PL221307B1 - The use of quinine alkaloid derivatives as cytotoxic compounds - Google Patents
The use of quinine alkaloid derivatives as cytotoxic compoundsInfo
- Publication number
- PL221307B1 PL221307B1 PL408980A PL40898014A PL221307B1 PL 221307 B1 PL221307 B1 PL 221307B1 PL 408980 A PL408980 A PL 408980A PL 40898014 A PL40898014 A PL 40898014A PL 221307 B1 PL221307 B1 PL 221307B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- cancer
- preparation
- pcn
- configuration
- propargylcinchonine
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie eterów 9-O-propargilowych o ogólnej strukturze wyrażonej wzorem 1, gdzie poszczególne etery posiadają konfigurację absolutną atomów C-8 i C9: (8R,9S)- konfiguracja cynchoniny lub (8R,9R)- konfiguracja 9-epicynchoniny do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii nowotworów.The subject of the invention is the use of 9-O-propargyl ethers with the general structure expressed in formula 1, where individual ethers have the absolute configuration of C-8 and C9 atoms: (8R,9S)- cinchonine configuration or (8R,9R)- 9-epicinchonine configuration to preparation of drugs used in cancer chemotherapy.
Description
Opis wynalazkuDescription of the invention
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie 9-O-propargilocynchoniny i 9-O-propargiloepicynchoniny do sporządzania leków stosowanych w terapii przeciwnowotworowej.The invention relates to the use of 9-O-propargylepicinchonine and 9-O-propargylepicinchonine for the preparation of medicaments for anti-cancer therapy.
Choroby nowotworowe stanowią jeden z głównych problemów zdrowotnych ludzi, charakteryzując się najwyższym współczynnikiem umieralności oraz postępującą liczbą zachorowań, związaną głównie ze wzrostem długości oraz stylem życia. Terapia chorób nowotworowych jest trudna, kosztowna i w wielu przypadkach mało efektywna. Z tego powodu pilnie poszukiwane są nowe substancje o działaniu cytostatycznym. Ich źródłem często są produkty naturalne a zwłaszcza alkaloidy i ich pochodne takie jak taksol, kamptotecyna czy alkaloidy barwinka (Vinca) (publikacja przeglądowa Taglialatela-Scafati, O. Modern Alkaloids, Fattorusso E. (red.), Wiley-VCH, 2007, str. 25). Alkaloidy kory chinowej, do których należą m.in. chinina, chinidyna oraz cynchonidyna i cynchonina nie wykazują swoistych właściwości przeciwrakowych. W eksperymentalnej farmakoterapii chorób nowotworowych z występującą opornością wielolekową (MDR) stosuje się kombinację leków przeciwnowotworowych np. cyklofosfamidu, doxorubicyny, metyloprednizolonu lub winblastyny oraz niedziałających przeciwrakowo alkaloidów chinowca - chininy lub cynchoniny. Alkaloidy te znajdują zastosowanie w kombinowanej terapii w przypadku wytworzenia w komórce nowotworowej oporności wielolekowej, gdyż hamują one usuwanie z tych komórek leków przeciwrakowych co skutkuje spotęgowaniem ich działania (Lee, S.Y. et al. Environ. Tox., 2011, 26, 424 i Solary, E. et al., Leukemia, 2000, 14, 2085). W zgłoszeniu patentowym WO 9214467 ujawniono zastosowanie, do leczenia m.in. białaczki szpikowej, raka jajników, niedrobnokomórkowego raka płuc, znanych leków m.in. etopozydu lub doksorubicyny w połączeniu z alkaloidami chinowca takimi jak cynchonina, dihydrocynchonina oraz hydrochinidyna. Alkaloidy chinowca hamują efekt MDR na skutek czego leki przeciwrakowe wykazują efektywniejsze działanie.Cancer is one of the main health problems of people, with the highest mortality rate and a progressive number of cases, mainly related to the increase in length and lifestyle. Treatment of neoplastic diseases is difficult, expensive and in many cases ineffective. For this reason, new substances with a cytostatic effect are urgently sought. Their source is often natural products, especially alkaloids and their derivatives such as taxol, camptothecin or vinca alkaloids (Taglialatela-Scafati review, O. Modern Alkaloids, Fattorusso E. (eds.), Wiley-VCH, 2007, pp. 25). Quinocortical alkaloids, which include i.a. quinine, quinidine, and cinchonidine and cinchonine do not have specific anti-cancer properties. In experimental pharmacotherapy of neoplastic diseases with multiple drug resistance (MDR), a combination of antineoplastic drugs, e.g. cyclophosphamide, doxorubicin, methylprednisolone or vinblastine, and the non-cancerous quinine alkaloids, quinine or cinchonine, are used. These alkaloids are used in combined therapy in the case of multidrug resistance in the tumor cell, because they inhibit the removal of anti-cancer drugs from these cells, which results in the intensification of their action (Lee, SY et al. Environ. Tox., 2011, 26, 424 and Solary, E. et al., Leukemia, 2000, 14, 2085). The patent application WO 9214467 discloses the use, for the treatment of i.a. myeloid leukemia, ovarian cancer, non-small cell lung cancer, known drugs incl. etoposide or doxorubicin in combination with cinchonin alkaloids such as cinchonine, dihydrocinchonine and hydroquinidine. Cinnamon alkaloids inhibit the MDR effect, and therefore anti-cancer drugs are more effective.
Z kolei opis WO 9856383 ujawnia zastosowanie dichlorowodorku cynchoniny jako środka hamującego efekt MDR, przy czym związek ten charakteryzuje się wyższą rozpuszczalnością w wodzie niż związki ujawnione w zgłoszeniu WO 9214467, dzięki czemu jest bardziej biodostępnym lekiem a tym samym korzystniejszym dla wspomagania w terapii nowotworów.In turn, WO 9856383 discloses the use of cinchonine dihydrochloride as an MDR inhibitory agent, the compound having a higher water solubility than the compounds disclosed in WO 9214467, making it a more bioavailable drug and therefore more advantageous for assisting in cancer therapy.
Ujawnione w zgłoszeniach WO 9214467 i WO 9856383 zastosowanie znanych pochodnych chinowca ogranicza się do wspomagającego działania w chemioterapii nowotworowej w terapiach w których występuje zjawisko MDR. Ujawnione w tych zgłoszeniach związki nie wykazują efektywnego samodzielnego działania przeciwnowotworowego, tzn. ich zastosowanie w terapiach przeciwnowotworowych polega na neutralizowaniu mechanizmów uniemożliwiających działanie właściwych leków przeciwnowotworowych a nie bezpośrednim działaniu na komórkę rakową jak to ma miejsce w przypadku właściwych leków przeciwnowotworowych.The use of known cinchona derivatives disclosed in the applications WO 9214467 and WO 9856383 is limited to an adjuvant effect in cancer chemotherapy in MDR therapies. The compounds disclosed in these applications do not show an effective anti-cancer activity on their own, i.e. their use in anti-cancer therapies consists in neutralizing the mechanisms preventing the action of proper anti-cancer drugs and not directly acting on the cancer cell, as is the case with proper anti-cancer drugs.
Z danych ujawnionych przez Martirosyan'a (Martirosyan, A.R. et al. Biochem. Pharmacol., 2004, 68, 1729) wynika że, dla wysokich stężeń chininy i chinidyny, obserwuje się słabe działanie przeciwrakowe. W eksperymentalnej różnicowej terapii nowotworów (differentiation therapy) stosowano związki zawierające pierścień chinolinowy, w tym chininę i chinidynę. Zaobserwowano ich wpływ na ekspresję genów wpływających na rozwój raka. Jednak słabe zahamowanie wzrostu i różnicowania się komórek raka piersi (MCF-7) obserwowane in vitro dla chininy i chinidyny (IC50 odpowiednio 40 i 113 μΜ), według standardów chemioterapeutycznych nie kwalifikuje tych substancji jako efektywnych leków przeciwrakowych.Data disclosed by Martirosyan (Martirosyan, AR et al. Biochem. Pharmacol., 2004, 68, 1729) show that, for high concentrations of quinine and quinidine, a weak anti-cancer effect is observed. In experimental differentiation therapy, compounds containing a quinoline ring, including quinine and quinidine, have been used. Their influence on the expression of genes influencing the development of cancer has been observed. However, the weak inhibition of growth and differentiation of breast cancer cells (MCF-7) observed in vitro for quinine and quinidine (IC 50 40 and 113 μΜ, respectively), according to chemotherapeutic standards, do not qualify these substances as effective anti-cancer drugs.
Celem wynalazku było opracowanie nowych zastosowań pochodnych alkaloidów chinowca posiadających działanie cytotoksyczne w terapii przeciwnowotworowej.The aim of the invention was to develop new applications of cinchona alkaloids having a cytotoxic effect in anti-cancer therapy.
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie eterów 9-O-propargilowych o ogólnej strukturze wyrażonej wzorem 1 (DThe invention relates to the use of 9-O-propargyl ethers with the general structure given by formula 1 (D
PL 221 307 B1 gdzie poszczególne etery posiadają konfigurację absolutną atomów C-8 i C-9:PL 221 307 B1 where individual ethers have the absolute configuration of C-8 and C-9 atoms:
(8R,9S) - konfiguracja cynchoniny lub (8R,9R) - konfiguracja 9-epicynchoniny do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii nowotworów. Do oznaczenia konfiguracji przyjęto zwyczajową numerację stosowaną w chemii alkaloidów chinowca.(8R, 9S) - configuration of cinchonin or (8R, 9R) - configuration of 9-epicinchonin for the preparation of drugs used in cancer chemotherapy. The usual numbering used in the chemistry of cinchona alkaloids is used to denote the configuration.
Badania aktywności cytotoksycznej przeprowadzono na liniach komórek nowotworowych: MCF-7 (rak piersi), HeLa (rak szyjki macicy) A549 (rak płuca) oraz KB (rak nosogardzieli) pochodzących z kolekcji ECACC - European Collection of Cell Cultures.Cytotoxic activity studies were performed on the following neoplastic cell lines: MCF-7 (breast cancer), HeLa (cervical cancer) A549 (lung cancer) and KB (nasopharyngeal cancer) from the ECACC collection - European Collection of Cell Cultures.
Testy cytotoksyczności prowadzono za pomocą standardowego oznaczenia z wykorzystaniem sulforodaminy B. Polegały na 72 godzinnej inkubacji linii komórek nowotworowych znajdujących się w fazie wzrostu logarytmicznego z badanym związkiem a następnie oznaczeniu stopnia zahamowania wzrostu komórek z wykorzystaniem adsorpcji barwnika - sulforodaminy B wiążącego się z białkami komórkowymi za pomocą pomiaru spektrofotometrycznego. Oznaczenia prowadzono według procedury opisanej w pracy: Vichai, V., Kirtikara, K. Nature Protocols, 2006, 1, 1112.Cytotoxicity tests were carried out using a standard assay using sulforhodamine B. They consisted of a 72-hour incubation of tumor cell lines in the logarithmic growth phase with the test compound and then determination of the degree of cell growth inhibition by adsorption of the dye - sulforhodamine B bound to cellular proteins by spectrophotometric measurement. The determinations were carried out according to the procedure described in: Vichai, V., Kirtikara, K. Nature Protocols, 2006, 1, 1112.
Przygotowanie komórek do badań:Preparation of cells for research:
Komórki nowotworowe badanej linii w fazie logarytmicznego wzrostu wysiewa się na 24-studzienkowe płytki w ilości 20 tys. komórek/2 mL pożywki na studzienkę, a następnie inkubuje w cieplarce w temperaturze 37°C, w atmosferze 5% CO2 przez 24 godziny.The tumor cells of the studied line in the logarithmic growth phase are seeded in 24-well plates in the amount of 20 thousand. cells / 2 mL medium per well, then incubated in an incubator at 37 ° C under 5% CO2 for 24 hours.
Przygotowanie roztworów badanego związku:Preparation of test compound solutions:
Roztwory badanych związków przygotowuje się w DMSO w zakresie stężeń: 0,05; 0,1; 0,5; 1; 5;Solutions of test compounds are prepared in DMSO in the concentration range: 0.05; 0.1; 0.5; 1; 5;
10; 50; 100 μΜ.10; 50; 100 μΜ.
W komorze laminarnej, zapewniającej sterylne warunki pracy, komórki testowanych linii traktuje się roztworami badanego związku w ten sposób, że: trzy pierwsze studzienki stanowią kontrolę - zawierają tylko 20 μL DMSO, do następnych studzienek dodaje się kolejne roztwory badanego związku (20 μυ) począwszy od najniższego stężenia (trzy studzienki na każde stężenie). Następnie płytkę umieszcza się w inkubatorze na 72 godziny.In a laminar chamber, ensuring sterile working conditions, cells of the test lines are treated with solutions of the test compound in such a way that: the first three wells constitute a control - they contain only 20 μL of DMSO, subsequent solutions of the test compound (20 μυ) are added to the next wells, starting from lowest concentration (three wells for each concentration). The plate is then placed in an incubator for 72 hours.
Po zakończonej inkubacji przyklejone komórki utrwala się przez dodatek 500 μυ zimnego (4°C) 50% kwasu trichloroctowego (TCA) i inkubuje w 4°C przez 1 godzinę. Następnie każdą studzienkę płucze się sterylną wodą i suszy. Tę operację powtarza się pięciokrotnie. Utrwalone komórki wybarwia się przez 30 minut poprzez dodatek 500 μL 0,4% roztworu barwnika (sulforodaniny B) rozpuszczonego w 1% kwasie octowym. Niezwiązany barwnik usuwa się zlewając go z płytki a komórki płucze się 4 razy 1% kwasem octowym. Następnie płytkę suszy się na powietrzu przez ok. 5 minut. Związany barwnik rozpuszcza się poprzez dodanie do każdej studzienki 1500 μL 10 mM buforu Tris-base (trishydroksymetyloaminometan) i miesza się przy użyciu wytrząsarki orbitalnej przez 5 minut. Następnie przenosi się po 200 μυ roztworu z każdej studzienki do dwóch studzienek na nowej płytce 96-studzienkowej oraz oznacza się absorpcję roztworów spektrofotometrycznie przy długości fali 490-530 nm za pomocą czytnika płytek. % zahamowania wzrostu komórek wobec badanego związku oblicza się przyjmując absorpcję roztworu kontrolnego za 100%.After incubation, the stuck cells are fixed by the addition of 500 µυ of cold (4 ° C) 50% trichloracetic acid (TCA) and incubated at 4 ° C for 1 hour. Thereafter, each well is rinsed with sterile water and dried. This operation is repeated five times. Fixed cells are stained for 30 minutes by adding 500 μL of 0.4% dye solution (sulforhodanine B) dissolved in 1% acetic acid. Unbound dye is removed by decanting it from the plate and the cells are washed 4 times with 1% acetic acid. The plate is then air dried for approx. 5 minutes. Bound dye is dissolved by adding 1500 µL of 10 mM Tris-base buffer (trishydroxymethylaminomethane) to each well and mixing using an orbital shaker for 5 minutes. Subsequently, 200 .mu.u of the solution from each well is transferred to two wells in a new 96-well plate and the absorption of the solutions is determined spectrophotometrically at a wavelength of 490-530 nm using a plate reader. The% inhibition of cell growth against the test compound is calculated by taking the absorption of the control solution as 100%.
W zależności od rodzaju linii komórkowej stosowano następujące media hodowlane:Depending on the type of cell line, the following culture media were used:
• linia MCF-7 była namnażana w medium Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME) firmy Sigma (nr kat. D5796), • linie HeLa, A549 oraz KB były namnażane w medium RPMI-1640 firmy Sigma (nr kat. R8758).• MCF-7 line was amplified on Sigma's Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME) (cat. No. D5796), • HeLa, A549 and KB lines were amplified on Sigma's RPMI-1640 medium (cat. No. R8758).
Dla wszystkich badanych pochodnych wyznaczono wskaźnik IC50, który oznacza stężenie związku potrzebne do zahamowania wzrostu komórek o 50%. Pochodne wykazujące IC50 <4 μg/mL są powszechnie uznawane za aktywne (w skrócie: A, ang. active), pochodne mieszczące się w przedziale IC50 = 4-30 μg/mL za związki o średniej aktywności (w skrócie: MA, ang. medium active), natomiast pochodne, dla których IC50 >30 μg/mL za związki nieaktywne (w skrócie: NA, ang. non-active) (National Cancer Institute, Division of Cancer Treatment, Drug Research and Development. Program Procedure. Instruction and technical documentation change notice, instruction 14. Screening data summary interpretation and outline of current screening. Edition NCI, NIH, Bethesda Rev., 1980, 6, 31-62).The IC50 index was determined for all tested derivatives, which is the concentration of the compound required to inhibit cell growth by 50%. Derivatives showing IC 50 <4 μg / mL are commonly considered active (abbreviated: A), derivatives in the range of IC 50 = 4-30 μg / mL as compounds of moderate activity (abbreviated as: MA, medium active), while derivatives for which IC 50 > 30 μg / mL for inactive compounds (abbreviated: NA, non-active) (National Cancer Institute, Division of Cancer Treatment, Drug Research and Development. Program Procedure Instruction and technical documentation change notice, instruction 14. Screening data summary interpretation and outline of current screening. Edition NCI, NIH, Bethesda Rev., 1980, 6, 31-62).
Dla porównania analogiczne badania przeprowadzono z użyciem znanych leków cytotoksycznych, a mianowicie 5-fluoro-2'-deoksyurydyny i 5-fluorourcylu oraz cynchoniną.For comparison, analogous studies were carried out with the use of known cytotoxic drugs, namely 5-fluoro-2'-deoxyuridine and 5-fluorourcyl and cinchonine.
Wyniki badań aktywności cytotoksycznej związków o wzorze ogólnym 1 przedstawione są w tabeli 1. Podane wartości uśredniono z trzech niezależnych oznaczeń.The results of tests for the cytotoxic activity of compounds of general formula I are shown in Table 1. The reported values were averaged over three independent determinations.
PL 221 307 B1PL 221 307 B1
T a b e l a 1T a b e l a 1
Cytotoksyczność in vitro wobec linii komórek nowotworowych raka piersi, raka szyjki macicy, raka płuca oraz raka nosogardzieli związku PCN mieści się w zakresie wysokiej aktywności (IC50The in vitro cytotoxicity against the cancer cell lines of the breast cancer, cervical cancer, lung cancer and nasopharyngeal cancer of the PCN compound is in the range of high activity (IC50
9,0-11,7 μΜ) i jest wyższa od porównywanych znanych i stosowanych związków przeciwrakowych9.0-11.7 μΜ) and is higher than compared to known and used anti-cancer compounds
5-fluoro-2'-deoksyurydyny i 5-fluorouracylu.5-fluoro-2'-deoxyuridine and 5-fluorouracil.
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie 9-O-propargilocynchoniny (PCN) do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii raka piersi. Badania potwierdziły, że najbardziej aktywnym związkiem wobec linii MCF-7 jest PCN, dla którego wartość IC50 wynosi 9.02 μΜ. Jest on ponad 2 razy bardziej cytotoksyczny niż stosowane w terapiach przeciwnowotworowych porównawcze 5FU oraz 1,3 razy bardziej aktywny niż 5FdU.The present invention relates to the use of 9-O-propargylcinchonine (PCN) for the preparation of medicaments for the chemotherapy of breast cancer. The studies confirmed that the most active compound against the MCF-7 lineage is PCN, for which the IC 50 value is 9.02 μΜ. It is more than 2 times more cytotoxic than the comparator 5FU used in cancer therapies and 1.3 times more active than 5FdU.
Kolejnym aspektem wynalazku jest zastosowanie 9-O-propargilocynchoniny (PCN) do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii raka szyjki macicy.Another aspect of the invention is the use of 9-O-propargylcinchonine (PCN) for the preparation of drugs for the chemotherapy of cervical cancer.
Badania potwierdziły, że najbardziej aktywnym związkiem jest PCN, dla którego wartość IC50 wynosi 10,53 μM. PCN jest niemal 2 razy bardziej cytotoksyczny niż porównawczy 5FU oraz 1,2 razy bardziej cytotoksyczny niż 5FdU.The studies confirmed that the most active compound is PCN with the IC50 value of 10.53 μM. PCN is almost 2 times more cytotoxic than the comparative 5FU and 1.2 times more cytotoxic than 5FdU.
Kolejnym aspektem wynalazku jest zastosowanie 9-O-propargilocynchoniny (PCN) do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii raka płuca.Another aspect of the invention is the use of 9-O-propargylcinchonine (PCN) in the preparation of drugs for the chemotherapy of lung cancer.
Badania potwierdziły, że najaktywniejszym związkiem jest PCN, dla którego wartość IC50 wynosi 11,73 μM. PCN jest 1,8 razy bardziej cytotoksyczny niż porównawczy 5FU oraz nieco bardziej cytotoksyczny niż 5FdU.The studies confirmed that the most active compound is PCN, for which the IC50 value is 11.73 μM. PCN is 1.8 times more cytotoxic than the comparative 5FU and slightly more cytotoxic than 5FdU.
Kolejnym aspektem wynalazku jest zastosowanie 9-O-propargilocynchoniny (PCN) do sporządzania leków stosowanych w chemioterapii raka nosogardzieli. Badania potwierdziły, że najaktywniejszym związkiem jest PCN, dla którego wartość IC50 wynosi 9,63 μM. PCN w porównaniu z 5FU oraz 5FdU wykazuje odpowiednio 2,3 oraz 1,4 razy wyższą cytotoksyczność.Another aspect of the invention is the use of 9-O-propargylcinchonine (PCN) in the preparation of drugs for the chemotherapy of nasopharyngeal cancer. The studies confirmed that the most active compound is PCN, for which the IC 50 value is 9.63 μM. PCN in comparison with 5FU and 5FdU shows 2.3 and 1.4 times higher cytotoxicity, respectively.
Cytotoksyczność związków o wzorze ogólnym 1 jest związana z konfiguracją absolutną na atomach C-8 i C-9, najaktywniejszy związek PCN jest pochodną cynchoniny o konfiguracji (8R,9S). Zmiana konfiguracji na przeciwną czyli (8S,9R) występującą w pochodnej otrzymanej z cynchonidyny, powoduje średnio trzykrotne obniżenie aktywności cytotoksycznej.The cytotoxicity of the compounds of general formula I is related to the absolute configuration at C-8 and C-9 atoms, the most active PCN compound is the cinchonine derivative of the (8R, 9S) configuration. Changing the configuration to the opposite, i.e. (8S, 9R), occurring in the derivative obtained from cinchonidine, causes an average three-fold reduction in cytotoxic activity.
Przedmiot wynalazku jest objaśniony przykładem wykonania, który ilustruje syntezę związku PCN.The subject matter of the invention is elucidated by an embodiment that illustrates the synthesis of a PCN compound.
Eter 9-O-propargilowy cynchoniny otrzymano z naturalnego alkaloidu izolowanego z kory chinowca procedurą opisaną w patencie EP 1477488.Cinchonine 9-0-propargyl ether was obtained from a natural alkaloid isolated from cinchona bark by the procedure described in patent EP 1477488.
P r z y k ł a d 1P r z k ł a d 1
Cynchoninę (883 mg; 3 mmol) rozpuszczano w bezwodnym DMF (12 mL) po czym roztwór umieszczono na łaźni lodowej. Po ochłodzeniu mieszaniny do ok. 5°C dodawano porcjami wodorek sodu (50% NaH w oleju mineralnym, 300 mg, 2 równoważniki) w przeciągu 0,5 godz. Mieszany roztwór pozostawiano na 2 godziny po czym dodano strzykawką porcjami bromek propargilu w postaci 80% roztworu w toluenie (0,42 mL; 3,75 mmol, 1,25 równoważnika). Mieszaninę reakcyjną pozostawiano przez noc w temperaturze pokojowej. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano dichlorometan (50 mL) i roztwór organiczny przemyto kolejno nasyconym roztworem NaCl (30 mL), a następnie wodą destylowaną (30 mL). Warstwę organiczną suszono bezwodnym siarczanem magnezu, po czym środek suszący odsączono, a rozpuszczalniki odparowano na wyparce próżniowej utrzymując temperaturę łaźni wodnej w zakresie 40-45°C. Surowy produkt 9-O-propargilocynchoninę (PCN) oczyszPL 221 307 B1 czano na kolumnie chromatograficznej wypełnionej silikażelem (60H, 0,045-0,075 mm/200-300 mesh firmy Merck) w gradiencie: CH2Cl2/n-heksan, CH2Cl2, 1% MeOH/CH2Cl2, 5% MeOH/CH2Cl2. Związek PCN w formie oleju 165 o czystości >99% otrzymano z wydajnością ok. 80%.Cinchonine (883 mg; 3 mmol) was dissolved in anhydrous DMF (12 mL) and the solution was placed in an ice bath. After cooling the mixture to approx. 5 ° C, sodium hydride (50% NaH in mineral oil, 300 mg, 2 eq.) Was added portionwise over 0.5 h. The stirred solution was allowed to stand for 2 hours then propargyl bromide was added by syringe as an 80% solution in toluene (0.42 mL; 3.75 mmol, 1.25 eq.) In portions. The reaction mixture was allowed to stand overnight at room temperature. Then, dichloromethane (50 mL) was added to the reaction mixture, and the organic solution was washed sequentially with a saturated NaCl solution (30 mL) followed by distilled water (30 mL). The organic layer was dried over anhydrous magnesium sulfate, then the drying agent was filtered off and the solvents were evaporated on a vacuum evaporator keeping the temperature of the water bath in the range of 40-45 ° C. The crude product 9-O-propargylcinchonine (PCN) was purified on a silica gel column chromatography (60H, 0.045-0.075 mm / 200-300 mesh from Merck) with a gradient of: CH2Cl2 / n-hexane, CH2Cl2, 1% MeOH / CH2Cl2, 5% MeOH / CH2Cl2. PCN compound 165 in the form of an oil with a purity of> 99% was obtained in a yield of ca. 80%.
1H NMR (300/400 MHz, CDCI3): δ 1,24 (m, 1H), 1,52 (m, 2H), 2,11 (m, 1H), 2,28 (q, 1H, J = 8,0 Hz), 2,46 (t, 1H, J = 2,3 Hz), 2,72-2,97 (m, 3H), 3,11 (m, 1H), 3,49 (s, 1H), 3,92 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 3,95 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 4,21 (d, 1H, J = 2,4 Hz), 4,25 (d, 1H, J = 2,4 Hz), 5,01 (d, 1H, J = 3,7 Hz), 5,14 (d, 1H, J = 11,1 Hz), 6,10 (ddd, 1H, J = 17,3, 10,1, 7,6 Hz), 7,26 (s, 1H ), 7,48 (d, 1H, J = 4,3 Hz), 7,59 (m, 1H), 7,73 (m, 1H), 8,15 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,18 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 8,91 (d, 1H, J = 4,3 Hz). 1 H NMR (300/400 MHz, CDCl3): δ 1.24 (m, 1H), 1.52 (m, 2H), 2.11 (m, 1H), 2.28 (q, 1H, J = 8.0 Hz), 2.46 (t, 1H, J = 2.3 Hz), 2.72-2.97 (m, 3H), 3.11 (m, 1H), 3.49 (s, 1H), 3.92 (d, 1H, J = 1.8Hz), 3.95 (d, 1H, J = 1.8Hz), 4.21 (d, 1H, J = 2.4Hz) 4.25 (d, 1H, J = 2.4Hz), 5.01 (d, 1H, J = 3.7Hz), 5.14 (d, 1H, J = 11.1Hz), 6 , 10 (ddd, 1H, J = 17.3, 10.1, 7.6 Hz), 7.26 (s, 1H), 7.48 (d, 1H, J = 4.3 Hz), 7. 59 (m, 1H), 7.73 (m, 1H), 8.15 (d, 1H, J = 8.4Hz), 8.18 (d, 1H, J = 8.5Hz), 8. 91 (d, 1H, J = 4.3Hz).
13C NMR (CDCI3): δ 20,35, 28,10, 40,00, 49,22, 49,98, 56,48, 60,30, 75,13, 114,74, 123,24, 126,81, 129,18, 130,46, 148,51, 150,08. 13 C NMR (CDCl3): δ 20.35, 28.10, 40.00, 49.22, 49.98, 56.48, 60.30, 75.13, 114.74, 123.24, 126, 81, 129.18, 130.46, 148.51, 150.08.
MS ES (m/z): (-) 331 (M-H)-, 367/369 (M+Cl)-; (+) 333 (M+H)+, 355 (M+Na)+.MS ES (m / z): (-) 331 (MH) - , 367/369 (M + Cl) - ; (+) 333 (M + H) + , 355 (M + Na) + .
Claims (5)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL408980A PL221307B1 (en) | 2014-07-24 | 2014-07-24 | The use of quinine alkaloid derivatives as cytotoxic compounds |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL408980A PL221307B1 (en) | 2014-07-24 | 2014-07-24 | The use of quinine alkaloid derivatives as cytotoxic compounds |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL408980A1 PL408980A1 (en) | 2015-02-02 |
| PL221307B1 true PL221307B1 (en) | 2016-03-31 |
Family
ID=52397009
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL408980A PL221307B1 (en) | 2014-07-24 | 2014-07-24 | The use of quinine alkaloid derivatives as cytotoxic compounds |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL221307B1 (en) |
-
2014
- 2014-07-24 PL PL408980A patent/PL221307B1/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL408980A1 (en) | 2015-02-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6951767B2 (en) | Heterocyclic compounds used as anti-cancer drugs | |
| Cao et al. | Synthesis and structure–activity relationships of harmine derivatives as potential antitumor agents | |
| Chen et al. | Synthesis and biological evaluation of 1, 9-disubstituted β-carbolines as potent DNA intercalating and cytotoxic agents | |
| CN102153564B (en) | Nitrogen-atom-containing arteannuin dimers, and preparation method and application thereof | |
| Shah et al. | Synthesis of C-2 and C-3 substituted quinolines and their evaluation as anti-HIV-1 agents | |
| Godlewska et al. | Biological evaluation of ω-(dialkylamino) alkyl derivatives of 6H-indolo [2, 3-b] quinoline-novel cytotoxic DNA topoisomerase II inhibitors | |
| Bergemann et al. | Novel B-ring modified allocolchicinoids of the NCME series: design, synthesis, antimicrotubule activity and cytotoxicity | |
| Yang et al. | Identification of benzofuro [2, 3-b] quinoline derivatives as a new class of antituberculosis agents | |
| WO2016058501A1 (en) | 5-methyl-2-(pyridine-2-ylamino)-8h-pyridino[2,3-d]pyrimidine-7-one compound | |
| CA2891633C (en) | Application of cinchona alkaloid derivatives as cytotoxic compounds | |
| Zi et al. | Synthesis and antitumor activity of biotinylated camptothecin derivatives as potent cytotoxic agents | |
| JP7245918B2 (en) | Sarsasapogenin structure-based derivative, pharmaceutical composition and use thereof | |
| Castro et al. | Lignopurines: a new family of hybrids between cyclolignans and purines. Synthesis and biological evaluation | |
| CN110981882B (en) | Chelidonium nitric oxide donor derivatives, and preparation method and application thereof | |
| CN110981881B (en) | Chelidonine nitric oxide donor derivative and preparation method and application thereof | |
| CN110156817B (en) | Anti-tumor derivative of bi-evodiamine molecule and preparation and application thereof | |
| US9714254B2 (en) | Anilino podophyllin derivative having antitumor activity, method for preparation thereof, and use thereof | |
| PL221307B1 (en) | The use of quinine alkaloid derivatives as cytotoxic compounds | |
| CN113292629B (en) | Diosgenin hydroximic acid derivative and preparation method and application thereof | |
| Wei et al. | Syntheses and evaluation of acridone derivatives as anticancer agents targeting Kras promoter i-motif structure | |
| PL225349B1 (en) | 2',3'-dideoxy-5-fluorouridine derivatives with cytotoxic effect, their preparation and use | |
| Li et al. | Design and synthesis of luotonin A-derived topoisomerase targeting scaffold with potent antitumor effect and low genotoxicity | |
| Cho et al. | Synthesis and antitumor activity of 3-arylisoquinoline derivatives | |
| CN111393453A (en) | Acrylketone derivative of levofloxacin, and preparation method and application thereof | |
| CN115572247B (en) | Vitamin K 3 Derivatives and medical use thereof |