PL195627B1 - Colostrinin and application thereof - Google Patents
Colostrinin and application thereofInfo
- Publication number
- PL195627B1 PL195627B1 PL97332632A PL33263297A PL195627B1 PL 195627 B1 PL195627 B1 PL 195627B1 PL 97332632 A PL97332632 A PL 97332632A PL 33263297 A PL33263297 A PL 33263297A PL 195627 B1 PL195627 B1 PL 195627B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- colostrinin
- pharmaceutical composition
- nervous system
- disease
- central nervous
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
1. Zastosowanie kolostryniny do wytwarzania leku do leczenia przewlekłych chorób ośrodkowego układu nerwowego wybranych z grupy obejmującej zaburzenia neurologiczne, zaburzenia umysłowe, otępienie, choroby neurodegeneracyjne, psychozę i nerwicę. 7. Zastosowanie kolostryniny do wytwarzania leku profilaktycznego dla ludzi do zapobiegania chorobie Alzheimera. 11. Kompozycja farmaceutyczna do leczenia przewlekłych chorób ośrodkowego układu nerwowego lub immunostymulacji, znamienna tym, że obejmuje doustną postać dawkowania zawierającą wybraną wcześniej ilość kolostryniny w kombinacji z dopuszczalnym fizjologicznie nośnikiem. 18. Zastosowanie kolostryniny w postaci izolowanej jako dodatku żywieniowego. 22. Zastosowanie nonapeptydu o składzie i sekwencji aminokwasowej Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro- -Leu-Phe-Pro do wytwarzania leku do leczenia przewlekłych chorób ośrodkowego układu nerwowego wybranych z grupy obejmującej zaburzenia neurologiczne, zaburzenia umysłowe, otępienie, choroby neurodegeneracyjne, psychozę i nerwicę. 24. Kompozycja farmaceutyczna do leczenia przewlekłych chorób ośrodkowego układu nerwowego lub immunostymulacji, znamienna tym, że obejmuje w doustnej postaci dawkowania nonapeptyd o składzie i sekwencji aminokwasowej Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro w kombinacji z fizjologicznie dopuszczalnym nośnikiem.1. Use of Colostrinin in the manufacture of a medicament for the treatment of chronic central diseases nervous system selected from the group consisting of neurological disorders, mental disorders, dementia, neurodegenerative diseases, psychosis and neurosis. 7. Use of Colostrinin in the manufacture of a prophylactic drug for humans for prevention Alzheimer's disease. 11. A pharmaceutical composition for the treatment of chronic diseases of the central nervous system or immunostimulation, characterized in that it comprises an oral dosage form containing a pre-selected amount of colostrinin in combination with a physiologically acceptable carrier. 18. Application of colostrinin in an isolated form as a nutritional supplement. 22. The use of a nonapeptide with the composition and amino acid sequence of Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro- -Leu-Phe-Pro for the manufacture of a medicament for the treatment of chronic diseases of the central nervous system selected from the group consisting of neurological disorders, mental disorders, dementia and diseases neurodegenerative, psychosis and neurosis. 24. A pharmaceutical composition for the treatment of chronic diseases of the central nervous system or immunostimulation, characterized in that it comprises nonapeptide in an oral dosage form with the composition and amino acid sequence of Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro in combination with physiologically acceptable carrier.
Description
Kolostrynina jest to białkowy kompleks z siary.Colostrinin is a protein complex from colostrum.
Siara jest gęstym, żółtawym płynem produkowanym przez ssacze matki w trakcie kilku pierwszych dni po urodzeniu dziecka. Zastępowana jest dojrzałym mlekiem matki po czterech do pięciu dni po urodzeniu. W porównaniu z dojrzałym mlekiem matki siara zawiera mało cukrów. Jednakże siara jest bogatsza w tłuszcze, białko, sole mineralne, witaminy i immunoglobuliny. Zawiera również różnorodne komórki krążące, takie jak komórki ziarniste i zrębowe, neutrofile, monocyty/makrofagi i limfocyty, oraz czynniki wzrostu, hormony i cytokiny.Colostrum is a thick, yellowish fluid produced by a mother's mammals in the first few days after having a baby. It is replaced by mature breast milk four to five days after birth. Compared to mature breast milk, colostrum is low in sugar. However, colostrum is richer in fat, protein, minerals, vitamins and immunoglobulins. It also contains a variety of circulating cells such as granulosa and stromal cells, neutrophils, monocytes / macrophages and lymphocytes, and growth factors, hormones, and cytokines.
Różne czynniki pochodzące z siary ssaków wyizolowano i scharakteryzowano. W 1974 roku, Janusz i in., (FEBS Lett., 49, 276-279) wyizolowali z siary owcy polipeptyd bogaty w prolinę (PRP). Następnie stwierdzono, że analogi PRP są składnikiem siary ssaków innych niż owca. PRP nazwano kolostryniną i wstępnie zidentyfikowano jako nową klasę cytokin.Various factors derived from mammalian colostrum have been isolated and characterized. In 1974, Janusz et al. (FEBS Lett., 49, 276-279) isolated a proline-rich polypeptide (PRP) from sheep colostrum. Subsequently, the PRP analogs were found to be a component of the colostrum of mammals other than sheep. PRP was named colostrinin and initially identified as a new class of cytokines.
Zemecki i wsp. w „Effect of Proline-Rich Polypeptide (PRB) on the development of homiletic anemia and survival of New Zealand black (NCB) mice (Archivum Immunologiae at Therapeutic Experimentalis, tom 39 numer 5 do 6, 1991 str. 461 do 467 ujawnili wewnątrzotrzewnowe podawanie PRP nowozelandzkim czarnym myszom. Stwierdzono, że obniża to przypadek dodatniej reakcji Coombsa i przedłuża średni czas życia myszy. Rozważano, że PRP może mieć wartość terapeutyczną w leczeniu zaburzeń autoimmunologicznych, takich jak mł odzień cze reumatoidalne zapalenie stawów.Zemecki et al. In "Effect of Proline-Rich Polypeptide (PRB) on the development of homiletic anemia and survival of New Zealand black (NCB) mice (Archivum Immunologiae at Therapeutic Experimentalis, vol. 39 number 5 to 6, 1991 pp. 461 to 467 disclosed intraperitoneal administration of PRP to New Zealand black mice, which was found to reduce the incidence of a positive Coombs reaction and prolong the mean life of the mice. It was considered that PRP may be of therapeutic value in the treatment of autoimmune disorders such as juvenile rheumatoid arthritis.
Janusz i in., w „Proline-Rich Polypeptide (PRP) - an immunomadulatory Peptide from Ovine Colostrum (Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, 1993, 41, 275-279) wspomniał, że PRP pochodzący z siary owcy wykazuje aktywność immunotropową u myszy. Jednakże, w tej publikacji nie zamieszczono żadnych sugestii o tym, że PRP mógłby mieć jakikolwiek wpływ leczniczy na inne zwierzęta. Należy zdać sobie sprawę, że w oparciu o fakt, iż kompozycja wywiera działanie lecznicze na myszy, nie można zakładać, że będzie miała wypływ leczniczy na inne zwierzęta.Janusz et al., In "Proline-Rich Polypeptide (PRP) - an immunomadulatory Peptide from Ovine Colostrum (Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, 1993, 41, 275-279) mentioned that PRP derived from sheep colostrum exhibits immunotropic activity in mice. However, no suggestions are made in this publication that PRP could have any therapeutic effect on other animals. It will be appreciated that based on the fact that the composition has a therapeutic effect on mice, it cannot be assumed that it will have a therapeutic effect on other animals.
Stwierdzono obecnie, że kolostrynina wykazuje wiele wcześniej nieznanych działań terapeutycznych. A zwłaszcza, stwierdzono, że kolostrynina ma działanie immunotropowe i psychotropowe.It has now been found that colostrinin exhibits many previously unknown therapeutic effects. In particular, colostrinin has been found to have immunotropic and psychotropic effects.
Niniejszy wynalazek dotyczy zastosowania kolostryniny do wytwarzania leku do leczenia przewlekłych chorób ośrodkowego układu nerwowego wybranych z grupy obejmującej zaburzenia neurologiczne, zaburzenia umysłowe, otępienie, choroby neurodegeneracyjne, psychozę i nerwicę.The present invention relates to the use of colostrinin for the manufacture of a medicament for the treatment of chronic diseases of the central nervous system selected from the group consisting of neurological disorders, mental disorders, dementia, neurodegenerative diseases, psychosis and neurosis.
Lek wytwarzany zgodnie z zastosowaniem według wynalazku jest szczególnie korzystny do leczenia choroby Alzheimera, i choroby neuronu motorycznego.The medicament produced according to the use of the invention is particularly advantageous for the treatment of Alzheimer's disease, and motor neuron disease.
Korzystnie kolostrynina nie jest kolostryniną owczą.Preferably the colostrinin is not sheep's colostrinin.
Korzystnie lek jest przeznaczony do podawania jako doustna postać dawkowania w kombinacji z fizjologicznie dopuszczalnym noś nikiem.Preferably, the medicament is for administration as an oral dosage form in combination with a physiologically acceptable carrier.
Korzystnie kolostrynina dostarczana jest w postaci izolowanej.Preferably, the colostrinin is provided in an isolated form.
W zakres wynalazku wchodzi również zastosowanie kolostryniny do wytwarzania leku profilaktycznego dla ludzi do zapobiegania chorobie Alzheimera.Also within the scope of the invention is the use of Colostrinin in the manufacture of a prophylactic drug for humans for the prevention of Alzheimer's disease.
W tym zastosowaniu również korzystnie kolostrynina nie jest kolostryniną owczą.In this application also preferably the colostrinin is not sheep's colostrinin.
Bardziej korzystnie lek jest przeznaczony do podawania jako doustna postać dawkowania w kombinacji z fizjologicznie dopuszczalnym noś nikiem.More preferably, the medicament is for administration as an oral dosage form in combination with a physiologically acceptable carrier.
Korzystnie kolostrynina dostarczana jest w postaci izolowanej.Preferably, the colostrinin is provided in an isolated form.
Ponadto wynalazek dotyczy kompozycji farmaceutycznej do leczenia przewlekłych chorób ośrodkowego układu nerwowego lub immunostymulacji, która obejmuje doustną postać dawkowania zawierającą wybraną wcześniej ilość kolostryniny w kombinacji z dopuszczalnym fizjologicznie nośnikiem.Furthermore, the invention relates to a pharmaceutical composition for the treatment of chronic diseases of the central nervous system or immunostimulation, which comprises an oral dosage form containing a pre-selected amount of colostrinin in combination with a physiologically acceptable carrier.
Korzystnie kompozycja farmaceutyczna jest w postaci przydatnej do absorpcji przez śluzówkę jamy ustnej/nosowo-gardłowej i/lub w postaci przydatnej do absorpcji w przewodzie pokarmowym, bardziej korzystnie w postaci tabletki, drażetki podjęzykowej, żelu, albo plastra.Preferably the pharmaceutical composition is in a form suitable for absorption through the oral / nasopharyngeal mucosa and / or in a form suitable for absorption in the gastrointestinal tract, more preferably in the form of a tablet, sublingual dragee, gel or patch.
Kompozycja w takiej postaci zawiera od 25 do 1000 μg kolostryniny, szczególnie korzystnie od 50 do 100 μg kolostryniny.The composition in this form contains from 25 to 1000 µg of colostrinin, particularly preferably from 50 to 100 µg of colostrinin.
PL 195 627 B1PL 195 627 B1
Korzystnie kompozycja zawiera kolostryninę w postaci izolowanej.Preferably the composition comprises colostrinin in an isolated form.
Korzystnie kolostrynina w kompozycji nie jest owczą kolostryniną.Preferably the colostrinin in the composition is not sheep colostrinin.
W zakres wynalazku wchodzi również zastosowanie kolostryniny w postaci izolowanej jako dodatku żywieniowego, który korzystnie jest dodatkiem dla niemowląt, małych dzieci, dorosłych poddawanych chemioterapii i/lub dorosłych cierpiących na kacheksję albo utratę ciężaru ciała z powodu przewlekłej choroby.It is also within the scope of the invention to use colostrinin in an isolated form as a nutritional supplement, which is preferably an additive for infants, young children, adults undergoing chemotherapy and / or adults suffering from cachexia or weight loss due to chronic disease.
Korzystnie dodatek żywieniowy ma postać stałą lub płynną.Preferably the nutritional supplement is in solid or liquid form.
Wynalazek dotyczy również dodatku żywieniowego, który obejmuje doustną postać dawkowania zawierającą kolostryninę w postaci izolowanej, wytworzoną w kombinacji z fizjologicznie dopuszczalnym nośnikiem.The invention also relates to a nutritional supplement which comprises an oral dosage form containing colostrinin in an isolated form made in combination with a physiologically acceptable carrier.
Ponadto wynalazek dotyczy zastosowania nonapeptydu o składzie i sekwencji aminokwasowej Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro do wytwarzania leku do leczenia przewlekłych chorób ośrodkowego układu nerwowego wybranych z grupy obejmującej zaburzenia neurologiczne, zaburzenia umysłowe, otępienie, choroby neurodegeneracyjne, psychozę i nerwicę.Furthermore, the invention relates to the use of a nonapeptide with the composition and amino acid sequence Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro for the manufacture of a medicament for the treatment of chronic diseases of the central nervous system selected from the group consisting of neurological disorders, mental disorders, dementia, neurodegenerative, psychosis and neurosis.
Lek wytwarzany zgodnie z zastosowaniem według wynalazku jest szczególnie korzystny do leczenia choroby Alzheimera. W zakres wynalazku wchodzi ponadto kompozycja farmaceutyczna do leczenia przewlekłych chorób ośrodkowego układu nerwowego lub immunostymulacji, która obejmuje w doustnej postaci dawkowania nonapeptyd o składzie i sekwencji aminokwasowej Val-Glu-Ser-TyrVal-Pro-Leu-Phe-Pro w kombinacji z dopuszczalnym fizjologicznie nośnikiem.The medicament produced according to the use of the invention is particularly advantageous for the treatment of Alzheimer's disease. The invention further includes a pharmaceutical composition for the treatment of chronic diseases of the central nervous system or immunostimulation which comprises, in an oral dosage form, a nonapeptide having the composition and amino acid sequence of Val-Glu-Ser-TyrVal-Pro-Leu-Phe-Pro in combination with a physiologically acceptable carrier. .
Kolostrynina może być wykorzystywana jako lek dla zwierząt nie będących gryzoniami; stwierdzono, że kolostrynina jest szczególnie przydatna do leczenia ludzi.Colostrinin can be used as a medicine for non-rodent animals; Colostrinin has been found to be particularly useful for treating humans.
Przykłady schorzeń neurologicznych, które mogą być skutecznie leczone kolostryniną, obejmują otępienie, jak również zaburzenia wywołujące otępienie, takie jak zaburzenia neurodegeneracyjne. Zaburzenia neurodegeneracyjne obejmują, na przykład, otępienie starcze i choroby neuronu ruchowego, których przykładem jest choroba Parkinsona. Stwierdzono, że kolostrynina może być szczególnie skuteczna w leczeniu choroby neurodegeneracyjnej znanej jako choroba Alzheimera.Examples of neurological conditions that can be effectively treated with colostrinin include dementia as well as dementia-inducing disorders such as neurodegenerative disorders. Neurodegenerative disorders include, for example, senile dementia and motor neuron diseases, exemplified by Parkinson's disease. Colostrinin has been found to be particularly effective in treating the neurodegenerative disease known as Alzheimer's disease.
Przykłady chorób psychicznych, które skutecznie mogą być leczone kolostrynina, obejmują psychozy i nerwice. Na przykład, kolostryninę można stosować w leczeniu zaburzeń emocjonalnych, szczególnie zaburzeń emocjonalnych u pacjentów psychiatrycznych w stanie depresyjnym - stwierdzono, że zastosowanie kolostryniny pomaga pacjentom w poprawie samopoczucia i wyrównuje nastrój. Kolostryninę można również stosować w leczeniu wspomagającym odstawienie u osób uzależnionych od narkotyków, po okresie odtruwania i u osób uzależnionych od środków pobudzających.Examples of mental illnesses that can be successfully treated with colostrinin include psychoses and neuroses. For example, Colostrinin can be used to treat emotional disorders, especially emotional disorders in psychiatric patients in a depressed state - the use of Colostrinin has been found to help patients improve well-being and balance their mood. Colostrinin can also be used as a withdrawal support treatment in drug addicts, after a detoxification period and in stimulant addicts.
W innym korzystnym wykonaniu wynalazku kolostrynina jest wykorzystywana w leczeniu zaburzeń układu immunologicznego, szczególnie przewlekłych chorób układu immunologicznego. Tak więc, stwierdzono, że kolostryninę można wykorzystywać w leczeniu chorób wymagających immunomodulacji. Stwierdzono zwłaszcza, że kolostrynina jest przydatna w leczeniu takich zaburzeń u zwierząt nie będących gryzoniami, w tym ludzi. Kolostrynina jest przydatna do leczenia różnorodnych chorób o etiologii immunologicznej i zakaźnej. Na przykład, kolostryninę można stosować w leczeniu przewlekłych chorób o etiologii bakteryjnej i wirusowej i w leczeniu nabytych niedoborów odpornościowych, które rozwijają się na przykład po chemioterapii albo radioterapii nowotworów. Wynalazek jest szczególnie przydatny do leczenia przewlekłych bakteryjnych i wirusowych zakażeń wymagających nieswoistej immunostymulacji i immunokorekcji.In another preferred embodiment of the invention, the colostrinin is used in the treatment of disorders of the immune system, especially chronic diseases of the immune system. Thus, it has been found that colostrinin can be used in the treatment of diseases requiring immunomodulation. In particular, Colostrinin has been found to be useful in the treatment of such disorders in non-rodent animals, including humans. Colostrinin is useful in the treatment of various diseases of immunological and infectious etiology. For example, colostrinin can be used in the treatment of chronic diseases of bacterial and viral etiology and in the treatment of acquired immune deficiencies that develop after, for example, chemotherapy or radiotherapy of tumors. The invention is particularly useful for the treatment of chronic bacterial and viral infections requiring non-specific immunostimulation and immunocorrection.
Choroba przewlekła jest to taka choroba, której okres trwania utrzymuje się przez długi czas, zwykle przynajmniej tydzień, bardziej typowo przynajmniej miesiąc i często przynajmniej trzy miesiące albo przynajmniej sześć miesięcy.A chronic disease is one that lasts a long time, usually at least a week, more typically at least a month, and often at least three months or at least six months.
Kolostryninę można zastosować do poprawy rozwoju układu odpornościowego u noworodków. Można ją również zastosować do korekcji niedoborów odpornościowych u dzieci. Te zastosowania kolostryniny mogą być szczególnie odpowiednie u niemowląt i dzieci, które były pozbawione siary. Może to wystąpić na przykład u niemowląt i dzieci, które nie były karmione piersią od urodzenia; sztuczny pokarm, którym karmi się takie niemowlęta i dzieci, nie zawiera kolostryniny.Colostrinin can be used to improve the development of the immune system in newborns. It can also be used to correct immune deficiencies in children. These uses of colostrinin may be particularly appropriate in infants and children who have been deprived of colostrum. This can occur, for example, in infants and children who have not been breastfed since birth; the artificial food that is fed to such infants and children does not contain colostrinin.
Zgodnie z niniejszym wynalazkiem możliwe jest zastosowanie kolostryniny jako dodatku żywieniowego. Kolostrynina jest szczególnie korzystna jako dodatek żywieniowy dla niemowląt i młodszych dzieci w celu wyrównania niedoborów rozwojowych ich układu odpornościowego. Jak zauważono powyżej, niedobory takie powstają u niemowląt i dzieci, które nie były karmione piersią od urodzenia. Kolostrynina może być również wykorzystana jako dodatek żywieniowy u dorosłych poddawanych chemioterapii, lub cierpiących z powodu kacheksji, lub z utratą wagi spowodowaną przewlekłą chorobą.According to the present invention, it is possible to use colostrinin as a nutritional supplement. Colostrinin is especially beneficial as a nutritional supplement for infants and younger children to compensate for the developmental deficiencies of their immune system. As noted above, such deficiencies arise in infants and children who have not been breastfed since birth. Colostrinin can also be used as a nutritional supplement in adults undergoing chemotherapy or suffering from cachexia or weight loss caused by chronic disease.
PL 195 627 B1PL 195 627 B1
Inny aspekt niniejszego wynalazku dotyczy dodatku żywieniowego obejmującego doustnie przyjmowaną kombinację kolostryniny w połączeniu z fizjologicznie dopuszczalnym nośnikiem. Dodatek żywieniowy może mieć postać płynną lub stałą; przydatny dodatek żywieniowy możne też mieć postać tabletki.Another aspect of the present invention relates to a nutritional supplement comprising an orally ingested combination of colostrinin in combination with a physiologically acceptable carrier. The nutritional supplement may be in liquid or solid form; the suitable nutritional supplement may also be in the form of a tablet.
Zgodnie z wynalazkiem kolostrynina może być podawana profilaktycznie w celu zapobiegania rozwojowi zaburzeń ośrodkowego układu nerwowego i układu odpornościowego.According to the invention, colostrinin may be administered prophylactically in order to prevent the development of disorders of the central nervous system and the immune system.
Kolostrynina stosowana w opisanym powyżej aspekcie według wynalazku może być kolostrynina owczą, albo może być kolostryninA nie pochodzącą od owcy. Kolostrynina nie pochodząca od owcy może pochodzić z siary na przykład ludzi, krów, koni, kóz, świń, jaków, lam i osłów. Siara jest zwykle obecna w wydzielinie sutkowej tych zwierząt przez 1 do 4 dni po odbytym porodzie.The colostrinin used in the above-described aspect of the invention may be sheep colostrinin or it may be non-sheep colostrinin. Colostrinin not derived from sheep may be derived from colostrum from, for example, humans, cows, horses, goats, pigs, yaks, lamas, and donkeys. Colostrum is usually present in the mammary secretions of these animals for 1 to 4 days after birth.
Stosowany tu termin „kolostrynina odnosi się do polipeptydu w jego postaci naturalnej, który uzyskuje się z siary ssaka. Kolostrynina ma następujące właściwości:The term "colostrinin" as used herein refers to a polypeptide in its natural form which is obtained from the colostrum of a mammal. Colostrinin has the following properties:
(i) ciężar cząsteczkowy w zakresie od 16000 do 26000 daltonów;(i) a molecular weight ranging from 16,000 to 26,000 Daltons;
(ii) jest dimerem albo trimerem podjednostek, każdej o ciężarze cząsteczkowym w zakresie od 5000 do 10000 daltonów, korzystnie 6000 daltonów;(ii) is a dimer or trimer of subunits, each having a molecular weight in the range of 5,000 to 10,000 Daltons, preferably 6,000 Daltons;
(iii) zawiera prolinę i ilość proliny jest większa niż każdego innego pojedynczego aminokwasu.(iii) it contains proline and the amount of proline is greater than that of any other single amino acid.
Stwierdzono również, że kolostrynina, jak również podjednostki budujące kolostryninę, jest niepolarna.Colostrinin has also been found to be nonpolar, as well as the subunits that make up the colostrinin.
Ciężar cząsteczkowy można określić metodą elektroforezy w obecności SDS; obecność dimeru albo trimeru można wykazać tą samą techniką. Można wykazać metodą elektroforezy w warunkach redukujących i nieredukujących, że wiązania pomiędzy podjednostkami są wiązaniami niekowalencyjnymi. Obecność proliny można ustalić typową analizą aminokwasów. Niepolarny charakter można wykazać metodą chromatografii w warunkach niepolarnych.Molecular weight can be determined by SDS electrophoresis; the presence of a dimer or trimer can be demonstrated by the same technique. It can be shown by electrophoresis under reducing and non-reducing conditions that the bonds between the subunits are non-covalent bonds. The presence of proline can be determined by conventional amino acid analysis. The non-polar nature can be demonstrated by chromatography under non-polar conditions.
Zastosowanie kolostryniny według niniejszego wynalazku obejmuje kolostryninę owczą, albo kolostryninę niepochodzącą od owcy. Kolostrynina owcza ma ciężar cząsteczkowy około 18000 daltonów i zbudowana jest z trzech połączonych niekowalencyjnie podjednostek, z których każda ma ciężar cząsteczkowy około 6000 daltonów i zawiera około 22% wagowych proliny. Kompozycja aminokwasowa jest zbudowana z następującej ilości reszt aminokwasowych na podjednostkę: lizyna-2, histydyna-1, arginina-0, kwas asparaginowy-2, treonina-4, seryna-3, kwas glutaminowy-6, prolina-11, glicyna-2, alanina-0, walina-5, metionina-2, izoleucyna-2, leucyna-6, tyrozyna-1, fenyloalanina-3 i cysteina-0.The use of colostrinin according to the present invention includes sheep colostrinin or non-sheep colostrinin. Sheep colostrinin has a molecular weight of about 18,000 daltons and is composed of three non-covalently linked subunits each having a molecular weight of about 6,000 daltons and containing about 22% proline by weight. The amino acid composition is composed of the following number of amino acid residues per subunit: lysine-2, histidine-1, arginine-0, aspartic acid-2, threonine-4, serine-3, glutamic acid-6, proline-11, glycine-2, alanine-0, valine-5, methionine-2, isoleucine-2, leucine-6, tyrosine-1, phenylalanine-3 and cysteine-0.
Jak zaznaczono powyżej, kolostryninę w jej naturalnej postaci można uzyskać z siary ssaka po usunięciu z siary tłuszczów i większości białek. Ogólnie, kolostryninę można otrzymać, z siary, na przykład uzyskiwanej z wielkich farm hodowlanych wykorzystując metodę chromatografii kolumnowej lub inne techniki biochemiczne, albo można otrzymać wykorzystując techniki inżynierii genetycznej.As noted above, colostrinin in its natural form can be obtained from the colostrum of a mammal after the fats and most of the proteins are removed from the colostrum. In general, colostrinin can be obtained from colostrum, for example obtained from large breeding farms using column chromatography or other biochemical techniques, or can be obtained using genetic engineering techniques.
Bardziej szczegółowo, kolostryninę można izolować z siary ssaka stosując następujące etapy:More specifically, colostrinin can be isolated from mammalian colostrum using the following steps:
(i) usuwanie tłuszczów, na przykład przez wirowanie;(i) fat removal, for example by centrifugation;
(ii) usuwanie białek takich jak kazeina, na przykład przez obniżenie pH;(ii) removing proteins such as casein, for example by lowering the pH;
(iii) oddzielanie kolostryniny związanej z immunoglobulinami, na przykład przez:(iii) separation of immunoglobulin bound colostrinin, for example by:
(a) obróbkę serwatki wytworzonej po usunięciu tłuszczów i białek przez chromatografię jono-wymienną;(a) treating the whey produced after the removal of fats and proteins by ion exchange chromatography;
(b) przemywanie solą fizjologiczną buforowaną fosforanem i zbieranie frakcji zawierającej kolostryninę związaną z immunoglobulinami, na przykład IgG2 u owcy;(b) washing with phosphate buffered saline and collecting a fraction containing colostrinin bound to immunoglobulins, for example IgG2 in sheep;
(iv) oddzielanie kolostryniny od immunoglobulin, na przykład metodą chromatografii przesiewowej;(iv) separating colostrinin from immunoglobulins, for example by screening chromatography;
(v) dalsze oczyszczanie kolostryniny, korzystnie przez:(v) further purification of the colostrinin, preferably by:
(a) odsalanie frakcji o ciężarze cząsteczkowym poniżej 30000 daltonów; i (b) wprowadzanie przeciwciał przeciwko immunoglobulinom i przez to usuwanie tej klasy białek w celu otrzymania produktu koń cowego.(a) desalting of fractions with a molecular weight below 30,000 Daltons; and (b) introducing antibodies against immunoglobulins and thereby removing this class of proteins to obtain the final product.
Chociaż powyższa definicja odnosi się do naturalnie występującej kolostryniny ssaczej, stosowany tu termin „kolostrynina, obejmuje również analogi kolostryniny i jej fragmenty posiadające zasadniczo taką samą aktywność biologiczną i kolostryninę ssaczą, jej analogi i jej fragmenty uzyskane techniką rekombinacji DNA. Stosowany tU termin „kolostrynina obejmuje również aktywne biologiczne polipeptydy o zasadniczo takim samym składzie jak kolostrynina naturalna, uzyskane metodą syntezy polipeptydu.While the above definition refers to naturally occurring mammalian colostrinin, the term "colostrinin as used herein" also includes colostrinin analogs and fragments thereof having substantially the same biological activity and mammalian colostrinin, analogs, and fragments thereof obtained by recombinant DNA technology. The term "colostrinin" as used herein also includes active biological polypeptides having substantially the same composition as the natural colostrinin obtained by polypeptide synthesis.
PL 195 627 B1PL 195 627 B1
W korzystnym wykonaniu kolostryninę podaje się pacjentowi w ilości około 1 do 2 dziennych dawek leczniczych w pierwszym okresie, po którym następuje drugi okres, w trakcie którego nie podaje się kolostryniny. Okres pierwszy korzystnie trwa około 2 do 4 tygodni, bardziej korzystnie około 3 tygodnie; drugi okres trwa korzystnie około 2 do 5 tygodni, bardziej korzystnie około 4 tygodnie. Korzystnie cykl ten jest powtarzany przynajmniej raz, bardziej korzystnie więcej niż raz.In a preferred embodiment, the colostrinin is administered to the patient in an amount of about 1 to 2 daily therapeutic doses for a first period followed by a second period during which no colostrinin is administered. The first period is preferably about 2 to 4 weeks, more preferably about 3 weeks; the second period is preferably about 2 to 5 weeks, more preferably about 4 weeks. Preferably the cycle is repeated at least once, more preferably more than once.
Kolostryninę do podawania pacjentom można wytwarzać w jakiejkolwiek przydatnej postaci. Na przykład, można wytwarzać postać do podawania doustnego, doodbytniczego albo pozajelitowego. Bardziej szczegółowo, kolostrynina może być wytwarzana w postaci do podawania we wstrzyknięciu, albo korzystnie w postaci możliwej do wchłaniania przez błonę śluzową jamy ustnej i nosogardzieli, przewodu pokarmowego lub inną powierzchnię błony śluzowej.The colostrinin for administration to patients may be prepared in any suitable form. For example, it may be formulated for oral, rectal or parenteral administration. More specifically, the colostrinin may be formulated for injection, or preferably absorbed through the oral and nasopharyngeal mucosa, gastrointestinal tract or other mucosa surface.
Formulacje doustne mogą być w postaci do połykania, albo korzystnie w postaci rozpuszczającej się w ślinie, dzięki czemu formulacja może być zaabsorbowana przez błony śluzowe jamy ustnej i nosogardzieli. Formulacje doustne mogą być w postaci tabletek do podawania doustnego, pastylek do ssania (tj. słodkich postaci tabletkopodobnych, które można trzymać w ustach i ssać), w postaci adhezyjnych żeli wcieranych w dziąsła. Kolostryninę można wytwarzać w postaci plastrów adhezyjnych do podawania na dziąsła. Kolostryninę można również wytwarzać w postaci do podawania na błonę śluzową narządów moczowo-płciowych.Oral formulations may be in a swallow form, or preferably in a saliva-soluble form such that the formulation can be absorbed by the oral and nasopharyngeal mucosa. Oral formulations can be in the form of tablets for oral administration, lozenges (ie, sweet tablet-like forms that can be held in the mouth and sucked), and adhesive gels rubbed on the gums. Colostrinin can be prepared in the form of adhesive patches to be applied to the gums. Colostrinin can also be prepared for administration to the mucosa of the genitourinary organs.
Chociaż możliwe jest oczywiście podawanie kolostryniny w postaci pełnej siary, nie jest to korzystne, ponieważ pełna siara ma nieprzyjemny smak i jest trudna do przechowywania.While it is of course possible to administer colostrinin in the form of whole colostrum, it is not preferred because the whole colostrum has an unpleasant taste and is difficult to store.
Kolostryninę stosowaną w niniejszym wynalazku można uzyskać od dowolnego ssaka, w tym od człowieka albo od zwierząt takich jak krowy, konie, kozy, świnie, jaki, owce, lamy albo osły, wielbłądy itd.Colostrinin used in the present invention can be obtained from any mammal, including humans, or from animals such as cows, horses, goats, pigs, yaks, sheep, llamas or donkeys, camels, etc.
Badania kolostryniny przeprowadzono stosując kolostryninę ludzką albo owczą. Owcza kolostrynina jest sprzedawana pod nazwą Colostrinin™.Colostrinin studies were performed using either human or sheep colostrinin. Sheep Colostrinin is marketed under the name Colostrinin ™.
W trakcie badań na zwierzętach doświadczalnych stwierdzono, że kolostrynina charakteryzuje się działaniem immunotropowym zarówno in vivo, jak in vitro, które jest oparte na właściwościach modulowania, wywoływania różnicowania i dojrzewania tymocytów do postaci aktywnych limfocytów T i na stymulowaniu albo hamowaniu odpowiedzi immunologicznej i na wzbudzaniu ekspresji róż nych markerów powierzchniowych na tymocytach. Dootrzewnowe podawanie myszom kolostryniny hamuje rozwój niedokrwistości hemolitycznej u myszy linii NZB, hamuje wzrost mięsaka 180 u myszy i zapobiega wystąpieniu choroby popromiennej u myszy poddanych naświetlaniu promieniami gamma.In experimental animals, it was found that colostrinin is characterized by immunotropic activity, both in vivo and in vitro, which is based on the properties of modulating, inducing differentiation and maturation of thymocytes into active T lymphocytes, and stimulating or inhibiting the immune response and inducing expression. various surface markers on thymocytes. Intraperitoneal administration of colostrinin to mice inhibits the development of haemolytic anemia in NZB mice, inhibits the growth of sarcoma 180 in mice, and prevents radiation sickness in mice exposed to gamma irradiation.
Badania toksykologiczne u myszy wykazały, że zarówno po podaniu doustnym, jak i pozajelitowym występuje bardzo mała toksyczność, LD50 jest powyżej 1,25 g/kg ciężaru ciała. Kolostrynina również wykazuje zdolność stymulowania, wzrostu, dojrzewania i różnicowania komórek aktywnych immunologicznie zarówno u ludzi, jak i u zwierząt doświadczalnych. W hodowlach limfocytów ludzkiej krwi obwodowej (w tym w hodowlach limfocytów izolowanych z krwi pępowinowej) kolostrynina charakteryzuje się tym, że stymuluje produkcję cytokin, a zwłaszcza interferonu gamma (INF-γ), czynnika martwicy nowotworów (TNF-α), interleukin (np. IL-6 i IL-10) i różnych czynników wzrostu. Produkcja cytokin oceniana jest ilościowo znanymi metodami.Toxicology studies in mice have shown that there is very little toxicity after both oral and parenteral administration, the LD50 is above 1.25 g / kg body weight. Colostrinin also has the ability to stimulate, grow, mature and differentiate immunologically active cells in both humans and experimental animals. In cultures of human peripheral blood lymphocytes (including cultures of lymphocytes isolated from umbilical cord blood), colostrinin is characterized by stimulating the production of cytokines, especially interferon gamma (INF-γ), tumor necrosis factor (TNF-α), interleukins (e.g. IL-6 and IL-10) and various growth factors. The production of cytokines is quantified by known methods.
W warunkach naturalnych analogi owczej kolostryniny posiadające jej właściwości biochemiczne są obecne przez 1 do 4 dni po porodzie w ludzkiej siarze i w siarach wszystkich ssaków, a zwłaszcza zwierząt hodowlanych takich jak krowy, konie, kozy, świnie, jaki, owce, lamy albo osły, wielbłądy itp. Kolostrynina dostaje się do organizmu nowonarodzonych zwierząt podczas ssania i połykania siary matki. Ze względu na niski ciężar cząsteczkowy możliwe, że kolostrynina oddziałuje na śluzówkę jamy ustnej i jamy nosogardzieli przez receptory komórkowe, a nawet w wyniku zwykłej dyfuzji. Ponieważ błona śluzowa i nabłonek górnych odcinków przewodu pokarmowego zawierają receptory konkretnych immunomodulatorów, wykazano w wyniku badań, że kolostryninę można podawać w postaci tabletek i tabletek podjęzykowych do ssania, tabletek i kapsułek do połykania, w postaci żeli adhezyjnych i w postaci adhezyjnych plastrów umocowywanych na dziąsłach. Kolostrynina może być również podawana na błony śluzowe narządów moczowo-płciowych.Under natural conditions, analogues of sheep colostrinin with its biochemical properties are present for 1 to 4 days after birth in human colostrum and colostrum of all mammals, especially farm animals such as cows, horses, goats, pigs, yaks, sheep, llamas or donkeys, camels etc. Colostrinin enters the body of newborn animals during the suckling and swallowing of the mother's colostrum. Due to its low molecular weight, it is possible that colostrinin acts on the oral and nasopharyngeal mucosa through cell receptors and even through simple diffusion. Since the mucosa and epithelium of the upper gastrointestinal tract contain receptors for specific immunomodulators, studies have shown that colostrinin can be administered in the form of sublingual tablets and lozenges, tablets and capsules for swallowing, as adhesive gels, and in the form of adhesive gingival patches. Colostrinin can also be administered to the mucous membranes of the genitourinary organs.
PL 195 627 B1PL 195 627 B1
Badania naukowe, których celem było wyjaśnienie aktywności biochemicznej wywołanej przez kolostryninę ujawniają również występowanie podobnej aktywności biologicznej po zastosowaniu ludzkiej siary, zbieranej od kobiet w ciągu 1 do 7 dni po odbytym porodzie.Research studies aimed at elucidating the biochemical activity induced by colostrinin also reveal the presence of a similar biological activity after the use of human colostrum, collected from women 1 to 7 days after delivery.
Sposób izolacji kolostryniny pochodzącej od człowieka był analogiczny do sposobów uzyskiwania jej z siary zwierząt hodowlanych, a zwłaszcza z siary owiec. Stwierdzono, że siara wydzielana przez gruczoły sutkowe kobiet w ciągu 1 do 7 dni po porodzie zawiera polipeptyd kolostryninę, której ilość zależy od laktacji, przy czym największa ilość wydzielana jest w ciągu 2-3 dni, kiedy około 300 mg kolostryniny można wykryć w 1 litrze siary. Taka ilość ludzkiej kolostryniny jest porównywalna z ilością w siarze owcy. Wykazano, ż e ludzka kolostrynina ma wiele wł a ś ciwoś ci biologicznych podobnych do, na przykład, właściwości analogu owczego. Stwierdzono, że kolostrynina pochodząca z ludzkiej siary stymuluje limfocyty obecne w siarze i limfocyty krwi pępowinowej, do wydzielania cytokin, w tym przede wszystkim interferonu (INF-γ), czynnika martwicy nowotworu TNF-α, interleukin (IL-10 i IL-6) i innych cytokin. Cytokiny te biorą udział w humoralnych i komórkowych odpowiedziach odpornościowych.The method of isolating human-derived colostrinin was analogous to the methods of obtaining it from colostrum of farm animals, especially sheep colostrum. Colostrinin secreted by the mammary glands of women 1 to 7 days postpartum has been found to contain the polypeptide colostrinin, the amount of which depends on lactation, with the greatest amount secreted in 2-3 days, when about 300 mg of colostrinin can be detected in 1 liter colostrum. This amount of human colostrinin is comparable to the amount in sheep's colostrum. Human colostrinin has been shown to have many biological properties similar to, for example, those of a sheep analog. Colostrinin derived from human colostrum has been found to stimulate colostrinin and cord blood lymphocytes to secrete cytokines, including interferon (INF-γ), tumor necrosis factor TNF-α, interleukins (IL-10 and IL-6). and other cytokines. These cytokines are involved in humoral and cellular immune responses.
Aktywności biologiczne kolostryniny zarówno ludzkiej, jak i pochodzącej od zwierząt określono metodą znaną z polskiego opisu patentowego (PL 170592B1) i z europejskiego opisu patentowego nr EP-B-0609225 pt: Testing Immunology.The biological activities of both human and animal-derived colostrinin were determined by the method known from the Polish patent description (PL 170592B1) and from the European patent specification No. EP-B-0609225 entitled: Testing Immunology.
W badaniach na ludzkich ochotnikach wykazano, że po podaniu tabletek do ssania, zawierających przynajmniej 25 μg kolostryniny w dawce przynajmniej raz dziennie, przez okres około 3 tygodni, nie zaobserwowano żadnych działań niepożądanych, z drugiej strony doprowadziło to do stanu zmniejszonej reaktywności na indukcję interferonu INF-γ i częściowo również czynnika martwicy nowotworów TNF-α. Po zaprzestaniu podawania kolostryniny stan zmniejszonej reaktywności powracał do normy. Uzyskane reakcje są wynikiem włączenia się cytokin produkowanych przez limfocyty Th1 i Th2 i limfocyty pomocnicze.Studies in human volunteers have shown that no adverse effects were observed after the administration of lozenges containing at least 25 μg of colostrinin in a dose at least once a day for a period of approximately 3 weeks, on the other hand, it led to a state of reduced reactivity to INF interferon induction -γ and partly also the tumor necrosis factor TNF-α. Upon discontinuation of colostrinin administration, the state of decreased reactivity returned to normal. The obtained reactions are the result of the inclusion of cytokines produced by Th1 and Th2 lymphocytes and helper lymphocytes.
W trakcie badań klinicznych wykazano dodatkowo, że kolostrynina ma działanie immunomodulujące i wywiera wpływ na ośrodkowy układ nerwowy, który można wykorzystać w postępowaniu zapobiegawczym i leczniczym w następujących chorobach np. do zapobiegania występowania, progresji i do remisji choroby Alzheimera, w otępieniu starczym o innej etiologii i do leczenia przewlekłych chorób o etiologii immunologicznej i zakaźnej.During clinical trials, it was additionally shown that colostrinin has an immunomodulatory effect and exerts an effect on the central nervous system, which can be used in the preventive and therapeutic treatment of the following diseases, e.g. for the prevention, progression and remission of Alzheimer's disease, in senile dementia of a different etiology and for the treatment of chronic diseases of immune and infectious etiology.
Zamiast kolostryniny możliwe jest zastosowanie nonapeptydu zwanego NP o następującym składzie i sekwencji aminokwasowej: Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro. NP można uzyskać z kolostryniny przez trawienie chymotrypsyną i izolację na kolumnie chromatograficznej albo innymi sposobami syntezy chemicznej. NP jest przykładem przydatnego fragmentu kolostryniny. Stwierdzono, że ma on podobne działanie biologiczne jak kolostrynina, a zwłaszcza jest przydatny w leczeniu opisanych powyżej przewlekłych chorób immunologicznych i zaburzeń ośrodkowego układu nerwowego, szczególnie choroby Alzheimera. NP można stosować do leczenia dowolnego zaburzenia opisanego powyżej. Można go również stosować w dodatku żywieniowym i formułować w ten sam sposób jak co kolostryninę. NP jest przydatny w leczeniu ssaków, a zwłaszcza ludzi.Instead of colostrinin, it is possible to use a nonapeptide called NP with the following composition and amino acid sequence: Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro. NP can be obtained from colostrinin by chymotrypsin digestion and column chromatographic isolation or other chemical synthesis methods. NP is an example of a useful colostrinin fragment. It has been found to have a similar biological effect to colostrinin and is particularly useful in the treatment of the chronic immune diseases and disorders of the central nervous system described above, particularly Alzheimer's disease. NP can be used to treat any disorder described above. It can also be used in a nutritional supplement and formulated in the same way as Colostrinin. NP is useful in treating mammals, and especially humans.
Następujące przykłady ilustrują wynalazek.The following examples illustrate the invention.
P r z y k ł a d IP r z k ł a d I
W kolostryninie owczej o ciężarze cząsteczkowym 18000 daltonów, zbudowanej z trzech połączonych niekowalencyjne podjednostek o ciężarze cząsteczkowym 6000 daltonów, każda podjednostka ma następujący skład aminokwasowy:In sheep colostrinin with a molecular weight of 18,000 daltons, made up of three linked non-covalent subunits with a molecular weight of 6,000 daltons, each subunit has the following amino acid composition:
PL 195 627 B1 cd. tabeliPL 195 627 B1 cont. table
Kolostryninę uzyskano z siary owczej, pobieranej po odbytym porodzie do 24 godzin po rozpoczęciu laktacji. Uzyskany materiał wirowano przy 35000 x g w celu usunięcia tłuszczów i części kazeiny. Uzyskaną frakcję Ig przepuszczono przez kolumnę DEAE-celuloza, w celu wyizolowania kompleksu immunoglobuliny IgG2 z polipeptydem kolostryniny i po wypłukaniu z kolumny kolostryninę oddzielano od IgG2 wykorzystując kolumnę chromatograficzną Sephadex G-100 i poddawano chromatografii ponownie na Sephadex'ie G-75. Następnie frakcję tego polipeptydu poddawano chromatografii na kolumnie z Sepharozą skoniugowaną z przeciwciałami przeciwko owczym IgG2 w celu usunięcia śladów zanieczyszczeń IgG2. Uzyskany preparat odsalano stosując Sephadex G-25 i liofilizowano, po czym przechowywano w temperaturze +4°C albo -20°C.Colostrinin was obtained from sheep colostrum, collected after parturition up to 24 hours after the start of lactation. The resulting material was centrifuged at 35,000 x g to remove fats and part of the casein. The obtained Ig fraction was passed through a DEAE-cellulose column to isolate the IgG2 immunoglobulin complex with the colostrinin polypeptide, and after elution from the column, colostrinin was separated from IgG2 using a Sephadex G-100 column and chromatographed again on a G-75 Sephadex. The fraction of this polypeptide was then chromatographed on a Sepharose column conjugated with anti-sheep IgG2 antibodies to remove any traces of IgG2 contamination. The obtained preparation was desalted using Sephadex G-25, freeze-dried and then stored at + 4 ° C or -20 ° C.
Tak uzyskaną kolostryninę oznaczono znakiem towarowym Colostrinin™.The colostrinin thus obtained was marked with the trademark Colostrinin ™.
W elektroforezie na ż elu poliakryloamidowym w obecności SDS, obserwowano silny prążek odpowiadający ciężarowi cząsteczkowemu 5800 daltonów i dwa słabe prążki odpowiadające ciężarowi 12400 daltonów i 18200 daltonów.On SDS polyacrylamide gel electrophoresis, a strong band was observed corresponding to a molecular weight of 5,800 daltons and two faint bands corresponding to 12,400 daltons and 18,200 daltons.
P r z y k ł a d IIP r z x l a d II
Nonapeptyd NP posiadający skład i sekwencję aminokwasową: Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro uzyskano z kolostryniny wytworzonej w przykładzie I.The NP nonapeptide having the composition and the amino acid sequence: Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro was obtained from the colostrinin prepared in Example I.
mg kolostryniny trawiono stosując 10 jednostek aktywności enzymu proteolitycznego chymotrypsyny, przez 20 godzin w temperaturze 30°C. Izolację produktu trawienia przeprowadzono stosując przynajmniej jeden cykl na kolumnie chromatograficznej wykorzystującej Sephadex G-10. Uzyskany preparat liofilizowano, po czym przechowywano w temperaturze +4°C albo -20°C. Wyizolowany nonapeptyd izolowano przez oznaczenie N-końcowych aminokwasów.mg of colostrinin was digested with 10 units of chymotrypsin proteolytic enzyme activity for 20 hours at 30 ° C. The digestion product isolation was performed using at least one cycle on a Sephadex G-10 column chromatography. The obtained preparation was lyophilized and then stored at a temperature of + 4 ° C or -20 ° C. The isolated nonapeptide was isolated by designating the N-terminal amino acids.
P r z y k ł a d IIIP r x l a d III
Jednostki dawkowania w postaci tabletek do ssania o składzie:Dosage units in the form of lozenges with the following composition:
Składnik czynny: polipeptyd Colostrinin™ uzyskany 0,0001 g zgodnie z przykł adem IActive ingredient: Colostrinin ™ polypeptide obtained from 0.0001 g according to example I
Stabilizator: albumina wolna od zanieczyszczeń, 0,000135 g przede wszystkim I.P.S.Stabilizer: Pollutant Free Albumin, 0.000135g Mostly I.P.S.
Środek smarujący/wiążący stearynian magnezu 0,003 gMagnesium stearate lubricant / binding agent 0.003 g
Nośnik: mannitol 0,15 g (0,1497 g)Carrier: mannitol 0.15 g (0.1497 g)
Powyższe składniki zawieszono w 0,0001 M NaCl. Tabletki do ssania są głownie przeznaczone do leczenia wczesnych i późnych stadiów otępienia, w tym choroby Alzheimera i różnorodnych etapów otępienia starczego, do leczenia przewlekłych zakażeń bakteryjnych i wirusowych wymagających nieswoistej immunostymulacji i immunokorekcji i nabytych niedoborów odporności powodowanych przez różne czynniki. Ponadto, stosowano je w zaburzeniach emocjonalnych, szczególnie w stanach depresyjnych u pacjentów cierpiących na choroby psychiczne w celu poprawy ogólnego samopoczucia i stabilizacji nastroju i do leczenia wspomagającego odstawienie u osób uzależnionych od narkotyków, po okresie odtruwania i u osób uzależnionych od środków pobudzających.The above ingredients were suspended in 0.0001 M NaCl. The lozenges are primarily intended for the treatment of early and late stages of dementia, including Alzheimer's disease and various stages of senile dementia, for the treatment of chronic bacterial and viral infections requiring non-specific immunostimulation and immunocorrection, and acquired immunodeficiency caused by various agents. In addition, they have been used in emotional disorders, particularly in depressive states in patients suffering from mental illnesses to improve general well-being and stabilize mood, and for supportive therapy in drug addicts, after the detoxification period and in stimulant addicts.
PL 195 627 B1PL 195 627 B1
Colostrinin™ można również stosować u noworodków i młodszych dzieci do poprawy niedoborów żywieniowych związanych z sztucznym karmieniem.Colostrinin ™ can also be used in newborns and younger children to improve nutritional deficiencies associated with artificial feeding.
P r z y k ł a d IVP r x l a d IV
Preparat w postaci żelu do podawania na błony śluzowe o składzie:Preparation in the form of a gel for administration to mucous membranes with the following composition:
Składnik czynny: polipeptyd Colostrinin™ uzyskany zgodnie z przykładem IActive ingredient: Colostrinin ™ polypeptide obtained according to example I
Stabilizator: albuminaStabilizer: albumin
Nośnik żelowy: Orabase-Plain® zawierający pektynę, żelatynę, sól sodową karboksymetylocelulozy i żel węglowodorowyGel carrier: Orabase-Plain® containing pectin, gelatin, sodium carboxymethyl cellulose and hydrocarbon gel
Na 1 ml nośnika żelowego użyto 0,0003 g polipeptydu Colostrinin™ i 0,0015 g albuminy. Jednostki dawkowania tak sformułowane są przeznaczone głównie do cyklicznego leczenia zakażeń bakteryjnych i wirusowych jamy ustnej i górnych dróg oddechowych.0.0003 g of Colostrinin ™ polypeptide and 0.0015 g of albumin were used per 1 ml of gel carrier. The dosage units formulated in this way are primarily intended for the cyclic treatment of bacterial and viral infections of the oral cavity and upper respiratory tract.
P r z y k ł a d VP r z k ł a d V
Preparat w postaci do iniekcji domięśniowych, podskórnych albo dożylnych:Preparation in the form of intramuscular, subcutaneous or intravenous injections:
Składnik czynny: polipeptyd Colostrinin™ uzyskany zgodnie z przykładem IActive ingredient: Colostrinin ™ polypeptide obtained according to example I
Stabilizator: ludzka albumina, wolna od zanieczyszczeńStabilizer: human albumin, pollution free
Nośnik: sterylna, niepirogenna wodaCarrier: sterile, pyrogen-free water
Na 1 ml ampułkę użyto 0,0003 g polipeptydu Colostrinin™ i 0,0015 g albuminy i czynnika antybakteryjnego, 0,001% Merthiolate'u tj. soli sodowej kwasu etylomerkuriotiosalicylowego. Tak uzyskane jednostki dawkowania przeznaczone były głównie do cyklicznego leczenia zakażeń bakteryjnych i wirusowych.Per 1 ml ampoule, 0.0003 g of Colostrinin ™ polypeptide and 0.0015 g of albumin and an antibacterial agent, 0.001% Merthiolate, ie sodium salt of ethyl mercuriotiosalicylic acid, were used. The dosage units thus obtained were intended mainly for the cyclic treatment of bacterial and viral infections.
P r z y k ł a d VIP r x l a d VI
Preparat w postaci do iniekcji domięśniowych, podskórnych albo dożylnych:Preparation in the form of intramuscular, subcutaneous or intravenous injections:
Składnik czynny: NP uzyskany zgodnie z przykładem IIActive ingredient: NP obtained according to example II
II Stabilizator: ludzka albumina, wolna od zanieczyszczeńII. Stabilizer: human albumin, pollution free
Nośnik: sterylna, niepirogenna wodaCarrier: sterile, pyrogen-free water
Na 1 ml ampułkę użyto 0,0003 g NP i 0,0015 g albuminy i czynnika antybakteryjnego, 0,001% Merthiolate'u tj. soli sodowej kwasu etylomerkuriotiosalicylowego. Tak uzyskane jednostki dawkowania przeznaczone były głównie do cyklicznego leczenia zakażeń bakteryjnych i wirusowych.0.0003 g of NP and 0.0015 g of albumin and the antibacterial agent, 0.001% Merthiolate, i.e. sodium salt of ethyl mercuriotiosalicylic acid, were used per 1 ml ampoule. The dosage units thus obtained were intended mainly for the cyclic treatment of bacterial and viral infections.
P r z y k ł a d VIIP r o x l a d VII
Indukcję cytokin przez polipeptyd Colostrinin™ in vitro przeprowadzono na próbkach krwi pobranej od zdrowych i chorych ochotników przyjmujących lek w postaci opisanej w przykładzie III, w leczeniu cyklicznym, w sposób następujący.In vitro cytokine induction by Colostrinin ™ polypeptide was performed on blood samples taken from healthy and sick volunteers receiving the drug as described in Example 3 in a cycle treatment as follows.
Pełną krew zawierającą 10 jednostek na 1 ml heparyny bez żadnych konserwantów, rozcieńczono w stosunku 1:10 w pożywce hodowlanej RPMI 1640. Inkubację przeprowadzono w tej samej pożywce bez żadnych induktorów (kontrola ujemna), albo w obecności 1-100 μg/ml polipeptydu Colostrinin™, albo w obecności 2 μg/ml krwi fitohemaglutyniny (PHA) i 2 μg/ml krwi lipopolisacharydu (LPS) w temperaturze 37°C, w atmosferze 5% dwutlenku węgla, przez 20 godzin. Próbki z mieszaniną PHA i LPS były kontrolą dodatnią, ponieważ mogą stymulować maksymalną ilość cytokin. Wyniki badania przedstawiono w tabeli 1 i 2. Wykazują one, że Colostrinin™ w stężeniu 1-100 μg/ml stymuluje produkcję cytokin w sposób zależny od dawki. W stosunku do kontroli ujemnej (bez induktorów) wyniki te są statystycznie istotne (p<0,0001). Pacjenci z chorobą Alzheimera wykazują zmniejszoną zdolność produkcji IFN, a w mniejszym stopniu również TNF.Whole blood containing 10 units per 1 ml of heparin without any preservatives was diluted 1:10 in RPMI 1640 culture medium. Incubation was performed in the same medium without any inducers (negative control), or in the presence of 1-100 μg / ml Colostrinin polypeptide ™, or in the presence of 2 µg / ml blood phytohaemagglutinin (PHA) and 2 µg / ml blood lipopolysaccharide (LPS) at 37 ° C, 5% carbon dioxide for 20 hours. Samples with a mixture of PHA and LPS were a positive control because they can stimulate the maximum amount of cytokines. The results of the study are shown in Tables 1 and 2. They show that Colostrinin ™ at a concentration of 1-100 µg / ml stimulates the production of cytokines in a dose dependent manner. Compared to the negative control (without inducers), these results are statistically significant (p <0.0001). Patients with Alzheimer's disease have a reduced ability to produce IFN, and to a lesser extent also TNF.
T a b e l a 1T a b e l a 1
Indukcja cytokin przez owczą Colostrinin™ (seria A 1993) w hodowli limfocytów obecnych w pełnej krwi zdrowych ochotników albo pacjentów z chorobą Alzheimera:Cytokine Induction by Sheep Colostrinin ™ (Lot A 1993) in cultures of lymphocytes present in whole blood of healthy volunteers or patients with Alzheimer's disease:
PL 195 627 B1 cd. tabeli 1PL 195 627 B1 cont. table 1
Grupa zdrowych ochotników (22 osoby) była grupą heterogenną (zakres wieku od 20 do 64 lat). Podobnie grupa pacjentów z chorobą Alzheimera (50 osób) była grupą heterogenną (wiek 63±7,5 roku). Pomimo wysokiego odchylenia standardowego (±SD) różnice pomiędzy grupami kontrolnymi bez induktorów (brak induktora) i grupami Colostrinin™ były istotne statystycznie (p<0,001).The group of healthy volunteers (22 people) was a heterogeneous group (age range from 20 to 64 years). Similarly, the group of patients with Alzheimer's disease (50 people) was a heterogeneous group (age 63 ± 7.5 years). Despite the high standard deviation (± SD), the differences between the control groups without inducers (no inducer) and the Colostrinin ™ groups were statistically significant (p <0.001).
T a b e l a 2T a b e l a 2
Przykłady stymulacji produkcji interferonu (IFN) przez owczą Colostrinin™ (seria A 1993) w doświadczeniach wykorzystujących pełną krew młodych ochotników i pacjentów z różnorodnymi schorzeniami.Examples of stimulation of interferon (IFN) production by sheep Colostrinin ™ (series A 1993) in experiments using whole blood of young volunteers and patients with various diseases.
UWAGA: testem biologicznym na obecność TNF mierzy się poziom różnych typów interferonów, podczas gdy test ELISA określa jedynie poziom immunoaktywnego IFN-γ.NOTE: The TNF Bioassay measures the levels of various types of interferons, while the ELISA test measures only the level of immunoactive IFN-γ.
PL 195 627 B1PL 195 627 B1
P r z y k ł a d VIIIP r x l a d VIII
Krew pępowinową uzyskano z Oddziału Ginekologiczno-Położniczego Specjalistycznego Szpitala Rejonowego we Wrocławiu. Indukcję cytokin przez Colostrinin™ in vitro w limfocytach krwi pępowinowej pobranej 4-6 godzin po porodzie przeprowadzono w następujący sposób.Cord blood was obtained from the Gynecology and Obstetrics Department of the Specialist District Hospital in Wrocław. In vitro cytokine induction by Colostrinin ™ in cord blood lymphocytes collected 4-6 hours postpartum was performed as follows.
Limfocyty izolowano stosując gradient Ficoll-Paque® zawierający 5,7 g składnika Ficoll 400 i 9,0 g składnika Diatrizoate Sodium na 100 ml. Wyizolowane limfocyty zawieszano w pożywce hodowlanej RPMI-1640 do gęstości 2 x 106 limtocytów na 1 ml pożywki hodowlanej. Colostrinin™ w stężeniu 1-20 μg/ml albo fitohemaglutyninę w stężeniu 10 μg/ml dodano do zawiesiny limfocytarnej. Hodowlę inkubowano przez 20 godzin w temperaturze 37°C. Poziom cytokin w płynie hodowlanym określano metodami biologicznymi. Typowy przykład podano w tabeli 3. Colostrinin™ w stężeniu 1-100 μg/ml ma zdolność stymulacji cytokin (INF i TNF) podobną do tej, którą wykazuje klasyczny induktor IFN-Y-fitohemaglutynina.Lymphocytes were isolated using a Ficoll-Paque® gradient containing 5.7 g of the Ficoll 400 component and 9.0 g of the Diatrizoate Sodium component per 100 ml. The isolated lymphocytes were suspended in RPMI-1640 culture medium to a density of 2 x 10 6 lymphocytes per 1 ml of culture medium. Colostrinin ™ at a concentration of 1-20 µg / ml or phytohaemagglutinin at a concentration of 10 µg / ml were added to the lymphocyte suspension. The culture was incubated for 20 hours at 37 ° C. The level of cytokines in the culture fluid was determined by biological methods. A typical example is given in Table 3. Colostrinin ™ at a concentration of 1-100 µg / ml has a cytokine (INF and TNF) stimulation capacity similar to that of the classic IFN-Y-phytohaemagglutinin inducer.
T a b e l a 3T a b e l a 3
Indukcja cytokin przez Colostrinin™ (seria A 1996) w hodowli limfocytów izolowanych z krwi pępowinowej (CBL)Cytokine induction by Colostrinin ™ (series A 1996) in umbilical cord blood lymphocytes (CBL) culture
N-liczba zbadanych próbek CBLN-number of CBL samples tested
W teście t- Studenta prawdopodobieństwo (p) istotność róż nicy Colostrinin™ - „nieobecność, zarówno IFN jak i TNF wynosi p<0,0001In the Student's t-test, the probability (p) of significance of difference Colostrinin ™ - "absence of both IFN and TNF is p <0.0001
Ze względu na to, że krew pępowinowa jest bogata w niedojrzałe komórki macierzyste, które są zdolne do odtwarzania komórek krwiotwórczych i różnorodnych komórek aktywnych immunologicznie, uzyskany wynik wskazuje, że Colostrinin™ znacząco przyspiesza dojrzewanie komórek macierzystych. Uzyskany wynik wskazuje, że Colostrinin™ można zastosować w leczeniu różnych rodzajów niedoborów odpornościowych i do pobudzania układu krwiotwórczego np. po zranieniach, zakażeniach, chemoterapii i radioterapii. W badaniach biomedycznych substancje pochodzenia naturalnego o podobnym działaniu są bardzo rzadko spotykane.Due to the fact that umbilical cord blood is rich in immature stem cells that are able to regenerate hematopoietic cells and a variety of immunologically active cells, the obtained result indicates that Colostrinin ™ significantly accelerates the maturation of stem cells. The obtained result indicates that Colostrinin ™ can be used in the treatment of various types of immunodeficiencies and for the stimulation of the hematopoietic system, eg after injuries, infections, chemotherapy and radiotherapy. In biomedical research, substances of natural origin with a similar effect are very rarely found.
P r z y k ł a d IXP r x l a d IX
Sposób leczenia zaburzeń ośrodkowego układu nerwowego badano na grupie ochotników we wczesnym i umiarkowanym stadium choroby Alzheimera. Jednostki dawkowania zawierające 0,00015 g Colostrinin™ określonej w przykładzie I i III podawano w postaci tabletek do ssania pomiędzy posiłkami. Początkowo stosowano jedną tabletkę dziennie przez okres 3 tygodni, następnie leczenie przerwano na okres 2-4 tygodni i ponownie rozpoczęto leczenie podając 2 tabletki dziennie przez 3 tygodnie. Stwierdzono, że leczenie Colostrinin™ wywołuje stan hiporeaktywności albo tolerancji. Manifestuje się to niezdolnością do syntetyzowania IFN jak również czynnika martwicy nowotworów TNF-α. Zjawisko to pozwala na ilościowe zmierzenie działania aktywnego składnika.The method of treating disorders of the central nervous system was studied in a group of volunteers in the early and moderate stages of Alzheimer's disease. Dosage units containing 0.00015 g of Colostrinin ™ as defined in Examples 1 and 3 were administered as lozenges between meals. Initially, one tablet was used daily for a period of 3 weeks, then treatment was interrupted for 2-4 weeks and treatment was restarted with 2 tablets daily for 3 weeks. Treatment with Colostrinin ™ has been found to induce a state of hyporeactivity or tolerance. This is manifested by an inability to synthesize IFN as well as tumor necrosis factor TNF-α. This phenomenon allows the action of an active ingredient to be quantified.
Po zaprzestaniu podawania tych leków stan tolerancji spontanicznie ulegał odwróceniu. Stan czasowej tolerancji na Colostrinin™ jest wynikiem włączenia się cytokin produkowanych przez limfocyty Th1 i Th2 i komórki pomocnicze takie jak monocyty, makrofagi, komórki dendrytyczne i komórki śródbłonka i ich produkty. W wyniku tego obserwowano poprawę kontaktu i podniesienie nastroju u pacjentów z chorobą Alzheimera.Upon discontinuation of these drugs, the state of tolerance spontaneously reversed. The state of temporary tolerance to Colostrinin ™ is the result of the incorporation of cytokines produced by Th1 and Th2 lymphocytes and helper cells such as monocytes, macrophages, dendritic cells and endothelial cells and their products. As a result, improved contact and elevated mood were observed in patients with Alzheimer's disease.
PL 195 627 B1PL 195 627 B1
Na figurze 1 zilustrowano pojawianie się i spontaniczne zanikanie stanu hiporeaktywności (częściowej tolerancji) na wzbudzanie interferonu gamma (IFN-γ) u kobiet (JM) z chorobą Alzheimera, które otrzymywały Colostrinin™ w 100 μg tabletkach codziennie przez trzy tygodnie. Po tym następowała trzytygodniowa przerwa w leczeniu (w trakcie przerwy tolerancja na induktory powracała do normy). Próbki krwi do badania stymulacji IFN-γ przez Colostrinin™ i induktory kontrolne (PHA-10 μg/ml) pobierano co tydzień. Sposób przeprowadzania badań indukcji cytokin i ich ilościowe oznaczenia opisano we wcześniejszych akapitach.Figure 1 illustrates the emergence and spontaneous disappearance of a state of hyporesponsiveness (partial tolerance) to interferon gamma (IFN-γ) induction in Alzheimer's disease (JM) women who received Colostrinin ™ 100 µg tablets daily for three weeks. This was followed by a three-week break in treatment (during the break, tolerance to inducers returned to normal). Blood samples for the IFN-γ stimulation test by Colostrinin ™ and the control inducers (PHA-10 µg / ml) were collected weekly. How to conduct cytokine induction studies and their quantification are described in the previous paragraphs.
Wyniki oznaczeń poziomów indukowanego IFN-γ wskazują, że hiporeaktywność pojawia się wcześnie w trakcie pierwszego tygodnia przyjmowania Colostrinin™ (codziennie 100 μg/tabletkę) i osiąga maksimum w trzecim tygodniu leczenia. Odwrócenie stanu tolerancji na indukcję IFN-γ pojawia się spontanicznie w okresie trzech tygodni przerwy w leczeniu (tj. w 6 tygodniu po rozpoczęciu leczenia). Ponadto, wykres ten wskazuje na to, że hiporeaktywność jest „swoista w odniesieniu do Colostrinin™ pochodzącej od owcy (OvCal) i utrzymuje się przez 6 tygodni obserwacji, podczas gdy hiporeaktywność na PHA całkowicie zanika.The results of the determination of the levels of induced IFN-γ indicate that hyporesponsiveness appears early during the first week of taking Colostrinin ™ (100 µg / tablet daily) and peaks in the third week of treatment. Reversal of the state of tolerance to IFN-γ induction occurs spontaneously within the three-week interruption period (ie, at the 6th week after initiation of treatment). Furthermore, this plot shows that the hyporeactivity is "sheep-derived Colostrinin ™ specific (OvCal) and persists through 6 weeks of observation, while the PHA hyporeactivity completely disappears."
P r z y k ł a d XP r z k ł a d X
Sposób leczenia zaburzeń ośrodkowego układu nerwowego badano na grupie ochotników we wczesnym i umiarkowanym stadium choroby Alzheimera. Jednostki dawkowania zawierające 0,00015 g NP określonego w przykładzie II podawano w postaci tabletek do ssania pomiędzy posiłkami. Początkowo stosowano jedną tabletkę dziennie przez okres 3 tygodni, następnie leczenie przerwano na 3 tygodnie i ponownie rozpoczęto leczenie podając 2 tabletki dziennie przez 3 tygodnie. Stwierdzono, że łączenie NP wywołuje stan hiporeaktywności albo tolerancji. Manifestuje się to niezdolnością do syntetyzowania IFN jak również czynnika martwicy nowotworów TNF-α. Zjawisko to pozwala na ilościowe zmierzenie działania aktywnego składnika.The method of treating disorders of the central nervous system was studied in a group of volunteers in the early and moderate stages of Alzheimer's disease. Dosage units containing 0.00015 g of NP as defined in Example 2 were administered as lozenges between meals. Initially, one tablet was used daily for a period of 3 weeks, then treatment was interrupted for 3 weeks and treatment was restarted with 2 tablets daily for 3 weeks. Fusion of NPs has been found to induce a state of hyporeactivity or tolerance. This is manifested by an inability to synthesize IFN as well as tumor necrosis factor TNF-α. This phenomenon allows the action of an active ingredient to be quantified.
Po zaprzestaniu podawania tych leków stan tolerancji spontanicznie ulegał odwróceniu. Stan przemijającej tolerancji na NP jest wynikiem włączenia się cytokin produkowanych przez limfocyty Th1 i Th2 i komórki pomocnicze takie jak monocyty, makrofagi, komórki dendrytyczne i komórki śródbłonka i ich produkty. W wyniku tego obserwowano poprawę kontaktu i podniesienie nastroju u pacjentów z chorobą Alzheimera.Upon discontinuation of these drugs, the state of tolerance spontaneously reversed. The transient NP tolerance state is the result of the incorporation of cytokines produced by Th1 and Th2 lymphocytes and helper cells such as monocytes, macrophages, dendritic cells and endothelial cells and their products. As a result, improved contact and elevated mood were observed in patients with Alzheimer's disease.
Claims (24)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL97332632A PL195627B1 (en) | 1996-10-03 | 1997-10-03 | Colostrinin and application thereof |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL96316416A PL185442B1 (en) | 1996-10-03 | 1996-10-03 | Pharmaceutic agent exhibiting immunoregulating and psychotropic properties, therapeutic form thereof and method of treating diseases of immunological and physical background |
| PCT/GB1997/002721 WO1998014473A1 (en) | 1996-10-03 | 1997-10-03 | Colostrinin, and uses thereof |
| PL97332632A PL195627B1 (en) | 1996-10-03 | 1997-10-03 | Colostrinin and application thereof |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL332632A1 PL332632A1 (en) | 1999-09-27 |
| PL195627B1 true PL195627B1 (en) | 2007-10-31 |
Family
ID=26653215
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL97332632A PL195627B1 (en) | 1996-10-03 | 1997-10-03 | Colostrinin and application thereof |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL195627B1 (en) |
-
1997
- 1997-10-03 PL PL97332632A patent/PL195627B1/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL332632A1 (en) | 1999-09-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2266859C (en) | Colostrinin, and uses thereof | |
| CA2260007C (en) | Method for treating gastrointestinal damage | |
| EP1976397B1 (en) | Infant immunological formula | |
| CN1070371C (en) | Method of treatment of HIV-seropositive individuals with dietary whey proteins | |
| CN101434650B (en) | Bursa pentapeptide, deriving peptide thereof and use thereof | |
| JPH10509955A (en) | Treatment of secondary immunodeficiency | |
| US20080085299A1 (en) | Peptides derived from colostrinin | |
| CN106535915B (en) | Ghrelin secretion promoter | |
| JP2008115194A (en) | Cancer preventive or therapeutic pharmaceutical composition | |
| CA2171281C (en) | Immunomodulating compositions from bile | |
| FR2537436A1 (en) | METHOD FOR REGULATING APPETITE AND EFFICIENCY IN THE USE OF FOODS USING INTERFERON | |
| US5888552A (en) | Anti-cancer therapeutic compositions containing whey protein concentrate | |
| EP0788800A1 (en) | Method and kit for inducing immunological tolerance | |
| PL195627B1 (en) | Colostrinin and application thereof | |
| AU761148B2 (en) | Colostrinin, and uses thereof | |
| GB2352176A (en) | Colostrinin and uses thereof | |
| MXPA99003108A (en) | Colostrinin, and uses thereof | |
| JP2001048804A (en) | TNF-alpha PRODUCTION INHIBITOR | |
| KUROKI et al. | Antitumor effect of recombinant murine interferon-β against mouse malignant glioma | |
| Noviatri et al. | WATER-SOLUBLE EXTRACT OF GOAT MILK YOGURT MODULATE EXPRESSION OF INTERLEUKIN-10 AND INTERLEUKIN-17 IN THE THYROID OF AUTOIMMUNE THYROIDITIS RATS. | |
| Bounous | 54). ANTI-CANCER THERAPEUTIC | |
| KR20180016382A (en) | Combinations of tolerogenic peptides and TFG-B for use in induction and maintenance of oral tolerance in young mammals | |
| Baker | Influence of milk proteins on the immune response of mice |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| RECP | Rectifications of patent specification | ||
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20131003 |