PL46129B1 - - Google Patents

Description

|B!R' ' .... lUII'^ •4 POLSKIEJ RZECZYPOSPOLITEJ LUDOWEJ OPIS PATENTOWY Nr 46129 KI. 6 b, 16/03 Czeslair Boldok Warszawa, Polska Jaduriga Jankoirska Warszawa, Polska WaclaLU Kumanomski Warszawa, Polska Zdzislaiu Synoiuiedzki Warszawa, Polska Sposób otrzymywania antybiotyków i innych produktów fermentacji Patent trwa od dnia 8 kwietnia 1961 r.Wynalazek dotyczy sposobu otrzymywania tetracyklin, streptomycyny, penicyliny benzylo¬ wej, erytromycyny, poUmiksyny, cyfcloseiryny i kwasu giberylinowego z hodowli odpowiednich diobnoustrojów, /prowadzonych na podlozach plynnych w warunkach fermentacji tlenowej.Sposób wedlug wynalazku umozliwia bez spe¬ cjalnego zwiekszenia normalnych kosztów pro¬ dukcyjnych znaczne podwyzszenie wydajnosci, otrzymywanych za pomoca fermentacji wspom¬ nianych na wstepie produktów fermentacji.Okazalo sie, ze cel ten mozna latwo uzyskac jesli do plynu hodowlanego w czasie trwania fermentacji doda sie adsorbenta lub wymienia¬ cza jonowego, adsorbujacego wzglednie wiaza¬ cego produkty wytwarzane i wydzielane w pro¬ cesie fermentacji.Mozna domniemywac, ze dodawani* adsor¬ benta wzglednie wymieniacza jonowego do ho¬ dowli drobnoustrojów przedluza czas ich wege¬ tacji i produktywnosci. Czesto bawienij wyste¬ pujace zjawiska przedwczesnego . zakonczenia wytwarzania antybiotyków i innych produktów przez odpowiednie drobnoustroje tlumaczy sie wrazliwoscia tych drobnoustrojów na pewn*»stezenie substancji, wytwarzanych przez nie sa¬ me a rozpuszczone w plynach hodowlanych.Znane jest wprawdzie dodawanie adsorben¬ tów i wymieniaczy jonowych do brzeczek fer¬ mentacyjnych, lecz dopiero po zakonczeniu pro¬ cesu fermentacji i ewentualnie po oddzieleniu drobnoustroju, w celu wydzielenia antybiotyku. sposób wedlug wynalazku polega na tym, ze do nodowli odpowiednich drobnoustrojów, wy¬ twarzajacych znanymi sposobami tetracykliny, streptomycyne, penicyline benzylowa, erytromy¬ cyne, polimiksyne, cykloseryne i kwas gibery- iinowy — dodaje sie miedzy 10 a 70 godzina trwania fermentacji adsorbenta zwlaszcza weg¬ la aktywnego w ilosci 0,5—1 g nia 100 ml ply¬ nu hodowlanego lub wymieniacza jonowego jak Amberlit, ROA, Wofatyt itp. w ilosci 0,1—2 g na 100 ml plynu hodowlanego.Na podstawie przeprowadzonych wedlug wy¬ nalazku hodowli doswiadczalnych szczepj Strep- tomyces Aureofeciens nr 193, na podlozach plyn¬ nych z dodatkiem wegla aktywnego, jako ad¬ sorbenta chiorotetracykliny i innych metaboli¬ tów, stwierdzono wytworzenie sie okolo 4500 mg chiorotetracykliny w 1 litrze plynu ^ hodowlane¬ go. Jest to laczna ilosc antybiotyku zawarta w zakwaszonej do pH = 2,0 odwirowanej brzeczce oraz w pozostalym osadzie, skladaja¬ cym sie miedzy innymi z mycelium i wegla aktywnego, Z analogicznej serii doswiadczen porównaw¬ czych, prowadzonych bez dodawania wegla ja¬ ko adsorbenta, stwierdzono zawartosc okolo 4000 mg w 1 litrze plynu, Sposób wedlug wynalazku w odniesieniu do pozostalych antybiotyków wymienionych na wstepie powoduje podobne zwiekszenie ich wy¬ dajnosci , , | | Przyklad. 9 litrów pozywki, zawierajacej: 2% krochmalu, 0,5% wodnego namoku kukury¬ dzy, 0,2% melasu, 3,0% sacharozy, 0,3% siarcza¬ nu amonu, 0,4% chlorku sodowego, 2,0% maki arachidowej, 0,4% drozdzy piwnych, 0,6% we¬ glanu wapnia o ustalonej wartosci pH okolo 7,0 — rozlano do 90 kolb okraglych, plaskoden¬ nych, zakorkowanych korkami z waty i stery¬ lizowano w aparacie Kocha trzykrotnie dzien po dniu w ciagu godziny w temperaturze 100°C.Wyjalowiona pozywke szczepiono 1% obj. za¬ wiesiny, zawierajacej w 1 ml jeden miliard za¬ rodników szczepu Streptomyces aureofaciens nr 193. Uzyte zarodniki byly uprzednio prezerwo- wane w postaci zliofilizowanej konserwy ziem¬ nej, a nastepnie hodowane na podlozu z otrab ziarna zbozowego w temperaturze 28'C w ciagu 10 dni, po czym utrwalona w chlodni przez okres 6 tygodni w temperaturze okolo 7°C.Hodowle prowadzono w ciagu 30—36 godzin w temperaturze 28°C na wstrzasarce wahadlo¬ wej o 160 wstrzasach na minute. Z otrzymanego inaculum (I stadium wegetatywne) -pobrano 5 litrów, które przeniesiono do fermentora o po¬ jemnosci 150 1, zawierajacego 100 litrów wy- sterylizowaraej uprzednio w 120°C w ciajai 40 minut i schlodzonej do 28°C pozywki. Pozywka zawierala: 2% krochmalu, 0,4% wodnego namo¬ ku kukurydzy, 50%-wego), 0,2% melasy, 3,0% sachorozy, 0,3% siarczanu amonu, 0,4% chlorku sodowego, 2,0% maki arachidowej, 0,4% wegla¬ nu wapnia, pH pozywki przed sterylizacja wy¬ nosilo 6,5. -^ • Do hodowli ^&I stadium produkcyjne) doda¬ wane w pierwszych 10 godzinach wodnego roz¬ tworu rodanku 'benzylu w ilosci 1 y na 1 ml plynu hodowlanego, zas w 36 godzinie fermen¬ tacji wyjalowionego wegla aktywnego w ilosci 0,5—^1 g na 100 ml plynu hodowlanego w celu zaadsorbowania czesci wytworzonego i rozpu¬ szczonego antybiotyku, Fermentacje (w II stadium produkcyjnym) prowadzono w ciagu 72 godzin w temperaturze 28°C, napowietrzajac hodowle w ilosci 0,8 obje- ¦TF tosci powietrza na 1 objetosc pozywki w ciagu i minuty.Aktywnosc odsaczonego plynu hodowlanego wynosila 2100 jednostek chiorotetracykliny w 1 ml, ponadto w eluatach otrzymanych z wegla aktywnego i grzybni, odsaczonych z plynu ho¬ dowlanego, stwierdzono 2400 jednostek w 1 mi.Laczna aktywnosc wynosila 4500 jednostek chio¬ rotetracykliny w 1 ml plynu hodowlanego. Jak podano na wstepie w hodowlach porównawczych prowadzonych w analogicznych warunkach bez dodawania wegla aktywnego lub wymieniacza jonowego aktywnosc wynosila 3000 jednostek chiorotetracykliny w 1 ml plynu hodowlanego. PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe Sposób otrzymywania antybiotyków i innych produktów, zwlaszcza tetracyklin, streptomycy¬ ny, penicyliny, erytromycyny, polimiksyny, cy- kloseryny, kwasu ^iberylinowego, z hodowli odpowiednich drobnoustrojów, prowadzonych na podlozach plynnych w warunkach fermentacji - 2 -tlenowej, znamienny tym, ze do plynu hodowla¬ nego odpowiedniego drobnoustroju dodaje sie miedzy 10—70 godzina trwania procesu fer¬ mentacyjnego i powstawania antybiotyków oraz innych produktów, adsorbenta zwlaszcza w^gla aktywnego w ilosci 0,5-^1,0% lub wymieniacza jonowego zwlaszcza Amberlitu ROA, Wofatytu w ilosci 0,1—2,0% w stosunku do plynu hodo¬ wlanego w celu adsorbowania wytwarzanych produktów, przy czym dodany adsorbent wzglednie wymieniacz jonowy, pozostaje w zet¬ knieciu z plynem hodowlanym do konca proce¬ su fermentacji. Czeslaw Bol dok Jadwiga Jankowska Waclaw Kumanowski Zdzislaw Synowiedzki Zastepca: mgr inz- Antoni Sentek rzecznik patentowy 1545. RSW „Prasa", Kielce PL