PL244489B1 - Biosensor for the quantification of PARP-1 in human body fluids - Google Patents
Biosensor for the quantification of PARP-1 in human body fluids Download PDFInfo
- Publication number
- PL244489B1 PL244489B1 PL441141A PL44114122A PL244489B1 PL 244489 B1 PL244489 B1 PL 244489B1 PL 441141 A PL441141 A PL 441141A PL 44114122 A PL44114122 A PL 44114122A PL 244489 B1 PL244489 B1 PL 244489B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- parp
- biosensor
- layer
- determination
- doi
- Prior art date
Links
- 108010064218 Poly (ADP-Ribose) Polymerase-1 Proteins 0.000 title description 7
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 title description 6
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 title description 6
- 102100023712 Poly [ADP-ribose] polymerase 1 Human genes 0.000 title description 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 title 1
- 238000001847 surface plasmon resonance imaging Methods 0.000 claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 17
- 108010061844 Poly(ADP-ribose) Polymerases Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 102000012338 Poly(ADP-ribose) Polymerases Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000005192 partition Methods 0.000 claims abstract description 10
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 7
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 claims abstract description 6
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 239000010936 titanium Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229920000776 Poly(Adenosine diphosphate-ribose) polymerase Polymers 0.000 abstract description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 21
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 7
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 7
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- -1 poly(ADP-ribose) Polymers 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 102000015087 Poly (ADP-Ribose) Polymerase-1 Human genes 0.000 description 3
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-O NAD(+) Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-O 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000005730 ADP ribosylation Effects 0.000 description 1
- SRNWOUGRCWSEMX-KEOHHSTQSA-N ADP-beta-D-ribose Chemical group C([C@H]1O[C@H]([C@@H]([C@@H]1O)O)N1C=2N=CN=C(C=2N=C1)N)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SRNWOUGRCWSEMX-KEOHHSTQSA-N 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000004266 Collagen Type IV Human genes 0.000 description 1
- 108010042086 Collagen Type IV Proteins 0.000 description 1
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 1
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 102000000380 Matrix Metalloproteinase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010016113 Matrix Metalloproteinase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000000424 Matrix Metalloproteinase 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010016165 Matrix Metalloproteinase 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000003445 Mouth Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000008880 Peptidase C12, ubiquitin carboxyl-terminal hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108050000823 Peptidase C12, ubiquitin carboxyl-terminal hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102100023652 Poly [ADP-ribose] polymerase 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710144590 Poly [ADP-ribose] polymerase 2 Proteins 0.000 description 1
- 108091026813 Poly(ADPribose) Proteins 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 231100000024 genotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001738 genotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 208000023589 ischemic disease Diseases 0.000 description 1
- 108010028309 kalinin Proteins 0.000 description 1
- 208000012987 lip and oral cavity carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012113 quantitative test Methods 0.000 description 1
- 238000003380 quartz crystal microbalance Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000008458 response to injury Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 239000000439 tumor marker Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
Abstract
Zgłoszenie dotyczy biosensora do oznaczania białka polimerazy poli(ADP-rybozy) (PARP-1) techniką Powierzchniowego Rezonansu Plazmonów w wersji Obrazowej (SPRi), który stanowi płytka szklana, korzystnie ze szkła typu BK7, z nałożoną na nią warstwą tytanu o grubości 1±0,2 nm, na którą nałożona jest warstwa złota o grubości 50±2 nm, na którą to warstwę nałożona jest siatka polimerowa dzieląca sensor na partycje, następnie nałożona jest warstwa linkera w postaci funkcjonalizowanego tiolu, korzystnie cysteaminy, do którego przyłączone jest tworząc warstwę receptora mysie monoklonalne przeciwciało specyficzne względem PARP-1.The application concerns a biosensor for the determination of the poly(ADP-ribose) polymerase (PARP-1) protein using the Surface Plasmon Resonance Imaging (SPRi) technique, which is a glass plate, preferably made of BK7 glass, with a 1± thick layer of titanium applied to it. 0.2 nm, on which a layer of gold with a thickness of 50±2 nm is applied, on which a polymer mesh is placed, dividing the sensor into partitions, then a linker layer is applied in the form of a functionalized thiol, preferably cysteamine, to which it is attached to form a layer receptor mouse monoclonal antibody specific for PARP-1.
Description
Opis wynalazkuDescription of the invention
DZIEDZINA TECHNIKITECHNICAL FIELD
Przedmiotem wynalazku jest biosensor służący do specyficznego i selektywnego oznaczania ilościowego PARP-1 w płynach ustrojowych z wykorzystaniem techniki Powierzchniowego Rezonansu Plazmonów w wersji Imaging, jako sposobu detekcji.The subject of the invention is a biosensor for specific and selective quantitative determination of PARP-1 in body fluids using the Surface Plasmon Resonance Imaging technique as a detection method.
STAN TECHNIKISTATE OF TECHNOLOGY
PARP to rodzina enzymów zdolnych do dołączania rozgałęzionych łańcuchów ADP-rybozy do białek. Polimeraza poli(ADP-rybozy) (ang. poly ADP-ribose polymerase, PARP) stanowi cel nowoczesnych terapii oraz metod oznaczeń diagnostycznych. PARP należy do grupy enzymów zależnych od NAD+, które biorą udział przede wszystkim w naprawie uszkodzonego DNA. NAD+ jako ważny metabolit, wykorzystywany jest przez enzymy z rodziny PARP, m.in. PARP-1 oraz PARP-2 do reakcji ADPrybozylacji (Canto C., et al., Mol. Aspects. Med., 2013: 34(6), 1168-1201). PARP-1 stanowi jeden z elementów ilościowych oznaczeń w przypadku diagnostyki nowotworów takich jak: nowotwór jajnika, piersi oraz jamy ustnej. Swój udział ma także przy chorobach niedokrwiennych, cukrzycy i chorobach neurodegeneracyjnych (Dal Piaz F., et al., Biochim. Biophys. Acta., 2015: 1850(9), 1806-1814).PARP is a family of enzymes capable of adding branched ADP-ribose chains to proteins. Poly(ADP-ribose) polymerase (poly ADP-ribose polymerase, PARP) is the target of modern therapies and diagnostic testing methods. PARP belongs to a group of NAD+-dependent enzymes that are primarily involved in the repair of damaged DNA. NAD+, as an important metabolite, is used by enzymes from the PARP family, including: PARP-1 and PARP-2 for the ADPribosylation reaction (Canto C., et al., Mol. Aspects. Med., 2013: 34(6), 1168-1201). PARP-1 is one of the elements of quantitative tests for the diagnosis of cancers such as ovarian, breast and oral cancer. It also plays a role in ischemic diseases, diabetes and neurodegenerative diseases (Dal Piaz F., et al., Biochim. Biophys. Acta., 2015: 1850(9), 1806-1814).
Białko PARP-1 obecne jest głównie w jądrze komórkowym, niewielkie jego ilości znajdują się także w cytoplazmie. PARP-1 bierze udział w procesach metabolicznych komórek, reguluje transkrypcję, kontroluje szlaki sygnałowe w komórkach. Odpowiedzialny jest również za ich apoptozę. Do najważniejszych zadań enzymu PARP-1 należy jednak rozpoznanie uszkodzeń DNA i ich naprawa. Może ona odbywać się na dwa różne sposoby. Pierwszy z nich to wycinanie odpowiednich zasad, drugi natomiast zakłada naprawy w obrębie pęknięć pojedynczej nici DNA (Papeo G., et al., J. Biomol. Screen., 2014: 19(8), 1212-1219). Gdy na skutek stresu genotoksycznego, bądź oksydacyjnego dochodzi do uszkodzeń materiału genetycznego, wzrasta aktywność PARP-1. Zwiększa się ilość polimerów poli(ADP-rybozy) w jądrze komórkowym, które w następstwie zaczynają przedostawać się również do cytoplazmy. W następstwie zostaje uruchomiony odpowiedni szlak sygnałowy, który indukuje odpowiedź na uszkodzenie materiału genetycznego i jego naprawę (Wiśnik E., et al., Post. Hig. Med. Dośw., 2016: 70, 280-294).PARP-1 protein is present mainly in the cell nucleus, small amounts are also found in the cytoplasm. PARP-1 is involved in cell metabolic processes, regulates transcription, and controls signaling pathways in cells. It is also responsible for their apoptosis. However, the most important tasks of the PARP-1 enzyme include recognizing DNA damage and repairing it. It can be done in two different ways. The first one involves cutting out appropriate bases, while the second involves repairing single-strand DNA breaks (Papeo G., et al., J. Biomol. Screen., 2014: 19(8), 1212-1219). When genetic material is damaged as a result of genotoxic or oxidative stress, PARP-1 activity increases. The amount of poly(ADP-ribose) polymers in the cell nucleus increases, which then begin to enter the cytoplasm. As a result, an appropriate signaling pathway is activated, which induces a response to damage to the genetic material and its repair (Wiśnik E., et al., Post. Hig. Med. Dośw., 2016: 70, 280-294).
Dotychczas do oznaczeń ilościowych PARP-1 wykorzystano metody takie jak: QCM (Yang H., et al., Anal. Chem., 2019: 91(17), 11038-11044), fluorescencję z chemiluminescencją - „dual mode” (Xu E., et al., Sensor. Actuat. B-Chem., 2020). Wykorzystując SPR badano inhibitory PARP-1 pochodzenia roślinnego (Dal Piaz F., et al., Biochim. Biophys. Acta., 2015: 1850(9), 1806-1814), za pomocą SDSPAGE-MS badano obecność białek z rodziny PARP w plemnikach (Jha R., et al., Fertil. Steril., 2009: 91(3), 782-790), metoda WB posłużyła do identyfikacji białek PARP w próbkach ejakulatu (Jha R., et al., Fertil. Steril., 2009: 91(3), 782-790), natomiast metoda ELISA służyła do badań rodzaju inhibicji PARP-1 (Moonen H. et al., Biochem. Bioph. Res. Co., 2005: 338(4), 1805-1810).So far, methods used for quantitative determination of PARP-1 include: QCM (Yang H., et al., Anal. Chem., 2019: 91(17), 11038-11044), fluorescence with chemiluminescence - "dual mode" (Xu E ., et al., Sensor. Actuat. B-Chem., 2020). PARP-1 inhibitors of plant origin were tested using SPR (Dal Piaz F., et al., Biochim. Biophys. Acta., 2015: 1850(9), 1806-1814), the presence of PARP family proteins in sperm (Jha R., et al., Fertil. Steril., 2009: 91(3), 782-790), the WB method was used to identify PARP proteins in ejaculate samples (Jha R., et al., Fertil. Steril. , 2009: 91(3), 782-790), while the ELISA method was used to test the type of PARP-1 inhibition (Moonen H. et al., Biochem. Bioph. Res. Co., 2005: 338(4), 1805- 1810).
Technika rezonansu powierzchniowego plazmonów tj. SPRi (ang. Surface Plasmon Resonance Imaging) jest niezwykle skutecznym narzędziem do oznaczania biologicznie aktywnych związków, została przedstawiona m.in. w pracach: Lee H.J., et al., J. Physiol., 2005: 563, 61-71; Tokarzewicz et al., Anal. Methods, 2017: 9, 2407-2414., Sankiewicz et al., J. Pharmac. Biomed. Anal., 2018: 150, 1-8.The surface plasmon resonance technique, i.e. SPRi (Surface Plasmon Resonance Imaging), is an extremely effective tool for the determination of biologically active compounds. It was presented, among others, in the works: Lee H.J., et al., J. Physiol., 2005: 563, 61-71; Tokarzewicz et al., Anal. Methods, 2017: 9, 2407-2414., Sankiewicz et al., J. Pharmac. Biomed. Anal., 2018: 150, 1-8.
W stanie techniki znane są biosensory SPRi umożliwiające oznaczanie stężeń substancji bioaktywnych. Takie biosensory ujawniają przykładowe opisy JP2009133844A, US6239255, PL223400B1, PL210052B1, PL222548B1, czy też PL439848A1.SPRi biosensors are known in the state of the art and enable the determination of concentrations of bioactive substances. Such biosensors are disclosed in exemplary descriptions JP2009133844A, US6239255, PL223400B1, PL210052B1, PL222548B1, or PL439848A1.
Nie skonstruowano dotąd biosensora, który umożliwiałby prowadzenie ilościowych oznaczeń PARP-1 w ludzkim materiale biologicznym i cechował się przy tym wysoką specyficznością oraz czułością, a także odpowiednio dużą przepustowością, która umożliwiłaby zbadanie w krótkim czasie jak największej ilości prób.So far, no biosensor has been constructed that would enable quantitative determination of PARP-1 in human biological material and would be characterized by high specificity and sensitivity, as well as a sufficiently high throughput that would enable testing as many samples as possible in a short time.
UJAWNIENIE WYNALAZKUDISCLOSURE OF THE INVENTION
W świetle opisanego stanu techniki celem niniejszego wynalazku jest zatem dostarczenie narzędzia umożliwiającego z wysoką specyficznością oraz czułością i odpowiednio dużą przepustowością badanie w krótkim czasie jak największej ilości prób dla ilościowych oznaczeń PARP-1, w ludzkich płynach ustrojowych, w postaci biosensora dla PARP-1 do prowadzenia czułej i specyficznej metody jego oznaczania z wykorzystaniem oznaczania za pomocą SPRi.In the light of the described state of the art, the aim of the present invention is therefore to provide a tool enabling, with high specificity and sensitivity and a sufficiently high throughput, to test in a short time as many samples as possible for the quantitative determination of PARP-1 in human body fluids, in the form of a biosensor for PARP-1 for conducting a sensitive and specific method of its determination using SPRi determination.
Cel ten został osiągnięty poprzez dostarczenie immuno-biosensora specyficznego dla enzymu PARP-1, który specyficzne ilościowo wykrywa obecność PARP-1 w ludzkim materiale biologicznym i współpracuje z Powierzchniowym Rezonansem Plazmonów w wersji obrazowej (SPRi) stanowiącym dla niego sposób detekcji.This goal was achieved by providing an immuno-biosensor specific for the PARP-1 enzyme, which quantitatively specifically detects the presence of PARP-1 in human biological material and cooperates with Surface Plasmon Resonance Imaging (SPRi) as its detection method.
Wynalazek dotyczy biosensora do oznaczania białka polimerazy poli(ADP-rybozy) (PARP-1) techniką Powierzchniowego Rezonansu Plazmonów w wersji Obrazowej (SPRi), który stanowi płytka szklana z nałożoną na nią warstwą tytanu o grubości 1±0,2 nm, na którą nałożona jest warstwa złota o grubości 50±2 nm, na którą to warstwę nałożona jest siatka polimerowa dzieląca sensor na partycje, następnie nałożona jest warstwa linkera w postaci funkcjonalizowanego tiolu, korzystnie cysteaminy, do którego następnie przyłączone jest mysie monoklonalne przeciwciało specyficzne względem PARP-1 tworząc warstwę receptora. W korzystnym biosensorze do oznaczania białka PARP-1 płytka szklana (1) wykonana jest ze szkła - typu BK7.The invention concerns a biosensor for the determination of the poly(ADP-ribose) polymerase protein (PARP-1) using the Surface Plasmon Resonance Imaging (SPRi) technique, which consists of a glass plate with a 1±0.2 nm thick layer of titanium applied to it, on which a layer of gold with a thickness of 50±2 nm is applied, on which a polymer mesh is placed, dividing the sensor into partitions, then a linker layer is applied in the form of a functionalized thiol, preferably cysteamine, to which a mouse monoclonal antibody specific for PARP-1 is then attached forming a receptor layer. In a preferred biosensor for the determination of PARP-1 protein, the glass plate (1) is made of glass - type BK7.
Wynalazek dotyczy zatem nowego biosensora SPRi do ilościowych oznaczeń PARP-1 w ludzkich płynach ustrojowych.The invention therefore relates to a new SPRi biosensor for quantitative determination of PARP-1 in human body fluids.
Biosensor wychwytuje wyłącznie oznaczaną substancję z roztworu, a aparatura SPRi reaguje na przyrost masy na powierzchni biosensora i przekształca go w sygnał analityczny. Rozwiązanie tak ie charakteryzuje prostota zarówno wykonania biosensora, jak i przeprowadzenia procesu pomiarowego. Dlatego rozwiązanie to może konkurować z obecnie stosowanymi metodami ilościowych oznaczeń substancji biologicznie aktywnych. Dotychczas jednak nie opracowano biosensora SPRi na oznaczanie PARP-1. Biosensor według wynalazku przeznaczony jest do specyficznego i ilościowego oznaczania PARP-1 w ludzkim materiale biologicznym takim jak osocze, surowica krwi, lub homogenatach tkankowych i dostosowany jest do współpracy/odczytu techniką SPRi - powierzchniowego rezonansu plazmonów w wersji obrazowej. Opracowany biosensor wykorzystuje monoklonalne mysie przeciwciało specyficzne względem PARP-1 jako receptor i spełnia warunki analityczne pod względem zakresu pomiarowego, specyficzności, precyzji i dokładności pomiaru. Biosensor według wynalazku zawiera płytkę szklaną pokrytą warstwą złota oraz siatkę polimeru tworzącą pęk miejsc aktywnych (partycje) zawierających warstwę receptorową. Warstwę receptorową tworzy wymienione wyżej przeciwciało zimmobilizowane na powierzchni złota wiązaniem kowalencyjnym za pośrednictwem linkera w postaci funkcjonalizowanego tiolu, korzystnie cysteaminy. Skonstruowany biosensor służy do ilościowych i selektywnych oznaczeń enzymu PARP-1 w ludzkich płynach ustrojowych. Jako rodzaj detekcji zastosowano Powierzchniowy Rezonans Plazmonów w wersji Obrazowej. Polimeraza poli(ADP-rybozy) jest ważnym celem zarówno terapii, jak i metod oznaczeń ilościowych, ponieważ należy do grupy enzymów, które biorą udział m.in. w naprawie uszkodzonego DNA. Nie został do tej pory skonstruowany biosensor zdolny do ilościowych oznaczeń PARP-1 w ludzkim materiale biologicznym. Skonstruowany biosensor wychwytuje jedynie oznaczaną substancję z próby biologicznej (PARP-1). Aparatura SPRi reaguje natomiast na przyrosty masy na powierzchni biosensora, które następnie zamieniane są na sygnał analityczny prowadzący do otrzymania dokładnej zawartości PARP-1 w badanej próbie. Wynalazek zapewnia dobrą precyzję i dokładność pomiaru, co zapewnia liniowa odpowiedź detektora na zmiany masy na powierzchni biosensora. Objętość pojedynczej próby wymagana do analizy jest bardzo mała (tj. około 3 μL), dlatego też wynalazek wykazuje duży potencjał do pracy z unikatowym i cennym materiałem biologicznym. Dzięki zastosowaniu biosensora według wynalazku uzyskuje się bardzo szybką analizę badanego materiału, nie tylko na obecność ale i na stężenie PARP-1.The biosensor only captures the substance being marked from the solution, and the SPRi apparatus reacts to the mass increase on the biosensor surface and transforms it into an analytical signal. This solution is characterized by the simplicity of both the construction of the biosensor and the measurement process. Therefore, this solution can compete with currently used methods for quantitative determination of biologically active substances. However, the SPRi biosensor for the determination of PARP-1 has not been developed so far. The biosensor according to the invention is intended for the specific and quantitative determination of PARP-1 in human biological material such as plasma, blood serum, or tissue homogenates and is adapted to cooperate/read using the SPRi technique - surface plasmon resonance in the imaging version. The developed biosensor uses a monoclonal mouse antibody specific for PARP-1 as a receptor and meets the analytical conditions in terms of measurement range, specificity, precision and accuracy of measurement. The biosensor according to the invention contains a glass plate covered with a gold layer and a polymer mesh forming a bunch of active sites (partitions) containing a receptor layer. The receptor layer is formed by the above-mentioned antibody immobilized on the gold surface by a covalent bond via a linker in the form of a functionalized thiol, preferably cysteamine. The constructed biosensor is used for quantitative and selective determination of the PARP-1 enzyme in human body fluids. Surface Plasmon Resonance in the Image version was used as the detection type. Poly(ADP-ribose) polymerase is an important target of both therapy and quantitative methods, because it belongs to a group of enzymes that are involved in, among others, in repairing damaged DNA. So far, no biosensor capable of quantitatively determining PARP-1 in human biological material has been constructed. The constructed biosensor only captures the marked substance from the biological sample (PARP-1). The SPRi apparatus responds to mass increases on the biosensor surface, which are then converted into an analytical signal leading to obtaining the exact PARP-1 content in the tested sample. The invention ensures good precision and accuracy of measurement, which is ensured by the linear response of the detector to mass changes on the biosensor surface. The volume of a single sample required for analysis is very small (i.e. approximately 3 μL), therefore the invention has great potential for working with unique and valuable biological material. Thanks to the use of the biosensor according to the invention, a very quick analysis of the tested material is achieved, not only for the presence but also for the concentration of PARP-1.
SZCZEGÓŁOWE PRZEDSTAWIENIE WYNALAZKUDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
KRÓTKI OPIS FIGUR RYSUNKUBRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWING FIGURES
Przedmiot wynalazku przedstawiony jest w przykładzie realizacji na rysunku, na którym Fig. 1 przedstawia schemat biosensora, a Fig. 2 pokazuje krzywą kalibracyjną PARP-1 - zmienność liniową sygnału w zależności od stężenia PARP-1.The subject of the invention is presented in an embodiment in the drawing, in which Fig. 1 shows a diagram of the biosensor, and Fig. 2 shows the PARP-1 calibration curve - linear variation of the signal depending on the PARP-1 concentration.
Cytowane w opisie publikacje oraz podane w nich odniesienia są w całości niniejszym włączone, jako referencje.The publications cited herein and the references provided therein are hereby incorporated by reference in their entirety.
SPOSOBY WYKONANIA WYNALAZKUMETHODS OF MAKING THE INVENTION
Poniższe przykłady umieszczono jedynie w celu zilustrowania wynalazku oraz wyjaśnienia poszczególnych jego aspektów, a nie w celu jego ograniczenia i nie powinny być utożsamiane z całym jego zakresem, który zdefiniowano w załączonych zastrzeżeniach.The following examples are provided solely for the purpose of illustrating the invention and explaining particular aspects thereof and are not intended to limit it and should not be construed as constituting the entire scope thereof as defined in the appended claims.
PRZYKŁADYEXAMPLES
Przykład 1 Biosensor do ilościowego oznaczania PARP-1 oraz pomiar stężenia PARP-1Example 1 Biosensor for quantitative determination of PARP-1 and measurement of PARP-1 concentration
Dla wytworzenia biosensora do ilościowego oznaczania PARP-1, jako receptor wykorzystano mysie monoklonalne przeciwciało, specyficzne względem PARP-1 (Abcam, nr ab110915). WynalazekTo create a biosensor for the quantitative determination of PARP-1, a mouse monoclonal antibody specific for PARP-1 (Abcam, no. ab110915) was used as the receptor. Invention
PL 244489 Β1 współpracuje z urządzeniem do pomiarów SPRi (Powierzchniowego Rezonansu Plazmonów w wersji Obrazowej (Imaging)). Biosensor charakteryzuje się tym, że składa się z płytki szklanej (1), korzystnie ze szkła typu BK7, na którą napylona jest warstewka tytanu (2) o grubości 1 ±0,2 nm, na którą następnie napyla się warstewkę złota (3) o grubości 50±2 nm. Następnie przed immobilizacją linkera, siatkę polimeru (4) nadrukowano metodą sitodruku w ten sposób dzieląc biosensor na partycje czyli miejsca aktywne biosensora (wewnątrz każdej partycji biosensora). Następnie na warstewce złota (-3) immobilizuje się linkier (5), którym jest funkcjonalizowany tiol, korzystnie cysteamina (5), do linkera przyłącza się receptor - mysie monoklonalne przeciwciało specyficzne względem PARP-1 (6).PL 244489 Β1 works with the SPRi (Surface Plasmon Resonance Imaging) measurement device. The biosensor is characterized by the fact that it consists of a glass plate (1), preferably BK7 glass, on which a layer of titanium (2) with a thickness of 1 ± 0.2 nm is sputtered, on which a layer of gold (3) with a thickness of 1 ± 0.2 nm is then sputtered. thickness 50±2 nm. Then, before linker immobilization, the polymer mesh (4) was screen-printed, thus dividing the biosensor into partitions, i.e. active sites of the biosensor (inside each biosensor partition). Then, a linker (5) is immobilized on the gold layer (-3), which is a functionalized thiol, preferably cysteamine (5), and a receptor - a mouse monoclonal antibody specific for PARP-1 (6) - is attached to the linker.
Przykład 2 Oznaczanie PARP-1 z wykorzystaniem biosensoraExample 2 Determination of PARP-1 using a biosensor
W niniejszym przykładzie biosensor wytworzony zgodnie z Przykładem 1 został wykorzystany do oznaczania PARP-1 w serii próbek osocza krwi pacjentek ze stwierdzoną endometriozą oraz w serii próbek osocza krwi pochodzących od grupy kontrolnej (osoby bez endometriozy). Próbki te zawierały badany analit - PARP-1, który wiązał się z monoklonalnym przeciwciałem specyficznym wobec PARP1. Próbkę osocza krwi pacjentek ze stwierdzoną endometriozą rozcieńczano buforem PBS w stosunku 1:9. Na jedno z aktywnych miejsc biosensora tj. na określoną partycję nanoszono 3 pL tak uzyskanego roztworu, dla każdej próby na inna partycję. Po upływie 10 minut próbka była 6-krotnie przemywana buforem HBS- ES oraz wodą. Próbki osocza krwi grupy kontrolnej były rozcieńczane buforem PBS w stosunku 1:1, a dalsze postępowanie było analogiczne jak opisano powyżej.In this example, the biosensor produced according to Example 1 was used to determine PARP-1 in a series of blood plasma samples from patients with diagnosed endometriosis and in a series of blood plasma samples from a control group (people without endometriosis). These samples contained the analyte of interest, PARP-1, which bound to a PARP1-specific monoclonal antibody. A blood plasma sample from patients with endometriosis was diluted with PBS buffer in a ratio of 1:9. 3 pL of the solution obtained in this way was applied to one of the active sites of the biosensor, i.e. to a specific partition, and to a different partition for each sample. After 10 minutes, the sample was washed 6 times with HBS-ES buffer and water. Blood plasma samples of the control group were diluted with PBS buffer in a 1:1 ratio, and further procedures were analogous to those described above.
Mierzono sygnał SPRi w aparacie do Powierzchniowego Rezonansu Plazmonów przy długości światła 632 nm i natężeniu 35 mA pochodzącego z diody laserowej w zakresie kątów 36-38 stopni. Stężenie PARP-1 odczytano porównując uzyskany wynik do wcześniej wyznaczonej krzywej kalibracyjnej (przedstawionej na Fig. 2) wytworzonej poprzez naniesienie roztworów wzorcowych o znanym stężeniu PARP-1 na poszczególne partycje biosensora. Przy wyliczeniach uwzględniano zastosowane rozcieńczenie. Dla serii próbek osocza krwi pacjentów ze stwierdzoną endometriozą oraz osocza z krwi grupy kontrolnej otrzymano następujące wyniki, przedstawione w Tabeli 1.The SPRi signal was measured in the Surface Plasmon Resonance apparatus at a light length of 632 nm and an intensity of 35 mA coming from the laser diode in the angle range of 36-38 degrees. The PARP-1 concentration was read by comparing the obtained result to a previously determined calibration curve (shown in Fig. 2) created by applying standard solutions with a known PARP-1 concentration to individual partitions of the biosensor. The dilution used was taken into account in the calculations. For a series of blood plasma samples from patients with endometriosis and plasma from the control group, the following results were obtained, presented in Table 1.
Tabela 1. Wyznaczenie stężenia PARP-1 przy pomocy biosensora według wynalazku i odczytu SPRi.Table 1. Determination of PARP-1 concentration using the biosensor according to the invention and SPRi reading.
Przeprowadzone oznaczenia potwierdziły skuteczność i funkcjonalność biosensora według wynalazku dla ilościowego oznaczania PARP-1 w badanych próbkach biologicznych, w których spodziewano się podwyższenia poziomów PARP-1 (osoby z endometriozą) i w próbkach kontrolnych, a zatem potwierdzono jego przydatność w zastosowaniach diagnostycznych do ilościowego oznaczania PARP1 w ludzkich płynach ustrojowych.The tests carried out confirmed the effectiveness and functionality of the biosensor according to the invention for the quantitative determination of PARP-1 in the tested biological samples in which increased levels of PARP-1 were expected (people with endometriosis) and in control samples, and therefore its usefulness in diagnostic applications for the quantitative determination of PARP1 was confirmed. in human body fluids.
WYKAZ OZNACZEŃLIST OF MARKINGS
- płytka szklana- glass plate
- warstwa tytanu- titanium layer
- warstwa złota- gold layer
- siatka polimerowa tworząca partycje tj. miejsca aktywne biosensora- polymer mesh creating partitions, i.e. active sites of the biosensor
- linker (np. cysteamina)- linker (e.g. cysteamine)
- monoklonalne mysie przeciwciało specyficzne wobec PARP-1- monoclonal mouse antibody specific for PARP-1
- badany analit - tu białko PARP-1- the analyte being tested - here the PARP-1 protein
LITERATURA:LITERATURE:
Cantó, C., Sauve, A. A., & Bai, P. (2013). Crosstalk between poly(ADP-ribose) polymerase and sirtuin enzymes. Molecular Aspects of Medicine, 34(6), 1168-1201. https://doi.org/- /10.1016/J.MAM.2013.01.004Cantó, C., Sauve, A. A., & Bai, P. (2013). Crosstalk between poly(ADP-ribose) polymerase and sirtuin enzymes. Molecular Aspects of Medicine, 34(6), 1168-1201. https://doi.org/- /10.1016/J.MAM.2013.01.004
Dal Piaz, F., Ferro, P., Vassallo, A., Vasaturo, M., Forte, G., Chini, M. G., Bifulco, G., Tosco, A., & de Tommasi, N. (2015). Identification and mechanism of action analysis of the new PARP-1 inhibitor 2-hydroxygenkwanol A. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - General Subjects, 1850(9), 1806-1814. https://doi.org/10.1016/J.BBAGEN.2015.05.014Dal Piaz, F., Ferro, P., Vassallo, A., Vasaturo, M., Forte, G., Chini, M. G., Bifulco, G., Tosco, A., & de Tommasi, N. (2015). Identification and mechanism of action analysis of the new PARP-1 inhibitor 2-hydroxygenkwanol A. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - General Subjects, 1850(9), 1806-1814. https://doi.org/10.1016/J.BBAGEN.2015.05.014
Fang, S., Lee, H. J., Wark, A. W., & Corn, R. M. (2006). Attomole microarray detection of MicroRNAs by nanoparticle-amplified SPR imaging measurements of surface polyadenylation reactions. Journal of the American Chemical Society, 128(43), 14044-14046. https://doi.org/10.1021/ja065223pFang, S., Lee, H. J., Wark, A. W., & Corn, R. M. (2006). Attomole microarray detection of MicroRNAs by nanoparticle-amplified SPR imaging measurements of surface polyadenylation reactions. Journal of the American Chemical Society, 128(43), 14044-14046. https://doi.org/10.1021/ja065223p
Gorodkiewicz, E. (2007). The Surface Plasmon Resonance Imaging Sensor for Papain Based on Immobilized Cystatin. Protein & Peptide Letters, 14(5), 443-445. https://doi.org//10.2174/- /092986607780782803Gorodkiewicz, E. (2007). The Surface Plasmon Resonance Imaging Sensor for Papain Based on Immobilized Cystatin. Protein & Peptide Letters, 14(5), 443-445. https://doi.org//10.2174/- /092986607780782803
Gorodkiewicz, E., Charkiewicz, R., Rakowska, A., Bajko, P., Chyczewski, L., & Niklinski, J. (2012). SPR imaging biosensor for podoplanin: sensor development and application to biological materials. Microchimica Acta, 176, 337-343, https://doi.org/10.1007/s00604-011-0726-9Gorodkiewicz, E., Charkiewicz, R., Rakowska, A., Bajko, P., Chyczewski, L., & Niklinski, J. (2012). SPR imaging biosensor for podoplanin: sensor development and application to biological materials. Microchimica Acta, 176, 337-343, https://doi.org/10.1007/s00604-011-0726-9
Gorodkiewicz, E., Ostrowska, H., & Sankiewicz, A. (2011). SPR imaging biosensor for the 20S proteasome: Sensor development and application to measurement of proteasomes in human blood plasma. Microchimica Acta, 175(1-2), 177-184. https://doi.org/10.1007/s00604-011-0656-6Gorodkiewicz, E., Ostrowska, H., & Sankiewicz, A. (2011). SPR imaging biosensor for the 20S proteasome: Sensor development and application to measurement of proteasomes in human blood plasma. Microchimica Acta, 175(1-2), 177-184. https://doi.org/10.1007/s00604-011-0656-6
Gorodkiewicz, E., & Regulska, E. (2010). SPR Imaging Biosensor for Aspartyl Cathepsins: Sensor Development and Application for Biological Material. Protein & Peptide Letters, 17(9), 1148-1154. https://doi.org/10.2174/092986610791760450Gorodkiewicz, E., & Regulska, E. (2010). SPR Imaging Biosensor for Aspartyl Cathepsins: Sensor Development and Application for Biological Material. Protein & Peptide Letters, 17(9), 1148-1154. https://doi.org/10.2174/092986610791760450
Gorodkiewicz, E., Sankiewicz, A., & Laudański, P. (2014). Surface plasmon resonance imaging biosensors for aromatase based on a potent inhibitor and a specific antibody: Sensor development and application for biological material. Central European Journal of Chemistry, 12(5), 557-567. https://doi.org/10.2478/s11532-014-0512-8Gorodkiewicz, E., Sankiewicz, A., & Laudański, P. (2014). Surface plasmon resonance imaging biosensors for aromatase based on a potent inhibitor and a specific antibody: Sensor development and application for biological material. Central European Journal of Chemistry, 12(5), 557-567. https://doi.org/10.2478/s11532-014-0512-8
Grzywa, R., Gorodkiewicz, E., Burchacka, E., Lesner, A., Laudański, P., Łukaszewski, Z., & Sieńczyk, M. (2014). Determination of cathepsin G in endometrial tissue using a surface plasmon resonance imaging biosensor with tailored phosphonic inhibitor. European Journal of Obstetrics and Gynecology and Reproductive Biology, 182, 38-42. https://doi.org/10.1016/j.ejogrb.2014.08.029Grzywa, R., Gorodkiewicz, E., Burchacka, E., Lesner, A., Laudański, P., Łukaszewski, Z., & Sieńczyk, M. (2014). Determination of cathepsin G in endometrial tissue using a surface plasmon resonance imaging biosensor with tailored phosphonic inhibitor. European Journal of Obstetrics and Gynecology and Reproductive Biology, 182, 38-42. https://doi.org/10.1016/j.ejogrb.2014.08.029
Jha, R., Agarwal, A., Mahfouz, R., Paasch, U., Grunewald, S., Sabanegh, E., Yadav, S. P., & Sharma, R. (2009). Determination of Poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) homologues in human ejaculated sperm and its correlation with sperm maturation. Fertility and Sterility, 91 (3), 782-790. https://doi.org/10.1016/J.FERTNSTERT.2007.12.079Jha, R., Agarwal, A., Mahfouz, R., Paasch, U., Grunewald, S., Sabanegh, E., Yadav, S. P., & Sharma, R. (2009). Determination of Poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) homologues in human ejaculated sperm and its correlation with sperm maturation. Fertility and Sterility, 91(3), 782-790. https://doi.org/10.1016/J.FERTNSTERT.2007.12.079
Laudanski, P., Gorodkiewicz, E., Ramotowska, B., Charkiewicz, R., Kuzmicki, M., & Szamatowicz, J. (2013). Determination of cathepsins B, D and G concentration in eutopic proliferative endome trium of women with endometriosis by the surface plasmon resonance imaging (SPRI) technique. European Journal of Obstetrics and Gynecology and Reproductive Biology, 169(1), 80-83. https://doi.org/10.1016/j.ejogrb.2013.01.024Laudanski, P., Gorodkiewicz, E., Ramotowska, B., Charkiewicz, R., Kuzmicki, M., & Szamatowicz, J. (2013). Determination of cathepsins B, D and G concentration in eutopic proliferative endome trium of women with endometriosis by the surface plasmon resonance imaging (SPRI) technique. European Journal of Obstetrics and Gynecology and Reproductive Biology, 169(1), 80-83. https://doi.org/10.1016/j.ejogrb.2013.01.024
Lee, H. J., Nedelkov, D., & Corn, R. M. (2006). Surface Plasmon Resonance Imaging Measurements of Antibody Arrays for the Multiplexed Detection of Low Molecular Weight Protein Biomarkers. https://doi.org/10.1021/ac060881dLee, H. J., Nedelkov, D., & Corn, R. M. (2006). Surface Plasmon Resonance Imaging Measurements of Antibody Arrays for the Multiplexed Detection of Low Molecular Weight Protein Biomarkers. https://doi.org/10.1021/ac060881d
Lee, H. J., Yan, Y., Marriott, G., & Corn, R. M. (2005). Quantitative functional analysis of protein complexes on surface. Journal of Physiology, 563(1), 61-71. https://doi.org/10.1113/jphy- siol.2004.081117Lee, H. J., Yan, Y., Marriott, G., & Corn, R. M. (2005). Quantitative functional analysis of protein complexes on surface. Journal of Physiology, 563(1), 61-71. https://doi.org/10.1113/jphy- siol.2004.081117
Moonen, H. J. J., Geraets, L., Vaarhorst, A., Bast, A., Wouters, E. F. M., & Hageman, G. J. (2005). Theophylline prevents NAD+ depletion via PARP-1 inhibition in human pulmonary epithelial cells. Biochemical and Biophysical Research Communications, 338(4), 1805-1810. https://doi.org/- /10.1016/J.BBRC.2005.10.159Moonen, H. J. J., Geraets, L., Vaarhorst, A., Bast, A., Wouters, E. F. M., & Hageman, G. J. (2005). Theophylline prevents NAD+ depletion via PARP-1 inhibition in human pulmonary epithelial cells. Biochemical and Biophysical Research Communications, 338(4), 1805-1810. https://doi.org/- /10.1016/J.BBRC.2005.10.159
Papeo, G., Avanzi, N., Bettoni, S., Leone, A., Paolucci, M., Perego, R., Quartieri, F., RiccardiSirtori, F., Thieffine, S., Montagnoli, A., & Lupi, R. (2014). Insights into PARP inhibitors’ selectivity using fluorescence polarization and surface plasmon resonance binding assays. Journal of Biomolecular Screening, 79(8), 1212-1219. https://doi.org/10.1177/1087057114538319Papeo, G., Avanzi, N., Bettoni, S., Leone, A., Paolucci, M., Perego, R., Quartieri, F., RiccardiSirtori, F., Thieffine, S., Montagnoli, A., & Lupi, R. (2014). Insights into PARP inhibitors’ selectivity using fluorescence polarization and surface plasmon resonance binding assays. Journal of Biomolecular Screening, 79(8), 1212-1219. https://doi.org/10.1177/1087057114538319
Sankiewicz, A., Laudanski, P., Romanowicz, L., Hermanowicz, A., Roszkowska-Jakimiec, W., Debek, W., & Gorodkiewicz, E. (2015). Development of surface plasmon resonance imaging biosensors for detection of ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase L1. Analytical Biochemistry, 469, 4-11. https://doi.org/10.1016/J.AB.2014.09.021Sankiewicz, A., Laudanski, P., Romanowicz, L., Hermanowicz, A., Roszkowska-Jakimiec, W., Debek, W., & Gorodkiewicz, E. (2015). Development of surface plasmon resonance imaging biosensors for detection of ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase L1. Analytical Biochemistry, 469, 4-11. https://doi.org/10.1016/J.AB.2014.09.021
Sankiewicz, A., Lukaszewski, Z., Trojanowska, K., & Gorodkiewicz, E. (2016). Determination of collagen type IV by Surface Plasmon Resonance Imaging using a specific biosensor. Analytical Biochemistry , 515, 40-46. https://doi.org/10.1016/j.ab.2016.10.002Sankiewicz, A., Lukaszewski, Z., Trojanowska, K., & Gorodkiewicz, E. (2016). Determination of collagen type IV by Surface Plasmon Resonance Imaging using a specific biosensor. Analytical Biochemistry, 515, 40-46. https://doi.org/10.1016/j.ab.2016.10.002
Sankiewicz, A., Romanowicz, L., Laudanski, P., Zelazowska-Rutkowska, B., Puzan, B., Cylwik, B., & Gorodkiewicz, E. (2016). SPR imaging biosensor for determination of laminin-5 as a potential cancer marker in biological material. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 408(19), 5269-5276. https://doi.org/10.1007/s00216-016-9621-xSankiewicz, A., Romanowicz, L., Laudanski, P., Zelazowska-Rutkowska, B., Puzan, B., Cylwik, B., & Gorodkiewicz, E. (2016). SPR imaging biosensor for determination of laminin-5 as a potential cancer marker in biological material. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 408(19), 5269-5276. https://doi.org/10.1007/s00216-016-9621-x
Sankiewicz, A., Romanowicz, L., Pyc, M., Hermanowicz, A., & Gorodkiewicz, E. (2018). SPR imaging biosensor for the quantitation of fibronectin concentration in blood samples. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 150, 1-8. https://doi.org/10.1016/j.jpba.2017.11.070Sankiewicz, A., Romanowicz, L., Pyc, M., Hermanowicz, A., & Gorodkiewicz, E. (2018). SPR imaging biosensor for the quantitation of fibronectin concentration in blood samples. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 150, 1-8. https://doi.org/10.1016/j.jpba.2017.11.070
Tokarzewicz, A., Romanowicz, L., Sveklo, I., & Gorodkiewicz, E. (2016). The development of a matrix metalloproteinase-1 biosensor based on the surface plasmon resonance imaging technique. Analytical Methods, 8(34), 6428-6435. https://doi.org/10.1039/c6ay01856dTokarzewicz, A., Romanowicz, L., Sveklo, I., & Gorodkiewicz, E. (2016). The development of a matrix metalloproteinase-1 biosensor based on the surface plasmon resonance imaging technique. Analytical Methods, 8(34), 6428-6435. https://doi.org/10.1039/c6ay01856d
Tokarzewicz, A., Romanowicz, L., Sveklo, L, Matuszczak, E., Hermanowicz, A., & Gorodkiewicz, E. (2017). SPRI biosensors for quantitative determination of matrix metalloproteinase-2. Analytical Methods , 9(16), 2407-2414. https://doi.org/10.1039/c7ay00786hTokarzewicz, A., Romanowicz, L., Sveklo, L., Matuszczak, E., Hermanowicz, A., & Gorodkiewicz, E. (2017). SPRI biosensors for quantitative determination of matrix metalloproteinase-2. Analytical Methods, 9(16), 2407-2414. https://doi.org/10.1039/c7ay00786h
Wiśnik, E., Ryksa, M., & Koter-Michalak, M. (2016). Inhibitory PARP1: Współczesne próby zastosowania w terapii przeciwnowotworowej i perspektywy na przyszłość. Postępy Higieny i Medycyny Doświadczalnej , 70, 280-294. https://doi.org/10.5604/17322693.1199303Wiśnik, E., Ryksa, M., & Koter-Michalak, M. (2016). PARP1 inhibitors: Contemporary attempts at use in anticancer therapy and future prospects. Postępy Hygieny i Medycyny Doświadczlnej, 70, 280-294. https://doi.org/10.5604/17322693.1199303
Xu, E., Yang, H., Li, P., Wang, Z., Liu, Y., Wei, W., & Liu, S. (2021). Dual-mode detection of PARP-1 by fluorescence and chemiluminescence. Sensors and Actuators B: Chemical, 330, 129288. https://doi.org/10.1016/J.SNB.2020.129288Xu, E., Yang, H., Li, P., Wang, Z., Liu, Y., Wei, W., & Liu, S. (2021). Dual-mode detection of PARP-1 by fluorescence and chemiluminescence. Sensors and Actuators B: Chemical, 330, 129288. https://doi.org/10.1016/J.SNB.2020.129288
Yang, H., Li, P., Wang, D., Liu, Y., Wei, W., Zhang, Y., & Liu, S. (2019). Quartz Crystal Microbalance Detection of Poly(ADP-ribose) Polymerase-1 Based on Gold Nanorods Signal Amplification. Analytical Chemistry, 91 (11), 11038-11044. https://doi.org/10.1021/ACS.ANALCHEM.9B01366Yang, H., Li, P., Wang, D., Liu, Y., Wei, W., Zhang, Y., & Liu, S. (2019). Quartz Crystal Microbalance Detection of Poly(ADP-ribose) Polymerase-1 Based on Gold Nanorods Signal Amplification. Analytical Chemistry, 91(11), 11038-11044. https://doi.org/10.1021/ACS.ANALCHEM.9B01366
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL441141A PL244489B1 (en) | 2022-05-10 | 2022-05-10 | Biosensor for the quantification of PARP-1 in human body fluids |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL441141A PL244489B1 (en) | 2022-05-10 | 2022-05-10 | Biosensor for the quantification of PARP-1 in human body fluids |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL441141A1 PL441141A1 (en) | 2023-11-13 |
| PL244489B1 true PL244489B1 (en) | 2024-01-29 |
Family
ID=88789817
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL441141A PL244489B1 (en) | 2022-05-10 | 2022-05-10 | Biosensor for the quantification of PARP-1 in human body fluids |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL244489B1 (en) |
-
2022
- 2022-05-10 PL PL441141A patent/PL244489B1/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL441141A1 (en) | 2023-11-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20220229074A1 (en) | Methods of determining a treatment protocol for and/or a prognosis of a patient's recovery from a brain injury | |
| McKeating et al. | Biosensors and nanobiosensors for therapeutic drug and response monitoring | |
| CZ20002078A3 (en) | Continuous format high throughput screening | |
| CN104364649B (en) | Protein expression analyses for identifying genotoxic compounds | |
| Sankiewicz et al. | SPR imaging biosensor for determination of laminin-5 as a potential cancer marker in biological material | |
| Kim et al. | Simultaneous quantification of multiple biomarkers on a self-calibrating microfluidic paper-based analytic device | |
| KR101255828B1 (en) | Qualitative and quantitative analytical method for analyzing the activity type of an enzyme that is activated by proteolysis | |
| Shinde et al. | Utility of cardiac biomarkers and biosensors for diagnosis of acute myocardial infarction | |
| US20170037450A1 (en) | Novel assay for early detection of a disease using a magnetic nanoparticle biosensor | |
| PL244489B1 (en) | Biosensor for the quantification of PARP-1 in human body fluids | |
| CN113652488B (en) | Application of CTSF in evaluation of brain metastasis efficacy of non-small cell lung cancer | |
| Załęcka et al. | The SPRi determination of cathepsin L and S in plasma and peritoneal fluid of women with endometriosis | |
| EP4042155B1 (en) | Xbp1 isoform multiplex assay | |
| JPH1183785A (en) | Cell probe, measurement system and probe for examination | |
| US9422591B2 (en) | Methods and kits for detecting mastitis | |
| AU2017346940B2 (en) | Prognostic method and kits useful in said method | |
| RU2074392C1 (en) | Method of blood cyclosporine a assay | |
| Ahmad et al. | Electrochemical distinction of neuronal and neuroblastoma cells via the phosphorylation of the cellular extracellular membrane | |
| JP2003130871A (en) | Method of measuring amount of protein | |
| US20210148913A1 (en) | Electrochemical sensor for analyte detection | |
| KR20220067567A (en) | Rapid detection method of anti-drug antibody | |
| PL244508B1 (en) | Gynecological-oncology biosensor panel for the simultaneous specific determination of biomarker concentrations in body fluids and tissue homogenates using the surface plasmon resonance technique in the Imaging version | |
| PL235043B1 (en) | Biosensor for determination of metalloproteinase-1 enzyme, using an antibody | |
| PL222548B1 (en) | Biosensor for the determination of aromatase using the antibodies | |
| KR20130052923A (en) | A composition, kit and method for detecting toxicity by nanomaterials |