PL209163B1 - The manner of obtaining enzyme preparation - Google Patents
The manner of obtaining enzyme preparationInfo
- Publication number
- PL209163B1 PL209163B1 PL379557A PL37955706A PL209163B1 PL 209163 B1 PL209163 B1 PL 209163B1 PL 379557 A PL379557 A PL 379557A PL 37955706 A PL37955706 A PL 37955706A PL 209163 B1 PL209163 B1 PL 209163B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- parts
- sulphate
- medium
- weight
- production
- Prior art date
Links
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Opis wynalazkuDescription of the invention
Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania preparatu enzymów zawierającego kompleks enzymów pektynolitycznych, celulolitycznych oraz ksylanazy, o aktywności poszczególnych enzymów niezbędnej do efektywnej, kompleksowej obróbki wstępnej włókien lnu i bawełny lub gotowych wyrobów z lnu lub bawełny.The subject of the invention is a method of obtaining an enzyme preparation containing a complex of pectinolytic, cellulolytic and xylanase enzymes, with the activity of individual enzymes necessary for effective, comprehensive pretreatment of flax and cotton fibers or ready-made linen or cotton products.
Preparaty enzymów otrzymywane znanymi sposobami w drodze hodowli grzyba nitkowatego Aspergillus niger w podłożu płynnym lub w podłożu stałym, nie zawierają kompleksu enzymów niezbędnego do efektywnej obróbki włókien lnianych i bawełnianych.The enzyme preparations obtained by known methods by culturing the filamentous fungus Aspergillus niger in a liquid or a solid base do not contain the enzyme complex necessary for the effective treatment of flax and cotton fibers.
I tak, z czasopisma Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology 1998, t. 20, s. 34-38 jest znany sposób otrzymywania preparatu enzymatycznego zawierającego pektynoesterazę i poligalakturonazę, polegający na hodowli szczepu grzyba Aspergillus niger w podłożu stałym zawierającym pektynę.Thus, from the Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology 1998, vol. 20, pp. 34-38, there is known a method of obtaining an enzyme preparation containing pectinesterase and polygalacturonase, which consists in culturing a strain of Aspergillus niger in a solid medium containing pectin.
Sposób otrzymywania preparatu enzymatycznego zawierającego egzopektynazę w drodze hodowli szczepu grzyba Aspergillus niger w podłożu stałym jest znany z czasopisma Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology 2001, t. 26, s. 271-274.A method for the preparation of an enzyme preparation containing exopectinase by culturing a fungus strain Aspergillus niger in a solid medium is known from the Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology 2001, vol. 26, pp. 271-274.
Z czasopisma Process Biochemistry 2000, t. 36, s. 255-261 jest znane otrzymywanie preparatu enzymatycznego, zawierającego poligalakturonazę, celulazę, ksylanazę i proteinazę, w drodze hodowli szczepu grzyba Aspergillus niger 3T5B8 w podłożu stałym zawierającym skórki bananów, skórki mango i otręby pszenne. Preparat ten ułatwia ekstrakcję olejów z pulpy oleandra.From the journal Process Biochemistry 2000, vol. 36, pp. 255-261 it is known to obtain an enzyme preparation containing polygalacturonase, cellulase, xylanase and proteinase by culturing the fungus strain Aspergillus niger 3T5B8 in a solid medium containing banana peels, mango skins and wheat bran . This preparation facilitates the extraction of oils from oleander pulp.
W czasopiś mie Bioresource Technology 2004, t. 91, s. 153-156 opisano otrzymywanie preparatu celulazy i hemicelulozy w drodze hodowli szczepu grzyba Aspergillus niger KK2 na podłożu stałym.The journal Bioresource Technology 2004, vol. 91, pp. 153-156 describes the preparation of cellulase and hemicellulose preparation by culturing the fungus strain Aspergillus niger KK2 on a solid medium.
Natomiast z opisu patentowego PL nr 166 006 jest znany sposób otrzymywania kompleksu enzymów celulolitycznych w hodowli wgłębnej w podłożu ciekłym szczepu grzyba nitkowatego Aspergillus niger IBT-90.On the other hand, the patent description PL No. 166 006 discloses a method of obtaining a complex of cellulolytic enzymes in submerged culture in a liquid medium of the filamentous fungus Aspergillus niger IBT-90.
Sposób otrzymywania kompleksu enzymów w hodowli szczepu grzyba nitkowatego Aspergillus niger IBT-90, wykazującego zdolność wzrostu na agarze słodowym lub brzeczkowym w temperaturze 10-40°C w środowisku o pH = 3-8, polegający na przygotowaniu z niego materiału posiewowego, zaszczepieniu tym materiałem wysterylizowanego stałego podłoża produkcyjnego, prowadzeniu hodowli produkcyjnej w warunkach sterylnych, a po jej zakończeniu ekstrahowaniu enzymów z podłoża, według wynalazku polega na tym, że szczep Aspergillus niger IBT-90 uaktywnia się na wysterylizowanym podłożu stałym zawierającym 1000 części wagowych brzeczki słodowej lub ekstraktu słodowego, o stężeniu 6-12° Bx, oraz 15-30 części wagowych agaru, w temperaturze 10-40°C w czasie 3-8 dni, następnie zmywa się skos agarowy 0,5-1,5% roztworem chlorku sodowego i tak przygotowanym materiałem posiewowym szczepi się wysterylizowane stałe podłoże produkcyjne, o wilgotności 50-90%, stosując 0,5-3 ml materiału posiewowego na 100 g s. m. podłoża. Hodowlę produkcyjną prowadzi się w warunkach sterylnych, w temperaturze pokojowej w czasie 1-8 dni mieszają c podł oż e co 12 godzin. Po zakończeniu hodowli do podłoża wprowadza się wodę destylowaną w ilości 10-100 g na 1 g stałych składników podłoża oraz detergent w ilości 0,01-1% wagowych w stosunku do masy wprowadzonej wody i prowadzi ekstrakcję enzymów w temperaturze 18-26°C w czasie 15-60 minut mieszając całość z szybkością 50-300 minut-1. Otrzymany roztwór enzymów odsącza się i zagęszcza w temperaturze 20-60°C. Stosuje się podłoże produkcyjne o składzie w częściach wagowych: 10-100 części wysłodków buraczanych, 10-100 części otrąb pszennych, 10-100 części kiełków słodowych, 1-25 części pektyny jabłkowej, ewentualnie 1-20 części skórek z pomidorów oraz 500-900 części wody wodociągowej zawierającej w 1 litrze 3-6 g diwodorofosforanu (V) potasu, 0,2-2 g siarczanu (VI) magnezu, 0,01-1 g chlorku wapnia, 0,2-3 g mocznika, 1-10 mg siarczanu (VI) żelaza (II), 1-10 mg siarczanu (VI) kobaltu, 0,2-10 mg siarczanu (VI) manganu, 0,01-2 mg siarczanu (VI) cynku, 1-10 mg siarczanu (VI) miedzi lub podłoże produkcyjne o składzie w częściach wagowych: 10-100 części wysłodków buraczanych, 10-100 części otrąb pszennych, 10-70 części kiełków słodowych, 10-50 części odpadów cytrusowych oraz 500-900 części wody wodociągowej zawierającej w 1 litrze 3-6 g diwodorofosforanu (V) potasu, 0,2-2 g siarczanu (VI) magnezu, 0,01-1 g chlorku wapnia, 0,2-3 g mocznika, 1-10 mg siarczanu (VI) żelaza (II), 1-10 mg siarczanu (VI) kobaltu, 0,2-10 mg siarczanu (VI) manganu, 0,01-2 mg siarczanu (VI) cynku, 1-10 mg siarczanu (VI) miedzi.A method of obtaining an enzyme complex in the culture of the filamentous fungus Aspergillus niger IBT-90, showing the ability to grow on malt or wort agar at a temperature of 10-40 ° C in an environment with pH = 3-8, consisting in preparing a seed material from it, inoculating with this material of sterilized solid production medium, carrying out the production culture under sterile conditions, and after its completion, the extraction of enzymes from the medium, according to the invention, the Aspergillus niger IBT-90 strain is activated on a sterilized solid medium containing 1000 parts by weight of malt wort or malt extract, with a concentration of 6-12 ° Bx, and 15-30 parts by weight of agar, at the temperature of 10-40 ° C for 3-8 days, then the agar slope is washed with 0.5-1.5% sodium chloride solution and the thus prepared material The seed is inoculated with a sterilized solid production medium with a moisture content of 50-90% with 0.5-3 ml of seed material per 100 g DM of medium. The production culture is carried out under sterile conditions, at room temperature for 1-8 days, with mixing of the medium every 12 hours. After completion of the cultivation, distilled water is introduced into the medium in the amount of 10-100 g per 1 g of solid components of the medium and detergent in the amount of 0.01-1% by weight in relation to the weight of the introduced water, and the enzymes are extracted at a temperature of 18-26 ° C in time 15-60 minutes, mixing everything at the rate of 50-300 minutes -1 . The obtained enzyme solution is filtered off and concentrated at 20-60 ° C. The production medium is used with the following composition in parts by weight: 10-100 parts of beet pulp, 10-100 parts of wheat bran, 10-100 parts of malt sprouts, 1-25 parts of apple pectin, possibly 1-20 parts of tomato peel and 500-900 parts. parts of tap water containing in 1 liter 3-6 g of potassium dihydrogen phosphate, 0.2-2 g of magnesium sulphate, 0.01-1 g of calcium chloride, 0.2-3 g of urea, 1-10 mg iron (II) sulphate, 1-10 mg cobalt sulphate, 0.2-10 mg manganese sulphate, 0.01-2 mg zinc sulphate, 1-10 mg sulphate (VI) ) copper or production medium with the composition in parts by weight: 10-100 parts of beet pulp, 10-100 parts of wheat bran, 10-70 parts of malt sprouts, 10-50 parts of citrus waste and 500-900 parts of tap water in 1 liter of 3 -6 g of potassium dihydrogen phosphate, 0.2-2 g of magnesium sulfate, 0.01-1 g of calcium chloride, 0.2-3 g of urea, 1-10 mg of iron (II) sulfate , 1-10 mg of sulphate (VI) k obalt, 0.2-10 mg of manganese sulphate, 0.01-2 mg of zinc sulphate, 1-10 mg of copper sulphate.
Szczep grzyba uaktywnia się na podłożu stałym wysterylizowanym w temperaturze 117-121°C w czasie 10-40 minut. Hodowlę produkcyjną prowadzi się na podłożu produkcyjnym wysterylizowanymThe fungus strain becomes activated on a solid medium sterilized at the temperature of 117-121 ° C for 10-40 minutes. The production culture is carried out on a sterilized production medium
PL 209 163 B1 w temperaturze 117-121°C w czasie 15-45 minut. W procesie ekstrakcji enzymów stosuje się korzystnie detergenty o nazwie handlowej Tween 20, Sulforokanol, Pluronic.At 117-121 ° C for 15-45 minutes. In the enzyme extraction process, detergents with the trade name Tween 20, Sulforocanol, Pluronic are preferably used.
Sposób według wynalazku umożliwia otrzymanie w jednym cyklu produkcyjnym wieloenzymowego wysokoaktywnego preparatu zawierającego enzymy pektynolityczne, takie jak polimetylogalakturonaza, pektynoesteraza i liaza pektynowa, enzymy celulolityczne, takie jak endo-1,4-e-glukanaza, egzocelobiohydrolaza i β-glukozydaza, a także endo-1,4-e-ksylanazę, który bez potrzeby jego wzbogacania w inne enzymy, może być wykorzystany do efektywnej, kompleksowej obróbki wstępnej włókien lub wyrobów z lnu i bawełny.The method according to the invention makes it possible to obtain in one production cycle a highly active multi-enzyme preparation containing pectinolytic enzymes such as polymethylgalacturonase, pectinesterase and pectin lyase, cellulolytic enzymes such as endo-1,4-e-glucanase, exocelobiohydrolase and β-endosidase, 1,4-e-xylanase, which without the need to enrich it with other enzymes, can be used for an effective, comprehensive pretreatment of fibers or linen and cotton products.
Enzymy celulolityczne w sposób kontrolowany hydrolizują włókna celulozowe, w wyniku czego następuje usunięcie powierzchniowo występujących włókien materiału. Po działaniu mechanicznym na tak przygotowane włókno można uzyskać tzw. efekt biopolerowania, którego wynikiem jest atrakcyjny wygląd tkanin - efekt skórki brzoskwini, zmniejszona skłonność do pilingu i delikatny chwyt. Kompleks enzymów pektynolitycznych usuwa pektyny zawarte we włóknach lnu lub bawełny, co powoduje poprawę sorpcji wody, a także wodnego roztworu nadtlenku wodoru stosowanego do wybielania tkanin, a przez to pozwala na obniżenie ilości tego środka koniecznej do wybielenia tkaniny.Cellulolytic enzymes hydrolyze cellulose fibers in a controlled manner, removing the surface fibers of the material as a result. After mechanical action on the thus prepared fiber, you can get the so-called the bio-polishing effect, which results in an attractive appearance of fabrics - peach skin effect, reduced peeling tendency and a gentle touch. The pectinolytic enzyme complex removes pectin contained in flax or cotton fibers, which improves the sorption of water, as well as the aqueous solution of hydrogen peroxide used for bleaching fabrics, and thus reduces the amount of this agent necessary for bleaching the fabric.
Sposób według wynalazku ilustrują poniższe przykłady.The process according to the invention is illustrated by the following examples.
P r z y k ł a d IP r z k ł a d I
Szczep grzyba nitkowego Aspergillus niger IBT-90 uaktywniano w podłożu stałym zawierającym 1000 części wagowych brzeczki słodowej o stężeniu 8° Bx i 20 części wagowych agaru, wysterylizowanym w temperaturze 121°C w ciągu 20 minut. Uaktywnienie prowadzono w czasie 5 dni w temperaturze 30°C, po czym sporządzono zawiesinę zarodników tego szczepu zmywając skos agarowy 100 ml 0,85% roztworu NaCl. Tak przygotowanym materiałem posiewowym zaszczepiono stałe podłoże produkcyjne o składzie: 61,1 g suchej substancji wysłodków buraczanych, 53,3 g suchej substancji otrąb pszennych, 78,1 g suchej substancji kiełków słodowych, 7,5 g suchej substancji pektyny jabłkowej, 800 ml wody wodociągowej zawierającej 3,584 g diwodorofosforanu (V) potasu, 0,688 g siarczanu (VI) magnezu, 0,08 g chlorku wapnia, 4,616 mg 5 siarczanu (VI) żelaza (II), 0,184 mg siarczanu (VI) kobaltu, 0,816 mg siarczanu (VI) manganu, 0,224 mg siarczanu (VI) cynku, 2,904 mg siarczanu (VI) miedzi oraz 0,6072 g mocznika, wysterylizowane w temperaturze 121°C w ciągu 20 minut, stosując 1,5 ml materiału posiewowego na 100 g podłoża stałego. Hodowlę produkcyjną prowadzono w kolbach Erlenmayera o pojemności 1 litr zawierających 20 g stałych składników podłoża o wilgotności 80%, w czasie 5 dni mieszając podłoże stałe co 12 godzin. Po zakończeniu hodowli masę podłoża uzupełniono wodą do masy 300 g, wprowadzono detergent o nazwie firmowej Tween 20 w ilości 0,5% w stosunku do masy wprowadzonej wody i prowadzono ekstrakcję enzymów w czasie 30 minut, mieszając całość na mieszadle z szybkością 200 minut-1. Następnie, mieszaninę sączono na przegrodzie filtracyjnej i zagęszczano w temperaturze 40°C w wyparce próżniowej, w wyniku czego otrzymano ciekły preparat enzymów o aktywności [J/ml]: endo-1,4-e-glukanaza -161,04; β-glukozydaza - 134,97; egzocelobiohydrolaza - 10,33; FPA - 4,37; endo-1,4-e-ksylanaza - 548,86; poligalakturonaza - 98,28; pektynoesteraza -14,89, zaś ogólna aktywność pektynolityczna preparatu wynosiła 13192,6 [°PM].The filamentous fungus strain Aspergillus niger IBT-90 was activated in a solid medium containing 1000 parts by weight of 8 ° Bx malt wort and 20 parts by weight of agar, sterilized at 121 ° C for 20 minutes. Activation was carried out for 5 days at the temperature of 30 ° C, after which the spores of this strain were suspended by washing the agar slope with 100 ml of 0.85% NaCl solution. The seed material prepared in this way was inoculated to a solid production medium with the following composition: 61.1 g of dry substance of beet pulp, 53.3 g of dry substance of wheat bran, 78.1 g of dry substance of malt sprouts, 7.5 g of dry substance of apple pectin, 800 ml of water tap water containing 3.584 g of potassium dihydrogen phosphate, 0.688 g of magnesium sulphate, 0.08 g of calcium chloride, 4.616 mg of iron (II) sulphate, 0.184 mg of cobalt sulphate, 0.816 mg of sulphate (VI) ) manganese, 0.224 mg of zinc sulphate, 2.904 mg of copper sulphate and 0.6072 g of urea, sterilized at 121 ° C for 20 minutes using 1.5 ml of seed per 100 g of solid support. The production cultivation was carried out in 1-liter Erlenmayer flasks containing 20 g of solid components of the medium with a moisture of 80%, for 5 days with agitation of the solid medium every 12 hours. After completion of the cultivation, the mass of the medium was supplemented with water to the mass of 300 g, detergent under the brand name Tween 20 in the amount of 0.5% in relation to the mass of the introduced water was introduced, and the enzymes were extracted for 30 minutes, while stirring everything on a mixer at the rate of 200 minutes -1 . Thereafter, the mixture was filtered on a filtering wall and concentrated at 40 ° C in a vacuum evaporator to obtain a liquid enzyme preparation with activity [J / ml]: endo-1,4-e-glucanase -161.04; β-glucosidase - 134.97; exocelobiohydrolase - 10.33; FPA - 4.37; endo-1,4-e-xylanase - 548.86; polygalacturonase - 98.28; pectinesterase -14.89, while the overall pectinolytic activity of the preparation was 13192.6 [° PM].
P r z y k ł a d IIP r z x l a d II
Szczep Aspergillus niger IBT-90 uaktywniano w podłożu stałym zawierającym 1000 części wagowych ekstraktu słodowego o stężeniu 8° Bx i 20 części wagowych agaru, wysterylizowanym w temperaturze 121°C w ciągu 20 minut. Uaktywnianie prowadzono w czasie 5 dni w temperaturze 30°C, po czym sporządzono zawiesinę komórek tego szczepu zmywając skos agarowy 100 ml 0,85% roztworu NaCl. Tak przygotowanym materiałem posiewowym zaszczepiono stałe podłoże produkcyjne o składzie: 47,2 g suchej substancji wysłodków buraczanych, 49,9 g suchej substancji otrąb pszennych, 79,2 g suchej substancji kiełków słodowych, 9,20 g suchej substancji skórek z pomidorów, 14,5 g suchej substancji pektyny jabłkowej oraz 800 ml wody wodociągowej zawierającej 3,584 g diwodorofosforanu (V) potasu, 0,688 g siarczanu (VI) magnezu, 0,08 g chlorku wapnia, 4,616 mg siarczanu (VI) żelaza (II), 0,184 mg siarczanu (VI) kobaltu, 0,816 mg siarczanu (VI) manganu, 0,224 mg siarczanu (VI) cynku, 2,904 mg siarczanu (VI) miedzi oraz 0,6072 g mocznika, wysterylizowane w temperaturze 121°C w ciągu 20 minut, stosując 1,5 ml materiału posiewowego na 100 g podłoża. Hodowlę produkcyjną prowadzono w kolbach Erlenmayera o pojemności 1 l zawierających 20 g stałych składników podłoża o wilgotności 80%, w czasie 5 dni mieszając podłoże stałe co 12 godzin. Po zakończonej hodowli masę podłoża uzupełniono wodą do 300 g, wprowadzono detergent o nazwie firmowej Sulforokanol w ilości 0,1% w stosunku do masy wprowadzonej wody i prowadzono ekstrakcję enzymów w czasie 30 minut mieszając całość na mieszadle z szybkością 200 minut-1. Następnie, mieszaninęThe Aspergillus niger IBT-90 strain was activated in a solid medium containing 1000 parts by weight of 8 ° Bx malt extract and 20 parts by weight of agar, sterilized at 121 ° C for 20 minutes. Activation was carried out for 5 days at the temperature of 30 ° C, after which the cells of this strain were suspended by washing the agar slope with 100 ml of 0.85% NaCl solution. The seed material prepared in this way was inoculated into a solid production medium composed of: 47.2 g of beet pulp dry matter, 49.9 g of wheat bran dry matter, 79.2 g of malt sprouts dry matter, 9.20 g of tomato peel dry matter, 14, 5 g of apple pectin dry substance and 800 ml of tap water containing 3.584 g of potassium dihydrogen phosphate, 0.688 g of magnesium sulphate, 0.08 g of calcium chloride, 4.616 mg of iron (II) sulphate, 0.184 mg of sulphate ( VI) cobalt, 0.816 mg of manganese sulphate, 0.224 mg of zinc sulphate, 2.904 mg of copper sulphate and 0.6072 g of urea, sterilized at 121 ° C for 20 minutes, using 1.5 ml seed material on 100 g of medium. The production cultivation was carried out in 1 L Erlenmayer flasks containing 20 g of solid components of the medium with a moisture of 80%, for 5 days with the agitation of the solid medium every 12 hours. After completion of the cultivation, the mass of the medium was supplemented with water to 300 g, the detergent named Sulforocanol in the amount of 0.1% in relation to the mass of the introduced water was introduced, and the enzymes were extracted for 30 minutes, while the mixture was stirred on a mixer at the rate of 200 minutes -1 . Then, the mixture
PL 209 163 B1 sączono na przegrodzie filtracyjnej, po czym zagęszczono w temperaturze 40°C w wyparce próżniowej, uzyskując ciekły preparat enzymów o aktywności [J/ml]: endo-1,4-e-glukanaza - 124,87; β-glukozydaza - 122,89; egzocelobiohydrolaza - 11,44; FPA - 6,65; endo-1,4-e-ksylanaza - 445,77; poligalakturonaza - 160,85; pektynoesteraza - 16,00; zaś ogólna aktywność pektynolityczna preparatu wynosiła 7679,2 [°PM].The PL 209 163 B1 was filtered on a filtering wall, then concentrated at 40 ° C in a vacuum evaporator, obtaining a liquid enzyme preparation with activity [J / ml]: endo-1,4-e-glucanase - 124.87; β-glucosidase - 122.89; exocelobiohydrolase - 11.44; FPA - 6.65; endo-1,4-e-xylanase - 445.77; polygalacturonase - 160.85; pectinesterase - 16.00; and the overall pectinolytic activity of the preparation was 7679.2 [° PM].
P r z y k ł a d IIIP r z x l a d III
Szczep Aspergillus niger IBT-90 uaktywniano w podłożu stałym zawierającym 1000 części wagowych brzeczki słodowej o stężeniu 8° Bx oraz 20 części wagowych agaru, wysterylizowanym w temperaturze 121°C w ciągu 20 minut. Uaktywnianie prowadzono w czasie 5 dni w temperaturze 29°C, po czym sporządzono zawiesinę zarodników tego szczepu zmywając skos agarowy za pomocą 100 ml 0,85% roztworu NaCl. Tak przygotowanym materiałem posiewowym zaszczepiono stałe podłoże produkcyjne o składzie: 52,2 g suchej substancji wysłodków buraczanych, 51,0 g suchej substancji otrąb pszennych, 67,5 g suchej substancji kiełków słodowych, 29,3 g suchej substancji odpadów cytrusowych, 800 ml wody wodociągowej zawierającej: 6,358 g diwodorofosforanu (V) potasu, 1,215 g siarczanu (VI) magnezu, 0,239 g chlorku wapnia, 5,886 mg siarczanu (VI) żelaza (II), 0,616 mg siarczanu (VI) kobaltu, 0,454 mg siarczanu (VI) manganu, 0,699 mg siarczanu (VI) miedzi oraz 1,669 g mocznika, wysterylizowane w temperaturze 121°C w ciągu 20 minut, stosując 1,5 ml materiału posiewowego na 100 g podłoża. Hodowlę produkcyjną prowadzono w kolbach Erlenmayera o objętości 1 litr, zawierających 20 g stałych składników podłoża o wilgotności 80%, w czasie 5 dni, mieszając podłoże stałe co 12 godzin. Po zakończeniu hodowli masę podłoża uzupełniono wodą do 300 g, wprowadzono detergent o nazwie firmowej Tween 20 w ilości 0,5% w stosunku do masy wprowadzonej wody i prowadzono ekstrakcję enzymów w czasie 30 minut, mieszając całość na mieszadle z szybkością 200 minut-1. Następnie, mieszaninę sączono na przegrodzie filtracyjnej i zagęszczono w temperaturze 40°C w wyparce próżniowej, uzyskując ciekły preparat enzymów o aktywności [J/ml]: endo-1,4-e-glukanaza -208,57; β-glukozydaza - 162,12; egzocelobiohydrolaza - 10,06; FPA - 11,06; endo-1,4-e-ksylanaza - 243,29; poligalakturonaza - 140,55; pektynoesteraza -19,18; zaś ogólna aktywność pektynolityczna preparatu była równa 9183,18 [°PM].The Aspergillus niger IBT-90 strain was activated in a solid medium containing 1000 parts by weight of 8 ° Bx malt wort and 20 parts by weight of agar, sterilized at 121 ° C for 20 minutes. Activation was carried out for 5 days at 29 ° C, after which the spores of this strain were suspended by washing the agar slant with 100 ml of 0.85% NaCl solution. The seed material prepared in this way was inoculated into a solid production medium with the following composition: 52.2 g dry substance of beet pulp, 51.0 g dry substance of wheat bran, 67.5 g dry substance of malt sprouts, 29.3 g dry substance of citrus waste, 800 ml of water water supply containing: 6.358 g of potassium dihydrogen phosphate, 1.215 g of magnesium sulphate, 0.239 g of calcium chloride, 5.886 mg of iron (II) sulphate, 0.616 mg of cobalt sulphate (VI), 0.454 mg of manganese sulphate (VI) , 0.699 mg of copper sulphate and 1.669 g of urea, sterilized at 121 ° C for 20 minutes, using 1.5 ml of seed per 100 g of medium. The production cultivation was carried out in 1 liter Erlenmayer flasks containing 20 g of solid components of the medium with a moisture of 80% for 5 days, mixing the solid medium every 12 hours. After the end of the cultivation, the mass of the medium was supplemented with water to 300 g, the detergent Tween 20 was introduced in the amount of 0.5% in relation to the mass of the introduced water, and the enzymes were extracted for 30 minutes, while mixing on a mixer at a speed of 200 minutes -1 . Then, the mixture was filtered on a filtering wall and concentrated at 40 ° C in a vacuum evaporator, giving the enzyme preparation liquid with activity [J / ml]: endo-1,4-e-glucanase -208.57; β-glucosidase - 162.12; exocelobiohydrolase - 10.06; FPA - 11.06; endo-1,4-e-xylanase - 243.29; polygalacturonase - 140.55; pectinesterase -19.18; while the overall pectinolytic activity of the preparation was equal to 9183.18 [° PM].
Claims (5)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL379557A PL209163B1 (en) | 2006-04-27 | 2006-04-27 | The manner of obtaining enzyme preparation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL379557A PL209163B1 (en) | 2006-04-27 | 2006-04-27 | The manner of obtaining enzyme preparation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL379557A1 PL379557A1 (en) | 2007-10-29 |
| PL209163B1 true PL209163B1 (en) | 2011-07-29 |
Family
ID=43016806
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL379557A PL209163B1 (en) | 2006-04-27 | 2006-04-27 | The manner of obtaining enzyme preparation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL209163B1 (en) |
-
2006
- 2006-04-27 PL PL379557A patent/PL209163B1/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL379557A1 (en) | 2007-10-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hoondal et al. | Microbial alkaline pectinases and their industrial applications: a review | |
| Zheng et al. | Degumming of ramie fibers by alkalophilic bacteria and their polysaccharide-degrading enzymes | |
| Chang et al. | Antifungal activity and enhancement of plant growth by Bacillus cereus grown on shellfish chitin wastes | |
| Brühlmann et al. | Enzymatic degumming of ramie bast fibers | |
| Evans et al. | Flax-retting by polygalacturonase-containing enzyme mixtures and effects on fiber properties | |
| Fan et al. | In-situ microbial degumming technology with Bacillus sp. HG-28 for industrial production of ramie fibers | |
| CN103710327B (en) | Compound enzyme preparation for deep processing of olive and preparation method and application thereof | |
| Mostafa et al. | Enzymatic, kinetic and anti-microbial studies on Aspergillus terreus culture filtrate and Allium cepa seeds extract and their potent applications | |
| Dhiman et al. | Pretreatment processing of fabrics by alkalothermophilic xylanase from Bacillus stearothermophilus SDX | |
| CN101962666B (en) | Method for preparing chitin, L-calcium lactate and compound amino acid or peptide from carapace waste | |
| WO2007037711A1 (en) | The method of fibrous plant degumming | |
| JPH10511410A (en) | Enzyme preparation having cellulolytic activity | |
| JP3917258B2 (en) | Novel alkaline pectate lyase and process for producing the same | |
| CN106701350B (en) | A kind of multi-functional blueberry ferment laundry dew | |
| CN104342296A (en) | Preparation and process of functional sugar active enzyme biological scouring agent | |
| CN103174045B (en) | Production method of bark-forming handmade paper bleaching pulp | |
| PL209163B1 (en) | The manner of obtaining enzyme preparation | |
| CN107828757B (en) | It can be used for the enzyme preparation and its crudefiber crop bast degumming tech of crudefiber crop degumming | |
| CN109989114A (en) | A kind of method of flax degumming | |
| CN102994400B (en) | Microorganism capable of degrading navel orange segment membrane and enzymic preparation containing microorganism as well as application | |
| Yinghua et al. | Production of efficient enzymes for flax retting by solid state fermentation with Aspergillus niger | |
| CN106434476A (en) | High-yield strain for alkaline pectinase and application of high-yield strain | |
| JP5685398B2 (en) | Polygalacturonase | |
| PL209161B1 (en) | The manner of obtaining enzyme preparation | |
| Siddiqa et al. | Statistical optimization of pectin lyase from Penicillium digitatum in solid state fermentation |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20090427 |