NO328298B1

NO328298B1 - Pharmaceutical preparations comprising the immunomodulating compound 2-methyl-1- (2-methylpropyl) -1H-imidazole [4,5-c] [1,5] naphthyridin-4-amine

Info

Publication number: NO328298B1
Application number: NO20042714A
Authority: NO
Inventors: Matthew T Scholz; Raymond Skwierczynski; Terri Busch; Amy L Gust-Heiting; Mary T Fretland
Original assignee: 3M Innovative Properties Co
Priority date: 2001-11-29
Filing date: 2004-06-28
Publication date: 2010-01-25
Also published as: NO20042714L; ZA200405147B

Description

Oppfinnelsens område Field of the invention

Foreliggende oppfinnelse er rettet mot farmasøytiske preparater som omfatter den immunresponsmodifiserende forbindelsen 2-metyl-l-(2-metylpropyl)-lH-imidazo[4,5-c][l,5]naftyridin-4-amin. Utførelser av foreliggende oppfinnelse gjelder topiske preparater for påførsel på huden til et pattedyr. The present invention is directed to pharmaceutical preparations comprising the immune response modifying compound 2-methyl-1-(2-methylpropyl)-1H-imidazo[4,5-c][1,5]naphthyridin-4-amine. Embodiments of the present invention relate to topical preparations for application to the skin of a mammal.

Oppfinnelsens bakgrunn The background of the invention

Mange imidazokinolinamin-, imidazopyridinamin-, 6,7-kondenserte sykloalkylimidazopyridinamin-, 1,2-broholdige imidazokinolinamin-, tiazolokinolinamin-, oksazolokinolinamin-, tiazolopyridinamin-, Many imidazoquinolineamine-, imidazopyridinamine-, 6,7-fused cycloalkylimidazopyridinamine-, 1,2-bridged imidazoquinolineamine-, thiazoloquinolineamine-, oxazoloquinolineamine-, thiazolopyridinamine-,

oksazolopyridinamin-, imidazonaftyridinamin-, imidazotetrahydronaftyridinamin- oxazolopyridinamine-, imidazonaphthyridinamine-, imidazotetrahydronaphthyridinamine-

og tiazolonaftyridinaminforbindelser har vist kraftig immunstimulerende aktivitet, antiviral aktivitet og antitumoraktivitet (innbefattet anti-kreftaktivitet), og har også and thiazolonenaphthyridinamine compounds have shown potent immunostimulatory activity, antiviral activity, and antitumor activity (including anticancer activity), and have also

blitt vist å være anvendbare som vaksineadjuvanser. Disse forbindelsene betegnes heri i det påfølgende under ett som "1RM" (immunresponsmodifiserende)- have been shown to be useful as vaccine adjuvants. These compounds are referred to hereinafter collectively as "1RM" (immune response modifier)-

forbindelser. En av disse IRM-forbindelsene, som betegnes imikimod, har blitt kommersialisert i et topisk preparat "Aldara™" for behandling av anogenitale vorter forbundet med humant papillomavirus. connections. One of these IRM compounds, designated imiquimod, has been commercialized in a topical preparation "Aldara™" for the treatment of anogenital warts associated with human papillomavirus.

Mekanismen for disse IRM-forbindelsenes antivirale aktivitet og antitumoraktivitet The mechanism of these IRM compounds' antiviral activity and antitumor activity

antas å i en vesentlig grad skyldes en forsterking av immunresponsen ved induksjon av forskjellige viktige cytokiner (f.eks. interferoner, interleukiner, is believed to be largely due to a strengthening of the immune response by the induction of various important cytokines (e.g. interferons, interleukins,

tumornekrosefaktor osv.). Slike forbindelser har blitt vist å stimulere en hurtig frigivelse av visse monocytt/makrofagavledede cytokiner og kan også stimulere B- tumor necrosis factor, etc.). Such compounds have been shown to stimulate a rapid release of certain monocyte/macrophage-derived cytokines and may also stimulate B-

celler til å utskille antistoffer som spiller en viktig rolle i disse IRM-forbindelsenes antivirale aktivitet og antitumoraktivitet. En av de dominerende immunstimulerende responsene forbundet med disse forbindelsene er induksjon av interferon (IFN)-a-produksjon, noe som antas å være svært viktig for de observerte akutte antivirus- og antitumoraktiviteter. Videre har en oppregulering av andre cytokiner, f.eks. tumornekrosefaktor (TNF), Interleukin-1 (IL-1) og IL-6 også mulige gunstige virkninger som antas å bidra til disse forbindelsenes antivirus- og cells to secrete antibodies that play an important role in the antiviral and antitumor activity of these IRM compounds. One of the predominant immunostimulatory responses associated with these compounds is the induction of interferon (IFN)-α production, which is believed to be very important for the observed acute antiviral and antitumor activities. Furthermore, an upregulation of other cytokines, e.g. tumor necrosis factor (TNF), Interleukin-1 (IL-1) and IL-6 also possible beneficial effects believed to contribute to these compounds' antiviral and

antitumoregenskaper. antitumor properties.

Selv om noen av de gunstige virkningene av IRM er kjente, kan evnen til å gi Although some of the beneficial effects of IRM are known, the ability to provide

terapeutisk nytte ved topisk påførsel av en IRM-forbindelse for behandling av en gitt tilstand i et gitt sete hindres av en rekke faktorer. Disse faktorene omfatter irritasjon av huden som blir påført preparatet, at preparatet vaskes bort, uløselighet og/eller degradering av IRM-forbindelsen i preparatet, fysisk ustabilitet av preparatet (f.eks. separasjon av bestanddeler, tykning, utfelling/agglomerisering av den aktive bestanddel og lignende), dårlig permeabilitet og uønsket systemisk tilførsel av den topisk påførte IRM-forbindelse. Følgelig foreligger det et therapeutic utility of topical application of an IRM compound for the treatment of a given condition at a given site is hindered by a number of factors. These factors include irritation of the skin to which the preparation is applied, wash-off of the preparation, insolubility and/or degradation of the IRM compound in the preparation, physical instability of the preparation (e.g. separation of components, thickening, precipitation/agglomeration of the active ingredient and the like), poor permeability and undesirable systemic delivery of the topically applied IRM compound. Consequently, there is a

, kontinuerlig, behoy for nye fremgangsmåter og prepatater„som,kan.gi det høyeste terapeutiske utbyttet fra denne klassen av forbindelser. , continuously, behoy for new methods and preparations„which,can.provide the highest therapeutic yield from this class of compounds.

Oppsummering av oppfinnelsen Summary of the invention

I én utførelse er foreliggende oppfinnelse rettet mot et farmasøytisk preparat som inneholder den immunresponsmodifiserende (IRM) forbindelsen 2-metyl-l-(2-metylpropyl)-lH-imidazo[4,5-c][l,5]naftyridin-4-amin eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; en fettsyre; en hydrofob, aprotisk bestanddel som er blandbar med fettsyren og som omfatter en hydrokarbylgruppe med 7 eller flere karbonatomer, og eventuelt et hydrofilt viskositetsfremmende middel utvalgt blant celluloseetere og karbomerer. In one embodiment, the present invention is directed to a pharmaceutical preparation containing the immune response modifying (IRM) compound 2-methyl-1-(2-methylpropyl)-1H-imidazo[4,5-c][1,5]naphthyridine-4- amine or a pharmaceutically acceptable salt thereof; a fatty acid; a hydrophobic, aprotic component which is miscible with the fatty acid and which comprises a hydrocarbyl group with 7 or more carbon atoms, and optionally a hydrophilic viscosity-promoting agent selected from cellulose ethers and carbomers.

Preparatet kan videre omfatte én eller flere av et konserverende system, et emulsjonsmiddel og vann. The preparation can further comprise one or more of a preservative system, an emulsifier and water.

Preparatet i følge oppfinnelsen kan anvendes i behandling av en hudassosiert tilstand ved å påføre huden preparat i følge oppfinnelsen. Hudassosierte tilstander som kan behandles med et preparat i følge oppfinnelsen er for eksempel aktinisk keratose, post-kirurgiske arr, basalcellekarsinom, atopisk dermatitt og vorter. The preparation according to the invention can be used in the treatment of a skin-associated condition by applying the preparation according to the invention to the skin. Skin-associated conditions that can be treated with a preparation according to the invention are, for example, actinic keratosis, post-surgical scars, basal cell carcinoma, atopic dermatitis and warts.

Dersom ikke annet er angitt skal alle tall som angir mengder, forhold og nummeriske egenskaper ved bestanddeler, reaksjonsbetingelser og lignende som anvendes i beskrivelsen og kravene forstås å i alle tilfeller være modifisert med begrepet "tilnærmet". If not stated otherwise, all numbers indicating quantities, ratios and numerical properties of components, reaction conditions and the like used in the description and requirements shall be understood to be modified in all cases with the term "approximate".

Som anvendt heri benyttes "en", eller "den" om hverandre med "minst én" og skal bety "én eller flere" av elementet som modifiseres. As used herein, "an", or "the" is used interchangeably with "at least one" and shall mean "one or more" of the element being modified.

Detaljert beskrivelse Detailed description

Ulike immunresponsmodifiserende forbindelser og fremgangsmåter for fremstilling og anvendelse av slike, er beskrevet i US-patentene nr. 4 689 338, 4 929 624, 4 988 815, 5 037 986, 5 175 296, 5 238 944, 5 266 575, 5 268 376, 5 346 905, Various immune response modifying compounds and methods for their production and use are described in US patents no. 4,689,338, 4,929,624, 4,988,815, 5,037,986, 5,175,296, 5,238,944, 5,266,575, 5,268 376, 5,346,905,

5 352 784, 5 367 076, 5 389 640, 5 395 937, 5 446 153, 5 482 936, 5 693 811, 5 741 908, 5 756 747, 5 939 090, 6 039 969, 6 083 505, 6 110 929, 6 194 425, 6 245 776, 6 331 539, 6 376 669, og 6 451 810, europeisk patent 0 394 025; US-publikasjonen 2002/0055517; og PCT-publikasjonene WO 99/47719, WO 00/76518 WO 01/4343 WO 02/46188, WO 02/46189, WO 02/46190, WO 0246191, WO 02/46192, WO 02/46193, WO 02/46194 og WO 02/46749 viss beskrivelser inkorporeres heri ved referanse. 5,352,784.5,367,076.5,389,640.5,395,937. 929, 6,194,425, 6,245,776, 6,331,539, 6,376,669, and 6,451,810, European Patent 0,394,025; US Publication 2002/0055517; and PCT publications WO 99/47719, WO 00/76518 WO 01/4343 WO 02/46188, WO 02/46189, WO 02/46190, WO 0246191, WO 02/46192, WO 02/46193, WO 02/46194 and WO 02/46749 certain descriptions are incorporated herein by reference.

I følge en utførelsesform omfatter preparatet i følge oppfinnelsen videre et konserverende system og et emulsjonsmiddel. According to one embodiment, the preparation according to the invention further comprises a preservative system and an emulsifier.

J. følge ytterligere en utførelsesforn^oj3ifoter^det_.hydrofile, yiskpsitetsfremmende.. middelet en karbomer. J. follow a further embodiment of the hydrophilic, viscosity-promoting agent a carbomer.

Enda en utførelsesform av oppfinnelsen gjelder et preparat i følge oppfinnelsen omfattende (a) 0,001 til 5 % (vekt/vekt) 2-metyl-l-(2-metylpropyl)-lH-imidazo[4,5-c][l,5]naftyridin-4-amin eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; (b) 0,05-40 % Yet another embodiment of the invention concerns a preparation according to the invention comprising (a) 0.001 to 5% (w/w) 2-methyl-1-(2-methylpropyl)-1H-imidazo[4,5-c][1,5 ]naphthyridin-4-amine or a pharmaceutically acceptable salt thereof; (b) 0.05-40%

(vekt/vekt) isostearinsyre; (c) 1-30 % (vekt/vekt) hydrofob, aprotisk bestanddel; (d) 0,5-10 % (vekt/vekt) emulsjonsmiddel; (e) 0,01-30 % (vekt/vekt) konserverende system; og (f) 0,1-10 % (vekt/vekt) karbomer. Enda en utførelsesform av dette gjelder et preparat som omfatter (a) 0,03-3 % (vekt/vekt) 2-metyl-l-(2-metylpropyl)-lH-imidazo[4,5-c][l,5] naftyridin-4-amin eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; (b) 3-25 % (vekt/vekt) isostearinsyre; (c) 3-15 % (vekt/vekt) hydrofob, aprotisk bestanddel; (d) 0,75-3,5 % (vekt/vekt) emulsjonsmiddel; (e) 0,1-25 % (vekt/vekt) konserverende system; og (f) 0,5-5 % (vekt/vekt) karbomer. (w/w) isostearic acid; (c) 1-30% (w/w) hydrophobic, aprotic component; (d) 0.5-10% (w/w) emulsifier; (e) 0.01-30% (w/w) preservative system; and (f) 0.1-10% (w/w) carbomer. Yet another embodiment of this concerns a preparation comprising (a) 0.03-3% (w/w) 2-methyl-1-(2-methylpropyl)-1H-imidazo[4,5-c][1,5 ] naphthyridine-4-amine or a pharmaceutically acceptable salt thereof; (b) 3-25% (w/w) isostearic acid; (c) 3-15% (w/w) hydrophobic, aprotic component; (d) 0.75-3.5% (w/w) emulsifier; (e) 0.1-25% (w/w) preservative system; and (f) 0.5-5% (w/w) carbomer.

I henhold til enda en utførelsesform har den hydrofobe, aprotiske bestanddelen har en hydrofil/lipofil balanse på mindre enn 2.1 enda en annen utførelsesform har I henhold til enda en utførelsesform har den hydrofobe, aprotiske bestanddelen en pKa-verdi som er større enn 14,2. I følge en annen utførelsesform av oppfinnelsen er forholdet mellom den hydrofobe, aprotiske bestanddelen og fettsyren er 0,025:1 til 600:1.1 en annen utførelsesform er den kombinerte vektprosenten av den hydrofobe, aprotiske bestanddelen og fettsyren er 2 til 50. According to yet another embodiment, the hydrophobic aprotic component has a hydrophilic/lipophilic balance of less than 2.1 yet another embodiment has According to yet another embodiment, the hydrophobic aprotic component has a pKa value greater than 14.2 . According to another embodiment of the invention, the ratio between the hydrophobic, aprotic component and the fatty acid is 0.025:1 to 600:1. In another embodiment, the combined weight percentage of the hydrophobic, aprotic component and the fatty acid is 2 to 50.

I følge en utførelsesform er fettsyren isostearinsyre. I ytterligere en utførelsesform av oppfinnelsen er den aprotiske fettsyreesteren er isopropylmyristat, isopropylpalmitat, diisopropyldimerdilinoleat, kaprylsyre/kap-ronsyretriglyserid, cetylestervokser eller kombinasjoner derav. I følge en annen utførelsesfor er den hydrofobe, aprotiske bestanddelen valgt fra aprotiske fettsyreestere, hydrokarboner med 8 eller flere karbonatomer og vokstyper. According to one embodiment, the fatty acid is isostearic acid. In a further embodiment of the invention, the aprotic fatty acid ester is isopropyl myristate, isopropyl palmitate, diisopropyl dimerdylinoleate, caprylic acid/caproic acid triglyceride, cetyl ester wax or combinations thereof. According to another embodiment, the hydrophobic aprotic component is selected from aprotic fatty acid esters, hydrocarbons having 8 or more carbon atoms and wax types.

I henhold til ytterligere en annen utførelsesform av oppfinnelsen omfatter preparatet ytterligere omfatter et konserverende system. I følge ytterligere en utførelsesform omfatter det konserverende system et konserve-ringsfremmende solubiliseringsmiddel, så som for eksempel dietylenglykolmonoet-yleter, propylenglykol eller en kombinasjon derav. According to yet another embodiment of the invention, the preparation further comprises a preservative system. According to a further embodiment, the preservative system comprises a preservation-promoting solubilizer, such as, for example, diethylene glycol monoethyl ether, propylene glycol or a combination thereof.

I følge en bestemt utførelsesform omfatter preparatet i følge oppfinnelsen (a) 0,001 til 5 % (vekt/vekt), 2-metyl-l-(2-metylpropyl)-lH-imidazo[4,5-c][l,5]naftyridin-4-amin eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav; (b) 0,05-40 % (vekt/vekt) isostearinsyre; (c) 1-30 % (vekt/vekt) hydrofob, aprotisk bestanddel; og (d) 0,01-30 % (vekt/vekt) konserverende system. According to a specific embodiment, the preparation according to the invention comprises (a) 0.001 to 5% (w/w), 2-methyl-1-(2-methylpropyl)-1H-imidazo[4,5-c][1,5] naphthyridine-4-amine or a pharmaceutically acceptable salt thereof; (b) 0.05-40% (w/w) isostearic acid; (c) 1-30% (w/w) hydrophobic, aprotic component; and (d) 0.01-30% (w/w) preservative system.

Ytterligere en utførelsesform av oppfinnelsen gjelder et som ytterligere omfatter et emulsjonsmiddel og et hydrofilt, viskositetsforsterkende middel. Oppfinnelsen omfatter endelig et hvor det hydrofile, viskositetsforsterkende middelet omfatter en karbomer. A further embodiment of the invention relates to one which further comprises an emulsifying agent and a hydrophilic, viscosity enhancing agent. Finally, the invention includes one wherein the hydrophilic, viscosity-enhancing agent comprises a carbomer.

Mengden av en IRM-forbindelse som vil være terapeutisk effektiv i en gitt situasjon vil avhenge av faktorer som den gitte forbindelses aktivitet, doseringsmønsteret, påføringssetet, det angjeldende preparat og tilstanden som behandles. Følgelig er det generelt ikke praktisk å angi spesifikke tilførselsmengder heri, fagfolk vil imidlertid kunne fastslå egnede, terapeutisk effektive mengder basert på de retningslinjer som gis heri, informasjon som er tilgjengelig innen faget når det gjelder disse forbindelsene og rutinemessig eksperimentering. Begrepet "en terapeutisk effektiv mengde" betyr en mengde av forbindelsen som er tilstrekkelig til å indusere en terapeutisk virkning, for eksempel cytokininduksjon, inhibering av TH2-immunrespons, antiviral aktivitet eller antitumoraktivitet, reduksjon eller fjerning av postkirurgiske arr eller reduksjon eller fjerning av aktinisk keratose eller pre-aktinisk keratose-lesjoner. The amount of an IRM compound that will be therapeutically effective in a given situation will depend on factors such as the activity of the given compound, the dosage pattern, the site of application, the formulation in question and the condition being treated. Accordingly, it is generally not practical to set forth specific dosage amounts herein, however, those skilled in the art will be able to determine appropriate therapeutically effective amounts based on the guidelines provided herein, information available in the art regarding these compounds, and routine experimentation. The term "a therapeutically effective amount" means an amount of the compound sufficient to induce a therapeutic effect, such as cytokine induction, inhibition of TH2 immune response, antiviral activity or antitumor activity, reduction or removal of post-surgical scars or reduction or removal of actinic keratosis or pre-actinic keratosis lesions.

Generelt vil mengden av IRM-forbindelsen som foreligger i et topisk preparat ifølge oppfinnelsen være en mengde som effektivt behandler den tilstand preparatet er beregnet på å behandle, som forhindrer tilbakevendelse av tilstanden eller som fremmer immunitet mot tilstanden. Mengden eller konsentrasjonen av IRM-forbindelsen kan variere fra 0,001 % til 10 % (vekt/vekt) basert på den totale vekt av preparatet, f.eks. fra 0,03-5,0 % (vekt/vekt) eller fra 0,1-1,0 % (vekt/vekt). I visse utførelser er mengden av IRM-forbindelsen minst 0,003 % (vekt/vekt), f.eks. minst 0,005 %, minst 0,01 %, minst 0,03 %, minst 0,10 %, minst 0,30 % og minst 1,0 %. I andre utførelser er mengden av IRM-forbindelsen maksimalt 5,0 % In general, the amount of the IRM compound present in a topical preparation according to the invention will be an amount which effectively treats the condition the preparation is intended to treat, which prevents recurrence of the condition or which promotes immunity against the condition. The amount or concentration of the IRM compound can vary from 0.001% to 10% (w/w) based on the total weight of the preparation, e.g. from 0.03-5.0% (w/w) or from 0.1-1.0% (w/w). In certain embodiments, the amount of the IRM compound is at least 0.003% (w/w), e.g. at least 0.005%, at least 0.01%, at least 0.03%, at least 0.10%, at least 0.30% and at least 1.0%. In other embodiments, the amount of the IRM compound is at most 5.0%

(vekt/vekt), f.eks. maksimalt 3,0 % og maksimalt 1,0 %. (weight/weight), e.g. maximum 3.0% and maximum 1.0%.

De topiske preparatene ifølge oppfinnelsen omfatter i tillegg en fettsyre. Som anvendt heri betyr begrepet "fettsyre" en karboksylsyre, enten mettet eller umettet, som omfatter fra 6-28 karbonatomer, f.eks. fra 10-22 karbonatomer. Ikke-begrensende eksempler på slike fettsyrer omfatter isostearinsyre, oljesyre og lineære eller forgrenede karboksylsyrer med fra 6-18 karbonatomer. Fettsyren kan foreligge i preparatet i en mengde som er tilstrekkelig til å solubilisere IRM-forbindelsen. I The topical preparations according to the invention additionally comprise a fatty acid. As used herein, the term "fatty acid" means a carboxylic acid, either saturated or unsaturated, comprising from 6-28 carbon atoms, e.g. from 10-22 carbon atoms. Non-limiting examples of such fatty acids include isostearic acid, oleic acid and linear or branched carboxylic acids having from 6 to 18 carbon atoms. The fatty acid can be present in the preparation in an amount sufficient to solubilize the IRM compound. IN

én utførelse kan mengden av fettsyren variere fra 0,05 % til 40 % (vekt/vekt) basert på preparatets totalvekt, f.eks. fra 1 % til 30 %, fra 3 % til 15 % og fra 5 % til 10 %. I visse utførelser er mengden av fettsyren minst 3,0 % (vekt/vekt), f.eks. minst 5,0 %, minst 10,0 % og minst 25 %. Fettsyrebestanddelen i preparatet kan utgjøres av én eller flere fettsyrer. in one embodiment, the amount of the fatty acid can vary from 0.05% to 40% (w/w) based on the total weight of the preparation, e.g. from 1% to 30%, from 3% to 15% and from 5% to 10%. In certain embodiments, the amount of the fatty acid is at least 3.0% (w/w), e.g. at least 5.0%, at least 10.0% and at least 25%. The fatty acid component in the preparation can be made up of one or more fatty acids.

De topiske preparatene ifølge oppfinnelsen omfatter i tillegg minst én hydrofob, aprotisk bestanddel som er blandbar med fettsyren og som omfatter en hydrokarbylgruppe med 7 eller flere karbonatomer. Med "hydrofob" menes at forbindelsen i det vesentlige er uløselig i vann, det vil si ikke blandbar med vann og ikke i stand til å danne en micelle i vann, og at forbindelsen ikke inneholder polyjoksyetylen- eller syresaltgrupper. Den hydrofobe, aprotiske bestanddel.har fortrinnsvis en hydrofil, lipofil balanse (HLB) på mindre enn 2. HLB for en bestanddel kan f.eks. bestemmes som beskrevet i Attwood, D., Florence, A.T. Surfactant Systems: Their Chemistry, Pharmacy, and Biologv. New York: Chapman & Hall, 471-473, 1983. Med "aprotisk" menes at bestanddelen ikke kan donere et proton til IRM-forbindelsen og ikke inneholder grupper som karboksylgrupper, hydroksygrupper, primære og sekundære aminogrupper, primære og sekundære amidogrupper eller kvaternære ammoniumgrupper. Denne bestanddelen har fortrinnsvis en pKapå minst 14,2 og vil i det vesentlige ikke solubilisere eller danne et kompleks, f.eks. et syre-base-par eller -kompleks eller et hydrogenbind-ingskompleks med IRM-forbindelsen. Med "ikke i det vesentlige" menes at forholdet mellom IRM-forbindelsens løselighet i den hydrofile, aprotiske bestanddel og løseligheten i isostearinsyre er mindre enn 1:40. The topical preparations according to the invention additionally comprise at least one hydrophobic, aprotic component which is miscible with the fatty acid and which comprises a hydrocarbyl group with 7 or more carbon atoms. By "hydrophobic" is meant that the compound is essentially insoluble in water, i.e. not miscible with water and unable to form a micelle in water, and that the compound does not contain polyoxyethylene or acid salt groups. The hydrophobic, aprotic component preferably has a hydrophilic lipophilic balance (HLB) of less than 2. The HLB for a component can e.g. determined as described in Attwood, D., Florence, A.T. Surfactant Systems: Their Chemistry, Pharmacy, and Biology. New York: Chapman & Hall, 471-473, 1983. By "aprotic" is meant that the compound cannot donate a proton to the IRM compound and does not contain groups such as carboxyl groups, hydroxy groups, primary and secondary amino groups, primary and secondary amido groups, or quaternary ammonium groups . This component preferably has a pKa of at least 14.2 and will essentially not solubilize or form a complex, e.g. an acid-base pair or complex or a hydrogen-bonding complex with the IRM compound. By "not substantially" is meant that the ratio between the solubility of the IRM compound in the hydrophilic, aprotic component and the solubility in isostearic acid is less than 1:40.

Det er ønskelig at preparater som er beregnet for dermal eller topisk anvendelse har en viss minimal mengde av en oljefase for å tilveiebringe egenskaper som spredbarhet, følelse på huden, konsistens osv. Dersom alle bestanddelene i oljefasen solubiliserer IRM-forbindelsen vil imidlertid metningsgraden av IRM-forbindelsen i preparatet reduseres, noe som gjør det vanskeligere å tilføre IRM-forbindelsen fra preparatet til huden. Tilsetning av den hydrofobe, aprotiske bestanddel kan øke oljefasevolumet i det topiske preparat for erholdelse av ønskede egenskaper som spredbarhet og følelse, samtidig som man ikke i vesentlig grad endrer metningsgraden eller den termodynamiske aktivitet av IRM-forbindelsen. F.eks. kan mengden av fettsyre, som solubiliserer IRM-forbindelsen, reduseres for å forhøye graden av IRM-metning samtidig som et tilstrekkelig oljefasevolum opprettholdes grunnet tilsetning av den hydrofobe, aprotiske bestanddel, som ikke forstyrrer den forhøyede IRM-metning. Det topiske preparat ifølge foreliggende oppfinnelse kan således oppfylle krav til både fysiske egenskaper og medikamenttilførsel. Metnings-grad og termodynamisk aktivitet av IRM-forbindelsen i disse preparatene tilsvarer IRM-konsentrasjonen i oljefasen dividert med metningskonsentrasjonen av 1RM i oljefasen. Dersom de topiske preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse inneholder mettet IRM-forbindelse er den termodynamiske aktivitet eller metningsgraden 1, og dersom preparatene er delvis mettede er den termodynamiske aktivitet eller metningsgraden mindre enn 1. It is desirable that preparations intended for dermal or topical application have a certain minimal amount of an oil phase to provide properties such as spreadability, feel on the skin, consistency, etc. If all the components in the oil phase solubilize the IRM compound, however, the degree of saturation of the IRM the compound in the preparation is reduced, making it more difficult to deliver the IRM compound from the preparation to the skin. Addition of the hydrophobic, aprotic component can increase the oil phase volume in the topical preparation to obtain desired properties such as spreadability and feel, while not significantly changing the degree of saturation or the thermodynamic activity of the IRM compound. E.g. the amount of fatty acid, which solubilizes the IRM compound, can be reduced to increase the degree of IRM saturation while maintaining a sufficient oil phase volume due to the addition of the hydrophobic, aprotic component, which does not interfere with the elevated IRM saturation. The topical preparation according to the present invention can thus fulfill requirements for both physical properties and drug delivery. Degree of saturation and thermodynamic activity of the IRM compound in these preparations corresponds to the IRM concentration in the oil phase divided by the saturation concentration of 1RM in the oil phase. If the topical preparations according to the present invention contain saturated IRM compound, the thermodynamic activity or degree of saturation is 1, and if the preparations are partially saturated, the thermodynamic activity or degree of saturation is less than 1.

Mengden av den hydrofobe, aprotiske bestanddel som foreligger i et preparat ifølge oppfinnelsen kan variere fra 1 % til 30 % (vekt/vekt) basert på totalvekten av preparatet, f.eks. fra 3 % til 15 % (vekt/vekt) og fra 5-10 % (vekt/vekt). I visse utførelser er mengden av den hydrofobe, aprotiske bestanddel minst 3,0 % The amount of the hydrophobic, aprotic component present in a preparation according to the invention can vary from 1% to 30% (weight/weight) based on the total weight of the preparation, e.g. from 3% to 15% (w/w) and from 5-10% (w/w). In certain embodiments, the amount of the hydrophobic aprotic component is at least 3.0%

(vekt/vekt), f.eks. minst 5,0 % og minst 10,0 %. Vektforholdet mellom den hydrofobe, aprotiske bestanddel og fettsyren kan være fra 0,025:1 til 600:1, f.eks. fra 0,5:1 til 50:1 og fra 2:1 til 30:1. Den samlede mengde (vekt % av det totale topiske preparat) av den hydrofobe, aprotiske bestanddel og fettsyren kan være fra 2 (weight/weight), e.g. at least 5.0% and at least 10.0%. The weight ratio between the hydrophobic, aprotic component and the fatty acid can be from 0.025:1 to 600:1, e.g. from 0.5:1 to 50:1 and from 2:1 to 30:1. The total amount (% by weight of the total topical preparation) of the hydrophobic, aprotic component and the fatty acid can be from 2

% til 50 % (vekt/vekt), f.eks. fra 2 % til 30 %, 5 % til 30 %, 5 % til 20 %, og 10 % -til'20%. % to 50% (w/w), e.g. from 2% to 30%, 5% to 30%, 5% to 20%, and 10% to'20%.

Eksempler på egnede hydrofobe, aprotiske bestanddeler omfatter, men er ikke begrenset til, fettsyreestere, f.eks. isopropylmyristat, isopropylpalmitat, diisopropyldimer-dilinoleat, triglyserider, f.eks. kaprylsyre/kapronsyretriglyserid, cetyletervokser, hydrokarboner med 8 eller flere karbonatomer, f.eks. lett mineralolje, vaselin og voks, f.eks. bivoks. I noen utførelser er den hydrofobe, aprotiske bestanddel utvalgt blant én eller flere av isopropylmyristat, isopropylpalmitat, kaprylsyre/kapronsyretriglyserid og diisopropyldimer-dilinoleat. Examples of suitable hydrophobic aprotic components include, but are not limited to, fatty acid esters, e.g. isopropyl myristate, isopropyl palmitate, diisopropyl dimer dilinoleate, triglycerides, e.g. caprylic acid/caproic acid triglyceride, cetyl ether waxes, hydrocarbons with 8 or more carbon atoms, e.g. light mineral oil, vaseline and wax, e.g. beeswax. In some embodiments, the hydrophobic, aprotic component is selected from one or more of isopropyl myristate, isopropyl palmitate, caprylic acid/caproic acid triglyceride, and diisopropyl dimer dilinoleate.

Preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også omfatte et hydrofilt viskositetsfremmende middel. Eksempler på egnede hydrofile viskositetsfremmende midler omfatter celluloseetere som hydroksypropylmetylcellulose, hydroksyetyl-cellulose, hydroksypropylcellulose og karboksymetylcellulose, polysakkaridgum-mier som xantangummi og homopolymerer og kopolymerer av akryl syre kryss-bundet med allylsukrose eller allylpentraerytriol, f.eks. de polymerer som betegnes karbomerer i de Forente Staters Pharmacopoeia. Egnede karbomerer omfatter f.eks. karbomerene som er tilgjengelige som "Carbopol" 934P, "Carbopol" 971P, "Carbopol" 940, "Carbopol" 974P, "Carbopol 980, og "Pemulen" TR-1 (USP/NF monografi, karbomer 1342), alle tilgjengelige fra Noveon, Cleveland, Ohio. I én utførelse av foreliggende oppfinnelse er det viskositetsfremmende middel utvalgt blant Carbopol 974P og 980. Dersom et viskositetsfremmende middel inngår i preparatet foreligger det generelt i en mengde i området fra 0,1 % til 10 % The preparations according to the present invention can also comprise a hydrophilic viscosity-promoting agent. Examples of suitable hydrophilic viscosity-promoting agents include cellulose ethers such as hydroxypropyl methylcellulose, hydroxyethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose and carboxymethyl cellulose, polysaccharide gums such as xanthan gum and homopolymers and copolymers of acrylic acid cross-linked with allyl sucrose or allylpentaerytriol, e.g. the polymers designated carbomers in the United States Pharmacopoeia. Suitable carbomers include e.g. the carbomers available as "Carbopol" 934P, "Carbopol" 971P, "Carbopol" 940, "Carbopol" 974P, "Carbopol 980, and "Pemulen" TR-1 (USP/NF monograph, carbomer 1342), all available from Noveon , Cleveland, Ohio. In one embodiment of the present invention, the viscosity-promoting agent is selected from Carbopol 974P and 980. If a viscosity-promoting agent is included in the preparation, it is generally present in an amount in the range from 0.1% to 10%

(vekt/vekt) av preparatets totalvekt, f.eks. fra 0,5 % til 5 % (vekt/vekt), fra 0,5-1,5 % (vekt/vekt) og fra 0,7-3,0 % (vekt/vekt). I visse utførelser er mengden av det viskositetsfremmende middel minst 0,5 % (vekt/vekt), f.eks. minst 0,6 % (weight/weight) of the total weight of the preparation, e.g. from 0.5% to 5% (w/w), from 0.5-1.5% (w/w) and from 0.7-3.0% (w/w). In certain embodiments, the amount of viscosity enhancing agent is at least 0.5% (w/w), e.g. at least 0.6%

(vekt/vekt), minst 0,7 % (vekt/vekt), minst 0,9 % (vekt/vekt) og minst 1,0 % (w/w), at least 0.7% (w/w), at least 0.9% (w/w) and at least 1.0%

(vekt/vekt). (weight/weight).

Preparatene ifølge oppfinnelsen kan i tillegg omfatte et emulsjonsmiddel. Egnede emulsjonsmidler omfatter ikke-ioniske overflateaktive midler som polysorbat 60, sorbitanmonostearat, polyglyseryl-4-oleat, polyoksyetylen (4) lauryleter, osv. I visse utførelser er emulsjonsmidlet utvalgt blant poloksamerer (f.eks. "Pluronic" F68, også betegnet Poloxamer 188), en poly(etylenglykol)-blokk-poly-(propylenglykol)-blokk-poly(etylenglykol), tilgjengelig fra BASF, Ludwigshafen, Tyskland) og sorbitantrioleat (f.eks. Span 85, tilgjengelig fra Uniqema, New Castle, DE). Dersom et emulsjonsmiddel inngår foreligger det generelt i en mengde som utgjør fra 0,1 % til 10 % (vekt/vekt) av preparatets totalvekt, f.eks. fra 0,5 % til 5 % The preparations according to the invention may additionally comprise an emulsifier. Suitable emulsifying agents include nonionic surfactants such as polysorbate 60, sorbitan monostearate, polyglyceryl 4-oleate, polyoxyethylene (4) lauryl ether, etc. In certain embodiments, the emulsifying agent is selected from among poloxamers (eg, "Pluronic" F68, also referred to as Poloxamer 188 ), a poly(ethylene glycol)-block-poly-(propylene glycol)-block-poly(ethylene glycol), available from BASF, Ludwigshafen, Germany) and sorbitan trioleate (e.g., Span 85, available from Uniqema, New Castle, DE) . If an emulsifier is included, it is generally present in an amount that amounts to from 0.1% to 10% (weight/weight) of the total weight of the preparation, e.g. from 0.5% to 5%

(vekt/vekt) og fra 0,75 % til 3,5 % (vekt/vekt). I visse utførelser er mengden emulsjonsmiddel minst 1,0 % (vekt/vekt), f.eks. minst 2,5 %, minst 3,5 % og minst 5,0 %. (w/w) and from 0.75% to 3.5% (w/w). In certain embodiments, the amount of emulsifier is at least 1.0% (w/w), e.g. at least 2.5%, at least 3.5% and at least 5.0%.

Preparatet kan også omfatte minst et chelateringsmiddel. Chelateringsmidlet vil bidra til chelatbinde metallioner som kan foreligge i preparatet. Egnede chelateringsmidler omfatter salter av etylendiaminotetraacetat (EDTA), f.eks. dinatriumsaltet. Dersom et chelateringsmiddel inngår foreligger det generelt i en mengde i området fra 0,001 % til 0,1 % (vekt/vekt) og fortrinnsvis fra 0,01 % til 0,05 % (vekt/vekt). Mengden av chelateringsmidlet kan for eksempel være minst 0,005 % (vekt/vekt), f.eks. minst 0,01 % og minst 0,05 %. The preparation may also comprise at least one chelating agent. The chelating agent will help to chelate metal ions that may be present in the preparation. Suitable chelating agents include salts of ethylenediaminetetraacetate (EDTA), e.g. the disodium salt. If a chelating agent is included, it is generally present in an amount in the range from 0.001% to 0.1% (w/w) and preferably from 0.01% to 0.05% (w/w). The amount of the chelating agent may for example be at least 0.005% (w/w), e.g. at least 0.01% and at least 0.05%.

Preparatet kan også omfatte et konserveringsmiddel. Konserveringsmidlet kan generelt omfatte minst én konserverende forbindelse utvalgt blant metylparaben, etylparaben, propylparaben, fenoksyetanol, jodpropynylbutylkarbamat, sorbinsyre, The preparation may also include a preservative. The preservative may generally comprise at least one preservative compound selected from methylparaben, ethylparaben, propylparaben, phenoxyethanol, iodopropynylbutylcarbamate, sorbic acid,

en fettsyremonoester av glyserol, f.eks. glyserolmonolaurat, og en fettsyremono- a fatty acid monoester of glycerol, e.g. glycerol monolaurate, and a fatty acid mono-

ester av propylenglykol, f.eks. propylenglykolmonokaprylat. Det konserverende system kan også omfatte et konserveringsfremmende solubiliseringsmiddel som forhøyer løseligheten av konserveringsmidlet i vannfasen, og eksempler på slike omfatter dietylenglykol-monoetyleter og propylenglykol. Det konserverende system kan for eksempel også omfatte metylparaben, propylparaben og propylenglykol, ester of propylene glycol, e.g. propylene glycol monocaprylate. The preservative system can also comprise a preservation-promoting solubilizer that increases the solubility of the preservative in the water phase, and examples of such include diethylene glycol monoethyl ether and propylene glycol. The preservative system can, for example, also include methylparaben, propylparaben and propylene glycol,

eller det kan bestå av metylparaben, etylparaben og dietylenglykol-monoetyleter eller omfatte fenoksyetanol, metylparaben eller metyl- og etylparaben og dietylenglykol-monoetyleter. Det konserverende system kan også bestå av jodpropynylbutylkarbamat eller jodpropynylbutylkarbamat, dietylenglykol-monoetyleter og poly(etylenglykol) (4) monolaurat. Det konserverende system kan også bestå av jodpropynylbutylkarbamat, én eller flere av metylparaben, etylparaben, propylparaben eller fenoksyetanol, og dietylenglykol-monoetyleter. Metylparaben, etylparaben og propylparaben kan for eksempel alle foreligge i preparatene i en mengde som varierer fra 0,01 % til 0,5 % (vekt/vekt) av preparatets vekt, f.eks. fra 0,05 % til 0,25 % (vekt/vekt) og fra 0,1 % til 0,2 % (vekt/vekt). Jodpropynylbutylkarbamat kan foreligge i preparatene i en mengde som ligger mellom 0,01 % og 0,1 %. Fenoksyetanol kan foreligge i preparatene i en mengde som ligger mellom 0,1 % og or it may consist of methyl paraben, ethyl paraben and diethylene glycol monoethyl ether or include phenoxyethanol, methyl paraben or methyl and ethyl paraben and diethylene glycol monoethyl ether. The preservative system can also consist of iodopropynylbutylcarbamate or iodopropynylbutylcarbamate, diethylene glycol monoethyl ether and poly(ethylene glycol) (4) monolaurate. The preservative system can also consist of iodopropynylbutylcarbamate, one or more of methylparaben, ethylparaben, propylparaben or phenoxyethanol, and diethylene glycol monoethyl ether. Methylparaben, ethylparaben and propylparaben can, for example, all be present in the preparations in an amount varying from 0.01% to 0.5% (w/w) of the weight of the preparation, e.g. from 0.05% to 0.25% (w/w) and from 0.1% to 0.2% (w/w). Iodopropynylbutylcarbamate can be present in the preparations in an amount between 0.01% and 0.1%. Phenoxyethanol can be present in the preparations in an amount between 0.1% and

1 %. Propylenglykol og dietylenglykol-monoetyleter kan begge foreligge i 1%. Propylene glycol and diethylene glycol monoethyl ether can both be present in

preparatene i en mengde som ligger mellom 1 % og 30 % (vekt/vekt) av preparatets vekt, f.eks. fra 5 % til 25 % (vekt/vekt) og fra 10 % til 15 % (vekt/vekt). Det konserverende system kan foreligge i preparatene i en mengde som ligger mellom 0,01 % og 30 % (vekt/vekt) av preparatet, f.eks. mellom 0,05 % og 30 %, mellom 0,1 % og 25 % (vekt/vekt) og mellom 0,2 % og 15 % (vekt/vekt). I nok en utførelse kan metylparaben, etylparaben, propylparaben, jodpropynylbutyl-karbamat og fenoksyetanol være solubilisert i propylenglykol, poly(etylenglykol) (4) monolaurat eller dietylenglykolmonoetyleter før tilsetning til preparatet. Det konserverende system kan utvelges slik at det oppfyller kriteriene for antimikrobiell effektivitet som gis i de Forente Staters Pharmacopoeia <51>. the preparations in an amount that is between 1% and 30% (weight/weight) of the weight of the preparation, e.g. from 5% to 25% (w/w) and from 10% to 15% (w/w). The preservative system can be present in the preparations in an amount between 0.01% and 30% (weight/weight) of the preparation, e.g. between 0.05% and 30%, between 0.1% and 25% (w/w) and between 0.2% and 15% (w/w). In yet another embodiment, methylparaben, ethylparaben, propylparaben, iodopropynylbutyl carbamate and phenoxyethanol can be solubilized in propylene glycol, poly(ethylene glycol) (4) monolaurate or diethylene glycol monoethyl ether before addition to the preparation. The preservative system can be selected to meet the criteria for antimicrobial efficacy given in the United States Pharmacopoeia <51>.

Preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse kan i tillegg omfatte minst ett pH-justerende middel. Egnede pH-justerende midler omfatter organiske baser og uorganiske baser, f.eks. KOH og NaOH. pH i de topiske preparatene ifølge The preparations according to the present invention may additionally comprise at least one pH-adjusting agent. Suitable pH adjusting agents include organic bases and inorganic bases, e.g. KOH and NaOH. pH in the topical preparations according to

foreliggende oppfinnelse ligger generelt mellom 3,5 og 7,0. pH i de topiske preparatene kan for eksempelligge mellom 4,0 bg 6,0, fortrinnsvis 5,0, eller metiom - present invention is generally between 3.5 and 7.0. The pH in the topical preparations can, for example, be between 4.0 and 6.0, preferably 5.0, or between

5,5 og 6,5, fortrinnsvis 6,0. 5.5 and 6.5, preferably 6.0.

Alle de ovenfor nevnte preparatene kan foreligge i form av en olje-i-vann-emulsjon, f.eks. som en krem eller salve. En slik emulsjon kan omfatte en oljefase som omfatter IRM-forbindelsene, en fettsyre i en mengde som er tilstrekkelig til å solubilisere IRM-forbindelsene, en hydrofob, aprotisk bestanddel og en vannfase som omfatter et hydrofilt viskositetsfremmende middel, f.eks. en karbomer. I visse utførelser kan mengden eller konsentrasjonen av IRM i oljefasen være minst 0,01 %, f.eks. minst 0,02 %, minst 0,1 % og minst 1 % relativt til vekten av oljefasen. I andre utførelser kan mengden eller konsentrasjonen av IRM i oljefasen være maksimalt 20 %, f.eks. maksimalt 10 % og maksimalt 5 % relativt til vekten av oljefasen. Emulsjonen kan være konservert, slik at den dersom den undersøkes ved en analyse av den antimikrobielle effektivitet oppfyller de regulatoriske krav for topiske kremer pakket i beholdere for flere gangers bruk. All the preparations mentioned above can be in the form of an oil-in-water emulsion, e.g. as a cream or ointment. Such an emulsion may comprise an oil phase comprising the IRM compounds, a fatty acid in an amount sufficient to solubilize the IRM compounds, a hydrophobic, aprotic component and an aqueous phase comprising a hydrophilic viscosity enhancing agent, e.g. a carbomer. In certain embodiments, the amount or concentration of IRM in the oil phase may be at least 0.01%, e.g. at least 0.02%, at least 0.1% and at least 1% relative to the weight of the oil phase. In other embodiments, the amount or concentration of IRM in the oil phase may be a maximum of 20%, e.g. a maximum of 10% and a maximum of 5% relative to the weight of the oil phase. The emulsion may be preserved, so that if examined by an analysis of the antimicrobial effectiveness, it meets the regulatory requirements for topical creams packaged in containers for multiple use.

Alle de ovenfor beskrevne preparater ifølge foreliggende oppfinnelse kan påføres hudoverflatene til et pattedyr. Avhengig av IRM-forbindelseskonsentrasjonen, preparatets sammensetning og hudoverflaten kan den terapeutiske virkning av IRM-forbindelsen kun strekke seg til de overfladiske lag i hudoverflaten eller til vev som ligger under hudoverflaten. Preparatet i følge oppfinnelsen kan følgelig anvendes i behandling av en hudassosiert tilstand som omfatter påføring av ett av de ovenfor nevnte preparater på huden. Som anvendt heri betyr en "hudassosiert tilstand" en inflammatorisk, infeksiøs, neoplastisk eller annen tilstand som omfatter en hudoverflate eller som ligger i tilstrekkelig nærhet til en hudoverflate til at den påvirkes av et terapeutisk middel som påføres hudoverflaten topisk. Eksempler på hudassosierte tilstander omfatter vorter, atopisk dermatitt, basalcellekarsinom, postkirurgiske arr og aktinisk keratose. All of the above-described preparations according to the present invention can be applied to the skin surfaces of a mammal. Depending on the IRM compound concentration, the composition of the preparation and the skin surface, the therapeutic effect of the IRM compound may extend only to the superficial layers of the skin surface or to tissue lying below the skin surface. The preparation according to the invention can consequently be used in the treatment of a skin-associated condition which includes applying one of the above-mentioned preparations to the skin. As used herein, a "skin-associated condition" means an inflammatory, infectious, neoplastic or other condition involving a skin surface or located in sufficient proximity to a skin surface to be affected by a therapeutic agent applied topically to the skin surface. Examples of skin-associated conditions include warts, atopic dermatitis, basal cell carcinoma, post-surgical scars and actinic keratosis.

Preparatene i følge oppfinnelsen kan for eksempel påføres hudoverflaten for behandling av aktinisk keratose (AK). Aktiniske keratoser er premaligne lesjoner som anses biologisk å være enten karsinom in situ eller skvamøs intraepidermal neoplasi. AK er den hyppigst forekommende epidermale tumor og induseres ved ultrafiolett stråling (UV-stråling), typisk fra sollys. Grunnet sin prekanserøse natur kan AK anses å være den viktigste manifestasjon av solindusert hudskade. The preparations according to the invention can, for example, be applied to the skin surface for the treatment of actinic keratosis (AK). Actinic keratoses are premalignant lesions that are considered biologically to be either carcinoma in situ or squamous intraepidermal neoplasia. AK is the most frequently occurring epidermal tumor and is induced by ultraviolet radiation (UV radiation), typically from sunlight. Due to its precancerous nature, AK can be considered the most important manifestation of sun-induced skin damage.

Det er spesielt fordelaktige at preparatet i følge oppfinnelsen påføres huden over et tidsrom som er tilstrekkelig til at det oppnås en ønsket terapeutisk virkning uten uønsket systemisk absorpsjon av IRM-forbindelsen. It is particularly advantageous that the preparation according to the invention is applied to the skin over a period of time that is sufficient for a desired therapeutic effect to be achieved without unwanted systemic absorption of the IRM compound.

EKSEMPLER EXAMPLES

De påfølgende eksemplene gis for ytterligere å beskrive forskjellige IRM-preparater og fremgangsmåter ifølge oppfinnelsen. The following examples are given to further describe various IRM preparations and methods according to the invention.

Eksempel 1- 7 og sammenligningseksempel Cl Examples 1-7 and comparative example Cl

Tabell 1 oppsummerer topiske preparater fremstilt i samsvar med foreliggende oppfinnelse basert på prosent (vekt/vekt). Table 1 summarizes topical preparations prepared in accordance with the present invention based on percentage (weight/weight).

Preparatene som gis i tabell 1 ble fremstilt på følgende måte: The preparations given in Table 1 were prepared in the following way:

Fremstilling av oljefasen: 2-metyl-l-(2-metylpropyl)-lH-imidazo[4,5-c][l,5]naftyridin-4-amin (IRM-forbindelse 1) ble løst i isostearinsyre og isopropylmyristat, om nødvendig ved oppvarming. Carbomer 974P ble så dispergert i oljefasen. Preparation of the oil phase: 2-methyl-1-(2-methylpropyl)-1H-imidazo[4,5-c][1,5]naphthyridin-4-amine (IRM compound 1) was dissolved in isostearic acid and isopropyl myristate, about required during heating. Carbomer 974P was then dispersed in the oil phase.

Er- emstillingav vannfasen:.Dinatrium-EDTA.b.leJøst i.vannet. Melyjparabemag.. propylparaben ble løst i propylenglykol, og denne løsningen ble så tilsatt til vannfasen. Poloxamer 188 ble så tilsatt til vannfasen, og dette ble sammenblandet inntil alt var oppløst. Preparation of the water phase:.Disodium-EDTA.b.leaved in.the.water. Melyjparabemag.. propylparaben was dissolved in propylene glycol, and this solution was then added to the water phase. Poloxamer 188 was then added to the aqueous phase and this was mixed until all was dissolved.

Fasekombinasion: Oljefasen ble tilsatt til vannfasen ved normale betingelser. Emulsjonen ble så homogenisert. Etter homogeniseringen ble Phase combination: The oil phase was added to the water phase under normal conditions. The emulsion was then homogenized. After the homogenization,

natriumhydroksidløsning (20 % vekt/vekt) tilsatt, og den resulterende krem ble sammenblandet inntil den var glatt og enhetlig. pH i kremen ble målt, og en pH-justering ble om nødvendig gjort med ytterligere natriumhydroksidløsning for å oppfylle prosessens mål-pH på 5. sodium hydroxide solution (20% w/w) was added and the resulting cream was blended until smooth and uniform. The pH of the cream was measured and, if necessary, a pH adjustment was made with additional sodium hydroxide solution to meet the process target pH of 5.

Preparater som inneholdt 2-metyl-l-(2-metylpropyl)-lH-imidazo[4,5-c][l,5]naftyridin-4-amin (IRM forbindelse 1) ble analysert for evne til å indusere forhøyet cytokinkonsentrasjon hos rotter etter topisk tilførsel. Denne undersøkelsen ble gjennomført for å evaluere cytokininduksjonen etter én enkelt dose av varierende styrke, analysert på forskjellige tidspunkter, eller for å sammenligne flere doser med én dose av IRM-forbindelse 1. Preparatene som beskrives ovenfor ble analysert ved å undersøke konsentrasjonen av cytokinene TNF-a, MCP-1 (monocyttkjemoattraktantprotein-1) og INF-a-cytokiner i vev og serum etter medikamentbehandlingen. Preparations containing 2-methyl-1-(2-methylpropyl)-1H-imidazo[4,5-c][1,5]naphthyridin-4-amine (IRM compound 1) were analyzed for their ability to induce elevated cytokine concentrations in rats after topical application. This study was conducted to evaluate the cytokine induction after a single dose of varying strength, analyzed at different time points, or to compare multiple doses with a single dose of IRM compound 1. The preparations described above were analyzed by examining the concentration of the cytokines TNF- a, MCP-1 (monocyte chemoattractant protein-1) and INF-a cytokines in tissue and serum after the drug treatment.

Hårløse CD-hunnrotter (Charles River Laboratories, Wilmington, MA) med kroppsvekt 200-250 g ble anvendt i alle undersøkelser. Dyrene ble tilfeldig fordelt på behandlingsgrupper med fem dyr i hver gruppe. Hairless female CD rats (Charles River Laboratories, Wilmington, MA) with a body weight of 200-250 g were used in all studies. The animals were randomly allocated to treatment groups with five animals in each group.

Rottene ble tilvendt å bære krager rundt halsen over to på hverandre følgende dager før den faktiske dosering. Rottene ble forsynt med krager før doseringen for å forhindre inntak av medikamentet, og ble så behandlet topisk med 50 ul aktiv krem eller tilsvarende placebo på høyre side og så oppburet enkeltvis etter doseringen. På forskjellige tidspunkter etter doseringen ble rottene bedøvet og blod oppsamlet ved hjertepunkturen. Blodet fikk koagulere ved romtemperatur og serum ble separert fra koagelet ved sentrifugering og lagret ved -20°C inntil det ble analysert for cytokinkonsentrasjoner. The rats were acclimated to wearing collars around their necks on two consecutive days before the actual dosing. The rats were fitted with collars before dosing to prevent ingestion of the drug, and were then treated topically with 50 µl of active cream or equivalent placebo on the right side and then caged individually after dosing. At various times after dosing, the rats were anesthetized and blood was collected by cardiac puncture. The blood was allowed to clot at room temperature and serum was separated from the clot by centrifugation and stored at -20°C until assayed for cytokine concentrations.

Etter oppsamling av blod ble rottene avlivet og huden fjernet. Vev fra både det behandlede setet (ved) og på det kontralatterale setet (bort fra) ble erholdt ved anvendelse av en 8 mm biopsinål, veid, plassert i en forseglet 1,8 ml fryseampulle og hurtig nedfrosset i flytende nitrogen. Den nedfrosne vevsprøven ble så suspendert i 1,0 ml RPMI-medium (Celox, Hopkins, MH) tilsatt 10 % føtalt bovint serum (Sigma, St. Louis, MO), 2 mM L-glutamin, penicillin/streptomycin og 2-merkaptoetanol (komplett RPMI) blandet med proteaseinhibitorblanding sett III (Calbiochem, San Diego, CA). Vevet ble homogenisert ved anvendelse av en "Tissue Tearor" (Biospec Products, Bartlesville, OK) i tilnærmet 1 min. Vevssuspensjonen ble så sentrifugert ved 2000 rpm i 10 min. under avkjøling for "nedsentrifugering av celleresfer, og supernatanten ble oppsamlet og lagret ved -20°C inntil den ble analysert for cytokinkonsentrasjoner. After blood collection, the rats were euthanized and the skin removed. Tissue from both the treated site (at) and the contralateral site (away from) was obtained using an 8 mm biopsy needle, weighed, placed in a sealed 1.8 ml cryogenic vial and snap-frozen in liquid nitrogen. The frozen tissue sample was then suspended in 1.0 ml RPMI medium (Celox, Hopkins, MH) supplemented with 10% fetal bovine serum (Sigma, St. Louis, MO), 2 mM L-glutamine, penicillin/streptomycin, and 2-mercaptoethanol (complete RPMI) mixed with Protease Inhibitor Mix Kit III (Calbiochem, San Diego, CA). The tissue was homogenized using a Tissue Tearor (Biospec Products, Bartlesville, OK) for approximately 1 min. The tissue suspension was then centrifuged at 2000 rpm for 10 min. under refrigeration to "centrifuge down" cell pellets, and the supernatant was collected and stored at -20°C until assayed for cytokine concentrations.

ELISA-sett for MCP-1 fra rotte ble erholdt fra BioSource Intl. (Camarillo, CA) og for TNF-a fra rotte fra BD Pharmingen (San Diego, CA), og analysene ble utført ifølge produsentens retningslinjer. Resultatene for både TNF-a og MCP-1 ble uttrykt som pg/200 mg vev eller pg/ml serum. Følsomheten for TNF-a-ELISA-analysen var 31,2 pg/ml og for MCP-1-ELISA-analysen 11,7 pg/ml. lFN-a-konsentrasjonen i både serum og hudvev ble bestemt ved anvendelse av en bioanalyse som målte inhibering av den cytopatiske virkning av vesikulært stomatitt-virus på LMS-C2-rottefibroblastceller som beskrevet tidligere (Reiter, M. J., Testerman, T. L., Miller, R.L., Weeks, C. E. og Tomai, M. A. (1994) "Cytokine Induction in Mice by the Immunomodulator Imiquimod". J. Leukocyte Biol. 55, 234-240). IIT Research Institute, Chicago IL, utførte disse analysene. Resultatene for IFN-a-konsentrasjonen ble normalisert ved sammenligning med et standard referansepreparat av IFN-a fra rotte, og resultatene gis som U/ml og er normaliserte pr. mg vev. Rat MCP-1 ELISA kits were obtained from BioSource Intl. (Camarillo, CA) and for rat TNF-α from BD Pharmingen (San Diego, CA), and the assays were performed according to the manufacturer's guidelines. The results for both TNF-α and MCP-1 were expressed as pg/200 mg tissue or pg/ml serum. The sensitivity for the TNF-α ELISA assay was 31.2 pg/ml and for the MCP-1 ELISA assay 11.7 pg/ml. The lFN-α concentration in both serum and skin tissue was determined using a bioassay measuring inhibition of the cytopathic effect of vesicular stomatitis virus on LMS-C2 rat fibroblast cells as described previously (Reiter, M.J., Testerman, T.L., Miller, R.L. , Weeks, C.E. and Tomai, M.A. (1994) "Cytokine Induction in Mice by the Immunomodulator Imiquimod". J. Leukocyte Biol. 55, 234-240). IIT Research Institute, Chicago IL, performed these analyses. The results for the IFN-a concentration were normalized by comparison with a standard reference preparation of IFN-a from rat, and the results are given as U/ml and are normalized per mg tissue.

Resultatene som vises nedenfor i tabell 2-4 er fra tre separate eksperimenter og ble analysert for 1) måling av farmakokinetikken for hele tidsforløpet, 2) måling av doserespons og 3) sammenligning av flere doser med enkeltdoser. The results shown below in Tables 2-4 are from three separate experiments and were analyzed for 1) measurement of full time course pharmacokinetics, 2) measurement of dose response and 3) comparison of multiple doses to single doses.

For å bestemme kinetikken for den lokale og systemiske cytokinproduksjonen etter lokal tilførsel av IRM-forbindelse 1 ble undersøkelsen over det fulle tidsforløp (undersøkelse 1 med resultater i tabell 2) utført ved topisk dosering av rottene med det topiske krempreparat ifølge eksempel 7. Serum og vevsprøver ble uttatt 1, 2, 4, 8, 16, 24 og 48 timer etter doseringen. Flere cytokiner (MCP-1, TNF-a og IFN-a) ble analysert hver for seg. To determine the kinetics of the local and systemic cytokine production after local application of IRM compound 1, the full time course study (study 1 with results in Table 2) was performed by topically dosing the rats with the topical cream preparation according to Example 7. Serum and tissue samples were taken 1, 2, 4, 8, 16, 24 and 48 hours after dosing. Several cytokines (MCP-1, TNF-α and IFN-α) were analyzed separately.

For vevsverdiene analyserte en paret t-test (anvendt for å eliminere variabiliteten innen et individ) for hver målte time forskjellen mellom behandlet vev og kontrollvev fra samme dyr. En p-verdi som var mindre enn alfa=0,05 viste en statistisk signifikant forskjell mellom behandlet vev og kontrollvev på dette tidspunkt. Resultatene gis i tabell 2. En undersøkelse med flere doser ble utført for å måle virkningene av et flerdoseskjema (undersøkelse 2 med resultater vist i tabell 3). Rottene ble dosert to ganger ukentlig i seks timer over tre uker med det topiske krempreparat ifølge eksempel 5. Rotter ble placebobehandlet (sammenligningseksempel Cl) og gitt en enkeltdose for sammenligningens skyld, og dette ble gjort samtidig med den siste dosering i flerdosesettet. Serum og vevsprøver ble uttatt 8 og 24 timer etter doseringen og analysert for MCP-1. For the tissue values, a paired t-test (used to eliminate within-individual variability) analyzed for each measured hour the difference between treated tissue and control tissue from the same animal. A p-value less than alpha=0.05 indicated a statistically significant difference between treated tissue and control tissue at this time point. The results are given in Table 2. A multiple dose study was conducted to measure the effects of a multiple dose schedule (Study 2 with results shown in Table 3). The rats were dosed twice weekly for six hours over three weeks with the topical cream preparation according to example 5. Rats were placebo-treated (comparative example Cl) and given a single dose for the sake of comparison, and this was done at the same time as the last dose in the multi-dose set. Serum and tissue samples were taken 8 and 24 hours after dosing and analyzed for MCP-1.

En analyse som var identisk med analysen i undersøkelse 1 ble utført for undersøkelse 2. Dette resultatsettet ble oppdelt ut fra behandling (flerdose eller enkeltdose) og tidspunkt før analysen. Igjen ble placeboresultatene kun målt etter 8 timer for enkelt dosering, men ble brukt for sammenligning med placebo for alle kombinasjoner av behandling av tidspunkt hver for seg. Resultatene er gitt i tabell 3 nedenfor. An analysis identical to the analysis in study 1 was performed for study 2. This set of results was divided based on treatment (multiple dose or single dose) and time before the analysis. Again, the placebo results were only measured at 8 hours for single dosing, but were used for comparison with placebo for all time-treatment combinations separately. The results are given in table 3 below.

En doseresponsundersøkelse (undersøkelse 3 med resultater vist i tabell 4) ble utført A dose response study (Study 3 with results shown in Table 4) was performed

ved dosering med de topiske krempreparatene ifølge eksempel 3-5 og 7, som inneholder forskjellige konsentrasjoner av IRM-forbindelse 1. Serum og vevsprøver ble tatt 8 og 24 timer etter doseringen og analysert for MCP-1. Disse by dosing with the topical cream preparations according to examples 3-5 and 7, which contain different concentrations of IRM compound 1. Serum and tissue samples were taken 8 and 24 hours after dosing and analyzed for MCP-1. These

undersøkelsene analyserte topisk tilførsel av kremer som omfatter IRM-forbindelse 1 for evne til å gi en lokal MCP-1-induksjon i fire konsentrasjoner. studies analyzed topical application of creams comprising IRM compound 1 for ability to produce a local MCP-1 induction at four concentrations.

Serumresultatene sammenlignet aktiv behandling med placebobehandling The serum results compared active treatment with placebo treatment

-•.(sammenligningseksempel Cl) separat for-hvert av_de_angitte tidspunkt:ene«J3fimerk-.. -- . at placebogruppen kun ble målt 24 timer etter doseringen og at disse observasjonene ble sammenlignet med hvert tidspunkt for den .aktive gruppen. -•.(comparative example Cl) separately for-each of_the_indicated times: the «J3fimerk-.. -- . that the placebo group was only measured 24 hours after dosing and that these observations were compared with each time point for the active group.

Eksempler 14- 18 Examples 14-18

Tabell 9 oppsummerer topiske preparater fremstilt i samsvar med foreliggende oppfinnelse basert på % vekt/vekt. Table 9 summarizes topical preparations prepared in accordance with the present invention based on % w/w.

Eksempler 25- 28 Examples 25-28

Eksempler 136- 140 Examples 136-140

Tabell 17 oppsummerer topiske preparater fremstilt i samsvar med foreliggende oppfinnelse basert pa prosent (vekt/vekt). Table 17 summarizes topical preparations prepared in accordance with the present invention based on percentage (weight/weight).

De topiske kremene fra eksempel 136-140 ble analysert ved anvendelse av analysefremgangsmåten som beskrives nedenfor. Resultatene gis i tabell 18 nedenfor, hvor hver verdi er middelverdien av verdiene fra de tre rottene i behandlingsgruppen. "Normale dyr" fikk ingen behandling. The topical creams from Examples 136-140 were analyzed using the analytical procedure described below. The results are given in Table 18 below, where each value is the mean of the values from the three rats in the treatment group. "Normal animals" received no treatment.

ANALYSEFREMGANGSMÅTE FOR CYTOKININDUKSJON MED EN ENKELT DOSE SINGLE-DOSE CYTOKINE INDUCTION ASSAY PROCEDURE

Hårløse CD-hunnrotter (Charles River Laboratories, Wilmington, MA) med kroppsvekt 200-250 g anvendes. Dyrene fordeles tilfeldig på behandlingsgrupper med tre dyr pr. gruppe. Hairless female CD rats (Charles River Laboratories, Wilmington, MA) with a body weight of 200-250 g are used. The animals are randomly allocated to treatment groups with three animals per group. group.

Rottene akklimatiseres til krager rundt halsen over to på hverandre følgende dager før den faktiske dosering. En 50 /al dose av aktiv krem påføres høyre flanke og gnis forsiktig inn i rottens hud. Rottene påføres så krager og oppstalles enkeltvis for å forhindre inntak av medikamentet. Seks timer etter behandlingen bedøves rottene, og blod (3 ml) oppsamles ved hjertepunksjonen. Blodet får koagulere ved romtemperatur, og sesum-£s&r^eres.fra koage.let yed sentrifugering og lagres.ved . The rats are acclimatized to collars around the neck over two consecutive days before the actual dosing. A 50 µl dose of active cream is applied to the right flank and gently rubbed into the rat's skin. The rats are then fitted with collars and housed individually to prevent ingestion of the drug. Six hours after the treatment, the rats are anesthetized, and blood (3 ml) is collected by cardiac puncture. The blood is allowed to coagulate at room temperature, and the serum is removed from the coagulated by centrifugation and stored at .

-20°C inntil det analyseres for cytokinkonsentrasjoner. -20°C until assayed for cytokine concentrations.

Etter oppsamling av blod avlives rottene og huden fjernes. Vevsprøver (4 fra hvert sete) fra både det behandlede setet og det kontralatterale setet (ubehandlet) erholdes ved anvendelse av en 8 mm biopsinål, veies, plasseres i en forseglet 1,8 ml fryseampulle og nedfryses hurtig i flytende nitrogen. Den nedfrosne vevsprøven suspenderes så i 1,0 ml RPMI-medium (Celox, Hopkins, MN) tilsatt 10 % føtalt bovint serum (Sigma, St. Louis, MO), 2 mm L-glutamin, penicillin/straptomycin og 2-merkaptoetanol (komplett RPMI) sammenblandet med proteaseinhibitorblanding sett III (Calbiochem, San Diego, CA). Vevet homogeniseres ved anvendelse av en "Tissue Tearor" (Biospec Products, Bartlesville, OK) i tilnærmet 1 min. Vevssuspensjonen sentrifugeres så ved 2000 rpm i 10 min. under avkjøling for nedsentrifugering av rester. Supernatanten oppsamles og lagres ved -20°C inntil den analyseres for cytokinkonsentrasjoner. After collection of blood, the rats are euthanized and the skin is removed. Tissue samples (4 from each site) from both the treated site and the contralateral site (untreated) are obtained using an 8 mm biopsy needle, weighed, placed in a sealed 1.8 ml cryogenic vial and flash frozen in liquid nitrogen. The frozen tissue sample is then suspended in 1.0 ml RPMI medium (Celox, Hopkins, MN) supplemented with 10% fetal bovine serum (Sigma, St. Louis, MO), 2 m m L-glutamine, penicillin/streptomycin, and 2-mercaptoethanol ( complete RPMI) mixed with Protease Inhibitor Mix Kit III (Calbiochem, San Diego, CA). The tissue is homogenized using a "Tissue Tearor" (Biospec Products, Bartlesville, OK) for approximately 1 min. The tissue suspension is then centrifuged at 2000 rpm for 10 min. during cooling for centrifugation of residues. The supernatant is collected and stored at -20°C until assayed for cytokine concentrations.

ELISA-sett for MCP-1 fra rotte erholdes fra BioSource Intl. (Camarillo, CA) og for rotte og for TNF-a fra rotte fra BD Pharmingen (San Diego, CA), og analysene utføres ifølge produsentens retningslinjer. Resultatene vist som pg/ml, verdiene for vevsprøvene er normalisert pr. 200 mg vev. Følsomheten for MCP-l-ELISA-analysen er 12 pg/ml og for TNF-a-ELISA-analysen 31 pg/ml. Rat MCP-1 ELISA kits are obtained from BioSource Intl. (Camarillo, CA) and for rat and for rat TNF-α from BD Pharmingen (San Diego, CA), and the assays are performed according to the manufacturer's guidelines. The results shown as pg/ml, the values for the tissue samples are normalized per 200 mg tissue. The sensitivity for the MCP-1 ELISA assay is 12 pg/ml and for the TNF-α ELISA assay 31 pg/ml.

Claims

1. Pharmaceutical preparation, characterized in that it comprises: the immune response modifying (IRM) compound 2-methyl-1-(2-methylpropyl)-1H-imidazo[4,5-c][1,5]naphthyridin-4-amine or a pharmaceutically acceptable salt thereof ; a fatty acid; a hydrophobic, aprotic component which is miscible with the fatty acid and which comprises a hydrocarbyl group with 7 or more carbon atoms, and optionally a hydrophilic viscosity-promoting agent selected from cellulose ethers and carbomers.

2. Preparation according to claim 1, characterized in that it further comprises a preservative system and an emulsifier.

3. Preparation according to claim 1, characterized in that the hydrophilic, viscosity-promoting agent comprises a carbomer.

4. Preparation according to claim 2, characterized in that it comprises: (a) 0.001 to 5% (w/w) 2-methyl-1-(2-methylpropyl)-1H-imidazo[4,5-c][1,5]naphthyridin-4-amine or a pharmaceutically acceptable salt thereof; (b) 0.05-40% (w/w) isostearic acid; (c) 1-30% (w/w) hydrophobic, aprotic component; (d) 0.5-10% (w/w) emulsifier; (e) 0.01-30% (w/w) preservative system; and (f) 0.1-10% (w/w) carbomer.

5. Preparation according to claim 4, characterized in that it comprises (a) 0.03-3% (w/w) 2-methyl-1-(2-methylpropyl)-1H-imidazo[4,5-c][1,5] naphthyridine-4- amine or a pharmaceutically acceptable salt thereof; (b) 3-25% (w/w) isostearic acid; (c) 3-15% (w/w) hydrophobic, aprotic component; (d) 0.75-3.5% (w/w) emulsifier; (e) 0.1-25% (w/w) preservative system; and (f) 0.5-5% (w/w) carbomer.

6. Preparation according to 1, characterized in that the preparation further comprises a preservative system.

7. Preparation according to claim 1, characterized in that the hydrophobic, aprotic component has a hydrophilic/lipophilic balance of less than 2.

8. Preparation according to claim 1, characterized in that the hydrophobic, aprotic component has a pKa value greater than 14.2.

9. Preparation according to claim 1, characterized in that the ratio between the hydrophobic, aprotic component and the fatty acid is 0.025:1 to 600:1.

10. Preparation according to claim 1, characterized in that the combined percentage by weight of the hydrophobic, aprotic component and the fatty acid is 2 to 50.

11. Preparation according to claim 1, characterized in that the fatty acid is isostearic acid.

12. Preparation according to claim 1, characterized in that the hydrophobic, aprotic component is selected from aprotic fatty acid esters, hydrocarbons with 8 or more carbon atoms and wax types.

13. Preparation according to claim 14, characterized in that the aprotic fatty acid ester is isopropyl myristate, isopropyl palmitate, diisopropyl dimerdylinoleate, caprylic acid/caproic acid triglyceride, cetyl ester wax or combinations thereof.

14. Preparation according to claim 2 or 6, characterized in that the preservative system comprises a preservation-promoting solubilizer.

15. Preparation according to claim 14, characterized in that the preservation-promoting solubilizer comprises diethylene glycol monoethyl ether, propylene glycol or a combination thereof.

16. Preparation according to claim 6, characterized in that it comprises: (a) 0.001 to 5% (w/w) 2-methyl-1-(2-methylpropyl)-1H-imidazo[4,5-c][1,5]naphthyridin-4-amine or a pharmaceutically acceptable salt thereof; (b) 0.05-40% (w/w) isostearic acid; - (e)--1-30% (w/w)rhydrdfbb-, aprotic component; and (d) 0.01-30% (w/w) preservative system.

17. Preparation according to claim 6 or 16, characterized in that it further comprises an emulsifying agent and a hydraulic felt, viscosity enhancing agent.

18. Preparation according to claim 19, characterized in that the hydrophilic viscosity-enhancing agent comprises a carbomer.