NO852313L - Fremgangsmaate til isolering og rensing av alfa-interferoner. - Google Patents
Fremgangsmaate til isolering og rensing av alfa-interferoner.Info
- Publication number
- NO852313L NO852313L NO852313A NO852313A NO852313L NO 852313 L NO852313 L NO 852313L NO 852313 A NO852313 A NO 852313A NO 852313 A NO852313 A NO 852313A NO 852313 L NO852313 L NO 852313L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- interferons
- butanol
- interferon
- aqueous
- phase
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 22
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 title 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 31
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 30
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims description 22
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 21
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 claims description 19
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims description 9
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000009826 distribution Methods 0.000 claims description 7
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 claims description 5
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 4
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 claims description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 claims description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 claims description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 6
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000005377 adsorption chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- -1 alkyl sulphate Chemical compound 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001064 anti-interferon Effects 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000001273 butane Substances 0.000 description 1
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000005289 controlled pore glass Substances 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Polymers 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 150000002731 mercury compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N n-butane Chemical compound CCCC IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N n-pentane Natural products CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/555—Interferons [IFN]
- C07K14/56—IFN-alpha
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Ultra Sonic Daignosis Equipment (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
Allerede i 1956 oppdaget Isaacs og Lindemann interferon som et indirekte hemmestoff av den intracellulære virus-formering. I mellomtiden ble identifisert et stort antall forskjellige interferontyper av naturlig opprinnelse, som fremfor alt ved de forskjellige opprinnelsesceller karakteriseres:
De ved tilsvarende stimuli i de respektive celler induserte interferoner hører kjemisk til gruppen glykoproteiner, de er delvis syrestabile (pH 2) og utdolder deres fulle anti-8 9
virale virkning fra 10 - 10 IE/mg artsspesifikk. Primær-strukturen av en rekke av a-, 5- og Y-interferoner, som er oppbygd av 146-166 aminosyrer, er oppklart. Videre er det blitt kjent ikke i naturen forekommende interferoner, hvis struktur på genteknologisk måte enten ble forkortet eller i forhold til de naturlige interferoner ble endret i amino-syre sekvensen .
De yngste arbeider på området genteknologi, hvor interferon-gener i E. coli ble bragt til kjenne, har vist at den i de naturlige interferoner påviste glykosyl- resp. polysakkarid-sidekjedene ikke synes å ha noen innvirkning på proteinenes biologiske aktivitet. Dessuten kan det med antistoffer som ble frembragt med naturlig glykoprotein måles en sammenlignbar binding til ikke glykosylert interferoner fra E. coli, hvilket hentyder på den overveiende innvirkning av proteinstrukturen av interferon som anti-gendeterminanter.
På grunn av deres terapeutiske potens produseres interferoner i storteknisk målestokk enten ved høsting av kulturmedier av tilsvarende cellekulturer eller i den nyere tid ved fermentering av E.coli-stammer, hvori det på genteknologisk måte ble klonert en interferon-koderende DNA-vektor. For isolering og rensing av de utvunnede rå- 3 4 interferon-preparater (gjennomsnittlig aktivitet 10 - 10 IE/mg protein) anvendes vanligvis fremgangsmåter med affinitets- og adsorpsjonskromatografi. Disse nytter interferonets spesielle evne til å binde til immobiliserte hydrofobe ligan-der, metallioner, tioler, organiske kvikksølvforbindelser, polynukleotider, Controlled Pore Glass, samt til antistoffer med høy spesifitet. På tross av de utallige rensemetoder blir utbytter og renhet av de dermed oppnådde interferoner imidlertid utilfredsstillende, som usikkerheten over grunnen til bivirkninger ved den kliniske undersøkelse av inter-feronene på mennesker viser.
Nye, effektive isoleringsfremgangsmåter er derfor nødvendige. Denne oppgave løses ved foreliggende oppfinnelse av en fremgangsmåte til anrikning og isolering ay interferon, idet fremgangsmåten erkarakterisert vedaé interferonholdige frysetørkede råblandinger oppløses i/en vandig oppløsning av urinstoff, som inneholder et tensid som natriumdodecylsulfat (SDS) og av denne oppløsning utvinner interferonet ved ekstraktiv tofase-fordeling med en blanding av n-butanol/ iseddik/E^O. Derved anriker interferonet seg i den butan-holdige fase og kan herav isoleres etter fortynning med vann og dialyse ved etterfølgende frysetørking. Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er overlegen ovenfor de kjente affinitets- og adsorpsjonsfremgangsmåter ved at den i et effektivt, entrinnet anrikningstrinn muliggjør elimineringen av mer enn 95% av alle medfølgende forurensninger fra E. coli-fermenteringen.
Oppfinnelsen vedrører således en fremgangsmåte til isolering og rensning av plasmidogene a-interferoner av genteknologisk endrede bakteriekulturer og a-interferoner fra kulturoverstående av induserte pattedyrceller, idet fremgangsmåten erkarakterisert vedat tilsvarende interferonholdige råstoffer fordeles mellom en tensidholdig vandig urinstoffoppløsning og en vannholdig n-butanol/iseddikblanding og de rensede a-interferoner isoleres fra den øvre fase.
Ved hjelp av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen skilles fortrinnsvis blandinger av plasmidogene a-interferoner (herav forstås i denne forbindelse også a-hybridinterferoner) og de ved dens fremstilling fra bakterieoppslutninger og fermenter-ingsvæsker dannede forurensninger.
Som tofaset organisk- vandig oppløsningsmiddelsystem egner
det seg spesielt en vandig underfase, som inneholder 1-8 mol urinstoff/1 og et aniontensid, fortrinnsvis et alkylsulfat, spesielt natriumdodecylsulfat (SDS) eksempelvis i en konsen-trasjon på 0,1-2 vekt-% og vandig organisk overfase av n-butanol/iseddik, fortrinnsvis 300-400 volumdeler n-butanol og 30-50 volumdeler iseddik, spesielt ca. 300 volumdeler n-butanol og 40 volumdeler iseddik som fortrinnsvis er mettet med vann.
Det således i overfasen ekstraherte interferon kan deretter isoleres ved fortynning med vann og avsalting ved hjelp av dialyse og frysetørking.
Skal prepareringen renses ytterligere, kan den interferonholdige overfase eksempelvis underkastes en ytterligere fordeling, fortrinnsvis mot en n-butanol og iseddikholdige organisk-vandig fase. Som spesielt egnet har det vist seg oppløs-ningsmiddelsystemer av følgende sammensetning:
Den ytterligere rensing kan eksempelvis foregå ved hjelp av en Droplet-Countercurrent-fordeling mot ovennevnte vandige system som stasjonær fase.
En ytterligere mulighet i høyrensing er kromatografi over en fordelingssøyle, som f.eks. er fylt med "Sephadex" LH 20, ekvilibrert f.eks. med n-butanol/iseddik/t^O (ca. 215:175: 2150, vol.:vol.). Dertil haes den interferonholdige overfase fra ekstraksjonen umiddelbart på fordelingssøylen og
søylen fremkalles med frisk overfase.
Spesielt fordelaktig er fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen å anvende til adskillelse av a-interferoner fra fermenteringen av genteknologisk modifiserte E. coli-stammer.
Utf<ør>elseseksemgler:
Eksempel_l
Lysatet av en 10 1 fermentering av en E. coli-stamme, som produserer plasmidogenet a-interferon, sentrifugeres. Det klare overstående frysetørkes deretter.
Utbytte 13 g.
Det ved hjelp av reduksjonen av den cytoplatiske effekt (Lin et al. J. Gen.Virol. 39. 125-130, 1978) målte interferoninnhold
g
av dette material utgjør 2 . 10 IFE/g stoff.
10 g av dette råmaterial suspenderes i 50 ml vandig 6 M urinstoffoppløsning (1% SDS) under kraftig omrøring og den uoppløselige del frasentrifugeres. Oppløsningen innstilles ved tilsetning av iseddik på ca. pH 3. Den dannede utfelling sentrifugeres etter 15 minutters omrøring ved 4°C og opptas på nytt i 50 ml 6 M urinstoffoppløsning (1% SDS). Den klare oppløsning blir oversjiktet med det samme volum av overfasen av (n-butanol/iseddik = 350:40, mettet med vann). De to faser gjennomblandes godt i 30 minutter ved 4°C og adskilles deretter igjen ved fornyet sentrifugering. Overfasen adskilles, fortynnes med vann, dialyseres og frysetørkes. Residuet (8 mg) består av a-interferon som til ca. 75% er ren og har en CPE-verdi på o 2 . 10 8 IFE/mg stoff. Dette material kan nå på vanlig måte kromatograferes, f.eks. over en affini-tetssøyle, på hvis bærermaterial det er fiksert kovalent antiinterferon-antistoffer. Renhetsgraden utgjør deretter mer enn 95%. Det således utvunnede interferon viser i SDS-gelelektroforese et enhetlig bånd.
Eksempel_2_
10 g råmateriale opparbeides som i eksempel 1 ved fordelilng mellom overfase/6 M urinstoffoppløsning (1% SDS). Den interferonholdige overfase innmates i en DCC-kromatograf (Droplet-Countercurrent, f.eks. Buchi 670). Den stasjonære fase av DCC-kromatografen består av n-butanol/iseddik/vann (215:175: i 2150 volumdeler). Fordelingen fremkalles med frisk overfase. Det interferonholdige eluat samles med en fraksjonskollektor. De tilsvarende fraksjoner forenes og interferonet isoleres som i eksempel 1 ved frysetørking.
Utbytte 12 mg interferon med et innhold på 63%.
Claims (10)
1. Fremgangsmåte til isolering og rensing av plasmidogene a-interferoner fra genteknologisk endrede bakteriekulturer og a-interferoner fra kulturoverstående av induserte pattedyrceller,karakterisert vedat tilsvarende interferonholdige råstoffer fordeles mellom en tensidholdig vandig urinstoffoppløsning og en vannholdig n-butanol/iseddik-blanding og de rensede a-interferoner isoleres fra den øvre fase.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1,
karakterisert vedat a-interferoner fra genteknologisk endrede bakteriekulturer isoleres og renses.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 2,
karakterisert vedata~hybridinterferoner isoleres og renses.
4. Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1-3,karakterisert vedat den nedre fase inneholder 1-8 mol urinstoff/1.
5. Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1-4,karakterisert vedat den nedre fase inneholder et aniontensid.
6. Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1-5,karakterisert vedat den nedre fase inneholder 0,1-2% natriumdodecylsulfat.
7. Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1-6,karakterisert vedat den øvre fase er en vannholdig blanding av n-butanol/iseddik i volumforholdet på ca. 350:40.
8. Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1-7,karakterisert vedat n-butanol/iseddik-blandingen er mettet med vann.
9. Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1-8,karakterisert vedat den interferonholdige overfase underkastes en ytterligere fordeling mellom en n-butanol og iseddikholdig organisk-vandig fase.
10. Fremgangsmåte ifølge krav 9,
karakterisert vedat denne vandige fase er en blanding av n-butanol/iseddik/vann i volumforhold på ca. 215:175:2150.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19843421302 DE3421302A1 (de) | 1984-06-08 | 1984-06-08 | Verfahren zur isolierung und reinigung von (alpha)-interferonen |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO852313L true NO852313L (no) | 1985-12-09 |
Family
ID=6237887
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO852313A NO852313L (no) | 1984-06-08 | 1985-06-07 | Fremgangsmaate til isolering og rensing av alfa-interferoner. |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4681931A (no) |
| EP (1) | EP0164069B1 (no) |
| JP (1) | JPS619298A (no) |
| KR (1) | KR860000378A (no) |
| AT (1) | ATE41786T1 (no) |
| AU (1) | AU4342285A (no) |
| DE (2) | DE3421302A1 (no) |
| DK (1) | DK254485A (no) |
| ES (1) | ES8604022A1 (no) |
| FI (1) | FI852251L (no) |
| IL (1) | IL75424A0 (no) |
| NO (1) | NO852313L (no) |
| NZ (1) | NZ212324A (no) |
| PH (1) | PH22608A (no) |
| PT (1) | PT80617B (no) |
| ZA (1) | ZA854329B (no) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60126243A (ja) * | 1983-12-13 | 1985-07-05 | New Japan Chem Co Ltd | 脂肪族カルボン酸の製造法 |
| JP2538953B2 (ja) * | 1987-11-17 | 1996-10-02 | 三菱重工業株式会社 | 工業用ロボットのバランス機構 |
| WO1995000529A1 (en) * | 1993-06-18 | 1995-01-05 | Pharmagenics, Inc. | INHIBITION OF INTERFERON-η WITH OLIGONUCLEOTIDES |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL7404590A (nl) * | 1974-04-03 | 1975-10-07 | Stichting Rega V Z W | Werkwijze voor het reactiveren van interferon. |
| DE2943016C2 (de) * | 1979-10-24 | 1984-09-06 | Dr. Rentschler Arzneimittel Gmbh & Co, 7958 Laupheim | Verfahren zur Reinigung von Interferon |
| US4450103A (en) * | 1982-03-01 | 1984-05-22 | Cetus Corporation | Process for recovering human IFN-β from a transformed microorganism |
| US4462940A (en) * | 1982-09-23 | 1984-07-31 | Cetus Corporation | Process for the recovery of human β-interferon-like polypeptides |
-
1984
- 1984-06-08 DE DE19843421302 patent/DE3421302A1/de not_active Withdrawn
-
1985
- 1985-05-30 AT AT85106648T patent/ATE41786T1/de active
- 1985-05-30 DE DE8585106648T patent/DE3569123D1/de not_active Expired
- 1985-05-30 EP EP85106648A patent/EP0164069B1/de not_active Expired
- 1985-06-05 FI FI852251A patent/FI852251L/fi not_active Application Discontinuation
- 1985-06-05 ES ES543916A patent/ES8604022A1/es not_active Expired
- 1985-06-06 NZ NZ212324A patent/NZ212324A/xx unknown
- 1985-06-06 PH PH32372A patent/PH22608A/en unknown
- 1985-06-06 US US06/741,865 patent/US4681931A/en not_active Expired - Fee Related
- 1985-06-06 IL IL75424A patent/IL75424A0/xx unknown
- 1985-06-06 DK DK254485A patent/DK254485A/da not_active Application Discontinuation
- 1985-06-07 NO NO852313A patent/NO852313L/no unknown
- 1985-06-07 KR KR1019850003989A patent/KR860000378A/ko not_active Application Discontinuation
- 1985-06-07 JP JP60122856A patent/JPS619298A/ja active Pending
- 1985-06-07 AU AU43422/85A patent/AU4342285A/en not_active Abandoned
- 1985-06-07 ZA ZA854329A patent/ZA854329B/xx unknown
- 1985-06-07 PT PT80617A patent/PT80617B/pt unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ZA854329B (en) | 1986-02-26 |
| DK254485D0 (da) | 1985-06-06 |
| DK254485A (da) | 1985-12-09 |
| DE3421302A1 (de) | 1985-12-12 |
| US4681931A (en) | 1987-07-21 |
| ES8604022A1 (es) | 1986-01-16 |
| DE3569123D1 (en) | 1989-05-03 |
| EP0164069A3 (en) | 1988-02-03 |
| ES543916A0 (es) | 1986-01-16 |
| ATE41786T1 (de) | 1989-04-15 |
| IL75424A0 (en) | 1985-10-31 |
| EP0164069B1 (de) | 1989-03-29 |
| PT80617B (de) | 1987-03-18 |
| PT80617A (de) | 1985-07-01 |
| NZ212324A (en) | 1989-02-24 |
| KR860000378A (ko) | 1986-01-28 |
| JPS619298A (ja) | 1986-01-16 |
| PH22608A (en) | 1988-10-17 |
| EP0164069A2 (de) | 1985-12-11 |
| AU4342285A (en) | 1985-12-12 |
| FI852251A0 (fi) | 1985-06-05 |
| FI852251L (fi) | 1985-12-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Yajima et al. | Studies on peptides. 103. Chemical synthesis of a crystalline protein with the full enzymic activity of ribonuclease A | |
| von Ehrenstein | [76] Isolation of sRNA from intact Escherichia coli cells | |
| US6471500B1 (en) | Process for producing erythropoietin containing no animal proteins | |
| Scott et al. | Purification of the rep protein of Escherichia coli. An ATPase which separates duplex DNA strands in advance of replication. | |
| Ikeda et al. | Chromatographic separation and antigenic analysis of proteins of the oncornaviruses. V. Identification of a new murine viral protein, p15 (E) | |
| Knipe et al. | Translation of individual species of vesicular stomatitis viral mRNA | |
| KR910006602B1 (ko) | 면역 인터페론의 제조방법 | |
| Marie et al. | One gene, but two messenger RNAs encode liver L and red cell L′ pyruvate kinase subunits | |
| CA1216807A (en) | Peptide and use thereof | |
| Rueckert | Studies on the structure of viruses of the columbia SK group: II. The protein subunits of ME-virus and other members of the columbia SK group | |
| SAITO-NAKATSUKA et al. | Reactive Sulfhydryl Groups of Sarcoplasmic Reticulum ATPase. I. Location of a Group Which Is Most Reactive with N-Ethyhnaleimide | |
| KR910008643B1 (ko) | B형 간염 비루스 표면항원(HBs 항원)의 정제 방법 | |
| Handley et al. | Characterization of the collagen synthesized by cultured cartilage cells | |
| US4902782A (en) | Isolation of fibroblast growth factor | |
| EP0480041A1 (en) | Fused antigen polypeptide | |
| KR910006483A (ko) | 재조합 아프로티닌 변이체, 균질하게 프로세싱된 아프로티닌 변이체의 미생물을 이용한 유전공학적 제조 방법 및 그의 치료 용도 | |
| Lheureux et al. | Immunological purification and partial characterization of variant-specific antigen messenger RNA of Trypanosoma brucei brucei | |
| EP0295859B1 (en) | Production of proteins in active forms | |
| NO852313L (no) | Fremgangsmaate til isolering og rensing av alfa-interferoner. | |
| EP0163573B1 (en) | Site-specific proteolysis by renin | |
| Mosser et al. | Proteins of Rous-associated virus type 61: polypeptide stoichiometry and evidence that glycoprotein gp35 is not a cleavage product of gp85 | |
| Adam et al. | Isolation of the coat proteins of foot-and-mouth disease virus and analysis of the composition and N-terminal endgroups | |
| Pepinsky et al. | Purification and properties of a fifth major viral gag protein from avian sarcoma and leukemia viruses | |
| Yaron et al. | Synthesis and immunological properties of the oligolysyl-Niε-dinitrophenyllysine and oligolysylalanylalanylalanyl-Niε-dinitrophenyllysine peptide series | |
| EP0244147A2 (en) | Purification process for hybrid proteins |