PL240556B1 - The nanocapsule and the method of its production for the simultaneous transport of a lipophilic and hydrophilic compound and its application - Google Patents
The nanocapsule and the method of its production for the simultaneous transport of a lipophilic and hydrophilic compound and its application Download PDFInfo
- Publication number
- PL240556B1 PL240556B1 PLPLPLPLPLPLPLPLPL426702A PLPLPLPLPLPLPLPL426702A PL240556B1 PL 240556 B1 PL240556 B1 PL 240556B1 PL PLPLPLPLPLPLPLPL426702 A PLPLPLPLPLPLPLPLPL426702 A PL PLPLPLPLPLPLPLPL426702A PL PLPLPLPLPLPLPL426702 A PLPLPLPLPLPLPLPL426702 A PL PLPLPLPLPLPLPL426702A PL 240556 B1 PL240556 B1 PL 240556B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- oil
- emulsion
- water
- capsule
- phase
- Prior art date
Links
- 150000002433 hydrophilic molecules Chemical class 0.000 title claims description 23
- 150000002634 lipophilic molecules Chemical class 0.000 title claims description 18
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 title description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 96
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 46
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 44
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 38
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 claims description 37
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims description 36
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 36
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N Oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 claims description 32
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims description 31
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 24
- 125000003438 dodecyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 20
- 238000000527 sonication Methods 0.000 claims description 16
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 claims description 15
- 150000004676 glycans Polymers 0.000 claims description 14
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 claims description 14
- 230000002209 hydrophobic Effects 0.000 claims description 13
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 13
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 13
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 10
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims description 10
- MAKUBRYLFHZREJ-JWBQXVCJSA-M sodium;(2S,3S,4R,5R,6R)-3-[(2S,3R,5S,6R)-3-acetamido-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-4,5,6-trihydroxyoxane-2-carboxylate Chemical class [Na+].CC(=O)N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C([O-])=O)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O MAKUBRYLFHZREJ-JWBQXVCJSA-M 0.000 claims description 10
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 9
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 9
- 229930003231 vitamins Natural products 0.000 claims description 9
- 229940088594 Vitamin Drugs 0.000 claims description 8
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 claims description 8
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims description 8
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 claims description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 5
- 230000000087 stabilizing Effects 0.000 claims description 5
- XUGNVMKQXJXZCD-UHFFFAOYSA-N Isopropyl palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(C)C XUGNVMKQXJXZCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- 239000010478 argan oil Substances 0.000 claims description 4
- 229940075495 isopropyl palmitate Drugs 0.000 claims description 4
- 239000000944 linseed oil Substances 0.000 claims description 4
- 235000021388 linseed oil Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 claims description 4
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000008307 w/o/w-emulsion Substances 0.000 claims description 4
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 claims description 2
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 2
- 239000010685 fatty oil Substances 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 claims 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 28
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 10
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- -1 dodecyl hyaluronic acid Chemical compound 0.000 description 8
- DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N Calcein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(O)=O)CC(=O)O)C(O)=C1 DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229960002378 Oftasceine Drugs 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 229940099552 Hyaluronan Drugs 0.000 description 5
- KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N Hyaluronan Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)C1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H](C(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N 0.000 description 5
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N Rhodamine B Chemical group [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- VOFUROIFQGPCGE-UHFFFAOYSA-N Nile red Chemical compound C1=CC=C2C3=NC4=CC=C(N(CC)CC)C=C4OC3=CC(=O)C2=C1 VOFUROIFQGPCGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XMVONEAAOPAGAO-UHFFFAOYSA-N Sodium tungstate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][W]([O-])(=O)=O XMVONEAAOPAGAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 4
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 4
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- ZBKFYXZXZJPWNQ-UHFFFAOYSA-N [N-]=C=S Chemical compound [N-]=C=S ZBKFYXZXZJPWNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 3
- 230000002708 enhancing Effects 0.000 description 3
- 229940014041 hyaluronate Drugs 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 3
- 230000002195 synergetic Effects 0.000 description 3
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 3
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 description 3
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 2
- 238000000604 cryogenic transmission electron microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003010 ionic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000011068 load Methods 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 230000003595 spectral Effects 0.000 description 2
- JGVWCANSWKRBCS-UHFFFAOYSA-N tetramethylrhodamine thiocyanate Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(N(C)C)=CC2=[O+]C2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC=C(SC#N)C=C1C(O)=O JGVWCANSWKRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 2
- 102000010400 1-phosphatidylinositol-3-kinase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040005185 1-phosphatidylinositol-3-kinase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 210000004051 Gastric Juice Anatomy 0.000 description 1
- 229940088597 Hormone Drugs 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N Intaxel Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- 210000004698 Lymphocytes Anatomy 0.000 description 1
- 239000002616 MRI contrast agent Substances 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229960001592 Paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N Sirolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 description 1
- 102000013530 TOR Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010065917 TOR Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 229940029983 VITAMINS Drugs 0.000 description 1
- 229940021016 Vitamin IV solution additives Drugs 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor Effects 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogens Species 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 239000011258 core-shell material Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 125000000298 cyclopropenyl group Chemical class [H]C1=C([H])C1([H])* 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing Effects 0.000 description 1
- 230000004059 degradation Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001066 destructive Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 239000000416 hydrocolloid Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000000670 limiting Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000001264 neutralization Effects 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000003921 particle size analysis Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 230000036231 pharmacokinetics Effects 0.000 description 1
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000003334 potential Effects 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reduced Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229930003347 taxol Natural products 0.000 description 1
- 230000001960 triggered Effects 0.000 description 1
- 238000005429 turbidity Methods 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000002569 water oil cream Substances 0.000 description 1
Description
PL 240 556 B1PL 240 556 B1
Opis wynalazkuDescription of the invention
Dziedzina technikiThe field of technology
Przedmiotem wynalazku są biokompatybilne polisacharydowe układy typu „kapsuła w kapsule” oraz sposób ich wytwarzania, które są złożone z kapsuły o rdzeniu olejowym i średnicy nieprzekraczającej 1 μm, w którym umieszczone są kapsuły o rdzeniach wodnych, umożliwiające efektywną enkapsulację związków o charakterze zarówno lipofilowym (w rdzeniu olejowym), jak i hydrofilowych (w rdzeniu wodnym) i wysoką stabilnością w wodnej zawiesinie oraz sposób ich wytwarzania i stabilizacji za pomocą modyfikowanych hydrofobowo polisacharydów z grupami jonowymi w strukturze. Ponadto przedmiotem wynalazku jest również zastosowanie tych układów do przenoszenia związków lipofilowych i związków hydrofilowych.The subject of the invention are biocompatible polysaccharide systems of the "capsule-in-capsule" type and the method of their production, which consist of a capsule with an oil core and a diameter not exceeding 1 μm, in which capsules with water cores are placed, enabling effective encapsulation of both lipophilic compounds (in oil core) and hydrophilic (in the water core) and high stability in aqueous suspension, and the method of their preparation and stabilization using hydrophobically modified polysaccharides with ionic groups in the structure. Furthermore, the invention also relates to the use of these systems for the transport of lipophilic compounds and hydrophilic compounds.
Stan technikiState of the art
Potrzeba równoczesnego dostarczania związków hydrofobowych i hydrofilowych wiąże się często z synergistycznym działaniem kombinacji substancji aktywnych (Chou TC (2006) Theoretical basis, experimental design, and computerized simulation of synergism and antagonism in drug combination studies. Pharmacol Rev 58: 621-681; Zimmermann GR, Lehar J, Keith CT (2007) Multi-target therapeutics: when the whole is greater than the sum of the parts. Drug discovery today 12: 34-42.) lub możliwością równoczesnego i kolokalizowanego podawania terapeutyków i substancji wspomagających diagnostykę (teranostyka) (Liu G, Deng J, Liu F, Wang Z, Peerc D, Zhao Y, Hierarchical theranostic nanomedicine: MRI contrast agents as a physical vehicle anchor for high drug loading and triggered ondemand delivery, J. Mater. Chem. B, 2018,6, 1995-2003). Dotyczy to w szczególności dostarczania leków, witamin, hormonów, pestycydów, substancji kontrastujących w obrazowaniu rezonansowo -magnetycznym, itp. W przypadku stosowania leków jest to szczególnie ważne przy terapiach skomplikowanych chorób takich jak nowotwory (Blanco E et al. Colocalized delivery of rapamycin and paclitaxel to tumors enhances synergistic targeting of the PI3K/Akt/mTOR pathway. Mol Ther. 2014 Jul; 22(7): 1310-1319.), czy też przezwyciężaniu lekooporności drobnoustrojów, grzybów (Levy SB, Marshall B (2004) Antibacterial resistance worldwide: causes, challenges and responses. Nature medicine 10: S122-129; Fitzgerald JB, Schoeberl B, Nielsen UB, Sorger PK (2006) Systems biology and combination therapy in the quest for clinical efficacy. Nature chemical biology 2: 458-466).The need for the simultaneous supply of hydrophobic and hydrophilic compounds is often associated with the synergistic effect of combinations of active substances (Chou TC (2006) Theoretical basis, experimental design, and computerized simulation of synergism and antagonism in drug combination studies. Pharmacol Rev 58: 621-681; Zimmermann GR , Lehar J, Keith CT (2007) Multi-target therapeutics: when the whole is greater than the sum of the parts. Drug discovery today 12: 34-42.) Or the possibility of simultaneous and co-localized administration of therapeutics and diagnostic aids (theranostics) (Liu G, Deng J, Liu F, Wang Z, Peerc D, Zhao Y, Hierarchical theranostic nanomedicine: MRI contrast agents as a physical vehicle anchor for high drug loading and triggered ondemand delivery, J. Mater. Chem. B, 2018, 6, 1995-2003). This applies in particular to the delivery of drugs, vitamins, hormones, pesticides, Magnetic resonance imaging contrast substances, etc. In the case of the use of drugs, it is particularly important in the treatment of complex diseases such as cancer (Blanco E et al. Colocalized delivery of rapamycin and paclitaxel to tumors enhances synergistic targeting of the PI3K / Akt / mTOR pathway. Mol Ther. 2014 Jul; 22 (7): 1310-1319.), or overcoming drug resistance of microbes, fungi (Levy SB, Marshall B (2004) Antibacterial resistance worldwide : causes, challenges and responses. Nature medicine 10: S122-129; Fitzgerald JB, Schoeberl B, Nielsen UB, Sorger PK (2006) Systems biology and combination therapy in the quest for clinical efficacy. Nature chemical biology 2: 458-466) .
Podawane substancje aktywne o różnej hydrofilowości zwykle różnią się farmakokinetyką, co utrudnia występowanie efektów synergistycznych w organizmie, nawet przy równoczesnym podaniu mieszaniny tych substancji. Rozwiązaniem tego problemu może być podawanie takich substancji w jednym nośniku o rozmiarach submikrometrycznych, który umożliwi dostarczenie obu (lub wielu) substancji jednocześnie w danym miejscu (kolokalizacja). Takimi nośnikami mogą być układy typu podwójnych emulsji woda-olej-woda, które strukturalnie można też opisać jako kapsuły z wodnym rdzeniem umieszczone w kapsuła z olejowym rdzeniem, jak w niniejszym wynalazku.The administered active substances of different hydrophilicity usually differ in pharmacokinetics, which makes it difficult for the synergistic effects to occur in the body, even when a mixture of these substances is administered simultaneously. A solution to this problem may be to administer such substances in one sub-micrometric carrier, which will allow both (or many) substances to be delivered simultaneously at a given site (co-location). Such carriers can be water-oil-water double emulsion systems, which can also be structurally described as water-core capsules within an oil-core capsule as in the present invention.
W przypadku związków hydrofilowych istotny jest także efekt ochronny realizowany poprzez odizolowanie substancji od środowiska zewnętrznego, które może działać na nią destrukcyjnie (np. sok żołądkowy o niskim pH, limfocyty odpowiedzialne za odpowiedź immunologiczną organizmu). Dotyczy to w szczególności doustnego podawania białek i peptydów (Abdul Muheem, Faiyaz Shakeel, Mohammad Asadullah, Jahangir, Mohammed Anwar, Neha Mallick, Gaurav Kumar Jain, Musarrat HusainWarsi, Farhan Jalees Ahmad, A review on the strategies for oral delivery of proteins and peptides and their clinical perspectives, Saudi Pharmaceutical Journal 2016, 24, 413-428).In the case of hydrophilic compounds, the protective effect achieved by isolating the substance from the external environment, which can have a destructive effect on it (e.g. gastric juice with a low pH, lymphocytes responsible for the body's immune response) is also important. This applies in particular to the oral administration of proteins and peptides (Abdul Muheem, Faiyaz Shakeel, Mohammad Asadullah, Jahangir, Mohammed Anwar, Neha Mallick, Gaurav Kumar Jain, Musarrat HusainWarsi, Farhan Jalees Ahmad, A review on the strategies for delivery of proteins and peptides and their clinical perspectives, Saudi Pharmaceutical Journal 2016, 24, 413-428).
Przedstawiony wynalazek oparty na wytworzeniu podwójnej emulsji typu woda-olej-woda (W/O/W) stabilizowanej hydrofobizowaną pochodną kwasu hialuronowego, bez konieczności użycia dodatkowych emulsyfikatorów, pełni rolę nośnika, który rozwiązuje problem z jednoczesnym podaniem substancji aktywnych o różnej hydrofilowości oraz z ochroną wrażliwych substancji hydrofilowych przed agresywnym środowiskiem zewnętrznym.The presented invention is based on the production of a double water-oil-water (W / O / W) emulsion stabilized with a hydrophobized derivative of hyaluronic acid, without the need to use additional emulsifiers, acts as a carrier that solves the problem of simultaneous administration of active substances of different hydrophilicity and protection sensitive hydrophilic substances against an aggressive external environment.
W patencie polskim numer P.413155 ujawniono stabilne układy emulsyjne O/W o budowie typu rdzeń-powłoka stabilizowane za pomocą modyfikowanych polisacharydów zdolne do efektywnej enkapsulacji związków hydrofobowych.Polish patent number P.413155 discloses stable core-shell O / W emulsion systems stabilized with modified polysaccharides capable of efficient encapsulation of hydrophobic compounds.
Z międzynarodowego patentu nr WO 2016/179251 znane są stabilne emulsje zdolne do enkapsulacji lotnych związków chemicznych, np. pochodnych cyklopropenu. Podwójna emulsja typu woda -olej-woda zawiera emulsyfikator i surfaktant zapewniający jej stabilność.From the international patent no. WO 2016/179251, stable emulsions capable of encapsulating volatile chemical compounds, e.g. cyclopropene derivatives, are known. The water-oil-water double emulsion contains an emulsifier and a surfactant to ensure its stability.
PL 240 556 Β1PL 240 556 Β1
Stabilne podwójne emulsje opisane zostały w amerykańskim patencie US 2010/0233221. Zawierają one co najmniej dwa emulsyfikatory o różnych masach molowych zapewniające stabilizację emulsji woda w oleju oraz podwójnej emulsji.Stable double emulsions are described in US patent US 2010/0233221. They contain at least two emulsifiers of different molar weights to stabilize the water-in-oil emulsion and the double emulsion.
Znane z międzynarodowego patentu WO 2018/077977 są podwójne emulsje zawierające usieciowane kwasy tłuszczowe jako warstwę wewnętrzną służące do enkapsulacji hydrofilowych związków stosowanych w kosmetyce. Emulsje wykazują stabilność przez minimum 3 miesiące.Known from the international patent WO 2018/077977, they are double emulsions containing cross-linked fatty acids as an internal layer used to encapsulate hydrophilic compounds used in cosmetics. Emulsions are stable for a minimum of 3 months.
Z międzynarodowego patentu nr WO 2017/199008 znane są podwójne emulsje zawierające emulsyfikatory i wodną fazę wewnętrzną zawierającą polimery ulegające sieciowaniu w podwyższonej temperaturze co prowadzi do otrzymania układów typu hydrożel-olej-woda. Otrzymane układy są zdolne do przenoszenia substancji aktywnych (leków i komórek) inkorporowanych w cząstkach hydrokoloidalnych.From the international patent no. WO 2017/199008, double emulsions containing emulsifiers and an internal aqueous phase containing polymers crosslinkable at elevated temperature are known, which lead to the formation of hydrogel-oil-water systems. The resulting systems are capable of transporting active substances (drugs and cells) incorporated in hydrocolloid particles.
Celem niniejszego wynalazku jest dostarczenie nowych układów emulsyjnych (nanokapsuła w nanokapsule) typu woda-olej-woda. Nowe układy jako formy farmaceutyczne mogłyby zawierać substancje czynne przeciwnowotworowe lub białka.The aim of the present invention is to provide new water-oil-water emulsion systems (nanocapsule in a nanocapsule). The new systems as pharmaceutical forms could contain anti-tumor active substances or proteins.
Szczegółowy opis wynalazku:Detailed description of the invention:
Istotą niniejszego wynalazku są biozgodne układy typu podwójnej emulsji woda-olej-woda zdolne do jednoczesnego przenoszenia związków lipofilowych (w fazie olejowej) i hydrofilowych (w wewnętrznej fazie wodnej). Stabilizacja układu nie wymaga stosowania małocząsteczkowych związków powierzchniowo czynnych (surfaktantów), jest bowiem zapewniona przez hydrofobowo zmodyfikowany kwas hialuronowy.The present invention is based on biocompatible water-oil-water double emulsion systems capable of simultaneous transport of lipophilic (in the oil phase) and hydrophilic (in the inner water phase) compounds. The stabilization of the system does not require the use of low molecular weight surfactants, as it is ensured by hydrophobically modified hyaluronic acid.
Wytworzone otoczki stabilizujące kapsuły z olejowym rdzeniem, jak i kapsuły z wodnym rdzeniem (kapsuła wewnętrzna) składają się z modyfikowanego hydrofobowo hialuronianu sodu, Hy-C12, o wzo-The produced shells stabilizing the capsules with the oil core and the capsules with the water core (inner capsule) consist of a hydrophobically modified sodium hyaluronate, Hy-C12, with the formula
gdzie p jest liczbą całkowitą równą 5, a stosunek liczba m/(m+n) wynosi od 0,001 do 0,4.where p is an integer equal to 5 and the ratio number m / (m + n) is from 0.001 to 0.4.
Wytworzenie układu o budowie nanokapsuła w nanokapsule jest procesem dwuetapowym; pierwszy etap to otrzymanie odwróconej emulsji typu woda w oleju przez zmieszanie fazy wodnej stanowiącej roztwór dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego o stężeniu 1-10 g/L w soli fizjologicznej, tj. chlorku sodu o stężeniu 0,15 mol/dm3 z nietoksycznym olejem stanowiącym ok. 99% objętościowych mieszaniny. Drugi etap to opłaszczenie wytworzonych kropli wodnych zawieszonych w ciągłej fazie olejowej, powłoką z hialuronianu, co prowadzi do powstania układu typu woda-olej-woda. Co istotne, powstający w pierwszym etapie układ woda w oleju jest niestabilny, wymaga zastosowanie drugiego etapu w celu uzyskania stabilnego układu koloidalnego. Podwójna emulsja wykazuje stabilność w czasie minimum 2 miesięcy.The creation of a system with the structure of a nanocapsule in a nanocapsule is a two-stage process; the first step is to obtain an inverse water-in-oil emulsion by mixing the water phase, which is a solution of the dodecyl derivative of hyaluronic acid at a concentration of 1-10 g / L in saline, i.e. sodium chloride at a concentration of 0.15 mol / dm 3 with a non-toxic oil of approx. 99% by volume of the mixture. The second step is to coat the produced water droplets suspended in a continuous oil phase with a hyaluronan coating, resulting in a water-oil-water system. Importantly, the water-in-oil system formed in the first stage is unstable, requiring the use of the second stage in order to obtain a stable colloidal system. The double emulsion is stable for a minimum of 2 months.
Dla uzyskania stabilnej w czasie emulsji istotne jest ustalenie balansu pomiędzy hydrofilowymi i hydrofobowymi fragmentami cząsteczki. Przeprowadzone badania wykazały, że najlepsze właściwości wykazuje układ stabilizowany przez kwas hialuronowy modyfikowany dodecylowymi łańcuchami bocznymi. Korzystnie, aby stopień podstawienia w łańcuchu polisacharydu nie przekraczał 5%. Zbyt duża zawartość bocznych łańcuchów hydrofobowych może bowiem ograniczyć rozpuszczalność polimeru w wodzie.In order to obtain a time-stable emulsion, it is important to establish the balance between the hydrophilic and hydrophobic parts of the molecule. The conducted research has shown that the best properties are shown by the system stabilized by hyaluronic acid modified with dodecyl side chains. Preferably, the degree of substitution in the polysaccharide chain does not exceed 5%. Too high content of hydrophobic side chains may limit the water solubility of the polymer.
Dla uzyskania dobrej stabilności układu istotne jest także stosowanie polisacharydów obdarzonych trwałym ładunkiem elektrostatycznym. Korzystnie, aby zawartość grup jonowych w polisacharydzie była większa niż 20%, korzystniej jeśli jest większa niż 40%, zaś najkorzystniej aby przekraczała 60%. Obecność grup karboksylowych sprawia, że kwas hialuronowy to naturalnie występujący polianion, który zapewnia stabilizację układu typu nanokapsuła w nanokapsule.For good system stability it is also important to use polysaccharides with a permanent electrostatic charge. Preferably the content of ionic groups in the polysaccharide is greater than 20%, more preferably greater than 40% and most preferably greater than 60%. The presence of carboxyl groups makes hyaluronic acid a naturally occurring polyanion that stabilizes the nanocapsule system in the nanocapsule.
PL 240 556 Β1PL 240 556 Β1
Konieczne jest stosowanie sonikacji (lub intensywnego mieszania) w celu uzyskania zarówno odwróconej emulsji typu woda-olej jak i podwójnej emulsji (woda-olej-woda), przy czym korzystnie aby sonikacja trwała 15-60 minut w temperaturze wyższej niż 18°C, ale nieprzekraczającej 40°C. Najkorzystniej, aby sonikacja trwała 60 min dla uzyskania odwróconej emulsji i 30 min dla uzyskania podwójnej emulsji i była prowadzona w temperaturze 25-30°C.It is necessary to use sonication (or vigorous agitation) to obtain both a water-oil inverse emulsion and a double (water-oil-water) emulsion, with preferably 15-60 minutes of sonication at a temperature greater than 18 ° C, but not exceeding 40 ° C. Most preferably, the sonication is 60 min for an inverse emulsion and 30 min for a double emulsion, and is carried out at a temperature of 25-30 ° C.
Do wytwarzania podwójnej emulsji stosowane są wodne roztwory hydrofobowo zmodyfikowanych polisacharydów jonowych o stężeniu 1-10 g/L i sile jonowej z zakresu 0,01-0,15. Korzystnie jest stosować roztwór kwasu hialuronowego o stężeniu 2 g/L rozpuszczony w roztworze chlorku sodu o stężeniu 0,15 mol/dm3.For the preparation of the double emulsion, aqueous solutions of hydrophobically modified ionic polysaccharides with a concentration of 1-10 g / L and an ionic strength in the range of 0.01-0.15 are used. It is preferable to use a hyaluronic acid solution with a concentration of 2 g / L dissolved in a sodium chloride solution with a concentration of 0.15 mol / dm 3 .
Otrzymane układy typu nanokapsuła w nanokapsule charakteryzują się szerokim spektrum zastosowań, pozwalają bowiem na jednoczesne załadowanie związków hydrofobowych (do fazy olejowej) oraz hydrofilowych (do wewnętrznej fazy wodnej). Możliwość enkapsulacji barwników fluorescencyjnych zapewnia obrazowanie otrzymanych układów. Jednoczesne zastosowanie barwników hydrofilowych i hydrofobowych umożliwia obrazowanie geometrii kapsuł. Możliwe jest także zastosowanie znakowanych fluorescencyjnie pochodnych kwasu hialuronowego. Korzystnie jest stosować barwniki różniące się charakterystyką spektralną, korzystniej wzbudzane różnymi laserami i emitujące promieniowanie w różnych kanałach emisji konfokalnego mikroskopu fluorescencyjnego. Najkorzystniej stosować kwas hialuronowy modyfikowany izotiocyjanianem rodaminy oraz izotiocyjanianem fluoresceiny.The obtained nanocapsule-in-nanocapsule systems are characterized by a wide range of applications, as they allow the simultaneous loading of hydrophobic compounds (into the oil phase) and hydrophilic compounds (into the internal water phase). The possibility of encapsulating fluorescent dyes provides imaging of the obtained systems. The simultaneous use of hydrophilic and hydrophobic dyes enables the imaging of the geometry of the capsules. It is also possible to use fluorescently labeled hyaluronic acid derivatives. It is preferable to use dyes differing in spectral characteristics, more preferably excited with different lasers and emitting radiation in different emission channels of a confocal fluorescence microscope. Most preferably, hyaluronic acid modified with rhodamine isothiocyanate and fluorescein isothiocyanate are used.
Istotą wynalazku jest wieloprzedziałowy układ typu „kapsuła w kapsule” w formie podwójnej emulsji typu woda-olej-woda do równoczesnego przenoszenia związków hydrofilowych oraz lipofilowych, który posiada jednocześnie:The essence of the invention is a multi-compartment "capsule-in-capsule" system in the form of a water-oil-water double emulsion for the simultaneous transport of hydrophilic and lipophilic compounds, which simultaneously has:
a) ciekły rdzeń olejowy do przenoszenia związku lipofilowego zawierający olej wybrany z grupy obejmującej: kwas oleinowy, palmitynian izopropylu, kwasy tłuszczowe, ekstrakty i oleje pochodzenia naturalnego, zwłaszcza olej kukurydziany, olej lniany, olej sojowy, olej arganowy, lub ich mieszaniny, korzystnie kwas oleinowy,a) a liquid oil core for carrying a lipophilic compound containing an oil selected from the group consisting of: oleic acid, isopropyl palmitate, fatty acids, extracts and oils of natural origin, especially corn oil, linseed oil, soybean oil, argan oil, or mixtures thereof, preferably acid oleic,
b) umieszczoną w olejowym rdzeniu kapsułę lub wiele kapsuł z rdzeniem wodnym do przenoszenia związku hydrofilowego,b) a capsule or a plurality of capsules with a water core embedded in an oil core for carrying the hydrophilic compound;
c) otoczkę stabilizującą zarówno dla kapsuły z olejowym rdzeniem, jak i wewnętrznej z wodnym rdzeniem, składającą się z modyfikowanego hydrofobowo polisacharydu dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego,c) a stabilizing shell for both the capsule with an oil core and the inner capsule with an aqueous core, consisting of a hydrophobically modified polysaccharide of the dodecyl derivative of hyaluronic acid,
d) średnicę zewnętrznej kapsuły poniżej 1 pm i jest stabilna w roztworze wodnym.d) the outer capsule has a diameter of less than 1 µm and is stable in an aqueous solution.
Korzystnie w modyfikowanym hydrofobowo polisacharydzie stopień podstawienia hydrofobowych łańcuchów bocznych wynosi od 0,1 do 40%.Preferably, the hydrophobically modified polysaccharide has a degree of substitution of the hydrophobic side chains from 0.1 to 40%.
Korzystnie wytworzone otoczki stabilizujące kapsuły z olejowym rdzeniem, jak i kapsuły z wodnym rdzeniem (kapsuła wewnętrzna) składają się z modyfikowanego hydrofobowo hialuronianu sodu, Hy-C12, o wzorze:Preferably prepared shells stabilizing the capsules with the oil core and the capsules with the aqueous core (inner capsule) consist of hydrophobically modified sodium hyaluronate, Hy-C12, with the formula:
gdzie p jest liczbą całkowitą równą 5, a stosunek liczb m/(m+n) wynosi od 0,001 do 0,4.where p is an integer equal to 5 and the ratio of the numbers m / (m + n) is 0.001 to 0.4.
Korzystnie przenoszonym związkiem lipofilowym może być barwnik fluorescencyjny, rozpuszczalna w tłuszczach witamina lub hydrofobowa substancja lecznicza, a przenoszonym związkiem hydrofilowym może być barwnik fluorescencyjny, rozpuszczalna w wodzie witamina, białko, hydrofilowa substancja lecznicza.Preferably, the transferred lipophilic compound can be a fluorescent dye, a fat-soluble vitamin or a hydrophobic drug substance, and the transferred hydrophilic compound can be a fluorescent dye, a water-soluble vitamin, protein, hydrophilic drug substance.
Sposób otrzymywania układu typu „kapsuła w kapsule” do jednoczesnego przenoszenia związku lipofilowego i hydrofilowego, obejmuje następujące etapy:The method for preparing a "capsule-in-capsule" system for the simultaneous transfer of a lipophilic and a hydrophilic compound comprises the following steps:
a) miesza się fazę wodną z fazą olejową, przy czym stosunek objętościowy fazy wodnej i olejowej wynosi od 1:10 do 1:10000, korzystnie około 1:100,a) mixing the water phase with the oil phase, the volume ratio of the water phase and the oil phase being from 1:10 to 1: 10000, preferably about 1: 100,
PL 240 556 B1PL 240 556 B1
b) z powstałej mieszaniny uzyskuje się emulsję typu woda w oleju, W/O, (kapsuły z wodnym rdzeniem) poprzez oddziaływanie ultradźwiękami (sonikację) lub oddziaływanie mechaniczne, korzystnie mieszanie lub wytrząsanie,b) a water-in-oil, W / O emulsion is obtained from the resulting mixture (capsules with an aqueous core) by sonication or mechanical action, preferably by mixing or shaking,
c) powstałą emulsję W/O miesza się z fazą wodną przy czym stosunek objętościowy fazy emulsji W/O i fazy wodnej 1:10 do 1:10000, korzystnie około 1:100,c) the resulting W / O emulsion is mixed with the water phase, with a volume ratio of the W / O emulsion phase and the water phase of 1:10 to 1: 10000, preferably about 1: 100,
d) z powstałej mieszaniny uzyskuje się emulsję typu W/O/W (układ typu „kapsuła w kapsule”) poprzez oddziaływanie ultradźwiękami (sonikację) lub oddziaływanie mechaniczne, korzystnie mieszanie lub wytrząsanie, przy czym jako fazę wodną stosuje się roztwór wodny modyfikowanego hydrofobowo polisacharydu, dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego o pH w zakresie 2-12, stężeniu 0,1-30 g/L i sile jonowej 0,001-3 mol/dm3, natomiast faza olejowa zawiera olej wybrany z grupy obejmującej: kwas oleinowy, palmitynian izopropylu, kwasy tłuszczowe, oleje pochodzenia naturalnego, zwłaszcza olej lniany, olej sojowy, olej arganowy, lub ich mieszaniny, korzystnie kwas oleinowy, przy czym proces prowadzi się bez stosowania małocząsteczkowych surfaktantów.d) a W / O / W emulsion ("capsule-in-capsule" system) is obtained from the resulting mixture by sonication or mechanical action, preferably by mixing or shaking, with an aqueous solution of a hydrophobically modified polysaccharide being used as the aqueous phase , dodecyl derivative of hyaluronic acid with a pH in the range of 2-12, a concentration of 0.1-30 g / L and an ionic strength of 0.001-3 mol / dm 3 , while the oil phase contains an oil selected from the group consisting of: oleic acid, isopropyl palmitate, acids fatty oils of natural origin, especially linseed oil, soybean oil, argan oil, or mixtures thereof, preferably oleic acid, the process being carried out without the use of low molecular weight surfactants.
Korzystnie sonikację prowadzi się przez od 15 do 120 minut w temperaturze od 4°C do 40°C, korzystnie od 30 do 60 minut w temperaturze od 20 do 35°C, zwłaszcza przez 60 minut w temperaturze pokojowej dla otrzymania emulsji typu W/O i 30 minut w temperaturze pokojowej dla otrzymania emulsji typu W/O/W.Preferably, sonication is carried out for 15 to 120 minutes at a temperature of 4 ° C to 40 ° C, preferably for 30 to 60 minutes at a temperature of 20 to 35 ° C, especially 60 minutes at room temperature to obtain a W / O emulsion. and 30 minutes at room temperature to obtain a W / O / W emulsion.
Korzystnie sonikację impulsową prowadzi się o czasie impulsu dwukrotnie krótszym niż czas przerwy między kolejnymi impulsami.Preferably, pulse sonication is carried out with a pulse time twice as short as the pause time between successive pulses.
Korzystnie enkapsulowany związek lipofilowy zawarty jest w rdzeniu olejowym, a enkapsulowany związek hydrofilowy w rdzeniu wodnym kapsuł.Preferably, the encapsulated lipophilic compound is contained in the oil core and the encapsulated hydrophilic compound is contained in the aqueous core of the capsules.
Istotą wynalazku jest również zastosowanie wieloprzedziałowego układu zdefiniowanego powyżej do przenoszenia związków lipofilowych i związków hydrofilowych.The invention also relates to the use of a multi-compartment system as defined above for the transport of lipophilic compounds and hydrophilic compounds.
Korzystnie, związkiem lipofilowym może być barwnik fluorescencyjny, rozpuszczalna w tłuszczach witamina lub hydrofobowa substancja lecznicza, a związkiem hydrofilowym może być barwnik fluorescencyjny, rozpuszczalna w wodzie witamina, białko, hydrofilowa substancja lecznicza.Preferably, the lipophilic compound may be a fluorescent dye, a fat-soluble vitamin or a hydrophobic drug substance, and the hydrophilic compound may be a fluorescent dye, a water-soluble vitamin, protein, hydrophilic drug substance.
Zaletą opracowanego wynalazku jest możliwość uzyskania biozgodnej i stabilnej nanoformulacji zdolnej do jednoczesnego transportu związków hydrofilowych i lipofilowych w oddzielonych przestrzennie kompartmentach podwójnej nanokapsuły. Zabezpiecza to enkapsulowane związki przed degradacją, przedwczesnym uwolnieniem z nośnika oraz zbyt szybką eliminacją z układu, np. krwioobiegu. Znacznie rozszerza to zakres stosowalności opisanych układów, które cechują się dodatkowo prostotą preparatyki i niskimi nakładami finansowymi.The advantage of the developed invention is the possibility of obtaining a biocompatible and stable nanoformulation capable of simultaneous transport of hydrophilic and lipophilic compounds in spatially separated double nanocapsule compartments. This protects the encapsulated compounds against degradation, premature release from the carrier and too fast elimination from the system, e.g. bloodstream. This significantly extends the scope of applicability of the described systems, which are additionally characterized by simplicity of preparation and low financial outlays.
Nanokapsuła do równoczesnego przenoszenia związku lipofilowego i hydrofilowego oznacza wieloprzedziałowy układ typu „kapsuła w kapsule” w formie podwójnej emulsji typu woda-olej-woda do równoczesnego przenoszenia związków hydrofilowych oraz lipofilowych.Nanocapsule for the simultaneous transport of a lipophilic compound and a hydrophilic compound means a multi-compartment "capsule-in-capsule" system in the form of a water-oil-water double emulsion for the simultaneous transport of hydrophilic and lipophilic compounds.
Opis tabel i rysunków:Description of tables and figures:
Przedmiot wynalazku został uwidoczniony w przykładach oraz rysunkach, których wykaz zamieszczono poniżej:The subject of the invention has been shown in the examples and drawings, the list of which is presented below:
Fi g. 1 - przedstawia odwróconą emulsję otrzymaną przez zmieszanie preemulsji zawierającej wodę z kwasem oleinowym i wodno-etanolowego roztworu dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego (stosunek objętościowy woda:alkohol równy 2:3). Strzałkami zaznaczono duże pęcherzyki, które powstały w trakcie emulsyfikacji).Fig. 1 - shows an inverse emulsion obtained by mixing a pre-emulsion containing water with oleic acid and a water-ethanolic solution of the dodecyl derivative of hyaluronic acid (water: alcohol ratio 2: 3). Large bubbles formed during emulsification are marked with arrows.
Fi g. 2 - przedstawia pęcherzyki powstałe w trakcie otrzymywania odwróconej emulsji powstałej przez zmieszanie preemulsji zawierającej wodę z kwasem oleinowym i wodno-etanolowego roztworu dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego (stosunek objętościowy woda:alkohol równy 1:2).Fig. 2 - shows the bubbles formed during the preparation of an inverse emulsion made by mixing a pre-emulsion containing water with oleic acid and a water-ethanolic solution of the dodecyl derivative of hyaluronic acid (water: alcohol ratio equal to 1: 2).
Fi g. 3 - przedstawia odwróconą emulsję otrzymaną przez zmieszanie preemulsji zawierającej wodę z kwasem oleinowym i wodnego roztworu dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego po 1 (a) i 5 dniach (b) od wytworzenia.Fig. 3 - shows an inverted emulsion obtained by mixing a water-containing pre-emulsion with oleic acid and an aqueous solution of a dodecyl derivative of hyaluronic acid 1 (a) and 5 days (b) from preparation.
Fig. 4 - przedstawia rozkład rozmiarów cząstek odwróconej emulsji otrzymanej przez zmieszanie preemulsji zawierającej wodę z kwasem oleinowym i wodnego roztworu dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego (układ w dniu emulsyfikacji).Fig. 4 - shows the particle size distribution of an inverse emulsion obtained by mixing a water containing pre-emulsion with oleic acid and an aqueous solution of the dodecyl derivative of hyaluronic acid (system on the day of emulsification).
PL 240 556 B1PL 240 556 B1
Fig. 5 - przedstawia rozkład rozmiarów cząstek odwróconej emulsji otrzymanej przez zmieszanie preemulsji zawierającej wodę z kwasem oleinowym i wodnego roztworu dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego (5 dni po emulsyfikacji).Figure 5 - shows the particle size distribution of an inverse emulsion obtained by mixing a water containing pre-emulsion with oleic acid and an aqueous solution of a dodecyl derivative of hyaluronic acid (5 days after emulsification).
Fig. 6 - przedstawia mikrofotografię cryo-TEM cząstki odwróconej emulsji (W/O) otrzymanej przez zmieszanie preemulsji zawierającej wodę z kwasem oleinowym i wodnego ro ztworu dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego zawierającej wolframian(VI) sodu.Fig. 6 - is a cryo-TEM photomicrograph of an inverse emulsion (W / O) particle obtained by mixing a water-containing pre-emulsion with oleic acid and an aqueous solution of sodium tungstate containing dodecyl derivative of hyaluronic acid.
Fig. 7 - przedstawia rozkład rozmiarów cząstek podwójnej emulsji otrzymanej przez zmieszanie 0,4% objętościowego odwróconej emulsji zwierającej dodecylową pochodną kwasu hialuronowego znakowanego FITC z wodnym roztworem hialuronianu znakowanego RhBITC (układ w dniu emulsyfikacji).Figure 7 - Shows the particle size distribution of the double emulsion obtained by mixing 0.4 vol% inverse emulsion containing FITC-labeled dodecyl hyaluronic acid with aqueous RhBITC-labeled hyaluronan (system on the day of emulsification).
Fig. 8 - przedstawia rozkład rozmiarów cząstek podwójnej emulsji otrzymanej przez zmieszanie 0,4% objętościowego odwróconej emulsji zwierającej dodecylową pochodną kwasu hialuronowego znakowanego FITC z wodnym roztworem hialuronianu znakowanego RhBITC (układ po 7 dniach od emulsyfikacji).Figure 8 - Shows the particle size distribution of the double emulsion obtained by mixing 0.4 vol% inverse emulsion containing FITC-labeled dodecyl hyaluronic acid with aqueous RhBITC-labeled hyaluronan (7 days after emulsification system).
Fig. 9 - przedstawia zdjęcia z mikroskopu konfokalnego układu podwójnej emulsji otrzymanej przez zmieszanie 0,4% objętościowego odwróconej emulsji zwierającej dodecylową pochodną kwasu hialuronowego znakowanego FITC z wodnym roztworem hialuronianu znakowanego RhBITC - obserwacja w zbiorczym kanale (a) i w kanale FITC (b) (podziałka 5 μm).Fig. 9 - Shows confocal microscopic pictures of the double emulsion system obtained by mixing 0.4 vol% inverse emulsion containing FITC-labeled dodecyl hyaluronic acid with aqueous RhBITC-labeled hyaluronan - Observation in the bulk channel (a) and in the FITC channel (b) ( graduation 5 μm).
Fig. 10 - przedstawia mikrofotografię cryo-TEM cząstki podwójnej emulsji otrzymanej przez otrzymanej przez zmieszanie 0,4% objętościowego odwróconej emulsji zwierającej dodecylową pochodną kwasu hialuronowego znakowanego FITC i rozpuszczony wolframian(VI) sodu z wodnym roztworem hialuronianu znakowanego RhBITC.Fig. 10 - is a cryo-TEM photomicrograph of a double emulsion particle obtained by mixing 0.4 vol.% Inverse emulsion containing FITC-dodecyl hyaluronic acid derivative and dissolved sodium tungstate with aqueous RhBITC-labeled hyaluronate solution.
Fig. 11 - przedstawia rozkład rozmiarów cząstek podwójnej emulsji zawierającej kalceinę w wewnętrznej fazie wodnej.Fig. 11 - Shows the particle size distribution of the calcein-containing double emulsion in the inner aqueous phase.
Fig. 12 - przedstawia zdjęcia układu podwójnej emulsji z mikroskopu konfokalnego - obserwacja w zbiorczym kanale - nakładanie sygnału od kalceiny i rodaminy, którą zmodyfikowany był hialuronian (podziałka 10 μm).Fig. 12 - Confocal microscope pictures of the double-emulsion system - observation in the bulk channel - overlay of calcein and rhodamine signal, with which hyaluronan was modified (10 µm graduation).
Fig. 13 - przedstawia rozkład rozmiarów cząstek podwójnej emulsji otrzymanej przez zmieszanie 0,1% objętościowego odwróconej emulsji zwierającej dodecylową pochodną kwasu hialuronowego znakowanego FITC (stosunek objętościowy fazy wodnej i olejowej 1:30) z wodnym roztworem hialuronianu znakowanego RhBITC.Fig. 13 - Shows the particle size distribution of the double emulsion obtained by mixing 0.1% by volume of an inverse emulsion containing FITC-labeled dodecyl hyaluronic acid (1:30 oil / water phase ratio) with aqueous RhBITC-labeled hyaluronate.
Fig. 14 - przedstawia zdjęcia z mikroskopu konfokalnego podwójnej emulsji otrzymanej przez zmieszanie 0,1% objętościowego odwróconej emulsji zwierającej dodecylową pochodną kwasu hialuronowego znakowanego FITC (stosunek objętościowy fazy wodnej i olejowej 1:30) z wodnym roztworem hialuronianu znakowanego RhBITC. Obserwacja w kanale zbiorczym (a), w kanale FITC (b) oraz kanale TRITC (c) (podziałka 10 μm).Fig. 14 - Shows confocal microscopic photos of the double emulsion obtained by mixing 0.1% by volume of an inverse emulsion containing FITC-labeled dodecyl hyaluronic acid (1:30 oil / water phase ratio) with RhBITC-labeled hyaluronate aqueous solution. Observation in the collection channel (a), in the FITC channel (b) and in the TRITC channel (c) (10 μm division).
Fig. 15 - przedstawia rozkład rozmiarów cząstek podwójnej emulsji w czasie 11 tygodni od otrzymania układu typu W/O/W.Fig. 15 - Shows the particle size distribution of the double emulsion during 11 weeks from the receipt of the W / O / W type system.
Fig. 16 - przedstawia zestawienie wartości potencjałów dzeta i odchyleń standardowych (SD) mierzonych w dniu otrzymania układu podwójnej emulsji oraz po kolejnych 7, 14, 21, 28, 43, 59 i 79 dniach.Figure 16 is a summary of the zeta potentials and standard deviations (SDs) measured on the day the double emulsion system was obtained and after the following 7, 14, 21, 28, 43, 59 and 79 days.
Fig. 17 - przedstawia zdjęcia układu podwójnej emulsji z mikroskopu konfokalnego - obserwacja w zbiorczym kanale, tydzień 3 (górny panel) oraz tydzień 4 (dolny panel) (podziałka 5 μm).Fig. 17 - Confocal microscopy pictures of the double emulsion system - bulk channel observation, week 3 (upper panel) and week 4 (lower panel) (5 µm graduation).
Fig. 18 - przedstawia rozkład rozmiarów cząstek podwójnej emulsji zawierającej kalceinę w wewnętrznej fazie wodnej i czerwień Nilu w fazie olejowej.Fig. 18 - Shows the particle size distribution of the double emulsion containing calcein in the inner water phase and Nile Red in the oil phase.
Fig. 19 - przedstawia zdjęcia układu podwójnej emulsji zawierającej kalceinę w fazie wodnej i czerwień Nilu w fazie olejowej uzyskane za pomocą mikroskopu konfokalnego - obserwacja w kanale TRITC (a, czerwień Nilu), FITC (b, kalceina) i kanale zbiorczym (c) (podziałka 5 μm).Fig. 19 - shows pictures of a double emulsion system containing calcein in the water phase and Nile red in the oil phase obtained with a confocal microscope - observation in the TRITC (a, Nile red), FITC (b, calcein) and collecting channels (c) ( graduation 5 μm).
PL 240 556 B1PL 240 556 B1
Wynalazek ilustrują następujące przykłady wykonania, nie stanowiące jego ograniczenia.The invention is illustrated by the following non-limiting examples.
P r z y k ł a d IP r z k ł a d I
Otrzymywanie odwróconej emulsji typu woda w olejuPreparation of a water-in-oil inverse emulsion
Celem uzyskania odwróconej emulsji (typu W-O) zastosowano mieszaninę wodno-etanolową dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego. Obecność lotnego rozpuszczalnika organicznego miała umożliwić uzyskanie przez łańcuchy polimerowe rozwiniętej konformacji (celem umożliwienia powstania odwróconej emulsji). Rozpuszczalnik miał być następnie odparowany.In order to obtain an inverse emulsion (W-O type), a water-ethanol mixture of the dodecyl derivative of hyaluronic acid was used. The presence of a volatile organic solvent was to enable the polymer chains to obtain a developed conformation (to enable the formation of an inverted emulsion). The solvent was then to be evaporated off.
Przygotowano roztwór dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego (stopień podstawienia hydrofobowych łańcuchów bocznych wynosi od 4,5%) w soli fizjologicznej (stężenie ok 7,5 g/L). Roztwór o odczynie obojętnym zadano następnie etanolem i uzyskano mieszaninę o stosunku objętościowym równym 2:3.A solution of the dodecyl derivative of hyaluronic acid (the degree of substitution of hydrophobic side chains is 4.5%) in physiological saline (concentration about 7.5 g / L) was prepared. The neutral solution was then treated with ethanol to give a mixture in a 2: 3 volume ratio.
Równocześnie przygotowano preemulsję przez zmieszanie kwasu oleinowego i wodnego roztworu chlorku sodu (c=0,15 mol/dm3) w stosunku objętościowym 100:1. Układ wytrząsano przez 10 minut na wytrząsarce typu vortex oraz sonikowano przez 30 minut w łaźni ultradźwiękowej (tryb impulsowy, 1 s ultradźwięków, 2 s przerwy) w temperaturze pokojowej. Sonikacja doprowadziła do powstania mlecznobiałej emulsji.Simultaneously, a pre-emulsion was prepared by mixing oleic acid and an aqueous sodium chloride solution (c = 0.15 mol / dm 3 ) in a 100: 1 volume ratio. The setup was shaken for 10 minutes on a vortex shaker and sonicated for 30 minutes in an ultrasonic bath (pulse mode, 1s son, 2s rest) at room temperature. The sonication led to the formation of a milky white emulsion.
Do preemulsji stopniowo przez 5 min wkraplano wodno-etanolowy roztwór dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego. Całość sonikowano przez 30 min w trybie impulsowym w otwartej buteleczce celem odparowania etanolu.A water-ethanolic solution of the dodecyl derivative of hyaluronic acid was gradually added dropwise to the pre-emulsion over 5 min. This was sonicated for 30 min in open flask pulse mode to evaporate the ethanol.
Rozkłady rozmiarów zmierzone z wykorzystaniem dynamicznego rozpraszania światła (DLS) wskazują na uzyskanie układu zawierającego wiele frakcji cząstek. Potencjał dzeta (ξ) stanowiący o stabilności układu był niemożliwy do mierzenia (bardzo niestabilne pomiary). Ponadto w buteleczce widoczne były sferyczne pęcherzyki o średnicach przekraczających 1 mm (Fig. 1).The size distributions measured using dynamic light scattering (DLS) indicate a multi-fraction system. The zeta potential (ξ) determining the stability of the system was impossible to measure (very unstable measurements). Moreover, spherical bubbles with diameters exceeding 1 mm were visible in the bottle (Fig. 1).
P r z y k ł a d IIP r z x l a d II
Otrzymywanie odwróconej emulsji typu woda w oleju po zmniejszeniu zawartości fazy wodnej w mieszaninie wodno-etanolowePreparation of an inverse water-in-oil emulsion after reducing the water phase content in the water-ethanol mixture
Przygotowano preemulsję jak w przykładzie I. Dodawano do niej stopniowo wodno-etanolowy roztwór dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego, z tą różnicą, że stosunek objętościowy fazy wodnej i etanolu wynosił 1:2.A pre-emulsion was prepared as in Example I. A water-ethanolic solution of the dodecyl derivative of hyaluronic acid was gradually added thereto, except that the volume ratio of the aqueous phase to ethanol was 1: 2.
Układ sonikowano w podwyższonej temperaturze w celu odparowania etanolu (ok. 34°C). Początkowo w oleju widoczna była biała zawiesina, która po wprowadzeniu układu do kuwety do pomiarów metodą DLS przekształcała się w pęcherzyki o średnicach przekraczających 1 mm (Fig. 2).The system was sonicated at an elevated temperature to evaporate the ethanol (approx. 34 ° C). Initially, the oil showed a white suspension which, upon insertion into the DLS cuvette, transformed into bubbles larger than 1 mm in diameter (Fig. 2).
Po pomiarze rozmiarów w aparacie do DLS w kuwecie obserwowano 2 duże krople wody. Potencjału dzeta nie udało się zmierzyć.After measuring the dimensions in a DLS apparatus, 2 large drops of water were observed in the cuvette. The zeta potential has not been measured.
Na podstawie wyników zaprezentowanych w przykładzie I i II wnioskowano o negatywnym wpływie etanolu na powstawanie emulsji; kolejnym kroku wyeliminowano alkohol z układu.Based on the results presented in Examples 1 and 2, it was concluded that ethanol had a negative effect on the formation of emulsions; in the next step, alcohol was eliminated from the system.
P r z y k ł a d IIIP r x l a d III
Otrzymywanie odwróconej emulsji typu woda w oleju po wyeliminowaniu alkoholu z układuPreparation of a water-in-oil inverse emulsion after eliminating the alcohol from the system
Odwróconą emulsję typu woda w oleju przygotowano przez zmieszanie roztworu dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego (c = 4,7 g/L) w soli fizjologicznej (cNaCl = 0,15 mol/dm3) z kwasem oleinowym w stosunku objętościowym 1:100. Układ wytrząsano i sonikowano analogicznie jak w przykładzie I, przy czym sonikacja trwała 1 godzinę.A water-in-oil inverse emulsion was prepared by mixing a solution of the dodecyl derivative of hyaluronic acid (c = 4.7 g / L) in physiological saline (cNaCl = 0.15 mol / dm 3 ) with oleic acid in a volume ratio of 1: 100. The system was shaken and sonicated in the same way as in Example 1, but the sonication lasted for 1 hour.
Otrzymano mlecznobiałą emulsję, a jej stabilność mierzono w dniu otrzymania oraz 5 dni od emulsyfikacji. Badania DLS wskazały na wysoką stabilność wyjściowego układu (ξ = -33 ± 21,7 mV). Rozmiary cząstek charakteryzowały się wąskim rozkładem. Po 5 dniach rozkład opisujący wielkość cząstek uległ przesunięciu w stronę mniejszych cząstek, pojawiło się także drugie niewielkie maksimum. Po 5 dniach zmętnienie próbki znacząco zmalało (Fig. 3, Fig. 4, Fig. 5). Połączenie obserwacji wizualnej z danymi DLS pozwoliło wysnuć wniosek o zmniejszeniu zawartości cząstek po upływie 5 dni, co sugeruje otrzymanie układu składającego się z elementów stabilnych i takich ulegających destabilizacji. Ze względu na aplikacyjność taka sytuacja nie jest korzystna, prowadzi bowiem do strat materiału i powstawaniu układu o niekontrolowanym składzie. Z tego względu w kolejnym etapie układ odwróconej emulsji od razu poddawano kolejnym krokom prowadzącym do powstania podwójnej emulsji.A milky white emulsion was obtained and its stability was measured on the day it was received and 5 days after the emulsification. DLS tests showed high stability of the starting system (ξ = -33 ± 21.7 mV). The particle sizes were characterized by a narrow distribution. After 5 days, the distribution describing the particle size shifted towards the smaller particles, and there was also a second small maximum. After 5 days, the turbidity of the sample had significantly decreased (Fig. 3, Fig. 4, Fig. 5). Combining the visual observation with DLS data led to the conclusion that the particle content was reduced after 5 days, suggesting a system consisting of stable and destabilized elements. Due to the applicability, such a situation is unfavorable, as it leads to material losses and the formation of a system with an uncontrolled composition. Therefore, in the next step, the inverse emulsion system was immediately subjected to the subsequent steps leading to the formation of a double emulsion.
PL 240 556 B1PL 240 556 B1
P r z y k ł a d IVP r x l a d IV
Obrazowanie odwróconej emulsji techniką krioskopowej transmisyjnej mikroskopii elektronowejImaging of inverse emulsions by cryoscopic transmission electron microscopy
Przygotowano odwróconą emulsję zgodnie z opisem przedstawionym w przykładzie III, przy czym wewnętrzna faza wodna zawierała wolframian(VI) sodu celem wzmocnienia kontrastu podczas obrazowania. Po dwóch dniach poddano ją obrazowaniu techniką transmisyjnej mikroskopii elektronowej z przystawką krioskopową. Analiza otrzymanych obrazów potwierdza powstanie sferycznych cząstek o średnicy ok. 250 nm (Fig. 6).An inverse emulsion was prepared as described in Example 3, with the internal aqueous phase containing sodium tungstate to enhance contrast during imaging. After two days, it was subjected to imaging by transmission electron microscopy with a cryoscopic attachment. The analysis of the obtained images confirms the formation of spherical particles with a diameter of approx. 250 nm (Fig. 6).
P r z y k ł a d VP r z k ł a d V
Otrzymywanie podwójnej emulsjiPreparation of a double emulsion
Otrzymano odwróconą emulsję jak w przykładzie III z tym, że użyto dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego znakowanego izotiocyjanianem fluoresceiny (FITC) o stężeniu 2 g/L, zaś sonikacja trwała 30 minut.An inverse emulsion was prepared as in Example 3, except that a 2 g / L fluorescein isothiocyanate-labeled dodecyl hyaluronic acid derivative (FITC) was used and sonication was performed for 30 minutes.
Podwójną emulsję otrzymano przez zmieszanie odwróconej emulsji stanowiącej 0,4% objętościowego mieszaniny z dodecylową pochodną kwasu hialuronowego znakowanego izotiocyjanianem rodaminy (RhBITC) o stężeniu 1 g/L w soli fizjologicznej. Układ wytrząsano przez 10 minut na wytrząsarce typu vortex, a następnie sonikowano w temperaturze pokojowej przez 30 minut zgodnie z parametrami opisanymi w przykładzie I. Analiza rozkładów wielkości cząstek z pomiarów DLS wskazuje na obecność cząstek o średnicy 500-600 nm, zaś pomiar potencjału dzeta potwierdza stabilność otrzymanego układu (ξ = -44,6 ± 3,33 mV). Po 7 dniach obserwacji nie stwierdzono istotnych zmian rozmiarów cząstek, nie zaobserwowano także istotnej zmiany wartości potencjału dzeta (ξ = -44,6 ± 3,08 mV) (Fig. 7, Fig. 8).The double emulsion was prepared by mixing an inverse emulsion of 0.4% by volume of the mixture with rhodamine isothiocyanate-labeled dodecyl hyaluronic acid (RhBITC) at a concentration of 1 g / L in saline. The system was shaken for 10 minutes on a vortex shaker and then sonicated at room temperature for 30 minutes according to the parameters described in Example 1. Analysis of the particle size distributions from DLS measurements indicated the presence of particles with a diameter of 500-600 nm, and the measurement of the zeta potential confirms stability of the obtained system (ξ = -44.6 ± 3.33 mV). After 7 days of observation, no significant changes in particle size were found, and no significant change in the zeta potential value was observed (ξ = -44.6 ± 3.08 mV) (Fig. 7, Fig. 8).
P r z y k ł a d VIP r x l a d VI
Obrazowanie podwójnej emulsji techniką mikroskopii konfokalnejImaging of the double emulsion by confocal microscopy
Znakowane polisacharydy zostały użyte w celu obrazowania struktur otrzymanych w przykładzie V z użyciem mikroskopu konfokalnego. Charakterystyka spektralna pozwala na wzbudzenie obu barwników laserami o różnej długości fali (488 nm i 561 nm), a także obserwacje emisji w innych kanałach mikroskopu. Potwierdzono, że nie dochodzi do wzbudzenia FITC laserem odpowiadającemu RhB (i odwrotnie), nie obserwowano również sygnału RhB w kanale FITC, ani sygnału FITC w kanale odpowiadającym emisji rodaminy. Zastosowanie do pierwszej emulsji typu W-O pochodnej zawierającej FITC, oraz pochodnej zawierającej RhBITC w drugim etapie, do wytwarzania podwójnej emulsji pozwoliło na zobrazowanie otrzymanych struktur i potwierdzenie ich morfologii.The labeled polysaccharides were used to visualize the structures obtained in Example 5 using a confocal microscope. Spectral characteristics allow both dyes to be excited with lasers of different wavelengths (488 nm and 561 nm), as well as the observation of emissions in other microscope channels. It was confirmed that there was no excitation of FITC with a laser corresponding to RhB (and vice versa), and no RhB signal was observed in the FITC channel, and no FITC signal was observed in the channel corresponding to rhodamine emission. The use of the FITC-containing derivative and the RhBITC-containing derivative in the second step for the preparation of the double emulsion for the first W-O-type emulsion made it possible to visualize the structures obtained and confirm their morphology.
Zdjęcia z mikroskopu konfokalnego (obiektyw 100x, lasery 488 nm i 561 nm) potwierdzają powstanie okładu „warstwowego” - obserwacja sygnału ze wszystkich kanałów i z kanału charakterystycznego dla FITC (Fig. 9).Pictures from a confocal microscope (100x objective, 488 nm and 561 nm lasers) confirm the formation of a "layered" wrap - observation of the signal from all channels and from the channel characteristic for FITC (Fig. 9).
P r z y k ł a d VIIP r x l a d VII
Obrazowanie podwójnej emulsji techniką krioskopowej transmisyjnej mikroskopii elektronowejImaging of the double emulsion by cryoscopic transmission electron microscopy
Przygotowano podwójną emulsję zgodnie z opisem przedstawionym w przykładzie V, przy czym wewnętrzna faza wodna zawierała wolframian(VI) sodu celem wzmocnienia kontrastu podczas obrazowania. Po dwóch dniach próbkę analizowano z wykorzystaniem transmisyjnego mikroskopu elektronowego z przystawką krioskopową. Analiza otrzymanych obrazów potwierdza powstanie sferycznych cząstek o budowie warstwowej o średnicy ok. 600 nm (Fig. 10).A double emulsion was prepared as described in Example 5, with the internal aqueous phase containing sodium tungstate to enhance contrast during imaging. After two days, the sample was analyzed using a transmission electron microscope with a cryoscopic attachment. The analysis of the obtained images confirms the formation of spherical particles with a layered structure with a diameter of approx. 600 nm (Fig. 10).
P r z y k ł a d VIIIP r x l a d VIII
Enkapsulacja hydrofilowego barwnika w wewnętrznej fazie wodnejEncapsulation of a hydrophilic dye in the inner water phase
Otrzymano podwójną emulsję analogicznie jak w przykładzie V, przy czym do przygotowania odwróconej emulsji użyto wodnego roztworu dodecylowej pochodnej kwasu hialuronowego o stężeniu 4,5 g/L w soli fizjologicznej zmieszanego z roztworem kalceiny (ckalc= 2 g/L) w stosunku objętościowym 3:1. Analiza rozmiarów cząstek przeprowadzona na podstawie wyników z pomiarów DLS potwierdza powstanie stabilnej formulacji (ξ = -32,5 ± 6,58 mV) zawierającej cząstki o średnicach hydrodynamicznych ok. 600 nm (Fig. 11). Stwierdzono brak wpływu enkapsulowanej substancji na właściwości fizykochemiczne układu koloidalnego.A double emulsion was obtained in the same way as in Example 5, but an aqueous solution of the dodecyl derivative of hyaluronic acid with a concentration of 4.5 g / L in saline mixed with a calcein solution (ckalc = 2 g / L) in a volume ratio of 3 was used to prepare the inverse emulsion: 1. The particle size analysis carried out on the basis of the DLS measurement results confirms the formation of a stable formulation (ξ = -32.5 ± 6.58 mV) containing particles with hydrodynamic diameters of approx. 600 nm (Fig. 11). There was no effect of the encapsulated substance on the physicochemical properties of the colloidal system.
Claims (10)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL240556B1 true PL240556B1 (en) | 2022-04-25 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20200345651A1 (en) | Nanocapsule for delivery of lipophilic compound and process of preparation thereof | |
| Khandelia et al. | Gold nanoparticle–protein agglomerates as versatile nanocarriers for drug delivery | |
| JP2006508126A (en) | Protein-stabilized liposome formulation of pharmaceutical formulation | |
| JP2014221802A (en) | Aqueous-core lipid nanocapsule for encapsulating hydrophilic and/or lipophilic molecule | |
| Lee et al. | Hyaluronic acid-coated solid lipid nanoparticles to overcome drug-resistance in tumor cells | |
| Karabasz et al. | Cytotoxic activity of paclitaxel incorporated into polyelectrolyte nanocapsules | |
| Üstündağ-Okur et al. | Modification of solid lipid nanoparticles loaded with nebivolol hydrochloride for improvement of oral bioavailability in treatment of hypertension: Polyethylene glycol versus chitosan oligosaccharide lactate | |
| Rehman et al. | Lipid nanocarriers: Formulation, properties, and applications | |
| CN101011355A (en) | Vitamin e succinate stabilized pharmaceutical compositions, methods for the preparation and the use thereof | |
| JP7465876B2 (en) | Multicompartment systems of nanocapsule-in-nanocapsule type for the encapsulation of lipophilic and hydrophilic compounds and related manufacturing methods | |
| Kumar et al. | Lipid nanocapsule: a novel approach to drug delivery system formulation development | |
| Abdolahpour et al. | Development of doxorubicin-loaded nanostructured lipid carriers: preparation, characterization, and in vitro evaluation on MCF-7 cell line | |
| PL240556B1 (en) | The nanocapsule and the method of its production for the simultaneous transport of a lipophilic and hydrophilic compound and its application | |
| TWI483747B (en) | Drug carrier and preparation method thereof | |
| Khandbahale et al. | Nanoparticle-A review | |
| Cella et al. | Calcium stearate as an effective alternative to poly (vinyl alcohol) in poly-lactic-co-glycolic acid nanoparticles synthesis | |
| Fan et al. | Application of abdominal imaging based on nano drug delivery system for diagnosis and treatment of liver cancer | |
| US20160199308A1 (en) | Magnetic nano core-shell capsule and application thereof | |
| Frézard et al. | Liposome-encapsulated neuropeptides for site-specific microinjection | |
| CN110237050A (en) | A kind of Combretastatin nanoparticle and preparation method thereof | |
| Shahiwala et al. | Parenteral drug delivery systems | |
| JP2012102043A (en) | Method for producing univesicular liposome, univesicular liposome dispersion and dry powder thereof, and method for producing the univesicular liposome dispersion and dry powder thereof | |
| Kalluri et al. | Nanocapsules novel drug delivery system: A review | |
| KR101983653B1 (en) | Pharmaceutical carrier compositions for intra-articular injection | |
| Curry et al. | A comparison of emulsion-based and electrosprayed particle architectures to sustain the release of small hydrophilic agents |