PL166537B1

PL166537B1 - The method of obtaining allocryptopin from plant materials

Info

Publication number: PL166537B1
Application number: PL29273691A
Authority: PL
Inventors: Leon Jusiak; Wladyslaw Golkiewicz; Jerzy Kuczynski
Original assignee: Akad Medyczna
Priority date: 1991-12-11
Filing date: 1991-12-11
Publication date: 1995-05-31
Also published as: PL292736A1

Abstract

Sposób otrzymywania allokryptopiny z surowców roślinnych przez ekstrakcję surowca roślinnego wodnym roztworem kwasu organicznego, korzystnie octowego i wyodrębnienie alkaloidów III-rzędowych przez sorpcję na żelu krzemionkowym, następnie desorpcję bezwodnym alkoholem lub przez sorpcję na żelu krzemionkowym alkaloidów towarzyszących, a wytrącenie z roztworu pozostałego ługiem alkaloidów III-rzędowych i rozpuszczenie ich w alkoholu, następnie odsączenie z roztworu alkoholowego osadu protopiny, wytrącenie i oddzielenie chlorowodorku chelidoniny, znamienny tym, że roztwór alkoholowy po oddzieleniu chlorowodorku chelidoniny odparowuje się do konsystencji syropu, po czym rozcieńcza się wodą w ilości korzystnie 1 część wagowa pozostałości +5 części objętościowych wody 1 doprowadza się do pH około 7,0 przez dodanie wodorotlenku sodu lub amoniaku, następnie roztwór ten ekstrahuje się niższym estrem kwasu karboksylowego, korzystnie octanem propylu lub niższym ketonem nie mieszający się z wodą, korzystnie ketonem metylowo-propylowym do wyczerpania alkaloidów, zaś uzyskany ekstrakt pozostawia się do krystalizacji wolnej allokryptopinyA method for obtaining allocryptopine from plant raw materials by extracting the plant raw material with an aqueous solution of an organic acid, preferably acetic acid, and isolating tertiary alkaloids by sorption on silica gel, then desorption with anhydrous alcohol or by sorption on silica gel of accompanying alkaloids, and precipitating tertiary alkaloids from the remaining solution with a lye and dissolving them in alcohol, then filtering the protopine precipitate from the alcohol solution, precipitating and separating chelidonine hydrochloride, characterized in that the alcohol solution after separation of chelidonine hydrochloride is evaporated to the consistency of syrup, then diluted with water in an amount of preferably 1 part by weight of the residue + 5 parts by volume of water and adjusted to pH of about 7.0 by adding sodium hydroxide or ammonia, then this solution is extracted with a lower ester of carboxylic acid, preferably propyl acetate or a lower water-immiscible ketone, preferably methyl propyl ketone, until the alkaloids are exhausted, and the resulting extract is left to crystallize free allocryptopine

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania allokryptopiny z surowców roślinnych przez ekstrakcję surowca roślinnego wodnym roztworem kwasu organicznego, korzystnie octowego i następnie wyodrębnienie z wyciągu wodnego poszczególnych alkaloidów przez sorpcję na żelu krzemionkowym i selektywną desorpcję wyodrębnionych alkaloidów lub przez sorpcję na żelu krzemionkowym alkaloidów towarzyszących, następnie rozpuszczenie w alkoholu alkaloidów III-rzędowych i wydzielenie z roztworu protopiny, chlorowodorku chelidoniny oraz selektywne wykrystalizowanie allokryptopiny.The subject of the invention is a method of obtaining allocryptopin from plant materials by extracting the plant material with an aqueous solution of an organic acid, preferably acetic acid, and then isolating individual alkaloids from the aqueous extract by sorption on silica gel and selective desorption of the separated alkaloids or by sorption on silica gel of accompanying alkaloids, then dissolving them in alcohol of tertiary alkaloids and separation of protopine and chelidonine hydrochloride from the solution and selective crystallization of allocryptopin.

Allokryptopina zwana też fagaryną występuje w wielu roślinach rodziny makowatych (Papaveraceae) i rutowatych (Rutaceae). Posiada strukturę protopiny lecz różni się od niej grupami funkcyjnymi - zamiast jednej grupy metylenodwuoksy ma dwie grupy metoksy. Jest dość silną trzeciorzędową zasadą. Pod wpływem kwasów mineralnych przechodzi w silną nietrwałą czwartorzędową zasadę.Allocryptopin, also called phagarin, occurs in many plants of the poppy (Papaveraceae) and rutaceae (Rutaceae) families. It has the structure of protopine, but differs from it in functional groups - instead of one methylenedioxy group, it has two methoxy groups. It is quite a strong tertiary principle. Under the influence of mineral acids, it turns into a strong, unstable quaternary base.

Interesujące są farmakologiczne właściwości allokryptopiny. Według ostatnich badań, działa ona uspakajająco, znosi lęk, działa żółciopędnie oraz wykazuje słabe działanie antynowotworowe. Znane jest wyodrębnianie allokryptopiny z korzenia glistnika z opisu patentowego RP nr 144 246. Sposób ten polega na tym, że chloroformowy wyciąg alkaloidowy otrzymany znanymi metodami, a zawierający cały zespół alkaloidowy rośliny, między innymi allokryptopinę i towarzyszące jej zawsze protopinę odparowuje się do pozostałości oleistej, którą rozpuszcza się następnie na gorąco w propanolu i po oziębieniu wykrystalizowuje allokryptopina z protopiną. Mieszaninę obu alkaloidów rozdziela się następnie metodą przeciwprądowej ekstrakcji kaskadowej w układzie: chloroform + roztwór buforowy o pH 5,4 stosując co najmniej 10 przeniesień. Mieszaninę protopiny i allokryptopiny można oddzielić od pozostałego zespołu alkaloidów sposobem znanym z opisu patentowego P-269 918, przez ekstrakcję ich ze stężonych wyciągów alkaloidowych w rozpuszczalnikach organicznych rozcieńczonymi kwasami. Allokryptopinę od protopiny oddzielić można następnie w układzie przeciwprądowym. Metody te są jednak pracochłonne i wymagają zużycia dużych ilości odczynników. Najbliższe stanem techniki są sposoby otrzymywania niektórych alkaloidów III-rzędowych w tym także allokryptopiny znane z opisów patentowych 165 555 i 165 556.The pharmacological properties of allocryptopin are of interest. According to recent studies, it has a calming effect, relieves anxiety, has a choleretic effect and has a weak anti-cancer effect. It is known to isolate allocryptopin from the celandine root from the Polish patent description No. 144 246. This method consists in the fact that a chloroform alkaloid extract obtained by known methods, and containing the entire alkaloid complex of the plant, including allocryptopin and always accompanying it, is evaporated to an oily residue, which is then dissolved while hot in propanol and upon cooling allocryptopin with protopin crystallizes out. The mixture of both alkaloids is then separated by countercurrent cascade extraction in the system: chloroform + buffer solution pH 5.4 using at least 10 transfers. The mixture of protopin and allocryptopin can be separated from the remaining group of alkaloids by the method known from P-269,918, by extracting them from concentrated alkaloid extracts in organic solvents with dilute acids. Allocryptopine from protopin can then be separated in a countercurrent system. However, these methods are labor-intensive and require large amounts of reagents. The methods for the preparation of some tertiary alkaloids, including allocryptopins known from patents 165 555 and 165 556, are the closest prior to the art.

Według metody znanej z opisu patentowego 165 556 izolację alkaloidów uzyskuje się przez ich selektywną sorpcję z kwaśnego ekstrahenta na żelu krzemionkowym i następnie desorpcję alkaloidów III-rzędowych bezwodnym alkoholem. Z roztworu alkoholowego po oddzieleniu wykrystali166 537 zowanej protopiny, wytrąca się kwasem solnym chlorowodorek chelidoniny a po jego oddzieleniu z pozostałego roztworu wyodrębnia się allokryptopinę na przykład przez przeciwprądową ekstrakcję w układzie chloroform/roztwór buforowy o pH 5,4.According to the method known from patent specification 165 556, the isolation of the alkaloids is achieved by their selective sorption from the acid extractant on silica gel and then desorption of the tertiary alkaloids with anhydrous alcohol. After separation of the crystallized protopin from the alcoholic solution, chelidonine hydrochloride is precipitated with hydrochloric acid, and after its separation from the remaining solution, allocryptopin is isolated, for example, by countercurrent extraction with chloroform / buffer pH 5.4.

Metoda znana z opisu 165 555 polega na sorpcji na żelu krzemionkowym alkaloidów towarzyszących i pozostawieniu w roztworze alkaloidów Ill-rzędowych, które wytrąca się z tego roztworu przez zbuforowanie go ługiem do pH około 7,0. Wytrącony osad miesza się następnie z bezwodnym alkoholem i po oddzieleniu nierozpuszczonej protopiny z roztworu wytrąca się chlorowodorek chelidoniny, a po jego oddzieleniu z przesączu wyodrębnia się allokryptopinę wyżej podanym sposobem.The method known from specification 165,555 consists in sorption of accompanying alkaloids on silica gel and leaving the tertiary alkaloids in the solution, which precipitates from this solution by buffering it with alkali to a pH of about 7.0. The precipitate is then mixed with anhydrous alcohol, and after separation of undissolved protopin from the solution, chelidonine hydrochloride is precipitated, and after its separation from the filtrate, allocryptopin is isolated as described above.

Wynalazek rozwiązuje zagadnienie wyodrębniania w prosty sposób allokryptopiny z roztworów alkoholowych stanowiących pozostałość po oddzieleniu chlorowodorku chelidoniny, w procesach stosujących sorpcję alkaloidów wyodrębnianych lub towarzyszących na żelu krzemionkowym.The invention solves the problem of the simple isolation of allocryptopin from alcoholic solutions remaining after the separation of chelidonine hydrochloride in processes using sorption of alkaloids isolated or accompanying on silica gel.

Istota sposobu według wynalazku polega na tym, że uzyskany po oddzieleniu chlorowodorku chelidoniny wytrąconego kwasem solnym alkoholowy roztwór odparowuje się do konsystencji syropu, następnie rozcieńcza się wodą w ilości korzystnie 1:5 i doprowadza się pH roztworu do około 7,0 przez dodanie wodorotlenku sodowego lub amoniaku, po czym roztwór ekstrahuje się niższym estrem kwasu karboksylowego, korzystnie octanem propylu lub niższym ketonem nie mieszającym się z wodą, korzystnie ketonem metylowo-propylowym. Uzyskany ekstrakt oziębia się do temperatury około 10°C i pozostawia na okres około 24 godzin do wykrystalizowania allokryptopiny, którą ewentualnie poddaje się oczyszczeniu przez dodatkową krystalizację.The essence of the method according to the invention consists in the fact that the alcoholic solution obtained after separation of the chelidonine hydrochloride precipitated with hydrochloric acid is evaporated to the consistency of a syrup, then it is diluted with water in an amount preferably 1: 5 and the pH of the solution is adjusted to about 7.0 by adding sodium hydroxide or ammonia, the solution is then extracted with a lower ester of the carboxylic acid, preferably propyl acetate or a lower water-immiscible ketone, preferably methyl propyl ketone. The extract obtained is cooled to about 10 ° C and allowed to crystallize allocryptopin for a period of about 24 hours, which is optionally purified by additional crystallization.

Sposobem według wynalazku uzyskuje się produkt o wysokiej czystości nie wymagający przekrystalizowania. Metoda ta jest szczególnie przydatna do wyodrębniania allokryptopiny z takich surowców jak sangwinaria, siwieć żółty, kokorycz, bokkonia, glistnik i inne.By the method according to the invention, a product of high purity is obtained, which does not require recrystallization. This method is especially useful for the isolation of allocryptopin from raw materials such as sanguine, yellow gray, coconut, bok choy, celandine and others.

Przykład I. Z frakcji alkaloidów Ill-rzędowych otrzymanych przez ekstrakcję glistnika kwasem octowym, następnie wyizolowanych metodą sorpcyjną na żelu krzemionkowym i zdesorbowanych bezwodnym metanolem oddzielono osad protopiny. Następnie roztwór zadano kwasem solnym. Wydzielony osad chlorowodorku chelidoniny odsączono, a przesącz odparowano do konsystencji syropu, który rozcieńczono wodą w ilości 1:5 i dodano wodorotlenku sodu do pH = 7,0. Z uzyskanego roztworu ekstrahowano allokryptopinę octanem propylu, z którego po oziębieniu do temp. 10°C wykrystalizował osad będący wolną allokryptopiną o wysokiej czystości.Example 1 The protopin precipitate was separated from the fractions of tertiary alkaloids obtained by extracting celandine with acetic acid, then isolated by sorption method on silica gel and desorbed with anhydrous methanol. The solution was then quenched with hydrochloric acid. The separated precipitate of chelidonine hydrochloride was filtered off and the filtrate was evaporated to a syrup consistency, which was diluted with water in the amount of 1: 5 and sodium hydroxide was added to pH = 7.0. Allocryptopin was extracted from the obtained solution with propyl acetate, from which, after cooling to 10 ° C, a precipitate crystallized, which was free allocryptopin of high purity.

Przykład II. Roztwór uzyskany z ekstrakcji korzenia glistnika 1 % kwasem octowym o pHExample II. Solution obtained from the extraction of celandine root with 1% acetic acid at pH

5,5 skierowano na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym. Sorpcję prowadzono do momentu, aż u wylotu kolumny zjawiły się alkaloidy-trzeciorzędowe zasady. Wówczas wyciek zbierano do zbiornika do chwili gdy u wylotu kolumny zjawiły się alkaloidy-czwartorzędowe zasady. Sorpcję przerwano, kolumnę przemyto buforem octanowym do pH 5,5, wyciek połączono z wyciekiem zawierającym alkaloidy III-rzędowe i zbuforowano roztworem NaOH do pH = 7,0. Wtrącony osad odsączono i zmieszano z 95% metanolem w ilości 4,8 części objętościowych metanolu na 1 część wagową osadu. Uzyskany roztwór przesączono. W osadzie powstała protopina, przesącz natomiast zakwaszono przy ciągłym mieszaniu kwasem solnym dla wydzielenia chelidoniny w postaci chlorowodorku. Roztwór po odsączeniu chelidoniny zagęszczono do konsystencji syropu, który rozcieńczono wodą w stosunku 1:5, doprowadzono do pH 7,0, przez dodanie wodorotlenku sodowego, ekstrahowano allokryptopinę octanem propylu, z którego po krótkim czasie wydziela się allokryptopina o wysokiej czystości.5.5 was directed to a column packed with silica gel. Sorption was carried out until tertiary alkaloids appeared at the outlet of the column. The effluent was then collected in the tank until alkaloids-quaternary bases appeared at the column outlet. Sorption was stopped, the column was washed with acetate buffer to pH 5.5, the effluent was combined with the effluent containing tertiary alkaloids and buffered with NaOH solution to pH = 7.0. The precipitated solid was filtered off and mixed with 95% methanol in the amount of 4.8 parts by volume methanol per 1 part by weight of the precipitate. The resulting solution was filtered. Protopin was formed in the precipitate, while the filtrate was acidified with continuous stirring with hydrochloric acid to release chelidonine in the form of the hydrochloride. The solution after filtering off the chelidonin was concentrated to the consistency of a syrup, which was diluted with water in a ratio of 1: 5, adjusted to pH 7.0 by the addition of sodium hydroxide, allocryptopin was extracted with propyl acetate, from which high purity allocryptopin is released after a short time.

Metodą jak w przykładzie I można otrzymać allokryptopinę ze wszystkich zawierających ją surowców, gdzie alkaloidy IV-rzędowe zasady zatrzymywane są na kolumnie z żelem krzemionkowym, a allokryptopina wraz z trzeciorzędowymi zasadami gromadzić się będzie w przesączu, z którego po wytrąceniu amoniakiem lub zasadą sodową wyekstrahuje się ją octanem propylu, z którego po oziębieniu do 10°C w krótkim czasie wykrystalizuje wolna allokryptopina.Using the method as in example 1, allocryptopine can be obtained from all raw materials containing it, where the fourth-order alkaloids are retained on a column with silica gel, and allocryptopin together with the tertiary bases will be collected in the filtrate, from which, after precipitation with ammonia or sodium base, it is extracted It is made of propyl acetate, from which, on cooling to 10 ° C, free allocryptopin crystallizes out in a short time.

Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz.Publishing Department of the UP RP. Circulation of 90 copies

Cena 1,00 zł.Price PLN 1.00.

Claims

Patent claim

The method of obtaining allocryptopin from plant raw materials by extracting the plant raw material with an aqueous solution of organic acid, preferably acetic acid, and isolating tertiary alkaloids by sorption on silica gel, then desorption with anhydrous alcohol or by sorption of accompanying alkaloids on silica gel, and precipitation from the remaining solution with alkaloids III and dissolving them in alcohol, then filtering the protopin precipitate from the alcohol solution, precipitating and separating the chelidonin hydrochloride, characterized in that the alcoholic solution, after separating off the chelidonine hydrochloride, is evaporated to the consistency of a syrup, and then diluted with water in an amount preferably 1 part by weight of the residue +5 parts by volume of water and adjusted to a pH of about 7.0 by adding sodium hydroxide or ammonia, then this solution is extracted with a lower carboxylic acid ester, preferably with propyl acetate or a lower water immiscible ketone, k preferably methyl propyl ketone until alkaloids are depleted and the extract obtained is allowed to crystallize free allocryptopin.