MXPA97009650A - Derivados de bencimidazol 2-sustituidos como inhibidores de proliferacion de celulas de musculo liso - Google Patents

Abstract

En la presente se describen compuestos de fórmula (I) en la que R1 es alquilo, trifluorometilo o piridinilo;R2 en H, alquilo o arilalquilo sustituido, en el cual los sustituyentes son independientemente uno o dos grupos halógenos, carboxilo o alcoxicarbonilo;R3 y R4 son H, alquilo, halógeno o nitro;o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, los cuales sonútiles como inhibidores de proliferción de células de músculo liso.

Description

DERIVADOS DE BENCTMIDAZOL 2-SUSTITUIDOS GOMO INHIBIDORES DE PROLIFERACIÓN DE CÉLULAS DE M SCULO LISO DESCRIPCIÓN DE IA PiVEClÓN Esta invención se relaciona con derivados de bencimidazol 2-sustituidos que son útiles como inhibidores de proliferación de células de músculo liso y con compuestos y composiciones farmacéuticas de los mismos para tratar enfermedades y condiciones o trastornos relacionados con proliferación excesiva de células de músculo liso, tales como restenosis, y con procesos para la preparación de tales compuestos . La proliferación y migración dirigida de células vasculares de músculo liso es un componente importante oclusivo vascular en procesos tales como remodelado vascular inducido por hipertensión, restenosis vascular y aterosclerosis (Gibbons, G.H.; Dzau, V.J.; NEJM, 1994; 330: 1431) . La totalidad de los procesos mórbidos se conoce como enfermedad vascular hiperproliferativa basada en la etiología de los procesos mórbidos. La oclusión vascular es precedida por estenosis que resulta de hiperplasia de la intima de las células de músculo liso (Clowes A.W. ; Reidy, M.A. ; J. Vasc. Surg., 1991, 13: 885). La causa subyacente de hiperplasia en la íntima de las células de músculo liso REF: 26200 es daño a células de músculo liso vasculares que llevan a la ruptura del endotelio y la matriz extracelular (Schwartz, S.M., Human Pathology, 1987, 18: 240; Fingerle, J. , Arteriesclerosis, 1990; 10: 1082). Normalmente las células de la pared arterial están bajo estrecho control negativo y en un estado de proliferación basal bajo o en un estado no proliferante, en reposo. Después del daño vascular, la liberación de factores de crecimiento y citosinas resulta en proliferación y migración de células de músculo liso (Fagin, J.A. ; Forrester, J.S.; Trends in Cardiovascular Med., 1992; 2: 90.; Shiratani, M. ; Yui, Y.; Ka ai, C, Endothelium, 1993; 1:5). El daño vascular que lleva a hiperplasia de la íntima puede ser inclusive inmunológicamente o por procedimiento cardiovasculares invasivos. La arteriesclerosis es una forma común de daño vascular mediado biológicamente que progresa a estenosis. La proliferación anormal de células vasculares de músculo liso es una característica de placas ateroscleróticas responsables de lesiones obstructivas de neoíntima en el sitio de daño de la íntima (Ross, R. ; Nature, 1993: 362; 801; Cascells, . , Circulation, 1992; 86: 723). Puede presentarse dañó mecánico que lleve a hiperplasia de la íntima posterior a procedimientos de angioplastia, cirugía de trasplante de órganos y otros procedimientos invasivos vasculares que alteren la integridad vascular (Clowes, A.W. ; Reidy, M.A., J. Vasc. Surg., 1991; 13: 885; Isik, F.F.; McDonald, T.O.; Ferguson, M. ; Yanaka, E., Am. J. Pathol., 1992; 141: 1139). La angioplastia coronaria transluminar percutánea ha adquirido amplia aceptación para el tratamiento de estenosis de la arteria coronaria. En este procedimiento en endotelio se daña y se expone a diversos quimioatrayentes y itógenos los cuales son producidos en la sangre o son liberados en el sitio de daño. Entre estos agentes se considera que el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) juega un papel significativo en el proceso de proliferación y quimiotaxis de células de músculo liso (Reidy, M.A. ; Fingerle, J. ; Lindner, V.; Circulation, 1993: 86 (suppl III): 111-43; Ferns, G.A.A.; Raines, E. .; Sprugel, K.H. ; Montani, A.S.; Reidy, M.A. ; Ross, R. ; Science, 1991; 253: 1129.; Jawien, A., et . al., J. Clin. Invest., 1992; 89: 507; Nabel, E.G., et al., J. Clin. Invest . , 1993; 91: 1822). En los siguientes tres a seis meses después de la angioplastia se observa una reducción significativa en el flujo sanguíneo en aproximadamente 30-40% de pacientes como resultado de restenosis provocada por respuesta a daño vascular durante este procedimiento. Estos pacientes posteriormente requieren un segundo procedimiento quirúrgico (Pepine, C. , Circulation, 1990; 81: 1753.; Hardoff, R.J. , J. Am. Coll. Cardiol . , 1990; 15: 1486). En consecuencia, los agentes que limitan el proceso de restenosis serían de beneficio significativo. Los agentes que inhiben la proliferación de células de músculo liso vascular, particularmente proliferación estimulada por PDGF sería útil en el tratamiento de trastornos hiperproliferativos vasculares (Molloy, C.J., Drug Dev. Res., 1993; 29: 148.; Newby, A.C.; George, S.J., Cardiovasc . Res. , 1993; 27: 1173) . La patente norteamericana 5,387,600 describe 2-alquil o heterociclilbencimidazoles de fórmula I como inhibidores de ACAT: La patente norteamericana 5,128,359 describe derivados de ácido l-bencilbencimidazol-2-alcanoico para tratamiento de aterosclerosis. La patente norteamericana 4,814,329 describe 2-tiobencimidazoles de la siguiente fórmula II como agentes hiperlipidérmicos, en donde R es alquilo de C^^ e hidroxialquilo de C2-C4: La DE 4212748 describe N -difenilmetilbencimidazoles como antagonistas de AII. De acuerdo con esta invención, se proporciona un grupo de derivados de bencimidazol 2-sustituidos que son útiles como inhibidores de la proliferación de células de músculo liso y también se proporcionan composiciones terapéuticas para tratar enfermedades y condiciones las cuales están caracterizadas por proliferación excesiva de células de músculo liso, tal como restenosis. Por lo tanto, de acuerdo con la presente invención, se proporciona un compuesto de la fórmula: en el que Rx es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, trifluorometilo o piridinilo; R2 es H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o arilalquilo sustituido de 7 a 10 átomos de carbono, en el cual los sustituyentes son independientemente uno o dos grupos halógeno, carboxilo o alcoxicarbonilo de 2 a 7 átomos de carbono; R3 y R4 son H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halógeno o nitro; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Cuando Rl t R2, R3 o R„ es alquilo, puede ser una cadena ramificada o recta y de manera preferible de 1 a 4 átomos de carbono, particularmente metilo, etilo, n- o isopropilo o n-, iso-, sec-, o t-butilo. Cuando R2 es arilalquilo sustituido, de manera preferible es bencilo. Cuando R2 está sustituido con alcoxicarbonilo de manera preferible es metoxicarbonilo o etoxicarbonilo. Cuando R3 y R4 son alquilo, cada uno, de manera más preferible, es meti1o. Cuando son halógeno, cada uno es preferiblemente cloro o flúor.

Los compuestos particularmente preferidos son: 1- (3, 4-diclorobencil) -2-piridin-2-il-lH-bencimidazol o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. - Ester metílico del ácido 4- [2- (piridin-2-il) - bencimidazol-1-ilmetil] benzoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Ester metílico del ácido 4- (5, 6-dimetil-2- trifuorometil-bencimidazol-1-ilmetil) benzoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Ester etílico del ácido 4- (5-nitro-2-propil- bencimidazol-1-ilmetil) -benzoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los bencimidazoles 1, 2 -disustituidos de esta invención se preparan de acuerdo con la secuencia general de reacciones indicada en el esquema siguiente: NH-HC1 HCl R?CN R-OH OR El clorhidrato (I) de éterimino se prepara al hacer reaccionar un nitrilo apropiado con un alcohol y cloruro de hidrógeno a 0°C. La reacción de 1 y de 1,2-diaminobenceno sustituido de manera apropiada en etanol bajo reflujo proporciona el bencimidazol (2) 2-sustituido correspondiente. La alquilación de 2 con un haluro de arilalquilo sustituido apropiadamente, en donde n es 1, 2 ó 3, en dimetilformamida utilizando hidruro de sodio como base proporciona bencimidazoles (3) 1, 2-disustituidos de esta invención. R es alquilo de cadena lineal o ramificada, de manera preferible alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, particularmente etilo. Por lo tanto, de acuerdo con un aspecto adicional de esta invención, se proporciona un proceso para la preparación de un compuesto de fórmula I como se define en la presente o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, el cual comprende: (a) hacer reaccionar un nitrilo de fórmula RXCN con un alcohol en ácido clorhídrico para formar un compuesto de fórmula 1 como se define antes, y (b) hacer reaccionar el compuesto de fórmula 1 con 1, 2-diaminobenceno sustituido de fórmula 2 como se define en lo anterior para formar un compuesto de fórmula I en el que R2 es H y (c) opcionalmente, hacer reaccionar el compuesto de fórmula I en el que R2 es H con un agente alquilante apropiado para formar el compuesto de fórmula I, en el que R2 es alquilo o arilalquilo sustituido, y opcionalmente formar una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables son aquéllas derivadas de ácidos orgánicos e inorgánicos tales co o: acético, láctico, cítrico, fu árico, tartárico, succínico, maleico, malónico, clorhídrico, bromhídrico, fosfórico, nítrico, sulfúrico, metansulfónico, metilbencensulfónico y ácidos conocidos similarmente aceptables. Con aquellos compuestos que poseen un sustituyente ácido tal como los ácidos carboxílicos, las - ló sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales de metal alcalino (sodio o potasio) , las sales de metal alcalino terreo (calcio o magnesio) y sales de amonio. Esta invención incluye composiciones farmacéuticas constituidas de bencimidazoles de esta invención ya sean solos o en combinación con excipientes (es decir, materiales farmacéuticamente aceptables sin efecto farmacológico) . Tales composiciones son útiles para tratar enfermedades las cuales están caracterizadas por proliferación excesiva de células de músculo liso, que con mayor frecuencia de se presentan a partir de cirugía reconstructiva vascular y de trasplante, por ejemplo, angioplastia con globo, y cirugía de injerto vascular, cirugía de derivación de arteria coronaria y trasplante de corazón. Otros estados de enfermedad en los cuales existe una proliferación vascular no deseada incluyen hipertensión, asma y fallo cardíaco congestivo. Los compuestos de esta invención por lo tanto son útiles para tratar estas enfermedades y estados. Los compuestos de esta invención se pueden administrar sistemáticamente, por ejemplo, por inyección intravenosa, típicamente varía desde 0.1 hasta 10 mg/kg/h durante 5-30 días. Por inyección subcutánea a dosis menores o por administración oral a dosis mayores la inyección intravenosa. El suministro localizado de los compuestos de esta invención también se pueden llevar a cabo por vías transmembrana, transdérmica u otras vías de administración tópicas utilizando dispositivos de liberación continua apropiados tales como matriz de soporte, cuando sea aplicable. Las composiciones de la invención se pueden formular con excipientes convencionales tales como un material de relleno, un agente desintegrante, un aglutinante, un lubricante, un agente saborizante y similares. Estas se formulan de manera convencional. Los compuestos se pueden administrar puros o con un portador farmacéutico sólido o líquido a un paciente en necesidad de tal tratamiento. Los portadores sólidos aplicables pueden incluir una o más sustancias las cuales también pueden actuar como agentes saborizantes, lubricantes, solubilizantes, agentes que mejoran la suspensión, materiales de relleno, deslizantes, auxiliares para la compresión, aglutinantes o agentes para desintegración de tabletas o un material encapsulante . En polvos, el portador es un sólido finamente dividido el cual está en mezcla con el ingrediente activo finamente dividido. En tabletas, el ingrediente activo se mezcla con un portador que tiene las propiedades de compresión necesarias en proporciones adecuadas y que se compactan en la forma y tamaño deseados. Los polvos y tabletas de manera preferible contienen hasta 99% del ingrediente activo. Los portadores sólidos adecuados incluyen, por ejemplo, fosfato de calcio, estearato de magnesio, talco, azúcares, lactosa, dextrina, almidón, gelatina, celulosa, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, polivinilpirrolidina, ceras con bajo punto de fusión y resinas de intercambio iónico. Se pueden utilizar portadores líquidos para preparar soluciones, suspensiones, emulsiones, jarabes y elíxires. El ingrediente activo de esta invención puede disolverse o suspenderse en un portador líquido farmacéuticamente aceptable tal como agua, un solvente orgánico, una mezcla de ambos o aceites farmacéuticamente aceptables o grasas. El portador líquido puede contener otros aditivos farmacéuticos adecuados tales como solubilizantes, emulsificantes , amortiguadores, preservativos, edulcorantes, agentes saborizantes, agentes que mejoran la suspensión, agentes espesantes, colores, reguladores de viscosidad, estabilizantes y osmoreguladores .

Los ejemplos adecuados de portadores líquidos para administración oral parenteral incluyen agua (particularmente que contiene aditivos como en lo anterior, por ejemplo derivados de celulosa, de manera preferible una solución de carboximetilcelulosa de sodio) , alcoholes (que incluyen alcoholes monohidricos como alcoholes polihídricos, por ejemplo glicoles) y sus derivados, y aceites (por ejemplo aceite de coco fraccionado y aceite de cacahuate) . Para administración parenteral, el portador también puede ser un éster oleoso tal como oleato de etilo y miristato de isopropilo. Los portadores líquidos estériles se utilizan en composiciones en forma líquida estéril para administración parenteral . Las composiciones farmacéuticas líquidas las cuales son soluciones o suspensiones estériles pueden ser utilizadas, por ejemplo, para inyección intramuscular, intraperitonial o subcutánea. Las soluciones estériles también se pueden administrar por vía intravenosa. La administración oral puede ser en forma de composición líquida o sólida. De manera preferible, la composición farmacéutica está en forma de dosificación unitaria, por ejemplo, como tabletas o cápsulas. En tal forma, la composición se subdivide en cantidades apropiadas que contengan dosis unitarias del ingrediente activo; las formas de dosificación unitarias pueden ser composiciones empacadas, por ejemplo polvos empacados, frascos, á pulas o ampolletas, jeringas llenadas previamente o sacos que contengan líquidos. La forma de dosificación unitaria puede ser, por ejemplo, una cápsula o tableta en si misma, o puede ser cualquier cantidad apropiada de tales composiciones en forma de empaque . Así, de acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula I como se define en la presente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un portador farmacéuticamente aceptable . La dosificación que se va a utilizar en el tratamiento de un paciente específico que padece de una enfermedad que involucra proliferación de células de músculo liso puede determinarse de manera subjetiva por el médico que atiende. Las variables involucradas incluyen el estado específico de enfermedad y el tamaño, edad y patrón de respuesta del paciente. Así, de acuerdo con un aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de fórmula I como se define en la presente para uso en el tratamiento de mamíferos y de manera más particular para uso en el tratamiento de condiciones y enfermedades relacionadas con proliferación de células de músculo liso. Se establece la capacidad de los compuestos de la presente invención para inhibir la proliferación de células de músculo liso utilizando células de músculo liso aórticas porcinas aisladas en una modificación del procedimiento de Castellot et al., J. Biol. Chem 25.2(19) 11256 (1982), como sigue : Aortas porcinas frescas, limpiadas cuidadosamente retirando tejido graso se enjuagan en solución salina estéril amortiguada con fosfatos, con 2% de líquido antibiótico-antimicótico (lOOx) (10,000 unidades de penicilina (base) de 10,000 µg de estreptomicina (base) y 25 µg de amfotericina B/ml utilizando penicilina G (sal de sodio) , sulfato de estreptomicina y amfotericina B como Fungizone"" en solución salina al 0.85%, disponible de Gibco Laboratories, Grand Island Biological Co., Grand Island, NY) . Posteriormente se digiere el tejido en 10-15 mi de una solución de enzimas que contiene colagenasa tipo I, 165 U/ml; elastasa tipo III, 15 U/ml; BSA, 2 mg/ml; e inhibidor de tripsina de frijol de soya, 0.375 mg/ml, seguido por incubación a 37°C bajo una atmósfera de C02 al 5%, durante 10 a 15 minutos. Después de este tratamiento, se retira la adventicia de la superficie exterior o desprendimiento con fórceps. Después se corta longitudinalmente la aorta y se coloca abierta, y la capa endotelial se retira por raspado. De la capa media de células se enjuaga en la solución de enzima y se coloca en un recipiente nuevo de 100 mm con 10 mi de solución de enzima. La capa media de células se corta utilizando un par de tijeras finas y se digiere durante 2-3 horas a 37°C en 30 mi de solución fresca de enzima. Después de la digestión, el tejido medio se homogeniza utilizando una pipeta Pasteur estéril con una punta pulida al fuego o bien un pipeteador Eppendorf con una punta de pipeta estéril de 200-1000 µl . Posteriormente la suspensión se centrifuga durante 10 minutos a 8000 rpm y el sedimento se suspende en 4-6 mi de solución fresca de enzima y se siembra en placas sobre 4-6 matraces de 100 mm, con tapones ventilados. Después se permite que las células crezcan hasta confluencia y se dividen utilizando tripsina al 0.25%. Se evalúan las células para determinar pureza y la calidad total utilizando anticuerpo para SMC actina. Se ensaya las células en un pasaje temprano (generalmente pasaje 3-7) en condiciones de subconfluencia. Se hacen crecer cultivos en recipientes de cultivo de pozos múltiples de 16 mm (24 pozos) en medio 199 suplementado con 10% de suero bovino fetal y 2% de antibiótico/antimicótico. En la subconfluencia, las células se colocan en un medio de linfocitos libre de suero, definido (AIM-V; Gibco) durante 24-48 h antes de iniciar el protocolo experimental. Se inicia el procedimiento de prueba estándar por adición del compuesto de prueba, 3H-timidina y suero, o un factor de crecimiento específico a células sincronizadas privadas de suero. El factor de crecimiento y las estimulaciones con suero se optimizan para cada tipo de célula. Se agregan los compuestos de prueba a cada pozo en una dilución 50 veces (20 µl/pozo) y las placas se incuban durante 24-36 h a 37°c en una atmósfera de C02 al 5%. Los compuestos de prueba se disuelven en etanol al 50% y se realizan ensayos a l, 10 y 100 µM. Como control, se ensaya de manera sistemática RG 50872 (Bilder, G.A.; et al., Am. J. Cell. Physiol., 1991; 260:C721) bajo las condiciones de cada preparación celular a una concentración de 5 µM. Al finalizar el experimento, las placas se colocan en hielo, se lavan tres veces con PBS enfriado con hielo y se incuban en ácido tricloroacético (TCA) a 10% enfriado con hielo durante 30 minutos para eliminar las proteínas solubles en ácido. Cada solución se transfiere a un frasco de centelleo que contiene HCl 0.4 N (500 µl/frasco para neutralizar NaOH) y cada pozo se humedece dos veces con agua (500 µl) para un volumen total de 2 ml/frasco. Se cuantifican los datos al someter los frascos a conteo de centelleo, por triplicado, en las muestras tanto control como experimentales. Los datos de control (100%) se obtienen de células estimuladas al máximo, como resultado del factor de crecimiento o estimulación de suero. Se obtienen datos experimentales en células estimuladas al máximo con factor de crecimiento o suero y tratadas con un compuesto de prueba. El factor de crecimiento derivado de plaquetas utilizado en el ensayo es PDGF-AB recombinante humano adquirido de Upstate Biotechnology Inc. , Lake Placid, NY) . Los datos se expresan como por ciento de control a partir de lo cual se determinan las CI50. Para diferenciar citotoxicidad de la capacidad de un compuesto para evitar proliferación, se examinan los compuestos de prueba examinando una modificación comercial del ensayo MTT. Brevemente, se hacen crecer células en placas de 24 pozos hasta 70-80% de confluencia. Se priva a las células de suero durante 24-48 h antes de inicio del protocolo experimental. Para asegurar que el ensayo MTT monitorea toxicidad en vez de proliferación, se incuban células con compuestos de prueba 50 mM en medio fresco sin suero, durante 24 h a 37°C en un incubador con C02 y humidificador. Al completar el tratamiento con el compuesto, se agrega el colorante indicador MTT durante 4 horas a 37°C. Después se solubilizan las células y se transfieren alícuotas a cada pozo a una placa de 96 pozos para su análisis. Se registra la absorbancia a 570 nm de longitud de onda con una longitud de onda de referencia de 630 nm utilizando un lector de placa ELISA. Los resultados se presentan como por ciento viable sin utilizar medicamentos (100% viable) y estándares de presolubilización (0% viable) . Los compuestos de la presente invención son inhibidores efectivos de proliferación de células de músculo liso como se muestra por lo datos presentados en la tabla I.

Tabla I Se presentan los siguientes ejemplos a modo de ilustración en vez de limitación para la producción de compuestos representativos de la invención.

EJEMPLO 1 1- (3,4-diclorobßncil) -2-piriciln-2-il-lH-bßnci?nidazol Se disuelve 2-piridin-2-il-lH-bencimidazol (1.95 g, 0.01 moles) en DMF (50 mi) bajo una atmósfera de nitrógeno. Posteriormente se agrega hidruro de sodio (dispersión al 60% en aceite, 0.48 g, 0.012 moles). La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 0.5 h. Posteriormente se agrega bromuro de 3,4-diclorobencilo (2.4 g, 0.01 moles). La mezcla se agita a 80 °C durante un período de 4 h. La mezcla se enfría y se diluye con agua. Después se extrae la mezcla con acetato de etilo. Se lava el extracto orgánico con agua dos veces y después se evapora. Se tritura el residuo con una cantidad pequeña de acetato de etilo/hexano. Se recolecta el sólido y se cristaliza a partir de cloruro de hidrógeno etanólico. Se recolecta el sólido para proporcionar el compuesto del título (1.3 g, 36.7% de rendimiento) como monoclorhidrato, como sólido café claro, p.f. 227-229°C. Análisis calculado para C19H13C12N3. HCl : C, 58.41; H, 3.61; N, 10.76. Encontrado: C, 58.21; H, 3.54; H, 10.80. Espectro de masas (+FAB; [M+H]+) 354/356/358. -RMN (DMSO-d6; 400 MHz) d 8.78 (d, 1H) , 8.52 (d, 1H) , 8.15 (t, 1H) , 7.9 (d, 1H) , 7.77 (d, 1H) , 7.65 (d, 2H) , 7.54 (d, 1H) , 7.48-7.52 (m, 2H) , 7.23 (d, 1H) , y 6.22 ppm (s, 2H) .

EJEMPLO 2 Ester metílico de 4- [2- (piridit?-2-il) -bencitni azol-1- ilmetil]benzoico Se prepara el compuesto del título utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 1, utilizando (2.29 g, 0.01 moles) del éster metílico del ácido 4-bromometilbenzoico. La cristalización a partir de una mezcla de acetato de etilo/hexano proporciona 1.3 g (37.9% de rendimiento) del compuesto del título como un sólido café, p.f. 158-159°C. Análisis calculado para C21H17N302 : C, 73.45; H, 4.99; N, 12.24. Encontrado: C, 73.47; H, 5.07; N, 12Í21. Espectro de masas (+FAB; [M+H]+) 344. "H-RMN (DMS0-d6; 400 MHz) d 8.63 (d, 1H) , 8.38 (d, 1H) , 7.98 (t, 1H) , 7.84 (d, 2H) , 7.77 (m, 1H) , 7.54 (m, 1H) , 7.47 (m, 1H) , 7.28 (m, 2H) , 7.24 (d, 2H) , 6.28 (s, 2H) , y 3.78 ppm (s, 3H) .

EJEMPLO 3 Éster metílico del ácido 4- (5,6-dimetil-2-trifluorometil- bencimidazol-1-ilmetil) -benzoico Se disuelve 5, 6-dimetil-2-trifluorometil-lH-bencimidazol (2.14 g, 0.01 moles) en DMF (50 mi) . Se agrega hidruro de sodio (dispersión al 60% en aceite, 0.48 g, 0.012 moles) y la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 0.5 h bajo una atmósfera de nitrógeno. Posteriormente se agrega éster metílico del ácido 4-bromo etilbenzoico (2.29 g, 0.01 moles) . La mezcla se agita a 80°C durante 18 h. Se evapora la mayor parte del solvente. Se diluye el residuo con agua y se extrae con acetato de etilo. Se lava la fase orgánica con agua, se seca sobre sulfato de sodio anhidro y después se evapora. Se recristaliza el residuo a partir de acetato de etilo/hexano, dos veces, para proporcionar el compuesto puro del título (0.85 g, 3.5% de rendimiento) como un sólido blanco, p.f. 150-152°C. Análisis calculado para C19H17F3N202 : C, 62.98; H, 4.73; N, 7.73. Encontrado: C, 62.96; H, 4.73; N, 7.56. Espectro de masas (+FAB; [M+H]+) 363. -RMN <DMS0-d6; 400 MHz) d 7.90 (d, 1H) , 7.63 (s, 1H) , 7.45 (s, 1H) , 7.15 (d, 2H) , 5.74 (s, 2H) , 3.81 (s, 3H) , 2.33 (s, 3H) ,. y 2.30 ppm (s, 3H) .

EJEMPLO 4 Etapa 1 clorhidrato de etil-butiroimidato Se enfría en un baño con hielo una solución de butironitrilo (15 g, 0.21 moles) en EtOH (150 mi) . La solución fría después se satura con cloruro de hidrógeno. La mezcla de reacción se refrigera durante 18 h. Se evapora el etanol bajo vacío. Después se hace reaccionar la sustancia oleosa residual con éter para obtener el compuesto del título (15.5 g, 48% de rendimiento) el cual se utiliza en la siguiente reacción.

Etapa 2 2-propil-5-nitroindol Una mezcla de clorhidrato de etil-butiroimidato (7.6 g, 50 mmoles) y 4-nitro-l, 2-fenilendiamina (7.6 g, 50 mmoles) en etanol (100 mi) se somete a reflujo durante 18 h. El etanol se evapora bajo vacío. El sólido pegajoso se suspende en H20 (100 mi) . La separación del sólido amarillo proporciona el compuesto del título (5.3 g, 52% de rendimiento). 'H-RMN (DMS0-d6; 200 MHz) d 12.9 (s, 1H) , 8.4 (s, 1H) , 8.0-8.05 (d, 1H) , 7.6-7.64 (d, 1H) , 2.28-2.85 (t, 2H) , 1.7-1.85 (m, 2H) , 0.9-1.0 ppm (t, 3H) .

Etapa 3 Éster etílico del ácido 4- (5-nit o-2-propil-benci?nidazol- 1-ilmetil) -benzoico A una suspensión de hidruro de sodio, dispersión al 60% en aceite (1.0 g; 25 mmoles) en DMF (30 mi) se agrega a gotas durante 10 minutos una solución de 2-propil-5-nitroindol (4.2 g; 20 mmoles) en DMF (30 mi) . Después de la adición, la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 30 minutos, después se agrega 4-(bromometil) benzoato de metilo (4.7 g; 20 mmoles) . La mezcla de reacción se caliente a 80°C durante 18 h, y después se concentra hasta un aceite espeso. El aceite se extrae con acetato de etilo y agua. Se concentra a sequedad la capa de acetato de etilo. Se somete el residuo (1.3 g) a cromatografía instantánea en gel de sílice (hexano/EtOAc; 7:3) para obtener 365 mg de un sólido amarillo. La recristalización a partir de hexano/EtOAc proporciona el compuesto del título, p.f. 136-138°C. Análisis calculado para C20H21N3O4 : C, 65.38; H, 5.74; N, 11.44. Encontrado: C, 65.15; H, 5.75; N, 11.26. Espectro de masas (El; M+) m/z 367. Hí-RMN (DMSO-d6; 400 MHz) d 8.5 (d, 1H) , 8.1 (dd, 1H) , 7.9 (d, 2H) , 7.7 (d, 1H) , 7.2 (d, 2H) , 5.7 (s, 2H) , 4.3-4.3 (q, 2H) , 2.8 (t, 2H) , 1.7-2.0 (m, 2H) , 1.24-1.3 (t, 3H) , y 0.90-0.95 ppm (t, 3H) . Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención. Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes:

Claims (15)

piaTVTMntcACTO ES

1. Un compuesto de la fórmula caracterizada porque: Rx es propilo, trifluorometilo o piridin-2-ilo; R2 es bencilo sustituido en el cual los sustituyentes son independientemente uno o dos grupos halógeno, carboxilo o alcoxicarbonilo de 2 a 7 átomos de carbono, R3 y R„ son H, metilo o nitro; con la condición de que cuando R2 es piridin-2-ilo o propilo, y R3 y R4 son H, R2 no es p-clorobencilo, y además con la condición de que cuando R? es propilo, R2 no está sustituido con carboxilo o alcoxicarbonilo; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. El éster etílico del ácido 4- (5-nitro-2-propil-bencimidazol-1-ilmetil) -benzoico una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es l-(3,4-diclorobencil) -2-piridin-2-il-lH-bencimidazol o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es el éster metílico del ácido 4- [2- (piridin-2-il) -bencimidazol-1-ilmetil] -benzoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

5. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es el éster metílico del ácido 4- (5, 6-dimetil-2-trifluorometil-bencimidazol-1-ilmetil) benzoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

6. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende un compuesto de la fórmula : caracterizada porque: R-L es propilo, trifluorometilo o piridinilo; R2 está sustituido con bencilo en el cual los sustituyentes son independientemente uno o dos grupos de halógeno, carboxilo o alcoxicarbonilo de 2 a 7 átomos de carbono, R3 y R4 son H, metilo o nitro; con la condición de que cuando R1 es propilo, y R3 y R4 son H, R2 no es p-clorobencilo y con la condición adicional de que cuando Rx es propilo, R2 no está sustituido con carboxilo o alcoxicarbonilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un portador farmacéuticamente aceptable.

7. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende el éster etílico del ácido 4- (5-nitro-2-propil-bencimidazol -1-ilmetil ) -benzoico una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

8. El compuesto de fórmula I: caracterizada porque: Rx es propilo, trifluorometilo o piridinilo; R2 es bencilo sustituido en el cual los sustituyentes son independientemente uno o dos grupos de halógeno, carboxilo o alcoxicarbonilo de 2 a 7 átomos de carbono, R3 y R4 son H, metilo o nitro; con la condición de que cuando Rx es propilo, y R3 y R4 son H, R2 no es p-clorobencilo y con la condición adicional de que cuando R1 es propilo, R2 no está sustituido con carboxilo o alcoxicarbonilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en tratamiento de mamíferos.

9. El éster etílico del ácido 4- (5-nitro-2-propil-bencimidazol-1-ilmetil) -benzoico una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un compuesto de fórmula I de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el compuesto es para uso en el tratamiento de enfermedades o condiciones relacionadas con proliferación de células de músculo liso .

10 . El uso de un compuesto de fórmula (I) para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de la polif eración de células de músculo liso en un mamífero , caracterizado porque comprende administrar a ese mamífero, por vía oral o parenteral , dicho compuesto: caracterizado porque: Ri es propilo, trifluorometilo o piridinilo; R2 es bencilo sustituido en el cual los sustituyentes son independientemente uno o dos grupos de halógeno, carboxilo o alcoxicarbonilo de 2 a 7 átomos de carbono, R3 y R4 son H, metilo o nitro; con la condición de que cuando Rx es propilo, y R3 y R4 son H, R2 no es p-clorobencilo y con la condición adicional de que cuando R1 es propilo, R2 no está sustituido con carboxilo o alcoxicarbonilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un portador farmacéuticamente aceptable.

11. El uso del éster etílico del ácido 4- (5-nitro-2-propil-bencimidazol-l-ilmetil) -benzoico para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de la proliferación de células de músculo liso en un mamífero, caracterizado porque comprende administrar a ese mamífero, por vía oral o parenteral, el éster etílico del ácido o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un portador farmacéuticamente aceptable.

12. El uso de conformidad con las reivindicaciones 10 u 11, caracterizado porque la proliferación de células de músculo liso se manifiestan en si mismas como restenosis posterior a angioplastia.

13. El uso de un compuesto de fórmula I: caracterizada porque: Rx es propilo, trifluorometilo o piridin-2-ilo; R2 es bencilo sustituido en el cual los sustituyentes son independientemente uno o dos grupos de halógeno, carboxilo o alcoxicarbonilo de 2 a 7 átomos de carbono, R3 y R4 son H, metilo o nitro; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la fabricación de un medicamento para la prevención de proliferación de células de músculo liso en un mamífero.

14. El uso del éster etílico del ácido 4- (5-nitro-2-propil-bencimidazol-l-ilmetil) -benzoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la manufactura de un medicamento para la prevención de proliferación de células de músculo liso en un mamífero.

15. Un proceso para la preparación de un compuesto de fórmula I : caracterizado porque: Rx es propilo, trifluorometilo o piridin-2-ilo; R2 es bencilo sustituido en el cual los sustituyentes son independientemente uno o dos grupos de halógeno, carboxilo o alcoxicarbonilo de 2 a 7 átomos de carbono, R3 y R4 son H, metilo o nitro; con la condición de que cuando Rx es piridin-2-ilo o propilo, y R3 y R4 son H, R2 no es p-clorobencilo y con la condición adicional de que cuando Rx es propilo, R2 no está sustituido con carboxilo o alcoxicarbonilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; o el éster etílico del ácido 4- (5-nitro-2-propil-bencimidazol-l-ilmetil) -benzoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, proceso el cual está caracterizado porque comprende: (a) hacer reaccionar un nitrilo de fórmula RXCN con un alcohol en ácido clorhídrico para formar un compuesto de fórmula 1, en la que R es alquilo; (b) hacer reaccionar el compuesto de fórmula 1 con 1,2-diaminobenceno sustituido de fórmula: para formar un compuesto de fórmula I, en la que (c) opcionalmente hacer reaccionar el compuesto de fórmula 1 en el que R2 es H, con un agente alquilante para formar el compuesto de fórmula 1, en el que R2 es alquilo o arilalquilo sustituido; y (d) opcionalmente formar una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En la presente se describen compuestos de fórmula (I) en la que R2 es alquilo, trifluorometilo o piridinilo; R2 es H, alquilo o arilalquilo sustituido, en el cual los sustituyentes son independientemente uno o dos grupos halógenos, carboxilo o alcoxicarbonilo; R3 y R4 son H, alquilo, halógeno o nitro; o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, los cuales son útiles como inhibidores de proliferación de células de músculo liso.