RU177920U1 - A device for monitoring the spatiotemporal dynamics of thrombin - Google Patents
A device for monitoring the spatiotemporal dynamics of thrombin Download PDFInfo
- Publication number
- RU177920U1 RU177920U1 RU2016147005U RU2016147005U RU177920U1 RU 177920 U1 RU177920 U1 RU 177920U1 RU 2016147005 U RU2016147005 U RU 2016147005U RU 2016147005 U RU2016147005 U RU 2016147005U RU 177920 U1 RU177920 U1 RU 177920U1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sample
- irradiation
- cuvette
- coagulation
- pressure
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
Abstract
Устройство мониторинга пространственно-временной динамики тромбина, которое включает термостатируемую герметизируемую камеру с прозрачным окном и световой ловушкой, заполненную текучей средой, выполненную с возможностью установки в нее кюветы, внутри которой находится исследуемый образец плазмы крови и внутрь которой помещается специальная вставка-активатор свертывания, с нанесенным на ее нижнем торце веществом, способствующим инициации процесса свертывания, по меньшей мере, одно средство освещения образца, выполненное с возможностью получения сигнала светорассеяния от образца и, по меньшей мере, одно первое средство облучения, выполненное с возможностью возбуждения сигнала флуоресценции специальной метки, образующейся в образце в процессе расщепления предварительно добавленного в образец флуорогенного субстрата одним из протеолитических ферментов системы свертывания, средство оптической фото/видео регистрации светорассеяния/излучения от образца, средство регулировки давления в термостатируемой герметизируемой камере, выполненное с возможностью поддержания избыточного, по отношению к атмосферному, давления в камере, при этом устройство включает, по меньшей мере, одно второе средство облучения образца, выполненное с возможностью возбуждения сигнала флуоресценции указанной метки, при этом, по меньшей мере, одно первое средство облучения обеспечивает облучение образца в направлении перпендикулярном плоскости кюветы и, по меньшей мере, одно второе средство облучения обеспечивает облучение образца под углом к плоскости кюветы.Технический результат, который может быть получен при реализации данного устройства, заключается в повышении точности определения пространственно-временного распределения концентрации тромбина в процессе свертывания плазмы крови, необходимого для диагностирования состояния системы свертывания крови.A device for monitoring the spatio-temporal dynamics of thrombin, which includes a thermostatic sealed chamber with a transparent window and a light trap filled with a fluid, configured to install a cuvette inside which there is a test sample of blood plasma and inside which a special coagulation activator insert is placed, with applied at its lower end with a substance that promotes the initiation of the coagulation process, at least one means of illumination of the sample, made with possibly the method of obtaining a light scattering signal from a sample and at least one first irradiation means configured to excite a fluorescence signal of a special label formed in the sample during cleavage of the fluorogenic substrate previously added to the sample by one of the proteolytic enzymes of the coagulation system, an optical photo / video tool registration of light scattering / radiation from the sample, means for adjusting the pressure in a thermostatic sealed chamber, configured to support the excess pressure relative to atmospheric pressure in the chamber, the device includes at least one second means of irradiation of the sample, configured to excite the fluorescence signal of the specified label, while at least one first means of irradiation provides irradiation of the sample in the direction perpendicular to the plane of the cuvette and at least one second irradiation means provides irradiation of the sample at an angle to the plane of the cuvette. Technical result that can be obtained by realizing The purpose of this device is to increase the accuracy of determining the spatiotemporal distribution of the concentration of thrombin during blood plasma coagulation, which is necessary for diagnosing the state of the blood coagulation system.
Description
Область техникиTechnical field
Техническое решение относится к медицине и биологии и может быть использовано, в частности, для диагностических и исследовательских целей при определении характеристик свертывания крови и ее компонентов, а также в биотехнологии и в фундаментальных биологических исследованиях.The technical solution relates to medicine and biology and can be used, in particular, for diagnostic and research purposes in determining the characteristics of blood coagulation and its components, as well as in biotechnology and basic biological research.
Предшествующий уровень техникиState of the art
В качестве ближайшего аналога выбрано устройство, раскрытое в патенте РФ №123166, кл. G01 N33/86, опубл. 20.12.2012 г. Указанное устройство включает термостатируемую герметизируемую камеру с прозрачным окном и световой ловушкой, заполненную текучей средой, выполненную с возможностью установки в нее кюветы, внутри которой находится исследуемый образец плазмы крови и внутрь которой помещается специальная вставка-активатор свертывания, с нанесенным на ее нижнем торце веществом, способствующим инициации процесса свертывания, по меньшей мере, одно средство освещения образца, выполненное с возможностью получения сигнала светорассеяния от образца, по меньшей мере, одно средство облучения, выполненное с возможностью возбуждения сигнала флуоресценции специальной метки, образующейся в образце в процессе расщепления предварительно добавленного в образец флуорогенного субстрата одним из протеолитических ферментов системы свертывания, средство оптической фото/видео регистрации светорассеяния/излучения от образца, средство регулировки давления в термостатируемой герметизируемой камере, выполненное с возможностью поддержания избыточного, по отношению к атмосферному, давления в камере. В качестве недостатка указанного устройства можно назвать артефактное искажение сигнала флуоресценции метки на границе фибринового сгустка и несвернувшейся плазмы крови, которое возникает при облучении образца излучением возбуждения метки в направлении перпендикулярном стенке кюветы. Искажения сигнала флуоресценции метки на границе роста фибринового сгустка приводят к ошибке расчета значений концентрации протеолитического фермента, в частности тромбина, в данной области.As the closest analogue, the device disclosed in the patent of the Russian Federation No. 123166, cl. G01 N33 / 86, publ. December 20, 2012. The specified device includes a thermostatic sealed chamber with a transparent window and a light trap filled with a fluid made with the possibility of installing a cuvette inside which there is a blood plasma sample under study and inside which a special coagulation activator insert is placed with its lower end with a substance that facilitates the initiation of the coagulation process, at least one means of illumination of the sample, configured to receive a light scattering signal from the sample at least one irradiation means configured to excite a fluorescence signal of a special label generated in the sample during cleavage of the fluorogenic substrate previously added to the sample by one of the proteolytic enzymes of the coagulation system, optical photo / video recording means of light scattering / radiation from the sample, means adjusting the pressure in a thermostatic sealed chamber, made with the possibility of maintaining excessive, relative to atmospheric, pressure in the camera. A drawback of this device is the artifact distortion of the label fluorescence signal at the boundary of the fibrin clot and the coagulated blood plasma, which occurs when the sample is irradiated with radiation from the label excitation in the direction perpendicular to the cell wall. Distortion of the fluorescence signal of the label at the growth boundary of the fibrin clot leads to an error in calculating the concentration of the proteolytic enzyme, in particular thrombin, in this area.
Другим недостатком указанного устройства является то, что в нем не учитывается влияние оптической плотности образца плазмы крови на сигнал флуоресценции. Так, одна и та же концентрация флуоресцентной метки будет давать разную интенсивность сигнала флуоресценции в нормальной и мутной плазме крови (например, гемолизной или хилезной). Из-за этого невозможно пользоваться единой калибровкой для разных образцов плазмы крови, т.е. для восстановления концентрации протеолитического фермента невозможно использовать единожды установленную зависимость между сигналом флуоресценции и концентрацией метки.Another disadvantage of this device is that it does not take into account the influence of the optical density of the blood plasma sample on the fluorescence signal. So, the same concentration of the fluorescent label will give different intensities of the fluorescence signal in normal and turbid blood plasma (for example, hemolysis or chylous). Because of this, it is impossible to use a single calibration for different samples of blood plasma, i.e. to restore the concentration of the proteolytic enzyme, it is impossible to use the once established relationship between the fluorescence signal and the concentration of the label.
Существо заявляемого решенияThe essence of the proposed decision
Технический результат, который может быть получен при реализации данного технического решения, заключается в повышении точности определения пространственно-временного распределения концентрации тромбина в процессе свертывания плазмы крови, необходимого для диагностирования состояния системы свертывания крови.The technical result that can be obtained by implementing this technical solution is to increase the accuracy of determining the spatiotemporal distribution of the concentration of thrombin during blood plasma coagulation, which is necessary for diagnosing the state of the blood coagulation system.
Задача, которую решает заявляемая полезная модель, состоит в устранении артефактного искажения сигнала флуоресценции метки на границе фибринового сгустка и в добавлении возможности учета оптической плотности образца при определении пространственно-временного распределения концентрации тромбина.The problem that the claimed utility model solves is to eliminate artifact distortion of the label fluorescence signal at the boundary of the fibrin clot and to add the ability to take into account the optical density of the sample in determining the spatiotemporal distribution of thrombin concentration.
Указанная задача решается за счет создания устройства мониторинга пространственно-временной динамики тромбина, которое включает термостатируемую герметизируемую камеру с прозрачным окном и световой ловушкой, заполненную текучей средой, выполненную с возможностью установки в нее кюветы, внутри которой находится исследуемый образец плазмы крови и внутрь которой помещается специальная вставка-активатор свертывания, с нанесенным на ее нижнем торце веществом, способствующим инициации процесса свертывания, по меньшей мере, одно средство освещения образца, выполненное с возможностью получения сигнала светорассеяния от образца и, по меньшей мере, одно первое средство облучения, выполненное с возможностью возбуждения сигнала флуоресценции специальной метки, образующейся в образце в процессе расщепления предварительно добавленного в образец флуорогенного субстрата одним из протеолитических ферментов системы свертывания, средство оптической фото/видео регистрации светорассеяния/излучения от образца, средство регулировки давления в термостатируемой герметизируемой камере, выполненное с возможностью поддержания избыточного, по отношению к атмосферному, давления в камере, при этом устройство включает, по меньшей мере, одно второе средство облучения образца, выполненное с возможностью возбуждения сигнала флуоресценции указанной метки, при этом, по меньшей мере, одно первое средство облучения обеспечивает облучение образца в направлении перпендикулярном плоскости кюветы и, по меньшей мере, одно второе средство облучения обеспечивает облучение образца под углом к плоскости кюветы.This problem is solved by creating a device for monitoring the spatio-temporal dynamics of thrombin, which includes a thermostatic sealed chamber with a transparent window and a light trap filled with a fluid, configured to install a cuvette inside which there is a blood plasma sample under investigation and inside which a special coagulation activator insert, with a substance deposited on its lower end that facilitates the initiation of the coagulation process, at least one means illumination of the sample, configured to receive a light scattering signal from the sample and at least one first irradiation means configured to excite the fluorescence signal of a special label formed in the sample during the cleavage of the fluorogenic substrate previously added to the sample by one of the proteolytic enzymes of the coagulation system, means of optical photo / video recording of light scattering / radiation from a sample, means for adjusting the pressure in a thermostatic sealed the chamber, configured to maintain excess, relative to atmospheric, pressure in the chamber, while the device includes at least one second means of irradiation of the sample, configured to excite the fluorescence signal of the specified label, while at least one first irradiation means provides irradiation of the sample in the direction perpendicular to the plane of the cuvette, and at least one second irradiation means irradiates the sample at an angle to the plane of the cuvette.
А также тем, что оно дополнительно содержит средство анализа оптической плотности образца, предпочтительно на длине волны возбуждения флуоресцентной метки.And also the fact that it further comprises means for analyzing the optical density of the sample, preferably at a wavelength of excitation of the fluorescent label.
А также тем, что средство регулировки давления выполнено с возможностью поддержания избыточного давления, по отношению к атмосферному на 0,2-0,5 атм.And also the fact that the pressure control means is configured to maintain excess pressure, relative to atmospheric pressure, by 0.2-0.5 atm.
А также тем, что оно содержит оптические элементы, направляющие, фокусирующие и осуществляющие спектральную коррекцию освещения/облучения.And also by the fact that it contains optical elements that guide, focus and perform spectral correction of lighting / irradiation.
А также тем, что оно дополнительно содержит средство управления средствами освещения/ облучения, фото/видео регистрации и регулировки давления, выполненное с возможностью синхронизации работы указанных средств.And also the fact that it additionally contains means for controlling lighting / irradiation, photo / video recording and pressure adjustment, configured to synchronize the operation of these funds.
На фиг. 1 схематически представлено заявляемое устройство;In FIG. 1 is a schematic representation of the claimed device;
на фиг. 2 приведен пример размещения образца плазмы и вставки-активатора в измерительной кювете, фотографии светорассеяния от образца при освещении его средством освещения и фотографии флуоресценции образца при облучении его средствами облучения;in FIG. Figure 2 shows an example of placing a plasma sample and an activator insert in a measuring cuvette, photos of light scattering from the sample when it is illuminated with a light, and photos of the fluorescence of the sample when it is irradiated with radiation;
на фиг. 3 представлен пример артефактного искажения сигнала флуоресценции метки на границе фибринового сгустка при использовании одного средства облучения, облучающего образец в направлении перпендикулярном стенке кюветы (слева), а также пример устранения артефактного искажения сигнала флуоресценции метки на границе фибринового сгустка при использовании двух средств облучения (справа);in FIG. Figure 3 shows an example of artifact distortion of the label fluorescence signal at the boundary of the fibrin clot when using a single irradiation means irradiating the sample in the direction perpendicular to the cell wall (left), as well as an example of eliminating artifact distortion of the label fluorescence signal at the border of the fibrin clot when using two irradiation means (right) ;
на фиг. 4 изображен график зависимости интенсивности сигнала флуоресценции метки от оптической плотности образца.in FIG. Figure 4 shows a plot of the intensity of the label fluorescence signal versus the optical density of the sample.
Устройство (фиг. 1) предназначено для определения характеристик процесса свертывания крови и ее компонентов и оно работает следующим образом. В герметичной термостатируемой камере 1, заполненной водой или иной текучей прозрачной средой (далее «тепловым агентом»), устанавливают и поддерживают температуру теплового агента на заданном уровне (по умолчанию 37°С). Внутри термостатируемой камеры 1 при помощи фиксатора кюветы 18 размещают кювету 2. Кювета 2 может содержать как один, так и несколько каналов. Внутри канала (каналов) кюветы 2 размещен образец (образцы) плазмы крови 3 (фиг. 2). При этом кювета 2 размещается таким образом, что часть кюветы с исследуемым образцом 3 полностью погружена в тепловой агент, тем самым обеспечивается равномерный и быстрый прогрев образца. После полного прогрева образца 3 и прекращения конвекционных потоков в образце в кювету 2 погружают специальную вставку 4 таким образом, чтобы тромбогенное вещество (активатор свертывания), нанесенное на торец этой вставки 4, пришло в соприкосновение с образцом 3 и инициировало запуск исследуемого процесса свертывания. В качестве вещества, способствующего инициации процесса свертывания, может быть использован: белок, так называемый - тканевый фактор (тромбопластин), иммобилизованный различными способами на торцевую поверхность вставки 4 или непосредственно на внутреннюю поверхность кюветы 2 в заданном заранее месте; а также другие материалы организменного происхождения, представляющие собой препараты клеток и тканей. В качестве активатора свертывания можно использовать и другие тромбогенные вещества: стекло; каолин, пластик и т.п.The device (Fig. 1) is intended to determine the characteristics of the coagulation process of blood and its components and it works as follows. In a sealed
Далее закрывают термостатируемую камеру 1 герметизирующим средством 6 и устанавливают и поддерживают избыточное давление (в пределах на 0,3-0,5 атм. выше атмосферного) в объеме термостатируемой камеры посредством работы средства регулировки давления 5. Избыточное давление необходимо для предотвращения образования пузырьков газа как в образце 3, так и в тепловом агенте. Это необходимо для того, чтобы указанные пузырьки не искажали результаты регистрации оптических характеристик процесса свертывания (т.к. пузырьки газа вызывают артефактные блики при их освещении). Средство регулировки давления 5, в частном случае его выполнения, может включать в свой состав воздушный насос, обратные клапаны и датчик давления, измеряющий давление в камере 1. Средство герметизации 6 может представлять собой крышку, колпачок, задвижку или иное известное средство. При этом средство герметизации 6 может быть механическим, закрываемым оператором, или электромеханическим, работающим по командам средства управления.Next, close the thermostatically controlled
Термостатируемая камера 1 снабжена прозрачным окном 7, через которое кювета с исследуемым образцом 3 освещается средством освещения 8 и средствами облучения 12, имеющие разные спектры излучения. Средство освещения 8 предназначено для освещения образца с целью дальнейшей регистрации светорассеяния от образца (например, освещает образец в красном диапазоне длин волн). При необходимости, средств освещения может быть несколько (на фиг. 1 не показано), которые симметрично освещают кювету 2 с образцом 3 с боков. Средства облучения 12 предназначены для возбуждения сигнала флуоресценции от специальной метки-флуорофора, которая образуется в объеме образца после взаимодействия тромбина с предварительно добавленным в образец флуорогенным субстратом (например, освещают образец в диапазоне длин волн, соответствующем спектру возбуждения метки). В качестве средств освещения и облучения могут быть использованы светодиоды (или группы светодиодов), или любые другие источники излучения требуемого спектрального диапазона (или группы источников излучения).The thermostatically controlled
При контакте активатора свертывания, размещенного на торце вставки 4, с образцом 3 запускается процесс свертывания. От торца вставки начинает расти фибриновый сгусток. Изображения процесса формирования фибринового сгустка регистрируются средством фото/видео регистрации 9 (например, цифровой фото/видеокамерой) при помощи объектива 10, в виде картины пространственного распределения светорассеяния (фотографии) от образца 3 при освещении его средством освещения 8. Формирующийся фибриновый сгусток хорошо рассеивает свет, в то время как плазма крови практически прозрачна для света от средства освещения 8. В результате на получаемом средством регистрации изображении (фотографии) светорассеяния фибриновый сгусток будет более яркий, чем несвернувшаяся часть образца (фиг. 2). В процессе проведения исследования световая ловушка 11, размещенная внутри термостатируемой камеры 1, обеспечивает эффективное поглощение света от средств освещения, прошедшего за плоскость кюветы 2. Это достигается за счет геометрических и поверхностных свойств ловушки, обеспечивающих многократное переотражение света стенками ловушки и его постепенное эффективное поглощение. Световая ловушка может быть выполнена различным способом, в частности, сформирована за счет определенной геометрии внутренних поверхностей термостатируемой камеры, в частности, в виде усеченного конуса. Также она может быть сформирована за счет придания внутренним поверхностям камеры светопоглощающих свойств, например за счет чернения и придания им определенной шероховатости. Геометрия и оптические свойства световой ловушки 11 были подобраны таким образом, чтобы обеспечивать многократное переотражение и поглощение фонового излучения. Таким образом, лишь малая часть света, прошедшего за плоскость кюветы 2 при освещении образца, попадает обратно в область регистрации кюветы 2 и во входную апертуру объектива 10 после отражения от стенок термостатируемой камеры 1 и ловушки 11. За счет этого достигается лучшая контрастность между свернувшейся и несвернувшейся частью образца. Путем цифровой обработки серии изображений (фотографий) светорассеяния средство 13 обработки результатов исследования рассчитывает параметры пространственной динамики свертывания плазмы крови (например, такие как скорость роста сгустка, время задержки роста сгустка, наличие спонтанных сгустков и др.).When the coagulation activator, located at the end of the
Добавление в образец 3 перед началом проведения исследования флуорогенного субстрата к одному из протеолитических ферментов системы свертывания, в частности, субстрата к тромбину, позволяет проводить исследование пространственной кинетики данного протеолитического фермента - тромбина в процессе свертывания плазмы крови. При образовании в образце тромбина, он начинает отщеплять от субстрата сигнальную метку. Метка способна флуоресцировать при облучении светом определенной длиной волны (в частности, 370 нм). Из пространственного распределения сигнала метки в различные моменты времени можно получить пространственное распределение концентрации тромбина в различные моменты времени, используя уравнения типа реакция-диффузия.The addition of a fluorogenic substrate to one of the proteolytic enzymes of the coagulation system, in particular, a substrate to thrombin, in
Для регистрации пространственной кинетики протеолитического фермента в процессе свертывания плазмы крови исследуемый образец 3 с добавленным флуорогенным субстратом облучают в заданные моменты времени средствами облучения 12 для возбуждения сигнала флуоресценции метки и регистрируют изображения пространственного распределения сигнала флуоресценции метки в образце (фиг. 2.) устройством регистрации 9.To register the spatial kinetics of the proteolytic enzyme during blood plasma coagulation, the
Для обеспечения получения заявленного технического результата, а именно для повышения точности определения пространственно-временной концентрации тромбина, средства облучения 12 располагают относительно кюветы таким образом, чтобы исключить возникновение артефактных искажений сигнала флуоресценции метки на границе роста фибринового сгустка (фиг. 3). Одно первое средство облучения 12 облучает кювету 2 через окно 7 в термостатируемой камере перпендикулярно стенке кюветы 2, что достигается путем использования дихроичного зеркала 14 (является зеркалом для освещения возбуждения и является прозрачным для излучения флуоресценции), такое расположение средства 12 обеспечивает максимально равномерное облучение кюветы. Второе средство облучения 12 облучает кювету 2 через окно 7 под углом снизу, что обеспечивает минимизацию искажений сигнала флуоресценции метки на границе роста фибринового сгустка. Излучение от средств облучения 12, каждого из которых может быть более одного (на фиг. 1 не показано) подвергается спектральной коррекции фильтрами 16, обеспечивающими выделение спектра флуоресценции метки из спектра средства освещения. Диффузоры 17 служат для сглаживания диаграммы направленности излучения средств облучения 12. Световой фильтр 15 служит для блокировки той части излучения от средств облучения 12, которая была отражена образцом, кюветой или стенками камеры. Средство освещения 8 и/или средства облучения 12 включаются лишь на то короткое время, когда осуществляется процесс регистрации светорассеяния/флуоресценции. Такой режим работы средств освещения/облучения уменьшает эффект фотовыцветания метки субстрата.To ensure the receipt of the claimed technical result, namely, to increase the accuracy of determining the spatiotemporal thrombin concentration, the irradiation means 12 is positioned relative to the cuvette in such a way as to exclude the occurrence of artifact distortion of the fluorescence signal of the label at the growth boundary of the fibrin clot (Fig. 3). One first irradiation means 12 irradiates the
При облучении образца излучением возбуждения флуоресцентная метка начинает излучать свет в другом диапазоне длин волн (излучение флуоресценции). Излучение флуоресценции метки регистрируется средством регистрации 9 (например, цифровой фото/видеокамерой) при помощи объектива 10, в виде изображений картины пространственного распределения сигнала флуоресценции (фиг. 2). Путем цифровой обработки серии фотографий флуоресценции средство 13 обработки результатов исследования рассчитывает параметры пространственной кинетики протеолитического фермента, в частности, тромбина в процессе свертывания (например, такие как скорость распространения тромбина, амплитуда пика тромбина, количество образовавшегося тромбина и др.).When a sample is irradiated with excitation radiation, a fluorescent label begins to emit light in a different wavelength range (fluorescence radiation). Label fluorescence radiation is recorded by means of registration 9 (for example, a digital photo / video camera) with a
Сигнал флуоресценции метки зависит не только от активности протеолитического фермента, но и от оптических свойств исследуемого образца 3. Для нормальных образцов (без признаков гемолиза или хилеза) интенсивность флуоресценции фиксированной концентрации метки различается незначительно, что делает возможным использование общей калибровки для всех нормальных образцов (под калибровкой понимается единожды установленная для конкретного устройства зависимость между интенсивностью флуоресценции метки в каждой точке образца и ее концентрацией). Однако повышенное присутствие билирубина или гемоглобина в образце, также как и хилезность образца изменяет оптическую плотность образца, что в свою очередь влияет на сигнал флуоресценции метки. Для того чтобы использовать общую калибровку применительно к таким образцам, ее необходимо предварительно нормировать, используя значение оптической плотности образца и зависимость интенсивности сигнала флуоресценции метки от оптической плотности образца (фиг. 4). Значение оптической плотности образца 3 вычисляется из значения интенсивности сигнала освещения возбуждения от средства облучения 12, освещающего кювету перпендикулярно, прошедшего сквозь образец. Интенсивность сигнала прошедшего облучения измеряется электронным фотодетектором 21. Размещение электронного фотодетектора 21 внутри заполненной тепловым агентом камеры 1 термостата нежелательно, так как потребует принятия мер по изоляции электрической части детектора от теплового агента (например, воды) и мер по герметичному выводу сигнала с фотодетектора (проводов) из термостатируемой камеры 1. Расположение фотодетектора 21 непосредственно за кюветой 2 сильно исказит изображение картины светорассеяния от образца за счет возникновения паразитных сигналов светорассеяния и отражения от фотодетектора 21. Для того чтобы избежать обозначенных проблем фотодетектор 21 располагают вне термостатируемой камеры. При этом прошедшее через кювету 2 излучение возбуждения направляется к фотодетектору 21 миниатюрным зеркалом 19 через прозрачное герметичное окно 20. Зеркало 19 конструктивно закреплено в фиксаторе кюветы 18 и расположено за кюветой 2 таким образом, что вносит искажения в сигнал светорассеяния и флуоресценции образца лишь в небольшой части области регистрации, не участвующей в последующем анализе. Таким образом, на фотодетектор 21 попадает часть излучения возбуждения, прошедшая через образец 3. Сигнал, регистрируемый фотодетектором, зависит от оптической плотности образца, и используется для нормировки общей калибровки.The fluorescence signal of the label depends not only on the activity of the proteolytic enzyme, but also on the optical properties of the studied
Регистрация пространственной динамики процесса свертывания и кинетики образования протеолитического фермента возможна в рамках одного исследования путем поочередной работы средств освещения 8 и облучения 12.Registration of the spatial dynamics of the coagulation process and the kinetics of the formation of a proteolytic enzyme is possible within the framework of a single study by the alternate operation of the
Таким образом, предлагаемое устройство позволяет регистрировать в различные моменты времени в процессе свертывания образца плазмы крови пространственное распределение светорассеяния от образца и пространственное распределение флуоресценции метки-флуорофора, образующейся под действием протеолитического фермента системы свертывания крови - тромбина. Параметры пространственной динамики роста фибринового сгустка и пространственной кинетики образования тромбина рассчитываются путем анализа полученных распределений. Полученные данные дают важную информацию о состоянии свертывающей системы крови образца.Thus, the proposed device allows you to register at different points in time in the process of coagulation of a blood plasma sample, the spatial distribution of light scattering from the sample and the spatial distribution of fluorescence of the fluorophore mark formed by the proteolytic enzyme of the blood coagulation system - thrombin. The parameters of the spatial dynamics of fibrin clot growth and the spatial kinetics of thrombin formation are calculated by analyzing the obtained distributions. The data obtained provide important information about the state of the blood coagulation system of the sample.
Claims (5)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016147005U RU177920U1 (en) | 2016-11-30 | 2016-11-30 | A device for monitoring the spatiotemporal dynamics of thrombin |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016147005U RU177920U1 (en) | 2016-11-30 | 2016-11-30 | A device for monitoring the spatiotemporal dynamics of thrombin |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU177920U1 true RU177920U1 (en) | 2018-03-15 |
Family
ID=61628916
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016147005U RU177920U1 (en) | 2016-11-30 | 2016-11-30 | A device for monitoring the spatiotemporal dynamics of thrombin |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU177920U1 (en) |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
UA58370C2 (en) * | 2002-12-06 | 2005-01-17 | Bukovyna State Medical Academy | Method for determining blood clotting time from the time of thrombus formation after introduction of thrombin in the blood plasma |
RU2347224C2 (en) * | 2007-01-10 | 2009-02-20 | Институт химической кинетики и горения СО РАН | Method of blood analyses and blood analyser |
RU2360970C2 (en) * | 2004-03-31 | 2009-07-10 | Бакстер Интернэшнл Инк. | Kit for measurement of thrombin formation in sampled patient's blood or plasma |
US7767458B2 (en) * | 2005-02-22 | 2010-08-03 | Technoclone Gesellschaft M.B.H. | Method for determining coagulation activation and device for carrying out said method |
RU123166U1 (en) * | 2012-08-16 | 2012-12-20 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Гематологическая Корпорация" | SPATIAL MONITORING OF SPATIAL BLOOD COAGING AND ITS COMPONENTS |
RU2489704C2 (en) * | 2007-12-20 | 2013-08-10 | Конинклейке Филипс Электроникс Н.В. | Microelectronic sensory unit of sensor for detecting target particles |
-
2016
- 2016-11-30 RU RU2016147005U patent/RU177920U1/en active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
UA58370C2 (en) * | 2002-12-06 | 2005-01-17 | Bukovyna State Medical Academy | Method for determining blood clotting time from the time of thrombus formation after introduction of thrombin in the blood plasma |
RU2360970C2 (en) * | 2004-03-31 | 2009-07-10 | Бакстер Интернэшнл Инк. | Kit for measurement of thrombin formation in sampled patient's blood or plasma |
US7767458B2 (en) * | 2005-02-22 | 2010-08-03 | Technoclone Gesellschaft M.B.H. | Method for determining coagulation activation and device for carrying out said method |
RU2347224C2 (en) * | 2007-01-10 | 2009-02-20 | Институт химической кинетики и горения СО РАН | Method of blood analyses and blood analyser |
RU2489704C2 (en) * | 2007-12-20 | 2013-08-10 | Конинклейке Филипс Электроникс Н.В. | Microelectronic sensory unit of sensor for detecting target particles |
RU123166U1 (en) * | 2012-08-16 | 2012-12-20 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Гематологическая Корпорация" | SPATIAL MONITORING OF SPATIAL BLOOD COAGING AND ITS COMPONENTS |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA2879601C (en) | Device for monitoring spatial coagulation of blood and of components thereof | |
US7415144B2 (en) | Cell observation device and cell observation method | |
JP2021009153A (en) | Low volume coagulation assay | |
US9494604B2 (en) | Device for characterizing the coagulation or sedimentation dynamics of a fluid such as blood or blood plasma | |
US20080201083A1 (en) | Cell Culture Evaluation System, Cell Culture Evaluation Method, and Cell Culture Evaluation Program | |
US20080293091A1 (en) | Apparatus and methods for automated diffusion filtration, culturing and photometric detection and enumeration of microbiological parameters in fluid samples | |
KR100813915B1 (en) | Cell culture detection apparatus | |
JP2011512543A (en) | Three-dimensional imaging of living cells using ultraviolet radiation | |
KR102652419B1 (en) | Methods for measuring analytes and/or proteins in biological samples | |
JP2018534557A (en) | Device for reading IVD assays | |
KR20120080056A (en) | Disc and calibration method of test device using the same | |
JP2015532428A (en) | Optical filling detection | |
RU2518247C2 (en) | Method of determining space-time distribution of proteolytic enzyme activity in heterogeneous system, device for realising thereof and method of diagnosing hemostasis system disorders by change of space-time distribution of proteolytic enzyme activity in heterogenic system | |
RU123166U1 (en) | SPATIAL MONITORING OF SPATIAL BLOOD COAGING AND ITS COMPONENTS | |
RU177920U1 (en) | A device for monitoring the spatiotemporal dynamics of thrombin | |
WO2018101861A1 (en) | Device for monitoring the spatial and temporal dynamics of thrombin | |
JP2009162578A (en) | Method and instrument for measuring intercellular interaction | |
AU2022201120A1 (en) | Systems, Subsystems And Methods For Measuring Water Characteristics In A Water Facility | |
CA2109045A1 (en) | Microphoto lysis analysis process to measure cell characteristics | |
US10514334B2 (en) | Cell measurement method | |
JP2022119510A (en) | Discrimination method and fluorometer | |
JP2005278599A (en) | Cultured cell observation device and method for observing cultured cell |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PD9K | Change of name of utility model owner | ||
QB9K | Licence granted or registered (utility model) |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20190806 Effective date: 20190806 |