Przedmiotem wynalazku jest kolumna chromatograficzna do dokladnego, analitycznego lub preparatywnego rozdzialu mieszanain substancji takich jak bialka, peptydy, kwasy nukleinowe, nukleotydy, cukry, aminokwasy itp., metodami chromatografii zelowej lub zelowo- jonowymiennej.Z polskiego opisu patentowego nr 68 838 znana jest kolumna chromatograficzna zbudowana z segmentów, których dno jest wyposazone w króciec laczacy poszczególne segmenty. Kazdy seg¬ ment ma wewnatrz pólke wykonana w postaci stozka normalnego lub stozka o poboczach wkleslych lub majaca na swojej powierzchni stozek normalny lub stozek o poboczach wkleslych.Z tego samego opisu patentowego znana jest odmiana kolumny, która ma jednolita obudowe z pólkami wyposazonymi w otwór w srodku,przy czym miedzy tymi pólkami umieszczone sa pólki stozkowe lub majace na swojej powierzchni stozek.Konstrukcja ta pozwala na wyeliminowanie wplywu niejednorodnosci ziaren wypelnienia na rozdzial mieszaniny zwiazków chemicznych, co predystynuje ja szczególnie do procesów w skali przemyslowej, dzieki zwiekszeniu predkosci przeplywu faz ruchomych przez kolumne.Z innego polskiego opisu patentowego nr 782S3 znana jest kolumna chromatograficzna napelniona srodkami sorpcyjnymi o ksztalcie cylindrycznym, przechodzaca stozkowo przy obydwu koncach w kolumny o mniejszej srednicy. Kazda z tych krótszych kolumn o mniejszej srednicy ma wewnatrz rozdzielacz filtrujacy oraz korek zaopatrzony w kapilare. Srodek sorpcyjny, rozdzielacz filtrujacy i korek przylegaja scisle do siebie, bez tzw. objetosci martwych. Kolumny sa nad korkami zamkniete za pomoca dodatkowego zalakowania, z którego wystaja kapilary. Jest korzystne, gdy stosunek promienia kolumny do promienia krótszej, koncowej kolumny wynosi 2:1 do 5:1 a stozkowa czesc tworzy z kolumna kat najlepiej 30°.Z prospektu szwedzkiej firmy Sephadex: Laboratory Columns, Pharmacia fine Chemicals, Uppsala — Sweden, March 1969-1, znana jest kolumna chromatograficzna w postaci szklanej odlewanej rury, na koncach stozkowo poszerzonej. Górne zamkniecie sklada sie z plastykowego pierscienia zewnetrznie otaczajacego rozszerzenie rury, który ma wewnetrznie nagwintowany kolnierz. W kolnierz wkrecony jest krazek z plastyku stanowiacy zamkniecie, w którym sa wykonane uszczelnione otwory na doprowadzenie eluentu oraz na odpowietrzanie. Dolne zam¬ kniecie jest zbudowane tak samo, z ta jednak róznica, ze ma w swietle rozszerzenia rury porowata2 122 538 plytke zamykajaca dól kolumny, kanalem polaczona z uszczelnionym korkiem z przelotowym otworem do odprowadzania eluentu.Kolumna ta nie nadaje sie do stosowania przy przeplywie eluentu w obu kierunkach, a poza tym ze wzgledu na uzyte materialy, glównie polichlorek winylu, nie moze byc stosowana, gdy eluentem jest rozpuszczalnik organiczny lub kwas organiczny, np. czesto uzywany roztwór kwasu mrówkowego lub octowego.Przedmiotem wynalazku jest kolumna chromatograficzna majaca postac szklanej rury, której przeswit z kazdej strony zamkniety jest szczelnie krazkiem ze spieku szklanego a kazda krawedz otoczona jest uszczelniajacym pierscieniem wystajacym ponad nia, od wewnatrz nagwintowanym, w który wkrecona jest tuleja z gwintowanym otworem. Istota wynalazku polega na tym, ze pomiedzy uszczelniajacym pierscieniem a zewnetrzna powierzchnia rury umieszczone sa uszczelki dociskane z góry pierwsza tuleja, w która wkrecona jest druga tuleja z trzpieniem, majacym centralnie wykonany otwór na rurke, wyposazona w kolnierz u dolu. Nad krazkiem ze spieku szklanego i zarazem pod trzpieniem ulokowany jest profilowany tefionowy tlok, w ksztalcie odwróconego leja, wyposazonego na obudowie w kolnierz stanowiacy uszczelnienie miedzy rura, a krazkiem oraz dolna czescia drugiej tulei i obejmujacy dolna czescia krazek. Dolna czesc drugiej tulei ma u dolu kolnierz, w którym jest obwodowo osadzona uszczelka.Dzieki temu, ze czesci kontaktujace sie z eluentem mozna wykonac z tworzyw odpornych na chemikalia, szkla, teflonu lub polietylenu, nie ma ograniczen w stosowaniu róznych rozpuszczalni¬ ków organicznych, zwlaszcza kwasu mrówkowego i octowego jak równiez nieorganicznych zasad i kwasów. Rozwiazania konstrukcyjne tloka i pozostalych elementów zapewniaja calkowita szczel¬ nosc przeplywajacego eluentu, a zarazem pozwalaja na przesuwanie krazka wraz z kolnierzem tloka wewnatrz rury, w celu likwidacji objetosci martwej. Kolumna zapewnia mozliwosc dwukie¬ runkowego przeplywu eluentu. Ze wzgledu na rozwiazanie zamkniecia kolumny rura szklana nie musi miec idealnie kolowego przekroju, dzieki czemu moga byc stosowane standardowe rury szklane, co eliminuje koniecznosc specjalnego odlewania rur. Rura na te kolumne nie wymaga takze wytwarzania przy krawedzi ani kolnierzy ani gwintów dla mocowania pierscieni uszczelniaja¬ cych. Przedmiot wynalazku jest przedstawiony w przykladzie wykonania na rysunku, na którym jest przedstawiona górna czesc kolumny w pólwidoku i pólprzekroju pionowym.Kolumna wedlug przykladowego rozwiazania sklada sie ze szklanej rury 1 o jednakowej srednicy na calej dlugosci oraz takich samych elementów zamykajacych i uszczelniajacych z obu stron. Przy krawedzi rury 1 umieszczony jest uszczelniajacy pierscien 2 otaczajacyja z zewnatrz i od tej strony uszczelniony gumowymi uszczelkami 3 o przekroju kolowym. Górna czesc pierscienia 2 wystaje poza krawedz rury 1 i jest od wewnatrz nagwintowana. W pierscieniu wkrecona jest pierwsza tuleja 4, moletowana z zewnatrz o przelotowym gwintowanym otworze, w którym wkrecona jest druga tuleja 5 z moletowana glówka 6. Dolna czesc drugiej tulei 5 ma u dolu kolnierz 7 z obwodowo wykonanym rowkiem w którym ulokowana jest gumowa uszczelka 8. W otworze drugiej tulei 5 osadzony jest trzpien 9 zakonczony moletowana glówka 10. Ponizej glówki 10 trzpien 9 jest nagwintowany na pewnej dlugosci, zas na gwint nakrecona jest ustalajaca nakretka 11, przeznaczona do ustalenia jego polozenia. W trzpieniu 9 jest centralnie wykonany kanal, w którym umieszczona jest polietylenowa rurka 12, majaca u dolu kolnierz. Dolna czesc trzpienia 9 ma wewnetrzna komore, w której osadzona jest górna czesc profilowanego tloka 13 majacego postac odwróconego leja, wyposazonego na obwodzie w kolnierz 14, przylegajacy do sciany rury 1.W dolnej czesci kolnierza 14 ulokowany jest porowaty krazek 15 wykonany ze spieku szklanego.Miedzy obwodem krazka 15, a rura 1 wcisnieta jest dolna czesc kolnierza 14, górna jego czesc z jednej strony przylega do rury 1 a z drugiej do uszczelki 8 umieszczonej w kolnierzu 7 drugiej tulei 5.Wszystkie elementy nie stykajace sie z eluentem wykonane sa z polichlorku winylu, natomiask tlok 13 wykonany jest z teflonu.Przed rozpoczeciem uzywania kolumny zamyka sieja od dolu, zakladajac dolny pierscien 2 z uszczelkami 3 i dokrecajac calosc tuleja 4. Nastepnie do wnetrza rury 1 wprowadza sie sorbent i zamyka kolumne górnym zamknieciem, podobnie jak u dolu. Z kolei doprowadza sie eleuent przez rurke 12, tlok 13 i porowaty krazek 15, co najpierw powoduje osadzenie sie sorbentu w kolumnie.Niewypelniona objetosc pomiedzy sorbentem a tlokiem 13 zmniejsza sie do zera przez wkrecanie trzpienia 9, az do zrównania sie krazka 15 z powierzchnia sorbentu, po czym dokreca sie ustalajaca nakretke 11. W tym stanie kolumna jest gotowa do pracy.122538 3 Zastrzezenie patentowe Kolumna chromatograficzna majaca postac szklanej rury jednakowo z obu stron uszczelnio¬ nej, której przeswit z kazdej strony zamkniety jest szczelnie krazkiem ze spieku szklanego, a kazda krawedz otoczona jest uszczelniajacym pierscieniem wystajacym ponad nia, od wewnatrz nagwin¬ towanym, w który wkrecona jest tuleja z gwintowanym otworem, znamienna tym, ze pomiedzy uszczelniajacym pierscieniem (2), a zewnetrzna powierzchnia rury (1) umieszczone sa uszczelki (3) dociskane z góry pierwsza tuleja (4), w która wkrecona jest druga tuleja (5) z trzpieniem (9) majacym centralnie wykonany otwór na rurke (12) wyposazona w kolnierz u dolu, natomiast nad krazkiem (15) a pod trzpieniem (9) ulokowany jest profilowany teflonowy tlok (13) w ksztalcie odwróconego leja, wyposazonego na obwodzie w kolnierz (14), stanowiacy uszczelnienie miedzy rura (1) a krazkiem (15) oraz dolna czescia drugiej tulei (5) i obejmujacy dolna czescia krawedz (15), przy czym dolna czesc drugiej tulei (5) ma u dolu kolnierz (7), w którym jest obwodowo osadzona uszczelka (8). PLThe subject of the invention is a chromatographic column for the precise, analytical or preparative separation of mixtures of substances such as proteins, peptides, nucleic acids, nucleotides, sugars, amino acids, etc., by means of gel or gel-ion exchange chromatography methods. From the Polish patent description No. 68 838 a chromatographic column is known. made of segments, the bottom of which is equipped with a stub connecting the individual segments. Each segment has inside a shelf made in the form of a normal cone or a cone with concave sides, or having a normal cone or a cone with concave sides on its surface. A variant of the column is known from the same patent specification, which has a unit housing with shelves equipped with an opening in In the middle, between these shelves there are conical shelves or shelves with cones on their surface. Another Polish patent description No. 782S3 describes a chromatographic column filled with a cylindrical-shaped sorption agent, conically passing into columns of smaller diameter at both ends. Each of these shorter, smaller diameter columns has a filter manifold inside and a cap with capillary. The sorption agent, the filter separator and the plug fit snugly together, without the so-called dead volumes. The columns are closed above the plugs by means of additional sealing from which capillaries protrude. Preferably, the ratio of the column radius to the radius of the shorter final column is 2: 1 to 5: 1 and the conical portion forms an angle of preferably 30 ° with the column. From the Swedish company Sephadex brochure: Laboratory Columns, Pharmacia fine Chemicals, Uppsala - Sweden, March 1969-1, a chromatographic column in the form of a cast glass tube with conically widened ends is known. The top closure consists of a plastic ring on the outside surrounding the tube extension which has an internally threaded collar. A plastic disc is screwed into the flange as a closure, in which the holes for the eluent inlet and for venting are sealed. The lower closure is constructed in the same way, but the difference is that in the light of the tube flare it has a porous plate closing the bottom of the column, a channel connected to a sealed plug with a through-hole for eluent discharge. This column is not suitable for use in the flow of eluent. in both directions, and because of the materials used, mainly polyvinyl chloride, cannot be used when the eluent is an organic solvent or organic acid, e.g. a frequently used solution of formic or acetic acid. The subject of the invention is a chromatographic column in the form of a glass tube The gap of which on each side is tightly closed with a disc made of sintered glass and each edge is surrounded by a sealing ring protruding above it, threaded from the inside, into which a sleeve with a threaded hole is screwed. The essence of the invention consists in the fact that between the sealing ring and the outer surface of the pipe there are seals pressed from above, the first sleeve, into which the second sleeve is screwed with a pin, having a centrally made hole for the tube, equipped with a flange at the bottom. Above the disc made of sintered glass, and at the same time under the mandrel, there is a profiled Tefion piston, in the shape of an inverted funnel, equipped with a flange on the housing, which is a seal between the pipe and the disc, and the lower part of the second sleeve and covering the lower part of the disc. The lower part of the second sleeve has a flange at the bottom, in which a gasket is seated circumferentially. Due to the fact that the parts in contact with the eluent can be made of chemical-resistant materials, glass, Teflon or polyethylene, there are no restrictions on the use of various organic solvents, especially formic and acetic acid as well as inorganic bases and acids. The design solutions of the piston and other elements ensure complete tightness of the flowing eluent, and at the same time allow the pulley and the piston flange to be moved inside the pipe in order to eliminate the dead volume. The column provides for a bi-directional flow of eluent. Due to the column closure solution, the glass tube does not have to be perfectly circular, so that standard glass tubes can be used, which eliminates the need for special casting of the tubes. The pipe for these columns also does not require fabrication at the edge, no flanges, or threads for attaching the sealing rings. The subject of the invention is presented in an example of embodiment in the drawing, which shows the upper part of the column in a half-view and a vertical half-section. According to an exemplary embodiment, the column consists of a glass tube 1 of the same diameter throughout its entire length and the same closing and sealing elements on both sides. At the edge of the pipe 1 there is a sealing ring 2 surrounding the outside and on this side sealed with rubber gaskets 3 with circular cross-section. The upper part of the ring 2 extends beyond the edge of the tube 1 and is threaded on the inside. The first sleeve 4 is screwed into the ring, externally knurled with a threaded through hole, in which the second sleeve 5 with a knurled head 6 is screwed in. The lower part of the second sleeve 5 has a flange 7 at the bottom with a circumferential groove in which a rubber gasket 8 is placed. In the bore of the second sleeve 5, a pin 9 is mounted, with a knurled head 10. Below the head 10, the pin 9 is threaded at a certain length, and a fixing nut 11 is screwed onto the thread, intended to fix its position. The mandrel 9 has a centrally formed channel in which a polyethylene tube 12 is placed, with a flange at the bottom. The lower part of the spindle 9 has an internal chamber in which the upper part of the profiled piston 13 is mounted, in the form of an inverted funnel, with a flange 14 around the circumference, adjacent to the wall of the pipe 1. In the lower part of the flange 14 there is a porous disc 15 made of sintered glass. Between the circumference of the disc 15 and the pipe 1, the lower part of the flange 14 is pressed in, its upper part adjoins the pipe 1 on one side and on the other side to the seal 8 placed in the flange 7 of the other sleeve 5. All elements not in contact with the eluent are made of polyvinyl chloride , the piston 13 is made of Teflon. Before use, the columns are closed from the bottom, by putting on the lower ring 2 with gaskets 3 and tightening the entire sleeve 4. Then, the sorbent is introduced into the pipe 1 and the column is closed with an upper closure, similar to the one at the bottom. The eleuent is then fed through the tube 12, the piston 13 and the porous disc 15, which first causes the sorbent to settle in the column. The unfilled volume between the sorbent and the piston 13 is reduced to zero by screwing the pin 9 until the disc 15 is level with the sorbent surface. , then tighten the retaining nut 11. In this state, the column is ready for operation. 122538 3 Patent Claim The chromatography column has the form of a glass tube sealed on both sides, the lumen of which on each side is sealed with a sintered disc, and each edge is surrounded by a sealing ring protruding above it, threaded from the inside, into which a sleeve with a threaded hole is screwed, characterized in that between the sealing ring (2) and the outer surface of the pipe (1) there are gaskets (3) pressed from the top, the first sleeve (4), into which the second sleeve (5) is screwed, with a central pin (9) hole for the tube (12) equipped with a flange at the bottom, while above the disk (15) and under the spindle (9) there is a profiled Teflon piston (13) in the shape of an inverted funnel, equipped with a collar (14) on the circumference, which serves as a seal between the tube (1) and a disc (15) and the lower part of the second sleeve (5) and the edge (15) surrounding the lower part, the lower part of the second sleeve (5) having a flange (7) at the bottom, in which a gasket (8) is seated circumferentially ). PL