NO321663B1 - Anvendelse av et lidokain for fremstilling av et preparat for a redusere fagocytose av spermatozoer. - Google Patents

Anvendelse av et lidokain for fremstilling av et preparat for a redusere fagocytose av spermatozoer. Download PDF

Info

Publication number
NO321663B1
NO321663B1 NO19993921A NO993921A NO321663B1 NO 321663 B1 NO321663 B1 NO 321663B1 NO 19993921 A NO19993921 A NO 19993921A NO 993921 A NO993921 A NO 993921A NO 321663 B1 NO321663 B1 NO 321663B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
lidocaine
spermatozoa
endometriosis
fertility
peritoneal fluid
Prior art date
Application number
NO19993921A
Other languages
English (en)
Other versions
NO993921L (no
NO993921D0 (no
Inventor
Greta Edelstam
Original Assignee
Edelstam Inc
Greta Edelstam
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Edelstam Inc, Greta Edelstam filed Critical Edelstam Inc
Publication of NO993921L publication Critical patent/NO993921L/no
Publication of NO993921D0 publication Critical patent/NO993921D0/no
Publication of NO321663B1 publication Critical patent/NO321663B1/no

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A61K31/167Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide having the nitrogen of a carboxamide group directly attached to the aromatic ring, e.g. lidocaine, paracetamol
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/395Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/10Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for impotence

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Anvendelse av et lokalt anestetikum for fremstilling av et medikament for anvendelse mot infertilitet eller for økt fertilitet.Oppfinnelsen angår også et farmasøytisk preparat omfattende en farmasøytisk effektiv dose av et lokalt anestetikum sammen med en farmasøytisk akseptabel eksipiens. Den angår også en fremgangsmåte for økt fertilitet hos en kvinne med det farmasøytiske preparat.

Description

Teknisk område
Foreliggende oppfinnelse angår anvendelse av et lidokain for fremstilling av et preparat for å redusere fagocytose av spermatozoer for å øke fertilitet. Den angår også anvendelse av en farmasøytisk effektiv konsentrasjon av lidokain sammen med en farmasøytisk akseptabel eksipiens ved fremstilling av et medikament for å redusere fagocytose av spermatozoer for å øke en kvinnes fertilitet i forhold til kvinnens nåværende fertilitet.
Oppfinnelsen bakgrunn
Infertilitet eller subfertilitet kan være et problem for mennesker rammet av dette. En vanlig behandling av infertile kvinner er IVF ( in vitro fertilisering)-behandling. Grunnlaget for IVF-behandlingen er som følger: Stimulering av ovulasjon: daglige hormoninjeksjoner, ultralydundersøkelse og blodprøver.
Oocyttuttak: ultralydrettledet ovariepunksjon utført vaginalt under lokal anestesi.
Preparering av spermatozoer: "swim-up, swim-down"-spermieutvelgelse eller andre fremgangsmåter for å utvelge den optimale populasjon med den beste progressive motilitet.
In vitro fertilisering: inkubering av oocytter og den utvalgte populasjon av spermatozoer i en celleinkubator. Direkte mikroskopisk inspeksjon av celledeling og utvelgelse av den mest vitale blastocytt.
Embryooverføring: 2-3 blastocytter med den beste vitalitet avleveres i livmorhulen for forhåpentlig implan-tasjon i endometriet. IVF-behandling er en kostbar metode som for noen par initierer kompliserte psykologiske bieffekter. Den tekniske og kunstige måte å prøve å bli gravid på har ulempene for paret med å gå igjennom behandling som på en skadelig måte kan påvirke forholdet. Etter all den besværlige behandling er det bare en graviditetsfrekvens på 25 til 30 %, hvilket medfører at de som ikke lykkes sitter igjen med et ødelagt forhold og fortsatt ingen barn. Kostnadene med IVF-behandling er ca. 20 000 - 25 000 SEK per menstruasjonssyklus. På tross av mange tidligere studier er årsakene til infertilitet under endometriose ikke klarlagt, ei heller mangel på forbedret fertilitetsfrekvens etter behandling. Spesielt er forholdet uklart mellom mild endometriose og subfertilitet i fravær av adhesjon til bekkenet (Mahmood, TA, Templeton A. Patophysiology of mild endometriosis: review of literature. Human Reproduction 1990; 5:765-784).
Økt antall leukocytter er observert i peritonealvæsken (PF) hos pasienter med endometrielle peritoneale implantater og antas å være en pågående steril inflammasjon (Haney AF, Muscato JJ, Weinberg JB: Peritoneal fluid cell populations in infertility patients. Fertil Steril 1981, 35:696-698; Edelstam GAB, Lundkvist OE, Venge P, Laurent TC: Hyaluronan and myeloperoxidase in the peritoneal fluid during genital inflammation 1994, 18:13-21). Det økte antall leukocytter inneholder in vivo primede makrofager som sekrerer en makrofagavledet vekstfaktor (MDGF) som kan forklare prolifer-eringen av endometrievev (Halme J, White C, Kauma S, Esters J, Haskill S: Peritoneal macrophages from patients with endometriosis release growth factor activity in Vitro. J Clin Endcrin and Metabolism. 1988;66:1044-49). Andre sekretoriske produkter fra makrofagene, vekstfaktorer slik som TNF og interferon, har gamettoksisitet og kan også ha en skadelig innvirkning på fertilitetsprosessen (Halme J: Role of peritoneal inflammation in endometriosis -assosiated intertility. Ann N Y Acad Sei 1991; 622:266-74).
Også den cellefrie peritonealvæske er viktig ved redusert fruktbarhet, da det er vist at den betydelig reduserer evnen til å plukke opp egg fra egglederes fimbria (Suginami H, Yano K, Watanbe K, Matsnura S: A factor inhibiting ovum capture by the oviductal fimbriae present in endometriosis peritoneal fluid. Fertil Steril 1986; 46:1140-1146). I peritonealvæsken fra pasienter med endometriose og uforklarlig infertilitet er en redusert progressiv hastighet av spermatozoer blitt funnet (Makarand K, Oak M, Chantler EN, Vaughan Williams CA, Elstein M: Sperm survival studies in peritoneal fluid from infertile women with endometriosis and unexplained infertility. Clinical reproduction and fertility 1985; 3:297-303.). Enda mer interessant er den økte fagocytose av spermatozon som er blitt funnet ved in vitro inkubering i 24 timer med perionealvæske fra pasienter med endometriose (Muscato JJ, Haney AF, Weinberg JB: Sperm phagocytosis by human peritoneal macrophages: a possible cause of infertility in endometriosis. Am J Obstet Gynecol 1982; 144: 503-510). I den spesielle studie var det imidlertid flere forskjellige spermiedonorer og involverte immunologiske faktorer kan derfor ikke ekskluderes.
Teknikkens stand beskrives også i FR 2704147, S. J. Bennett et al., J. of Assisted Reprod. and Genetics, bind. 9, 1992, s. 271-273, P. Jha et al., Am. Journal of Reproductive Immunology, bind 36, 1996, s. 235-237 og I. M. Oda et al., Journal of Submicroscopic cytology, bind 14, 1982, s. 313-322.
Oppsummering av oppfinnelsen
Foreliggende oppfinnelse gjelder anvendelse av et lidokain for fremstilling av et preparat for å redusere fagocytose av spermatozoer for å øke fertilitet og anvendelse av en farmasøytisk effektiv konsentrasjon av lidokain sammen med en farmasøytisk akseptabel eksipiens ved fremstilling av et medikament for å redusere fagocytose av spermatozoer for å øke en kvinnes fertilitet i forhold til kvinnens nåværende fertilitet. Det er blitt funnet ved in vitro studier at fagocytose av spermatozoer reduseres av lidokain. Det antas at denne effekt av lidokain skyldes stabilisering av cellemembranen ved å forhindre økt Na<+->permeabilitet og muligens ved å interferere med ATP i cellemembranen. Kostnadene ved denne behandling vil være ca. 10 % av IVF-behandling, f.eks. 2 500 SEK per menstruasjonssyklus. Den er ingen teknisk fertili-seringsprosess som kan medføre psykologiske bieffekter. Denne behandling kan forsøkes hos pasienter med endometriose og/eller lette mekaniske årsaker til infertilitet. Den kan utføres mens det ventes på IVF og påvirker ikke muligheten av en senere vellykket IVF-behandling.
Så langt er ingen behandling av infertilitet med lidokain rapportert i litteraturen. Andre farmasøytiske effekter av lidokain er imidlertid kjent, som f.eks. i EP 507 160, der det beskrives et eksternt preparat for påføring på huden inneholdende; lidokain som omfatter et medikamentinneholdende lag plassert på et fundament. Preparatet bør anvendes for behandling av herpes zoster neuralgi og postherpetisk neuralgi.
Kort beskrivelse av figurene
Anvendt i figurene betyr "endometr" endometriose og "end-prob" mulig endometriose. Figur 1 er en skjematisk fremstilling som viser antall frie spermatozoer for hver dags inkubering; med cellemedium (A, kontroll), med cellemedium og lidokain (B), med peritonealvæske (C, kontroll) og med peritonealvæske og lidokain (D). Figur 2 er en skjematisk fremstilling av antall progressivt bevegende spermatozoer for hver dags inkubering; med cellemedium (A, kontroll), med cellemedium og lidokain (B), med peritonealvæske (C, kontroll) og med peritonealvæske og lidokain (D). Figur 3 er en skjematisk fremstilling av antall ikke-progressive men bevegelige spermatozoer for hver dags inkubering; med cellemedium (A, kontroll), med cellemedium og lidokain (B), med peritonealvæske (C, kontroll) og med peritonealvæske og lidokain (D). Figur 4 er en skjematisk fremstilling av antall levende men stasjonære spermatozoer vist for hver dags inkubering; med cellemedium (A, kontroll), med cellemedium og lidokain (B), med peritonealvæske (C, kontroll) og med peritonealvæske og lidokain (D). Figur 5 er en skjematisk fremstilling av antall døde spermatozoer vist per dags inkubering: med cellemedium (A, kontroll), med cellemedium og lidokain (B), med peritonealvæske (C, kontroll) og med peritonealvæske og lidokain (D).
Detaljert beskrivelse
Med henvisning til figurene 1-5, beskrives anvendelse av et lokalt anestetikum for fremstilling av et medikament for anvendelse mot infertilitet og for økt fertilitet. Eksempler på slike substanser er bupivakain (1-butyl-N-(2,6-dimetyl-fenyl)-2-piperidinkarboksamid), lidokain (2-(dietylamin)-N-(2,6-dimetylfenyl)acetamid), mepivakain (N-(2,6-dimetylfenyl)-1- metyl-2-piperidinkarboksamid), prilokain (N-(2-metylfenyl)-2- (propylamino)propanamid) og ropivakain ((S)-N-(2,6-dimetyl-fenyl)-l-propyl-2-piperidinkarboksamid). Andre lokalanestetika kan også anvendes. I denne oppfinnelsen anvendes lidokain.
Et annet trekk ifølge foreliggende oppfinnelse er en anvendelse av en farmasøytisk effektiv konsentrasjon av lidokain sammen med en farmasøytisk akseptabel eksipiens ved fremstilling av et medikament for å redusere fagocytose av spermatozoer for å øke en kvinnes fertilitet i forhold til kvinnens nåværende fertilitet. Konsentrasjonen er en konsentrasjon som har en effekt på infertilitet hos en kvinne eller en konsentrasjon som øker fertiliteten hos en kvinne. Dosen og konsentrasjonen kan bestemmes av legen. Konsentrasjonen av lidokain er minst 5 ug/ml. Det kan anvendes 100-2000 ug i 1-20 ml, fortrinnsvis ca. 118 jig. Dosen som administreres er minst 100 ug, helst ca. 1000 ug.
Lidokain kan blandes med eksipienser som er farma-søytisk akseptable og kompatible med lidokainet og i mengder egnet for anvendelse. I tillegg kan, om ønskelig, preparatet inneholde små mengder hjelpestoffer som fukte- eller emul-geringsmidler, pH-buffermidler og lignende som øker effek-tiviteten av den aktive ingrediens.
Det farmasøytiske preparat ifølge oppfinnelsen kan omfatte farmasøytisk akseptable salter av komponentene. Farmasøytisk akseptable salter omfatter syreaddisjonssalter som dannes med uorganiske syrer, slik som f.eks. saltsyre eller fosforsyrer, eller slike organiske syrer som eddiksyre, vinsyre og mandelsyre.
Fysiologisk tolererbare bærere er vel kjente innen teknikken. Eksempler på bærere i væskeform er sterile vandige løsninger som ikke inneholder stoffer i tillegg til de aktive ingredienser og vann, eller inneholder en buffer slik som natriumfosfat ved fysiologisk pH-verdi, fysiologisk saltvann eller begge, slik som fosfatbufret saltvann. Videre kan vandige bærere inneholde mer enn ett buffersalt, så vel som salter slik som natriumklorid og kaliumklorid, dekstrose, propylenglykol, polyetylenglykol og andre oppløselige stoffer.
Preparatet kan også omfatte hyaluronan som er en viskøs substans f.eks. i gelform. Hyaluronan gir en langsom frigivelse av den aktive substans hvilket er fordelaktig fordi befruktning kan finne sted opp til 24 timer etter ovulasjon og behandling ifølge oppfinnelsen. En annen fordel er at hyaluronan har en stimulerende effekt på spermiene (Zimmerman ER, Drobnis E, Robertson KR, Nakajima ST, Kim H: Semen preparation with the Sperm Select system versus a washing technique. Fertil Steril 1994; 61:269-275).
Infertilitet er vanligvis ikke ansett som en sykdom. Det beskrives også en fremgangsmåte for behandling av infertilitet hos en kvinne med et farmasøytisk preparat ifølge oppfinnelsen, kjennetegnet ved at det farmasøytiske preparat settes inn ved perturbasjon.
Det omtales spesielt en kosmetisk eller en ikke-terapeutisk fremgangsmåte mot infertilitet og for økt fertilitet der a)ovulasjon diagnostiseres, b)en behandling med et lokalt anestetikum gis når ovulasjon forventes ifølge trinn
a) .
Behandlingen utføres fortrinnsvis ved perturbasjon.
Helst er trinnene som følger:
Spontan ovulasjon: primær behandling under normal menstruasjonssyklus. Stimulering bare hos anovulatoriske pasienter og primært med Clomifen (tabletter) som er lette og billige. En blodprøve er nødvendig etter ovulasjon for å bekrefte at det har vært en ovulasjon under behandlings-syklusen.
LH (luteiniserende hormon)-test: LH-toppen 24-36 timer før ovulasjon diagnostiseres ved en hjemmetest av en urinprøve.
Perturbasjon: Når LH-testen er positiv gis en pertubasjonsbehandling med f.eks. 10 ml av 100 ug/ml lidokain i fysiologisk NaCl eller Ringer-løsning under en normal gynekologisk undersøkelse. Det behøves ingen bedøvelse.
Fertilisering: Ingen kunstig behandling. Paret vil prøve å oppnå graviditet på normal måte ved samleie hjemme etter pertubasjonsbehandlingen er gitt.
Fravær av skadelige effekter på spermieoverlevelser viser at spermatozoene er upåvirket av lidokain hvilket også er vist i andre studier (Bennett SJ, Bolton V, Parsons J. The effects of lignocain on human sperm motility. J. Assisted Reprod. & Genetics 1992; 9:271-3). Dette ser ut til å være tilfelle også for oocyttene da høye nivåer av lidokain er blitt målt uten noen problemer med fertilisering eller embryo-utvikling (Bailey-Pridham DD, Cook CL. Reshef E, Hurst HE, Drury K, Yussman MA. Follicular fluid lidocain levels during transvaginal oocyte retrieval. Fertil Steril 1990; 53:171-173). Det høyeste nivå var 118 ug/ml hvilket betyr at dosen på 1000 ug lidokain gitt ved in vitro inkubering bør kunne anvendes fortynnet til f.eks. 100 ug/ml i 10 ml isoton væske. Denne konsentrasjon vil nå anvendes i en klinisk studie av graviditetsresultat etter perturbasjon utført 24 timer før ovulasjon for å øke spermieoverlevelse.
Lidokain er blitt anvendt i mange år uten noen rapporter på skadelige effekter under-svangerskap hvilket også er blitt vist ved dyrestudier (Ramazzotto J, Curro FA, Paterson JA, Tanner P, Coleman M. Toxicological Assessment of Lidocaine in the Pregnant Rat. J Dent Res 1985; 64:1214-1218 og bør derfor være mulig å anvende ved behandling av infertilitet hos pasienter med endometriose.
Oppfinnelsen illustreres ved det følgende eksempel. Alle tekniske og vitenskapelige betegnelser som anvendes, dersom ikke annet er definert, har til hensikt å ha den samme betydning som vanligvis forstås av fagpersoner innen teknikken. Teknikkene anvendt i dokumentet er de teknikker som er kjent for fagpersoner innen teknikken dersom ikke annet er beskrevet.
Eksempel 1 - reduksjon av fagocytose av spermatozoer i PF (peritonealvæske) hos kvinner med endometriose.
Denne studie ble gjenstand for ytterligere analyse av leukocyttfunksjonen ved redusert fertilitet under endometriose og også leting etter en potensiell terapeutisk tilnærming. For å ekskludere immunologisk påvirkning deltok bare en spermie-donor i eksperimentene. Tilberedte spermieprøver ble inkubert med usentrifugert peritonealvæske fra friske kvinner og kvinner med endometriose for å evaluere betydningen av fagocytose av spermatozoer på den reduserte fruktbarhet under endometriose. Antall levedyktige spermatozoer i inkuberingene ble telt daglig i fem dager med eller uten nærvær av lokale anestetika som ble tilsatt for å finne en fremgangsmåte for å redusere aktiviteten til de peritoneale leukocyttpopulasjoner.
Materialer og metoder
Pasienter
Kvinner: Pasientene ble inndelt i tre ulike grupper. Kontrollmaterialet {n = 9, gjennomsnittsalder - 38,5 år) bestod av kvinner som gjennomgikk laparoskopisterilisering eller kvinner med diffuse magesmerter. Kontrolltilfellene hadde laparoskopiske funn ansett som normale med anatomisk normal livmor og eggledere.
Undersøkelsesgruppen var kvinner som gjennomgikk laparoskopi for å finne årsaken til infertilitet eller magesmerter og der diagnosen var endometriose (N = 11, gjennomsnittsalder = 34,5 år). I denne gruppen var diagnosen lapara-skopisk hos 8 pasienter og anamnestisk mulig endometriose hos 3 pasienter, men disse hadde ennå ikke utviklet noen endometriotiske implantater som kunne ses ved laparoskopi.
Mann: Spermiedonoren var en frisk 38 år gammel mann med normal fertilitet med en kontinensperiode på 2-3 dager før hver spermieprøve. Spermieprøvene ble preparert ved "svømme-opp-teknikken" for å utvelge den optimale populasjon (Russel LD, Rogers BK. Improvement in the quality and fertilization potential of a human sperm population using the rise technique. J Androl 1987; 8:25).
Prøver av peritonealvæske innsamlet ved laparoskopi
Etter at pasientene var blitt anestesert, ble blod-prøver tatt for senere analyser av hyaluronan, som kan være en markør i PF for pågående inflammasjon for å ekskludere en PID {pelvis inflammatorisk sykdom). Ved begynnelsen av laparo-skopien med instrumentene forsvarlig i abdominal hull, ble all peritonealvæske som kunne frembringes i Douglas-posen aspirert med en sugende enhet gjennom et teflon-kateter (diameter 1,7 mm, Optinova, Godby, Finland) og blandet med 10 IU heparin per ml (Olive DL, Weinberg JB, Haney AF. Peritoneal macrophages and infertility: the association between cell number and pelvic pathology. Fertil Steril 1985; 44:772-777) i en teflonflaske (Nalgene, Brochester, NY, USA) og umiddelbart tatt hånd om. Mengden peritonealvæske ble bestemt ved veiing på en elektrisk vekt. Teflon var det valgte materiale for inn-samling av PF på grunn av dets lave adhesjon til pattedyr-celler (Grinnell F, Milam M, Srere PA. Studies on cell adhesion. Arch Biochem Biophys 1972; 153:193-198). Heparin ble anvendt som antikoagulasjonsmiddel for å forhindre aggregering av leukocytter (Makarand et. al. 1985). Tidligere er sitrat blitt anvendt (Edelstam et al. 1994) som har skadelige effekter på spermieviabiliteten under spermieinkuberingen. Alle prøver ble tatt etter tillatelse fra pasientene og innsamlingsprosedyren var godkjent av den etiske komité, det medisinske fakultet, Uppsala universitet, Sverige.
Inkubering av spermatozoer og peritonealvæske
Teflonampuller ble anvendt ved alle inkuberinger som ble utført i en fuktig celleinkubator som følger: a) cellemedium (1 ml), spermatozoer (IO<6> i 1 ml cellemedium) og 0,1 ml NaCl. b) cellemedium (1 ml), spermatozoer (IO<6> i 1 ml cellemedium) og 0,1 ml lidokain 10 mg/ml ("Xylocain", ASTRA). c) spermatozoer (IO<6> i ml cellemedium), peritonealvæske (1 ml) og 0,1 ml NaCl. d) spermatozoer (IO<6> i 1 ml cellemedium), 0,1 ml lidokain (10 mg/ml) og peritonealvæske (1 ml).
Earls cellemedium (Sigma) med 0,35 % BSA (bovint serumalbumin). Resten av peritonealvæsken ble sentrifugert og supernatanten fryst (-20 °C) for senere analyse av hyaluronan (Edelstam et al. 1994). Ampullene ble analysert daglig i løpet av fem dager og følgende ble telt i alle A-D-inkuberingene opp til 100 spermatozoer: antall frie spermatozoer ikke-adherente til leukocytter
antall spermatozoer med progressiv motilitet
antall spermatozoer med ikke-progressiv bevegelse antall spermatozoer som er stasjonære og levende antall døde spermatozoer
Også prosent levende peritoneale leukocytter ble registrert daglig ved anvendelse av trypanblått.
Resultater
Hovedfunnet var at det var statistisk signifikant færre fagocyterte spermatozoer (p < 0,02) i ampullene når de ble inkubert med peritonealvæske og lidokain. Spermatozoer ble observert fanget i store aggregater av leukocytter og noen gjennomgikk tilsynelatende fagocytose følgelig ble antall frie funksjonelle spermatozoer redusert.
Spermieoverlevelse med og uten endometriose. Etter to dagers inkubering var det statistisk signifikant flere frie spermatozoer i inkuberingene med peritonealvæske fra normal-gruppen sammenlignet med endometriosegruppen (Kruskal Wallis p<0,014). Spermieoverlevelse med og uten lidokain. Ingen skadelige effekter ble funnet på spermieoverlevelse og det var statistisk ingen signifikant forskjell mellom inkuberinger av spermatozoer med eller uten lidokain etter 24 eller 48 timer. P-verdien ifølge Wilcoxon vises henholdsvis i tabell I og II.
Spermieoverlevelse med og uten PF ( peritonealvæske) og lidokain, uavhengig av diagnose. Den progressive motilitet reduseres raskere uten nærvær av peritonealvæske (fig. 2) sammenlignet med inkubering av spermatozoer alene. Spermieoverlevelse med og uten PF og lidokain, i endometriosegruppen. I nærvær av peritonealvæske og lidokain var det signifikant flere frie spermatozoer, spesielt etter to dagers inkubering i endometriosegruppen. Figur 1 og tabell II.
Det var flere døde spermatozoer i inkuberingene med lidokain over tid i begge diagnosegruppene. Figur 5, tabell
II.
Hyaluronankonsentrasjonene i peritonealvæsken viser ingen indikasjoner på pågående inflammatorisk prosess, dvs. bekrefter at alle pasientene var friske.
Denne studie sammenligner effekten av lidokain på spermieoverlevelse og effekten på peritoneal leukocytt-fagocytose av spermatozoer in vitro under inkubering i fem dager. Studien omfatter bare en donor av spermatozoer for å unngå ulike immunologiske kombinasjoner som kunne ha vært ukontrollerte faktorer i eksperimentene. Denne studie følger også spermieoverlevelsen i opptil fem dager mens tidligere studier har undersøkt spermieoverlevelse i løpet av en 24 timers periode. Videre ble ikke bare antall frie ikke-fagocytterte spermatozoer telt, men også hvordan mange som viste progressiv eller stasjonær bevegelse så vel som antall levende, døde eller frie (dvs. ikke bundet til leukocytter) spermatozoer.
I denne studie ble tidligere funn beskrevet av Muscato et al. 1982 som angår redusert fertilitet hos endo-metriosepasienter på grunn av spermiefagocytose bekreftet. Økt fagocytosekapasitet hos peritoneale makrofager fra pasienter med endometriose er også blitt vist med fluorescente kuler (Samejima T, Masuzaki H, Ishimaru T, Yamabe T. Activity of Peritoneal Macrophages in Endometriosis. Asia Oceania J Obstet Gynaecol 1989, 15:175-181).
Andre studier av spermiefagocytose har ikke betraktet problemet med tap av leukocytter som adhererer til noe materiale mer enn til andre (Grinnell et al. 1972). Makarand et al. 1985 anvendte glassbeholdere for lagring av peritonealvæske. Glass har den høyeste adhesjon av leukocytter (Grinell et al. 1972) og er blitt anvendt for å separere makrofager (Smedsroed B, Pertoft H. Preparation of pure hepatocytes and reticuloendothelial cells in high yield from a single rat liver by means of Percoll centrifugation and selective adherence. J Leukocyte Biol. 1985; 38). Muscato et al. 1989 valgte polypropylen som er et bedre alternativ enn glass med hensyn på celleadhesjonsproblemet, men mindre optimalt enn teflon.
Funnet av flere døde spermatozoer i inkuberingene med lidokain over tid må anses som en effekt av redusert spermiefagocytose i nærvær av lidokain, siden det ikke ble funnet noen skadelige effekter på spermatozoene i inkuberinger av spermatozoer alene med eller uten lidokain. Dette må også være forklaringen på funnet av økt ikke-progressivt bevegende spermatozoer i lidokaininkuberingene (figur 3). Reduksjonen av progressiv motilitet uten nærvær av peritonealvæske kan være en indikasjon på at PF (peritonealvæske) inneholder substanser nødvendig for at spermatozoene skal bibeholde sin funksjon. Som nevnt i introduksjonen fuktes fimbria i egglederen konstant av peritonealvæske som reduserer evnen til å plukke opp egget hos pasienter med endometriose (Suginami et al. 1986). Som vist i denne og tidligere studier er leukocyttene i peritonealvæsken hos pasienter med endometriose mer effektive til å fagocytere spermatozoer (Muscato et al. 1982). Følgelig kan kvinner med endometriose ha to faktorer som bidrar til deres reduserte fertilitet. Denne studie antyder også muligheten av å anvende effekten av lidokain for å redusere fagocytosen av spermatozoer.
Kort oppsummert har denne studie vist en redusert fagocytose av spermatozoer i nærvær av lidokain. Dette fenomen må følges opp med randomiserte kliniske studier av pertubasjon med saltvann eller lidokain/saltvannsløsninger preovulatorisk (tidspunkt for LH-topp).
Mens foreliggende oppfinnelse er blitt beskrevet i henhold til foretrukne preparater og utførelsesformer, skal det forstås at spesielle substitusjoner og endringer kan gjøres i forhold til dette uten å avvike fra ånden og rammen av de følgende krav.

Claims (4)

1. Anvendelse av et lidokain for fremstilling av et preparat for å redusere fagocytose av spermatozoer for å øke fertilitet.
2. Anvendelse av en farmasøytisk effektiv konsentrasjon av lidokain sammen med en farmasøytisk akseptabel eksipiens ved fremstilling av et medikament for å redusere fagocytose av spermatozoer for å øke en kvinnes fertilitet i forhold til kvinnens nåværende fertilitet.
3. Anvendelse ifølge krav 2, der den farmasøytisk effektive konsentrasjon er minst 5 ug/ml og lidokainet anvendes sammen med et fysiologisk NaCl og et hyaluronan.
4. Anvendelse ifølge krav 2, der medikamentet administreres til en kvinne før kvinnens ovulasjon.
NO19993921A 1997-02-15 1999-08-13 Anvendelse av et lidokain for fremstilling av et preparat for a redusere fagocytose av spermatozoer. NO321663B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/800,737 US5977143A (en) 1997-02-15 1997-02-15 Medicament against infertility which reduces phagocytosis of spermatozoa in women
PCT/US1998/002267 WO1998035676A1 (en) 1997-02-15 1998-02-09 A medicament against infertility and for increasing fertility

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO993921L NO993921L (no) 1999-08-13
NO993921D0 NO993921D0 (no) 1999-08-13
NO321663B1 true NO321663B1 (no) 2006-06-19

Family

ID=25179227

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO19993921A NO321663B1 (no) 1997-02-15 1999-08-13 Anvendelse av et lidokain for fremstilling av et preparat for a redusere fagocytose av spermatozoer.

Country Status (23)

Country Link
US (1) US5977143A (no)
EP (1) EP1001771B1 (no)
JP (1) JP3497513B2 (no)
KR (1) KR20000071053A (no)
CN (1) CN1248915A (no)
AT (1) ATE295169T1 (no)
AU (1) AU743346B2 (no)
BR (1) BR9807370A (no)
CA (1) CA2280685C (no)
DE (1) DE69830176T2 (no)
EE (1) EE9900346A (no)
ES (1) ES2245022T3 (no)
HU (1) HUP0001342A3 (no)
IL (1) IL131267A0 (no)
IS (1) IS5152A (no)
LT (1) LT4661B (no)
LV (1) LV12450B (no)
NO (1) NO321663B1 (no)
NZ (1) NZ337504A (no)
PL (1) PL335419A1 (no)
SK (1) SK110599A3 (no)
TR (1) TR199901958T2 (no)
WO (1) WO1998035676A1 (no)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE305784T1 (de) * 1997-02-15 2005-10-15 Edelstam Inc Medikament gegen dysmenorrhoe und premenstruelles syndrom enthaltend lidocain
US20030114394A1 (en) * 2001-10-29 2003-06-19 Levine Howard L. Vaginally administered anti-dysrhythmic agents for treating pelvic pain
US8425892B2 (en) 2001-10-29 2013-04-23 Columbia Laboratories, Inc. Extended, controlled-release pharmaceutical compositions using charged polymers
WO2011145993A1 (en) * 2010-05-19 2011-11-24 Isifer Ab Treatment for reducing inflammation
AU2016340769B2 (en) * 2015-10-23 2018-07-12 Isifer Ab Composition for treatment of infertility in a female subject
KR101802090B1 (ko) 2016-09-26 2017-11-27 서울대학교산학협력단 탈락막 자궁내막 세포를 포함하는 자궁내막 손상의 치료용 조성물

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3115625B2 (ja) 1991-03-30 2000-12-11 帝國製薬株式会社 リドカイン含有外用貼付剤
FR2704147B1 (fr) * 1993-04-22 1995-07-21 Leguern Jacques Composition régénératrice des cellules et son application en milieu médical, vétérinaire et agricole.

Also Published As

Publication number Publication date
TR199901958T2 (xx) 1999-12-21
AU743346B2 (en) 2002-01-24
IL131267A0 (en) 2001-01-28
JP3497513B2 (ja) 2004-02-16
EE9900346A (et) 2000-02-15
SK110599A3 (en) 2000-11-07
LT99101A (en) 2000-03-27
LT4661B (lt) 2000-05-25
CA2280685C (en) 2004-06-29
LV12450A (lv) 2000-04-20
EP1001771B1 (en) 2005-05-11
HUP0001342A2 (hu) 2000-09-28
CN1248915A (zh) 2000-03-29
JP2000513737A (ja) 2000-10-17
HUP0001342A3 (en) 2000-10-30
CA2280685A1 (en) 1998-08-20
KR20000071053A (ko) 2000-11-25
AU6270398A (en) 1998-09-08
BR9807370A (pt) 2000-03-14
NO993921L (no) 1999-08-13
ES2245022T3 (es) 2005-12-16
ATE295169T1 (de) 2005-05-15
NZ337504A (en) 2001-01-26
EP1001771A1 (en) 2000-05-24
US5977143A (en) 1999-11-02
WO1998035676A1 (en) 1998-08-20
DE69830176T2 (de) 2006-01-26
DE69830176D1 (de) 2005-06-16
LV12450B (en) 2000-10-20
IS5152A (is) 1999-08-11
EP1001771A4 (en) 2000-09-27
PL335419A1 (en) 2000-04-25
NO993921D0 (no) 1999-08-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Marrs et al. Clinical applications of techniques used in human in vitro fertilization research
Tsai et al. Progesterone elevation on the day of human chorionic gonadotropin administration is not the only factor determining outcomes of in vitro fertilization
Wallach et al. Early miscarriage and fetal malformations after induction of ovulation (by clomiphene citrate and/or human menotropins), in vitro fertilization, and gamete intrafallopian transfer
Liu et al. Comparing the pregnancy rates of one versus two intrauterine inseminations (IUIs) in male factor and idiopathic infertility
EP1158978B1 (en) Medicament against dysmenorrhoea and premenstrual syndrome comprising lidocaine
NO321663B1 (no) Anvendelse av et lidokain for fremstilling av et preparat for a redusere fagocytose av spermatozoer.
Ishii et al. Identifying a possible factor for the increased newborn size in singleton pregnancies after assisted reproductive technology using cryopreserved embryos, in comparison with fresh embryos
Lannou et al. Andrology: Strategies in frozen donor semen procreation
MXPA99007534A (en) A medicament against infertility and for increasing fertility
CZ280699A3 (cs) Lék proti neplodnosti a ke zvýšení plodnosti
HK1025054A (en) A medicament against infertility and for increasing fertility
Lucchini et al. Comparison of intrafollicular sperm injection and intrauterine insemination in the treatment of subfertility
Hassan et al. Twenty four hours sperm survival test after sperms preparation with and without Pentoxifylline adding
Dugwekar Scope and limitations of hormone therapy in animal reproduction and production
US20250367262A1 (en) Compositions and methods for intrauterine insemination (iui)
DE60022988T2 (de) Medikament gegen dysmenorrhoe und premenstruelles syndrom enthaltend lidocain
Karthigayeni et al. Intrauterine Insemination
Zuluaga Velez Pre-and post-synchronization methodologies to enhance the efficiency of fixed timed artificial insemination in pharmacologically-controlled breeding systems with Bos indicus-influenced cattle
WO2017092178A1 (zh) C-型钠肽在制备外用避孕药和精子功能检测中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
MK1K Patent expired