PL225791B1 - Pożywka do namnażania lawendy wąskolistnej odmiany Munstead - Google Patents

Pożywka do namnażania lawendy wąskolistnej odmiany Munstead

Info

Publication number
PL225791B1
PL225791B1 PL408906A PL40890614A PL225791B1 PL 225791 B1 PL225791 B1 PL 225791B1 PL 408906 A PL408906 A PL 408906A PL 40890614 A PL40890614 A PL 40890614A PL 225791 B1 PL225791 B1 PL 225791B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
medium
amount
lavender
munstead
multiplication
Prior art date
Application number
PL408906A
Other languages
English (en)
Other versions
PL408906A1 (pl
Inventor
Dominika Andrys
Danuta Kulpa
Original Assignee
Zachodniopomorski Univ Tech W Szczecinie
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zachodniopomorski Univ Tech W Szczecinie filed Critical Zachodniopomorski Univ Tech W Szczecinie
Priority to PL408906A priority Critical patent/PL225791B1/pl
Publication of PL408906A1 publication Critical patent/PL408906A1/pl
Publication of PL225791B1 publication Critical patent/PL225791B1/pl

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

Pożywka do namnażania roślin lawendy wąskolistnej odmiany Munstead w kulturach tkankowych zawierająca pożywkę standardową MS oraz regulator wzrostu, kinetynę, charakteryzuje się tym, że na jeden dm3 pożywki standardowej MS zawiera 2 mg kinetyny, 0,2 mg kwasu indolilo-3-octowego oraz 0,2 mg kwasu jasmonowego.

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest pożywka do namnażania lawendy wąskolistnej odmiany Munstead w warunkach kultur tkankowych (in vitro).
Na przestrzeni ostatnich lat poszukuje się coraz to nowszych możliwości pozyskania i wykorzystania naturalnych substancji czynnych, inaczej metabolitów wtórnych, pochodzenia roślinnego. Met abolity wtórne są produkowane przez rośliny często w bardzo niewielkich ilościach albo w szczególnych momentach rozwojowych na przykład w okresie kwitnienia. Produkowane są również pod wpływem warunków stresogennych np. w odpowiedzi na atak patogenów lub w wyniku obecności pewnych związków. Metodą pozwalającą na bardzo wydajną produkcję metabolitów wtórnych, w sterylnych, kontrolowanych warunkach, jest metoda roślinnych kultur tkankowych in vitro.
Jedną z możliwości wykorzystania metabolitów jest ich użycie w różnych produktach jako związków konserwujących. Głównym zadaniem konserwantu jest przedłużenie trwałości produktu, czyli ochrona przed jego zepsuciem, wywołanym przez dostępność powietrza oraz mikroorganizmy. Metabolity wtórne w postaci ekstraktów, a także olejków eterycznych są wykorzystywane w przemyśle farmaceutycznym, kosmetycznym, a niekiedy także w spożywczym.
Skład ekstraktów oraz olejków eterycznych występujących u lawendy różni się w zależności od odmiany. Najbardziej zróżnicowany skład wykazuje lawenda wąskolistna Lavandula angustifolia (Boelens, 1995), stąd też olejek lawendowy z niej izolowany jest najczęściej produkowany.
Namnażanie roślin zielarskich w warunkach in vitro przy użyciu pożywek zawierających w swoim składzie elicytory, czyli substancje stresogenne na przykład kwas jasmonowy, pozwala na uzysk anie ekstraktów, a także olejków o bogatszym składzie, zawierającym większą ilość pożądanych składników (Devi i in., 2011). Składniki olejków eterycznych zawartych w lawendzie wąskolistnej takie jak: linalol, octan linalolu, octan geraniolu oraz kumaryna wykazują silną aktywność przeciwbakteryjną (Gulluce i in., 2007).
Kwas jasmonowy dodawany do kultur tkankowych powoduje wzrost stężenia i produkcję roślinnych metabolitów wtórnych (Gundlach i in. 1991). W badaniach własnych kwas jasmonowy ogranicza wzrost kultur tkankowych namnażanej lawendy wąskolistnej odmiany Munstead. Wpływa na zmniejszenie wzrostu roślin, a to wiąże się z ich mniejszą masą. Liczba pędów bocznych namnażanej odmiany lawendy jest mniejsza, niż tej samej odmiany rosnącej na pożywce bez dodatku kwasu jasm onowego (Andrys D., Kulpa D. 2013. Wpływ kwasu jasmonowego na namnażanie się lawendy wąsk olistnej (Lavandula angustifolia Mill.). Mater. Konf. Nauk. „Wpływ młodych naukowców na osiągnięcia polskiej nauki. V edycja-Nowe trendy w naukach przyrodniczych”. Poznań, 1 grudnia 2013: 98-102).
Z przeglądu literatury przedmiotu wynika, że do celów przemysłowych, a także leczniczych wykorzystuje się olejek eteryczny pozyskiwany komercyjnie z kwiatów lub łodyg roślinnych, które wyk azują aktywność antymikrobiologiczną. Natomiast ekstrakty i olejki eteryczne pozyskane z roślin lawendy namnożonych w kulturach tkankowych wykazują o wiele większą aktywność antymikrobiologiczną. Porównując skład chemiczny ekstraktów i olejków eterycznych, w przypadku roślin namnażanych w warunkach in vitro jest on bogatszy o związki wykazujące aktywność antymikrobiologiczną, a zatem i konserwującą, w stosunku do roślin rosnących w warunkach in vivo (w warunkach naturalnych).
Do namnażania roślin metodą in vitro znana jest pożywka standardowa MS (Murashige i Skoog, 1962). Znane jest także namnażanie roślin na pożywce standardowej MS z dodatkiem regulatorów wzrostu na przykład kinetyną, 6-benzyloaminopuryną, tidiazuronem w stężeniu 0,5, 1,0, 1,5 lub 2,0 mg/dm i kwasem 1-octowym w stężeniu 0,05 mg/dm (Al-Bakhit A.A.M., Sawwan J.S., Al-Mahmoud M.S.2007. In vitro Propagation of Two Lavandula Species: Lavandula angustifolia and Lavandula latifolia L. Medica. JJAS.3(1): 16-25.
Pożywka do namnażania roślin lawendy wąskolistnej odmiany Munstead w kulturach tkankowych, według wynalazku, zawierająca pożywkę standardową MS oraz regulator wzrostu kinetynę, 3 charakteryzuje się tym, że zawiera na jeden dm pożywki standardowej MS 2 mg kinetyny, 0,2 mg kwasu indolilo-3-octowego oraz 0,2 mg kwasu jasmonowego.
Namnażanie roślin na pożywce, według wynalazku dzięki dodaniu do pożywki standardowej MS roślinnych regulatorów wzrostu oraz kwasu jasionowego pozwala zwiększyć produkcję ekstraktów lawendowych i uzyskać ich bogatszy skład.
Dla celów niniejszego wynalazku zbadano skład ekstraktów wyizolowanych z roślin rosnących w warunkach in vivo oraz in vitro za pomocą chromatografii gazowej z wykorzystaniem metody GC/MS przy użyciu aparatu firmy Agilent model 6890 z kolumną chromatograficzną HP-5MS. WrażliPL 225 791 B1 wość bakterii na działanie wyizolowanych ekstraktów określono metodą dyfuzyjno-krążkową, którą przeprowadzono w 3 powtórzeniach w odniesieniu do szczepów wzorcowych gronkowca złocistego Staphylococcus aureus ATCC 6538 oraz szczepu pałeczki okrężnicy Escherichia coli ATCC 8739.
Rozwiązanie według wynalazku przedstawione jest w przykładzie wykonania.
Do namnażania lawendy wąskolistnej użyto pożywkę podstawową MS (Murashige i Skoog, 1962) zawierającą składniki mineralne: azotan amonu (NH3NO3) w ilości 1650 mg/dm , azotan potasu (KNO3) w ilości 1900 mg/dm , siarczan magnezu (MgSO4-7H2O) w ilości 370 mg/dm , diwodorofosfo33 ran potasu w ilości 170 mg/dm (KH2PO4), chlorek wapnia (CaCl2-2H2O) w ilości 440 mg/dm , jodek potasu (KJ) w ilości 0,83 mg/dm , kwas borowy (H3BO3) w ilości 6,2 mg/dm , siarczan manganu (II) (MnSO4-4H2O) w ilości 22,3 mg/dm , siarczan cynku (ZnSO4-7H2O) w ilości 8,6 mg/dm , molibdenian o
(VI) sodu (Na2MoO4-2H2O) w ilości 0,25 mg/dm , siarczan żelaza (II) (FeSO4-7H2O) w ilości
27,8 mg/dm , wersenian disodu (Na2EDTA-2H2O) w ilości 37,3 mg/dm , siarczan miedzi (II) (CuSO4-5H2O) w ilości 0,025 mg/dm3, chlorek kobaltu (II) (CoCI2-6H2O) w ilości 0,025 mg/dm3. Po3 żywka zawierała dodatki organiczne takie jak: niacyna w ilości 0,5 mg/dm3, pirydoksyna HCl w ilości 0,5 mg/dm , tiamina HCl w ilości 0,1 mg/dm , glicyna w ilości 2 mg/dm . Składniki odważono i rozpuszczono w wodzie destylowanej. Następnie dodano roślinne regulatory wzrostu: kinetynę (KIN) w ilości 2 mg/dm , kwas indolilo-3-octowy (IAA) w ilości 0,2 mg/dm oraz kwas jasmonowy (JA) 3 w ilości 0,2 mg/dm , po czym ustalono pH na 5,7 za pomocą stężonego HCl oraz NaOH.
Odważono składniki stałe takie jak: inozytol w ilości 100 mg/dm , sacharoza w ilości 30 g/dm 3 oraz agar w ilości 7 g/dm3 i dodano do wcześniej przygotowanej bazy. Całość podgrzewano w wysokiej temperaturze do momentu zagotowania pożywki. Pożywkę w odmierzonej ilości 30 ml umieszczano w naczyniach szklanych i zakręcano nakrętkami. Przygotowane naczynia szklane wypełnione pożywką umieszczono w autoklawie i sterylizowano przez 19 minut w temperaturze 121°C przy ciśnieniu 1 atm. (0,1 Mpa). Po wysterylizowaniu pożywki wyciągnięto słoiki z autoklawu i pozostawiono do wystygnięcia i zestalenia pożywki. Po 24 godzinach na przygotowane pożywki wykładano fragmenty roślin (eksplantaty). W doświadczeniu pożywką porównawczą była pożywka MS wzbogacona o kine33 tynę w ilości 2 mg/dm oraz kwas indolilo-3-octowy w ilości 0,2 mg/dm . Założone kultury in vitro umieszczono w fitotronie w temperaturze 24°C oraz wilgotności względnej powietrza 70-80%. Kultury były oświetlane światłem fluorescencyjnym o natężeniu 40 PAR ^E-m- -s-) przez 16 h dziennie. W doświadczeniu na sporządzoną pożywkę według wynalazku oraz pożywkę porównawczą wyłożono po 100 eksplantatów, w 20 słoikach, po 5 eksplantatów w każdym słoiku.
Po 4 tygodniach określono wygląd morfologiczny wyłożonych na pożywkę roślin lawendy. Określono ich wysokość, masę oraz ilość pędów. Następnym etapem badań było wyciągnięcie materiału roślinnego z naczyń szklanych i suszenie go w temperaturze pokojowej przez 5 dni. Suchy materiał roślinny użyto w celu izolacji ekstraktów lawendowych.
Porównano skład ekstraktów wyizolowanych z rośliny rosnącej w warunkach in vivo oraz z ro33 ślin namnażanych w warunkach in vitro na pożywce z dodatkiem 2 mg/dm kinetyny i 0,2 mg/dm kwasu indolilo-3-octowego oraz na będącej przedmiotem wynalazku pożywce wzbogaconej
3 3 o 2 mg/dm3 kinetyny, 0,2 mg/dm3 kwasu indolilo-3-octowego i 0,2 mg/dm3 kwasu jasmonowego. Badania przeprowadzono za pomocą chromatografii gazowej przy użyciu metody GC-MS. Skład ekstraktów przedstawiono w poniższej tabeli.
Nazwa związku Czas retencji [min] Munstead
in vivo pożywka porównawcza in vitro (pożywka MS 2KIN, 0,2IAA) pożywka według wynalazku in vitro + JA (pożywka MS 2KIN, 0,21IAA, 0,2JA)
[%]
Piranon 6,80 - 3,48 1,71
Izoborneol 7,13 - - 0,39
Kumaran 7,25 - 60,82 31,20
PL 225 791 B1 cd. tabeli
Kumaryna 14,95 52,51 2,59 6,99
p-Cymen 16,71 - - 1,56
Tlenek kariofilenu 18,71 - - 1,84
Epibicykloseskwifellandren 20,41 - 8,74 17,07
Herniaryna 23,15 24,42 8,49 23,0
Witamina E 63,37 - - 1,04
Suma związków zidentyfikowanych 76,93 84,12 78,80
Po przeprowadzeniu analizy GC-MS stwierdzono zróżnicowany skład ekstraktów badanej odmiany lawendy wąskolistnej, a także powstanie szeregu różnorodnych związków w wyniku namnażania lawendy w warunkach in vitro.
Powstałe ekstrakty mają właściwości antybakteryjne. Określono aktywność antybakteryjną wyizolowanych ekstraktów lawendowych. W tym celu 18 godzinne hodowle szczepu gronkowca złocistego Staphylococcus aureus ATCC 6538 oraz szczepu pałeczki okrężnicy Escherichia coli ATCC 8739 zawieszono w fizjologicznym roztworze NaCl do gęstości 0,5 McFarlanda. Tak uzyskaną zawiesinę bakterii nanoszono równomiernie na powierzchnię szalki z podłożem stałym Mueller-Hintona II (Oxoid) przy użyciu sterylnych ez. Na szalki nanoszono krążki bibułowe o średnicy 6 mm uprzednio nasączane 10 μl ekstraktu. Szalki inkubowano przez 24 godziny w temperaturze +37°C. Po upływie 24 h zmierzono strefy zahamowania wzrostu (jako średnicę w milimetrach). Po trzech przeprowadzonych powtórzeniach, stwierdzono, że lawendowe ekstrakty odmiany Munstead wyizolowane z materiału roślinnego namnażanego na pożywce według wynalazku zahamowały wzrost szczepów gronkowca złocistego Staphylococcus aureus ATCC 6538 oraz szczepu pałeczki okrężnicy Escherichia coli ATCC.

Claims (1)

  1. Zastrzeżenie patentowe
    Pożywka do namnażania roślin lawendy wąskolistnej odmiany Munstead w kulturach tkankowych zawierająca pożywkę standardową MS oraz regulator wzrostu, kinetykę, znamienna tym, że na jeden dm pożywki standardowej MS zawiera 2 mg kinetyny, 0,2 mg kwasu indolilo-3-octowego oraz 0,2 mg kwasu jasmonowego.
PL408906A 2014-07-18 2014-07-18 Pożywka do namnażania lawendy wąskolistnej odmiany Munstead PL225791B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL408906A PL225791B1 (pl) 2014-07-18 2014-07-18 Pożywka do namnażania lawendy wąskolistnej odmiany Munstead

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL408906A PL225791B1 (pl) 2014-07-18 2014-07-18 Pożywka do namnażania lawendy wąskolistnej odmiany Munstead

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL408906A1 PL408906A1 (pl) 2016-02-01
PL225791B1 true PL225791B1 (pl) 2017-05-31

Family

ID=55178369

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL408906A PL225791B1 (pl) 2014-07-18 2014-07-18 Pożywka do namnażania lawendy wąskolistnej odmiany Munstead

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL225791B1 (pl)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL232759B1 (pl) 2015-08-07 2019-07-31 Zachodniopomorski Univ Technologiczny W Szczecinie Emulsja kosmetyczna typu olej/woda

Also Published As

Publication number Publication date
PL408906A1 (pl) 2016-02-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Bajaj et al. Gamma irradiation studies on seeds, seedlings and callus tissue cultures of Phaseolus vulgaris L.
KR102448442B1 (ko) 미츠아리아속에 속하는 균주 및 그 균주를 사용한 미생물 농약
Farahi et al. Effect of pre-harvest foliar application of polyamines and calcium sulfate on vegetative characteristics and mineral nutrient uptake in Rosa hybrida
MX2011013261A (es) Composicion para obtener fungicida y bactericida biologico.
CN117617266A (zh) 一种含有贝莱斯芽孢杆菌tcs001和啶酰菌胺的杀菌组合物及其应用
Hartini et al. Antagonistic antibacterial effect of betel and red betel combination against gram-positive and gram-negative bacteria
PL225791B1 (pl) Pożywka do namnażania lawendy wąskolistnej odmiany Munstead
Natsir et al. Toxicity of liquid extract of seaweed Sargassum sp. on the growth of microalgae Skeletonema costatum
Nugroho et al. Propagation of Dendrobium antennatum Lindl via seed culture in vitro using simple medium: fertilizer and complex organic based medium
RU2666920C1 (ru) Способ получения адвентивных корней вздутоплодника сибирского (Phlojodicarpus sibiricus (Steph.) К.-Pol.) в условиях in vitro
Kumar et al. Environmental factors and plant–microbes (endophytes) interaction: an overview and future outlook
Muratova et al. The effect of caffeine in a nutrient medium on rhizogenesis of the Rubus genus plants
Sultana et al. Effect of hyaluronic acid (HA) on organogenesis in protocorm-like bodies (PLBs) of Phalaenopsis ‘Fmk02010’cultured in vitro
Duarte et al. Micropropagation of Handroanthus heptaphyllus (Vell.) Mattos from seedling explants
Shatnawi et al. Germination and in vitro propagation of Gundelia tournefontii as an important medicinal plant
Alhashimi et al. The antimicrobial activity of leaves and callus extracts of Thevetia peruviana in vitro
Obsuwan et al. The response of growth and development from in vitro seed propagation of Dendrobium orchid to chitosan
Veraplakorn Allelopathic hormesis and slow release of lantana (Lantana camara L.) callus extract
Pawelec et al. Callus Culture of common thyme (Thymus vulgaris L.)
Restu et al. Effectiveness of media B5 (Gamborg) for multiplication of Sengon (Paraserianthes falcataria L. Nielsen) in vitro
Lin et al. The in vitro secretion of growth regulators by isolated callus tissues
Yousif et al. Effect of Zirconium Oxide and Yttrium oxide Nanoparticles on Plant Germination of Cucumis Sativus.
CN106922655A (zh) 一种含稳定剂的杀菌组合物
Garg et al. Nutrient Medium and Its Fortification for In Vitro Cultivation of Medicinal Plants
Kakoniova et al. The possibility to enhance flavonoids production in Rubia tinctorum L. callus cultures