PL210611B1

PL210611B1 - Nowa pochodna pirymidyny i sposób wytwarzania nowej pochodnej pirymidyny

Info

Publication number: PL210611B1
Application number: PL376420A
Authority: PL
Inventors: Jerzy Cieplik; Janusz Pluta; Olaf Gubrynowicz
Original assignee: Akademia Medyczna Im Piastow Śląskich We Wrocławiu
Priority date: 2005-08-01
Filing date: 2005-08-01
Publication date: 2012-02-29
Also published as: PL376420A1

Description

Przedmiotem wynalazku jest nowa pochodna pirymidyny i sposób wytwarzania nowej pochodnej pirymidyny o nazwie: 4-(4'-chlorofenyloamino)-5-(3',5'-dichlorofenyloaminometyleno)-2-fenylo-6-metylopirymidyna i wzorze 1. Nowa pochodna wykazuje bardzo silne działanie przeciwbakteryjne, znacznie przewyższające działanie chloramfenikolu lub erytromycyny.

Wynalazek dotyczy nowej pochodnej pirymidyny o nazwie: 4-(4'-chlorofenyloamino)-5-(3',5'-dichlorofenyloaminometyleno)-2-fenylo-6-metylopirymidyna i wzorze 1.

Wynalazek dotyczy także sposobu wytwarzania nowej pochodnej pirymidyny o nazwie: 4-(4'-chlorofenylamino)-5-(3',5'-dichlorofenyloaminometyleno)-2-fenylo-6-metylopirymidyna i wzorze 1.

Istota wynalazku polega na tym, że 4-(4'-chlorofenyloamino)-5-chlorometyleno-2-fenylo-6-metylopirymidynę o wzorze 2 poddaje się kondensacji z 3,5-dichloroaniliną w niepolarnym rozpuszczalniku, korzystnie w chloroformie lub tetrahydrofuranie, w temperaturze wrzenia.

Nieoczekiwanie okazało się, że otrzymana nowa, wyżej wymieniona pochodna, wykazuje działanie przeciwbakteryjne, czego nie można było z góry przewidzieć. Badania wykazały, że działanie to jest związane ze strukturą pirymidyn, a ich mechanizm działania przeciwbakteryjnego jest nie do końca wyjaśniony. Jak się okazało na działanie przeciwbakteryjne ma także wpływ rodnika elektrofilowego (chlor) w pierścieniu aromatycznym przy węglu 4. Działanie przeciwbakteryjne zostało potwierdzone badaniami mikrobiologicznymi na wybranych szczepach bakteryjnych. Do oznaczeń wybrano wzorcowe kultury bakteryjne, które zawieszono w 3 ml jałowego roztworu PBS, doprowadzając do zgodności ze standardem 0,5 Mc Farlanda, odpowiadającego 2 x 10⁸ CUF/ml i rozcieńczono go jałowym roztworem PBS 1 : 10, uzyskując 10⁷ CFU/ml. Wykonane inokulum dodawano w ilości 0,01 ml do 0,2 ml jałowych finalnych rozcieńczeń badanych substancji według tabeli 1 - uzyskując koncentrację bakterii w badanych próbach 5 x 10⁴ CFU/ml. Dla każdego rozcieńczenia badanej substancji wykonano 6 prób, przy jednej kontroli bez inokulum. Badania oparto na standardzie M-7, A-5 (MIC Testing) Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Test for Bacteria That Grow Aerobically; Approved Standard - Filth Edition* NCCLS Volume 20 Number 2 January 2000. Badania przeprowadzono na następujących szczepach: Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis, Serratia marcesceus, Proteus vu Igaris, Staphylococcus epidermidis, Klebsiella Pneumoniae, Candida albicans.

Przedmiot wynalazku jest przedstawiony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d: 4 g (0.011) mola 4-(4'-chlorofenyloamino)-5-chlorometyleno-2-fenylo-6-metylopirymidyny o wzorze 2 rozpuszcza się w 50 ml chloroformu i dodaje 3 g 3,5-dichloroaniliny. Całość podgrzewa się pod chłodnicą zwrotną przez 5 godz. Następnie mieszaninę poreakcyjną oziębia się i wlewa do 200 ml wody, po czym roztwór ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem. Wyciągi chloroformowe łączy się i osusza nad siarczanem magnezu. Roztwór odsącza się od środka suszącego i przesącz zagęszcza. Surową oleistą pozostałość krystalizuje się z metanolu, uzyskując 4,4 g nowego związku o temperaturze topnienia 158-160°C, z wydajnością równą 81% wydajności teoretycznej. Struktura nowego związku o wzorze 1 została potwierdzona badaniami fizykochemicznymi, a mianowicie analizą elementarną, protonowym rezonansem magnetycznym oraz spektroskopią w podczerwieni.

Analiza elementarna: C H

Obliczono: 61.67 3.85

Otrzymano: 61.92 3.46

IR (KBr) ν = cm^-1 3340 (NH), 1260 (NH).

N

11.99

12.04

Cl

22.48

22.52 ¹H NMR δ = PPM: 1.55 (s-3H, CH3), 1,80 (d-2H CH2), 2.55 (s-1H Al.-NH), 4.25 (s-1H, Ar-NH), 6.13-7.80 (m - 12 H aromat.).

Szczegółowe wyniki badań przedstawia poniższa tabela:

T a b e l a 1. Minimalne stężenie hamowania rozwoju szczepów bakteryjnych (MIC) ^g/ml) Test M-7, A-5

	Chloramfenikol	Nowa pochodna według wzoru 1	Erytromycyna
	μg/ml	μg/ml	μg/ml
1	2	3	4
Enterococcus faecalis PCM - 896	4	8	4

PL 210 611 B1 cd. tabeli 1

1	2	3	4
Bacillus subtilis ATCC - 6633	2	256	0,25
Pseudomonas aeruginosa ATCC - 27853	64	256	64
Escherichia coli ATCC - 25922	8	256	32
Klebsiella pneumoniae ATCC - 13886	1	64	1
Staphylococcus epidermidis ATCC - 14990	16	128	32
Staphylococcus aureus ATCC - 6538P	2	8	0,25
Proteus vulgaris ATCC - 13315	2	256	64
Candida albicans ATCC - 10231	128	128	128

Zastrzeżenia patentowe

Claims

Zastrzeżenia patentowe

1. Nowa pochodna pirymidyny o nazwie 4-(4'-chlorofenyloamino)-5-(3',5'-dichlorofenyloaminometyleno)-2-fenylo-6-metylopirymidyna i wzorze 1.
2. Sposób wytwarzania nowej pochodnej pirymidyny o nazwie 4-(4'-chlorofenyloamino)-5-(3',5'-dichlorofenyloaminometyleno)-2-fenylo-6-metylopirymidyna i wzorze 1, znamienny tym, że 4-(4'-chlorofenyloamino)-5-chlorometyleno-2-fenylo-6-metylopirymidynę o wzorze 2, poddaje się kondensacji z 3,5-dichloroaniliną w temperaturze wrzenia, w niepolarnym rozpuszczalniku.
3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że jako rozpuszczalnika używa się chloroformu.
4. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że jako rozpuszczalnika używa się tetrahydrofuranu.