NO136062B - - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse gjelder fremgangsmåte og anordning for oppsamling av væske med innhold av radioaktive sporstoffer fra en beholder som også inneholder faste partikler, særlig av biologisk vev, uten at disse partikler samtidig oppsamles»

En prosess av denne art er alminnelig ved laboratorieundersøkelser

in vitro av celledod eller celleodeleggelse. Celler fra biologisk vev merkes herunder på forhånd med en radioaktiv isotop og blir deretter oppslemmet i en væske med passende egenskaper for formålet„ Når de radioaktivt merkede celler dor eller på annen måte får skadet celle-membran vil en del av den radioaktive isotop lekke ut i oppslemningsvæsken. Etter utfelling av cellepartiklene fra oppslemningen, samles den overforliggende supernatant-væske opp på

en slik måte at ingen celler eller celledeler blir tatt med. Supematantens radioaktivitet måles deretter ved kjent teknikk, nemlig ved scintilasjonstelling»

Nevnte oppsamling av supernatant-væske for radioaktiv måling

foregår i henhold til kjent teknikk ved hjelp av en pipette-anordning, som tillater uttakning av en meget noyaktig definert væskemengde.

Den væskemengde som de radioaktive celler oppslemmes i blir imidlertid ikke alltid noyaktig avmålt i vanlig praksis, og det foreligger derfor ofte en usikkerhet med hensyn til den uttatte andel av den totale væskemengde. Heller ikke kan man med sikkerhet fastslå at ikke mindre celle-fragmenter suges opp i pipetten sammen med supernatanten. Målemetoden går imidlertid ut på at det er bare den radioaktivitet som lekker ut i væsken som skal måles» Det oppnås derfor ikke alltid tilfredsstillende målenoyaktighet ved kjent teknikk, og særlig ikke ved rutinemessig måling av et stort

antall prover. I dette tilfellet anvendes ofte samme pipetteutstyr ved flere etterfSigende målinger, og det kan da også foreligge en viss akkumulert radioaktivitet i pipetten og det tilhorende utstyr.

Det er derfor et formål for foreliggende oppfinnelse å angi en fremgangsmåte som overvinner de ovenfor angitte ulemper og muliggjor en pålitelig og sikker måling av supernatantens radioaktivitet med forbedret noyaktighet.

Dette oppnås i henhold til oppfinnelsen- ved at en aktiv oppsugningsflate på et væskeabsorberende legeme nedsenkes i væskemengden i beholderen med oppsugningsflaten dekket av et filter som er gjennomtrengelig for nevnte væskemengde, men ikke nevnte partikler; og hele nevnte væskemengden bringes til å oppsuges av legemet gjennom filteret, som derpå frigjores fra den aktive oppsugningsflate for legemet fjernes fra beholderen.

Oppfinnelsen angår også en anordning for utforelse av ovenfor angitte fremgangsmåte og som har som særtrekk i henhold til 'oppfinnelsen at den er utstyrt med minst ett væskeabsorberende legeme utformet for nedsenkning i væskemengden i beholderen og derved å gi nevnte væske tilgang, til en aktiv oppsugningsflate dekket av et væskegjennomtrengelig, men ikke partikkelgjennomtrengelig filter, som er anordnet for å frigjores fra den aktive oppsugningsflate etter at hele væskemengden i beholderen er oppsuget av legemet gjennom filteret, men for legemet fjernes fra beholderen.

Et antall væskeabsorberende legemer kan i praksis være anordnet

på felles basis i et monster tilsvarende samme antall beholdere, f0eks. i form av reagensror, som er anbragt i en ramme, et stativ eller lignende for samtidig oppsamling av væske fra de forskjellige beholdere i hvert sitt legeme.

De forskjellige væskeabsorberende legemer er herunder fortrinnsvis utfort som engangskomponenter for å kastes etter en gangs bruk.

For bedre forståelse av oppfinnelsens særtrekk og fordeler, vil det nå bli beskrevet et utforelseseksempel under henvisning til vedfdyde tegning, hvorpå: Fig. 1 viser skjematisk et reagensror som inneholder en supernatantvæske og en viss mengde cellevev, samt en anordning i henhold til oppfinnelsen, og Fig. 2 viser en ramme innrettet for montering av et sbbrre antall reagenser for provetakning i henhold til oppfinnelsen.

Hvite blodlegemer (lymfocytter) fra to ubeslektede individer A og

B separeres fra perifert blod. En av lymfocytt-provene, f.eks.

A, blir merket med en radioaktiv crom-isotop ^Cr og deretter dekket med et passende antistoff som reagerer mot cellene fra individ AD Deretter blandes sådanne radioaktivt merkede lymfocytter fra A med et stort overskudd av umerkede lymfocytter fra B. Celle-blandingen blir oppslemmet i passende væske ved en temperatur på 37°C i noen timer„ På grunn av lymfocyttenes egenskaper som forsvarsceller, blir noen av de antistoff-dekkede radioaktivt

51

merkede celler fra A odelagt og noe radioaktivt crom Cr vil lekke ut i supernatant-væsken. Mengden av radioaktivt sporstoff i supernatanten vil da utgjore en viss prosentandel av den totale mengde 51 Cr som befant seg inne i cellene fra individ A til åo begynne med. Denne prosentandel er dermed et mål for den evne lymfocyttene fra individ B har til å odelegge lymfocyttene fra individ A, samt aktiviteten av nevnte antistoff overfor cellene fra individ A. En måling av supernatantens samlede radioaktivitet vil derfor gi et grunnlag for vurdering av antistoffers forholds hos visse pasienter,.

Cellene blandes vanligvis med nevnte væske i en passende beholder, f.eks. et reagensror R, slik det er vist i fig. 1. På grunn av tyngdekraften vil alle celler C etter hvert synke ned til bunnen

av roret R, mens supernatanten S rager et stykke opp i roret.

For oppsamling av den radioaktive supernatantvæske S anvendes i henhold til oppfinnelsen en anordning L som består av et væskeabsorberende legeme A med en viss aktiv oppsugningsflate som er dekket av et væskegjennomtrengelig, men ikke partikkelgjennomtrengelig filter F. Som vist i fig. 1, har det væske-absorberende legeme i den foreliggende utforelse form av en lang-strakt sylinder som er dimensjonert og utformet for raskt og enkelt å kunne fores ned i reagensroret R for oppsugning av hele den foreliggende væskemengde S i roret» Legemet kan imidlertid også ha en annen utformning, f.eks. parallellepiped, ringformet ror e.l., som fortrinnsvis er tilpasset formen av den benyttede beholder.

Den aktive oppsugningsflate for det væskeabsorberende legeme A befinner seg ved den ene endeflate av anordningen L og er fullstendig tildekket av et tynt skiveformet filter F, således at all væske som suges inn i det væskeabsorberende legeme A må passere filteret F, som imidlertid ikke er gjennomtrengelig for cellene C.

I henhold til oppfinnelsen er det væskeabsorberende legemes absorbsjonsevne avpasset slik i forhold til den foreliggende "væskemengde S i roret R at.hele væskemengden uten vanskelighet absorberes, hvoretter filteret fraskilles for legemet A fjernes fra reagensroret R. Filteret kan. herunder i praksis uten vanskelighet utfores slik at det har ubetydelig volum og væskeabsorbsjonsevne i forhold til legemet A, således at den væskemengde som eventuelt tilbakeholdes i filteret og går tapt ved dets fraskillelse, er helt uten praktisk betydning.

Legemet A blir deretter plassert i en passende holder for anordning i en scintilasjonsteller for bestemmelse av den foreliggende radioaktivitet på kjent måte. Radioaktiviteten kan herunder bestemmes ved scinitilasjonstelling av gammastråling fra nevnte sporstoff i den absorberte supernatant-væske i legemet A, som da hensiktsmessig bor ugjores av ugjennomsiktig material, f .eks.. bomull, papir e.l. Alternativt kan imidlertid radioaktiviteten bestemmes ved scintilasjonstelling av beta-stråling fra sporstoffet i den absorberte væske S, men det væskeabsorberende legeme A bor da utgjores av gjennomsiktig material, f.eks. glassfiber, plast eller lignende, på grunn av beta-strålingens lave intensitet.

En fordel ved foreliggende fremgangsmåte i henhold til oppfinnelsen er at hele den foreliggende væskemengde S overfores til legemet A, slik at variasjoner i væskemengden ikke medforer unøyaktigheter i måleresultatet. Dette er ofte tilfellet hvis bare en del av væsken blir overfort, hvilket er tilfelle ved tilsvarende målinger

i henhold til kjent teknikk.

En annen fordel ved oppfinnelsens anordning er at all supernatant

S må passere filteret F på vei inn i det væskeabsorberende legeme

A. Da filteret F er utfort slik at ikke celler C eller celledeler kan trenge gjennom filteret, sikres det på denne måte at bare selve supernatantvæsken S oppsamles og blir gjenstand for radioaktivitetsmåling. Dette oker i hoy grad målingenes pålitelighet.

En ytterligere fordel er det at cellene utsettes for liten

mekanisk påkjenning under oppsamling av supernatanten S, og blir derfor ikke odelagt under selve oppsamlingsprosessen.

Anordningen L er fortrinnsvis utfort som engangskomponent for å kastes etter en gangs bruk, og det oppnås dermed at det ikke kan finnes noen oppsamling av uonsket radioaktivitet som kan representere en helsefare for de personer som utforer oppsamlingen. Dette er ikke tilfelle ved vanlig kjent teknikk, som er basert på oppsugning av væsken gjennom slanger, pipetter o.l.

Ved oppfinnelsens anordning kan håndtering av flere enn en oppsamlingsanordning L skje samtidig. Et antall oppsamlingslegemer Kan således anordnes på felles basis i et monster tilsvarende

samme antall beholdere, f.eks. i form av reagensror R, som f..eks.

er anbragt i en ramme D, slik det er vist i fig. 2, for samtidig oppsamling av væske fra de forskjellige reagensror R i hvert sitt oppsamlingslegeme L. Iflg. 2 er det således skjematisk vist 96

reagensror R anbragt rektangulært symetrisk i rammen D, således at et tilsvarende antall oppsamlingslegemer plassert i samme monster på f.eks. en plate (ikke vist)> samtidig kan fores ned i hvert sitt ror R.

En sådan anordning av et storre antall oppsamlingslegemer og reagensror i henhold til oppfinnelsen vil lette en systematisk håndtering, oppbevaring og forsendelse av de aktive legemer,

både under og etter oppsugning av supernatant-væsken.

Etter væskeoppsugningen i legemet A kan naturligvis filteret F fjernes fra oppsugningsflaten ved hjelp av hensiktsmessige mekaniske midler. Filteret er imidlertid fortrinnsvis utfort med så liten vekt at det uten vanskelighet kan fastholdes ved adhesjon mot legemets oppsugningsflate for og under legemets nedsenkning i supernatant-væsken. Etter fullfort væskeoppsugning er det imidlertid vist ved forsok at filteret lett frigjores fra oppsugningsflaten under innflytelse av den indre væskemengde i det væske-absorberende legeme A.

Claims (5)

1. Fremgangsmåte for oppsamling av en gitt væskemengde med innhold av radioaktive sporstoffer fra en beholder som også

inneholder faste partikler, uten åt disse partikler samtidig oppsamles;karakterisert ved at en aktiv oppsugningsflate på et væskeabsorberende legeme (A) nedsenkes i væskemengden (S) i beholderen (R) med oppsugningsflaten dekket av et filter (F) som er gjennomtrengelig for nevnte væskemengde (S), men ikke nevnte partikler (C); og hele nevnte væskemengdaibringes til å oppsuges av legemet gjennom filteret, som derpå frigjores fra den aktive oppsugningsflate for legemet fjernes fra beholderen (R).

2. Fremgangsmåte som angitt i krav 1, karakterisert ved at.filteret (F) bringes til å fastholdes ved adhesjon mot legemets oppsugningsflate under nedsenkningen i væskemengden (S) og frigjores fra nevnte flate etter væskeoppsugningen under innflytelse av den oppsugede væskemengde i legemet (A) .

3. Anordning for utforelse av den fremgangsmåte som er angitt i krav 1, for oppsamling av en væskemengde med innhold av radioaktive sporstoffer fra en beholder som også inneholder faste partikler, særlig biologiske vev, uten at vedkommende partikler også oppsamles; karakterisert ved at anordningen (L) er utstyrt med et væskeabsorberende legeme (A) utformet for nedsenkning i væskemengden (S) i beholderen (R) og derved å gi nevnte væske tilgang til en aktiv oppsugningsflate dekket av et væskegjennomtrengelig, men ikke partikkelgjennomtrengelig filter (F), som er anordnet for å frigjores fra den aktive oppsugningsflate etter at hele væskemengden i beholderen er oppsuget av legemet gjennom filteret, men for legemet fjernes fra beholderen.

4. Anordning som angitt i krav 4 og utfort for seintilasjons-telling av gamma-stråling fra nevnte sporstoffer i den oppsugede væske (S), karakterisert ved at det væskeabsorberende legeme (A) utgjores av ugjennomsiktig material, f.eks. bomull, papir e.l.

5. Anordning som angitt i krav 4, og utfort for seintilasjons-telling av beta-stråling fra nevnte sporstoffer i den oppsugede væske (S); karakterisert ved at det væskeabsorberende legeme (A) utgjores av gjennomsiktig material, f.eks. glassfiber, plast e.l.