NL1018756C1

NL1018756C1 - Testing the purity or stability of amlodipine maleate comprises assaying for the presence of amlodipine aspartate or amlodipine maleamide

Info

Publication number: NL1018756C1
Application number: NL1018756A
Authority: NL
Inventors: Jacobus Maria Lemmens; Frantisek Picha; Theodorus Hendricus Ant Peters; Petrus Franciscus Anton Bakker
Original assignee: Bioorg Bv
Priority date: 2001-08-15
Filing date: 2001-08-15
Publication date: 2001-11-02

Abstract

Method for testing the purity or stability of a sample of amlodipine maleate or a pharmaceutical dosage form comprising amlodipine maleate comprises assaying the sample for the presence of amlodipine aspartate or amlodipine maleamide. Independent claims are also included for the following: (1) a method comprising analyzing largely pure amlodipine aspartate or amlodipine maleamide under a series of conditions to provided a reference standard for this series of conditions; (2) a process comprising separating amlodipine maleate from both amlodipine aspartate and amlodipine maleamide; (3) a process comprising mixing amlodipine maleate with excipient(s), producing a batch of tablets or capsules comprising the mixture, analyzing a sample of the tablets or capsules, comparing the result with a reference standard for amlodipine aspartate or amlodipine maleamide, and selling or releasing the batch if the amlodipine aspartate or amlodipine maleamide content is no more than 1% by weight of amlodipine maleate.

Description

REFERENTIESTANDAARDEN VOOR HET BEPALEN VAN DE ZUIVERHEID OF STABILITEIT VAN AMLODIPINEMALEAAT EN WERKWIJZEN DAARVOORREFERENCE STANDARDS FOR DETERMINING THE PURITY OR STABILITY OF AMLODIPINE MALATE AND METHODS THEREFOR

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op het gebruik van twee nieuwe verbinding als referentie-standaarden voor het bepalen van de zuiverheid of stabiliteit van amlodipinemaleaatstoffen en farmaceutische 5 preparaten.The present invention relates to the use of two new compounds as reference standards for determining the purity or stability of amlodipine maleates and pharmaceutical preparations.

Farmaceutische producten worden in de meeste landen gereguleerd door een overheidsinstantie. De U.S. Food & Drug Administration (FDA) vereist in het algemeen dat een aanvrager de veiligheid en werkzaamheid van het farmaceu-10 tische product aantoont tijdens de goedkeurings/over-zichtsfase en dat hij de veiligheid van het geneesmiddel na de goedkeuring blijft volgen. Vergelijkbare vereisten bestaan in vele Europese landen en elders in de wereld. Teneinde te voldoen aan veiligheidsbelangen vereisen de 15 regelende instanties in het algemeen een productiespeci-ficatie, die de maximale hoeveelheid van elke geïdentificeerde onzuiverheid alsook de maximale hoeveelheid voor alle resterende ongeïdentificeerde onzuiverheden vaststelt. Indien eenmaal goedgekeurd, wordt elke partij of 20 portie van het farmaceutische product getest om te garanderen dat aan de specificatie wordt voldaan. Verder worden stabiliteitstesten uitgevoerd op het farmaceutische product om aan te tonen, dat het preparaat niet aanzienlijk of materieel verandert in de tijd; d.w.z.Pharmaceuticals are regulated by a government agency in most countries. The U.S. The Food & Drug Administration (FDA) generally requires an applicant to demonstrate the safety and efficacy of the pharmaceutical product during the approval / review phase and to continue to monitor the safety of the medicinal product after approval. Similar requirements exist in many European countries and elsewhere in the world. In order to meet safety concerns, the regulators generally require a production specification, which establishes the maximum amount of each identified impurity as well as the maximum amount for all remaining unidentified impurities. Once approved, each batch or 20 portion of the pharmaceutical product is tested to ensure compliance with the specification. Furthermore, stability tests are performed on the pharmaceutical product to show that the formulation does not change significantly or materially over time; i.e.

25 voorbij zijn aangegeven houdbaarheidstijd. Het is belangrijk dat vóór de toediening ervan aan een patiënt het farmaceutische product niet afwijkt van zijn goedgekeurde specificatie op een manier die afbreuk zou kunnen doen aan zijn veiligheid en werkzaamheid. Een goede praktijk 30 houdt in dat van elke aan het publiek vrijgegeven, commerciële partij een monster wordt achtergehouden, zodat de stabiliteit gevolgd kan worden en elk defect kan worden ontdekt en gecorrigeerd.25 has passed its stated shelf life. It is important that, prior to administration to a patient, the pharmaceutical product does not deviate from its approved specification in a manner that could compromise its safety and efficacy. Good practice 30 involves the retention of a sample from each commercial lot released to the public so that stability can be monitored and any defect discovered and corrected.

1018756· 21018756 · 2

Derhalve worden farmaceutica getest op zuiverheid zowel tijdens de productie als daarna tijdens zijn houdbaarheidsduur. In het algemeen wordt het product getest door bepaalde analytische resultaten te vergelijken met 5 de resultaten van een standaard referentie. Voor de detectie van onzuiverheden betekent dit normaal het analyseren van het farmaceutische product en het vergelijken van het resultaat met het resultaat dat verkregen wordt voor een in grote mate zuivere vorm van de verwach-10 te onzuiverheid in dezelfde bepaling. Bronnen van potentiële onzuiverheden in een farmaceutisch actief middel of preparaat omvatten: * resterende hoeveelheden van synthetische voorlopers 15 * bijproducten ontstaan uit de synthese en op- werking van de actieve stof * resterende oplosmiddelen * afbraakproducten die verschijnen tijdens opslag, inclusief producten als gevolg van in- 20 teracties met hulpstoffen in preparaten * isomeren van het actieve middel * sporenverontreinigingen, bijv. van de apparatuur of uit de omgeving.Therefore, pharmaceuticals are tested for purity both during production and afterwards during its shelf life. In general, the product is tested by comparing certain analytical results with the results of a standard reference. For the detection of impurities, this normally means analyzing the pharmaceutical product and comparing the result with the result obtained for a highly pure form of the expected impurity in the same assay. Sources of potential impurities in a pharmaceutically active agent or preparation include: * residual amounts of synthetic precursors 15 * by-products from the synthesis and reprocessing of the active substance * residual solvents * degradation products that appear during storage, including products due to in - 20 interactions with excipients in preparations * isomers of the active agent * trace impurities, eg from the equipment or from the environment.

25 Zonder identificatie van de potentiële onzuiverheid en een synthesenrouten om een referentiestandaard daarvoor te maken, is het moeilijk of onmogelijk om efficiënt te analyseren op de onzuiverheid of om op andere wijze de hoeveelheid ervan in het farmaceutische product te con-30 troleren.Without identifying the potential impurity and a synthesis routes to make a reference standard therefor, it is difficult or impossible to efficiently analyze for the impurity or otherwise control its amount in the pharmaceutical product.

Amlodipinebesylaat is een zeer succesvol farmaceu-ticum dat wordt verkocht door Pfizer onder de handelsnaam NOVASC voor het behandelen van hypertensie en angina. Amlodipine zelf werd voor het eerst gepatenteerd in EP 35 089 167 en overeenkomstig US 4.572.909. Deze octrooi-schriften identificeren, dat één van de verbindingen met de meeste voorkeur 2-[(2-aminoethoxy) methyl]-4-(2-chloor-fenyl)-3-ethoxycarbonyl-5-methoxycarbonyl-6-methyl-l,4- 1018756· 3 dihydropyridine is. Deze verbinding, die nu algemeen bekend is als amlodipine, heeft de volgende structuur.Amlodipine besylate is a very successful pharmaceutical sold by Pfizer under the trade name NOVASC for the treatment of hypertension and angina. Amlodipine itself was first patented in EP 35 089 167 and in accordance with US 4,572,909. These patents identify that one of the most preferred compounds is 2 - [(2-aminoethoxy) methyl] -4- (2-chlorophenyl) -3-ethoxycarbonyl-5-methoxycarbonyl-6-methyl-1, 4-1018756-3 is dihydropyridine. This compound, now commonly known as amlodipine, has the following structure.

KI LIKI LI

c Tc T

H3COvVvVCH3 O I oH3COvVvVCH3 O I o

Cj α 10 De voorbeelden 8, 11, 12 en 22 van EP 089 167 tonen de synthese van amlodipine in de maleaatzoutvorm. Hoewel algemeen geleerd wordt dat een verscheidenheid aan zuur-additiezouten geschikt is, is het maleaatzout het zuurad-ditiezout met de meeste voorkeur. EP 244 944 en overeen-15 komstig US 4.879.303 werden echter gepubliceerd en waren gericht op het besylaat- (of benzeensulfonaat) zout van amlodipine. Van het besylaatzout wordt beweerd, dat het bepaalde voordelen biedt boven de bekende zouten, waaronder goede formuleringseigenschappen. De kwaliteitsstan-20 daard voor amlodipinebesylaat wordt verschaft in Pharmeu-ropa 10 (2) , 187 (1998) .Cj α 10 Examples 8, 11, 12 and 22 of EP 089 167 show the synthesis of amlodipine in the maleate salt form. While it is commonly taught that a variety of acid addition salts are suitable, the maleate salt is the most preferred acid addition salt. EP 244 944 and corresponding to US 4,879,303, however, were published and focused on the besylate (or benzenesulfonate) salt of amlodipine. The besylate salt is said to offer certain advantages over the known salts, including good formulation properties. The quality standard for amlodipine besylate is provided in Pharmacia 10 (2), 187 (1998).

Inderdaad onthult een overzicht van de beschikbare delen van NORVASC (amlodipinebesylaat) New Drug Application (NDA), die werd ingediend bij de U.S. Food & Drug 25 Administration door Pfizer, dat er tijdens de ontwikkeling werd omgeschakeld van het originele maleaatzout op het latere besylaatzout. (Zie "Review of Original NDA" voor NDA# 19-787 van 10.10.1990, dat te verkrijgen is van de FDA onder de Freedom of Information Act.) De redenen 30 voor de omschakeling waren blijkbaar problemen bij de tablettering en met de stabiliteit. De precieze problemen/vragen/oorzaken wat betreft stabiliteit en tablettering zijn echter niet voor het publiek beschreven in de informatie die van de FDA verkrijgbaar is.Indeed, a review of the available parts of NORVASC (amlodipine besylate) New Drug Application (NDA), which was filed with U.S. Pat. Food & Drug 25 Administration by Pfizer, which switched from the original maleate salt to the later besylate salt during development. (See "Review of Original NDA" for NDA # 19-787, 10.10.1990, available from the FDA under the Freedom of Information Act.) The reasons for the switch were apparently tabletting and stability issues . However, the precise problems / questions / causes regarding stability and tabletting are not publicly described in the information available from the FDA.

35 Amlodipinemaleaat is echter nog steeds een bruik baar zout van amlodipine. Het zou wenselijk zijn om de daarmee geassocieerde stabiliteitsproblemen te identifi- 1018756· 4 ceren en op te lossen en om een werkwijze voor het controleren van de productie ervan te verschaffen.However, amlodipine maleate is still a useful salt of amlodipine. It would be desirable to identify and solve the associated stability problems and to provide a method for controlling their production.

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op de ontdekking van twee nieuwe onzuiverheden die geassocieerd 5 zijn met amlodipinemaleaat en zijn farmaceutische preparaten. Eén aspect van de onderhavige uitvinding heeft betrekking op een werkwijze, die het analyseren van een in grote mate zuiver amlodipineaspartaat of amlodipinema-leamide onder een reeks van omstandigheden omvat om een 10 analytische resultaat voor de referentiestandaard te verkrijgen voor deze reeks van omstandigheden. Een verder aspect van de uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor het testen van de zuiverheid of stabiliteit van een monster van amlodipinemaleaat of een farmaceutische 15 doseringsvorm die amlodipinemaleaat bevat, die het analyseren van een monster van een amlodipinemaleaatstof of -preparaat op de aanwezigheid van amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide omvat. Bijvoorbeeld een werkwijze voor het controleren van de zuiverheid of stabiliteit van 20 een amlodipinemaleaatstof of -preparaat om een analytisch resultaat te verkrijgen; en het vergelijken van het analytische resultaat met een overeenkomstig analytisch resultaat voor een referentiestandaard voor amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide om te bepalen of de zui-25 verheid of stabiliteit van de amlodipinemaleaatstof of het preparaat bevredigend is. Een ander aspect van de uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor het produceren van farmaceutisch geschikte vaste doserings-vormen van amlodipinemaleaat. De werkwijze omvat het 30 mengen van amlodipinemaleaat met tenminste één farmaceutisch aanvaardbare hulpstof om een mengsel te vormen; ofwel (a) het afvullen van het mengsel in een capsule of (b) het samenpersen van het mengsel tot tabletten, om een productieportie van farmaceutische vaste doseringsvormen 35 van amlodipinemaleaat te vormen; het verwijderen van een monster van deze farmaceutische vaste doseringsvormen van amlodipinemaleaat uit de productieportie; het onderwerpen van het monster aan een analyse om een analytische resul- 101 87 5 6· 5 taat voor het monster te verkrijgen; het vergelijken van het analytische resultaat voor het monster met een overeenkomstig analytisch resultaat voor een referentiestan-daard voor amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide om 5 de hoeveelheid amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide ten opzichte van het amlodipinemaleaat te bepalen; en de productieportie te verkopen of vrij te geven, als de relatieve hoeveelheid amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide niet groter is dan een vooraf bepaalde/goed-10 gekeurde grens, bijv. 1,0 gew.%, bij voorkeur 0,1 gew.% op basis van de hoeveelheid amlodipinemaleaat.The present invention relates to the discovery of two new impurities associated with amlodipine maleate and its pharmaceutical preparations. One aspect of the present invention pertains to a method comprising analyzing a highly pure amlodipine aspartate or amlodipinema leamide under a range of conditions to obtain a reference standard analytical result for this set of conditions. A further aspect of the invention relates to a method for testing the purity or stability of a sample of amlodipine maleate or a pharmaceutical dosage form containing amlodipine maleate, which analyzes a sample of an amlodipine maleate or preparation for the presence of amlodipine aspartate or includes amlodipine maleamide. For example, a method for checking the purity or stability of an amlodipine maleate or preparation to obtain an analytical result; and comparing the analytical result with a corresponding analytical result for a reference standard for amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide to determine whether the purity or stability of the amlodipine maleate or composition is satisfactory. Another aspect of the invention relates to a method of producing pharmaceutically suitable solid dosage forms of amlodipine maleate. The method comprises mixing amlodipine maleate with at least one pharmaceutically acceptable excipient to form a mixture; either (a) filling the mixture into a capsule or (b) compressing the mixture into tablets, to form a production portion of pharmaceutical solid dosage forms of amlodipine maleate; removing a sample of these pharmaceutical solid dosage forms of amlodipine maleate from the production portion; subjecting the sample to analysis to obtain an analytical result for the sample; comparing the analytical result for the sample with a corresponding analytical result for a reference standard for amlodipine aspartate or amlodipine maleamide to determine the amount of amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide relative to the amlodipine maleate; and sell or release the production portion, if the relative amount of amlodipine aspartate or amlodipine maleamide is not greater than a predetermined / approved limit, e.g. 1.0 wt%, preferably 0.1 wt% based the amount of amlodipine maleate.

Fig. 1 toont een HPLC-chromatogram van een kunstmatig mengsel van amlodipinemaleaat, amlodipineaspartaat en amlodipinemaleamide.Fig. 1 shows an HPLC chromatogram of an artificial mixture of amlodipine maleate, amlodipine aspartate and amlodipine maleeamide.

15 Fig. 2 toont een 1H-NMR-spectrum van de amlodipine- aspartaatverbinding die in Voorbeeld 1 geproduceerd wordt.FIG. 2 shows a 1 H NMR spectrum of the amlodipine aspartate compound produced in Example 1.

Fig. 3 toont een 13C-NMR-spectrum van de amlodipi-neaspartaatverbinding die in Voorbeeld 1 geproduceerd 2 0 wordt.Fig. 3 shows a 13 C NMR spectrum of the amlodipine aspartate compound produced in Example 1.

Fig. 4 toont een 1H-NMR-spectrum van de amlodipine-maleamidenverbinding die geproduceerd wordt in Voorbeeld 2.Fig. 4 shows a 1 H NMR spectrum of the amlodipine maleamide compound produced in Example 2.

Fig. 5 toont een HPLC-chromatogram van amlodipine-25 maleaattabletten met minder dan 0,2 % amlodipinemaleaat of amlodipineaspartaat.Fig. 5 shows an HPLC chromatogram of amlodipine-25 maleate tablets containing less than 0.2% amlodipine maleate or amlodipine aspartate.

Fig. 6 toont een HPLC-chromatogram van amlodipine-maleaattabletten met meer dan 0,2 % amlodipineaspartaat.Fig. 6 shows an HPLC chromatogram of amlodipine maleate tablets with greater than 0.2% amlodipine aspartate.

Fig. 7 toont een gescand TLC-chromatogram van 30 amlodipinemaleaat, met amlodipineaspartaat en amlodipinemaleamide als onzuiverheden.Fig. 7 shows a scanned TLC chromatogram of 30 amlodipine maleate, with amlodipine aspartate and amlodipine maleeamide as impurities.

Amlodipinemaleaat heeft de volgende formule: 35 •1Ό187 56w 6 0H3yV^n% yooh H3COnJ1nAv/°^.CH3 I 5 0 1. a pooh 10 Nu is gevonden, dat tenminste twee tot nu toe ongeïdentificeerde onzuiverheden in beschouwing genomen moeten worden bij het testen van de kwaliteit van amlodi-pinemaleaat. Beide zijn verontreinigingen die ontstaan als gevolg van nevenreacties tijdens de synthese en/of 15 gevormd worden tijdens opslag. De verontreinigingen zijn specifiek voor amlodipinemaleaat, omdat ze ontstaan door de aanwezigheid van maleïnezuur en dus niet worden geïdentificeerd of gemeten in verband met amlodipinebesy-laat. De verbindingen worden hierin aralodipineaspartaat 20 en amlodipinemaleamide genoemd. De formule voor elk wordt hieronder gegeven.Amlodipine maleate has the following formula: 35 • 1Ό187 56w 6 0H3yV ^ n% yooh H3COnJ1nAv / ° ^ .CH3 I 5 0 1. a pooh 10 It has now been found that at least two previously unidentified impurities should be considered in testing of the quality of amlodi pinate maleate. Both are impurities arising from side reactions during synthesis and / or from storage. The impurities are specific to amlodipine maleate because they arise from the presence of maleic acid and so are not identified or measured for amlodipine besylate. The compounds are referred to herein as aralodipine aspartate 20 and amlodipine maleamide. The formula for each is given below.

"Amlodipineaspartaat""Amlodipine Aspartate"

25 CH3n^n>y^0.^'N^N.^,C00HCH3n ^ n> y ^ 0. ^ 'N ^ N. ^, C00H

h>c°>AA^ch’ Xh> c °> AA ^ ch ’X

° J. a pooh 30 "Amlodipinemaleamide11 35 H3 \^coqh 1018756· 7° J. a pooh 30 "Amlodipine maleamide11 35 H3 \ ^ coqh 1018756 · 7

Zowel amlodipineaspartaat als amlodipinemaleamide zijn zelf calciumkanaalblokkerende middelen en kunnen worden gebruikt als farmaceutisch actieve middelen. Deze nieuwe verbindingen en hun gebruik in farmaceutica worden 5 meer volledig beschreven in de gemeenschappelijk in eigendom zijnde, tegelijkertijd in behandeling zijnde Amerikaanse Octrooiaanvrage 09/809.349, die werd ingediend op 16 maart 2001 en is getiteld "Aspartaatderivaat van amlodipine", waarvan de gehele inhoud hierin wordt 10 opgenomen als referentie, en in de gemeenschappelijk in eigendom zijnde, tegelijkertijd in behandeling zijnde Amerikaanse Octrooiaanvrage 09/809.348, die werd ingediend op 16 maart 2001 en is getiteld "Amidenderivaat van amlodipine", waarvan de gehele inhoud hierin wordt opge-15 nomen als referentie.Both amlodipine aspartate and amlodipine maleamide are themselves calcium channel blockers and can be used as pharmaceutically active agents. These new compounds and their use in pharmaceuticals are more fully described in commonly owned co-pending U.S. Patent Application 09 / 809,349, filed March 16, 2001, entitled "Aspartate Derivative of Amlodipine", the entire contents of which It is incorporated herein by reference, and in commonly owned, co-pending U.S. Patent Application 09 / 809,348, filed March 16, 2001, entitled "Amide Derivative of Amlodipine", the entire contents of which are incorporated herein. take as a reference.

Deze verbindingen worden gevormd door een reactie tussen amlodipine en maleïnezuur. Amlodipineaspartaat wordt gevormd door een Michael-additie tussen de amino-groep van amlodipine en de dubbele binding van het 20 maleïnezuur. Amlodipinemaleamide wordt gevormd door een amideringsreactie van de aminegroep van het amlodipine met de carboxylgroep van het maleïnezuur.These compounds are formed by a reaction between amlodipine and maleic acid. Amlodipine aspartate is formed by a Michael addition between the amino group of amlodipine and the double bond of the maleic acid. Amlodipine maleamide is formed by an amidation reaction of the amine group of the amlodipine with the carboxyl group of the maleic acid.

Chemische reacties tussen amlodipine en maleïnezuur die leiden tot de aspartaat- en maleamidenonzuiverheden, 25 kunnen optreden als nevenreacties tijdens de vorming van het amlodipinemaleaatzout. Verder kan amlodipinemaleaat daaropvolgende omzetting/afbraak ondergaan door de bovengenoemde Michael-additie of amideringsreacties onder de vorming van respectievelijk de aspartaat- of maleamide-30 nonzuiverheid tijdens de bewerking en formulering tot een farmaceutisch eindproduct of tijdens daaropvolgende opslag. Wat betreft de twee onzuiverheden wordt het amlodipineaspartaat gemakkelijker gevormd, vooral onder opslagomstandigheden, en het is dus waarschijnlijk een 35 belangrijkere onzuiverheid om te controleren. Hoewel deze verbindingen niet schadelijk hoeven te zijn in het farmaceutische preparaat, omdat het zelf calciumkanaalblokkerende middelen zijn, vereist de moderne regulatoire 101875fid 8 praktijk in het algemeen precieze controle over dergelijke "onzuiverheden". Nu dat de onzuiverheden geïdentificeerd en in een voldoende zuivere toestand bereid zijn, kunnen amlodipineaspartaat en amlodipinemaleamide worden 5 gebruikt als referentiemarkers voor routinematige analyse van amlodipinemaleaat of farmaceutische doseringsvormen die dit bevatten, zowel tijdens ontwikkelingswerk gericht op het oplossen van de bovengenoemde stabiliteitsvraag-stukken of tijdens industriële productie van amlodipine-10 maleaat en daarop gebaseerde farmaceutische vormen.Chemical reactions between amlodipine and maleic acid that lead to the aspartate and maleamide impurities can act as side reactions during the formation of the amlodipine maleate salt. Furthermore, amlodipine maleate may undergo subsequent conversion / degradation by the above Michael addition or amidation reactions to form the aspartate or maleamide impurity, respectively, during processing and formulation into a final pharmaceutical product or during subsequent storage. As for the two impurities, the amlodipine aspartate is more easily formed, especially under storage conditions, so it is probably a more important impurity to control. While these compounds need not be harmful in the pharmaceutical composition because they themselves are calcium channel blockers, modern regulatory practice generally requires precise control over such "impurities". Now that the impurities have been identified and prepared in a sufficiently pure state, amlodipine aspartate and amlodipine maleeamide can be used as reference markers for routine analysis of amlodipine maleate or pharmaceutical dosage forms containing it, both during development work aimed at solving the above stability issues or during industrial production of amlodipine-10 maleate and pharmaceutical forms based thereon.

Het synthetiseren van amlodipineaspartaat voor gebruik als een referentiestandaard of -marker kan tot stand worden gebracht door de vrije base van amlodipine of een zout daarvan en maleïnezuur in nauw contact met 15 elkaar te brengen onder omstandigheden van een Michael-additie. De reactie wordt hieronder geïllustreerd.Synthesizing amlodipine aspartate for use as a reference standard or marker can be accomplished by bringing the free base of amlodipine or a salt thereof and maleic acid in close contact under conditions of a Michael addition. The reaction is illustrated below.

[^yC' SxXJH 0 JyC, XcOOH^YC'SxXHH JYyC, XcOOH

2525

In het algemeen vertonen omstandigheden van een hogere pH, hogere temperatuur en langere reactie/contact-tijd de neiging de additiereactie te verbeteren. Bij 30 voorkeur is de pH van het milieu altijd hoger dan 7, bij voorkeur hoger dan 7,5. Lagere pH1s neigen ertoe de additie te remmen en de reactie te verhinderen. Verder wordt de reactie bij voorkeur uitgevoerd in een smeltfase of in een oplossing. Een "smeltfase" betekent, dat amlo-35 dipine tenminste kortstondig is gesmolten terwijl het in de aanwezigheid is van maleïnezuur. Wanneer dit in oplossing wordt uitgevoerd, is de temperatuur bij voorkeur tenminste 60°C, met meer voorkeur tenminste 80°C en in 1018758·· 9 het algemeen in het bereik van 85°C - 110°C. Tot de oplosmiddelen die geschikt zijn voor de additiereactie behoren polaire aprotische oplosmiddelen, bijvoorbeeld Ν,Ν-dimethylformamide, alcoholen zoals ethanol en isopro-5 panol, esters zoals ethylacetaat en koolwaterstoffen zoals tolueen.Generally, conditions of higher pH, higher temperature, and longer reaction / contact time tend to improve the addition reaction. Preferably, the pH of the medium is always higher than 7, preferably higher than 7.5. Lower pH1s tend to inhibit the addition and prevent the reaction. Furthermore, the reaction is preferably carried out in a melt phase or in a solution. A "melt phase" means that amlo-dipine has melted at least momentarily while in the presence of maleic acid. When performed in solution, the temperature is preferably at least 60 ° C, more preferably at least 80 ° C, and in 1018758 ·· 9 generally in the range of 85 ° C - 110 ° C. Solvents suitable for the addition reaction include polar aprotic solvents, for example, Ν, Ν-dimethylformamide, alcohols such as ethanol and isopropol, esters such as ethyl acetate and hydrocarbons such as toluene.

Het amlodipine en maleïnezuur worden normaal gecombineerd in ongeveer stoichiometrische verhoudingen, namelijk 0,9:1 tot 1:0,9. Een geschikte werkwijze om de 10 reactie uit te voeren is om amlodipinemaleaat te smelten. Hoewel het malenezuur in feite vooraf met het amlodipine wordt gecombineerd, wordt dit specifiek gezien als vallend binnen het kader van de onderhavige uitvinding. Als alternatief kunnen de vrije base van amlodipine en amlo-15 dipinemaleaat worden gecombineerd in een oplosmiddel of droog worden gemengd en gesmolten enz. om de reactie uit te voeren.The amlodipine and maleic acid are normally combined in approximately stoichiometric ratios, from 0.9: 1 to 1: 0.9. A suitable method for carrying out the reaction is to melt amlodipine maleate. Although the millic acid is in fact pre-combined with the amlodipine, it is specifically considered to be within the scope of the present invention. Alternatively, the free base of amlodipine and amlo-dipine maleate can be combined in a solvent or mixed dry and melted etc. to carry out the reaction.

Amlodipinemaleamide kan worden gesynthetiseerd door amlodipine of een zout daarvan te laten reageren met een 20 carbonylgeactiveerde maleïnezuurverbinding. Deze reactie is in wezen een amideringsreactie en wordt dus bevorderd door de aanwezigheid van een zure katalysator, verhoogde temperatuur, enz. en dergelijke andere amideringsomstan-digheden zoals welbekend zijn bij deskundigen in het vak. 25 Een "carbonylgeactiveerde maleïnezuurverbinding" betekent maleïnezuur of een derivaat daarvan, dat een voldoende geactiveerde carbonylgroep heeft om de amideringsreactie met amlodipine te vergemakkelijken. In sommige uitvoeringsvormen wordt de carbonyl-activering bereikt door de 30 aanwezigheid van een zure katalysator, in het algemeen een Lewis-zuur zoals aluminiumchloride of fosforzuur. De voorkeursuitvoeringsvorm is echter om maleïnezuuranhydri-de te gebruiken, dat een geactiveerde carbonylgroep verschaft zonder de noodzaak van een katalysator. Male-35 inezuur als zodanig en in de afwezigheid van een katalysator of activator is geen carbonylgeactiveerde male-nezuurverbinding en zal niet gemakkelijk amlodipinemaleamide· vormen, zelfs niet als het in de aanwezigheid van f018756· 5 10 amlodipine gebracht wordt. De reactie met maleïnezuuranhydride wordt hieronder weergegeven.Amlodipine maleamide can be synthesized by reacting amlodipine or a salt thereof with a carbonyl-activated maleic acid compound. This reaction is essentially an amidation reaction and is thus aided by the presence of an acidic catalyst, elevated temperature, etc. and the like other amidation conditions as are well known to those skilled in the art. A "carbonyl-activated maleic acid compound" means maleic acid or a derivative thereof, which has a sufficiently activated carbonyl group to facilitate the amidation reaction with amlodipine. In some embodiments, the carbonyl activation is accomplished by the presence of an acidic catalyst, generally a Lewis acid such as aluminum chloride or phosphoric acid. However, the preferred embodiment is to use maleic anhydride, which provides an activated carbonyl group without the need for a catalyst. Male-35 acidic acid as such and in the absence of a catalyst or activator is not a carbonyl-activated maleic acid compound and will not readily form amlodipine maleamide even when brought in the presence of amlodipine. The reaction with maleic anhydride is shown below.

h3co. Jl JL/O-^ch, -*- H3COsAJvVCH3 L/COOHh3co. Jl JL / O- ^ ch, - * - H3COsAJvVCH3 L / COOH

°^s 10° s 10

In het algemeen kan de reactie worden uitgevoerd door de vrije base van amlodipine of een zout daarvan en 15 de carbonylgeactiveerde maleïnezuurverbinding in nauw contact met elkaar te brengen. Bij voorkeur wordt de reactie uitgevoerd bij een verhoogde temperatuur zoals 25 - 100°C, meer in het algemeen 35 - 50°C, in een geschikt oplosmiddel. Tot de oplosmiddelen die geschikt zijn voor 20 de additiereactie behoren polaire aprotische oplosmiddelen, bijvoorbeeld N,N-dimethylformamide, alcoholen zoals ethanol en isopropanol, esters zoals ethylacetaat en koolwaterstoffen zoals tolueen. Het amlodipine en de carbonylgeactiveerde maleïnezuurverbinding worden normaal 25 gecombineerd in ongeveer stoichiometrische verhoudingen, namelijk 0,9:1 tot 1:0,9.Generally, the reaction can be carried out by bringing the free base of amlodipine or a salt thereof and the carbonyl-activated maleic acid compound in close contact. Preferably, the reaction is carried out at an elevated temperature such as 25-100 ° C, more generally 35-50 ° C, in a suitable solvent. Solvents suitable for the addition reaction include polar aprotic solvents, for example N, N-dimethylformamide, alcohols such as ethanol and isopropanol, esters such as ethyl acetate and hydrocarbons such as toluene. The amlodipine and the carbonyl-activated maleic acid compound are normally combined in approximately stoichiometric ratios, namely 0.9: 1 to 1: 0.9.

Amlodipineaspartaat en amlodipinemaleamide kunnen elk worden gebruikt als een referentiestandaard (of referentiemarker) in een analyse voor het bepalen van de 30 aanwezigheid en/of de concentratie van de onzuiverheid in een monster van een amlodipinemaleaatstof of farmaceutisch preparaat. Als een referentiestandaard moet het amlodipineaspartaat of -maleamide in een geschikt zuivere vorm zijn, in het algemeen tenminste 80 %, met meer 35 voorkeur tenminste 90 %. Hogere zuiverheidsniveaus kunnen bereikt worden, maar zijn niet essentieel. Het amlodipineaspartaat en amlodipinemaleamide, die geproduceerd worden zoals hierboven beschreven, kunnen indien nodig tf018756«i 11 verder gezuiverd worden om het gewenste zuiverheidsniveau te bereiken. Zuivering kan worden uitgevoerd met gebruikelijke werkwijzen, bijvoorbeeld door herkistallisatie vanuit een geschikt oplosmiddel of door het roeren, 5 bijvoorbeeld onder verwarmen, van een suspensie van de verbinding in een geschikte vloeistof met daaropvolgende verwijdering van de vloeistoffase.Amlodipine aspartate and amlodipine maleamide can each be used as a reference standard (or reference marker) in an analysis to determine the presence and / or concentration of the impurity in a sample of an amlodipine maleate or pharmaceutical composition. As a reference standard, the amlodipine aspartate or maleamide should be in a suitably pure form, generally at least 80%, more preferably at least 90%. Higher purity levels can be achieved, but are not essential. The amlodipine aspartate and amlodipine maleamide, which are produced as described above, can be further purified if necessary to achieve the desired level of purity. Purification can be carried out by conventional methods, eg by recrystallization from a suitable solvent or by stirring, for example under heating, a suspension of the compound in a suitable liquid with subsequent removal of the liquid phase.

De analyse die bruikbaar is in de onderhavige uitvinding is niet in het bijzonder beperkt en omvat elke 10 techniek, die de doelverbinding kan scheiden of anderszins de aanwezigheid daarvan kan detecteren. In het algemeen kunnen analyses worden ingedeeld in technieken gebaseerd op fysieke afscheiding van de doelverbinding (en) uit het monster en niet-scheidende of op waame-15 ming gebaseerde technieken zoals IR en NMR, hoewel ook andere technieken mogelijk zijn. Bij voorkeur is de analyse gebaseerd op een scheiding. Voorbeelden van dit type analyse omvatten dunne laag-chromatografie (TLC) en hoge prestatie-vloeistofchromatografie (HPLC).The analysis useful in the present invention is not particularly limited and includes any technique which can separate the target compound or otherwise detect its presence. In general, analyzes can be classified into techniques based on physical separation of the target compound (s) from the sample and non-separating or warming-based techniques such as IR and NMR, although other techniques are also possible. Preferably, the analysis is based on a separation. Examples of this type of analysis include thin layer chromatography (TLC) and high performance liquid chromatography (HPLC).

20 Het amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide wordt geanalyseerd onder een reeks van omstandigheden om een analytisch resultaat voor de referentiestandaard te produceren. Een "analytisch resultaat voor een referentiestandaard" kan een kwantitatief of kwalitatief resul-25 taat zijn en het kan in elke vorm zijn, waaronder numme-riek, grafisch, als afbeelding, enz. In sommige gevallen kan het resultaat electronisch worden opgeslagen voor latere vergelijkingen.The amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide is analyzed under a range of conditions to produce an analytical result for the reference standard. An "analytical result for a reference standard" can be a quantitative or qualitative result, and it can be in any form, including numeric, graphic, image, etc. In some cases, the result can be electronically stored for later comparisons .

Het amlodipinemaleaatmateriaal dat men wil analyse-30 ren op de aanwezigheid van ofwel amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide, omvat amlodipinemaleaatstoffen en preparaten. De term "amlodipinemaleaatstof" wordt hierin gebruikt om een materiaal aan te duiden dat voornamelijk alleen amlodipinemaleaat bevat. Voorbeelden van de stof 35 omvatten het ruwe amlodipinemaleaat dat wordt teruggewonnen tijdens synthese, alsook gezuiverd amlodipinemaleaat. "Amlodipinemaleaatpreparaten" omvatten mengsels, oplossingen, suspensies, enz., die amlodipinemaleaat bevatten.The amlodipine maleate material to be analyzed for the presence of either amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide includes amlodipine maleates and preparations. The term "amlodipine maleate" is used herein to designate a material which mainly contains only amlodipine maleate. Examples of the substance 35 include the crude amlodipine maleate recovered during synthesis, as well as purified amlodipine maleate. "Amlodipine maleate preparations" include mixtures, solutions, suspensions, etc., containing amlodipine maleate.

1018756· 12101875612

Voorbeelden van preparaten omvatten de gemengde, poedervormige preparaten die gebruikt worden in tabletterings-technieken om tabletten te vormen, alsook tussenverbin-dingen daarvoor en uiteindelijke doseringsvormen. De 5 preparaten kunnen verder worden bewerkt om de analyse uit te voeren, bijv. het fijnstampen van een tablet om een poeder te verkrijgen, en dergelijke modificaties worden omvat binnen het kader van de uitvinding. Het amlodipine-maleaat als zodanig kan in elke geschikte vorm zijn, 10 waaronder kristallijne vormen of amorfe vormen.Examples of formulations include the mixed powder formulations used in tableting techniques to form tablets, as well as intermediates therefor and final dosage forms. The formulations can be further processed to carry out the analysis, eg crushing a tablet to obtain a powder, and such modifications are included within the scope of the invention. The amlodipine maleate as such can be in any suitable form, including crystalline forms or amorphous forms.

Een amlodipinemaleaatpreparaat met voorkeur om te testen is een farmaceutische vaste doseringsvorm. Een farmaceutische vaste doseringsvorm omvat tabletten, capsules, zakjes, enz., die amlodipinemaleaat bevatten in 15 een farmaceutisch effectieve hoeveelheid en tenminste één farmaceutisch aanvaardbare hulpstof zoals een bindmiddel, vulmiddel, verdunningsmiddel, smeermiddel, desintegrerend middel, enz. Dergelijke preparaten worden gemaakt met werkwijzen die welbekend zijn in het vakgebied, waaronder 20 natte verkorreling, droge verkorreling en direct samenpersen voor tabletten en mengen en afvullen voor het maken van capsules. In beide gevallen wordt een mengsel gevormd door amlodipinemaleaat te mengen met tenminste één farmaceutisch aanvaardbare hulpstof. Het mengsel 25 wordt dan verder bewerkt, waaronder afgevuld in capsules of samengeperst tot tabletten, naar gewenst. Opgemerkt moet worden, dat mengen of verkorrelen zowel natte als droge bewerkingswerkwijzen omvat. Farmaceutische amlodi-pinemaleaatpreparaten met voorkeur hebben een pH in het 30 bereik van 5,5 tot 7, gemeten als een 20 gew.%-ige waterige slurrie en ze vertonen dus een verbeterde stabiliteit, zoals meer volledig wordt beschreven in de gemeenschappelijk in eigendom zijnde, tegelijkertijd in behandeling zijnde Amerikaanse Octrooiaanvrage 09/809.346, die 35 werd ingediend op 16 maart 2001 en die is getiteld "Farmaceutische preparaten die amlodipinemaleaat bevatten", waarvan de gehele inhoud hierin wordt opgenomen als referentie.A preferred amlodipine maleate preparation for testing is a pharmaceutical solid dosage form. A pharmaceutical solid dosage form includes tablets, capsules, sachets, etc., containing amlodipine maleate in a pharmaceutically effective amount and at least one pharmaceutically acceptable excipient such as a binder, filler, diluent, lubricant, disintegrant, etc. Such preparations are made by methods which are well known in the art, including wet granulation, dry granulation and direct tablet compression and mixing and filling to make capsules. In both cases, a mixture is formed by mixing amlodipine maleate with at least one pharmaceutically acceptable excipient. The mixture is then further processed, including filling into capsules or compressed into tablets, as desired. It should be noted that mixing or granulating includes both wet and dry processing methods. Preferred pharmaceutical amlodipine maleate preparations have a pH in the range of 5.5 to 7 as measured as a 20 wt% aqueous slurry and thus exhibit improved stability as more fully described in the commonly owned co-pending U.S. Patent Application 09 / 809,346, which was filed March 16, 2001, and is entitled "Pharmaceutical Compositions Containing Amlodipine Maleate", the entire contents of which are incorporated herein by reference.

1018756· 13101875613

Voor kwaliteitscontroledoeleinden heeft het de voorkeur dat het farmaceutische preparaat gemaakt wordt van amlodipinemaleaat dat een lage concentratie amlodipi-neaspartaat of amlodipinemaleamide heeft. Een geschikte 5 manier om amlodipine te maken en om te zetten in het maleaatzout ervan met een minimale vorming van onzuiverheden en met goede opbrengsten wordt meer volledig beschreven in de gemeenschappelijk in eigendom zijnde, tegelijkertijd in behandeling zijn Amerikaanse Octrooi-10 aanvrage 09/809.351, die werd ingediend op 16 maart 2001 en die is getiteld "Werkwijze voor het maken van amlodipine, derivaten daarvan en voorlopers daarvoor", waarvan de gehele inhoud hierin wordt opgenomen als referentie, en in de gemeenschappelijk in eigendom zijnde, tegelij-15 kertijd in behandeling zijnde Amerikaanse Octrooiaanvrage 09/809.343, die werd ingediend op 16 maart 2001 en die is getiteld "Werkwijze voor het maken van amlodipinemaleaat", waarvan de gehele inhoud hierin wordt opgenomen als referentie.For quality control purposes, it is preferred that the pharmaceutical composition be made from amlodipine maleate having a low concentration of amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide. A convenient way of making and converting amlodipine to its maleate salt with minimal impurity formation and good yields is more fully described in the Commonly Owned, co-pending U.S. Patent No. 10 / 809,351, filed March 16, 2001, entitled "Process for Making Amlodipine, Derivatives thereof and Precursors therefor", the entire contents of which are incorporated by reference herein, and currently being co-owned, pending that is, U.S. Patent Application 09 / 809,343, which was filed March 16, 2001 and is entitled "Method of Making Amlodipine Maleate", the entire contents of which are incorporated herein by reference.

20 In het algemeen worden farmaceutische preparaten gemaakt in partijen of porties voor productiedoeleinden. Productieporties zijn in het algemeen 100.000 - 1.000.000 of meer tabletten of capsules. Een productieportie moet worden gecontroleerd om te garanderen dat de concentratie 25 van amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide ligt binnen de specificatie; d.w.z. een kwaliteitscontrole-test. Een monster van de productieportie (bijv. 10 - 100 capsules of tabletten) wordt eruit genomen en geanalyseerd op de aanwezigheid van amlodipineaspartaat of 30 amlodipinemaleamide en bij voorkeur ook op het gehalte hiervan. Bij voorkeur bevatten farmaceutische preparaten van amlodipinemaleaat minder dan 1 %, met meer voorkeur minder dan 0,5 % en met de meeste voorkeur minder dan 0,2 % amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide op basis van 35 de hoeveelheid amlodipinemaleaat. In het algemeen zal de gehele productieportie minus elk achtergehouden monster worden verkocht of anderszins worden vrijgegeven door de producent, tenzij er een onaanvaardbare concentratie aan 1018756· 14 amlodipineaspartaat of amlodipineraaleamide wordt gevonden. In dat geval zal de productieportie niet worden verkocht of vrijgegeven; d.w.z. niet in de handel worden gebracht noch worden gebruikt in klinische studies.Generally, pharmaceutical preparations are made in batches or portions for production purposes. Production portions are generally 100,000-1,000,000 or more tablets or capsules. A production portion must be controlled to ensure that the concentration of amlodipine aspartate or amlodipine maleamide is within specification; i.e. a quality control test. A sample from the production portion (e.g. 10-100 capsules or tablets) is taken out and analyzed for the presence of amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide and preferably also for its content. Preferably, pharmaceutical preparations of amlodipine maleate contain less than 1%, more preferably less than 0.5%, and most preferably less than 0.2%, amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide based on the amount of amlodipine maleate. Generally, the entire production portion minus any retained sample will be sold or otherwise released by the producer unless an unacceptable concentration of 101875614 amlodipine aspartate or amlodipineral amide is found. In that case, the production portion will not be sold or released; i.e. are not placed on the market nor used in clinical studies.

5 Dezelfde strategie kan worden toegepast op produc- tieporties van amlodipinemaleaatstof. Een monster van de productieportie (bijv. 0,5 - 2 g van het materiaal) wordt eruit genomen en geanalyseerd op de aanwezigheid van amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide en bij voor-10 keur ook op het gehalte ervan. Bij voorkeur bevat de amlodipinemaleaatstof minder van 1 %, met meer voorkeur minder dan 0,5 % en met de meeste voorkeur minder dan 0,1 % aan amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide op basis van de hoeveelheid amlodipinemaleaat. In het algemeen zal 15 de gehele productieportie minus elk achtergehouden monster worden verkocht of anderszins worden vrijgegeven door de producent, tenzij een onaanvaardbare hoeveelheid amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide wordt gevonden. In dat geval zal de productieportie niet worden 20 verkocht of vrijgegegeven; d.w.z. noch in de handel worden gebracht noch worden gebruikt voor de productie van farmaceutische producten.The same strategy can be applied to production portions of amlodipine maleate. A sample of the production portion (eg 0.5-2 g of the material) is taken out and analyzed for the presence of amlodipine aspartate or amlodipine maleamide and preferably also for its content. Preferably, the amlodipine maleate contains less than 1%, more preferably less than 0.5%, and most preferably less than 0.1% of amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide based on the amount of amlodipine maleate. Generally, the entire production portion minus any retained sample will be sold or otherwise released by the producer unless an unacceptable amount of amlodipine aspartate or amlodipine maleamide is found. In that case, the production portion will not be sold or released; i.e. are neither marketed nor used for the production of pharmaceutical products.

In het algemeen resulteert het analyseren van het amlodipinemaleaatmateriaal in een analytisch resultaat 25 voor het monster. In het algemeen wordt het "analytische resultaat voor het monster" op de een of andere manier vergeleken met het analytische resultaat voor de referenties tandaard voor ofwel amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide. De vergelijking kan handmatig worden gedaan 30 zoals door visuele waarneming en/of met een geautomatiseerde werkwijze. Het analytische resultaat voor de referentiestandaard kan in wezen tegelijk met het analytische resultaat voor het monster worden verkregen, zoals direct vóór, tijdens of direct na het analyseren van het 35 amlodipinemaleaatmonster, of het kan eerder, zelfs maanden of jaren eerder worden verkregen. In sommige uitvoeringsvormen wordt het analytische resultaat voor de referentiestandaard electronisch opgeslagen en gebruikt 1018756* 15 met een computeralgoritme om de aanwezigheid van het aspartaat of maleamide en de hoeveelheid daarvan te bepalen. Deze laatste uitvoeringsvorm omvat het ijken van de apparatuur op basis van het analytische resultaat voor 5 de referentiestandaard of resultaten daarvan afgeleid en/of het verschaffen van een zogenaamde interne normalisatie. Al dergelijke vergelijkingen, ofwel direct, indirect, handmatig of geautomatiseerd, worden omvat binnen de betekenis van "vergelijken".Generally, analyzing the amlodipine maleate material results in an analytical result for the sample. Generally, the "analytical result for the sample" is somehow compared to the analytical result for the reference tandard for either amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide. The comparison can be done manually such as by visual observation and / or by an automated method. The analytical result for the reference standard can be obtained essentially simultaneously with the analytical result for the sample, such as immediately before, during or immediately after analyzing the amlodipine maleate sample, or it can be obtained earlier, even months or years earlier. In some embodiments, the analytical result for the reference standard is stored electronically and used 1018756 * 15 with a computer algorithm to determine the presence of the aspartate or maleamide and the amount thereof. The latter embodiment comprises calibrating the equipment on the basis of the analytical result for the reference standard or results derived therefrom and / or providing a so-called internal normalization. All such comparisons, whether direct, indirect, manual or automated, are included within the meaning of "compare".

10 De analyse die wordt gebruikt bij het bepalen van het analytische resultaat voor de referentiestandaard is in het algemeen ook dezelfde analyse met dezelfde reeks van omstandigheden als gebruikt om het amlodipinemaleaat-materiaal te testen, hoewel dit niet noodzakelijk vereist 15 is. .The analysis used in determining the analytical result for the reference standard is generally also the same analysis with the same set of conditions as used to test the amlodipine maleate material, although this is not necessarily required. .

De uitvinding zal verder worden beschreven onder verwijzing naar de twee analysentechnieken met voorkeur, namelijk TLC en HPLC. In TLC worden monsters van het te testen amlodipinemaleaatmateriaal en referentiestan-20 daard(en), die bekende hoeveelheden amlodipineaspartaat en/of amlodipinemaleamide bevatten, gechromatografeerd op een geschikte chromatografische plaat met een geschikte ontwikkelvloeistof (mobiele fase) onder vastgelegde omstandigheden. Deze omstandigheden omvatten het oplos-25 middel, de concentratie van het amlódipinederivaat in het oplosmiddel en de hoeveelheid oplossing die op de plaat wordt gebracht. Het selecteren van geschikte oplosmiddelen en concentraties is welbekend in het vakgebied. De analytische resultaten die onder deze omstandigheden 30 worden geproduceerd, kunnen de Rf-waarde omvatten, dat wil zeggen de verhouding van de afstand afgelegd door het overeenkomstige materiaal tot de afstand afgelegd door het oplosmiddel, en/of de grootte van de vlek die op het chromatogram wordt geproduceerd.The invention will be further described with reference to the two preferred analysis techniques, namely TLC and HPLC. In TLC, samples of the amlodipine maleate material to be tested and reference standard (s) containing known amounts of amlodipine aspartate and / or amlodipine maleeamide are chromatographed on a suitable chromatographic plate with a suitable developing liquid (mobile phase) under fixed conditions. These conditions include the solvent, the concentration of the amlodipine derivative in the solvent and the amount of solution that is placed on the plate. Selecting suitable solvents and concentrations is well known in the art. The analytical results produced under these conditions may include the Rf value, ie, the ratio of the distance traveled by the corresponding material to the distance traveled by the solvent, and / or the size of the spot that is on the chromatogram is produced.

35 Bij voorkeur wordt de referentiestandaard op het zelfde moment en op dezelfde chromatografieplaat opgebracht als het te testen monster, waardoor het mogelijk wordt ze naast elkaar te vergelijken. In andere uitvoe- 1018756· 16 ringsvormen is de referentiestandaard reeds gedefinieerd en wordt hij eenvoudig vergeleken met het ontwikkelde monsterchromatogram.Preferably, the reference standard is applied at the same time and on the same chromatography plate as the sample to be tested, making it possible to compare them side by side. In other embodiments, the reference standard has already been defined and is simply compared to the developed sample chromatogram.

Eén werkwijze voor het testen van de zuiverheid 5 en/of stabiliteit tegen afbraak van een monster dat amlodipinemaleaat bevat, omvat derhalve de stappen van: a) het oplossen van een monster dat amlodipinemaleaat bevat, in een oplosmiddel om een monsteroplossing te produceren; 10 b) het oplossen van een monster amlodipineaspartaat en/of amlodipinemaleamide in een oplosmiddel om een referentieoplossing te produceren; c) het onderwerpen van de monsteroplossing en referentieoplossing aan dunne laag-chromatografie om een 15 TLC-chromatogram voor elk te verkrijgen en d) het schatten van de intensiteit van elke secundaire vlek die met het monster wordt verkregen en die in Rf-waarde overeenkomt met de referentiemarker, tegen de intensiteit van de vlek als gevolg van het aspartaat of 20 maleamide in het chromatogram van de referentieoplossing. Opgemerkt moet worden, dat de referentieoplossing een "gemengde" referentieoplossing kan zijn, dat wil zeggen dat zij zowel het aspartaat als een ander referentiemateriaal met bekende zuiverheid kan bevatten, d.w.z. dat zij 25 verder een bekende hoeveelheid en zuiverheid van amlodi-pine en/of amlodipinemaleamide enz. kan bevatten.Thus, one method for testing the purity and / or degradation stability of a sample containing amlodipine maleate comprises the steps of: a) dissolving a sample containing amlodipine maleate in a solvent to produce a sample solution; B) dissolving a sample of amlodipine aspartate and / or amlodipine maleamide in a solvent to produce a reference solution; c) subjecting the sample solution and reference solution to thin layer chromatography to obtain a TLC chromatogram for each and d) estimating the intensity of each secondary spot obtained with the sample and corresponding in Rf value to the reference marker, against the stain intensity due to the aspartate or maleamide in the chromatogram of the reference solution. It should be noted that the reference solution may be a "mixed" reference solution, ie it may contain both the aspartate and another reference material of known purity, ie it further contains a known amount and purity of amlodi-pine and / or may contain amlodipine maleamide etc.

Op vergelijkbare wijze kan een analyse met behulp van HPLC worden opgezet. De analytische resultaten voor de referentiestandaard kunnen de resolutiefactor, de 30 responsfactor, de retentietijd en/of het piekoppervlak voor het aspartaat of maleamide omvatten. Een werkwijze voor het testen van de zuiverheid en/of stabiliteit tegen afbraak van een monster dat amlodipinemaleaat bevat, omvat bijvoorbeeld de stappen van: 35 a) het oplossen van een monster dat amlodipinemale aat bevat, in een oplosmiddel om één of meer monsterop-lossingen te produceren; 1018756· 17 b) het oplossen van een monster amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide in een oplosmiddel om een referen-tieoplossing te produceren; c) het injecteren van de monster- en referentieop-5 lossingen op een HPLC-kolom en d) het schatten van de piekoppervlakken van elke oplossing en het aan de hand hiervan berekenen van het gehalte van het amlodipineaspartaat en/of amlodipinemaleamide in elke monsteroplossing.Similarly, an analysis using HPLC can be set up. The analytical results for the reference standard may include the resolution factor, the response factor, the retention time and / or the peak area for the aspartate or maleamide. For example, a method for testing the purity and / or degradation stability of a sample containing amlodipine maleate comprises the steps of: a) dissolving a sample containing amlodipine maleate in a solvent to provide one or more sample solutions to produce; 1018756 · 17 b) dissolving a sample of amlodipine aspartate or amlodipine maleamide in a solvent to produce a reference solution; c) injecting the sample and reference solutions onto an HPLC column and d) estimating the peak areas of each solution and calculating the content of the amlodipine aspartate and / or amlodipine maleide in each sample solution.

10 In deze uitvoeringsvorm kan het noodzakelijk of gewenst zijn om een oplossing voor de geschiktheid van het systeem door de HPLC-kolom te laten lopen vóór stap c) om de resolutiefactor tussen amlodipinemaleaat en elke andere in het monster aanwezige verbinding te bepalen. In 15 dat geval omvat de werkwijze de additionele stap van: b') het oplossen van amlodipinemaleaat en één of meer geschikte externe standaarden om een oplossing voor de geschiktheid van het systeem te produceren en het injecteren van de oplossing voor de geschiktheid van het 20 systeem op de HPLC-kolom om de resolutiefactor (en) te bepalen. Dit is bruikbaar om te controleren of de kolom nog steeds binnen de specificaties presteert. De oplossing voor de geschiktheid kan die van het aspartaat of maleamide zijn, maar zij is niet hiertoe beperkt en kan 25 van elk materiaal zijn dat aantoont of de kolom nog werkt als bij ontwerp.In this embodiment, it may be necessary or desirable to run a solution for system suitability through the HPLC column before step c) to determine the resolution factor between amlodipine maleate and any other compound present in the sample. In that case, the method comprises the additional step of: b ') dissolving amlodipine maleate and one or more suitable external standards to produce a solution for the suitability of the system and injecting the solution for the suitability of the system on the HPLC column to determine the resolution factor (s). This is useful to check if the column is still performing within specifications. The solution for the suitability may be that of the aspartate or maleamide, but it is not limited thereto and may be of any material that shows whether the column is still working as in design.

Fig. 1 toont aan, dat HPLC kan worden gebruikt om amlodipineaspartaat en amlodipinemaleamide van amlodipine te scheiden. Een kunstmatig mengsel van amlodipine, 30 amlodipineaspartaat en amlodipinemaleamide werd onderworpen aan HPLC. De resultaten worden getoond als een HPLC-chromatogram in Fig. 1. Let erop dat de pieken overeenkomend met het aspartaat en maleamide zichtbaar zijn.Fig. 1 shows that HPLC can be used to separate amlodipine aspartate and amlodipine maleamide from amlodipine. An artificial mixture of amlodipine, amlodipine aspartate and amlodipine maleamide was subjected to HPLC. The results are shown as an HPLC chromatogram in Fig. 1. Ensure that the peaks corresponding to the aspartate and maleamide are visible.

Als een alternatief voor het elke keer apart analy-35 seren van een monster van de referentiemarker kan een parameter die bekend is als de Responsfactor (R), worden gebruikt. De responsfactor is een eerder bepaalde verhouding van een nummeriek resultaat (bijv. een piekoppervlak 1018756· 18 in HPLC) dat verkregen werd door het testen van een monster van het aspartaat of het maleamide met een bepaalde analytische techniek, tot het overeenkomstige numerieke resultaat verkregen door het testen van de-5 zelfde hoeveelheid zuiver amlodipinemaleaat in een equivalente concentratie. De bekende responsfactor voor amlodipineaspartaat of amlodipinemaleamide kan worden gebruikt om de hoeveelheid van die betreffende marker in het testmonster te berekenen. Op deze manier kan de 10 relatieve hoeveelheid van de onzuiverheid ten opzichte van het amlodipinemaleaat in het monster worden bepaald, zoals welbekend is in het vakgebied.As an alternative to analyzing a sample from the reference marker each time, a parameter known as the Response Factor (R) can be used. The response factor is a previously determined ratio of a numerical result (e.g. peak area 101875618 in HPLC) obtained by testing a sample of the aspartate or maleamide with a given analytical technique to the corresponding numerical result obtained by testing the same amount of pure amlodipine maleate in an equivalent concentration. The known response factor for amlodipine aspartate or amlodipine maleamide can be used to calculate the amount of that particular marker in the test sample. In this way, the relative amount of the impurity to the amlodipine maleate in the sample can be determined, as is well known in the art.

Het moet duidelijk zijn dat in de bovenstaande uitvoeringsvormen het oplosmiddel om het amlodipinemale-15 aatmonster in op te lossen alleen het oplossen van de amlodipinemaleaatstof en de onzuiverheden van belang vereist. Andere componenten zoals inerte vulmiddelen in een farmaceutisch preparaat hoeven niet oplosbaar te zijn in het op losmiddel systeem en hoeven niet "opgelost" te 20 worden om te voldoen aan de bovengenoemde "oplosstap", zoals gebruikelijk is in het vakgebied voor het analyseren van een farmaceutische doseringsvorm.It should be understood that in the above embodiments, the solvent to dissolve the amlodipine maleate sample requires only the dissolution of the amlodipine maleate and the impurities of interest. Other components such as inert fillers in a pharmaceutical composition need not be soluble in the solvent system and do not need to be "dissolved" to meet the above "dissolution step" as is common in the art of analyzing a pharmaceutical dosage form.

De uitvinding verschaft ook het gebruik van een verbinding die geselecteerd wordt uit amlodipineaspartaat 25 (1) of amlodipinemaleamide (2) als een referentiemarker bij het analyseren van de zuiverheid of stabiliteit tegen afbraak van een monster van een partij amlodipinemaleaat of een monster van een partij van een farmaceutische doseringsvorm die amlodipinemaleaat bevat. Dergelijk 30 analytische testen van de geneesmiddelstof of de genees-middelvorm die amlodipinemaleaat bevat, dient voornamelijk om te bevestigen, dat de verbindingen (1) en (2) afwezig zijn (d.w.z beneden de detectiegrens van de analytische werkwijze) of slechts aanwezig zijn in con-35 centraties beneden de maximaal toegestane grens, die de farmaceutische kwaliteit kenmerken van producten die amlodipinemaleaat bevatten, d.w.z. de kwaliteit die het 1018756« 19 toestaat dat de producten worden vrijgegeven of verkocht als farmaceutica.The invention also provides the use of a compound selected from amlodipine aspartate (1) or amlodipine maleamide (2) as a reference marker in analyzing the purity or stability against degradation of a sample of a batch of amlodipine maleate or a sample from a batch of a pharmaceutical dosage form containing amlodipine maleate. Such analytical testing of the drug substance or drug form containing amlodipine maleate serves primarily to confirm that the compounds (1) and (2) are absent (ie, below the limit of detection of the analytical method) or are only present in con -35 degrees below the maximum allowable limit, which characterize the pharmaceutical quality of products containing amlodipine maleate, ie the quality which allows the products to be released or sold as pharmaceuticals.

De uitvinding wordt verder beschreven door de volgende niet-beperkende voorbeelden.The invention is further described by the following non-limiting examples.

55

Voorbeeld 1 - werkwijze voor het maken van amlodipineas-partaat 16 g amlodipine en 12 g amlodipinemaleaat werden gesmolten in een fles van 300 ml. De gesmolten stof werd 10 afgekoeld tot kamertemperatuur en opgelost in 300 ml di-chloormethaan. Het mengsel werd geëxtraheerd met 300 ml van een 1 N NaOH-oplossing. De organische laag werd weggegooid en de waterlaag werd aangezuurd met 55 ml van een 6 M HC1-oplossing. Het mengsel werd geëxtraheerd met 15 300 ml dichloormethaan. De lagen werden gescheiden en de organische laag werd gedroogd over Na2S04. Het mengsel werd drooggedampt en de resterende vaste stof werd her-kristalliseerd vanuit ethanol. De verkregen vaste stof werd gedroogd in een vacuümoven bij 40°C onder de vorming 20 van 4,7 g van een vaalwit product.Example 1 - method of making amlodipine aspartate 16 g of amlodipine and 12 g of amlodipine maleate were melted in a 300 ml bottle. The molten substance was cooled to room temperature and dissolved in 300 ml of dichloromethane. The mixture was extracted with 300 ml of a 1 N NaOH solution. The organic layer was discarded and the water layer was acidified with 55 ml of a 6 M HCl solution. The mixture was extracted with 300 ml of dichloromethane. The layers were separated and the organic layer was dried over Na2 SO4. The mixture was evaporated to dryness and the residual solid was recrystallized from ethanol. The solid obtained was dried in a vacuum oven at 40 ° C to give 4.7 g of an off-white product.

Opbrengst: 4,7 g (39 %)Yield: 4.7 g (39%)

Smeltpunt: 178°C - 183°C (ontleed)Melting point: 178 ° C - 183 ° C (decomposed)

Zuiverheid: groter dan 90 %.Purity: greater than 90%.

25 1H-NMR-spectrum: 4' 301 H NMR Spectrum: 4 '30

1^|pY0Y?'R'2!ï£H1 ^ | pY0Y? 'R'2! Ï £ H

3535

Het 1H-NMR-spectrum werd gemeten bij 303,2 K op een Bruker Avance-400 in gedeutereerde dimethylsulfoxide bij 400 MHz. Het is weergegeven in Fig. 2.The 1 H NMR spectrum was measured at 303.2 K on a Bruker Avance-400 in deuterated dimethyl sulfoxide at 400 MHz. It is shown in Fig. 2.

T018756· 20 δ toekenning 1.12 (t, 3H, J11(12 =7,0 Hz, 3x H-12) ; 2.36 (S, 3H, 3x H-15) ; 2,87 (m, ~2H, 2x H-3") ; 5 3,24 (m, ~2H, 2x H-9) ; 3,52 (S, ~3H, 3x H-14) ; 3,76 (bs, 2H, 2x H-8); 4,00 (m, 3H, 2x H-ll + H-2"); 4,65 (m, 2H, 2X H-7); 10 5,33 (S, 1H, H-4); 7.13 (dt, 1H, J3, A1 = J4I>5, = 7,6 Hz, J4,f6, = 1,8 Hz, H-4') ; 7,26 (m, 2H, H-3' + H-5'); 7.37 (d, 1H, J5,(6, = 7,8 Hz, H-6 ' ) ; 15 8,61 (S, 1H, NH).T01875620 δ assignment 1.12 (t, 3H, J11 (12 = 7.0 Hz, 3x H-12); 2.36 (S, 3H, 3x H-15); 2.87 (m, ~ 2H, 2x H- 3 "); 5 3.24 (m, ~ 2H, 2x H-9); 3.52 (S, ~ 3H, 3x H-14); 3.76 (bs, 2H, 2x H-8); 4 .00 (m, 3H, 2x H-11 + H-2 "); 4.65 (m, 2H, 2X H-7); 5.33 (S, 1H, H-4); 7.13 (dt, 1H, J3, A1 = J4I> 5, = 7.6 Hz, J4, f6, = 1.8 Hz, H-4 '); 7.26 (m, 2H, H-3' + H-5 ') 7.37 (d, 1H, J5, (6 = 7.8 Hz, H-6 '), 8.61 (S, 1H, NH).

13C-NMR-spectrum:13 C NMR spectrum:

Het 13C-NMR-spectrum werd gemeten bij 303,2 K op 20 een Bruker Avance-400 in gedeutereerde dimethylsulfoxide bij 100,6 MHz. Het is weergegeven in Fig. 3.The 13 C NMR spectrum was measured at 303.2 K on a Bruker Avance-400 in deuterated dimethyl sulfoxide at 100.6 MHz. It is shown in Fig. 3.

δ toekenning δ toekenning 14,18 (C-12); 66,64, 66,69 (C-7, C-8); 25 18,33 (C-15); 101,92, 102,40 (C-3, C-5); 35,77 (C-3"); 127,54 (C-5'); 36,85 (C-4); 127,88 (C-4'); 45,63, 45,74 (C-9); 129,07 (C-2'); 50,58 (C-14); 131,11 (C-6'); 30 56,42 (C-2"); 166,43 (C-10); 59,60 (C-ll); 167,28 (C-13); 170,55, 171,49 (C-l", C-4").δ assignment δ assignment 14.18 (C-12); 66.64, 66.69 (C-7, C-8); 18.33 (C-15); 101.92, 102.40 (C-3, C-5); 35.77 (C-3 "); 127.54 (C-5 '); 36.85 (C-4); 127.88 (C-4'); 45.63, 45.74 (C-9 ); 129.07 (C-2 '); 50.58 (C-14); 131.11 (C-6'); 56.42 (C-2 "); 166.43 (C-10); 59.60 (C-11); 167.28 (C-13); 170.55, 171.49 (C-1 ", C-4").

35 Voorbeeld 2 - bereiding van amlodipinemaleamide 5 g amlodipine werd opgelost in 50 ml ethylacetaat en verwarmd tot 60°C. Aan dit mengsel werd 1,15 g male-inezuuranhydride toegevoegd en het mengsel werd geschud $018756· 21 totdat de oplossing helder was. Het mengsel werd afgekoeld tot kamertemperatuur en men liet het gedurende de nacht staan. Het mengsel werd drooggedampt en vervolgens gedroogd in een hoog-vacuümoven bij 25°C gedurende 3 uur, 5 waarbij een gele vaste stof overbleef.Example 2 - preparation of amlodipine maleeamide 5 g of amlodipine was dissolved in 50 ml of ethyl acetate and heated to 60 ° C. To this mixture was added 1.15 g of maleic anhydride and the mixture was shaken $ 01875621 until the solution was clear. The mixture was cooled to room temperature and left overnight. The mixture was evaporated to dryness and then dried in a high vacuum oven at 25 ° C for 3 hours, leaving a yellow solid.

Opbrengst: 6,1 g (99 %)Yield: 6.1 g (99%)

Smeltpunt: 83°C - 86°C Zuiverheid: groter dan 95 % (HPLC) 10 1H-NMR-spectrumMelting point: 83 ° C - 86 ° C Purity: greater than 95% (HPLC) 10 1 H NMR spectrum

Het 1H-NMR-spectrum werd gemeten bij 303 K op een Bruker Avance-400 in gedeutereerde dimethylsulfoxide bij 15 400 MHz. Het is weergegeven in Fig. 4.The 1 H NMR spectrum was measured at 303 K on a Bruker Avance-400 in deuterated dimethyl sulfoxide at 400 MHz. It is shown in Fig. 4.

δ toekenning 1.12 (t, 3H, J1112 = 7,0 Hz, 12-H3) 2,31 (S, 3H, 15-¾) 20 3,44 (bq, ~2H, 9-¾) 3,52 (s, ~3H, 14-¾) 3,58 (bt, 2H, 8-¾) 3,99 (m, -2H, 11-¾) 4,62 (AB q, 2H, 7-¾) 25 5,32 (s, 1H, 4-H) 6.27 (d, -1H, J4I15(, = 12,4 Hz, 4"-H) 6,43 (d, ~1H, J411>51, = 12,4 Hz, 5"-H) 7.13 (dt, 1H, J3,i4, = 7,7 Hz, J4,6, = 1,6 Hz, 41 -H) 30 7,23 (dt, 1H, J4,j5, = ^51^1 ~ ^^z' ^3',5' =δ assignment 1.12 (t, 3H, J1112 = 7.0 Hz, 12-H3) 2.31 (S, 3H, 15-¾) 20 3.44 (bq, ~ 2H, 9-¾) 3.52 (s , ~ 3H, 14-¾) 3.58 (bt, 2H, 8-¾) 3.99 (m, -2H, 11-¾) 4.62 (AB q, 2H, 7-¾) 25 5.32 (s, 1H, 4-H) 6.27 (d, -1H, J4I15 (, = 12.4 Hz, 4 "-H) 6.43 (d, ~ 1H, J411> 51, = 12.4 Hz, 5 "-H) 7.13 (dt, 1H, J3, i4, = 7.7 Hz, J4.6, = 1.6 Hz, 41 -H) 30 7.23 (dt, 1H, J4, j5, = ^ 51 ^ 1 ~ ^^ z '^ 3', 5 '=

Hz, 41-H) 7.28 (dd, 1H, J31j4, = 7,7 Hz, J3,(5, = 1,0 Hz, 3 1 -H) 7,34 (dd, 1H, J4I<6, = 1,6 Hz, J5,f6, = 7,7 Hz, 35 6’-H> 8,49 (S, ~1H, 1-H) 9,24 (bt, ~1H, 9'-NH).Hz, 41-H) 7.28 (dd, 1H, J31j4, = 7.7 Hz, J3, (5, = 1.0 Hz, 3 1 -H) 7.34 (dd, 1H, J4I <6, = 1 .6 Hz, J5, f6 = 7.7 Hz, 6'-H> 8.49 (S, ~ 1H, 1-H) 9.24 (bt, ~ 1H, 9'-NH).

1018756« 221018756 «22

Voorbeeld 3Example 3

Analyse op amlodipinemaleaat, amlodipineaspartaat en amlodipineamide in amlodipinemaleaatstof met HPLCAnalysis for amlodipine maleate, amlodipine aspartate and amlodipine amide in amlodipine maleate by HPLC

5 1. Een Referentieoplossing 1 werd bereid door ongeveer 32 mg van de referentiestandaard amlodipinemaleaat (met een bekende zuiverheid) over te brengen in een volumetrische fles van 50 ml en het op te lossen in een mengsel van 0,02 M acetaatbuffer van pH 5,0 en acetonitril (1:1 v/v). 10 2. De Referentieoplossing 2 werd bereid door ongeveer 32 mg van een gemengde standaard met amlodipinemaleaat (een mengsel van 4 gewichtsdelen amlodipinemaleaat, 1 deel amlodipineaspartaat en 1 deel amlodipineamide, elk van hoge en algemeen bekende zuiverheid) over te brengen in 15 een volumetrische fles van 50 ml en dit op te lossen in een mengsel van 0,02 M acetaatbuffer van pH 5,0 en acetonitril (1:1 v/v).1. A Reference solution 1 was prepared by transferring about 32 mg of the reference standard amlodipine maleate (of known purity) into a 50 ml volumetric bottle and dissolving it in a mixture of 0.02 M acetate buffer of pH 5, 0 and acetonitrile (1: 1 v / v). 2. Reference solution 2 was prepared by transferring about 32 mg of a mixed standard with amlodipine maleate (a mixture of 4 parts by weight of amlodipine maleate, 1 part of amlodipine aspartate and 1 part of amlodipine amide, each of high and well-known purity) into a volumetric bottle 50 ml and dissolve it in a mixture of 0.02 M acetate buffer of pH 5.0 and acetonitrile (1: 1 v / v).

3. Een Monsteroplossing werd bereid door ongeveer 32 mg van een te analyseren monster van amlodipinemaleaat over3. A Sample solution was prepared by transferring about 32 mg of an analyte of amlodipine maleate

20 te brengen in een volumetrische fles van 50 ml en dit op te lossen in een mengsel van 0,02 M acetaatbuffer van pH20 in a 50 ml volumetric bottle and dissolve in a mixture of 0.02 M acetate buffer of pH

5,0 en acetinitrol (1:1 v/v).5.0 and acetinitrol (1: 1 v / v).

4. Chromatografische werkwijze a. Chromatografische omstandigheden: 25 Analytische kolom: Symmetry Shield C8 (Waters, 100 x 4,6 mm, dp = 3,5 μτη4. Chromatographic method a. Chromatographic conditions: 25 Analytical column: Symmetry Shield C8 (Waters, 100 x 4.6 mm, dp = 3.5 μτη

Guardkolom: Sentry Guard kolom, Symmetry C8 (Waters), 20 x 3,9 mm, d = r 30 5 μτηGuard column: Sentry Guard column, Symmetry C8 (Waters), 20 x 3.9 mm, d = r 30 5 μτη

Mobiele fase: A) 0,05 M perchloraatbuffer pHMobile phase: A) 0.05 M perchlorate buffer pH

2,75 en acetonitril 65:35 (v/v) (B) 0,05 M perchloraatbuffer 35 pH 2,75 en acetonitril 35:65 (v/v) 1018756· 232.75 and acetonitrile 65:35 (v / v) (B) 0.05 M perchlorate buffer 35 pH 2.75 and acetonitrile 35:65 (v / v) 101875623

Perchloraatbuffer pH 2,75: Los 7 g NaCl04*H20 (0,05 M) en 1,74 g KjHPO^ (0,01 M) op in 1.000 5 ml water. Stel op pH 2,75 door de toevoeging van fosforzuur.Perchlorate buffer pH 2.75: Dissolve 7 g NaClO 4 * H 2 O (0.05 M) and 1.74 g KjHPO 4 (0.01 M) in 1,000 ml of water. Adjust to pH 2.75 by adding phosphoric acid.

Stroomsnelheid: 1,0 ml/minuut, gradiëntFlow rate: 1.0 ml / minute, gradient

Gradiënt programma: Tijd (min) % A % BGradient program: Time (min)% A% B

10 0,0 100 0 4,0 100 0 14.0 35 65 21.0 0 100 28,0 0 100 15 29,0 100 0 32,0 100 010 0.0 100 0 4.0 100 0 14.0 35 65 21.0 0 100 28.0 0 100 15 29.0 100 0 32.0 100 0

Detectie: UV, 237 nmDetection: UV, 237 nm

Kolomtemperatuur: 45°CColumn temperature: 45 ° C

Autosampler: 4°C, tegen licht afgeschermd 20 Injectievolume: 10 μΐ b. Injectiewerkwijze:Autosampler: 4 ° C, shielded from light 20 Injection volume: 10 μΐ b. Injection method:

Nadat een stabiele basislijn was verkregen, werd de Referentieoplossing 2 geïnjecteerd en de resolutiefactor 25 tussen amlodipine, aspartaat en amide werd berekend. De symmetriefactor en het aantal theoretische platen werd ook berekend met behulp van de algemene werkwijze van de European Pharmacopoeia voor het berekenen van de parameters voor de geschiktheid van een systeem. De verkregen 30 waarden waren als volgt:After a stable baseline was obtained, the Reference solution 2 was injected and the resolution factor 25 between amlodipine, aspartate and amide was calculated. The symmetry factor and the number of theoretical plates were also calculated using the general method of the European Pharmacopoeia to calculate the parameters for the suitability of a system. The 30 values obtained were as follows:

Resolutie: amlo-aspartaat/amlodipine = 15,6, amlodipi-ne/amlo-maleamide =20,1.Resolution: amlo-aspartate / amlodipine = 15.6, amlodipine / amlo-maleamide = 20.1.

Symmetriefactor: amlodipineaspartaat 1,2; amlodipine 1,3; amlodipinemaleamide 1,2.Symmetry factor: amlodipine aspartate 1.2; amlodipine 1.3; amlodipine maleamide 1.2.

35 Aantal theoretische platen: amlodipineaspartaat 6387, amlodipine 22.852, amlodipinemaleamide 56676.Number of theoretical plates: amlodipine aspartate 6387, amlodipine 22,852, amlodipine maleamide 56676.

De Referentieoplossing 1 en de Monsteroplossing werden daarna in de kolom geïnjecteerd.The Reference solution 1 and the Sample solution were then injected into the column.

1018756* 24 5. Berekeningen:1018756 * 24 5. Calculations:

Het gehalte aan amlodipine en het gehalte aan de respectievelijke onzuiverheden in het geanalyseerde monster werden berekend door het vergelijken van de 5 piekoppervlakken van de respectievelijke verbindingen in het chromatogram van de monsteroplossing met overeenkomstige piekoppervlakken verkregen in de chromatogrammen van resp. Referentieoplossing 1 en 2, waarbij rekening gehouden wordt met het gewicht en de zuiverheid van de 10 referentiemonsters en de vooraf bepaalde relatieve res-ponsfactoren (RRF). De RRF-waarden en de analysengrenzen voor de individuele onzuiverheden als een percentage van amlodipine worden opgesomd in de volgende tabel: 15 Verbinding RRF Analysengrens (%)The content of amlodipine and the content of the respective impurities in the analyzed sample were calculated by comparing the peak areas of the respective compounds in the chromatogram of the sample solution with corresponding peak areas obtained in the chromatograms of resp. Reference solution 1 and 2, taking into account the weight and purity of the 10 reference samples and the predetermined relative response factors (RRF). The RRF values and the analysis limits for the individual impurities as a percentage of amlodipine are listed in the following table: 15 Compound RRF Analysis limit (%)

Aspartaat 0,78 0,01Aspartate 0.78 0.01

Amide 1,01 0.02 20 Voorbeeld 4Amide 1.01 0.02 20 Example 4

Analyse voor amlodipinemaleaat en amlodipineaspar-taat in tabletten, die amlodipinemaleaat bevatten in een hoeveelheid equivalent aan 2,5 mg van de vrije base van amlodipine, met HPLC.Analysis for amlodipine maleate and amlodipine extract in tablets containing amlodipine maleate in an amount equivalent to 2.5 mg of the free base of amlodipine by HPLC.

2525

De analyse wordt uitgevoerd zoals beschreven in Voorbeeld 3 met de volgende veranderingen:The analysis is performed as described in Example 3 with the following changes:

Monsteroplossing werd bereid door 5 amlodipineta-bletten over te brengen in een volumetrische fles van 25 30 ml. 20 ml van een mengsel van 0,02 M acetaatbuffer van pHSample solution was prepared by transferring 5 amlodipinet tablets into a 30 ml volumetric bottle. 20 ml of a mixture of 0.02 M acetate buffer of pH

5.0 en acetonitril (1:1 v/v) werd toegevoegd en het mengsel werd rondgedraaid totdat alle tabletten volledig waren gedesintegreerd. Vervolgens werd het mengsel 5 minuten in een ultrasoon bad geplaatst. De fles werd5.0 and acetonitrile (1: 1 v / v) was added and the mixture was swirled until all tablets were completely disintegrated. The mixture was then placed in an ultrasonic bath for 5 minutes. The bottle became

35 gevuld met een mengsel van 0,02 M acetaatbuf fer van pH35 filled with a mixture of 0.02 M acetate buffer of pH

5.0 en acetonitril (1:1 v/v) tot het juiste volume en 1018756* 25 gemengd. Ongeveer 10 ml van de verkregen oplossing werd 10 minuten bij 4.000 o.p.m. gecentrifugeerd. De bovenstaande vloeistof werd gebruikt voor de analyse.5.0 and acetonitrile (1: 1 v / v) to the correct volume and 1018756 * 25 mixed. About 10 ml of the resulting solution was diluted at 4,000 rpm for 10 minutes. centrifuged. The supernatant was used for the analysis.

In wezen kan dezelfde werkwijze worden gebruikt 5 voor de analyse van tabletten die 5 of 10 mg amlodipine-maleaat bevatten in plaats van 2,5 zoals hierboven, op voorwaarde dat volumetrische flessen van respectievelijk 50 ml of 100 ml worden gebruikt.Essentially, the same method can be used for the analysis of tablets containing 5 or 10 mg of amlodipine maleate instead of 2.5 as above, provided that 50 ml or 100 ml volumetric bottles are used, respectively.

10 Voorbeeld 510 Example 5

Van een portie van amlodipinemaleaattabletten van 10 mg werd een monster genomen en geanalyseerd op de aanwezigheid van amlodipineaspartaat en amlodipinemalea-mide via HPLC. Om deze tabletten de specificatie "aan-15 vaardbaar" te laten krijgen, vereiste dat niet meer dan 0,2 % van ofwel amlodipineaspartaat of amlodipinemaleami-de erin aanwezig was. Het HPLC-chromatogram wordt getoond in Fig. 5. De analyse toonde aan, dat de tabletten 0,17 % amlodipineaspartaat en 0,01 % amlodipinemaleamide in 20 verhouding tot het piekoppervlak van het amlodipine, en de portie is dus aanvaardbaar/goedgekeurd.A 10 mg serving of 10 mg amlodipine maleate tablets was sampled and analyzed for the presence of amlodipine aspartate and amlodipine maleamide by HPLC. For these tablets to be given the specification "acceptable" required no more than 0.2% of either amlodipine aspartate or amlodipine maleamide to be present. The HPLC chromatogram is shown in Fig. 5. The analysis showed that the tablets have 0.17% amlodipine aspartate and 0.01% amlodipine maleamide relative to the peak area of the amlodipine, and the portion is thus acceptable / approved.

VergelijkingComparison

Van een andere portie amlodipinemaleaattabletten van 10 25 mg dan hierboven gebruikt werd een monster genomen en geanalyseerd op de aanwezigheid van amlodipineaspartaat en amlodipinemaleamide via HPLC. Om deze tabletten de specificatie "aanvaardbaar" te laten krijgen, vereiste dat niet meer dan 0,2 % van ofwel amlodipineaspartaat of 30 amlodipinemaleamide erin aanwezig was. Het HPLC-chromatogram wordt getoond in Fig. 6. De analyse bepaalde, dat de tabletten 0,42 % amlodipineaspartaat en 0,02 % amlodipinemaleamide in verhouding tot het piekoppervlak van het amlodipine bevatten, en deze portie is dus niet aanvaard-35 baar en zal niet worden goedgekeurd of vrijgegeven.A different 25 mg portion of amlodipine maleate tablets than used above was sampled and analyzed for the presence of amlodipine aspartate and amlodipine maleeamide via HPLC. For these tablets to be given the specification "acceptable" required no more than 0.2% of either amlodipine aspartate or amlodipine maleamide to be present. The HPLC chromatogram is shown in Fig. 6. The analysis determined that the tablets contained 0.42% amlodipine aspartate and 0.02% amlodipine maleamide relative to the peak area of the amlodipine, and this portion is thus not acceptable and will not be approved or released.

ΊΌ18756* 2618756 * 26

Voorbeeld 6Example 6

Bepaling van amlodipineaspartaat en amlodipineamide in de geneesmiddelstof amlodipinemaleaat met TLC.Determination of amlodipine aspartate and amlodipine amide in the drug substance amlodipine maleate by TLC.

5 1. Beschrijving van het systeem5 1. Description of the system

Oplosmiddel: Water en methanol in de verhouding 50:50 (v/v).Solvent: Water and methanol in the ratio 50:50 (v / v).

Monsteroplossing A: Breng ongeveer 51 mg Amlodipinemale-10 aat ruw materiaal in een bruine flesje van 10 ml. Los op in 4 ml oplosmiddel en homogeniseer de oplossing (equivalent aan 10 mg Amlodipine per ml).Sample solution A: Place approximately 51 mg of Amlodipinemale-10 a raw material in a brown 10 ml bottle. Dissolve in 4 ml of solvent and homogenize the solution (equivalent to 10 mg of Amlodipine per ml).

Amlo-aspartaat 0.3 %-jge oplossing B: Breng ongeveer 6 mg 15 Amlodipineaspartaat in een volumetrische fles van 25 ml. Voeg 20 ml oplosmiddel toe en los op met behulp van een ultrasoon bad. Breng het volume op peil met oplosmiddel en homogeniseer de oplossing (stockoplossing B). Pipet-teer 0,5 ml stockoplossing B in een flesje van 10 ml.Amlo Aspartate 0.3% Solution B: Place approximately 6 mg of 15 Amlodipine Aspartate in a 25 ml volumetric bottle. Add 20 ml of solvent and dissolve using an ultrasonic bath. Bring up the volume with solvent and homogenize the solution (stock solution B). Pipette 0.5 ml stock solution B into a 10 ml bottle.

20 Voeg 3,5 ml oplosmiddel toe en homogeniseer de oplossing (equivalent aan 0,03 mg Amlodipine per ml).20 Add 3.5 ml solvent and homogenize the solution (equivalent to 0.03 mg Amlodipine per ml).

Amlo-maleamide 0,3 %-ige oplossing C: Breng ongeveer 6 mg Amlodipinemaleamide in een volumetrische fles van 25 ml. 25 Voeg 20 ml oplosmiddel toe en los op met behulp van een ultrasoon bad. Breng het volume op peil met oplosmiddel en homogeniseer de oplossing (stockoplossing C). Pipet-teer 0,5 ml van stock-oplossing C in een fles. Voeg 3,5 ml oplosmiddel toe en homogeniseer de oplossing (equiva-30 lent aan 0,03 mg amlodipine per ml).Amlo-maleamide 0.3% solution C: Place approximately 6 mg of Amlodipine maleamide in a 25 ml volumetric bottle. 25 Add 20 ml of solvent and dissolve using an ultrasonic bath. Bring up the volume with solvent and homogenize the solution (stock solution C). Pipette 0.5 ml of stock solution C into a bottle. Add 3.5 ml of solvent and homogenize the solution (equivalent to 0.03 mg of amlodipine per ml).

Gemengde standaard D: Breng ongeveer 51 mg Amlodipinemaleaat ruw materiaal in een bruine fles. Los op in 3 ml oplosmiddel. Voeg respectievelijk 0,5 ml van stockoplos-35 sing B en 0,5 ml van stockoplossing C toe en homogeniseer de oplossing.Mixed Standard D: Place approximately 51 mg of Amlodipine maleate raw material in a brown bottle. Dissolve in 3 ml of solvent. Add 0.5 ml of stock solution B and 0.5 ml of stock solution C, respectively, and homogenize the solution.

1018756· 27101875627

Plaat: HPTLC-plaat bedekt met silica- gel 60 F254, 20 x 10 cm (Merck) Monstervolume: 1,0 μΐ 5 Band: 10 mmPlate: HPTLC plate covered with silica gel 60 F254, 20 x 10 cm (Merck) Sample volume: 1.0 μΐ 5 Band: 10 mm

Opbrengsnelheid: 4 sec/μΐApplication rate: 4 sec / μΐ

Afstand vanaf de onderste grens van de HPTLC-plaat: 15 mm.Distance from the lower limit of the HPTLC plate: 15 mm.

Afstand tussen monsters: 10 mm.Distance between samples: 10 mm.

10 Mobiele fase: Methylisobutylketon, methanol en azijnzuur in de verhouding 70 : 20 : 10 (v/v/v)10 Mobile phase: Methyl isobutyl ketone, methanol and acetic acid in the ratio 70: 20: 10 (v / v / v)

Verzadiging van de kamer: Vul de geconditioneerde bak met 20 ml mobiele fase en ver-15 zadig gedurende 5 minuten.Chamber saturation: Fill the conditioned container with 20 ml of mobile phase and saturate for 5 minutes.

Ontwikkeling: Scheidingspad 9 cm, horizon taal .Development: Separation pad 9 cm, horizontal language.

Drogen aan de lucht: 15 min. bij omgevingstempera tuur.Air drying: 15 min. At ambient temperature.

20 Detectie: UV 366 nm.Detection: UV 366 nm.

2. Beoordeling van chromatogrammen a. Nadat alle vier de oplossingen op de plaat waren gebracht, werd de TLC-plaat aan de lucht gedroogd en 25 daarna bekeken onder UV-licht van 366 nm. De test was niet geldig, tenzij het chromatogram verkregen met de Gemengde standaard D drie duidelijk gescheiden vlekken vertoonde.2. Evaluation of Chromatograms a. After all four solutions were plated, the TLC plate was air dried and then viewed under 366 nm UV light. The test was not valid unless the chromatogram obtained with the Mixed standard D showed three clearly separated spots.

b. De intensiteit van elke secundaire vlek op het chroma-30 togram van oplossing A overeenkomend in Rf-waarde met de hoofdvlek die verkregen werd met oplossing B (equivalent aan 0,3 % van het aspartaat) werd geschat.b. The intensity of each secondary spot on the chroma-30 gram of solution A corresponding in Rf value to the main spot obtained with solution B (equivalent to 0.3% of the aspartate) was estimated.

c. De intensiteit van elke secundaire vlek op het chromatogram van oplossing A overeenkomend in Rf-waarde met de 35 hoofdvlek, die verkregen werd met standaardoplossing C (equivalent aan 0,3 % van het aspartaat), werd geschat.c. The intensity of each secondary spot on the chromatogram of solution A corresponding in Rf value to the main spot obtained with standard solution C (equivalent to 0.3% of the aspartate) was estimated.

f018756· 28 3. Resultatenf018756 · 28 3. Results

Een voorbeeld van een chromatogram van het mengsel van amlodipinemaleaat, amlodipineaspartaat en amlodipinemale-amide, dat zichtbaar werd gemaakt door te scannen op een 5 Camag TLC-scanner, wordt getoond in Fig. 7.An example of a chromatogram of the mixture of amlodipine maleate, amlodipine aspartate and amlodipine male amide visualized by scanning on a Camag TLC scanner is shown in Fig. 7.

Stof RfFabric Rf

Amlodipineaspartaat 0,06Amlodipine aspartate 0.06

Amlodipinemaleaat 0,19 10 Amlodipinemaleamide 0,76.Amlodipine maleate 0.19 10 Amlodipine maleeamide 0.76.

Nu de uitvinding beschreven is, zal het voor deskundigen in het vak duidelijk zijn, dat verdere veranderingen en modificaties in de werkelijke implementatie van 15 de hierin beschreven ideeën en uitvoeringsvormen gemakkelijk kunnen worden aangebracht of worden geleerd door het in de praktijk brengen van de uitvinding, zonder af te wijken van de geest en het kader van de uitvinding zoals gedefinieerd in de volgende conclusies.Having described the invention, it will be apparent to those skilled in the art that further changes and modifications in the actual implementation of the ideas and embodiments described herein can be easily made or learned by practicing the invention, without departing from the spirit and scope of the invention as defined in the following claims.

f018756·f018756

Claims

1. A method comprising analyzing a highly pure amlodipine aspartate or amlodipine maleamide under a series of conditions to obtain an analytical result for a reference standard for this series of conditions.

2. The method of claim 1, wherein the analysis is thin 1 layer chromatography and the conditions include the solvent, the concentration of the amlodipine aspartate or amlodipine maleamide in this solvent, and the amount of amlodipine aspartate or amlodipine maleamide applied in the chromatography, and wherein the analytical result of the reference standard is the Rf value and / or the size of a spot corresponding to the amlodipine aspartate or amlodipine maleamide.

A method according to claim 1 or 2. wherein the assay is HPLC and the conditions include the solvent, the concentration of amlodipine aspartate or amlodipine maleamide in this solvent, and the amount of amlodipine aspartate or amlodipine maleamide applied in the chromatography, and where the analytical result for the reference standard is the resolution factor or retention time , the peak area and / or the peak response factor is corresponding to the amlodipine aspartate or amlodipine maleamide.

A method for testing the purity or stability of a sample of amlodipine maleate or a pharmaceutical dosage form containing amlodipine maleate, which comprises analyzing a sample of an amlodipinate late substance or preparation for the presence of amlodipine neaspartate or amlodipine maleeamide.

The method of claim 4, comprising: analyzing an amlodipine maleate substance or preparation to obtain an analytical result; and comparing this analytical result with a corresponding analytical result for a reference standard for amlodipine aspartate or amlodipine maleate to determine whether the purity or stability of this amlodipine maleate or composition is satisfactory.

The method of claim 4 or 5, wherein the purity or stability is satisfactory when the amount of amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide is determined to be less than 0.2% by weight relative to amlodipine maleate.

A method of determining the presence of an impurity comprising the steps of: a) dissolving a sample containing amlodipine maleate in a solvent to produce a sample solution; B) dissolving a sample of amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide in a solvent to produce a reference solution; c) subjecting the sample solution and the reference solution to thin layer chromatography for one

Obtain TLC chromatogram for each; and d) estimating the intensity of each secondary spot obtained with the sample solution and corresponding in Rf value to the reference marker against the intensity of the spot as a result of the aspartate or maleamide in the chromatogram of the reference solution.

8. A method of determining the presence of an impurity, comprising the steps of: a) dissolving a sample containing amlodipine maleate in a solvent to produce one or more sample solutions; b) dissolving a sample of amlodipine aspartate or amlodipine maleamide in a solvent to produce a reference solution; C) injecting the sample and reference solutions onto an HPLC column; and d) estimating the peak areas of each solution and calculating from this the 1018756 content of the amlodipine aspartate or the amlodipinema leamide in each sample solution.

9. A method comprising separating amlodipine maleate from either amlodipine aspartate or amlodipine maleamide.

The method of claim 9, wherein this separation is performed by thin layer chromatography.

The method of claim 9, wherein this separation is performed by HPLC.

A method comprising mixing amlodipine maleate with at least one pharmaceutically acceptable excipient to form a mixture; either (a) filling this mixture into capsules or (2) compressing this mixture into tablets to form a production portion of pharmaceutical solid dosage forms of amlodipine maleate; removing a sample of these pharmaceutical solid dosage forms of amlodipine maleate from this production portion; Subjecting this sample to analysis to obtain an analytical result for the sample; and comparing the analytical result for the sample with a corresponding analytical result for a reference standard for amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide to determine the amount of amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide relative to the amlodipine maleate; and selling or releasing this production portion, if the amount of amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide is not greater than 1.0% by weight based on the amount of amlodipine maleate.

The method of claim 12, wherein the analytical result for the reference standard was determined before the mixing step.

A method according to claim 12 or 13, wherein the comparison step uses an electronically stored representation of the analytical result for the reference standard.

The method of any one of claims 12-14, wherein the comparing step comprises a visual inspection of the analytical result for the sample and the analytical result for the reference standard.

A method according to any one of claims 12-15, wherein the production portion is released or sold, if the amount of amlodipine aspartate or amlodipine maleeamide is not greater than 0.2% by weight based on the amount of amlodipine maleate. 101875 $ «