PL64127B1 - - Google Patents

Description

Pierwszenstwo: Opublikowano: 15X11.1971 64127 KI. 30 h, 14 MKP C 12 k, 3/00 UKD Wspóltwórcy wynalazku: Olgierd Lubinski, Antoni Górski, Józef Dudek, Halina Herman, Janina Terlecka Wlasciciel patentu: Instytut Antybiotyków, Warszawa (Polska) Sposób wytwarzania nowych pozywek do hodowli drobno* ustrojów Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych pozywek do hodowli drobnoustrojów za¬ równo w celu namnazania masy komórkowej droz¬ dzy jak i do otrzymywania substancji czynnych biologicznie.Znane jest stosowanie w hodbwli drobnoustrojów substancji wzrostowych do wytwarzania masy ko¬ mórkowej i/lub produktów metabolizmu drobno¬ ustrojów. Substancje wzrostowe dodawane w wiek¬ szych ilosciach sa jednoczesnie zródlem wegla i azotu. W procesach tych jako substancje wzro¬ stowe stosuje sie drozdze glównie rodzaju Torula lub Saccharomyces lub ich hydrolizaty. Drozdze te otrzymuje sie w wyniku fermentacji na pozyw¬ kach zawierajacych jako zródlo wegla weglowo¬ dany w róznej postaci jak na przyklad cukry za¬ warte w melasie, hydrolizaty celulozy, lugi posul¬ fitowe. Tego rodzaju pozywki zawieraja tylko nie¬ wielkie ilosci witamin grupy B i nie najkorzyst¬ niejszy sklad ilosciowy i jakosciowy aminokwasów.Sposobem wedlug wynalazku, jako substancje wzrostowe i/Lub jako zródla wegla i azotu stosuje sie drozdze uzyskiwane jako produkt uboczny przez mi¬ krobiologicznym odparafinowaniu frakcji n-parafi- nowych ropy naftowej metoda przytoczona w opi¬ sie patentowym nr 59579 oraz hydrolizaty i/lub autolizaty tych drozdzy. Sa to drozdze glównie rodzaju Candida.Sposób wedlug wynalazku polega na tym, ze do pozywek posiewowych i/lub produkcyjnych de¬ lt 15 daje sie drozdze uzyskane jako produkt uboczny przy mikrobiologicznym odparafinowaniu frakcji ropy naftowej.Drozdze stosuje sie w postaci komórkowej i/lub ich hydrolizatów i/lub ich autolizatów. Drozdze i/lub ich hydrolizaty i/lub ich autolizaty dodaje sie w ilosciach sladowych jako substancje wzrostowe.Drozdze i/lub ich hydrolizaty i/lub ich autolizaty dodaje sie do pozywek w ilosciach do 5°/o jako zródlo azotu i wegla.W procesach, w których drozdze i/lub hydrolizat i autolizat stanowia zródla wegla i azotu otrzymuje sie pozywki rozpuszczalne bardzo przy¬ datne na przyklad do badan nad szczepami wy¬ twarzajacymi substancje biologicznie czynne i nad biogeneza tych substancji.Wyniki analizy ilosciowej masy komórkowej drozdzy uzyskiwanych jako produkt uboczny w pro¬ cesie mikrobiologicznego odparafinowania frakcji ropy naftowej wedlug patentu nr 59579 przedsta¬ wiaja sie nastepujaco: Azot Bialko Substancje tluszczowe Weglowodany Popiól Wilgoc 7,88°/o 49,25% 7,15% 36,45% 2,70% 2,86% Witaminy Bi B2 B6 B12 i PP 6412764127 Sklad ilosciowy aminokwasów bialka drozdzy Torula utilis hodowanych na pozywkach weglo¬ wodanowych i drozdzy Candida lipolytica hodo¬ wanych na pozywce weglowodorowej: Tryptofan Metionina Kwas asparagi¬ nowy Kwas glutami¬ nowy Histydyna Arginina Lizyna Seryna Glicyna Treonina Tyrozyna Alanina Walina Fenyloalanina Leucyna + izo- leucyna Candida lipolytica g/100 g bial¬ ka *) . 1,77 1,06 7,80 8,25 5,85 4,48 7,62 3,68 2,64 3,95 3,84 5,55 3,02 3,26 7,44 g/100 g su¬ chych droz¬ dzy **) 0,84 0,50 3,70 3,92 2,78 2,27 3,62 1,75 1,25 1,88 1,82 2,64 1,43 1,55 3,53 Torula g/100 g bial¬ ka**) 1,6 0,8 — — 1,70 4,10 6,80 — — 5,40 — — 6,0 3,9 13,10 i utilis g/100 g su¬ chych droz¬ dzy***) 0,8 0,57 1,20 4,20 0,39 1,15 1,19 — | — 1 1,92 1,25 5,78 3,50 1,72 — *) Preparat wlasny **) Champagnat Revue de 1'Institut Francais du Pstrole 1962, XVII 11, Str. 1372.*?*) Die Hefen 1060, t. 1, str. 389 Verlag Hans Carl, Nurn- berg.Autolizaty i hydrolizaty wykonywano z drozdzy Candida lipolytica o podanym wyzej skladzie su¬ marycznym i aminokwasowym.Sklad sumaryczny autolizatów i hydrolizatów: Bialko surowe Weglowodany Substancje tluszczowe niezmydlajace Substancje tluszczowe zmydlajace Fosfor | Popiól Wysuszony przesacz po autolizie 52,87% 11,2% 11,33% 4,0% 2,83% 9,82% Autolizat zawierajacy sciany komórkowe 27,10% 32,06% 26,38% 8,56% 0,41% 1,73% 10 15 20 25 30 35 40 45 Pozywki przygotowane sposobem wedlug wyna¬ lazku maja korzystniejszy sklad ilosciowy i jako¬ sciowy aminokwasów oraz zawieraja zwiazki sty¬ mulujace wzrost drobnoustrojów, co powoduje 50 55 60 65 szybszy wzrost drobnoustrojów, a tym samym wieksza wydajnosc procesów biosyntezy. Sposobem wedlug wynalazku przygotowuje sie pozywki za¬ równo posiewowe jak i produkcyjne w procesach biosyntezy wymagajacych stosowania czynników wzrostowych na przyklad w biosyntezie antybio¬ tyków.Ponizsze przyklady ilustruja lecz nie ograniczaja istoty wynalazku.Przyklad I. Zastosowanie czynnika wzrostowego przy cesie mikrobiologicznego ( ropy naftowej.Przygotowano 2 porcje o nastepujacym skladzie: mocznik K2HP04 MgS04. 7H20 ZnS04. 7H20 FeS04. 7H20 MnS04.5H20 olej parafinowy *) woda wodociagowa autolizatu jako hodowli drozdzy w pro- dparafinowania frakcji pozywki produkcyjnej do 1,5 g/l 1,0 „ 0,7 „ 0,15 „ 0,07 „ 0,05 „ 150,0 „ 1,0 1 *) zawartosc n-parafin 10%, temperatura krzep¬ niecia + 14°C. Do I porcji pozywki dodano 0,1 g/l autolizatu drozdzy Candida lipolytica. Do II por¬ cji pozywki nie dodano zadnego czynnika wzro¬ stowego. Pozywki zaszczepiono brzeczka z 24-go- dzinnej hodowli posiewowej szczepu Candida lipo¬ lytica. Fermentacje prowadzono w fermentorach kolumnowych wedlug patentu nr 59579 w tempe¬ raturze 30°C w warunkach tlenowych podajac 1,2 objetosci powietrza/objetosc pozywki/minute.Po 36 godzinach fermentacji uzyskano nastepu¬ jace wyniki: Zawartosc suchej masy drozdzy w brzeczce pofermentacyjnej temperatura krzepnie¬ cia odparafinowanej frakcji Pozywka I 1,4% —36°C Pozywka II 0,84% —3°C Przyklad II. Zastosowanie hydrolizatu droz¬ dzy Candida lipolytica do wytwarzania wiomycyny przy uzyciu szczepu Streptomyces vinaceus. W po¬ zywce konwencjonalnej znajdowaly sie dwa sklad¬ niki dajace nierozpuszczalna w brzeczce zawiesine to jest wyciag namokowy kukurydzy oraz maka sojowa. Z wyciagu namokowego kukurydzy usu¬ nieto zwiazki dajace zawiesine, znana metoda ko¬ agulacji termicznej w odczynie alkalicznym, a ma¬ ke sojowa zastapiono hydrolizatem drozdzy Can¬ dida lipolytica. Na rozpuszczalnej pozywce o na¬ stepujacym skladzie: hydrolizat drozdzy 40,0 g/l NaN03 10,0 „ (NH4)2S04 5,0 „ CaC03 5,0 „64127 wyciag namokowy kukurydzy (rozpuszczalny) 5,0 g/l olej sojowy 15,0 „ woda wodociagowa do 1,0 1 uzyskano brzeczke pofermentacyjna zawierajaca 2388 j/ml wiomycyny. PL PL

Claims (4)

1. Zastrzezenia patentowe 10 1. Sposób wytwarzania nowych pozywek do ho¬ dowli drobnoustrojów, znamienny tym, ze do po¬ zywek posiewowych i/lub produkcyjnych dodaje sie drozdze uzyskane jako produkt uboczny przy 15 mikrobiologicznym odparafinowaniu frakcji ropy naftowej.

2. Sposób wedlug zastrz. 1 znamienny tym, ze drozdze stosuje sie w postaci komórkowej i/lub ich hydrolizatów i/lub ich autolizatów.

3. Sposób wedlug zastrz. 1 i 2, znamienny tym, ze drozdze i/lub ich hydrolizaty i/lub ich autolizaty dodaje sie w ilosciach sladowych jako substancje wzrostowe.

4. Sposób wedlug zastrz. 1 i 2, znamienny tym, ze drozdze i/lub ich hydrolizaty i/lub ich autolizaty dodaje sie do pozywek w ilosciach do 5% jako zródlo azotu i wegla. PL PL