RU196919U1 - Устройство для иммунохроматографической одновременной индивидуальной детекции фторхинолоновых антибиотиков офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина в продуктах питания - Google Patents
Устройство для иммунохроматографической одновременной индивидуальной детекции фторхинолоновых антибиотиков офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина в продуктах питания Download PDFInfo
- Publication number
- RU196919U1 RU196919U1 RU2019144500U RU2019144500U RU196919U1 RU 196919 U1 RU196919 U1 RU 196919U1 RU 2019144500 U RU2019144500 U RU 2019144500U RU 2019144500 U RU2019144500 U RU 2019144500U RU 196919 U1 RU196919 U1 RU 196919U1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- enrofloxacin
- ofloxacin
- membrane
- ciprofloxacin
- analysis
- Prior art date
Links
- SPFYMRJSYKOXGV-UHFFFAOYSA-N Baytril Chemical compound C1CN(CC)CCN1C(C(=C1)F)=CC2=C1C(=O)C(C(O)=O)=CN2C1CC1 SPFYMRJSYKOXGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 63
- 229960000740 enrofloxacin Drugs 0.000 title claims abstract description 63
- 229960001699 ofloxacin Drugs 0.000 title claims abstract description 63
- GSDSWSVVBLHKDQ-UHFFFAOYSA-N 9-fluoro-3-methyl-10-(4-methylpiperazin-1-yl)-7-oxo-2,3-dihydro-7H-[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinoline-6-carboxylic acid Chemical compound FC1=CC(C(C(C(O)=O)=C2)=O)=C3N2C(C)COC3=C1N1CCN(C)CC1 GSDSWSVVBLHKDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 62
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 title claims abstract description 16
- 235000013305 food Nutrition 0.000 title claims abstract description 11
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 125
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 82
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 72
- 229960003405 ciprofloxacin Drugs 0.000 claims abstract description 63
- 229940124307 fluoroquinolone Drugs 0.000 claims abstract description 21
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims abstract description 10
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims abstract description 10
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims abstract description 9
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims abstract description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims abstract description 5
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 claims abstract description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 claims description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 92
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 abstract description 12
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 10
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 10
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 abstract description 5
- 239000002131 composite material Substances 0.000 abstract description 5
- 239000011152 fibreglass Substances 0.000 abstract description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 abstract description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 abstract 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 abstract 1
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 abstract 1
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 abstract 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 abstract 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 18
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 12
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 11
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 11
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 11
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- QMLVECGLEOSESV-RYUDHWBXSA-N Danofloxacin Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2CN1C)N2C(C(=CC=1C(=O)C(C(O)=O)=C2)F)=CC=1N2C1CC1 QMLVECGLEOSESV-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 2
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 229960004385 danofloxacin Drugs 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 2
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- XBHBWNFJWIASRO-UHFFFAOYSA-N 6-fluoro-1-(4-fluorophenyl)-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-3-quinolinecarboxylic acid Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1=CC=C(F)C=C1 XBHBWNFJWIASRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010054814 DNA Gyrase Proteins 0.000 description 1
- 208000027244 Dysbiosis Diseases 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- BPFYOAJNDMUVBL-UHFFFAOYSA-N LSM-5799 Chemical compound C1CN(C)CCN1C1=C(F)C=C2C(=O)C(C(O)=O)=CN3N(C)COC1=C32 BPFYOAJNDMUVBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 108010046308 Type II DNA Topoisomerases Proteins 0.000 description 1
- 102000007537 Type II DNA Topoisomerases Human genes 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- NOCJXYPHIIZEHN-UHFFFAOYSA-N difloxacin Chemical compound C1CN(C)CCN1C(C(=C1)F)=CC2=C1C(=O)C(C(O)=O)=CN2C1=CC=C(F)C=C1 NOCJXYPHIIZEHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950001733 difloxacin Drugs 0.000 description 1
- 230000007140 dysbiosis Effects 0.000 description 1
- 229940111782 egg extract Drugs 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000010185 immunofluorescence analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 229960002531 marbofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 229960000210 nalidixic acid Drugs 0.000 description 1
- MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N nalidixic acid Chemical compound C1=C(C)N=C2N(CC)C=C(C(O)=O)C(=O)C2=C1 MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001180 norfloxacin Drugs 0.000 description 1
- OGJPXUAPXNRGGI-UHFFFAOYSA-N norfloxacin Chemical compound C1=C2N(CC)C=C(C(O)=O)C(=O)C2=CC(F)=C1N1CCNCC1 OGJPXUAPXNRGGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001225 nuclear magnetic resonance method Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 150000004885 piperazines Chemical class 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 150000007660 quinolones Chemical class 0.000 description 1
- 229950007734 sarafloxacin Drugs 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 229940066771 systemic antihistamines piperazine derivative Drugs 0.000 description 1
- 239000000273 veterinary drug Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/02—Food
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54306—Solid-phase reaction mechanisms
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Заявленное устройство предназначено для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов - фторхинолоновых антибиотиков (офлоксацина, энрофлоксацина, ципрофлоксацина) в продуктах питания. Устройство представляет собой мультимембранный композит с нанесенными иммунореагентами (тест-полоску). Мультимембранный композит состоит из рабочей нитроцеллюлозной мембраны на твердой полистироловой основе с нанесенными иммунореагентами, стекловолоконной мембраны с нанесенными иммунореагентами, мембраны для впитывания и сепарации исследуемой пробы и конечной адсорбирующей мембраны для впитывания компонентов пробы после прохождения реакции. Отличительной особенностью заявленного устройства является то, что в контрольную зону (К.З.) нанесены поликлональные козьи антитела, специфичные к иммуноглобулинам кролика. В первую тестовую зону (Т.З.1) нанесен конъюгат офлоксацина с белком-носителем соевым ингибитором трипсина (СИТ). Во вторую тестовую зону (Т.З.2) нанесен конъюгат энрофлоксацина с белком-носителем СИТ. В третью тестовую зону (Т.З.3) нанесен конъюгат ципрофлоксацина с белком-носителем СИТ. На стекловолоконную мембрану нанесена смесь конъюгатов с коллоидным золотом поликлональных кроличьих антител, специфичных к офлоксацину, энрофлоксацину и ципрофлоксацину. Для проведения анализа не требуется никаких дополнительных приспособлений. Продолжительность анализа составляет 10 мин без учета пробоподготовки. Технической задачей заявленной полезной модели является одновременная индивидуальная детекция трех токсичных контаминантов - фторхинолоновых антибиотиков офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина в продуктах питания. Технический результат заявленной полезной модели заключается в одновременной индивидуальной детекции на одной тест-полоске офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина с использованием простой одностадийной процедуры проведения анализа, обеспечиваемой за счет нанесения на тест-полоску всех необходимых реагентов.
Description
Полезная модель относится к определению токсичных контаминантов и может быть использована как экспрессное средство лабораторного и внелабораторного контроля для обеспечения безопасности пищевой потребительской продукции (молока и молочных продуктов, мяса и мясных продуктов, яиц, меда).
Устройство предназначено для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов -фторхинолоновых антибиотиков офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина в продуктах питания.
На сегодняшний день одними из наиболее распространенных загрязнителей продуктов питания животного происхождения являются различные ветеринарные лекарственные препараты.
Фторхинолоны, пиперазиновые производные хинолона налидиксовой кислоты являются одной из наиболее перспективных групп препаратов современной антибактериальной химиотерапии, применяемых для лечения инфекций разнообразной этиологии и локализации у человека и животных. Ингибируя ДНК-гиразу или топоизомеразу II, фторхинолоны подавляют жизнедеятельность как грамотрицательных, так и грамположительных бактерий. Широкое ветеринарное использование фторхинолонов вызывает существенные риски для здоровья людей, связанные с поступлением этих контаминантов как по пищевым цепям (с продуктами животноводства), так и посредством загрязнения окружающей среды. Неконтролируемое попадание фторхинолонов в организм человека может привести к развитию устойчивых форм микроорганизмов, а также вызвать ряд патологических процессов, таких как дисбактериозы, аллергические реакции, подавление активности некоторых ферментов и др. С учетом этого установлены максимальные допустимые уровни остатков фторхинолонов в молоке, птице, говядине и свинине, равные 30-300 мкг/кг в Европе и России, 100-400 мкг/кг в Китае, 50-200 мкг/кг в Япония и 200 мкг/кг в США.
Для широкого скрининга контаминации пищевых продуктов фторхинолонами используются различные виды жидкостной хроматографии и метод протонного ядерного магнитного резонанса, однако они не решают задачу массового тестирования вне централизованных лабораторий, т.к. требуют сложного дорогостоящего оборудования, высокоочищенных растворителей, квалифицированного персонала. Более эффективны в этом отношении иммунохимические методы: иммуноферментный анализ, иммунофлуоресцентный анализ, электрохимические и оптические биосенсоры, иммунохроматографический анализ (ИХА).
Наиболее простой в использовании формой иммунохимического анализа является ИХА, который обнаруживает присутствие антигена (токсичного контаминанта) в жидкой пробе за 10-15 минут. ИХА основан на движении жидкой пробы вдоль мембраны, которое приводит к образованию на разных участках мембраны специфических иммунных комплексов. Конъюгированный со специфическими антителами окрашенный маркер (коллоидное золото) распределяется по мембране, и его наличие или отсутствие в определенных участках мембраны по окончании анализа является основанием для вывода о полученных результатах. Использование ИХА для детекции токсичных контаминантов обеспечивает достижение ряда преимуществ - проведение контроля в лабораторных и внелабораторных условиях, экспрессность анализа при минимальной пробоподготовке, проведение анализа в одну стадию без необходимости в дополнительных реагентах и манипуляциях и простоту детектирования и интерпретации результатов.
В научной литературе есть описания разработок иммунохроматографических тестов для определения отдельных фторхинолоновых антибиотиков - ципрофлоксацина (1-3), энрофлоксацина (4-6), данофлоксацина (7), офлоксацина (8), в которых используются антитела с индивидуальной специфичностью, и для одновременного определения нескольких (до 12) фторхинолоновых антибиотиков (9), в которых используются антитела, специфичные на группу фторхинолоновых антибиотиков. В коммерческих иммунохроматографических тест-системах в основном используются групп-специфичные антитела, например в разработках фирм «АЕ Solution» (ЮАР), «Unisensor» (Бельгия), «Elabscience» (США), «Shenzhen Lvshiyuan Biotechnology)), «Ballya» и «Beijing Meizheng Bio-Tech» (все - Китай).
Наиболее близким аналогом заявляемой полезной модели является коммерческая иммунохроматографическая тест-система «QuinoSensor. Rapid test detecting all quinolones and fluoroquinolones in milk», KIT038, фирмы «Unisensor» (Бельгия), основанная на реакции антиген-антитело.
Тест-система представляет собой набор, состоящий из:
-8-ми тест-полосок с нанесенными реагентами, упакованных в алюминиевый контейнер с крышкой, в которую помещен осушитель;
-пластикового 8-луночного стрипа, в лунки которого нанесен и высушен конъюгат специфичных к фторхинолоновым антибиотикам (норфлоксацину, энрофлоксацину, данофлоксацину, дифлоксацину, сарафлоксацину, марбофлоксацину, ципрофлоксацину, оксолиновой кислоте, флумеквину, ломефлоксацину, пефлоксацину) антител с коллоидным золотом;
-инструкции по применению набора;
-картонной коробки с маркировкой для упаковки набора.
Тест-полоска представляет собой мультимембранный композит, который состоит из:
- нитроцеллюлозной рабочей мембраны на твердой основе с нанесенными в контрольную зону антивидовыми антителами и нанесенным в тестовую зону конъюгатом гаптена с белком-носителем (дизайн конъюгата гаптен-белок-носитель является ноу-хау производителя);
- мембраны для впитывания и сепарации исследуемой пробы;
- конечной адсорбирующей мембраны для впитывания компонентов образца после прохождения реакции;
- покрывающей защитной пленки с маркировкой.
Анализ проводят следующим образом:
1. Молоко и жидкие молочные продукты анализируют без предварительной пробоподготовки.
2. От стрипа отделяют 1 лунку с высушенным конъюгатом специфичных к фторхинолонам антител с коллоидным золотом.
3. В лунку с помощью пипетки вносят 200 мкл молока.
4. Лунку с пробой помещают в ячейку нагревательного блока, закрывают крышку и автоматически перемешивают пробу в течение 5-10 с.
5. Включают нагрев на 37°С и инкубируют лунку с пробой в течение 6 мин.
6. Открывают крышку блока и тест-полоску погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца в жидкую пробу на 4 мин.
7. Через 10 мин от начала анализа тест-полоску вынимают. Результат анализа фиксируют визуально или с использованием детектора READSENSOR АРР038.
Результат анализа интерпретируют следующим образом:
1. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются две линии (контрольная и тестовая), окрашенные в темно-красный цвет, то результат анализа считается отрицательным, т.е. в образце не содержатся фторхинолоновые антибиотики или их концентрация ниже предела обнаружения.
2. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются две темно-красные линии (контрольная и очень бледная тестовая) или одна темно-красная линия (контрольная), то результат анализа считается положительным, т.е. в образце содержатся фторхинолоновые антибиотики в концентрациях равных или выше предела обнаружения.
3. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски не образуется ни одной окрашенной линии или образуется только одна тестовая окрашенная линия, то результат анализа считается недействительным.
Тест-система «QuinoSensor» дает информацию только о суммарной контаминации образца фторхинолоновыми антибиотиками, тогда как заявляемая полезная модель позволяет идентифицировать токсичный контаминант. Анализ с использованием тест-системы «QuinoSensor» предполагает промежуточную стадию инкубации пробы с конъюгатом специфических антител с коллоидным золотом. Анализ с использованием заявляемой полезной модели является одностадийным, т.к. все необходимые реагенты нанесены на тест-полоску. Также для проведения анализа с использованием тест-системы «QuinoSensor» требуется дополнительное оборудование - нагревательный блок со встроенным перемешивающим устройством, что усложняет анализ по сравнению с анализом с использованием заявляемой полезной модели.
Технической задачей заявляемой полезной модели является одновременная индивидуальная детекция трех токсичных контаминантов - офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина в продуктах питания.
Технический результат заявляемой полезной модели заключается в одновременной индивидуальной детекции на одной тест-полоске трех токсичных контаминантов -фторхинолоновых антибиотиков офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина с использованием простой одностадийной процедуры проведения анализа, обеспечиваемой за счет нанесения на тест-полоску всех необходимых реагентов.
Предлагаемое устройство представляет собой мультимембранный композит с нанесенными иммунореагентами (тест-полоску). Мультимембранный композит состоит из рабочей нитроцеллюлозной мембраны на твердой полистироловой основе с нанесенными иммунореагентами, стекловолоконной мембраны с нанесенными иммунореагентами, мембраны для впитывания и сепарации исследуемого образца и конечной адсорбирующей мембраны для впитывания компонентов образца после прохождения реакции.
Указанный технический результат достигается тем, что:
- в К.З. нанесены поликлональные козьи антитела, специфичные к иммуноглобулинам кролика;
- в Т.З.1 нанесен конъюгат офлоксацина с белком-носителем СИТ;
- в Т.З.2 нанесен конъюгат энрофлоксацина с белком-носителем СИТ;
- в Т.З.3 нанесен конъюгат ципрофлоксацина с белком-носителем СИТ;
- на стекловолоконную мембрану нанесена смесь конъюгатов с коллоидным золотом поликлональных кроличьих антител, специфичных к офлоксацину, энрофлоксацину и ципрофлоксацину.
На прилагаемом чертеже (рис. 1) представлено заявляемое устройство, где 1 - твердая основа рабочей нитроцеллюлозной мембраны из полистирола, 2 - рабочая нитроцеллюлозная мембрана с нанесенными и высушенными иммунореагентами, 3 - конечная адсорбирующая мембрана для впитывания компонентов образца после прохождения реакции, 4 -стекловолоконная мембрана с нанесенными и высушенными иммунореагентами, 5 - мембрана для впитывания и сепарации исследуемой пробы, А - К.З. с нанесенными поликлональными козьими антителами, специфичными к иммуноглобулинам кролика, Б - Т.З.3 с нанесенным конъюгатом ципрофлоксацина с белком-носителем СИТ, В - Т.З.2 с нанесенным конъюгатом энрофлоксацина с белком-носителем СИТ, Г - Т.З.1 с нанесенным конъюгатом офлоксацина с белком-носителем СИТ.
В таблице 1 приведена характеристика материалов, из которых изготовлены элементы заявляемого устройства.
Анализ с помощью заявляемого устройства проводят следующим образом:
1. 100-120 мкл анализируемой пробы (молоко, жидкий молочный продукт, экстракт из мяса или яиц, разбавленный мед, вода) вносят в пластиковую пробирку вместимостью 1,5 мл.
2. Тест-полоску погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в жидкость и инкубируют при комнатной температуре в течение 3 мин.
3. Вынимают тест-полоску и помещают ее на сухую горизонтальную поверхность на 7 мин.
4. Через 10 мин после начала движения жидкости по тест-полоске результат анализа фиксируют визуально или с использованием детектора с видеоцифровой регистрацией.
Заявляемое устройство функционирует следующим образом (см. рис. 1):
Если в пробе присутствуют офлоксацин, энрофлоксацин и/или ципрофлоксацин, то они с потоком жидкости перемещаются по впитывающей мембране (5), доходят до стекловолоконной мембраны (4) и реагируют с конъюгатами коллоидного золота со специфическими антителами с образованием двойных комплексов (растворенный антиген - антитела, меченные коллоидным золотом). Комплексы под действием капиллярных сил движутся вдоль рабочей нитроцеллюлозной мембраны (2) и взаимодействуют с иммобилизованными в Т.З.1 (Г), Т.З.2 (В) и Т.З.3 (Б) конъюгатами антигенов офлоксацина с белком-носителем СИТ (Т.З.1, Г), энрофлоксацина с белком-носителем СИТ (Т.З.2, В) и ципрофлоксацина с белком-носителем СИТ (Т.З.3, Б) с образованием тройных комплексов (иммобилизованный на мембране через белок-носитель антиген - меченные коллоидным золотом антитела - антиген из раствора). Избыток не связавшихся двойных комплексов продолжает двигаться вдоль рабочей нитроцеллюлозной мембраны (2) и взаимодействует с антивидовыми антителами, иммобилизованными в К.З. (А), с образованием двойных комплексов (иммобилизованные на мембране антивидовые антитела - антитела, меченные коллоидным золотом).
Интерпретация результатов анализа производится в соответствие со схемой, представленной на рис. 2:
1. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются четыре красные линии (К.З., Т.З.1, Т.З.2 и Т.З.3), то результат анализа считается отрицательным, т.е. в пробе не содержатся офлоксацин, энрофлоксацин и ципрофлоксацин или их концентрации ниже пределов обнаружения (рис. 2а).
2. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (К.З. и первая по ходу движения жидкости Т.З.1), то результат анализа считается отрицательным по офлоксацину и положительным по энрофлоксацину и ципрофлоксацину, т.е. в пробе не содержится офлоксацин (или его концентрация ниже предела обнаружения) и содержатся энрофлоксацин и ципрофлоксацин в концентрациях, равных или выше пределов обнаружения (рис. 2б).
3. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (К.З. и вторая по ходу движения жидкости Т.З.2), то результат анализа считается отрицательным по энрофлоксацину и положительным по офлоксацину и ципрофлоксацину, т.е. в пробе не содержится энрофлоксацин (или его концентрация ниже предела обнаружения) и содержатся офлоксацин и ципрофлоксацин в концентрациях, равных или выше пределов обнаружения (рис. 2в).
4. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (К.З. и третья по ходу движения жидкости Т.З.3), то результат анализа считается отрицательным по ципрофлоксацину и положительным по офлоксацину и энрофлоксацину, т.е. в пробе не содержится ципрофлоксацин (или его концентрация ниже предела обнаружения) и содержатся офлоксацин и энрофлоксацин в концентрациях, равных или выше пределов обнаружения (рис. 2г).
5. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (К.З., вторая и третья по ходу движения жидкости, Т.З.2 и Т.З.3), то результат анализа считается положительным по офлоксацину и отрицательным по энрофлоксацину и ципрофлоксацину, т.е. в пробе содержится офлоксацин в концентрации, равной или выше предела обнаружения, и не содержатся энрофлоксацин и ципрофлоксацин (или их концентрации ниже предела обнаружения) (рис. 2д).
6. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (К.З., первая и третья по ходу движения жидкости, Т.З.1 и Т.З.3), то результат анализа считается положительным по энрофлоксацину и отрицательным по офлоксацину и ципрофлоксацину, т.е. в пробе содержится энрофлоксацин в концентрации, равной или выше предела обнаружения, и не содержатся офлоксацин и ципрофлоксацин (или их концентрации ниже предела обнаружения) (рис. 2е).
7. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (К.З., первая и вторая по ходу движения жидкости, Т.З.1 и Т.З.2), то результат анализа считается положительным по ципрофлоксацину и отрицательным по офлоксацину и энрофлоксацину, т.е. в пробе содержится ципрофлоксацин в концентрации, равной или выше предела обнаружения, и не содержатся офлоксацин и энрофлоксацин (или их концентрации ниже предела обнаружения) (рис. 2ж).
8. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляется одна красная линия (К.З.), то результат анализа считается положительным по офлоксацину, энрофлоксацину и ципрофлоксацину, т.е. в пробе содержатся офлоксацин, энрофлоксацин и ципрофлоксацин в концентрациях, равных или выше пределов обнаружения (рис. 2з).
9. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски не образуется ни одной окрашенной линии или образуются только тестовые линии (одна, две или три в любых комбинациях), то результат анализа считается недействительным (рис. 2и).
Эффективность данного подхода подтверждается следующими представленными ниже примерами:
Пример 1 (исследование времени получения отрицательных по офлоксацину, энрофлоксацину и ципрофлоксацину результатов анализа с использованием заявляемого устройства):
С использованием заявляемого устройства проводят анализ молока с содержанием жира 3,2%, не содержащего офлоксацин, энрофлоксацин и ципрофлоксацин по данным ИФА. 120 мкл образца вносят в пробирку. Заявляемое устройство (тест-полоску) погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в образец и инкубируют при комнатной температуре в течение 3 мин. Вынимают тест-полоску и помещают ее в паз выдвижной каретки детектирующего устройства для видеоцифровой регистрации. Результат анализа оценивают через 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15 мин с помощью программного обеспечения видеоцифрового детектора. Время анализа контролируют с помощью секундомера. Анализ проводят в пяти повторностях, используя тест-полоски пяти разных серий (полоски №№1-5).
Результаты анализа приведены в таблице 2. Интенсивности окрашивания каждой из зон связывания нормированы на ее среднее значение, полученное через 15 мин после начала анализа. Из приведенных экспериментальных данных видно, что через 10 мин после начала анализа интенсивности окрашивания К.З. достигают 100,0-100,5%, зон связывания офлоксацина (Т.З.1) - 100,0-100,1%, зон связывания энрофлоксацина (Т.З.2) - 99,7-100,1%, зон связывания ципрофлоксацина (Т.З.3) - 99,2-99,8% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут, т.е. время анализа с использованием заявленного устройства при отсутствии в пробе офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина составляет 10 мин.
Пример 2 (исследование времени получения положительного по офлоксацину и отрицательного по энрофлоксацину и ципрофлоксацину результатов анализа с использованием заявляемого устройства):
С использованием заявляемого устройства проводят анализ молока с содержанием жира 3,2%, содержащего офлоксацин в концентрации 30 нг/мл и не содержащего энрофлоксацин и ципрофлоксацин по данным ИФА. 120 мкл образца вносят в пробирку. Заявляемое устройство (тест-полоску) погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в образец и инкубируют при комнатной температуре в течение 3 мин. Вынимают тест-полоску и помещают ее в паз выдвижной каретки детектирующего устройства для видеоцифровой регистрации. Результат анализа оценивают через 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15 мин с помощью программного обеспечения видеоцифрового детектора. Время анализа контролируют с помощью секундомера. Анализ проводят в пяти повторностях, используя тест-полоски пяти разных серий (полоски №№1-5).
Результаты анализа приведены в таблице 3. Интенсивности окрашивания К.З., Т.З.2 и Т.З.3 нормированы на их средние значения, полученные через 15 мин после начала анализа. Интенсивности окрашивания Т.З.1 нормированы на ее среднее значение, полученное при отсутствии офлоксацина в пробе (см. Пример 1).
Из приведенных экспериментальных данных видно, что через 10 мин после начала анализа интенсивности окрашивания К.З. достигают 99,8-100,5%, зон связывания энрофлоксацина (Т.З.2) - 99,5-100,0%, зон связывания ципрофлоксацина (Т.З.3) - 99,3-99,8%) и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Интенсивности окрашивания тестовых зон связывания офлоксацина (Т.З.1) через 10 мин после начала анализа составляют от 0 до 0,3% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Таким образом, время анализа пробы, содержащей офлоксацин в концентрации 30,0 нг/мл и не содержащей энрофлоксацин и ципрофлоксацин по данным ИФА, с использованием заявленного устройства составляет 10 мин.
Пример 3 (исследование времени получения положительного по энрофлоксацину и отрицательного по офлоксацину и ципрофлоксацину результатов анализа с использованием заявляемого устройства):
С использованием заявляемого устройства проводят анализ молока с содержанием жира 3,2%, содержащего энрофлоксацин в концентрации 30 нг/мл и не содержащего офлоксацин и ципрофлоксацин по данным ИФА. 120 мкл образца вносят в пробирку. Заявляемое устройство (тест-полоску) погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в образец и инкубируют при комнатной температуре в течение 3 мин. Вынимают тест-полоску и помещают ее в паз выдвижной каретки детектирующего устройства для видеоцифровой регистрации. Результат анализа оценивают через 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15 мин с помощью программного обеспечения видеоцифрового детектора. Время анализа контролируют с помощью секундомера. Анализ проводят в пяти повторностях, используя тест-полоски пяти разных серий (полоски №№1-5).
Результаты анализа приведены в таблице 4. Интенсивности окрашивания К.З., Т.З.1 и Т.З.3 нормированы на их средние значения, полученные через 15 мин после начала анализа. Интенсивности окрашивания Т.З.2 нормированы на ее среднее значение, полученное при отсутствии энрофлоксацина в пробе (см. Пример 1).
Из приведенных экспериментальных данных видно, что через 10 мин после начала анализа интенсивности окрашивания К.З. достигают 99,8-100,5%, зон связывания офлоксацина (Т.З.1) - 99,6-100,4%, зон связывания ципрофлоксацина (Т.З.3) - 99,2-99,8% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Интенсивности окрашивания тестовых зон связывания энрофлоксацина (Т.З.2) через 10 мин после начала анализа составляют от 0 до 0,3% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Таким образом, время анализа пробы, содержащей энрофлоксацин в концентрации 30,0 нг/мл и не содержащей офлоксацин и ципрофлоксацин по данным ИФА, с использованием заявленного устройства составляет 10 мин.
Пример 4 (исследование времени получения положительного по ципрофлоксацину и отрицательного по офлоксацину и энрофлоксацину результатов анализа с использованием заявляемого устройства):
С использованием заявляемого устройства проводят анализ молока с содержанием жира 3,2%, содержащего ципрофлоксацин в концентрации 30 нг/мл и не содержащего офлоксацин и энрофлоксацин по данным ИФА. 120 мкл пробы вносят в пробирку. Заявляемое устройство (тест-полоску) погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в образец и инкубируют при комнатной температуре в течение 3 мин. Вынимают тест-полоску и помещают ее в паз выдвижной каретки детектирующего устройства для видеоцифровой регистрации. Результат анализа оценивают через 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15 мин с помощью программного обеспечения видеоцифрового детектора. Время анализа контролируют с помощью секундомера. Анализ проводят в пяти повторностях, используя тест-полоски пяти разных серий (полоски №№1-5).
Результаты анализа приведены в таблице 5. Интенсивности окрашивания К.З., Т.З.1 и Т.З.2 нормированы на их средние значения, полученные через 15 мин после начала анализа. Интенсивности окрашивания Т.З.3 нормированы на ее среднее значение, полученное при отсутствии ципрофлоксацина в пробе (см. Пример 1).
Из приведенных экспериментальных данных видно, что через 10 мин после начала анализа интенсивности окрашивания К.З. достигают 99,8-100,5%, зон связывания офлоксацина (Т.З.1) - 99,8-100,4%, зон связывания энрофлоксацина (Т.З.2) - 99,3-100,0%) и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Интенсивности окрашивания тестовых зон связывания ципрофлоксацина (Т.З.3) через 10 мин после начала анализа составляют от 0,2 до 0,6% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Таким образом, время анализа пробы, содержащей ципрофлоксацин в концентрации 30,0 нг/мл и не содержащей энрофлоксацин и офлоксацин по данным ИФА, с использованием заявленного устройства составляет 10 мин.
Пример 5 (исследование времени получения положительного по офлоксацину, энрофлоксацину и ципрофлоксацину результатов анализа с использованием заявляемого устройства):
С использованием заявляемого устройства проводят анализ молока с содержанием жира 3,2%, содержащего офлоксацин, энрофлоксацин и ципрофлоксацин в концентрациях 30 нг/мл по данным ИФА. 120 мкл образца вносят в пробирку. Заявляемое устройство (тест-полоску) погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в образец и инкубируют при комнатной температуре в течение 3 мин. Вынимают тест-полоску и помещают ее в паз выдвижной каретки детектирующего устройства для видеоцифровой регистрации. Результат анализа оценивают через 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15 мин с помощью программного обеспечения видеоцифрового детектора. Время анализа контролируют с помощью секундомера. Анализ проводят в пяти повторностях, используя тест-полоски пяти разных серий (полоски №№1-5).
Результаты анализа приведены в таблице 6. Интенсивности окрашивания К.З. нормированы на ее среднее значение, полученное через 15 мин после начала анализа. Интенсивности окрашивания Т.З.1, Т.З.2 и Т.З.3 нормированы на их средние значения, полученные при отсутствии офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина в пробе (см. Пример 1).
Из приведенных экспериментальных данных видно, что через 10 мин после начала анализа интенсивности окрашивания К.З. достигают 99,9-100,6% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Интенсивности окрашивания тестовых зон связывания офлоксацина (Т.З.1), энрофлоксацина (Т.З.2) и ципрофлоксацина (Т.З.3) через 10 мин после начала анализа составляют от 0 до 0,5% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Таким образом, время анализа пробы, содержащей офлоксацин, энрофлоксацин и ципрофлоксацин в концентрациях 30,0 нг/мл по данным ИФА, с использованием заявленного устройства составляет 10 мин.
Ссылки
1. Hendrickson O.D., Zvereva E.A., Shanin I.A., Zherdev A.V., Tarannum N., Dzantiev B.B. Appl. Biochem. Microbiol. 2018, 54(6), 670-676.
2. Yu L., Liu M., Wang Т., X. Wang. Anal.Meth. 2019, 11, 3244-3251.
3. Liu L., Luo L., Suryoprabowo S., Peng J., Kuang H., Xu C. Sensors. 2014, 14, 16785-16798.
4. Hendrickson O.D., Zvereva E.A., Shanin LA., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. J. Sci. Food Agric. 2019, 99, 3834-3842.
5. Chen X., Xu H., Lai W., Chen Y., Yang X., Xiong Y. Food Add. Cont.: Part A, 2012, 29(3), 383-391.
6. Zhao Y., Zhang G., Liu Q., Teng M., Yang J., Wang J. J. Agric. Food Chem. 2008, 56, 12138-12142.
7. Yang X., Wang Y., Yang J., Sun Z., Yue Z., Li L., He L., Ни X. Food Anal. Meth. 2019, 12, 2430-2437.
8. Byzova N.A., Smirnova N.I., Zherdev A.V., Eremin S.A., Shanin LA., Lei H.-T., Sun Y., Dzantiev B.B. Talanta. 2014, 119, 125-132.
9. Zhu Y., Li L., Wang Z., Chen Y., Zhao Z., Zhu L., Wu X., Wan Y., He F., Shen J. J. Agric. Food Chem. 2008, 56, 5469-5474.
Краткое описание чертежей
На рис. 1 изображена схема заявляемого устройства для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов - фторхинолоновых антибиотиков (офлоксацина, энрофлоксацина, ципрофлоксацина), в продуктах питания и объектах окружающей среды. 1 - твердая основа рабочей нитроцеллюлозной мембраны из полистирола, 2 - рабочая нитроцеллюлозная мембрана с нанесенными и высушенными иммунореагентами, 3 - конечная адсорбирующая мембрана для впитывания компонентов пробы после прохождения реакции, 4 - стекловолоконная мембрана с нанесенными и высушенными иммунореагентами, 5 - мембрана для впитывания и сепарации исследуемой пробы, А - К.З. с нанесенными поликлональными козьими антителами, специфичными к иммуноглобулинам кролика, Б - Т.З.3 с нанесенным конъюгатом ципрофлоксацина с белком-носителем СИТ, В - Т.З.2 с нанесенным конъюгатом энрофлоксацина с белком-носителем СИТ, Г - Т.3.1 с нанесенным конъюгатом офлоксацина с белком-носителем СИТ.
На рис. 2 изображен алгоритм интерпретации результатов анализа. Если на рабочей мембране тест-полоски появляются четыре красные линии (К.З., Т.З.1, Т.З.2 и Т.З.3), результат анализа считается отрицательным по трем антибиотикам (рис. 2а). Если на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (К.З. и Т.З.1), результат анализа считается отрицательным по офлоксацину и положительным по энрофлоксацину и ципрофлоксацину (рис. 2б). Если на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (К.З. и Т.З.2), результат анализа считается отрицательным по энрофлоксацину и положительным по офлоксацину и ципрофлоксацину (рис. 2в). Если на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (К.З. и Т.З.3), результат анализа считается отрицательным по ципрофлоксацину и положительным по офлоксацину и энрофлоксацину (рис. 2г). Если на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (К.З., Т.З.2 и Т.З.3), результат анализа считается отрицательным по ципрофлоксацину и энрофлоксацину и положительным по офлоксацину (рис. 2д). Если на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (К.З., Т.З.1 и Т.З.3), результат анализа считается отрицательным по офлоксацину и ципрофлоксацину и положительным по энрофлоксацину (рис. 2е). Если на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (К.З., Т.З.1 и Т.З.2), результат анализа считается отрицательным по офлоксацину и энрофлоксацину и положительным по ципрофлоксацину (рис. 2ж). Если на рабочей мембране тест-полоски появляется одна красная линия (К.З.), результат анализа считается положительным по трем антибиотикам (рис. 2з). Если на рабочей мембране тест-полоски не образуется ни одной окрашенной линии или образуются только тестовые линии (одна, две или три в любой комбинации), результат анализа считается недействительным (рис. 2и).
Claims (1)
- Устройство для иммунохроматографической одновременной индивидуальной детекции фторхинолоновых антибиотиков офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина в продуктах питания, представляющее собой тест-полоску, которая состоит из полистироловой подложки с наклеенными мембранами: нитроцеллюлозной мембраной с нанесенными и высушенными иммунореагентами в виде контрольной и трех тестовых зон, стекловолоконной мембраной с нанесенными и высушенными иммунореагентами, мембраной для впитывания и сепарации исследуемой пробы и конечной адсорбирующей мембраны для впитывания компонентов пробы после прохождения реакции, отличающееся тем, что в контрольную зону нанесены поликлональные козьи антитела, специфичные к иммуноглобулинам кролика, в первую тестовую зону нанесен конъюгат офлоксацина с белком-носителем, во вторую тестовую зону нанесен конъюгат энрофлоксацина с белком-носителем, в третью тестовую зону нанесен конъюгат ципрофлоксацина с белком-носителем, на стекловолоконную мембрану нанесена смесь конъюгатов с коллоидным золотом трех препаратов поликлональных кроличьих антител, специфичных к офлоксацину, энрофлоксацину и ципрофлоксацину.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019144500U RU196919U1 (ru) | 2019-12-27 | 2019-12-27 | Устройство для иммунохроматографической одновременной индивидуальной детекции фторхинолоновых антибиотиков офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина в продуктах питания |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019144500U RU196919U1 (ru) | 2019-12-27 | 2019-12-27 | Устройство для иммунохроматографической одновременной индивидуальной детекции фторхинолоновых антибиотиков офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина в продуктах питания |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU196919U1 true RU196919U1 (ru) | 2020-03-20 |
Family
ID=69898051
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019144500U RU196919U1 (ru) | 2019-12-27 | 2019-12-27 | Устройство для иммунохроматографической одновременной индивидуальной детекции фторхинолоновых антибиотиков офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина в продуктах питания |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU196919U1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113295870A (zh) * | 2021-05-31 | 2021-08-24 | 江西煌上煌集团食品股份有限公司 | 一种检测兽药残留的多重聚集诱导发光免疫层析方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA011656B1 (ru) * | 2005-04-14 | 2009-04-28 | Юнисенсор С.А. | Способ одновременного выявления и идентификации антибиотиков различных классов in vitro и соответствующий диагностический набор |
| RU2406090C2 (ru) * | 2009-02-18 | 2010-12-10 | Учреждение Российской академии наук Институт биохимии имени А.Н. Баха РАН (ИНБИ РАН) | Способ иммунохроматографического определения антибиотиков в молоке и молочных продуктах |
| CN202631541U (zh) * | 2012-03-22 | 2012-12-26 | 北京勤邦生物技术有限公司 | 检测牛奶中氟喹诺酮类药物的胶体金试剂盒 |
| CN103091495A (zh) * | 2013-01-16 | 2013-05-08 | 河南知微生物工程有限公司 | 一种氟喹诺酮类药物残留快速检测试纸卡及其制备方法 |
| RU191660U1 (ru) * | 2019-02-21 | 2019-08-15 | Общество с ограниченной ответственностью «Милкгуард» | Иммунохроматографическая тест-полоска для проведения экспресс-метода определения четырех групп антибиотиков в молоке с исключением возможной фальсификации образца |
-
2019
- 2019-12-27 RU RU2019144500U patent/RU196919U1/ru active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA011656B1 (ru) * | 2005-04-14 | 2009-04-28 | Юнисенсор С.А. | Способ одновременного выявления и идентификации антибиотиков различных классов in vitro и соответствующий диагностический набор |
| RU2406090C2 (ru) * | 2009-02-18 | 2010-12-10 | Учреждение Российской академии наук Институт биохимии имени А.Н. Баха РАН (ИНБИ РАН) | Способ иммунохроматографического определения антибиотиков в молоке и молочных продуктах |
| CN202631541U (zh) * | 2012-03-22 | 2012-12-26 | 北京勤邦生物技术有限公司 | 检测牛奶中氟喹诺酮类药物的胶体金试剂盒 |
| CN103091495A (zh) * | 2013-01-16 | 2013-05-08 | 河南知微生物工程有限公司 | 一种氟喹诺酮类药物残留快速检测试纸卡及其制备方法 |
| RU191660U1 (ru) * | 2019-02-21 | 2019-08-15 | Общество с ограниченной ответственностью «Милкгуард» | Иммунохроматографическая тест-полоска для проведения экспресс-метода определения четырех групп антибиотиков в молоке с исключением возможной фальсификации образца |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113295870A (zh) * | 2021-05-31 | 2021-08-24 | 江西煌上煌集团食品股份有限公司 | 一种检测兽药残留的多重聚集诱导发光免疫层析方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Nouri et al. | Designing a direct ELISA kit for the detection of Staphylococcus aureus enterotoxin A in raw milk samples | |
| Cháfer-Pericás et al. | Fast screening methods to detect antibiotic residues in food samples | |
| Cohen et al. | Competition between, and effectiveness of, IgG and IgM antibodies in indirect fluorescent antibody and other tests | |
| Sharma et al. | Adulteration of cow’s milk with buffalo’s milk detected by an on-site carbon nanoparticles-based lateral flow immunoassay | |
| US4757002A (en) | Method and kit for the estimation of serum immunoglobulin | |
| CN105137096B (zh) | 一种用于血型抗体检测的试剂盒及其应用 | |
| NZ201583A (en) | Method for the detection of pregnancy | |
| Hendrickson et al. | Development of a multicomponent immunochromatographic test system for the detection of fluoroquinolone and amphenicol antibiotics in dairy products | |
| Leem et al. | An Efficient Liposome‐Based Immunochromatographic Strip Assay for the Sensitive Detection of S almonella T yphimurium in Pure Culture | |
| Liu et al. | A magnetic nanoparticle-based lateral flow immunochromatography assay for the rapid detection of fluoroquinolones in milk | |
| JP2002518062A (ja) | 生物流体中のβ−ラクタム環を含む抗生物質を測定するための方法 | |
| CN109709339A (zh) | 检测牛或羊骨骼肌肌钙蛋白i的胶体金免疫层析试纸条及应用 | |
| RU196919U1 (ru) | Устройство для иммунохроматографической одновременной индивидуальной детекции фторхинолоновых антибиотиков офлоксацина, энрофлоксацина и ципрофлоксацина в продуктах питания | |
| WO2016111619A1 (en) | Methods for detecting a marker for active tuberculosis | |
| CN108700583A (zh) | 用于检测神经毒素的装置及其制造方法 | |
| CN101666802A (zh) | 定量检测金黄色葡萄球菌肠毒素b的胶体金免疫层析方法以及胶体金免疫检测试纸条 | |
| CN109705216B (zh) | 一种抗牛骨骼肌肌钙蛋白i单克隆抗体及其应用 | |
| CN109810191B (zh) | 一种抗羊骨骼肌肌钙蛋白i单克隆抗体及其应用 | |
| CN104330568A (zh) | 检测蓝藻毒素的胶体金免疫层析试剂盒 | |
| Kim et al. | Immuno-strip biosensor system to detect enrofloxacin residues | |
| Shanin et al. | Development of an immunoenzyme assay to control the total content of antibiotics of the fluoroquinolone group in milk | |
| RU2406090C2 (ru) | Способ иммунохроматографического определения антибиотиков в молоке и молочных продуктах | |
| JP2009031024A (ja) | 抗原又は抗体の測定方法 | |
| Ibrahim et al. | Rapid detection of salmonellae by immunoassays with titanous hydroxide as the solid phase | |
| Zhang et al. | Development of flow-through and dip-stick immunoassays for screening of sulfonamide residues |