NL2028903B1 - Method and device for vitrifying biological material, such as semen - Google Patents

Method and device for vitrifying biological material, such as semen Download PDF

Info

Publication number
NL2028903B1
NL2028903B1 NL2028903A NL2028903A NL2028903B1 NL 2028903 B1 NL2028903 B1 NL 2028903B1 NL 2028903 A NL2028903 A NL 2028903A NL 2028903 A NL2028903 A NL 2028903A NL 2028903 B1 NL2028903 B1 NL 2028903B1
Authority
NL
Netherlands
Prior art keywords
container
biological material
channel
pipe
flushing channel
Prior art date
Application number
NL2028903A
Other languages
Dutch (nl)
Inventor
Marinus Van Den Berg Bartel
Original Assignee
Marinus Van Den Berg Bartel
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Marinus Van Den Berg Bartel filed Critical Marinus Van Den Berg Bartel
Priority to NL2028903A priority Critical patent/NL2028903B1/en
Application granted granted Critical
Publication of NL2028903B1 publication Critical patent/NL2028903B1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02Preservation of living parts
    • A01N1/0236Mechanical aspects
    • A01N1/0242Apparatuses, i.e. devices used in the process of preservation of living parts, such as pumps, refrigeration devices or any other devices featuring moving parts and/or temperature controlling components
    • A01N1/0252Temperature controlling refrigerating apparatus, i.e. devices used to actively control the temperature of a designated internal volume, e.g. refrigerators, freeze-drying apparatus or liquid nitrogen baths
    • A01N1/0257Stationary or portable vessels generating cryogenic temperatures
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02Preservation of living parts
    • A01N1/0236Mechanical aspects
    • A01N1/0263Non-refrigerated containers specially adapted for transporting or storing living parts whilst preserving, e.g. cool boxes, blood bags or "straws" for cryopreservation
    • A01N1/0268Carriers for immersion in cryogenic fluid, both for slow-freezing and vitrification, e.g. open or closed "straws" for embryos, oocytes or semen

Abstract

De uitvinding betreft een werkwijze voor het vitrificeren van biologisch materiaal, zoals sperma, welke werkwijze de stappen omvat: — het aanbrengen van biologisch materiaal in een afgesloten houder, zoals een rietvormige houder, die aan weerseinden is afgedicht; — het in een kanaal plaatsen van de afgesloten houder; en — het door het kanaal laten stromen van een koelvloeistof, in het bijzonder vloeibaar stikstof.The invention relates to a method for vitrifying biological material, such as sperm, which method comprises the steps of: arranging biological material in a closed container, such as a reed-shaped container, which is sealed at both ends; - placing the sealed container in a channel; and - allowing a coolant, in particular liquid nitrogen, to flow through the channel.

Description

Werkwijze en inrichting voor het vitrificeren van biologisch materiaal, zoals spermaMethod and device for vitrifying biological material, such as semen

De uitvinding betreft een werkwijze voor het vitrificeren van biologisch materiaal, zoals sperma, welke werkwijze de stappen omvat: - het aanbrengen van biologisch materiaal in een afgesloten houder, zoals een rietvormige houder, die aan weerseinden is afgedicht.The invention relates to a method for vitrifying biological material, such as sperm, which method comprises the steps of: arranging biological material in a sealed container, such as a reed-shaped container, which is sealed at both ends.

Om biologisch materiaal, zoals sperma en embryo's, langere tijd te kunnen bewaren is het bekend om het biologisch materiaal in te vriezen. Een bekende techniek is om het biologisch materiaal zeer langzaam te laten bevriezen. Hierbij wordt het biologisch materiaal gekoeld tot net onder het vriespunt, waardoor ijskristallen ontstaat in de extracellulaire vloeistof. Hierdoor neemt de concentratie in de overblijvende extracellulaire vloeistof toe, waardoor de cellen van het biologisch materiaal uitdrogen en ijsvorming binnen de cellen voorkomen wordt.In order to be able to store biological material, such as sperm and embryos, for a longer period of time, it is known to freeze the biological material. A known technique is to freeze the biological material very slowly. The biological material is cooled to just below freezing point, causing ice crystals to form in the extracellular fluid. This increases the concentration in the remaining extracellular fluid, drying out the cells of the biological material and preventing ice formation within the cells.

Deze techniek vereist echter een zeer nauwkeurige controle van de temperatuur en neemt veel tijd in beslag doordat het afkoelen zeer langzaam dient te gebeuren.However, this technique requires very precise control of the temperature and takes a long time because cooling has to be done very slowly.

Bovendien zijn kostbare machines en kundig en geschoold personeel nodig. Daarnaast wordt het biologisch materiaal in een medium van glycerol en eigeel ingevroren. Dit eigeel is van biologische afkomst en vormt daardoor een risico op ongewenste ziektes. Daarnaast is glycerol toxisch wat ook de kwaliteit van het biologisch materiaal niet ten goede komt.In addition, expensive machines and skilled and trained personnel are required. In addition, the biological material is frozen in a medium of glycerol and egg yolk. This egg yolk is of biological origin and therefore poses a risk of unwanted diseases. In addition, glycerol is toxic, which does not benefit the quality of the biological material.

Een andere techniek voor het invriezen van biologisch materiaal is vitrificatie. Hierbij wordt het biologisch materiaal zo snel afgekoeld, dat het vormen van ijskristallen in de cellen en de extracellulaire vloeistof voorkomen wordt en het biologisch materiaal een vaste,Another technique for freezing biological material is vitrification. The biological material is cooled so quickly that the formation of ice crystals in the cells and the extracellular fluid is prevented and the biological material becomes a solid,

glasachtige toestand krijgt.glassy condition.

Vitrificatie van water vereist een afkoelsnelheid in de orde van 10% °C/min. Het cytoplasma van cellen is rijk aan proteine, waardoor vitrificatie makkelijker wordt en de afkoelsnelheid lager kan zijn. Dit kan verder verbeterd worden door het toevoegen van niet-permeabele cryoprotectieve middelen, zoals een antivriesmiddel. Bij een voldoende hoge concentratie van dergelijke cryoprotectieve middelen kan vitrificatie verkregen bij een minder snelle afkoelsnelheid.Vitrification of water requires a cooling rate of the order of 10% °C/min. The cytoplasm of cells is rich in protein, which makes vitrification easier and the cooling rate can be slower. This can be further improved by adding non-permeable cryoprotective agents, such as an antifreeze agent. With a sufficiently high concentration of such cryoprotective agents, vitrification can be achieved at a slower cooling rate.

De concentratie van de cryoprotectieve middelen is dan echter zodanig hoog, dat dit schadelijk is voor diverse soorten cellen, waaronder spermacellen.However, the concentration of the cryoprotective agents is then so high that it is harmful to various types of cells, including sperm cells.

Het is dan ook van belang bij vitrificatie om de concentratie niet-permeabele cryoprotectieve middelen zo laag mogelijk te houden en de afkoelsnelheid zo hoog mogelijk te krijgen.It is therefore important during vitrification to keep the concentration of non-permeable cryoprotective agents as low as possible and to get the cooling rate as high as possible.

Bij het bevriezen van sperma is het gebruikelijk om het sperma in een spermarietje te brengen en het rietje aan weerseinden af te dichten. Wanneer een dergelijk rietje in vloeibaar stikstof ondergedompeld wordt om een zo groot mogelijke afkoelsnelheid te verkrijgen zodat het sperma gevitrificeerd kan worden, blijkt het afkoelen alsnog relatief langzaam te verlopen. Dit komt door het zogenaamde Leidenfrost effect. Door het grote temperatuurverschil tussen het spermarietje en de vloeibare stikstof ontstaat er een laagje gasvormig stikstof rond het spermarietje dat als isolatie fungeert en de afkoeling van het rietje met het sperma vertraagt. Het gebruik van schadelijke niet-permeabele cryoprotectieve middelen is dan nog steeds nodig om vitrificatie mogelijk te maken.When freezing sperm, it is common practice to place the sperm in a semen straw and seal the straw at both ends. When such a straw is immersed in liquid nitrogen in order to obtain the greatest possible cooling speed so that the sperm can be vitrified, the cooling still appears to proceed relatively slowly. This is due to the so-called Leidenfrost effect. Due to the large temperature difference between the semen straw and the liquid nitrogen, a layer of gaseous nitrogen forms around the semen straw that acts as insulation and slows down the cooling of the straw containing the semen. The use of harmful non-permeable cryoprotectants is then still necessary to enable vitrification.

Het is nu een doel van de uitvinding om de bovengenoemde nadelen te verminderen of zelfs te voorkomen.It is now an object of the invention to reduce or even prevent the above drawbacks.

Dit doel wordt volgens de uitvinding bereikt met een werkwijze volgens de aanhef, die gekenmerkt wordt door: - het in een kanaal plaatsen van de afgesloten houder; en - het door het kanaal laten stromen van een koelvloeistof, in het bijzonder vloeibaar stikstof.This object is achieved according to the invention with a method according to the preamble, which is characterized by: - placing the sealed container in a channel; and - allowing a coolant, in particular liquid nitrogen, to flow through the channel.

Door volgens de uitvinding de houder met biologisch materiaal in een kanaal te plaatsen en vervolgens koelvloeistof door dit kanaal te laten stromen, zal eventueel gasvormig koelmiddel, wat voor een isolerende laag zou kunnen zorgen, direct afgevoerd worden met de langsstromende koelvloeistof. Hierdoor wordt een optimale warmte uitwisseling tussen de houder met biologisch materiaal en de koelvloeistof verkregen en daardoor een aanzienlijk hogere afkoelsnelheid.By placing the container with biological material in a channel according to the invention and then allowing coolant to flow through this channel, any gaseous coolant, which could provide an insulating layer, will be immediately discharged with the coolant flowing past. This results in an optimum heat exchange between the container with biological material and the coolant, resulting in a considerably higher cooling rate.

Bij het gebruik van vloeibaar stikstof kan de afkoelsnelheid een factor 20 hoger zijn met de werkwijze volgens de uitvinding ten opzichte van een werkwijze waarbij de houder eenvoudig in vloeibaar stikstof ondergedompeld wordt. De werkwijze volgens de uitvinding maakt hierdoor vitrificatie van biologisch materiaal, zoals sperma, zonder of met minimaal gebruik van niet-permeabele cryoprotectieve middelen mogelijk. Bovendien kan deze werkwijze met eenvoudige middelen uitgevoerd worden en is een en ander weinig afhankelijk van protocollen en kunde van personeel.When using liquid nitrogen, the cooling rate can be a factor of 20 higher with the method according to the invention compared to a method in which the container is simply immersed in liquid nitrogen. The method according to the invention thus enables vitrification of biological material, such as sperm, without or with minimal use of non-permeable cryoprotective agents. Moreover, this method can be carried out with simple means and is little dependent on protocols and skills of personnel.

In een voorkeursuitvoeringsvorm van de werkwijze volgens de uitvinding wordt het kanaal gevormd door een pijp en waarbij één eind van de pijp, via een afsluiter, verbonden is met een houder van koelvloeistof.In a preferred embodiment of the method according to the invention, the channel is formed by a pipe, one end of the pipe being connected, via a valve, to a container of cooling liquid.

Bij voorkeur staat de houder van koelvloeistof onder een druk hoger dan de omgevingsdruk, zodat bij het openen van de afsluiter koelvloeistof door de pijp zal stromen.Preferably, the container of cooling liquid is under a pressure higher than the ambient pressure, so that cooling liquid will flow through the pipe when the valve is opened.

Met de afsluiter kan gecontroleerd worden wanneer koelvloeistof door de pijp stroomt. Zo is het gemakkelijk om een afgesloten houder met biologisch materiaal in de pijp te plaatsen en vervolgens koelvloeistof door de pijp te laten stromen door het openen van de afsluiter.The valve can be used to control when coolant flows through the pipe. For example, it is easy to place a sealed container with biological material in the pipe and then allow coolant to flow through the pipe by opening the valve.

In een verdere uitvoeringsvorm van de werkwijze volgens de uitvinding is het andere eind van de pijp voorzien van een rooster voor het voorkomen dat de houder door de koelvloeistof uit de pijp gedrukt wordt.In a further embodiment of the method according to the invention, the other end of the pipe is provided with a grid to prevent the container from being pressed out of the pipe by the cooling liquid.

Wanneer de koelvloeistof onder hoge druk staat, zoals bij vloeibaar stikstof, en daardoor met hoge snelheid door de pijp stroomt, kan het zijn dat door de druk de houder uit de pijp geblazen wordt. Door het aanbrengen van een rooster wordt dit voorkomen, terwijl de koelvloeistof vrij door de pijp kan stromen.When the coolant is under high pressure, such as with liquid nitrogen, and therefore flows through the pipe at high speed, the pressure may blow the container out of the pipe. This is prevented by applying a grid, while the coolant can flow freely through the pipe.

In een andere uitvoeringsvorm van de werkwijze volgens de uitvinding wordt aan de afgesloten houder een cryo- protectief middel, zoals een antivriesmiddel, toegevoegd. Het cryo-protectief middel zorgt er voor dat vitrificatie eenvoudiger plaatsvindt en de afkoelsnelheid lager kan zijn dan zonder cryo-protectief middel.In another embodiment of the method according to the invention, a cryoprotective agent, such as an antifreeze agent, is added to the sealed container. The cryo-protective agent ensures that vitrification takes place more easily and the cooling rate can be lower than without the cryo-protective agent.

In een zeer geprefereerde uitvoeringsvorm van de werkwijze volgens de uitvinding is de afgesloten houder een spermarietje. Een dergelijk lange en dunne houder heeft een groot buitenoppervlak en daarmee contactoppervlak met de koelvloeistof in verhouding met de inhoud van de houder.In a highly preferred embodiment of the method according to the invention, the sealed container is a semen straw. Such a long and thin container has a large outer surface and thus contact surface with the cooling liquid in proportion to the contents of the container.

De uitvinding betreft verder een inrichting voor het vitrificeren van biologisch materiaal, zoals sperma, welke inrichting omvat: - een spoelkanaal met een eerst eind en een tweede eind; - een afsluitbare houder aangebracht in het spoelkanaal, waarbij tussen de wanden van het spoelkanaal en de afsluitbare houder een doorgangsruimte aanwezig is voor doorstroming van een koelmiddel; en - een koelmiddeltoevoer in vloeistofverbinding met het eerste eind van het spoelkanaal.The invention further relates to a device for vitrifying biological material, such as sperm, which device comprises: - a flushing channel with a first end and a second end; - a closable container arranged in the flushing channel, wherein a passage space is present between the walls of the flushing channel and the closable container for a coolant to flow through; and - a coolant supply in fluid communication with the first end of the flushing channel.

In een voorkeursuitvoeringsvorm van de inrichting volgens de uitvinding is aan het tweede eind van het spoelkanaal een rooster voorzien voor het voorkomen dat de 5 afsluitbare houder door de koelvloeistof uit het spoelkanaal gedrukt wordt.In a preferred embodiment of the device according to the invention, a grid is provided at the second end of the flushing channel to prevent the closable container from being forced out of the flushing channel by the cooling liquid.

Met name bij het gebruik van vloeibaar stikstof kan bij het openen van de houder de druk in het spoelkanaal zodanig hoog worden, dat de afsluitbare houder uit het spoelkanaal gedrukt wordt. Het aangebrachte rooster voorkomt dit.Particularly when liquid nitrogen is used, the pressure in the flushing channel can become so high when the container is opened that the closable container is pressed out of the flushing channel. The fitted grid prevents this.

In een andere uitvoeringsvorm van de inrichting volgens de uitvinding is het spoelkanaal losneembaar van de koelmiddeltoevoer. In deze uitvoering kan de afsluitbare houder snel verwisseld worden en kunnen bijvoorbeeld gemakkelijk enkele spermarietjes snel afgekoeld worden om het daarin bevatte sperma te vitrificeren.In another embodiment of the device according to the invention, the flushing channel is detachable from the coolant supply. In this embodiment, the closable container can be quickly exchanged and, for example, a few semen straws can easily be quickly cooled in order to vitrify the semen contained therein.

Deze en andere kenmerken van de uitvinding worden nader toegelicht aan de hand van de bijgaande tekeningen.These and other features of the invention are further elucidated with reference to the accompanying drawings.

Figuren 1 en 2 tonen schematisch een uitvoeringsvorm van een inrichting volgens de uitvinding in twee verschillende standen.Figures 1 and 2 schematically show an embodiment of a device according to the invention in two different positions.

Figuur 3 toont schematisch een dwarsdoorsnede van een afsluitbare houder ondergedompeld in vloeibare stikstof.Figure 3 schematically shows a cross-section of a sealable container immersed in liquid nitrogen.

Figuur 4 toont schematisch een dwarsdoorsnede van een afsluitbare houder tijdens het uitvoeren van de werkwijze volgens de uitvinding.Figure 4 schematically shows a cross-section of a closable container during the execution of the method according to the invention.

Figuur 5 toont een diagram van de temperatuur in de afsluitbare houder volgens figuur 3.Figure 5 shows a diagram of the temperature in the sealable container according to Figure 3.

Figuur 6 toont een diagram van de temperatuur in de afsluitbare houder volgens figuur 4.Figure 6 shows a diagram of the temperature in the sealable container according to Figure 4.

Figuur 1 toont een inrichting 1 met een koelmiddelreservoir 2 met daarop een afsluiter 3 met bedieningshandel 4. De uitloop 5 van de afsluiter 3 is via een afdichting 6 in vloeistofverbinding gekoppeld met een buis +, die een spoelkanaal vormt, waarin een afsluitbare houder 8 is geplaatst. Op het distale eind van de buis 7 is een rooster 9 voorzien, dat voorkomt dat de houder 8 uit de buis 7 geblazen wordt.Figure 1 shows a device 1 with a coolant reservoir 2 with a valve 3 with operating handle 4 on it. The outlet 5 of the valve 3 is coupled in fluid communication via a seal 6 with a pipe +, which forms a flushing channel, in which a closable container 8 is placed. placed. At the distal end of the tube 7, a grid 9 is provided, which prevents the container 8 from being blown out of the tube 7.

De afsluitbare houder 8 is in deze uitvoeringsvorm een bekend spermarietje, waarin biologisch materiaal, in het bijzonder sperma, is ondergebracht.In this embodiment, the closable container 8 is a known semen straw, in which biological material, in particular semen, is accommodated.

In het koelmiddelreservoir 2 zal er een evenwicht zijn tussen vloeibare stikstof 11 en gasvormig stikstof 10.In the refrigerant reservoir 2 there will be an equilibrium between liquid nitrogen 11 and gaseous nitrogen 10.

In figuur 2 wordt de inrichting 1 getoond, waarbij de bedieningshandel 4 omlaag is gedrukt, waardoor de afsluiter 3 geopend wordt en koelvloeistof L, in het bijzonder vloeibare stikstof, uit het reservoir 2 via de aanzuigbuis 12, de afsluiter 3, de uitloop 5 door de buis 7 en langs het spermarietje 8 stroomt.In figure 2 the device 1 is shown, with the operating handle 4 pressed down, whereby the valve 3 is opened and cooling liquid L, in particular liquid nitrogen, is discharged from the reservoir 2 via the suction pipe 12, the valve 3, the outlet 5 through the tube 7 and along the sperm straw 8.

Figuur 3 toont een schematische dwarsdoorsnede van een spermarietje 8, waarin sperma S is ondergebracht, ondergedompeld in vloeibare stikstof L. Door het Leidenfrost effect zal er tussen de buitenwand van het spermarietje 8 en het vloeibare stikstof L een laag gasvormig stikstof G gevormd worden. Deze laag gasvormig stikstof G vormt een isolatielaag, waardoor de afkoeling van het sperma S vertraagd wordt.Figure 3 shows a schematic cross-section of a sperm straw 8, in which sperm S is housed, immersed in liquid nitrogen L. Due to the Leidenfrost effect, a layer of gaseous nitrogen G will be formed between the outer wall of the sperm straw 8 and the liquid nitrogen L. This layer of gaseous nitrogen G forms an insulating layer, slowing down the cooling of the sperm S.

Figuur 4 toont een schematische dwarsdoorsnede van de buis 7 van de inrichting 1 volgens figuur 2, waarbij vloeibare stikstof L tussen de binnenwand van de buis 7 en de buitenwand van het spermarietje 8 stroomt. Gasbellen G, die op de buitenwand van het spermarietje 8 gevormd worden, zullen gelijk met de stroom vloeibare stikstof L meegevoerd worden, waardoor er geen laag gasvormig stikstof kan ontstaan, zoals getoond in figuur 3. Hierdoor wordt de warmteuitwisseling tussen het spermarietje 8 en de vloeibare stikstof LFigure 4 shows a schematic cross-section of the tube 7 of the device 1 according to Figure 2, wherein liquid nitrogen L flows between the inner wall of the tube 7 and the outer wall of the sperm straw 8 . Gas bubbles G, which are formed on the outer wall of the sperm straw 8, will be carried along with the flow of liquid nitrogen L, so that a layer of gaseous nitrogen cannot form, as shown in figure 3. As a result, the heat exchange between the sperm straw 8 and the liquid nitrogen L

: aanzienlijk verbeterd.: significantly improved.

Figuur 5 toont een temperatuur diagram voor de situatie volgens figuur 3. De temperatuur T van het sperma S daalt vanaf kamertemperatuur naar ongeveer -190°C in een tijdsbestek van ongeveer 20 seconden.Figure 5 shows a temperature diagram for the situation according to Figure 3. The temperature T of the sperm S drops from room temperature to about -190°C in a period of about 20 seconds.

Figuur 6 toont een temperatuur diagram voor de situatie volgens figuur 4. De temperatuur T van het sperma S daalt eveneens vanaf kamertemperatuur naar ongeveer -190°C, maar wel in een aanzienlijk sneller tijdsbestek van minder dan 1 seconde.Figure 6 shows a temperature diagram for the situation according to figure 4. The temperature T of the sperm S also drops from room temperature to about -190°C, but in a considerably faster time frame of less than 1 second.

Hieruit is overduidelijk dat met de werkwijze en inrichting volgens de uitvinding een veel snellere afkoeling van het biologisch materiaal in de afsluitbare houder verkregen kan worden, waardoor vitrificatie met aanzienlijk minder of zelfs geen cryo-protectief middel mogelijk is.It is abundantly clear from this that with the method and device according to the invention a much faster cooling of the biological material in the closable container can be achieved, as a result of which vitrification is possible with considerably less or even no cryo-protective agent.

Claims (9)

ConclusiesConclusions 1. Werkwijze voor het vitrificeren van biologisch materiaal, zoals sperma, welke werkwijze de stappen omvat: - het aanbrengen van biologisch materiaal in een afgesloten houder, zoals een rietvormige houder, die aan weerseinden is afgedicht; gekenmerkt door - het in een kanaal plaatsen van de afgesloten houder; en - het door het kanaal laten stromen van een koelvloeistof, in het bijzonder vloeibaar stikstof.CLAIMS 1. Method for vitrifying biological material, such as sperm, which method comprises the steps of: - placing biological material in a closed container, such as a reed-shaped container, which is sealed at both ends; characterized by - placing the sealed container in a channel; and - allowing a coolant, in particular liquid nitrogen, to flow through the channel. 2. Werkwijze volgens conclusie 1, waarbij het kanaal gevormd wordt door een pijp en waarbij één eind van de pijp, via een afsluiter, verbonden is met een houder van koelvloeistof.A method according to claim 1, wherein the channel is formed by a pipe and one end of the pipe is connected, via a valve, to a container of cooling liquid. 3. Werkwijze volgens conclusie 2, waarbij de houder van koelvloeistof onder een druk staat hoger dan de omgevingsdruk, zodat bij het openen van de afsluiter koelvloeistof door de pijp zal stromen.A method according to claim 2, wherein the container of cooling liquid is under a pressure higher than the ambient pressure, so that cooling liquid will flow through the pipe when the valve is opened. 4. Werkwijze volgens conclusie 2 of 3, waarbij het andere eind van de pijp voorzien is van een rooster voor het voorkomen dat de houder door de koelvloeistof uit de pijp gedrukt wordt.A method according to claim 2 or 3, wherein the other end of the pipe is provided with a grid to prevent the container from being pushed out of the pipe by the cooling liquid. 5. Werkwijze volgens één van de voorgaande conclusies, waarbij aan de afgesloten houder een cryo- protectief middel, zoals een antivriesmiddel, toegevoegd wordt.A method according to any one of the preceding claims, wherein a cryoprotective agent, such as an antifreeze agent, is added to the sealed container. 6. Werkwijze volgens één van de voorgaande conclusies, waarbij de afgesloten houder een spermarietje is.A method according to any one of the preceding claims, wherein the sealed container is a semen straw. 7. Inrichting voor het vitrificeren van biologisch materiaal, zoals sperma, welke inrichting omvat: - een spoelkanaal met een eerst eind en een tweede eind; — een afsluitbare houder aangebracht in het spoelkanaal, waarbij tussen de wanden van het spoelkanaal en de afsluitbare houder een doorgangsruimte aanwezig is voor doorstroming van een koelmiddel; en - een koelmiddeltoevoer in vloeistofverbinding met het eerste eind van het spoelkanaal.7. Device for vitrifying biological material, such as sperm, which device comprises: - a flushing channel with a first end and a second end; - a closable container arranged in the flushing channel, wherein a passage space is present between the walls of the flushing channel and the closable container for a coolant to flow through; and - a coolant supply in fluid communication with the first end of the flushing channel. 8. Inrichting volgens conclusie 7, waarbij aan het tweede eind van het spoelkanaal een rooster is voorzien voor het voorkomen dat de afsluitbare houder door de koelvloeistof uit het spoelkanaal gedrukt wordt.8. Device as claimed in claim 7, wherein a grid is provided at the second end of the flushing channel to prevent the closable container from being pressed out of the flushing channel by the cooling liquid. 9. Inrichting volgens conclusie 7 of 8, waarbij het spoelkanaal losneembaar is van de koelmiddeltoevoer.9. Device as claimed in claim 7 or 8, wherein the flushing channel is detachable from the coolant supply.
NL2028903A 2021-08-02 2021-08-02 Method and device for vitrifying biological material, such as semen NL2028903B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NL2028903A NL2028903B1 (en) 2021-08-02 2021-08-02 Method and device for vitrifying biological material, such as semen

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NL2028903A NL2028903B1 (en) 2021-08-02 2021-08-02 Method and device for vitrifying biological material, such as semen

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NL2028903B1 true NL2028903B1 (en) 2023-02-17

Family

ID=77519722

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NL2028903A NL2028903B1 (en) 2021-08-02 2021-08-02 Method and device for vitrifying biological material, such as semen

Country Status (1)

Country Link
NL (1) NL2028903B1 (en)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090186405A1 (en) * 2008-01-17 2009-07-23 Milton Chin Rapid Chilling Device for Vitrification
EP3772935A1 (en) * 2018-04-05 2021-02-17 Xu Han Improved ultra-fast cooling system and methods of use

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090186405A1 (en) * 2008-01-17 2009-07-23 Milton Chin Rapid Chilling Device for Vitrification
EP3772935A1 (en) * 2018-04-05 2021-02-17 Xu Han Improved ultra-fast cooling system and methods of use

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KATKOV I I ET AL: "KrioBlastTMas a New Technology of Ultrafast Cryopreservation of Cells and Tissues. 2. Kinetic Vitrification of Human Pluripotent Stem Cells and Spermatozoa", BULLETIN OF EXPERIMENTAL BIOLOGY AND MEDICINE, SPRINGER NEW YORK LLC, US, vol. 165, no. 1, 24 May 2018 (2018-05-24), pages 171 - 175, XP036532441, ISSN: 0007-4888, [retrieved on 20180524], DOI: 10.1007/S10517-018-4122-X *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Rubinsky Principles of low temperature cell preservation
JP4824677B2 (en) Delivery of large cell masses with syringes and related methods for cryopreserving cells
US5723282A (en) Method of preparing organs for vitrification
Isachenko et al. Technologies for Cryoprotectant-Free Vitrification of Human Spermatozoa: Asepticity as a Criterion for Effectiveness
Ozkavukcu et al. Cryopreservation: basic knowledge and biophysical effects
CN103179852A (en) Improved micromanipulation and storage apparatus and methods
US6361934B1 (en) Method and apparatus for cryopreservation
Baust et al. Integrating molecular control to improve cryopreservation outcome
US20200154697A1 (en) High subzero cryopreservation
NL2028903B1 (en) Method and device for vitrifying biological material, such as semen
WO2013098825A1 (en) Cryopreservation device for vitrification and method for using same
US20100212331A1 (en) Cryopreservation method and device
WO2014088514A1 (en) A method of vitrification
Arav et al. Directional freezing: a solution to the methodological challenges to preserve large organs
Saragusty Directional freezing for large volume cryopreservation
EP3402331A1 (en) Automatic devices configured to perform a cryoprocedure on at least one biological sample carried by one or more carriers
Kasai Cryopreservation of mammalian embryos: vitrification
Pomeroy Cryopreservation of transgenic mice
SHARMA et al. Biophysics of cryopreservation
Zhou et al. Investigation on the thermal performance of a novel microchannel-aided device for vitrification of cells/tissues
Katkov et al. KrioBlast TM as a New Technology of Hyper-fast Cryopreservation of Cells and Tissues. Part I. Thermodynamic Aspects and Potential Applications in Reproductive and Regenerative Medicine
JP6721242B2 (en) Biological sample storage container
Jones Cryopreservation of bovine embryos
Kagalwala Sperm vitrification
JP2019199450A (en) Treatment method of heart for transplantation