PL224852B1 - Środek do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt - Google Patents

Abstract

Wynalazek dotyczy receptury środka do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt w zastosowaniu do badań genetycznych, populacyjnych, migracyjnych i dydaktyki weterynaryjnej. Środek do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt, zawierający kredę jako naturalny barwnik biały oraz lub tlenek żelaza jako barwnik purpurowy charakteryzuje się tym, że stanowi go pożywka, która w każdych 100 częściach składa się z od 30% wagowo do 35% wagowo węglowodorów nie strawialnych, takich zwłaszcza jak mieszanina stearyny z parafiną, z od 35% wagowo do 45% wagowo mieszaniny strawialnych tłuszczy pochodzenia naturalnego, z od 10% wagowo do 20% wagowo mieszaniny substancji stabilizująco - rozcieńczalnikowych, z od 5% wagowo do 10% wagowo mieszaniny węglowodanów pochodzenia roślinnego użytej jako główne źródło cukrów, oraz z od 1% wagowo do 3% wagowo nieorganicznej niestrawialnej substancji koloryzującej.

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest środek do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt.

Wynalazek dotyczy receptury środka do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwi erząt w zastosowaniu do badań genetycznych, populacyjnych, migracyjnych i dydaktyki weterynaryjnej.

Nie są znane receptury środków specjalnie przeznaczonych do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt dla potrzeb zarówno hodowlanych jak i dydaktyki weterynaryjnej.

Znane są natomiast i opisane w literaturze głównie myśliwskiej i w literaturze leśnictwa hodowlanego, sposoby pozwalające zabarwiać na biało lub na karminowo czerwono odchody dzikich zwierząt leśnych, przez podawanie im w karmie wykładanego w paśnikach dodatku sproszkowanej kredy lub niewielkich ilości starannie wyjałowionej rdzy - z tlenków żelaza. Dodatki podawane przez leśników do karmy w paśnikach leśnych są stosowane głównie w celu ustalenia przez barwę odchodów kierunków migracji poszczególnych stad zwierząt leśnych (najczęściej zwierzyny płowej), lub drobnych zwierząt futerkowych na przykład kuny leśnej, w sytuacjach gdy występuje ona w ekosystemie leśnym jako drapieżnik o nie pożądanej dynamice rozrodu.

Znane są również i opisane liczne metody identyfikacji DNA zwierząt. Znana jest między innymi z publikacji Broome, Rosemary L, Li Feng, Qin Zhou, Alicja Smith, Nina Hahn, Suwane M. Matusi i M. Bistr Omary publikacja z roku 1999 - 11-26 pt. Noninvasive trawnsgenic Morse genotyping using stool analysis (FEBR Letters 462 (1-2) - 159-160, metodyka badania odchodów zwierząt. Publikacja ta prezentuje głównie zalety z punktu widzenia badania genomu DNA. Opisana tam metoda charakteryzuje się jednak poważną wadą polegająca na tym, że w badanych odchodach znajdują się bakterie i inne mikroorganizmy pochodzące z diety gatunków zjedzonych przez badanego osobnika, nie całkowicie strawionych zarówno zwierzęcych jak i roślinnych. Wszystkie te zanieczyszczenia mogą dawać pozytywny ale fałszywy obraz DNA.

Wynalazek rozwiązuje zagadnienie opracowania nowej receptury fizjologicznie obojętnego, nietoksycznego środka do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt w zastosowaniu do badań genetycznych, określania DNA o zwiększonej czystości, dla badań populacyjnych, migracyjnych i dydaktyki weterynaryjnej. Wynalazek może posłużyć do badań drobnych ssaków wszystko żernych (np. Mus musculus), do badań populacyjnych, etologicznych, do badań kierunków migracji i dyspersji zwierząt zarówno w terenie jak i w warunkach hodowlanych.

Środek do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt, zawierający znane składniki takie jak kreda jako naturalny barwnik biały oraz lub tlenek żelaza jako barwnik purpurowy charakterystyczny tym według wynalazku, że stanowi go pożywka, która w każdych 100 częściach składa się z od 30% wagowo do 35% wagowo węglowodorów niestrawialnych, takich zwłaszcza jak mieszanina stearyny z parafiną, z od 35% wagowo do 45% wagowo mieszaniny strawialnych tłuszczy pochodzenia naturalnego, z od 10% wagowo do 20% wagowo mieszaniny substancji stabilizująco-rozcieńczalnikowych, od 5% wagowo do 10% wagowo mieszaniny węglowodanów pochodzenia roślinnego użytej jako główne źródło cukrów, oraz od 1% wagowo do 3% wagowo nieorganicznej niestrawialnej substancji koloryzującej.

Istotnym jest według wynalazku, że w niektórych jego charakterystycznych wykonaniach zawarta w pożywce mieszanina substancji stabilizująco-rozcieńczalnikowych, składa się z użytych w niemianowanym wzajemnym stosunku ilościowym węglanu wapnia CaCO₃ i tlenku tytanu TiO₂.

Istotnym jest według wynalazku, że w niektórych jego charakterystycznych wykonaniach jako substancja stabilizująco-rozcieńczalnikowa użyty jest w pożywce czysty węglan wapnia CaCO₃.

Istotnym jest według wynalazku, że w niektórych jego charakterystycznych wykonaniach jako substancja stabilizująco-rozcieńczalnikowa użyty jest w pożywce czysty tlenek tytanu TiO₂.

Istotnym jest według wynalazku, że w niektórych jego charakterystycznych wykonaniach zastosowana w pożywce mieszanina węglowodanów pochodzenia roślinnego jako główne źródło cukrów, składa się z użytych w niemianowanym wzajemnym stosunku ilościowym glikolu etylenowego (CH₂O)_n, cyklooktaamelozy C_x(H₂O)_wedtug, i węglowodanów pochodzenia naturalnego o ogólnym wzorze (C6H10O5)n gdzie 40 < n < 3000.

Istotnym jest według wynalazku, że w niektórych jego charakterystycznych wykonaniach jako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody w kolorze białym jest użyty w pożywce węglan wapnia CaCO3.

PL 224 852 B1

Istotnym jest według wynalazku, że w niektórych jego charakterystycznych wykonaniach jako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody jest użyty w pożywce dwutlenek tytanu TiO₂.

Istotnym jest według wynalazku, że w niektórych jego charakterystycznych wykonaniach jako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody w odcieniach od rdzawego ceglasto-czerwonego, poprzez purpurę kardynalską do ciemno-różowego, jest użyty w pożywce uwodniony tlenek żelaza Fe₂O₃ x H₂O.

Istotnym jest według wynalazku, że w niektórych jego charakterystycznych wykonaniach j ako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody jest użyty w pożywce

Na8-10Al6Si6O24S2-4.

Istotnym jest według wynalazku, że w niektórych jego charakterystycznych wykonaniach jako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody jest użyty w pożywce CoAl₂O₄.

Środek do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt według wynalazku spełnia założone cele i wykazuje szereg dodatnich cech użytkowych. W szczególności dzięki zastosowaniu w charakterystycznej recepturze od 30% wagowo do 35% wagowo węglowodorów niestrawialnych, takich zwłaszcza jak mieszanina stearyny z parafiną, oraz dzięki zastosowaniu w pożywce niestrawialnej mieszaniny stearyny z parafiną, będącej dominującym składnikiem stabilizującym postać fizyczną badanych odchodów, okazało się możliwe utrzymanie z niezmiennej postaci fizycznej substancji koloryzującej będącej głównym znacznikiem badanych odchodów, co poprawiło w znaczącym stopniu przydatność receptury do badań naukowo-poznawczych wyodrębnionych populacji zwierząt.

Dzięki zastosowaniu w charakterystycznej recepturze według wynalazku mieszaniny węglowodanów pochodzenia roślinnego jako głównego źródło cukrów, składającej się z użytych w niemianowanym wzajemnym stosunku ilościowym glikolu etylenowego (CH₂O)_n, cyklooktaamelozy C₂(H₂O)_wedtug, i węglowodanów pochodzenia naturalnego o ogólnym wzorze (C₆H₁₀O₅)_n gdzie 40 < n 3000, okazało się możliwe uzyskanie korzystnego stosunku cukrów w diecie badanych zwierząt, co w znacznym stopniu wyeliminowało skutki błędów pomiaru lub recepcji badanego materiału genetycznego.

Dzięki zastosowaniu w charakterystycznej recepturze według wynalazku nieorganicznej niestrawialnej substancji koloryzującej badane odchody w kolorze białym użytej w pożywce jako węglan wapnia CaCO₃, lub jako dwutlenek tytanu TiO₂ okazało się możliwe znaczące poprawienie powtarzalności wyników badawczych w stosunku do określonych grup osobniczych.

Dzięki temu, że w charakterystycznej recepturze według wynalazku jako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody w odcieniach od rdzawego ceglasto-czerwonego, poprzez purpurę kardynalską do ciemno-różowego, jest użyty w pożywce uwodniony tlenek żelaza Fe₂O₃ x H₂O, oraz albo Na_8-10Al₆Si₆O₂₄S_2-4, oraz albo CoAl₂O₄ okazało się możliwe uzyskanie korzystnej rozdzielczości otrzymywanych wyników poszczególnych grup osobniczych w ramach jednej wyodrębnionej populacji badanych zwierząt

Substancje zawarte w wynalezionym znaczniku chemicznym są fizjologicznie obojętne w krótkich okresach stosowania, prawie obojętne lub nieszkodliwe u osobników zdrowych, oraz wydalane w naturalny sposób.

Zawarte w wynalezionym znaczniku chemicznym substancje koloryzujące pochodzenia naturalnego wykazują się dużą zmiennością kolorystyczną, dlatego ich użycie pozwala na uzyskanie wyników badawczych z dużą dokładnością i rozdzielczością, a poza tym substancje te działają względem siebie addytywnie dając różne kombinacje kolorystyczne podczas procesu badawczego. Zastosowane związki koloryzujące dzięki zawartym w nich węglowodorom nie ulegają mieszaniu dzięki czemu możliwe jest określenie czy dany osobnik żerował w ciągu na przykład 24 godzin w wielu miejscach.

Uzyskane dzięki stosowaniu pożywki zawierającej wynaleziony znacznik chemiczny odchody pozwalają na zwiększenie wydajności reakcji amplifikacji przez to, iż po izolacji DNA uzyskuje się praktycznie wyłącznie DNA gospodarza, nie DNA zawartego w diecie.

Wynalazek jest szczegółowo zilustrowany w przytoczonych przykładach jego wykonania.

P r z y k ł a d 1

Środek do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt, stanowi pożywka, która w każdych 100 częściach składa się z od 35% wagowo węglowodorów niestrawialnych, takich zwłaszcza jak mieszanina stearyny z parafiną, z 45% wagowo mieszaniny strawialnych tłuszczy pochodzenia naturalnego, z 10% wagowo mieszaniny substancji stabilizująco-rozcieńczalnikowych, 7% wagowo mieszaniny węglowodanów pochodzenia roślinnego użytej jako główne źródło cukrów, oraz 3% wagowo nieorganicznej niestrawialnej substancji koloryzującej. Użyta w pożywce mieszanina substancji

PL 224 852 B1 stabilizująco-rozcieńczalnikowych, składa się z zmieszanych w niemianowanym wzajemnym stosunku ilościowym węglanu wapnia CaCO₃ i tlenku tytanu TiO₂. Zastosowana w przykładowym wykonaniu pożywki mieszanina węglowodanów pochodzenia roślinnego potraktowanych jako główne źródło cukrów, składa się z użytych w niemianowanym wzajemnym stosunku ilościowym 1:1:1 glikolu etylenowego (CH₂O)_n, cyklooktaamelozy C_x(H₂O)_według, i węglowodanów pochodzenia naturalnego o ogólnym wzorze (C₆H₁₀O₅)_n gdzie 40 < n 3000.

P r z y k ł a d 2

Środek do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt, stanowi pożywka, która w każdych 100 częściach składa się z od 35% wagowo węglowodorów niestrawialnych, takich zwłaszcza jak mieszanina stearyny z parafiną, z 45% wagowo mieszaniny strawialnych tłuszczy pochodzenia naturalnego, z 10% substancji stabilizująco-rozcieńczalnikowej, 7% wagowo mieszaniny węglowodanów pochodzenia roślinnego użytej jako główne źródło cukrów, oraz 3% wagowo nieorganicznej niestrawialnej substancji koloryzującej. Jako substancja stabilizująco-rozcieńczalnikowa jest użyty w pożywce węglanu wapnia CaCO₃. Zastosowana w przykładowym wykonaniu pożywki mieszanina węglowodanów pochodzenia roślinnego potraktowanych jako główne źródło cukrów, składa się z użytych w niemianowanym wzajemnym stosunku ilościowym 1 : 1,5 : 0,7 glikolu etylenowego (CH₂O)_n, cyklooktaamelozy C_x(H₂O)_według, i węglowodanów pochodzenia naturalnego o ogólnym wzorze (C₆H₁₀O₅)_n gdzie 40 < n 3000.

P r z y k ł a d 3

Środek do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt, stanowi pożywka, która w każdych 100 częściach składa się z od 33% wagowo węglowodorów niestrawialnych, takich zwłaszcza jak mieszanina stearyny z parafiną, z 40% wagowo mieszaniny strawialnych tłuszczy pochodzenia naturalnego, z 18% wagowo mieszaniny substancji stabilizująco-rozcieńczalnikowych, 7% wagowo mieszaniny węglowodanów pochodzenia roślinnego użytej jako główne źródło cukrów, oraz 2% wagowo nieorganicznej niestrawialnej substancji koloryzującej. Użyta w pożywce mieszanina substancji stabilizująco-rozcieńczalnikowych, składa się z zmieszanych w niemianowanym wzajemnym stosunku ilościowym węglanu wapnia CaCO₃ i tlenku tytanu TiO₂. Zastosowana w przykładowym wykonaniu pożywki mieszanina węglowodanów pochodzenia roślinnego potraktowanych jako główne źródło cukrów, składa się z użytych w niemianowanym wzajemnym stosunku ilościowym 0,9 : 1 : 1,3 glikolu etylenowego (CH2O)n, cyklooktaamelozy Cx(H2O)według, i węglowodanów pochodzenia naturalnego o ogólnym wzorze (C₆H₁₀O₅)_n gdzie 40 < n 3000. Jako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody jest użyty w pożywce Na_8-10Al₆Si₆O₂₄S_2-4.

P r z y k ł a d 4

Środek do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt, stanowi pożywka, która w każdych 100 częściach składa się z od 33% wagowo węglowodorów niestrawialnych, takich zwłaszcza jak mieszanina stearyny z parafiną, z 40% wagowo mieszaniny strawialnych tłuszczy pochodzenia naturalnego, z 18% wagowo mieszaniny substancji stabilizująco-rozcieńczalnikowych, 7% wagowo mieszaniny węglowodanów pochodzenia roślinnego użytej jako główne źródło cukrów, oraz 2% wagowo nieorganicznej niestrawialnej substancji koloryzującej. Użyta w pożywce mieszanina substancji stabilizująco-rozcieńczalnikowych, składa się z zmieszanych w niemianowanym wzajemnym stosunku ilościowym węglanu wapnia CaCO3 i tlenku tytanu TiO2. Zastosowana w przykładowym wykonaniu pożywki mieszanina węglowodanów pochodzenia roślinnego potraktowanych jako główne źródło cukrów, składa się z użytych w niemianowanym wzajemnym stosunku ilościowym 0,9 : 1 : 1,3 glikolu etylenowego (CH₂O)_n, cyklooktaamelozy C_x(H₂O)_według, i węglowodanów pochodzenia naturalnego o ogólnym wzorze (C₆H₁₀O₅)_n gdzie 40 < n 3000. Jako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody jest użyty w pożywce CoAl₂O₄.

WYKAZ LITERATURY DO OPISU PATENTOWEGO

1. Broome, Rosemary L., Li Feng, Qin Zhou, Alicia Smith, Nina Hahn, Suzanne M. Matsui, i M.Bishr Omary. 1999. „Non-invasive transgenic mouse genotyping using stool analysis”. FEBS Letters 462 (1-2) (listopad 26): 159-160. doi:10.1016/S0014-5793(99)01516-1.

2. Davison, Angus, Johnny D. S. Birks, Rachael C. Brookes, Tony C. Braithwaite, i John E. Messenger. 2002. „On the origin of faeces: morphological versus molecular methods for surveying rare carnivores from their scats”. Journal of Zoology 257 (2) (czerwiec 1): 141-143. doi: 10.1017/ /S0952836902000730.

3. Hoss, Matthias, Michael Kohn, Svante Paabo, Felix Knauer, i Wolfgang Schroder. 1992. „Excrement analysis by PCR”. Nature 359 (6392) (wrzesień 17): 199—199. doi: 10.1038/3591990.

PL 224 852 B1

4. Kalippke, Katy, Sonja Werwitzke, Marcus von Hornung, Reinhard Mischke, Arnold Ganser,

I Andreas Tiede. 2009. „DNA analysis from stool samples: a fast and reliable method avoiding invasive sampling methods in mouse models of bleeding disorders”. Laboratory Animals 43 (4) (październik 1): 390-393. doi: 10.1258/la.2008.008057.

5. Kohn, Michael H., Eric C. York, Denise A. Kamradt, Gary Haught, Raymond M. Sauvajot,

I Robert K. Wayne. 1999. „Estimating population size by genotyping faeces”. Proceedings of the Royal Society of London. Series B: Biological Sciences 266 (1420) (kwiecień 7): 657—663.

6. Krackow, Sven, i Barbara Konig. 2008. „Microsatellite Length Polymorphisms Associated with Dispersal-Related Agonistic Onset in Male Wild House Mice (Mus Musculus Domesticus)”. Behavioral Ecology and Sociobiology 62 (5) (marzec 1): 813-820. doi: 10.1007/s00265-007-0507-y.

7. NSUBUGA, A. M., M. M. ROBBINS, A. D. ROEDER, P. A. MORIN, C. BOESCH, i L. VIGILANT. 2004. „Factors affecting the amount of genomic DNA extracted from ape faeces and the identification of an improved sample storage method”. Molecular Ecology 13 (7) (lipiec 1): 2089-2094. doi: 10.1111/ /j.1365-294X.2004.02207.X.

8. Stauffer, Stephen H., Adam J. Birkenheuer, Michael G. Levy, Henry Marr, i Jody L. Gookin. 2008. „Evaluation of Four DNA Extraction Methods for the Detection of Tritrichomonas Foetus in F eline Stool Specimens by Polymerase Chain Reaction”. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation 20 (5) (wrzesień 1): 639—641. doi: 10.1177/104063870802000518.

Claims (15)

1. Środek do znakowania chemicznego odchodów drobnych zwierząt, zawierający kredę jako naturalny barwnik biały oraz lub tlenek żelaza jako barwnik purpurowy znamienny tym, że stanowi go pożywka, która w każdych 100 częściach składa się z od 30% wagowo do 35% wagowo węglowodorów niestrawialnych, takich zwłaszcza jak mieszanina stearyny z parafiną, z od 35% wagowo do 45% wagowo mieszaniny strawialnych tłuszczy pochodzenia naturalnego, z od 10% wagowo do 20% wagowo mieszaniny substancji stabilizująco-rozcieńczalnikowych, z od 5% wagowo do 10% wagowo mieszaniny węglowodanów pochodzenia roślinnego użytej jako główne źródło cukrów, oraz z od 1 % wagowo do 3% wagowo nieorganicznej niestrawialnej substancji koloryzującej.

2. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że użyta w pożywce niestrawialna mieszanina stearyny z parafiną, jest dominującym składnikiem stabilizującym postać fizyczną badanych odchodów.

3. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że użyta w pożywce mieszanina stearyny z parafiną ma proporcje utrzymywane w niemianowanym przedziale, zwłaszcza w stosunku jak 1 : 1.

4. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako węglowodór stabilizujący użyta jest czysta parafina C₅₇H₁₁₀O₆.

5. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako węglowodór stabilizujący użyta jest czysta stearyna C_nH_2n+₂.

6. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że użyta w pożywce mieszanina strawialnych tłuszczy pochodzenia roślinnego, składa się z od 25% wagowo do 28% wagowo kwasu palmitynowego C₁₆H₃₂O₂, i/lub od 12% wagowo do 14% wagowo kwasu stearynowego C₁₈H₃₆O₂ i/lub od 1% wagowo do 2% wagowo kwasu mirystynowego C14H28O2.

7. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że użyta w pożywce mieszanina substancji stabilizująco-rozcieńczalnikowych, składa się z użytych w niemianowanym wzajemnym stosunku ilościowym węglanu wapnia CaCO₃ i tlenku tytanu TiO₂.

8. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako substancja stabilizująco-rozcieńczalnikowa użyty jest w pożywce czysty węglan wapnia CaCO3.

9. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako substancja stabilizująco-rozcieńczalnikowa użyty jest w pożywce czysty tlenek tytanu TiO2.

10. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że zastosowana w pożywce mieszanina węglowodanów pochodzenia roślinnego jako główne źródło cukrów, składa się z użytych w niemianowanym wzajemnym stosunku ilościowym glikolu etylenowego (CH₂O)_n, cyklooktaamelozy C_x(H₂O)_wedtug, i węglowodanów pochodzenia naturalnego o ogólnym wzorze (C₆H₁₀O₅)_n gdzie 40 < n 3000.

11. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody w kolorze białym jest użyty w pożywce węglan wapnia CaCO3.

PL 224 852 B1

12. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody jest użyty w pożywce dwutlenek tytanu TiO₂.

13. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody w odcieniach od rdzawego ceglasto-czerwonego, poprzez purpurę kardynalską do ciemno-różowego, jest użyty w pożywce uwodniony tlenek żelaza Fe₂O₃ x H₂O.

14. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody jest użyty w pożywce Na₈.₁₀Al₆Si₆O₂₄S₂.₄.

15. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako nieorganiczna niestrawialna substancja koloryzująca badane odchody jest użyty w pożywce CoAl₂O₄.