PL136986B1 - Method of determination of 2-bromo-1-/2,4-dichlorophenylene/-vinyl-diethylphosphate and its metabolites - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób oznaczania 2-bromo-a-/2,4-dwuchlorofenyleno/-winylo-dwuetylo fosforanu, zwanego dalej bromfenwifosem oraz jego metabolitów.Bromfenwifos jest pestycydem fosforoorganicz¬ nym, wykazujacym wysoka aktywnosc owadobój¬ cza wobec róznych bioindyfkatorów, zwlaszcza za* wobec stonki ziemniaczanej.Pestycydy stanowia grupe zwiazków, na oddzia¬ lywanie których czlowiek jest narazony bardzo czesto. Dotyczy to zarówno samych zwiazków, jak i produktów ich przemiany. Zazwyczaj bowiem w wyniku przemian biochemicznych i fizykoche¬ micznych powstaje kilka lub kilkanascie produk¬ tów o róznych wlasciwosciach chemicznych i bio¬ logicznych, których oddzialywanie na srodowisko stanowi powazne zagrozenie dla ludzi. Zwiazki te, w wiekszosci sa silnymi truciznami, a wpro¬ wadzone w nadmiernej ilosci do srodowiska na¬ turalnego, stanowia potencjalne niebezpieczenstwo zatrucia.Bromfenwifos, po dostaniu sie do organizmów zywych, ulega biotransformacji. Dlatego tez, ko¬ niecznym jest sledzenie pozostalosci tego pesty- 25 cydu oraz podstawowych jego metabolitów, takich jak kwas 2,4-dwuchloromigdalowy, kwas 2,4-dwu- chlorobenzoesowy i monodesetylobromfenwifos.Analize jakosciowa wymienionych zwiazków prze¬ prowadza sie obecnie w oparciu o chromatografie '• 10 15 20 cienkowarstwowa, jak równiez chromatografie ga¬ zowa, oraz metode radioizotopowa. Pomimo, ze daly one pozytywne wyniki, to jednak sa bardzo pracochlonne, jak równiez malo dokladne oraz ko¬ sztowne. Niedogodnoscia jest równiez to, ze me¬ tody te pozwalaja na oznaczanie jedynie poje¬ dynczych substancji w próbkach fizjologicznych.Istota wynalazku jest sposób oznaczania 2-bromo- Jl-/2,4rNdwuchlorofenyleno/-winylo-dwuetylofosfora- nu oraz jego metabolitów metoda chromatogra¬ ficzna, charakteryzujacy sie tym, ze oznaczenie odbywa sie metoda jonowo-asocjacyjnej wysoko- sprawnej chromatografii cieczowej, a chemicznym modyfikatorem fazy ruchomej jest jodek 4-butylo- amoniowy lub chlorek 4-butyloamoniowy o stezeniu 0,005 M, przy czym faze ruchoma stanowi uklad metanol-woda-bufor fosforanowy o skladzie 60°/o — 30% — 1/15 mola i pH = 4.Sposób wedlug wynalazku pozwala n£ dokladne, jakosciowe i ilosciowe oznaczenie bromfenwifosu i jego metabolitów w próbkach fizjologicznych organizmów zwierzecych.Substancje zastosowane jako modyfikatory fazy ruchomej powoduja tworzenie sie par jonowych z oznaczonymi zwiazkami, a tym samym zwiek¬ szaja hydrofobowy charakter rozdzielanych sub¬ stancji. Pozwala to na jednoczesne oznaczenie wszystkich czterech substancji w jednej prób¬ ce, 136 986136 986 3 Przyklad I. Oznaczenia wzorów bromfenwi- fosu i jego podstawowych metabolitów dokonano na chromatografie cieczowym z wykorzystaniem detektora UV — 254 m, na kolumnie z chemicz¬ nie zwiazana faza ciekla C18 — osadzona na nosniku, który stanowil zel krzemionkowy o sred¬ niej srednicy porów 60 um i powierzchni wla¬ sciwej 350 m2/g.Faze ruchoma stanowi uklad metanol-woda-bufor fosforanowy o skladzie 60% — 30% — 1/15 mola i pH = 4. Substancja modyfikujaca faze rucho¬ ma jest jodek 4^butyloamoniowy 0,005 M. Faze ruchoma przez kolumne przepuszczano z szybko¬ scia 1 ml/min.W wyniku oznaczenia uzyskano rozdzial brom- fenwifosu i jego metabolitów przedstawiony na fig. 1. Nastepnie oznaczono bromfenwifos i jego metabolity z substancja bardziej chemicznie ak¬ tywna, to jest z chlorkiem 4-butyloamoniowym, 0,005 M, jako modyfikatorem fazy ruchomej.Przy identycznych warunkadh oznaczania i tym samym pH = 4 uzyskano wyniki przedstawione na rysunku fig. 2.Na rysunku poszczególne piki oznaczaja: 1 — kwas 2,4-dwuchloromigdalowy 2 — kwas ,2,4-dwuchlorobenzoesowy 3 — pochodna monodesetylobromfenwifosu 4 — bromfenwifos Okreslono poziom wykrywalnosci dla poszczegól¬ nych substancji i wynosi on: ao 15 20 25 1 Poziom wykrywalnosci w g/ml 1 Faza / ru- / cno- / ma / /Sub- / stan- / c^a / roz- / dzie- / lana I jodek chlorek 1 2 3 4 8 • 10-* 3 • 10"8 4 • ,10-» 4 • 10"6 4 • 10"fl 2,7- 10"7 4 • 10-7 2 • 10"7 Zastrzezenie patentowe Sposób oznaczania 2-bromo-l-/2,4-dwuchlorof'eny- loZ-winylo-dwuetylofosforanu i jego metabolitów metoda chromatograficzna, znamienny tym, ze oz¬ naczenie odbywa sie metoda jonowo-asocjacyjnej wysdkosprawmej chromatografii cieczowej, a che¬ micznym modyfikatorem fazy ruchomej jest jodek 4-baityloa5noniQwy lufo chlorek 4-butyloamoniowy o stezeniu 0,005 M, przy czym faze ruchoma sta¬ nowi uklad metanol — woda — bufor fosforano¬ wy o akladzae 60% — 30% — 1/15 mola i pH = 4. yu u t -+- -l -k—I min. 14 12 io 8 g ^ z o min. ZO n 16 M 42 10 2 6 « Z 0 fi). 4 tx ±*~ DN-3, zam. 250/86 Cena 100 zl PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe Sposób oznaczania 2-bromo-l-/2,4-dwuchlorof'eny- loZ-winylo-dwuetylofosforanu i jego metabolitów metoda chromatograficzna, znamienny tym, ze oz¬ naczenie odbywa sie metoda jonowo-asocjacyjnej wysdkosprawmej chromatografii cieczowej, a che¬ micznym modyfikatorem fazy ruchomej jest jodek 4-baityloa5noniQwy lufo chlorek 4-butyloamoniowy o stezeniu 0,005 M, przy czym faze ruchoma sta¬ nowi uklad metanol — woda — bufor fosforano¬ wy o akladzae 60% — 30% — 1/15 mola i pH = 4. yu u t -+- -l -k—I min. 14 12 io 8 g ^ z o min. ZO n 16 M 42 10 2 6 « Z 0 fi). 4 tx ±*~ DN-3, zam. 250/86 Cena 100 zl PL