PL154276B1 - Sposób rozdziału kwasów cholanowych i ich estrów wyodrębnionych z 2ółci zwierzęce3 lub ptactwa domowego - Google Patents

Sposób rozdziału kwasów cholanowych i ich estrów wyodrębnionych z 2ółci zwierzęce3 lub ptactwa domowego

Info

Publication number
PL154276B1
PL154276B1 PL26459687A PL26459687A PL154276B1 PL 154276 B1 PL154276 B1 PL 154276B1 PL 26459687 A PL26459687 A PL 26459687A PL 26459687 A PL26459687 A PL 26459687A PL 154276 B1 PL154276 B1 PL 154276B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
mixture
acids
eluent
silica gel
separating
Prior art date
Application number
PL26459687A
Other languages
English (en)
Other versions
PL264596A1 (en
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed filed Critical
Priority to PL26459687A priority Critical patent/PL154276B1/pl
Publication of PL264596A1 publication Critical patent/PL264596A1/xx
Publication of PL154276B1 publication Critical patent/PL154276B1/pl

Links

Landscapes

  • Steroid Compounds (AREA)

Description

RZECZPOSPOLITA OPIS PATENTOWY 154 276
POLSKA
Patent dodatkowy do patentu nr---- Int Cl * i 2 * * 5 C07J 9/00
Zgłoszono: 87 03 11 /P. 264596,/
HĘ? Pierwszeństwo !££ S 8 łŁm 8 0 S U l B
URZĄD PATENTOWY Zgłoszenie ogłoszono: 88 12 08
RP Opis patentowy opublikowano: 1991 1129
Twórcy wynalazku: Stefania Respondek, Wojciech Piątkowski, Roman Petrus, Stanisław 2ydzik
Uprawniony z patentu: Politechnika Rzeszowska im. Ignacego Łukasiewicza Rzeszów /Polska/
Rzeszowskie Zakłady Farmaceutyczne Polfa'', Rzeszów /Polska/
SPOSÓB ROZDZIAŁU KWASÓW CHOLANOWYCH I ICH ESTRÓW WYODRĘBNIONYCH Z 2ÓŁCI ZWIERZĘCEJ LUB PTACTWA DOMOWEGO
Przedmiotem wynalazku jest sposób rozdziału kwasów cholanowych i ich estrów wyodrębnionych z żółci zwierzęcej lub ptactwa domowego metodę preparatywnej kolumnowej chromatoggafii cieczowej. świeża żółć zwierzęca zawiera między innymi szereg kwasów cholanowych, z których wiele w stanie czystym jest cennymi lekami lub półproduktami do ich wytwarzania. Kwasy te występuję w żółci w postaci rozpuszczalnych w wodzie soli sodowych i potasowych połęczeń z glicynę i/lub taurynę.
Znany jest sposób izooowania z żółci mieszaniny wolnych kwasów cholanowych pozbawionych zanieczyszczeń innymi związkami organicznymi, głównie barwnikami żółcóowymi i substancjami białkowymi. Najczęściej stosowanę metodę prowadzęcę do wyodrębnienia tej mieszaniny jest alkalcczna hydrolizs żółci lub produktów jej wysolenia, wstępne oczyszczanie przez gotowanie z metanolem i węglem aktywnym, zakwaszenie hydrolizatu .i odsęczenie wydzielonego osadu oraz wysuszenie go do stałej masy.
otrzymanej z hydrolizy mieszaniny surowych kwasów cholanowych wyodrębnia się pojedyncze kwasy różnymi opisanymi w litθfalucze lub opatentowanymi sposobami. Wyodrębnianie dotyczy najczęściej tylko tych kwasów, które sę głównymi składnikami mieszanin. Na przykład z mieszaniny kwasów cholanowych zawartych w żółci wieprzowej wyodrębnia się tylko kwas hiodeoksycholowy przez krystalizację w postaci adduktu benzenowego jego estru metylowego. Tymczasem w ługach pokrystelizecyjnych, które trekoowane sę Jako odpad zostaje jeszcze około 20% tego kwasu, a także kikkanaścia innych zw^zków, a między innym: cholesterol oraz kwas chenodeoksycholowy, których wydzielanie Jest opłacalne. W analogiczny sposób postępuje się z żółcią wołowę, z której wydziela się tylko kwas cholowy, czy z żółcią ptactwa, która jest źródeem kwasu ihenodθoksycholooego.
154 276
154 275
Znane jest tez z literatury zastosowanie kolumnowej chromatografii cieczowej zarówno podziałowej Jak i adsorpcyjneJ, jako metody analizy jakościowej lub looścoowej mieszanin wolnych kwasów choianowych oraz mieszanin ich koniugatów z taurynę lub glccyną lub mieszanin ich estrów. I tak w przypadku zastosowania chromatograf ii podziałowej istnieje bardzo wiele przebadanych układów chromaragraficznych. Fazę stacjonarną sę tu odpowiednio fabrycznie przygorawane wypełnienia kolumn i tak na przykład w pracach opublikowanych w Journal oi Chromatography v.2O2 /1980/, 347-351 oraz v.27O /1983/, 402-306, użyto wypełnienia typu Bondapak C^ * wypełnienia typu RP-B. Sę to wypasienia przygotowane na bazie AlgOg lub żelu krzemionkowego z naniesionymi na ich powierzchnię fazami stacjonarnymi. Eluentami w tym typie chrommrograrii sę roztwory wodno - alkoholowe lub wodno - aceranitrylowe. Używane sę też jako eluenty roztwory wodne, wodno-alkoholowe lub alkoholowe z rozpuszczonymi w nich związkami nieorganicznymi lub organicznymi Jak na przykład w pracach opublikowanych w Biochem.Soc .Trans.1989, 374-5 lub 0.Chroma tography v.l65 /1979/, 283-299.
Zgodnie z przytoczonę wyżej ltteaaturę w przypadku chromarograrii adsorpcyjnej fazę stacjonarnę w kolumnie jest aktywny tlenek glinu lub żel krzemionkowy o różnym stopniu mooyffkacji oraz rozdrobnienia, a eluentami czyste rozpuszczaaniki organiczne lub ich roztwory o różnych proporcjach wzajemnych. I tak na przykład w pracy 3.Chromatography v.l65 /1979/, 283-299, do rozchromatografowania mieszaniny wolnych kwasów choianowych lub ich soli użyto roztworu octanu etylu: heksanu /7:3/, a w pracy Journal of Chromatography, v.2O2 /1980/, 322-331, użyto cały szereg eluentów, w tym na przykład eluentu o składzie : isooktan : octan etylu : lodowaty kwas octowy : n-butanol · 10 : 7 : 3 : 4. Taka sama różnorodność stosowanych eluentów występuje w przypadku chromatografowania mieszaniny estrów. I tak na przykład w pracy Journal of Chramaragraphy, v.2O2 /1980/, 322-331, użyto roztworu o składzie n-heptan : dioksan : 2-proptnol 14 : 5 : 1.
Celem wynalazku jest zastosowanie procesu preparatywnae, absorpcyjnej cieczowej chromarograrii kolumnowej do iooścoowego rozdziału wyżej opisanych mieszanin w skali od wielkolaboratoryjnej do przemysłowej ne pojedyncze składniki, lub na frakcje zawierające interesujące substancje w stopniu skoncentoowanym. Istota sposobu rozdziału według wynalazku polega na tym, że dobrano warunki tego procesu dla skali od laboratoryjnej do technicznej, a przede wszystkmm oryginalny układ rozdzielający : żel krzemionkowy - eluent o następujęcych cechach :
- optymalny rozdział chroma tog rafowanych mieszanin niezależnie od zastosowanej skali procesu,
- stosunkowo niska cena używanych odczynników,
- dobra ekonomika procesu zapewniona przez mooliwość wielokrotnej rtgeπθeaaZi eluenta oraz adsorbentu.
Istota sposobu według wynalazku polega na tym, że mieszaninę kwasów chołanowych chromatografuje się na żelu krzemionkowym eluentem będęcym mieszaninę octanu meeylu i mei^nc^lu Sposobem według wynalazku mieszaninę estrów metylowych kwasów choianowych chromaaografuje się na żelu krzemionoowym eluentem będęcym mieszaninę octanu metylu i benzenu lub toluenu. Sposobem według wynalazku mieszaninę estrów butylowych kwasów choianowych chromaragrafuje się na żelu lrzemgongowym eluentem będęcym mieszaninę octanu meeylu i benzenu lub toluenu. Sposobem według wynalazku zmieniajęc Jedynie eluent oraz jego skład można rozdzielić preparatywmie wszystkie kwasy cholanowe zawarte w żółci, a także ich pochodne np. estry, ketony oraz substancje pochodne otafmmane na drodze przeróbki kwasów choianowych do hormonów steroidowych .
Przedmiot wynalazku jest opisany w przykładach wykonania nie ograniczających jego zakresu.
Przykład I. Do kolumny chromaraggaflcznej o średnicy 30 mm wsypano 44 g żelu krzemionkowego frmmy Merck o granulacji 0,04-0,063 mm i następnie ubito go metodę suchę przez wstrzęsanie i nasycono go eluenram złożonym z meszaniny octanu etylu i metanolu w stosunku obj. 30:1. 2 kolei na szczyt kolumny naniesiono roztwór mieszaniny surowych kwasów choianowych z żółci wieprzowej i rozchromaragrafowano. W oparciu o uzyskane wyniki na TLC połączono odpowiednie frakcje zawierające odrębne indywidua. Z próbki o masie 0,9 g gtazmmang 0,65 g czystego kwasu hiodeolsfcholootgo, 0,32 g kwasu zhtngyegksyzhglowtgo, a poza tym cholastrol, kwasy tłuszczowe, kwas lirahocwy i inne, wszystkie w stania czystym.
154 275
Przykład II. Do kolumny,jak w przykładzie I, wsypano 44 g suchego żelu krzemionkowego firny Merck o granulacji 0,04-0,063 mm, nasycono eluentem będącym meszaninę octanu etylu i benzenu w stosunku obj,2:i. Następnie na szczyt kolumny wprowadzono próbkę meszan^ny estrów kwasów choinowych otrzymanych z żółci wieprzowej rozpuszczony w podanym wyżej eluencie, po uprzednim oddzieleniu przez krystalizację 80% masy głównego składnika, jakmm jest ester me tyłowy kwasu hiodeoksycholowego. Próbkę rozchromatografowano stosując eluent o podanym powyżej składzie. 2 masy 4 g próbki estrów metylowych kwasów choinowych ot^mi^no 0,875 g czystego chenodeoksycholanu metylu o czystości powyżej 99%.
Przykład III. Do kolumny chromatograficznej o średnicy 50 mm wsypano 200 g żelu krzemionkowego firmy Merck o granulacji 0,04-0,063 mm. Dalszy sposób przygotowania kolumny jak w przykładzie I. Następnie kolumnę nasycono eluentem złożonym z meszaniny octanu etylu i toluenu w stosunku obj. 2:1. Na szczyt kolumny naniesiono roztwór estrów butyoowych kwasów cholanowych otzzymanyjh z żółci wieprzowej w wyżej podanym eluencie. Próbkę rozchromatograoowano otrzymując między innymi z masy 25 g mieszaniny estrów 5,2 g surowego chenodeoksycholanu butylu i około 11 g surowego estru hiodeoksycholanu butylu oraz estry innych kwasów choinowych.

Claims (3)

  1. Zastrzeżenia patenoowe
    1. Sposób rozdziału kwasów choinowych wyodrębnionych z żółci zwierzęcej lub ptactwa domowego, polegający na prowadzeniu procesu preparatywnej, cieczowej adsorpcyjnej chromatografii kolumnowej w obecności układu chromaaograficznego złożonego z : żalu krzemionkowego i eluenta, znamienny tym, że mieszaninę surowych kwasów choinowych chromatografuje się na żelu krzemionoowym eluentem będącym mieszaniną octanu etylu i metanolu.
  2. 2. Sposób rozdziału estrów me tyłowych kwasów cholanowych, polegający na prowadzeniu procesu preparatywnee, cieczowej adsorpcyjnej jhrom8tooΓatli kolumnowej w obecności układu chromatograficznego złożonego z : żelu krzemionkowego i eluenta, znamienny tym, że mieszaninę estrów metylowych kwasów cholanowych chromaografuje się na żelu krzemion^nym eluentem będącym mieszaniną octanu etylu i benzemu lub toluenu.
  3. 3. Sposób rozdziału estrów butylowych kwasów choinowych, polegający na prowadzeniu procesu preparatywnej cieczowej adsorpcyjnej chrommaoogaaii kolumnowej w obecności układu chromatograficznego złożonego z : żelu krzemionkowego 1 eluenta, znamienny tym, że mieszaninę estrów butyiwych kwasów choinowych chromaografuje się na żelu krzemlonOwym elueneern będącym mieszaniną octanu etylu i benzenu lub toluenu.
    154 276
    Zakład Wydawnictw UP RP. Nakład 100 egz Cena 3000 zł
PL26459687A 1987-03-11 1987-03-11 Sposób rozdziału kwasów cholanowych i ich estrów wyodrębnionych z 2ółci zwierzęce3 lub ptactwa domowego PL154276B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL26459687A PL154276B1 (pl) 1987-03-11 1987-03-11 Sposób rozdziału kwasów cholanowych i ich estrów wyodrębnionych z 2ółci zwierzęce3 lub ptactwa domowego

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL26459687A PL154276B1 (pl) 1987-03-11 1987-03-11 Sposób rozdziału kwasów cholanowych i ich estrów wyodrębnionych z 2ółci zwierzęce3 lub ptactwa domowego

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL264596A1 PL264596A1 (en) 1988-12-08
PL154276B1 true PL154276B1 (pl) 1991-07-31

Family

ID=20035395

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL26459687A PL154276B1 (pl) 1987-03-11 1987-03-11 Sposób rozdziału kwasów cholanowych i ich estrów wyodrębnionych z 2ółci zwierzęce3 lub ptactwa domowego

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL154276B1 (pl)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111961105A (zh) * 2020-09-23 2020-11-20 安徽科宝生物工程有限公司 一种萃取法分离猪胆膏中猪去氧胆酸的方法

Also Published As

Publication number Publication date
PL264596A1 (en) 1988-12-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Heirwegh et al. Heterogeneity of bile pigment conjugates as revealed by chromatography of their anthranilate azopigments
Rouser et al. Analytical fractionation of complex lipid mixtures: DEAE cellulose column chromatography combined with quantitative thin layer chromatography
MIGEON et al. A method for the fractionation and measurement of 17-ketosteroids in human plasma
CHATZ et al. Lipoidal derivative of estradiol: the biosynthesis of a nonpolar estrogen metabolite
Kornblatt et al. Partial characterization of a novel glycerogalactolipid from rat testis
Idler et al. Separation of steryl acetates by silver ion chromatography
Suzuki et al. Isolation of testosterone-binding globulin from bovine serum by affinity chromatography and its molecular characterization
DE COURCY A TRICHLORACETIC ACID REAGENT FOR THE DETECTION OF PREGNANE-3α: 17α: 20-TRIOLS ON PAPER CHROMATOGRAMS
Elliott Allo bile acids
Martin Reversed phase paper chromatography and detection of steroids of the cholesterol class
Cargill The separation of cholesterol from related stanols and stanones by thin-layer chromatography
Benassayag et al. Relations between fatty acids and oestrogen binding properties of pure rat alpha1-foetoprotein
Rothblat et al. A quantitative colorimetric assay for squalene
PL154276B1 (pl) Sposób rozdziału kwasów cholanowych i ich estrów wyodrębnionych z 2ółci zwierzęce3 lub ptactwa domowego
Gordon et al. Separation of bile acid conjugates by ion exchange chromatography
Angelico et al. Fractionation and determination of the lipid and steroid constituents of the adrenal glands of rats by means of thin-layer chromatography
Purdy et al. Analysis of metabolites of progesterone in bovine liver, kidney, kidney fat, and milk by high performance liquid chromatography
Neskovic et al. Thin-layer chromatographic separation of glycolipids in animal lipid mixtures
Bebbington et al. Detection and identification of moulting hormone (ecdysones) in the barnacle Balanus balanoides
Arcos Steroids in egg yolk
Wilson et al. Sample preparation for the chromatographic determination of ecdysteroids using solid-phase extraction methods
Kritchevsky et al. Oxidation of Ergosterol by Rat and Mouse Liver Mitochondria.
Guth et al. Dependence of the 12-methyltridecanal concentration in beef on the age of the animal
Rao et al. In vitro conversion of 17α-hydroxyprogesterone to androstenedione by mashed gonads from metamorphic stages of Xenopus laevis
SE8204273L (sv) Forfarande for rening av beta-sitosterol isolerad fran neutralemnet i sulfatcellulosaprocessens rasapa