Opis patentowy opublikowano: 1987 06 30 136 829 CYTtLNlA Int CU C08B 37/16 A61K 31/13 fwtfroa wynalazkut —— Uprawniony z patentu! Chlnoln Gyógyszer es Tegyssceti leraekek Gyara R.T., Budapeszt /Wegry/ SPOSÓB WYTWARZANIA KOMPLF-TSÓW INKLUZYJNYCH N-/1-FENYL0-ETYL0/- -3f3-DIFENYL0PR0PYL0AMlNY WZGLEDNIE JEJ CHLOROWODORKU Z CYKLODEKSTRYNA Ersedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania kompleksów inkluzyjnych K-/1-renyloetylo/- -3jdifenylopropyloaainy wzglednie jej chlorowodorku s eyklodekatrynaa H-/1-f#nyloetylo/-3»direnjlopro?yloandii&, zwana dalej fendylina, jest czynna substancja antagonis^yozna wapnia rozszerzajacego naczynia wiencowe* Wytwarzanie tej substancji czynnej przedstawione jest w wegierskim opisie patentowym 150 334* Substancja ta jest oleista ciecza, a jej chlorowodorek jest srodkiem leczniczym znanym pod nazwa handlowa Seneit. Stala postac srodka leczniczego mozna wytworzyc tylko z chlorowodorku* Chlorowodorek fendyliny jest tylko sle zwilzany woda i jest wyraznie hydrofobowy. Szybkosc wchlaniania fendyliny jak równiez ilosc wchlaniania sa niewystarczajace* Celem wynalazku jest opracowanie takiego sposobu, w którym fendyline i jej chlorowodorek przeprowadza sie w postac szybciej 1 lepiej rozpuszczalna, przez co polepsza sie znacznie szyb¬ kosc oraz ilosc ich wchlaniania* Stwierdzono, ze gdy fendyline albo jej chlorowodorek przeprowadzi sie w kompleKs inkluzyjn z cyklodekstryna, tak otrzymany kompleks w srodowisku o odpowiadajacej kwasowi zoladkowemu war¬ tosci pH i temperaturze, rozpuszcza sie duzo szybciej i w wiekszym stezeniu niz pierwotna czastecz¬ ka. Jak wiadomo, czasteczki cyklodekstryny sa cylindryczne o niepolarnej powierzchni wewnetrznej i przez to moga laczyc hydrofobowe czasteczki w postac kompleksów inkluzyjnych. Taka hydrofobowa czasteczka moze byc fendylina albo jej chlorowodorek, które bardzo trudno rozpuszczaja sie w wodzie• Stwierdzono, ze gdy fendyline poddaje sie reakcji z cyklodekstrynami, dwie czasteczki cyklo¬ dekstryny tworza z czasteczka fendyliny kompleks inkluzyjny, który niespodziewanie w odpowiadaja¬ cym wartosci pH kwasu zoladkowego wodnym roztworze kwasu solnego traci jedna z czasteczek cy¬ klodekstryny i z duza szybkoscia przechodzi w czasteczkowy stan dyspersyjny. Tak wystepuje zna¬ cznie lepsza rozpuszczalnosc i przez to takze lepsza moznosc zastosowania biologicznego.2 136 829 Sposób wedlug wynalazku polega na tym, ze 1 roinol N-/l-fenyloetylo/-3,3~difenylopropyloaminy .jako zasady wzglednie jej chlorowodorek poddaje sie reakcji z 1-3 mmolam.l cyklodekstryny w wod- -nyra i/albo etanolowym srodowisku przy mieszaniu w temperaturze 4-60 C i ewentualnie w celu wy¬ tworzenia chlorowodorku otrzymany kompleks zasady z cyklodekstryna traktuje sie kwasom solnym.Reakcje prowadzi sie w srodowisku wodnym stosujac na 1 mmol cyklodekstryny 1-20 ml wody, np* w 5-32^ objetosciowo wodnym i/albo etanolowym srodowisku.W sposobie wedlug wynalazku stosuje sie dp fi i "fcyklodekatryne* Reakcje wytwarzania kompleksu prowadzi sie z utworzonym in situ chlorowodorkiem B~/1-fe»yloetylo/-3,3-difenylopro- pyloaalny* Gdy cyklodekstryne i fenydyline miesza sie intensywnie w wodnym i/albo etanolowym srodowisku, ozasteczka fendyliny wypiera czasteczke wody wystepujaca w wewnetrznej czecoi wol¬ nej przestrzeni cyklodekstryny, dochodzi do skutku przeciwdzialanie apolarno-apolarne, przez co powstaje kompleks lnkluzyjny* Ten, polaczony z tworzeniem soli i z czesciowa eliminacja cyklodekstryny, intensywny pro¬ ces rozpuszczania przeprowadzalnego z cyklodekstrynami oslaniania jest dla obecnego stanu wiedzy nowy* Istota sposobu polega na tym, ze obca czasteczka w kompleksie inkluzyjnym utworzonym przez cyklodekstryne z niejonowa obca czasteczka zostaje zjonizowana, po czym na skutek jonowego wiazania wystepuje duza intensywnosc ladunków i stan uwodniony 1 przez to powloka cyklodek- strynowa zostaje odepchnieta przez obca czasteczke* Jezeli kompleks lnkluzyjny trudno roz¬ puszczalnej w wodzie, wykazujacej krystaliczna strukture sieci, niejonowej obcej czasteczki zostanie przeprowadzony w stan jonowy, ziarno krystaliczne rozpada sie wybuchowo i przecho¬ dzi w czasteczkowy stan dyspersyjny, a wiec cala ilosc rozpuszcza sie* Tak utworzona struktura czasteczkowa jest wzglednie dobrze rozpuszczalna, poniewaz jeden koniec czasteczki na skutek jonizacji jest uwodniony, a drugi koniec, który zreszta jest sil¬ nie apolarny i powoduje trudna rozpuszczalnosc czasteczki, jest od zewnetrznej strony pokryty hydrofilowym pierscieniem cyklodekstryny* Fendylina nie rozpuszcza sie w wodzie, ale jej chlorowodorek jest równiez ogromnie fle rozpuszczalny* Jezeli wolna zasade potraktuje sie kwasem solnym, wówczas utworzony na powierz¬ chni zasady w postaci oleistych kropel silnie hydrofobowy chlorowodorek utrudnia rozpuszcze¬ nie, a nawet dalsze tworzenie soli* Gdy czasteczka fendyliny tworzy z dwiema czasteczkami cy¬ klodekstryny kompleks lnkluzyjny, otrzymuje sie krystaliczna substancje wzglednie trudna roz¬ puszczalna w wodzie* Ale gdy ten kompleks lnkluzyjny znaj dale sie w kwasnym srodowisku, np* w kwasie zoladko¬ wym, wówczas atom azotu fendyliny zostaje zjonizowany przez przylaczenie protonu 1 odpycha znajdujacy sie w poblizu atomu azotu pierscien cyklodekstryny* W wyniku tego powstaje taka struktura, w której jonowa czesc fenyloetyloaminowa fendyliny wystepuje wolna i po wiekszej czesci uwodniona, a niepolarna grupa difenylopropylowa tworzy kompleks z jedna czasteczka cyklodekstryny* A zatem z kompleksu 2 t 1 w kwacnym srodowisku powstaje kompleks 1 s 1, czyli kompleks fendylina-cyklodeketryna w kwasnym srodowisku przechodzi bardzo szybko w czastecz¬ kowy stan dyspersyjny, to znaozy kompleks rozpuszcza sie* Kompleks cyklodekstryny z fendylina wzglednie jej chlorowodorkiem rozpuszcza sie w wo¬ dzie dobrze* Kompleks o stosunku molowym 2:1 postaci zasadowej jak równiez kompleks o sto¬ sunku molowym 1 i 1 chlorowodorku /zawartosc substancji czynnej przecietnie 11£ wzglednie 21$/ rozpuszczaja sie duzo lepiej niz chlorowodorek fendyliny i takze jest duzo silniejsza biologiczna aktywnosc, która odpowiednia jest do zastosowania przy wytwarzaniu srodków lecz¬ niczych* Dla oceny biologicznej skutecznosci badan®, jak dalece na zwolnienie i wchloniecie fen¬ dyliny i chlorowodorku fendyliny w warunkach in ritro wywiera wplyw wlaczenia substancji czyn¬ nej w kompleks lnkluzyjny z cyklodekstryna* Wykonanie badan in vitro bylo uzasadnione tym, ze pomiary ta droga moga byc lepiej odtwa¬ rzane i rozrzut jest mniejszy, niz gdyby pomiary wykonano in vlvo« Zwolnienie 1 wchlanianie sa procesami nastepujacymi po sobie, w duzej mierze i wzajemnie od siebie zaleznymi* W warunkach fizjologicznych na wchlanianie wywieraja silny wplyw z jednej strony warunki pH panujace w136 629 3 miejscu wchlaaianla» a z drugiej strony czas przebywania srodka leczniczego w miejscu wchla¬ niania* Przecietny czas przebywania srodka leczniczego i wartosc pH w niektórych odcinkaoh ukladu zoladkowo-jelitowego przedstawione sa w tablicy I.Tablica I Miejsce przebywania srodka leczniczego Zoladek Poczatkowy odcinek jelita cienkiego Dalsze odcinki jelita cienkiego Czas /min*/ 0-30 30-60 60 - 360 Hph 1,2 5-6 6-7 I Stosownie do tego przeprowadzono badania* Badania wchlaniania przeprowadzono wzorcowym przyrzadem wchlaniania typu Sartorius 91 16 750, którym mozna za pomoca uzytej membrany bardzo dobrze odwzorowywac v ^ulanianie z zoladka i jelita* Na podstawie wyniku przeprowadzonych badan obliczono stale szybkosci dy¬ fuzji /Kd/ 1 szybkosci wchlaniania A,/na badanych substancjach. Uzyskane wyniki przedsta¬ wione sa w tablicy II* Tablica II 1 Substancja 1 Fendylina Kompleks fendylina- [i -cyklo- dekstryna Chlorowodorek fendyliny Kompleks chlorowodorek fen¬ dyliny- fi -cyklodekstryna i K, /cm2min.~1/ | a z jelita 6,9 x 10~4 1,42 x 10~3 6,7 x 10~4 1,71 x 10" 3 K. /min."1/ | x z .jelita. | 5,1 x 10"3 I 1,24 X 10~2 | 4,9 x 10~3 | 1,52 x 10~2 1 1 Przy wchlanianiu z jelita wartosc K^ oraz Ki wzrasta prssez kompleksowanie o wiecej niz 100%.Oznaczanie rozpuszczonej /MQ/ i wchlonietej /U^/ ilosci substancji czynnej przeprowa¬ dzono wzorcowym przyrzadem rozpuszczania typu Sartorius SM 16 751 /H* Striokert Pharm. Ind* 33t 157 /1971/I H. Stricker: Drugs in Germany 14, 93 /1971/. Zaleznosc czasowa zwalniania fendyliny i kompleksu fendylina-cyklodekstryna w poszczególnych odcinkach przewodu zoladko- wo-jelitowego przedstawiona jest na wykresie nr 1, gdzie F oznacza zwolnienie fendyliny, F-CD zwolnienie kompleksu fendylina-oyklodekstryna* Zwolniona z jelita w setnych czesciach minuty ilosc fendyliny jako zasady wynosi 75 mg, natomiast kompleksu fendylina-cyklodekstry¬ na 150 mg* Wchlaniana ilosc fendyliny wzglednie kompleksu fendylina-cyklodekstryna i chlorowodorku fendyliny wzglednie kompleksu chlorowodorek fendyllny-cyklodekstryna z przewodu zoladkowo- -jelitowego przedstawiona jest na wykresie nr 2, przy czym F dotyczy wchlanianej ilosci fen¬ dyliny, F-CD wchlanianej ilosci kompleksu fendylina-oyklodekstryna, FHC1 wchlanianej ilosci chlorowodorku fendyliny, a FHC1-CD dotyczy wchlanianej ilosci kompleksu chlorowodorek fendy¬ llny-cyklodekstryna* Zgodnie z wartosciami zwalniania wzrasta prawie dwukrotnie ilosc substancji czynnej wchlanianej z jelita w przypadku zasady jak równiez soli, co jest wynikiem utworzenia kom¬ pleksu* Dlatego dla uzyskania takiego samego efektu potrzebne jest wprowadzenie okolo po¬ lowy tak duzej dawki**¦ 136 829 Podczas toksykologicznych b&dari sprawdzano na myszach sródotrssewnowo ostra toksycz¬ nosc fendyliny wzglednie kompleksu fendylina-cykl odekstryna oraz chlorowodorku fendyliny wzglednie kompleksu chlorowodorek fendyliny-cyklodekstryna. Badane substancje podawano za pomoca 5% srodka powierzchniowo czynnego Tween 80 grupom po 10 mysz samców i 10 mysz samic, W przypadku kompleksu dawke obliczano na fendyline jako substancje czynna. Uzyskane wyniki przedstawione sa w tablicach III i IV.Tablica III Stosowanie sródotrzewnowe Substancja czynna Fendylina Kompleks fendylina-cyklodekstryna Chlorowodorek fendyliny Kompleks chlorowodorek fendyliny- cyklodekstryna Okres obserwacji /godziny/ i — 24 24 1 1 ^50 lxud)uU 47,54 | 157,47 | 81,14 | |_ 160,55 | I ab 1 i o a IV Stosowanie doustne Substancja czynna Fendylina Kompleks fendylina-cyklodekstryna Chlorowodorek fendyliny Kompleks chlorowodorek fendyliny- cyklodekstryna ' 1 )—¦¦¦¦ ... ¦ III 1^-II. ¦ 1 K^—— | 1 | ¦ 1 | .1 Okres obserwacji /godziny/ 12 72 24 24 /nwc/kK/ 512,41 | 624,65 | 522,24 | 954,86 | Wytwarzane sposobem wedlug wynalazku kompleksy fendylina-cyklodekstryna sa bialymi, mi¬ krokrystalicznymi substancjami w postaci proszku, które moga znalezc zastosowanie jako sub¬ stancje czynne preparatów farmaceutycznych* Preparaty te, poza skuteczna iloscia kompleksu fendylina-cyklodekstryna jako substancje czynna zawieraja' ewentualnie odpowiednie do sto¬ sowania farmaceutycznego nosniki nieorganiczne i organiczne •-* Preparaty mozna podawac w postaci tabletek, drazetek, kapsulek lub syropu itd. Zawie¬ raja one substanoje czynna zmieszana z rozcienczalnikami, laktoza, dekstroza, sacharoza, glicyna i/albo srodkami smarujacymi, up* ziemia okrzemkowa, talkiem, kwasem stearynowym i jego solami, z glikolem polietylenowym, srodkami wiazacymi, napelniaczami, barwnikami, srod¬ kami poprawiajacymi smak itd. Preparaty moga zawierac ewentualnie dalsze biologicznie czynne substancje* Wytwarza sie je znanymi metodami tabletkowania, granulowania i homogenizowania* Preparaty zawieraja substancje czynna w ilosci 10 - 40£, a dozowanie zalezy od róznych ozyn- ników, jak np* od sposobu podawania, od stanu i wieku pacjenta* Ponizsze przyklady przedstawiaja dalsze szczególy wynalazku, nie ograniczajac jego za¬ kresu*136 829 5 Przyklad I. 10 g /75 mmoli/ zawierajacej 15* wody y#-cyklode kstryny rozprasza sie w temperaturze pokojowej w 40 ml wody i przy intensywnym mleesaniu wkrapla sie 0,96 g /3 mmole/ fendyliny w 2 ml 96* objetosciowo etanolu* Zawiesine miesza sie przoz dalsze 5 go¬ dzin, saozy i suszy. Tak otrzymuje sie 92 g kompleksu fendylina—/3—cyklodekstryna, zawie¬ rajacego 9,7* wagowych fendyliny. Produkt jest bialym proszkiem i nie wykazuje charakterys¬ tycznej temperatury topnienia.Oznaczanie zawartosci fendyliny w kompleksie: 0,05 g produktu rozpuszcza sie w 25 ml 50* objetosciowo etanolu i poddaje badaniu fotornetrycznemu przy dlugosci fal.1" 258 nm w porównaniu z 50* objetosciowo etanolem. Zawartosc fendyliny ustala sie za pomoca krzywej cechowania.Przyklad II. 26,8 g /20 mmoli/ zawierajacej 15% wody /#-cyklodekstryny roz¬ puszcza sie w temperaturze 60°C w mieszaninie 350 ml wody i 5Q ml 96* objetosciowo etanolu i w ciagu pól godziny, przy intensywnym mieszaniu dodaje sie mieszanine 3,15 g /10 mmoli/ fendyliny i 40 ml 96* objetosciowo etanolu* Calosc ochladza sie przez 6 godzin do tempera¬ tury pokojowej i pozostawia przez noc w temperaturze +4°C. Wydzielony krystaliczny produkt odsacza sie i suszy na powietrzu. Otrzymuje sie 28,4 g kompleksu fendylin© - cyklodekstry- na, zawierajacego 10,7* wagowych fendyliny.Przyklad III. W mozdzierzu porcelanowym rozprasza sie 13,3 g /10 mmoli/ zawie¬ rajacej 15* wody /8-cyklodeketryny w 10 ml destylowanej wody. Nastepnie dodaje sie roztwór 155 g /5 mmoli/ fendyliny w 5 ml 96* objetosciowo etanolu. Otrzymuje sie rozcienozona za¬ wiesine, która homogenizuje sie przez ciagle rozcieranie. Po okolo 30 minutach zawiesina staje sie pasta, która rozklada sie w eksykatorze i suszy przez 24 godziny nad pentatlen¬ kiem fosforu. Kompleks pozbawiony rozpuszczalnika i wody poddaje sie sproszkowaniu. Otrzy¬ muje sie 12,5 g kompleksu fendylina- fi -cyklodekstryna, zawierajaoego 11,8* wagowych fen¬ dyliny.Przyklad IV. W 15 ml wody w temperaturze 40°C rozpuszcza sie 2,1 g /1,4 mmoli/ zawierajacej 15* wody ^f-cyklodek tryny. Potem przy mieszaniu wkrapla sie mieszanine 0,158 g /0,5 mmola/ fendyliny i 1 ml etanolu. Wydzielanie krysztalów dostrzega sie juz podczas doda¬ wania. Zawiesine ochladza sie przez 2 godziny do temperatury pokojowej i pozostawia przez noc w temperaturze +4°C» Po przesaczeniu i wysuszeniu na powietrzu otrzymuje sie 0,66 g kom¬ pleksu fendylina- )T -cyklodekstryna, zawierajacego 11,3* wagowych fendyliny.Przyklad V. 1,0 g /1,0 mmol/ zawierajacej 3,3* wody tfL-cyklodekstryny rozpusz¬ cza sie w temperaturze 40°C w 7 ml destylowanej wody. Przy mieszaniu wkrapla sie mieszanine 0,158 g /0,5 mmola/ fendyliny i 1 ml 96* objetosciowo etanolu. W czasie dodawania wydzielaja sie pierwsze krysztaly. Zawiesine ochladza sie przez 2 godziny do temperatury pokojowej i pozostawia przez noc w temperaturze +4°C* Nastepnie mieszanine saczy sie i suszy. Otrzymuje sie 0,5 g kompleksu fendylina- ot -cyklodekstryna, zawierajacego 12,2* wagowych fendyliny.Przyklad VI. W mieszaninie zlozonej z 20 ml destylowanej wody i 3 ml 96* obje¬ tosciowo etanolu w temperaturze 60°C rozpuszcza sie 1,8 g zawierajacej 11* wody mieszaniny cyklodekstrynowej o nastepujacym skladzie suchej substancji, na podstawie analizy droga cie¬ czowej chromatografii cisnieniowej: 70* J0-oyklodekstryny, 20* f-cyklodekstryny, 10* klodekstryny, przecietny ciezar czasteczkowy: 1151, liczba mmolij 1,4. Przy intensywnym mie¬ szaniu wkrapla sie mieszanine 0,22 g /O,7 mmola/ fendyliny i 2 ml 96* objetosciowo etanolu.Mieszanine ochladza sie przez 3 godziny do temperatury pokojowej i pozostawia przez noc w temperaturze +4 C. Wydzielony produkt krystaliczny odaaoza sie i suszy na powietrzu. Otrzy¬ muje sie 1,3 g produktu, zawierajacego 11,0* wagowych fendyliny.Przyklad VII. W 35 ml wody, w temperaturze 60°C rozpuszcza sie 3 g /3 mmole/ fi -cyklodekstryny, zawierajacej 15* wody. Przy mieszaniu wkrapla sie roztwór 1,05 g /3 mmole/ chlorowodorku fendyliny w 8 ml 96* objetosciowo etanolu. Mieszanine ochladza sie przez 5 go¬ dzin do temperatury pokojowej i pozostawia przez noo w temperaturze +4°C. Wydzielona krysta¬ liczna, biala substancje odsacza sie i suszyf Otrzymuje sie 3,8 g powietrznie suchego kompleksu chlorowodorek fendyliny- {i -cyklodekstryna, zawierajacego 22,2* wagowych chlorowodorku fendy¬ liny.6 136 829 P r e y k l a d VIII. 13,4 g /10 mmoli/ zawierajacej 15* wody y£~cyklodekstryny rozpusz¬ cza sie w temperaturze 50°C w mieszaninie 160 ml wody 1 10 ni 1 I kwasu solnego. Nastepnie do¬ daje sie roztwór 3,15 g /10 mmoli/ fendyliny w 30 ml 96$ objetosciowo etanolu* Mieszanine och¬ ladza sie przez 4 godziny do temperatury pokojowej i pozostawia przez noc w temperaturze +4°C.Wydzielona substancje krystaliczna saczy sie i suszy. Otrzymuje Bie 11,2 g kompleksu chloro¬ wodorek fendyliny- fi -oyklodekstryna, zabierajacego 20,5# wagowych chlorowodorku fendyliny* Przyklad IX* 5t0 g wytworzonego wedlug przykladu II kompleksu fendylina-/?- -cyklodekstryna, zawierajacego 10,7% wagowych fendyliny rozpuszcza sie w temperaturze 37°C w mieszaninie zlozonej z 35 ml wody i 2 ml 1ff kw&su rolnego* Roztwór odstawia sie na 24 go¬ dziny, po czym wydzielona krystaliczna substancje odsacza* Otrzymuje sie 2,0 g powietrznie suchego kompleksu ohlorowodorek fendyliny- /3 -cyklodekstryna, zawierajacego 21,2* wagowych chlorowodorku fendyliny* Przyklad Za* Wykazanie struktury kompleksowej produktu wytworzonego wedlug przy¬ kladu I, droga dyfrakcji AOntgena* Charakterystyczne wierzcholki odbicia pojawiaja sie przy znaczaco róznych 2 G° wartos¬ ciach kata przy pochlanianiu proszku ^-cyklodekstryny i kompleksu fendylina- /3 -cyklodek¬ stryna na dyfraktogramie Rentgena i ten fakt wskazuje na rózne struktury krystaliczne* Po¬ niewaz czasteczka wlaczona do kompleksu jest ciekla, odmienna struktura krystaliczna potwier¬ dza utworzenie kompleksu* Przjklad Xb* Badanie produktu wytworzonego wedlug przykladu I metodami termoana- litycznymi.Termoanalityczne badania wykazuja znaczne róznice miedzy kompleksem fendylina- J3 -cyklo¬ dekstryna i fizyczna mieszanina fendyliny z /#-cyklodekstryna* Parowanie fendyliny wzglednie jej rozklad rozpoczyna sie przy temperaturze 150°C i do temperatury 250°C mozna zaobserwowac 98% zmiane masy* Cyklodekstryna rozklada sie od temperatury 250°C i w temperaturze 300°C /? -cyklodekstryna topnieje z rozkladem. Fizyczna mieszanina traci w temperaturze 100°C wode zawarta w cyklodekstrynie a w temperaturze 150 - 250°C fendyline.Substancja czynna uwalnia sie z kompleksu tylko jednoczesnie z rozkladem cyklodekstryny, a wiec w temperaturze 270 - 300°C. Z termoanalitycznych badan wynika, ze fendylina tworzy z /? — cyklodekstryna kompleks w stosunku molowym 1 t 2* Przy nadmiarze fendyliny, nadmiar ten zachowuje sie jak w fizycznej mieszaninie, czyli juz w temperaturze 150 - 250°C rozpoczyna sie rozklad.Przyklad XIa. Badanie rozpuszczalnosci kompleksu chlorowodorek fendyliny-3- -cyklodQkstrynas wytworzonego wedlug przykladu VII.W 10 ml wody w temperaturze 37°C rozpuszcza sie kompleks chlorowodorek fendyliny-^- -cyklodekstryna w ilosci odpowiadajacej 200 mg fendyliny jako substancji czynnej i otrzymany roztwór miesza z szybkoscia 150 obrotów/min* przy zastosowaniu mieszadla magnetycznego* Za¬ wartosc substancji czynnej w próbce oznacza sie metoda spektrofotometryczna* Wyniki badania szybkosci rozpuszczania przedstawione sa w tablicy V. tablica V Czas /minuty/ I 1 I 5 I 15 | 30 I 60 I 12° Stezenie fendyliny /mg/ml/ 13,3 12.7 | 12,9 | 12,8 | 13,3 J 14,6 \ jyii 'i w ..ii^in hiiiibii ¦ ¦ ¦¦¦¦¦uji mum ipiii i«i«iii miui iii win* w i uMhiimimmu^iI136 829 7 Przyklad XIb, Badanie skladu kompleksu chlorowodorek fendyliny- fi -cyklodekst¬ ryna, wytworzonego wedlug przykladu VII* Przy uzyciu mieszadla magnetycznego o szybkosci 150 obrotów/min. wiesza sie przez 3 go¬ dziny 0,22 g /0,6 mmola/ chlorowodorku fendyliny w 3 ml wody wzglednie w roztworach fi - -oyklodekstryny o róznym stezeniu. Stezenie rozpuazozonego chlorowodorku fendyliny oznacza sie spektrofotometrycznie i wyraza w równowazniku fendyliny. Wyniki doswiadczenia przedsta¬ wione sa w tablicy VI, Tablica VI Stezenia 1 -cyklodeketryny 1 mg/ml 1 15 I 20 I 25 | 30 mmoli/1 13,2 17,6 22,0 26,4 Stezenie fendyliny mg/ml 4,39 5,95 6,94 7,51 mmoli/1 13,9 16,6 22,0 23,8 | /6-cyklodekstryna /mraole/ fendylina /mmole/ 0,95 | 0,95 | 1,00 | 1,10 Wartosc ilorazu /?-cyklodekstryna mmoli/fendylina mmoll w ostatniej kolumnie tablicy VI wykazuje wyraznie, ze chlorowodorek fendyliny tworzy % ^-cyklodekstryna kompleks prak¬ tycznie o stosunku molowym 1 i 1.Przyklad III* Wytwarzanie preparatu w postaci tabletek z kompleksu fendylina- -/3-cyklodekstryna, otrzymanego wedJL g przykladu III.Sklad preparatui kompleks fendylina- fi --cyklodekstryna 398 g, stearynian magnezowy 5 g» koloidalny kwas krzemowy 7 g, mikrokrystaliczna celuloza /Avicel PH 102/ 90 g. Powyzsze sklad¬ niki miesza sie, homogenizuje 1 z mieszaniny proszkowej prasuje tabletki o przecietnym cieza¬ rze 500 mg i srednicy 13 mm.Tabletki zawieraja przecietnie 45 mg fendyliny i to odpowiada 50 mg chlorowodorku fendy¬ liny* A zatem tabletka taka zawiera równowazna ilosc substancji czynnej z tabletka zawiera¬ jaca 50 mg chlorowodorku fendyliny« Przyklad XIII* Wytwarzanie syropu z kompleksu fendylina- fi -cyklodekstryna, otrzy¬ manego wedlug przykladu III.Sklad syropui kompleks fendylina-/? -cyklodekstryna 5 g, p-oksybenzoesan metylu 0,1 g, substancja aromatyczna 0,5 g, sól sodowa karboksymetylocelulozy 0,9 g, mikrokrystaliczna celuloza /Arieel RC/ 1,1 g, sorbit 35 g# destylowana woda do 100 ml* Sól sodowa karboksymetylocelulozy rozpuszcza sie w mniej wiecej polowie ilosci wody, w roztworze tym rozprasza sie mikrokrystaliczna celuloze i po specznieniu zawiesiny domiesz¬ kuje sie kompleks fendylina- fi -cyklodekstryna. W pozostalej ilosci wody rozpuszcza sie p-oksybenzoesan metylu, substancje aromatyczna oraz sorbit 1 tak otrzymany roztwór dodaje sie do powyzszej zawiesiny. Objetosc zawiesiny uzupelnia sie destylowana woda do 100 ml i otrzymana zawiesine poddaje homogenizacji. PLPatent description published: 1987 06 30 136 829 CYTtLN1A Int CU C08B 37/16 A61K 31/13 fwtfroa invention —— Patent holder! Chlnoln Gyógyszer es Tegyssceti leraekek Gyara RT, Budapest / Hungary / METHOD OF MANUFACTURING N- / 1-PHENYL0-ETHYL0 / - -3f3-DIFENYL-PR0PYL0AML-RELATIVE INVENTION-RELATIVE COMPLF-INCLUSIVE COMPLEXES / - -3diphenylpropylaaine or its hydrochloride s eyclodecatrin H- (1-pnylethyl) -3 "direnjlopro? Yloandia", hereinafter referred to as fendyline, is an active substance of calcium antagonist of vasodilating coronary artery * The production of this active substance is described in the patent 150 334 * This substance is an oily liquid and its hydrochloride salt is a medicinal agent known under the trade name Seneit. A solid form of the drug can only be prepared from the hydrochloride * Fendyline hydrochloride is only moistened with water and is clearly hydrophobic. The rate of absorption of fendyline as well as the amount of absorption are insufficient * The aim of the invention is to develop a method in which fendyline and its hydrochloride are converted into a faster and more soluble form, thereby significantly improving the speed and quantity of their absorption * It was found that when fendyline or its hydrochloride is transformed into an inclusion complex with cyclodextrin, the so obtained complex, in an environment of pH and temperature corresponding to gastric acid, dissolves much faster and in greater concentration than the original molecule. As it is known, cyclodextrin molecules are cylindrical with a non-polar inner surface and therefore can join hydrophobic molecules in the form of inclusion complexes. Such a hydrophobic molecule may be fendyline or its hydrochloride, which is very difficult to dissolve in water. It has been found that when fendyline reacts with cyclodextrins, two cyclodextrin molecules form an inclusion complex with the fendyline molecule which unexpectedly at the corresponding pH value of the acid In the gastric aqueous solution of hydrochloric acid, one of the cyclodextrin molecules is lost and quickly transforms into a molecular dispersion state. Thus, there is a significantly better solubility and thus also a better biological applicability.2 136 829 The process according to the invention consists in that 1-rinol N- (1-phenylethyl) -3,3-diphenylpropylamine is subjected as a base or its hydrochloride is subjected to preparation. reaction with 1-3 mmolam.l of cyclodextrin in water and / or ethanolic environment while stirring at 4-60 ° C and possibly in order to form the hydrochloride the obtained base complex with cyclodextrin is treated with hydrochloric acids. The reaction is carried out in an environment in aqueous solution using 1-20 ml of water per 1 mmol of cyclodextrin, e.g. in 5-32 volumetric aqueous and / or ethanolic environment. According to the invention, dpfi and "phyclodecatrin are used. * The complex formation reactions are carried out with the hydrochloride B formed in situ ~ / 1-pheylethyl / -3,3-diphenylpropylal * When cyclodextrin and phenydyline are mixed intensively in an aqueous and / or ethanolic environment, the molecule of fendylin displaces the water molecule present in the internal on the third part of the free space of cyclodextrin, the apolar-apolar counteracting effect takes place, which results in the formation of an inclusive complex * This, combined with salt formation and partial elimination of cyclodextrin, the intense dissolution process carried out with the shielding cyclodextrins is new to the present state of knowledge. The method is based on the fact that the foreign molecule in the inclusion complex formed by the cyclodextrin with the non-ionic foreign particle is ionized, after which, due to the ionic bond, a high intensity of the charges occurs and the hydrated state 1 and thus the cyclodextrin coating is repelled by the foreign molecule complex * sparingly soluble in water, showing a crystalline structure of the lattice, the non-ionic foreign particle will be converted into the ionic state, the crystalline grain disintegrates explosively and transforms into a molecular dispersive state, so that the whole amount dissolves. relatively well soluble, because one end of the molecule is hydrated due to ionization, and the other end, which is also strongly apolar and causes difficult solubility of the molecule, is on the outside covered with a hydrophilic cyclodextrin ring * Fendlin does not dissolve in water, but its hydrochloride is also extremely soluble * If the free base is treated with hydrochloric acid, then the base formed on the surface in the form of oily droplets, the strongly hydrophobic hydrochloride hinders dissolution and even further salt formation * When the fendyline molecule forms a complex with two molecules of cyclodextrin inclusion, a relatively difficult, water-soluble crystalline substance is obtained. But when this inclusion complex is found in an acidic environment, e.g. in gastric acid, then the fendylin nitrogen atom is ionized by attaching a proton and repels the nearby atom cyclodextr ring nitrogen yny * As a result, a structure is formed in which the ionic phenylethylamine part of fendyline is free and mostly hydrated, and the nonpolar diphenylpropyl group forms a complex with one cyclodextrin molecule * Thus, a complex of 2 t 1 in an acidic environment forms a 1 s 1 complex, that is, the fendylin-cyclodecethrin complex in an acidic environment changes very quickly into a molecular dispersion state, that is, the complex dissolves. * The complex of cyclodextrin with fendyline or its hydrochloride dissolves well in water * Complex with a molar ratio of 2: 1 base form as well as a complex with a molar ratio of 1 and 1 hydrochloride (active substance content on average 11 or 21%) dissolves much better than fendyline hydrochloride and also has a much stronger biological activity, which is suitable for use in the production of medicinal agents * For evaluation the biological effectiveness of the study, how far to release and absorb The effect of incorporation of the active substance into the inclusion complex with cyclodextrin under the in ritro conditions of phendiline and fendyline hydrochloride. The in vitro tests were justified by the fact that this method can be better reproduced and the spread is smaller than if the measurements were taken. done in vlvo "Release 1, absorption are processes that follow one another, to a large extent and interdependent *. Under physiological conditions, the absorption is strongly influenced by the pH conditions prevailing in 136 629 3 absorption site" and on the other hand, the time of the medicinal agent's stay in absorption site * The average residence time of the drug and the pH value in certain sections of the gastrointestinal system are presented in Table I. Table I Location of the medicinal agent Stomach Initial segment of the small intestine Further sections of the small intestine Time / min * / 0-30 30 -60 60 - 360 Hph 1.2 5-6 6-7 I Tests were conducted accordingly * Absorption studies The analysis was carried out with a standard Sartorius 91 16 750 type absorption device, which can be used to imitate very well the loss of stomach and intestine with the use of a membrane * Based on the results of the tests, the diffusion rate / Kd / 1 absorption rate A / for the subjects substances. The results obtained are shown in Table II. Table II. Substance 1 Pendylin Complex fendylin- [and -cyclodextrin Hydrochloride fendyline Hydrochloride complex phenidiline-di-cyclodextrin and K, / cm2 min. a from the intestine 6.9 x 10 ~ 4 1.42 x 10 ~ 3 6.7 x 10 ~ 4 1.71 x 10 "3 K. / min."1/ | x with .jelita. | 5.1 x 10 "3 I 1.24 X 10 ~ 2 | 4.9 x 10 ~ 3 | 1.52 x 10 ~ 2 1 1 When absorbed from the intestine, K ^ and Ki values increase more than 100% of complexation. Determination of the dissolved (MQ) and absorbed (U) amount of active substance was carried out with a standard dissolution device of the Sartorius SM 16 751 / H * Striokert Pharm. Ind. 33t 157/1971 / I H. Stricker: Drugs in Germany 14, 93 / 1971 /. The time dependence of the release of fendyline and the fendyline-cyclodextrin complex in individual sections of the gastrointestinal tract is shown in the diagram No. 1, where F is the release of fendylin, F-CD the release of the fendyline-oyclodextrin complex * Released from the intestine in hundredth parts minutes, the amount of fendyline as base is 75 mg, and the amount of fendyline-cyclodextrin complex is 150 mg. * Amount of fendyline, relative to the complex of fendyline-cyclodextrin and fendyline hydrochloride, or of the complex of fendiline-cyclodextrin from the gastrointestinal tract st in Figure 2, where F is the absorbed amount of phendilin, F-CD is the amount of fendyline-o-cyclodextrin complex, FHC1 is the amount of fendylin hydrochloride absorbed, and FHC1-CD is the amount of fendyline-cyclodextrin complex absorbed * The amount of active substance absorbed from the intestine almost doubled in the case of the base as well as of the salt, which is a result of the complex formation * Therefore, to obtain the same effect it is necessary to introduce about half of such a large dose ** ¦ 136 829 During toxicological studies, in mice, intrinsically acute toxicity of fendyline or the complex of fendyline-cyclodextrin, and of fendyline hydrochloride or of the complex of fendyline-cyclodextrin. The test substances were administered with 5% Tween surfactant to 80 groups of 10 male and 10 female mice. In the case of the complex, the dose was calculated on fendyline as active ingredient. The obtained results are presented in Tables III and IV. Table III Intraperitoneal use Active substance Fendiline Fendylin-cyclodextrin complex Fendylin hydrochloride-cyclodextrin complex Fendylin hydrochloride-cyclodextrin complex Observation period / hours / i - 24 24 1 1 ^ 50 lxud) uU 47.54 | 157.47 | 81.14 | | _ 160.55 | I ab 1 i o a IV Oral use Active substance Pendylin Fendylin-cyclodextrin complex Fendyline hydrochloride Fendylin hydrochloride-cyclodextrin complex '1) —¦¦¦¦ ... ¦ III 1 ^ -II. ¦ 1 K ^ —— | 1 | ¦ 1 | .1 Observation period / hours / 12 72 24 24 / nwc / kK / 512,41 | 624.65 | 522.24 | 954.86 | The fendyline-cyclodextrin complexes prepared by the process according to the invention are white, microcrystalline substances in the form of powders which can be used as active substances of pharmaceutical preparations. These preparations, in addition to an effective amount of the fendyline-cyclodextrin complex, contain as active substances, possibly up to one hundred Pharmaceutical use inorganic and organic carriers • - * The preparations can be administered in the form of tablets, dragees, capsules or syrup, etc. They contain the active substance mixed with diluents, lactose, dextrose, sucrose, glycine and / or lubricants, soil diatomaceous, talc, stearic acid and its salts, with polyethylene glycol, binders, fillers, dyes, flavor enhancers, etc. The preparations may contain possibly other biologically active substances * They are produced by known methods of tabletting, granulating and homogenizing * The preparations contain substances active in the amount of 10-40 £ and the dosage depends on various factors, such as, for example, the mode of administration, the condition and age of the patient. * The following examples show further details of the invention without limiting its scope * 136 829 5 Example I. 10 g / 75 mmol / containing 15 * water y # -kstrin cycle is dispersed at room temperature in 40 ml of water and with intensive milling 0.96 g / 3 mmol / fendyline in 2 ml 96 * by volume ethanol is added dropwise * The suspension is mixed For another 5 hours, sauces and dried. This gives 92 g of fendyline- (3-cyclodextrin complex) containing 9.7% by weight of fendyline. The product is a white powder and has no melting point. Determination of the content of fendyline in the complex: 0.05 g of the product is dissolved in 25 ml of 50% by volume of ethanol and subjected to a photornetric test at a wavelength of 1 "258 nm versus 50 * volumetric ethanol The content of fendyline is determined by the gauge curve. Example II 26.8 g (20 mmol) containing 15% water - cyclodextrin is dissolved at 60 ° C in a mixture of 350 ml of water and 5 ml 96 * by volume of ethanol and within half an hour, with vigorous stirring, a mixture of 3.15 g / 10 mmol / of fendyline and 40 ml of 96% by volume of ethanol is added. The whole is cooled for 6 hours to room temperature and left overnight at + 4 ° C. C. The separated crystalline product is filtered off and dried in the air to obtain 28.4 g of fendylin © - cyclodextrin complex, containing 10.7% by weight of fendylin. Example III 13.3 g / 10 is dispersed in a porcelain mortar. mmoles (containing 15% of water) 8-cyclodecethrin in 10 ml of distilled water. Then a solution of 155 g (5 mmol) fendyline in 5 ml 96% by volume ethanol is added. A diluted suspension is obtained which is homogenized by continuous grinding. After about 30 minutes the suspension becomes a paste which is decomposed in a desiccator and dried for 24 hours over phosphorus pentoxide. The complex, devoid of solvent and water, is pulverized. There is obtained 12.5 g of fendyline-β-cyclodextrin complex containing 11.8% by weight of fendilin. Example IV. 2.1 g (1.4 mmol) of 15% water of trinium-cyclodec are dissolved in 15 ml of water at 40 ° C. Thereafter, a mixture of 0.158 g (0.5 mmol) of fendyline and 1 ml of ethanol is added dropwise with stirring. The separation of the crystals is already noticeable during the addition. The suspension is cooled for 2 hours to room temperature and left overnight at + 4 ° C. After filtering and air drying, 0.66 g of fendyline-) T -cyclodextrin complex is obtained, containing 11.3% by weight of fendyline. EXAMPLE 5 1.0 g (1.0 mmol) of tfL-cyclodextrin containing 3.3% water is dissolved at 40 ° C. in 7 ml of distilled water. While stirring, a mixture of 0.158 g / 0.5 mmol / fendyline and 1 ml of 96% by volume ethanol is added dropwise. The first crystals separate during the addition. The suspension is cooled for 2 hours to room temperature and left overnight at + 4 ° C. The mixture is then filtered and dried. 0.5 g of fendyline-ot-cyclodextrin complex is obtained, containing 12.2% by weight of fendyline. Example VI. 1.8 g of a 11% water cyclodextrin mixture with the following dry substance composition is dissolved in a mixture of 20 ml of distilled water and 3 ml of 96% by volume ethanol at 60 ° C, as analyzed by liquid pressure chromatography: 70 * J0-oyclodextrin, 20 * f-cyclodextrin, 10 * clodextrin, average molecular weight: 1151, mmolij number 1.4. While stirring vigorously, a mixture of 0.22 g / 0.7 mmol / fendyline and 2 ml of 96% by volume ethanol is added dropwise. The mixture is cooled for 3 hours to room temperature and left overnight at +4 ° C. The separated crystalline product odaose. and air dried. There is obtained 1.3 g of a product containing 11.0% by weight of fendyline. Example VII. In 35 ml of water at 60 ° C, 3 g (3 mmol) of bipicyclodextrin are dissolved, containing 15 * water. While stirring, a solution of 1.05 g (3 mmol) of fendiline hydrochloride in 8 ml of 96% by volume ethanol is added dropwise. The mixture is cooled over 5 hours to room temperature and left overnight at + 4 ° C. The separated crystalline, white substance is filtered off and dried. 3.8 g of air-dry fendyline-{i-cyclodextrin complex containing 22.2% by weight of fendyline hydrochloride are obtained. 6 136 829 P r e y k l a d VIII. 13.4 g (10 mmol) of 15% water of cyclodextrin are dissolved at 50 ° C in a mixture of 160 ml of water and 10 ml of hydrochloric acid. Then a solution of 3.15 g (10 mmol) of fendyline in 30 ml of 96% by volume ethanol is added. The mixture is cooled for 4 hours to room temperature and left overnight at + 4 ° C. The separated crystalline material is filtered. and dries. Obtains Bie 11.2 g of fendyline hydrochloride-β-yyclodextrin complex, containing 20.5% by weight of fendyline hydrochloride * Example IX * 5t0 g of fendyline-/ α--cyclodextrin complex prepared according to Example II, containing 10.7% by weight of fendyline dissolves at 37 ° C in a mixture of 35 ml of water and 2 ml of agricultural acid * The solution is left to stand for 24 hours, then the separated crystalline substance is filtered off * 2.0 g of air-dried fendylin hydrochloride complex are obtained. 3-cyclodextrin containing 21.2% by weight of fendyiline hydrochloride * Example For * Demonstration of the complex structure of the product prepared according to Example I, diffraction path of Antgen's * Characteristic reflection peaks appear at significantly different 2 G ° values of the angle when the powder is absorbed. -cyclodextrin and the complex fendylin- (3 -cyclodextrin) on the X-ray diffraction pattern and this fact indicates different crystal structures * Due to the molecules The channel incorporated into the complex is liquid, the different crystal structure confirms the formation of the complex * Example Xb * Testing the product prepared according to example 1 by thermoanalytic methods. Thermoanalytical studies show significant differences between the fendyline-J3-cyclo-dextrin complex and the physical / fendyline mixture # -cyclodextrin * Evaporation of fendyline or its decomposition begins at 150 ° C and up to 250 ° C, 98% weight change can be observed * Cyclodextrin decomposes from 250 ° C and 300 ° C /? the cyclodextrin melts decomposed. The physical mixture loses the water contained in the cyclodextrin at 100 ° C and fendyline at 150 - 250 ° C. The active substance is released from the complex only simultaneously with the decomposition of the cyclodextrin, i.e. at 270 - 300 ° C. Thermoanalytical studies show that fendyline forms with /? - cyclodextrin complex in a molar ratio of 1 t 2 * With an excess of fendyline, the excess behaves as in a physical mixture, i.e. decomposition begins already at a temperature of 150 - 250 ° C. Example XIa. Test of the solubility of the complex of fendiline-3-cyclodQkstrynas prepared according to example VII. 10 ml of water at 37 ° C dissolve the complex of fendylin - ^ - -cyclodextrin in an amount corresponding to 200 mg of fendyline as active substance and the resulting solution is mixed at a rate of 150 revolutions / min * with the use of a magnetic stirrer * The content of the active substance in the sample is determined by the spectrophotometric method * The results of the dissolution rate test are presented in Table V. Table V Time / minutes / I 1 I 5 I 15 | 30 I 60 I 12 ° Fendyline concentration / mg / ml / 13.3 12.7 | 12.9 | 12.8 | 13,3 J 14,6 \ jyii 'i ..ii ^ in hiiiibii ¦ ¦ ¦¦¦¦¦uji mum ipiii i «i« iii miui iii win * wi uMhiimimmu ^ iI136 829 7 Example XIb, Investigation of the complex composition of fendyline hydrochloride - phyclodextrin, prepared according to example VII. Using a magnetic stirrer with a speed of 150 rpm. 0.22 g (0.6 mmol) of fendyline hydrochloride is suspended in 3 ml of water or in solutions of phyllodextrin of varying concentration for 3 hours. The concentration of dissolved fendyline hydrochloride is determined spectrophotometrically and expressed in the fendyline equivalent. The results of the experiment are shown in Table VI, Table VI. Concentrations of 1-cyclodecethrin 1 mg / ml 1 15 I 20 I 25 | 30 mmol / l 13.2 17.6 22.0 26.4 fendyline concentration mg / ml 4.39 5.95 6.94 7.51 mmol / l 13.9 16.6 22.0 23.8 | / 6-cyclodextrin / mraoles / fendyline / mmoles / 0.95 | 0.95 | 1.00 | 1.10 The value of the quotient β - cyclodextrin mmoles / fendyline mmoll in the last column of Table VI clearly shows that fendyline hydrochloride forms a% 3 -cyclodextrin complex with a practically molar ratio of 1 and 1. Example III * Preparation of a tablet formulation from the complex fendylin- - / 3-cyclodextrin, obtained according to example 3 g. Composition of the preparation and complex fendyline-ph - cyclodextrin 398 g, magnesium stearate 5 g, colloidal silicic acid 7 g, microcrystalline cellulose / Avicel PH 102/90 g. The above composition They are mixed, homogenized, and the powder mixture is compressed into tablets with an average weight of 500 mg and a diameter of 13 mm. The tablets contain an average of 45 mg of fendyline and this corresponds to 50 mg of fendyline hydrochloride. * Thus, the tablet contains the equivalent amount of the active ingredient from the tablet. containing 50 mg of fendyline hydrochloride. Example XIII. Preparation of the syrup from the fendyline-phi-cyclodextrin complex obtained according to Example III. Composition of the syrup and complex ex fendylin- /? - cyclodextrin 5 g, methyl p-oxybenzoate 0.1 g, aromatic substance 0.5 g, sodium carboxymethyl cellulose 0.9 g, microcrystalline cellulose / Arieel RC / 1.1 g, sorbitol 35 g # distilled water up to 100 ml * Salt sodium carboxymethylcellulose is dissolved in about half the amount of water, microcrystalline cellulose is dispersed in this solution and the fendylin-phyclodextrin complex is admixed after swelling the suspension. The methyl p-oxybenzoate, aromatics and sorbitol are dissolved in the remaining amount of water, and the solution thus obtained is added to the above suspension. The volume of the suspension is made up to 100 ml with distilled water and the resulting suspension is homogenized. PL