NO864919L

NO864919L - Coating method.

Info

Publication number: NO864919L
Application number: NO864919A
Authority: NO
Inventors: Carl-Eric Gullberg
Original assignee: Pharmacia Ab
Priority date: 1985-04-24
Filing date: 1986-12-08
Publication date: 1986-12-08
Also published as: DK625386A; DK625386D0

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte for påføring av et belegg av allergen på spissen av et instrument, som skal anvendes for allergidiagnose in vivo, såkalt prikktester på huden. The present invention relates to a method for applying a coating of allergen to the tip of an instrument, which is to be used for allergy diagnosis in vivo, so-called prick tests on the skin.

I foreliggende sammenheng refererer betegnelsen "allergen" til et stoff som kan bevirke en allergisk reaksjon, med mindre annet er angitt. In the present context, the term "allergen" refers to a substance that can cause an allergic reaction, unless otherwise stated.

Allergidiagnose in vivo er et middel for å identifisere det spesifikke allergen(er) overfor hvilket pasienten er allergisk, hvor denne diagnostiseringsteknikk innebærer følgende metode: En dråpe av allergen-ekstrakt eller av allergen i en annen egnet form avsettes på huden. Deretter punkteres huden ved hjelp av spissen på en kanyle, eller med en nål, lansett eller annet spisst redskap, for derved å bevirke at allergenet trenger inn i huden hvor allergenet da kan gi opphav til en allergisk reaksjon; f.eks. kan allergenet reagere med IgE-anti stoff er bundet til mastceller som frigjør inflammatoriske mediatorer. Teknikken som sådan er kjent og beskrevet i flere lærebøker og artikler (se f.eks. Allergy and Clinicval Immunology, Grune & Stratton Inc., 1976, side 164-170). Allergy diagnosis in vivo is a means of identifying the specific allergen(s) to which the patient is allergic, where this diagnostic technique involves the following method: A drop of allergen extract or of allergen in another suitable form is deposited on the skin. The skin is then punctured with the help of the tip of a needle, or with a needle, lancet or other pointed instrument, thereby causing the allergen to penetrate the skin where the allergen can then give rise to an allergic reaction; e.g. can the allergen react with IgE-anti substance is bound to mast cells which release inflammatory mediators. The technique as such is known and described in several textbooks and articles (see, for example, Allergy and Clinical Immunology, Grune & Stratton Inc., 1976, pages 164-170).

De instrumentene som benyttes for punktering, kan ha forskjellige former. Det har således f.eks. vært benyttet spesielle nåler som er laget av stål og har en spiss-konfigurasjon som er optimalisert for hudtesting (Mailing, J-J et al., Allergy 37 ,(1982), side 563-67). Når en slik nål benyttes, blir et overskudd av allergenisk materiale avsatt på huden hvorved punktering bevirkes ved hjelp av nålen, og restoverskuddet av allergen blir deretter tørket av. Nåler som er blitt belagt med allergeniske stoffer før deres bruk i prikktesting, har også vært foreslått som egnede redskaper. I DE-A-2.940.342 er det f.eks. beskrevet en lansett på hvis spiss det er avsatt et allergenisk preparat, og videre frysetørket og lakkbehandlet før bruk. Hverken beising generelt eller syrebeising som et forbehandlingstrinn er omtalt. The instruments used for puncturing can have different shapes. It has thus e.g. have been used special needles which are made of steel and have a tip configuration which is optimized for skin testing (Mailing, J-J et al., Allergy 37, (1982), pages 563-67). When such a needle is used, an excess of allergenic material is deposited on the skin whereby a puncture is effected with the help of the needle, and the residual excess of allergen is then wiped off. Needles that have been coated with allergenic substances prior to their use in prick testing have also been suggested as suitable tools. In DE-A-2,940,342 it is e.g. described a lancet on the tip of which an allergenic preparation has been deposited, and further freeze-dried and varnished before use. Neither pickling in general nor acid pickling as a pre-treatment step is discussed.

De teknikker som for tiden benyttes for utførelse av denne type tester, har flere ulemper, og blant disse kan det f.eks. nevnes at operatører som arbeider med disse tester, løper risiko for å bli sensibiliserte, og at det oppstår vanskeligheter med sammenligning av resultater fra tester av forskjellige datoer, idet disse sistnevnte ulemper bl.a. skyldes vanskelig-heten med å få en standardisert mengde allergen til på reproduserbar måte å trenge gjennom huden. Det kan dessuten vise seg vanskelig å sammenligne resultater oppnådd med forskjellige prøver av allergener. Videre, ifølge metoder som for tiden er vanlig benyttet, blir et overskudd av allergen påført og blir deretter tørket av. Dette betyr at ved hvert tilfelle blir en relativt stor mengde kostbart materiale oppbrukt. The techniques that are currently used for carrying out this type of test have several disadvantages, and among these there can be e.g. it is mentioned that operators who work with these tests run the risk of becoming sensitized, and that difficulties arise with comparing results from tests of different dates, as these latter disadvantages include is due to the difficulty in getting a standardized amount of allergen to reproducibly penetrate the skin. It can also prove difficult to compare results obtained with different samples of allergens. Furthermore, according to methods currently commonly used, an excess of allergen is applied and then wiped off. This means that in each case a relatively large amount of expensive material is used up.

Formålet med foreliggende oppfinnelse er å minimalisere disse ulempene, dvs. å øke reproduserbarheten av testresultater oppnådd på forskjellige tidspunkter og med forskjellige allergenpreparater av enten samme eller forskjellige allergener. Oppfinnelsen tar dessuten sikte på å redusere sensibiliseringsrisikoer for pasienter og for personell som utfører testene. The purpose of the present invention is to minimize these disadvantages, i.e. to increase the reproducibility of test results obtained at different times and with different allergen preparations of either the same or different allergens. The invention also aims to reduce sensitization risks for patients and for personnel performing the tests.

Såvidt man vet har tidligere forsøk på belegging av metallspissen på punkteringsinstrumentene på en reproduserbar måte slått feil, hovedsake-lig p.g.a. at man ikke har fått noen innsikt i typen av de faktorer som bestemmer adherensen av allergeniske stoffer til metallgjenstander. Et viktig punkt å merke seg er at allergenisiteten til det allergeniske stoffet ikke må bli ødelagt. Fra instrumentet må stoffet kunne overføres i en virkningsfull form til huden på pasienten som skal testes. I tillegg er det nødvendig at stoffet forblir på plass på spissen av nålen inntil instrumentet faktisk har blitt anbragt på ønsket måte. Dersom stoffet løsner fra spissen for tidlig, vil dette innebære en stor risiko for at det oppnådde resultat viser seg å være ikke-reproduserbart samt risiko for at personen som utører testen, eksponeres for en forøket sensibiliserings-risiko. En faktor som påvirker klebeevnen til allergenpreparatet, er dets opprinnelse og sammensetning. Således har allergenpreparater som er rike på polysakkarider, f.eks. fra mugg og planter, en relativt høy grad av klebeevne til ståloverflater, mens andre som har et lavt polysakkarid-innhold, f.eks. pattedyrepitel, kun har liten klebeevne til ståloverflater. Som en regel er den allergeniske komponenten alltid et protein, og graden av dets klebeevne bestemmes av de andre komponentene som er til stede i preparatet. En annen faktor er stålets glans, dvs. dets overflatedybde. Som en regel bidrar en forøket overflatedybde til forbedret adhesjon. En tredje faktor kan være urenheter, hvis slike er til stede, slik som f.eks. fett og metalloksyder. Urenheter kan innebære en vesentlig forringelse av klebeevne. Det vil således forstås at det er en rekke faktorer som er avgjørende for den allergeniske aktiviteten til et allergenpreparat når dette preparat kleber seg til en stålspiss. As far as is known, previous attempts to coat the metal tip of the puncture instruments in a reproducible way have failed, mainly due to that no insight has been gained into the type of factors that determine the adherence of allergenic substances to metal objects. An important point to note is that the allergenicity of the allergenic substance must not be destroyed. From the instrument, the substance must be able to be transferred in an effective form to the skin of the patient to be tested. In addition, it is necessary that the fabric remains in place on the tip of the needle until the instrument has actually been placed in the desired manner. If the substance detaches from the tip too early, this will entail a great risk that the result obtained turns out to be non-reproducible as well as a risk that the person performing the test is exposed to an increased risk of sensitization. One factor that affects the adhesiveness of the allergen preparation is its origin and composition. Thus, allergen preparations that are rich in polysaccharides, e.g. from mold and plants, a relatively high degree of adhesiveness to steel surfaces, while others that have a low polysaccharide content, e.g. mammalian epithelium, has only a small adhesive capacity to steel surfaces. As a rule, the allergenic component is always a protein, and the degree of its adhesiveness is determined by the other components present in the preparation. Another factor is the shine of the steel, i.e. its surface depth. As a rule, an increased surface depth contributes to improved adhesion. A third factor can be impurities, if such are present, such as e.g. grease and metal oxides. Impurities can mean a significant deterioration in adhesiveness. It will thus be understood that there are a number of factors that are decisive for the allergenic activity of an allergen preparation when this preparation sticks to a steel tip.

Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en fremgangsmåte hvorved det er tatt hensyn til disse faktorer slik at hele spissen på punkteringsinstru-mentet kan belegges med en reproduserbar og standardisert aktiv mengde allergenisk stoff. Dette oppnås ved syrebeising av spissen før belegging derav. The present invention provides a method whereby these factors are taken into account so that the entire tip of the puncture instrument can be coated with a reproducible and standardized active amount of allergenic substance. This is achieved by acid pickling of the tip before coating it.

På enhver av to gitte spisser må beisingen utføres under nøyaktig de samme betingelsene dersom resultatene som oppnås med disse spisser skal kunne sammenlignes med hverandre. Beising ifølge oppfinnelsen har den virkning at ståloverflaten til en spiss renses for oksyder og andre urenheter, og har antageligvis også den ytterligere effekt at mikrostruk-turen til ståloverflaten påvirkes på gunstig måte for belegging med en aktiv mengde av et allergenisk stoff. Fettoppløselige materialer fjernes fra stålet før beising ved at overflaten som skal beises, behandles med et fettoppløsende stoff slik som f.eks. trikloretan. On any two given tips, the pickling must be carried out under exactly the same conditions if the results obtained with these tips are to be comparable with each other. Pickling according to the invention has the effect that the steel surface of a tip is cleaned of oxides and other impurities, and probably also has the further effect that the microstructure of the steel surface is affected in a favorable way for coating with an active amount of an allergenic substance. Fat-soluble materials are removed from the steel before pickling by treating the surface to be pickled with a fat-dissolving substance such as e.g. trichloroethane.

Angivelsen om at en aktiv mengde materiale skal være til stede på spissen, betyr at en lokal allergisk reaksjon vil resultere ved punktering av huden til et allergisk individ med spissen. Den aktive mengden uttrykt i gram varierer blant forskjellige allergenpreparater med det samme allergen samt blant forskjellige typer av allergener. Normalt blir spissen dekket med en mengde allergen (protein) i området 0,1-10.000 ng, spesielt 8-1000 ng. Aktiviteten kan uttrykkes som biologiske enhet, B.U. The statement that an active amount of material must be present on the tip means that a local allergic reaction will result when the skin of an allergic individual is punctured with the tip. The active amount expressed in grams varies among different allergen preparations with the same allergen as well as among different types of allergens. Normally, the tip is covered with an amount of allergen (protein) in the range of 0.1-10,000 ng, especially 8-1000 ng. The activity can be expressed as a biological unit, B.U.

(Nordic Guidelines, Publ. No. 7, Kapittel 3.4.2 ,Biological Potency; Nordic Council of Medicine, Uppsala, Sverige), og ifølge oppfinnelsen blir lansettspissen belagt med en mengde allergen slik at reaksjonen i huden når allergenet anvendes, vil tilsvare 10<4->10<6>B.U., som f.eks. 10<5>B.U. Det brede området av variasjoner i spesifikk aktivitet som er tilbøyelig til å forekomme med forskjellige typer av allergen, er eksemplifisert i tabell 1. (Nordic Guidelines, Publ. No. 7, Chapter 3.4.2, Biological Potency; Nordic Council of Medicine, Uppsala, Sweden), and according to the invention, the lancet tip is coated with an amount of allergen so that the reaction in the skin when the allergen is applied will correspond to 10 <4->10<6>B.U., which e.g. 10<5>B.U. The wide range of variation in specific activity that tends to occur with different types of allergen is exemplified in Table 1.

Allergenakti vitet Allergen reactivity

Instrumentkonstruksjon Instrument construction

Instrumentet kan gis forskjellige former, idet det mest kritiske trekk er spissens form. I foreliggende sammenheng betyr "spiss" den delen av instrumentet som vil trenge inn i huden ved punktering derav. Ifølge en meget fordelaktig utførelse er spissen gitt en slik form at punktering av huden bevirkes på reproduserbar måte til en passende dybde; i denne sammenheng skal det bemerkes at den lokale allergiske reaksjon som oppnås, vil avhenge bl.a. av dybden på punkteringen og den vinkel med hvilken punktering forårsakes. Instrumentet kan ha form av en lansett, hvis spiss har skuldre, og hvis håndtak er gitt en form slik at test-operatøren alltid vil foretrekke å punktere huden i samme vinkel, f.eks. 45° eller 90° (målt mellom huden og instrumentet). Skuldrene virker effektivt som stoppanordninger slik at bare spissen kan gjennomtrenge huden. En fordelaktig utførelse er vist på fig. 1. På denne figuren er det vist et punkteringsinstrument som har form av en lansett. Det består av en plate 1 som er vesentlig rektangulær og avlang. På en av dens korte sider har den en spis 2, fortrinnsvis triangelformet, idet spissens basis er festet til den korte siden på en måte slik at spissen rager ut derfra i rett vinkel i platens plan. Det anbefales at platen og spissen utstanses fra den samme metallplaten (rustfritt stål). Den delen av den korte siden som omgir spissens basis, danner to anordninger 3 som kan forårakes å gjennomtrenge huden bare med den største vanske-lighet. Disse anordninger betegnes "skuldre" eller "stoppanordninger" og er rettet vesentlig i rett vinkel utover fra instrumentets lengdeakse. Hjørnene 4 og 5 på platen kan skråskjæres for å gi optimalt grep og av estetiske hensyn. I lengderetningen på platen kan det være preget/- inntrykket i lengderetningen forløpende rygger eller fordypninger lik spor 6 i platen. Disse vil motarbeide tilfeldig folding eller bøying av instrumentet. De nøyaktige dimensjonene til instrumentet bestemmes ut fra praktiske betraktninger. F.eks. velges instrumentets lengde slik at spissen lett kan håndteres til å trenge inn i huden ved en gitt vinkel, f.eks. 90°. Lengden kan være i området 25-45 mm og bredden i området 3-6 mm. Forholdet for spissens dybde til bredden av en av stoppanordningene kan variere fra f.eks. 0,1 til 1. The instrument can be given different shapes, the most critical feature being the shape of the tip. In the present context, "tip" means the part of the instrument that will penetrate the skin when punctured therefrom. According to a very advantageous embodiment, the tip is given such a shape that puncture of the skin is effected in a reproducible manner to a suitable depth; in this context, it should be noted that the local allergic reaction that is achieved will depend, among other things, of the depth of the puncture and the angle at which the puncture is caused. The instrument may have the form of a lancet, the tip of which has shoulders, and the handle of which is given a shape so that the test operator will always prefer to puncture the skin at the same angle, e.g. 45° or 90° (measured between the skin and the instrument). The shoulders act effectively as stopping devices so that only the tip can penetrate the skin. An advantageous embodiment is shown in fig. 1. This figure shows a puncture instrument in the shape of a lancet. It consists of a plate 1 which is substantially rectangular and oblong. On one of its short sides, it has a tip 2, preferably triangular, the base of the tip being attached to the short side in such a way that the tip protrudes from there at a right angle in the plane of the plate. It is recommended that the plate and tip are punched from the same sheet metal (stainless steel). The part of the short side which surrounds the base of the tip forms two devices 3 which can be caused to penetrate the skin only with the greatest difficulty. These devices are termed "shoulders" or "stop devices" and are directed substantially at right angles outward from the instrument's longitudinal axis. The corners 4 and 5 of the plate can be beveled to provide optimal grip and for aesthetic reasons. In the longitudinal direction of the plate, there may be ridges or depressions similar to groove 6 in the plate. These will counteract accidental folding or bending of the instrument. The exact dimensions of the instrument are determined from practical considerations. For example the length of the instrument is chosen so that the tip can be easily manipulated to penetrate the skin at a given angle, e.g. 90°. The length can be in the range 25-45 mm and the width in the range 3-6 mm. The ratio of the depth of the tip to the width of one of the stop devices can vary from e.g. 0.1 to 1.

Med hensyn til spissens visuelle utseende, så kan denne variere innen vide grenser. Eksempler på forskjellige utførelser er enkle nålformede og trekantede pisser, hule spisser, og spisser dannet med en overflateøkende muslingkonfigurasjon. Dersom overflaten økes, betyr dette at et større areal er til diposisjon for belegging, dvs. spissen kan belegges med en større mengde allergen. Dersom spissen er dannet med overflateøkende trekk, må disse velges slik at de ikke på negativ måte vil påvirke mulighetene for utførelse av reproduserbare og smertefrie punkteringer av huden. En trekantet spiss er en foretrukken utførelse. With regard to the visual appearance of the tip, this can vary within wide limits. Examples of different designs are simple needle-shaped and triangular tips, hollow tips, and tips formed with a surface-increasing clamshell configuration. If the surface is increased, this means that a larger area is available for coating, i.e. the tip can be coated with a larger amount of allergen. If the tip is formed with surface-increasing features, these must be chosen so that they will not negatively affect the possibilities of performing reproducible and painless punctures of the skin. A triangular tip is a preferred design.

Ifølge oppfinnelsen bør den overflate som skal belegges med allergenet, være laget av rustfritt stål, idet en viktig forutsetning er at stålet bør ha en slik kvalitet at risikoen for at testpersonen blir sensibilisert overfor metallet, minimaliseres. De andre, ikke-belagte delene av instrumentet kan fortrinnsvis være av det samme materialet, skjønt de kan også være laget av et annet materiale. According to the invention, the surface to be coated with the allergen should be made of stainless steel, an important prerequisite being that the steel should have such a quality that the risk of the test subject becoming sensitized to the metal is minimised. The other, non-coated parts of the instrument may preferably be of the same material, although they may also be made of a different material.

Belegging av spissenCoating of the tip

Oppfinnelsen utnytter syrebeising ved hjelp av en mineralsyre slik som f.eks. saltsyre, svovelsyre eller blandinger derav. Graden av effektivitet for beisingen vil avhenge av syrenes konsentrasjon og den tid i løpet av hvilken stålet utsettes for behandlingen. En gjennomsnittfagmann vil lett finne egnede betingelser. Behandlingsperioder som er for lange, eller konsentrasjoner som er for høye, vil ha tilbøyelighet til å bevirke oppløsning av stålet. Dersom, på den annen side, behandlingsperiodene er for korte, eller konsentrasjonene for lave, vil således resulterende beising være av en dårlig kvalitet, slik at allergenet vil utvise dårlig klebeevne. Forskjellige tilsetninger av salter slik som natriumklorid, kan øke beisekapasiteten til et beisebad. Oksyderende syrer i en konsentrert form, slik som f.eks. salpetersyre, bidrar til dårlig beising, mens derimot tilsetninger av oppløselige salter av ikke-oksyderende mineralsyrer kan øke beisekapasiteten til salpetersyre (oksyderende syre). Spesielt gode resultater har blitt oppnådd med vandige saltsyreoppløsninger med konsentrasjoner fra 3 M og oppover; syren har blitt fortynnet i vann eller konsentrert salpetersyre. The invention utilizes acid pickling with the help of a mineral acid such as e.g. hydrochloric acid, sulfuric acid or mixtures thereof. The degree of effectiveness of the pickling will depend on the concentration of the acids and the time during which the steel is exposed to the treatment. An average professional will easily find suitable conditions. Treatment periods that are too long, or concentrations that are too high, will tend to cause dissolution of the steel. If, on the other hand, the treatment periods are too short, or the concentrations too low, the resulting pickling will thus be of a poor quality, so that the allergen will exhibit poor adhesiveness. Various additions of salts such as sodium chloride can increase the pickling capacity of a pickling bath. Oxidizing acids in a concentrated form, such as e.g. nitric acid contributes to poor pickling, while, on the other hand, additions of soluble salts of non-oxidizing mineral acids can increase the pickling capacity of nitric acid (oxidizing acid). Particularly good results have been obtained with aqueous hydrochloric acid solutions with concentrations from 3 M upwards; the acid has been diluted in water or concentrated nitric acid.

Etter beisetrinnet blir spissen renset ved skylling, hvoretter den rensede overflaten før den forurenses på nytt, belegges med det allergeniske materialet. Dette kan foretas ved å bringe spissen i kontakt med et preparat av standardisert allergen, fortrinnsvis en vandig oppløsning derav, idet konsentrasjonen av dette standardmaterialet f.eks. er 0,004-0,4 ng/ml. Deretter tørkes spissen (eventuelt frysetørkes). Instrumentet som er belagt og klargjort på denne måten, kan med fordel lagres i et vakuum med utelukkelse av luft og fuktighet. Belegging foretas på aseptisk måte for å sikre at et sterilt produkt oppnås. Når beisingen utføres, blir det sørget for at de deler av stoppanordningene som ligger i umiddelbar nærhet av instrumentpissen, blir beiset og belagt med allergen. På denne måten sikres en reproduserbar belegging av spissen. After the pickling step, the tip is cleaned by rinsing, after which the cleaned surface, before being contaminated again, is coated with the allergenic material. This can be done by bringing the tip into contact with a preparation of standardized allergen, preferably an aqueous solution thereof, as the concentration of this standard material e.g. is 0.004-0.4 ng/ml. The tip is then dried (possibly freeze-dried). The instrument which has been coated and prepared in this way can advantageously be stored in a vacuum with the exclusion of air and moisture. Coating is done aseptically to ensure that a sterile product is obtained. When the pickling is carried out, it is ensured that the parts of the stop devices which are in the immediate vicinity of the instrument tip are picked and coated with allergen. In this way, a reproducible coating of the tip is ensured.

Oppfinnelsen kal nå videre ekemplifiseres ved hjelp av en rekke ikke-begrensende eksempler. The invention can now be further exemplified by means of a number of non-limiting examples.

Eksempel 1Example 1

Fremstilling av instrumenterManufacture of instruments

A. BeisingA. Pickling

En rekke lansetter (svensk høykvalitetstål, Sandvik AB, Sverige) innføres i et system av opphengingsanordninger fra hvilke hver lansett henger fritt ned. Fra disse lansetter avvaskes eventuelle fettrester ved hjelp av trikloretan. Opphengingssystemet henges deretter i et stativ over et bad inneholdende HCL 5M slik at hver lansettspiss pluss noen millimeter opp til skulderen vil komme i kontakt med væsken. Etter 7 min. avbrytes beisingen, og lansettene vaskes nøye i destillert vann inntil all resterende saltsyre har blitt fjernet. Deretter tørkes lansettene og steriliseres i et varmt skap. Akseptable resultater oppnås også dersom beisingen utføres ved andre konsentrasjoner og med blandinger av mineralsyrer. I disse tilfeller kan beisetidene måtte varieres. Forsøk av denne typen har blitt utført og er angitt i nedenstående tabell. Når kliniske forsøks-resultater fra tester foretatt med en rekke lansetter skal sammenlignes med hverandre, er det nødvendig at disse lansettene alle har blitt beiset under identiske betingelser. A number of lancets (Swedish high-quality steel, Sandvik AB, Sweden) are introduced into a system of suspension devices from which each lancet hangs down freely. Any fat residues are washed off from these lancets using trichloroethane. The suspension system is then suspended in a rack over a bath containing HCL 5M so that each lancet tip plus a few millimeters up to the shoulder will come into contact with the liquid. After 7 min. pickling is interrupted, and the lancets are carefully washed in distilled water until all remaining hydrochloric acid has been removed. The lancets are then dried and sterilized in a warm cupboard. Acceptable results are also obtained if the pickling is carried out at other concentrations and with mixtures of mineral acids. In these cases, the pickling times may have to be varied. Experiments of this type have been carried out and are indicated in the table below. When clinical trial results from tests carried out with a number of lancets are to be compared with each other, it is necessary that these lancets have all been stained under identical conditions.

Beising av stålmaterialePickling of steel material

Dersom variheten av behandlingen er for lang, har lansettene tilbøyelig-het til å få en brunaktig farge, hvilket er estetisk utilfredsstillende. Beisingen ifølge foreliggende oppfinnelse bør gi lansetter som er frie for misfarging. If the duration of the treatment is too long, the lancets tend to take on a brownish colour, which is aesthetically unsatisfactory. The pickling according to the present invention should give lancets that are free from discoloration.

B. Belegging med allergenB. Coating with allergen

40 steriliserte lansetter (beiset som angitt i 1 A) henges på 40 sterilized lancets (stained as indicated in 1 A) are hung on

opphengingsanordninger slik at de alle befinner seg i samme nivå. En steril oppløsning, X ml, av allergenet engelsk raigress (Allergon AB, Sverige) fremstilles ved en konsentrasjon på 0,04 mg/ml. Lansettene transporteres deretter sideveis slik at de passerer over oppløsningen, idet hver lansett gis kontakt med denne allergen-oppløsning i 0,5 min.; på denne måten bevirkes det allergeniske materialet til å klebe seg til lansetten. Deretter tørkes lansettene i LAF (laminær luftstrøm) i ca. 5 min., hvoretter de pakkes aseptisk i fuktighetstette beholdere. Ved hjelp av immunoelektroforese er det mulig å bestemme mengden av allergen som er festet til lansetten på en semikvantitativ måte. suspension devices so that they are all at the same level. A sterile solution, X ml, of the allergen English ryegrass (Allergon AB, Sweden) is prepared at a concentration of 0.04 mg/ml. The lancets are then transported laterally so that they pass over the solution, each lancet being given contact with this allergen solution for 0.5 min.; in this way the allergenic material is caused to adhere to the lancet. The lancets are then dried in LAF (laminar air flow) for approx. 5 min., after which they are packed aseptically in moisture-proof containers. Using immunoelectrophoresis, it is possible to determine the amount of allergen attached to the lancet in a semi-quantitative manner.

Eksempel 2Example 2

Stikktester med lansetterPrick tests with lancets

Lansettbeholderen åpnes. Lansetten gripes i den øvre delen av håndtaket og dirigeres i rett vinkel mot huden (underarmens underside eller bakside) hvoretter huden perforeres ved hjelp av et lett trykk på lansetten som deretter umiddelbart trekkes tilbake og kastes. Dersom flere tester utføres samtidig, bør det være en avstand på minst 2 cm mellom punkteringene. Etter 15 min. avleses hudreaksjonen. Et erytem og en blemme kan sees dersom pasienten har reagert positivt. Størrelsen på blemmen er proporsjonal med pasientens reaktivitet. Stikktester har blitt foretatt både med beisede og ikke-beisede lansetter; det ble funnet at en beiset lansett kan belegges med en større mengde av allergen-aktivitet enn en ikke-beiset lansett (sammenligningen foretas ved bruk av samme allergenpreparat i hvert tilfelle). Ved hjelp av sammenlig-nende stikktester har foreliggende beleggingsmetode blitt kalibrert for hvert allergen slik at hver lansettspiss kan belegges med 100,000 B.U. allergen. The lancet container is opened. The lancet is grasped in the upper part of the handle and directed at a right angle to the skin (underside or back of the forearm), after which the skin is perforated by means of a light pressure on the lancet, which is then immediately withdrawn and thrown away. If several tests are carried out at the same time, there should be a distance of at least 2 cm between the punctures. After 15 min. the skin reaction is read. An erythema and a blister can be seen if the patient has reacted positively. The size of the blister is proportional to the patient's reactivity. Prick tests have been carried out with both stained and unstained lancets; it was found that a stained lancet can be coated with a greater amount of allergen activity than a non-stained lancet (the comparison is made using the same allergen preparation in each case). By means of comparative prick tests, the present coating method has been calibrated for each allergen so that each lancet tip can be coated with 100,000 B.U. allergen.

Claims

Method for applying a coating of allergen to a steel tip of an instrument for use for in vivo allergy diagnosis and which has stop devices adjacent to the steel tip so that only said tip can penetrate the skin, characterized in that the steel tip plus the parts of the stop devices that lie in the immediate vicinity of the tip acid-stained and then coated with allergen to thereby cause an active amount of allergen to attach to said tip.