NO133865B

NO133865B -

Info

Publication number: NO133865B
Application number: NO801/71A
Authority: NO
Inventors: T J Staron
Original assignee: Agronomique Inst Nat Rech
Priority date: 1971-03-03
Filing date: 1971-03-03
Publication date: 1976-04-05
Also published as: NO133865C

Abstract

Fremgangsmåte til avgiftning av vegetabilske presskaker.Procedure for detoxification of vegetable press cakes.

Description

Presskaker som er fremstilt av jordnøtter, raps eller sojabønner er tilgjengelige i store mengder, dag lar de seg tross deres høye næringsverdi og proteininnhold ikke ut-nytte som -føde for mennesker eller dyr, da de inneholder en rekke forurensninger, særlig svovelholdige produkter som f.eks. isotiocyanater og aflatoksiner. Om disse -svovelholdige forurensninger, særlig av tioglykosider i rapspresskaker, vet man at de ved inn-taking av presskakene forårsaker tallrike fysiol-ogiske forstyrrelser, og afl-a toksinene som særlig befinner seg -i jordnøttpresskaker og heterocyklisk oppbyggede stoffskifte-produkter av bestemte ■sopper., slik som penicillium aspergillus har kreftfremkallende virkninger. Pressed cakes made from peanuts, rapeseed or soya beans are available in large quantities, today, despite their high nutritional value and protein content, they cannot be used as food for humans or animals, as they contain a number of pollutants, especially sulphur-containing products such as .ex. isothiocyanates and aflatoxins. About these sulphur-containing pollutants, especially from thioglycosides in rapeseed cakes, it is known that they cause numerous physiological disturbances when the cakes are ingested, and the toxins that are particularly found in peanut cakes and heterocyclically structured metabolic products of certain ■ fungi., such as penicillium aspergillus have carcinogenic effects.

Man har derfor- allerede forsøkt å fjerne den slags svovelholdige forurensninger fra rapspresskaker ved røst-ning, destillering, vanndampbehandling-, oppløsningsekstraksjon eller behandling med tungmeta-llsalter, dog har ingen av disse fremgangsmåter vist seg virksomme. Attempts have therefore already been made to remove such sulphur-containing contaminants from rapeseed cakes by roasting, distillation, steam treatment, solution extraction or treatment with heavy metal salts, but none of these methods have proven to be effective.

Den oppgave som ligger til grunn for foreliggende oppfinnelse består dermed i å skaffe en fremgangsmåte til avgiftning av slike presskaker for å gjøre disse presskaker mere brukbare som føde for mennesker og dyr. The task underlying the present invention thus consists in providing a method for detoxifying such pressed cakes in order to make these pressed cakes more usable as food for humans and animals.

Foreliggende oppfinnelse angår således en fremgangsmåte til avgiftning av presskaker som er fremstillet ved vegetatilier, og fremgangsmåten karakteriseres ved at presskakene behandles i vandig medium ved 30—■M5°C med geotrichum candidum cg at det vandige .medium deretter fraskilles. The present invention thus relates to a method for detoxifying pressed cakes which have been produced by means of vegetation, and the method is characterized by the pressed cakes being treated in an aqueous medium at 30-■M5°C with geotrichum candidum and that the aqueous medium is then separated.

Denne fremgangsmåte kan utføres med de forskjel-ligste presskaker slik som særlig presskaker av raps, nepefrø, j.ordnøtter, solsikkefrø, sojab.ønner, sesam, risinus, bomulls-frø, vinia senensis, den lille hestebønne og andre vegetabilske This method can be carried out with a wide variety of pressed cakes such as, in particular, pressed cakes of rapeseed, turnip seeds, peanuts, sunflower seeds, soya beans, sesame, castor beans, cotton seeds, vinia senensis, the small horse bean and other vegetable

frø. seed.

Ved behandling av presskaken med geotrichum candidum i vandig medium sørger man hensiktsmessig for en grundig kontakt mellom presskakebestanddelene og mikroorganismen. I løpet av behanlingen ligger pH-verdien for det vandige medium mellom 6,5 og 4, høyest i begynnelsen, og den faller vanligvis under behandlingen. Behandlingstiden varierer med temperaturer og andre faktorer. Ved en temperatur på 30°C får man, f.eks. en fullstendig avgiftning i løpet av 30 til 4.0 timer, mens man kan forkorte behandlingstiden til mindre enn 30 timer når man arbeider mellom 37 og 40°C. Av og til kan det være nødvendig å forlenge behandlingstiden sogar til 60-90 timer. Behandlingen foregår ved stasjonære betingelser eller under bevegelse eller under en utluftning. En fordel med denne fremgangsmåte består i at det ikke må gå noen sterilisering forut for denne behandling.. When treating the pressed cake with geotrichum candidum in an aqueous medium, a thorough contact between the pressed cake ingredients and the microorganism is suitably ensured. During the treatment, the pH value of the aqueous medium is between 6.5 and 4, highest at the beginning, and it usually falls during the treatment. Treatment time varies with temperatures and other factors. At a temperature of 30°C, you get, e.g. a complete detoxification within 30 to 4.0 hours, while the treatment time can be shortened to less than 30 hours when working between 37 and 40°C. Occasionally, it may be necessary to extend the treatment time even to 60-90 hours. The treatment takes place under stationary conditions or during movement or during a ventilation. An advantage of this procedure is that no sterilization must precede this treatment.

Etter behandlingen av presskakene med geotrichum candidum i det vandige medium foregår atskillelsen av det behandlede materiale fra det vandige medium f.eks. ved forstøvning eller ved annen slags fjernelse av behandlingsvannet. After the treatment of the press cakes with geotrichum candidum in the aqueous medium, the separation of the treated material from the aqueous medium takes place, e.g. by spraying or by other means of removing the treatment water.

I det følgende blir nå de karakteristiske egen-skaper for den anvendte mikroorganisme geotrichum candidum og dnes dyrkningsbetingelser beskrevet. 1. Karakteristiske data for den anvendte mikroorganisme ( geotrichum candidum). In the following, the characteristic properties of the microorganism geotrichum candidum used and its cultivation conditions are now described. 1. Characteristic data for the microorganism used (geotrichum candidum).

(1) Morfologi og biologi (1) Morphology and biology

Under mikroskopet er myceliet hvitt, forgrenet og med hyppige veggdannelser. Conidioforer er ikke tilstede. Conidiene er monocellulære uten konseptakel, kuleformede, syl-indriske, korte og rette, de dannes ved utskilling fra mycelet krthrospore conidier). Størrelsen er i middel 3~ 6 x 6 - 12 y. Ovenstående data gjør det mulig å klassifisere mikroorganismen i arten geotrichum candidum Linx ex Persoon. Under the microscope, the mycelium is white, branched and with frequent wall formations. Conidiophores are not present. The conidia are unicellular without conceptacle, globular, cylindric, short and straight, they are formed by exudation from the mycelium (krthrospore conidia). The size is on average 3~ 6 x 6 - 12 y. The above data make it possible to classify the microorganism in the species geotrichum candidum Linx ex Persoon.

Soppen viser god vekst på de fleste vanlige vekstmedia (Sabouraud, Czapek, potet, pepton), men dyrkes best i Sauton-miljø. Arten er meget polyfag: den metaboliserer alle karbohydrater og alle nitrogenformer (salpeternitrogen, ammon-iakalsk nitrogen, ureanitrogen, aminnitrogen, proteinnitrogen, pyrimidinnitrogen, purinnitrogen). Imidlertid gir purinbaser de beste proteinutbytter. The mushroom shows good growth on most common growth media (Sabouraud, Czapek, potato, peptone), but is best grown in a Sauton environment. The species is very polyphagous: it metabolizes all carbohydrates and all forms of nitrogen (nitrate nitrogen, ammonium nitrogen, urea nitrogen, amine nitrogen, protein nitrogen, pyrimidine nitrogen, purine nitrogen). However, purine bases give the best protein yields.

(2) Vekstmedium og kulturmiljø (2) Growth medium and culture environment

Konserveringen av arten foretas i fast Sauton-miljø. Fremstilling av gjæringstilsetning for oppbløtnings-gjæringen skjer fortrinnsvis på et kulturmedium som består av: The conservation of the species is carried out in a permanent Sauton environment. Preparation of fermentation additive for the soaking fermentation takes place preferably on a culture medium consisting of:

(a) en mineralsk oppl-øsning av pH = 6,8 (KH2PO^: (a) a mineral solution of pH = 6.8 (KH2PO^:

1 g, M<g>S<O>4.7H2O:0,5 g, KC1:0,2 g, CaCl2:0/2 g, FeSO^.7H20:0,03 g, ZnSO.^ .7H2O:0,01 g, CuSO^.5H20:2 mg, destillert vann ad 1000 ml), 1 g, M<g>S<O>4.7H2O:0.5 g, KC1:0.2 g, CaCl2:0/2 g, FeSO^.7H20:0.03 g, ZnSO.^ .7H2O:0 .01 g, CuSO^.5H20:2 mg, distilled water ad 1000 ml),

(b) glukose 36 g/l (b) glucose 36 g/l

(c.) urinsyre 5 g/l eller urea 4 g/l (c.) uric acid 5 g/l or urea 4 g/l

Dette næringsmedium fylles på 500 -ml erlenmeyer-kolber, 100 ml i hver, og steriliseres deretter i 15 minutter ved 110°C. This nutrient medium is filled into 500 ml Erlenmeyer flasks, 100 ml in each, and then sterilized for 15 minutes at 110°C.

Inkuberingen foretas sterilt med en vandig sus-pensjon av kultur av geotrichum candidum, 5 dager gammel, dyrket på Sauton-miljø. The incubation is carried out sterilely with an aqueous suspension of culture of Geotrichum candidum, 5 days old, grown on Sauton medium.

Kulturen dyrkes under røring (130 omdr./minutt) ved 30°C, og tidsrommet er 48 timer. The culture is grown with stirring (130 rpm) at 30°C, and the period is 48 hours.

I spesiell inkubator eller gjæringskar er kulturen vanligvis ferdig etter ca. 20 timer^In a special incubator or fermentation vessel, the culture is usually finished after approx. 20 hours^

II. Kontrollmetoder. II. Control methods.

Frigivelsen av 5-vinyltiooksazolidon, forkortet VTO-, som velges som representant for de tioglykosider som The release of 5-vinylthiooxazolidone, abbreviated VTO-, which is chosen as representative of the thioglycosides that

finnes i oppbløtningsvæsken, og restirmholdet av denne -forbind-elsen i den uoppløselige presskake, bestemmes som følger: (a) Fremstilling a- v et enzympreparat av myrosin-ase. is found in the soaking liquid, and the residual content of this compound in the insoluble press cake is determined as follows: (a) Preparation of an enzyme preparation of myrosinase.

Man har funnet at knust oljefri hvit sennep gir liknende resultater som myrpsinaseoppløsning-. Følgelig bruker man dette mel for de praktiske forsøk. Forholdet illustreres på fig. 1 som er utført på rapsfr^kaker o-g viser absorbsjons-kurven for VTO (Veltrukket kurve) og absorbs j onskurvén for sen-nepsmel (streket kurve), idet optisk tetthet er oppført langs ordinaten og bølgelengden X langs abscissen. Crushed oil-free white mustard has been found to give similar results to myrpsinase solution. Consequently, this flour is used for the practical experiments. The relationship is illustrated in fig. 1, which has been carried out on rapeseed cakes and g, shows the absorption curve for VTO (well-drawn curve) and the absorption curve for mustard turnip flour (dashed curve), optical density being listed along the ordinate and wavelength X along the abscissa.

Korn av hvit trialba-sennep finknuses og befris deretter for olje ved utgnidning med 3x5 volumer petroleter, tørkes ved værelsestemperatur og holdes i fryser ved -2Q°C. Grains of white trialba mustard are finely crushed and then freed from oil by rubbing with 3x5 volumes of petroleum ether, dried at room temperature and kept in a freezer at -2Q°C.

(b) Enzymreaksjon. (b) Enzyme reaction.

I en 500 ml erlenmeyer oppveies 2 g presskake og 0,2 g oljefri sennep, deretter tilsettes 100 ml fosfat-buffer, pH = 7 (Na^PO^. 12H20 = 23,08 g/l = 4-00 ml, KHgPO^, 9-,07 g/l = 600 ml). Man inkuberer i rørei-nkubator ved 30°C i 2 timer. In a 500 ml Erlenmeyer, weigh out 2 g of press cake and 0.2 g of oil-free mustard, then add 100 ml of phosphate buffer, pH = 7 (Na^PO^. 12H20 = 23.08 g/l = 4-00 ml, KHgPO^ , 9-.07 g/l = 600 ml). Incubate in a stirring incubator at 30°C for 2 hours.

(c) Ekstraksjon av VTO og dosering. (c) Extraction of VTO and dosage.

Etter at enzymreaksjonen er ferdig, filtreres oppløsningen gjennom papir, man ekstraherer 1 ml av oppløsningen med 2 x 10 ml svovelsyret eter. Eterfraksjonene slås sammen, oppfylles til 25 ml, filtreres gjennom hydrofil bomuil og fylles på spektrofotometer (VTO-absorhsjonstopp ved 248 nm). After the enzyme reaction is finished, the solution is filtered through paper, 1 ml of the solution is extracted with 2 x 10 ml of sulfuric ether. The ether fractions are combined, made up to 25 ml, filtered through hydrophilic cotton and loaded onto the spectrophotometer (VTO absorption peak at 248 nm).

Man måler absorbsjonen ved 225, 248 og 265 nm, og man beregner den midlere optiske tetthet ved å trekke middel-verdien av sbsorbsjonen ved 225 og 265 nm fra verdien ved 248 nm.. Man oppfører den fundne forskjell på en Wetter-kurve (fig. 2) for å finne innholdet X av VTO i mikrogram/ml. The absorption is measured at 225, 248 and 265 nm, and the average optical density is calculated by subtracting the average value of the absorption at 225 and 265 nm from the value at 248 nm. The difference found is plotted on a Wetter curve (fig 2) to find the content X of VTO in micrograms/ml.

Innholdet av VTO i gram pr. 100 g presskake The content of VTO in grams per 100 g pressed cake

finnes etter følgende likning: can be found according to the following equation:

0, 25 X 0.25X

M M

hvor M er vekten av uttatt prøve i gram. where M is the weight of the sample taken in grams.

Fig 2 viser Wetter-skalaen som er kjent på dette området. Langs ordinaten er oppsatt verdiene for optisk tetthet som funksjon av konsentrasjonen i VTO uttrykt i mikrogram/ml, langs abscissen. Fig 2 shows the Wetter scale which is known in this area. Along the ordinate are the values for optical density as a function of the concentration in VTO expressed in micrograms/ml, along the abscissa.

Eksempel 1 Example 1

Dette eksempel gjelder behandling av rapsfrø-kaker. This example concerns the treatment of rapeseed cakes.

( A) Oppbløtning og gjæring og oppnådde resultater. - (A) Soaking and fermentation and results obtained. -

Oppbløtningsgjøringen av rapsfrøkaken utføres The soaking of the rapeseed cake is carried out

i en fors-øksbeholder på 40 liter, etter følgende oppskrift: Rapsfrøkake 6 kg in a 40 liter container, according to the following recipe: Rapeseed cake 6 kg

Kultur av geotrichum candium 5 liter Culture of geotrichum candium 5 liters

Vann fra springen 19 liter Utgangs-pH 6,4, ekstraksjbns-pH = 4. Denne senkning i pH skyldes i det vesentlige frigivelsen av proteiner i kultur-' mediet. Tap water 19 liters Initial pH 6.4, extraction pH = 4. This decrease in pH is essentially due to the release of proteins in the culture medium.

Fig. 3 er en grafisk fremstilling hvor man på ordinaten har oppført for det første pH-verdien og for det andre mengden av proteiner i g/l i det øverst liggende væske-sjikt etter behandlingen, begge deler som funksjon av behandlingstiden som er angitt langs abscissen i timer. Den øvre kurve viser endringen av pH-verdien i løpet av behandlingen, og den nedre kurve viser frigjøring av proteiner fra presskaken i ekstraktet. Fig. 3 is a graphic representation where, on the ordinate, firstly the pH value and secondly the amount of proteins in g/l in the uppermost liquid layer after the treatment have been listed, both parts as a function of the treatment time which is indicated along the abscissa in hours. The upper curve shows the change in pH during the treatment, and the lower curve shows the release of proteins from the press cake in the extract.

Dyrkingen utføres under langsom røring eller uten røring i løpet av 30 - 60 timer ved 37°C , uten forutgående sterilisering. Forsøk har vist at ingen forurensninger har opp-trådt under -de angitte forholdt. Videre synes røringen og gjen-nomlufting av dyrkningsmediet ikke å være nødvendig når man arbeider med relativt små volumer-. Cultivation is carried out under slow stirring or without stirring during 30 - 60 hours at 37°C, without prior sterilization. Tests have shown that no pollution has occurred under the specified conditions. Furthermore, stirring and aerating the culture medium does not seem to be necessary when working with relatively small volumes.

De angitte kontrollmetoder gjør det mulig å kontrollere frigivelsen av VTO i oppbløtningsvannet og den følg-ende nedbrytning. Fig. 4 viser en kurve under innvirkning av geotrichum candidum. Mengden VTO er oppsatt langs ordinaten og er uttrykt i gram/100 g presskake, Bløtningens varighet uttrykt i timer -er oppført langs abscissen. Kurven (1) viser resultater ved 37°C og kurven (2) ved 27°C. Man ser at den høyere temperatur har en kraftig virkning. Ved 27°C foregår utelukkende hyd-rolyse av tiogly-kosider og f$-rst etter 35 timers dyrking begynner nedbrytningen av isotiocyanatene og nedbrytningen er ikke ferdig før etter 85 timers gjæring. Ved 37°C foregår som man ser hydro-lyse' og nedbrytning avtioglykosidene og isotiocyanatene samtidig. .Bestemmelsen av næringsverdien for den forgjærede presskake ble- gjennomført på mus. The specified control methods make it possible to control the release of VTO in the soaking water and the subsequent degradation. Fig. 4 shows a curve under the influence of geotrichum candidum. The amount of VTO is set up along the ordinate and is expressed in grams/100 g of pressed cake, the duration of soaking expressed in hours - is listed along the abscissa. Curve (1) shows results at 37°C and curve (2) at 27°C. It can be seen that the higher temperature has a strong effect. At 27°C, only hydrolysis of thioglycosides takes place and only after 35 hours of cultivation does the breakdown of the isothiocyanates begin and the breakdown is not complete until after 85 hours of fermentation. At 37°C, as can be seen, hydrolysis and breakdown of the thioglycosides and isothiocyanates takes place simultaneously. .The determination of the nutritional value of the pre-fermented press cake was carried out on mice.

180 hunmus ble fordelt på seks grupper med 30 mus i hver gruppe. Kontrollfdret hadde vanlig sammensetning (akus-tisk -fysiologi (INRA)). I de fem andre forsøksfor er presskaken av jordnøtter-henholdsvis soyabønner erstattet med presskaker av rapsfrø. 180 female mice were divided into six groups with 30 mice in each group. The control fluid had a normal composition (acoustic physiology (INRA)). In the other five trials, the pressed cake made of peanuts or soybeans is replaced with pressed cakes made of rapeseed.

Den følgende tabell I angir sammensetningen for det anvendte f6r. The following Table I indicates the composition of the used f6r.

Forsøksserien varte fra 16-. juni til 2. oktober I969. Musene ble veiet 2 ganger i uken. Fig. 5 viser vekst-kurven for hver gruppe. På fig. 5 har man langs ordinaten av-satt musenes vekt i gram og langs abscissen eksperimentets varighet i uker. The trial series lasted from 16-. June to October 2, I969. The mice were weighed twice a week. Fig. 5 shows the growth curve for each group. In fig. 5 the weight of the mice in grams has been set along the ordinate and the duration of the experiment in weeks along the abscissa.

Referansekurvene 1, 2, 3, 4, 5 og 6 tilsvarer henholdsvis kontrollfSret og forene nr. 2,, 3, 4, 5 og 6 som er The reference curves 1, 2, 3, 4, 5 and 6 correspond respectively to the control curve and to curves no. 2, 3, 4, 5 and 6 which are

oppført i tabellen. listed in the table.

Mus.ene i gruppe 5 viser symptomer pa blodkar-svakhet (blødning fra ører og snute) og 15 av disse mus måtte av-lives 9- september samtidig med 10 f orsøksmus. Den andre- 1-5 mus fra gruppe, nr. 5 ble fra denne dato- fåret med f6rsammensetning nr-. 4 og de ovenfor angitte symptomer forsvant deretter og vekt-økningen pr. mus var den 3- oktober 9r,83 g>The mice in group 5 show symptoms of blood vessel weakness (bleeding from the ears and snout) and 15 of these mice had to be euthanized on 9 September at the same time as 10 experimental mice. The other - 1-5 mice from group, no. 5 was from this date - sheep with pre-composition no. 4 and the above-mentioned symptoms then disappeared and the weight increase per mouse was on 3 October 9r,83 g>

i. in.

Dette forsøk viser at giftigheten av rapspresskaker for mus ikke merkes vektmessig. This experiment shows that the toxicity of rapeseed cake for mice is not marked by weight.

De ovenfor behandlede mus ble drept 3- oktober The above-treated mice were killed on 3 October

og nøyaktig oppdelt i cellevev og følgende organer: hjerne, hjerte, lunge, nyrer, milt, lever, mage, tarm, muskler, hud og hår, knokler. Por hvert av disse prøvestykker ble tørrvekt, innhold av fria aminosyrer, innhold av totale proteiner og innholdet av totalt fosfor bestemt. Resultatene ble sammenstillet i følgende tabell II. and precisely divided into cellular tissue and the following organs: brain, heart, lungs, kidneys, spleen, liver, stomach, intestines, muscles, skin and hair, bones. For each of these samples, the dry weight, content of free amino acids, content of total proteins and the content of total phosphorus were determined. The results were compiled in the following table II.

Tabell II viser følgende forskjeller: Table II shows the following differences:

Innholdet av tørrsubstans er praktisk talt konstant i alle organer og cellevev i gruppen nr. 1 til 4 med unntag-else av musklene i -gruppe nr. 4 som er rikere på fett. The content of dry matter is practically constant in all organs and cell tissues in groups no. 1 to 4, with the exception of the muscles in group no. 4, which are richer in fat.

De frie aminosyrer befinner seg i -betydelig mengde 1 alle organer i gruppe 4 som gjenspeiler en stoffskiftefor-styrrelse ved dette nivå. The free amino acids are found in significant quantities in all organs in group 4, which reflects a metabolic disorder at this level.

Man iakttar en anrikelse av proteiner i alle organer fra gruppe 4, unntatt musklene hvor innholdet er lavere. Det er meget interessant å fastslå at man i gruppene 1 og 2 inntar mellomtilstander-. An enrichment of proteins is observed in all organs from group 4, except the muscles where the content is lower. It is very interesting to note that in groups 1 and 2 one takes intermediate states-.

Totalfosforet i organene fra gruppe 4 er meget forminsket. Porminskelsen av dette element iakttas på samme måte i gruppene 1 og 2, særlig i knoklene. The total phosphorus in the organs from group 4 is greatly reduced. The reduction in the size of this element is observed in the same way in groups 1 and 2, especially in the bones.

Den frie leverglykose er hos musene i gruppe nr. The free liver glucose in the mice in group no.

2 og 4 meget rik. Dette fenomen kan tilskrives en hindring eller hemning av fosforyleringen. 2 and 4 very rich. This phenomenon can be attributed to a hindrance or inhibition of the phosphorylation.

Resultatene av analysene hos mus fra gruppe nr. 4a viser at de forstyrrelser som er iakttatt i denne gruppe hurtig omvendes når næringen forandres. The results of the analyzes in mice from group no. 4a show that the disturbances observed in this group are quickly reversed when the diet is changed.

De ovenstående resultater viser at man forbedrer nærings verdien i rapsepresskaker når man underkaster dem en behandling ifølge foreliggende oppfinnelse. The above results show that the nutritional value of rapeseed cakes is improved when they are subjected to a treatment according to the present invention.

De analyser som er utført på organene viser hvilke forstyrrelser i husholdningen for aminosyrer, fri glukose, proteiner og fosfater hos dyr som ble ernært med rapsepresskaker som er rike på tioglykodid og med polske presskaker som ikke inneholder disse.. De behandlede, men deretter med a-protein og VTO anrikede rapspresskaker var toksiske hvilket viser disse stoffers giftighet. Eksempel 2. The analyzes carried out on the organs show the disturbances in the household for amino acids, free glucose, proteins and phosphates in animals that were fed with rape press cakes that are rich in thioglycodide and with Polish press cakes that do not contain these.. They treated, but then with a -protein and VTO enriched rapeseed cakes were toxic, which shows the toxicity of these substances. Example 2.

Fremgangsmåten ifølge eksempel 1 ble gjentatt med jord-nøttpresskaker,hvorved de deri inneholdte aflatoksiner ble ødelagt. Behandlingen med geotrichum candidum ble gjennomført med tre por-sjoner jordnøttpresskaker som var sterkt forurenset. Følgende tabell III viser ødeleggelsen av aflatoksiner med tiden. The procedure according to example 1 was repeated with peanut press cakes, whereby the aflatoxins contained therein were destroyed. The treatment with geotrichum candidum was carried out with three portions of peanut press cakes which were heavily contaminated. The following Table III shows the destruction of aflatoxins with time.

De resultater som er oppført i tabell III viser at ette 36 timers behandling var de toksiske bestanddeler fullstendig for-svunnet . The results listed in Table III show that after 36 hours of treatment, the toxic components had completely disappeared.

Por å påvise at det oppnås en tilfredsstillende effekt med andre arter av geotrichum candidum ble det gjennom-ført forsøk slik som angitt i eksemplene 1 og 2. Forsøkene ble gjennomført ved 37°C med rapspresskaker og med jordnøttpress-kaker. Ved forsøkene med rapspresskaker i henhold til eksem-oel 1 ble reduksjonen av innholdet av 5-vinyltiooksazolidon bestemt i avhengighet av tiden. Ved den andre forsøksrekke med jordnøttpresskaker ble det i henhold til eksempel 2 foretatt en undersøkelse på nedbrytningen av aflatoksiner. Resultatene -er gjengitt i fig. 6 og 7. Disse kurver viser tydelig at det ved begge forsøk ble oppnådd gode resultater med alle de tre-undersøkte stammer selvom dette skjedde i noe forskjellige tidsrom. Aflatoksinnedbrytningen i jordnøttpresskakene skjedde så og si til null med de tre undersøkte stammer av geotrichum candidum i løpet av et tidsrom på mellom 30 og 50 timer. Når det gjaldt nedbrytningen av 5-vinyltiooksazolidon i rapspresskaken, var tidsrommet til så og si maksimal avgiftning mellom 50 og 90 timer, mens sluttinnholdet i presskakene av VTO utgjorde mellom 0,05 og 0, 2%. Disse forsøk viser at det opptrer visse svingninger for virksomheten av de forskjellige stammer av geotrichum candidum, men det vises også tydelig at alle de undersøkte stammer er brukbare. In order to demonstrate that a satisfactory effect is achieved with other species of geotrichum candidum, tests were carried out as indicated in examples 1 and 2. The tests were carried out at 37°C with rapeseed cakes and with peanut press cakes. In the experiments with rapeseed cakes according to example 1, the reduction of the content of 5-vinylthiooxazolidone was determined as a function of time. In the second series of experiments with peanut pressed cakes, an investigation into the breakdown of aflatoxins was carried out in accordance with example 2. The results are reproduced in fig. 6 and 7. These curves clearly show that in both experiments good results were achieved with all the three investigated strains, even though this happened in slightly different time periods. The aflatoxin degradation in the peanut pressed cakes practically went to zero with the three investigated strains of geotrichum candidum over a period of between 30 and 50 hours. When it came to the breakdown of 5-vinylthiooxazolidone in the rapeseed cake, the time until, so to speak, maximum detoxification was between 50 and 90 hours, while the final content of VTO in the cake was between 0.05 and 0.2%. These experiments show that there are certain fluctuations in the activity of the different strains of geotrichum candidum, but it is also clearly shown that all the strains examined are usable.

I kurvene i fig. 6 og 7 angir bokstavene a, b og In the curves in fig. 6 and 7 indicate the letters a, b and

c geotrichum candidum sp. STARON, geotrichum candidum ATCC 12784 og geotrichum candidum ATCC 755. c Geotrichum candidum sp. STARON, geotrichum candidum ATCC 12784 and geotrichum candidum ATCC 755.

Claims

1. Method for detoxifying pressed cakes made from vegetables, characterized in that the pressed cakes are treated in an aqueous medium at 30-45°C with geotrichum candidum and that the aqueous medium is then separated.

2. Method according to claim 1, characterized in that the processing of the pressed cakes is carried out at 37-40°C.

3. Method according to claims 1 and 2, characterized in that the pH value in the aqueous treatment medium is kept between 4 and 6.5.