PL220670B1 - Sposób pomiaru wpływu mieszanin gazowych na żywe komórki - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób pomiaru wpływu mieszanin gazowych na żywe komórki, przeznaczony do pomiaru ich toksycznego wpływu.

Z opisu CN102212470 znany jest sposób pomiaru wpływu tlenku węgla i radonu na komórki, w którym wytworzoną ich mieszaninę dostarcza się do urządzenia pomiarowego, w którym znajdują się żywe komórki.

Z kolei z opisu CN102212469 znany jest sposób pomiaru wpływu radonu i benzenu na żywe komórki, w którym wytworzoną ich mieszaninę dostarcza się rurkami do komory zawierającej hodowlę komórkową, a następnie bada się ich toksyczne oddziaływanie na komórki w funkcji czasu.

Istota sposobu pomiaru wpływu mieszanin gazowych na żywe komórki według wynalazku polega na tym, że w sterylnie zamkniętej komorze znajdującej się w komorze kondycjonującej umieszcza się hodowlę komórkową pozbawioną płynu hodowlanego, a następnie za pomocą układu aspiracyjnego poprzez filtr antybakteryjny wprowadza się analizowany gaz do komory z hodowlą komórkową, po czym po odpowiedniej ekspozycji hodowli komórek na gaz zalewa się je płynem hodowlanym, po czym bada się toksyczny wpływ gazu na hodowlę komórek.

Korzystnie, komora kondycjonująca jest wyposażona w czujnik ciśnienia i czujnik temperatury.

Zaletą sposobu pomiaru wpływu toksyczności mieszanin gazowych na żywe komórki jest możliwość badania bezpośredniego oddziaływania różnego rodzaju rzeczywistych mieszanin gazowych pochodzących z różnych źródeł na organizmy żywe z uwzględnieniem efektów synergizmu addytywnego.

Przedmiot wynalazku jest przedstawiony w przykładzie wykonania i uwidoczniony na rysunku, na którym fig. 1 przedstawia sposób pomiaru wpływu toksycznego mieszanin gazowych na żywe komórki.

P r z y k ł a d 1

Sposób pomiaru toksycznego wpływu spalin silnikowych na ludzkie drogi oddechowe polega na tym, że w zamykanej sterylnej komorze 1, która znajduje się w komorze kondycjonującej 3 umieszcza się hodowle komórek 2 nabłonka płuc ludzkich A549 linii komórek nabłonkopodobnych raka płuc (ATCC CCL 185). Następnie do komory kondycjonującej 3 za pomocą układu aspiracyjnego 4 poprzez filtry antybakteryjne 5 wprowadza się spaliny silnikowe w celu określenia ich wpływu na układ oddechowy człowieka, przy czym czas ekspozycji hodowli komórek 2 dobiera się stosownie do czasu kontaktu człowieka ze spalinami silnikowymi na stanowisku pracy. Po odpowiednim czasie ekspozycji hodowle komórkowe zalewa się płynem hodowlanym i poddaje się standardowym testom toksykologicznym zgodnie z normowanymi procedurami, tj. określenie właściwości mutagennych badanych preparatów poprzez oznaczenie białka p-53 w ludzkich komórkach krwi obwodowej metodą immunocytochemiczną, oznaczanie poziomu cytokin (TNF-α, IL-4) za pomocą testu ELISA, cytotoksyczności oznaczona testem MTT.

P r z y k ł a d 2

Sposób pomiaru wpływu toksycznego powietrza z wnętrza pojazdu na skórę ludzką polega na tym, że w zamykanej sterylnej komorze 1, która znajduje się w komorze kondycjonującej 3 umieszcza się hodowle komórek 2 tkanki podskórnej L929 - linia komórek fibroblastopodobnych otrzymanych z podskórnej tkanki tłuszczowej myszy C3H (ATCC CCL 1). Następnie do komory kondycjonującej 3 za pomocą układu aspiracyjnego 4 poprzez filtry antybakteryjne 5 wprowadza się powietrze z wnętrza pojazdu w celu określenia ich wpływu na komórki skóry, przy czym czas ekspozycji hodowli komórek 2 dobiera się stosownie do czasu kontaktu człowieka z mieszaniną gazów podczas użytkowania samochodu. Po odpowiednim czasie ekspozycji hodowle komórkowe 2 tkanki podskórnej zalewa się płynem hodowlanym i poddaje się standardowym testom toksykologicznym zgodnie z normowanymi procedurami, tj. określenie właściwości mutagennych badanych preparatów poprzez oznaczenie białka p-53 w ludzkich komórkach krwi obwodowej metodą immunocytochemiczną, oznaczanie poziomu cytokin (TNF-α, IL-4) za pomocą testu ELISA, cytotoksyczności oznaczona testem MTT.

P r z y k ł a d 3

Sposób taki sam jak w przykładzie 1 lub przykładzie 2 z tą różnicą, że za pomocą czujnika ciśnienia 6 i czujnika temperatury 7 kontroluje się temperaturę i ciśnienia w celu podtrzymania funkcji życiowych komórek hodowlanych.

Claims (2)

1. Sposób pomiaru wpływu mieszanin gazowych na żywe komórki, znamienny tym, że w sterylnie zamkniętej komorze (1) znajdującej się w komorze kondycjonującej (3) umieszcza się hodowlę komórkową (2) pozbawioną płynu hodowlanego, a następnie za pomocą układu aspiracyjnego (4) poprzez filtr bakteryjny (5) wprowadza się analizowany gaz do komory (1) z hodowlą komórkową (2), po czym po odpowiedniej ekspozycji hodowli komórek (2) na gaz zalewa się je płynem hodowlanym, po czym bada się toksyczny wpływ gazu na hodowlę komórek (2).

2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że komora kondycjonująca (3) jest wyposażona w czujnik ciśnienia (6) i czujnik temperatury (7).