RU1307844C

RU1307844C - Method for producing yeast biomass

Info

Publication number: RU1307844C
Authority: RU
Inventors: кова Т.И. Чист; Н.И. Науменко; В.К. Ерошин; И.М. Чирков
Original assignee: Институт Биохимии И Физиологии Микроорганизмов Ан Ссср
Priority date: 1985-03-27
Filing date: 1985-03-27
Publication date: 1993-11-30

Abstract

Изобретение относитс к микробиологической промышленности, в чааности к способам получени биомассы дрожи ей на этаноле. Целью изобетени вл етс улучшение качества целевого продукта за счет предотвращени его инфицированности посторонней микрофлороЯ Штамм Candida valida ВКМУ-2327 выращивают в режиме хемостата .при лимитировании роста клеток этанолом на модифицированной среде 8-Е при температ и jrfH 4,0. .Скорость протока ч . Парй1иальное давление кислорода в среде 40 - 50% от насыщени После уаановлени стационарного соао ни iQffibTypbi провод т термооб1 ботку, дл чего отлю- чают проток в ферментере, температуру повышают до 50 - 53% и выдерживают культу в течение 025 - 1,0 ч после чего снова подключают проток Стационарное состо ние куга)Туры после термообработки наступает через 7 - 8 ч Способ основан на обнаруженной способности штамма Candida salida ВКМУ-2327 расти при температуре 55 - 60&deg;С и позвол ет улучиить качестю поучаемой би шассы за счет предотфащени ее инф щфо- ванности посторонней микрофлорой. 1таблThe invention relates to the microbiological industry, in particular, to methods for producing yeast biomass on ethanol. The aim of the invention is to improve the quality of the target product by preventing it from becoming infected with extraneous microflora. The Candida valida strain VKMU-2327 is grown in a chemostat mode by limiting cell growth with ethanol on modified 8-E medium at temperatures and jrfH 4.0. . Speed duct h Parental oxygen pressure in the medium 40–50% of saturation After stationary iQffibTypbi coa is established, heat treatment is carried out, for which the duct in the fermenter is turned off, the temperature is increased to 50–53% and the cultivation is maintained for 025–1.0 h after which is connected again to the duct. The stationary state of the kug) Tours after heat treatment begin in 7-8 hours. The method is based on the detected ability of the Candida salida strain VKMU-2327 to grow at a temperature of 55-60 ° C and allows to improve the quality of the learned bass due to the prevention her info awnings of extraneous microflora. 1table

Description

Изобретение относитс к микробиологической промышленности и представл ет собой способ получени биомзссы дрожжей на этиловом спирте.The invention relates to the microbiological industry and is a method for producing ethanol-containing yeast biomass.

Целью изобретени вл етс улучшение качества целевого продукта за счет предотвращени его инфицированности посторонней микрофлорой.The aim of the invention is to improve the quality of the target product by preventing it from becoming infected with extraneous microflora.

Способ заключаетс в том, что дрожжи Candida vallda ВКМ У-2327 с рко выраженными термотолерантными свойстсзами (обнаружены способности роста при 50-53°С) культивируют на питательной среде, содержащей этиловый спирт и минеральные соли в качестве источника азота, фосфора и микроэлементов . В случае инфицировани либо с профилактической целью провод ттер.мо- обработку при темп ературе ВО-53 С и тече- ние 0,25-1,0 ч, затем продолжают культивирование.The method consists in the fact that Candida vallda VKM U-2327 yeast with pronounced thermo-tolerant properties (growth ability was detected at 50-53 ° C) is cultivated on a nutrient medium containing ethyl alcohol and mineral salts as a source of nitrogen, phosphorus and trace elements. In case of infection or for prophylactic purposes, a tert. Treatment is carried out at a temperature of BO-53 C and for 0.25-1.0 hours, then cultivation is continued.

Дл изучени выживаемости дрожжевой мезофильной микрофлоры были поставлены специальные эксперименты. С этой целью из ВКМ были получены 20 штаммов мезофильных дрожжей, растущих на минеральной среде с этанолом. Кроме того, дл сравнени исследовали некоторые термотолерантные штаммы дрожжей.Special experiments have been performed to study the survival of yeast mesophilic microflora. For this purpose, 20 strains of mesophilic yeast growing on a mineral medium with ethanol were obtained from VKM. In addition, several thermotolerant yeast strains were examined for comparison.

Штаммы дрожжей раздельно выращивают на скошенном сусло-агаре при температуре 28°С в течение 48 ч. .Затем с кос ка делают смыв 3 мл стерильной гзодопровод- ной-воды, осторожно встр хивают пробирку , культуру смывают с поверхности агаризованной среды и полученную суспензию клеток в количестве 1 мл внос т в заранее приготовленные колбы на 500 мл с 100 мл среды 8-Е следующего состава (на 1 л): (NH4)2HPO/i 1,5 г; KH.POl 0,7 г; MgSO-v 7Н20 0,8 г; fx aCi 0,05 г; FeSO.r бНаО 16,7 мг; CaCl2- 2Н20 0:66 мг; ZnSO/ - 6H20 0,13 мг; CuS04- 5Н20 0,16мг; MnSO/i 0,15 мг; CoCS2 6Н20 0,18 мг; этанол 1 об.%; дрожжевой автолизат 0,2 об.%.Yeast strains are separately grown on beveled wort agar at a temperature of 28 ° C for 48 h. Then, 3 ml of sterile gzon-piped water are washed off the braid, the tube is gently shaken, the culture is washed off the surface of the agar medium and the resulting cell suspension in an amount of 1 ml are added to 500 ml pre-prepared flasks with 100 ml of 8-E medium of the following composition (per 1 l): (NH4) 2HPO / i 1.5 g; KH.POl 0.7 g; MgSO-v 7H20 0.8 g; fx aCi 0.05 g; FeSO.r bNaO 16.7 mg; CaCl2 - 2H20 0:66 mg; ZnSO / - 6H20 0.13 mg; CuS04-5H20 0.16 mg; MnSO / i 0.15 mg; CoCS2 6H20 0.18 mg; ethanol 1 vol.%; yeast autolysate 0.2 vol.%.

Выращивание провод т в колбах на качалке при28°С в течение 48 ч. Далее из колб делают отбор проб в количестве 3 мл и провод т высев на чашки Петри с сусло-агаром в количестве 0,05 мл (контроль). Затем суспензию клеток прогревают в ультратермостате при (50-53°С) ± 0,5°С в течение 30-60 мин, после чего делают высеп по 0,05 мл на чашки с сусло-агаром (опыт). Чашки инкубируют при 28°С в течение 72 ч. По истечении указанного срока провод т просмотр выросших колоний, Оценка визуальна по п тибалльной шкале, где 5 баллов - обильный рост, 4 балла - хороший рост, 3 балла - средний рост, 2 - слабый рост. Cultivation was carried out in flasks on a shaker at 28 ° C for 48 hours. Next, samples were taken from the flasks in an amount of 3 ml and plated on Petri dishes with wort agar in an amount of 0.05 ml (control). Then the cell suspension is heated in an ultra-thermostat at (50-53 ° C) ± 0.5 ° C for 30-60 minutes, after which 0.05 ml per cup is made onto wort agar plates (experiment). The cups are incubated at 28 ° C for 72 hours. At the end of the indicated period, the grown colonies are scanned. The rating is visual on a scale of 5 points, where 5 points indicate abundant growth, 4 points indicate good growth, 3 points mean growth, 2 weak height.

1 балл едва различимый рост, О - отсутствие роста.1 point barely perceptible growth, O - lack of growth.

Результаты исследовани представлены в таблице. Из таблицы видно, что из 22The results of the study are presented in the table. The table shows that out of 22

исследованных штаммов дрожжей в результате термообработки при 53°С в течение 30 мин способность к размножению сохран етс у Шести штаммов дрожжей, а выдерживание штаммов при этой же температуре вstudied yeast strains as a result of heat treatment at 53 ° C for 30 min, the ability to reproduce is preserved in Six yeast strains, and keeping the strains at the same temperature in

0 течение SO мин приводит к потере жизнеспособности всех исследованных мезофильных штаммов дрожжей.0 SO min leads to loss of viability of all studied mesophilic yeast strains.

Во всех экспериментах провод т контроль на загр знение посторонней микро5 флорой в процессе культивировани путем микроскопироваии , а также высева суспензии клеток на чашки Петри с суслом-агаром. . С этой целью берут 0,5 мл суспензии и делают разведение в 100000 раз стерильной во0 допроводной водой. Высев провод т в количестве 100-200 клеток на чашки Петри с суслом-агаром. Чашки инкубируют при 28°С в течение 72 ч.In all experiments, contamination with extraneous microflora was monitored during cultivation by microscopy, as well as plating of cell suspensions on Petri dishes with wort agar. . For this purpose, 0.5 ml of suspension is taken and dilution is made 100,000 times with sterile water-conducting water. Sowing is carried out in an amount of 100-200 cells per Petri dish with wort agar. Plates are incubated at 28 ° C for 72 hours.

По истечении указанного срока про5 сматривают выросшие колонии дрожжей. Наличие посторонней дрожжевой микрофлоры определ ют по присутствию колоний разной формы, цвета, консистенции и другим морфологическим признакам.After this period, grown yeast colonies are examined. The presence of extraneous yeast microflora is determined by the presence of colonies of various shapes, colors, consistencies, and other morphological characters.

0 Пример Штамм Candida valida ВКМ У-2327 хран т на скошенном сусле-агаре в пробирке, закрытой ватно-марлевой пробкой , при температуре 4-б С. Штамм выращивают па кос ке с суслом-агаром при 37°С0 Example The strain Candida valida VKM U-2327 is stored on beveled wort agar in a test tube closed with a cotton-gauze stopper at a temperature of 4 b C. The strain is grown on a skew with wort agar at 37 ° C.

5 в течение 13 ч.5 for 13 hours

Дл получени инокул та (первой стадии ) в пробирку с культурой Candida vallda ВКМ У-2327 внос т около 5 мл стерильной водопроводной воды, осторожно встр хи0 вают пробирку, смыоают культуру с поверхности агаризованной среды и полученную суспензию внос т в стерильный биологический матрац с заранее приготовленной пло1цадкой сусла-агара. Суспензию рав5 номерно распредел ют по поверхности сусла-агара и выращивают при 37°С в течение 18ч.In order to obtain an inoculum (first stage), about 5 ml of sterile tap water is introduced into a test tube with a Candida vallda VKM U-2327 culture, gently shake the tube, wash the culture off the surface of the agar medium and add the suspension to a sterile biological mattress with a preliminary cooked platter of wort agar. The suspension is uniformly distributed over the surface of the wort agar and grown at 37 ° C for 18 hours.

Дл получени инокул та (второй стадии ) в биологический матрац с культуройTo obtain an inoculum (second stage) in a biological mattress with culture

0 (инокул т первой стадии) внос т около 50 мл стерильной воды и, осторожно покачива матрац, смывают культуру с поверхности згаризозанной среды. Полученную суспензию перенос т в стерильную колбу с отрост5 ком и получают инокул т второй стадии, который используют дл засееа среды в ферментере.0 (inoculum of the first stage), add about 50 ml of sterile water and, gently shaking the mattress, wash off the culture from the surface of the obstructed medium. The resulting suspension was transferred to a sterile flask with a process 5 and a second-stage inoculum was obtained, which was used to inoculate the medium in a fermenter.

Выращивание Candida vaiide 8КМ У- 2327 в ферментере АНКУМ-2М провод т в режиме хемостата при лимитировании роста клеток этанолом на модифицированной среде 8-Е следующего состава (на 1,0 л): (NH4)2HPO/) 1,5 г; КН2Р04 0,7 г; MgSO/j 7Н20 0,8 г; NaCI 0,05 г; бНаО 16,7 мг,- CaCl2- 2Н20 0,66 мг; ZnS04- 6Н20 0,18 мг: 5Н200,16 мг; МпЗОд 4Н20 0,15 мг; CoCl2- 6Н20 0,18 мг; этанол 1 об. %.The cultivation of Candida vaiide 8KM U-2327 in the ANKUM-2M fermenter was carried out in a chemostat mode by limiting cell growth with ethanol on modified 8-E medium of the following composition (1.0 l): (NH4) 2HPO /) 1.5 g; KH2R04 0.7 g; MgSO / j 7H20 0.8 g; NaCl 0.05 g; bNaO 16.7 mg; - CaCl2 - 2H20 0.66 mg; ZnS04-6H20 0.18 mg: 5H200.16 mg; Mp3 4H20 0.15 mg; CoCl2-6H20 0.18 mg; ethanol 1 vol. %

Температуру 36°С поддерживают на заданном уровне в пределах ±0,5°С. Значение рН среды устанавливают равным 4,0 ± ±0,1 автоматической подтитровкой 1% . Скорость протока в хемостате устанавливают 0,25 ч . Парциальное давление кислорода в среде (р 02) поддерживают 40- 50% от насыщени , Отбор проб дл анализа провод т после трехкратной смены объема среды в ферментере. После установлени стационарного состо ни культуры в услови х хемостата (оптическа плотность, температура , рН, р 02) провод т термообработку . С этой целью отключают проток в ферментере, температуру повышают до 50°С и культуру выдерживают в этих услови х в течение 30 мин, после чего снова подключают проток. Стационарное состо ние культуры после термообработки наступает через ч. В указанных услови х термообработки клетки штамма Candida vadda В KM У-2327 остаютс жизнеспособными на 59% и сохран ют способность к размножению.The temperature of 36 ° C is maintained at a predetermined level within ± 0.5 ° C. The pH of the medium is set equal to 4.0 ± ± 0.1 by automatic subtitling 1%. The flow rate in the chemostat set 0.25 hours The partial pressure of oxygen in the medium (p 02) is maintained at 40-50% of saturation. Sampling for analysis is carried out after changing the volume of medium three times in the fermenter. After establishing the stationary state of the culture under the conditions of a chemostat (optical density, temperature, pH, p 02), heat treatment is carried out. For this purpose, the duct in the fermenter is turned off, the temperature is raised to 50 ° C, and the culture is maintained under these conditions for 30 minutes, after which the duct is reconnected. The stationary state of the culture after heat treatment occurs after h. Under the indicated heat treatment conditions, the cells of the Candida vadda strain KM U-2327 remain 59% viable and retain the ability to reproduce.

П р и м е р 2. Осуществл ют, как описано в примере 1, но термообработку провод т при 50°С в течение 60 мин.Example 2. They were carried out as described in Example 1, but the heat treatment was carried out at 50 ° C for 60 minutes.

В указанных услови х штамм Cabdida valida В KM У-2327 сохран ет жизнеспособность , а также способность к размножению на 23%. Стационарное состо ние культуры после термообработки наступает через 7-8 ч.Under the indicated conditions, the Cabdida valida strain B KM U-2327 retains viability as well as the ability to reproduce by 23%. The stationary state of the culture after heat treatment occurs in 7-8 hours.

Примерз. Осуществл ют, как описано 8 примере 1, но дл засева ферментера используют смесь двух штаммов (1;1)-Candlda valida ВКМ У-2327 и Candida utilis ВКМ У- 2332. После установлени стационарного состо ни в услови х хемостата (оптическа плотность, рН, р 02) провод т термообработку при температуре 50°С 30 мин. В указанных услови х термообработки клетки штамма Candida utilis ВКМ У-2332 погибают полностью, а у штамма Candida vaiida ВКМ У-2327 отмирает 41% клеток. Таким образом , в результате термообработки в культуре не остаетс дрожжей С. utilis ВКМ У-2332. а дрожжи. С.valida ВКМ У-2327 сохран ют жизнеспособность на 59 %, а также способность к размножению. Стационарное состо ние культуры в услови х хемостата наступает через 7-8 ч после термообработки.Sample Carried out as described in Example 8, example 1, but a mixture of two strains of (1; 1) -Candlda valida VKM U-2327 and Candida utilis VKM U-2332 is used for inoculation of the fermenter. After establishment of a stationary state under the conditions of a chemostat (optical density, pH, p 02) heat treatment is carried out at a temperature of 50 ° C for 30 minutes. Under the indicated heat treatment conditions, the cells of the Candida utilis VKM U-2332 strain die completely, and 41% of the cells die in the Candida vaiida VKM U-2327 strain. Thus, as a result of heat treatment, C. utilis VKM U-2332 yeast did not remain in the culture. but yeast. C.valida VKM U-2327 retained viability by 59%, as well as the ability to reproduce. The steady state of the culture under the conditions of a chemostat occurs 7-8 hours after heat treatment.

П р и м е р 4. Осуществл ют, как описано в примере 3, но термообработку провод т при температуре 50°С в течение 60 мин. В указанных услови х термообработки клетки 5 штамма С.utilis ВКМ У-2332 погибают полностью , а у штамма С.valida ВКМ У-2327 отмирает 77% клеток. Таким образом, в результате термообработки в культуре не остаетс дрожжей С.utilis ВКМ У-2332, а 10 дрожжи С.valida ВКМ У-2327 сохран ют жизнеспособность и способность к размножению на 23%. Стационарное состо ние культуры в услови х хемостата наступает через 7-8 ч после термообработки. 15П р им ерб.Осуществл ют, как описаноExample 4. They were carried out as described in Example 3, but the heat treatment was carried out at a temperature of 50 ° C for 60 minutes. Under the indicated heat treatment conditions, cells 5 of the strain C.utilis VKM U-2332 die completely, and in the strain C.valida VKM U-2327, 77% of the cells die. Thus, as a result of heat treatment, C.utilis VKM U-2332 yeast does not remain in the culture, and 10 C.valida VKM U-2327 yeast retains viability and reproducibility by 23%. The steady state of the culture under the conditions of a chemostat occurs 7-8 hours after heat treatment. 15 P erb. Carry out as described

в примере 3, но термообработку провод т при температуре 53°С в течение 15 мин. В указанных услови х термообработки клетки штамма С.utilis ВКМ У-2332 погибают пол- 0 ностью, а у.штамма C.valida ВКМ У-2327 отмирает 80,2% клеток. Таким образом, в результате термообработки в культуре не остаетс дрожжей С.utilis ВКМ У-2332, а дрожжи C.valida ВКМ У-2327 сохран ют 5 жизнеспособность на 19,8%.in Example 3, but the heat treatment was carried out at a temperature of 53 ° C for 15 minutes. Under the indicated heat treatment conditions, cells of the strain C.utilis VKM U-2332 die completely, and the strain of C.valida VKM U-2327 dies 80.2% of the cells. Thus, as a result of heat treatment, C.utilis VKM U-2332 yeast does not remain in the culture, and C.valida VKM U-2327 yeast retains 5 viability by 19.8%.

П р и м е. р 6. Штамм дрожжей C.valida ВКМ У-2327 выращивают, как описано в примере 1. После установлени стационарного состо ни в услови х хемостата в фер- 0 ментер дополнительно внос т смесь следующих штаммов мезофильных дрожжей:PRI me R 6. The yeast strain C.valida VKM U-2327 is grown as described in example 1. After establishing a stationary state under the conditions of a chemostat, a mixture of the following strains of mesophilic yeast is additionally introduced into the fermenter:

C.aaserlВКМУ-1425C.aaserl VKMU-1425

C.foliorumВКМУ-1453C.foliorum VKMU-1453

5C.steatolyticaВКМ У-25965C.steatolytica VKM U-2596

C.vartiovaaralВКМУ-2115C.vartiovaaral VKMU-2115

Rhodotorula glutinisВКМ У-749Rhodotorula glutinis VKM U-749

Torulopsis camarellli ВКМ У-1485 T.schataviiВКМУ-2094Torulopsis camarellli VKM U-1485 T.schatavii VKMU-2094

0C.BIankilВКМУ-21000C.BIankilВКМУ-2100

C.sifvatlcaАКМ У-2597 C.sifvatlca AKM U-2597

C.vartiovaaraiВКМУ-2114C.vartiovaarai VKMU-2114

Cryptococcus laurentl ВКМ У-1627 Rh.muclleginosaВКМ У-80Cryptococcus laurentl VKM U-1627 Rh.muclleginosa VKM U-80

5 T.lnconsplcuaВКМУ-7405 T.lnconsplcuaВКМУ-740

C.kefyrВКМУ-257C.kefyr VKMU-257

Штаммы дрожжей раздельно выращивают на кос ках с суслом-агаром при температуре 28°С в течение 48 ч. Затем с каждого 0 кос ка делают смыв 5 мл стерильной водопроводной воды, осторожно встр хивают пробирку, культуру смывают с поверхности агаризованной среды и полученную суспензию перенос т в стерильную колбу с отрост- 5 ком. Полученный инокул т внос т в ферментер. После установлени стационарного состо ни е услови х хемостата (оптическа плотность, температура, рН) отключают проток, температуру повышают до 50°С и культуру выдерживают с этих услови х в течение 60 мин, после чего снова подключают проток. Стационарное состо ние культур в услови х хемостата наступает через 8 ч после термообработки.Yeast strains are separately grown on braids with must-agar at a temperature of 28 ° C for 48 hours. Then, 5 ml of sterile tap water is washed from each 0 braids, the tube is gently shaken, the culture is washed off the surface of the agar medium and the suspension obtained is transferred. t into a sterile flask with a growth of 5 com. The resulting inoculum is introduced into the fermenter. After establishing the stationary state of the chemostat conditions (optical density, temperature, pH), the duct is turned off, the temperature is increased to 50 ° C and the culture is maintained under these conditions for 60 minutes, after which the duct is reconnected. The stationary state of the cultures under the conditions of a chemostat occurs 8 hours after heat treatment.

В указанных услови х термообработки подавл ющее большинство колоний составл ют колонии штамма дрожжей C.vaiida ВКМ У-2327 и отдельные колонии других штаммов дрожжей, отличающихс по форме .Under these heat treatment conditions, the vast majority of the colonies are colonies of the C. vaiida VKM U-2327 yeast strain and individual colonies of other yeast strains that differ in shape.

Пример. Осуществл ют, как описано в примере 6, но термообработку провод т при 53°С в течение 60 мин.Example. It was carried out as described in Example 6, but the heat treatment was carried out at 53 ° C for 60 minutes.

В указанных услови х термообработки способность к размножению сохран ет только штамм C.vaiida ВКМ У-2327. Стационарное cocfo ниe штамма C.vaiida ВКМ У- 2327 в услови х хемостата после термообработки наступает через 8 ч.Under the indicated heat treatment conditions, only C. vaiida VKM U-2327 strain retains the ability to reproduce. The stationary cocfo nium strain of C. vaiida VKM U-2327 under the conditions of a chemostat after heat treatment occurs in 8 hours.

Таким образом, предлагаемый способ позвол ет по сравнению с известным предотвратить размножение посторонней дрожжевой мезофильной микрофлоры или очистить ot нее производственную культуру.Thus, the proposed method allows, in comparison with the known method, to prevent the propagation of extraneous yeast mesophilic microflora or to purify the industrial culture from it.

При такой технологии получени биомассы дрожжей на этаноле C.vaiida ВКМWith this technology for the production of yeast biomass on ethanol C. vaiida VKM

У-2327 можно избавитьс от загр знени культуры посторонними мезофильными дрожжами как в отделении чистой культуры, так и в промышленных аппаратах дл выращивани дрожжей C.vaiida ВКМ У-2327. Реализаци данного преимущества штамма обеспечивает стабильность технологического процесса и облегчает получение продукта посто нного высокого качества,U-2327 can eliminate the contamination of the culture with extraneous mesophilic yeast both in the pure culture department and in industrial apparatus for growing C. vaiida VKM U-2327 yeast. The realization of this advantage of the strain ensures the stability of the technological process and facilitates the production of a constant high quality product,

(56) Авторское свидетельство СССР №442204, кл, С 12 С 1/16, 1974.(56) Copyright certificate of the USSR No. 442204, class C 12 C 1/16, 1974.

Chlstyakova Т. I.. MInkevlch 1. G., Eroshin V. К. Growth of the Thermotolerant. Yeast Candida valida on Ethanol: Dependences ofChlstyakova T. I. .. MInkevlch 1. G., Eroshin V. K. Growth of the Thermotolerant. Yeast Candida valida on Ethanol: Dependences of

Naximai Growth Rate and Cell Blomass Jleld on Temperature, Eur, I. Appi. Microhlol. Blotechnol., 1983, 18, p. 225-228.Naximai Growth Rate and Cell Blomass Jleld on Temperature, Eur, I. Appi. Microhlol. Blotechnol., 1983, 18, p. 225-228.

Примечание: 5 баллов - обильный рост, 4 балла - хороший рост, 3 балла - средний рост, 2 балла - слабый рост, 1 балл - едва различимый рост, О - отсутствие роста.Note: 5 points - abundant growth, 4 points - good growth, 3 points - average growth, 2 points - weak growth, 1 point - barely noticeable growth, O - lack of growth.

Claims

The claims

A METHOD FOR PRODUCING YEAST BIOMASS, providing for their continuous cultivation under conditions of aeration on a liquid nutrient medium containing ethanol as a carbon source, sources of nitrogen, phosphorus,

Editor N. Timonina

Compiled by Tehred M. Morgenthal

Order 3333

Circulation

NGO Search for Rospatent 113035. Moscow. Zh-35, Rauska embankment. 4/5

Production and Publishing Plant Patent, Uzhhorod, 101 Gagarin St.

Table continuation

mineral salts and microelements, characterized in that, in order to improve the quality of the target product by preventing it from being infected by extraneous microflora, the yeast is kept at a temperature of 50-53 ° C for 0.25-1.0 hours during cultivation.

Proofreader L. Pilipenko