MXPA98004741A

MXPA98004741A - Compuestos inhibidores de proteasas retrovirales

Info

Publication number: MXPA98004741A
Application number: MXPA/A/1998/004741A
Authority: MX
Inventors: J Kempf Dale; Leung Sham Hing; D Stewart Kent
Original assignee: Abbott Laboratories
Priority date: 1995-12-13
Filing date: 1998-06-12
Publication date: 1999-07-06

Abstract

Se proporcionan inhibidores de proteasa de HIV. Cuando están ligados a al proteasa de HIV, los inhibidores son caracterizados por una orientación y conformación tri-dimensional con relación a los subsitios S1, S1', S2, S2', S3 y S3'de la proteasa. Las composiciones farmacéuticas conteniendo los inhibidores y métodos para tratar la infección de HIV también son proporcionados.

Description

COMPUESTOS INHIBIDORES DE PROTEASAS RETROVIRALES Referencia cruzada para solicitud relacionada La presente solicitud es una continuación en parte de la Solicitud de Patente de Estados Unidos No. 08/572,226, presentada el 13 de diciembre de 1996, la descripción de la cual se incorpora en la presente por referencia.

Campo técnico de la invención La presente invención se refiere a novedosos compuestos, composiciones y métodos para inhibir proteasas retrovirales y en particular para inhibir proteasa de virus de inmunodeficiencia humana (H IV). La presente invención también se refiere a un método para superar la resistencia adquirida a ciertos inhibidores de proteasa HIV.

Antecedentes de la invención Los retrovirus son aquellos virus los cuales utilizan un intermediario de ácido ribonucleico (RNA) y una polimerasa de ácido desoxirribonucleico (DNA) dependiente de RNA, transcriptasa inversa, durante su ciclo de vida. Los retrovirus incluyen, pero no están limitados a, los virus de RNA de la familia Retroviridae, y también los virus de DNA de las familias Hepadnavirus y Caulimovirus. Los retrovirus provocan una variedad de estados de enfermedad en el hombre, animales y plantas. Algunos de los retrovirus más importantes desde un punto de vista patológico incluyen los virus de inmunodeficiencia humana (HIV-1 y H IV-2), los cuales causan síndrome de inmunodeficiencia adquirida (AIDS) en el hombre, virus linfotróficos de células T humanos I, I I , IV y V, los cuales causan leucemia celular aguda humana, y virus de leucemia de bovino y felino, los cuales causan leucemia en animales domésticos. Las proteasas son enzimas las cuales cortan proteínas en ligaduras de péptido específicas. Muchas funciones biológicas son controladas o mediadas por proteasas y sus inhibidores de proteasa complementarios. Por ejemplo, la proteasa de renina corta el péptido angiotensinógeno para producir el péptido de angiotensina 1 . La angiotensina I es cortada adicionalmente por la proteasa de enzima convertidora de angiotensina (ACE) para formar el péptido hipotensivo angiotensina II . Los inhibidores de renina y ACE son conocidos por reducir la alta presión sanguínea [n vivo. Un inhibidor de una proteasa retroviral proporcionará un agente terapéutico para enfermedades causadas por el retrovirus. Los genomas de retrovirus codifican una proteasa que es responsable para el procesamiento proteolítico de uno o más precursores de poliproteína, tales como los porductos de gene pol y gag. Ver Wellink, Arch. Virol. 98 1 (1988). Las proteasas retrovirales procesan muy comúnmente el precursor gag en proteínas de núcleo, y también procesan el precursor ppl en transcriptasa inversa y proteasa retroviral . Además, las proteasas retrovirales son específicas de secuencia. Ver Pearl, Nature 328 482 (1987) . El procesamiento correcto de las poliproteínas del precursor por la proteasa retroviral es necesario para el montaje de viriones infecciosos. Se ha mostrado que la mutagénesis in vitro que produce virus defectuoso de proteasa, conduce a la producción de formas de núcleo inmaduras las cuales carecen de infectividad. Ver Crawford, J . Virol. 53 899 (1985); Katoh, et al., Virology 145 280 (1985). Por lo tanto, la inhibición de proteasa retroviral proporciona un objetivo atractivo para terapia antiviral. Ver Mitsuya, Nature 325 775 (1987). Los tratamientos actuales para enfermedades virales usualmente involucran la administración de compuestos que inhiben la síntesis de DNA viral. Los tratamientos actuales para AIDS involucran la administración de compuestos tales como 3'-azido-3'-desoxitimidina (AZT), 2', 3'-didesoxicitidina (DDC), 2',3'-didesoxinosina (DDl), d4T y 3TC y compuestos los cuales tratan las infecciones oportunistas causadas por la inmunosupresión resultante de la infección de H IV. Ninguno de los tratamientos de AIDS actuales han probado ser totalmente efectivos para tratar y/o invertir la enfermedad. Además, muchos de los compuestos actualmente usados para tratar AIDS provocan efectos laterales adversos incluyendo cuenta de plaquetas baja, toxicidad renal y citopenia de hueso medular. Recientemente los inhibidores de proteasa de HIV ritonavir, saquinavir e ¡ndinavir han sido aprobados en Estados Unidos para tratamiento de infecciones de H IV. Un problema asociado con el uso de inhibidores de proteasa de H 1V existentes es la disminución de efectividad de estos medicamentos con uso prolongado como monoterapia. A manera de ejemplo, la administración de largo plazo de ritonavir como monoterapia conduce a mutaciones en la secuencia de residuos de aminoácidos de la proteasa H IV, cuyas proteasas de H IV mutantes han reducido susceptibilidad a los efectos del inhibidor. Resultados similares han sido reportados para otros inhibidores de proteasa de H IV. En consecuencia, todavía existe una necesidad en la técnica para nuevos y mejorados inhibidores de proteasa de HIV.

Breve resumen de la invención La presente invención proporciona los compuestos que inhiben la proteasa HIV. Los compuestos inhibidores contienen un anillo heterocíclico teniendo (a) 4 a 7 átomos de anillo, (b) por lo menos un átomo de anillo N , y (c) por lo menos un átomo de anillo C, el cual es substituido con oxo (=0), tioxo (=S) o ¡mino (=NH). Cuando se liga a la proteasa de H IV, por lo menos un átomo de anillo de este heterociclo es ubicado ya sea en el subsitio S2 o S2' de proteasa. Su inhibidor preferiblemente se liga al sitio activo de la proteasa. El compuesto de la invención, cuando se liga a la proteasa de H IV, contiene adicionalmente un átomo no de hidrógeno ya sea en el subsitio S1 o S1 ' de la proteasa de H IV y carece de un átomo no de hidrógeno tanto en los subsitios S3 como S3' de la proteasa de HIV, dichos subsitios S3 y S3' no incluyen ninguno de los subsitios S1 y S1 \ respectivamente. La presente invención proporciona además composiciones farmacéuticas comprendiendo un inhibidor de proteasa de H IV de la invención y el uso de inhibidores para inhibir la proteasa de HIV o infección de H IV solos o en combinación con otros tratamientos anti-H IV, tales como otros inhibidores de proteasa de H IV o inhibidores de transcriptasa inversa. Los compuestos de la presente invención son activos como inhibidores de las proteasas de HIV mutantes, dichas proteasas son resistentes a la inhibición por ritonavir y otros inhibidores de proteasa de HIV, los cuales promueven el desarrollo de mutaciones en la proteasa de HIV del tipo promovido por ritonavir. En consecuencia, los compuestos de la presente invención son útiles en combinación con ritonavir y/u otros inhibidores de proteasa de H IV, los cuales promueven el desarrollo de mutaciones en la proteasa de H IV del tipo promovido por ritonavir.

Descripción detallada de la invención I. La invención La presente invención proporciona inhibidores de proteasa de HIV. Los inhibidores, cuando se ligan a la proteasa de H IV, están caracterizados por una conformación tridimensional y orientación relativa a la proteasa de HIV. Como un resultado de esta relación espacial única con la proteasa, los inhibidores actualmente reclamados son menos susceptibles al desarrollo de cambios mutacionales en la proteasa de H IV del tipo causado por monoterapia con ritonavir (u otros inhibidores de proteasa de HIV los cuales promueven el desarrollo de mutaciones en la proteasa de H IV del tipo promovido por ritonavir) y los cuales resultan en la pérdida de actividad inhibidora. Además, los compuestos de la presente invención son activos como inhibidores de proteasas de H IV mutantes, dichas proteasas son resistentes a inhibición por ritonavir y otros inhibidores de proteasa H IV, los cuales promueven el desarrollo de las mutaciones en la proteasa de H IV del tipo promovido por ritonavir. Así, un inhibidor de la presente invención puede ser usado solo o junto con otros inhibidores de proteasa de HIV para tratar la infección de HIV.

I I. Compuestos inhibidores de proteasa Un compuesto de la presente invención se liga a la proteasa de H IV e inhibe la actividad catalítica de esta enzima proteasa. El inhibidor se liga al sitio activo de la proteasa de HIV, dicho sitio activo es bien conocido en la técnica (Ver, por ejemplo, Miller et al. , Science, 246: 1 149-1 152, 1989). Un inhibidor de la presente invención puede ser ya sea un inhibidor peptidomimético o no péptido como aquellos términos son conocidos y entendidos en la técnica (HIV Protease Inhibitors, Kemplf, D.J . y Sham, H . L. , Current Pharmaceutical Design, 2:225-246, 1996). Cuando se liga al sitio activo, el inhibidor comprende de preferencia por lo menos un átomo de no hidrógeno en un primer volumen esférico. El primer volumen esférico (y todos los demás volúmenes esféricos referidos en la presente) es definido al ubicar el punto central del volumen esférico junto con un radio definido alrededor de ese punto central. Los puntos centrales de los volúmenes esféricos son definidos por el punto de intersección de vectores de una cierta longitud (lugares geométricos) que surgen de átomos de carbono alfa particulares de la proteasa ligada. Un experto en la técnica reconocerá que cualquiera de los carbonos alfa de la proteasa de HIV ligada puede usarse como punto de referencia. El punto central del primero y todos los demás volúmenes esféricos en la presente es definido por la intersección de por lo menos tres lugares geométricos de vectores de longitudes dadas (es decir, por lo menos tres carbonos alfa de referencia son necesarios). Sin embargo, un experto en la técnica apreciará fácilmente que pueden haber dos coordinados espaciales definidos por la intersección de tres lugares geométricos de vectores como se definió antes. Uno de los coordinados espaciales estará por encima del plano de los carbonos alfa de referencia y el segundo estará ubicado por debajo de ese plano. Con referencia particular a la presente invención (inhibidor ligado y proteasa), alguien de habilidad en la técnica reconocerá que uno de los dos coordinados espaciales estará situado en lo profundo dentro de la proteasa en sí y, de esta manera, no se pretende que este punto en el espacio defina un punto central de volumen esférico. Los puntos de referencia para la ubicación del punto central del primer volumen esférico en la presente incluyen los átomos de carbono alfa de los residuos 27, 127, 50 y 150 de la proteasa de H IV. La proteasa de H 1V consiste de dos subunidades idénticas, cada una de las cuales tiene 99 residuos de aminoácidos. Como se usa en la presente, los números ordinales 1 -99 indican residuos (el residuo N-terminal es 1 ) en una subunidad y los ordinales 101 -199 indican los residuos correspondientes en la otra subunidad. El punto central del primer volumen esférico es definido por al menos tres lugares geométricos seleccionados del grupo de primeros lugares geométricos consistiendo de 5.0 A a 6.0 Á desde el carbono alfa del residuo 27 de la proteasa, 5.0 ? a 6.0 ? del carbono alfa del residuo 127 de la proteasa, 6.3 Á a 7.5 ? del carbono alfa del residuo 50 de la proteasa, y 6.3 Á a 7.5 Á del carbono alfa del residuo 150 de la proteasa. De preferencia, el punto central del primer volumen esférico es determinado usando cuatro lugares geométricos del primer grupo de lugares geométricos. El radio del primer volumen esférico es aproximadamente 3.0 Á. Un compuesto inhibidor de la presente invención comprende un heterociclo particular, dicho heterociclo está únicamente orientado de manera espacial para subsitios de la proteasa de HIV, cuando el inhibidor es ligado a la proteasa. El componente de heterociclo del inhibidor puede contener desde 4 hasta 7 átomos de anillo. Los átomos de anillo deben incluir por lo menos un átomo de nitrógeno (N) de anillo. Los átomos de anillo también deben incluir por lo menos un átomo de anillo de carbono (C), el cual es substituido con un grupo oxo (=0) , un grupo tioxo (=S) o un grupo imino (=NH). De preferencia, el heterociclo del compuesto contiene cinco o seis átomos de anillo. El heterociclo de preferencia contiene dos átomos de anillo N no adyacentes y por lo menos un átomo de anillo C el cual es substituido con un grupo oxo (=0). Por lo menos uno de los átomos de anillo N de preferencia tiene la estructura NH y el anillo de preferencia tiene de 0 a 2 dobles ligaduras. Donde el heterociclo tiene un anillo N de la estructura NH , el átomo de anillo N de la estructura NH está ubicado dentro del rango desde aproximadamente 2.4 Á hasta aproximadamente 3.7 Á del átomo de nitrógeno de esqueleto de ya sea el residuo 30 o el residuo 1 30 de la proteasa cuando el compuesto está ligado a la proteasa. Donde el heterociclo tiene un átomo de anillo C, el cual es substituido con un grupo oxo (=0), el átomo O de ese grupo C=0 está ubicado dentro de un rango desde aproximadamente 2.4 Á hasta aproximadamente 3.7 Á del átomo de nitrógeno de esqueleto de ya sea el residuo 30 o el residuo 130 de la proteasa, cuando el compuesto está ligado a la proteasa de H IV. De preferencia, ambas de las condiciones anteriores se satisfacen. Un heterociclo preferido tiene la estructura: _) en donde n es 1 , 2 o 3, m es 1 , 2, o 3, m' es 1 o 2, X es O, S o NH, Y es -CH2-, -O-, -S- o -N(R6)- en donde R6 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo o arilalquilo, Y" es -CH2- o -N(R6-)- en donde R6- es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo o arilalquilo, Y' es -N(R6 )- en donde R6- es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo o arilalquilo, y Z es O, S o N H ; Las estructuras más preferidas del heterociclo tienen la estructura: c) en donde X, Y, Y', Y", Z, R6-, n, m y m' son como se definió antes. Los heterociclos más altamente preferidos tienen la estructura: en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -N H- b) en donde m es 1 o 2, X es O, Y es -CH2- y Z es O, \ sC) (CH2) m en donde m' es 1, X es O, Z es O y Y es -NH-, en donde m' es 1, X es O, Y" es -NH- y Y' es -NH- o e) en donde X es O y R6- es hidrógeno. Heterociclos aún más altamente preferidos tienen la estructura: a) en donde n es 1 o 2, X es O o s y Y es -CH2 o -NH-, en donde m' es 1, Xes O, Z es O y Yes -NH- en donde m' es 1, X es O, Y" es -NH- y Y' es -NH- o en donde X es O y R6- es hidrógeno. Los heterociclos más altamente preferidos tienen la estructura: en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -NH-. Cuando se liga a la proteasa de H IV, el inhibidor es caracterizado por la presencia de por lo menos un átomo de anillo heterocíclico en el subsitio S2 o S2' de la proteasa. Las ubicaciones de los subsitios S2 y S2' de la proteasa son bien conocidas por alguien de habilidad en la técnica (Ver, por ejemplo, Miller et al, Science, 246:1 149-1 152, 1989). Aunque solo uno de los átomos de anillo heterocíclico necesita estar en los subsitios definidos como se definió antes, cualquier número de átomos de anillo, hasta e incluyendo el número total de átomos de anillo (4, 5, 6 o 7) puede estar ubicado en los mismos. Se prefiere que más de un átomo de anillo esté ubicado en el subsitio S2 o S2'. Más particularmente, por lo menos un átomo de anillo del anillo heterocíclico del inhibidor está ubicado ya sea en un segundo o tercer volumen esférico. El segundo volumen esférico tiene un radio en el rango desde aproximadamente 2.5 A hasta aproximadamente 4.0 A. Más preferiblemente, ese radio es desde aproximadamente 3.0 A hasta aproximadamente 4.0 A, aún más preferiblemente en el rango desde aproximadamente 3.5 A hasta aproximadamente 4.0 A. Más preferiblemente, el radio del cuarto volumen esférico es aproximadamente 4.0 A. El punto central del segundo volumen esférico es definido por al menos tres lugares geométricos seleccionados de un segundo grupo de lugares geométricos consistiendo de 3.8 A a 4.2 A del carbono alfa del residuo 28 de la proteasa, 4.3 A a 4.7 A del carbono alfa del residuo 30 de la proteasa, 7.7 A a 8.1 A del carbono alfa del residuo 32 de la proteasa, y 6.5 A a 6.9 A del carbono alfa del residuo 48 de la proteasa. El radio del tercer volumen esférico está en el rango desde aproximadamente 2.5 A hasta aproximadamente 4.0 A. Más preferiblemente, ese radio es desde aproximadamente 3.0 A hasta aproximadamente 4.0 A y, aún más preferiblemente en el rango desde aproximadamente 3.5 A hasta aproximadamente 4.0 A. Más preferiblemente, el radio del tercer volumen esférico es aproximadamente 4.0 A. El punto central del tercer volumen esférico es definido por al menos tres lugares geométricos seleccionados de un grupo de terceros lugares geométricos consistiendo de 3.8 A a 4.2 A desde el carbono alfa de residuo 128 de la proteasa, 4.3 A a 4.7 A desde el carbono alfa de residuo 130 de la proteasa, 7.7 A a 8.1 A desde el carbono alfa de residuo 132 de la proteasa, y 6.5 A a 6.9 A desde el carbono alfa de residuo 148 de la proteasa. El segundo y tercer volúmenes esféricos están relacionados por simetría a las dos subunidades de la proteasa. Los carbonos alfa en los residuos 28 (138), 30 (130), 32 8132) y 48 (148) son típicamente Ala, Asp, Val y Gly, respectivamente. La identidad precisa de aquellos residuos no es, sin embargo, crítica para el uso como puntos de referencia para definir el segundo y tercer volúmenes esféricos. Así, cada uno de aquellos residuos puede ser cualquiera de los veinte residuos de aminoácidos que ocurren de manera natural. En otras palabras, mutaciones en la proteasa no afectarán la ubicación de los volúmenes definidos o la relación del inhibidor a ese volumen. En una manera similar a la descrita para el primer volumen esférico, se prefiere que los puntos centrales del segundo y tercer volúmenes esféricos sean definidos por más de tres lugares geométricos. De esta manera, estos puntos centrales son cada uno definidos de preferencia independientemente por al menos cuatro, más preferiblemente por lo menos cinco, aún más preferiblemente por lo menos seis, y más preferiblemente los siete de sus respectivos grupos de lugares geométricos. Todavía en otra modalidad, un inhibidor de la presente invención es de preferencia también restringido espacialmente en relación a los subsitios S1 y S1 ' de la proteasa. De acuerdo con esta modalidad, el inhibidor, cuando se liga a la proteasa, tiene por lo menos un átomo de no hidrógeno ya sea en el subsitio S1 o S1 ' de la proteasa. Más particularmente, el inhibidor, cuando se liga a la proteasa, contiene un átomo de no hidrógeno ya sea en un cuarto o un quinto volumen esférico. El punto central del cuarto volumen esférico es definido por el punto de intersección de por lo menos tres lugares geométricos de vectores seleccionados desde el grupo de cuartos lugares geométricos consistiendo 3.2 A a 3.7 A del carbono alfa de residuo 49 de la proteasa, 4.1 A a 4.5 A desde el carbono alfa de residuo 50 de la proteasa, 12.4 A a 12.8 A desde el carbono alfa de residuo 108 de la proteasa, 13.0 A a 13.4 A desde el carbono alfa de residuo 1 10 de la proteasa, 1 1 .0 A a 1 1 .4 A desde el carbono alfa de residuo 125 de la proteasa, 5.7 A a 6.1 A desde el carbono alfa de residuo 182 de la proteasa, y 8.4 A a 8.8 A desde el carbono alfa de residuo 184 de la proteasa. El radio del cuarto volumen esférico está en el rango desde aproximadamente 2.5 A hasta aproximadamente 4.0 A. Más preferiblemente, ese radio es desde aproximadamente 3.0 A hasta aproximadamente 4.0 A y, aún más preferiblemente en el rango desde aproximadamente 3.5 A hasta aproximadamente 4.0 A. Más preferiblemente, el radio del cuarto volumen esférico es aproximadamente 4.0 A. El quinto volumen esférico (la contraparte simétrica del cuarto volumen esférico pero relativa a la segunda subunidad de la proteasa) tiene un radio en el rango desde aproximadamente 2.5 A hasta aproximadamente 4.0 A y un punto central definido por al menos tres lugares geométricos seleccionados del grupo de quintos lugares geométricos consistiendo de 3.2 A hasta 3.7 A desde el carbono alfa de residuo 140 de la proteasa, 4.1 A hasta 4.5 A desde el carbono alfa de residuo 150 de la proteasa, 12.4 A hasta 12.8 A del carbono alfa de residuo 8 de la proteasa, 13.0 A hasta 13.4 A desde el carbono alfa de residuo 10 de la proteasa, 1 1 .0 A hasta 1 1 .4 A desde el carbono alfa de residuo 25 de la proteasa, 5.7 A hasta 6.1 A desde el carbono alfa de residuo 82 de la proteasa, y 8.4 A hasta 8.8 A desde el carbono alfa del residuo 84 de la proteasa. Un radio preferido para el quinto volumen esférico es el mismo como se expuso antes para el cuarto volumen esférico. En las modalidades preferidas tanto para el cuarto como el quinto volumen esférico, los puntos centrales son cada uno independientemente definidos por al menos cuatro, más preferiblemente por cinco, aún más preferiblemente por al menos seis y, muy preferiblemente siete lugares geométricos seleccionados a partir de los grupos cuarto y quinto de lugares geométricos, respectivamente. Como fue el caso con el segundo y tercer volumen esférico, la identidad precisa de los residuos de aminoácidos en las ubicaciones del carbono alfa indicado no son críticas y pueden ser cualquiera de los veinte residuos de aminoácidos que ocurren de manera natural. Todavía en otra modalidad preferida, un inhibidor de la presente invención está restringido de manera espacial con relación a los subsitios S3 y S3' de la proteasa. De acuerdo con esta modalidad, el inhibidor, cuando está ligado a la proteasa, carece de un átomo de no hidrógeno tanto en los subsitios S3 y S3' de la proteasa. Alguien de habilidad ordinaria en la técnica apreciará fácilmente que existe un traslape entre los subsitios S3 y S1 así como entre los subsitios S3' y S1 '. La aunsencia de un átomo de no hidrógeno en los subsitios S3 y S3' es pretendida para excluir aquellas porciones de los subistios S3 y S3' que se traslapan con los subsitios S1 y S1 ', respectivamente. En otras palabras, un inhibidor de la presente invención puede contener un átomo de no hidrógeno en esa porción de S3 que se traslapa con S1 y esa porción de S3' que se traslapa con S1 '. Más particularmente, el inhibidor, cuando está ligado a la proteasa, carece de un átomo de no hidrógeno tanto en un sexto como un séptimo volumen esférico. El sexto volumen esférico tiene un radio en el rango desde aproximadamente 2.5 A hasta aproximadamente 4.0 A y un punto central definido por al menos tres lugares geométricos seleccionados del grupo de sextos lugares geométricos consistiendo de 7.7 A hasta 8.2 A desde el carbono alfa de residuo 49 de la proteasa, 9.8 A hasta 10.2 A desde el carbono alfa de residuo 50 de la proteasa, 9.6 A hasta 1 0.0 A desde el carbono alfa de residuo 108 de la proteasa, 10.4 A hasta 10.8 A desde el carbono alfa de residuo 1 10 de la proteasa, 12.7 A hasta 13. 1 A desde el carbono alfa de residuo 125 de la proteasa, 5.4 A hasta 5.8 A desde el carbono alfa de residuo 182 de la proteasa, y 10.1 A hasta 10.6 A desde el carbono alfa de residuo 184 de la proteasa. El sexto volumen esférico se traslapa en parte con el cuarto volumen esférico como se definió antes. Esa porción del sexto volumen esférico que se traslapa con el cuarto volumen esférico es excluido de consideración con respecto esta restricción espacial. En otras palabras, el inhibidor puede contener un átomo de no hidrógeno en esa porción del sexto volumen esférico que se traslapa con el cuarto volumen esférico. El séptimo volumen esférico tiene un radio en el rango desde aproximadamente 2.5 A hasta aproximadamente 4.0 A y un punto central definido por al menos tres lugares geométricos seleccionados del grupo de séptimos lugares geométricos consistiendo de 7.7 A hasta 8.2 A desde el carbono alfa de residuo 149 de la proteasa, 9.8 A hasta 10.2 A desde el carbono alfa de residuo 150 de la proteasa, 9.6 A hasta 10.0 A desde el carbono alfa de residuo 8 de la proteasa, 10.4 A hasta 10.8 A desde el carbono alfa de residuo 10 de la proteasa, 12.7 A hasta 1 3. 1 A desde el carbono alfa de residuo 25 de la proteasa, 5.4 A hasta 5.8 A desde el carbono alfa de residuo 82 de la proteasa, y 10.1 A hasta 10.6 A desde el carbono alfa de residuo 84 de la proteasa, en donde el séptimo volumen esféricas no incluye cualquiera del quinto volumen esférico. La exclusión de cualquiera del volumen del quinto volumen esférico está al mantener con el traslape entre el quinto y séptimo volumen esférico. Los valores preferidos para los radios del sexto y séptimo volumen esférico son los mismos como se expuso antes con respecto al cuarto y quinto volumen esférico. De manera similar, el número preferido de lugares geométricos para identificar los puntos centrales del sexto y séptimo volumen esférico son los mismos como se expuso antes con relación al cuarto y quinto volumen esférico. Un compuesto inhibidor preferido y ejemplar de la presente invención como se define por la fórmula I: en donde R^ y R2 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de alquilo inferior, cicloalquilalquilo y arilalquilo; R3 es alquilo inferior, hidroxialquilo o cicloalquilalquilo; R4 es arilo o heterociclo; R5 es a) (C 2)n-J en donde n es 1 , 2 o 3, m es 1 , 2 o 3, m' es 1 o 2, X es O, S o N H , Y es -CH2-, -O-, -S- o -N H(R6)- en donde R6 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo o arilalquilo, Y" es -CH2- o -NH(R6-)-en donde R6- es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo o arilalquilo, Y' es -N H(R6 )- en donde R6- es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo o arilalquilo, y Z es O, S o NH ; y L1 es a) -O-, b) -S-, c) -N(R7)- en donde R7 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo o cicloalquilalquilo, d) -O-alquilenilo-, e) -S-alquilenilo-f) -S(O)-alquilenilo-, g) -S(O)2-alquilenilo, h) -N(R7)-alquilenilo- en donde R7 es definido como antes, i) -alquilenilo-O-, j) -alquilenilo-S, k) alquilenilo-N(R )- en donde R es definido como antes, I) alquilenilo o m) alquenilenilo; o una sal farmacéuticamente aceptable, éster o promedicamento del mismo.

Los compuestos preferidos son compuestos de la fórmula I en donde Ri y R2 son arilalquilo, R3 es alquilo inferior, R4 es arilo, R5 es b) en donde X, Y, Y', Y", Z, R6», n, m y m' son definidos como antes y L-, es -O-alquilenilo. Los compuestos más preferidos son compuestos de la fórmula I , en donde Ri y R2 son bencilo o R-i es bencilo y R2 es alquilo inferior, R3 es alquilo inferior, R4 es (a) fenilo el cual es substituido con dos grupos de alquilo inferior y el cual es opcionalmente substituido con un tercer substituyente seleccionado del grupo que consiste de alquilo inferior, hidroxi, amino y halo o (b) piridilo o pirimidinilo cualquiera de los cuales es substituido con dos grupos de alquilo inferior y el cual es opcionalmente substituido con un tercer substituyente seleccionado del grupo que consiste de alquilo inferior, hidroxi, amino y halo, R5 es en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -N H-, en donde m es 1 o 2, X es O, Y es -CH2- y Z es O, en donde m' es 1 , X es O, Z es O y Y es -N H-, d) en donde m' es 1 , X es O, Y" es -NH- y Y' es -NH- o en donde X es O y R6- es hidrógeno y Compuestos aún más preferidos son compuestos de la fórmula I en donde R-¡ y R2 son bencilo o R-¡ es bencilo y R2 es isopropilo, R3 es alquilo inferior, R4 es 2,6-dimetilfenil el cual es opcionalmente substituido con un tercer substituyente seleccionado del grupo que consiste de alquilo inferior y halo, R5 es en donde n es o 2, X es O o S y Y es -CH; -NH- b) en donde m es 1 o 2, X es O, Y es -CH2- y Z es O, en donde m' es 1 , X es O, Z es O y Y es -N H- en donde m' es 1 , X es O, Y" es -N H- y Y' es -NH- o en donde X es O y R6- es hidrógeno 20 y Los compuestos más preferidos son compuestos de la fórmula I en donde R-¡ y R2 son bencilo o R-¡ es bencilo y R2 es isopropilo, R3 es alquilo inferior, R4 es 2,6-dimetilfenilo, el cual es opcionalmente substituido con un tercer substituyente seleccionado del grupo consistiendo de alquilo • inferior y halo, R5 es en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -NH-, en donde m' es 1 , X es O, Z es O y Y es -N H-, en donde m' es 1 , X es O, Y" es -N H- y Y' es -N H- o 20 en donde X es O y R6- es hidrógeno L es -O-CH2-. Los compuestos más altamente preferidos son compuestos de la fórmula I, en donde R1 y R2 son bencilo o R1 es bencilo y R2 es isopropilo, R3 es alquilo inferior, R es 2,6-dimetilfenilo el cual es opcionalmente substituido con un tercer substituyente seleccionado del grupo que consiste de alquilo inferior y halo, R5 es en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -NH- y 15 Ejemplos de compuestos altamente y muy altamente preferidos de la ¡^^ fórmula I se seleccionan del grupo que consiste de: (2S, 3S, 5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-[2S-(1 -tetrahidro- pirimid-2-onil)-3-metil butanoil]amino-1 ,6-defneilhexano; 20 (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1 -imidazolidin- 2-onil)-3,3-dimetil butanoil)amino-1 , 6-dif enilhexano; (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1 -imidazolidin- 2-tionil)-3-metil butanoil)amino-1 ,6-difenilhexano; (2S,3S,5S)-2-(2, 4, 6-trimetilf enoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - 25 imidazol idin-2-onil)-3-metilbotanoil)am ino- 1 , 6-dif enil hexa no; (2S,3S,5S)-2-(4-fluoro-2,6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - imidazolid¡n-2-onil)-3-metil-butano¡l)amino-1 ,6-difenilhexano; (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1-pirrolidin-2- onil)-3-metil-butanoil)amino-1 ,6-difenilhexano; 5 (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1 -pirrolid¡n- 2,5-dionil)-3-metil-butanoil)amino-1 ,6-difenilhexano; (2S,3S,5S)-2-(trans-3-(2,6-dimetilfenil)propenoil)amino-3-hidroxi-5-(2S-1 - tetrahídropirim id in-2-onil)-3-metil-butanoil)am ino- 1 , 6-dif enil hexano; (2S,3S,5S)-2-(3-(2,6-dimetilfenil)propanoil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - ^0* ?o tetrahidropirimidin-2-onil)-3-metil-butanoil)amino-1 , 6-dif en ilhexano; (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1 -tetrahidro- pirimid-2,4-dionil)-3-metilbutanoil)amino- 1 ,6-difenilhexano; (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(4-aza-1- tetrahidro-pirimid-2-onil)-3-metil-butanoil)am ino- 1 , 6-dif en ilhexano: 15 (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenox¡acet¡l)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1 -tetrahidro- pirimid-2-onil)-3-metilbutanoil)am ino- 1 -fen i l-6-metil heptano; (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxí-5-(2S-(1 -tetrah¡dro- pirimid-2,4-dionil)-3-metilbutanoil)amino-1 -fenil-6-met¡l heptano; y (2S, 3S,5S)-2-(2, 6-dimetilf enoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(4-aza-4, 5- 20 dehidro-1 -pirimid-2-oníl)-3-metil-butanoil)amino-1 ,6-difen?lhexano: o una sal farmacéuticamente aceptable, éster o promedicamento de los mismos. El compuesto más altamente preferido de la fórmula I es (2S, 3S, 5S)-2-(2, 6-dimetilf enoxiacetil)a min o-3-hidroxi-5-[2S-(1 -tetrahidro-p i rim id-2- 25 onil)-3-metíl butanoil)amino-1 ,6-difenilhexano; K o una sal farmacéuticamente aceptable, éster o promedicamento del mismo. En algunas circunstancias se prefiere ser capaz de preparar (2S, 3S, 5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetil9amino-3-hidroxi-5-[2S-(1 -tetrahidro-pirimid- 5 2-onil)-3-metil butanoil]amino-1 ,6-difenilhexano (o una sal farmacéuticamente aceptable, éster o promedicamento del mismo) como un sólido amorfo. Tal sólido amorfo puede prepararse al disolver (2S, 3S, 5S)-2-(2, 6-dimetilf enoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-[2S-(1 -tetrah idro-pirimid-2- onil)-3-metiI butanoil]amino-1 ,6-difenilhexano en un solvente orgánico (por ejemplo, etanol, isopropanol, acetona, acetonitrilo y similares) y entonces adicionar la solución al agua. De preferencia, (2S, 3S, 5S)-2-(2,6- dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-[2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-onil)-3- metil butanoiI]amino-1 ,6-difenilhexano es disuelto en etanol (desde aproximadamente 2 hasta aproximadamente 4 ml/g) y la solución etanólica 15 es adicionada con agitación al agua (desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 100 ml/g) para proporcionar (2S, 3S, 5S)-2-(2,6- dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-[2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-onil)-3- metil butanoil]amino- 1 ,6-difenilhexano amorfo. Los compuestos de la invención pueden comprender átomos de 20 carbono asimétricamente substituidos. Como un resultado, todos los estereoisómeros de los compuestos de la invención son pretendidos por estar incluidos en la invención, incluyendo mezclas racémicas, mezclas de diasterómeros, así como diasterómeros simples de los compuestos de la invención. áF¡ Los términos configuración "S" y "R" son como se definen por I UPAC 1974 Recommendations para la Sección E, Fundamental Stereochemistry, Puré Appl. Chem. (1976) 45, 13 - 30. El término "grupo N-protector" o "N-protegido" como se usa en la 5 presente se refiere a aquellos grupos pretendidos para proteger el extremo N de un aminoácido o péptido o para proteger un grupo amino contra reacciones indeseables durante los procedimientos sintéticos. Comúnmente los grupos N-protectores se describen en Green y Wuts, "Protective Groups In Organic Synthesis," (John Wiley & Sons, Nueva York * 10 (1991 )), el cual se incorpora en la presente por referencia. Los grupos N- protectores comprenden grupos acilo tales como formilo, acetilo, propionilo, pivaloilo, t-butilacetilo, 2-cloroacetilo, 2-bromoacetilo, trifluoroacetilo, tricloroacetilo, ftalilo, o-nitrofenoxiacetilo, a-clorobutirilo, benzoilo, 4-clorobenzoilo, 4-bromobenzoilo, 4-nitrobenzoilo, y similares; los grupos sulfonilo tales como bencensulfonilo, p-toluensulfonilo y similares; los grupos formadores de carbamato tales como benciloxicarbonilo, p-clorobenci loxicarbon ilo, p-metoxi benciloxicarbonilo, p-nitrobenciloxicarbonilo, 2-nitrobenciloxicarbonilo, p- bromobenciloxicarbonílo, 3,4-dimetoxibenciloxicarbonilo, 3,5- 20 dimetoxibenciloxicarbonilo, 2,4-dimetoxibenciloxicarbonilo, 4- metoxibenciloxicarbonilo, 2-nitro-4, 5-di metoxi benciloxicarbonilo, 3,4, 5- trimetoxibenciloxicarbonilo, 1 -(p-bifen i lil)- 1 -meti I etoxicarbonil o, a,a- dimetil-3,5-dimetoxibenciloxicarbonilo, benzhidriloxicarbonilo, t- butiloxicarbonilo, diisopropilmetoxicarbonilo, isopropiloxicarbonilo, etoxicarbonilo, metoxicarbonilo, aliloxicarbonilo, 2,2,2- tricloroetoxicarbonilo, fenoxicarbonilo, 4-nitrofenoxicarbonilo, fluorenil-9- metoxicarbonilo, ciclopentiloxicarbonilo, adamantiloxicarbonilo, ciclohexiloxicarbonilo, feniltiocarbonilo y similares; grupos alquilo tales como bencilo, trifenilmetilo, benciloximetilo y similares; y grupos sililo 5 tales como trimetilsililo y similares. Los grupos N-protectores preferidos son formilo, acetilo, benzoilo, pivaloilo, t-butilacetilo, fenilsulfonailo, bencilo, t-butiloxicarbonilo (Boc) y benciloxicarbonilo (Cbz). El término "derivado de éster activado" como se usa en la presente se refiere a haluros ácidos tal como cloruros ácidos, y esteres activados ^J 10 incluyendo, pero no limitando a, anhídridos derivados de ácido fórmico y acético, anhídridos derivados a partir de haluros de alcoxicarbonilo tal como isobutiloxicarbonilcloruro y similares, esteres derivados de N- hidroxisuccinimida, esteres derivados de N-hidroxiftalimida, esteres derivados de N-hidroxibenzotriazol, esteres derivados de N-hidroxi-5- 15 norbornen-2,3-dicarboxiamida, esteres derivados de 2 ,4,5-triclorofenol , esteres derivados de tiofenol, anhídridos derivados de ácido propilfosfónico y similares. El término "alcanoilo" como se usa en la presente se refiere a R?9C(O)- en donde R19 es un grupo alquilo inferior. 20 El término "alquenilenilo" como se usa en la presente se refiere a un grupo divalente derivado de un hidrocarburo de cadena lineal o ramificada conteniendo de 2 a 10 átomos de carbono y que contiene también por lo menos una doble ligadura carbono-carbono. Ejemplos de alquenileno incluyen -CH = CH-, -CH2CH=CH-, -C(CH3) = C H-, -CH2CH = CHCH2-, y similares. áF¡ Los términos "alcoxi" y "tioalcoxi" como se usan en la presente se refiere a R15O- y R15S-, respectivamente, en donde R15 es un grupo alquilo inferior. El término "alcoxialcoxi" como se usa en la presente se refiere a 5 R22O-R23O- en donde R22 es alquilo inferior como se definió antes y R23 es un grupo alquilenilo. Ejemplos representativos de grupos alcoxialcoxi incluyen metoximetoxi, etoximetoxi, t-butoximetoxi y similares. El término "alcoxialquilo" como se usa en la presente se refiere a un grupo alcoxi anexado a un radical alquilo inferior. 10 El término "alcoxicarbonilo" como se usa en la presente se refiere a R2oC(O)- en donde R2o es un grupo alcoxi. El término "alquilamino" como se usa en la presente se refiere a — NHR16 es un grupo alquilo inferior. El término "alqulaminocarbonilo" como se usa en la presente se 15 refiere a R2-? C(O)- en donde R21 es un grupo alquilamino. El término "alquilenilo" como se usa en la presente se refiere a un grupo divalente derivado de un hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada teniendo de 1 a 10 átomos de carbono por la remoción de dos átomos de hidrógeno, por ejemplo, metileno (-CH2-), 1 ,2-etileno (- 20 CH2CH2-), 1 , 1 -etileno =CH-CH3, 1 , 3-propileno (-CH2CH2CH2-) , 2,2- dimetilpropileno (-CH2C(CH3)2CH2-) , y similares. El término "aminocarbonilo" como se usa en la presente se refiere a -C(O)NH2. El término "arilo" como se usa en la presente se refiere a un sistema 25 de añilo carbocícliclo mono- o bicíclíco comprendiendo 6 a 12 átomos de £ carbono y teniendo uno o dos anillos aromáticos incluyendo, pero no limitando a, fenilo, naftilo, tetrahidronaftilo, indanilo, indenilo y similares. Los grupos arilo pueden ser no substituidos o substituidos con uno, dos o tres substituyentes independientemente seleccionados de alquilo inferior, 5 halo, haloalquilo, haloalcoxi, alcoxi, alcoxicarbonilo, tioalcoxi, amino, alquilamino, dialquilamino, aminocarbonilo, mercapto, nitro, carboxaldehído, carboxi e hidroxi. El término "arilalquilo" como se usa en la presente se refiere a un -^Í grupo arilo como se definió previamente, anexado a un radial alquilo inferior, por ejemplo, bencilo y similares. El término "cicloalquilo" como se usa en la presente se refiere a un sistema de anillo alifático teniendo 3 a 8 átomos de carbono incluyendo, pero no limitando a, ciclopropilo, ciclopentilo, ciciohexilo y similares. El término "cicloalquilalquilo" como se usa en la presente se refiere 15 a un grupo cicloalquilo anudo a aun radical alquilo inferior, incluyendo pero no limitando a ciclohexilmetilo. El término "dialquilamino" como se usa en la presente se refiere a -NR16Ri7 en donde R-|6 y R17 son independientemente seleccionados de grupos alquilo inferior. 20 El término "dialquilaminocarbonilo" como se usa en la presente se refiere a R22C(0)- en donde R22 es un grupo dialquilammo. El término "halo" o "halógeno" como se usa en la presente se refiere a -Cl, -Br, -I o -F. El término "haloalcoxi" como se usa en la presente se refiere a R180- 25 en donde R18 es un grupo haloalquilo. jÉk El término "haloalquilo" como se usa en la presente se refiere a un grupo alquilo inferior en el cual uno o más átomos de hidrógeno son reemplazados por halógeno, por ejemplo, clorometilo, cloroetilo, trifluorometilo y similares. 5 El término "anillo heterocícliclo" o "heterocíclico" o "heterociclo" como se usa en la presente se refiere a cualquier anillo de 3 o 4 miembros conteniendo un heteroátomo seleccionado de oxígeno, nitrógeno y azufre; o un anillo de 5, 6 o 7 miembros conteniendo uno, dos o tres heteroátomos independientemente seleccionados del grupo consistiendo de nitrógeno, 10 oxígeno y azufre o un anillo de 5 miembros conteniendo 4 átomos de nitrógeno; e incluye un anillo de 5, 6 o 7 miembros conteniendo uno, dos o tres átomos de nitrógeno; un átomo de oxígeno; un átomo de azufre; un átomo de nitrógeno y uno de azufre; un átomo de nitrógeno y uno de oxígeno; dos átomos de oxígeno en posiciones no adyacentes; un átomo de oxígeno y uno de azufre en posiciones no adyacentes; dos átomos de azufre en posiciones no adyacentes; dos átomos de azufre en posiciones adyacentes y un átomo de nitrógeno; dos átomos de nitrógeno adyacentes y un átomo de azufre; dos átomos de nitrógeno no adyacentes y un átomo de azufre; dos átomos de nitrógeno no adyacentes y un átomo de oxígeno.

El anillo de 5 miembros tiene 0-2 dobles ligaduras y los anillos de 6 y 7 miembros tienen 0-3 dobles ligaduras. Los heteroátomos de nitrógeno pueden ser opcionalmente cuaternizados. El término "heterocíclico" también incluye grupos bicícliclos en los cuales cualquiera de los anillos heterocícliclos anteriores es fusionado a un anillo de benceno o un anillo de ciciohexano u otro anillo heterocícliclo (por ejemplo, indolilo, quinolilo, isoquinolilo, tetrahidroquinolilo, benzofurilo, bistetrahidrofuranilo o benzotienilo y similares). Los heterocíclicos incluyen: azetidinilo, pirrolilo, pirrolinilo, pirrolidinilo, pirazolilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, imidazolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, piridilo, piperidinilo, homopiperidinilo, pirazinilo, piperazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, tiazolilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, isotiazolidinilo, indolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, benzimidazolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, furilo, tienilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotienilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, pirrolilo, pirimidilo y benzotienilo. Los heterocícliclos también incluyen compuestos de la fórmula en donde X* es -CH2-, -NH- u -O-, Y* es -C(O)- o [-C(R")2-]V en donde R" es hidrógeno o C?-C4-alquilo y v es 1 , 2 o 3 y Z* es -O- o -N H-; tal como 1 ,3-benzodioxolilo, 1 ,4-benzodioxanilo y similares. Los heterocícliclos pueden ser no substituidos o substituidos con uno, dos, tres o cuatro substituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidroxi, halo, oxo (=0), alquilimino (R*N= en donde R* es un grupo alquilo inferior), amino, alquilamino, dialquilamino, alcoxi, alcoxialcoxi, haloalquilo, cicloalquilo, arilo, arilalquilo, -COOH , -SO3H y alquilo inferior. Además, los heterociclos conteniendo nitrógeno pueden ser N-protegidos. El término "hidroxialquilo" como se usa en la presente se refiere a un radical de alquilo inferior al cual se anexa un grupo hidroxi.

El término "alquilo inferior" como se usa en la presente se refiere a un radical alquilo de cadena lineal o ramificada conteniendo de 1 a 6 átomos de carbono incluyendo, pero no limitando a, metilo, etilo, n-propilo, iso-propilo, n-butilo, ¡so-butilo, sec-butilo, t-butilo, n-pentilo, 1 -metílbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 2-metilpentilo, 2,2-dimetilpropilo, n-hexilo y similares. El término "tioalcoxialquilo" como se usa en la presente se refiere a un grupo tioalcoxi anexado a un radical alquilo inferior. El compuesto de la invención de fórmula I puede prepararse como se muestra en los Esquemas l-IV. Como se señala en el Esquema I , los intermediarios 1 y 2 (en donde Pi es un grupo N-protector, por ejemplo, t-butiloxicarbonilo) pueden acoplarse usando métodos y reactivos de acoplamiento de péptido estándares, por ejemplo, reacción de 1 y 2 en la presencia de 1 -hidroxibenzotriazol y una diimida tal como diciclohexilcarbodiimida (DCC) o N-etil-N'-dimetilaminopropilcarbodiimida (EDAC) y similares para dar 3. De manera alternativa, una sal o un derivado de éster activado de intermediario (por ejemplo, el cloruro ácido, preparado mediante reacción del ácido carboxílico con cloruro de tionilo) puede hacerse reaccionar con el intermediario 2. El compuesto 3 puede ser N-desprotegido para dar el compuesto 4 La N-desprotección de 3 en donde Pi (especialmente en donde Pi es t-butiloxicarbonil) es un grupo N-protector lábil ácido puede conducir a la formación de impurezas resultando de la migración del grupo acilo R -Li-C(O)- del grupo amino al grupo hidroxilo. La formación de esta impureza puede minimizarse o eliminarse al realizar la desprotección usando (1 ) ácido trifluoroacético en cloruro de metileno o (2) ácido ff clorhídrico concentrado (desde aproximadamente 2 equivalentes molares a aproximadamente 6 equivalente molares, de preferencia, desde aproximadamente 2 equivalentes molares hasta aproximadamente 4 equivalentes molares) en ácido acético a aproximadamente temperatura ambiente. Un método de N-desprotección preferido comprende hacer reaccionar el compuesto 3 (en donde Pi es t-butiloxicarbonilo) con ácido clorhídrico concentrado (desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 20 equivalentes molares) en acetonitrilo (desde 4¡Ét aproximadamente 2 hasta aproximadamente 10 litros/kilogramo de ?o compuesto 3) a una temperatura desde aproximadamente 0°C hasta aproximadamente 5°C. El compuesto 5 o un derivado de éster activado del mismo puede acoplarse entonces a un compuesto 4 para dar el compuesto de la fórmula I (es decir, 6). Un proceso alternativo es mostrado en el Esquema HA. El compuesto 7 (en donde P2 es un grupo N-protector, por ejemplo, , benciloxicarbonilo) puede acoplarse al compuesto 5, o una sal o un \ derivado de éster activado del mismo (por ejemplo, el cloruro ácido, preparado medíante reacción del ácido carboxílico con cloruro de tionilo), para dar 8. El compuesto 8 puede ser N-desprotegido para dar 9. El compuesto 9 puede ser acoplado con el compuesto 1_, o un derivado de éster activado del mismo, para dar el compuesto de la fórmula I (es decir, 6)- El esquema IIB muestra un proceso alternativo en donde el alcohol de amino N-protegido 7a (P3 es hidrógeno y P4 es un grupo N-protector o tanto P3 y P4 son grupos N-protectores, de preferencia, P3 y P son bencilo) se hace reaccionar con aproximadamente 1 a aproximadamente 1.3 equivalentes molares de ácido carboxílico 5 o una sal o un derivado de éster activado del mismo (por ejemplo, el cloruro ácido, preparado mediante reacción del ácido carboxílico con cloruro de tionilo en acetato 5 de etilo o THF o cloruro de oxalilo en tolueno/DMF y similares) en la presencia desde aproximadamente 1.0 hasta aproximadamente 4.0 equivalentes molares (de preferencia, desde aproximadamente 2.5 hasta aproximadamente 3.5 equivalentes molares) de una base de amina orgánica (por ejemplo, imidazol, 1 -metilimidazol, 2-metilimidazol, 2- 10 isopropilimidazol, 4-metilimidazol, 4-nitroimidazol, piridina, N, N- dimetilaminopiridina, 1 ,2,4-triazol, pirrol, 3-metilpirrol, trietilamina o N- metilmorfolina y similares) o desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 20 equivalentes molares de una base inorgánica (por ejemplo, carbonato de sodio o bicarbonato de sodio y similares) en un solvente inerte (por ejemplo, acetato de etilo, dimetilformamida, TH F, acetonitrilo, acetato de isopropilo o tolueno y similares) a una temperatura desde aproximadamente 0°C hasta aproximadamente 50°C para proporcionar el compuesto 8a. Las bases de amina orgánica incl uyen imidazol y 1 ,2,4-triazol. 20 LA N-desbencilación de 8a (por ejemplo, usando hidrógeno y un catalizador de hidrogenación o Pd/C y una sal de ácido fórmico (por ejemplo, formato de amonio y similares) o Pd/C y ácido fórmico y similares) proporciona 9. El compuesto 9 puede ser convenientemente purificado mediante cristalización con un ácido carboxílico orgánico (por ejemplo, ácido S-piroglutámico, ácido succínico o ácido fumárico y similares). Un ácido carboxílico preferido es ácido S-piroglutámico. El compuesto 9 (o una sal de ácido carboxílico orgánico del compuesto 9) se hace reaccionar con desde aproximadamente 1 .0 hasta aproximadamente 1 .3 equivalentes molares de ácido carboxílico __ o una sal o un derivado de éster activado del mismo (por ejemplo, el cloruro ácido) en la presencia de (1 ) desde aproximadamente 4 hasta aproximadamente 8 equivalentes molares (de preferencia, desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 7 equivalentes molares) de una base inorgánica (por ejemplo, NaHCO3, KHCO3, K2CO3, NaOH o KOH y similares) en un solvente inerte (por ejemplo, 1 : 1 acetato de etilo/agua o acetato de isopropilo/agua o tolueno/agua o THF/agua y similares) a aproximadamente temperatura ambiente o (2) desde aproximadamente 1 .0 hasta aproximadamente 4.0 equivalentes molares (de preferencia, desde aproximadamente 2.5 hasta aproximadamente 3.5 equivalentes molares) de una base de amina orgánica (por ejemplo, ¡midazol, 1 -metilimidazol, 2-metilimidazol, 2-isoprop¡limidazol, 4-metilímidazol, 4-nitroimidazol, piridina, N, N-dimetilaminopiridina, 1 ,2,4-triazol, pirrol, 3-metilpirrol, trietilamina o N-metilmorfolina y similares) en un solvente inerte (por ejemplo, acetato de etilo, acetato de isopropilo, TH F, tolueno, acetonitrilo, dimetilformamida y similares) a una temperatura desde aproximadamente 0°C hasta aproximadamente 50°C para proporcionar el compuesto 6. En una modalidad preferida de la invención (mostrada en el Esquema lll), el compuesto intermediario 5 tiene la fórmula del compuesto _____ (R3 es como se definió para el compuesto de fórmula I y es de preferencia isopropilo). El compuesto __0 puede ser preparado en una vairedad de formas como se muestra en el Esquema l l l . En un método, el aminácido _M_ (ya sea como el ácido carboxílico libre o como el éster de ácido carboxílico (es decir, éster de alquilo inferior)) es convertido a 5 carbamato 12. (R" es fenilo, fenilo substituido con alquilo inferior, fenilo substituido con halo, fenilo substituido con nitro, trifiuorometilfenilo y similares) mediante reacción con el éster de cloroformato apropiado y similares. La reacción de carbamato 1_2 con desde aproximadamente 1 .0 hasta *-^W * 10 aproximadamente 1 .5 equivalentes molares de la amina 1_3 o una sal de adición de ácido de la misma (Q es un grupo que sale, por ejemplo, Cl, Br o I, o un sulfonato tal como metanosulfonato, triflato, p-toluensulfonato, bencensulfonato y similares) en un solvente inerte (por ejemplo, THF, metil t-butil éter, dimetoxietano, THF/agua, dimetoxietano/agua, tolueno o heptano y similares, en la presencia de una base (por ejemplo, LiOH , NaOH , Li2C03, Na2CO3, fenóxido de litio o fenóxido de sodio y similares) en la cantidad desde aproximadamente 2.5 hasta aproximadamente 3.5 equivalentes molares, proporciona urea 14. La urea 14 puede aislarse y hacerse reaccionar adicionalmente o puede convertirse in situ a urea cíclicla 1_0 mediante reacción en un solvente inerte (por ejemplo, TH F, dimetoxietano, metil t-butil éter, tolueno o heptano y similares) con una base (por ejemplo, t-butóxido de potasio, hidruro de sodio, hidruro de potasio o dimetilaminopiridina y similares) en la cantidad desde aproximadamente 2.0 hasta aproximadamente 5.0 equivalentes molares.

Si el éster de aminácido de ___ fue el material de inicio, el éster es hidrolizado entonces para proporcionar el ácido carboxílico 1_0. De manera alternativa, el aminoácido 1_1 (ya sea como el ácido carboxílico libre o como el éster de ácido carboxílico) es convertido a urea 4 por reacción con desde aproximadamente 1 .0 hasta aproximadamente 1 .5 equivalentes molares de isocianato 1_5 (Q es un grupo que sale, por ejemplo, Cl, Br, o I, o un sulfonato tal como metanosulfonato, triflato, p-toluensulfonato, bencensulfonato y similares) en un solvente inerte (por ejemplo, TH F, dimetoxietano, metil t-butil éter, tolueno o heptano y similares) en la presencia de una base. Todavía en otra alternativa, el aminoácido _M (ya sea como el ácido carboxílico libre o como el éster de ácido carboxílico) es convertido a diamina 16. mediante reacción con desde aproximadamente 1 .0 hasta aproximadamente 1 .5 equivalentes molares de amina 1 3 o un derivado N-protegido de la misma (Q es un grupo que sale, por ejemplo, Cl, Br o I , o un sulfonato tal como metanosulfonato, triflato, p-toluensulfonato, bencensulfonato y similares) en un solvente inerte (por ejemplo, TH F, dimetoxietano, metil t-butil éter, tolueno o heptano y similares) en la presencia de una base (por ejemplo, NaH o t-butóxido de potasio y similares) en la cantidad desde aproximadamente 1 .0 hasta aproximadamente 4.0 equivalentes molares. La N-desprotección es requerida si el derivado N-protegido de 1_3 fue usado. La reacción de diamina 16 con un equivalente de carbonilo 17 (por ejemplo, fosgeno, carbonildiímidazol y similares, en donde Q' y Q" son grupos que salen tal como Cl, Br, I , -O-alquilo inferior, -O-arilo o imidazolilo y similares) en un f solvente inerte (por ejemplo, THF, dimetoxietano, metil t-butil éter, tolueno o heptano y similares) en la presencia de una base (por ejemplo, NaH o t- butóxido de potasio y similares) en la cantidad desde aproximadamente 2.0 hasta aproximadamente 4.0 equivalentes molares, proporciona urea cíclica 5 1_0. Si el éster de aminoácido de 1_1 fue el material de inicio, el éster es hidrolizado entonces para proporcionar el ácido carboxílico 1_0. Todavía en otra alternativa mostrada en el Esquema IV, el compuesto 1_1 (ya sea como el ácido carboxílico libre o como el éster de ácido carboxílico (es decir, éster de alquilo inferior)) se hace reaccionar ^ 10 con acrilonitrilo de acuerdo a J . Am. Che. Soc. 72, 2599 (1950) para dar aminonitrilo 18.. Alternativamente, el acrilonitrilo puede ser reemplazado con 3-cloropropionitrilo para proporcionar 1_3. La N-protección de aminonitrilo 1_8 como el carbamato (R30 es alquilo inferior o fenilo o haloalquilo (por ejemplo, 2-cloroetiIo, 2-bromoetilo y similares) y similares) usando condiciones estándares (por ejemplo, reacción de la amina con el éster de cloroformato apropiado (CIC(O)OR30 en donde R30 es alquilo inferior, fenilo, haloalquilo y similares) puro o en un solvente inerte (por ejemplo, agua, TH F y similares) en la presencia de una base inorgánica (por ejemplo, NaOH, KOH, K2C03 y similares) o una base orgánica (por ejemplo, una alquilamina o dialquilamina y similares) y similares) proporciona el compuesto 1_9. La hidrogenación de 1_9 en la presencia de un catalizador (por ejemplo, aleación Ni-AI (básica) o níquel de Raney (neutral o básico) o Pt02 (ácido) y similares) en un solvente inerte (por ejemplo, agua o metanol o etanol o TH F y similares) proporciona urea cíclica 10. En un proceso preferido, el compuesto 19 es hidrogenado en la presencia de un catalizador de aleación Ni-AI en un solvente inerte (por • ejemplo, agua o metanol o etanol o TH F y similares) en la presencia de una base (por ejemplo, KOH o NaOH o LiOH o una base de amina orgánica y similares) en la cantidad desde aproximadamente 1.1 hasta 5 aproximadamente 5 equivalentes molares para proporcionar urea cíclica 10. Si el éster de aminoácido de _____ fue el material de inicio, el éster es hidrolizado entonces para proporcionar el ácido carboxílico 1_0. De manera alternativa, la hidrogenación del compuesto 1_8 (como se describió antes para el compuesto 1_9) proporciona una diamina 1_6 la cual ^T 10 puede convertirse al compuesto 10 como se describió previamente. Si el éster de aminoácido de ______ fue el material de inicio, el éster es hidrolizado entonces para proporcionar el ácido carboxílico 1_0. ? 3 Esquema HA Esquema IIB 7a P3 = P4 = bencilo 8a Esquema lll Esquema IV F Los intermediarios clave para la preparación de los compuestos de la invención incluyen compuestos de la fórmula ll l o una sal o un derivado de éster activado de los mismos: 1U inferior, hidroxialquilo o cicloalquilalquilo; y i) en donde n es 1 , 2 o 3, m es 1 , 2 o 3, m' es 1 o 2, X es O, S o N H, Y es -CH2-, -O-, -S- o -N(R6)- en donde R6 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo o arilalquilo, Y" es -CH2- o -N(R6-)- en donde R6- es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo o arilalquilo, Y' es -N(R6-)- en donde R6- es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo o arilalquilo, y Z es O, S o NH . Los compuestos preferidos son compuestos de la fórmula ll l o un derivado de éster activado de los mismos, en donde R3 es alquilo inferior y e) F 10 en donde X, Y, Y', Y", Z, R6-, n, m y m' son como se definió antes. Los compuestos más preferidos son compuestos de la fórmula l l l o un derivado de éster activado de los mismos, en donde R3 es alquilo inferior y Rs es 15 en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -NH- b) en donde m es 1 o 2, X es O, Y es -CH2- y Z es O, # en donde m' es 1 , X es O, Z es O y Y es -NH-, en donde m' es 1 , X es O, Y" es -NH- y Y' es -N H- o en donde X es O y R6- es hidrógeno. 20 Compuestos aún más preferidos son compuestos de la fórmula ll l o un derivado de éster activado del mismo, en donde R3 es ¡sopropilo y Rs es en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -NH- en donde m es 1 o 2, X es O, Y es -CH2- y Z es O, en donde m' es 1 , X es O, Z es O y Y es -N H-, en donde m' es 1 , X es O, Y" es -N H- y Y' es -N H- o en donde X es O y R6- es hidrógeno.

Los compuestos más preferidos son compuestos de la fórmula l l l o un derivado de éster activado del mismo, en donde R3 es isopropilo y R5 es en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -NH-, en donde m' es 1 , X es O, Z es O y Y es -N H-, en donde m' es 1 , X es O, Y" es -NH- y Y' es -NH- o en donde X es O y R6- es hidrógeno.

Los compuestos más altamente preferidos son compuestos de la fórmula lll o un derivado de éster activado de los mismos, en donde R3 es isopropilo y R5 es en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -NH-. Los intermediarios clave para la preparación de los compuestos de la invención también incluyen compuestos de la fórmula IV: o una sal de los mismos, en donde P3 y P4 son independientemente seleccionados del hidrógeno o un grupo N-protector; y R2 son seleccionados independientemente del grupo que consiste de alquilo inferior, cicloalquilalquilo y arilalquilo; R3 es alquilo inferior, hidroxialquilo o cicloalquilalquilo; y Rs es a) en donde n es 1 , 2 o 3, m es 1 , 2 o 3, m' es 1 o 2, X es O, S o N H, Y es -CH2-, -O-, -S- o -N(R6)- en donde R6 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo o arilalquilo, Y" es -CH2- o -N(R6 )- en donde R6« es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo o arilalquilo, Y' es -N(R6 )- en donde R6- es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo o arilalquilo, y Z es O, S o N H . Los compuestos preferidos son compuestos de la fórmula IV, en donde P3 y P4 son hidrógeno o bencilo, Ri y R2 son arilalquilo, R3 es alquilo inferior y R5 es a) en donde X, Y, Y', Y", Z, R6-, n, m y m' son definidos como antes. Los compuestos más preferidos son compuestos de la fórmula IV en donde Ri y R2 son bencilo o Ri es bencilo y R2 es alquilo inferior, R3 es alquilo inferior y R5 es en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -NH- en donde m es 1 o 2, X es O, Y es -CH2- y Z es O, en donde m' es 1 , X es O, Z es O y Y es -NH- en donde m' es 1, X es O, Y" es -NH- y Y' es -NH- o en donde X es O y R6- es hidrógeno. Compuestos aún más preferidos son compuestos de la fórmula IV, en donde Ri y R2 son bencilo o Ri es bencilo y R2 es isopropilo, R3 es alquilo inferior y Rs es en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -NH-, en donde m es 1 o 2, X es O, Y es -CH2- y Z es O, en donde m' es 1 , X es O, Z es O y Y es -N H-, en donde m' es 1 , X es O, Y" es -NH- y Y' es -NH- o en donde x es O y R6- es hidrógeno. Los compuestos más preferidos son compuestos de la fórmula IV, en donde Ri y R2 son bencilo o Ri es bencilo y R2 es isopropilo, R3 es alquilo inferior y R5 es en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -N H-, b) en donde m' es 1 , X es O, Z es O y Y es -NH- en donde m' es 1 , X es O, Y" es -NH- y Y' es -NH- o en donde X es O y R6- es hidrógeno. Los compuestos más altamente preferidos son compuestos de la fórmula IV, en donde Ri y R2 son bencilo o Ri es bencilo y R2 es isopropilo, R3 es alquilo inferior y Rs es en donde n es 1 o 2, X es O o S y Y es -CH2 o -N H-. Las sales preferidas del compuesto de la fórmula IV son sales de ácido carboxílico orgánico, especialmente la sal de ácido (S)-piroglutámico.

Los siguientes ejemplos servirán para ilustrar la preparación de los novedosos compuestos de la invención.

Eiemplo 1 (2S. 3S. 5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacet¡namino-3-hidroxi-5-r2S-(1 - imidazol idi n-2-onil)-3-metil-butanoillamino-1 .6-dif enilhexano A. N , N-dibencil-(L)-fenilalanin bencil éster Una solución conteniendo L-fenilalanina (161 kg, 975 moles), carbonato de potasio (445 kg, 3220 moles), agua (675 I), etanol (340 I), y cloruro de bencilo (415 kg, 3275 moles) se calentó a 90±15°C durante 10-24 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 60°C y la capa acuosa inferior fue removida. «El heptano (850 I) y agua (385 I) fueron adicionados a los orgánicos, se agitaron y las capas se separaron. Los orgánicos fueron lavados una vez con una mezcla agua/metanol (150 1/1 50 I). Los orgánicos fueron extraídos entonces para dar el producto deseado como un aceite, el cual se llevó adelante en el siguiente paso sin purificación. I R (puro) 3090, 3050, 3030, 1730, 1495, 1540, 1 160 cm" 1 , 1 H N MR (300 M Hz, CDCI3) d 7.5-7.0 (m, 20H), 5.3 (d, 1 H , J = 13.5 Hz) , 5.2 (d, 1 H , J = 13.5 Hz), 4.0 (d, 2H , J = 15 Hz), 3.8 (t, 2H, J = 8.4 Hz) , 3 6 (d, 2H , J = Hz), 3.2 (dd, 1 H, J = 8.4, 14.4 Hz), 13C N MR (300 M Hz, CDCI3) d 172.0, 139.2, 138.0, 135.98.2, 128.1 , 128.1 , 126.9, 126.2, 66.0, 62.3, 54.3, 35.6. [a]D -79° (c = 0.9, DMF).

B. (4S)-4-(N, N-dibencilamino)-3-oxo-5-fenil-pentanonitrilo Una solución conteniendo el producto del ejemplo 1 A (es decir, éster de bencilo) (aproximadamente 0.45 moles) en 520 ml de tetrahidrofurano y 420 ml de acetonitrilo fue enfriada a -40°C bajo nitrógeno. Una segunda solución conteniendo amida de sodio (48.7 g, 1 .25 moles) en 850 ml de tetrahidrofurano se enfrió a -40°C. A la solución de amida de sodio fueron añadidos lentamente 75 ml de acetonitrilo y la solución resultante se agitó a -40°C durante más de 15 minutos. La solución de amida de sodio/acetonitrilo fue adicionada entonces lentamente a la solución de éster de bencilo a -40°C. La solución combinada se agitó a -40°C durante una hora y entonces se extinguió con 1150 ml de una solución de ácido cítrico al 25% (p/v). La pasta resultantes se calentó a temperatura ambiente y los orgánicos se separaron. Los orgánicos se lavaron entonces con 350 ml de una solución de cloruro de sodio al 25% (p/v), entonces se diluyó con 900 ml de heptano. Los orgánicos fueron lavados entonces tres veces con 900 ml de una solución de cloruro de sodio al 5% (p/v), dos veces con 900 ml de una solución de agua metanólica al 10%, una vez con 900 ml de una solución de agua metanólica al 15%, y entonces una vez con 900 ml de una solución de agua metanólica al 20%. Los orgánicos se extrajeron y el material resultante se disolvió en 700 ml de etanol caliente. Sobre el enfriamiento a temperatura ambiente, el producto deseado se precipitó. La filtración dio el producto deseado en un rendimiento de 59% de la L-fenilalanina. I R (CHCI3) 3090, 3050, 3030, 2250, 1735, 1600, 1490, 1450, 1370, 1300, 1215 ctrT1 , 1 H NM R (CDCI3) d 7.3 (m, 15H) , 3.9 (d, 1 H , J = 19.5 Hz) , 3.8 (d, 2H , J = 13.5 Hz), 3.6 (d, 2H, J = 13.5 Hz) , 3.5 (dd , 1 H, J = 4.0, 10.5 Hz) , 3.2 (dd, 1 H, J = 10.5, 13.5 Hz), 3.0 (dd, 1 H , J = 4.0, 13.5 Hz), 3.0 (d, 1 H , J = 19.5 Hz), 13C NMR (300MHz, CDCI3) d 197.0, 138.4, 138.0, 129.5, 129.0, 128.8, 128.6, 127.8, 126.4, 68.6, 54.8, 30.0, 28.4. [a]D -95° (c = 0.5, DMF).

C. (5S)-2-amino-5-(N . N-dibencilamino)-4-oxo-1 , 6-dif en ilhex-2-eno. A una solución a -5°C del producto de nitrilo del Ejemplo 1 B (90 kg, 244 moles) en tetrahidrofurano (288 I), se adicionó cloruro de bencilmagnesio (378 kg, 2M en THF, 708 moles). La solución se calentó a temperatura ambiente y se agitó hasta que el análisis no mostró material de inicio. La solución se volvió a enfriar entonces a 5°C y se transfirió lentamente a una solución de ácido cítrico al 15% (465 kg). Tetrahidrofurano adicional (85 I) se usó para enjuagar el recipiente original y el enjuague se adicionó al recipiente de extinción de ácido cítrico. Los orgánicos se separaron y lavaron con cloruro de sodio al 10% (235 kg) y se extrajeron a un sólido. El producto se extrajo nuevamente de etanol (289 I) y se disolvió en etanol a 80°C (581 I). Después de enfriamiento a temperatura ambiente y agitación durante 12 horas, el producto resultante se filtró y secó en un horno de vacío a 30°C para dar aproximadamente 95 kg del producto deseado. Pf 101 -102°C, I R (CDCI3) 3630, 3500, 31 10, 3060, 3030, 2230, 1620, 1595, 1520, 1495, 1450 cnT1 , 1 H N MR (300 MHZ, CDRCI3) d 9.8 (br s, 1 H), 7.2 (m, 20H), 5.1 (s, 1 H), 4.9 (br s, 1 H), 3.8 (d, 2H , J = 14.7 Hz), 3.6 (d, 2H , J = 14.7 Hz), 3.5 (m , 3H), 3.2 (dd, 1 H , J = 7.5, 14.4 Hz), 3.0 (dd, 1 H , J = 6.6, 14.4 Hz) , 13C N M R (CDCI3) d 198.0, 162.8, 140.2, 140.1 , 136.0, 129.5, 129.3, 128.9, 128.7, 128. 1 , 128.0, 127.3, 126.7, 125.6, 96.9, 66.5, 54.3, 42.3, 32.4. [a]D -147° (c = 0.5, DMF).

D. (2S. 3S. 5S)-5-amino-2-(N. N-dibenc¡lamino)-3-h¡droxi-1 ,6-difenilhexano i) Una suspensión de borohidruro de sodio (6.6 kg, 175 moles) en tetrahidrofurano (157 I) se enfrió a menos de -10±5°C. El ácido metanosulfónico (41 .6 kg, 433 moles) se adicionó lentamente y la temperatura se mantuvo debajo de 0°C durante la adición. Una vez que la adición fue completa, una solución de agua (6 I, 333 moles), el producto del Ejemplo 1 C (20 kg, 43 moles) y tetrahidrofurano (61 I) se adicionó lentamente mientras que se mantuvo la temperatura debajo de 0°C durante la adición. La mezcla se agitó durante no menos de 19 h a 0±5°C. ii) A un matraz por separado se adicionó borohidruro de sodio (6.6 kg, 175 moles) y tetrahidrofurano (157 I). Después de enfriar a -5±5°C, se adicionó ácido trifluoroacético (24.8 kg, 218 moles) mientras que se mantuvo la temperatura debajo de 15°C. La solución se agitó 30 min a 15±5°C y entonces se adicionó a la mezcla de reacción resultando del paso i, manteniendo la temperatura a menos de 20°C. Esta se agitó a 20±5°C hasta que la reacción se completó. La solución se enfrió entonces a 10±5°C y se extinguió con NaOH 3N (195 kg). Después de agitar con ter-butil metil éter (162 I), la capa orgánica se separó y se lavó una vez con NaOH 0.5N (200 kg), una vez con cloruro de amonio acuoso al 20% p/v (195 kg), y dos veces con cloruro de sodio acuoso al 25% (160 kg). Los orgánicos se extrajeron para dar el producto deseado como un aceite, el cual se usó directamente en el siguiente paso.

IR (CHCI3) 3510, 3400, 3110, 3060, 3030, 1630, 1H NMR (300 MHz, CDCI3) d 7.2 (m, 20H), 4.1 (d, 2H, J = 13.5 Hz), 3.65 (m, 1H), 3.5 (d, 2H, J = 13.5 Hz), 3.1 (m, 2H), 2.8 (m, 1H), 2.65 (m, 3H), 1.55 (m, 1H), 1.30 (m, 1H), 13C NMR (300 MHz, CDCI3) d 140.8, 140.1, 138.2, 129.4, 129.4, 128.6, 128.4, 128.3, 128.2, 126.8, 126.3, 125.7, 72.0, 63.6, 54.9, 53.3, 46.2, 40.1, 30.2.

E. (2S.3S,5S)-2-(N.N-dibencilamino)-3-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonilamino)- 1,6-difenilhexano A una solución del [2S,3S,5S]-2-N,N-dibencilamino-3-hidroxi-5-amino-1,6-difenilhexano (aproximadamente 105 kg, 226 moles) en MTBE (1096 I), se adicionó anhídrido de BOC (65 kg, 373 moles) y carbonato de potasio al 10% (550 kg). La mezcla se agitó hasta que la reacción se completó (aproximadamente 1 hora). La capa inferior se removió y los orgánicos se lavaron con agua (665 I). La solución se extrajo entonces para dar el producto deseado como un aceite. 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 1.40 (s, 9H), 1.58 (s, 2H), 2.45-2.85 (m, 4H), 3.05 (m, 1H), 3.38 (d, 2H), 3.6 (m, 1H), 3.79 (m, 1H), 3.87 (d, 2H), 4.35 (s, 1H), 4.85 (s, amplio, 1H), 7.0-7.38 (m, 20 H).

F-1. (2S,3S,5S)-2-amino-3-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonilamino)-116- difenilhexano A una solución agitada de [2S,3S,5S]-2-N,N-dibencilamino-3-hidroxi-5-t-butiloxicarbonilamino-1,6-difenilhexano (12 g, 21.3 mmol) en metanol (350 ml) se cargó con formato de amonio (8.05 g, 128 mmol, 6.0 eq) y paladio en carbono al 10% (2.4 g). La solución se agitó bajo nitrógeno a 60°C durante tres horas y entonces a 75°C durante 12 horas. Una cantidad adicional de formato de amonio (6 g) y paladio en carbono al 10% (1 .5 g) se adicionó así como 1 ml de ácido acético glacial. La reacción se condujo a la terminación dentro de 2 horas a una temperatura de reflujo. La mezcla de reacción se enfrió entonces a temperatura ambiente y entonces se filtró a través de un lecho de celita. La torta de filtración se lavó con metanol (75 ml) y los filtrados combinados fueron concentrados bajo presión reducida. El residuo se tomó en NaOH 1 N (300 ml) y se extrajo en cloruro de metileno (2 X 200 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (250 ml) y se secaron sobre sulfato de sodio. La concentración de la solución bajo presión reducida proporcionó el producto deseado como un aceite de color ligero, el cual lentamente se cristalizó sobre sedimentación (5 g). Purificación adicional del producto podría lograrse mediante cromatografía instantánea (gel de sílice, 5% de metanol en cloruro de metileno) . 300 MHz 1 H N M R (CDCI3) d 1 .42 (s, 9H), 1 .58 (m, 1 H), 1 .70 (m, 1 H), 2.20 (s, amplio, 2H), 2.52 (m, 1 H) , 2.76-2.95 (m, 4H), 3.50 (m , 1 H), 3.95 (m, 1 H), 4.80 (d, amplio, 1 H), 7.1 5-7.30 (m, 10H).

F-2. Sal de succinato de f2S,3S.5Sl-2-amino-3-hidroxi-5-t- butiloxicarbonilamino-1 ,6-d ifenil hexano A una solución de [2S,3S,5S]-2-N , N-dibenciIamino-3-hidrox¡-5-t-butiloxicarbonilamino- 1 ,6-difenilhexano (aproximadamente 127 kg , 225 moles) en metanol (437 I), se adicionó a una pasta metanólica (285 I) de paladio en carbono al 5% (24 kg). A esto se adicionó una solución de formato de amonio (84 kg, 1332 moles) en metanol (361 I). La solución se calentó a 75°C durante 6-12 horas y entonces se enfrió a temperatura ambiente. Los sólidos fueron filtrados a partir de la mezcla de reacción usando un filtro recubierto con auxiliar de filtración (Celita) y el metanol se extrajo de la mezcla de reacción usando calor y vacío (hasta 70°C). El residuo se disolvió en acetato de isopropilo (4400 kg) con calor (40°C) y entonces se lavó con una solución de carbonato de sodio al 10% (725 kg), y finalmente con agua (665 I). Ambos lavados fueron realizados a 40°C para mantener el producto en solución . El solvente se removió bajo vacío con calor (hasta 70°C). Se adicionó entonces alcohol isopropílico (475 I) y se extrajo para remover los solventes residuales. El isopropanol (1200 I) se adicionó al residuo y se agitó hasta que estuvo homogéneo. A esta solución se adicionó una solución de ácido succínico (15-40 kg) en isopropanol (1200 I). La solución enchaquetada se calentó a 70°C para disolver todos los sólidos y entonces se permitió que se enfriara lentamente a temperatura ambiente y agitó durante 6 horas. La solución se filtró entonces para dar el producto deseado como un sólido blanco (55-80 kg). ef: 145-146°C. 1 H NMR: (Me2SO-d6, 300 MHz) d 0.97 (d, 3H , I PA), 1 .20 (s, 9H), 1 .57 (t, 2H) , 2.20 (s, 2H, ácido succínico), 2.55 (m, 2H), 2.66 (m, 2 H) , 2.98 (m, 1 H), 3.42 (m, 1 H), 3.70 (m . 1 H) , 3.72 (m, 1 H , I PA), 6.60 (d, 1 H , amida N H), 7.0-7.3 (m, 10H). 1 H NMR: (CD3OD, 300 MHz) d 1.1 1 (d, 3H; J = 7 Hz, IPA), 1 .29 (s, 9H), 1 .70 (m, 2H), 2.47 (s, 2H , ácido succínico), 2.65 (m, 2H), 2.85 (m, 2H), 3.22 (m, 1 H), 3.64 (m, 1 H), 3.84 (m, 1 H), 7.05-7.35 (m, 10H).

G. 2,6-dimetilfenoxi acetato de etilo. A una solución de 2,6-dimetilfenol (8.0 g, 66 mmoles) en dioxano (600 ml) se adicionó bromoacetato de etilo (18.2 ml, 164 mmoles) y carbonato de cesio (58 g, 176 mmoles). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 18 h, se enfrió a temperatura ambiente, se filtró y concentró a vacío. La purificación mediante cromatografía de columna en gel de sílice (5% a 20% de éter en hexano) proporcionó el compuesto deseado (80%). 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 1 .35 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 2.30 (s, 6H), 4.31 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 4.40 (s, 2H), 7.0 (m, 3H).

H. Acido 2,6-dimetilfenoxi acético A una solución del compuesto del Ejemplo 1 G (5.15 g, 24.7 mmoles) en metanol (170 ml) y agua (56 ml) se adicionaron 5.3 g de hidróxido de litio a 0°C, la solución se agitó durante 1 .5 h a RT (temperatura ambiente) y se concentró a vacío. El residuo se acidificó con HCl 0.5 M y se extrajo con acetato de etilo (300 ml). La capa orgánica se secó y concentró para dar un sólido blanco (4.05 g, 91 %). 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 2.30 (s, 6H), 4.48 (s, 2H), 7.0 (m, 3H) .

I . (2S, 3S. 5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(t- butiloxicarbonilamino)-1 ,6-difenilhexano.

El acoplamiento de la amina del Ejemplo 1 F con el ácido del Ejemplo 1 H usando el procedimiento de acoplamiento EDAC estándar proporcionó el compuesto deseado (78%). 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 1 .40 (s, 9H) , 1 .65 (m, 3H), 2.18 (s, 6H), 2.78 (m, 2H), 2.98 (d, J = 9 Hz, 2H), 3.75 (m, 1 H), 3.90 (m, 1 H), 4.15 (m, 1 H), 4.20 (s, 2H), 4.60 (m, 1 H), 7.0 (m, 3H) , 7.25 (m, 10H). Espectro de masa: (M = H)+ = 547.

J. 2-N-(bencilox¡carbonil)amino-acetaldehído A una solución de 1 .45 ml de DMSO en 20 ml de CH2CI2 a -78°C se adicionó en forma de gotas 1.34 ml de cloruro de oxalilo. Después de 1 5 minutos a -78°C, una solución de N-Cbz-aminoetanol en 40 ml de CH2CI2 se adicionó. Después de 15 minutos a -78°C y 2 minutos a 0°C, la solución se enfrió a -78°C y se adicionó trietilamina (6.14 ml) en forma de gotas. La solución se agitó a -78°C durante 30 minutos y se vació en 50 ml de ácido cítrico acuoso al 10% frío y se extrajo con éter (150 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera y se secó con Na2S0 anhidro; se filtró y se concentró a vacío. La purificación del producto crudo mediante cromatografía de columna de gel de sílice (10% EtOAc/CH2CI2) proporcionó el compuesto deseado (42%). 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 4.17 (d, J = 6 Hz, 2H), 5.15 (s, 2H), 5.40 (br s, 1 H), 7.36 (m, 5H), 9.66 (s, 1 H). Espectro de masa: (M+NH4)+ = 21 1 .

K. N-(benciloxicarbonilamino)-etil valina metil éster A una solución del aldehido del Ejemplo 1 J (0.829 g, 4.29 mmoles) en 17 ml de metanol se adicionó hidrocloruro de valina metil éster (0.72 g , 4.29 mmoles), acetato de sodio (0.7 g, 8.58 mmoles), y cianoborohidruro de sodio (0.54 g, 8.58 mmoles. La mezcla se agitó a RT durante la noche y el solvente se evaporó a vacío. El residuo se tomó en acetato de etilo (100 mi) y se lavó con NaHC03 saturado (10 ml) y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera y se secó con sulfato de sodio anhidro, se filtró y concentró a vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice (20% EtOAc/CH2CI2) para proporcionar el compuesto deseado (60%). 300 MHz 1H NM R (CDCI3) d 0.91 (d, J = 3 Hz, 3H), 0.94 (d, J = 3 Hz, 3H), 1 .90 (m, 1 H), 2.55 (m, 1 H), 2.80 (m, 1 H), 2.98 (d, J = 6 Hz, 1 H), 3.20 (m, 1 H), 3.30 (m, 1 H) , 3.71 (s, 3H), 5.10 (s, 2H) , 5.27 (br s, 1 H), 7.37 (m, 5H). Espectro de masa: (M+H)+ = 309.

L. Metil éster de ácido 2S-(1 -imidazolidin-2-onil)-3-metil butanoico El Cbz-protector del compuesto en el Ejemplo 1 K se removió mediante hidrogenólisis y el producto crudo se trató con un equivalente de 1 , 1 -carbonildiimidazol en CH2CI2 para proporcionar el compuesto deseado (64%), 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.95 (d, J = 7.5 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 7.5 Hz, 3H), 2.15 (m, 1 H), 3.47 (m, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.73 (m, 1 H) , 4.23 (d , J = 10.5 Hz, 1 H), 4.81 (br s, 1 H), espectro de masa: (M + H)+ = 201 .

M. Acido 2S-(1 -imidazolidin-2-onil)-3-metil butanoico Una solución del compuesto del Ejemplo 1 L (151 mg, 0.75 mmoles) en 2.5 ml de agua y 5 ml de dioxano se adicionó a monohidrato de hidróxido de litio a 0°C (2.0 eq.). La solución se agitó a 0°C durante 1 .5 h y RT durante 1 H. La acidificación con HCl 1N, extracción con EtOAc (100 ml + 2 x 50 ml), secado con sulfato de sodio y evaporación de la solución filtrada a vacío, proporcionó el compuesto deseado (88%). 300 MHz 1H NMR (DMSO-d6) d 0.85 (d, J = 12 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 12 Hz, 3H), 2.05 (m, 1H), 3.25 (m, 2H), 3.30 (m, 1H), 3.50 (m, 1H), 3.90 (d, J = 15 Hz, 1H), 6.40 (br s, 1H), 12.60 (br s, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 187.

N. (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilf enoxiacetíl)amino-3-hidrox¡-5-amino- 1.6- difenilhexano A 4.5 g del compuesto del Ejemplo 11 se adicionaron 40 ml de cada uno de CH2CI2 y ácido trifluoroacético. La solución se dejó a RT durante 1 h. La concentración de la solución a vacío proporcionó el compuesto deseado (100%). 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 1.48 (m, 1H), 1.62 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 2.24 (s, 6H), 2.50 (m, 1H), 2.80 (m, 1H), 3.0-3.10 (m, 4H), 3.90 (d, J = 10 Hz, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.26 (Abq, J = 13.5 Hz, 2H), 7.0 (m, 3H), 7.10 (m, 2H), 7.30 (m, 7H), /.41 (d, J = 10 Hz, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 447.

O. (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-f2S-(1- imidazolid¡n-2-onil)-3-metil-butano¡pamino-1 , 6-dif eni I hexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 1N con el ácido del Ejemplo 1M usando el procedimiento de acoplamiento estándar [1-(3-d¡metilaminopropil)-3-etilcarbodiimida en DMF] proporcionó el compuesto deseado. (80%). 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.83 (d, J = 6 Hz, 3H), 0.86 (d, J = 6 Hz, 3H), 1.75 (m, 2H), 2.16 (m, 1H), 2.18 (s, 6H), 2.76 (m, 2H), 2.97 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 3.14 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 3.70 (d, J = 1 - Hz, 1 H), 3.75 (m, 1H), 4.20 (m, 4H), 4.50 (br s, 1H), 6.70 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.0 (m, 3H), 7.25 (m, 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 615.

Eiemplo 2 (2S-3S-5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacet¡namino-3-hidroxi-5-(2S-(1-tetrah¡dro- pirimid-2-onil)-3-metil butanoillamino-l ,6-difenilhexano A. Acido 2S-(1-tetrahidro-pirimid-2-on¡l)-3-metil butanoico Usando los procedimientos descritos en los Ejemplos 1J a 1M, pero reemplazando N-Cbz-aminoetanol en el Ejemplo 1J con N-Cbz-3-aminopropanoi proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1H NMR (DMSO-dß) d 0.82 (d, J = 7 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 7 Hz, 3H), 1.77 (m, 2H), 2.10 (m, 1H), 3.10-3.23 (m, 4H), 4.42 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 6.37 (br s, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 201.

B. (2S, 3S.5S)-2-(2.6-dimetilf enox¡acetil)amino-3-hidroxi-5-f2S-(1- tetrahidro-pirimid-2-onil)-3-metil butanoipamino-1,6-difenilhexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 1N con el ácido del Ejemplo 2A usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado (70%). 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.80 (d, J = 4.5 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 4.5 Hz, 3H), 1.50 (m, 1H), 1.65-1.72 (m, 6H), 2.20 (s, 6H), 2.68 (m, 1H), 2.82 (m, 2H), 3.0 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.05 (m, 4H), 3.77 (m, 1H), 4.07 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.20 (m, 4H), 4.50 (br s, 1H), 6.78 (br d, 1H), 7.0 (m, 3H), 7.25 (m, 10H). Espectro de masa: (M + H)+ = 629.

Ejemplo 3 (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacet¡namino-3-hidroxi-5-r2S-(3-oxazolidin-2- onil)-3-metil-butano¡nam ino- 1 , 6-dif en ilhexano A. Metil éster de ácido 2S-(3-oxazolidin-2-onil)-3-metil-butanoico A una solución de hidrocloruro de L-valina metil éster (7.6 mmoles) se adicionó una solución de óxido de etileno en etanol (1 .5 equivalente).

La solución se mantuvo a 0°C durante 0.5 h y entonces a RT durante 1 8 h, a ese tiempo 0.01 equivalente de BF3. Et20 se adicionó. Oxido de etileno fresco se burbujeó directamente en la solución durante 3 a 4 minutos.

Después de 8 h, la solución se concentró a sequedad y el residuo se disolvió en CH2CI2 y se enfrió a 0°C. A esta solución se adicionaron 1 .2 equivalente de trietilamina y 1 .0 equivalente de trifosgeno. Después de 1 h, el solvente se removió a vacío y el residuo se lavó con agua (30 ml) y se extrajo con CH2CI2 (3x50 ml) , se secó y concentró. La purificación del producto crudo mediante cromatografía de columna de gel de sílice (5% EtOAc/CH2CI2) proporcionó el compuesto deseado (42%, 2 pasos). 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.98 (d, J = 4.0 Hz, 3H), 1 .0 (d, J = 4.0 Hz, 3H) , 2.16 (m, 1 H), 3.60 (m, 2H), 3.73 (s, 3H) , 4.20 (d, J = 10 Hz, 1 H) , 4.37 (m, 2H). Espectro de masa: (M + H)2 = 202.

B. Acido 2S-(3-oxazolidin-2-onil)-3-metil-butanoico La hidrólisis del metil éster del Ejemplo 3A, usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 1 M proporcionó el compuesto deseado. 300 M Hz 1 H N MR (DMSO-de) d 0.90 (d, J = 6 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6 Hz, 3H), 2.1 (m, 1 H), 3.55 (m, 1 H), 3.70 (m, 1 H), 3.88 (d, J = 9 Hz, 1 H), 4.30 (m, 2H), 13.0 (br s, 1 H). Espectro de masa: (M+NH4)+ = 205.

C. (2S.3S,5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-í2S-(3- oxazolidin-2-on i l)-3-metil-butanoillam ¡no- 1 , 6-dif en ilhexano El acoplamiento de la amina del Ejemplo 1 N con el ácido del Ejemplo 3B usando procedimientos de acoplamiento estándares (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.83 (d, J = 4.5 Hz, 3H), 0.87 (d, J = 4.5 Hz, 3H), 1 .75 (m, 1 H), 2.10 (m, 1 H), 2.20 (s, 6H), 2.65 (m, 1 H), 2.85 (m, 1 H), 3.0 (m, 3H), 3.30 (m, 1 H), 3.60 (m, 2H) , 3.77 (m, 1 H), 4.20 (m, 4H), 6.25 (br d, J = 6 Hz, 1 H), 7.0 (m, 3H), 7.25 (m , 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 616.

Eiemplo 4 (2S-3S-5S)-2-í(3R, 3aS, 6aR)-bis-tetrahidrofuraniloxilam¡no-3-hidroxi-5-r2S-(3-metil-1-imidazol¡din-2-on¡l)-3-metil butanoillamino-l , 6-dif enilhexano A. Metil éster de ácido 2S-(3-metil-1-imidazolid¡n-2-onil)-3-metilbutanoico A una suspensión de 45 mg (60% de dispersión de aceite) de hidruro de sodio en 0.5 ml de DMF se adicionó una solución de 150 mg del compuesto del Ejemplo 1 1 en 4.5 ml de DM F. Después de 20 minutos a RT, se adicionó yoduro de metilo (1 .5 equivalente, 0.07 ml). La reacción se completó en 1 h. La reacción se extinguió con solución de NH CI saturado y se extrajo con éter (100 ml + 50 ml x 2), se secó y se concentró a vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice (20% EtOAc/CH2CI2) para proporcionar el compuesto deseado (61%). 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.95 (d, J = 6 Hz, 3H), 0.97 (d, J = & Hz, 3H), 2.15 (m, 1H), 2.80 (s, 3H), 3.32 (m, 3H), 3.60 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 4.25 (d, J = 10.5 Hz, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 215.

B. Acido 2S-(3-metil-1-imidazolidin-2-oniP-3-metil butanoico Hidrólisis del metil éster del Ejemplo 4A usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 1M proporcionó el compuesto deseado.300 MHz 1H NMR (DMSO-de) d 0.85 (d, J = 6 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 6 Hz, 3H), 2.05 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 3.25 (m, 3H), 3.42 (m, 1H), 3.90 (d, J = 10 Hz, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 201.

C. (3R.3aS.6aR)-bis-tetrahidrofuranil-(4-nitrofenil)carbonato A una solución de 3R-hidroxi-(3aS,6aR)-bis-tetrahidrofurano [J. Med.

Chem. 37, 2506-2508 (1994)] (200 mg, 1.54 mmoles) en 10 ml de CH2CI2 se adicionó trietilamina (0.26 ml, 1.85 mmoles), y cloroformato de p-nitrofenilo (341 mg, 1.69 mmoles). La solución se mantuvo a RT durante 3 días, se diluyó con CH2CI2 (100 ml) y se lavó con NaHC03 saturado (15 ml). La capa orgánica se secó y concentró a vacío. La purificación mediante cromatografía de columna en gel de sílice (5% EtOAc/CH2CI2) proporcionó el compuesto deseado (42%). 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 2.0 (m, 1H), 2.20 (m, 1H), 3.18 (m, 1H), 4.0 (m, 3H), 4.17 (m, 1H), 5.27 (m, 1H), 5.80 (d, J = 6 Hz), 7.40 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 8.30 (d, J = 7.5 Hz, 2H). Espectro de masa: (M + NH4)+ = 313.

D. (2S.3S.5S)-2-r(3R.3aS.6aR)-bis-tetrahidrofuraniloxilamino-3-hidroxi-5- (t-butilox¡ carbonil)amino-1 ,6-difenilhexano A una solución del carbonato del Ejemplo 4C (100 mg, 0.34 mmoles) en 3.4 ml de DMF se adicionó el compuesto del Ejemplo 1 F (130 mg, 0.34 mmoles). La solución se mantuvo a RT durante la noche y entonces se concentró a vacío. La purificación del producto crudo mediante cromatografía de columna en gel de sílice (2% a 5% MeOH/CH2CI2) proporcionó el compuesto deseado (93%). 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 1 .40 (s, 9H), 1 .64 (m, 3H), 2.76 (m, 2H), 2.87 (m, 2H), 3.66-4.0 (m, 7H), 4.53 (m, 1 H), 5.06 (m, 2H), 5.68 (d, J = 6 HZ, 1 H), 7.10-7.28 (m, 10H). Espectro de masa: (M+NH )+ = 558.

E. (2S.3S.5S)-2-f(3R.3aS,6aR)-bis-tetrahidrofuraniloxilamino-3-hidroxi-5- am ino- 1 ,6-difen ilhexano A una solución del compuesto del Ejemplo 4D (170 mg, 0.31 mmoles) en 5 ml de CH2CI2 se adicionaron 5 ml de ácido trifluoroacético. Después de 0.25 h, el solvente se removió a vacío. El residuo se disolvió en 100 ml de EtOAc y se lavó con NaHC03 saturado y entonces salmuera, se secó y concentró para proporcionar el compuesto deseado (91 %). 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 1 .27-1 .60 (m, 4H), 1 .75 (m, 2H), 2.47 (m, 1 H), 2.80 (m, 1 H), 2.88 (m, 2H), 3.0 (m, 2H), 3.80 (m, 4H), 4.0 (m, 1 H), 5. 10 (m, 1 H), 5.30 (d, J = 10.5 Hz, 1 H), 5.70 (d, J = 6 Hz, 1 H), 7.05-7.25 (m, 10H) . Espectro de masa: (M+H)+ = 441 .

F. (2S.3S.5S)-2-r(3R.3aS.6aR)-bis-tetrah¡drofuraniloxilamino-3-hidroxi-5- r2S-(3-met¡l-1 -imidazolid¡n-2-onil)-3-metil butanoillamino-1 .6- difenilhexano El acoplamiento del ácido carboxílico del Ejemplo 4B con el compuesto amino del Ejemplo 4E usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.82 (d, J = 3H, 3H), 0.85 (d, J = Hz, 3H), 1 .65 (m, 1 H), 2.77 (s, 3H), 2.85 (m, 3H), 3.17 (m, 2H), 3.47 (m, 1 H), 3.60 (m, 2H), 3.75 (m, 1 H), 3.87 (m, 1 H), 4.0 (m, 1 H), 4.20 (m, 1 H), 5.05 (m, 2H), 5.68 (d, J = 6 Hz, 1 H), 6.45 (br d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.20 (m, 10H) . Espectro de masa: (M+H)+ = 623.

Eiemplo 5 (2S,3S.5S)-2-r(3R,3aS.6aR)-bis-tetrahidrofuraniloxilamino-3-h¡drox¡-5-f2S- (1-imidazolidin-2-onil)-3-metil butanoillamino-l , 6-dif enilhexano El acoplamiento del compuesto amino del ejemplo 4E con el ácido carboxílico del Ejemplo 1 M usando el procedimiento estándar (EDAC/DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz H NMR (CDCI3) d 0.85 (d, J = 7 Hz, 3H), 0.88 (d, J = Hz, 3H), 1 .70 (m, 2H , 2.18 (m, 1 H), 2.80 (m, 3H), 2.95 (m, 1 H), 3.20 (m, 4H), 3.60 (m, 3H), 3.75 (m, 2H) , 4.0 (m, 1 H), 4.20 (m, 1 H), 4.45 (s, 1 H), 5.10 (m, 2H), 5.67 (d, J = 6 Hz, 1 H) , 6.60 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.20 (m, 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 609.

Eiemplo 6 (2S.3S,5S)-2-(N-((5-tiazolil)metoxicarbonM)amino)-5-((2S-(1 -imidazolidini- 2-onil)-3-met¡ I-bu tanoil)-a min o)-3-hidroxi-1 , 6-dif enilhexano A. 2-cloro-2-formilacetato de etilo A un matraz de fondo redondo de tres cuellos de 2 I cargado con t-butóxido de potasio (0.5 mol, 500 ml de una solución 1 M en TH F) y 500 ml de TH F seco enfriado a 0°C, se adicionó en forma de gotas desde un embudo de adición una solución de cloroacetato de etilo (0.5 mol, 53.5 ml) y formato de etilo (0.5 mol, 40.4 ml), en 200 ml de TH F sobre 3 horas.

Después de la terminación de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora y se permitió que permaneciera durante la noche. El sólido resultante se diluyó con dietil éter y se enfrió en un baño de hielo.

Entonces, el pH se disminuyó a aproximadamente 3 usando HCl 6N. La fase orgánica se separó, y la capa acuosa se lavó tres veces con dietil éter. Las porciones etéreas combinadas se secaron sobre NaS0 , y se concentraron a vacío. El compuesto crudo deseado se almacenó a -30°C y se usó sin purificación adicional.

B. Tiazol-5-carboxilato de etilo A un matraz de fondo redondo se adicionaron 250 ml de acetona seca, 7.5 g (0.123 mol) de tioformamida, y 18.54 g (0.123 mol) de 2-cloro-2-formilacetato de etilo. La reacción se calentó a reflujo durante 2 horas.

El solvente se removió a vacío, y el residuo se purificó mediante cromatografía (Si02, columna o.d. de 6 cm, 100% CHCI3, Rf = 0.25) para proporcionar 1 1 .6 g (60%) del compuesto deseado como un aceite amarillo claro. NMR (CDCI3) d 1 .39 (t, J = 7 Hz, 3H), 4.38 (q, J = 7 Hz, 2H), 8.50 (s, 1 H), 8.95 (s, 1 H).

C. 5-(hidroximetil)tiazol A un matraz de 500 ml de tres cuellos preenfriado (baño de hielo) conteniendo hidruro de litio aluminio (2.89 g, 76 mmol) en 250 ml de TH F se adicionó tiazol-5-carboxilato de etilo (1 1 .82 g, 75.68 mmol) en 100 ml de THF en forma de gotas sobre 1 .5 horas para evitar el exceso de espuma. La reacción se agitó durante una hora adicional y se trató con precaución con 2.9 ml de agua, 2.9 ml de 15% de NaOH , y 8.7 ml de agua. Las sales de sólido se filtraron y el filtrado se apartó. Las sales crudas se calentaron a reflujo en 100 ml de acetato de etilo durante 30 minutos. La mezcla resultante se filtró y los dos filtrados fueron combinados, secados sobre Na2S04, y concentrados a vacío. El producto se purificó mediante cromatografía de gel de sílice levigando secuencialmente con 0% - 2% -4% de metano el cloroformo, para proporcionar el compuesto deseado, Rf - 0.3 (4% de metanol en cloroformo), el cual solidificó sobre sedimentación en rendimiento de 75%. NMR (CDCI3) d 4.92 (s, 2H), 7.78 (s, 1 H), 8.77 (s, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 1 16.

D. ((5-tiazolil)metil)-(4-nitrofenil)carbonato A una solución de 3.1 1 g (27 mmoles) de 5-(hidroximetil)tiazol y exceso de N-metil morfolina en 100 ml de cloruro de metileno se enfrió a 0°C y se trató con 8.2 g (41 mmoles) de cloroformato de 4-nitrofenilo.

Después de haber sido agitado durante 1 h, la mezcla de reacción se diluyó con CHCI3, se lavó sucesivamente con HCl 1 N , NaHC03 acuoso saturado y salmuera saturada, se secó sobre NaS04, y se concentró a vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía de gel de sílice (Si02, 1-2% MeOH/CHCU, Rf = 0.5 en 4% MeOH/CHCI3) para rendimiento 5.9 g (78%) del compuesto deseado como un sólido amarillo. NMR (CDCI3) d 5.53 (s, 2H), 7.39 (dt, J = 9, 3 Hz, 2H), 8.01 (s, 1H), 8.29 (dt, J = 9, 3 Hz, 2H), 8.90 (s, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 281.

E. (2S,3S,5S)-5-amino-2-(N-((5-tiazolil)-metoxicarbonil)amino)-3-hidroxi- 1 ,6-difenilhexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 1F con el carbonato del Ejemplo 6D usando el procedimiento del Ejemplo 4D, seguido por la remoción del grupo Boc-protector usando TFA/CH2CI2 proporcionó el compuesto deseado.300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 1.3-1.6 (m, 2H), 2.40 (dd, J = 14, 8 Hz, 1H), 2.78 (dd, J = 5 Hz, 1H), 2.88 (d, J = 7 Hz, 2H), 3.01 (m, 1H), 3.72 (br q, 1H), 3.81 (br d, J = 10 Hz, 1 H), 5.28 (s, 2H), .34 (br d, J = 9 Hz, 1H), 7.07 (br d, J = 7 Hz, 2H), 7.15-7.35 (m, 8H), 7.87 (s, 1H), 8.80 (s, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 426.

F. (2S.3S.5S)-2-(N-((5-tiazolil)metoxicarbonil)amino)-5-((2S-1-¡midazolidin- 2-onil)-3-metil-butanoil)-amino)-3-hidroxi-1,6-difenilhexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 6E con el ácido carboxílico del Ejemplo 1M usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado (52%). 300 MHz H NMR (CDCI3) d 0.82 (d, J = 7.5 Hz, 3H), 0.85 (d, J = 7.5 Hz, 3H), 1.65 (m, 2H), 2.15 (m, 1H), 2.70 (m, 3H), 2.85 (d, 7.5 Hz, 2H), 3.08 ( , 1H), 3.18 (m, 1H), 3.30 (m, 2H), 3.60 (m, 3H), 3.80 (m, 1H), 4.16 (m, 1H), 4.40 (s, 1H), 5.16 (d, J = 9 Hz, 1H), 5.24 (s, 2H), 6.60 (d, J = 9 Hz, 1H), 7.20 (m, 10H), 7.83 (s, 1H), 8.80 (s, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 594.

Eiemplo 7 (2S.3S.5S)-2-(N-((5-tiazolin-metoxicarboninamino)-3-hidroxi-5-(2S-(1- imidazolidin-2-onil)-3, 3-di metil butanoil)amino-1,6-difen ilhexano A. Acido 2S-(1-imidazolidin-2-onil)-3,3-dimetil butanoico Usando los procedimientos descritos en el Ejemplo 1J a 1M, pero reemplazando L-valina metil éster con L-t-butil-leucina metil éster, proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1H NMR (DMSO-d6) d 1.0 (s, 9H), 3.22 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.55 (q, J = 7.5 Hz, 1H), 3.65 (q, J = 7.5 Hz, 1H), 4.14 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 12.62 (br s, 1H). Espectro de masa: (M+N)+ = 201.

B. (2S.3S.5S)-2-(N-((5-tiazolil)-metoxicarboninamino)-3-hidroxi-5-(2S-(1- imidazolidin-2-onil)-3,3-dimetil butanoil)amino-1 ,6-difenilhexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 6E con el ácido carboxílico del Ejemplo 7A usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado (77%). 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 1.0 (s, 9H), 1.68 (m, 2H), 2.60-2.80 (m, 3H), 2.85 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.10 (m, 1H), 3.30 (m, 1H), 3.50 (m, 1H), 4.56 (s, 1H), 5.15 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.25 (Abq, 1H), 6.50 (d, J = / Hz, 1H), 7.20 (m, 10H), 7.83 (s, 1H), 8.80 (s, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 609.

Ejemplo 8 (2S,3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacet¡l)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1-imidazolidin- 2-oniQ-3,3-dimetil butanoiDam ino- 1, 6-dif enilhexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 1N con el ácido carboxílico del Ejemplo 7A usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado (80%). 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 1.0 (s, 9H), 2.18 (s, 6H), 2.68 (m, 1H), 2.80 (m, 1H), 2.98 (m, 3H), 3.10 (m, 1H), 3.27 (q, J = 7 Hz, 1H), 3.53 (m, 1H), 3.77 (m, 1H), 4.0 (s, 1H), 4.20 (m, 4H), 6.72 (m, 1H), 7.0 (m, 3H), 7.10-7.25 (m, 10H). Espectro de masa: (M + H)+ = 629.

Ejemplo 9 (2S.3S.5S -2-(2.6-dimetilf enoxíacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1 -imidazolidin- 2-tionil)-3-metil butanoil)amino-1,6-difen ilhexano A. Acido 2S-(1-imidazolidin-2-tionil)-3-metil butanoico Usando los mismos procedimientos descritos en el Ejemplo 1J a 1M, pero reemplazando 1,1-carbonil-diimidazol con 1,1-tiocarbonildiimidazol proporcionó el compuesto deseado.300 MHz H NMR (DMSO-d6) d 0.87 (d, J = 6 Hz, 3H), 0.96 (d, J = 6 Hz, 3H), 2.11 (m, 1H), 3.45 (m, 2H), 3.62 (m, 1H), 3.80 (q, J = 9 Hz, 1H), 4.80 (d, J = 10 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 12.75 (br s, 1H).

B. (2S.3S,5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1- ímidazolidin-2-tionil)-3-metil butanoil)ámino-1 ,6-d ¡fenil hexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 1 N con el ácido carboxílico del Ejemplo 9A usando procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado (53%). 300 MHz 1 H NMR (C DCI3) d 0.82 (d, J = 6 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 6 Hz, 3H), 1 .75 (m, 1 H), 2.20 (s, 6H), 2.65 (m, 1 H), 2.84 (m, 1 H), 3.0 (m, 3H), 3.25 (m, 1 H), 3.40 (m, 2H), 3.54 (d, J = Hz, 1 H), 3.78 (m, 1 H), 4.22 (m, 4H), 4.56 (d, J = 10.5 Hz, 1 H), 5.65 (s, 1 H), 6.60 (d, J = Hz, 1 H), 7.0 (m, 3H), 7.25 (m, 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 631 .

Eiemplo 10 (2S.3S.5S)-2-(4-amino-2.6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - imidazolid¡n-2-onil)-3-metil-butanoi Da min o- 1 , 6-dif en ilhexano A. Etil éster de ácido 2,6-dimetil4-nitro fenoxiacético A una solución de 10.5 g (54.6 mmoles) de 2,6-dimetilfenoxi acetato de etilo y 7.5 g (109 mmoles) de nitrito de sodio en 100 ml de cloruro de metileno se adicionaron 50 ml de ácido trifluoroacético lentamente. La mezcla de reacción se volvió sólida después de la adición . Se agregaron ml de ácido trifluoroacético adicionales. Después de que la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h, se separó cuidadosamente entre solución de bicarbonato de sodio saturado y cloruro de metileno. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y evaporaron a sequedad bajo presión reducida. El residuo se volvió a cristalizar en acetato de etilo al 30% y hexanos para dar 4.75 g (36%) de 2,6-dimetil-4- nitro fenoxiacetato de etilo como prismas amarillos claros. 300 MHz 1 H NMR (CDC!3) d 1 .34 (3H, t, J = 7.5 Hz), 2.39 (6H, s), 4.31 (2H , q, J = 7.5 Hz), 7.93 (2H, s).

B. Acido 2.6-dimetil-4-nitro-fenoxiacético A una solución de 0.962 g (4.06 mmoles) de 2,6-dimetil-4-nitro fenoxiacetato de etilo en 10 ml de metanol se adicionó 1 ml de hidróxido de sodio 3N. Después de que la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, se acidificó con HCl 3N y se separó entre agua y cloruro de metileno. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y evaporaron a sequedad bajo presión reducida para dar 0.82 g (97%) de ácido 2,6-dimetil-4-nitro fenoxi acético como sólido amarillo claro. 300 MHz 1 H N MR (d3-DMSO) d 2.35 (6H , s), 4.55 (2H , s), 7.97 (2H, s), 13.02 (1 H, bs).

C. (2S.3S.5S)-2(t-butilox¡carbon¡l)amino-3-hidrox¡-5-(2S-(1 -imidazolid¡n-2- onil)-3-metil-butanoil)amino-1 ,6-difenilhexano El acoplamiento de (2S,3S,5S)-2-(t-butiloxicarbonil)amino-3-hidrox¡-5-amino-1 ,6-difenilhexano con el ácido carboxílico del Ejemplo 1 M usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado (100%). 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 0.83 (d, J = 6 Hz, 3H) , 1 .40 (s, 9H), 1 .70 (m, 2H), 2.16 (m, 1 H), 2.58-2.80 (m, 4H), 3.10-3.30 (m , 4H), 3.65 (m, 2H) , 4.20 (m, 1 H), 4.38 (s, 1 H) , 4.83 (d, J = Hz, 1 H), 6.53 (d, J = 9 Hz, 1 H), 7.20 (m , 10H). Espectro de masa: (M + H)+ = 553.

D. (2S.3S.5S)-2-am¡no-3-hidroxi-5-(2S-(1 -imidazolid¡n-2-on¡P-3-met¡l- butanoiPam ino- 1 , 6-dif en ilhexano La desprotección del grupo Boc-protector del compuesto del Ejemplo 10C mediante el procedimiento estándar (TFA/CH2CI2) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.87 (d, J = 6Hz, 3H), 0.90 (d, J = 6Hz, 3H), 1 .33 (dd, J = 4.5, 9.0 Hz, 1 H), 2.18 (m, 1 H), 2.50 (m, 1 H), 2.80 (m, 5H), 3.20 (m, 4H), 3.72 (d, J = 10 Hz, 1 H), 4.30 (m, 1 H), 4.50 (s, 1 H), 6.67 (d, J = 7 Hz, 1 H), 7.20 (m, 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 453.

E. (2S.3S.5S)-2-(4-nitro-2, 6-dimetilf enoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - imidazolidin-2-oniP-3-metil-butano¡Pamino-1 ,6-d ifenil hexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 10D con el ácido carboxílico del Ejemplo 10B usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H N M R (CDCI3) d 0.83 (d, 7 = Hz, 3H), 0.86 (d, J = 7 Hz, 3H), 1 .70 (m, 3H) , 2.18 (m, 2H), 2.28 (s, 6H), 2.75 (m, 3H), 2.95-3.30 (m, 6H), 3.67 (d, J = 10.5 Hz, 1 H), 3.75 (M, 1 H), 3.82 (d, J = 4 Hz, 1 H), 4.25 (m, 5H), 6.55 (d, J = 7 Hz, 1 H), 7.20 (m, 10H), 7.92 (s, 2H). Espectro de masa: (M+H)+ = 660.

F. (2S.3S.5S)-2-(4-amino-2.6-dimetilfenoxiacet¡Pamino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - im ¡dazol idin-2-oniP-3-metil-butanoi Pam ino- 1 ,6-d ifenil hexano A una suspensión de 7 mg de 10% Pd/C en 5 ml de metanol se adicionó una solución de 69 mg del compuesto del Ejemplo 10E. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente bajo una atmósfera de hidrógeno (globo relleno con hidrógeno unido a una llave de 3 vías) . Después de 1 h, la reacción se completó mediante análisis TLV; el catalizador se filtró y el filtrado se concentró a vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice (2% a 5% MeOH/CH2CI2) para proporcionar el compuesto deseado (65%). 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.082 (d, J = Hz, 3H), 0.87 (d, J = 6Hz, 3H), 1 .70 (m , 2H), 2.10 (s, 6H), 2.15 (m, 2H), 2.72 (m, 2H), 2.97 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 3.08 (m, 1 H), 3.15 (m, 1 H), 3.30 (m, 2H), 3.45 (br s, 2H), 3.66 (d, J = 10 Hz, 1 H), 3.72 (m, 1 H), 3.90 (d, J = 3 Hz, 1 H) , 4.10-4.20 (m, 4H), 4.30 (s, 1 H) , 6.33 (s, 2H), 6.57 (d, J = 9 Hz, 1 H), 7.20 (m, 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 630.

Ejemplo 1 1 (2S,3S.5S)-2-(2,4.6-trimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - im idazolid in-2-on ¡P-3-m eti I butanoil) ami no- 1 , 6-dif en ilhexano A. Acido 2,4.6-trimetilfenoxiacético Usando los procedimientos del Ejemplo 1 G y 1 H , pero reemplazando 2,6-dimetilfenol con 2,4,6-trimetilfenol proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 2.25 (s, 9H), 4.43 (s, 2H) , 6.84 (s, 2H) . Espectro de masa: (M+H)+ = 1 95.

B. (2S.3S.5S)-2-(2.4.6-trimetilfenoxiacetiPam¡no-3-hidroxi-5-(2S-(1 - imidazolidin-2-onil)-3-metilbutanoiPam ino- 1 , 6-dif enilhexano El acoplamiento del compuesto amino del ejemplo 10D con el ácido carboxílico del Ejemplo 11A usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado (51%). 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.82 (d, J = 6 Hz, 3H), 0.85 (d, J = 6 Hz, 3H), 1.70 (m, 4H), 2.13 (s, 6H), 2.25 (s, 3H), 2.75 (m, 2H), 2.97 (d, J = 7 Hz, 1H), 3.13 (m, 2H), 3.28 (m, 2H), 3.68 (m, 2H), 3.68 (d, J = 10 Hz, 1H), 3.72 (m, 1H), 4.16 (m, 4H), 4.40 8br s, 1H), 6.67 (d, J = 8 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 7.20 (m, 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 629.

Eiemplo 12 (2S-3S-5S)-2-(4-fluoro-2.6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-(2S-(1- imidazol id in-2-on¡l)-3-metil-butanoiPam i no- 1.6-dif enilhexano A. Acido 4-fluoro-216-dimetilfenoxiacético Usando el procedimiento del Ejemplo 1G y 1H, pero reemplazando 2,6-dimetilfenol con 4-fluoro-2,6-dimetilfenol proporcionó el compuesto deseado.300 MHz 1H NMR (CD3OD) d 2.26 (s, 6H), 4.37 (s, 2H), 6.73 (d, J = 9 Hz, 2H). Espectro de masa: M+ = 198.

B. (2S.3S.5S)-2.(4-fluoro-2.6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(2S-(1- imidazolidin-2-oniP-3-metil-butanoiPamino-1 ,6-difenilhexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 10D con el ácido carboxílico del Ejemplo 12A proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.83 (d, J = 6 Hz, 3H), 0.86 (d, J = 6 Hz, 3H), 1.72 (m, 2H), 2.15 (s, 6H), 2.20 (m, 1H), 2.76 (m, 2H), 298 (d, J = 7 Hz, 2H), 3.12 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 3.67 (d, J = 10 Hz, 1 H), 3.72 (m, 1 H), 4.13 (AB q, J = 8, 9 Hz, 2H), 4.20 (m, 2H), 4.37 (s, 1 H), 6.64 (d, J = 9 Hz, 1 H), 6.70 (d, J = Hz, 2H), 7.20 (m, 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 633.

Ejemplo 13 (2S,3S,5S)-2-(4.6-dimetil pírimidin-5-oxi-acet¡Pamino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - ¡midazolidin-2-oniP-3-metil-butano¡Pamino-1 ,6-difenilhexano A. Acido 4, 6-dimetil pirimidin-5-oxi-acético Usando los procedimientos del Ejemplo 1 G y 1 H, pero reemplazando 2,6-dimetilfenol con 5-hidroxi-4,6-dimetilpirimidina (preparada de acuerdo a Chem Ver. 93 pg, 1998, 1960) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (DMSO-de) d 2.45 (s, 6H), 4.55 (s, 2H), 8.50 (s, 1 H) . Espectro de masa: (M+H)+ = 183.

B. (2S.3S.5S)-2-(4.5-dimetil pirimidin-5-oxi-acetiPamino-3-hidroxi-5-(2S- (1 -¡m¡dazolidin-2-oniP-3-metil-butano¡Pamino-1 ,6-d ifenil hexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 10D con el ácido carboxílico del Ejemplo 13A proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz H N MR (CDCI3) d 0.82 (d, J = 6 Hz, 3H) 0.85 (d, J = 6 Hz, 3H), 1 .70 (m , 2H), 2.15 (m, 1 H), 2.40 (s, 6H), 2.75 (m, 2H), 2.97 (d, J = 7 Hz, 2 H), 3.12 (m , 2H), 3.30 (m, 2H), 3.66 (d, J = 10 Hz, 1 H), 3.74 (m , 1 H), 3.88 (d, J = Hz, 1 H), 4.20 (m, 4H) 6.62 (d, J = 9 Hz, 1 H), 7.0 (d, J = 9 Hz, 1 H), 7.20 (m , 10H), 8.70 (s, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 617.

Ejemplo 14 D. (2S.3S.5S)-2-(2.4-dimetil-piridin-3-oxi-acetiPamino-3-hidrox¡-5-(2S-(1 - imidazolidin-2-onil)-3,3-dimetil butanoiPamino-1 ,6-difenilhexano A. Acido 214-dimetil-piridin-3-oxi-acético Usando los procedimientos del Ejemplo 1 G y 1 H, pero reemplazando 2,6-dimetilfenol con 2,4-dimetil-3-hidroxipiridina (preparada de acuerdo a J. Med. Chem. 35, pg 3667-3671 , 1992) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H NM R (DMSO-d6) d 2.26 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 4.44 (s, 2H), 7.08 (d, J = 5 Hz, 1 H), 8.07 (d, J = 5 Hz, 1 H). Espectro de masa: (M + H)+ = 182.

B. (2S.3S,5S)-2-(2.4-dimetil-pirid¡n-3-oxi-acetiPamino-3-hidroxi-5-(t- butiloxicarboniPamino-1 ,6-difen ilhexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 1 F con el ácido carboxílico del Ejemplo 14A usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H NM R (CDCI3) d 1 .40 (s, 9H), 1 .70 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.77 (m, 2H), 2.98 (d, J = / Hz, 2H), 3.75-3.95 (m , 3H), 4.20 (s, 2H), 4.22 (m, 1 H), 4.60 (br d, 1 H), 7.0 (d, J = 5H, 1 H), 7.10 (m, 3H), 7.25 (m, 7H), 8.16 (d, J = 5 Hz, 1 H) . Espectro de masa: (M + H)+ = 548.

C. (2S.3S.5S)-2-(2.4-dimetil-piridin-3-oxi-acetiPamino-3-h¡droxi-5-am¡no- 1 ,6-difenilhexano La desprotección del grupo Boc en el compuesto del Ejemplo 14B usando el procedimiento estándar (TFA/CH2CI2) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 1.45 (m, 1H), 1.62 (m, 1H), 2.23 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.50 (m, 1H), 2.80 (m, 1H), 3.0 (m, 2H), 3.12 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 4.18 (m, 1H), 4.25 (Abq, J ) 9, 12 Hz, 2H), 6.98 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.10 (m,2H), 7.30 (m, 8H), 8.17 (d, J = 5 Hz, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 448.

D. (2S.3S.5S)-2-(2.4-dimetil-p¡ridin-3-oxi-acetiPamino-3-hidroxi-5-(2S-(1- imidazolidin-2-oniD-3,3-dimetil butanoil)amino-1.6-dif en ilhexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 14C con el ácido carboxílico del Ejemplo 7A usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 1.0 (s, 9H), 1.70 (m, 3H), 2.18 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.75 (m, 2H), 3.0 (m, 4H), 3.30 (m, 1H), 3.55 (m, 1H), 3.80 (m, 1H), 4.05 (s, 1H), 4.20 (m, 4H), 4.60 (s, 1H), 6.70 (d, J = 7 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.15 (m, 3H), 7.25 (m, 7H), 7.25 (m, 7H), 8.17 (d, J = Hz, 1H), Espectro de masa: (M+H)+ = 630.

Eiemplo 15 (2S.3S.5S)-2-(2,4-d¡metil-pirídin-3-oxi-acetil9amino-3-hidroxi-5-(2S-(1- imídazolidin-2-onil)-3-metil-butanoil)amino-1,6-difenilhexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 14C con el ácido carboxílico del Ejemplo 1M usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.82 (d, J = 6 Hz), 3H), 0.86 (d, J = 6 Hz, 3H), 1.75 (M, 3H), 2.15 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.75 (m, 2H), 2.97 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 3.20 (m, 4H), 3.70 (d, J = 10 Hz, 1H), 3.75 (m, 1H), 4.20 (m, 6H), 4.52 (s, 1H), 3.75 (m, 1H), 4.20 (m, 6H), 4.52 (s, 1H), 6.80 (d, J = 7 Hz, 1H), 6.968d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.20 (m, 10H), 8.17 (d, J = 4.5 Hz, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 616.

Eiemplo 16 (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetiltiofenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5(2S-(1- imidazolidin-2-onil)-3-metil-butanoiPam ino- 1, 6-dif enilhexano A. Acido 2,6-dímetiltiofenoxi acético Usando los procedimientos del Ejemplo 1G y 1H, pero reemplazando 2,6-dimetilfenol con 2,6-dimetíltiofenol proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 2.56 (s, 6H), 3.40 (s, 2H), 7.10 (m, 3H). Espectro de masa: (M+H)* = 197.

B. (2S.3S,5S)-2-(2,6-d¡metiltiofenoxiacet¡l)amino-3-hidroxi-5(2S-(1- imidazol id in-2-oniP-3-metil-butanoil)am ino- 1, 6-dif enilhexano El acoplamiento del ácido carboxílico del Ejemplo 16A con el compuesto amino del ejemplo 10D proporcionó el compuesto deseado.300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.82 (d, J = 6 Hz, 3H), 0.86 (d, J = 6 Hz, 3H), 2.15 (m, 1H), 2.52 (s, 6H), 2.70 (m, 4H), 3.10 (m, 2H), 3.30 (m, 4H), 3.60 (m, 2H), 4.0 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 4.22 (s, 1H), 6.39 (d, J = 7 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 9 Hz, 1H), 7.20 (m, 13H). Espectro de masa: (M+H)+ = 631.

Ejemplo 17 (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-(2S-(1 -pirrolidin-2- on¡P-3-metil-butanoiPamino-1 , 6-dif en ¡I hexano A. 4-bromobutanoil-L-valina metil éster Una solución de 1 .08 (8.4 mmoles) de L-valina metil éster en 30 ml de CH2CI2 se adicionó 1.36 ml (16.8 mmoles) de piridina, se enfrió a 0°C y 1 .55 g (8.4 mmoles) de cloruro de 4-bromobutanoilo se adicionó. La solución se agitó a 0°C durante 40 minutos y a RT durante 1 H . La solución se lavó con NaHC03 saturado, salmuera y se secó con Na2S0 anhidro; se filtró y concentró a vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice (5% EtOAc/CH2CI2) para proporcionar 1 .82 g (77%) del producto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.92 (d, J = 6 Hz, 3H), 0.96 (d, J = 6 Hz, 3H), 2.20 (m, 3H) , 2.46 (m, 2 H) , 3.50 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 4.58 (dd, J = 4, 7 Hz, 1 H), 5.97 (br d, J = 7 Hz, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 297.

B. Acido 2S-(1 -pirrolidin-2-onil)-3-metil-butanoico A una solución de 1 .49 g (5.3 mmoles) del compuesto del Ejemplo 17A en una mezcla de DMF/CH2Cl2 enfriada a 0°C, se adicionó 0.234 g (1 .1 equivalente) de 60% de hidruro de sodio en aceite mineral. La mezcla se calentó lentamente a RT y se agitó durante la noche. La mezcla se vació en cloruro de amonio saturado y se extrajo con acetato de etilo, se secó y concentró a vacío. El producto crudo se hidrolizó usando hidróxido de litio como en el Ejemplo 1 H para proporcionar el compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.96 (d, J = 7 Hz, 3H), 1 .06 (d, J = 7 Hz, 3 H), 2.10 (m, 2H), 2.40 (m, 1 H), 2.50 (t, J = 7 Hz, 2H), 3.56 (m, 2H), 4.14 (d, J = 10 Hz, 1 H). Espectro de masa: (M+H) + = 186.

C. (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacet¡Pamino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - pirrolidin-2-onil)-3-metil-butanoiPamino-1 , 6-dif en ilhexano El acoplamiento del ácido carboxílico del Ejemplo 17B con la amina del Ejemplo 1 N usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H NM R (CDCI3) d 0.77 (d, J = 7 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 7 Hz, 3 H), 1 .75 (m, 3H), 2.10 (m, 1 H), 2.20 (s, 6H), 2.25 (m, 1 H), 2.65 (m, 1 H), 2.85 (m, 1 H), 3.0 (d, J = 7 Hz, 2H) , 3.20 (m, 1 H), 3.77 (m, 2H), 3.88 (d, J = 10 Hz, 1 H), 4.20 (m, 3H), 6.30 (d, J = 7 Hz, 1 H), 6.98 (m, 3H), 7.20 (m, 10H). Espectro de masa: (M + H)+ = 614.

Eiemplo 18 (2S,3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetil9amino-3-hidroxi-5-í2S-(1 -pirrolidin- 2, 5-dionil)-3-metil-butanoil)am i no- 1 , 6-dif en ilhexano A. Bencil éster de ácido 2S-(1 -pirrolidin-2, 5-dioniP-3-metil-butanoico A una solución de 700 mg (3.38 mmoles) de L-valina bencil éster en 6 ml de cloroformo se adicionó 1 equivalente de anh ídrido succínico. Después de 1 h a RT, el solvente se removió a vacío y el residuo se disolvió en 20 ml de DMF. A esta solución se adicionó 0.52 g de N-hidroxi-benzotriazol, 0.68 g de EDAC y 0.52 ml de trietilamina. Después de 24 h a RT, 20 mg de 4-dimetilaminopiridina se adicionaron. La solución se dejó a RT durante 3 días. Después de levantamiento estándar, el producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice para proporcionar 0.25 g del producto deseado (26%). 300 MHz 1 H N M R (CDCI3) d 0.84 (d, J = 7 Hz, 3H), 1.12 (d, J = 7 Hz, 3H), 2.70 (m, 1 H), 2.71 (s, 4H), 4.45 (d, J = 0 Hz, 1 H), 5.15 (s, 2H), 7.30 (m, 5H).

B. Acido 2S-(1 -pirrol¡d¡n-2, 5-dioniD-3-met¡l-butano¡co Una mezcla de 0.245 del producto del Ejemplo 18A, 30 mg de paladio en carbón al 10% en 50 ml de metanol se agitó vigorosamente bajo atmósfera de hidrógeno (globo relleno con hidrógeno) durante 1 h. El catalizador se filtró y el solvente se removió bajo vacío para proporcionar 168 mg del compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.84 (d, J = 6 Hz, 3H), 1 .13 (d, J = 6 Hz, 3H), 2.65 (m, 1 H), 2.80 (s, 4H), 4.45 (d, J = 8 Hz, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 200.

C. (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilf enoxiacetil)amino-3- idroxi-5-(2S-(1 -pirrolidin- 2,5-dioniP-3-metil-butanoil)amino-1 .6-dif en ilhexano El acoplamiento del ácido carboxílico del Ejemplo 18B con la amina del Ejemplo 1 N usando el procedimiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H NM R (CDCI3) d 0.70 (d , J = 4 Hz, 3H), 0.72 (d, J = 4 Hz, 3H), 1 .70 (m, 1 H), 2.20 (s, 6H), 2.45 (m , 2H), 2.60 (s, 4H), 2.80 (m, 2H), 3.0 (m, 2H) , 3.76 (m, 1 H) , 4.20 (m, 6H) , 7.0 (m, 3H), 7.20 (m, 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 628.

Eiemplo 19 (2S.3S.5S)-2-(trans-3-(2.6-dimetilfeniPpropenoiPamino-3-hidroxi-5-(2S- 1 - tetrahidropirimidin-2-oniP3-metil-butanoiPamino-1 , 6-dif enilhexano A. 2, 6-dimetil benzaldehído La oxidación de alcohol 2, 6-dimetil bencílico mediante el procedimiento de oxidación de Swern estándar (cloruro de oxalilo/DMSO) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H N M R (CDCI3) d 2.62 (s, 6H), 7.10 (m, 2H), 7.33 (t, J = 7 Hz, 1 H), 10.63 (s, 1 H). Espectro de masa: (M + H)+ = 135.

B. Metil éster de ácido trans-3-(2,6-dimetilfeniP-propenoico A una solución de fosfonoacetato de trimetilo (149 mg, 0.82 mmoles) en 15 ml de THF se adicionaron 36 mg de hidruro de sodio (60% en aceite). Después de 15 minutos, 100 mg del compuesto del Ejemplo 19A en 2 ml de THF se adicionaron. Después de 2 h, la reacción se extinguió cuidadosamente con agua y se extrajo con acetato de etilo /70 ml), se secó y concentró. La purificación del producto crudo mediante cromatografía de gel de sílice (hexano/EtOAc 95:5) proporcionó el compuesto deseado (75%). 300 MHz 1 H N M R (CDCI3) d 2.35 (s, 6H), 3.82 (s, 3H), 6.07 (d, J = 16 Hz, 1 H), 7.10 (m, 3H) , 7.85 (d , J = 16 Hz, 1 H). Espectro de masa: (M + H)+ = 191 .

C. Acido trans-3-(2,6-dimetilfen¡P-propenoico La hidrólisis del metil éster del Ejemplo 19B usando hidróxido de litio en una mezcla de metanol y agua proporcionó el compuesto deseado (84%). 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 2.38 (s, 6H), 6.13 (d, J = 16 Hz, 1H), 7.10 (m, 3H), 7.96 (d, J = 16 Hz, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 194.

D. (2S,3S.5S)-2-(trans-3-(2.6-dimetilfeniPpropenoiPamino-3-hidroxi-5-(t- butiloxicarboniDamino-1,6-difenilhexano El acoplamiento del ácido carboxílico del Ejemplo 19C con la amina del Ejemplo 1F usando el procedimiento estándar (EDAC/DMF) proporcionó el compuesto deseado (84%). 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 1.40 (s, 9H), 1.68 (m, 1H), 2.34 (s, 6H), 2.75 (m, 2H), 2.96 (m, 2H), 3.72 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 4.08 (m, 2H), 4.60 (m, 1H), 5.88 (d, J = 10 Hz, 1H), 5.94 (d, J = 16 Hz, 1H), 7.10 (m, 5H), 7.25 (m, 8H), 7.72 (d, J = 16 Hz, 1H). Espectro de masa: (M+H)+ = 543 E. (2S,3S.5S)-2-(trans-3-(2.6-dimetilf eniPpropenoiPamino-3-h idroxi-5-(2S- 1-tetrahidropirimidin-2-on¡P-3-metil-butanoiPamino-1,6-difenilhexano La remoción del grupo Boc-protector del compuesto del Ejemplo 19D (TFA/CH2CI2) y el acoplamiento de la amina resultante con el ácido carboxílico del Ejemplo 2A usando el procedimiento estándar (EDAC/DMF) proporcionó el compuesto deseado (73%). 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.82 (d, J = 6 Hz, 3H), 0.87 (d, J = 6 Hz, 3H), 1.50 (m, 1H), 1.70 (m, 2H). 2.20 (m, 1H), 2.33 (s, 6H), 2.68 (m, 1H), 2.78 (m, 1H), 2.85 (m, 1H), 3.05 (m, 5H), 3.73 (m, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.30 (d, J = 3 Hz, 1H), 4.60 (s, 1H). .95 8d, J = 15 Hz, 1 H), 6.0 (d, J = 9 Hz, 1 H), 6.80 (d, J = 7 Hz, 1 H), 7.25 (m, 13H), 7.70 (d, J = 15 Hz, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 625.

Ejemplo 20 (2S,3S.5S)-2-(3-(2.6-dimetilfeniPpropanoiPamino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - tetrahidropirimidin-2-on¡P-3-metil-butanoiPam¡no-1 ,6-difenilhexano A. Metil éster de ácido 3-(2,6-dimetilfeniPpropanoico Una solución de 400 mg del compuesto del Ejemplo 19B en 25 ml de metanol y 40 mg de Pd/C al 10% se agitó vigorosamente bajo una atmósfera de hidrógeno (presión de globo) durante 3 h. El catalizador y la concentración del filtrado a vacío proporcionó el compuesto deseado (98%). 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 2.35 (s, 6H), 2.45 (m, 2H) , 2.98 (m , 2H), 3.22 (s, 3H), 7.02 (s, 3H). Espectro de masa: (M+H)+ = 210.

B. Acido 3-(2,6-dimetilfeniPpropanoico La hidrólisis del metil éster del Ejemplo 20a, usando hidróxido de litio en metanol y agua proporcionó el compuesto deseado (93%) . 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 2.36 (s, 6H), 2.50 (m, 2H), 3.0 (m, 2 H), 7.03 (s, 3H). Espectro de masa: (M + H)+ = 196.

C. (2S.3S.5S)-2-(3-2.6-dimetilf enil) propanoil)amino-3-hidroxi-5-(t- butiloxicarboniPamino-1 ,6-d ifenil hexano El acoplamiento del ácido carboxílico del Ejemplo 20B con la amina del Ejemplo 1 F usando procedimiento de acoplamiento estándar (EDAC/DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 1 .40 (s, 9H), 1 .55 8m, 2H), 2.20 (m, 2H), 2.30 (s, 6H), 2.74 (m, 2H), 2.85 (m, 4H), 3.66 (m, 1 H), 3.82 (m, 1 H), 3.95 (m, 2H), 4.57 (br d, 1 H), 5.66 (d, J = 9 Hz, 1 H), 7.0 (s, 3H), 7.22 (m, 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 545.

D. (2S,3S,5S)-2-(3-(2.6-dímetilfeniDpropanoiPamino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - tetrahidropirimidin-2-oniP-3-metil-butanoiPamino-1 ,6-difenilhexano La remoción del grupo Boc-protector del compuesto del Ejemplo 20C usando ácido trifluoroacético en CH2CI2 y el acoplamiento de la amina resultante con el ácido carboxílico del Ejemplo 2A usando el procedimiento de acoplamiento estándar (EDAC/DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.82 (d, J = 6 Hz, 3H), 0.86 (d, J - 6 Hz, 3H), 1 .55 (m, 2H), 1 .65 (m, 1 H), 1 .70 (s, 3H), 2.20 (m, 3H), 2.30 (s, 6H), 2.65 (m, 1 H), 2.75 (m, 1 H), 2.86 (m, 5H), 3.10 (m , 3H), 3.68 (m, 1 H) , 4. 10 (m, 4H), 4.63 (s, 1 H), 5.75 (d, J = 7 Hz, 1 H), 6.76 (d, J = 7 Hz, 1 H), 7.0 (m, 3H), 7.20 (m, 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 627.

Eiemplo 21 (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetil-4-hidroxi-fenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - tetrah id ropírimidin-2-oniP-3-metil-butanoi I) ami no- 1 ,6-d ifenil hexano A. 2,6-dimetil-4-ter-butildimetilsiliiox¡ fenol A una solución de 2.5 g (14.7 mmoles) de 2,6-dimetilquinona en 5 ml de metanol se adicionó 200 mg de Pd/C (20%). La mezcla de reacción se agitó bajo 1 atmósfera de hidrógeno durante la noche. El Pd/C se removió sobre un cojín de celita, y el solvente se evaporó a sequedad bajo presión reducida para dar 2.0 g (100%) de 2,6-dimetiIdihidroquinona como un aceite amarillo claro. A una solución de 2.0 g (14.7 mmoles) de 2,6-dimetildihidroquinona en 10 ml de cloruro de metileno se adicionó 1 .2 g (17.6 mmoles) de imidazol y 2.2 g (14.7 mmoles) de cloruro de ter-butildimetilsililo subsecuentemente a 0°C. Después de la reacción se completó como se indica por TLC, se separó entre cloruro de metileno y mezcla 1 : 1 de cloruro de hidrógeno 3 N y salmuera. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó a sequedad bajo presión reducida. La cromatografía en gel de sílice usando 5% acetato de etilo:hexanos dio 1 .8 g (49%) de 2,6-dimetil-4-ter-butildimetilsililoxi fenol como un sólido blanco. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.16 (s, 6H), 0.98 (s, 9H), 2.19 (s, 6H) , 4.22 (s, 1 H), 6.48 (s, 2H). Espectro de masa: (M+H)+ = 253.

B. 2,6-dimetil-4-ter-butildimetilsililoxi fenoxil acetato de etilo Una solución de 1 .8 g (7.1 mmoles) de 2,6-dimetil-4-ter-butildimetilsililoxi fenol en 5 ml de dimetilformamida se trató con 2.0 g (1 .43 mmoles) de carbonato de potasio y 830 µl (7.5 mmoles) de bromoacetato de etilo. La solución resultante se calentó a 70°C durante 4 h. Después de enfriarse a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se separó entre acetato de etilo y cloruro de hidrógeno 3N . La capa orgánica combinada se lavó con salmuera diluida, se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó a vacío. La cromatografía de gel de sílice usando 5% acetato de etilo.hexanos dio 2.03 g (85%) de 2,6-dimetil-4-ter-butildimetilsililoxi fenoxil acetato de etilo como un aceite amarillo claro. 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 0.17 (s, 6H), 0.97 (s, 9H), 1 .33 (t, 3H , J = 6.3 Hz), 2.22 (s, 6H), 4.30 (q, 2H, J = 6.3 Hz), 4.35 (s, 2H), 6.57 (s, 2H). Espectro de masa: (M+H)+ = 356.

C. Acido 2,6-dimetil-4-hidroxil fenoxiacético A una solución de 2.03 g (6.0 mmoles) de 2,6-dimetil-4-ter- butildimetilsililoxi fenoxi acetato de etilo en 10 ml de metanol se adicionaron 4 ml de hidróxido de sodio 3 N . Después de que la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, se acidificó con HCl 3N. Se permitió que la reacción se agitara durante 1 h adicional, y entonces se separó entre agua y cloruro de metileno. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y evaporaron a sequedad bajo presión reducida. La trituración con hexanos dio 910 mg (77%) de ácido 2,6-dimetil-4-hidroxil fenoxiacético como un sólido blanco. 300 MHz 1 H N M R (CD3OD) d 2.18 (s, 6H), 4.31 (s, 2H) , 6.41 (s, 2H). Espectro de masa: (M+H)+ = 214.

D. (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetil-4-hidroxi-fenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-(t- butiloxicarbonil)amino-1 ,6-difen¡lhexano El acoplamiento del ácido carboxílico del Ejemplo 21 C con la amina del Ejemplo 1 F usando el procedimiento de acoplamiento estándar (EDAC/DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 1 .40 (s, 9H), 1 .68 (m, 2H), 2.07 (s, 6H), 2.77 (d, J = 6 Hz, 2H), 2.98 (m, 2H), 3.74 (m, 1 H), 3.90 (m, 1 H), 4.10 (m, 3H), 4.58 (m, 1 H), 5.20 (m, 1 H) , 6.44 (s, 2H), 7.10-7.30 (m, 10H).

E. (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimet¡l-4-hidroxi-fenoxiacetiPamino-3-hidrox¡-5-(2S- (1 -tetrah idropirimidin-2-oniP-3-metil-butanoil)amino-1 , 6-dif enilhexano La remoción del grupo Boc-protector del compuesto del Ejemplo 21 D usando TFA/CH2CI2 y el acoplamiento de la amina resultante con el ácido carboxílico del Ejemplo 2A usando el procedimiento estándar (EDAC/DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 0.78 (d, J = 5 Hz, 3H), 0.81 (d, J = 5 Hz, 3H), 1 .47 (m, 1 H), 2.04 (s, 6H), 2.18 (m, 1 H), 2.62 (m, 1 H), 2.80 (m, 2H), 3.05 (m, 6H), 3.78 (m, 1 H), 4.12 (M, 6H) , 4.37 (M, 1 H), 4.71 (s, 1 H), 6.47 (s, 2H), 6.94 (br d, 1 H) , 7.20 (m, 10H) . Espectro de masa: (M+H)+ = 645.

Eiemplo 22 (2S,3S,5S)-2-(cis(+)-1 , 1 -dioxo-2-isopropil-3-tetrahidrotiofenoxpamino-3- hidroxi-5-(2S-(1 -tetrahidropirimid-2-oniP-3-metil butano¡l)amino-1 .6- difenilhexano A. Cis (±)-2-¡sopropil-3-hidroxi-tetrahídrotiofeno A una solución de etil-3-mercaptopropionato (27.25 ml, 0.246 mol) en 200 ml de etanol se adicionó cuidadosamente etóxido de sodio (16.75 g , 0.246 mol) en varias porciones. La suspensión resultante se enfrió entonces a -20°C y etil-2-bromoisovalerato (50 g, 0.239 mol) en 50 ml de etanol se adicionó en forma de gotas sobre 2 h. Después de la adición se terminó, la reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 3 h. La mezcla se vació en 600 ml de acetato de etilo y 600 ml de NH4CI saturado. La capa de acetato de etilo se removió y la capa acuosa se extrajo (2 x 200 ml) con acetato de etilo. La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró a vacío para dar un aceite naranja. El aceite se disolvió en 500 ml de tolueno y etóxido de sodio (16.75 g, 0.246 mol) se adicionó. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 6 h, se enfrió a RT, y entonces se vació en una solución fría con hielo de HCL 1 N (235 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 150 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron a un aceite, el cual se usó en el siguiente paso sin purificación. El producto crudo se adicionó a 500 ml de ácido sulfúrico acuoso al % y la mezcla resultante se calentó a reflujo durante varias horas, y entonces se enfrió a RT y se neutralizó con hidróxido de sodio 6N y se extrajo con acetato de etilo (3 x 300 ml). La capa orgánica combinada se secó, se filtró y concentró a vacío para dar un aceite de color vino obscuro. El producto crudo (cetona) se purificó mediante destilación a vacío a 75°-80°C. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.93 (d, J = 9 Hz, 3H) , 1 .03 (d, J = 9 Hz, 3H), 2.32 (m, 1 H), 2.55-2.70 (m, 2H), 2.93 (t, J = 7.5 hz, 2H), 3.38 (d, J = 4 Hz, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 145.

A una solución agitada de la cetona anterior en 125 ml de CH2CI2 a 0°C se adicionó hidruro de diisobutilaluminio (86 ml, 1 M en THF) en forma de gotas sobre 20 minutos. La mezcla de reacción se permitió que se enfriara a temperatura ambiente y entonces se extinguí mediante adición cautelosa de HCl 1 N (255 ml). La mezcla se extrajo con éter (3 x 150 ml) y la solución de éter combinada se lavó con bicarbonato de sodio saturado, salmuera y se secó sobre sulfato de magnesio. La solución se concentró a vacío y el aceite resultante se purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice (10% EtOAc/hexano). 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 1 .03 (d, J = 7 Hz, 3H), 1 .08 (d, J = 7 Hz, 3H), 1 .80 (d, J = 9 Hz, 1 H), 1 .90 (m, 2H) , 2.24 (m, 1 H), 2.90-3.10 (m, 3H), 4.36 (m, 1 H). Espectro de masa: (M + H) + = 147.

B. C¡s(±)-(2-isopropil-3-tiofeniP-2(2-piridil)carbonato Al producto del Ejemplo 22A (2.29 g, 15.7 mmoles) en 40 ml de CH2CI2 se adicionó diisopropiletil amina (4.65 ml, 26.7 mmoles) y di-(2-piridil)carbonato (5.42 g, 25.1 mmoles). Después de 18 h a RT, la mezcla de reacción se diluyó con cloroformo y se lavó secuencialmente con ácido cítrico al 10%, bicarbonato de sodio saturado, salmuera y entonces se secó sobre sulfato de sodio; se filtró y concentró a vacío. La purificación del producto crudo mediante cromatografía de columna en gel de sílice (20% EtOAc/hexano) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H N M R (CDCI3) d 1 .05 (d, J = 7 Hz, 3H) , 1 .08 (d, J = 7 Hz, 3H), 1 .90 (m, 1 H) , 2.05 (m, 2H), 2.58 (dd, J = 6, 15 Hz, 2H), 3.10 (m, 2H), 3.28 (dd, J = 3, 12 Hz, 1 H), 5.47 (m, 1 H), 7.12 (m, 1 H), 7.27 (m, 1 H), 7.80 (m, 1 H), 8.41 (m, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 268.

C. (2S,3S,5S)-2-(cis(±)-2-isopropil-3-tetrahidrotiofenoxi)amino-3-hidroxi-5- (t-builoxicarboniPamino-1 , 6-dif enilhexano A una solución del compuesto del Ejemplo 22B (500 mg, 1 .87 mmoles) en 5 ml de CH2CI2 se adicionó la amina del Ejemplo 1 F (791 mg, 2.06 mmoles). La reacción se agitó a RT hasta que todo el compuesto del Ejemplo 22B se consumió. La mezcla de reacción se diluyó con cloroformo y se lavó con ácido cítrico al 10%, bicarbonato de sodio saturado, salmuera y entonces se secó con sulfato de sodio; se filtró y concentró a vacío. La purificación del producto crudo mediante cromatografía de columna en gel de sílice (2% MeOH/CH2CI2) proporcionó el compuesto deseado (73%). 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.83-1 .05 (m, 6H), 1 .40 (s, 9H), 1 .90 (m, 3H), 2.20 (m, 1 H), 2.75 (m, 2H), 2.85 (m, 4H), 2.95-3.15 (m, 3H), 3.67-3.90 (m, 4H), 4.55 (m, 1 H), 5.10 (m, 1 H), 5.30 (m, 1 H), 7.10-7.26 (m, 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 557.

D. (2S,3S,5S)-2-(cis(±)-1 , 1 -dioxo-2-isopropil-3-tetrahidrotiofenoxpamino-3- hidroxi-5-(t-butiloxicarboniPam ino- 1 , 6-dif en ¡I hexano Al compuesto del Ejemplo 22C (523 mg, 0.91 mmoles) en 10 ml de acetona y 0.5 ml de agua se adicionó Oxano (839 mg, 1.37 mmoles) y bicarbonato de sodio (152 mg, 1 .82 mmoles). La solución resultante se agitó durante 2 h, a ese tiempo apareció un precipitado blanco. La reacción se extinguió con bisulfito de sodio acuoso y se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 ml), se secó con sulfato de sodio, se filtró y concentró a vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice (2% MeOH/CH2CI2) para proporcionar 422 mg del producto. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 1.20 (m, 6H), 1 .40 (s, 9H), 1 .60 (m, 4H), 2.10-2.32 (m, 4H), 2.67 (m, 2H), 2.75 (m, 2H), 2.85 (m, 2H), 3.15 (m, 2H), 3.70-3.90 (m, 3H), 4.56 (/m, 1 H), 5.30 (m, 2H), 7.10-7.30 (m, 10H).

E. (2S,3S,5S)-2-(cis(±)-1 , 1 -dioxo-2-isopropil-3-tetrahidrotiofenoxpamino-3- h id roxi-5(2S-(1 -tetrah id ropírimid-2-on¡P-3-metil butanoiPamino-1 ,6- difenilhexano La remoción del grupo Boc-protector del compuesto del Ejemplo 22D usando TFA/CH2CI2 y el acoplamiento de la amina resultando con el ácido carboxílico del Ejemplo 2A proporcionó el compuesto deseado (82%). 300 MHz 1 H NMR (CDCIs) d 0.82 (m, 6H), 1 .0-1 .20 (m, 6H), 1 .60 (, 2H), 2.07 (m, 1 H), 2.25 (m, 2H), 2.65-3.20 (m, 12H), 3.70 (m, 1 H), 3.90 (m, 1 H), 4.10-4.20 (m, 2H), 5.07 (m, 1 H), 5.37 (m, 1 H), 5.87-5.98 (m, 1 H), 6.95-7.05 (m, 1 H), 7.20 (m, 10H). Espectro de masa: (M+H)+ = 671 .

Eiemplo 23 (2S.3S.5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - dihidropirimid-2,4-dionil)-3-metil-butanoil)am ino- 1 , 6-dif eni I hexano A. N-(2-etoxiacriloil)-N'-(1 S-carbometoxi-2-metil-propiP-urea A 1 .74 g (0.013 mol) de cloruro de 2-etoxi-acriloilo en 18 ml de tolueno se adicionaron 3.90 g (0.026 mol) de cianato de plata. La mezcla se calentó a reflujo durante 0.75 h. La mezcla se permitió que se enfriara a RT y el precipitado se permitió que se asentara. El sobrenadante (9.6 ml) se retiró y se adicionó a 18 ml de DMF seco y 5 ml de Et20, se enfrió a -15°C durante 45 minutos y se dejó en el congelador durante la noche. El solvente se evaporó a vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice (2% MeOH/CH2CI2) para proporcionar 1 .59 g de compuesto deseado (90.2%). 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 0.96 (d, J = 7 Hz, 3H), 1 .0 (d, J = 7 Hz, 3H), 1 .37 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 2.25 (m, 1 H), 3.74 (s, 3H), 3.097 (q, J = 7.5 Hz, 2H) , 4.42 (dd, J = 4.5, 8.0 Hz, 1 H), 5.25 (d, J = 12 Hz, 1 H) , 7.68 (d, J = 12 Hz, 1 H), 8.55 (s, 1 H), 9.10 (d, J = 8 Hz, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 273.

B. Acido 2S-(1 -dihidropirimid-2,4-dioniP3-metil butanoico Una solución de 174 mg (0.64 mmol) del compuesto del Ejemplo 23A en 10 ml de ácido sulfúrico 2N se sometió a reflujo durante 2h, se enfrió a RT y se dejó en el congelador durante la noche. La mezcla se concentró y el residuo se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 mi), se secó y concentró a vacío para dar 122 mg del compuesto deseado. 300 MHz H N MR (CDCI3) d 1 .06 (d, J = 7 Hz, 3H), 1 .13 (d, J = 7 Hz, 3H), 2.25 (m, 1 H), 5.04 (d, J = 10 Hz, 1 H), 5.74 (d, J = 7 Hz, 1 H), 7.50 (d, J = 10 Hz, 1 H) , 8.43 (s, 1 H) .

C. (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacet¡Pamino-3-hidroxi-5-(2S-(1 - dihidrop¡rimid-2,4-d¡oniP-3-metil-butano¡Pamino-1 ,6-d ifenil hexano El acoplamiento del ácido carboxílico del Ejemplo 23B con la amina del Ejemplo 1 N usando el procedimiento de acoplamiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.81 (d, J = 7 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 7 Hz, 3H), 2.18 (s, 6H), 2.23 (m, 1 H), 2.63 (m, 1 H), 2.85 (m, 1 H), 3.0 (m, 2H), 3.78 (m, 1 H), 4.20 (m, 4H), 4.58 (d, J = 10 Hz, 1 H), 5.68 (dd, J = 1 .5, 7.5 Hz, 1 H), 7.0-7.25 (m, 13H), 7.50 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 9.50 (s, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 640.

Eiemplo 24 Preparación alternativa de (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimet¡lfenox¡acetil9amino-3- hidroxi-5-f2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-oniP-3-met¡l butano¡pamino- 1 ,6- difenilhexano A. Acido 2,6-dimetilfenoxiacético 2,6-dimetilfenol (102.8 g, 0.842) y ácido cloroacético (1 59.6 g, 1 .68 mol) en 1000 ml de H20 se adicionaron a un matraz de fondo redondo de 3 cuellos, de 3 I, con agitación mecánica y un condensador enfriado con agua. Una solución de NaOH (134.9 g, 3.37 mol) disuelta en 500 ml de agua se adicionó lentamente a la mezcla anterior vía un embudo de adición y se calentó a reflujo. Después de 2 horas, ácido cloroacético adicional (79.4 g, 0.84 mol) y una solución de NaOH (67.2 g, 1 .68 mol en 200 ml de agua) se agregaron a la mezcla de reacción. Después de 19 horas, ácido cloroacético adicional (39.8 g, 0.42 mole) y una solución de NaOH (33.6 g, 0.84 mol en 100 ml de agua) se adicionaron a la mezcla de reacción y el reflujo se continuó hasta que el fenol de inicio fue consumido. El matraz de reacción se enfrió en un baño de agua helada y se acidificó a pH = 1 con HCl concentrado, causando que se forme un precipitado. La pasta resultante se agitó en el baño de hielo durante 1 hora entonces se filtró. El sólido es disuelto en agua caliente (100°C) y se enfrió para cristalizar el producto como placas blancas, pf=136-137°C, rendimiento = 78.8 g, 52%.

B. (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilf enoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-(t- butiloxicarbonilam ino)- 1 , 6-dif en ilhexano El cloruro de oxalilo (36.3 ml, 0.42 mol) se adicionó a una pasta de ácido 2,6-dimetilfenoxiacético (50 g, 0.28 mol) en 500 ml de tolueno seguido por adición de 5 gotas de DMF y se agitó a temperatura ambiente durante 30 min, entonces a 55°C durante 1 .5 horas. El tolueno se removió en un evaporador rotatorio y los volátiles restantes se removieron a vacío para dar cloruro de 2,6-dimetilfenoxiacetiIo como un aceite ámbar, 55 gramos, 100%. [2S,3S, 5S]-2-amino-3-h id roxi-5-t-butiloxicarbon ilamino- 1 ,6-difenilhexano x 0.5 succinato (1 1 1 .9 g, 0.25 mol) se cargó a un matraz de fondo redondo de 3 cuellos, de 2 I, con agitación mecánica. NaHC03 (106 g, 1 .26 mol), 600 ml H2) y 600 ml EtOAc se adicionaron y se agitó vigorosamente hasta que todos los sólidos se disolvieron (15 minutos). La agitación se disminuyó y una solución del cloruro de 2,6-dimetil-fenoxiacetil y EtOAc (100 ml) se adicionó en una corriente angosta vía embudo de adición. Después de 30 min de agitación, los materiales de inicio se consumieron (análisis H PLC) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc, las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con 200 ml de NaOH 1 , 200 ml de HCl al 10%, 200 ml de salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y concentraron para proporcionar el producto deseado como un sólido blanco.

C. (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-amino-1 ,6- difenilhexano (2S,3S,5S)-2-82, 6-dimetilf enoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonilamino)-1 ,6-difenilhexano (175.1 g, 0.32 mol) y 500 mi de CH2CI2 se mezclaron con agitación. CF3C02H (249 ml, 3.2 mol) se adicionó y se agitó 20-25 minutos, entonces la mezcla de reacción se vació en un embudo de separación conteniendo 1000 ml de agua y 2000 ml de CH2CI2. La mezcla resultante se agitó cuidadosamente y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó nuevamente con 500 ml de agua, entonces 3x 500 ml de NaHC03 y finalmente 500 ml de salmuera. La solución orgánica se secó sobre MgS04, se filtró y concentró a un aceite dorado que produjo una espuma. 300 ml de dietil éter se adicionaron al producto crudo y se agitó vigorosamente para disolverse. En minutos, el sólido empezó a cristalizar y la mezcla se volvió espesa. Suficiente dietil éter se adicionó para hacer agitable a la mezcla, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. El sólido se filtró y secó con aire para dar el producto deseado como 115 g de agujas blancas, 81 % de rendimiento. Una solución de HCI/dietil éter se adicionó al filtrado para precipitar el producto restante como la sal de HCl. Este sólido rosado se colectó mediante filtración, tomando cuidado para mantener el sólido inundado con N2 mientras que era humedecido con éter. Cuando se secó, se transfirió la sal de amina a un embudo de separación y se extrajo con CH2CI2 y NaHC?3 (acuoso). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgS04, se concentró y trató como antes para dar unos 15 g adicionales del producto deseado, el rendimiento total es 91 %.

D. N-carbonilbenciloxi-3-aminopropanol A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos, de 12 I, se adicionó acetato de isopropilo (6.5 I). El solvente se enfrió a 0°C en un baño de agua helada y 3-amino-1 -propanol (1 .14 kg, 15.1 mol. 2.15 eq) se adicionaron en una porción. A esta solución agitándose rápidamente, se adicionó cloroformato de bencilo (1 .20 kg, 7.03 mol. 1 .0 eq) en forma de gotas sobre 2h, mientras que se mantenía la temperatura interna del matraz entre 10°C y 15°C. Después de que la adición se terminó, se permitió que la mezcla de reacción se agitara entre 10°C y 15°C durante 0.3 h adicional después de ese tiempo se adicionó agua (3.5 I ) en una porción. La solución se separó entonces y se lavó con 2x3.51 de agua adicionales. La capa orgánica se secó sobre carbonato de potasio y se concentró para dar un sólido que se disolvió en exceso de acetato de isopropilo y se precipitó la solución al adicionar el compuesto a heptano. El sólido se filtró bajo nitrógeno para producir 1 .20 kg (82%) del producto deseado como un sólido incoloro.

E. N-carbonilbenciloxi-3-aminopropanal 335 mi de dimetilsulfóxido y 9 I de cloruro de metileno fueron combinados y enfriados a -48 °C. 313 ml de cloruro de oxalilo se adicionaron sobre 25 minutos de manera que la temperatura permaneció debajo de -40°C. Se enfrió a -48°C, y se adicionaron 500 gramos de N-Cbz-3-amino-1 -propanol disueltos en 1 I de cloruro de metileno, de manera que la temperatura permaneció debajo de -40°C. Se agitó durante una hora adicional a -45°C. 1325 ml de trietilamina se agregaron a tal proporción que la temperatura permanceció debajo de -40°C. Después de agitar 15 minutos adicionales a -40°C, se permitió que la mezcla se calentara a -30°C, entonces se adicionaron 2.5 I de fosfato diácido de potasio acuoso al 20%. Se agitó durante una hora, entonces se separaron las capas, se lavó la capa orgánica con salmuera, y se secó con sulfato de magnesio. El aldehido resultante se mantuvo en solución a -20°C hasta que fue necesario.

F. N-(N-benciloxicarbonil-3-amino)-prop¡Pvalina metil éster A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos de 5 I , se adicionó el producto crudo (sin someter a cromatografía) del Ejemplo 24E (1 15 g, 0.555 mol, 1 .0 eq) seguido por adición de agua (400 ml) y metanol (1600 ml) . La mezcla de reacción se mantuvo a 25°C a través del curso de la reacción. Después de que la solución se volvió homogénea, se adicionó hidrocloruro de (S)-valina metil éster (90.2 g , 0.538 mol, 0.97 eq) en una porción seguido por una adición rápida de trihidrato de acetato de sodio (151 g, 1 .1 1 mol, 2.0 eq) y cianoborohidruro de sodio (73.2 g, 1 .17 mol, 2.1 eq) en dicho orden. La mezcla de reacción se permitió que se agitara a temperatura ambiente durante 0.5 h y se concentró a vacío para remover todo el metanol presente. A esta solución, se adicionó bicarbonato de sodio acuoso saturado (400 ml) y la mezcla se extrajo con acetato de isopropilo (11). La capa orgánica se lavó con agua (2x400ml), se secó sobre sulfato de sodio y se concentró para producir 150 g de producto crudo, el cual se disolvió en acetato de isopropilo (300 ml) y heptano (2400 ml). Se burbujeó HCl seco y un sólido aceitoso se precipitó de la solución. El líquido se decantó del sólido y se disolvió en diclorometano (31). La solución se lavó con agua (600 ml) y bicarbonato de sodio acuoso saturado (600 mi) y se secó sobre sulfato de sodio. Se concentró a vacío para producir 105 g (59%) del producto deseado como un aceite amarillo claro.

G. N-(3-amino)-propiPvalina metil éster A un matraz de 31 se adicionó el producto del Ejemplo 24F (120 g, 0.372 mol) y metanol (11). Se permitió que esta solución se agitara en la presencia de Níquel de Raney (180 g) durante 1 h. Después de la remoción del Níquel de Raney por filtración, Pd(OH)2 (24 g) se adicionó y la solución se permitió que se agitara bajo 4.218 kg/cm2 de una atmósfera de hidrógeno durante 12h. La solución se purgó con nitrógeno y se volvió a presurizar con 4.218 kg/cm2 de hidrógeno durante una 1 h adicional. La solución se filtró y concentró para dar 63 g de un aceite (90%). A este aceite, se adicionó tolueno (120 ml) y la solución se concentró nuevamente a vacío para dar el producto deseado.

H. Metil éster de ácido 2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-onil)-3-metil butanoico A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos de 5 I con barra de agitación, se adicionó el producto crudo del Ejemplo 24G (150 g, 0.8 mol) y diclorometano (3.2 I). Se adicionó carbonildiimidazol (232 g, 1 .44 mol, 1 .8 eq) lentamente en porciones sobre 25 min. Se permitió que la solución se agitara a temperatura ambiente durante 40 h. Se agregó agua (200 mi) sobre 1 h con agitación cuidadosa hasta que no ocurrió más evolución de gas. Una solución de HCl al 35% se adicionó lentamente a la solución de agitación hasta que la solución se volvió acida. La solución se separó entonces y se lavó con agua (2x300ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró para producir 126 g (74%) del producto deseado como un sólido incoloro.

I. Metil éster de ácido 2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-oniP-3-metil butanoico A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos de 121 con barra de agitación se adicionó el producto del Ejemplo 24H (126g, 0.588 mol), agua (1 .3 I), y THF (3.9 I). La solución se enfrió a 0°C en un baño de agua helada y monohidrato de hidróxido de litio (74g, 1 .76 mol, 3.0eq) se adicionó en una porción con agitación rápida. Se permitió que la solución se agitara a 0°C durante 14 h. Entonces se acidificó a pH 1 1 mediante adición lenta de ácido fosfórico acuoso al 50% y TH F se removió a vacío. La fase acuosa se lavó con acetato de isopropílo (21) y se acidificó subsecuentemente a pH mediante adición lenta de HCl acuoso al 35%. La capa acuosa se extrajo entonces con acetato de etilo (5x2.21). Las capas orgánicas combinadas fueron concentradas para dar el producto deseado (105g) como un sólido blanco. El compuesto se purificó entonces mediante adición de acetato de isopropilo (500m ml) y etanol (15 ml) y se llevó la solución a ebullición con agitación rápida hasta que 50 ml de solvente se hubieron evaporado. La solución se enfrió a 0°C y se filtró para dar 92 g (75%) de producto deseado puro.

J. (2S.3S,5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetil9amino-3-hidroxi-5-r2S-(1 - tetrahidro-pirimid-2-oniP-3- metil butano¡namino-1 ,6-difenilhexano En un matraz de fondo redondo de 3 cuellos de 2 I, se combinaron el producto del Ejemplo 24C (100 g, 0.22 mol), el producto del Ejemplo 24I (44.8 g, 0.22 mol) y 750 DMF y la mezcla se enfrió en un baño de agua helada. HOBT (90.9 g, 0.67 mol), EDAC (86 g, 0.45 mol) y trietilamina (62.5 ml, 0.45 mol) se adicionaron y el baño de hielo fue removido, permitiendo la mezcla de reacción para agitar con calentamiento a temperatura ambiente durante 5h. La reacción se diluyó con 1000 ml de I PAC y se extinguió con 1000 ml de agua. La mezcla se agitó y se separó , la capa acuosa se extrajo 1 x200 ml I PAC, los orgánicos fueron lavados con 1 x400 ml HCl al 10%, 1 x500 mi de NaHC03, diluido con 100 ml de hexanos, entonces se lavó con agua 4x 500 ml, y salmuera 1 x 500 ml , se secó sobre MgS0 , se filtró y concentró para proporcionar el producto desead como una espuma blanca.

Eiemplo 25 (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-r2S-(1 -tetrahidro- pirimid-2,4-d¡oniP-3-metilbutanoillamino-1 ,6-difenilhexano A. N-(2-carbometoxpetil-L-valina t-butil éster A una solución de 1 .73 g de L-valina t-butil éster en 10 ml de metanol se adicionó 9.0 ml de acrilato de metilo. La solución se calentó a reflujo durante la noche. Otros 9.0 de acrilato de metilo se adicionó y continuó el reflujo durante 24 h. el solvente se evaporó a vacío y el producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice (20% acetato de etilo en hexano) para proporcionar 2.435 g del compuesto deseado (93.9%). 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.91 (d, J=3.5 Hz, 3H), 0.93 (d, J=3.5 Hz, 3H), 1 .47 (s, 9H), 1 .85 (m, 1 H), 2.47 (t, J=7 Hz, 2H), 2.68 (m, 1 H), 2.81 (d, J=6 Hz, 1 H) , 2.95 (m, 1 H), 3.68 (s, 3H). Espectro de masa: (M+H)+ = 260. _; B. N-(2-carbo,amido)etil-L-valina t-butil éster A una solución de 1 .86 g del producto del Ejemplo 25A en 5 ml de THF se adicionó 0.415 g de monohidrato de hidróxido de litio en 10.8 ml de agua. Después de 40 min, 10.8 ml de HCl 1 N se adicionaron . La mezcla de reacción se evaporó a sequedad y piridina seca se adicionó y evaporó a sequedad dos veces. El residuo se disolvió en 25 ml de acetonitrilo y 0.62 ml de piridina seca se adicionaron. A esta solución se adicionaron 2.02 g de carbonato de N, N'-disuccinimidilo. La mezcla de reacción se agitó durante 3.5 h. El solvente se removió a vacío y 90 ml de TH F se adicionaron seguido por 1 .43 ml de hidróxido de amonio concentrado. Se permitió que la reacción siguiera durante la noche. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró a vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con bicarbonato de sodio, salmuera y se secó con sulfato de sodio anhidro. Después de filtrar el agente de secado, el filtrado se concentró a vacío y el producto crudo se purificó mediante cromatografía de gel de sílice (5% MeOH en CH2CI2) para dar 1 .19 g (68% de compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.95 (d, J=7 Hz, 3H), 0.97 (d, J=7 Hz, 3H), 1 .48 (s, 9H), 193 (m, 1 H), 2.37 (m, 2H), 2.65 (m, 1 H), 2.95 (m, 2H), 5.30 (br s, 1 H), 7.85 (br s, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 245.

C. t-butil éster de ácido 2S-(1-tetrahidro-pirimid-2,4-dionil)-3- metilbutanoico Una solución de 0.92 g del producto del Ejemplo 25B en 10 ml de THF y 1 .83 g de carbonildiimidazol (CDI) se sometió a reflujo durante 26 h. Entonces 1 .83 g de CDI se adicionaron nuevamente y la solución se sometió a reflujo durante 72 h más. El solvente se evaporó a vació y el residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua, bicarbonato de sodio saturado, ácido clorhídrico diluido y entonces con salmuera. La capa orgánica se secó, filtró y concentró a vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice (2% a 5% MeOH en CH2CI2) para dar 0.54 g (52%) de compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.96 (d, J=7 Hz, 3H), 1 .05 (d, J=7 Hz, 3H), 1 .48 (s, 9H), 2.20 (m, 1 H), 2.66 (m, 2H), 3.43 (m, 1 H), 3.75 (m, 1 H), 4.63 (d, J=9 Hz, 1 H), 7.35 (br s, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 271 .

D. Acido 2S-(1 -tetrah id ro-pirimid-2.4-d ionil)-3-metil butanoico Una solución de 0.53 g del compuesto del Ejemplo 25C en 5 ml de ácido trifluoroacético se agitó a 0°C durante 1.25 h. El solvente se evaporó a vacío, se secó y purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice (2% MeOH/4% HOAc en CH2CI2) para dar 0.36 g de compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (DMSO-d6) d 0.86 (d, J = 7 Hz, 3H), 0.97 (d, J=7 Hz, 3H), 2.15 (m, 1 H), 3.40 (m, 4H) , 4.39 (d, J = 10 Hz, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 215.

E. (2S.3S, 5S)-2-(2,6-dimet¡lfenoxiacetil9amino-3-hidroxi-5-r2S-(1 - tetrah¡dro-pirimid-2,4-dioniP-3-metilbutanoinamino-1 ,6-difenilhexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 1 N con el ácido del Ejemplo 25D usando el procedimiento de acoplamiento estándar (EDAC en DMF) proporcionó el compuesto deseado (68%). 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.83 (d, J=7Hz, 3H), 0.88 (d, J=7Hz, 3H), 1 .80 (m, 2H), 2.20 (s, 6H), 2.40 (m, 1 H), 2.58 (m, 1 H), 2.80 (m, 1 H), 2.92 (m, 1 H), 3.05 (m, 3H), 3.65 (d, J=5Hz, 1 H), 3.83 (m, 1 H), 4.20 (m , 5H), 6.18 (d, J = 9Hz, 1 H), 7.0-7.38 (m, 14H). Espectro de masa: (M+H)+ = 643.

Eiemplo 26 (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilf enoxiacetil)amino-3-hidroxi-5r2S-(4-aza- 1 - tetrahidro-pirimid-2-onil)-3-metil-butanoillamino-1 ,6-difenilhexano A. Hidrazina de N(1 )-t-butiloxicarbonil-N (2)-alilo A una solución de 18.18 g de hidrazina de t-butiloxicarbonilo protegida en 50 ml de acetonitrilo se adicionó 19.0 g de carbonato de potasio, seguido por 11.9 ml de bromuro de alilo. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante un total de 3 h, se filtró y concentró a vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con bicarbonato de sodio saturado y se secó con sulfato de sodio anhidro y se filtró. Después de la concentración a vacío, el producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice (20% EtOAc/hexano) para dar 4.47 g de compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 1 .45 (s, 9H), 3.46 (m, 2H), 4.0 (br s, 1 H), 5.10 (m, 2H), 5.83 (m, 1 H), 6.0 (br s, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 173.

B. Hidrazina N(1 )-t-butiloxicarbonil-N(2)-alil-N(2)-benxiloxicarbonilo A una solución de 4.8 g del compuesto del Ejemplo 26A en 15 ml de DMF se adicionó 4.69 g de benciloxicarboniloxi-succinimida. La mezcla de reacción se agitó a RT durante 72 h y el solvente se evaporó a vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo, se lavó con bicarbonato de sodio saturado y se secó con sulfato de sodio anhidro. El producto crudo obtenido después de la concentración, se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice (20% a 50% EtOAc en hexano) y proporcionó 5.27 g del compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 1 .43 (br s, 9H), 4.15 (br s, 2H), 5.18 (s, 2H), 5.20 (m, 2H), 5.82 (m, 1 H), 6.39 (br s, 1 H), 7.36 (m, 5H). Espectro de masa: (M+H)+ = 307.

C. Hidrazina de N(1 )-t-butiloxicarbonil-N(2)-formilmetil-N(2)- benciloxicarbonilo Una solución de 6.5 g del compuesto del ejemplo 26B en 100 ml de metanol se enfrió con un baño de acetona/hielo seco. Se burbujeó ozono durante 1 .75 h hasta que un color azul pálido persistió. Se pasó aire a través de la solución durante 10 min y entonces 15.6 ml de sulfuro de dimetilo se adicionaron y se permitió que la mezcla de reacción se calentara gradualmente a RT durante la noche. El solvente se evaporó a vacío y el residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua, después con salmuera varias veces. La capa orgánica se secó con sulfato de sodio anhidro, se filtró y concentró a vacío para proporcionar 7.2 g del compuesto deseado. 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 1 .40 (br s, 9H), 4.35 (m, 2H), 5.20 (s, 2H), 6.65 (br s, 1 H), 7.36 (s, 5H), 9.70 (br s, 1 H). Espectro de masa: (M+NH4)+ = 326 D. N-í2-(N-(2)-benciloxicarbon¡l-N-(1 )-t-butiloxicarbon¡lhidrazinil]etil-L- valina metil éster A una solución de 7.2 g del compuesto del ejemplo 26C en 100 ml de metanol se adicionaron 3.55 g de hidrocloruro de L-valina metil éster, seguido por 3.48 g de acetato de sodio y 1 .33 g de cianoborohidruro de sodio. La mezcla de reacción se agitó a RT durante la noche. La mezcla se filtró y concentró a vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice (2% MeOH en CH2CI2) para proporcionar 5.8 g del compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 12 0.90 (d, J=6Hz, 6H), 1 .43 (br s, 9H), 1 .87 (m, 1 H), 2.60-3.0 (m, 4H), 3.72 (s, 3H), 5.18 (s, 2H), 7.37 (m, 5H). Espectro de masa: (M+H)+ = 424.

E. Metil éster de ácido 2S-f4-bencíloxicarbonilaza-1 -tetrahidro-pirimid-2- oniP-3-metil-butanoico Una solución de 2.4 g del compuesto del Ejemplo 26D en 20 ml de HCl en dioxano se agitó a RT bajo argón durante 1 h. El solvente se evaporó a vacío y el residuo se lavó con bicarbonato de sodio saturado y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó, se filtró y concentró a vacío. El producto crudo se disolvió en 28 ml de CH2CI2 y 0.56 g de carbonildiimidazol se adicionó. El solvente se removió y el residuo se purificó mediante cromatografía de columna en gel de sílice (10% a 30% EtOAc en CH2CI2) para dar 0.78 g del compuesto deseado. 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 0.90 (d, J = 7Hz, 3H), 0.98 (d, J = 7Hz, 3H), 2.17 (m, 1 H), 3.34 (m, 1 H), 3.61 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.98 (m, 1 H) , 4.71 (d, J = 10Hz, 1 H), 5.20 (s, 2H), 6.72 (br s, 1 H), 7.38 (m, 5H). Espectro de masa: (M+H)+ = 350.

F. Acido 2S-(4-benciloxicarbon¡ laza- 1 -tetrah id ro-pirimid-2-on i P-3-metil- butanoico Hidrólisis de 0.78 g del compuesto del Ejemplo 26E usando hidróxido de litio en dioxano acuoso proporcionó 0.35 g del compuesto deseado. 300 M Hz 1 H NMR (CDCI3) d 0.85 (d, J=7Hz, 3H) , 1 .04 (d, J=7Hz, 3H), 2.40 (m , 1 H), 3.40 (m, 1 H), 3.50 (m, 1 H), 3.80 (m, 2H), 3.95 (d, J = 10Hz, 1 H), 5.20 (s, 2H), 7.30 (s, 1 H), 7.36 (s, 5H) . Espectro de masa: (M + H)+ = 336.

G. (2S.3S.5S9-2-(2.6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5r2S- benciloxicarbonilaza-1-tetrahidro-pirimid-2-onil)-3-metil-butanipamino- 1 .6-difenilhexano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 1 N con el ácido del Ejemplo 26F usando el procedimiento de acoplamiento estándar (EDAC/DMF) proporcionó el compuesto deseado (36%). 300 MHz 1H N M R (CDCI3) d 0.72 (d, J = 7Hz, 3H), 0.83 (d, J=7Hz, 3H), 2.20 (s, 6H), 2.65 (m , 1 H), 2.83 (m, 1 H), 3.0-3.10 (m, 4H), 3.90 (m, 1 H), 6.65 (m, 1 H), 7.0-7.35 (m, 18H). Espectro de masa: (M+H)+ = 764.

H. (2S,3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5f2S-(4-aza-1 - tetrahidro-pirimid-2-oxiP-3-metil-butanoillamino-1 , 6-dif enilhexano La remoción del grupo protector de benciloxicarbonilo del compuesto del Ejemplo 26G mediante hidrogenólisis usando paladio en carbono al 10% como catalizador proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 0.83 (d, J=4.5 Hz, 3H), 0.86 (d, J=4.5Hz, 3H) , 1 .80 (m, 1 H) , 2.20 (s, 6H), 2.58 (m, 1 H), 2.67 (m, 1 H), 3.90 (m, 2H), 3.0 (m, 2H), 3.80 (m, 1 H), 4.20 (m, 3H), 6.72 (m, 1 H), 7.0 (m, 2H), 7.20 (m, 1 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 630.

Ejemplo 27 (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetíPamino-3-hidroxi-5-[2S-(1 -tetrahidro- pirimid-2-on¡l)-3-metilbutanoillamino-1 -fenil-6-metilheptano A. (2S,3S,5S)-2-amino-3-hidroxi-5-8t-butiloxicarbon ¡lamino)- 1-f enil-6- metilheptano Siguiendo los procedimientos descritos en el Ejemplo 1A al Ejemplo 1F-1, pero substituyendo cloruro de ¡sopropilmagnesío para cloruro de bencilmagnesio en el Ejemplo 1C proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.88 (d, J=7Hz, 3H), 0.92 (d, J=7Hz, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.50-1.80 (m, 4H), 2.55 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 3.0 (m, 1H), 3.54 (m, 2H), 4.62 (m, 1H), 7.30 (m, 5H). Espectro de masa: (M+H)+ = 337.

B. (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-(t- butiloxicarbonilamino)-1-fen¡l-6-metilheptano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 27A con el ácido del Ejemplo 1H usando el procedimiento de acoplamiento EDAC estándar proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.85 (d, J=7Hz, 3H), 0.90 (d, J=7Hz, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.70 (m, 2H), 2.20 (s, 6H), 3.03 (d, J=8Hz, 2H), 3.42 (m, 1H), 3.80 (m, 1H), 4.20 (m, 2H), 4.22 (s, 2H), 4.55 (m, 1H), 7.0 (m, 3H), 7.30 (m, 5H). Espectro de masa: (M+H)+ = 499.

C. (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5-amino-1-fenil-6- metilheptano La remoción del grupo protector de t-butiloxicarbonilo del compuesto del Ejemplo 27B usando el procedimiento del Ejemplo 1N proporcionó el compuesto deseado.300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.90 (d, J = 3Hz, 3H), 0.94 (d, J = 3Hz, 3H), 1.60 (m, 4H), 2.20 (s, 6H), 2.85 (m, 2H), 3.0 (m, 1H), 3.85 (m, 1 H), 4.20 (m, 2H), 7.0 (m, 2H), 7.35 (m, 6H). Espectro de masa: (M + H)+ = 399.

D. (2S.3S.5S)-2-f2.6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-r2S-(1 - tetrahidro-p¡rimid-2-onil)-3-metilbutanoillamino-1 -fenil-6-metilheptano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 27C con el ácido del Ejemplo 2A usando el procedimiento de acoplamiento estándar (EDAC/DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz H NMR (CDCI3) d 0.88 (m, 12H), 1.67 (m, 2H), 1 .90 (m, 1 H), 2.20 (s, 6H), 3.0 (d, J=8Hz, 2H), 3.22 (m, 4H), 3.67 (m, 1 H), 3.77 (m, 1 H), 4.20 (s, 2H), 4.40 (m, 1 H) , 4.76 (m, 1 H), 7.0 (m, 3H), 7.30 (m, 5H). Espectro de masa: (M+H)+ = 581 .

Eiemplo 28 (2S.3S.5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-r2S-p -tetrahidro- pir¡mid-2.4-dionil)-3-meti I butanoillami no- 1 -fenil-6-metil heptano El acoplamiento del compuesto amino del Ejemplo 27C con el ácido del Ejemplo 25D usando el procedimiento de acoplamiento estándar (EDAC/DMF) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 0.83 (d, J=7Hz, 6H), 0.92 (t, J = 7Hz, 6H), 1 .73 (m, 2H), 2. 18 (s, 6H), 2.30 (m, 1 H), 2.62 (m, 2H), 3.03 (m, 2H) , 3.45 (m, 1 H), 3.55 (m, 1 H), 4.72 (m , 2H), 4.20 (m, 4H), 6.40 (br d, J = 9Hz, 1 H), 7.0 (m, 3H), 7.30 (m, 5H), 7.62 (br s, 1 H). Espectro de masa: (M + H)+ = 595.

Ejemplo 29 (2S,3S,5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-r2S-(1 -piperazin- 2,3-dioniP-3-metilbutanoil]amino-1 ,6-difenilhexano A. Metil éster de ácido 2S-(4-benciloxicarbonil-1 -piperazin-2, 3-dioniP-3- metilbutanoico A una solución de 0.77 g de N-(benciloxicarbonilamino)-etil-L-valina metil éster en 20 ml de tolueno y 10 ml de acetonitrilo se adicionó 0.79 g de diimidazol de oxalilo. La mezcla de reacción se mantuvo a 50°C durante 24 h y 0.2 g de diimidazol de oxalilo se adicionó. La mezcla de reacción se mantuvo a 50°C durante otras 72 h. La evaporación de solvente a vacío y purificación del producto crudo mediante cromatografía de columna de gel de sílice (10% EtOAc en CH2CI2) proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1H NMR (CDCI3) d 0.95 (d, J = 7 Hz, 3H), 1 .03 (d, J=7Hz, 3H), 2.20 (m, 1 H), 3.60 (m, 1 H), 3.73 (s, 3H), 3.85 (m, 1 H), 4.0 (m, 1 H), 4.10 (m, 1 H), 4.90 (d, J = 10 Hz, 1 H), 5.36 (s, 2H), 7.20 (m, 5H). Espectro de masa: (M+H)+ = 380.

B. Metil éster de ácido 2S-(1 -piperaz¡n-2,3-dion¡P-3-metilbutanoico La remoción del grupo protector de bencilocarbonilo del compuesto del Ejemplo 29A mediante hidrogenólisis usando Pd/C al 10% como catalizador proporcionó el compuesto deseado. 300 MHz 1 H N MR (CDCI3) d 0.95 (d, J=7Hz, 3H), 1 .03 (d, J = 7 Hz, 3H) , 2.20 (m, 1 H) , 3.50 (m, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.83 (m, 1 H), 5.0 (d, J = 10 Hz, 1 H), 7.30 (br s, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 229.

C. (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5r2S-(1 -piperazin- 2, 3-dioniP-3-metilbutanoillamino-1 .6-dif enilhexano El metil éster del Ejemplo 29B se hidrolizó usando el procedimiento del Ejemplo 1 M y el ácido resultante se acopló al compuesto amino del Ejemplo 1 N usando el procedimiento de acoplamiento de EDAC estándar para proporcionar el compuesto deseado. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.82 (d, J=6 Hz, 3H), 0.85 (d, J=6 Hz, 3H), 1 .80 (m, 2H), 2.18 (m, 1 H), 2.20 (s, 6H), 2.65 (m, 1 H), 2.82-3.0 (m, 4H), 3.30 (m, 3H), 3.70 (m, 1 H), 3.82 (m, 1 H), 4.22 (m, 3H), 4.54 (d, J=10 Hz, 1 H), 6.30 (br s, 1 H), 6.65 (br d, 1 H), 7.0-7.30 (m, 13H). Espectro de masa: (M+H)+ = 643.

Ejemplo 30 (2S,3S.5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetíPamino-3-hidroxi-5r2S-(4-aza-4.5- dehidro-1 -pirim¡d-2-oniD-3-metil-butanoillam ino- 1 , 6-dif en ilhexano A. Acido 2S-(4-az3-4,5-dehidro-1 -p¡rimid-2-on¡p-3-metil-butanoico De la mezcla producto de la hidrólisis del Ejemplo 26F, el producto deseado fue aislado después de cromatografía de columna (5% MeOH/5% AcOH en CH2CI2) en 12.5% de rendimiento. 300 MHz 1 H NMR (CDCI3) d 0.93 (d, J=7Hz, 3H), 1 .04 (d, J = 7Hz, 3H), 2.20 (m, 1 H) , 3.92 (dd, J = 15, 3Hz, 1 H), 4.09 (dd, J=15, 3 Hz, 1 H), 4.50 (d, J = 10 Hz, 1 H), 6.95 (t, J = 3Hz, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 334.

B. (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetil)amino-3-hidroxi-5r2S-(4-aza-4, 5- dehidro-1 -pirimid-2-oxil)-3-metil-butano¡ Ha m ino- 1 .6-dif enilhexano El acoplamiento del compuesto del Ejemplo 1 N con el ácido del Ejemplo 30A usando el procedimiento de acoplamiento estándar (EDAC/DMF) proporcionó el compuesto deseado (70%). 300 MHz 1 H NM R (CDCI3) d 0.80 (d, J=7Hz, 3H), 0.85 (d, J = 7Hz, 3H), 1 .75 (m, 2H), 2.15 (m, 1 H), 2.20 (s, 6H), 2.62 (m, 1 H), 2.85 (m, 1 H), 3.02 (m, 2H), 3.55 (m, 2H), 3.80 (m, 1 H), 4.20 (m, 4H), 6.38 (br d, 1 H), 6.72 (t, J=3 Hz, 1 H), 7.0 (m, 3H), 7.22 (m, 10H), 7.63 (s, 1 H). Espectro de masa: (M+H)+ = 628.

Eiemplo 31 Cis-N-ter-butil-decahidro-2-r2(R)-h¡droxi-4-fenil-3(S)-(2S-(1 - tetrahidropirimid-2-on¡P-3-metilbutanoiPaminobutill-(4aS,8aS)-isoquinolin- 3(S)-carboxamida El título del compuesto puede ser preparado mediante acoplamiento del producto del ejemplo 2A con Cis-N-ter-butil-decahidro-2-[2(R)-hidroxi-4-fenil-3(S)-aminobutil]-(4aS,8aS)-isoquinolin-3(S)-carboxamida (descrito en la solicitud de patente de PCT No. W09426749 y la patente estadounidense No. 5, 196,438, emitida el 23 de marzo de 1993, ambas incorporadas en la presente por referencia) usando un procedimiento de acoplamiento estándar (EDAC en DMF) .

Eiemplo 32 Cis-N-ter-butil-decahidro-2-r2(R)-hidroxi-4-tiofenil-3(S)-(2S-(1 - tetrahidropir¡mid-2-oniP-3-met¡lbutnoiPaminobut¡n-(4aS,8aS)-isoquinolin- 3(S)-carboxamida El título del compuesto puede ser preparado mediante acoplamiento del producto del Ejemplo 2A con cis-N-ter-butil-decahidro-2-[2(R)-hidroxi-4-tiofenil-3(S)-aminobutil]-(4aS,8aS)-¡soquinolin-3(S)-carboxamida (descrito en la solicitud de patente de PCT No. WO95/09843, publicada el 13 de abril de 1995 y la patente estadounidense No. 5,484,926, emitida el 16 de enero de 1996, ambas incorporadas en la presente por referencia) usando un procedimiento de acoplamiento estándar (EDAC en DMF).

Eiemplo 33 4-amino-N-((2sin, 3S)-2-hidroxi-4-fenil-3-(2S-(1 -tetrahidropirim¡d-2-oniP-3- metilbutanoilamino)-butil)-N-isobutil-bencen sulfonamida El título del compuesto puede prepararse mediante acoplamiento del producto del Ejemplo 2A con 4-amino-N-((2sin,3S)-2-hidroxi-4-fenil-3-amino)-butil-N-isobutil-bencensulfonamida (descrito en la solicitud de patente de PCT No. WO94/05339, publicada el 17 de marzo de 1994, la cual se incorpora en la presente por referencia) usando un procedimiento de acoplamiento estándar (EDAC en DMF).

Ejemplo 34 A. Preparación alternativa de (2S, 3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenox¡acetil)amino- 3-hidroxi-5-am ino- 1 , 6-dif enilhexano A un matraz de 3 cuellos de 1 litro equipado con un agitador mecánico, sonda de temperatura J-Kem®, embudo de adición de goteo, y línea de nitrógeno seco se cargaron 30.0 g (54.87 mmol) del producto del Ejemplo 1 1 y 120 ml de acetonitrilo. La pasta resultante se enfrió a 0-5°C y 54.1 g (549 mmol) de ácido clorhídrico acuoso al 37% se adicionaron lentamente, manteniendo una temperatura interna de no más de +5°C durante la adición. La mezcla de reacción se agitó a 0-5°C y las muestras se tomaron periódicamente para analizar para consumo de material de inicio mediante H PLC (columna Zorbax C-8, fase móvil = 1 : 1 acetonitrilo/ácido fosfórico acuoso 0.1 %, proporción de flujo = 1.5 ml/minuto, detección a 205 nm). Después de agitar durante 3 horas, la reacción se completó. La reacción se extinguió mediante la adición lenta de 105 ml de hidróxido de sodio acuoso al 20%, manteniendo nuevamente una temperatura interna de no más de +5°C durante la adición. Una vez que se confirmó que el pH de la mezcla de reacción era básico, la solución se calentó a temperatura ambiente. Se adicionó acetato de etilo (180 mi) con mezclado, y después de asentamiento, la fase acuosa inferior se separó y descartó. La fase orgánica se lavó entonces una vez con 105 ml de cloruro de sodio acuoso al 10%. El compuesto del título se cristalizó de 12 ml/g de 1 :2 acetato de etilo/heptano (rendimiento 80-85%).

B. Preparación alternativa de (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetil)amino- 3-hidroxi-5-amino-1 ,6-d ¡fen ilhexano A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos de 1 con barra de agitación mecánica y termómetro se adicionó el producto del Ejemplo 1 1 (51 .6 g, 0.095 mol) y 100 ml de ácido acético glacial. A la suspensión resultante se adicionó HCl acuoso al 35% (1 0.5 ml, 0. 103 mol) en 1 porción . Se permitió que la solución se agitara bajo una atmósfera de N2 durante 3h, a ese tiempo 10.5 ml adicionales de HCl acuoso al 35% se agregaron. Después de 1 .5 h adicional, el matraz de reacción se sumergió en un baño de hielo y una solución de NaOH (16 ml, 0.198 mol) se adicionó a una proporción para mantener la temperatura interna del matraz debajo de 30°C. Se adicionó agua (200 ml) y la mezcla se extrajo con 2 x 200 ml de acetato de isopropilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaOH 2.5M (2 x 200 ml), 100 ml de H20, salmuera, se secaron sobre Na2S0 , se filtraron y evaporaron a vacío para producir 39.7 g (94% crudo) de producto como un sólido incoloro en una pureza mayor a 95% mediante HPLC. El producto podría ser purificado adicionalmente mediante disolución en 200 ml de isopropanol calentado sobre un baño de vapor, permitiendo que se enfriara con ágilación a 0-5°C para producir 32.2 g * (76%) del producto deseado, pf. = 131 °C.

Ejemplo 35 Preparación alternativa de ácido 2S-(1 -tetrahidropirimid-2-oniP-3-metil butanoico A. N-fenoxicarbonil-L-valina N-fenoxicarbonil-L-valina puede prepararse de acuerdo a los procedimientos descritos en la solicitud de patente estadounidense No. 08/671 ,893, presentada el 28 de junio de 1996, la cual se incorpora en la presente por referencia, y la cual incluye el siguiente método. En un reactor equipado con un agitador superior, refrigerante, sonda de pH y termocople se adicionó cloruro de litio (15.6 kg , 368 moles), L- valina (26.0 kg, 222 moles), alúmina neutral (8.1 kg, malla 150, Aldrich) y 156 kg de agua destilada. La mezcla heterogénea se agitó y enfrió a -14°C ± 5°C. El pH se ajustó a 10.1 con hidróxido de litio acuoso 10%. Fenilcloroformato preenfriado (-20°C) (36.6 kg, 234 moles) se adicionó mientras se mantenía una temperatura de no más de -9°C y el pH se controló durante la reacción (manteniendo un pH dentro del rango de 9.5 a 10.5 con un objetivo de 10.0) usando una adición continua de hidróxido de litio acuoso al 10%. La reacción se agitó durante 2 horas a aproximadamente -14°C. La mezcla de reacción se filtró a través de Celita y la torta de filtración se lavó con 42 kg de agua destilada. El filtrado acuoso se extrajo con metil t-butil éter (65 kg) para remover el fenol residual. La fase acuosa se enfrió entonces a 0-5°C y se mezcló con 200 kg de tolueno. La solución bifásica agitada se ajustó a pH 1 .8-2.0 con ácido sulfúrico al 25% (p/p). La capa de tolueno se concentró a no más de 40°C a aproximadamente 120 I, se filtró (30 kg de enjuague de tolueno) y se concentró nuevamente a no más de 40°C a aproximadamente 120 I. A la solución resultante se adicionaron 44.2 kg de heptano y la solución resultante se calentó a 40°C + 10°C durante 15 minutos. El calor se removió y la solución se sembró y agitó durante la noche. El producto se cristalizó en las paredes del reactor y se volvió a suspender en 80 kg de tolueno, se volvió a concentrar a no más de 50°C a aproximadamente 130 l, entonces 45.2 kg de heptano se adicionaron . La solución resultante se calentó entonces a 40°C ± 10°C durante no menos de 15 minutos y entonces se enfrió a no más de 20°C/hora a 18°C ± 5°C. Después de no menos de 12 horas, la pasta blanca resultante se enfrió a 14°C + 5°C y se agitó durante no menos de 3 horas. La pasta blanca se filtró y el sólido se lavó con 41 kg de 1 : 1 tolueno/heptano. El producto sólido se secó a no más de 50°C para proporcionar el producto deseado (47.8 kg) como un polvo blanco.

B. Acido 2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-oniP-3-metil butanoico Una mezcla de N-fenoxicarbonil-L-valina (25 g, 0.106 mol) e hidrocloruro de 3-cloropropilamina (15.2 g, 0.1 16 mol) en THF (250 ml) se enfrió a 2°C. El hidróxido de sodio (12.7 g, 0.318 mol) se adicionó a la suspensión en agitación. Después de aproximadamente 35 minutos, ocurrió una exoterma lenta a 10°C. La reacción se agitó a menos de 10°C durante 2 horas. Una solución de t-butóxido de potasio (29.6 g, 0.265 mol) en 125 mol de THF se adicionó sobre 10 minutos, seguido por un enjuague de THF de 20 ml. La temperatura de la mezcla de reacción se permitió que se elevara a 20CC durante la adición. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 19 horas. La mezcla de reacción se extinguió con 200 ml de agua destilada y entonces se acidificó a pH 9 usando 26.2 g de ácido clorhídrico concentrado, manteniendo la temperatura debajo de 30°C. La capa acuosa se separó y se lavó con otros 125 ml de TH F. El etanol 3A (75 ml) se adicionó a la capa acuosa separada y la mezcla se acidificó a pH<3 con 12.3 g de ácido clorhídrico concentrado, manteniendo la temperatura debajo de 25°C. La mezcla acidificada se extrajo dos veces con acetato de etilo (250 ml y 150 ml) . Las capas orgánicas combinadas se evaporaron a sequedad en un evaporador rotatorio a una temperatura debajo de 50°C. Los sólidos residuales fueron lavados a chorro con 250 ml de acetato de etilo. El sólido residual se disolvió en 150 ml de etanol 3A a temperatura de reflujo y se filtró a través de un lecho Darco-G60 de 5 g sobre auxiliar de filtración, seguido por un enjuague de etanol caliente de 50 ml. El filtrado se evaporó a sequedad en un evaporador rotatorio a una temperatura debajo de 50°C. El acetato de etilo (75 mi) se adicionó al residuo y se sometió a reflujo durante 30 minutos. La suspensión enfrió debajo de 10°C durante 2 horas. El sólido se colectó mediante filtración y se lavó con 20 ml de acetato de etilo frío (5-8°C). Después del secado a 40°C durante 72 horas, el producto deseado se obtuvo como un sólido blanco (15.6 g, 74%).

Eiemplo 36 Preparación alternativa de ácido 2S-(1 -tetrahidro-p¡rimid-2-onil)-3-metil butanoico Una mezcla de fenoxicarbonil-L-valina (250 g, 1 .05 mol; preparada de acuerdo al procedimiento descrito en la solicitud de patente estadounidense No. 08/671 ,893, presentada el 28 de junio de 1996, la cual se incorpora en la presente por referencia) e hidrocloruro de 3-cloropropiiamina (151 g, 1 .16 mol) en TH F (2.5 I) es enfriada a 2°C. Se adiciona hidróxido de sodio (127 g, 3.2 mol) a la suspensión en agitación.

Después de aproximadamente 45 minutos, ocurre una rápida exoterma a °C. La reacción es agitada a 1 -5°C durante 2 horas. 3-cloropropilamiina adicional (10 g, 0.08 mol) es agregada y la agitación se continúa durante 1 hora. Una solución de t-butóxido de potasio (296 g, 2.6 mol) en 1 .25 I de THF es adicionada entonces sobre 30 minutos, seguida por un enjuague de THF de 100 ml. La temperatura de la mezcla de reacción se permitió que se enjuagara a 20°C durante la adición. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12-16 horas. La mezcla de reacción se extinguió con 2 I de agua destilada y se enfrió a 12°C y entonces se acidifició a pH 9 usando 258 g (2.6 mol) de ácido clorhídrido concentrado, manteniendo la temperatura debajo de 30°C. La capa acuosa se separa. Se adiciona etanol 3A (625 ml) a la capa acuosa separada y la mezcla se acidifica a pH < 3 con 1 16 g (1 .2 mol) de ácido clorhídrico concentrado, manteniendo la temperatura debajo de 25°C. La mezcla acidificada es extraída dos veces con acetato de etilo (2.5 I y 1 .5 I). Las capas orgánicas combinadas son evaporadas a sequedad en un evaporador rotatorio a una temperatura debajo de 50°C. Los sólidos residuales se secan mediante destilación repetitiva con acetato de etilo (4 x 1 I) . El sólido residual es disuleto en 750 ml de metanol y tratado con carbono decolorante (10 g de lecho Darco-G60) a temperatura ambiente durante la noche. El carbono es removido mediante filtración a través de tierra diatomácea. El filtrado es evaporado a sequedad en un evaporador rotatorio a una temperatura debajo de 50°C. Se adicionó acetato de etilo (1 .5 I) al residuo y aproximadamente 500 ml son removidos en el evaporador rotatorio. La suspensión es enfriada debajo de 10°C durante > 1 hora. El sólido es colectado mediante filtración y lavado con 2 x 100 ml de acetato de etilo frío (5-8°C). Después del secado a 50°C durante 72 horas, el producto deseado es obtenido.

Ejemplo 37 Preparación alternativa de ácido 2S-(1 -tetrahidro-p¡rimid-2-onil)-3-metil butanoico A. (S)-(-)-N-carboximetil-N(ß)cianoetil valina A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos de 5 I con un agitador mecánico, se adicionó (S)-valina (170.1 g, 1.45 mol) y agua 145 ml. La solución se enfrió a 0°C con un baño de agua helada y una solución de 1 .0 eq de KOH (93g de 88% KOH sólido) en 180 ml de agua se adicionó en forma de gotas sobre 20 minutos. Después de que la adición se completó, se adicionó acrilonitrilo 1 .0 eq (95.5 ml) en forma de gotas con agitación vigorosa mientras se mantenía la temperatura interna del matraz por debajo de 5°C. Se permitió que la solución se agitara entre 0-5°C durante 4.5h. Se adicionó agua (600 ml) y un medidor de pH se insertó en la solución. Se adicionó cloroformato de metilo 1 .0 eq (1 12 ml) en forma de gotas mientras se mantenía el pH de la solución entre 9.5 y 10.5, con solución de KOH acuoso al 10%. La adición tuvo lugar sobre 0.5h. Entonces se acidificó la solución con HCl concentrado y ácido fosfórico a pH 2 y se extrajo subsecuentemente con 2 I de acetato de isopropilo. La capa orgánica se concentró bajo vacío para dar 201 g (60%) de un aceite incoloro que solidificó en sedimentación. P.f. 65-66°C. Línea D de sodio de rotación óptica a 25°C -0.44 (c=4.3, etanol). IR (cm"1 , C DCI3) 2960, 1740, 1710, 1470. 1 H NM R (300 MHz, CDCI3) ; (d TMS, 0.00) ppm 0.93 (d,3H J = 7Hz); 1 .07 (d,3H J=6Hz; 2.16-2.36 (m, 1 H); 2.62-2.86 (m,2H) ; 3.62 (t,2H, J=7.5 Hz); 3.77 (s, 1 .2H rotámero); 3.82 (s, 1 .8H rotámero); 4.15-4.30 (m, 1 H); 9.76-9.96 (brs, 1 H). ms (DCI/NH3) 246, 185, 146, 125. FAB hrms: cal para (M+H)+: 229.1 188; encontrado: 229.1 185.

B. Acido 2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-oniP-3-metil butanoico A un frasco de presión de 2 I se adicionó el producto del Ejemplo 37A (190 g, 0.833 mol), agua (900 ml) y KOH (3eq, 140 g). A esta solución a temperatura ambiente se adicionaron 75 g de aleación de níquel aluminio (Tipo Raney). Note que esta es la forma inactivada. La solución se selló en una bomba de presión y se colocó bajo 4.218 kg/cm2 de hidrógeno. La solución resultante se calentó a 100°C durante 4 h. Después de enfriar la solución a temperatura ambiente, se filtró, lavó con 900 ml de diclorometano y subsecuentemente se acidificó a pH 1 . La solución acuosa se extrajo con 2 x 900 ml de diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se concentraron para dar 120 g de producto crudo, el cual se hizo pasta en acetato de isopropilo para dar 70 g del compuesto del título.

Ejemplo 38 Preparación alternativa de (2S,3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetil)amino-3- hidroxi-5-f2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-onil)-3-metil butanoipamino- 1 ,6- difenilhexano A-1 . Cloruro de 2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-onil)-3-met¡l butanoilo Acido 2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-onil)-3metil butanoico (17.6 g, 87.9 mmoles) se hizo pasta en THF (240 ml) y se enfrió a <5°C. Se adicionó cloruro de tionilo (14.3 g, 120 mmoles) sobre 5 minutos (exotérmico). La pasta se agitó a 20°C durante 70 min hasta que estuvo completa mediante HPLC (muestras extinguidas en metanol). THF se removió mediante evaporación rotatoria; se adicionó heptano (90 ml) y se removió mediante evaporación rotatoria, produciendo una masa sólida húmeda. El material se hizo pasta en DMF (85 ml).

A-2. Preparación alternativa de cloruro de 2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-oniP- 3-metil butanoilo Acido 2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-onil)-3-metil butanoico (39.6 g, 198 mmoles) se hizo pasta en THF (590 ml) y se enfrió a 1 °C. El cloruro de tionilo (28.3 g, 238 mmoles) se adicionó sobre 5 minutos (exotérmico). La pasta se agitó a 20°C durante 2 horas. TH F se removió en el evaporador rotatorio; TH F (200 ml) se adicionó y removió en el evaporador rotatorio, produciendo una masa sólida húmeda. El material se hizo pasta en DMF (225 ml).

B-1 . (2S.3S.5S)-2-N . N-dibencilamino-3-hidroxi-5-r2S-(1 -tetrahidro-pirimid- 2-onil)-3-metil butanoipamino-1 ,6-difenílhexano (2S,3S,5S)-2-N , N-dibencilamino,3-hidroxi-5-amino-1 ,6-difenilhexano (ca. 83 mmoles; patente estadounidense No. 5.491 ,253, emitida el 13 de febrero de 1996, la cual se incorpora en la presente por referencia) e ¡midazoi (8.2 g, 120 mmoles) se disolvieron en acetato de etilo (350 ml, KF < 0.1 %) y se enfriaron a 2°C. El producto pastoso del Ejemplo 38A- 1 se adicionó (exotérmica, la temperatura máxima fue 10°C), seguido por un enjuague de DMF (15 ml). La reacción se agitó fría inicialmente, entonces se permitió que lentamente se calentara a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La reacción se extinguió con 100 ml de agua y se agitó 30 minutos. La capa orgánica se separó y lavó con 3 x 125 ml de NaCI al 5%. La solución orgánica se filtró y concentró en evaporador rotatorio a un jarabe espeso, 62 g. La pureza H PLC aproximada 85% (área pico). El contenido de isómero aproximadamente 1 1 .2%. CIMS (NH3) m/z 647 (M + H)+. 1 H NMR (300 MHz, CDCI3) d 7.35-7.13 (m, 10H), 7.13-7.06 (m, 1 H), 6.87 (br d, 1 H), 5.22 (br s, 1 H), 4.28 (d, 1 H), 4.20-4.05 (m, 1 H), 3.95 (d, 2H), 3.65-3.56 (m, 1 H), 3.37, (d, 2H), 3.12-2.89 (m, 5H), 2.83-2.53 (m, 4H), 2.23-2.08 (m, 1 H), 1 .74-1 .40 (m, 4H), 0.87-0.75 (m, 6H). 13C NMR (75 MHz, CDCI3) 5 170.0, 156.6, 140.2, 139.1 , 138.4, 129.3, 129.1 , 128.9, 128.4, 128.3, 128.0, 127.1 , 126.0, 125.8, 69.1 , 64.0, 63.1 (br), 54.2, 49.2, 41.2, 40.5, 40.0, 39.7, 31.5, 25.4, 21.6, 19.5, 18.6.

B-2. Preparación alternativa de (2S,3S,5S)-2-N, N-dibencilamino-3-hidroxi- 5-f2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-onil)-3-metil butano¡llamino-1 ,6-difenilhexano (2S,3S,5S)-2-N, N-dibencilamino-3-hidroxi-5-amino-1 ,6-d ifenil hexano (ca. 180 mmoles; patente estadounidense No 5,491 ,253, emitida el 13 de febrero de 1996, la cual se incorpora en la presente por referencia) e imidazol (38.1 g, 560 mmoles) se disolvieron en acetato de etilo (675 ml , KF < 0.1 %) y se enfriaron a 1 °C. El producto pastoso del Ejemplo 38A-2 se adicionó lentamente sobre 30 minutos (exotérmica, la temperatura máxima fue 6°C). Seguido por un enjuague de acetato de etilo (225 ml). La reacción se agitó fría durante 1 .5 horas, entonces se permitió que se calentara lentamente a aproximadamente 27°C y se agitó durante aproximadamente 20 horas. La reacción se extinguió con una solución diluida de HCl (36.75 g de HCl concentrado en 225 ml de agua) y se agitó 20 minutos. La mezcla bifásica se filtró con un enjuague de acetato de etilo de 100 ml. La capa orgánica se separó y lavó con 3 x 125 ml de NaCI al 5%. La capa orgánica se separó y lavó con 3 x 225 ml de NaCI al 5% y 2 x 225 ml de NaHC03 al 5%. La solución orgánica se concentró mediante evaporación rotatoria para proporcionar el producto deseado como un jarabe espeso.

C. (2S.3S.5S)-2-amino-3-hidroxi-5-r2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2-onil)-3-metil butanoipamino-l .e-difenilhexano El producto crudo del Ejemplo 38B (ca. 83 mmoles) se disolvió en metanol (260 ml). Pd/C (50% de catalizador de Pearleman húmedo, 10.4 g de peso húmedo) y formato de amonio (15.1 g, 239 mmoles) se adicionaron y la mezcla se calentó a 50°C. Después de 2.5 horas, la reacción se completó mediante TLC. La mezcla se enfrió a 35°C y el catalizador se removió mediante filtración a través de tierra diatomácea, seguido por un enjuague de metanol (250 ml). El filtrado combinado se concentró en el evaporador rotatorio. El residuo se disolvió en dioxano (150 ml) con calentamiento. El dioxano se removió en el evaporador rotatorio para producir 60 g de aceite amarillo. La pureza de HPLC aproximadamente 88.2% (área pico). El contenido de isómero > 7.9% (sin embargo, uno isómero no se separa del pico principal).

CIMS (NH3) m/z 467 (M + H)+ 1 H NMR (300 MHz, CD3OD) d 7.35-7.10 (m, 10H), 4.40-4.20 (m, 1 H), 4.25 (d, 1 H), 3.68-3.57 (m, 1 H), 3.20-3.09 (m, 2H), 3.08-2.90 (m, 3H), 2.90-2.74 (m, 2H), 2.65-2.49 (m, 2H), 2.20-2.04 (m, 1 H), 1.92-1.78 (m, 1 H), 1.78-1.60 (m, 2H), 1.60-1.45 (m, 1 H), 0.88-0.77 (m, 6H) 13C NMR (75 MHz, CD3OD) d 171.3, 158.4, 140.5, 139.8, 130.6, 130.4, 129.5, 129.3, 127.3, 127.0, 71.5, 63.9, 57.1 , 49.1 , 41.8, 41.6, 41.4, 40.7, 40.5, 26.9, 22.5, 20.0, 18.9 1 H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 7.35-7.13 (m, 10H), 5.35 (s, 1 H), 4.40-4.23 (m, 2H), 3.60-3.52 (m, 1 H), 3.25-2.65 (m, 8H), 2.58-2.45 (dd, 1 H), 2.30-2.10 (m, 1 H), 1.90-1.65 (m, 3H), 1 .65-1.50 (m, 1 H), 0. 91 (d, 3H), 0.84 (d, 3H) 1 c NMR (75 MHz, CDCI3) d 171.2, 156.6, 139.1 , 138.5, 129.3, 129.2, 128.5, 128.2, 126.3, 126.0, 71.6, 63.1 (br), 56.3, 48.7, 41.6, 41.0, 40.6, 40.0, 39.6, 25.5, 21.7, 19.7, 18.7 D. Sal de ácido (2S,3S,5S)-2-amino-3-hidroxi-5-r2S-(1 -tetrahidro-pirimid-2- onil)-3-metil butanoillamino-l ,6-difenilhexano (S)-piroglutámico El producto crudo del Ejemplo 38C se disolvió en dioxano (370 ml, KF = 0.07% de humedad). El ácido S-piroglutámico (10.3 g, 80 mimóles; se adicionó y la suspensión se calentó a 50°C para dar una solución clara. Después de agitar 1 hora, la solución se sembró con unos cuantos cristales de la sal del producto. La sal precipitó lentamente. La pasta se enfrió lentamente y se agitó durante la noche a temperatura ambiente. El producto se aisló mediante filtración y se lavó con dioxano (100 ml). El peso de la torta húmeda fue 120 g. El producto se secó a 60°C en un horno de vacío con purga de nitrógeno. El rendimiento fue de 35.2 g de polvo blancuzco. Pureza HPLC: >98% (área pico incluyendo ácido piroglutámico). Contenido de isómero aproximado 1 % (sin embargo, un isómero no se separa del pico principal), p.f = 135-141 [a]D25 = -21 .9° (c=2.5, CH3OH) CIMS (NH3) m/z 467 (M + H para base)+, 147 (M + NH4 para ácido piroglutámico) + , 130 (M + H para ácido piroglutámico)+ IR (KBr) 1586, 1655, 1682 crrr1 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 7.62 (s, 1 H), 7.54 (d, 1 H), 7.32-7.06 (m, 10 H), 6.33 (s, 1 H), 4.26 (d, 1 H), 4.1 1 -3.99 (m, 1 H), 3.82 (dd, 1 H), 3.57-3.48 (m, 1 H), 3.27-3.19 (m, 1 H), 3.08-2.95 (m, 2H), 2.92-2.70 (m, 5H), 2.53-2.43 (m, 1 H), 2.26-2.14 (m, 1 H), 2.13-1.99 (m, 2H), 1.99-1.87 (m, 2H), 1.72-1.61 (m, 2H), 1.61 -1 .49 (m, 1 H), 1.46-1.35 (m, 1 H), 0.70 (d, 3H), 0.64 (d, 3H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d 176.9, 176.1 , 169.2, 155.5, 138.8, 137.7, 129.3, 129.3, 128.3, 127.8, 126.4, 125.5, 66.9, 61.5, 56.9, 55.3, 46.8, 40.2, 39.6, 39.4, 38.8, 37.4, 29.8, 25.4, 25.3, 21.6, 19.6, 18.7.

H NMR (300 MHz, CD3OD) d 7.32-7.03 (m, 10H), 4.23-4.12 (m, 1 H), 4.12 (d, 1 H), 3.98 (dd, 1 H), 3.71-3.63 (m, 1 H), 3.46-3.37 (m, 1 H), 3.1 1 -2.98 (m, 2H), 2.97-2.80 (m, 4H), 2.70-2.59 (m, 1 H), 2.49-2.38 (m, 1 H), 2.38-2.12 (m, 3H), 2.07-1.92 (m, 2H), 1.75-1.63 (m, 2H), 1.63-1.50 (m, 1 H), 1.45-1.32 (m, 1 H), 0.74-0.65 (m, 6H). 13C NMR (75 MHz, CD3OD) 5 181.0, 179.6, 171.6, 158.4, 139.5, 137.3, 130.5, 130.0, 129.4, 128.3, 127.2, 68.1 , 64.0, 59.6, 57.7, 48.8, 41.7, 41.1 , 40.7, 40.6, 37.9, 31.1 , 26.9, 26.9, 22.5, 20.1 , 18.9. 1 H NMR (300 MHz, D20) d 7.30-6.97 (m, 10H), 4.16-4.03 (m, 1 H), 3.99-3.91 (m, 2H), 3.71-3.63 (m, 1 H), 3.43-3.35 (m, 1 H), 3.00-2.68 (m, 6H), 2.40-2.13 (m, 5H), 1.88-1.72 (m, 3H), 1.68-1.56 (m, 1 H), 1.52-1.37 (m, 1 H), 1.32-1.18 (m, 1 H), 0.60-0.52 (m, 6H). 1 C NMR (75 MHz, D20) d 181.6, 180.1 , 171.0, 157.3, 137.9, 135.2, 129.3, 129.2, 129.1 , 128.4, 127.6, 126.4, 67.3, 62.6, 58.2, 56.7, 47.5, 40.1 , 39.4, 39.2, 38.7, 35.7, 29.6, 25.3, 25.2, 20.5, 18.5, 17.6.

E. (2S.3S,5S)-2-(2,6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-hidroxi-5-r2S-(1 - tetrahidro-pirimid-2-onil)-3-metil butano¡pamino-1 ,6-difenilhexano El producto del Ejemplo 1 H (7.26 g, 40.3 mmoles) se hizo pasta en acetato de etilo (22 ml) y cloruro de tionilo (5.75 g, 48.3 mmoles) se adicionó, seguido por 1 gota de DMF. La mezcla se calentó a 50°C y se agitó 5 horas. La solución del cloruro ácido resultante se enfrió a 22°C y se sostuvo para la reacción de acoplamiento subsecuente. El producto del Ejemplo 38D (20 g, 31 .7 mmoles, corregido para contenido de dioxano), bicarbonato de sodio (16.5 g, 197 mmoles), acetato de etilo (150 ml) y agua (150 ml) se combinaron en un matraz y se agitaron hasta que el producto del Ejemplo 38D se había disuelto (algo de sal permanece sin disolver). La solución de cloruro ácido preparado antes se adicionó sobre 5 minutos, seguido por un enjuague de acetato de etilo (5 ml). La adición fue suavemente exotérmica (temperatura máxima 23°C). La mezcla se agitó durante la noche.

La capa orgánica se separó y lavó con bicarbonato de sodio al 5% (100 ml) y agua (100 ml). El solvente se removió en el evaporador rotatorio. El residuo se disolvió en acetato de etilo (100 ml) y se filtró, enjuagando con acetato de etilo (50 ml). El solvente se removió del filtrado combinado en el evaporador rotatorio. El residuo se disolvió en acetato de etilo caliente (105 ml) y heptano (105 ml) se adicionó; el producto comenzó a cristalizar rápidamente. La pasta se enfrió y agitó a 20-23°C durante 5 horas. El producto se colectó mediante filtración y se lavó con acetato de etilo/heptano 1 /1 (v/v) (30 ml). El producto se secó bajo horno de vacío a 70°C para proporcionar 18.8 g del producto deseado como un polvo blanco.

Eiemplo 39 Preparación de (2S.3S.5S)-2-(2, 6-di metilf enoxiaceti I) amino-3-hidroxi-5f2S- (1 -tetrah id ro-pir¡mid-2-oniP-3-metil butanoillamino-1 .6-dif enilhexano amorfo A. El producto del Ejemplo 38E (2.5 g) se disolvió en 8 ml de etanol absoluto. Esta solución se adicionó lentamente en forma de gotas a 250 ml de agua enfriada a 9°C con agitación vigorosa. Un sólido blanco apareció inmediatamente. La agitación se continuó durante 15 minutos y los sólidos fueron colectados mediante filtración. El secado a vacío a 50°C durante 12 horas proporcionó 2.32 g del producto deseado como un sólido amorfo.

B. El producto del Ejemplo 38E (2.5 g) se disolvió en 6 ml de etanol absoluto. Esta solución se adicionó lentamente en forma de gotas a 31 ml de agua enfriada a 7-9°C con agitación vigorosa. Un sólido blanco apareció. La agitación se continuó durante 20 minutos y los sólidos se colectaron mediante filtración. El secado a vacío a 50°C durante 12 horas proporcionó 2.24 g del producto deseado como un sólido amorfo. C. El producto del Ejemplo 38E (0.5 g) se disolvió en 8 ml de isopropanol. Es solución se adicionó lentamente en forma de gotas a 100 ml de agua enfriada a 10-15°C con agitación vigorosa. Un sólido blanco apareció. La agitación se continuó durante 20 minutos y los sólidos se colectaron mediante filtración. El secado con aire proporcionó 0.48 g del producto deseado como un sólido amorfo. D. El producto del Ejemplo 38E (0.5 g) se disolvió en 8 ml de acetona y 0.2 ml de etanol absoluto. Esta solución se adicionó lentamente ?ápßft?ta de gotas a 100 ml de agua enfriada a 10-15°C con ^¿I ación vigorosa. Un sólido blanco apareció. La agitación se continuó durante 10 minutos y los sólidos se colectaron mediante filtración. El secado con aire proporcionó 0.46 g del producto deseado como un sólido amorfo. E. El producto del Ejemplo 38E (0.5 g) se disolvió en 2 ml de acetonitrilo. Esta solución se adicionó lentamente en forma de gotas a 1 00 ml de agua enfriada a 10-15°C con agitación vigorosa. Un sólido blanco apareció. La agitación se continuó durante 20 minutos y los sólidos se colectaron mediante filtración. El secado con aire proporcionó 0.46 g del producto deseado como un sólido amorfo.

Ejemplo 40 N-(3-cloropropilaminocarbonil)-valina metil éster 3-cloropropilisocianato (0.31 ml, 3.0 mmol) se adicionó a una pasta de hidrocloruro de L-valina metil éster (0.5 g, 3.0 mmol) y trietilamina (0.42 ml, 3.0 mmol) en TH F (10 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 4 horas a temperatura ambiente y entonces se extinguí con la adición de bicarbonato de sodio acuoso. La mezcla de reacción extinguida fue extraída para dar acetato de etilo. La capa orgánica se separó, se secó y evaporó para dar el producto deseado.

Eiemplo 41 (2S.3S.5S)-2-(2.6-dimetilfenoxiacetiPamino-3-h¡droxi-5-r2S-(1-tetrahidro-4- hidroxi-pirimid-2-oniP-3-metil butanoillamino-1 ,6-d ¡fen ilhexano La reacción de una solución del producto del Ejemplo 25E en cloruro de metileno con borohidruro de sodio proporciona el producto deseado.

Eiemplo 42 (2S.3S.5S)-2-(2, 6-dimetilf enoxiacet¡Pamino-3-hidroxi-5-r2S-(1 -tetrahidro-6- hidroxi-pirimid-2-onil)-3-met¡l butanoipamino-1 , 6-dif enil hexa no Una incubación de 300 ml de (2S,3S,5S)-2-(2 ,6-dimetilfenox¡acetil)am¡no-3-hidroxi-5-[2S-(1 -tetrahidro-6-hidroxi-pirimid-2-onil)-3-metil butanoiI]amino-1 ,6-difenilhexano marcado con 1 C en el grupo carbonilo de la porción de acetilo (50 µM, 6.0 µCi) se realizó con microsomas de hígado de rata (0.5 mg/ml de proteína microsomal) y un sistema generador de NADPH durante 60 minutos a 37°C. La reacción metabólica se paró al adicionar 300 ml de acetonítrilo. El sobrenadante obtenido después de la centrifugación a 3000 RPM durante 10 minutos se evaporó a sequedad a vacío. El residuo se volvió a constituir en 2 ml de fase móvil de HPLC. El aislamiento de producto deseado se alcanzó a temperatura ambiente con una columna C?8 de 10 x 150 mm de 5 µm de Beckman Ultraspher conectada a una columna de guardia de cartucho de C?8 de 5 µm de Alltech Ultraspher. Un gradiente lineal de 25-55% de acetonitrilo en amortiguador (acetato de amonio 25 mM, pH ajustado a 4.8 con ácido fórmico) sobre 57 minutos se usó como eluyente de columna a una velocidad de flujo de 2.8 ml/minuto.

Ensavo fluorogénico para clasificar inhibidores de proteasa H IV La potencia inhibidora del compuesto de la invención puede ser determinada mediante el siguiente método. El compuesto de la invención se disuelve en DMSO y una pequeña alícuota diluida adicionalmente con DMSO a 100 veces la concentración final deseada para la prueba. La reacción se realiza en un tubo 6 x 50 mm en un volumen total de 300 mililitros. Las concentraciones finales de los componentes en el amortiguador de la reacción son: 125 mM de acetato de sodio, cloruro de sodio 1 M, 5 mM de ditiotreitol, 0.5 mg/ml de albúmina de suero bovino, 1 .3 µN de substrato fluorogénico, 2% (v/v) de dimetilsuflóxido, pH 4.5. Después de la adición del inhibidor, la mezcla de reacción es colocada en el soporte de celda del fluoromedidor y se incubó a 30°C durante varios minutos. La reacción se inicia mediante la adición de una pequeña alícuota de proteasa de HIV fría. La intensidad de fluorescencia (excitación 340 nM, emisión 490 nM) es registrada como una función del tiempo. La velocidad de reacción es determinada por los primeros seis a ocho minutos. La velocidad observada es directamente proporcional a los moles de substrato cortado por unidad de tiempo. El procentaje de inhibición es 100 X (1 - (velocidad en presencia de inhibidor)/(velocidad en ausencia de inhibidor)). Substrato fluorogénico: Dabcyl-Gaba-Ser-GIn-Asn-Tyr-Pro-lle-Val-Gln-EDANS, en donde DABCYL = ácido 4-(4-dimetilam¡no-fenil)azobenzoico, Gaba = ácido ?-aminobutírico, y EDANS = ácido 5-((2-ami noetil)amino)-naf taleno- 1 -sulfónico.

Tabla 1 - Compuesto de Eiemplo Porcentaje de in hibición Ce mcentración de inhibidor (nanomolar) 1 P 92.6 0.5 2B 93.2 0.5 3C 86.9 0.5 4F 49.7 0.5 5 80.8 0.5 6F 61 .4 0.5 7B 67.1 0.5 8 55.6 0.5 9B 62.6 0.5 10F 81 .0 0.5 1 1 B 91 . 1 0.5 12B 76.8 0.5 13B 56.2 0.5 14D 52.7 0.5 15 48 0.5 17C 87.2 0.5 18C 57.8 0.5 19E 68.5 0.5 22E 71.8 0.5 23C 86.0 0.5 25E 100 0.5 26H 94.6 0.5 27D 92.9 0.5 28 86.6 0.5 29C 72.6 0.5 30B 91.0 0.5 Actividad antiviral La actividad anti-HIV del compuesto de la invención puede determinarse en células MT4 de acuerdo al siguiente procedimiento. Las células MT4 fueron infectadas con sobrenadante libre de células de H IVI I I B (previamente congeladas con dosis infecciosa de cultivo de tejido 50% conocido (TCID5o) a 0.003 multiplicidad de infección (MOI) durante una hora. Después de una hora de infección, las células se lavaron dos veces para remover virus residuales, se volvieron a suspender en medio de cultivo y se sembraron en placas de cultivo de tejido de 96 cavidades a 1x10?4 células por cavidad con varias diluciones semi-log de los compuestos. Las células sin infectar son incluidas como toxicidad y controles de células. Medio RPMI 1640 (Gibco) con 10% de suero bovino fetal se usó como medio de cultivo. Varias concentraciones de suero humano (Sigma) 50%, 25% y 12.5% se adicionaron al medio de cultivo resultando en una concentración final de 60%, 35% y 22.5% de suero total. Todas las placas de ensayo se incubaron en incubador a 37 grados centígrados durante 5 días. Se adicionó MTT (sigma, 5 mg/ml de soporte en PBS) a todas las cavidades a 25 ul por cavidad, incubado durante 4 horas. 20% SDS con HCl 0.02 N en agua se adicionó a 50 ul por cavidad para provocar lisis en células. Las placas incubadas durante la noche para lisis completas se leyeron en un lector de placa de microtítulo a 570/650 nm de longitudes de onda para determinar la densidad óptica de células (O. D.). Los datos crudos se analizaron para el porcentaje de inhibición mediante la siguiente fórmula: Cavidad de prueba O. D. - control de virus O. D. x 100 Control de célula O. D. - control de virus O. D.

La concentración efectiva al 50% (EC50) se calculó mediante la ecuación de efecto medio (Chou, 1975, Proc. Int. Cong . Pharmacol. 6th p. 619) para determinar la eficacia del compuesto. La concentración letal al 50% (LC50) se calculó usando células MT4 sin infectar. Bajo estas condiciones, los siguientes datos fueron obtenidos (n = 4 determinaciones por duplicado: Tabla 2 Compuesto de Eiemplo iCso J_C_50 (µM, 0% de plasma) (µM) 1 P 0.01 41.32 2B 0.016 17.78 3C 0.025 49.5 4F 0.101 >100 5 0.368 >100 6F 0.193 >100 7B 0.204 >100 8 0.019 17.78 9B 0.272 19.33 10F 0.047 91.97 11B 0.19 18.16 12B 0.093 19.11 14D 0.053 >100 15 0.119 >100 17C 0.051 18.96 18C 0.329 19.1 19E 0.395 17.95 20D 0.283 24.08 25E 0.012 22.88 26H 0.015 33.0 27D 0.03 56.23 28 0.011 72.2 29C 0.427 56 30B 0.003 18 Generación in vitro y caracterización de HIV resistente al compuesto del Eiemplo 2B A. Selección del compuesto del Eiemplo 2B HIV-1 resistente mediante paso in vitro Las células MT4 fueron infectadas con el clon pNL4-3 de HIV tipo natural, y el virus se pasó en forma de serie en la presencia de concentraciones en aumento del compuesto del Ejemplo 2B para seleccionar el compuesto del Ejemplo 2B resistente a especies de virus. El virus creció inicialmente en la presencia de 0.02 µM del compuesto del Ejemplo 2B (paso P1 ), y durante el curso del procedimiento de selección de cinco meses, la concentración del compuesto del Ejemplo 2B se incrementó a 3.0 µM (Paso P1 7). Mientras que tomó más de 1 10 días en el cultivo para que la concentración de medicamento se incrementara de 0.02 µM a 0.80 µM, la concentración de medicamento pudo ser rápidamente intensificada de 0.80 µM a 3.0 µM durante las seis semanas subsecuentes. Los resultados de estos estudios de selección se muestran en la Tabla 3 a continuación.

Tabla 3. Selección in vitro y susceptibilidad fenotípica de HIV-1 pasado al compuesto del Ejemplo 2B Virus Conc. del compuesto del No. de días en El compuesto del Ejemplo 2B usado en cultivo Ejemplo 2B selección (µM) EC5o (µM) NL4-3 NA NA 0.028 P1 0.02 8 ND P2 02 16 0.025 P3 0.04 26 ND P4 0.04 37 0.032 P5 0.06 44 0.140 P6 0.12 58 0.149 P7 0.15 65 0.201 P8 0.21 75 0.295 P9 0.30 82 0.333 P10 0.30 93 0.464 P1 1 0.42 100 0.346 P12 0.62 107 0.291 P13 0.80 1 14 1 .001 P14 1 .10 121 1 .1 15 P15 1 .50 128 1 .337 P16 2.00 135 1 .426 P17 3.00 156 N D B. Análisis de secuencia de la región de codificación de proteasa de HIV de los pasos seleccionados Las secuencias de DNA provirales de células infectadas de los pasos P4, P6, P7 y P1 1 -P17 se clonaron y secuenciaron. Una compilación de las siete substituciones comunes observadas durante la selección de medicamento y su frecuencia en cada paso se muestra en la Tabla 4 a continuación.

Tabla 4. Frecuencia de las mutaciones comunes observadas durante la selección in vitro con el compuesto del Ejemplo 2B [inhibidí Dr] Fl recuencia (No. de clones) Paso (µM) 184V L10F M461 T91 S V321 147V 147A 4 0.04 0/3 0/3 0/3 0/3 0/3 0/3 0/3 6 0.12 6/7 2/7 0/7 0/7 2/7 0/7 0/7 7 0.15 6/6 6/6 2/6 0/6 0/6 0/6 0/6 1 1 0.42 7/7 7/7 7/7 5/7 0/7 0/7 0/7 12 0.62 7/7 7/7 7/7 6/7 0/7 0/7 0/7 1 3 0.80 5/5 8/8 5/5 3/5 1 /5 1 /5 0/5 14 1 .10 5/5 8/8 5/5 4/5 4/5 4/5 0/5 1 .50 5/5 8/8 5/5 5/5 4/5 4/5 0/5 16 2.00 10/10 10/10 10/10 8/1 0 9/10 8/1 0 0/10 17 3.00 5/5 5/5 5/5 4/5 0/5 0/5 5/5 Para cada paso, excepto el paso 4 (P4) , entre cinco y diez clones individuales fueron secuenciados. La secuencia de gene de proteasa tipo natural estuvo presente en dos de los tres clones P4, pero no se observó en ningún otro paso después de P4.

Por el paso 6 (P6), una mutación 184V predominante surgió, la cual estuvo presente en seis de siete clones. Esta mutación estuvo presente en cada clon secuenciado después de P6, sugiriendo que es una mutación crítica seleccionada en una etapa temprana necesaria para conferir resistencia al compuesto del Ejemplo 2B. El análisis del paso subsecuente P7 reveló una segunda mutación L10F, la cual estuvo presente en los seis clones, así como una tercer mutación M461 presente en dos de seis clones. Ambas mutaciones adicionales también se mantuvieron en todos los clones secuenciados después del paso P7, sugiriendo que éstas también son críticas para mantener el compuesto del fenotipo de resistencia del Ejemplo 2B. La substitución M461 ha sido previamente observada durante la selección con inhibidores de proteasa HIV, y pueden servir para compensar otros cambios presentes en cualquier residuo 82 o 84. Por el paso P1 1 , la emergencia de una cuarta mutación altamente conservada T91 S se observó en cinco de siete clones. Aunque se obtuvieron clones de pasos subsecuentes que no contenían esta substitución, la mutación T91 S se observó a una frecuencia de por lo menos 60% en todos los pasos subsecuentes. Los pasos P13-P16 se marcaron por la aparición de dos mutaciones adicionales V321 y 147V. Aunque solo presentes en uno de cinco clones del paso P13, ambas mutaciones estuvieron presentes en una frecuencia de 80% en los siguientes tres pasos, apareciendo casi siempre juntas en el mismo clon . De manera interesante, la mutación V321 apareció en dos de seis clones en el paso P6, pero no se observó en ningún otro clon hasta el paso P1 3 Adicionalmente, ninguno de los cinco clones secuenciados del paso P17 contenía la mutación V321 . Ya que la mutación V321 estuvo casi siempre asociada con la mutación 147V en el mismo clon, la desaparición de la mutación V321 en el paso P17 puede explicarse por lo menos en parte por el surgimiento de una segunda mutación en el residuo 47 de Val a Ala, una substitución la cual estuvo presente en todos los cinco clones del paso P17.

C. Susceptibilidad de los virus pasados al compuesto del Eiemplo 2B Siguiendo la selección, los soportes virales de cada paso se titularon, y su resistencia fenotípica al compuesto del Ejemplo 2B se determinó usando el ensayo colorimétrico de MTT. Basado en este análisis, el fenotipo del virus pasado al compuesto del Ejemplo 2B cayó dentro de 3 clases amplias: baja resistencia (pasos P1 -P4, susceptibilidad similar a aquélla de la especie paternal pNL4-3), resistencia intermedia (pasos P5-P12, 5 a 16 veces mayor EC50 que pNL4-3), y alta resistencia (pasos P13-P17, >35 veces mayor ECSo que N L4-3).

D. Resistencia cruzada de los virus pasados a otros inhibidores de proteasa La susceptibilidad de cuatro especies virales pasadas (P7, P1 1 , P14, y P17) al compuesto del Ejemplo 2B, rítonavir, indinavir y saquinavir fue examinada. Los valores EC50 se proporcionan a continuación en la Tabla . Como resistencia de nivel alto al compuesto del Ejemplo 2B surgió (P14, P17), resistencia cruzada importante (18-20 veces) a ritonavir se volvió evidente. El virus P17 también fue significativamente resistente a indinavir (20 veces). Sin embargo, todos los virus pasados retuvieron sensibilidad substancial (cambio de < 4 veces en ECSo) a saquinavir.

Tabla 5. Resistencia cruzada de H IV seleccionado in vitro por el compuesto del Ejemplo 2B a ritonavir, indinavir y saquinavir EC (µM) Virus Compuesto del Ritonavir Indinavir Saquinavir Ejemplo 2B NL4-3 0.028 0.098 0.067 0.020 P7 0.1 16 0.221 0.1 13 0.033 P1 1 0.249 0.478 0.153 0.058 P14 1 .278 1 .738 0^425 0.048 P17 9.475 2.094 1 .361 0.082 Estudios adicionales fueron realizados para comparar la actividad inhibidora del compuesto del Ejemplo 2B contra clones de H IV mutantes resistentes a ritonavir. Los valores de EC50 tanto para el compuesto 2B como para ritonavir en la presencia (50%) y ausencia (0%) de suero humano se proporcionan a continuación en la Tabla 6.

Tabla 6. Actividad del compuesto del Ejemplo 2B contra clones de H IV mutantes resistentes a ritonavir Compuesto del Ritonavir Ejemplo 2B % de suero humano 0% 50% 0% 50% Clon de virus Tipo natural (pN L4-3) 22 126 71 1400 V82A 33 268 144 4080 V82F 26 147 146 3600 V82T 31 147 146 5640 V82S 26 314 304 9220 I84V 20 170 141 2720 G48V 8 156 111 1710 L90M 16 180 93 2280 I54V, V82T 213 1150 613 16,700 Tipo natural (HXB2) 12 51 61 1050 E35D, M361 , I54V, A71 V, V82T 83 691 1170 21,900 K20R, E35D, M36I , I54V, A71 V, V82T 93 376 1420 16,000 Los datos muestran que a pesar del desarrollo de la resistencia profunda a ritonavir, el compuesto del Ejemplo 2B es todavía efectivo contra aquellos clones mutantes resistentes a ritonavir. Todavía estudios adicionales fueron realizados para probar la actividad del compuesto del Ejemplo 2B contra H IV resistentes a ritonavir de pacientes. Los valores de EC50 para el compuesto del Ejemplo 2B y ritonavir en aquellos pacientes son proporcionados a continuación en la Tabla 7.

Tabla 7. Actividad del compuesto del Ejemplo 2B contra HIV resistentes a ritonavir de pacientes Paciente EC50 (nM) No. Día Mutación resistente en Compuesto Ritonavir secuencia del Ejemplo 2B 104 -1 Línea base 8 21 104 21 V82A 9 46 104 28 V82T 13 67 129 -1 Línea base 5 24 129 84 M36I, I54V, A71V, V82T 33 203 129 140 K20K/R, M36M/I, I54V, 29 677 A71A/V, V82T 131 -28 Línea base 4 18 131 88 M36I, I54V>1, V82A 15 163 131 200 K20K/R.M36I, I54I/V, V82A 52 731 224 -6 Línea base 6 29 224 110 L33L/F, V82T/S 12 79 224 190 K20K/N/R,L33L/F,M36M/I, 52 496 I54V/M,V82S 235 -1 Línea base 6 10 235 167 I54I/V,A71V,V82A,L90L/M 6 66 313 1 Línea base 4 12 313 57 M36M/I.V82F 11 64 313 85 M36M/I,I54I/V,V82S/F/A/T 25 274 410 1 Línea base 6 29 410 57 M36M/I, I548/V,V82A 33 341 410 85 M36I,I54V,V82A 97 545 Los datos en la Tabla 7 muestran muy claramente el desarrollo de resistencia a ritonavir en pacientes. En contraste marcado, sin embargo, el compuesto del Ejemplo 2B permanece eficaz para inhibir la proteasa de HIV en esos mismos pacientes. En resumen, los datos anteriores demuestran claramente que el uso de un compuesto de la presente invención produce un perfil diferente de mutaciones de proteasa HIV, y, por lo tanto, un diferente perfil del desarrollo de resistencia. Además, los datos muestran que un compuesto de la presente invención puede usarse para inhibir de manera efectiva la actividad de proteasa de HIV en pacientes que ya han desarrollado resistencia a uno o más inhibidores de proteasa diferentes, los cuales promueven un patrón de mutación de proteasa de HIV del tipo promovido por ritonavir. Los datos demuestran el valor de usar un compuesto de la invención en combinación con ritonavir o un inhibidor de proteasa de HIV, el cual promueve un patrón de mutación de proteasa de HIV del tipo promovido por ritonavir. Los compuestos de la presente invención pueden ser usados en la forma de sales derivadas de ácidos orgánicos e inorgánicos. Estas sales incluyen pero no están limitadas a las siguientes: acetato, adipato, alginato, citrato, aspartato, benzoato, bencensulfonato, bisulfato, butirato, camforato, camforsulfonato, digluconato, ciclopentanopropionato, dodecilsulfato, etanosulfonato, glucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, fumarato, hidrocloruro, hidrobromuro, hidroyoduro, 2-hidroxi-etanosulfonato (isetionato), lactato, maleato, metanosulfonato, nicotinato, 2-naftalensulfonato, oxalato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, picrato.pivaiato, propionato, succinato, tartrato, tiocianato, p-toluenosulfonato y undecanoato. También, los grupos que contienen nitrógeno básico pueden ser cuaternizados con tales agentes como haluros de alquilo inferior, tal como metilo, etilo, propilo, y cloruro de butilo, bromuros y yoduros; sulfatos de dialquilo como dimetilo, dietilo, dibutilo y sulfatos de diamilo, haluros de cadena larga tales como cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo, miristilo y estearilo, haluros de aralquilo como bromueros de bencilo y fenetilo, y otros. Agua o productos dispersables o solubles en aceite son obtenidos con ello. Ejemplos de ácidos, los cuales pueden emplearse para formar sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables incluyen tales ácidos inorgánicos como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico y ácido fosfórico y tales ácidos orgánicos como ácido oxálico, ácido maleico, ácido succínico y ácido cítrico. Otras sales incluyen sales con metales alcalinos o metales alcalinotérreos, tal como sodio, potasio, calcio o magnesio o con bases orgánicas. Las sales preferidas de los compuestos de la invención incluyen hidrocloruro, metanosulfonato, sulfonato, fosfonato e isetionatol . Los compuestos de la presente invención también pueden ser usados en la forma de esteres. Ejemplos de tales esteres incluyen compuestos en donde un grupo hidroxilo en el compuesto de esta invención ha sido acilado con un residuo de aminoácido N-protegido o desprotegido, una función fosfato, un residuo de hemisuccinato, un residuo de acilo de la fórmula R*C(0)- o R*C(S)- en donde R* es hidrógeno, alquilo inferior, haloalquilo, alcoxi, tioalcoxi, alcoxialquilo, tioalcoxialquilo o haloalcoxi, o un residuo de acilo de la fórmula R_-C(Rb)(Rd)-C(0)- o Ra-C(Rb)(Rd)-C(S)-en donde Rb y Rd son independientemente seleccionados de hidrógeno o alquilo inferior y Ra es -N(Re)(Rf), ORe o -SRe en donde Re y Rf son independientemente seleccionados de hidrógeno, alquilo inferior y haloalquilo, o un residuo amino-acilo de la fórmula R18oNH(CH_)2N HCH_C(0)- o R?8oNH (CH2)2OCH2C(0)- en donde R?80 es hidrógeno, alquilo inferior, arilalquilo, cicloalquilalquilo, alcanoilo, benzoilo o un grupo a-amino acilo. Los esteres de aminoácidos de particular interés son glicina y lisina; sin embargo, otros residuos de aminoácidos también pueden ser usados, incluyendo aquéllos en donde el grupo amino acilo es -C(0)CH2N R20o 2o? en donde R20o y R2o? son independientemente seleccionados de hidrógeno y alquilo inferior o el grupo -NR20oR2o? forma un nitrógeno conteniendo un anillo heterocíclico. Estos esteres sirven como pro-medicamentos del compuesto de la presente invención y sirven para incrementar la solubilidad de estas substancias en el tracto gastrointestinal. Estos esteres también sirven para incrementar la solubilidad para la administración intravenosa del compuesto. Otros medicamentos incluyen compuestos en donde un grupo hidroxilo en el compuesto de esta invención es funcionalizado con un substituyente de la fórmula -CH(Rg)OC(0) R?_? o -CH(Rg)OC(S) R1 S? en donde R18? es alquilo inferior, haloalquilo, alcoxi, tioalcoxi o haloalcoxi y Rg es hidrógeno, alquilo inferior, haloalquilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo o dialquilaminocarbonilo. Tales promedicamentos pueden ser preparados de acuerdo al procedimiento de Screiber (Tetrahedron Lett. 1983, 24, 2363) mediante ozonólisis del metalil éter correspondiente en metanol seguido por el tratamiento con anhídrido acético. Los promedicamentos de esta invención son metabolizados in vivo para proporcionar el compuesto de esta invención. La preparación de los esteres de promedicamento se realiza al hacer reaccionar el compuesto de la invención con un derivado de amino acilo activado, fosforilo, hemisuccinilo o acilo como se definió antes. El producto resultante es desprotegido entonces para proporcionar el éster de promedicamento deseado. Los promedicamentos de la invención también pueden ser preparados mediante alquilación del grupo hidroxilo con (haloalquil)ésteres, transacetilización mediante bis-(alcanoil)acetales o condensación del grupo hidroxilo con un aldehido activado seguido por acilación del hemiacetal intermedio. Los medios para determinar la orientación espacial de un compuesto de esta invención son conocidos en la técnica. Un método preferido es la determinación del complejo proteasa de H lV/inhibidor mediante la técnica de cristalografía de rayos X. El proceso para determinar las estructuras de los complejos de proteína/inhibidor usando la técnica de rayos X es bien conocido (Ver T. L. Blundel y L. N . Johnson, Protein Crystallography, Academic Press, (1976) y Methods in Enzymology, volúmenes 1 14 y 1 1 5, H.W. Wyckoff et al. , eds. , Academic Press (1985)). Esta técnica puede emplear, por ejemplo, una preparación altamente purificada de proteasa de H IV en complejo con un inhibidor de interés en una solución amortiguada (típicamente a un pH de entre aproximadamente 4.5 y aproximadamente 8.0). Se permite que el complejo se cristalice en la presencia de un agente de precipitación (tal como sulfato de amonio) bajo condiciones las cuales producen cristales sencillos del complejo. Condiciones específicas para cristalizar la proteasa de H IV con varios inhibidores han sido bien documentadas (ver, por ejemplo, K. Appelt, Perspectives in Drug Discovery and Designs, 1 , 23-48 (1993)). La aplicación de un haz de rayo X concentrado (desde un sincrotrón o generador de rayos X de ánodo rotatorio) a un cristal montado y preparado apropiadamente producirá un patrón de difracción del haz de rayos X reflejado. La detección de los rayos difractados puede realizarse usando un detector de área de multicables (tal como aquél fabricado por Siemmens Analytical X-ray Instruments, Inc. (Madison, Wl)) o un sistema de placa de imagen II de eje R de Rigaku Corporation, The Woodlands, TX). El refinamiento de los datos de difracción de rayos X usando programas de computadora tal como X-PLOR (A.T. Brunger, X-PLOR, Versión 3.1 : Yale University Press: New Haven, CT, 1992, distribuido por Molecular Simulations, Inc.) producirá una estructura tridimensional. En general, la técnica anterior producirá una estructura la cual puede ser refinada a aproximadamente 2 a 3 ? con un valor R de aproximadamente 0.25 o menos. Como puede apreciar el experto, estos valores son adecuados para determinar las interacciones entre la proteasa de H IV y un compuesto dado, de manera que será claro si las características reclamadas están presentes. La visualización del complejo de proteasa de H IV y un inhibidor puede realizarse usando un programa de computadora tal como Insightl l (Biosym/Molecular Simulations, INC. , San Diego) o Quanta (Molecular Simulations, Inc. , Burlington MA), y las distancias y volúmenes esféricos pueden generarse usando herramientas disponibles dentro de esos programas. Un segundo medio para determinar la orientación espacial es la técnica de Espectroscopia de Resonancia Magnética Nuclear (NMR). El proceso para determinar las estructuras de complejos de proteína/inhibidor usando la técnica NMR es bien conocido (Ver K. Wuthrick, NMR of Proteins and Nucleic Acids, John Wiley, (1986)). Esta técnica puede emplear, por ejemplo, una preparación de proteasa de HIV en complejo con un inhibidor de interés en una solución amortiguada (típicamente a un pH de entre aproximadamente 3.0 y aproximadamente 8.0). Pueden aplicarse ya sea técnicas multi-dimensionales o simples. Ventajosamente, la enzima y/o el inhibidor pueden enriquecerse con isótopos estables tal como 13C, 15N, o 2H para determinar más fácilmente la conformación de ligadura y proximidad. Las condiciones específicas para determinar la estructura 3D de un inhibidor ligado a la proteasa de H IV ha sido descrita en T Yamazaki et al , Protein Science, 5, 495-506 (1996) En general, la técnica de NMR producirá una estructura la cual no tiene violación de distancia mayor que aproximadamente 0 3 Á y una desviación RMS entre la familia de estructuras generadas de la estructura promedio de aproximadamente 0 6 Á Como puede apreciar el experto, estos valores son adecuados para determinar las interacciones entre la proteasa de H IV y un compuesto dado de manera que será claro si las características reclamadas están presentes La visualización del complejo de la proteasa HIV y un inhibidor puede realizarse usando un programa de computadora tal como Insightll (Biosym/Molecular Simulations, Inc. , San Diego) o Quanta (Molecular Simulations, Inc. , Burlington, MA), y las distancias y volúmenes esféricos pueden ser generados usando herramientas disponibles dentro de esos programas. Un tercer medio es Molecular Modeling (Modelado Molecular). Este proceso de crear modelos teóricos de complejos de proteína-inhibidor es bien conocido (ver G. L. Seíbel y P.A. Kollman, "Molecular Mechanics and the Modeling of Drug Structures, Ch. 18.2 in Comprehensive Medicinal Chemistry, C. Hansch, Ed. , Pergammon Press, (1990) y T.J. Perun y C. L. Propost, Eds. Computer-Aided Drug Design, Marcel Dekker, Inc. (1989)) . El programa de computadora tal como Insight I I (Biosym/Molecular Simulations, Inc. , San Diego) o Quanta (Molecular Simulations, Inc. , Burlington, MA) es usado para construir un posible arreglo 3D de inhibidor y proteína. Normalmente, coordinados para la proteína son derivados de estructuras de NMR o rayos X anteriores tomadas de Protein Data Base (Brookhaven National Laboratories, Nueva York). Los coordinados para el inhibidor son adoptados el cual usa ángulos y longitudes de ligadura estándares derivados de estructuras de compuestos orgánicos (por ejemplo, datos encontrados dentro de Cambridge Crystallographic Datábase (University Chemical Laboratory, Cambridge, Reino Unido). El inhibidor candidato es alineado en espacio 3-dimensional con otros inhibidores relacionados, cuyas conformaciones de ligadura han sido previamente determinadas ya sea por cristalografía de rayos X o espectroscopia de NMR. Tanto el volumen de Van der Waals como los potencíales electrostáticos son usados para dirigir el proceso de alineación. Típicamente, se permite que las moléculas de proteína e inhibidor alcancen conformaciones que son inferiores en energía de la geometría inicial mediante minimización de energía en la cual un campo de fuerza es usado para buscar matemáticamente para la conformación de energía más baja. Los campos de fuerza adecuados tal como AMBER (S.J . Weiner et al., Journal of Computational Chemistry, 7, 230-252 (1986) o CVFF (J.R. Maple et al. , Journal of Computational Chemistry 15: 162-182 (1994)) están disponibles dentro del programa de computador listado antes. Típicamente, la minimización de energía del inhibidor es inicialmente realizada con los átomos de enzima sostenidos fijos en el espacio seguido por minimización de energía más extensiva del complejo de proteína/inhibidor completo. La búsqueda conformacional (métodos de conductor de torsión, biblioteca de rotor, o dinámica/Monte Cario están disponibles dentro del programa de computadora listado antes) es realizada para explorar modos de ligadura alternativos o adicionales del inhibidor dentro del sitio activo de la proteasa de HIV. Moléculas de agua pueden adicionarse durante el análisis para simular más estrechamente el ambiente acuoso. Usualmente, solo una o un pequeño número de conformaciones de inhibidor posibles permanecen después de este proceso de modelado completo. La precisión de estos modelos teóricos frecuentemente es comparable a la precisión de estructuras determinadas por métodos de NMR o rayos X, particularmente cuando el compuesto inhibidor candidato está estrechamente relacionado con los compuestos inhibidores previamente estudiados. Un ejemplo específico del uso de métodos de modelado molecular teórico en la predicción exitosa de un complejo de proteasa de HlV/inhibidor es encontrado en H.L. Sham et al. , Journal of Medicinal Chemistry, 39:392-397 (1996). La visualización del complejo de proteasa de HIV y un inhibidor puede realizarse usando un programa de computadora tal como Insight II (Biosym/Molecular Simulations, Inc. , San Diego) o Quanta (Molecular Simulations, Inc. , Burlington MA), y las distancias y volúmenes esféricos pueden ser generados usando herramientas disponibles dentro de esos programas. l l l. Composiciones farmacéuticas y métodos para inhibir la proteasa de HIV o una infección de HIV Los compuestos de la invención son útiles para inhibir la proteasa retroviral, en particular proteasa de HIV, in vitro o in vivo (especialmente en mamífero y en particular en humanos). Los compuestos de la presente invención también son útiles para la inhibición de retrovirus in vivo, especialmente virus de ¡nmunodeficiencia humana (HIV) . Los compuestos de la presente invención son también útiles para el tratamiento o profilaxis de enfermedades causadas por retrovirus, especialmente síndrome de inmunodeficiencia adquirida o una infección de H IV en un humano u otro mamífero. La dosis diaria total administrada a un humano u otro huésped mamífero en dosis simple o dividida puede ser en cantidades, por ejemplo, desde 0.001 a 300 mg/kg de peso corporal diaria y más usualmente 0.1 a 20 mg/kg de peso corporal diaria. Las composiciones de unidad de dosificación pueden contener tales cantidades de submúltiplos de las mismas para hacer la dosis diaria.

La cantidad de ingrediente activo que puede combinarse con los materiales portadores para producir una forma de dosificación simple variará dependiendo del huésped tratado y el modo particular de administración. Sin embargo, se entenderá que el nivel de dosis específico para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de factores incluyendo la actividad del compuesto específico empleado, la edad, peso corporal, salud general, sexo, dieta, tiempo de administración, ruta de administración, proporción de excreción, combinación de medicamentos, y la severidad de la enfermedad particular que experimenta terapia. Los compuestos de la presente invención pueden administrarse de manera oral, parenteral, sublingual, por atomizador de inhalación, de manera rectal o tópica en formulaciones de unidades de dosificación conteniendo portadores, auxiliares y vehículos farmacéuticamente aceptables, no tóxicos, convencionales, según se desee. La administración tópica también puede involucrar el uso de administración transdérmica tal como parches transdérmicos o dispositivos de iontoforesis. El término parenteral como se usa en la presente incluye inyecciones subcutáneas, inyección intravenosa, intramuscular, intrasternal o técnicas de infusión. Las preparaciones inyectables, por ejemplo, suspensiones aceitosas o acuosas inyectables estériles pueden formularse de acuerdo a la técnica conocida usando agentes humectantes o dispersantes adecuados y agentes de suspensión. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspención inyectable estéril en un diluyente o solvente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo, como una solución en 1 ,3-propanediol. Entro los vehículos y solventes aceptables que pueden ser empleados están agua, solución de Ringer, y solución de cloruro de sodio isotónica. Además, aceites fijos, estériles son convencionalmente empleados como un solvente o medio de suspensión. Para este propósito cualquier aceite fijado blando puede ser empleado incluyendo mono o diglicéricos sintéticos. Además, ácidos grasos tal como ácido oleico encuentran uso en la preparación de inyectables. Los supositorios para administración rectal del medicamento pueden prepararse al mezclar el medicamento con un excipiente no irritante adecuado tal como manteca de cacao y polietilenglicoles, los cuales son sólidos a temperaturas ordinarias pero líquidos a la temperatura rectal y por lo tanto se fundirán en el recto y liberarán el medicamento. Las formas de dosificación sólidas para administración oral pueden incluir cápsulas, tabletas, pildoras, polvos y granulos. En tales formas de dosificación sólidas, el compuesto activo puede mezclarse con al menos un diluyente inerte tal como sacarosa, lactosa o almidón. Tales formas de dosificación también pueden comprender, como es práctica normal, substancias adicionales diferentes a diluyentes inertes, por ejemplo, agentes lubricantes tal como estearato de magnesio. En el caso de cápsulas, tabletas, y pildoras, las formas de dosificación también pueden comprender agentes amortiguadores. Las tabletas y pildoras puede prepararse adicionalmente con recubrimientos entéricos. Las formas de dosificación líquidas para administración oral pueden incluir emulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elíxires farmacéuticamente aceptables conteniendo diluyentes inertes comúnmente usados en la técnica, tal como agua. Tales composiciones también pueden comprender auxiliares, tal como agentes humectantes, agentes de suspensión y emulsificantes, y agentes endulzantes, saborizantes y aromatizantes. Los compuestos de la presente invención también pueden ser administrados en la forma de liposomas. Como se sabe en la técnica, los liposomas generalmente son derivados de fosfolípidos y otras substancias lípidas. Los liposomas están formados por cristales líquidos hidratados mono- o multi-lamelares que se dispersan en un medio acuoso. Cualquier lípido metabolizable y fisiológicamente aceptable, no tóxico, capaz de formar liposomas puede ser usado. Las presentes composiciones en forma de lipidos pueden contener, además del compuesto de la presente invención, estabilizantes, conservadores, excipientes y similares. Los lípidos preferidos son los fosfolípidos y fosfatidil colinas (lecitinas), tanto naturales como sintéticos. Los métodos para formar liposomas son conocidos en la técnica. Ver, por ejemplo, Prescott, Ed., Methods in Cell Biologv, volumen XIV, Academic Press, Nueva York, N.Y. (1976), p. 33 et seq. Algunas formas de dosificación preferidas para los compuestos de esta invención se describen en la solicitud de patente estadounidense No. 08/ , presentada el 21 de noviembre de 1996, a nombre de J .

Lipari, L.A. Al-Razzak, S. Ghosh y R. Gao y la cual se titula Pharmaceutical Composition, el cual se incorpora en la presente por referencia.

Una forma de dosificación preferida para los compuestos de esta invención comprende una solución de (a) un compuesto de la fórmula I en la cantidad desde aproximadamente 1 % hasta aproximadamente 50% (de preferencia, desde aproximadamente 5% hasta aproximadamente 30%) en peso de la solución total y (b) aceite de ricino de polioxilo 35 en la cantidad desde aproximadamente 0% hasta aproximadamente 20% (de preferencia, desde aproximadamente 5% hasta aproximadamente 10%) en peso de la solución total, en un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable, el cual comprende (i) ácido oleico en la cantidad desde aproximadamente 20% hasta aproximadamente 99% (de preferencia, desde aproximadamente 30% hasta aproximadamente 70%; más preferiblemente, desde aproximadamente 40% hasta aproximadamente 65%) en peso de la solución total o (ii) una mezcla de (1 ) ácido oleico en la cantidad desde aproximadamente 20% hasta aproximadamente 99% (de preferencia, desde aproximadamente 30% hasta aproximadamente 70%, más preferiblemente, desde aproximadamente 40% hasta aproximadamente65%) en peso de la solución total y (2) etanol o propilenglicol o una mezcla de los mismos en la cantidad desde aproximadamente 0% hasta aproximadamente 12% (de preferencia, aproximadamente 10%) en peso de la solución total. En una modalidad aún más preferida de la invención, la solución es encapsulada en una cápsula de gelatina elástica suave (SEC) o una cápsula de gelatina dura. Una composición más preferida de la invención comprende una solución de (a) un compuesto de la fórmula I en la cantidad desde aproximadamente 30% en peso de la solución total y (b) aceite de ricino de polioxilo 35 en la cantidad desde aproximadamente 10% en peso de la solución total, en un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable, la cual comprende una mezcla de (1 ) ácido oleico en la cantidad desde aproximadamente 50% en peso de la solución total y (2) etanol en la cantidad desde aproximadamente 10% en peso de la solución total. En una modalidad más preferida de la invención, la solución es encapsulada en una cápsula de gelatina elástica suave (SEC) o una cápsula de gelatina dura y la solución también comprende un antioxidante (de preferencia, BHT (hidroxitolueno butilado)) en la cantidad desde aproximadamente 0.01 % hasta aproximadamente 0.08% en peso de la solución total (de preferencia, desde aproximadamente 0.05% en peso de la solución total). Un ejemplo de tal composición y su preparación se proporciona a continuación.

Componente % en peso Compuesto del Ejemplo 2B (base libre) 30 Etanol (USP, 200 prueba) 10 Aceite de ricino de polioxilo 35 (Cremophor® EL) 10 Acido oleico, 6321 , NF 50 Hidroxitolueno butilado (BHT), N F 0.01 Preparación de la composición anterior: El tanque de mezcla se purgó con nitrógeno. El ácido oleico (499.9 g) y etanol (100 g) se mezclaron en el tanque. El hidroxitolueno butilado (0.1 g) se cargó en el tanque y se mezcló hasta que la solución fue clara.

El compuesto del Ejemplo 2B (300 g) se cargó lentamente en el tanque y se mezcló hasta que la solución fue clara. El aceite de ricino de polioxilo 35 (100 g) se adicionó al tanque y se mezcló. La solución resultante se llenó en cápsulas elásticas suaves (0.333 g de solución/SEC) para proporcionar una dosificación de 100 mg de compuesto del Ejemplo 2B/SEC o 0.667 g/SEC para proporcionar una dosificación de 200 mg de compuesto del ejemplo 2B/SEC. Mientras que el compuesto de la invención puede administrarse como el agente farmacéutico activo único, también puede usarse en combinación con uno o más ¡nmunomoduladores, agentes antivirales, otros agentes anti-infectivos o vacunas. Otros agentes antivirales a ser administrados en combinación con un compuesto de la presente invención incluye AL-721 , beta interferón, polimannoacetato, inhibidores de transcriptasa inversa (por ejemplo, dideoxicitidina (ddC; zalcitabina), dideoxinosina (ddl; didanosina), BCH-189, AzdU, carbovir, ddA, d4C, d4T (estavudina), 3TC (lamivudina), DP-AZT, FLT (fluorotimidina), BCH-189, 5-halo-3'-tia-dideoxic¡t¡dina, PMEA, bis-POMPMEA, zidovudina (AZT), nevirapina, delviridina, MSA-300, trovirdina y similares) , inhibidores de transcriptasa inversa de no nucléosidos (por ejemplo, R82193, L-697,661 , BI-RG-587 (nevirapina)), inhibidores de proteasa retroviral (por ejemplo, inhibidores de proteasa de HIV tal como ritonavir, Ro 31 -8959 (saquinavír), SC-52151 , VX-478, AG1343 (nelfinavir), BMS 186,318, SC-55389A, BI LA 1096 BS, DMP-323, DMP-450, KNI-227, KNI-272, U- 140690, N-(2(R)-hidroxi-1 (S)-indanil)-2(R)-fenilmetil-4(S)-hidroxi-5-(1 -(4-(3-piridilmetil)-2(S)-N'-(t-butilcarboxamido)-piperazinii))-pentanamida (MK-639; indinavir) , 5(S)-Boc-amino-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-fenilmetilhexanoil-(L)-Val-(L)-Phe-morfolin-4-ilamida, 1 -naftoxiacetil-beta-metiltio-Ala-(2S,3S)-3-amino-2-hidroxi-4-butanoil-1 ,3-tiazolidin-4-t-butilamida (es decir, 1-naftoxiacetl-Mta-(2S,3S)-AHPBA-Thz-NH-tBu), 5-isoquinolinoxíacetil-beta-metiltio-Ala-(2S,3S)-3-amino-2-hidroxi-4-butanoil-1 ,3-tiazolidin-4-t-butilamida (es decir, ¡Qoa-Mta-Apns-Thz-NhtBu) y similares), compuestos HEPT, L, 697, 639, R82150, U-87201 E y similares), inhibidores de integrasa de HIV (Zintevir y similares), inhibidores TAT (por ejemplo, RO-24-7429 y similares), fosfonoformato de trisodio, HPA-23, eflonitina, Péptido T, Reticulosa (nucleofosfoproteína), ansamicina LM 427, trimetrexato, UA001 , ribavirin , alfa interferón, oxetanocin, oxetanocin-G, cilobut-G, ciclobut-A, ara-M, BW882C87, foscarnet, BW256U87, BW348U87, L-693,989, BV ara-U , anticuerpos triclonales CMV, FIAC, HOE-602, HPMPC, MSL-109, TI-23, trifluridina, vidarabina, famciclovir, penciclovir, aciclovir, ganciclovir, castanospermina, rCD4/CD4-lgG, CD4-PE40, butil-DNJ, hipericina, áicod oxamiriístico, sulfato de dextrano y polisulfato de pentosan. Los inmunomoduladores que pueden administrarse en combinación con el compuesto de la presente invención incluyen bropirimina, Ampligen, anticuerpo de alfa interferón anti-humano, factor estimulante de colonia, CL246,738, lmreg-1 , lmreg-2, dietiditiocarbamato, interleucin-2, alfa-interferón, pranobex de inosina, encefalina demetionina, muramil-tripéptido, TP-5, eritropoietin, naltrexona, factor de necrosis de tumor, beta interferón, gamma interferón, ¡nterleucin-3, interleucin-4, infusión de CD8 + autóloga, inmunoglobulina de alfa ínterferón, IGF- 1 , anti-Leu-3A, autovacunación, bioestimulación, fotoforesis extracorpórea, ciclosporin , rapamicina, FK-565, FK-506, G-CSF, GM-CSF, hipertermia, isopinosina, IVIG, HIVIG, inmunoterapia pasiva e hiperinmunización de vacuna de polio. Otros agentes anti-infectivos que pueden ser administrados en combinación con el compuesto de la presente invención incluyen isetionato de pentamidina. Cualquiera de una variedad de vacunas de HIV o AI DS (por ejemplo, gp120 (recombinante), Env 2-3 (gp120), HIVAC-1 e (gp120) , gp160 (recombinante), VaxSyn H IV-1 (gp160), Inmuno-AG (gp160), HGP-30, HlV-Inmunógeno, p24 (recombinante), VaxSyn H IV-1 (p24) pueden usarse en combinación con el compuesto de la presente invención. Otros agentes que pueden usarse en combinación con el compuesto de esta invención son ansamicina LM 427, ácido apurínico, ABPP, AI-721 , carrisin, AS-101 , avarol, azimexon, colchicina, compuesto Q, CS-85, cisteína de N-acetilo, (2-oxotiazolidin-4-carboxilato), D-penicilamina, difenilhidrantoína, EL-10, eritropoieten, ácido fusídico, glucano, HPA-23, hormona de crecimiento humano, hidroxicloroquina, iscador, L-ofloxacin u otros antibióticos de quinolona, lentinan, carbonato de litio, M M- 1 , monolaurin, MTP-PE, naltrexona, neurotropin, ozono, PAI, panax ginseng , pentofilina, pentoxifilina, Péptido T, extracto de pina de pino, polimanoacetato, reticulosa, retrogen, ribavirina, ribozimas, RS-47, Sdc-28, silicotungstato, THA, factor humoral tímico, tímopentina, fracción 5 de timosina, tímosina alfa uno, timostimulina, UA001 , uridina, vitamina B12 y "wobemugos". Otros agentes que pueden usarse en combinación con el compuesto de esta invención son antifungales tal como anfotericina B, clotrimazol, flucitosina, fluconazol, itraconazol, cetoconazol y nistatina y similares.

Otros agentes que pueden usarse en combinación con el compuestos de esta invención son antibacterianos tal como sulfato de amicacina, acitromicina, ciprofloxacina, tosufloxacina, claritromicina, clofazimina, etombutol, isoniazid, pirazinamida, rifabutina, rifampina, estreptomicina y TLC G-65 y similares. Otros agentes que pueden usarse en combinación con el compuesto de esta invención son anti-neoplásticos tales como alfa interferón, COMP (ciclofosfamida, vincristina, metotrexato y prednisona), etoposida, mBACOD (metotrexato, bleomicina, doxorubicina, ciclofosfamida, vincristina y dexametasona), PRO-MACE/MOPP (prednisona, metotrexato (w/rescate de leucovina), doxorubicina, ciclofosfamida, taxol, etoposido/mecloretamina, vincristina, prednisona y procarbazina), vincristina, vinblastina, angioihnhibinas, polisulfato de pentosan, factor de plaquetas 4 y SP-PG y similares. Otros agentes que pueden usarse en combinación con el compuesto de esta invención son medicamentos para tratar la enfermedad neurológica tal como péptido T, ritalina, litio, elavil, fenotoina, carbamazipina, mexitetina, heparina y citosina arabinosida y similares. Otros agentes que pueden ser usados en combinación con el compuesto de esta invención son anti-protozoarios tales como albendazol, azitromicina, claritromicina, clindamicina, corticoesteroides, dapsona, DIMP, eflornitina, 566C80, fansidar, furazolidona, L, 671 , 329, letrazuril, metronidazol, paromicina, pefloxacina, pentamidina, piritrexima, primaquina, pirimetamina, somatostatina, espiramicina, sulfadiazina, trimetoprim, TMP/SMX, trimetrexato y WR 6026 y similares.

Entre los agentes preferidos para inhibición o tratamiento de HIV o AI DS en combinación con el compuesto de esta invenc ion son inhibidores de transcriptasa inversa, especialmente, AZT (zidovudina), ddl (ddanosina), ddC (zalcitabina), d4T (estavudina), 3TC (lamivudina), nevirapina, delviridina, trovirdina, PMEA, bis-POMPMEA y MSA-300. Otros agentes preferidos para inhibición o tratamiento de H IV o AI DS en combinación con el compuesto de esta invención son inhibidores de proteasa de HIV, especialmente ABT-538 (ritonavir) y compuestos relacionados, descritos en la patente estadounidense No. 5,541 ,206, emitida el 30 de julio de 1996 y la patente estadounidense No. 5,491 ,253, emitida el 13 de febrero de 1996, las cuales se incorporan en la presente por referencia en la presente, N-(2(R)-hidroxi-1 (S)-indanil)-2(R)-fenilmetil-4(S)-hidroxi-5-(1 -(4-(3-piridilmetil)-2(S)-N'-(t-but¡lcarboxamido)-piperazinil))-pentanamida (es decir, indinavir) y compuestos relacionados, descritos en la solicitud de patente europea No. EP541 168, publicada el 12 de mayo de 1993, y la patente estadounidense No. 5,413,999, emitida el 9 de mayo de 1995 las cuales se incorporan en la presente por referencia; N-ter-butil-decahidro-2-[(R)-hidroxi-4-fenil-3(S)-[[N-(2-quinolilcarbon¡l)-L-asparaginil]amino-butil]-(4aS,8aS)-isoquinolin-3(S)-carboxamida (es decir, saquinavir) y compuestos relacionados, descritos en la patente estadounidense No, 5, 196,438, emitida el 23 de marzo de 1993, la cual se incorpora en la presente por referencia; 5(S)-Boc-amino-4(S)-hidrox¡-6-fenil-2(R)-fenilmetilhexanoil-(L)-Val-(L)-Phe-morfolin-4-ilamida y compuestos relacionados, descritos en la solicitud de patente europea No.

EP532466, publicada el 17 de marzo de 1993, la cual se incorpora en la presente por referencia; 1-naftoxiacetil-beta-metiltio-Ala-(2S,3S)-3-amino-2-hidroxi-4-butanoil-1 ,3-tiazolidin-4-t-butilamida (es decir, 1 -naftoxiacetil-Mta-(2S,3S)-AHPBA-Thz-NH-tBu), 5-isoquinolinoxiacetil-beta-metiltio-Ala-(2S,3S)-3-amino-2-hidroxi- 4-butanoil-1 ,3-tiazolidin-4-t-butilamida (es decir, ¡Qoa-Mta-Apns-Thz- NhtBu) y compuestos relacionados, descritos en la solicitud de patente europea No. EP490667, publicada el 17 de junio de 1992 y Chem. Pharm.

Bull. 40 (8) 2251 (1992), las cuales se incorporan en la presente por referencia; [1 S-[1 R*(r*),2S*]]-N1[3-[[[(1 , 1 -dimetiletil)amino]carbonil](2-metilpropil)amino]-2-hidroxi-1 -(fenilmetil)propil]-2-[(2-quinolinilcarbonil)amino]-butanodiamida (es decir, SC-52151 ) y compuestos relacionados, descritos en la solicitud de patente de PCT No.

WO92/08701 , publicada el 29 de mayo de 1992 y solicitud de patente de PCT No. W093/23368, publicada el 25 de noviembre de 1993, ambas incorporadas en la presente por referencia; (es decir, VX-478) y compuestos relacionados, descritos en la solicitud de patente de PCT No. WO94/05639, publicada el 17 de marzo de 1994, la cual se incorpora en la presente por referencia; (es decir, DMP-323) o (es decir, DMP-450) y compuestos relacionados, descritos en la solicitud de patente de PCT No WO93/07128, publicada el 15 de abril de 1993, la cual se incorpora en la presente por referencia; (es decir, AG 1343, (nelfinavir)), descrito en la solicitud de patente de PCT No WO95/09843, publicada el 13 de abril de 1995 y la patente estadounidense No. 5,484,926, emitida el 16 de enero de 1996, las cuales son incorporadas en la presente por referencia; (es decir, BMS 186,318) descrito en la solicitud de patente europea No. EP580402 , publicada el 26 de enero de 1994, la cual se incorpora en la presente por referencia; (es decir, SC-55389a) descrito en 2pd National Conference on Human Retroviruses and Related Infections, (Washington, D.C. , enero 29 - febrero 2, 1995), Sesión 88; y (es decir, BI LA 1096 BS) y compuestos relacionados descritos en la solicitud de patente europea No. EP560268, publicada el 15 de septiembre de 1993, la cual se incorpora en la presente por referencia; y (es decir, U-140690) y compuestos relacionados descritos en la solicitud de patente de PCT No. WO 9530670, publicada el 16 de noviembre de 1995, el cual se incorpora en la presente por referencia; o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de los anteriores.

En una combinación muy preferida, un compuesto de esta invención es administrado en combinación con ritonavir. Tal combinación es especialmente útil para inhibir la proteasa de H IV en un humano. Tal combinación también es especialmente útil para inhibir o tratar una infección de HIV en un humano. Cuando se usa en tal combinación, el compuesto de esta invención y ritonavir pueden ser administrados como agentes separados al mismo o en diferentes tiempos, o pueden ser formulados como una composición simple comprendiendo ambos compuestos. Cuando se administra en combinación con un compuesto de esta invención, el ritonavir provoca una mejora en la farmacocinética (es decir, aumenta la vida media, aumenta el tiempo a la concentración de plasma pico, aumenta niveles sanguíneos) del compuesto de esta invención. Las formas de dosificación preferidas para ritonavir incluyen (a) una forma de dosificación líquida para administración oral como se describió en la patente estadounidense No. 5,484,801 emitida el 19 de enero de 1996, la cual se incorpora en la presente por referencia, (b) una forma de dosificación semi-sólida o sólida encapsulada como se describe en la solicitud de patente de PCT No. WO95/07696, publicada el 23 de marzo de 1 995, y la Serial estadounidense No. 08/402 ,690, presentada el 13 de marzo de 1995, ambas incorporadas en la presente por referencia, y (c) una forma de dosificación sólida encapsulada como se describe en la solicitud de patente de PCT No. WO95/09614, publicada el 13 de abril de 1995 y la patente estadounidense No. 5,559, 158, emitida el 24 de septiembre de 1996, ambas incorporadas en la presente por referencia. Otros ejemplos de formas de dosificación preferidas para ritonavir se describen en la solicitud de patente estadounidense No. 08/ , presentada el 21 de noviembre de 1996, a nombre de J. Lipari, L.A. Al-Razzak, S.Ghosh y R. Gao y la cual se titula Pharmaceutical Composition, la cual se incorpora en la presente por referencia. Una composición preferida para ritonavir comprende una solución de (a) ritonavir en la cantidad desde aproximadamente 1 % hasta aproximadamente 30% (de preferencia, desde aproximadamente 5% hasta aproximadamente 25%) en peso de la solución total y (b) aceite de ricino de polioxilo 35 en la cantidad desde aproximadamente 0% hasta aproximadamente 20% (de preferencia, desde aproximadamente 5% hasta aproximadamente 10%) en peso de la solución total, en un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable, el cual comprende (i) ácido oleico en la cantidad desde aproximadamente 15% hasta aproximadamente 99% (de preferencia, desde aproximadamente 30% hasta aproximadamente 70%; más preferiblemente, desde aproximadamente 40% hasta aproximadamente 65%) en peso de la solución total o (ii) una mezcla de (1 ) ácido oleico en la cantidad desde aproximadamente 15% hasta aproximadamente 99% (de preferencia, desde aproximadamente 30% hasta aproximadamente 70%; más preferiblemente, desde aproximadamente 40% hasta aproximadamente 65%) en peso de la solución total y (2) etanol o propilenglicol o una mezcla de los mismos en la cantidad desde aproximadamente 0% hasta aproximadamente 12% (de preferencia, aproximadamente 10%) en peso de la solución total. En una modalidad aún más preferida de la invención, la solución es encapsulada en una cápsula de gelatina elástica suave (SEC) o una cápsula de gelatina dura y la solución también comprende un antioxidante (de preferencia, BHT (hidroxitolueno butilado)) en la cantidad desde aproximadamente 0.01 % hasta aproximadamente 0.08% en peso de la solución total (de preferencia, desde aproximadamente 0.01 % hasta aproximadamente 0.05% en peso de la solución total). Ejemplos de tal composición y su preparación se proporcionan a continuación.

Componente % en peso Ritonavir (base libre) ' 20 Etanol (USP, 200 prueba) 10 Aceite de ricino de polioxilo 35 (Cremophor® EL) 5 Acido oleico, 6321 , NF 65 Hidroxitolueno butilado (BHT), NF 0.01 Preparación de la composición anterior: El tanque de mezclado se purgó con nitrógeno. El ácido oleico (649.9 g) y el etanol (100 g) se mezclaron en el tanque. La solución se calentó hasta aproximadamente 33°C (29-37°C) y se mantuvo a esa temperatura. El hidroxitolueno (0.1 g) se cargó en el tanque y se mezcló hasta que la solución fue clara. El ritonavir (200 g) se cargó lentamente en el tanque y se mezcló hasta que la solución fue clara. El aceite de ricino de polioxilo 35 (50 g) se adicionó al tanque y se mezcló. El calentamiento se descontinuó y se permitió que la solución se enfriara a temperatura ambiente (20-30°C). La solución resultante se llenó en cápsulas elásticas suaves (0.5 g de solución/SEC) para proporcionar una dosificación de 100 mg de ritonavir/SEC o 1.0 g/SEC para proporcionar una dosificación de 200 mg de ritonavir/SEC.

Componente % en peso ritonavir (base libre) 20 Etanol (USP, 200 prueba) 10 Aceite de ricino de polioxilo 35 (Cremophor® EL) 10 Acido oleico, 6321 , N F 60 Hidroxitolueno butilado (BHT), N F 0.01 Preparación de la composición anterior: El tanque de mezcla se purgó con nitrógeno. El ácido oleico (599.9 g) y el etanol (100 g) se mezclaron en el tanque. La solución se calentó a aproximadamente 33°C (29-37°C) y se mantuvo a esa temperatura. El hidroxitolueno butilado (0.1 g) se cargó en el tanque y se mezcló hasta que la solución fue clara. El ritonavir (200 g) se cargó lentamente en el tanque y se mezcló hasta que la solución fue clara. El aceite de ricino de polioxilo 35 (100 g) se adicionó al tanque y se mezcló. El calentamiento se descontinuó y se permitió que la solución se enfriara a temperatura ambiente (20-30°C). La solución resultante se llenó en cápsulas elásticas (0.5 g de solución/SEC) para proporcionar una dosificación de 100 mg de ritonavir/SEC o 1 .0 g/SEC para proporcionar una dosificación de 200 mg de ritonavir/SEC. Ejemplos de formas de dosificación simple preferidas comprendiendo tanto ritonavir como un compuesto de la fórmula I también se describen en la solicitud de patente estadounidense No. 08/ , presentada el 21 de noviembre de 1996, a nombre de J. Lipari, L.A. Al-Razzak, S. Ghosh y R. Gao y la cual se titula Pharmaceutical Composition, la cual se incorpora en la presente por referencia. Una composición preferida para la forma de dosificación simple comprendiendo tanto ritonavir como un compuesto de la fórmula I comprende una solución de (a) una mezcla de ritonavir en la cantidad desde aproximadamente 1 % hasta aproximadamente 30% (de preferencia, desde aproximadamente 5% hasta aproximadamente 25%) en peso de la solución total y un compuesto de la fórmula I en la cantidad desde aproximadamente 1 % hasta aproximadamente 50% (de preferencia, desde aproximadamente 5% hasta aproximadamente 40%) en peso de la solución total y (b) aceite de ricino de polioxilo 35 en la cantidad de aproximadamente 10% en peso de la solución total, en un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable, el cual comprende una mezcla de (1 ) ácido oleico en la cantidad desde aproximadamente 10% hasta aproximadamente 88% (de preferencia, desde aproximadamente 40% hasta aproximadamente 65%) en peso de la solución total y (2) etanol en la cantidad desde aproximadamente 10% en peso de la solución total. En una modalidad muy preferida de la invención, la solución es encapsulada en una cápsula de gelatina elástica suave (SEC) o una cápsula de gelatina dura y la solución también comprende un antioxídante (de preferencia, BHT (hidroxitolueno butilado)) en la cantidad desde aproximadamente 0.01 % hasta aproximadamente 0.08% en peso de la solución total (de preferencia, desde aproximadamente 0.01 % hasta aproximadamente 0.05% en peso de la solución total). Ejemplos de tal composición y su preparación se proporcionan a continuación.

Componente % en peso ritonavir (base libre) 5 Compuesto del ejemplo 2B (base libre) 30 Etanol (USP, 200 prueba) 10 Aceite de ricino de polioxilo 35 (Cremophor® EL) 10 Acido oleico, 6321 , NF 45 Hidroxitolueno butilado (BHT), NF 0.01 Componente % en peso Ritonavir (base libre) 15 Compuesto del Ejemplo 2B (base libre) 15 Etanol (USP, 200 prueba) 10 Aceite de ricino de polioxilo 35 (Cremophor® EL) 10 Acido oleico, 6321 , N F 50 Hidroxitolueno butilado (BHT), N F 0.01 Componente % en peso Ritonavir (base libre) 15 Compuesto del Ejemplo 2B (base libre) 15 Etanol (USP, 200 prueba) 10 Aceite de ricino de polioxilo 35 (Cremophor® EL) 5 Acido oleico, 6321 , NF 55 Hidroxitolueno butilado (BHT), NF 0.01 Preparación de la composición anterior: El tanque de mezclado se purgó con nitrógeno. El ácido oleico (549.9 g) y el etanol (100 g) se mezclaron en el tanque. El hidroxitolueno butilado (0.1 g) se cargó en el tanque y se mezcló hasta que la solución fue clara. El ritonavir (150 g) se cargó lentamente en el tanque y se mezcló hasta que la solución fue clara. El compuesto del Ejemplo 2B (150 g) se cargó lentamente en el tanque y se mezcló hasta que la solución fue clara. El aceite de ricino de polioxilo 35 (100 g) se adicionó al tanque y se mezcló. La solución resultante se llenó en cápsulas elásticas suaves (1 .0 g de solución/SEC) para proporcionar una dosificación de 150 mg por cada uno de ritonavir y compuesto del Ejemplo 2B/SEC.

Componente % en peso Ritonavir (base libre) 15 Compuesto del Ejemplo 2B (base libre) 5 Etanol (USP, 200 prueba) 10 Aceite de ricino de polioxilo 35 (Cremophor® EL) 10 Acido oleico, 6321 , NF 60 Hidroxitolueno butilado (BHT), NF 0.01 La dosis diaria total de ritonavir (administrada en combinación con un compuesto de esta invención) a ser administrada a un humano u otro huésped mamífero en dosis simple o divididas puede estar en cantidades, por ejemplo, desde 0.001 hasta 300 mg/kg de peso corporal diario y más usualmente 0.1 a 10 mg de ritonavir. Las composiciones de unidad de dosificación pueden contener tales cantidades de submúltiplos de las mismas para hacer la dosis diaria. En las composiciones las cuales comprenden una mezcla de ritonavir y el compuesto del Ejemplo 2B, la proporción (p/p) de ritonavir al compuesto del Ejemplo 2B varía desde aproximadamente 1 : 16 hasta aproximadamente 5: 1 (de preferencia, desde aproximadamente 1 :6 hasta aproximadamente 3: 1 ). En otra combinación muy preferida, un compuesto de esta invención es administrado en combinación con ritonavir y uno o más inhibidores de transcriptasa inversa (de preferencia, uno o más compuestos seleccionados del grupo que consiste de AZT (zidovudina), ddl (didanosina), ddC (zalcitabina), d4T (estavudina) y 3TC (lamivudina)). Tal combinación es especialmente útil para inhibir o tratar una infección de H IV en un humano. Cuando se usa en tal combinación, el compuesto de esta invención y ritonavir y uno o más inhibidores de transcriptasa inversa pueden administrarse como agentes separados al mismo o en diferentes tiempos, o pueden formularse como composiciones que comprenden dos o más de los compuestos. Una combinación terapéutica particularmente preferida comprende un compuesto de la fórmula I (especialmente, el compuesto del Ejemplo 2B) en combinación con ritonavir, AZT y 3TC. Se entenderá que agentes los cuales pueden ser combinados con el compuesto de la presente invención para la inhibición, tratamiento o profilaxis de AIDS o una infección de HIV no están limitados a aquéllos listados antes, sino que incluyen en principio cualquier agente útil para el tratamiento o profilaxis de AIDS o una infección de HIV. Cuando se administran como una combinación, los agentes terapéuticos pueden formularse como composiciones separadas las cuales son proporcionadas al mismo tiempo o diferentes tiempos, o los agentes terapéuticos pueden proporcionarse como una composición simple. Lo anterior es simplemente ilustrativo de la invención y no pretende limitar la invención a los compuestos descritos. Se pretende que las variaciones y cambios los cuales son obvios para alguien experto en la técnica estén dentro del alcance y naturaleza de la invención, los cuales se definen en las reivindicaciones anexas.

Claims

REIVINDICACIONES 1 . Un compuesto, el cual cuando está ligado a la proteasa de HIV, contiene por lo menos un átomo de anillo de un heterociclo ya sea en el subsitio S2 o S2' de la proteasa, en donde el heterociclo (a) comprende 4 a 7 átomos de anillo, (b) contiene por lo menos un átomo de anillo N, y (c) contiene por lo menos un átomo de anillo C, el cual es substituido con oxo (=O), tioxo (=S) o imino (=NH).
2. El compuesto de la reivindicación 1 , el cual cuando está ligado a la proteasa, se liga al sitio activo de la proteasa.
3. El compuesto de la reivindicación 1 , el cual cuando está ligado a la proteasa, comprende además un átomo de no hidrógeno ya sea en el subsitio S1 o S1 ' de la proteasa.
4. El compuesto de la reivindicación 3, el cual cuando está ligado a la proteasa, carece de un átomo de no hidrógeno en ambos subsitios S3 y S3' de la proteasa, dichos subsitios S3 y S3' no incluyen ninguno de ios subsitios S1 y S1 \ respectivamente.
5. El compuesto de la reivindicación 1 , en donde el heterociclo es un anillo de 5 o 6 miembros.
6. El compuesto de ia reivindicación 5 en donde el heterociclo tiene dos átomos de anillo N no adyacentes y por lo menos un átomo de anillo C, el cual es substituido con oxo (=0).
7. El compuesto de la reivindicación 6, en donde por lo menos uno de los átomos de anillo N es de la estructura NH.
8. El compuesto de la reivindicación 5, en donde el anillo de heterociclo tiene desde 0 hasta 2 dobles ligaduras.
9. El compuesto de la reivindicación 7, en donde el átomo de anillo N de la estructura NH está ubicado dentro de un rango desde aproximadamente 2.4 Á hasta aproximadamente 3.7 Á del átomo de nitrógeno de esqueleto de ya sea el residuo 30 o el residuo 130 de la proteasa, cuando el compuesto está ligado a la proteasa.
10. El compuesto de la reivindicación 7, en donde el O de la estructura C=0 está ubicado dentro de un rango desde aproximadamente 2.4 Á hasta aproximadamente 3.7 Á del átomo de nitrógeno del esqueleto de ya sea el residuo 30 o el residuo 130 de la proteasa, cuando el compuesto está ligado a la proteasa.
1 1 . El compuesto de la reivindicación 7, en donde tanto el átomo N del grupo N H como el O del grupo C=0 están ubicados dentro de un rango desde aproximadamente 2.4 Á hasta aproximadamente 3.7 A del átomo de nitrógeno del esqueleto de ya sea el residuo 30 o el residuo 130 de la proteasa, cuando el compuesto está ligado a la proteasa.
12. El compuesto de la reivindicación 1 , el cual cuando está ligado a la proteasa, comprende un átomo de no hidrógeno en un primer volumen esférico teniendo un radio de aproximadamente 3.0 Á y un punto central definido por al mentos tres lugares geométricos seleccionados del grupo de primeros lugares geométricos consistiendo de 5.0 Á hasta 6.0 ? desde el carbono alfa del residuo 27 de la proteasa, 6.3 Á hasta 7.5 ? desde el carbono alfa de residuo 50 de la proteasa, y 6.3 Á hasta 7.5 ? desde el carbono alfa del residuo 150 de la proteasa.
13. El compuesto de la reivindicación 1 , el cual está ligado a la proteasa, comprende por lo menos uno de los átomos de anillo de heterociclo ya sea en un segundo o tercer volumen esférico, en donde el segundo volumen esférico tiene un radio en el rango desde aproximadamente 2.5 Á hasta aproximadamente 4.0 Á y un punto central definido por al menos tres lugares geométricos seleccionados del grupo de segundos lugares geométricos consistiendo de 3.7 Á hasta 4.5 Á desde el carbono alfa del residuo 28 de la proteasa, 4.2 Á hasta 5.4 Á desde el carbono alfa del residuo 30 de la proteasa, 7.6 Á hasta 8.3 Á desde el carbono alfa del residuo 32 de la proteasa, y 6.5 A hasta 7.0 A desde el carbono alfa del residuo 48 de la proteasa y en donde el tercer volumen esférico tiene un radio en el rango desde 2.5 Á hasta aproximadamente 4.0 Á y un punto central definido por al menos tres lugares seleccionados del grupo de terceros lugares geométricos consistiendo de 3.7 Á hasta 4.5 ? desde el carbono alfa del residuo 28 de la proteasa, 4.2 Á hasta 5.4 ? desde el carbono alfa del residuo 30 de la proteasa, 7.6 ? hasta 8.3 ? desde el carbono alfa del residuo 32 de la proíeasa, y 6.5 Á hasta 7.0 Á desde el carbono alfa del residuo 48 de la proteasa.
14. El compuesto de la reivindicación 13, en donde los puntos centrales del segundo y tercer volumen geométrico son definidos mediante cuatro lugares geométricos seleccionados de los grupos de los segundos y terceros lugares geométricos, respectivamente.
15. El compuesto de la reivindicación 13, en donde los radios dei segundo y tercer volumen esférico están cada uno independientemente en el rango desde aproximadamente 3.0 Á hasta aproximadamente 4.0 ?.
16. El compuesto de la reivindicación 13, en donde los radios del segundo y tercer volumen esférico están cada uno independientemente en el rango desde aproximadamente 3.5 A hasta aproximadamente 4.0 A.
17. El compuesto de la reivindicación 1 , el cual cuando está ligado a la proteasa comprende un átomo de no hidrógeno ya sea en un cuarto o quinto volumen esférico, en donde el cuarto volumen esférico tiene un radio en el rango desde aproximadamente 2.5 A hasta aproximadamente 4.0 A y un punto central definido por al menos tres lugares geométricos seleccionados del grupo de cuartos lugares geométricos de 3.2 A hasta 3.7 A desde el carbono alfa del residuo 49 de la proteasa, 4.1 A hasta 4.5 A desde el carbono alfa del residuo 50 de la proteasa, 12.4 A hasta 12.8 A desde el carbono alfa del residuo 108 de la proteasa, 13.0 A hasta 13.4 A desde el carbono alfa del residuo 1 10 de la proteasa, 1 1 .0 A hasta 1 1.4 A desde el carbono alfa del residuo 125 de la proteasa, 5.7 A hasta 6.1 A desde el carbono alfa del residuo 182 de la proteasa, y 8.4 A hasta 8.8 A desde el carbono alfa del residuo 184 de la proteasa y en donde el quinto volumen esférico tiene un radio en el rango desde aproximadamente 2.5 A hasta aproximadamente 4.0 A y un punto central definido por al menos tres lugares geométricos seleccionados del grupo de cinco lugares geométricos consistiendo de 3.2 A hasta 3.7 A desde el carbono alfa del residuo 149 de la proteasa, 4.1 A hasta 4.5 A desde el carbono alfa del residuo 150 de la proteasa, 12.4 A hasta 12.8 A desde el carbono alfa del residuo 8 de la proteasa, 13.0 A hasta 13.4 A desde el carbono alfa del residuo 10 de la proteasa, 1 1 .0 A hasta 1 1 .4 A desde el carbono alfa del residuo 25 de la proteasa, 5.7 A hasta 6.1 A desde el carbono alfa del residuo 82 de la proteasa, y 8.4 A hasta 8.8 A desde el carbono alfa del residuo 84 de la proteasa.
18. El compuesto de la reivindicación 17, en donde los radios del cuarto y quinto volumen esférico están cada uno independientemente en el rango desde aproximadamente 3.0 A hasta aproximadamente 4.0 A.
19. El compuesto de la reivindicación 17, en donde los radios del cuarto y quinto volumen esférico están cada uno independientemente en el rango desde aproximadamente 3.5 A hasta aproximadamente 4.0 A.
20. El compuesto de la reivindicación 17, en donde los puntos centrales del cuarto y quinto volumen esférico están cada uno independientemente definidos por al menos cuatro lugares geométricos seleccionados de los grupos de los cuartos y quintos lugares geométricos, respectivamente.
21 . El compuesto de la reivindicación 17, en donde los puntos centrales del cuarto y quinto volumen esférico están cada uno independientemente definidos por al menos cinco lugares geométricos seleccionados de los grupos de los cuartos y quintos lugares geométricos, respectivamente.
22. El compuesto de la reivindicación 17, en donde los puntos centrales del cuarto y quinto volumen esférico están cada uno independientemente definidos por al menos seis lugares geométricos seleccionados de los grupos de los cuartos y quintos lugares geométricos, respectivamente.
23. El compuesto de la reivindicación 17, el cual cuando está ligado a la proteasa, carece de un átomo de no hidrógeno tanto en un sexto y un séptimo volumen esférico, en donde el sexto volumen esférico tiene un radio en el rango desde aproximadamente 2.5 A hasta aproximadamente 4.0 A, un punto central definido por al menos tres lugares geométricos seleccionados del grupo de sextos lugares geométricos consistiendo de 7.7 A hasta 8.2 A desde el carbono alfa del residuo 49 de la proteasa, 9.8 A hasta 10.2 A desde el carbono alfa del residuo 50 de la proteasa, 9.6 A hasta 10.0 A desde el carbono alfa del residuo 108 de la proteasa, 10.4 A hasta 10.8 A desde el carbono alfa del residuo 1 10 de la proteasa, 12.7 A hasta 13.1 A desde el carbono alfa del residuo 125 de la proteasa, 5.4 A hasta 5.8 A desde el carbono alfa del residuo 184 de la proteasa, y dicho sexto volumen esférico no incluye ninguno del cuarto volumen esférico; y en donde el séptimo volumen esférico tiene un radio en el rango desde aproximadamente 2.5 A hasta aproximadamente 4.0 A, un punto central definido por al menos tres lugares geométricos seleccionados del grupo de séptimos lugares geométricos consistiendo de 7.7 A hasta 8.2 A desde el carbono alfa del residuo 149 de la proteasa, 9.8 A hasta 10.2 A desde el carbono alfa del residuo 150 de la proteasa, 9.6 A hasta 10.0 A desde el carbono alfa del residuo 8 de la proteasa, 10.4 A hasta 10.8 A desde el carbono alfa del residuo 10 de la proteasa, 12.7 A hasta 13.1 A desde el carbono alfa del residuo 25 de la proteasa, 5.4 A hasta 5.8 A desde el carbono alfa del residuo 82 de la proteasa, y 10.1 A hasta 10.6 A desde el carbono alfa del residuo 84 de la proteasa, en donde el séptimo volumen esférico no incluye ninguno del quinto volumen esférico.
24. El compuesto de la reivindicación 23 en donde los radíos del sexto y séptimo volumen esférico están cada uno independientemente en ei rango desde aproximadamente 3.0 A hasta aproximadamente 4.0 A.
25. El compuesto de la reivindicación 23 en donde los radios del sexto y séptimo volumen esférico están cada uno independientemente en el rango desde aproximadamente 3.5 A hasta aproximadamente 4.0 A.
26. El compuesto de la reivindicación 23 en donde los puntos centrales del sexto y séptimo volumen esférico son cada uno independientemente definidos por al menos cuatro lugares geométricos de los grupos de sextos y séptimos lugares geométricos, respectivamente.
27. El compuesto de la reivindicación 23 en donde los puntos centrales del sexto y séptimo volumen esférico son cada uno independientemente definidos por al menos cinco lugares geométricos de los grupos de sextos y séptimos lugares geométricos, respectivamente.
28. El compuesto de la reivindicación 23 en donde los puntos centrales del sexto y séptimo volumen esférico son cada uno independientemente definidos por al menos seis lugares geométricos de los grupos de sextos y séptimos lugares geométricos, respectivamente.
29. Una composición farmacéutica para inhibir la proteasa de HIV comprendiendo un portador farmacéutico y una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la reivindicación 1 .
30. Un proceso para inhibir la proteasa de H IV comprendiendo administra a un humano en necesidad de tal tratamiento una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la reivindicación 1.
31. Un proceso para inhibir una infección de HIV comprendiendo administra a un humano en necesidad de tal tratamiento una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la reivindicación 1.
32. Un proceso para inhibir una infección de HIV comprendiendo administrar a un humano en necesidad de tal tratamiento una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la reivindicación 1 en combinación con una cantidad terapéuticamente efectiva de un inhibidor de transcriptasa inversa o una combinación de inhibidores de transcriptasa inversa.
33. El proceso de la reivindicación 32, en donde el inhibidor de transcriptasa inversa es AZT (zidovudina), ddl (didanosina), ddC (zalcitabina), d4T (estavudina), 3TC (lamivudina), nevirapina, delviridina, trovirdina, PMEA, bis-POMPMEA o MSA-300.
34. Un proceso para inhibir una infección de HIV comprendiendo administrar a un humano en necesidad de tal tratamiento una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la reivindicación 1 , en combinación con una cantidad terapéuticamente efectiva de otro inhibidor de proteasa de HIV o una combinación de inhibidores de proteasa de H IV.
35. El proceso de la reivindicación 34, en dnde el otro inhibidor de proteasa de HIV es ritonavir, saquinavir, indinavir, 5(S)-Boc-amíno-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-fenilmetilhexanoil-(L)-Val-(L)-Phe-morfolin-4-ilamida; 1 -naftoxiacetil-beta-metiltio-Ala-(2S,3S)-3-amino-2-hidroxi-4-butanoil-1 ,3-tiazolidin-4-t-butilamida; 5-isoquinolinoxiacetil-beta-metiltio-Ala-(2S, 3S)-3-amino-2-hidroxi-4-butanoil-1 ,3-tiazolídn-4-t-butilamida; 24 (1S-(1R*(R*),2S*))-N1(3-((((1,1-dimetiletil)amino)carbonil)(2-metilpropil)amino)-2-hidroxi-1-(fenilmetil)propil)-2-((2-quinolinilcarbonil)amino)-butanodiamida; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, o una combinación de dos o más de estos inhibidores de proteasa de H1V.
36. Un proceso para inhibir la proteasa de HIV en un humano teniendo resistencia a la actividad inhibidora de un inhibidor de proteasa, comprendiendo el proceso administrar al humano una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la reivindicación 1.
37. El proceso de la reivindicación 36, en donde la proteasa de HIV es ritonavir, saquinavir, indinavir, 5(S)-Boc-amino-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-fenilmetilhexanoil-(L)-Val-(L)-Phe-morfolin-4-ilamida; 1 -naftoxiacetil-beta-metiltio-Ala-(2S,3S)-3-amino-2-hidroxi-4-butanoil-1 ,3-tiazolidin-4-t-butilamida; 5-isoquinolinoxiacetil-beta-metiltio-Ala-(2S,3S)-3-amino-2-hidroxi-4-butanoil-1 ,3-tiazolidn-4-t-butilamida; (1 S-(1 R*(R*),2S*))-N (3-((((1 , 1 -dimetiletil)amino)carbonil)(2-metilpropil)amino)-2-hidroxí-1 -(fen¡lmetil)prop¡l)-2-((2-quinolinilcarbonil)amino)-butanod ¡amida; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, o una combinación de dos o más de estos inhibidores de proteasa.