NO322663B1

NO322663B1 - Antiparasitic preparation for the treatment of fish, as well as the use of hexaflumuron in the preparation of medicinal preparations.

Info

Publication number: NO322663B1
Application number: NO20013187A
Authority: NO
Inventors: Svein Alexandersen; Oystein Evensen; Bernt Martinsen; Christian Syvertsen
Original assignee: Pharmaq As
Priority date: 2001-06-25
Filing date: 2001-06-25
Publication date: 2006-11-13
Also published as: NO20013187D0; NO20013187L

Description

Infeksjon med parasitter er et stort problem så vel i oppdrettsnæringen som hos villfisk både i fersk- og i saltvann. I oppdrett fører parasittangrep til skader på fisk med betydelig tap og merarbeid for fiskeoppdretterne. For eksempel regnes infeksjon med lakselus { Lepeophtheirus salmonis) og "skottelus" ( Caligus elongatus) som det største sjukdomsproblemet ved oppdrett av laksefisk, spesielt hos laks ( Salmo salar) og regn-bueørret ( Oncorhynchus mykiss). I tillegg til utgifter i forbindelse med behandling vil nedklassifisering av slaktefisk, samt redusert tilvekst pga redusert foropptak bidra til de økonomiske tapene for oppdretteren. Infection with parasites is a major problem both in the farming industry and in wild fish in both fresh and salt water. In farming, parasite attacks lead to damage to fish with significant losses and extra work for the fish farmers. For example, infection with salmon lice (Lepeophtheirus salmonis) and "scot lice" (Caligus elongatus) is considered the biggest disease problem in salmon farming, especially in salmon (Salmo salar) and rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). In addition to expenses in connection with treatment, the downgrading of slaughter fish, as well as reduced growth due to reduced pre-take, will contribute to the financial losses for the breeder.

I tillegg til skadene på oppdrettsfisken tyder nye forskningsresultater på at lakselus er den viktigste enkeltfaktoren i å svekke flere ville bestander av laksefisk. Utvandring av laksesmolt fra vassdrag er ofte sammenfallende med at temperaturen på sjøvannet i fjord- og kystområder er stigende, noe som fører til massive påslag av copepoditter (lakseluslarver) på smolten. Et påslag på 40 lakselus eller mer per laksesmolt vil være dødelig for fisk under 25 gram, og i flere regioner i Norge registreres prematur tilbake-vandring av postsmolt sjøørret. Nedgang i laksefiskbestandene som er dokumentert fra en rekke norske lakseelver de siste årene kan ha sammenheng med at mengden lakselus i forbindelse med oppdrettsvirksomhet har økt. In addition to the damage to farmed fish, new research results indicate that salmon lice are the single most important factor in weakening several wild populations of salmon. Emigration of salmon smolt from waterways often coincides with rising seawater temperatures in fjord and coastal areas, which leads to massive infestations of copepodites (salmon lice larvae) on the smolt. An increase of 40 salmon lice or more per salmon smolt will be fatal for fish under 25 grams, and in several regions of Norway premature return migration of post-smolt sea trout is recorded. The decline in salmon stocks that has been documented from a number of Norwegian salmon rivers in recent years may be related to the fact that the amount of salmon lice in connection with farming activities has increased.

Kjent behandlingsprinsipp Known treatment principle

Fram til nå har den vanligste måten for bekjempelse av fiskeparasitter vært ved å bade fisken i en behandlingsløsning. Dette gjelder så vel hud- som gjelleparasitter. Eksempelvis er bading i formalin en meget utbredt behandlingsmåte for en rekke parasitter spesielt i ferskvann. Bading med organofosfater (metrifonate, diklorvos, azamethiphos), pyrethrum, pyrethroider (cypermethrin, deltamethrin) eller hydrogen-peroksid er de mest benyttede badebehandlingsmidlene mot eksempelvis lakselus ( Lepeophtheirus salmonis, Caligus elongatus). Disse midlene virker direkte på parasitten via vannet, og eventuelt absorpsjon av legemiddel i fisken er uvesentlig for midlenes virkning mot parasitten. Until now, the most common way of combating fish parasites has been by bathing the fish in a treatment solution. This applies to both skin and gill parasites. For example, bathing in formalin is a very common method of treatment for a number of parasites, especially in fresh water. Bathing with organophosphates (metrifonate, dichlorvos, azamethiphos), pyrethrum, pyrethroids (cypermethrin, deltamethrin) or hydrogen peroxide are the most commonly used bath treatments against, for example, salmon lice (Lepeophtheirus salmonis, Caligus elongatus). These agents act directly on the parasite via the water, and any absorption of medication in the fish is immaterial to the effect of the agents against the parasite.

Parasittmidler til oral administrasjon er også testet ut til fisk med varierende resultat. Midler som kitinsyntesehemmerne, diflubenzuron og teflubenzuron, og ivermekting er eksempler på substanser som administrert oralt kan være effektive mot parasittsykdommer hos fisk. I tillegg til de midler som er nevnt over er det også en utstrakt bruk av leppefisk for å holde infeksjonen av lakselus under kontroll. Parasitic agents for oral administration have also been tested in fish with varying results. Agents such as the chitin synthesis inhibitors, diflubenzuron and teflubenzuron, and ivermekting are examples of substances which, administered orally, can be effective against parasitic diseases in fish. In addition to the remedies mentioned above, there is also extensive use of wrasse to keep the salmon lice infection under control.

Badbehandling Bath treatment

Substanser til badebehandling av fisk med parasitter, eksempelvis lakselus, må blandes i det vannet fisken normalt svømmer. Noen av de anvendte substansene er vannløselige (azamethiphos), mens andre ikke er løselig i vann (cypermethrin, deltamethrin) hvorpå substansen foreligger som en suspensjon eller emulsjon. For fisk som går i kar vil badebehandling kunne gjennomføres ved at substansformuleringen tilsettes direkte i det karet hvor fisken holdes. Ved behandling av fisk i merder i sjøen heves bunnen av merda manuelt for å minske behandlingsvolumet. Deretter trekkes en hel presenning rundt merda slik at fisken befinner seg innelukket i denne presenningen. Deretter tilsettes behandlingssubstansen til merda, og fisken svømmer i badeløsningen fra 20 - 60 minutter avhengig av behandlingssubstans. Behandlingsmerda må kontinuerlig tilsettes oksygen. Behandling med presenning uten bunn, såkalt skjørtbehandling, blir også be-nyttet i stor grad. Siden behandlingsvolumet i slike tilfeller ikke lar seg eksakt definere, vil man måtte bruke mer aktivsubstans ved skjørtbehandling enn ved behandling i luk-ket presenning. Behandling ved å overføre fisk til en brønnbåt, for deretter å gjennom-føre badebehandling blir også mer og mer vanlig. Substances for bathing fish with parasites, for example salmon lice, must be mixed in the water in which the fish normally swim. Some of the substances used are water-soluble (azamethiphos), while others are not soluble in water (cypermethrin, deltamethrin), on which the substance is present as a suspension or emulsion. For fish that go in tanks, bath treatment can be carried out by adding the substance formulation directly to the tank where the fish are kept. When treating fish in cages in the sea, the bottom of the cage is raised manually to reduce the treatment volume. An entire tarpaulin is then pulled around the cage so that the fish is enclosed in this tarpaulin. The treatment substance is then added to the cage, and the fish swims in the bathing solution from 20 - 60 minutes, depending on the treatment substance. Oxygen must be continuously added to the treatment cage. Treatment with a tarpaulin without a bottom, so-called skirt treatment, is also used to a great extent. Since the treatment volume in such cases cannot be precisely defined, one will have to use more active substance for skirt treatment than for treatment in a closed tarpaulin. Treatment by transferring fish to a well boat, then carrying out bath treatment is also becoming more and more common.

Organofosfater og hydrogenperoksyd virker kun mot preadulte og adulte stadier av lakselus (de 3 siste stadiene av i alt 8 stadier som finns på huden av laksefisk), mens pyrethroider og ivermectin i tillegg også har mer eller mindre veldefinert effekt mot de fastsittende stadiene (de 5 andre stadiene). Ingen av substansene gir beskyttelse mot nye infeksjoner etter gjennomført behandling. Organophosphates and hydrogen peroxide only work against preadult and adult stages of salmon lice (the last 3 stages of a total of 8 stages found on the skin of salmon fish), while pyrethroids and ivermectin also have a more or less well-defined effect against the sessile stages (the 5 other stages). None of the substances provides protection against new infections after completed treatment.

Hydrogenperoksyd er etsende, og må derfor behandles med forsiktighet. I tillegg krever transport av hydrogenperoksyd spesielle sikkerhetsforanstaltninger siden det i store mengder er klassifisert som farlig gods. Organofosfatene er toksiske for mennesker og må derfor behandles med forsiktighet, bl.a. vil søl av substans kunne absorberes over intakt hud og føre til forgiftning. Den terapeutiske sikkerheten av både organofosfater og hydrogenperoksyd i forhold til overdosering av fisk er liten. Feildosering og derpå følgende tap av fisk er ved flere anledninger rapportert. Hydrogen peroxide is corrosive and must therefore be handled with care. In addition, the transport of hydrogen peroxide requires special safety measures since it is classified as dangerous goods in large quantities. The organophosphates are toxic to humans and must therefore be handled with care, e.g. spillage of the substance could be absorbed over intact skin and lead to poisoning. The therapeutic safety of both organophosphates and hydrogen peroxide in relation to overdose of fish is small. Incorrect dosage and subsequent loss of fish have been reported on several occasions.

Pyrethroider har i tillegg til effekt mot preadulte og adulte lus også effekt mot fastsittende stadier av lakselus. De er ikke akutt toksiske for brukerne, men er en stoffgruppe som er fisketoksisk spesielt overfor liten fisk. Mulighet for overdosering og økt døde-lighet er derfor til stede. In addition to being effective against pre-adult and adult lice, pyrethroids are also effective against sessile stages of salmon lice. They are not acutely toxic to users, but are a group of substances that are toxic to fish, especially to small fish. The possibility of overdose and increased mortality is therefore present.

Alle stoffgrupper som er nevnt over må brukes som badebehandling. Dette er arbeidskrevende og til dels stressende for fisken. All substance groups mentioned above must be used as bath treatment. This is labor-intensive and partly stressful for the fish.

Oral behandling Oral treatment

I tillegg til badebehandlinger er det også utviklet midler for oral parasittbekjempelse hos fisk. To kitin syntesehemmere er dokumentert til bruk mot lakselus hos laks, diflubenzuron og teflubenzuron. I tillegg er det makrosykliske laktonet ivermektin i bruk mot parasitter hos salmonider i Chile, Irland og Skottland. In addition to bath treatments, agents have also been developed for oral parasite control in fish. Two chitin synthesis inhibitors have been documented for use against salmon lice in salmon, diflubenzuron and teflubenzuron. In addition, the macrocyclic lactone ivermectin is used against parasites in salmonids in Chile, Ireland and Scotland.

Diflubenzuron og teflubenzuron som tilhører samme substansgruppe som heksaflumuron virker ved å hemme produksjonen av kitin som er en viktig bestanddel i "huden" på insekter og krepsdyr. Ved hvert skall- eller hamskifte vil ny syntese av kitin være nød-vendig for utvikling. Dersom denne dannelsen av kitin blir hemmet, vil utvikling av insektet eller krepsedyret stoppe opp, og individ under utvikling vil dø. I prinsippet vil kitin syntesehemmere virke mot alle organismer som inneholder kitin. Fisk og pattedyr inneholder ikke kitin og vil derfor være upåvirket av stoffer innen denne stoffgruppen. Dette gjenspeiler seg i svært lav toksisitet overfor fisk og mennesker. Diflubenzuron og teflubenzuron gis til fisken via foret, absorberes og fordeles bl.a. til hud- og slimlag, hvor konsentrasjonen blir høy nok til å hemme utvikling av parasittstadier under utvikling. Ulemper ved bruk av diflubenzuron og teflubenzuron er at substansen ikke har effekt mot adulte stadier av parasitter som ikke aktivt syntetiserer kitin. Substansene har heller ikke virkning utover behandlingsperioden. Man er derfor avhengig av at eksempelvis lakselus gjennomgår et skallskifte i behandlingsperioden for å oppnå effekt, noe som ikke alltid er tilfellet ved forholdsvis korte behandlingsperioder (1 uke) og lav vanntemperatur. Behandlingen med disse kitin syntesehemmeme vil heller ikke kunne hindre påslag av nye parasitter kort tid etter avsluttet behandling. Dette skyldes at substansene skilles ut forholdsvis raskt slik at medikamentkonsentrasjonen kommer under terapeutisk nivå i hud- og slimlag. Behandlingen må derfor gjentas ofte dersom det er ny parasittsmitte kontinuerlig fra omgivelsene, noe som ofte er under naturlige forhold. Diflubenzuron and teflubenzuron, which belong to the same substance group as hexaflumuron, work by inhibiting the production of chitin, which is an important component of the "skin" of insects and crustaceans. At each change of shell or ham, new synthesis of chitin will be necessary for development. If this formation of chitin is inhibited, development of the insect or crustacean will stop, and the developing individual will die. In principle, chitin synthesis inhibitors will work against all organisms that contain chitin. Fish and mammals do not contain chitin and will therefore be unaffected by substances within this substance group. This is reflected in very low toxicity to fish and humans. Diflubenzuron and teflubenzuron are given to the fish via the feed, absorbed and distributed i.a. to skin and mucus layers, where the concentration becomes high enough to inhibit the development of developing parasite stages. Disadvantages of using diflubenzuron and teflubenzuron are that the substance has no effect against adult stages of parasites that do not actively synthesize chitin. The substances also do not have an effect beyond the treatment period. One therefore depends on, for example, salmon lice undergoing a change of shell during the treatment period to achieve an effect, which is not always the case with relatively short treatment periods (1 week) and low water temperature. The treatment with these chitin synthesis inhibitors will also not be able to prevent the attack of new parasites shortly after the end of the treatment. This is because the substances are excreted relatively quickly so that the drug concentration falls below the therapeutic level in the skin and mucus layer. The treatment must therefore be repeated often if there is continuous new parasite infection from the environment, which is often the case under natural conditions.

Ivermektin hindrer overføring av nerveimpulser hos laverestående dyr. Dette fører til paralyse og død. Pattedyr og fisk blir også påvirket av ivermektin, men de samme over-føringsmekanismene som påvirkes i laverestående dyr, finns bare i hjernen hos fisk og pattedyr. Pattedyr har en velutviklet blod-hjernebarriere som hindrer toksisk effekt av lave konsentrasjoner. Hos fisk er derimot blod-hjernebarrieren dårligere utviklet, noe som fører til en betydelig overgang av ivermektin hos behandlet fisk, og toksiske symptomer oppstår ved forholdsvis lave konsentrasjoner. Ivermektin er imidlertid effektivt til behandling av parasitter hos fisk, forutsatt at man er nøye med dosering da en relativt liten overdosering kan gi toksiske effekter og dødelighet. Ivermektin blir oftest dosert 1 til 2 ganger i uka for å kontrollere lakselusinfeksjon hos laksefisk. Ivermektin er ikke dokumentert og godkjent til bruk på fisk i noen land. Medikamentet har derfor ikke tilstrekkelig dokumentasjon når det gjelder tilbakeholdelsestider, giftighet overfor fisk, og giftighet i forhold til det marine miljø. Ivermectin prevents the transmission of nerve impulses in lower animals. This leads to paralysis and death. Mammals and fish are also affected by ivermectin, but the same transmission mechanisms that are affected in lower animals are only found in the brain of fish and mammals. Mammals have a well-developed blood-brain barrier that prevents the toxic effect of low concentrations. In fish, on the other hand, the blood-brain barrier is less developed, which leads to a significant transfer of ivermectin in treated fish, and toxic symptoms occur at relatively low concentrations. Ivermectin is, however, effective for treating parasites in fish, provided that one is careful with the dosage, as a relatively small overdose can cause toxic effects and mortality. Ivermectin is most often dosed 1 to 2 times a week to control salmon lice infection in salmon fish. Ivermectin is not documented and approved for use on fish in some countries. The medication therefore does not have sufficient documentation in terms of retention times, toxicity to fish, and toxicity in relation to the marine environment.

Fra WOA1 -9641536 er det kjent behandling av fisk med forbindelsen teflubenzuron. Imidlertid er beskyttelsen her kortvarig. From WOA1 -9641536 it is known to treat fish with the compound teflubenzuron. However, the protection here is short-lived.

In i eks i onsbehandling In i ex i on treatment

Injeksjon av fisk for behandling av parasitter har vært sett på som uegnet ut fra at behandlingen vil være svært arbeidskrevende samt unødig stressende for fisken. I forbindelse med forsøk på utvikling av vaksine mot lakselus har luseantigener vært injisert i fisk, men injeksjon av terapeutiske midler har ikke vært brukt til fisk i den hensikt å behandle eller beskytte fisk mot parasittangrep. Injection of fish for the treatment of parasites has been seen as unsuitable on the basis that the treatment will be very labor-intensive and unnecessarily stressful for the fish. In connection with attempts to develop a vaccine against salmon lice, lice antigens have been injected into fish, but injection of therapeutic agents has not been used for fish with the intention of treating or protecting fish against parasite attacks.

Målet med denne oppfinnelsen har vært å få fram midler for bekjempelse av kitinbærende fiskeparasitter, spesielt lakselus, som ikke har de ulemper kjente midler har, og som i tillegg beskytter behandlet fisk mot infeksjon i en lengre periode etter avsluttet behandling. Dette er tilfellet med foreliggende oppfinnelse som angir et slikt for oral behandling eller badbehandling av fisk for bekjempelse og/eller profylakse av kitinbærende parasitter hos fisk som er angitt i krav 1 's karakteriserende del, dvs. hvor preparatet omfattet heksaflumuron som antiparasittisk substans. The aim of this invention has been to produce means for combating chitin-bearing fish parasites, especially salmon lice, which do not have the disadvantages of known means, and which also protect treated fish against infection for a longer period after the end of treatment. This is the case with the present invention, which specifies such for oral treatment or bath treatment of fish for combating and/or prophylaxis of chitin-bearing parasites in fish as stated in claim 1's characterizing part, i.e. where the preparation included hexaflumuron as an antiparasitic substance.

Oppfinnelsen gjelder også anvendelse av heksaflumuron ved fremstilling av medika-mentelle preparater som er virksomme mot kitinbærende parasitter til badbehandling av fisk, hvor preparatet er utformet til å gi en sluttkonsentrasjon av heksaflumuron i badbehandlingen på 5 ppm. Ved å gjøre nytte av kombinasjon av behandling med andre antibakterielle og/eller antivirusmidler og profylaktisk terapi i et og samme preparat, vil en ved dette kunne få beskyttelse mot både bakterie-, virus- og parasittsykdommer. Bruk av kombinasjonspreparat som har disse egenskapene vil ikke resultere i ekstra stress på fisken eller økt arbeidsmengde for oppdretteren, i og med at bruk av vaksiner mot bakterie- og virussykdommer allerede er vel etablert i oppdrettsnæringen. Preparater ifølge oppfinnelsen kan være formulert i form av en oppløsning, suspensjon eller emulsjon av aktivsubstansen med eller uten andre komponenter. The invention also applies to the use of hexaflumuron in the production of medicinal preparations which are effective against chitin-bearing parasites for bathing fish, where the preparation is designed to give a final concentration of hexaflumuron in the bathing treatment of 5 ppm. By making use of a combination of treatment with other antibacterial and/or antiviral agents and prophylactic therapy in one and the same preparation, one will thereby be able to obtain protection against both bacterial, viral and parasitic diseases. Use of a combination preparation that has these properties will not result in extra stress on the fish or increased workload for the breeder, as the use of vaccines against bacterial and viral diseases is already well established in the farming industry. Preparations according to the invention can be formulated in the form of a solution, suspension or emulsion of the active substance with or without other components.

Oppfinnelsen gjelder anvendelse av heksaflumuron for fremstilling av et medikamentelt preparat for bekjempelse og profylakse av fiskeparasitter, særlig lus hos laksefisk. Heksaflumuron har formelen: The invention relates to the use of hexaflumuron for the production of a medicinal preparation for the control and prophylaxis of fish parasites, particularly lice in salmonids. Hexaflumuron has the formula:

Heksaflumuron kan tilsettes til ferdig produsert fiskefor eller pellet, eller det kan blandes med de andre ingrediensene i fiskefor før tillaging av pellet. Hekaflumuron kan også tilføres som kapsler eller sammen med andre båreprinsipp som fisken spiser, eksempelvis Akvaletter™ (fiskefortabletter). Hexaflumuron can be added to ready-made fish feed or pellets, or it can be mixed with the other ingredients in fish feed before making pellets. Hekaflumuron can also be added as capsules or together with other carrier principles that the fish eat, for example Akvaletter™ (fish food tablets).

Utskillelseshastigheten av heksaflumuron vil bl.a. være avhengig av fiskeart, vanntemperatur og preparatformulering (spesielt for injeksjon). Ut fra de forsøk som er gjort med heksaflumuron vil beskyttelsesperioden være vesentlig lenger enn 8 uker ved bruk av en emulsjons vaksine som bærer for aktivsubstansen. The excretion rate of hexaflumuron will, among other things, be dependent on fish species, water temperature and preparation formulation (especially for injection). Based on the tests carried out with hexaflumuron, the protection period will be significantly longer than 8 weeks when using an emulsion vaccine that carries the active substance.

Ved bruk av aktivsubstansen heksaflumuron, vil heksaflumuron distribueres til alle vev og kroppsdeler, inkludert slimlag, hud, gjeller og tarm. Parasitter som påvirkes av heksaflumuron og er lokalisert i vev med høy nok konsentrasjon vil bli hindret i videre utvikling og dør. Aktuelle lokalisasjoner av parasitter vil kunne være hud, gjeller, tarm og andre indre organer. When using the active substance hexaflumuron, hexaflumuron will be distributed to all tissues and body parts, including mucous layers, skin, gills and intestines. Parasites that are affected by hexaflumuron and are localized in tissues with a high enough concentration will be prevented from further development and die. Current localizations of parasites could be skin, gills, intestines and other internal organs.

Heksaflumuron hemmer syntesen av kitin hos insekter og krepsdyr, og vil kunne påvirke alle parasitter som er avhengig av egen syntese av kitin. Parasitter som er avhengig av kitinsyntese for å utvikle seg, vil dø i løpet av en viss tid etter inntak av heksaflumuron. Krepsdyr vil ikke kunne gjennomgå skallskifte og vil dermed dø. Dette vil eksempelvis være tilfelle for lakselus som er avhengig av kitinsyntese mellom hvert skallskifte. Adulte stadier som ikke har aktiv kitinsyntese, vil ikke påvirkes av heksaflumuron. Hos eksempelvis Gyrodactylus sp. vil kitinsyntesen til festekrokene kunne bli hemmet. Heksaflumuron vil også kunne påvirke eggkvaliteten hos voksen hunner av eksempelvis lakselus, slik at disse klekker unormalt eller gir unormal utvikling av lar-vene med misdannelser og manglende evner til å fullføre en normal utviklingssyklus. Hexaflumuron inhibits the synthesis of chitin in insects and crustaceans, and could affect all parasites that depend on their own synthesis of chitin. Parasites that depend on chitin synthesis to develop will die within a certain time after ingestion of hexaflumuron. Crustaceans will not be able to undergo shell change and will thus die. This would, for example, be the case for salmon lice, which depend on chitin synthesis between each shell change. Adult stages that do not have active chitin synthesis will not be affected by hexaflumuron. In, for example, Gyrodactylus sp. the chitin synthesis of the attachment hooks could be inhibited. Hexaflumuron will also be able to affect the egg quality of adult females of, for example, salmon lice, so that these hatch abnormally or cause abnormal development of the larvae with malformations and inability to complete a normal development cycle.

Det er svært overraskende at heksaflumuron, i tillegg til terapeutisk effekt, også beskytter fisk mot nye parasittangrep i en periode etter avsluttet behandling. Hos laksefisk er fisken beskyttet i minst 8 uker etter behandling overfor ny etablering av lakselus. Dette står i sterk kontrast til de nært beslektede substansene diflubenzuron og teflubenzuron som ikke beskytter mot nyetablering av lakselus (se forsøk 6, og figur 5 og 6 merd 3) ved oral behandling. Dette er en vesentlig forbedring i forhold til nåværende behandlingsalternativer og vil eksempelvis kunne gi bedre muligheter for å beskytte enkeltindivider av spesielt verdifull fisk mot parasittangrep. It is very surprising that hexaflumuron, in addition to its therapeutic effect, also protects fish against new parasite attacks for a period after the end of treatment. In salmon fish, the fish is protected for at least 8 weeks after treatment against new establishment of salmon lice. This is in stark contrast to the closely related substances diflubenzuron and teflubenzuron, which do not protect against the new establishment of salmon lice (see trial 6, and figures 5 and 6, cage 3) with oral treatment. This is a significant improvement compared to current treatment options and will, for example, provide better opportunities to protect individual individuals of particularly valuable fish against parasite attacks.

Det at oppfinnelsen beskytter fisken i minst 8 uker etter behandling er svært gunstig siden behovet for gjentatte behandlinger blir vesentlig redusert. Dette reduserer utslipp av behandlingsmidler til miljøet samtidig som det reduserer oppdretterens kostnader og behov for arbeidskraft. I tillegg vil oppfinnelsen kunne gi beskyttelse til utvandrende vill lakse- og ørretsmolt fra elver og vassdrag til oppvekstområdene i sjøen. Beskyttelse mot lakselusinfeksjon i denne perioden vil kunne være vesentlig for vill-fiskbestanden. The fact that the invention protects the fish for at least 8 weeks after treatment is very beneficial since the need for repeated treatments is significantly reduced. This reduces the discharge of treatment agents into the environment, while at the same time reducing the breeder's costs and need for labour. In addition, the invention will be able to provide protection for emigrating wild salmon and trout molts from rivers and waterways to the rearing areas in the sea. Protection against salmon lice infection during this period could be essential for the wild fish population.

I de forsøk som er gjennomført, er det ikke sett tegn til bivirkninger i forbindelse med injeksjon av heksaflumuron. Dette gjelder ved alle undersøkte doser og for de forskjellige preparatformuleringer som er undersøkt. In the trials that have been carried out, no signs of side effects have been seen in connection with the injection of hexaflumuron. This applies to all investigated doses and to the different preparation formulations that have been investigated.

Forklaring til figurene Explanation of the figures

De forskjellige medfølgende figurer relaterer seg til de enkelte forsøk som er foretatt for å underbygge oppfinnelsen. Figur 1 relaterer seg til forsøk 1 som er foretatt med laks ( Salmo salar), og viser antall lus før og etter behandling med heksaflumuron sammenlignet med en ubehandlet kontrollgruppe. Behandlingsdosen var 9 mg heksaflumuron per kg fisk per dag i 10 dager. Dette er angitt med betegnelsen "Grupper/Tidspunkt" i figuren. Figur 2 relaterer seg til forsøk 2 som er foretatt med laks ( Salmo salar), og viser antall lus før og etter behandlingen med heksaflumuron av fluazuron sammenlignet med en ubehandlet kontrollgruppe. Behandlingsdosen varierte fra 3 - 9 mg heksaflumuron og 9 - 12 mg heksaflumuron per kg fisk per dag i 7 dager. Dette er angitt med betegnelsen "Grupper/Tidspunkt" i figuren. The various accompanying figures relate to the individual experiments that have been carried out to substantiate the invention. Figure 1 relates to experiment 1, which was carried out with salmon (Salmo salar), and shows the number of lice before and after treatment with hexaflumuron compared to an untreated control group. The treatment dose was 9 mg hexaflumuron per kg fish per day for 10 days. This is indicated by the designation "Groups/Time" in the figure. Figure 2 relates to experiment 2, which was carried out with salmon (Salmo salar), and shows the number of lice before and after the treatment with hexaflumuron of fluazuron compared to an untreated control group. The treatment dose varied from 3 - 9 mg of hexaflumuron and 9 - 12 mg of hexaflumuron per kg of fish per day for 7 days. This is indicated by the designation "Groups/Time" in the figure.

I figuren betyr forkortelsene "8 d.e.beh." 8 dager etter behandling, og <*> betyr at medikamentet er gitt som "Akvaletter". In the figure, the abbreviations mean "8 d.e.beh." 8 days after treatment, and <*> means that the drug is given as "Aqualets".

Forsak som underbygger oppfinnelsen Case that supports the invention

For å påvise effekten av forskjellige formuleringer for å oppnå profylaktisk beskyttelse mot parasitter hos fisk, samt effekten av heksaflumuron som et effektivt terapeutisk og profylaktisk middel mot parasitter hos fisk, er følgende forsøk gjennomført: In order to demonstrate the effect of different formulations to achieve prophylactic protection against parasites in fish, as well as the effect of hexaflumuron as an effective therapeutic and prophylactic agent against parasites in fish, the following experiments have been carried out:

Forsøk 1 Attempt 1

Ca 800 laks ( Salmo salar) som veide ca 800 gram i gjennomsnitt ble holdt i 2 forskjellige mini-merder, 400 i hver merd. Fisken ble utsatt for naturlig smitte av lakselus. About 800 salmon (Salmo salar) weighing about 800 grams on average were kept in 2 different mini cages, 400 in each cage. The fish were exposed to natural infection by salmon lice.

Den fikk et kraftig påslag, og behandling med heksaflumuron ble initiert i den ene merda, mens den andre forble ubehandlet og fungerte som negativ kontroll. Den be-handlede merda fikk heksaflumuron som oral behandling, hvor substansen var coatet på utsiden av ordinær fiskepellet. Fisken ble dosert 9 mg heksaflumuron per kg kroppsvekt per dag i 10 dager med en medisinpellet som inneholdt 1,5 g heksaflumuron per kg for. Fisken ble foret på ordinær måte med denne medisinpelleten, mens kontroll-fisken fikk ordinært fiskefor fra T. Skretting A/S (Nutreco). Vanntemperaturen var 7,6 - 9,4 °C under forsøket. Figur 1 viser at den gjennomførte heksaflumuronbehandlingen reduserte antall lus med mer enn 90 % i forhold til kontrollgruppen. Reduksjonen av følsomme chalimus og preadulte stadier var ca. 95 %. It had a strong attack, and treatment with hexaflumuron was initiated in one cage, while the other remained untreated and served as a negative control. The treated merda received hexaflumuron as an oral treatment, where the substance was coated on the outside of ordinary fish pellets. The fish were dosed with 9 mg of hexaflumuron per kg of body weight per day for 10 days with a medicine pellet containing 1.5 g of hexaflumuron per kg of feed. The fish were fed in the ordinary way with this medicinal pellet, while the control fish received ordinary fish feed from T. Skretting A/S (Nutreco). The water temperature was 7.6 - 9.4 °C during the experiment. Figure 1 shows that the hexaflumuron treatment carried out reduced the number of lice by more than 90% compared to the control group. The reduction of sensitive chalimus and preadult stages was approx. 95%.

Forsøk 2 Attempt 2

Ca. 600 laks ( Salmo salar) som veide ca. 1000 g i gjennsomsnitt ble holdt i en mini-merd. Fisken ble utsatt for naturlig smitte av lakselus. Før behandling hadde fisken vært utsatt for kraftig lakselussmitte, med et gjennomsnitt på ca. 93 lus i alle stadier per fisk. Før behandling ble fisken fordelt på 6 forskjellige mini-merder med 100 fisk i hver. Tre merder ble behandlet oralt med heksaflumuron, to ble behandlet oralt med fluazuron (en annen kitin syntesehemmer) og en fungerte som negativ kontroll. About. 600 salmon (Salmo salar) which weighed approx. An average of 1000 g was kept in a mini-cage. The fish were exposed to natural infection by salmon lice. Before treatment, the fish had been exposed to heavy salmon lice infestation, with an average of approx. 93 lice in all stages per fish. Before treatment, the fish were distributed among 6 different mini-cages with 100 fish in each. Three cages were treated orally with hexaflumuron, two were treated orally with fluazuron (another chitin synthesis inhibitor) and one served as a negative control.

Dosering i de forskjellige merdene er vist i tabellen under. Dosing in the different cages is shown in the table below.

Alle merdene ble behandlet samtidig. Fisken i kontrollmerda fikk ordinært fiskefor fra Ewos. Vanntemperaturen var 8,0 - 9,8 °C under forsøket. Figur 2 viser at den gjennomførte heksaflumuronbehandlingen reduserte antall lus med mer enn 70 % i forhold til kontrollbehandling i alle de heksaflumuronbehandlede gruppene. Reduksjonen av følsomme chalimus og preadulte stadier var > 90 %. For gruppene som ble dosert med den høyeste doseringen var det en reduksjon på > 99 %. Figur 2 viser også at gruppene behandlet med fluazuron kun hadde 25 % reduksjon i forhold til kontrollen. All cages were treated simultaneously. The fish in the control cage received ordinary fish feed from Ewos. The water temperature was 8.0 - 9.8 °C during the experiment. Figure 2 shows that the implemented hexaflumuron treatment reduced the number of lice by more than 70% compared to the control treatment in all the hexaflumuron-treated groups. The reduction of sensitive chalimus and preadult stages was > 90%. For the groups dosed with the highest dosage, there was a reduction of > 99%. Figure 2 also shows that the groups treated with fluazuron only had a 25% reduction compared to the control.

Claims

rta, ■ 1. Preparation for oral treatment or bath treatment of fish for combating and/or prophylaxis of chitin-bearing parasites in fish,

characterized in that the preparation includes hexaflumuron as an antiparasitic substance.

2. Preparation according to claim 1,

characterized in that the preparation is available as a microemulsion.

3. Preparation according to claim 1 or 2,

characterized in that the preparation is available as a concentrate.

4. Preparation according to claim 1,

characterized in that the preparation is available as a pre-preparation.

5. Preparation according to any of claims 1-4,

characterized in that the preparation is suitable for treating salmonids such as salmon, trout and/or rainbow trout.

6. Preparation according to any of claims 1-5,

characterized in that the preparation is suitable for combating chitin-bearing parasites in fish, the parasites being selected from the group of salmon lice, scutella lice and/or Gyrodactylus.

7. Use of hexaflumuron in the production of a medicinal preparation that is effective against chitin-bearing parasites for bathing fish, where the preparation is designed to give a final concentration of hexaflumuron in the bathing treatment of 5 ppm.

8. Use of hexaflumuron in the manufacture of a medicinal preparation that is effective against chitin-bearing parasites for oral treatment of fish, where the preparation is designed to give an added amount of hexaflumuron of 4 mg/kg fish - 10 mg/kg fish.

9. Use according to claim 7 or 8, where the prepared preparation is suitable for treating salmonids such as salmon, trout and/or rainbow trout.

10. Use according to claim 7 or 8, where the prepared preparation is suitable for combating chitin-bearing parasites in fish, the parasites being selected from the group of salmon lice, scutella lice and/or Gyrodactylus.