PL218587B1 - Process for preparing 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-diene-3,17-dione - Google Patents

Process for preparing 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-diene-3,17-dione

Info

Publication number
PL218587B1
PL218587B1 PL400947A PL40094712A PL218587B1 PL 218587 B1 PL218587 B1 PL 218587B1 PL 400947 A PL400947 A PL 400947A PL 40094712 A PL40094712 A PL 40094712A PL 218587 B1 PL218587 B1 PL 218587B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
carried out
androst
oxa
dione
homo
Prior art date
Application number
PL400947A
Other languages
Polish (pl)
Other versions
PL400947A1 (en
Inventor
Anna Panek
Teresa Kołek
Alina Świzdor
Natalia Milecka-Tronina
Original Assignee
Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Przyrodniczy We Wrocławiu filed Critical Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority to PL400947A priority Critical patent/PL218587B1/en
Publication of PL400947A1 publication Critical patent/PL400947A1/en
Publication of PL218587B1 publication Critical patent/PL218587B1/en

Links

Landscapes

  • Steroid Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Opis wynalazkuDescription of the invention

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dionu, o wzorze 2 przedstawionym na rysunku.The present invention relates to a process for the preparation of 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dione of the formula (2) shown in the drawing.

Wynalazek może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym do otrzymywania związków biologicznie aktywnych.The invention may find application in the pharmaceutical industry for the preparation of biologically active compounds.

17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dion jest związkiem stosowanym głównie jako inhibitor aromatazy przekształcającej androgeny w estrogeny. Dzięki jego własnościom terapeutycznym można farmakologicznie zapobiegać rozwojowi raka piersi, który może być aktywowany przez estrogeny u kobiet po menopauzie. Związek ten stosowany jest również w profilaktyce przerostu i nowotworu prostaty, przy ginekomastii oraz przedwczesnym dojrzewaniu (G. E. Serafini, S. Moslemi, Molecular and Cellular Endocrinology, 2001, 178, s. 117-131).17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dione is a compound mainly used as an aromatase inhibitor that converts androgens into estrogens. Due to its therapeutic properties, it is possible to pharmacologically prevent the development of breast cancer, which can be activated by oestrogens in postmenopausal women. This compound is also used in the prevention of prostate hyperplasia and cancer, in gynecomastia and premature puberty (G. E. Serafini, S. Moslemi, Molecular and Cellular Endocrinology, 2001, 178, pp. 117-131).

Wynalazek dotyczy mikrobiologicznego, konkurencyjnego w stosunku do chemicznego, utleniania typu Baeyera-Villigera 1,4-dien-3-okso substratu steroidowego do 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dionu, z układem δ-laktonu w pierścieniu D.The invention relates to microbial, competitive to the chemical, Baeyer-Villiger type oxidation of 1,4-dien-3-oxo steroid substrate to 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dione, with δ-lactone system in the D ring

Znany jest sposób otrzymywania 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dionu w mieszaninie produktów na drodze mikrobiologicznej transformacji propionianu testosteronu oraz androstendionu przez Trichoderma hamatum KCH25 z niską wydajnością. W ciągu 4 dni z propionianu uzyskano 5% tego produktu a z androstendionu w ciągu 6 dni 13% (A. Bartmańska, J. Dmochowska-Gładysz, Enzyme and Microbial Technology, 2007, 40, s. 1615-1621). Związek ten otrzymano również z niską wydajnością jako jeden z produktów przekształcenia 17(a-hydroksyprogesteronu w kulturze Aspergillus tamarii KITA (A. Ch. Hunter, N. E. Carragher, Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology, 2003, 87, s. 301-308).It is known to obtain 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dione in a mixture of products by microbial transformation of testosterone propionate and androstenedione by Trichoderma hamatum KCH25 with low yield. Within 4 days, 5% of this product was obtained from propionate and 13% from androstenedione within 6 days (A. Bartmańska, J. Dmochowska-Gładysz, Enzyme and Microbial Technology, 2007, 40, pp. 1615-1621). This compound was also obtained in low yield as one of the transformation products of 17 (α-hydroxyprogesterone in Aspergillus tamarii KITA culture (A. Ch. Hunter, NE Carragher, Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology, 2003, 87, pp. 301-308) .

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dionu, opracowany w wyniku badań prowadzonych w ramach projektu finansowanego przez Unię Europejską z Europejskiego Funduszu Rozwoju Regionalnego, Grant Nr POIG. 01 .03.01 -00- 1 58/09 „Biotransformacje użyteczne w przemyśle farmaceutycznym i kosmetycznym.The subject of the invention is a method of obtaining 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dione, developed as a result of research conducted as part of a project financed by the European Union from the European Regional Development Fund, Grant No. POIG. 01 .03.01 -00- 1 58/09 "Biotransformations useful in the pharmaceutical and cosmetic industries.

Istota wynalazku polega na tym, że wodną pożywkę zaszczepia się szczepem Penicillium lilacinum AM111, po czym hodowlę prowadzi się przez 3 doby. Propionian 1-dehydrotestosteronu roz3 puszczony w acetonie, dodaje się w ilości od 10 do 25 mg na 100 cm3 pożywki i transformację prowadzi się przez kolejne 3 doby. Roztwór ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą, osusza się i odparowuje rozpuszczalnik. Surowy produkt oczyszcza się chromatograficznie, przy czym proces biotransformacji substratu prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu reagentów i w temperaturze od 18 do 27°C.The essence of the invention lies in the fact that the aqueous medium is inoculated with the Penicillium lilacinum AM111 strain, after which the cultivation is carried out for 3 days. Propionate, 1-dehydrotestosterone striped 3 released in acetone, is added in an amount of from 10 to 25 mg per 100 cm 3 of culture medium and the transformation is carried out for a further 3 days. The solution is extracted with a water-immiscible organic solvent, dried and the solvent is evaporated off. The crude product is purified by chromatography, with the biotransformation process of the substrate carried out by shaking the reagents continuously and at a temperature of 18 to 27 ° C.

33

Korzystnie jest, gdy do hodowli dodaje się 25 mg substratu na 100 cm3 pożywki.Preferably, 25 mg of substrate per 100 cm 3 of medium are added to the culture.

Korzystnie także jest, gdy oczyszczanie chromatograficzne prowadzi się przy pomocy eluentu o składzie heksan: aceton: chloroform: octan etylu, w proporcji objętościowej składnikówIt is also preferred that the chromatographic purification is carried out with the eluent of the composition hexane: acetone: chloroform: ethyl acetate, in the proportion by volume of the components

1,5:1:0,5:0,25.1.5: 1: 0.5: 0.25.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dionu z wydajnością 92%, w temperaturze pokojowej.The main advantage of the invention is the preparation of 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dione with a yield of 92%, at room temperature.

Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.The invention is explained in more detail using an exemplary embodiment.

P r z y k ł a dP r z k ł a d

Do kolby Erlenmajera o pojemności 300 cm3, w której znajduje się 100 cm3 sterylnej pożywki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku, wprowadza się szczep Penicillium lilacinum AM111. Hodowlę prowadzi się przy stałym wstrząsaniu w temperaturze 20°C. Po trzech dniach wzrostu mikroor3 ganizmu dodaje się 25 mg propionianu 1-dehydrotestosteronu, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm3 acetonu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez kolejne 72 godziny w warunkach, w których prowadzona była hodowla mikroorganizmu. Następnie uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 35 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie używając jako eluent mieszaninę: heksan: aceton: chloroform: octan etylu (1,5:1:0,5:0,25 v/v/v/v). Na tej drodze otrzymuje się 23 mg 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dionu, o wzorze 2 (wydajność 92%).Penicillium lilacinum AM111 strain is introduced into an Erlenmajer flask with a capacity of 300 cm 3 , in which there is 100 cm 3 of a sterile medium containing 3 g glucose and 1 g aminobac. The cultivation is carried out under constant agitation at a temperature of 20 ° C. After three days of growth mikroor 3 ganizmu added 25 mg of 1-dehydrotestosterone propionate of the formula 1, dissolved in 1 cm 3 of acetone. The transformation is carried out under continuous shaking for a further 72 hours under the conditions in which the microorganism was grown. The resulting transformation solution was then extracted three times with chloroform, dried with anhydrous magnesium sulfate, and the solvent was evaporated. 35 mg of crude product are obtained which are purified by chromatography using as eluent: hexane: acetone: chloroform: ethyl acetate (1.5: 1: 0.5: 0.25 v / v / v / v). In this way, 23 mg of 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dione of formula 2 are obtained (92% yield).

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:The obtained product is characterized by the following spectral data:

1H NMR: δ (ppm): 1,20 (3H, s, 19-CHs); 1,37 (3H, s, I8-CH3); 6,09 (1H, br s, C=C4H); 6,26 (1H, dd, J = 2,1; 10,2 Hz, C=C2H); 7,02 (1H, d, J = 10,2 Hz, C=C1H) 1 H NMR: δ (ppm): 1.20 (3H, s, 19-CHs); 1.37 (3H, s, 18-CH3); 6.09 (1H, br s, C = C4H); 6.26 (1H, dd, J = 2.1; 10.2 Hz, C = C2H); 7.02 (1H, d, J = 10.2Hz, C = C1H)

PL 218 587 B1 13C NMR: δ (ppm): 185,9 (C-3); 170,6 (C-17); 166,3 (C-5); 154,1 (C-1); 128,1 (C-2); 124,0 (C-4); 82,2 (C-13); 51,0 (C-9); 45,3 (C-14); 42,7 (C-10); 38,8 (C-12); 37,5 (C-8); 32,1 (C-7); 32,0 (C-6); 28,3 (C-16); 23,4 (C-11); 20,2 (C-15); 19,9 (C-18); 18,5 (C-19).GB 218 587 B1 13 C NMR: δ (ppm): 185.9 (C-3); 170.6 (C-17); 166.3 (C-5); 154.1 (C-1); 128.1 (C-2); 124.0 (C-4); 82.2 (C-13); 51.0 (C-9); 45.3 (C-14); 42.7 (C-10); 38.8 (C-12); 37.5 (C-8); 32.1 (C-7); 32.0 (C-6); 28.3 (C-16); 23.4 (C-11); 20.2 (C-15); 19.9 (C-18); 18.5 (C-19).

Claims (3)

1. Sposób wytwarzania 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dionu, o wzorze 2, na drodze mikrobiologicznej hydrolizy estru do alkoholu, który utlenienia się do ketonu, a następnie przekształca się na drodze utleniania typu Baeyera-Villigera do δ-laktonu w pierścieniu D, znamienny tym, że wodną pożywkę zaszczepia się szczepem Penicillium lilacinum AM111, po czym hodowlę prowadzi się przez 3 doby, następnie dodaje się propionian 1-dehydrotestosteronu rozpuszczony w acetonie, 3 w ilości od 10 do 25 mg na 100 cm3 pożywki, po tym transformację prowadzi się przez kolejne 3 doby, następnie roztwór ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą, osusza się i odparowuje rozpuszczalnik, zaś surowy produkt oczyszcza się chromatograficznie, przy czym proces biotransformacji substratu prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu reagentów i w temperaturze od 18 do 27°C.1. Method for the preparation of 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-dien-3,17-dione of formula 2 by microbial hydrolysis of an ester to an alcohol which is oxidized to a ketone and then converted by Baeyer-Villiger type oxidation to δ-lactone in the D-ring, characterized in that the aqueous medium is inoculated with Penicillium lilacinum AM111 strain, then the cultivation is carried out for 3 days, then 1-dehydrotestosterone propionate dissolved in acetone, 3 in an amount from 10 to 25 mg per 100 cm 3 of medium, after which the transformation is carried out for the next 3 days, then the solution is extracted with a water-immiscible organic solvent, dried and the solvent evaporated, and the crude product is purified by chromatography, with the biotransformation of the substrate carried out shaking the reactants continuously and at a temperature of 18 to 27 ° C. 33 2. Sposób, według zastrz. 1, znamienny tym, że dodaje się 25 mg substratu na 100 cm3 pożywki.2. The method according to p. Method according to claim 1, characterized in that 25 mg of substrate are added per 100 cm 3 of medium. 3. Sposób, według zastrz. 1, znamienny tym, że oczyszczanie chromatograficzne prowadzi się przy pomocy eluentu o składzie heksan: aceton: chloroform: octan etylu, w proporcji objętościowej składników 1,5:1:0,5:0,25.3. The method according to p. The method of claim 1, characterized in that the chromatographic purification is carried out with the eluent of the following composition: hexane: acetone: chloroform: ethyl acetate, in the volume ratio of components 1.5: 1: 0.5: 0.25.
PL400947A 2012-09-27 2012-09-27 Process for preparing 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-diene-3,17-dione PL218587B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL400947A PL218587B1 (en) 2012-09-27 2012-09-27 Process for preparing 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-diene-3,17-dione

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL400947A PL218587B1 (en) 2012-09-27 2012-09-27 Process for preparing 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-diene-3,17-dione

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL400947A1 PL400947A1 (en) 2013-05-27
PL218587B1 true PL218587B1 (en) 2015-01-30

Family

ID=48522802

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL400947A PL218587B1 (en) 2012-09-27 2012-09-27 Process for preparing 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-diene-3,17-dione

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL218587B1 (en)

Also Published As

Publication number Publication date
PL400947A1 (en) 2013-05-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ZA200700958B (en) Novel 2-substituted D-homo-estra-1,3,5(10)-trienes as inhibitors of 17pMiydroxysteroid dehydrogenase type I
Milecka-Tronina et al. Hydroxylation of DHEA and its analogues by Absidia coerulea AM93. Can an inducible microbial hydroxylase catalyze 7α-and 7β-hydroxylation of 5-ene and 5α-dihydro C19-steroids?
Yang et al. Biotransformations of steroids to testololactone by a multifunctional strain Penicillium simplicissimum WY134-2
DE60312029T2 (en) PROCESS FOR PREPARING C-7 SUBSTITUTED 5-ANDROSTENDS
Özçinar et al. Biotransformation of ruscogenins by Cunninghamella blakesleeana NRRL 1369 and neoruscogenin by endophytic fungus Neosartorya hiratsukae
FI78710C (en) Process for the preparation of novel 19-thio-androstane derivatives and their 4,5-dihydro analogs
Zafar et al. New metabolites from fungal biotransformation of an oral contraceptive agent: methyloestrenolone
Fu et al. Tamosterone sulfates: A C-14 epimeric pair of polyhydroxylated sterols from a new Oceanapiid sponge genus
US7732493B2 (en) 2-substituted D-homo-estra-1,3,5(10)-trienes as inhibitors of 17β-hydroxy steroid dehydrogenase type 1
Siddiqui et al. Biocatalytic transformation of steroidal drugs oxandrolone and ganaxolone, and aromatase inhibitory activity of transformed products
PL218587B1 (en) Process for preparing 17a-oxa-D-homo-androst-1,4-diene-3,17-dione
Cao et al. Metabolites identification of 17α-methyltestosterone mediated by Aspergillus niger RG13B1 and their cytotoxicity on cancer cells
FI102073B (en) Process for Preparation of Aromatase Inhibitors Useful for 2,19-Ethylene Bridge Steroids
Świzdor et al. Biohydroxylation of 7‐oxo‐DHEA, a natural metabolite of DHEA, resulting in formation of new metabolites of potential pharmaceutical interest
PL239842B1 (en) Method of preparing 19-nortestolactone
Hussain et al. Seven new metabolites of drostanolone heptanoate by using Beauveria bassiana, and Macrophomina phaseolina cell suspension cultures
Kupfer et al. Metabolism in vitro of 19-nortestosterone in female rat liver homogenate
Pérez-Díaz et al. Novel steroidal penta-and hexacyclic compounds derived from 12-oxospirostan sapogenins
Sonego et al. Synthesis and antifungal activity of C-21 steroids with an aromatic D ring
PL218589B1 (en) Process for preparing 17a-oxa-D-homo-5?-Androst-3,17-dione and 3?-Hydroxy-17a-oxa-D-homo-5?-Androst-17-one
CN104788529B (en) The preparation method of 5 α-chloro-androstane-6 β, 19-epoxy-3,17-diketone
PL212016B1 (en) Production method of testoloactane (17a-oxa—D-homo-androst-4-en-3,17-dione)
PL246161B1 (en) Method of producing 19-nortestololactone
DE69302007T2 (en) ANDROST-4-EN [4,5-B] PYRROL DERIVATIVES AND A METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF
Łyczko et al. Highly Regioselective and Stereoselective Biohydroxylations of Oxandrolone. Catalysts 2021, 11, 16

Legal Events

Date Code Title Description
LICE Declarations of willingness to grant licence

Effective date: 20140714