MXPA97009555A - Derivados de rapamicina - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a:Los derivados de rapamicina seleccionados entre los derivados de 32(S)-dihidro-rapamicina y los compuestos de 32-desoxo-rapamicina, tienen interesantes propiedades farmacológicas.

Description

DERIVADOS DE RAPAMICTNA La presente invención se refiere a derivados rlp rapamicina. a un proceso para su producción, a su usn nnmn un producto farmacéutico, y a cnmpnsicinnes f rmanéuti ras qnp Inq contienen. La rapamicina es un antibiótico de macrólido conocido, producido por Streptomyces hysroscopicus , que tiene la estructura ilustrada ep la Fórmula A: ver , por ejemplo, McAlpine, J.B., y . .

Antibiotics (1991) a : 688: Schreiber. S.l .. y colaboradores. .'. Am. Chem. Soc. (1991) 113: 7Ü33; la Patente de lps Estados Unirlos de Norteamérica Número 3,929.992. (Se han Dropuesto riifpi-put ? esquemas de numeración para la rapamicina. Para evitar copfppn-nes . cuando se mencionen en la presente derivados de rapami <• i r ,a especificos. los nombres se dan con referpncia a la rapa.rpr.r.a utilizando el esquema de numeración de la fórmula A) . La rapamicina es un potente inmunosupresor, y también se ha demostrado que tiene una actividad antitumoral y anti-hongos. Sin embargo, su utilidad como un producto farmacéutico está restrin-gido por su muy baja y variable biodisponibilidad. Más aun, la rapamicina es insoluble y carece de estabilidad, haciendo difícil formular composiciones galénicas estables. Se conocen numerosos derivados de rapamicipa. Ciertas rapamicinas 40-0-sustituidas se describen, por ejemplo, en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número US 5,258,389, y en la Publicación Internacional Número WO 94/09010 (rapamicina O-alquilica) : en la Publicación Internacional Número 92/05179 (esteres de ácido carboxilico) , en las Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Número US 5.118.677 (esteres de amida), US 5,118.678 (carbamatos), US 5,100.883 (esteres fluorados), US 5.151.413 (acétales), y US 5,120.842 ( steres silíli-cos) . Ahora se ha descubierto de una manera sorprendente, que ciertos derivados novedosos de rapamicina tienen un mejor perfil farmacológico sobre la rapamicina, y exhiben una mayor estabilidad. De acuerdo con la invención, se proporciona un compuesto de la Fórmula I : en donde : Rj es alquilo, alquenilo, alquinilo, hidroxialquilo, hidroxialquenilo, hidroxialquinilo, bencilo, alcoxibencilo o clorobencilo, R2 se selecciona a partir de la fórmula II ó de la Fórmula III Fórmula II ~ Fámula lll en donde : R3 se selecciona a partir de H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, tioalquilo, arilalquilo, hidroxiarilalquilo, hidroxiarilo, hidroxialquilo, dihidroxialquilo, hidroxialco-xialquilo, hidroxialquilarilalquilo, dihidroxialquilarilalquilo, alcoxialquilo, alquilcarboniloxialquilo, aminoalquilo, alquilami-noalquilo, alcoxicarbonilaminoalquilo, alquilcarbonilaminoalqui-lo, arilsulfonamidoalquilo, alilo, dihidroxiaquilalilo, dioxola-nilalilo, carbalcoxialquilo, y alquilsililo; R4 es H, metilo, o junto con R3 forma alquileno de 2 a 6 átomos de carbono; R5 es R60-CH2-, en donde R6 se selecciona a partir de H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilcarbonilo, arilcarbo-nilo, heteroarilcarbonilo, hidroxialquilcarbonilo, aminoalquil-carbonilo, formilo, tioalquilo, arilalquilo, hidroxiarilalquilo, hidroxiarilo, hidroxialquilo, dihidroxialquilo, hidroxialcoxial-quilo, hidroxialquilarilalquilo, dihidroxialquilarilalquilo, alcoxialquilo, alquilcarboniloxialquilo, aminoalquilo, alquila i-noalquilo, alcoxicarbonilaminoalquilo, alquilcarbonilaminoalqui-lo, arilsulfonamidoalquilo, alilo, dihidroxialquilalilo, dioxola-nilalilo, y carbalcoxialquilo; R7C0-, en donde R7 se selecciona a partir de H, alquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, amino, alquila-mino, un residuo de un aminoácido, o amino N,N-disustituido, en donde los sustituyentes (a) se seleccionan a partir de alquilo, arilo, o arilalquilo, ó (b) forman una estructura heterocíclica; R8NCH-, en donde Rg es alquilo, arilo, amino, alquilamino, arilamino, hidroxi, alcoxi, o arilsulfonilamino; -0-CH-0-; o dioximetilino sustituido; Y se selecciona a partir de 0, (H, OH) , y (H, 0R9) , en donde Ro se selecciona a partir de alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, heteroarilcarbonilo, hidroxialquilcarbonilo, aminoalquilcarbonilo, formilo, o arilo y X es OH ó H; en donde "alk" ó "alquilo" se refiere a un sustituyente alifático de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente interrumpido por un enlace oxi; y "ar" ó "arilo" se refiere a un sustituyente aromático de 4 a 14 átomos de carbono monocíclico, opcionalmente heterocíclico, opcionalmente sustituido, en el entendido de que, cuando X sea OH, Rj sea alquilo, y R2 sea un residuo de la fórmula II, entonces R3 es diferente de H. Cualquier fracción de "alk" o "alquilo" mencionada anteriormente, puede ser ramificada, lineal, o cíclica,- de preferencia es un sustituyente alifático de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente interrumpido por un enlace oxi, y más preferiblemente no interrumpido por oxi . Los ejemplos de la fracción de "ar" o "arilo" menciona-dos anteriormente y opcionalmente sustituidos, pueden incluir, por ejemplo, fenilo, bencilo, tolilo, piridilo, y similares. Cuando R¡ es clorobencilo, o alcoxibencilo, el sustituyente está de preferencia en orto. Cuando R7CO- es carbamoílo N,N-disustituido, puede ser, por ejemplo, N-metil-N- (2-piridin-2-il-etil) -carbamoílo, (4-metil-piperazin-1-il) -carbonilo, o (morfolin-4-il) -carbonilo. Cuando R5 es dioximetilino sustituido, puede ser, por ejemplo, 0,0- (alquilen) -dioxi-metilino, es decir, en donde los 2 átomos de oxígeno están enlazados por un grupo alquileno. En los compuestos de la fórmula I, se prefieren los siguientes significados bien sea individualmente o en cualquier combinación o subco binación: 1. X es OH y R| es alquinilo de 3 a 10 átomos de carbono ó hidroxialquinilo de 3 a 10 átomos de carbono, de preferencia alquin-2-ilo de 3 a 10 átomos de carbono ó hidroxial-quin-2-ilo de 3 a 10 átomos de carbono, más preferiblemente alquin-2-ilo de 3 a 6 átomos de carbono; 2. X es H y Rj es alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, alquen-2-ilo de 3 a 10 átomos de carbono, hidroxialquen-2-ilo de 3 a 10 átomos de carbono, alquin-2-ilo de 3 a 10 átomos de carbono, hidroxialquin-2-ilo de 3 a 10 átomos de carbono, o alcoxi de 1 a 10 átomos de carbono-alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, de preferencia alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o alquin-2-ilo de 3 a 6 átomos de carbono, más preferiblemente alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, y muy preferiblemente metilo; 3. Alquinilo de 3 a 6 átomos de carbono como Rj es 2-propinilo o pent-2-inilo, de preferencia pent-2-inilo; 4. Y es O, (H, OH) ó (H, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono) , de preferencia 0; 5. R2 es un residuo de la fórmula II; 6. En el residuo de la fórmula II, R3 es H, hidroxialquilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxialcoxi de 1 a 6 átomos de carbono-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, (alquilo de 1 a 6 átomos de carbono) -carbonilaminoalquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono-alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, o aminoalquilo de 1 a 6 átomos de carbono, de preferencia H, hidroxietilo, hidroxipropilo, hidroxietoxietilo, metoxietilo, o acetilaminoetilo; especialmente H cuando X es H ó cuando X es OH y Rj es alquinilo; 7. En el residuo de la fórmula II, R4 es metilo. 8. R2 es un residuo de la fórmula III, en donde R5 es R6OCH2- en donde Rg se selecciona a partir de H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquen-2-ilo de 3 a 6 átomos de carbono, alquin-2-ilo de 3 a 6 átomos de carbono, arilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono-carbonilo, arilcarbonilo, hidroxialquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, o aminoalquilo de 1 a 6 átomos de carbono; R7CO-, en donde R7 se selecciona a partir de H, hidroxi, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, amino, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono-amino, un residuo de un aminoácido, o amino N,N-disustituido, en donde los sustituyentes (a) se seleccionan a partir de alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o arilo, o (b) forman una estructura heterocíclica: R^ICH- en donde R e p? alquilo, arilo, amino, alquilamino , arilamino, hidroxi. alcp^i , o arilsulfonilamino; -0-CH-0-; ó dioximetilino sustituido. Los compuestos preferidos son los compuestos p la fórmula la: en donde Rj, R2 e Y son como se definieron antpripr-ment , y de preferencia tienen cualquiera de los signif i r adns preferidos dados en 1. y 3. a 8. anteriores: y de la fórmula I en donde Ri, R2 e Y son como se definieron aniprinr-mepte, y de preferencia tienen cualquiera de los significarlos preferidos dados en 2. a 8. anteriores. Los compuestos especialmente preferidos incluyen: (i) 32-desoxo-rapamicina; (ii) 16-O-pent-2-inil-32-desoxo-rapamicina; (iii) l6-O-pent-2-inil-32-desoxo-40-O- (2-hidroxie-til) -rapamicina; (iv) 16-0-pent-2-inil-32 (S) -dihidro-rapamicina; (v) 16-0-pent-2-inil-32 (S) -dihidro-40 -O- (2-hidroxietil) -rapamicina; (vi) 32 (S) -dihidro-40-O- (2-metoxi) etil-rapamicina; (vii) 32 (S) -dihidro-40-O- (2-hidroxietil) -rapamicina. Los compuestos de la fórmula I pueden exhibir isomerismo, y de acuerdo con lo mismo, existirán otras formas isoméricas. Se entenderá que la presente invención abarca compuestos de la fórmula I , los isómeros individuales de la fórmula I ' : en donde Rx, R2, Y y X son como se definieron anteriormente, así como mezclas isoméricas de los mismos.

Los isómeros individuales se pueden separar pnr analogía a los métodos conocidos en este campo. La presente invención también proporciona un proceso para la producción de los compuestos de la fórmula T. dicho proceso comprende: a) para producir un compuesto de la fórmula T nn donde X es H, eliminar de una manera reductiva el parbnniln PO la posición 32 de un compuesto de la fórmula I a: en donde R?. R 2 e son como se definieron antppm -mente, en una forma protegida o desprotegida. y, cuando se requiera, remover los grupos protectores presentes; o b) para producir un compuesto de la fórmula I. pn donde X es OH, reducir de una manera estereoselect i va el carhpni-lo en la posición 32 de un compuesto de la fórmula IVa comn « definió anteriormente: ó c) convertir un compuesto de la fórmula I ? dpnri.- |. , es alquilo, para proporcionar un compuesto de la fórmula I en donde Rj sea diferente de alquilo. Ep el paso a) del proceso, el compuesto de la fórmula IVa de preferencia está ep una forma protegida, es decir, puede comprender grupos protectores sobre grupos funcionales que no participen en la reacción, por ejemplo, OH en la posición 28 y opciopalmente en la posición 40 cuando R2 sea un residuo de la fórmula II, o en la posición 39 cuando R2 sea un residuo de la fórmula III. La reducción a) , para obtener el compuesto 32-desoxo de la fórmula I, convenientemente se puede realizar en dos pasos: i) mediante la reacción de un compuesta de la fórmula IVa de preferencia en forma protegida con un hidruro, por ejemplo, hidruro de aluminio di-isobutílico , o de preferencia hidruro de aluminio tributóxico terciario de litio, para producir un compuesto 32-dihidro correspondiente. Se pueden emplear otros métodos y reactivos como se conocen en la técnica para reducir cetonas, para la producción del compuesto 32-dihidro a partir de la cetona correspondiente. Estos incluyen, por ejemplo, hidroge-nación, reducción por metales, reducción con hidruro de metal, como se describen en Comprehensive Organic Transformations . R.C. Larock, VCH Publishers Inc., Nueva York, 1989. páginas 527-535. secciones 7.1.1-7.1.4 y métodos de reducción asimétrica para cetonas, por ejemplo, como se dan a conocer en Comprehensive Organic Transformations, R.C. Larock, VCH Publishers Inc., Nueva York, 1989, páginas 540-547, sección 7.1.15. Luego se sigue el paso de reducción i) , ii) mediante la conversión del compuesto 32-dihidro en el derivado de 32-halógeno correspondiente, por ejemplo, el derivado de 32-bromo o (de preferencia) de 32-yodo, el cual entonces se reduce, por ejemplo, por un hidruro, en el derivado de 32-desoxo deseado, y cuando se requiera, desproteger el compuesto resultante. Se pueden utilizar otros reactivos, tales como se utilizan para reducir haluros, e incluyen, por ejemplo, metales de baja valencia (es decir, litio, sodio, magnesio, y zinc) e hidruros de metal (hidruros de aluminio, hidruros de boro, silanos, hidruros de cobre) (ver Comprehensive Organic Transformations, R.C. Larock, VCH Publishers Inc., Nueva York. 1989, páginas 18-20, secciones 1.5.1. y 1.5.2). De una manera alternativa, la reducción del haluro se puede lograr mediante la utilización de hidrógeno o de una fuente de hidrógeno (es decir, ácido fórmico o una sal del mismo) , en la presencia de un catalizador de metal adecuado) es decir, niquel de Raney, metal de paladio o complejos de paladio, complejos de rodio o rutenio) (ver Comprehensive Organic Transformations, R.C. Larock, VCH Publishers Inc., Nueva York, 1989, páginas 20-24 , sección 1.5.3). Además, también se pueden emplear los métodos conocidos que se utilizan para transformar un alcohol en el compuesto desoxi correspondiente. Estos métodos incluyen, por ejemplo, reducción directa o reducción de un compuesto de fósforo intermediario, sulfonato, tiocarbonato, tiocarbamato, o xantato, y se describen, por ejemplo, en Comprehensive Organic Transformations, R.C. Larock, VCH Publishers Inc., Nueva York, 1989, páginas 27-31, secciones 1.9.1.-1.9.4. Los grupos protectores de hidroxi adecuados y los métodos para su formación y remoción se conocen en la técnica, por ejemplo, ver Protective Groups in Organic Synthesis, segunda edición T.W. Greene y P.G.M. Wuts, John Wiley & Sons, Nueva York, 1991, capítulo 2 y las referencias del mismo. Los grupos protectores de OH preferidos son, por ejemplo, los grupos triorganosililo tales como trialquilo(de 1 a 6 átomos de carbono) sililo (por ejemplo, trimetilsililo, trietilsililo) , tri-isopropilsililo, isopropildimetilsililo, butilo terciario-dimetilsililo, triarilsililo (por ejemplo, trifenilsililo) , o triaralquilsililo (por ejemplo, tribencilsililo) . La desprotección se puede realizar bajo condiciones ligeramente acidas. El paso de reducción i) se puede efectuar convenientemente a una baja temperatura, por ejemplo, de -10°C a -80°C. En el paso ii) , el compuesto 32-dihidro, opcionalmente en forma protegida, de preferencia el diaestereoisómero 32 (R) se convierte en un éster, de preferencia un sulfonato, por ejemplo mesilato, tosilato, nosilato, o triflato, seguido por desplazamiento con un haluro adecuado, por ejemplo yoduro o bromuro de sodio, yoduro o bromuro de amonio tetrabutílico, de preferencia en la presencia de una base, por ejemplo una amina. El diaeste-reoisó ero 32 (R) se puede separar de la mezcla de acuerdo con las técnicas de separación conocidas, por ejemplo cromatografía. Los hidruros adecuados para reducir el compuesto de 32-halógeno incluye, por ejemplo, hidruros de radicales, tales como hidruro de estaño tributílico o tris- (dimetilsilil) -silano. La reducción también se puede realizar en ausencia o en la presencia de un iniciador de radicales, por ejemplo 2,2 ' -azobisisobutironi-trilo o de preferencia Et3B, convenientemente a una temperatura de 0°C a 80°C. Convenientemente se puede agregar un oxidante tal como acetato cúprico después del paso de reducción de i) ó ii) , si se requiere, para volver a oxidar selectivamente en carbonilo una reducción secundaria indeseada que pueda presentarse, por ejemplo, en la posición 9. De una manera alternativa, el derivado de 32-dihidro se puede convertir directamente en un haluro mediante métodos conocidos en este campo, por ejemplo, utilizando fosfina trifení-lica en combinación con imida N-bromosuccínica o N-yodosuccínica, tetrabromuro o tetrayoduro de carbono, 1, 2-dibromotetracloroeta-no, 2,4, 5-tribromo- o -triyodoimidazol . yodo, 1, 2-diodoetano, o utilizando bromuro de tionilo o yoduro de fosfonio metiltrifenó-xico. La reducción del carbonilo en la posición 32 para obtener el derivado de 32-desoxo, también se puede realizar a través de la formación de una hidrazona tosílica, seguida por tratamiento con un borano, por ejemplo catecolborano, o a través de la formación de un ditiano seguida por una reducción adecuada, por ejemplo con níquel de Raney o con un hidruro, por ejemplo hidruro de estaño tributílico. Se pueden emplear otros métodos conocidos para transformar una cetona en el alcano correspondiente; estos métodos incluyen, por ejemplo, reducción directa (ver Comprehensive Organic Transformations, R.C. Larock, VCH Publishers Inc., Nueva York, 1989, páginas 35-37, sección 1.12.1.), o reducción por medio de hidrazonas (Comprehensive Organic Transformations, R.C. Larock, VCH Publishers Inc., Nueva York, 1989, páginas 37-38, sección 1.12.2.). y por medio de derivados de azufre y selenio (Comprehensive Organic Transformations, R.C. Larock, VCH Publishers Inc., Nueva York, 1989, páginas 34-35, secciones 1.10. y 1.11.). El paso de reducción b) para obtener el compuesto 32 (S) -dihidro de la fórmula I, se realiza bajo condiciones seleccionadas. De preferencia se utiliza un agente de reducción que favorezca de una manera significativa la reducción en 32 (S) por ejemplo borohidruro trietílico de sodio. La reducción se puede realizar convenientemente a una baja temperatura, por ejemplo de -50°C a -80°C, en un solvente inerte, por ejemplo tetrahidrofurano, éter dietílico, glima, diglima, o éter butílico terciario de metilo. La separación del compuesto 32 (S) -dihidro de las bajas cantidades del compuesto 32 (R) -dihidro producidas, se puede realizar mediante métodos conocidos en la técnica, por ejemplo cromatografía en columna, cromatografía de fase inversa. Si se desea, los grupos hidroxi en la posición 28 y opcionalmente en la posición 40, se pueden proteger antes de la reducción, y se pueden desproteger después, por ejemplo, como se divulgó anteriormente. De preferencia, el paso de reducción b) se realiza sin protección de OH. El paso de conversión c) se puede realizar de acuerdo con los métodos conocidos en este campo. Por ejemplo, un compuesto de la fórmula I en donde Ríes alquilo, de preferencia metilo, se puede hacer reaccionar con un compuesto Rx-0H, en donde Rx es alquinilo o hidroxialquinilo, para proporcionar un compuesto de la fórmula I en donde Ríes alquinilo o hidroxialquinilo. La reacción se puede realizar convenientemente en un solvente aprótico, por ejemplo diclorometano, tolueno, acetonitrilo, o tetrahidrofurano, bajo condiciones acidas. De preferencia, la reducción en la posición 32. particularmente el paso de reducción b) , se realiza sobre un compuesto de la fórmula IVa, en donde R i ya tenga el significado deseado, por ejemplo Ri sea alquinilo, eliminando de esta manera una conversión posterior después de la reducción. Se puede preparar un compuesto de la fórmula IVa en donde Ríes alquinilo hidroxialquinilo, utilizado como material de partida, un compuesto Rx-0H como se dio a conocer anteriormente.

Los compuestos utilizados como materiales de partida se pueden preparar de una manera análoga a los métodos conocidos y practicados en la técnica, por ejemplo, como se dan a conocer en las Patentes Números USP 5,258,389, WO 94/09010, WO 95/16691, USP 5,120,842 etcétera. Los siguientes ejemplo son ilustrativos de la invención. Todas las temperaturas están en °C. Se utilizan las siguientes abreviaturas: THF = tetrahidrofurano TES = trietilsililo EJEMPLO 1; 32-desoxorrapa icina (Rj « CH3; R2 » II en donde R3 « H y R4 - CH3; X » H; Y - O) . A una solución enfriada (-78°C) y agitada de 26.1 gramos (22.85 milimoles de 28, 40-bis-O-TES-rapamicina en 260 mililitros de tetrahidrofurano, se le agregan 50.3 mililitros (50.3 milimoles) de una solución 1M de hidruro de aluminio tributóxico terciario de litio en tetrahidrofurano. La mezcla resultante se deja calentar a -15°C durante 2 horas. Luego el baño de enfriamiento es reemplazado por un baño de hielo, llevando la temperatura hasta 0°C, y se continúa la agitación durante 1 hora a esta temperatura. La mezcla de reacción se vierte en un embudo de separación que contiene 750 mililitros de acetato de etilo y 400 mililitros de ácido cítrico acuoso 2N helado, y se agita brevemente. La capa acuosa se separa y se extrae dos veces con acetato de etilo frío. La solución orgánica combinada se lava con ácido cítrico acuoso 2N helado, agua, bicarbonato de sodio acuoso saturado, y dos veces con salmuera saturada, luego se seca sobre carbonato de sodio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo, que consiste en una mezcla de 32 (R) -dihidro-28, 40-bis-O-TES-rapamici-na y (32R) 9,32-bis-dihidro-28 ,40-bis-O-TES-rapamicina, se disuelve sin mayor purificación en 260 mililitros de metanol. Esta solución se enfría a 0°C, y se trata con 6.85 gramos (34.31 milimoles) de acetato cúprico. Después de agitar durante 1 hora, la solución resultante se diluye con éter butílico terciario de metilo, y se lava dos veces con agua y dos veces con salmuera saturada. Las capas acuosas se extraen de regreso con éter butílico terciario de metilo. La solución orgánica combinada se seca sobre sulfato de sodio anhidro, se filtra, y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica mediante cromatografía en gel de sílice (60:40, hexano/éter butílico terciario de metilo), para proporcionar 32 (R) -dihidro-28,40-bis-0-TES-rapami-cina pura como un sólido blanco. ^-RMN (CDC13) mezcla de rotámeros 4:1, los cambios químicos entre paréntesis se refieren al rotámero menor, d 0.72 (ÍH, dd, H-38ax), 1.63 (1.60) (3H, s, C17-CH3) , 1.66(1.69) (3H, s, C29-CH3), 1.77 y 1.81 (H-33) , 2.46 (ÍH, m, H-31) , 2.82 (2.91) (ÍH, m, H-25), 2.91 (ÍH, m, H-39) , 3.13 (3H, s, C16-OCH3) , 3.26 (3H, s, C27-0CH3) , 3.41 (ÍH, m, H-40) , 3.43 (3H, s, C39-0CH i , 3.62 (ÍH, m, H-32) , 3.75 (3.57) (ÍH, d, H-27) , 4.10 (ÍH, d, H-28), 4.81 (ÍH, s amplio, C10-0H) , 5.05 (ÍH, d, H-34) , 5.27 (ÍH, d, H-30) , 5.36 (ÍH, d, H-2) , 5.69 (ÍH, dd, H-22) , 6.03 (5.96) (ÍH, d, H-18) , 6.15 (ÍH, dd, H-21), 6.33 (ÍH, dd , H-20) , 6.40 (ÍH, dd, H-19) . MS (FAB, matriz Lil) m/z 1150 ( [M + Li] *) (intensidad relativa 100) . A una solución enfriada (-15°C) y agitada de 20.69 gramos (18.10 milimoles) de 32(R)-dihidro-28,40-bis-0-TES-rapa icina y 7.55 mililitros (54.27 milimoles) de amina trietíli-ca en 200 mililitros de cloruro de metileno, se le agregan 2.10 mililitros (27.02 milimoles) de cloruro de metansulfonilo. La mezcla se agita durante 20 minutos, luego se diluye con acetato de etilo, y se agrega bicarbonato de sodio acuoso saturado. Las capas se separan, y la capa acuosa se extrae tres veces con acetato de etilo. La fase orgánica combinada se lava con un bicarbonato de sodio acuoso saturado y salmuera, se seca sobre sulfato de sodio anhidro, se filtra, y se concentra bajo presión reducida. El residuo se puede purificar mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (80:20 hexano/acetato de etilo), proporcionando 32 (R)-dihidro-32-0-mesi 1-28,40-bis-O-TES-rapamiciña pura como un sólido blanco, pero se utiliza rutinariamente el producto crudo en el siguiente paso sin mayor purificación. *H-RMN (CDCla) 6 0.77 (ÍH, dd , H-38ax) , 1.67 (3H, s, C17-CH3), 1.72 (3H, s, C29-CH * , 2.77 (ÍH, M, H-25) , 2.92 (ÍH, m, H-39), 3.03 (3H, s, CI6-OCH3) , 3.17 (3H, s, C27-0CH i , 3.21 (3H, s, C39-0CH3) , 3.42 (ÍH, m, H-40) , 3.45 (3H, s, CH §0 , 3.91 (ÍH, d, H-27), 4.10 (ÍH, d, H-28) , 4.72 (ÍH, , H-32) , 4.94 (ÍH, s, C10-0H) , 5.12 (ÍH, m, H-34) , 5.25 (ÍH, d, H-30) , 5.43 (ÍH, d. H-2), 5.88 (ÍH, dd, H-22) , 6.03 (ÍH, d, H-18) , 6.18 (ÍH, dd , H-21), 6.37 (ÍH, dd, H-20) , 6.44 (ÍH, dd, H-19) MS (FAB, matriz Lil) m/z 1228 ( [M + Li]") (intensidad relativa 68), 1132 ( [M - CH3SO y) + Li]*) (intensidad relativa 100) . Una mezcla de 22.35 gramos (18.30 milimoles) de 32(R)-dihidro-32-0-mesil-28,40-bis-0-TES-rapamicina, 27.50 gramos (183.33 milimoles) de yoduro de sodio, y 6.3 mililitros (36.68 milimoles) de amina di-isopropiletí lica en 400 mililitros de tetrahidrofurano, se calienta a reflujo durante 6 horas, y luego se deja enfriar a la temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluye con acetato de etilo, y se trata con bisulfito de sodio acuoso al 38.4 por ciento. Las capas se separan. La fase orgánica se lava tres veces con bicarbonato de sodio acuoso saturado, y una vez con salmuera saturada, luego se seca sobre sulfato de sodio anhidro, se filtra, y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (83:17, hexano/acetato de etilo), para proporcionar 32(S)-desoxo-32-yodo-28,40-bis-0-TES-rapamicina pura . l-RMN (CDCI3) mezcla de rotámeros 1.5:1, los cambios químicos entre paréntesis se refieren al rotá ero menor, d 0.73 (ÍH, dd, H-38ax) , 1.68 (1.66) (6H, s, C17-CH3) y C29-CH J , 2.72 (ÍH, m, H-25) , 2.91 (2H, m, H-32 y H-39) , 3.15 (3H, s, CI6-OCH3) , 3.30 (3.31) (3H, s, C27-OCH3) , 3.43 (3.41) (3H, s, C39-0CH * , 3.77 (3.91) (ÍH, d, H-27) , 4.21 (4.25) (ÍH, d, H-28) , 4.51 (ÍH, s, C10-0H) , 5.45 (5.48) (ÍH, d, H-30) , 5.60 (5.79) (ÍH, dd , H-22) , 6.02 (5.85) (ÍH, d. H-18) . MS (FAB, matriz Lil) m/z 1260 ( [M + Li]*) (intensidad relativa 100) . A una solución enfriada, (°C) y agitada de 16.79 gramos (13.19 milimoles) de 32(S)~desoxo-32-yodo-28,40-bis-0-TES-rapamicina en 190 mililitros de tolueno, se le agregan 7 mililitros (26.38 milimoles) de hidruro de estaño tributilico, seguidos por 1.3 mililitros (1.30 milimoles) de una solución 1 M de borano trietílico en hexano. Esta mezcla se agita durante 30 minutos, y se apaga con cloruro de amonio acuoso saturado. Las capas se separan, y la capa acuosa se extrae dos veces con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavan con agua, bicarbonato de sodio acuoso saturado, agua, y tres veces con salmuera saturada, luego se secan sobre sulfato de sodio anhidro, se filtran y se concentran bajo presión reducida. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (75:25, hexano/éter butílico terciario de metilo), para proporcionar la 32-desoxo-28, 40-bis-O-TES-rapamicina pura como un sólido blanco. *H-RMN (CDC13) mezcla de rotámeros 2.5:1, los cambios químicos entre paréntesis se refieren al rotámero menor, d 0.73 (ÍH, dd, H-38ax), 1.62 (1.57) (3H, s, C17-CH3) , 1.68 (1.72) (3H, S, C29-CH3), 2.77 (2.91) (ÍH, m, H-25) , 2.91 (ÍH, m, H-39) , 3.15 (3H, S, C16-0CH3), 3.27 (3.25) (3H, S, C27-OCH3) , 3.43 (3.45) (3H, S, C39-OCH3), 3.70 (3.67) (ÍH, d, H-27) , 4.11 (4.07) (ÍH, d, H-28), 4.57 (ÍH, s amplia, C10-OH) , 4.87 (4.67) (ÍH, d, H-34) , 5.19 (5.08) (ÍH, d, H-30), 5.32 (ÍH, d, H-2) , 5.60 (5.66) (ÍH, dd, H- 22), 6.01 (5.92) (ÍH, d, H-18) , 6.17 (ÍH, dd, H-21) , 6.30 (ÍH, dd, H-20), 6.40 (ÍH, dd, H-19) . MS (FAB, matriz Lil) m/z 1134 ( [M + Li] +) (intensidad relativa 100) . A una solución enfriada (-15°C) y agitada de 10.73 gramos (9.52 milimoles) de 32-desoxo-28, 40-bis-O-TES-rapamicina en 85 mililitros de metanol, se le agregan por goteo 9.5 mililitros de ácido sulfúrico acuoso 2N. Después de que se termina la adición, la mezcla de reacción se calienta a 0°C, y se agita durante 1.5 horas, luego se diluye con acetato de etilo, y se apaga con bicarbonato de sodio saturado. Las capas se separan, y la capa acuosa se extrae con 3 porciones de acetato de etilo. La fase orgánica combinada se lava tres veces con bicarbonato de sodio saturado y con salmuera, luego se seca sobre sulfato de sodio anhidro, se filtra, y se concentra bajo presión reducida. El residuo se disuelve en éter dietilico, después de lo cual se cristaliza la 32-desoxo-rapamicina deseada (cristales incoloros) . H-I-RMN (CDCI3), mezcla de rotá eros 3:1, los cambios químicos entre paréntesis se refieren al rotámero menor, d 0.70 (1H, dd, H-38ax) , 1.14 y 1.32 (H-32) , 1.56 (H-33) , 1.65 (1.62) (3H, s, CI7-CH3), 1.68 (1.70) (3H, s, C29-CH i . 2.31 (2H, , H-23 y H-31), 2.82 (2.95) (ÍH, m, H-25) , 2.95 (ÍH, m. H-39) , 3.14 (3H, s, CI6-OCH3) , 3.32 (3H, s, C27-0CH ^ , 3.38 (ÍH, m, H-40) , 3.43 (3.41) (3H, s, C39-OCH3) , 3.61 (ÍH, d, H-27) . 4.12 (ÍH, d, H-28) , 4.80 (4.71) (ÍH, d, H-34) , 5.22 (ÍH, d, H-30) , 5.31 (ÍH, d, H-2) , 5.56 (ÍH, dd, H-22) , 5.95 (5.87) (ÍH, d, H-18) , 6.16 (ÍH, dd , H-21), 6.36 (ÍH, dd, H-20) , 6.41 (1H, dd, H-19) . MS (FAB, matriz Lil) m/z 906 ( [M + Li]4) (intensidad relativa 100) .

EJEMPLO 2: 16-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-rapamicina (R1 = pent-2-inilo; R = II en donde R3= H y R ,= CH ;3X = OH; Y = 0) . A una solución enfriada (°C) y agitada de 970 miligramos (1.06 milimoles) de 32(S) -dihidro-rapa icina y 1.39 mililitros (15.00 milimoles) de 2-pentin-l-ol en 20 mililitros de cloruro de metileno, se le agregan 0.50 mililitros (6.50 milimoles) de ácido trifluoroacético. La mezcla se agita a 0° C durante 3 horas, y se apaga con bicarbonato de sodio acuoso saturado.

Las capas se separan, y la capa acuosa se extrae con tres porciones de acetato de etilo. La solución orgánica combinada se lava con salmuera saturada, se seca sobre sulfato de sodio anhidro, se filtra, y se concentra bajo presión reducida. La mezcla cruda se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (20:80 hexano-acetato de etilo), y luego mediante cromatografía de líquido de alto rendimiento de fase inversa (RP18, 81:19 metanol-agua) , para proporcionar el compuesto del título como un sólido amorfo blanco. *H-RMN (CDC13) , mezcla de rotámeros 2.5:1, los cambios químicos entre paréntesis se refieren al rotámero menor, d 0.71 (ÍH, dd, H-38 ax), 1.13 (1.05) (3H, t, CH3CH2CCCH20) , 1.67 (3H, s, 17-CH3), 1.69 (3H, s, 29-CH3) , 2.21 (2H, qt, CHjCfl^CCO^O) , 2.96 (ÍH, m, H-39), 3.33 (3.37) (3H, s, 27-OCH3) , 3.41 (3.39) (3H, s, 39-OCH3), 3.78 (ÍH, dt, CH3CH2CCCHflO) , 4.0 (ÍH, dt, CH3CH2CCCHÍ¿0) , 5.52 (5.71) (ÍH, dd, H-22) , 5.98 (5.83) (ÍH, d, H-18) , 6.15 (ÍH, m, H-21) , 6.30 (ÍH, dd, H-20) , 6.40 (ÍH, dd, H-19) MS (FAB) m/z 974 ( [M + Li] +) .

EJEMPLO 3 ; 16-pent-2 - iniloxi-32 (S) -dihidro- rapamicina {Ruta Alternativa) . La rapamicina se hace reaccionar con 2-pentin-l-ol en un procedimiento análogo a aquel del Ejemplo 2 , para dar 16-pent-2 -iniloxi-rapamicina. A una solución enfriada (-77°C) y agitada de 17.5 gramos (18.1 milimoles) de 16-demetoxi-16-pent-2-iniloxi-rapami-cina en 180 mililitros de tetrahidrofurano, se le agregan 21.7 mililitros (21.7 milimoles) de una solución 1M de borohidruro trietílico de sodio en tetrahidrofurano. Después de 1 hora a -77°C, la reacción se apaga y se neutraliza con una solución acuosa de ácido cítrico al 10 por ciento. Luego la mezcla de reacción se deja llegar hasta la temperatura ambiente, y se remueve la mayor parte del tetrahidrofurano por evaporación, bajo presión reducida. La solución resultante se extrae dos veces con acetato de etilo, las fases orgánicas se combinan y se secan sobre sulfato de sodio. Después de la evaporación del solvente, el producto de reacción crudo se pasa por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con hexano/acetona 7/3. La purificación final se logra mediante cromatografía de líquido de alto rendimiento de preparación (RP-18, 76:24 metanol : agua) , para proporcionar el compuesto del título como un sólido amorfo blanco. Los datos espectrales son idénticos a aquellos del producto obtenido por la otra ruta.

E EMPLO 4 : 32 (s) -dihidro-40-O- (2-xnetoxi) etil-rapamicina (Rx = CH3; R2 = II en donde R3 = 2-metoxietilo y R4 = CH3; X = OH; Y = O) . A una solución enfriada (0°C) y agitada de 2.17 gramos (2.00 milimoles) de 40-O- (2-metoxi) etil-28-O-TES-rapamicina en 20 mililitros de tetrahidrofurano, se le agregan por goteo 4.4 mililitros (4.4 milimoles) de una solución 1M de L-SelectrideR en tetrahidrofurano. La solución amarilla resultante se agita durante 3 horas a 0°C, y el exceso de reactivo de hidruro se apaga mediante la adición de 2 mililitros de MeOH. La solución se diluye con éter butílico terciario de metilo, y se agrega una solución de sal de Rochelle acuosa saturada. Esta mezcla se deja calentarse hasta la temperatura ambiente, y se continúa la agitación durante 15 minutos. Las capas se separan, y la solución orgánica se lava con HCl ÍN frío, salmuera saturada, bicarbonato de sodio ÍN, y nuevamente con salmuera. Los lavados acuosos se extraen de regreso con éter butílico terciario de metilo. Las capas orgánicas combinadas se secan sobre sulfato de sodio anhidro, se filtran, y se concentran bajo presión reducida, para proporcionar una mezcla cruda de los isómeros 32S y 32R de 32-dihidro-40-O- (2-metoxi) etil-28-O-TES-rapamicina. El producto crudo obtenido anteriormente se disuelve en 20 mililitros de acetonitrilo, y se enfría a 0°C. A la solución resultante se le agregan 2 mililitros de complejo de HF.piridina. La agitación se continúa durante 1 hora, y se agrega bicarbonato de sodio ÍN. Esta mezcla se extrae tres veces con éter butílico terciario de metilo. La solución orgánica combinada se lava con bicarbonato de sodio ÍN y salmuera saturada, se seca sobre sulfato de sodio anhidro, se filtra, y se concentra bajo presión reducida. La purificación se realiza mediante cromatografía de líquido de alto rendimiento de fase inversa (RP 18, 5 mieras, 50:50 - 100:0 de acetonitrilo-agua durante 60 minutos), proporcionando 32(S)-dihidro-40-0-(2-metoxi)-etil-rapamicina y 32(R)-dihidro-40-0-(2-metoxi)etil-rapamicina como subproducto: 32(S)-dihidro-40-0-(2-metoxi)etil-rapamicina: *H-RMN (CDCI3) mezcla de rotá eros 2:1, los cambios químicos entre paréntesis se refieren al rotámero menor d 0.77 (ÍH, dd, H-38 ax) , 1.67 (6H, s, CI7-CH3) y C29-CH 3 , 2.50 (ÍH, m, H-31), 3.01 (ÍH, , H-25) , 3.12 (2H, m, H-39 y H-40) , 3.14 (3.15) (3H, s, OCH3) , 3.28 (ÍH, m, H-32) , 3.36 (3.34) (3H, s, OCH i , 3.39 (3.38) (3H, s, OCH3) , 3.48 (3.46) (3H, s, OCH } , 3.55 y 3.75 (4H, 2m , OCH2CH @) , 3.84 (ÍH, m, H-14) , 4.12 (4.16) (1H, d, H-28) , 4.73 (ÍH, s, C10-0H) , 5.03 (ÍH, m , H-34) . MS (FAB) m/z 980 ( [M + Li]*).

EJEMPLO 5: (32S)-dihidro-40-0-(2-hidroxi)etil-rapamicina (Rj = CH3; R?= II en donde R 5= -CH CH OH. y R =a CH ; # = OH; Y = 0) . Siguiendo el procedimiento del Ejemplo 4, pero utili-zando el material de partida apropiado, se obtiene el compuesto del título. (32S)-dihidro-40-0-(2-hidroxi)etil-rapamicina: Vl-RMN (CDCI3) , mezcla de rotámeros 1.7:1, los cambios químicos entre paréntesis se refieren al rotámero menor d 0.76 (ÍH, dd, H-38ax) , 2.50 (ÍH, m, H-31) , 3.10 (ÍH, m, H-39) , 3.13 (3.14) (3H, s, C16-OC ) , 3.20 (ÍH, m, H-40) , 3.28 (ÍH, m, H-32) , 3.36 (3.38) (3H, S, C27-OCH3) , 3.45 (3.43) (3.41) (3H, S, C39-OCH3) , 3.50 (ÍH, d, H-27) , 3.58 y 3.70 (4H, m, OCH2Ctf2OH) , 4.12 (4.16) (ÍH, d, H-28) , 5.06 (ÍH, m, H-34) , 5.60 (ÍH, dd, H-22) , 5.99 (ÍH, d, H-18) , 6.17 (ÍH, dd, H-21) , 6.33 (ÍH, dd, H-20) , 6.42 (ÍH, dd, H-19) . MS (FAB, matriz Lil) m/z 966 ( [M + Li] +) (intensidad relativa 100) .

EJEMPLO 6; 16-pent-2-iniloxi-32-desoxo-rapamicina (Rj= pent-2-inilo; R2 - II en donde R3 - H y R4 « CH3; X - H; Y * O) Siguiendo el procedimiento de los Ejemplos 1 y 2 ó 3, pero utilizando los materiales de partida apropiados, se obtiene el compuesto del título. 'H-RMN (CDC13) , d 0.70 (ÍH, dd, H-38ax) , 1.23 (3H, t, CH5CH2CCCH20) , 2.21 (2H, ddq, CH3CH2CCCH20) , 2.78 (ÍH, m, H-25) , 2.94 (ÍH, m, H-39) , 3.31 (3H, s, C27-OCH3) , 3.42 (3H, s, C39-OCH3) , 3.62 (ÍH, d, H-27) , 3.78 (ÍH, ddd, CH3CH2CCCff20) , 4.02 (1H, ddd, CH3CH2CCCH20) , 4.12 (ÍH, d, H-28) , 4.79 (ÍH, m, H-34) , 5.20 (ÍH, d, H-30), 5.28 (ÍH, d amplia, H-2) , 5.50 (ÍH, dd, H-22) , .97 (ÍH, d, H-18) , 6.14 (ÍH, dd, H-21) , 6.30 (ÍH, dd, H-20) , 6.38 (ÍH, dd, H-19) . MS (FAB, matriz Lil) m/z 958 ( [M + Li] +) (intensidad relativa 100) .

Los compuestos de la fórmula I exhiben actividad farmacéutica, y por consiguiente, son útiles como productos farmacéuticos. En particular, los compuestos de la fórmula I tienen una actividad inmunosupresora y antiproliferativa, como se indica en los siguientes métodos de prueba in vi tro e in vi vo: 1. Reacción de linfocitos mixtos (RLM) La Reacción de Linfocitos Mixtos se desarrollo origi-nalmente en relación con aloinjertos, para evaluar la compatibilidad del tejido entre donadores de órganos potenciales y receptores, y es uno de los mejores modelos establecidos de reacción inmune in vi tro. Se utiliza una Reacción de Linfocitos Mixtos de modelo de murino, por ejemplo, como es descrito por T.Meo en "Immunological Methods'P L. Lefkovits y B. Pernis, Eds. Academic Press, N.Y., páginas 227-239 (1979), para demostrar el efecto inmunosupresor de los compuestos de la fórmula I. Se coincuban células de bazo (2 x 105/cavidad) de ratones Balb/c (hembras, de 8 a 10 semanas) sobre platos de microtitulación durante 5 días, con 0.5 x 106 células de bazo irradiadas (2,000 rads) o tratadas con rnitomicina C, de ratones CBA (hembras de 8 a 10 semanas) . Las células alogepeicas irradiadas inducen una respuesta proliferativa en las células de bazo de Balb/c, que se puede medir mediante la incorporación del precursor marcado en el ADN. Ya que se irradian las células estimuladoras (o se tratan con mitomicina C) , no responden a las células de Balb/c con proliferación, sino que retienen su antigenicidad. Se mide el efecto antiproliferativo de los compuestos de la fórmula I sobre las células de Balb/c en diferentes diluciones, y se calcula la concentración que da como resultado una inhibición del 50 por ciento de la proliferación celular (IC50) . La capacidad inhibidora de la muestra de prueba se puede comparar con rapamicina, y se expresa como una IC50 relativa (es decir, IC5Q de la muestra de prueba/IC5 de rapamicina) . Se ha descubierto que los compuestos de los Ejemplos 1 y 2 tienen en esta prueba una IC50 relativa de 0.3 y de 0.08, respectivamente. 2. Proliferación mediada por IL-6 (PROL IL-6) Se evalúa la capacidad de los compuestos de la fórmula I para interferir con las trayectorias de señalización asociadas con el factor de crecimiento, utilizando una línea celular de hibridoma de ratón dependiente de interleucina-6 (IL-6) . El ensayo se realiza en platos de microtitulación de 96 cavidades. Se cultivan 5,000 células/cavidad en un medio exento de suero (como es descrito por M. H. Schreier y R. Tees en Immunological Methods, I. Lefkovits y B. Pernis, Eds., Academic Press 1981, volumen II, páginas 263-275) , complementado con un nanogramo de IL-6 recombinante/mililitro. En seguida de una incubación de 66 horas en ausencia o en la presencia de una muestra de prueba, las células se impulsan con 1 µCi (3-H) -timidina/cavidad durante otras 6 horas, se cosechan, y se cuentan mediante cintilación de líquido. La incorporación de (3 -H) -timidina en el ADN se correlaciona con el incremento en el número de células, y por consiguiente, es una medida de la proliferación celular. Una serie de dilución de la muestra de prueba permite calcular la concentración que da como resultado una inhibición del 50 por ciento de la proliferación celular (IC50) . La capacidad inhibidora de la muestra de prueba se puede comparar con la rapamicina, y se expresa como una IC50 relativa (es decir, muestra de prueba-/IC50 de rapamicina) . Se ha descubierto que los compuestos de los Ejemplos 1 y 2 tienen en esta prueba una IC5g relativa de 0.2 y de 0.09, respectivamente. 3. Ensayo de enlace de macrofilina (EEM) Se sabe que tanto la rapamicina como el inmunosupresor estructuralmente relacionado, FK-506, se enlazan en vivo con la macrofilina-12 (también conocida como proteína de enlace FK-506, o FKBP-12) , y se piensa que este enlace está relacionado con la actividad inmunosupresora de estos compuestos. Los compuestos de la fórmula I también se enlazan fuertemente con la macrofilina-12, como se demuestra en un ensayo de enlace competitivo. En este ensayo, se utiliza FK-506 acoplada con albúmina de suero bovino, para recubrir cavidades de microtitulación. Se permite que se enlace la macrofilina-12 humana recombinante biotinilada (biot-MAP) en la presencia o en ausencia de una muestra de prueba, con la FK-506 inmobilizada. Después de lavarse (para remover la macrofilina no específicamente enlaza-da) , se evalúa la biot-MAP enlazada mediante incubación con un conjugado de estreptavidina-fosfatasa alcalina, seguida por lavado y la subsecuente adición de fosfato de p-nitrofenilo como un sustrato. La lectura es el OD a 405 nanómetros. El enlace de una muestra de prueba con biot-MAP da como resultado una disminu-ción en la cantidad de biot-MAP enlazada con la FK-506, y por consiguiente, una disminución en el OD405. Una serie de dilución de la muestra de prueba permite determinar la concentración que da como resultado la inhibición del 50 por ciento del enlace de biot-MAP con la FK-506 inmovilizada (IC50) . La capacidad inhibido-ra de una muestra de prueba se compara con la IC50 de la FK-506 libre como un estándar, y se expresa como una IC50 relativa (es decir, IC50 de la muestra de prueba/IC50 de la FK-506 libre) . En este ensayo, se ha descubierto que los compuestos de los Ejemplos 1, 2, y 5 tienen una IC50 relativa de 1, 2.8, y 2.5, respectiva-mente. 4. Reacción de Injerto Localizado Contra el Huésped (GvH) Se prueba la eficacia en vivo de los Compuestos de la fórmula I en un modelo animal adecuado, como se describe, por ejemplo, en Ford y colaboradores TRANSPLANTATION 10 (1970) 258. Se inyectan subcutáneamente células de bazo (1 x 107) de ratas Wistar/Furth ( F) hembras de seis semanas de edad, en el día 0, en la pata izquierda de las ratas hembras (F344 x WF)F?, que pesan aproximadamente 100 gramos. Los animales se tratan durante 4 días consecutivos, y se remueven los nodos linfáticos poplitea-les, y se pesan en el día 7. La diferencia en el peso entre los dos nodos linfáticos se toma como el parámetro para evaluar la reacción.

. Reacción de Aloinierto de Riñon en Rata Un riñon de una rata donadora DA(RTla) o Brown-Norway (BN) (RTln) se trasplanta sobre el vaso renal de una rata receptora (Lewis RT11) nefrectomizada unilateralmente (lado izquierdo) , utilizando una anastomosis de extremo a extremo. La anastomosis uretérica también es de extremo a extremo. El tratamiento comienza en el día del trasplante, y continúa durante 14 días. Se hace una nefrectomía contralateral siete días después del trasplante, dejando a la receptora apoyándose en el funcionamiento del riñon de la donadora. La supervivencia de la receptora del injerto se toma como el parámetro para un injerto funcional . 6. Encefalomielitis Alérgica Experimentalmente Inducida (EAE1 en Ratas Se mide la eficacia de los compuestos de la fórmula I en encefalomielitis alérgica experimentalmente inducida, por ejemplo, mediante el procedimiento descrito en Levine & Wenk, AMER J PATH 47 (1965) 61; McFarlin y colaboradores, J IMMUNOL 113 (1974) 712; Borel, TRANSPLANT. & CLIN. IMMUNOL 12 (1981) 3. La encefalomielitis alérgica experimentalmente inducida es un modelo ampliamente aceptado para la esclerosis múltiple. Se inyectan ratas Wistar machos en las patas ocultas con una mezcla de médula espinal bovina y auxiliar de Freund completo. Los síntomas de la enfermedad (parálisis de la cola y de ambas patas ocultas) normalmente se desarrollan en 16 días. Se registran el número de animales enfermos, así como el tiempo del establecimiento de la enfermedad. 7. Artritis de Auxiliar de Freund La eficacia contra la artritis experimentalmente inducida, se demuestra empleando el procedimiento descrito, por ejemplo, en Winter & Nuss, ARTHRITIS & RHEUMATISM 9_ (1966) 394; Billingham & Devies, HANDBOOK OF EXPERIMENTAL PHARMACOL (Vane & Ferreira Eds, Springer-Verlag, Berlín) 50/11 (1979) 108-144. De inyectan i.c. ratas OFA y Wistar (machos o hembras, 150 gramos de peso del cuerpo) en la base de la cola o en la pata oculta con 0.1 mililitros de aceite mineral que contiene 0.6 miligramos de Mycobacterium smegmatis aniquilada por calor liofilizada. En el desarrollo del modelo de artritis, el tratamiento se inicia inmediatamente después de la inyección del auxiliar (días 1-18) ; en el modelo de artritis establecido, el tratamiento se inicia en el día 14, cuando está bien desarrollada la inflamación secundaria (dias 14-20). Al final de experimento, se mide el hincha-miento de las articulaciones por medio de microcalibrador . La ED50 es la dosis oral ep miligramos/kilogramo que reduce el hinchamiento (primario o secundario) hasta la mitad de aquel de los controles. 8. Actividad Antitumoral y MDR Se demuestra la actividad aptitumoral de los compuestos de la fórmula I , y su capacidad para mejorar el funcionamiento de agentes antitumorales. mediante el alivio de la resistencia a múltiples fármacos, por ejemplo, mediante la administración de un agente contra el cáncer, por ejemplo colchicina o etoposida. a células resistentes a múltiples fármacos y células sensibles al fármaco in vi tro, o a animales que tengan tumores o infecciones resistentes a múltiples fármacos o sensibles al fármaco, con n sin la coadministración de los compuestos de la fórmula I que se van a probar, o mediante la administración del compuesto de la fórmula I solo. Esta prueba in vi tro se realiza empleando cualquier línea celular resistente a fármacos apropiada, y linea celular de control (parental), generada, por ejemplo como es descrito por Ling y colaboradores, J. Cell. Physiol. 83, 103-116 (1974), Bech-Hansen y colaboradores, J. Cell. Physiol 88, 23-32 (1976). Los clones particulares seleccionados son la linea CHR resistente a múltiples fármacos (por ejemplo, resistente a colchicina) (subclón C5S3.2) y la línea parental sensible AUX Bl (subclón AB1 Sil) . Se demuestra la actividad antitumoral y anti-MDR en vivo, por ejemplo, en ratones infectados con células de cáncer resistentes a múltiples fármacos y sensibles al fármaco. Se desarrollan sublíneas de carcinoma de ascitas Ehrlich (EA) resistentes a las sustancias de fármaco DR, ?C. AM. ET, TE. ó CC , mediante la transferencia en secuencia de células EA a las siguientes generaciones de ratones huésped BALB/c de acuerdo con los métodos descritos por Slater y colaboradores, J. Clin. Ipvest. 70, 1131 (1982). Se pueden obtener resultados equivalentes empleando los compuestos de la fórmula I en modelos de prueba de un diseño comparable, por ejemplo, in vi tro o empleando animales de prueba infectados con cepas virales resistentes a fármacos y sepsihles al fármaco, cepas bacterianas resistentes a antibióticos (por ejemplo, penicilina) y sensibles, cepas fúngales resistentes a los anti- icóticos y sensibles, asi como cepas protozoarias resistentes a fármacos, por ejemplo cepas de Plasmodial, por ejemplo las sub-cepas que se presentan naturalmente de Plasmodium falciparum que exhiben resistencia adquirida al fármaco contra malaria quimioterapéutico. 9. Inhibición del factor Mip y en forma de Mip Adicionalmente, los compuestos de la fórmula I se enlazan con, y bloquean, una variedad de factores Mip (potenciador de inefectividad de macrófagos) y factores en forma de Mip, que son estructuralmente similares a la macrofilina. Los factores Mip y en forma de Mip son factores de virulencia producidos por una amplia variedad de patógeno, incluyendo aquellos de los géneros Chlamidia. por ejemplo, Chlamidia trachomatis; Neisseria. por ejemplo, Neisseria meningitidis: y Legionella, por ejemplo, Legionella pneumophilia: y también por los miembros obligadamente parasíticos del orden Rickettsiales. Estos factores tienen un papel crítico en el establecimiento de la infección intracelular. La eficacia de los compuestos de la fórmula I para reducir la inefectividad de los patógenos que producen factores Mip o en forma de Mip, se puede demostrar comparando la inefectividad de los patógenos en el cultivo celular en la presencia o en ausencia de las macrolidas, por ejemplo, empleando los métodos descritos en Lundemose, y colaboradores, Mol Microbiol . (1993) 7: 777.

. Rechazo de Aloinierto Crónico El riñon de una rata macho (RTla) se trasplanta ortotópicamente a un receptor Le is macho (RT11) . En total, se trasplantan 24 animales. Todos los animales se tratan con ciclosporina A, a 7.5 miligramos/kilogramo/día oralmente durante 14 días, empezando en el dia del trasplante, para prevenir un rechazo celular agudo. No se realiza pefrectomía contralateral . Cada grupo experimental tratado con una dosis distinta de un compuesto de la fórmula I o con placebo, comprende seis animales. Empezando en el día 53-64 después del trasplante, los animales receptores se tratan oralmente durante otros 69-72 días con un compuesto de la fórmula I. ó reciben placebo. A los 14 días después del trasplante, los animales se someten a la evaluación del injerto mediante imágenes de resonancia magnética (IRM) con medición de perfusión de los ríñones (con una comparación del riñon injertado y el propio riñon contralateral. Esto se repite en los días 53-64 después del trasplante, y al final del experimento. Luego se hace la autopsia de los animales. Se determinan y se analizan estadísticamente los parámetros de rechazo, tales como la calificación de las imágenes de resonancia magnética, el índice de perfusión relativa del riñon injertado, y la calificación histológica del aloinjerto de riñon para el rechazo celular y los cambios en los recipientes. La administración de un compuesto de la fórmula I, por ejemplo el compuesto del Ejemplo 1 ó 2, en una dosis de 0.5 a 2.5 miligramos/kilogramo en este modelo de aloinjerto de riñon de rata, produce una reducción en todos los parámetros de rechazo anteriormente mencionados. 11. Angioplastía Se realiza una caterización de globo en el día 0, esencialmente como es descrita por Powell y colaboradores (1989) . Bajo anestesia de Isofluorano, se introduce un catéter Fogarty 2F en la arteria carótida común izquierda por la carótida externa, y se infla (distensión de aproximadamente 10 microlitros de H20) . Se retira el globo inflado a lo largo de la longitud de la carótida común tres veces, y las últimas dos veces mientras se tuerce gentilmente para obtener una desendotelialización unifor-me. Luego se remueve el catéter, se coloca una ligadura alrededor de la carótida externa para prevenir el sangrado, y se deja que los animales se recuperen. Se utilizan 2 grupos de 12 ratas RoRo (400 gramos, de aproximadamente 24 semanas de edad) para el estudio: un grupo de control y un grupo que recibe el compuesto que se va a probar. Las ratas quedan completamente al azar durante todo el manejo, los procedimientos experimentales, y el análisis. El compuesto que se va a probar se administra oralmente (ofreciendo) empezando 3 días antes del estímulo del globo (día -3) hasta el final del estudio, 14 días después del estímulo del globo (día-+ 14) . Las ratas se mantienen en jaulas individuales, y se les da alimento y agua al gusto. Luego se anestesian la ratas con Isofluorano, se inserta un catéter de perfusión a través del ventrículo izquierdo y se asegura en el arco aórtico, y se inserta una cánula de aspiración en el ventrículo derecho. Los animales se perfunden bajo una presión de perfusión de 150 mmHg, primero durante 1 minuto con una solución salina regulada con fosfato 0.1 M (PBS, pH de 7.4), y luego durante 15 minutos con aldehido glutárico al 2.5 por ciento en regulador de fosfato (pH de 7.4) . La presión de perfusión es de 150 mmHg en la punta de la cánula (aproximadamente 100 mmHg en la arteria carótida, determinada en un experimento preliminar mediante la introducción de una cánula unida a un transductor de presión en la carótida externa) . Luego se cortan las arterias carótidas, se separan del tejido circundante, y se sumergen en un regulador de cacodilato 0.1 M (pH de 7.4) que contiene el 7 por ciento de sacarosa, y se incuban durante la noche a 4°C. Al día siguiente, las carótidas se sumergen y se agitan durante 1 hora a la temperatura ambiente en K n?4 al 0.05 por ciento en cacodilato 0.1 M. Luego los tejidos se deshidratan en una serie de etanol graduada,- 2 x 10 minutos en etanol al 75 por ciento, 2 x 10 minutos en etanol al 85 por ciento, 3 x 10 minutos en etanol al 95 por ciento, y 3 x 10 minutos en etanol al 100 por ciento. Las carótidas deshidratadas se empotran entonces en Technovit 7,100 de acuerdo con la recomendación de los fabricantes. El medio de empotramiento se deja polimerizar durante la noche en un extirpador bajo argón, ya que se encuentra que el oxígeno inhibe el endurecimiento apropiado de los bloques . Se cortan secciones de 1 a 2 mieras de espesor desde la sección media de cada carótida con una navaja de metal duro sobre un micrótomo giratorio, y se tiñen durante 2 minutos con tinte Giemse . De esta manera se preparan aproximadamente 5 secciones de cada carótida, y se evalúan morfomé ricamente el área del medio, la neoíntima, y el lumen por medio de un sistema de análisis de imágenes (MCID, Toronto, Canadá) . En este ensayo, los compuestos de la fórmula I, por ejemplo, el compuesto del Ejemplo 1 ó 2, inhiben la proliferación miointimal cuando se administran oralmente en una dosificación diaria de 0.5 a 2.5 miligramos/kilogramo. Los compuestos de la fórmula I también son útiles en ensayos para detectar la presencia o la cantidad de compuestos que se enlazan con macrofilina por ejemplo, en ensayos competitivos para propósitos de diagnóstico o de selección. Por consi-guíente, en otra modalidad, la invención proporciona el uso de los compuestos de la fórmula I como una herramienta de selección para determinar la presencia de compuestos que se enlazan con macrofilina en una solución de prueba, por ejemplo, sangre, suero sanguíneo, o caldo de prueba que se vaya a seleccionar. De preferencia, se inmoviliza un compuesto de la fórmula I en cavidades de microtitulación, y luego se deja enlazarse en la presencia y en ausencia de una solución de prueba, con la macrofilina-12 etiquetada (FKBP-12) . De una manera alternativa, la FKBP-12 se inmoviliza en cavidades de microtitulación y se deja enlazarse en la presencia y en ausencia de una composición de prueba, con un compuesto de la fórmula I que se haya marcado por ejemplo marcado con fluoro-, enzi áticamente-, o radio por ejemplo, un compuesto de la fórmula I ep donde Ri comprende un grupo marcado. Los platos se lavan y se mide la cantidad de compuesto marcado enlazado. La cantidad de sustancia que se enlaza con macrofilina en la solución de prueba es apenas inversamente proporcional a la cantidad del compuesto etiquetado enlazado. Para el análisis cuantitativo, se hace una curva de enlace convencional utilizando concentraciones conocidas del compuesto que se enlaza con macrofilina. Por consiguiente, los compuestos de la fórmula I son útiles en las siguientes condiciones: a) Tratamiento y prevención de rechazo agudo o crónico de trasplante de órganos o tejidos, por ejemplo, para el tratamiento de receptores de, por ejemplo, corazón, pulmón, corazón-pulmón combinados, hígado, riñon, trasplantes pancreáticos, de piel, o córneos. También se indican para la prevención de la enfermedad del injerto contra el huésped, tal como en seguida de trasplante de médula ósea. b) Tratamiento y prevención de vasculopatias por trasplante, por ejemplo, ateroesclerosis . c) Tratamiento y prevención de la prolif ración celular del músculo liso y emigración que conduce a engrosamiento de la íntima de los vasos, obstrucción de los vasos sanguíneos, ateroesclerosis coronaria obstructiva, restenosis. d) Tratamiento y prevención de enfermedad autoinmune y condiciones inflamatorias, en particular condiciones inflamatorias con una etiología que incluya un componente autoinmune tal como artritis (por ejemplo, artritis reumatoide, artritis crónica progresiva, y artritis deformante), y enfermedades reumáticas. Las enfermedades autoinmunes específicas para las cuales se pueden emplear los compuestos de la fórmula I incluyen, desórdenes hematológicos autoinmunes (incluyendo, por ejemplo, anemia hemolítica, anemia aplástica, anemia de glóbulos rojos puros, y trombocitopenia idiopática) , lupus eritematoso sistémico, policondritis, esclerodo a, granulomatosis de Wegener, dermato-miositis, hepatitis activa crónica, miastemia gravis, psoriasis, síndrome de Steven-Johnson, estomatitis idiopática, enfermedad inflamatoria autoinmune del intestino (incluyendo, por ejemplo colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn) , oftalmopatla endocrina, enfermedad de Graves, sarcoidosis, esclerosis múltiple. cirrosis biliar primaria, diabetes juvenil (diabetes mellitus tipo I), uveitis (anterior y posterior), queratoconjuntivi ti s sicca y queratoconjuptivitis vernal, fribrosis de pulmón inters-ticial, artritis psoriática, glomerulonefritis (con y sin síndrome nefrótico, por ejemplo, incluyendo síndrome nefrótico idiopático o pefropatía de cambio mínimo) , y dermatomiosi tis juvenil . e) Tratamiento y prevención de asma. f) Tratamiento de resistencia a múltiples fármacos (RMD) . Los compuestos de la fórmula I suprimen la P-glicopro-teínas (Pgp) , que son las moléculas de transporte de membrana asociadas con la resistencia a múltiples fármacos. La resistencia a múltiples fármacos es particularmente problemática en pacientes de cáncer y en pacientes de sida que no responden a la quimioterapia convencional debido a que el medicamento se bombea hacia afuera de las células mediante las Pgp. Los compuestos de la fórmula I, por consiguiente, son útiles para mejorar la eficacia de otros agentes quimioterapéuticos en el tratamiento y control de condiciones resistentes a múltiples fármacos, tales como cáncer resistente a múltiples fármacos o sida resistente a múltiples fármacos. g) Tratamiento de desórdenes proliferativos, por ejemplo, tumores, desorden hiperproliferativo de la piel, y similares. h) Tratamiento de infecciones por hongos. i) Tratamiento y prevención de inflamación, especialmente para potenciar la acción de esteroides. j) Tratamiento y prevención de infección, espe-cialmente infección por patógenos que tienen factores Mip o en forma de Mip. Para las indicaciones anteriores, la dosificación requerida, por supuesto, variará por ejemplo, dependiendo de la condición que se vaya a tratar (por ejemplo, el tipo de enferme-dad y la naturaleza de la resistencia), del efecto deseado, y del modo de administración. Sin embargo, en general se obtienen resultados satisfactorios con la administración oral en dosificaciones del orden desde 0.05 a 5 ó hasta 10 miligramos/kilogramo/-día, por ejemplo, del orden de 0.1 a 2 ó hasta 7.5 miligramos/ki-logramo/día, administradas una vez o, en dosis divididas de 2 a 4 veces al día, o con la administración parenteral, por ejemplo, intravenosa, por ejemplo, mediante goteo o infusión intravenosa, en dosificaciones del orden de 0.01 a 2.5 y hasta 5 miligramos/kilogramo/ día, del orden de 0.05 ó 0.1 y hasta 1.0 miligra-mos/kilogramo/día. Las dosificaciones diarias adecuadas para los pacientes, por consiguiente, son del orden de 500 miligramos oralmente, por ejemplo del orden de 5 a 100 miligramos oralmente, o del orden de 0.5 a 125 hasta 250 miligramos intravenosamente, por ejemplo, del orden de 2.5 a 50 miligramos intravenosamente. De una manera alternativa y todavía preferible, la dosificación se configura de una manera específica para el paciente, para proporcionar niveles en sangre previamente determinados, por ejemplo, como sean determinados mediante la técnica RÍA. Por consiguiente, la dosificación del paciente se puede ajustar para lograr niveles en sangre continuos regulares medidos mediante RÍA del orden de 50 ó de 150 y hasta 500 ó 1,000 nanogramos/mililitro, es decir, de una manera análoga a los métodos de dosificación actualmente empleados para la terapia de inmunosupresión con Ciclosporina. Los compuestos de la fórmula I se pueden administrar como el único ingrediente activo, o junto con otros fármacos. Por ejemplo, en aplicaciones inmunosupresoras tales como prevención y tratamiento de la enfermedad del injerto contra el huésped, rechazo de trasplante, o enfermedad autoinmune, los compuestos de la fórmula I se pueden utilizar en combinación con ciclosporinas o ascomicinas, o sus análogos inmunosupresores, por ejemplo ciclosporina A, ciclosporina G. FK-506, etcétera; corticosteroides; ciclofosfamida; azatioprina; metotrexato; brequinar; leflunomida,- mizoribina; ácido micofenólico; micofeno-lato mofetil; anticuerpos monoclonales inmunosupresores, por ejemplo anticuerpos monoclonales para receptores de leucocitos, por ejemplo MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD25, CD28, CTLA4, B7, CD45, ó CD58, o sus ligandos; u otros compuestos inmunomoduladores . Para las aplicaciones anti-inflamatorias, los compuestos de la fórmula I se pueden utilizar junto con agentes anti-inflamatorios, por ejemplo corticosteroides. Para aplicaciones antiinfecciosas, los compuestos de la fórmula I se pueden utilizar en combinación con otros agentes anti-infecciosos, por ejemplo fármacos antivirales o antibióticos. Los compuestos de la fórmula I se administran mediante cualquier vía convencional, en particular enteralmente, por ejemplo oralmente, por ejemplo en la forma de soluciones para beber, tabletas o cápsulas, o parenteralmente, por ejemplo en la forma de soluciones o suspensiones inyectables. Las formas de dosificación unitaria adecuadas para administración oral compren-den, por ejemplo, de 1 a 50 miligramos de un compuesto de la fórmula I, normalmente de 1 a 10 miligramos. Las composiciones farmacéuticas que comprenden a los compuestos de la fórmula I, se pueden fabricar de una manera convencional, por ejemplo análoga-mente a las composiciones farmacéuticas que comprenden rapamicina, por ejemplo como se describe ep la Patente Europea Número EPA 0,041,795. De preferencia, las composiciones farmacéuticas comprenden un compuesto de la fórmula I y un medio portador. dicho medio comprende una fase hidrofílica, una fase lipofílica, y un tensoactivo. Pueden estar en la forma de una emulsión o de un preconcentrado en microemulsión. Estas emulsiones o precon-centrados en microemulsión se dan a conocer, por ejemplo, en la Solicitud de Patente del Reino Unido Número 2,278,780 A. De preferencia, la fase lipofílica comprende del 10 al 85 por ciento en peso del medio portador; el tensoactivo comprende del 5 al 80 por ciento en peso del medio portador; la fase hidrof11 ica comprende del 10 al 50 por ciento en peso del medio portador. El compuesto de la fórmula I de preferencia está presente en una cantidad del 2 a 15 por ciento en peso. Una composición farmacéutica particularmente preferida comprende un medio portador de preconceptrado en microemulsión que comprende: i) un producto de reacción de un aceite de ricino y óxido de etilepo, ii) un producto de transesterificacióp de un aceite vegetal y glicerol que comprende predominantemente ácido linolei-co o ácido oleico, mono-, di-, y tri-glicéridos, o un aceite vegetal polioxialquilado. iii) glicol de 1 ,2-propileno, y iv) etanol. De acuerdo con lo anterior, la presente invención también proporciona: A. un compuesto de la fórmula I para utilizarse como un producto farmacéutico, por ejemplo ep la prevención o el tratamiento de los desórdenes anteriormente indicados. B. una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la fórmula I, junto con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable para el mismo. C. un método para prevenir o tratar desórdenes como se indicaron anteriormente, en un sujeto que necesite dicho tratamiento, dicho método comprende administrar a este sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de la fórmula I. D. un estuche o paquete para utilizarse en inmunosu-presión, inflamación, o infecciones como se indicaron anterior-mente, que incluyen una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la fórmula I, y una composición farmacéutica que comprende bien sea un fármaco inmuposupresor o inmunamodulador , o un agente anti-inflamatorio o un agente anti-infeccioso. De una manera sorprendente, también se ha descubierto que los compuestos de la fórmula I, en donde X es OH, es decir. los compuestos 32 (S) -dihidro, tienen una mejor actividad, por ejemplo en los ensayos anteriormente dados a conocer, y son más estables que los enantiómeros correspondientes, es decir, los compuestos 32 (R) -dihidro por ejemplo cuando se someten a la siguiente prueba: Los compuestos que se van a probar se incuban en suero de rata, y se mide su afinidad de enlace para FKBP12 en el ensayo de enlace de macrofilina después de diferentes tiempos de incubación. A medida que disminuye la afinidad, se incrementa la IC50 nominal. Una disminución en la afinidad generalmente se atribuye a la inestabilidad del compuesto en suero de rata.

Claims (10)

1. REIVINDICACIONES Un compuesto de la fórmula I: en donde : Rj es alquilo, alquenilo, alquinilo, hidroxialquilo, hidroxialquenilo, hidroxialquinilo, bencilo, alcoxibencilo o clorobencilo, R2 se selecciona a partir de la fórmula II ó de la Fórmula III: Fámula II " Fórmula lll en donde: R3 se selecciona a partir de H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, tioalquilo, arilalquilo, hidroxiarilalquilo, hidroxiarilo, hidroxialquilo, dihidroxialquilo, hidroxialco-xialquilo, hidroxialquilarilalquilo, dihidroxialquilarilalquilo, alcoxialquilo, alquilcarboniloxialquilo, aminoalquilo, alquilami-noalquilo, alcoxicarbonilaminoalquilo, alquilcarbonilaminoalqui-lo, arilsulfonamidoalquilo, alilo, dihidroxiaquilalilo, dioxola-nilalilo, carbalcoxialquilo, y alquilsililo; R es H, metilo, o junto con R3 forma alquileno de 2 a 6 átomos de carbono; R5 es R60-CH2-, en donde R6 se selecciona a partir de H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilcarbonilo, arilcarbo-nilo, heteroarilcarbonilo, hidroxialquilcarbonilo, aminoalquil-carbonilo, formilo, tioalquilo, arilalquilo, hidroxiarilalquilo, hidroxiarilo, hidroxialquilo, dihidroxialquilo, hidroxialcoxial-quilo, hidroxialquilarilalquilo, dihidroxialquilarilalquilo, alcoxialquilo, alquilcarboniloxialquilo, aminoalquilo, alquilami-noalquilo, alcoxicarbonilaminoalquilo, alquilcarbonilaminoalqui-lo, arilsulfonamidoalquilo, alilo, dihidroxialquilalilo, dioxola-nilalilo, y carbalcoxialquilo; R7CO, en donde R7 se selecciona a partir de H, alquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, amino, alquilami-no, un residuo de un aminoácido, o amino N,N-disustituido, en donde los sustituyentes (a) se seleccionan a partir de alquilo, arilo, o arilalquilo, ó (b) forman una estructura heterocíclica; R8NCH-, en donde R8 es alquilo, arilo, amino, alquilamino, arila ino, hidroxi, alcoxi, o arilsulfonilamino,- -0-CH-0-; o dioximetilino sustituido; Y se selecciona a partir de 0, (H, OH) , y (H, 0R9) , en donde Ra se selecciona a partir de alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, heteroarilcarbonilo, hidroxialquilcarbonilo, aminoalquilcarbonilo, formilo, o arilo; X es OH ó H; en donde "alk" ó "alquilo" se refiere a un sustituyente alifático de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente interrumpido por un enlace oxi; y "ar" ó "arilo" se refiere a un sustituyente aromático de 4 a 14 átomos de carbono monocíclico, opcionalmente heterocíclico, opcionalmente sustituido, en el entendido de que, cuando X sea OH, Rt sea alquilo, y R2 sea un residuo de la fórmula II, entonces R3 es diferente de H.
2. 2. Un compuesto de la fórmula la: la en donde : Rt es alquin-2-ilo de 3 a 10 átomos de carbono o hidroxialquin-2-ilo de 3 a 10 átomos de carbono, R es un residuo de la fórmula II ó III como se define en la reivindicación l, e Y es O.
3. 3. Un compuesto de la fórmula Ib: en donde: Rj es alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, alquenilo de 3 a 10 átomos de carbono, hidroxialquenilo de 3 a 10 átomos de carbono, alquin-2-ilo de 3 a 10 átomos de carbono, hidroxialquin-2-ilo de 3 a 10 átomos de carbono, o alcoxi de 1 a 10 átomos de carbono-alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, R2 es un residuo de la fórmula II ó III como se define en la reivindicación 1, e Y es 0.
4. 4. Un compuesto que es 16-pent-2-iniloxi-32 (S) -dihidro-rapamicina ó 16-pent-2-iniloxi-32 (S) -dihidro-40-0- (2- hidroxietil) -rapamicina.
5. 5. Un compuesto que es 32-desoxo-rapamicina n 16- pept-2-iniloxi-32-desoxo-rapamicina.
6. 6. Un proceso para la preparación de un compuesto de la fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1 , dicho proceso comprende : a) para producir un compuesto de la fórmula I. n donde X es H, eliminar de una manera reductiva el narbaniln pn la posición 32 de un compuesto de la fórmula IVa: en donde Rt e Y son como se definieron anteriormente, en una forma protegida o desprotegida, y, cuando se requiera, remover los grupos prntprtnrp? presentes; o b) para producir un compuesto de la fórmula I en donde X es OH, reducir de una manera estereoselert i va el carhnni-lo ep la posición 32 de un compuesto de la fórmula IVa cnmn ^<=> definió anteriormente: ó c) convertir un compuesto de la fórmula I en donde R¡ es alquilo, para proporcionar un compuesto de la fórmula I ep donde Ri es diferente de alquilo.
7. 7. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para utilizarse como un producto farmacéutico.
8. 8. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, junto con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable para el mismo.
9. 9. Un estuche o paquete para utilizarse en inmunosu-presióp, inflamación, o infecciones, que incluyen una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, y una composición farmacéutica que comprende un fármaco inmunosupresor o inmunomsdulador , o un agente anti-infla atorio o un agente anti-infeccioso .
10. 10. Un método para la prevención o el tratamiento de rechazo agudo o crónico de trasplante de órganos o tejidos, vasculopatías de trasplante, proliferación celular del músculo liso, y emigración que conduce a engrosamiepto de la íntima del vaso, o tumores, ep un sujeto que necesite dicho tratamiento, dicho método comprende administrar a este sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.