PL236836B1

PL236836B1 - 1-Cinnamoyl-2-hydroxy-sn-glycero-3-phosphocholine and method of preparing 1-cinnamoyl-2-hydroxy-sn-glycero-3-phosphocholine

Info

Publication number: PL236836B1
Application number: PL426426A
Authority: PL
Inventors: Anna Gliszczyńska; Marta Czarnecka
Original assignee: Wrocław University Of Environmental And Life Sciences
Priority date: 2018-07-24
Filing date: 2018-07-24
Publication date: 2021-02-22
Also published as: PL426426A1

Abstract

Zgłoszenie dotyczy fosfolipidowej pochodnej kwasu cynamonowego, o wzorze 3 oraz sposobu jej otrzymywania na drodze reakcji sn-glicero-3-fosfocholiny (GPC) i tlenku dibutylocyny (DBTO) rozpuszczonych w bezwodnym 2-propanolu z chlorku kwasu cynamonowego w obecności trietyloaminy (TEA). Przedstawione rozwiązanie może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym i kosmetycznym.The application relates to a phospholipid cinnamic acid derivative of the formula 3 and a method for its preparation by the reaction of sn-glycero-3-phosphocholine (GPC) and dibutyltin oxide (DBTO) dissolved in anhydrous 2-propanol from cinnamic acid chloride in the presence of triethylamine (TEA). The presented solution can be used in the pharmaceutical and cosmetic industries.

Description

Opis wynalazkuDescription of the invention

Przedmiotem wynalazku jest fosfolipidowa pochodna 1-cynamonoilo-2-hydroksy- sn-glicero-3fosfocholina, o wzorze 3, przedstawionym na rysunku oraz sposób jej otrzymywania.The subject of the invention is a phospholipid derivative of 1-cinnamoyl-2-hydroxy-sn-glycero-3-phosphocholine, of formula III, shown in the drawing, and the method of its preparation.

Lizofosfatydylocholina, o wzorze 3, może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym między innymi jako środek wspomagający terapię chorób nowotworowych, a także w przemyśle kosmetycznym jako składnik formulacji kosmetycznych.Lysophosphatidylcholine, of the formula 3, can be used in the pharmaceutical industry, inter alia, as an adjuvant in the therapy of neoplastic diseases, as well as in the cosmetics industry as a component of cosmetic formulations.

Kwas cynamonowy jest związkiem naturalnym, występującym w cynamonie wonnym (Cinnamomum cassia) (Morozumi, 1978, Lakshmi, 2009), źeń-szeniu (Panax ginseng) i szałwii czerwonej (Danshen) (Li, 2008). Jak większość kwasów fenolowych wykazuje szereg prozdrowotnych właściwości. Kwas cynamonowy jest popularny ze względu na właściwości zapachowe (Hoskins, 1984) oraz aktywność przeciwutleniającą (Avanesyan i in., Pharmaceutical Chemistry Journal, 2009, 43, s. 249) i antybakteryjną (Heleno i in., Food and Chemical Toxicology, 2013, 58, s. 95). Jest również znanym związkiem o właściwościach przeciwnowotworowym. Liu i wsp. udowodnili, że kwas cynamonowy działa cytostatycznie względem komórek glejaka (A175, U251), czerniaka (MEL 1011, A375(M), SKMEL 28), raka prostaty (PC3(M), Du145, LNCaP) i raka płuc (A549) (Liu, 1995), natomiast Brozlic i wsp. potwierdzili jego działanie hamujące na hydrogenazę 173-hydroksysteroidową typu 5 (AKR1C3), co może wskazywać na potencjalne możliwości wykorzystania omawianego związku również w leczeniu nowotworów hormonozależnych (Brozic, 2006).Cinnamic acid is a natural compound found in the aromatic cinnamon (Cinnamomum cassia) (Morozumi, 1978, Lakshmi, 2009), ginseng (Panax ginseng) and red sage (Danshen) (Li, 2008). Like most phenolic acids, it has a number of health-promoting properties. Cinnamic acid is popular for its aromatic properties (Hoskins, 1984) and its antioxidant (Avanesyan et al., Pharmaceutical Chemistry Journal, 2009, 43, p. 249) and antibacterial (Heleno et al., Food and Chemical Toxicology, 2013, 58, p. 95). It is also a known compound with anti-cancer properties. Liu et al. Proved that cinnamic acid is cytostatic against glioma cells (A175, U251), melanoma (MEL 1011, A375 (M), SKMEL 28), prostate cancer (PC3 (M), Du145, LNCaP) and lung cancer ( A549) (Liu, 1995), while Brozlic et al. Confirmed its inhibitory effect on 173-hydroxysteroid hydrogenase type 5 (AKR1C3), which may indicate the potential use of the compound in the treatment of hormone-dependent neoplasms (Brozic, 2006).

Nie jest znana lizofosfatydylocholina zawierająca kwas cynamonowy pozycji sn -1 i grupę hydroksylową w pozycji sn-2.There is no known lysophosphatidylcholine containing cinnamic acid in the sn -1 position and a hydroxyl group in the sn-2 position.

Celem wynalazku było opracowanie metody otrzymywania nowej lizofosfatydylocholiny zawierającej cząsteczkę kwasu cynamonowego w pozycji sn -1 fosfatydylocholiny, która pełni w tym wypadku rolę nośnika aktywnego biologicznie kwasu ułatwiając jego wnikanie do komórek żywych, zwiększając biodostępność w układach biologicznych.The aim of the invention was to develop a method of obtaining a new lysophosphatidylcholine containing a cinnamic acid molecule in the sn -1 position of phosphatidylcholine, which in this case acts as a carrier of a biologically active acid, facilitating its penetration into living cells, increasing bioavailability in biological systems.

Istotą wynalazku jest 1-cynamonoilo-2-hydroksy- sn-glicero-3-fosfocholina przedstawiona na rysunku oraz sposób jej otrzymywania.The essence of the invention is 1-cinnamoyl-2-hydroxy-sn-glycero-3-phosphocholine shown in the drawing and the method of its preparation.

Istotą sposobu otrzymywania lizofosfatydylocholiny, jaką jest 1-cynamonoilo-2-hydroksy-sn-glicero-3-fosfocholina, z cząsteczką kwasu cynamonowego jest to, że mieszaninę sn-glicero-3-fosfocholiny (GPC) i tlenku dibutylocyny (DBTO) rozpuszczonych w bezwodnym 2-propanolu poddaje się reakcji z chlorkiem kwasu cynamonowego, również rozpuszczonym w propan-2-olu, w obecności trietyloaminy (TEA). Całość miesza się przez co najmniej 1 godzinę w temperaturze wrzenia rozpuszczalnika, a następnie wydziela powstały produkt i oczyszcza go za pomocą chromatografii kolumnowej.The essence of the method of obtaining lysophosphatidylcholine, which is 1-cinnamoyl-2-hydroxy-sn-glycero-3-phosphocholine, with a molecule of cinnamic acid is that a mixture of sn-glycero-3-phosphocholine (GPC) and dibutyltin oxide (DBTO) dissolved in anhydrous 2-propanol is reacted with cinnamic acid chloride, also dissolved in propan-2-ol, in the presence of triethylamine (TEA). The mixture is stirred for at least 1 hour at the reflux temperature of the solvent, and then the resulting product is isolated and purified by column chromatography.

Sposób według wynalazku, objaśniony jest bliżej na przykładzie wykonania.The method according to the invention is explained in more detail using an exemplary embodiment.

P r z y k ł a d 1.P r z k ł a d 1.

Do kolby okrągłodennej zawierającej 12 cm³ 2-propanol dodaje się 257 mg (1 mmol) osuszonej sn-glicero-3-fosfocholiny (GPC) o wzorze 1 oraz 249 mg (1 mmol) tlenku dibutylocyny (DBTO) i całość ogrzewa się w temperaturze wrzenia rozpuszczalnika przez 1 godzinę. Po tym czasie mieszaninę reakcyjną ochładza się i dodaje trietyloaminę (TEA) (242 mg, 2,4 mmol) oraz 409 mg (2,4 mmol) chlorku kwasu cynamonowego rozpuszczonego w 5 cm³ bezwodnego 2-propanolu. Zawiesinę miesza się intensywnie w temperaturze pokojowej w atmosferze N2 przez 1 godzinę. Po tym czasie mieszaninę poreakcyjną odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem na lejku Shotta przez warstwę celitu, a następnie odparowuje się rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym stosując jako eluent mieszaninę rozpuszczalników CHCh:MeOH:H2O, 65:25:4 (v/v/v). Otrzymuje się 259 mg (0.67 mmol) 1-cynamonoilo-2-hydroksy- sn-glicero-3-fosfocholinę z wydajnością 67% w postaci mazistej substancji.To a round bottom flask containing 12 cm ^{3 of} 2-propanol was added 257 mg (1 mmol) of the dried sn-glycero-3-phosphocholine (GPC) of formula 1, and 249 mg (1 mmol) of dibutyltin oxide (DBTO) and the mixture heated at boiling the solvent for 1 hour. After this time the reaction was cooled and triethylamine (TEA) (242 mg, 2.4 mmol) and 409 mg (2.4 mmol) of cinnamic acid chloride dissolved in 5 cm ³ of anhydrous 2-propanol. The suspension is vigorously stirred at room temperature under N2 atmosphere for 1 hour. After this time, the reaction mixture was filtered under reduced pressure on a Shott funnel through a celite pad, and then the solvent was evaporated under reduced pressure. The crude product was purified by column chromatography on silica gel using a solvent mixture of CHC3: MeOH: H2O 65: 25: 4 (v / v / v) as the eluent. 259 mg (0.67 mmol) of 1-cinnamoyl-2-hydroxy-sn-glycero-3-phosphocholine are obtained with a yield of 67% as a greasy substance.

Współczynnik podziału (Rf) w cienkowarstwowej chromatografii cieczowej wyniósł 0.17 (CHCl3:MeOH:H2O, 65:25:4 (v/v/v)).The partition coefficient (Rf) in thin layer liquid chromatography was 0.17 (CHCl3: MeOH: H2O, 65: 25: 4 (v / v / v)).

Dane spektroskopowe otrzymanego związku, którym jest 1-cynamonoilo-2-hydroksy-sn-glicero3-fosfocholina, są następujące:The spectroscopic data of the obtained compound, which is 1-cinnamoyl-2-hydroxy-sn-glycero-3-phosphocholine, are as follows:

1H NMR (600 MHz, CDCI3/CD3OD 2:1 (v/v)), δ: 3,01 (s, 9H, - N(CH3)3), 3,44 (m, 2H, ΟΚ2-β), 3,733,79 (dwa m, 3H, H-2', CH2-3'), 3,85 (m, 1H, -OH), 4,00-4,10 (dwa m, 4H, CH2-a, CH2-1'), 6,25 (d, J = 16,0 Hz, 1H, H-2), 7,16 (m, 3H, H-3, H-4, H-5), 7,31 (m, 2H, H-2, H-6), 7,48 (d, J = 16,0 Hz, 1H, H-3).1H NMR (600 MHz, CDCl3 / CD3OD 2: 1 (v / v)), δ: 3.01 (s, 9H, - N (CH3) 3), 3.44 (m, 2H, ΟΚ2-β), 3.733.79 (two m, 3H, H-2 ', CH2-3'), 3.85 (m, 1H, -OH), 4.00-4.10 (two m, 4H, CH2-a, CH2 -1 '), 6.25 (d, J = 16.0 Hz, 1H, H-2), 7.16 (m, 3H, H-3, H-4, H-5), 7.31 ( m, 2H, H -2, H-6), 7.48 (d, J = 16.0 Hz, 1H, H-3).

PL 236 836 B1 ¹³C NMR (151 MHz, CDCI3/CD3OD 2:1 (v/v)) δ: 53,57, 53,60, 53,62 ((-N(CH3)3), 58,97 (C-a), 64,72 (C-1'), 65,88 (C-β), 66,60 (C-3¹), 68,17 (C- 2'), 116,85 (C-2), 127,68, (C-2, C-6), 128,50, 128,53 (C-3'', C-5), 130,16 (C-4), 133,72 (C-1), 145,27 (C-3), 166,91 (C-1). ¹³ C NMR (151 MHz, CDCl3 / CD3OD 2: 1 (v / v)) δ: 53.57, 53.60, 53.62 ((-N (CH3) 3), 58.97 ( Ca), 64.72 (C-1 '), 65.88 (C-β), 66.60 (C-3 ¹ ), 68.17 (C-2'), 116.85 (C-2) , 127.68, (C-2, C-6), 128.50, 128.53 (C-3 ", C-5), 130.16 (C-4), 133.72 (C-1 ), 145.27 (C-3), 166.91 (C-1).

³¹P NMR (243 MHz, CDCI3/CD3OD 2:1 (v/v)) δ: -1,26. ³¹ P NMR (243 MHz, CDCl3 / CD3OD 2: 1 (v / v)) δ: -1.26.

Claims

Patent claims

1. Cinnamoyl-2-hydroxy-sn-glycero-3-phosphocholine of the formula 3 shown in the figure.

Method for the preparation of 1-cinnamoyl-2-hydroxy-sn-glycero-3-phosphocholine, characterized in that the mixture of sn-glycero-3-phosphocholine (GPC) of formula 1 and dibutyl tin oxide (DBTO) dissolved in anhydrous 2-propanol react with cinnamic acid chloride of formula 2, also dissolved in propan-2-ol, in the presence of triethylamine (TEA), stirring for at least 1 hour at the reflux temperature of the solvent, and then isolating the resulting product 1-cinnamoyl -2-hydroxy-sn-glycero-3-phosphocholine of formula 3 and purifies it by column chromatography.