PT1735013E

PT1735013E - Alpha- and beta-emitting hydroxyapatite particles

Info

Publication number: PT1735013E
Application number: PT05708405T
Authority: PT
Inventors: Gro Salberg; Roy Larsen
Original assignee: Algeta Asa
Priority date: 2004-02-20
Filing date: 2005-02-18
Publication date: 2012-05-08
Also published as: DK1735013T3; KR101165518B1; TW200536558A; TWI347194B; IL177354A; CN1972720B; ATE544492T1; JP5214884B2; IL177354A0; NZ549080A; KR20070038030A; JP2007528373A; KR20100060029A; NO20064232L; ZA200606728B; GB0403856D0; ES2382041T3; CN1972720A

Abstract

The present invention provides Hydroxyapatite (HA) incorporating an alpha-emitting radionuclide or an in vivo generator for an alpha-emitting radionuclide. The invention further provides methods for the formation of such HA, pharmaceutical compositions comprising the HA and methods of medical treatment of cancerous or non-cancerous disease including administering the HA or compositions thereof.

Description

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DESCRIÇÃO "PARTÍCULAS DE HIDROXIAPATITE EMISSORAS ALFA" A presente invenção refere-se a composições adequadas para administrar radionuclideos in vivo. Em particular, a invenção refere-se a composições em partículas que compreendem radionuclideos emissores alfa ou geradores para radionuclideos emissores alfa. As composições da invenção são adequadas para serem usadas no tratamento de doenças oncolóqicas. A introdução de terapias inovadoras é importante na investigação farmacêutica em todos os campos e em particular na investigação oncológica. Um dos campos desta investigação refere-se ao uso de radionuclideos para finalidades terapêuticas. Durante muitos anos os emissores de partículas beta foram investigados relativamente ao tratamento de cancros e os coloides marcados com emissores de partículas beta foram propostos para o tratamento de doenças intracavitárias, incluindo o cancro do ovário metastizado.DESCRIPTION " ALPHA EMISSIONS HYDROXIAPATITIS PARTICLES " The present invention relates to compositions suitable for administering radionuclides in vivo. In particular, the invention relates to particulate compositions comprising alpha-emitting radionuclides or generators for alpha-emitting radionuclides. The compositions of the invention are suitable for use in the treatment of oncological diseases. The introduction of innovative therapies is important in pharmaceutical research in all fields and in particular in cancer research. One of the fields of this investigation refers to the use of radionuclides for therapeutic purposes. For many years the beta particle emitters have been investigated for the treatment of cancers, and the beta particle-emitter labeled colloids have been proposed for the treatment of intracavitary diseases, including metastatic ovary cancer.

Nos últimos anos têm sido também feitos esforços para usar os emissores alfa em agentes anti tumorais. Os emissores alfa apresentam várias caracteristicas que os distinguem dos emissores beta, incluindo energias mais elevadas e amplitudes mais curtas nos tecidos. A amplitude das radiações dos emissores alfa típicos em meios fisiológicos é geralmente inferior a 100 micrómetros, o equivalente a somente o diâmetro de algumas células. Isto torna estas fontes bastante adequadas para o tratamento de tumores incluindo as micrometástases pois pouca da energia radiada irá passar para além das células alvo e, deste modo, 2 quaisquer danos no tecido saudável envolvente podem ser minimizados. Por outro lado, uma partícula beta tem uma amplitude de 1 mm ou mais em áqua. A energia das radiações das partículas alfa é também elevada quando comparada com as partículas beta, com os raios gama e com os raios X, sendo tipicamente de 5-8 MeV, ou de 5 a 10 vezes a de uma partícula beta e de 20 ou mais vezes a energia de um raio gama. Deste modo, esta deposição de uma grande quantidade de energia ao longo de uma distância muito curta confere às radiações alfa uma energia de transferência linear (LET) excecionalmente elevada quando comparada com as radiações gama ou beta. Isto explica a citotoxicidade excecional dos radionuclídeos emissores alfa e impõe ainda exigências rigorosas sobre o nível de controlo e de estudo da distribuição de radionuclídeos necessário de modo a evitar efeitos secundários inaceitáveis.In recent years efforts have also been made to use alpha emitters in antitumor agents. Alpha emitters have several characteristics that distinguish them from beta emitters, including higher energies and shorter amplitudes in the tissues. The radiation amplitude of the typical alpha emitters in physiological media is generally less than 100 micrometers, equivalent to only the diameter of some cells. This makes these sources quite suitable for the treatment of tumors including micrometastases since little of the radiated energy will pass beyond the target cells and thus any damage to the surrounding healthy tissue can be minimized. On the other hand, a beta particle has an amplitude of 1 mm or more in water. The radiation energy of the alpha particles is also high when compared to beta particles, gamma rays and X-rays, typically being 5-8 MeV, or 5 to 10 times that of a beta particle and 20 or more often the energy of a gamma ray. Thus, this deposition of a large amount of energy over a very short distance gives the alpha radiation an exceptionally high linear transfer energy (LT) when compared to gamma or beta radiation. This explains the exceptional cytotoxicity of alpha-emitting radionuclides and also imposes stringent requirements on the level of control and study of the radionuclide distribution needed in order to avoid unacceptable side effects.

Foi sugerido que os emissores alfa sejam usados ligados a partículas e a coloides para a terapia de radionuclídeos internos (ver Bloomer et al., Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 10 (3) 341-348 (1984); Rotmensch et al. , Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 34, 609-616 (1996); US 970062, US 5030441, US 5085848; e Vergote et al., Gynecol Oncol. 47(3): 366-372 (1992) e Gynecol Oncol 47(3): 358-65 (1992) ) .It has been suggested that alpha emitters be used bound to particles and to colloids for the therapy of internal radionuclides (see Bloomer et al., Int.J. Radiat, Oncol. Biol. Phys. 10 (3) 341-348 (1984); (1996), U.S.A. 970062, U.S.A. 5030441, U.S. 5085848, and Vergote et al., Gynecol Oncol 47 (3): 366 -372 (1992) and Gynecol Oncol 47 (3): 358-65 (1992)).

Um problema destes suportes coloidais e em partículas usados anteriormente é que os materiais de suportes usados não sejam biocompatíveis e biodegradáveis. Deste modo, os suportes podem acumular, em especial quando administrados de um modo repetitivo a uma cavidade do corpo. Esta 3 acumulação de material não biocompatível pode, deste modo, provocar inflamações, etc.One problem with such previously used colloidal and particulate supports is that the carrier materials used are not biocompatible and biodegradable. In this way, the holders may accumulate, especially when administered in a repetitive manner to a body cavity. This accumulation of non-biocompatible material can thus cause inflammation, etc.

Um outro problema, por exemplo em particular com os coloides de astato-211 e de chumbo-212 de acordo com as técnicas anteriores são as fugas de radionuclideos livres pois o astato-211 e o bismuto-212 (gerado a partir do chumbo-212) demonstraram acumular-se nos tecidos normais como a tiroide e o estômago em relação ao astato e nos rins em relação ao bismuto.Another problem, for example in particular with astatine-211 and lead-212 colloids according to the prior art are the free radionuclide leaks since astatine-211 and bismuth-212 (generated from lead-212 ) have been shown to accumulate in normal tissues such as the thyroid and stomach in relation to astatine and in kidneys relative to bismuth.

Um terceiro problema com muitos dos radionuclideos usados reside no facto de que são difíceis de preparar e que se encontram disponíveis somente em pequenas quantidades ou que têm uma semi-vida tão curta que os torna inúteis para o uso em preparações terapêuticas. A energia muito alta de uma partícula alfa combinada com a sua massa significativa resulta na transmissão de um momento significativo à partícula emitida aquando do decaimento nuclear. Como resultado, um momento igual mas oposto é transmitido aos núcleos "filhos" restantes sob a forma de um "retrocesso nuclear". Este retrocesso é suficientemente poderoso para quebrar a maioria das ligações químicas e para forçar o nuclídeo filho formado de novo para fora da quelação. Isto é muito significativo quando o núcleo filho é em si alfa reativo pois o filho não estará mais confinado pela partícula ou pelo complexo quelato em que os núcleos pais foram administrados. Deste modo, um problema significativo com os métodos anteriores para a administração de radioquímicos-alfa tem sido o controlo da biodistribuição dos nuclídeos filhos emissores alfa. Isto pode limitar a escolha dos emissores alfa aos que não apresentam filhos emissores alfa ou que fazem com 4 que a dose seja limitada de modo a reduzir a exposição dos tecidos saudáveis.A third problem with many of the radionuclides used is that they are difficult to prepare and are available only in small amounts or have such a short half-life that they render them useless for use in therapeutic preparations. The very high energy of an alpha particle combined with its significant mass results in the transmission of a significant moment to the emitted particle during nuclear decay. As a result, an equal but opposite moment is transmitted to the cores " children " remaining in the form of a " nuclear kickback ". This kicker is powerful enough to break down most chemical bonds and to force the newly formed nuclide out of chelation. This is very significant when the child nucleus is itself reactive alpha because the child will no longer be confined by the particle or by the complex chelate in which the parent nuclei were administered. Thus, a significant problem with prior methods for the administration of alpha-radiochemicals has been the control of the biodistribution of the alpha-emitting daughter nuclides. This may limit the choice of alpha emitters to those who do not have alpha-emitting children or which cause the dose to be limited in order to reduce the exposure of healthy tissues.

Quando o controlo sobre a biodistribuição de núcleos filhos pode ser mantida então há uma vantagem considerável em formar radiofarmacêuticos com emissores alfa tendo uma cadeia de mais filhos emissores alfa. Com este método a dose recebida pelo tecido saudável durante a administração pode ser minimizada e idealmente vários decaimentos alfa podem ter lugar na área onde está a doença. No entanto, se o controlo sobre o destino dos núcleos filhos não pode ser estabelecido então estes tornam-se num problema caso sejam emissores alfa. Isto deve-se ao facto de que eles podem então acumular-se nos tecidos saudáveis e provocar efeitos secundários indesejáveis.When control over the biodistribution of daughter nuclei can be maintained then there is a considerable advantage in forming alpha-emitting radiopharmaceuticals having a chain of more alpha-emitting children. With this method the dose received by the healthy tissue during administration can be minimized and ideally several alpha decays can take place in the area where the disease is. However, if control over the destination of child cores can not be established then these become a problem if they are alpha emitters. This is due to the fact that they can then accumulate in healthy tissues and cause undesirable side effects.

Um método para manter o controlo dos núcleos filhos emissores de alfa foi proposto em W001/60417. Este método emprega um agente de quelação contendo lipossomas de modo a conter os emissores alfa e evitar o retrocesso nuclear da propulsão dos núcleos filhos para a solução. No entanto os lipossomas não são ideais para todos os métodos de administração e podem apresentar em alguns casos taxas e vias de tolerância inaceitáveis.A method for maintaining control of alpha-emitting daughter nuclei was proposed in WO001 / 60417. This method employs a chelating agent containing liposomes so as to contain the alpha emitters and to prevent nuclear backtracking of the propulsion of the daughter nuclei into the solution. However liposomes are not ideal for all methods of administration and may in some cases exhibit unacceptable rates and tolerance pathways.

Existe, deste modo, uma necessidade considerável de composições radioterapêuticas melhoradas que apresentem uma titulação estável dos radionuclídeos emissores alfa e apresentando fugas nulas ou muito reduzidas de filhos radioativos para os outros tecidos. Existe ainda a necessidade de composições radioterapêuticas tendo componentes biocompatíveis e biodegradáveis. Existe ainda uma necessidade de composições radioterapêuticas em que os radionuclídeos são suficientemente fáceis de preparar e se 5 encontram em quantidades suficientemente grandes para serem usados em preparações farmacêuticas.There is thus a considerable need for improved radiotherapeutic compositions which have a stable titre of the alpha-emitting radionuclides and exhibiting zero or very reduced leakages of radioactive offspring to the other tissues. There is still a need for radiotherapeutic compositions having biocompatible and biodegradable components. There is still a need for radiotherapeutic compositions wherein the radionuclides are sufficiently easy to prepare and are in amounts large enough to be used in pharmaceutical preparations.

Os presentes inventores estabeleceram agora, de um modo surpreendente, que as partículas de hidroxiapatite (HA) podem ser marcadas por rádio com radionuclídeos emissores alfa e irão reter de um modo estável os radionuclídeos durante um período de tempo considerável. De um modo adicional os presentes inventores estabeleceram que HA marcada por rádio com emissores alfa irá reter os nuclídeos filhos após o decaimento do nuclídeo pai, até um nível inesperadamente elevado. Isto foi uma descoberta muito inesperada pois o retrocesso produzido pelo decaimento alfa habitualmente rompe as ligações químicas e efetua a libertação do produto filho.The present inventors have now surprisingly established that the hydroxyapatite (HA) particles can be radiolabeled with alpha-emitting radionuclides and will hold the radionuclides in a stable state for a considerable period of time. Additionally the present inventors have established that radio-labeled HA with alpha emitters will retain the daughter nuclides after decay of the parent nuclide, to an unexpectedly high level. This was a very unexpected finding because the setback produced by alpha decay usually breaks the chemical bonds and releases the child product.

Num primeiro aspeto, a presente invenção proporciona deste modo uma hidroxiapatite (HA) que incorpora um radionuclídeo emissor alfa ou um radionuclídeo que é um gerador in vivo de um radionuclídeo emissor alfa.In a first aspect, the present invention thus provides a hydroxyapatite (HA) incorporating an alpha-emitting radionuclide or a radionuclide which is an in vivo generator of an alpha-emitting radionuclide.

As hidroxiapatites da presente invenção são de preferência estáveis no sentido de que o radionuclídeo se encontra preso de um modo estável no interior da HA e não tem perdas significativas para a solução ou para outros tecidos em condições fisiológicas. As HAs são, de um modo adicional, preferencialmente estáveis no sentido em que os nuclídeos filhos são também presos pelo suporte HA e essencialmente não apresentam perdas para a solução ou para outros tecidos em condições fisiológicas.The hydroxyapatites of the present invention are preferably stable in the sense that the radionuclide is stably attached within the HA and has no significant losses to the solution or to other tissues under physiological conditions. HAs are further preferably preferable in the sense that the daughter nuclides are also attached by the HA carrier and essentially do not present losses to the solution or to other tissues under physiological conditions.

De um modo adicional, os emissores alfa desejáveis que entram em decaimento para proporcionar uma cadeia de emissões alfa adicionais podem, de preferência, ser usados 6 porque as hidroxiapatites da presente invenção facultam o controlo sobre o destino de tais filhos. 0 único uso anterior conhecido das partículas de hidroxiapatite enquanto suportes foi para os radionuclídeos emissores beta em radiosinovectomia (isto é, no tratamento da dor da artrite) por Unni et al. (Nucl Med Biol 29, 199-209 (2002)) e Brodack et al. (WO 97/01304). Todos os emissores beta usados anteriormente entravam em decaimento passando a nuclídeos estáveis sem relevância para a distribuição de doses (isto é, quase não havia qualquer retrocesso aquando no decaimento e o produto filho era não radioativo e, como tal, a sua distribuição não tinha qualquer relevância). O documento WO 0128587 A2 revela composições com uma resposta magnética que compreendem partículas de cerâmica de ferro para suportarem substâncias destinadas ao diagnóstico e/ou ao tratamento médico in vivo.Additionally, desirable alpha emitters that decay to provide a chain of additional alpha emissions may preferably be used because the hydroxyapatites of the present invention provide control over the fate of such children. The only known prior use of the hydroxyapatite particles as carriers was for beta-emitting radionuclides in radiosinovectomy (i.e., in the treatment of arthritis pain) by Unni et al. (Nucl Med Biol 29, 199-209 (2002)) and Brodack et al. (WO 97/01304). All previously used beta emitters decayed to stable nuclides with no relevance for dose distribution (that is, there was almost no setback at decay and the daughter product was non-radioactive and as such its distribution had no relevance). WO 0128587 A2 discloses compositions having a magnetic response comprising iron ceramic particles to support substances for diagnosis and / or medical treatment in vivo.

Vergole L. et al., 1992, (47), Gynecologic Oncology, 366-372 revela 211At ligado a polímeros orgânicos sintéticos para o tratamento de tumores.Vergole L. et al., 1992, (47), Gynecologic Oncology, 366-372 discloses 211At bound to synthetic organic polymers for the treatment of tumors.

As hidroxiapatites da presente invenção e as composições preparadas a partir das mesmas são muito adequadas para serem usadas no tratamento de doenças oncológicas. Isto é essencialmente devido aos emissores alfa terapeuticamente ativos, administrados diretamente com as hidroxiapatites da presente invenção ou geradas in vivo, proporcionam uma elevada citotoxicidade e provocam menos danos às regiões mais profundas e envolventes dos tecidos normais quando comparadas com os emissores beta. Isto aplica-se em particular quando as HAs da invenção são usadas num método de administração local, regional ou direcionado como sejam os métodos intracavitário, sistémico direcionado ou 7 intratumoral e resultam da menor amplitude da radiaçao alf a.The hydroxyapatites of the present invention and the compositions prepared therefrom are very suitable for use in the treatment of oncological diseases. This is essentially due to the therapeutically active alpha emitters, administered directly with the hydroxyapatites of the present invention or generated in vivo, provide high cytotoxicity and cause less damage to the deeper regions and surrounding normal tissues as compared to the beta emitters. This applies in particular when the HAs of the invention are used in a method of local, regional or targeted administration such as intracavitary, systemic directed or intratumoral methods and result from the lower amplitude of alpha radiation.

Num segundo aspeto, a presente invenção proporciona deste modo composições para serem usadas num método de tratamento de um ser humano ou de um animal, em especial um mamífero (em especial um que necessite do tratamento) através da administração de uma quantidade eficaz de hidroxiapatite (HA) incorporando um radionuclídeo emissor alfa ou um radionuclídeo que é um gerador in vivo de um radionuclídeo emissor alfa ou por administração de uma composição preparada a partir de uma tal HA.In a second aspect, the present invention thus provides compositions for use in a method of treating a human or animal, especially a mammal (especially one in need of treatment) by administering an effective amount of hydroxyapatite ( HA) incorporating an alpha-emitting radionuclide or a radionuclide which is an in vivo generator of an alpha-emitting radionuclide or by administering a composition prepared from such an HA.

Num outro aspeto a presente invenção proporciona uma composição farmacêutica que compreende uma hidroxiapatite da presente invenção e pelo menos um suporte fisiologicamente aceitável.In a further aspect the present invention provides a pharmaceutical composition comprising a hydroxyapatite of the present invention and at least one physiologically acceptable carrier.

Num outro aspeto a presente invenção proporciona uma hidroxiapatite (HA) que incorpora um radionuclídeo emissor alfa ou um radionuclídeo que é um gerador in vivo para um radionuclídeo emissor alfa para ser usado em terapia. Num outro aspeto a presente invenção proporciona o uso de hidroxiapatite (HA) incorporando um radionuclídeo emissor alfa ou um radionuclídeo que é um gerador in vivo para um radionuclídeo emissor alfa no fabrico de um medicamento (em especial um medicamento injetável, infundível ou aplicável localmente) para o tratamento de uma doença oncológica ou não oncológica (como seja qualquer uma das doenças indicadas de seguida).In a further aspect the present invention provides a hydroxyapatite (HA) incorporating an alpha-emitting radionuclide or a radionuclide which is an in vivo generator for an alpha-emitting radionuclide for use in therapy. In a further aspect the present invention provides the use of hydroxyapatite (HA) by incorporating an alpha-emitting radionuclide or a radionuclide which is an in vivo generator for an alpha-emitting radionuclide in the manufacture of a medicament (especially an injectable, infused or locally applicable medicament) for the treatment of an oncological or non-oncological disease (such as any of the diseases listed below).

Num outro aspeto, a invenção refere-se a composições farmacêuticas e a dispositivos que compreendem uma hidroxiapatite (HA) que incorpora um radionuclídeo que é um emissor alfa ou um gerador in vivo para um radionuclídeo emissor alfa como sejam as seringas previamente carregadas com preparações farmacêuticas. A invenção refere-se ainda a um processo para a preparação de uma hidroxiapatite (HA) que incorpora um radionuclídeo que é um emissor alfa ou um gerador in vivo de um radionuclídeo emissor alfa, compreendendo as etapas de: (a) colocação de uma solução de um radionuclídeo emissor alfa ou um gerador in vivo de um radionuclídeo emissor alfa em contacto com partículas de hidroxiapatite; e (b) opcionalmente a cristalização de um revestimento de hidroxiapatite nas partículas tituladas marcadas na etapa (a) de modo a encapsular o referido radionuclídeo ou o referido gerador in vivo nas partículas.In another aspect, the invention relates to pharmaceutical compositions and devices comprising a hydroxyapatite (HA) incorporating a radionuclide which is an alpha emitter or an in vivo generator for an alpha-emitting radionuclide such as syringes previously loaded with pharmaceutical preparations . The invention further relates to a process for the preparation of a hydroxyapatite (HA) incorporating a radionuclide which is an alpha emitter or an in vivo generator of an alpha-emitting radionuclide, comprising the steps of: (a) placing a solution of an alpha-emitting radionuclide or an in vivo generator of an alpha-emitting radionuclide in contact with hydroxyapatite particles; and (b) optionally crystallizing a hydroxyapatite coating on the titled particles labeled in step (a) in order to encapsulate said radionuclide or said in vivo generator in the particles.

De um modo preferencial o referido processo compreende: (a) a absorção de uma solução do radionuclídeo emissor alfa ou do gerador in vivo do radionuclídeo emissor alfa para as partículas de hidroxiapatite, de preferência a um pH compreendido entre cerca de 3 - 12; e (b) opcionalmente a cristalização de um revestimento de hidroxiapatite nas partículas tituladas marcadas na etapa (a) de modo a encapsular o referido radionuclídeo nas partículas. 0 termo hidroxiapatite é usado na técnica para indicar uma pluralidade de compostos fosfatados relacionados, em especial hidroxiapatite de cálcio que tem a fórmula [Caio (P04) 6 (OH) 2] · A hidroxiapatite de cálcio é um constituinte da matriz óssea saudável em todos os vertebrados. É atualmente usada como material em membros artificiais, em especial em encaixes de osso "sem cimento". 9Preferably said process comprises: (a) absorbing a solution of the alpha-emitting radionuclide or the in vivo generator of the alpha-emitting radionuclide for the hydroxyapatite particles, preferably at a pH of about 3-12; and (b) optionally crystallizing a hydroxyapatite coating on the titled particles labeled in step (a) in order to encapsulate said radionuclide in the particles. The term hydroxyapatite is used in the art to denote a plurality of related phosphatic compounds, especially calcium hydroxyapatite having the formula [Caio (P04) 6 (OH) 2]) Calcium hydroxyapatite is a constituent of healthy bone matrix in all the vertebrates. It is currently used as a material in artificial limbs, especially in bone-free " cement fittings ". 9

Um outro uso para a hidroxiapatite é como um permutador seletivo de catiões em colunas. A hidroxiapatite é um material biocompativel e biodegradável que é, deste modo, especialmente útil na aplicação in vivo. Relativamente a este ponto, uma outra vantagem é que pode ser tratada termicamente ou em autoclave. A presente invenção proporciona adicionalmente, deste modo, produtos e composições que são estáveis em autoclave em condições padrão.Another use for hydroxyapatite is as a selective cation exchanger on columns. Hydroxyapatite is a biocompatible and biodegradable material which is thus especially useful in the in vivo application. At this point, another advantage is that it can be thermally treated or autoclaved. The present invention thus further provides products and compositions which are autoclavable under standard conditions.

Tal como aqui usado na descrição e nas reivindicações, o termo hidroxiapatite (HA) é usado para indicar qualquer hidroxiapatite e qualquer derivado ou análogo da mesma que seja biocompativel ou biodegradável. De preferência não devem apresentar efeitos adversos relativamente ao uso pretendido.As used herein and in the claims, the term hydroxyapatite (HA) is used to denote any hydroxyapatite and any derivative or analog thereof which is biocompatible or biodegradable. Preferably, they should not have adverse effects with respect to the intended use.

Por exemplo, o termo hidroxiapatite ou HA, tal como é aqui usado, compreende a hidroxiapatite de cálcio assim como qualquer composto em que o ião de cálcio Ca2+ é substituído por qualquer outro catião (de preferência biotolerável) como sejam os Sr2+, Ba2+, Bi3+ ou Ac3+, ou uma combinação de um ou mais de entre estes catiões. Numa forma de realização a hidroxiapatite compreende hidroxiapatite de cálcio é a preferida. A HA pode ainda ser co-sedimentada ou cristalizada com outros minerais que apresentam uma baixa solubilidade, em especial sais de Ca de baixa solubilidade. A HA útil na presente invenção e aqui referenciada como hidroxiapatite ou HA, podem ainda ser modificados na superfície para transportarem outros substituintes ou grupos, como sejam o flúor, os fosfonatos incluindo os biofosfonatos e os tetrafosfonatos, as proteínas, os aminoácidos, os péptidos e as substâncias magnéticas. 10For example, the term hydroxyapatite or HA, as used herein, comprises calcium hydroxyapatite as well as any compound in which Ca 2+ calcium ion is replaced by any other (preferably biotolerable) cation such as Sr 2+, Ba 2+, Bi 3+ or Ac3 +, or a combination of one or more of these cations. In one embodiment the hydroxyapatite comprises calcium hydroxyapatite is preferred. The HA may further be co-sedimented or crystallized with other minerals which have a low solubility, in particular low solubility Ca salts. The HA useful in the present invention and referred to herein as hydroxyapatite or HA may further be surface modified to carry other substituents or groups, such as fluorine, phosphonates including biophosphonates and tetraphosphonates, proteins, amino acids, peptides and the magnetic substances. 10

Através da modificação de superfície diferentes propriedades, como por exemplo uma maior resistência à degradação, podem ser transmitidas à HA em partículas. Um outro uso ou modificação de superfície é a inclusão de moléculas recetoras ligantes que podem agir como um ligante alvo para se direcionar a estruturas biológicas alvo, em especial recetores associados a tumores. A hidroxiapatite ou HA da forma aqui usada engloba também compostos como seja qualquer composto de hidroxiapatite combinado ou co-sedimentado com outros materiais como sejam os metais, os óxidos, as proteínas, os aminoácidos, os hidratos de carbono, os fosfonatos incluindo os biofosfonatos, os compostos orgânicos, por exemplo polilactida, cetonas de polietileno, cerâmicas de vidro, titania, óxido de alumínio, óxido de zircónio, sílica, polietileno, epóxi, polietileno glicol, polihidroxibutirato, gelatina, colagénio, chitosano, fosfazeno, ferro, óxidos de ferro e/ou ferro magnético. Tais combinações são úteis para dar à HA em partículas final propriedades desejáveis adicionais, como sejam por exemplo o magnetismo (ferro magnético) ou a capacidade para formar gel (gelatina, colagénio, chitosano). De um modo adicional alguns dos grupos acima mencionados irão tornar a HA mais lipofílica, tal como é bem sabido de um perito na técnica, e isto é considerado como sendo uma propriedade vantajosa de qualquer derivado de HA ou análogo a ser usado na presente invenção.By surface modification different properties, such as higher resistance to degradation, can be transmitted to the particulate HA. Another use or surface modification is the inclusion of binding receptor molecules that can act as a target ligand to target target biological structures, especially tumor associated receptors. The hydroxyapatite or HA as used herein also encompasses compounds such as any hydroxyapatite compound combined or co-sedimented with other materials such as metals, oxides, proteins, amino acids, carbohydrates, phosphonates including biophosphonates, the organic compounds, for example polylactide, polyethylene ketones, glass ceramics, titania, aluminum oxide, zirconium oxide, silica, polyethylene, epoxy, polyethylene glycol, polyhydroxybutyrate, gelatin, collagen, chitosan, phosphazene, iron, iron oxides and / or magnetic iron. Such combinations are useful to give the final particulate HA additional desirable properties, such as for example magnetism (magnetic iron) or the ability to form gel (gelatin, collagen, chitosan). Additionally, some of the above-mentioned groups will render HA more lipophilic, as is well known to one skilled in the art, and this is considered to be an advantageous property of any HA derivative or the like to be used in the present invention.

As hidroxiapatites que são adequadas para serem usadas na presente invenção apresentam qualquer forma sólida e serão geralmente designadas como "partículas" na presente descrição e nas reivindicações para fazer a diferença em 11 relação às partículas de rádio como sejam as partículas alfa (núcleos de hélio) ou partículas beta (eletrões) . As partículas HA podem, por exemplo, ser cristais, microesferas ou coloides. 0 formato, o tamanho dos poros e a densidade das partículas podem ser escolhidos de modo a albergar o uso pretendido. 0 tamanho da HA em partículas pode, de um modo geral, estar compreendido de entre cerca de 10 nm e cerca de 100 μπι, mas os coloides e outros materiais em partículas podem ser usados incluindo as partículas tão pequenas como 1 nm.Hydroxyapatites that are suitable for use in the present invention are in any solid form and will generally be referred to as " particles " in the present description and in the claims to make the difference in relation to radio particles such as alpha (helium nuclei) particles or beta (electron) particles. The HA particles may, for example, be crystals, microspheres or colloids. The shape, pore size and particle density may be chosen to accommodate the intended use. The size of the particulate HA may generally be in the range of about 10 nm to about 100 μm, but colloids and other particulate materials may be used including particles as small as 1 nm.

Em uma forma de realização é preferido que as partículas tenham um tamanho tal que possam permanecer em suspensão sem sedimentação. A sedimentação neste contexto é tomada de modo a incluir a flutuação, em que o "sedimento" se forma no topo ao invés de no fundo da suspensão. Em particular é preferido que as partículas tenham um tamanho tal que não provoque sedimentação quando armazenadas durante um período de pelo menos 1 hora, de preferência de pelo menos 6 horas e mais preferencialmente de pelo menos 1 mês quando suspensos num fluido tal como sejam uma solução (especialmente aquosa) farmaceuticamente tolerável. Tamanhos de partículas adequados serão deste modo facilmente determinados para qualquer HA em particular, através de experiencias de sedimentação rotineiras.In one embodiment it is preferred that the particles have a size such that they can remain in suspension without sedimentation. Sedimentation in this context is taken to include flotation, where " sediment " is formed at the top instead of at the bottom of the suspension. In particular it is preferred that the particles have a size such that they do not cause sedimentation when stored for a period of at least 1 hour, preferably at least 6 hours, and most preferably at least 1 month when suspended in a fluid such as a solution (especially aqueous) pharmaceutically tolerable. Suitable particle sizes will thus be readily determined for any particular HA through routine sedimentation experiments.

Uma amplitude de tamanhos gerais especialmente preferida para as partículas HA de acordo com a presente invenção será de 1 fim a 20 μιη, em particular de 1 μιη a 5 μιη. É preferível o uso de partículas que tenham uma distribuição de tamanho substancialmente uniforme, diferentes amplitudes de tamanhos serão preferidas e escolhidas dependendo do uso pretendido. 12A particularly preferred overall size range for HA particles according to the present invention will be from 1 to 20 μιη, in particular from 1 μιη to 5 μιη. The use of particles having a substantially uniform size distribution is preferred, different size ranges will be preferred and chosen depending on the intended use. 12

As partículas de tamanho reduzido podem distribuir-se melhor em áreas onde há uma perturbação estérica. Do mesmo modo pode haver vantagens quando a composição da invenção é administrada por via intravenosa (por exemplo para o tratamento sistémico do cancro) ou por administração local (por exemplo, a um órgão afetado pelo cancro, como seja por exemplo o figado). Deste modo, uma amplitude de pequenos tamanhos, em especial para a administração intravenosa, é de cerca de lnm a cerca de 2 μιη e uma amplitude mais preferida é de cerca de 8 nm a 40 nm.Small particles can be better distributed in areas where there is a steric disturbance. Likewise, there may be advantages when the composition of the invention is administered intravenously (for example for the systemic treatment of cancer) or by local administration (for example, to an organ affected by cancer, such as for example the liver). Thus, a range of small sizes, especially for intravenous administration, is from about 1 nm to about 2 μιη and a most preferred amplitude is from about 8 nm to 40 nm.

Numa forma de realização partículas muito pequenas são administradas de modo a direcionarem-se de preferência para células tumorais. Em especial, os capilares dos tumores podem ser mais atreitos a fugas do que os capilares dos tecidos saudáveis (por exemplo, devido à sua fenestração). Partículas HA "nano partículas" muito pequenas de acordo com a presente invenção, por exemplo de 1 a 50 nm, de preferência de 2 a 10 nm, mais preferencialmente de 3 a 5 nm) podem, deste modo, apresentar fugas de um modo seletivo a partir dos capilares dentro dos tumores de modo a direcionarem de uma forma eficaz os seus radionuclideos para o local do tumor. Tais partículas podem estar também presas às porções de direcionamento (como as moléculas de ligação de anticorpos ou de recetores - ver mais acima) de modo a aumentar este efeito de direcionamento.In one embodiment very small particles are administered so as to preferably target tumor cells. In particular, the capillaries of tumors may be more prone to leakage than the capillaries of healthy tissues (eg because of their fenestration). HA particles " nano particles " very small in accordance with the present invention, for example 1 to 50 nm, preferably 2 to 10 nm, more preferably 3 to 5 nm) can thus selectively leak from the capillaries within the tumors in order to effectively target their radionuclides to the tumor site. Such particles may also be attached to the targeting moieties (such as antibody or receptor-binding molecules - see above) in order to increase this targeting effect.

Por outro lado, as partículas de maior tamanho podem ser melhor retidas no interior do local administrado, por exemplo numa cavidade do corpo. Uma segunda vantagem de tais partículas maiores é que elas não são tão facilmente engolidas ou cindidas pelos macrófagos e, como tal, espera-se que retenham melhor o radionuclideo in vivo. 13On the other hand, the larger particles may be better retained within the administered site, for example in a body cavity. A second advantage of such larger particles is that they are not so easily swallowed or cleaved by macrophages and as such are expected to better retain the radionuclide in vivo. 13

Deste modo, uma outra amplitude de tamanhos preferida, em especial para a administração a uma cavidade corporal, é de entre cerca de 100 nm e 100 μιη e uma amplitude mais preferida é de cerca de 500 nm a 20 μιη.Thus, a further preferred size range, especially for administration to a body cavity, is between about 100 nm and 100 μιη and a most preferred amplitude is about 500 nm to 20 μιη.

Da forma aqui usada, o "tamanho" das partículas refere-se ao tamanho médio (modo) da maior dimensão das partículas. As partículas podem ter qualquer formato ou mistura de formatos, incluindo esferas, placas, aqulhas, hastes, etc., mas em geral a maior dimensão não será mais de 20 vezes, de preferência não mais de cinco vezes a dimensão mais curta. Quando as partículas são formadas para a injeção (em especial intravenosa ou intra-arterial) ou para infusão, normalmente não há uma proporção detetável de partículas tendo uma dimensão superior a 8 μιη, de preferência 5 μιη. A infeção local ou regional, por exemplo a uma cavidade, intratumoralmente, subcutaneamente ou intramuscularmente pode não necessitar desta restrição. A porosidade é uma segunda propriedade das partículas HA que pode ser escolhida de modo a corresponder com o uso pretendido ou com o radionuclídeo a ser marcado nas partículas. Em particular a porosidade estará muito relacionada com a densidade das partículas e para algumas aplicações será favorável escolher partículas de HA tendo uma porosidade que confere uma densidade similar à da água de modo a conseguir uma sedimentação muito lenta, na eventualidade de esta ocorrer.As used herein, " size " of the particles refers to the average size (mode) of the largest particle size. The particles may have any shape or mixture of shapes, including beads, plates, beads, rods, etc., but in general the largest dimension will be no more than 20 times, preferably no more than five times the shortest dimension. When the particles are formed for injection (especially intravenous or intraarterial) or for infusion, there is usually no detectable proportion of particles having a size greater than 8 μιη, preferably 5 μιη. Local or regional infection, for example a cavity, intratumorally, subcutaneously or intramuscularly, may not require this restriction. Porosity is a second property of the HA particles which may be chosen to correspond with the intended use or with the radionuclide to be labeled on the particles. In particular the porosity will be closely related to the density of the particles and for some applications it will be favorable to choose HA particles having a porosity which imparts a density similar to that of the water in order to achieve a very slow sedimentation in the event that it occurs.

Um grupo de núcleos a serem usados com a presente invenção inclui os núcleos emissores alfa do grupo seguinte: 211At, 212Bi , 223Ra, 224Ra, 225Ac, 227Th, e qualquer combinação dos mesmos. 14A group of nuclei to be used with the present invention includes the alpha emitting nuclei of the following group: 211At, 212Bi, 223Ra, 224Ra, 225Ac, 227Th, and any combination thereof. 14

Um outro grupo de radionuclídeos são os emissores beta tendo pelo menos um filho emissor alfa na sua cadeia de decaimento. Estes incluem 211Pb, que atua como uma fonte 211Bi emissor alfa; 213Bi que decai para 213Po emissor alfa; e 225Ra que decai em beta para proporcionar 225Ac, e de seguida decai através de quatro emissões alfa e duas emissões beta para finalmente dar origem a 209Bi estável. Um exemplo especialmente preferido é: 212Pb que decai através do seu filho emissor alfa Bi.Another group of radionuclides are the beta emitters having at least one alpha emitting son in their decay chain. These include 211Pb, which acts as a 211Bi alpha emitter source; 213Bi that decays to 213Po emissor alpha; and 225Ra which decays in beta to provide 225Ac, and then decays through four alpha emissions and two beta emissions to finally yield stable 209Bi. An especially preferred example is: 212Pb which decays through its alpha-emitting son Bi.

Numa forma de realização preferida da invenção os 212Pb/212Bi adequados para serem usados na HA da presente invenção podem ser preparados por um método que compreende: i) Preparação de 224Ra (por exemplo a partir de uma fonte de 228Tório através de cromatografia de troca de aniões), ii) Purificação de 224Ra através da colocação em contacto com um ligador especifico de bloco f (por exemplo uma resina especifica de actinideo/lantanídeo, em especial com a forma de uma coluna), iii) Permitir o crescimento interno de Pb (por exemplo deixando 224Ra repousar durante 6-24 horas, e iv) Purificando o 212Pb resultante em contacto com um ligante especifico de chumbo (por exemplo uma resina especifica de Pb, em especial sob a forma de uma coluna).In a preferred embodiment of the invention the 212Pb / 212Bi suitable for use in the HA of the present invention may be prepared by a method comprising: i) Preparation of 224Ra (for example from a source of 228T by means of exchange chromatography anions), ii) Purification of 224Ra by contacting with a specific block linker f (for example an actinide / lanthanide specific resin, especially in the form of a column), iii) Allowing internal growth of Pb ( for example by allowing 224Ra to stand for 6-24 hours, and iv) Purifying the resulting 212Pb in contact with a specific lead binder (for example a Pb-specific resin, especially as a column).

No método acima, qualquer uma das etapas de purificação i), ii) e/ou iv) pode ser repetida pelo menos uma vez com as mesmas amostras ou com amostras diferentes de ligante específico. Tais ligantes específicos do elemento do bloco f incluem os derivados do ácido bis-fosfónico de metano e seus derivados ácidos como o ácido P, P' bis-fosfónico di-octil metano (por exemplo DIPEX (RTM)). Certos ligantes Pb adequados específicos incluem, os éteres de coroa, em 15 particular derivados 18-coroa-6 como o di-t-butil-ciclohexano-18-coroa-6 (por exemplo o cartucho Pb-B25-S contendo resina especifica Pb Eichrom). Quando são usados radionuclideos é preferível usar ligantes específicos no suporte não lábil como seja uma sílica mas para a purificação em que o contacto com a resina é breve, podendo ser usados suportes de resinas orgânicas. Este método pode ser combinado com qualquer método para a formação de HA incorporando os radionuclideos aqui referidos. 0 Pb, e a HA que incorpora 212Pb, formada e formavel através destes métodos forma outros aspetos da invenção. 0 método de preparação para 212Pb, acima indicado tem a vantagem de proporcionar um procedimento simples e fácil de executar e ainda proporciona 212Pb com uma maior pureza de radionuclídeo do que o que tinha sido anteriormente conseguido.In the above method, either purification steps i), ii) and / or iv) may be repeated at least once with the same samples or with different samples of specific binder. Such block element-specific binders include the bis-phosphonic acid derivatives of methane and their acid derivatives such as P, P 'bis-phosphonic acid di-octyl methane (for example DIPEX (RTM)). Certain specific suitable Pb linkers include crown ethers in particular 18-crown-6 derivatives such as di-t-butyl-cyclohexane-18-crown-6 (for example the Pb-B25-S cartridge containing specific resin Pb Eichrom). When using radionuclides it is preferred to use specific binders in the non-labile support such as a silica but for purification in which contact with the resin is brief, and supports of organic resins may be used. This method can be combined with any method for the formation of HA incorporating the radionuclides referred to herein. 0 Pb, and the HA incorporating 212 Pb, formed and formable by these methods forms other aspects of the invention. The above-described 212Pb preparation method has the advantage of providing a simple and easy to perform procedure and still provides 212Pb with a higher radionuclide purity than was previously achieved.

As composições da presente invenção são estáveis à perda do radionuclídeo carregado a partir das partículas de HA. Pode dizer-se que uma composição da presente invenção é estável se, após incubação numa solução a 37°C durante pelo menos 20 minutos, pelo menos 80% da atividade do radionuclídeo carregado é detetada nas partículas HA ao invés de na solução. Esta proporção deve ser, de preferência, de pelo menos 85%, mais preferencialmente de pelo menos 90% e mais preferencialmente de 95% ou mais.The compositions of the present invention are stable to the loss of the radionuclide charged from the HA particles. It can be said that a composition of the present invention is stable if, after incubation in a solution at 37 ° C for at least 20 minutes, at least 80% of the charged radionuclide activity is detected in the HA particles rather than the solution. This ratio should preferably be at least 85%, more preferably at least 90%, and more preferably at least 95%.

As composições são também estáveis à perda de nuclídeos filhos gerados pelo decaimento (por exemplo o decaimento alfa) do nuclídeo carregado ou de um dos seus produtos de decaimento. Uma composição pode ser considerada estável neste ponto se, após a incubação durante um período de tempo adequado, a atividade que pode ser atribuída ao 16 radionuclídeo filho gerado durante este período for distribuída de modo a que pelo menos 70% fica associada com as partículas HA. Esta proporção é de preferência de pelo menos 75%, mais preferencialmente de pelo menos 80% e mais de preferência de pelo menos 90%. A marcação da hidroxiapatite com um radionuclídeo pode, por exemplo, ser efetuada através das etapas de processo que se seguem: (a) absorção de uma solução do radionuclídeo emissor alfa ou do gerador in vivo do radionuclídeo emissor alfa para as partículas de hidroxiapatite de preferência com um pH compreendido entre cerca de 3 - 12, mais de preferência com um pH de entre 5 e 10; e (b) opcionalmente cristalizando um revestimento de hidroxiapatite nas partículas marcadas preparadas na etapa (a) de modo a encapsular o referido radionuclídeo nas partículas de HA. O método compreende de preferência também as etapas de: (c) aquecimento das partículas HA da etapa (a) ou da etapa (b) até uma temperatura de entre 70 e 150°C, de preferência de 80 a 130°C, mais preferencialmente de 100 a 120 °C.The compositions are also stable to the loss of daughter nuclides generated by the decay (for example, alpha decay) of the charged nuclide or one of its decay products. A composition can be considered stable at this point if, after incubation for a suitable period of time, the activity that can be attributed to the child radionuclide generated during this period is distributed so that at least 70% is associated with the HA particles . This ratio is preferably at least 75%, more preferably at least 80% and more preferably at least 90%. The labeling of the hydroxyapatite with a radionuclide may, for example, be effected by the following process steps: (a) absorption of a solution of the alpha-emitting radionuclide or of the in vivo generator of the alpha-emitting radionuclide for the hydroxyapatite particles preferably with a pH of from about 3-12, more preferably at a pH of from 5 to 10; and (b) optionally crystallizing a hydroxyapatite coating on the labeled particles prepared in step (a) in order to encapsulate said radionuclide in HA particles. The method preferably further comprises the steps of: (c) heating the HA particles from step (a) or step (b) to a temperature of between 70 and 150 ° C, preferably 80 to 130 ° C, more preferably of 100 to 120 ° C.

As partículas de HA marcadas de acordo com (a) ou (b) podem ser adicionadas a um suporte líquido biocompatível ou fisiologicamente aceitável (de preferência um suporte aquoso) para preparar uma suspensão ou uma dispersão injetável ou infundível, em conjunto com qualquer excipiente e/ou aditivo necessário ou desejável. Os aditivos incluem os adjuvantes adaptados para a preparação e para a estabilização de uma preparação fisiologicamente aceitável para o uso no tratamento do cancro e na 17 radiosinovectomia. Tipicamente estes componentes adicionais, quando presentes, serão adicionados antes da etapa opcional (c).The HA particles labeled according to (a) or (b) may be added to a biocompatible or physiologically acceptable liquid carrier (preferably an aqueous carrier) to prepare an injectable or infundible suspension or dispersion, together with any excipient and / or necessary or desirable additive. Additives include adjuvants adapted for the preparation and stabilization of a physiologically acceptable preparation for use in the treatment of cancer and radiosynoectomy. Typically these additional components, when present, will be added before optional step (c).

Suportes e excipientes farmaceuticamente toleráveis são bem conhecidos dos peritos na técnica e podem incluir, por exemplo, os sais, os açúcares e outros ajustadores da tonicidade, os tampões, os ácidos, as bases e outros ajustadores de pH, modificadores da viscosidade, corantes, etc.Pharmaceutically tolerable carriers and excipients are well known to those skilled in the art and may include, for example, salts, sugars and other tonicity adjuvants, buffers, acids, bases and other pH adjusters, viscosity modifiers, colorants, etc.

De um modo alternativo as partículas HA marcadas de acordo com (a) seguida das etapas opcionais (b) e/ou (c) podem ser incluídas numa composição de gel farmacêutica, em conjunto com qualquer excipiente necessário ou desejável e/ou aditivos. Aditivos adequados serão bem conhecidos dos peritos na técnica e podem incluir os que se encontram acima indicados e agentes gelificantes bem conhecidos como sejam os geles de polímero naturais e/ou sintéticos. As composições em forma de gel apresentam de preferência propriedades de libertação contidas.Alternatively the labeled HA particles according to (a) followed by optional steps (b) and / or (c) may be included in a pharmaceutical gel composition, together with any necessary or desirable excipients and / or additives. Suitable additives will be well known to those skilled in the art and may include those listed above and well known gelling agents such as natural and / or synthetic polymer gels. The gel compositions preferably have release properties contained.

Todas as outras preparações farmacêuticas adequadas que podem ser preparadas a partir das partículas HA marcadas com radionuclídeo emissor alfa ou um gerador in vivo para um radionuclídeo emissor alfa, incluindo líquidos para injeção ou infusão, geles, cremes, pastas, gotas, emplastros, toalhetes, pulverizações, membranas e folhas impregnadas, formam modos de realização adicionais da invenção.All other suitable pharmaceutical preparations which may be prepared from alpha-emitting radionuclide-labeled HA particles or an in vivo generator for an alpha-emitting radionuclide, including liquids for injection or infusion, gels, creams, pastes, drops, patches, wipes, sprays, membranes and impregnated sheets form further embodiments of the invention.

As preparações farmacêuticas mais preferidas das composições de acordo com a invenção são suspensões ou dispersões injetáveis ou infundíveis geralmente líquidas 18 fisiologicamente aceitáveis. De modo a preparar tais composições as composições da invenção são adicionadas a suportes líquidos fisiologicamente aceitáveis. Especialmente preferidas são as soluções tampão isotónicas salinas ou de fosfato, mas pode ser usado qualquer outro suporte líquido ou mistura de suportes que seja fisiologicamente aceitável e compatível com o composto de acordo com a presente invenção. Muitos de tais suportes líquidos ou sistemas de suportes são conhecidos dos peritos na técnica da preparação de preparações farmacêuticas para injeção in vivo e/ou infusão.The most preferred pharmaceutical preparations of the compositions according to the invention are generally physiologically acceptable liquid injectable or infusible suspensions or dispersions. In order to prepare such compositions the compositions of the invention are added to physiologically acceptable liquid carriers. Especially preferred are isotonic saline or phosphate buffer solutions, but any other liquid carrier or carrier blend which is physiologically acceptable and compatible with the compound of the present invention may be used. Many of such liquid carriers or carrier systems are known to those of skill in the art of preparing pharmaceutical preparations for in vivo injection and / or infusion.

As composições da presente invenção oferecem uma vantagem adicional pois elas e/ou as preparações farmacêuticas feitas a partir das mesmas podem ser alvo de um tratamento térmico, por exemplo com o objetivo de esterilizar. As composições da invenção serão tipicamente estáveis ao tratamento térmico acima de 70°C, de preferência acima de 80°C e mais preferencialmente de pelo menos 100°C. Isto é particularmente significativo para maiores partículas que não serão facilmente esterilizadas por filtragem.The compositions of the present invention offer an additional advantage as they and / or the pharmaceutical preparations made therefrom can be subjected to a heat treatment, for example for the purpose of sterilization. The compositions of the invention will typically be stable to heat treatment above 70øC, preferably above 80øC, and most preferably at least 100øC. This is particularly significant for larger particles which will not be easily sterilized by filtration.

De modo a evitar a agregação das partículas HA quando em suspensão, modificadores adequados ou adjuvantes que são bem conhecidos na técnica, como sejam os agentes de dispersão, que podem ser adicionados à preparação farmacêutica líquida de acordo com a invenção. Exemplos de tais modificadores podem ser os hidratos de carbono ou as proteínas. A dosagem eficaz a ser administrada a um paciente a necessitar de tratamento estará dependente de vários fatores como sejam a semi vida e a cadeia de decaimento do radionuclídeo incluído na composição de acordo com a 19 invenção; a via de administração; a condição médica do paciente e a sua idade e peso; assim como a doença a ser tratada. Uma tal dosagem eficaz pode ser conseguida através da administração de uma composição farmacêutica de acordo com a invenção como uma dosagem simples uma vez; ou através de pelo menos uma dosagem simples por dia (tipicamente uma, duas ou três por dia) para um período de tratamento de pelo menos um dia individual ou pelo menos um dia por semana durante uma ou mais semanas ou meses. 0 tratamento pode ser repetido pelo menos uma vez conforme o que seja considerado como necessário ou adequado pelo perito médico.In order to avoid aggregation of HA particles when in suspension, suitable modifiers or adjuvants which are well known in the art, such as dispersing agents, which may be added to the liquid pharmaceutical preparation according to the invention. Examples of such modifiers may be carbohydrates or proteins. The effective dosage to be administered to a patient in need of treatment will be dependent upon various factors such as the half life and the decay chain of the radionuclide included in the composition according to the invention; the route of administration; the patient's medical condition and age and weight; as well as the disease being treated. Such an effective dosage can be achieved by administering a pharmaceutical composition according to the invention as a single dosage once; or through at least one simple dosage per day (typically one, two or three per day) for a treatment period of at least one individual day or at least one day per week for one or more weeks or months. The treatment may be repeated at least once according to what is considered necessary or appropriate by the medical expert.

Se um radionuclídeo tendo uma semivida curta for usado, geralmente dá origem a uma dosagem de maior atividade por administração simples quando comparada com um radionuclídeo tendo uma semivida mais longa.If a radionuclide having a short half-life is used, it generally gives a higher activity dosage by simple administration as compared to a radionuclide having a longer half-life.

As dosagens típicas irão em geral estar compreendidas entre 10 kiloBq e 10 gigaBq por cada administração simples, sendo uma amplitude mais preferida de entre 1 megaBq e 1 gigaBq por cada administração simples.Typical dosages will generally be comprised between 10 kiloBq and 10 gigaBq per single administration, with a more preferred range of between 1 megaBq and 1 gigaBq per single administration.

As composições de acordo com a presente invenção são úteis em composições farmacêuticas, em especial preparações ou dispositivos em líquido ou em gel e destinados ao tratamento de cancro e de doenças não oncológicas.The compositions according to the present invention are useful in pharmaceutical compositions, in particular liquid or gel preparations or devices and for the treatment of cancer and non-oncological diseases.

Tal como se encontra acima indicado, a presente invenção proporciona, em vários aspetos, uma composição destinada a ser usada num método de tratamento de cancro e o uso de uma composição para o fabrico de um medicamento para ser usado num tal método de tratamento. As doenças particularmente aplicáveis a estes aspetos da invenção incluem as doenças oncológicas metastizadas ou não metastizadas, como as 20 pequenas células e não pequenas células do cancro de pulmão, o melanoma maligno, o cancro do ovário, o cancro de mama, o cancro ósseo, o cancro do cólon, o cancro da bexiga, o cancro do colo do útero, os sarcomas, os linfomas, as leucemias e os tumores da próstata.As indicated above, the present invention provides, in various aspects, a composition for use in a method of treating cancer and the use of a composition for the manufacture of a medicament for use in such a method of treatment. Diseases particularly applicable to these aspects of the invention include metastatic or non-metastatic oncological diseases such as small cell and non-small cell lung cancer, malignant melanoma, ovarian cancer, breast cancer, bone cancer, cancer of the colon, bladder cancer, cervical cancer, sarcomas, lymphomas, leukemias and prostate tumors.

Deste modo, uma forma de realização destes aspetos refere-se a composições para serem usadas num método de tratamento local de um tumor. Um tal tratamento pode, de preferência, ser aplicado através de uma injeção intratumoral ou de uma infusão num sujeito (geralmente um paciente humano) a necessitar de um tal tratamento, de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição de acordo com a invenção. Um tal método proporciona a irradiação local do tecido do tumor. Os radionuclideos emissores alfa são muito eficazes nesta forma de realização pois a sua amplitude é reduzida e os danos ao tecido saudável envolvente são minimizados. Exemplos de doenças que podem beneficiar em particular desta forma de realização da invenção são os que provocam os tumores sólidos, como o das células não pequenas do pulmão, o melanoma maligno, o cancro dos ovários, o cancro do cólon, os sarcomas e os tumores da próstata.Accordingly, one embodiment of these aspects relates to compositions for use in a method of local treatment of a tumor. Such a treatment may preferably be applied by intratumoral injection or infusion in a subject (generally a human patient) in need of such treatment, of a therapeutically effective amount of a composition according to the invention. Such a method provides for local irradiation of tumor tissue. The alpha-emitting radionuclides are very effective in this embodiment because their amplitude is reduced and damage to the surrounding healthy tissue is minimized. Examples of diseases that may benefit in particular from this embodiment of the invention are those that cause solid tumors, such as non-small cell lung cancer, malignant melanoma, ovarian cancer, colon cancer, sarcomas, and tumors of the prostate.

Uma outra forma de realização da invenção refere-se a composições destinadas a serem usadas em métodos de tratamento de cancros com disseminação local, como sejam os tumores do fígado, ou as doenças com uma localização peritoneal ou intracraniana. Este tratamento pode de preferência ser aplicado através de injeções ou de infusões locais-regionais, a um sujeito que necessite de tal tratamento, de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição de acordo com a invenção. 21Another embodiment of the invention relates to compositions for use in methods of treatment of locally disseminated cancers, such as liver tumors, or diseases with a peritoneal or intracranial location. This treatment may preferably be applied by injections or local-regional infusions, to a subject in need of such treatment, of a therapeutically effective amount of a composition according to the invention. 21

Ainda em outra forma de realização da invenção encontra-se uma composição destinada a ser usada num método para o tratamento de cancros com disseminação local como os tumores do fígado, através de uma administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma preparação líquida compreendendo HA radiomarcado de acordo com a invenção a um sujeito a necessitar de tal tratamento, em especial à corrente sanguínea do referido sujeito para a área ou órgão afetados, por exemplo para a corrente sanguínea do fígado no caso de um tumor do fígado. Isto pode promover o transporte da composição para o tumor.In yet another embodiment of the invention there is provided a composition for use in a method for the treatment of locally disseminated cancers such as liver tumors, by administration of a therapeutically effective amount of a liquid preparation comprising radiolabelled HA according to the invention to a subject in need of such treatment, in particular the bloodstream of said subject to the affected area or organ, for example to the liver bloodstream in the case of a liver tumor. This may promote the transport of the composition into the tumor.

Uma outra forma de realização da invenção refere-se a uma composição destinada a ser usada num método para o tratamento de cancro sistemicamente disseminado através de uma injeção ou de uma infusão intravenosa, ou outra admistração sistémica, a um sujeito necessitado de tal tratamento, de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica compreendendo uma HA radiomarcada de acordo com a invenção.Another embodiment of the invention relates to a composition for use in a method for the treatment of systemically disseminated cancer by injection or intravenous infusion, or other systemic administration, to a subject in need of such treatment, a therapeutically effective amount of a pharmaceutical composition comprising a radiolabeled HA according to the invention.

Uma outra forma de realização da invenção refere-se a uma composição destinada a ser usada num método de tratamento de tumores intracavitários, em que a quantidade terapeuticamente eficaz de um radionuclídeo sob a forma de uma composição da presente invenção é administrada a um sujeito que necessita de um tal tratamento através de uma injeção ou de uma infusão na cavidade afetada pelo tumor e retida nesse local de modo a obter a irradiação das superfícies da cavidade. Tais cavidades incluem a cavidade craniana, a cavidade peritoneal e as cavidades criadas pela efusão pericárdica e o mesotelioma e a administração é adequada para cancros como sejam o cancro intracraniano, os cancros intraperitoneais, ou os cancros localizados nas 22 cavidades criadas pela efusão pericárdica e pelo mesotelioma.Another embodiment of the invention relates to a composition for use in a method of treating intracavitary tumors, wherein the therapeutically effective amount of a radionuclide in the form of a composition of the present invention is administered to a subject needing of such treatment by means of an injection or infusion into the tumor-affected cavity and retained therein in order to obtain irradiation of the cavity surfaces. Such cavities include the cranial cavity, peritoneal cavity, and cavities created by pericardial effusion and mesothelioma, and administration is suitable for cancers such as intracranial cancer, intraperitoneal cancers, or cancers located in the 22 wells created by pericardial effusion and mesothelioma.

Uma outra forma de realização da invenção refere-se a uma composição para ser usada num método de terapia combinada, o qual compreende a administração a um sujeito a necessitar de um tal tratamento de uma quantidade terapeuticamente eficaz de HA radiomarcado ativo de acordo com a presente invenção e um ou mais tratamentos adicionais escolhidos de entre o grupo que consiste por: cirurgia, quimioterapia e radioterapia (em especial feixes de radioterapia externos). A terapia combinada é uma forma de realização particularmente preferida da presente invenção e pode ser executada de um modo simultâneo, sequencial ou alternado, ou em qualquer combinação dos mesmos. Deste modo, uma terapia combinada pode compreender um tipo de tratamento seguido de um ou mais outros tipos de tratamento, em que cada tipo de tratamento pode ser repetido uma ou mais vezes. Um exemplo de terapia simultânea combinada é a quimioterapia combinada com a administração de uma composição de acordo com a presente invenção no mesmo momento do tempo (ou pelo mesmo método de administração ou por um método diferente). Um tal tratamento combinado pode ser combinado com terapia sequencial iniciando tratamento simultâneo, por exemplo, após um tumor ter sido removido de um modo cirúrgico. A terapia combinada pode ser repetida uma ou mais vezes de acordo com as necessidades com base na situação do paciente.Another embodiment of the invention relates to a composition for use in a method of combination therapy which comprises administering to a subject in need of such treatment a therapeutically effective amount of radiolabelled active HA according to the present invention and one or more additional treatments selected from the group consisting of: surgery, chemotherapy and radiotherapy (in particular external beam radiotherapy). Combination therapy is a particularly preferred embodiment of the present invention and may be performed concurrently, sequentially or alternately, or in any combination thereof. Thus, a combination therapy may comprise a type of treatment followed by one or more other types of treatment, wherein each type of treatment may be repeated one or more times. An example of combined simultaneous therapy is chemotherapy combined with administration of a composition according to the present invention at the same time of the time (either by the same method of administration or by a different method). Such a combined treatment may be combined with sequential therapy initiating simultaneous treatment, for example, after a tumor has been surgically removed. Combination therapy may be repeated one or more times according to the needs based on the patient's situation.

Um exemplo de terapia combinada alternada pode ser a quimioterapia em um ou em mais períodos de tratamento alternado em dias ou semanas diferentes com a administração da composição farmacêutica da invenção; ou por exemplo 23 cirurgia seguida de um ou mais períodos de tratamento com a HA radiomarcada de acordo com a presente invenção.An example of alternate combination therapy may be chemotherapy in one or more alternate treatment periods on different days or weeks with administration of the pharmaceutical composition of the invention; or for example surgery followed by one or more periods of treatment with radiolabeled HA according to the present invention.

Uma forma de realização muito preferida da invenção refere-se a uma composição para ser usada num método de tratamento através da aplicação de uma composição ou de um dispositivo de acordo com a invenção numa quantidade terapeuticamente eficaz durante a cirurgia, após ter sido executado um procedimento para remover o material canceroso de um sujeito. A composição da presente invenção pode ser aplicada na base do tumor ou no tecido envolvente. Uma tal aplicação pode ser executada de modo a conseguir um efeito esterilizante no local da, ou envolvente à, base do tumor e se aplicável na cavidade. Isto pode ser particularmente útil no caso de se verificar uma rutura do tumor (por exemplo durante o procedimento cirúrgico). Um tal tratamento pode ainda, ou de um modo alternativo, alcançar um efeito anti-tumor em quaisquer células tumorais restantes neste local e/ou na sua proximidade. Esta forma de realização pode ser levada a cabo usando uma suspensão do composto ativo (por exemplo, sob a forma de uma pulverização ou de um toalhete). De um modo alternativo, quando se faz referência a este método de tratamento, pode ser preferido que a composição da invenção se encontre na forma de uma pasta, de um emplastro, de uma folha impregnada (em especial um emplastro ou folha absorvente) , de um creme ou de um gel e em especial de uma composição (por exemplo um gel) que proporcione uma libertação prolongada do agente terapêutico radioativo.A most preferred embodiment of the invention relates to a composition for use in a method of treatment by applying a composition or device according to the invention in a therapeutically effective amount during surgery after a procedure to remove the cancerous material from a subject. The composition of the present invention may be applied to the base of the tumor or the surrounding tissue. Such an application may be performed in order to achieve a sterilizing effect at the site of, or surrounding the tumor base and if applicable in the cavity. This may be particularly useful in the event of a tumor rupture (for example during the surgical procedure). Such a treatment may further, or alternatively, achieve an anti-tumor effect in any remaining tumor cells at and near this site. This embodiment may be carried out using a suspension of the active compound (for example, in the form of a spray or a wipe). Alternatively, when referring to this method of treatment, it may be preferred that the composition of the invention is in the form of a paste, a patch, an impregnated sheet (in particular a patch or absorbent sheet) of a cream or a gel and in particular a composition (for example a gel) which provides a prolonged release of the therapeutic radioactive agent.

Uma outra forma de realização da presente invenção refere-se a uma composição para ser usada num método de sinovectomia, isto é, para tratar um sujeito que sofra de dores nas articulações e/ou nos ossos, como é o caso das dores resultantes da artrite.Another embodiment of the present invention relates to a composition for use in a method of synovectomy, i.e. to treat a subject suffering from joint and / or bone pain, as is the case of arthritis pain .

Tal como aqui usado, o termo "sujeito" irá de um modo geral indicar um paciente humano mas pode ainda indicar um sujeito mamífero não humano, em especial um sujeito mamífero canino ou felino.As used herein, the term " subject " will generally indicate a human patient but may further indicate a non-human mammalian subject, in particular a mammalian canine or feline subject.

Na secção seguinte a invenção está exemplificada de modo a mostrar como as partículas de hidroxiapatite podem ser marcadas com um radionuclídeo emissor alfa e com um radionuclídeo emissor beta, respetivamente. Os exemplos não devem ser considerados como limitativos da invenção. A invenção está também ilustrada pela figura em anexo na qual: o-io, A Figura 1 mostra a retenção de Bi em vários tecidos apos 1 e 24 horas a seguir à administração de 212Pb. 0 nível de equilíbrio também se encontra ilustrado e demonstra que os níveis de 212Bi se encontram perto do equilíbrio. Métodos e Materiais GeraisIn the following section the invention is exemplified in order to show how the hydroxyapatite particles can be labeled with an alpha-emitting radionuclide and with a beta-emitting radionuclide, respectively. The examples should not be construed as limiting the invention. The invention is also illustrated by the attached figure in which: Figure 1 shows the retention of Bi in various tissues at 1 and 24 hours following administration of 212Pb. The equilibrium level is also shown and shows that the levels of 212Bi are close to equilibrium. General Methods and Materials

As partículas de hidroxiapatite usadas eram Hidroxiapatite, suspensão aquosa tamponada, Tipo 1 (Sigma, St. Louis, MO, USA) ou Macro-Prep Hidroxiapatite Ceramica Tipo 1, 20 μπι (Bio Rad Laboratories, Hercules, CA, USA).The hydroxyapatite particles used were hydroxyapatite, buffered aqueous suspension, Type 1 (Sigma, St. Louis, MO, USA) or Macro-Prep Hydroxyapatite Ceramic Type 1, 20 μm (Bio Rad Laboratories, Hercules, CA, USA).

Contadores e detetores: Foi efetuada espetroscopia gama com um EG&G Ortec GEM15-P Germanium Detector. A contagem geral de radioatividade foi efetuada com um detetor Nal de orifícios múltiplos (Packard Crystal II, Packard InstrumentCounters and Detectors: Gamma spectroscopy was performed with an EG & G Ortec GEM15-P Germanium Detector. The general radioactivity count was performed with a Nal multi-hole detector (Packard Crystal II, Packard Instrument

Co., Downers Grove, IL, USA).Co., Downers Grove, IL, USA).

Titulação e purificação das partículas: A mistura de reação foi vigorosamente agitada num agitador (MSI Minishaker, 25 IKA, Alemanha) durante 1 minuto e depois foi incubada num misturador durante 30 minutos antes de ser centrifugada por três vezes (5 minutos, 9000 rpm, centrífuga MiniSpin, Eppendorf, Alemanha) e os tubos lavados duas vezes com 1 ml de uma solução de citrato 0,1 M.Particle Titration and Purification: The reaction mixture was vigorously shaken on a shaker (MSI Minishaker, 25 IKA, Germany) for 1 minute and then incubated in a blender for 30 minutes before being centrifuged three times (5 minutes, 9000 rpm, Centrifuge MiniSpin, Eppendorf, Germany) and the tubes washed twice with 1 ml of a 0.1 M citrate solution.

Exemplo 1Example 1

Preparação de partículas marcadas com rádio-223. O Radio-223 foi preparado a partir de uma fonte de Ac Th imobilizada numa coluna DIPEX-2 através da eluição do 223Ra com 1 M HC1. Ao eluato de HC1 foi adicionado citrato de Na a 0,1 M até que o pH estivesse acima de 5. Num tubo de Eppendorfer de 2 ml foram adicionados 250 μΐ de uma dispersão de hidroxiapatite de 40 mg/ml e 50 μΐ da solução de 223Ra/citrato. A marcação e a purificação foram efetuados como descrito na secção de Materiais e Métodos. A atividade de ligação das pastilhas foi acima de 96% para as três experiências em triplicado levadas a cabo em paralelo.Preparation of labeled particles with radio-223. Radio-223 was prepared from a source of Ac Th immobilized on a DIPEX-2 column by eluting 223Ra with 1 M HCl. To the HCl eluate was added 0.1 M Na citrate until the pH was above 5. In a 2 ml Eppendorfer tube were added 250 μ of a hydroxyapatite dispersion of 40 mg / ml and 50 μ of the solution of 223Ra / citrate. Marking and purification were performed as described in the Materials and Methods section. The tablet binding activity was above 96% for the three triplicate experiments carried out in parallel.

Exemplo 2Example 2

Teste de estabilidade in vitro de partículas HA marcadas 223Ra N s 999In vitro stability test of labeled HA particles 223Ra N s 999

As partículas HA Ra descritas no Exemplo 1 foram adicionados 500 μΐ ou de citrato de sódio 0,1 M ou albumina de soro bovino. A dispersão foi incubada de um dia para o outro a 37°C e as soluções foram centrifugadas de acordo com o Exemplo 1. A atividade ligada às pastilhas era superior a 96% quando medida após 20 minutos. Uma nova medição efetuada duas horas mais tarde não apresentou diferenças significativas nas taxas de contagem indicando que a distribuição de nuclídeos filhos estava bem de acordo com a de Ra. 26The HA Ra particles described in Example 1 were added 500 μl of 0.1 M sodium citrate or bovine serum albumin. The dispersion was incubated overnight at 37øC and the solutions were centrifuged according to Example 1. The activity bound to the pellets was greater than 96% when measured after 20 minutes. A new measurement done two hours later did not show significant differences in counting rates indicating that the distribution of daughter nuclides was well in agreement with that of Ra. 26

Numa outra experiência, ao usar particulas de cerâmica HA, 223Ra (1 MBq) incorporadas em 10 mg de cerâmica HA foi incubada em soro de vitelo fetal durante duas semanas à temperatura ambiente, após o que 93,2% das pastilhas eram ligadas.In another experiment, when using HA ceramic primers, 223Ra (1 MBq) incorporated in 10 mg of HA ceramic was incubated in fetal calf serum for two weeks at room temperature, after which 93.2% of the pellets were bound.

Exemplo 3 ~ 212 212Example 3 ~ 212 212

Preparaçao de partículas HA tituladas Pb e Bi o o oPreparation of HA particles titrated Pb and Bi o o o

Chumbo-212 foi preparado substancialmente rsento de Th e de 224Ra.Lead-212 was prepared substantially at Th and 224Ra.

Com 228Th evaporado até à secura como material de inicio, foi adicionado 0,5 ml 8M HN03 e a solução foi transferida para uma coluna contendo um permutador de aniões previamente equilibrado (AG1-X8). O rádio-224 e os filhos foram extraídos em 3 ml 8M HNO3. De seguida, o extrato de 224Ra foi evaporado até secar, dissolvido em 0,5 ml 1M HC1 e purificado numa coluna DIPEX (Resina-AC, Eichrom Inc, Darien, IL, EUA) , através da elusão de 224Ra em 700 microlitros 1M HC1 para obter um produto isento de tório-228 .With 228Th evaporated to dryness as starting material, 0.5M 8M HNO 3 was added and the solution was transferred to a column containing a previously equilibrated anion exchanger (AG1-X8). Radio-224 and children were extracted in 3 ml 8M HNO3. The 224Ra extract was then evaporated to dryness, dissolved in 0.5 ml 1 M HCl and purified on a DIPEX column (Resin-AC, Eichrom Inc, Darien, IL, USA), by the elution of 224Ra in 700 microliters 1M HCl to obtain a product free of thorium-228.

No dia seguinte (após o desenvolvimento de 212Pb) o eluato 224Ra foi evaporado até ficar seco e de seguida dissolvido em 0,5 ml 1M HNO3 e transferido para uma coluna contendo uma resina específica-Pb (PB-B25-S, Eichrom). O rádio-224 foi eludido com 2 ml 1M HN03 e 2 ml de H20 destilada. O chumbo-212 foi extraído da resina Pb usando 650 microlitros 0,1M de uma solução de oxalato de amónio. 27 A solução final de 212Pb podia ser combinada diretamente com hidroxiapatite e feita reagir da forma descrita para Ra no Exemplo 1.The following day (after 212Pb development) the 224Ra eluate was evaporated to dryness and then dissolved in 0.5 ml 1M HNO 3 and transferred to a column containing a specific Pb resin (PB-B25-S, Eichrom). Radio-224 was eluted with 2 ml 1M HNO 3 and 2 ml distilled H 2 O. Lead-212 was extracted from Pb resin using 650 microliters of 0.1M ammonium oxalate solution. The final 212Pb solution could be combined directly with hydroxyapatite and reacted as described for Ra in Example 1.

Exemplo 4 p i pExample 4 p i p

Teste de estabilidade de partículas HA tituladas Pb e 212Bi . HA marcado com chumbo-212 foi incubado em soro de vitelo fetal de um dia para o outro e de seguida foi centrifugado da forma que se encontra acima descrita. A radioatividade associada às pastilhas e ao sobrenadante foi medida. Foi descoberto que mais de 93% tanto de 212Pb como de 212Bi estavam associados com a pastilha. A fração de atividade ligada às pastilhas aparentava ser levemente mais elevada com as partículas de cerâmica.Stability test of Pb and 212Bi labeled HA particles titrated. HA-labeled HA was incubated in fetal calf serum overnight and then centrifuged as described above. The radioactivity associated with the pellets and the supernatant was measured. It was found that more than 93% of both 212Pb and 212Bi were associated with the tablet. The fraction of activity attached to the pellets appeared to be slightly higher with the ceramic particles.

Exemplo 5Example 5

Biodistibuição de HA titulada com 212Pb. HA titulada com 212Pb (20 μιη, cerâmica) foi preparada da forma acima descrita, lavada e centrifugada três vezes e dissolvida em 0,01 M de citrato de sódio/ácido cítrico numa solução salina isotónica a pH 7,4. A 7 ratos balb C fêmeas com pesos corporais de 21 - 25g foi administrado intraperitonealmente 0,5 ml de uma suspensão contendo 0,4 MBq 212Pb ligado a 1,0 mg de HA. Os animais foram sacrificados ao fim de 1 hora (n=3) e ao fim de 24 horas (n=4) e dissecados. Resultados: os dados de biodistribuição (Tabela 1) mostram que a atividade era quase quantitativamente descoberta na cavidade intraperitoneal e os órgãos e os tecidos dentro desta cavidade indicavam um grau muito reduzido de fugas para fora da cavidade. O padrão de distribuição associado com a 212Bi livre, isto é, 28 28 um uma elevada acumulaçao nos rins, nao foi detetada com grau significativo. 29Biodistibution of titrated HA with 212Pb. HA titrated with 212Pb (20μιη, ceramic) was prepared as described above, washed and centrifuged three times and dissolved in 0.01M sodium citrate / citric acid in isotonic saline solution at pH 7.4. Female balb C mice at body weights of 21-25 g were administered intraperitoneally 0.5 ml of a suspension containing 0.4 MBq 212 Pb bound to 1.0 mg HA. The animals were sacrificed after 1 hour (n = 3) and after 24 hours (n = 4) and dissected. Results: biodistribution data (Table 1) show that the activity was almost quantitatively discovered in the intraperitoneal cavity and the organs and tissues within this cavity indicated a very low degree of leakage out of the cavity. The distribution pattern associated with free 212Bi, i.e., 28æm a high accumulation in the kidneys, was not detected to a significant degree. 29

Tabela 1. Distribuição de tecido 1 hora e 24 horas após a injeção intraperitoneal de 212Pb Marcado com particulas de hidroxiapatite cerâmica : Tecido 1 hora 24 horas Sangue :(0.46 ± 0.40) / 0.39 ± 0.34 |(0.32 ± 0.19) / 0.30 ± 0.24 1 Fígado I (3.04 ± 2.83) / 3.09 ± 2.93 5(2.10 ± 1.56) / 2.06 ± 1.45 i Baço jj (3.03+ 1 .11) / 3 .25 ± 1.21 5(5.47 ± 5.21) / 5.58 ± 5.27 Rim '1(4.05 ± 3.08) / 3.32 ± 2.84 5(4.21 ± 3.29) / 4.12 ± 3.39 ; Intestino delgado :(0.78 ± 0.86) / 0.72 ± 0.80 |(0.62 ± 0.25) / 0.60 ± 0.26 Intestino grosso :; (0.45 ± 0.41) / 0.43 ± 0.38 5(0.52 + 0.39) / 0.52 ± 0.40 Estômago 5(3.20 ± 2.09) / 3.29 ± 2.18 5(5.11 ± 2.79) / 5.10 ± 2.79 : Diafragma 1(6.23 ± 2.39) / 6.25 ± 2.33 5(4.84 ± 1.95) / 4.49 ± 2.47 Coração ((0.10 ± 0.11) / 0.12 ± 0.13 5(0.06 ± 0.06) / 0.04 ± 0.03 Pulmão ij (0.36 ± 0.29) / 0.33 ± 0.27 |(0.18 ± 0.12) / 0.13 ± 0.09 .Músculo 5(1-18 ± 1.89) / 1.32 ± 2.14 |(0.35 ± 0.58) / 0.37 + 0.67 : OSSO 5 (0.44 ± 0.46) / 0.44 ± 0.47 5(0.44 ± 0.20) / 4.49 + 2.47 (Números entre parêntesis: Tecidos medidos aproximadamente 1 hora após sacrificar os ;animais. Números a negrito: tecidos medidos um dia após o sacrifício dos animais, isto é, dando tempo para que os nuclideos filhos estejam em equilíbrio com o nuclídeo mãe ;212Pb. Se o número entre parêntesis for inferior ao número correspondente a negrito indica uma falta no nuclídeo filho 212Bi vs 212Pb no tecido ao momento da morte (o oposto representaria o enriquecimento de 212Bi vs 212Pb ao momento da morte) .Table 1. Tissue distribution 1 hour and 24 hours after intraperitoneal injection of 212Pb Marked with ceramic hydroxyapatite particles: Tissue 1 hour 24 hours Blood: (0.46 ± 0.40) / 0.39 ± 0.34 (0.32 ± 0.19) / 0.30 ± 0.24 1 Liver I (3.04 ± 2.83) / 3.09 ± 2.93 5 (2.10 ± 1.56) / 2.06 ± 1.45 i Spleen (3.03 ± 1.11) / 3.25 ± 1.21 5 (5.47 ± 5.21) / 5.58 ± 5.27 Rim ' 1 (4.05 ± 3.08) / 3.32 ± 2.84 (4.21 ± 3.29) / 4.12 ± 3.39; Small intestine: (0.78 ± 0.86) / 0.72 ± 0.80 (0.62 ± 0.25) / 0.60 ± 0.26 Large intestine:; (0.25 ± 0.41) / 0.43 ± 0.38 5 (0.52 ± 0.39) / 0.52 ± 0.40 Stomach 5 (3.20 ± 2.09) / 3.29 ± 2.18 5 (5.11 ± 2.79) / 5.10 ± 2.79: Diaphragm 1 (6.23 ± 2.39) / 6.25 (0.46 ± 0.29) / 0.33 ± 0.27 (0.18 ± 0.12) / 0.12 ± 0.13 (0.06 ± 0.06) / 0.04 ± 0.03 (± 0.33 ± 0.29) (0.44 ± 0.46) / 0.44 ± 0.47 5 (0.44 ± 0.20) / 4.49 + 2.47 (0.35 ± 0.58) / 0.37 + 0.67 (Numbers in parentheses: Tissues measured approximately 1 hour after sacrificing the animals.) Numbers in bold: tissues measured one day after the sacrifice of the animals, that is, giving time for the nuchlidus to be in equilibrium with the mother nuclide; If the number in parentheses is less than the number corresponding to bold indicates a missing son nuclide 212Bi vs. 212Pb in tissue at time of death (the opposite would represent the enrichment of 212Bi vs 212Pb at mome of death).

Lisboa, 24 de Abril de 2012Lisbon, April 24, 2012

Claims

The use of hydroxyapatite (HA) and a radionuclide selected from the group 211At, 212Bi, 223Ra, 224Ra, 225Ac, Th or a beta-emitting radionuclide chosen from the group 212Pb, 211Pb, 213Bi or 225Ra in the manufacture of a medicament for use in the treatment of an oncological disease.

The use as claimed in claim 1, wherein said medicament is an injectable, infused or locally applicable medicament.

The use as claimed in claim 2, wherein said treatment comprises intratumoral therapy.

The use as claimed in claim 2, wherein said treatment comprises administering to the bloodstream of a cancerous organ.

A hydroxyapatite incorporating an alpha-emitting radionucleotide selected from the group 211At, 212Bi, 223Ra, 224Ra, 225Ac, 227Th or a beta-emitting radionuclide chosen from the group 212Pb, 211Pb, 213Bi or 225Ra to be used as a therapy against cancer.

A hydroxyapatite for use as claimed in claim 5, wherein the cation is selected from the group consisting of calcium, strontium, barium, bismuth, yttrium, lanthanum, lead or mixtures thereof.

A hydroxyapatite for use as claimed in claims 5 or 6, wherein the HA is in particles and has a size in the range of 1 nm to 100 μιη. 2

A hydroxyapatite for use as claimed in claim 7, wherein the HA has a size of between 1 μιη and 20 μιη.

A hydroxyapatite for use as claimed in any one of claims 5 to 8, wherein the HA is combined or co-sedimented with a substance selected from polylactide, polyethylene ketones, glass ceramics, titania, aluminum oxide, oxide zirconium, silica, polyethylene, polyethylene glycol, polyhydroxybutyrate, gelatin, collagen, chitosan, phosphazene, or mixtures thereof.

A pharmaceutical composition comprising a hydroxyapatite as defined in any one of claims 5 to 9 and a physiologically acceptable carrier for use in cancer therapy.

A hydroxyapatite or a composition for use as claimed in any one of claims 5 to 10, for the treatment of a primary or metastatic intracavitary tumor.

A hydroxyapatite or a composition for use as claimed in any one of claims 5 to 10 for use in intratumoral therapy.

A hydroxyapatite or a composition for use as claimed in any one of claims 5 to 10 for use in cancer treatment and / or sterilization of the tumor base and optionally in the well in the case of a tumor wherein said administration is effected following surgical removal of at least a portion of a tumor. Lisbon, April 12, 2012