NO861964L - Aminomalonyl-alaninforbindelser, samt anvendelse av dem som diett-soetemidler. - Google Patents
Aminomalonyl-alaninforbindelser, samt anvendelse av dem som diett-soetemidler.Info
- Publication number
- NO861964L NO861964L NO861964A NO861964A NO861964L NO 861964 L NO861964 L NO 861964L NO 861964 A NO861964 A NO 861964A NO 861964 A NO861964 A NO 861964A NO 861964 L NO861964 L NO 861964L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- mmol
- ester
- alanine
- solution
- etoac
- Prior art date
Links
- -1 AMINOMALONYL-ALANINE COMPOUNDS Chemical class 0.000 title description 38
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 title description 15
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 title 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 22
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 3
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims description 2
- OCYLOGGHVKOFCX-GSVOUGTGSA-N 3-[amino-[(1R)-1-carboxyethyl]amino]-3-oxopropanoic acid Chemical class NN([C@H](C)C(=O)O)C(CC(=O)O)=O OCYLOGGHVKOFCX-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 81
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 63
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 47
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 38
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 31
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 28
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 27
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 19
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 18
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 18
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 17
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 17
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 17
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 17
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 17
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 17
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 16
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 description 15
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 14
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 14
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 14
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 13
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 12
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium on carbon Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 9
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000008122 artificial sweetener Substances 0.000 description 9
- 235000021311 artificial sweeteners Nutrition 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 9
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 8
- 206010013911 Dysgeusia Diseases 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 7
- 235000019605 sweet taste sensations Nutrition 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 6
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 6
- TYRGLVWXHJRKMT-MRVPVSSYSA-N (2r)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](C)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 TYRGLVWXHJRKMT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 5
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 5
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 5
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 5
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 5
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 5
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 5
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 101150041968 CDC13 gene Proteins 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 230000036515 potency Effects 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole;hydrate Chemical compound O.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N benzyl chloroformate Chemical compound ClC(=O)OCC1=CC=CC=C1 HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 229930006727 (-)-endo-fenchol Natural products 0.000 description 2
- QIVCLSJTIRCGKW-RXMQYKEDSA-N (2r)-2-amino-n-propan-2-ylpropanamide Chemical compound CC(C)NC(=O)[C@@H](C)N QIVCLSJTIRCGKW-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 2
- HQMLIDZJXVVKCW-UWTATZPHSA-N (2r)-2-aminopropanamide Chemical class C[C@@H](N)C(N)=O HQMLIDZJXVVKCW-UWTATZPHSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-MICDWDOJSA-N 1-deuteriopropan-2-one Chemical compound [2H]CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 2
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 2
- 231100000039 Ames test Toxicity 0.000 description 2
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAIHUHQCLTYTSF-MRTMQBJTSA-N Fenchyl alcohol Chemical compound C1C[C@]2(C)[C@H](O)C(C)(C)[C@H]1C2 IAIHUHQCLTYTSF-MRTMQBJTSA-N 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000008575 L-amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 238000011887 Necropsy Methods 0.000 description 2
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 2
- PNNCWTXUWKENPE-UHFFFAOYSA-N [N].NC(N)=O Chemical compound [N].NC(N)=O PNNCWTXUWKENPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- AGEZXYOZHKGVCM-UHFFFAOYSA-N benzyl bromide Chemical compound BrCC1=CC=CC=C1 AGEZXYOZHKGVCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 244000309464 bull Species 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 2
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 2
- 239000002178 crystalline material Substances 0.000 description 2
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- IAIHUHQCLTYTSF-UHFFFAOYSA-N fenchyl alcohol Natural products C1CC2(C)C(O)C(C)(C)C1C2 IAIHUHQCLTYTSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 2
- 231100000243 mutagenic effect Toxicity 0.000 description 2
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- YAQKNCSWDMGPOY-JEDNCBNOSA-N propan-2-yl (2s)-2-aminopropanoate;hydrochloride Chemical compound Cl.CC(C)OC(=O)[C@H](C)N YAQKNCSWDMGPOY-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 2
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 235000014214 soft drink Nutrition 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- JABYJIQOLGWMQW-UHFFFAOYSA-N undec-4-ene Chemical compound CCCCCCC=CCCC JABYJIQOLGWMQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NDVWOBYBJYUSMF-RNFRBKRXSA-N (1r,2r)-2-methylcyclohexan-1-ol Chemical compound C[C@@H]1CCCC[C@H]1O NDVWOBYBJYUSMF-RNFRBKRXSA-N 0.000 description 1
- OGNVQLDIPUXYDH-ZPKKHLQPSA-N (2R,3R,4S)-3-(2-methylpropanoylamino)-4-(4-phenyltriazol-1-yl)-2-[(1R,2R)-1,2,3-trihydroxypropyl]-3,4-dihydro-2H-pyran-6-carboxylic acid Chemical compound CC(C)C(=O)N[C@H]1[C@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)OC(C(O)=O)=C[C@@H]1N1N=NC(C=2C=CC=CC=2)=C1 OGNVQLDIPUXYDH-ZPKKHLQPSA-N 0.000 description 1
- LWWYTOLUGSYYET-NUBCRITNSA-N (2r)-2-amino-n-propan-2-ylpropanamide;hydrochloride Chemical compound Cl.CC(C)NC(=O)[C@@H](C)N LWWYTOLUGSYYET-NUBCRITNSA-N 0.000 description 1
- FIAINKIUSZGVGX-HSHFZTNMSA-N (2r)-2-aminopropanamide;hydrochloride Chemical compound Cl.C[C@@H](N)C(N)=O FIAINKIUSZGVGX-HSHFZTNMSA-N 0.000 description 1
- KYVBNYUBXIEUFW-UHFFFAOYSA-N 1,1,3,3-tetramethylguanidine Chemical compound CN(C)C(=N)N(C)C KYVBNYUBXIEUFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 2H-benzotriazol-4-ol Chemical compound OC1=CC=CC2=C1N=NN2 JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NUIURNJTPRWVAP-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dimethylbenzidine Chemical compound C1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=CC=2)=C1 NUIURNJTPRWVAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000024188 Andala Species 0.000 description 1
- 241000234427 Asparagus Species 0.000 description 1
- 235000005340 Asparagus officinalis Nutrition 0.000 description 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- 150000008541 D-alanines Chemical class 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical group 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 241000662429 Fenerbahce Species 0.000 description 1
- 208000034308 Grand mal convulsion Diseases 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-UHFFFAOYSA-N Hydrogen atom Chemical compound [H] YZCKVEUIGOORGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020710 Hyperphagia Diseases 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N Lys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101000881330 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) Dynein heavy chain, cytoplasmic Proteins 0.000 description 1
- 101100361137 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) drh-16 gene Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011252 Phenylketonuria Diseases 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150118325 ROK1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229910006069 SO3H Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 208000025371 Taste disease Diseases 0.000 description 1
- CSCPPACGZOOCGX-WFGJKAKNSA-N acetone d6 Chemical compound [2H]C([2H])([2H])C(=O)C([2H])([2H])[2H] CSCPPACGZOOCGX-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 231100000215 acute (single dose) toxicity testing Toxicity 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 231100000460 acute oral toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229910000086 alane Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N amantadine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(N)C3 DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000538 analytical sample Substances 0.000 description 1
- 229940125681 anticonvulsant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- OGVDIKFUNKSNGB-RWLLOJOVSA-N benzyl n-[(2r)-1-(1-adamantylamino)-1-oxopropan-2-yl]carbamate Chemical compound N([C@H](C)C(=O)NC12CC3CC(CC(C3)C1)C2)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 OGVDIKFUNKSNGB-RWLLOJOVSA-N 0.000 description 1
- VIXPRKOAOWOKGD-LLVKDONJSA-N benzyl n-[(2r)-1-oxo-1-(propan-2-ylamino)propan-2-yl]carbamate Chemical compound CC(C)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 VIXPRKOAOWOKGD-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 1
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 1
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000007810 chemical reaction solvent Substances 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 1
- 229960004132 diethyl ether Drugs 0.000 description 1
- MKYNHKOAYQRSBD-UHFFFAOYSA-N dioxouranium;nitric acid Chemical compound O=[U]=O.O[N+]([O-])=O.O[N+]([O-])=O MKYNHKOAYQRSBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 230000037433 frameshift Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 231100000304 hepatotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007056 liver toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 235000019656 metallic taste Nutrition 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000003228 microsomal effect Effects 0.000 description 1
- VLAPMBHFAWRUQP-UHFFFAOYSA-L molybdic acid Chemical compound O[Mo](O)(=O)=O VLAPMBHFAWRUQP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 125000005740 oxycarbonyl group Chemical group [*:1]OC([*:2])=O 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 206010036067 polydipsia Diseases 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000003891 promutagen Substances 0.000 description 1
- QDQVXVRZVCTVHE-RXMQYKEDSA-N propan-2-yl (2r)-2-aminopropanoate Chemical compound CC(C)OC(=O)[C@@H](C)N QDQVXVRZVCTVHE-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- YAQKNCSWDMGPOY-NUBCRITNSA-N propan-2-yl (2r)-2-aminopropanoate;hydrochloride Chemical compound Cl.CC(C)OC(=O)[C@@H](C)N YAQKNCSWDMGPOY-NUBCRITNSA-N 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
- A23L27/10—Natural spices, flavouring agents or condiments; Extracts thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
- C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/70—Clarifying or fining of non-alcoholic beverages; Removing unwanted matter
- A23L2/78—Clarifying or fining of non-alcoholic beverages; Removing unwanted matter by ion-exchange
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
- A23L27/30—Artificial sweetening agents
- A23L27/31—Artificial sweetening agents containing amino acids, nucleotides, peptides or derivatives
- A23L27/32—Artificial sweetening agents containing amino acids, nucleotides, peptides or derivatives containing dipeptides or derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/801—Peptide sweetners
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Confectionery (AREA)
- Seasonings (AREA)
Description
Oppfinnelsens område
Foreliggende oppfinnelse vedrører nye kjemiske forbindelser og fremgangsmåter for anvendelse av dem som die11-søtemid1 er. Spesielt vedrører oppfinnelsen også forbindelser som bredt er klassifisert som aminorna 1ony1-D-a 1anin-der ivater.
Bakgrunn for oppfinnelsen
Siden introduksjonen av sakkarin som kunstig søtemiddel er det blitt utviklet relativt få nye søtemidler. Blant dem som er oppdaget er imidlertid den viktigste mety1 esteren av L-tt-asparty1-L-fenylalanin, mer vanlig kjent som aspartam, åpenbart ved US-patent nr. 3 492 131 (Schlatter). Varigheten av anvendelsen av aspartam i ikke-tørre anvendelser er imidlertid et alvorlig spørsmål. Dets nylige introduksjon for anvendelse i soft drinks var som en blanding med sakkarin, idet sakkarinet ble anvendt for å opprettholde en søt smak lenge etter at aspartam hydrolyserer til en ikke-søt struktur.
Således ville en ikke-toksisk kunstig søtemidde1 forbinde1 se som hva søteevne angår ville være sammenlignbar med aspartam, men som viser overlegen stabilitet i forhold til aspartam i vandige medier, være en nyttig tilføyelse til industrien som på basis av kunstige søtemidler. Slike forbindelser, preparater som inneholder dem, samt fremgangsmåter for å anvende disse forbindelser som kunstige søtemidler er emnet for foreliggende oppfinnelse.
Japansk patent 28068 (Takeda) beskriver aminoma1ony1dipeptider som har en C-terminal-aminosyre i L-konfigurasjonen som søteforbinde1 ser for fremstilling av matvarer. Overraskende har vi funnet at dette ikke er tilfelle, men snarere at de tilsvarende forbindelser i henhold til foreliggende oppfinnelse som har en C-terminal-aminosyre av D-konfiguras jon er søte.
Oppsummering av oppfinnelsen
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer forbindelser som er nyttige som kunstige søtemidler med følgende struktur:
hvor X er -OR eller -NHR, idet R er alkyl med 3-10 karbonatomer, eller -Nrfc . En foretrukken u t f ø r e 1 sesf o rm resulterer når X er -OR og R er en isopropylgruppe, dvs. isopropylesteren av aminoma1ony1-D-a1 anin (her også simpelthen betegnet
"i sopropy1esteren") . Stereokjemisk, når forbindelsene i henhold til foreliggende oppfinnelse syntetiserer, blir resultatet dia-stereomere blandinger. Ovenstående formel er vist for lettvint-hetsskyld, men det skal bemerkes at forbindelsene sannsynligvis vil eksistere som zwitter ioner.
De farmasøytisk akseptable salter, for eksempel citratet, tartratet, hydrokloridet og fosfatet, av de forbindelser som her er åpenbart, er også effektive som søtemidler. Slike salter kan lages under anvendelse av typiske syrer og metoder for fremstilling av saltene, slik som konvensjonelt kjent og praktisert på fagområdet.
Forbindelsene i henhold til oppfinnelsen varierer generelt i søthet mellom verdien for sukrose og for aspartam. Eksempelvis er i sopropy1es teren av aminomalonylalanin 58 ganger søtere enn sukrose og omtrent halvparten så søt som aspartam på vektbasis. Sammenlignet med sakkarin er isopropy1 es teren ikke i besittelse av en "metallisk" ettersmak, og det er faktisk ikke noen negative bi smaker.
I tillegg menes forbindelsene i henhold til foreliggende
oppfinnelse å være ikke-toks i ske. Det har vært en viss bekymring for de prinsipale metabolismeprodukter av aspartam - asparginsyre og fenylalanin. Førstnevnte forårsaker hjerneskader i neonatale mus, og sistnevnte er rapportert å indusere anfall av grand mal-type hos aper, produsere fødse1sdeffekter hos gravide kvinner med fenylketonuri, indusere oppfør se 1 send r inge r og forandre hjernens kjemi. Sakkarin selv er velkjent som et svakt mutagen i Ames-analysen, en egenskap som assosieres med karsinogent potensial.
I tillegg til de forbindelser som har den ovenfor angitte struktur, tilveiebringer oppfinnelsen også en setning av en drikk, omfattende å oppløse en tilstrekkelig mengde av minst én av de her åpenbarte forbindelser for å bevirke nevnte setning.
Det er derfor et formål med foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe et kunstig søtemiddel.
Det er videre et formål med foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe et kunstig søtemiddel som er relativt stabilt i vandig løsning.
Det er videre et formål med foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe et kunstig søtemiddel som er ikke-toksisk.
Disse og andre formål og fordeler med oppfinnelsen vil bli mer fremtredende og lettere forstått av den følgende detaljerte beskrivelse av for tiden foretrukne eksempelvise utførelsesformer av oppfinnelsen sett i tilknytning til den ledsagende figur som er en skjematisk representasjon av syntesen av DL-aminoma1ony1-D-a1 an in-isopropy1ester. De nedre bokstavbetegne1 ser refererer til følgende:
a. Benzylklorformiat (Z-Cl), NaHC03
b. NaOH, aq. EtOH
c. DBU, benzyl bromid
d. tetramety1guanid in (TMG), aq. tetrahydrofuran (THF)
e. DCC , HOBt , d lrnetyl f ormamid (DMF), D-alan in-isopropylester (6)
f . 10 % Pd/C , H:^ , MeOH.
Kort beskrivelse av figurene
Figur 1 er et reaksjons skjema som illustrerer syntesen av DL-aminomalonyl-D-alanin-isopropylester. Figur 2 er et grafisk sammenligning mellom søthetspotensen til isopropy1 esteren og sukrose og aspartam. Hvert datapunkt representerer den gjennomsnittlige + SEM. Figur 3 er en grafisk sammenligning mellom søthetspotensen til D-isopropy1 es teren og den tilsvarende L-isopropy1 es ter og sukrose.
Detaljert diskussjon
Syntesen av forbindelser innen omfanget av foreliggende oppfinnelse skal beskrives. Denne beskrivelse er bare for 11 lustras jonsforrnå1, ikke for begrensning.
I . Syntese av DL- aminorna 1ony1- D- a1 an in-
isopropylester.
Som en oversikt over de syntetiske metoder som anvendes, vises syntesen av DL-aminoma1ony1-D-a1 anm-i sopropy1ester i figur 1 og skal nå kort oppsummeres. Kommersielt tilgjengelig arnino-ma 1 onsy r e-d i e ty 1 e s t e rhyd r ok 1 o r id 1_ ble behandlet med Z-Cl (Z) er forkortelse for en benzy 1 oksyka r bony 1 g ruppe ) og NaHCOr»:slik at man fikk den N-beskyttede Z-Ama-(OEt) => 2 (Ama = aminoma 1 ony 1 - gruppe; Et = etyl). Forsåpning ga den frie syre 3_. Behandling med overskudd av benzy lbrornid og 1 , 8-d i azab i cyk 1 o C 5 . 4 . G lundek-7-en (DBU) ga diesteren 4. som etter delvis forsåpning ga mono-benzylesteren 5_.
Kobling av 5_ med D-alanin-i sopropylester 6. slik at man fikk det beskyttede dipeptid 7. hie oppnådd ved standard d i cykl oheksy 1-karbodiimid (DCC)-med ierte prosesser under anvendelse av enten hydroksybenzotriazol (HOBt) eller N-hydroksysuksinimid (HOSu) som katalysatorer. Utbyttene med hver katalysator var sammenlign-bare (7G-80 %), med sistnevnte som gjør det mulig å foreta fjerning av reaksjonens løsningsmiddel (THF mot DMF) som var nød-vendig av 1øse 1 ighetsgrunner, på lettere måte.
Sluttrinnet i sekvensen, fjerning av benzy1oksykarbonyl (Z)-og benzyl (Bz1)-ande 1 ene ved hydrogenolyse over 10 % Pd på karbon i metanol, ble fulgt av rekrystal1 i sas jon ut fra metanol slik at man fikk DL-aminoma1ony1-D-a 1anin-i sopropy1 es teren.
Mellomproduktene 2_, 4,, 5 og 6 er kjente forbindelser. Om-dannelsen av 4. til 5_ under anvendelse av tetrametylguanidin menes også å være ny.
Detaljerte prosesstrinn kan beskrives på følgende måte.
N- benzyloksykarbonyl- aminoma 1 onsyre -
dietyl- ester ( 2)
Denne forbindelse ble fremstilt ved fremgangsmåten til
M. Fujmo et al, Chem. Pharm. Bull. Japan, 24. (9), 2112 ( 1976), hvor den ble rapportert å være i form av en olje. Oppfinnerne her krystalliserte den rå olje fra eter/petroleter i et tørris/- acetonbad, med skraping, slik at man fikk 5,13 g (83 %) ; smp. 37-38'<::>,C; 60 MHz NMR (CDC13, ppm) 1,25 (6H, t. J = 7 Hz, CH3CH^-), 4,20 (4H, q, J = 7 Hz, CH3CH^-), 5,03 (2H, s, ArCH^-), 5,66 (1H, bred s, amid H) , 7,23 (5H, s, A r H~ :i) .
N- benzyloksykarbonyl- aminonralonsvre ( 3)
Forbindelse 2.(3,49 mmol, 1,08 g) ble oppløst i 3 ml 95 %ig etanol og behandlet med 3,49 ml 2N NaOH. Den klare, farveløse løsning ble hensatt ved romtemperatur i 19 timer til det ikke kunne påvises noe utgangsmateriale ved TLC på silikagel (benzen:-etylacetat, 4:1). Etanol ble fordampet under redusert trykk ved romtemperatur. Den vandige løsning ble vasket én gang med eter og deretter surgjort med konsentrert HC1 til pH 2,5. Den melkeaktige løsning ble ekstrahert med etylacetat (3x). Den oppsamlede ekstrakt ble vasket med saltvann, tørket over vannfritt Na;:S0« og inndampet til tørrhet. Produktet ble krystallisert fra eter slik at man fikk 0,852 g av forbindelse 3.; smp. 144-145<c:,>C; homogent ved TLC på silikagel ( CHC13: me tano 1 : edd ik-syre, 5:13:1); 250 MHz NMR (aceton-d&, ppm) 5,00 (1H, d, J = 8 Hz, a-H), 5,10 (2H, s, ArCH^-), 6,84 (1H, d, J = 8 Hz, amid H), 7,36 (5H, m, ArH=). I et 60 MHz spektrum kjørt i aceton med lavt vanninnhold ble også en 9,7 ppm (2H, bred s, utbyttbar med D^O) observert.
N- benzyloksykarbonyl- DL- aminomalon-
svre- monobenzvlester ( 5)
Forbindelse .3 (4,55 mmol, 1,25 g) ble oppløst i en blanding av 8 ml tetrahydrofuran (THF) og 8 ml CH3CN. Benzylbromid
(9,88 mmol, 1,18 ml) og 1,8-diazabicykloC5.4.0]undek-7-en (DBU)
(N. Ono et al., Bull. Chem. Soc, Japan, 51, 2401, 1978; C.G. Rao, Org. Prep. Proe. Int., 12, 225, 1980) (9,88 mmol, 1,48 ml) ble tilsatt. Den klare, farveløse løsning ble hensatt ved rom-
temperatur natten over. Løsningen ble konsentrert under redusert trykk til halvparten av det opprinnelige volum. Produktet ble utfelt ved tilsetning av vann. Det hvite krystallinske materiale ble oppsamlet ved filtrering, tørket og triturert med petroleter slik at man fikk forbindelse 4; 1,72 g (80 %); smp. 109-11G'<::>'C; 250 MHz NMR (CDC13, ppm), 5,11, 5,16, 5,2 (7H, s, s, m, 3 ArCHs-og a-H), 5,82 (1H, d, J = 8 Hz, NH), 7,30 (15H, m, 3 ArH=).
Z-Ama(OBzl)^(1,78 g, 4 mmol) ble oppløst i 18 ml THF. TMG (0,5 ml, 4 mmol, friskt destillert) i H^O ble tilsatt. Den
klare, farveløse løsning ga en pH-verdi på 12,5-13,5 (pH-hydrion-papir). Etter 3 h ved romtemperatur gikk pH-verdien ned til 8,5. Løsningen ble inndampet under redusert trykk for fjerning av THF. Den tåkete løsning ble fortynnet med mer vann og ekstrahert med
eter. Den vandige fase ble surgjort til pH 2 med konsentrert HC1. Den tåkete vannfase ble ekstrahert med EtOAc (3x). Den oppsamlede EtOAc-eks t rakt ble vasket med H;,-0, tørket over NarsSO/* og inndampet til tørrhet slik at man fikk et hvitt fast stoff. Råproduktet ble krystallisert ut fra MeOH/H;sO. Utbytte: 1,17 g (86 %) , smp. 118-120':;,C , TLC på silikagel C CHC1 : MeOH : HOAc = 45:5:11 indikerte fravær av 3.og 4. 250 MHz NMR (aceton-d6, ppm). 5,06 (1H, d, delvis overlappet med 5,1 topp, a-H), 5,1 (2H, s, ArCH^-), 5,24 (2H, s, ArCH3'-), 7,0 (1H, bred s, amid H), 7,35 (10H, m, 2 ArH=).
N- benzyloksykarbonyl- DL- aminomalony1-( benzvlester)- D- alanin- isopropylester ( 7 )
N-benzy 1 oksykarbonyl -DL-aminomal on sy re-mon ob en zyl es ter 5_
(0,156 g, 0,455 mmol) ble oppløst i 1,5 ml DMF. Løsningen ble avkjølt til -15^'C til -20<c:>,C og deretter behandlet med DCC (94 mg, 0,455 mmol) og 1-hydroksybenzotr iazolhydrat (62 mg, 0,46 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -15° til -20'"' i 30 minutter. D-alanin-isopropylesterhydroklorid (69 mg, 0,46 mmol) ble så innført, fulgt av tilsetning av N-metylmorfol in (50 ul,
0,46 mmol). Reaks jonsbland ingen ble omrørt ved -15r:>til -20c:>Ci 1,5 h, ved 0<<::>' i 1 h og 8 h ved romtemperatur. Reaks jonsblandingen ble filtrert for fjerning av DCU, og filtratet ble inndampet til tørrhet under høyt vakuum. Den oljeaktige rest ble tatt opp i EtOAc, og den tåkete EtOAc-løsning ble filtrert.
EtOAc-f iltratet ble deretter vasket med 0,1 N HC1 (3x), H20 (3x), 0,1 N NaOH (3x), H^O (3x), tørket over vannfritt Na^SO* og inndampet til tørrhet slik at man fikk en klar olje. TLC på silikagel (benzen:EtOAc - 4:1 og toluen:EtOAc = 9:1) hver indikerte 3 flekker; utbytte: 0,187 g (91 %). Det rå materiale (0,167 g) ble oppløst i CHCI3, blandet med tilnærmet 0,2 g silikagel og belagt på en 12 g si 1 i kage1-ko1 onne i toluen. Det rå produkt ble deretter kromatografert ved grad i ent-e1uer mg med toluen til toluen:EtOAc = 8:1. Hovedfraksjonen (0,124 g) ble identifisert ved NMR som det ønskede produkt. Produktet ble oppløst i en minste mengde av varm EtOAc; løsningen ble deretter fortynnet med samme volum av eter og avkjølt. Et hvitt fast stoff ble oppnådd: smp. 125-130<::>, 250 MHz NMR (CDC13 , ppm), 1,23 (rn, 7,5 H, (CH3)2-CH-0- overlappende med 8-CH3av Ala1én av 2-diastereomerene), 1,37 (d, 1,5 H, J = 6,98 Hz, 3-CH3av Ala av det annen diastereomer, 4,45 (m, 1H, a-H av Ala), 5,00 (m, 1H, a-H i isopropyl), 5,12 (s, 2H, Ar-CH-*-), 5,18-5,34 (m, 3H, Ar-CH^-0- i benzylesteren overlappende med a-H i Ama), 7,33 (s, 10H, 2 ArHra).
En fremstilling i 30 mmol-skala som fulgte den ovenstående fremgangsmåte gjennom ekstraks jonstr innet ga det rå produkt som ble krystallisert ut fra 2-propanol slik at man fikk 8,91 g av TLC-homogent 7_. Nye 2,17 g (totalt utbytte 81 %) av 7 ble oppnådd fra morvæsken ved den ovenfor beskrevne kolonnekromato-grafiske prosess.
Analyse beregnet for CsaHebN^O-/ : C, 63,46; H, 6,18; N, 6,14. Funnet: C, 63,15; H, 6,04; N, 6,06.
DL- aminomalonvl- D- alanin- i sopropylester ( 8)
N-benzyloksykarbonyl-DL-aminoma1ony1-(monobenzy1es te r)-D-a 1 an in-i sopr opy 1 es te r 7_ (1,16 g, 2,53 mmol) ble hydrogenert ved romtemperatur i 100 ml MeOH over 0,573 g av 10 % Pd/C ved 40 psi i en Parr-apparatur i 1 h. Løsningen ble deretter filtrert gjennom en Celite-pute for fjerning av katalysatoren; filtratet ble konsentrert under redusert trykk, og de frie dipeptider ble utfelt fra løsningen ved tilsetning av eter. Det rå produkt ble rekrystallisert ut fra MeOH. Utbytte: 0,411 g (60 %), smp. 102-104<c>>, 250 MHz NMR (CD3OD, ppm) 1,25 (m, 6H, (CH3) r.rCH-O-) , 1,41
(2d, 3H, B-CH.3 av Ala), 4,38 ( 2q , 1H, a-H av Ala), 4,99 (m, 1H, a-H av isopropyl).
Anal. beregnet for ^H,.é,N=0-5: C, 46,55; H, 6,95; N, 12,06. Funne t C, 46,53; H, 6,95; N, 12,11.
L- alanin- isopropylest e rhydroklorid ( 9)
L-alanin (10 g, 0,112 mol) ble suspendert i 250 ml 2-propanol. Hyd rogenk1or idgass ble boblet inn i lesningen. Temperaturen til løsningen steg gradvis til over 70,<::>,C etter hvert som hydrogenklorid ble oppløst i alkoholen. Etter 2 1/2 h gikk mesteparten av den frie aminosyre i løsning; mer 2-propanol ble tilsatt i små porsjoner (tilnærmet 30-50 ml) inntil det ble oppnådd en klar løsning. Løsningen ble hensatt ved romtemperatur natten over. Løsningen ble inndampet gjennom en NaOH-felle under redusert trykk. Resten ble oppløst i 100 ml 2-propanol og igjen inndampet til tørrhet. Resten ble tørket under et vakuum, og en hvit masse ble oppnådd, som ble triturert med eter og oppsamlet ved filtrering slik at man fikk 16,4 g (96 %) , smp. 84-87<<:>,C. Det rå produkt ble rekrys tal 11 ser t ut fra CH3CN/eter: smp. 89-90<::,C; NMR (CD3OD, ppm), 1,28 (d, J = 6 Hz, 6H, CH3av isopropyl), 1,51 (3H, d J = 8 Hz, B-CH3), 3,98 (1H, q, J = 7 Hz, Ala a-H), 4,7 (3H, bred s, amino H) , 5,0 (1H, m, 0-CHMe;,-;). D-isomeren ble fremstilt på lignende måte.
N- benzvloksykarbonyl- D- a1an in- 1 rans- 2-met<y>lcvk1oheksvlester ( 10)
N-benzyloksykarbonyl-D-alanin (2,5 mmol, 0,556 g) og trans-2-metylcyk1oheksano1 (3 ekvivalenter, 1 ml) ble opplest i 7 ml THF ved romtemperatur, fulgt av tilsetning av 70 mg 4-di-mety1aminopyrid in. DCC (2,5 mmol, 0,515 g) ble deretter innført under røring. Løsningen ble umiddelbart tåket og ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 15 min. til etter at flere dråper HOAc ble tilsatt til den. Di-cykloheksylurea (DCU) ble filtrert fra og filtratet inndampet til tørrhet. Inndampningsresten ble oppløst i etylacetat. EtOAc-løsningen ble filtrert, vasket med 0,5N HC1 (2x), saltvann (2x), 5 % NaHC03(2x) og til slutt saltvann (2x). Den organiske fase viste, etter at den var tørket over vannfritt Na^SO/i., én UV- positiv TLC-flekk. En annen flekk, som bare kunne påvises med f osf omolybdinsyre (PMA)-Ce ( SO* ) :;rdus j , ble identifisert som den uomsatte alkohol ved TLC-sammen1 igning med autentisk materiale. Etylacetat-1øsningen ble inndampet til tørrhet og tørket under høyt vakuum, hvilket ga en klar olje som veide 0,965 g. Det rå materiale ble kromatografert på en Merck Si-60 forhåndspakket kolonne, størrelse C, ved grad i ent-eluer ing med toluen til toluen:etylacetat (9:1). Etter inndampning ble 0,629 g (72,0 %) klar, farveløs olje utvunnet: NMR (CDC13, ppm), 0,85-2,05 (13H, m, alifatisk H1cyk1oheksano1), 0,9 (3H, d, J = 6 Hz, CH3) 1,3 (3H, d, J = 7 Hz, formørket av andre alifatiske protoner, G-CH31Ala), 4,3 (2H, m, CH-0- og a-H), 5 (2H, s, ArCH3-), 5,25 (1H, bred s, amid H), 7,15 (5H, s, A r H- js) .
N- benzovloksykarbonyl- D- a1 an1n- fenchylester ( 11)
N-benzyloksykarbonyl-D-alanin (8,646 g, 38,7 mmol) ble oppløst1150 ml THF og behandlet med DCC (7,987 g, 38,7 mmol) og 15 g fenchylalkohol (2,5 eq) , fulgt av 4-dime ty1aminopyr id in
(1,1 g). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Flere dråper av HOAc ble tilsatt, og etter 30 min. ble DCU filtrert fra. Filtratet ble inndampet til tørrhet under redusert trykk, og den oljeaktige rest ble oppløst i EtOAc. Løsningen ble avkjølt og mer DCU filtrert fra. EtOAc-1øsningen ble vasket med 0.1N HC1 (3x), HeO, 0,1N NaOH (3x), Hs*0 (3x) og tørket over Na^SOfl.. Løsningen ble deretter inndampet til tørrhet under redusert trykk. Det rå, oljeaktige produkt som således ble oppnådd, ble utsatt for sublimering ved 60'~' C/ 0, Q mm i 5 timer inntil vekten av det rå produkt var tilnærmet 12-13 g. Oljen ble krystallisert ut fra heksan; utbytte: 9,75 g (70 %). TLC (revers fase C-18 plate, MeOH: H^O = 8:1) viste en enkelt PMA-Ce(S0/*)^positiv flekk, smp. 97-98<<::>.>En analyttisk prøve ble rekrystal 1 i ser t ut fra eter, smp. 98-99<c:>', 250 MHz NMR (CDCI3, ppm) 0,76 (s, 3H, fenchyl-1-metyl), 1,04 (s, 3H, fenchyl-3-metyl), 1,08 (s, 3H, fenchyl-3-metyl), 1,12-1,79 (m, 7H, fenchyl alifatiske protoner), 1,40 (d, 3H, J = 7,35 Hz, G-CH3 i Ala), 4,24 (q, 1H, J = 7,35 Hz, a-H av Ala), 4,35 (d, 1H, J = 1,8 Hz, a-H i f enchylalkohol ) . Anal. beregnet for Cs-1H1 vNCU : C, 70,16; H, 8,13; N, 3,89. Funnet C, 70,05; H, 7,98; N, 3,78.
D- a 1an in- fenchyle s t e rhyd roklorid ( 12)
Krystallinsk N-benzyloksykarbonyl-D-alanin-fenchylester (9,1 g, 25,3 mmol) ble hydrogenert i 120 ml absolutt MeOH og 22 ml 1,25 N HCl/eter over 1,64 g av 10 % Pd/C ved 38 psi i 30 min. i en Parr-apparatur. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering gjennorn en Celite-pute og filtratet inndampet til tørrhet under redusert trykk. Saltet ble krystallisert ut fra eter. Utbytte: 5,68 g (86 %) i 2 omganger; smp. 180-181<::>, 250 MHz NMR ( aceton-d*,, ppm) 0,85 (s, 3H f enchy 1 -1-me ty 1 ) , 1,08 (s, 3H, fenchy1-3-mety1) , 1,11 (s, 3H, fenchy1-3-me ty1) , 1,14-1,89 (m, 7H, fenchyl-alifatiske protoner), 1,74 (d, 3H, J = 7,35 Hz, B-CH3.1Ala), 4,35 (q, J = 7,35 Hz, a-H av Ala), 4,43 (25, 1H, a-H1fenchyl-alkohol).
D- a1an in- 1 rans- 2- me tylcvkloheksvlester-
p- toluensu1 fonat ( 13)
N-benzyloksykarbonyl-D-a 1anin-1 rans-2-me ty1cykloheksylester (14,7 g, 47,5 mmol) og p-1o1uensu1 fonsyre-monohydrat (9,04 g, 47,5 mmol) ble oppløst1135 ml MeOH. Den metanoliske løsning ble hydrogenert over 2,51 g av 10 % Pd/C ved 40 psi i en Parr-apparatur11 time. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering gjennom en Celite-pute, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Saltet ble utfelt ved tilsetning av eter. Utbytte: 13,8 g12 omganger (81 %), smp. 145-147,<::>>. TLC på silikagel (CHC13:MeOH:HOAc=45:5:1) indikerte en enkelt nin-hydrin-positiv flekk. 250 MHz NMR (CD30D, ppm) 0,92 (d, 3H, J = 6,25 Hz, trans-2-metyl), 1,09-1,99 (m, 7H, alifatiske cykloheksyl-protoner), 1,53 (2d, 3H, 3-CH3 i Ala), 2,37 (s, 3H, C_H3-Ar-S03H) , 4,09 (2q, 1H, J = 7,35 Hz, 2,57 Hz; a-H av Ala), 4,51 (m, 1H, a-H1alkohol); 7,22, 7,69 (ABq, 4H, J = 8,46 Hz, CH3- ArH*-SQ3H).
N- benzyloksykarbonyl- D- a 1anin- 1- adamantvles ter ( 14)
N-benzyloksykarbonyl-D-a 1an in (11,15 g, 50 mmol) ble oppløst i 250 ml THF og behandlet med DCC (10,3 g, 50 mmol), 1-adamantano1 (7,7 g, 51 mmol) og 1,45 g av 4-dimetylamino-pyridin. Reaksjonsb1and ingen ble omrørt ved romtemperatur. Ved slutten av tidsrommet 24 timer ble noen få dråper av HOAc tilsatt, og reaksjonsb1 and ingen ble omrørt i ytterligere 15 min. DCU ble filtrert fra, filtratet ble inndampet til tørrhet under redusert trykk. Den oljeaktige rest som således ble oppnådd, ble oppløst i EtOAc, og løsningen ble avkjølt natten over. Mer DCU ble filtrert fra. Filtratet ble deretter vasket med 0,1 N HC1 (3x), H^O (3x), 0,1 N NaOH (3x), rb-O (3x) og tørket over vannfritt Na^SO*. Løsningen ble inndampet til tørrhet slik at man fikk en klar olje. Oljen ble utsatt for sub 1 imer ing ved 100<C>>/G,1 mm i 5 timer. Den oljeaktige rest ble krystallisert ut fra heksan; smp. 72- 74", utbytte: 11,6 g (75 %), 250 MHz NMR (CDC1.3, ppm) 1,37 (d, 3H, J=7,35 Hz, 13-CR», i Ala), 1,65 (s, 6H, adamantyl alifatiske protoner av forbindelsene 4, 6 og 10), 2,09 (s, 6H, 1-adamantyl alifatiske protoner av forbindelsene 2, 8 og 9), 2,16 (s, 3H, 1-adamantyl alifatiske protoner av forbindelsene 3, 5 og 7), 4,23 (m, 1H, a-H av Ala), 5,09 (s, 2H, Ar-CH^-O-), 5,32 (br.d, amid-proton), 7,33 (s, 5H, ArHs).
D- a 1an in- 1- adamantyleste rhyd rok1 or id ( 15)
N-benzyloksykarbonyl-D-a1 an in-1-adamantyles ter (7,35 g,
20,6 mmol) ble oppløst i 100 ml MeOH og 14,5 ml 1,25N HCl/eter. Løsningen ble hydrogenert over 1,09 g av 10 % Pd/C ved 40 psi i en Parr-apparatur ved romtemperatur i 40 min. Løsningen ble filtrert gjennom en Celite-pute, og det klare filtrat ble inndampet til tørrhet slik at man fikk en gul olje, som ble krystallisert ut fra EtOAc. Et lysegult salt (4,2 g) ble oppnådd. Det rå produkt ble rekrystal1 i sert ut fra MeOH/EtOAc; utbytte: 7,85 g (72 %), smp. 218-219'<;>j (spaltes), 250 MHz NMR (CD3OD, ppm), 1,50 (d, 3H, J = 7,35 Hz, 3-CH3av Ala), 1,72 (m, 6H, 1-adamantyl alifatiske protoner av forbindelsene 2, 8 og 9), 2,18 (m, 9H, adamantyl alifatiske protoner), 3,95 (q,lH, J = 7,35 Hz, a-H av Ala).
N- benzvioksykarbonyl- DL- aminoma1onvl-( benzylester)- D- alanin- f enchvlester ( 16)
N-benzyloksykarbonyl-DL-aminoma1 onsyre-monobenzy1es ter (6,86 g, 20 mmol) ble oppløst i 40 ml DMF og avkjølt til -20'::,C . DCC (4,12 g, 20 mmol) og 1-hydroksybenzotr iazo1-hydrat (HOBt-H^O)
(2,70 g, 20 mmol) ble så tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt
ved -20'-'C i 30 min. D-a 1 an in-f enchy 1 es t e r hyd r ok 1 o r i d (5,23 g,
20 mmol) ble tilsatt, fulgt av tilsetning av N-metylmorfol in (2,2 ml, 20 mmol). Det ble omrert ved -20<<::>' til 15<t::>,C i 1,5 timer, 0c:, C i 2 timer og romtemperatur natten over. Flere dråper av HOAc ble tilsatt, og reaksjonsbland ingen ble omrørt i 30 min. til. Etter at DCU var fjernet ved filtrering, ble filtratet inndampet under høyt vakuum til tørrhet. Den således oppnådde olje ble oppløst i EtOAc, og løsningen ble avkjølt. Mer DCU ble filtrert fra. EtOAc-løsningen ble ekstrahert med H^O (2x), 0.1N HC1 (3x), H^O (3x), 0.1N NaOH (3x) og H20 (3x). Den organiske fase ble tørket over Na-^SO^. og inndampet til tørrhet. Oljen ble krystallisert ut fra heksan. Utbytte: 2,81 g, smp. 71-75<<::>,C, TLC på silikagel (benzen:EtOAc = 9:1), enkelt flekk (Cia + o-tolidin-dusj). Nye 5,16 g av produktet ble isolert ved kromatografi av morvæsken (rå vekt = 8,32 g) på en kolonne 360 g av silikagel med toluen: EtOAc =7,1 som elueringsmiddel (totalt utbytte =
72,5 %). 250 MHz NMR (CDC13, ppm), 0,74 og 0,76 (2 s, 3H, diastereomer, fenchy1-1-metyl), 1,02 og 1,04 (2 s, 3H, diastereomer fenchy1-3-metyl), 1,10 og 1,11 (2 s, 3H, diastereomer fenchy1-3-metyl), 1,18-1,73 (m, 7H, fenchyl alifatiske protoner), 1,43 (d, 3H, J = 7,0 Hz, G-CH3i Ala, delvis overlappet med fenchyl alifatiske protoner), 4,55 (q, 1H, J = 7,0 Hz, a-H i Ala, 4,97 (2br s, 1H, a-H i fenchyl), 5,12 (s, 2H, Ar-CH^-), 5,18-5,37 (m, 3H, Ar-CHæ overlappet med a-H i Ama), 6,03 (br d, 1H, amid-proton), 6,83 og 7,04 (2 br d, 1H, uretan H), 7,33 (s, 10H, 2 ArHS3) .
N- benzvioksykarbonyl- DL- aminomalony1-( benzyl es ter)- L- alanin- i sopropvlester ( 17)
( mellomprodukt for sammenlignende ikke- søte isomerer)
Denne forbindelse ble fremstilt ved samme DCC-HOBt-prosess som beskrevet for D-a 1anin-isomerene i en 30 mmol skala. Det rå produkt ble krystallisert ut fra 2-propanol, og 7,25 g av TLC-homogent materiale (på silikagel toluen: EtOAc = 4:1) ble oppsamlet. Filtratet, som viste 4 flekker på TLC i det samme 1øsningsmidde1 sys tem ble kromatografert på silikagel ved grad i ent-eluer ing med toluen til to luen:EtOAc = 5:1. Hovedfraksjonen som ble oppsamlet ble krystallisert ut fra 2-propanol; utbytte: 2,76 g i 3 omganger; totalt utbytte 10,0 g (73 %), smp. 130-133'<3>. 250 MHz NMR (CDCI3, ppm) 1,23 (m, 7,5 H, (CH3)æCH-Q-over 1appende med B-CH31Ala av én av 2-diastereomerene) , 1,37
(d, 1,5 H, G-CH3 i Ala av den annen diastereomer), 4,45 (m, 1H, a-H i Ala), 5,0 (m, 1H, a-H1isopropyl), 5,12 (s, 2H, Ar-CH^ i Z). 5,18-5,34 (m, 3H, Ar-CH^-O overlappende med a-H i Ala), 6,02 (br d, H, amid-H), 6,85 (br d, 1H, uretan-H), 7,33 (s, 10H, 2 ArHs) . Anal. beregnet for C^ÆaN^Oy : C, 63,15; H, 6,18; N, 6,14. Funnet: C, 62,98; H, 6,21; N, 5,96.
N- benzyloksykarbonyl- DL- am1norna 1onyl-( benzylester)-D- alanin- trans- 2- me tv1cykloheksylester ( 18)
N-benzyloksykarbonyl-DL-ami nornalonsyre-monobenzylester (0,343 g, 1 mmol) ble oppløst14 ml THF og avkjøt til -15<<::>>til
-2G'<;>'. DCC (0,206 g, 1 mmol) og N-hydroksysuks lnimid (0,115 g,
1 mmol) ble så tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt kaldt i 30 min. D-alan in-1 rans-2-metylcykloheksylester-p-toluensulf onat (0,358 g, 1 mmol) ble deretter suspendert i løsningen, fulgt av tilsetning av Et3N (0,14 ml, 1 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -15<<::>>til -20<<::>'12,5 timer, 0<<::>' i 1 time og romtemperatur natten over. En dråpe av HOAc ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 15 min. til. Etter at DCU var fjernet ved filtrering, ble filtratet inndampet til tørrhet slik at man fikk en klar olje. Et hvitt krystallinsk materiale ble oppnådd da oljen ble triturert med vann; utbytte 0,55 g; TLC på silikagel (toluennn:EtOAc = 4:1) ga 4 flekker. Det rå produkt ble renset på 25 g silikagel ved grad i ent-eluer ing med toluen til toluen:EtOAc
= 5:1. Hovedfraksjonen som ble oppsamlet ble identifisert ved NMR som det ønskede dipeptid. Oljen ble krystallisert ved triturering i heksan: utbytte 0,391 g, smp. 116-119™, 250 MHz NMR (CDCI3, ppm) 0,87 (2d, 3H, 2-metyl), 1,04-1,11 (m, 9H, cykloheksyl alifatiske protoner), 1,22 og 1,40 (m, 3H, f3-CH3av den 2-diasteromere Ala overlappende med cykloheksyl alifatiske protoner), 4,45 (m, 2H, a-H's i cyk1oheksano1 og Ala), 4,95 - 5,29 (m, 3H, a-H i Ama og Ar-CH^av benzylester), 5,12 (s, 2H, Ar-CHa- av Z), 6,03 (br.d, 1H, uretan H), 6,81, 6,98 (br d, 1H, amid H), 7,32 (s, 10H, 2 Ar-Ho).
N- benz v 1 oksykarbony 1 - DL- am morna 1 ony 1
( benzylester)- D- alan in- 1- adaman tyle ster ( 19)
Denne forbindelse ble fremstilt ved den kjente dicyklo-heksy1 karbodi imid-hydroksysuksmimid (DCC-HOSu)-prosess som er beskrevet for fremstillingen av forbindelse (18) ovenfor i en 20 mmol skala. Acetonitril var løsningsmidlet for denne kobling. Det rå produkt (11,2 g) ble renset på en 600 g si 11kage 1ko1 onne ved grad i ent-e1uer ing med toluen til toluen:EtOAc = 9:1. Den således oppnådde rå olje ble krystallisert ved skraping i heksan i et isvann-bad: utbytte 8,66 g (79 %). 250 MHz NMR (CDC13, ppm) 1,19 (d, 1,5 H, 3-CH-»:i Ala av én av de to d i as t e r eome r e r , J = 7,35 Hz), 1,35 (d, 1,5 H, G-CH3i Ala av den annen diastereomer J = 6,98 Hz), 1,62 (s, 6H, adamantyl alifatiske protoner av forbindelsene 4, 6 og 10), 2,07 (s, 6H, adamantyl alifatiske protoner av forbindelsene 2, 8 og 9), 2,16 (s, 3H, adamantyl alifatiske protoner av forbindelsene 3, 5 og 7), 4,23 (m, 1H, 0(-H av Ala), 5,09 (s, 2H, Ar-CH=-0- av Z), 5,17-5,30 (m, 3H, Ar-CH^-O- av benzylester overlappende med a-H i Ama), 7,32 (s, 10H, 2 A r H;»;) .
DL- aminomalonyl- L- alanin- i sop ropy1 es ter ( 20)
( sammenlignende ikke- søte isomerer)
Denne forbindelse ble fremstilt ved den metode som er beskrevet for D-alanin-isomerene. Det rå produkt ble rekrystal1 i sert ut fra MeOH: utbytte 83,5 mg (68 %), smp. 108-109°, 250 MHz NMR (CD30D, ppm) 1,25 (m, 6H, (CH3)=CH-0), 1,39 (m, 3H, 3-CH3 i Ala), 4,38 (2q, 1H, a-H i Ala), 4,99 (m, 1H, a-H i i sopropy1) .
Anal. beregnet for C^HiÆOb: C, 46,55; H, 6,95; N, 12,06. Funnet: C, 46,18; H, 7,02; N, 12,11.
DL- aminonra1onyl- D- a lanin- fenchyles ter ( 21) ( søt)
Denne forbindelse ble fremstilt ved den metode som er beskrevet for isopropy1 ester-ana1ogen. Det rå produkt ble rekrystal 11 sert ut fra MeOH-H^O: utbytte 0,513 g (67,5 %), 250 MHz NMR (CD30D, ppm) 0,80(m, 3H, fenchy1-1-CH3), 1,06 (m, 3H, fenchyl-2-CH3), 1,46 (m, 3H, 3-CH3 i Ala), 4,37 (m, 1H, a-H i Ala), 4,51 (m, 1H, a-H i fenchylalkohol).
Beregnet for Ci ^H^N^Os: C, 58,88; H, 8,03; N, 8,58. Funnet C, 58,38; H, 8,21; N, 8,38.
DL- aminoma1ony1- D- a 1anin- 1- adamantyl
estercitrat ( 22) ( søt)
N-benzyloksyka rbony1-DL-aminonralonyl-(benzylester)-D-alan i n-1-adamanty1ester (0,523 g, 0,955 mmol) og sitronsyre (0,414 g, 0,955 mmol) ble oppløst i 11 ml MeOH og hydrogenert over 54 mg 10 % Pd/C ved 40 psi i 7-10 min. Den metanoliske løsning ble deretter filtrert gjennom en Celite-pute slik at man fikk et farveløst filtrat, som ble konsentrert til 2-3 ml og utfelt med eter: utbytte 0,350 g (73 %), smp. 108-112°, 250 MHz NMR (CD30D, ppm) 1,39 (m, 3H, B-CH3 av Ala), 1,71 (s, 6H, adamantyl alifatiske protoner fra forbindelsene 4, 6 og 10), 2,13 (s, 9H, adamantyl alifatiske protoner), 2,72, 2,92 (2d, 4H, -CH^-COOH), 4,32 (m, 1H, a-H i Ala). NMR indikerte at 2 mol av dipeptidene kombinerer seg med 1 mol sitronsyre.
Beregnet for C3BHSi(!>N^0i 7 : C, 54,28; H, 6,71; N, 6,66. Funnet, C, 54,55; H, 7,00; N, 6,80.
DL- aminoma1onvl- D- alan in- 1 rans- 2-metylcyk1oheksvlestercitrat ( 23) ( søt)
N-benzyloksykarbonyl-DL-aminoma1ony1-(benzylester)-D-alan in-tr ans-2-mety1cyk1oheksyles ter (99,8 mg, 0,195 mmol) ble oppløst i 6 ml MeOH og hydrogenert over 10,5 mg av 10 % Pd/C ved atmosfære-trykk17 min. inntil det ikke ble forbrukt mer H=. Løsningen ble filtrert gjennom en Celite-pute, og det farveløse filtrat ble inndampet til tørrhet under redusert trykk slik at man fikk et hvitt skum. Det rå produkt ble hurtig oppløst i 6 ml EtOH og sitronsyre tilsatt. Løsningen ble inndampet til tørrhet slik at man fikk et hvit masse. Det rå produkt ble rekrysta11 i sert ut fra EtOH-eter. 60 MHz NMR-spektrum for denne forbindelse indikerte at 2 mol av dipeptidet kombinerer seg med ett mol sitronsyre, smp. 71-75'<::>.>250 MHz NMR (CD30D, ppm) av de frie dipeptider: 1,11-1,92 (m, 9H, cyk1oheksano1 alifatiske protoner), 1,41 (d, 3H, 8-CH3, i Ala delvis overlappende med de alifatiske protoner, J = 7,35 Hz), 4,12 (m, 2H, a-H i Ala og a-H i trans-2-metyl-cykloheksanol).
D- a 1 aninamidhvdrokior id ( 24)
D-a 1 an in-mety1 esterhydrok 1or id [M. Zaoral et al, Collectxon Czech, Chem. Commun . , 3_2, 843 ( 1967)] omdannes til t i 11 e 1-ami de t ved å følge den metode CR.W. Chambers og F.H. Carpenter, J. Am. Chem. Soc . , 77_, 1522 ( 1955)] som er rapportert for L-a1 aninamid-hydroklond [J.K. Chang et al, J. Med. Chem., 14, 484 (1971)].
N- benzyloksykarbonyl- P- alanin- isopropylamid ( 25)
N-benzyloksykarbonyl-D-alanin (2,232 g, 10 mmol) og HOBt-hydrat (1,53 g, 10 mmol) oppløses i 40 ml friskt destillert DMF og avkjøles i et isvannbad. DCC (2,06 g, 10 mmol) tilsettes. Reaksjonsb1 and ingen omrøres kaldt i 15 min. , isopropylamin
(0,85 ml, 10 mmol) tilsettes deretter. Det røres kaldt i 2 timer og ved romtemperatur natten over. HOAc (noen få dråper) tilsettes, og reaksjonsb1 and ingen røres ved romtemperatur i 15 min. til. Det filtreres for fjerning av DCU, og filtratet sjikt-dannes med 50 ml EtOAc og 80 ml H-,?0. Fasene separeres, og vann-fasen ekstraheres med 50 ml EtOAc. Den oppsamlede EtOAc-ekstrakt vaskes med H2:0, 0,1 N HC1 (3x) , H^O ( 3x) , 0,1 N NaOH (3x), H^O (3x), tørkes over vannfri Na^SO* og inndampes til tørrhet. Det rå produkt renses ved væskekolonne-kromatografi på silikagel under eluering med toluen/EtOAc-blandinger.
D- alanin- isopropylamid ( 26)
N-benzyloksykarbonyl-D-a1an in-isopropy1 amid ( 1,322 g,
5 mmol) hydrogeneres i 20 ml MeOH over 100 mg 10 % Pd/C i en Parr-apparatur ved 40 psi og romtemperatur til det ikke forbrukes mer hydrogen. Den metanoliske suspensjon filtreres gjennom en Celite-pute for fjerning av katalysatoren, og filtratet inndampes til tørrhet. Det ønskede produkt renses ved omdannelse av det til et krystallinsk aminosyre-amidsalt .
N- benzyloksykarbonyl- D- alanin- 1- adamantylamid ( 27)
Ti11e1 forbinde1sen fremstilles av N-benzyloksykarbonyl-D-alanin og 1-adamantanamin ved anvendelse av den vanlige DCC-HOBt-metode som er beskrevet ovenfor.
D- a 1an in- 1- adamantylamid ( 28)
N-benzy1oksykarbonyl-D-alanin-1-adaman ty1 ami d hyd rogenere s ved den fremgangsmåte som er beskrevet for i sopropylarnidet .
N- benzyloksykarbonyl- DL- aminorna1onvl-( monobenzyl ester)- D- alan in- i sop ropy1 amid ( 29)
N-benzyloksyka rbony1-DL-aminonra 1 onsyre monobenzy1 es te r (0,156 g, 0,434 mmol) oppløses i 1,5 ml DMF. Løsningen avkjøles til -15<<r>' til -20<<::>>og behandles deretter med DCC (94 mg,
0,455 mmol) og 1-hydroksybenzotr iazolhydrat (62 mg, 0,46 mmol). Reaks jonsblandingen omrøres ved -15<c:>' til -20<c:>' i 30 min. D-alan in-isopropy1-amidhydrok 1 or id (76 mg, 0,46 mmol) tilsettes deretter, fulgt av N-metylmorfol in (50 ul, 0,46 mmol). Reaks jonsb 1 and ingen omrøres ved -15<<;:>>til -20,<::>' i 1,5 timer, ved 0<<::>>i 1 time og ved romtemperatur i 8 timer. Reaksjonsb1and ingen filtreres for fjerning av DCU, og filtratet befris for løsnings-middel under høyt vakuum. Resten taes opp i EtOAc og filtreres. Et0Ac-f11tratet vaskes deretter med 0,1 N HC1 (3x), H20 (3x),
0,1 N NaOH (3x), H:.--0 (3x), tørkes over vannfritt Na2S0« og inndampes til tørrhet. Det rå produkt kromatograferes deretter på silikagel ved eluering med to luen/EtOAc-bland inger. Produktet som inneholder fraksjon identifisert ved NMR, utfelles fra EtOAc, MeOH og eter-b1 and inge r.
N- benzyloksykarbonyl- DL- aminorna1onvl-( monobenzylester)- D- alan in- 1- adamantylamid ( 30)
Denne forbindelse fremstilles ved den vanlige DCC-mediat-prosess som er beskrevet for isopropy1-ana1ogen. Acetonitril og THF kan også anvendes som løsningsmiddel for denne kobling. Det rå produkt renses på en si 1 ikage 1-ko1 onne ved eluering med toluen/EtOAc-b1and inger. Det således oppnådde produkt krystalliseres ut fra heksan eller utfelling fra EtOAc med eter eller heksan.
N- benzvloksykarbonyl- DL- aminoma1onvl-( monobenzvles ter)- D- alanamid ( 31)
N-benzyloksykarbonyl-DL-aminoma1 onsyre-monobenzy1ester (0,343 g, 1 mmol) oppløses i 4 ml THF og avkjøles til -15c:'til
-20,::'. DCC (0,206 g, 1 mmol) og N-hydr oksysuks inimid (0,115 g,
1 mmol) tilsettes deretter. Reaksjonsb1 and ingen omrøres kaldt i 30 min. D-alaninamidhydroklorid (0,124 g, 1 mmol) tilsettes deretter, fulgt av Et3N (0,14 ml, 1 mmol). Reaksjonsbland ingen omrøres ved -15<<::>' til -20'<::>>i 2,5 timer, 0,<::>' i 1 time og romtemperatur natten over. Noen få dråper HOAc tilsettes. Reaksjonsblandingen omrøres i 15 min. til. Etter DCU-fjerning ved filtrering inndampes filtratet til tørrhet. Det rå produkt renses ved kromatografi på silikagel ved eluering med toluen/EtOAc-blandinger. Den fraksjon som identifiseres ved NMR som det ønskede produkt krystalliseres eller felles ut fra heksan, EtOAc, e ter-b1and inger.
DL- ami norna 1 onyl - D- alanmamid ( 32)
N-benzyloksykarbonyl-DL-aminoma1onyl-(benzylester)-D-alan in-amid (4,13 g, 10 mmol) hydrogeneres i 40 ml MeOH over 400 mg 10 % Pd/C i en Parr-apparatur ved romtemperatur og 40 psi. Produkter krystalliseres ut fra a 1koho1er/diety1eter.
DL- aminoma1onvl- D- alanin- i sopropylamid ( 33)
N-benzyloksykarbonyl-DL-ami nornalonyl-(benzylester)-D-alanin-i sopropy1ester hydrogeneres ved den fremgangsmåte som er beskrevet for D-alaninamid-analogen. Produktet renses på 1ignende måte.
DL- aminomalonyl- P- alanin- l- adamantvlamid ( 34)
Dette materiale fremstilles ved samme hydrogenolyse som er beskrevet for D-alaninamid-analogen.
I I . Smakstest
Mange kunstige søtemidler har ikke en behagelig sukrose-lignende smak som er fri for ubehagelig bismak og ettersmak. Disse forbindelser, inklusive mange av peptidene, oppviser bismak som for eksempel er peppemynteaktig, eller lakrisaktig, eller som til og med er bitter eller med isin-11gnende. Andre oppviser ettersmak, for eksempel en metallisk smak. Atter andre søte-midler oppviser en vedvarende søt smak. Ulik mange kunstige søtemidler oppviser den isopropy1 es ter som er beskrevet i denne smakstest en uvanlig sukrose 1 ignende søt smak som er fri for ubehagelig bi- og ettersmak. I sopropy1 esteren oppviser hurtig anslag og hurtig forsvinning av søtsmak, meget lik sukrose.
Ved å følge etablerte metoder ble det satt sammen en srnaksjury som ble trenet opp. Forbindelsen ble smakt ved konsentrasjoner av 0,021, 0,07 og 0,21 % vekt/vol (0,86, 3,0 og 9,0 mM) mot aspartamkonsentrasjoner på 0,01, 0,03, 0,1 og 0,3 % vekt/vol (0,34, 1,0, 3,4 og 10 mM) og sukrose 2, 4, 9, 18 og 36 % vekt/vol (62, 125, 250, 500 og 1000 mM). De normaliserte veide resultater for isop ropy1esteren, sukrosen og aspartamet er gitt i tabell I og vist grafisk i figur 2.
Både isopropylesteren og aspartam-1øsningene ble bedømt som søte og behagelige av smaksjuryen. De relative potenser av søte-midlene er uttrykt som den resiproke verdi av de konsentrasjoner som kreves for en karakter på 50 på søthetsska1aen. Basert på sukrose = 1,0, ville søthetspotensen til den foretrukne isopropylester være 58 og for aspartam 126 på en vektskåla.
Siden potens-respons1 injene er tilnærmet parallelle, er ovenstående potenssammen 1 igningsmetode gyldig.
III. Stabiiitetsstudier
Den mest signifikante begrensning av de få peptider som hittil er rapportert å ha gode smakskvaliteter er deres dårlige stabilitet i vandig løsning. Disse peptider har karboksyl-terminal L-aminosyreestere som krever for søthet at esteren lages av en lav-alkylalkoho1, for det meste metanol. Slike peptidestere er spesielt labile overfor hydrolyse og cyklisering i vandig løsning, hvilket resulterer i utvikling av ikke-søtet produkter. Imidlertid resulterer dannelsen av peptidestere av hindrede alkoholer, for eksempel isopropy1a1koho1, for disse karboksyl-terminal L-aminosyrepeptider i peptidestere med svært redusert eller ingen søt smak. Således er, for karboksyl-terminal L-aminosyred ipeptidestere, søt smak og dårlig stabilitet i løsning beslektede egenskaper.
Den uventede oppdagelse av den søte smak hos karboksyl-termina1 D-aminosyredlpeptidesteren, D,L-aminorna1onyl-D-alanin-isopropy1 es teren, tilveiebrakte en intens peptidester-søte-midde1-oppvisende stabilitet som er markert overlegen i forhold til teknikkens stand. For eksempel i løsning med pH 3,5 viste i sopropy1 esteren mindre enn 5 % nedbrytning etter 36 dager ved omgivelsestemperatur, mens aspartam etter samme tidsrom var mer enn 50 % nedbrutt til både mer og mindre polare produkter. Denne tidobbelte forbedring i stabilitet er spesielt signifikant hva angår dens anvendelse i sammenlignbart sure soft drinks. Videre, etter 36 dager i puffer pH 7,4 var i sopropy1 esteren 70 % nedbrutt mens etter bare 1/4 av nevnte tidsrom (9 dager) aspartam var 100 % nedbrutt. Disse resultater viser at i nøkke 1 spø r små1et stabilitet hos peptidsøtemid1er til isopropy1 esteren markerte forbedringer i forhold til teknikkens stand.
Stabilitet ble undersøkt i vandig løsning ved forskjellige pH-verdier. Løsninger (1 vekt/vol.%) ble fremstilt i 0,05 M fosfatpuffer justert til pH 7,4 og pH 3,5. Lagring ved omgivelsestemperatur i 36 dager ble overvåket ved HPLC-analyse (Waters radial-pak revers fase C-8 kolonne, 25 % CH3CN, 0,05 % TFA/Hs-0 eluer ingsmiddel , 210 nm U . V .-påvi sn ing ) . Aspartam ble undersøkt på lignende måte for sammenligningsformål.
IV. Ames/ Salmonel1a- mutagen i s i te t s- analys e
I sopropy1esteren ble testet med hensyn på mutagent potensiale i Ames-analysen under anvendelse av: 1) fem Salmonella-stammer som påviser rammeskift-muuutagener eller basepar-substi tusjonsmutagener, 2) både nærvær og fravær av pattedyr-S9-mikrosomal 1ever-f raks jon som den metaboliske aktivator, som di ff rens i erer promutagener fra di rekte-virkende mutagener, 3) fem dosenivåer (3000, 300, 3, 0,3 ug/plate), og 4) tre plater pr. dose. Forbindelsen ble også testet med hensyn på toksisitet, med og uten S9-aktiver ing, ved de to høyeste doser. Forbindelsen viste hverken mutagent potensial eller toksisitet for noen av disse tester. Positive kontro11pr øver og spontane bakgrunnsrevertanter var innen akseptable områder.
V. Akutt toksisitet- testing
I sopropy1 es teren ble vurdert på akutt oralt toksisitet i sveitsiske hannmus. Testingsparametrene var som følger: hver testgruppe besto av seks mus (20-30 gram hver); isopropy1es teren ble administrert i en vandig løsning som en enkelt oral dose av 100 mg/kg og 300 mg/kg; to 1øsningsmiddelkontroi 1 er ble også administrert; musene ble igjen gitt for 2 timer etter admini-strering av prøven.
Kroppsvekter ble målt på dag -3, 0, +7 og +14. Fysiologiske parametre ble undersøkt hele første dag, deretter tre ganger pr. dag i den første uke og to ganger pr. dag i uke to. Blodserum-analyser med hensyn på urea-nitrogen og alanin-aminotransferase-aktiviteter ble målt på dag -3 og dag +14. På dag 14 ble en gross-nekrops i utført på hver mus.
Resultatene fra denne akutte he 1dyr-1oksisitetsstudie indikerte at det ikke var noen toksiske effekter under de testede betingelser. De toksikologiske parametre var alle negative, og ingen oppførsels- eller farmakologiske effekter ble observert. Det var ingen overdreven eting eller drikking under studien. Vektene til alle testdyrene under den 14 dager lange studie var normale. Ingen toksiske effekter ble påvist i nekropsien.
Blodprøver ble tatt fra nålevenen for biokjemisk testing av serumprøver. Denne metode eliminerte praktisk talt hemolyserte prøver. Hverken forhøyet serum-urea-nitrogen eller forhøyet a1anin-aminotransferase-aktivitet ble påvist i post-studieprøver fra enten 100 mg/kg- eller 300 mg/kg-dosene. Disse analyser viste fravær av henholdsvis nyre- og 1 ever-toks isitet.
Derfor viser isopropy1 esteren seg å være ikke-toksisk i alle doser som ble testet, likeledes bestemt ved biokjemiske aksep tans-kr i ter i er.
VI . Samråen 11 gnende smakstest
For å demonstrere den signifikante distinksjon mellom forbindelsene i henhold til foreliggende oppfinnelse som har D-konfigurasjon og for deres isomer som har L-konfiguras jon, ble følgende forbindelser testet:
Sukrose
Aspar tam
Forbindelse (8) - D,L-ammorna1ony1-D-a 1 anin-i sopropy1 ester Forbindelse (21) - D,L-aminonra1ony1-D-a1 anin-fenchy1 es ter Forbindelse (20) - D,L-aminoma1ony1-L-a1an in-1sopropy1 ester
Forbindelsene ble oppløst i destillert vann ved de konsentrasjoner som er spesifisert i tabell 2. Det laget løsninger som ble holdt natten over i kjøleskap. Den følgende dag ble de hellet ned i individuelle inndelte plastbegre (10 ml pr. beger) og tillatt å oppvarmes til romtemperatur. Det ble satt sammen en srnaksjury, og testingen begynte samme dag. Testing og vurdering ble gjort ved den standard-protokol1 som er utviklet av Dr. Robert Gesteland fra Taste and Smell Consulting Group, Inc.
Den første løsning som det ble smakt på (referanse-standard for juryen) var 0,25 M sukrose. Andre løsninger ble utprøvd på vilkårlig måte. Den vilkårlige rekkefølge ble brukt som følger: i. En rangert liste av forbindelsene og konsentrasjonene ble laget (26 løsninger i alt).
ii. 0,25 M sukrose ble betegnet med 1.
iii. En standard tabell av vilkårlige tall ble anvendt, hvor tallene ble gruppert som tosifrede tall. Et punkt i tabellen var vilkårlig (b1indpeking). Den første løsning i listen ble gitt det første vilkårlige nummer i sekvensen (lest høyre mot venstre, ovenfra og ned) som er mellom 2 og 26. Løsning nr. 2 på listen ble gitt det neste vilkårlige nummer i sekvensen mellom 2 og 26, osv. Gjentatte nummer ble ignorert. iv. Løsninger ble deretter merket A (for nummer 1) B (for vilkårlig nummer 2), (C-Z). v. Jurymedlemmene ble instruert å smake på løsningene i alfabetisk rekkefølge.
Ved hjelp av Taste and Smell Consulting Group, Inc. ble smaksjury-med1emmene trenet og testet med hensyn på sin evne til å diskriminere sukrose-1øsn inger av varierende konsentrasjoner. Som oppsummering kan det angis at alle 9 jurymedlemmer hadde akseptable kor re1 asjonskarakterer. Deres resultater var i god overensstemmelse med dem som tidligere er blitt rapportert i lignende typer studier. For test-seriene var korrelasjonene for hvert jurymedlem hva sukrose og aspartam angår, akseptable, og det var også de totale resultater som ble oppnådd når man tok gjennomsnittet av enkeltkarakterer. Resultatene for smaksjuryen er angitt i tabell 2, hvor tallene i parentes representerer standard-fei 1verd i ene for antallet ovenfor.
Basert på de resultater som er vist i tabell 3, er en dose-respons-kurve for sukrose, forbindelse (8) og forbindelse (20) og samme illustrert i figur 2.
Fra en oversikt av figur 3, såvel som de resultater som er gjengitt i tabell 2, er det tydelig at forbindelse (8) (iso-proylesteren av D-konfigurasjon i henhold til foreliggende oppfinnelse) er søt, mens den tilsvarende isomer av L-konfigurasjon, forbindelse (20), ikke er søt.
Forbindelsene (21), (22) og (23) ble også funnet å være søte .
Selv orn bare noen få eksempelvise utferelsesformer av foreliggende oppfinnelse er beskrevet i detalj ovenfor, vil fagmannen på området lett innse at mange modifikasjoner er mulig i de eksempelvise utførelsesformer uten vesentlig å avvike fra den nye lære og fordelene ved foreliggende oppfinnelse. Følgelig er alle slike modifikasjoner ment å være inkludert innen omfanget av foreliggende oppfinnelse slik den er definert i de følgende krav.
Claims (7)
1. Aminorna 1onyl-D-a 1 anin-der ivater med følgende formel:
og farmasøytisk akseptable salter derav, hvor X er -NHR eller -OR idet R er alkyl med 3-10 karbonatomer , eller -NH^ .
2. Derivat som angitt i krav 1, karakterisert ved at R er isopropyl.
3. Materiale som omfatter kombinasjonen av minst ett aminoma1ony1-D-a 1anin-der ivat med følgende formel:
eller farmasøytisk akseptable salter derav, hvor X er -NHR eller
-OR idet R er alkyl med 3 til 10 karbonatomer eller -NH3 , oppløst i et vandig medium.
4. Materiale som angitt i krav 3, karakterisert ved at R er isopropyl.
5. Materiale som angitt i krav 3, karakterisert ved at det vandige medium er en drikk.
6. Fremgangsmåte for søtning av en drikk, karakterisert ved å oppløse deri minst ett aminomalonyl-D-alanin-derivat som har følgende formel:
idet minst én forbindelse er oppløst i en mengde som er tilstrekkelig til å bevirke setningen.
7. Fremgangsmåte som angitt i krav 6, karakterisert ved at R er isopropyl.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/651,859 US4564528A (en) | 1984-09-18 | 1984-09-18 | Aminomalonyl alanine compounds and use as dietary sweeteners |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO861964L true NO861964L (no) | 1986-05-16 |
Family
ID=24614499
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO861964A NO861964L (no) | 1984-09-18 | 1986-05-16 | Aminomalonyl-alaninforbindelser, samt anvendelse av dem som diett-soetemidler. |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4564528A (no) |
| EP (1) | EP0195047A4 (no) |
| JP (1) | JPS62500381A (no) |
| KR (1) | KR870700294A (no) |
| AU (1) | AU603052B2 (no) |
| CA (1) | CA1259448A (no) |
| DK (1) | DK225586D0 (no) |
| FI (1) | FI862059A (no) |
| IL (1) | IL76401A (no) |
| NO (1) | NO861964L (no) |
| NZ (1) | NZ213515A (no) |
| WO (1) | WO1986001690A1 (no) |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5175009A (en) * | 1991-10-17 | 1992-12-29 | Wm. Wrigley Jr. Company | Stabilized chewing gum containing acidified humectant |
| US5286509A (en) * | 1992-06-22 | 1994-02-15 | The Coca-Cola Company | L-aspartyl-D-α-aminoalkanoyl-(S)-N-alpha-alkylbenzyl amides useful as artificial sweeteners |
| WO2004075663A1 (en) * | 2003-02-26 | 2004-09-10 | Firmenich Sa | Aminoacid derivatives of dicarboxylic acids as flavor ingredients |
| US20050233058A1 (en) * | 2004-01-29 | 2005-10-20 | Eric Frerot | Aminoacid derivatives of dicarboxylic acids as flavor ingredients |
| US8945652B2 (en) * | 2005-11-23 | 2015-02-03 | The Coca-Cola Company | High-potency sweetener for weight management and compositions sweetened therewith |
| US8940350B2 (en) * | 2005-11-23 | 2015-01-27 | The Coca-Cola Company | Cereal compositions comprising high-potency sweeteners |
| US20070116833A1 (en) * | 2005-11-23 | 2007-05-24 | The Coca-Cola Company | High-Potency Sweetener Composition with Calcium and Compositions Sweetened Therewith |
| US8377491B2 (en) * | 2005-11-23 | 2013-02-19 | The Coca-Cola Company | High-potency sweetener composition with vitamin and compositions sweetened therewith |
| US8435587B2 (en) * | 2005-11-23 | 2013-05-07 | The Coca-Cola Company | High-potency sweetener composition with long-chain primary aliphatic saturated alcohol and compositions sweetened therewith |
| US9101160B2 (en) * | 2005-11-23 | 2015-08-11 | The Coca-Cola Company | Condiments with high-potency sweetener |
| US8524303B2 (en) * | 2005-11-23 | 2013-09-03 | The Coca-Cola Company | High-potency sweetener composition with phytosterol and compositions sweetened therewith |
| US20070116829A1 (en) * | 2005-11-23 | 2007-05-24 | The Coca-Cola Company | Pharmaceutical Composition with High-Potency Sweetener |
| US8435588B2 (en) * | 2005-11-23 | 2013-05-07 | The Coca-Cola Company | High-potency sweetener composition with an anti-inflammatory agent and compositions sweetened therewith |
| US20070116839A1 (en) * | 2005-11-23 | 2007-05-24 | The Coca-Cola Company | High-Potency Sweetener Composition With C-Reactive Protein Reducing Substance and Compositions Sweetened Therewith |
| US8367138B2 (en) * | 2005-11-23 | 2013-02-05 | The Coca-Cola Company | Dairy composition with high-potency sweetener |
| US8524304B2 (en) * | 2005-11-23 | 2013-09-03 | The Coca-Cola Company | High-potency sweetener composition with probiotics/prebiotics and compositions sweetened therewith |
| US8940351B2 (en) * | 2005-11-23 | 2015-01-27 | The Coca-Cola Company | Baked goods comprising high-potency sweetener |
| JP2009517022A (ja) * | 2005-11-23 | 2009-04-30 | ザ・コカ−コーラ・カンパニー | 改善された経時的プロファイル及び／又は香味プロファイルを有する天然高甘味度甘味料組成物、その配合方法、および使用 |
| US8512789B2 (en) * | 2005-11-23 | 2013-08-20 | The Coca-Cola Company | High-potency sweetener composition with dietary fiber and compositions sweetened therewith |
| US20070116800A1 (en) * | 2005-11-23 | 2007-05-24 | The Coca-Cola Company | Chewing Gum with High-Potency Sweetener |
| US8017168B2 (en) * | 2006-11-02 | 2011-09-13 | The Coca-Cola Company | High-potency sweetener composition with rubisco protein, rubiscolin, rubiscolin derivatives, ace inhibitory peptides, and combinations thereof, and compositions sweetened therewith |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US29682A (en) | 1860-08-21 | Feed-motion foe | ||
| US3492131A (en) * | 1966-04-18 | 1970-01-27 | Searle & Co | Peptide sweetening agents |
| US3475403A (en) * | 1967-01-20 | 1969-10-28 | Searle & Co | Aspartic acid containing dipeptide lower alkyl esters |
| GB1299265A (en) * | 1970-06-04 | 1972-12-13 | Ici Ltd | (alpha-CARBOXY)GLYCYL DIPEPTIDE DERIVATIVES |
| JPS4828068B1 (no) * | 1970-06-24 | 1973-08-29 | ||
| US3753739A (en) * | 1970-11-05 | 1973-08-21 | Alberto Culver Co | Low calorie dry sweetener composition |
| JPS4828068U (no) * | 1971-08-09 | 1973-04-05 | ||
| US4029701A (en) * | 1972-03-30 | 1977-06-14 | General Foods Corporation | Sweetening with hydrohalide salts of dipeptide sweeteners |
| JPS4913372A (no) * | 1972-06-01 | 1974-02-05 | ||
| US4059706A (en) * | 1974-03-07 | 1977-11-22 | General Foods Corporation | Spray-dried L-aspartic acid derivatives |
| US4411925A (en) * | 1980-01-21 | 1983-10-25 | Pfizer Inc. | Branched amides of L-aspartyl-d-amino acid dipeptides |
| US4564548A (en) * | 1984-11-21 | 1986-01-14 | Jacob Fast | Cover strip for display shelf |
-
1984
- 1984-09-18 US US06/651,859 patent/US4564528A/en not_active Expired - Fee Related
-
1985
- 1985-09-15 IL IL76401A patent/IL76401A/xx unknown
- 1985-09-17 NZ NZ213515A patent/NZ213515A/xx unknown
- 1985-09-18 CA CA000491073A patent/CA1259448A/en not_active Expired
- 1985-09-18 AU AU48619/85A patent/AU603052B2/en not_active Ceased
- 1985-09-18 US US06/893,551 patent/US4714619A/en not_active Expired - Fee Related
- 1985-09-18 WO PCT/US1985/001764 patent/WO1986001690A1/en not_active Application Discontinuation
- 1985-09-18 EP EP19850904743 patent/EP0195047A4/en not_active Withdrawn
- 1985-09-18 JP JP60504248A patent/JPS62500381A/ja active Pending
-
1986
- 1986-05-15 DK DK225586A patent/DK225586D0/da not_active Application Discontinuation
- 1986-05-16 NO NO861964A patent/NO861964L/no unknown
- 1986-05-16 FI FI862059A patent/FI862059A/fi not_active Application Discontinuation
- 1986-05-17 KR KR860700276A patent/KR870700294A/ko not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI862059A0 (fi) | 1986-05-16 |
| KR870700294A (ko) | 1987-12-28 |
| DK225586A (da) | 1986-05-15 |
| CA1259448A (en) | 1989-09-12 |
| US4564528A (en) | 1986-01-14 |
| EP0195047A4 (en) | 1988-05-31 |
| NZ213515A (en) | 1989-06-28 |
| AU4861985A (en) | 1986-04-08 |
| FI862059A (fi) | 1986-05-16 |
| WO1986001690A1 (en) | 1986-03-27 |
| DK225586D0 (da) | 1986-05-15 |
| US4714619A (en) | 1987-12-22 |
| AU603052B2 (en) | 1990-11-08 |
| EP0195047A1 (en) | 1986-09-24 |
| JPS62500381A (ja) | 1987-02-19 |
| IL76401A0 (en) | 1986-01-31 |
| IL76401A (en) | 1989-07-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO861964L (no) | Aminomalonyl-alaninforbindelser, samt anvendelse av dem som diett-soetemidler. | |
| EP0128654B1 (en) | Gem-diaminoalkane derived sweeteners | |
| Tada et al. | L-Ornithyltaurine, a new salty peptide | |
| NO821037L (no) | Fremgangsmaate ved fremstilling av n-substituerte amidoaminosyrer | |
| EP0009010B1 (en) | Bradykinin inhibiting tripeptide derivatives, process for their preparation and pharmaceutical preparations containing them | |
| Orlowski et al. | Study of benzhydrylamine-type polymers. Synthesis and use of p-methoxybenzhydrylamine resin in the solid-phase preparation of peptides | |
| US3821188A (en) | Proline and pyroglutamic acid containing tripeptides | |
| US4623639A (en) | Peptide derivatives | |
| Andruszkiewicz et al. | Anticandidal properties of N3-(4-methoxyfumaroyl)-L-2, 3-diaminopropanoic acid oligopeptides | |
| JPH10182613A (ja) | テトラヒドロイソキノリン誘導体 | |
| EP3625243B1 (en) | Tailored cyclodepsipeptides as potent non-covalent serine protease inhibitors | |
| NO158379B (no) | Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk aktive nitroalifatiske forbindelser. | |
| CA1059994A (en) | Histidine derivatives | |
| DK149110B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af bestatin eller et analogt dipeptid samt alfa-hydroxy-beta-aminocarboxylsyrer til brug som udgangsforbindelser herfor | |
| EP1140795A1 (en) | N-3, 3-dimethylbutyl-l-aspartic acid and esters thereof, the process of preparing the same, and the process for preparing n-[n-(3,3-dimethylbutyl)-l-alpha-aspartyl)-l-phenylalanine-1-methylester therefrom | |
| Pajpanova et al. | Canavanine derivatives useful in peptide synthesis | |
| HU200985B (en) | Process for production of active esthers of carbonic acid | |
| Sato et al. | Studies of peptide antibiotics. XXXV. Synthesis of gramicidin S by a fragment solid-phase method. | |
| US5190921A (en) | Amino acids and peptides having a modified tyrosine residue, their preparation and their application as medicaments | |
| Hooper et al. | 606. Polypeptides. Part II. The preparation of some protected peptides of cysteine and glycine | |
| Edwards et al. | Structure-activity relationships of cyclic and acyclic analogues of the phytotoxic peptide tentoxin | |
| Cheeseright et al. | Azasulfonamidopeptides as peptide bond hydrolysis transition state analogues. Part 1. Synthetic approaches | |
| US4043994A (en) | New pentapeptides and methods for their production | |
| Kondo et al. | Studies of Peptide Antibiotics. VI. Syntheses of Cyclic Penta and Decapeptides with a Glycyl-l-ornithyl-l-leucyl-d-phenylalanylglycyl Sequence | |
| US4735651A (en) | Novel phytotoxic and plant growth regulating oligopeptide |