MXPA97003776A - Analogos de la vitamina d3 fluorados - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere:Un compuesto de fórmula I, en donde R es hidrógeno, flúor o hidroxilo, y X es=CH2 o cuando R es hidroxilo, X es hidrógenoó=CH2, el cual es de utilidad en el tratamiento de trastornos hiperproliferativos, enfermedades neoplásicas y enfermedades de las glándulas sebáceas.

Description

ANÁLOGOS DE LA VITAMINA D3 FLUORADOS DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención se refiere a derivados de la vitamina D3, en particular a los derivados l6-en-23-in-trifluoro de la vitamina D3 de fórmula en donde R es hidrógeno, flúor o hidroxilo, y X es =CH2 o cuando R es hidroxilo, X es hidrógeno o =CH2. Los compuestos de fórmula I inducen la diferenciación e inhibición de la proliferación en distintas líneas celulares de la piel y del cáncer. En consecuencia, los compuestos de fórmula I son de utilidad como agentes para el tratamiento de enfermedades hiperproliferativas de la piel, tales como la psoriasis. Los compuestos de fórmula I son también de utilidad en el tratamiento de enfermedades neoplásicas tales como la leucemia y enfermedades de las glándulas sebáceas, tales como el acné o la dermatitis seborreica. La invención se refiere también a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula I y un método de tratamiento de los distintos estadios de las enfermedades antes mencionadas mediante la administración del compuesto de fórmula I . En una versión preferida, R es hidroxilo. Una de las versiones de la invención es una mezcla que comprende epímeros de fórmula en donde R y X tienen el significado descrito más arriba. Los compuestos de fórmula I se preparan como se describe a continuación en los esquemas I-II y los ejemplos.

En el anterior esquema I, el compuesto de fórmula II, [3aS, [3 (S*) ,3aa,7a,7aiS] ] - [ [3a, 4, 5, 6, 7, 7a-hexahidro-3a;-metil-3-(l-metil-3-butinil) -lH-inden-7-il] oxi] -trimetilsilano, un compuesto ya conocido, se convierte en un compuesto de fórmula III, por reacción con el n-butillitio y trifluoroacetona en un disolvente éter tal como el tetrahidrofurano. La reacción tiene lugar de -100°C a 0°C, de preferencia a -78°C. El compuesto de fórmula III se convierte en el compuesto de fórmula IV por reacción con el fluoruro de tetrabutil-amonio en un disolvente éter tal como el tetrahidrofurano. La reacción se efectúa a 0-50 °C, de preferencia a temperatura ambiente, y de preferencia en atmósfera de argón. El compuesto de fórmula IV se convierte en el compuesto de fórmula V por reacción con dicromato de piridinio y p-toluensulfonato de piridinio en un disolvente con hidrógenos clorados tal como el cloruro de metileno. El compuesto de fórmula V se convierte en el compuesto de fórmula VI por reacción con trimetilsilil-imidazol en un disolvente clorado tal como el cloruro de metileno. De preferencia, la reacción se lleva a cabo en atmósfera de argón .

ESQUEMA II le En el esquema II anterior, el compuesto de fórmula VI se convierte en el compuesto de fórmula Ib por reacción con el óxido de[3S- (lZ,3of,5j8)] - [2- [3 , 5-bis [ [1, 1-dimetiletil) dimetilsilil] oxi] -2 -metilenciclohexiliden] etil] difenilfosfina en tetrahidrofurano, de preferencia en atmósfera de argón y en presencia de n-butillitio como una base. Esta reacción se continúa con la separación de los grupos protectores sililo utilizando el fluoruro de tetrabutil-amonio en tetrahidrofurano como disolvente. Alternativamente, el compuesto de fórmula VI se convierte en el compuesto de fórmula le por reacción con el óxido de [3R- (3a, 53, Z) -3 , 5-bis [ [1, 1-dimetiletil) dimetilsilil] oxi] ciclo-hexiliden] etil] difenilfosfina en tetrahidrofurano, de preferencia en atmósfera de argón, y a continuación, separando los grupos sililo de protección. Alternativamente, el compuesto de fórmula VI se convierte en el compuesto de fórmula Id por reacción con el óxido de [3S- (3a, 5ß , Z) -2- [2-metilen-3-fluoro-5- [ [ (1, 1-dimetiletil ) dimetilsilil] oxi] ciclohexiliden] etil] difenilfosfina en tetrahidrofurano, de preferencia en atmósfera de argón, y a continuación, separando los grupos sililo de protección. Alternativamente, el compuesto de fórmula VI se convierte en el compuesto de fórmula le por reacción con el óxido de [5S,Z)-2- [2- [2 -metilen-5- [ [ (1, 1-dimetiletil) dimetilsilil] oxi] ci-clohexiliden] etil] difenilfosfina, en tetrahidrofurano, de prefe-rencia en atmósfera de argón, y a continuación, separando los grupos sililo de protección. Puede emplearse cualquier método convencional de separación conocido por los expertos en la especialidad, en cualquier punto en la preparación de un compuesto de fórmula I para separar la mezcla epimérica en cada uno de los epímeros (R) ó (S) . De esta forma, la invención se refiere a compuestos de formula I que representan mezclas de los epímeros (25R) y (25S) , así como también a los epímeros o diastorneros individuales (25R) y (25S) . El compuesto de fórmula I puede ser administrado por vía oral, por ejemplo, en forma de comprimidos, comprimidos laca-dos, grageas, cápsulas de gelatina dura o blanda, soluciones, emulsiones o suspensiones. La administración puede, sin embargo, efectuarse también por vía rectal, por ejemplo en forma de supositorios o por vía parenteral, por ejemplo en forma de soluciones para inyección. Una composición de acuerdo con la invención puede procesarse con excipientes farmacéuticamente inertes, inorgánicos u orgánicos, para la elaboración de comprimidos, comprimidos lacados, grageas y cápsulas de gelatina dura. La lactosa, almidón de maíz o derivados del mismo, talco, ácido esteárico o sus sales, y similares, pueden emplearse como tales excipientes, por ejemplo, para comprimidos, grageas y cápsulas de gelatina dura. Los excipientes adecuados para cápsulas de gelatina blanda son, por ejemplo, aceites vegetales, ceras, grasas, polioles semisólidos y líquidos, y similares; en función de la naturaleza del ingrediente activo. Sin embargo, no se necesita normalmente ningún excipiente en el caso de cápsulas de gelatina blanda. Excipientes adecuados para la preparación de soluciones y jarabes, son, por ejemplo, agua, polioles, sacarosa, azúcar invertido y glucosa. Excipientes adecuados para soluciones para inyección son, por ejemplo, agua, alcoholes, polioles, glicerina, aceites vegetales y similares . Excipientes adecuados para supositorios son, por ejemplo, aceites naturales o endurecidos, ceras, son, por ejemplo, aceites naturales o endurecidos, ceras, grasas, polioles semilíquidos o polioles líquidos y similares. Además, las preparaciones farmacéuticas pueden contener conservantes, solubilizantes, estabilizantes, agentes humec-tantes, emulsionantes, edulcorantes, colorantes, saborizantes, sales para variar la presión osmótica, tampones, agentes enmascaradores o antioxidantes. Los compuestos de fórmula I como se han descrito más arriba, pueden ser administrados oralmente o mediante in-yección, para el tratamiento de enfermedades neoplásicas tales como la leucemia, en animales de sangre caliente que necesitan dicho tratamiento. Más específicamente, los compuestos de fórmula I como se han descrito anteriormente pueden administrarse oralmente a un humano adulto en dosificaciones que están, en el margen de aproximadamente 0,25 a 50 µg por día para el tratamiento de enfermedades neoplásicas tales como la leucemia. Los compuestos de fórmula I como se han descrito anteriormente pueden ser administrados oralmente, para el tratamiento de enfermedades hiperproliferativas de la piel tales como la psoriasis, carcinomas celulares básales, trastornos de la queratinización, y queratosis, en animales de sangre caliente que necesitan dicho tratamiento. Más específicamente, los compuestos de fórmula I como se describen más arriba pueden ser administrados oralmente a un humano adulto en dosis del orden de aproximadamente 0,25 a 50 µg por día para el tratamiento de enfermedades hiperproliferativas de la piel tales como la psoriasis, carcinomas celulares básales, trastornos de queratinización, y queratosis. Estos compuestos pueden ser administrados oralmente para el tratamiento del acné en humanos a una dosis de aproximadamente 0,25 a 50 µg por día; de preferencia 0,5 a 5 µg por día. Los compuestos de fórmula I como se han descrito más arriba pueden administrarse tópicamente, para el tratamiento de enfermedades hiperproliferativas de la piel tales como la psoriasis, carcinomas celulares básales, trastornos de queratinización, y queratosis, a animales de sangre caliente que necesitan dicho tratamiento. Más específicamente, los compuestos de fórmula I como se han descrito más arriba pueden administrarse tópicamente en dosis que son del orden de aproximadamente 0,5 a 100 µg por gramo de formulación tópica por día, para el tratamiento de enfermedades hiperprolife-rativas de la piel tales como la psoriasis, carcinomas celulares básales, trastornos de queratinización, y queratosis.

Los compuestos de fórmula I como se han descrito más arriba pueden administrarse también tópicamente para el tratamiento de trastornos de las glándulas sebáceas tales como el acné o dermatitis seborreica en dosis del orden de 0,5 a 100 mg por gramo de formulación de formulación tópica por día.

La actividad útil de los compuestos de fórmula I como agentes para el tratamiento de enfermedades neoplásicas puede demostrarse mediante los siguientes procedimientos de ensa-yo. Diferenciación de las células HL-60 La inducción de la diferenciación de las células HL-60 se ensayó mediante la medición de su potencial de estallido oxidante mediante la reducción del NBT (azul nitro de tetra-zolio) . Las células HL-60 se mantuvieron en medio RPMI 1640 suplementado con FCS 10%, L-glutamina 2 mM, piruvato de sodio 1 mM, aminoácidos no esenciales 1%, 50 U/ml de penicilina y 50 µg/ml de estreptomicina (=RPMI/FCS) . Se sembraron 30.000 células/90 µl de RPMI/FCS en pocilios de placas de microti-tulación de fondo plano. Al mismo tiempo, se añadieron 10 µl de derivados de la vitamina D diluidos en medio completo, para obtener concentraciones finales entre 10"11 y 10"6 M (se guardaron soluciones madre 10"2M en etanol, a -20°C y protegidas de la luz) . Después de 3 días, se eliminó el medio con una pipeta multicanal y se substituyó con 100 µl de solución de NBT [1 mg/ml en PBS con 200 mM de forbol miristato acetato (PMA) ] . Después de una hora de incubación adicional a 37 °C, se eliminó la solución de NBT y se añadieron 100 µl de SDS 10% en HCl 0,01 N. La cantidad de NBT reducido se cuantificó fotomé-tricamente a 540 nm empleando un lector automático de placas. Se calculó la media de tres placas. Los S.E.M. encontrados fueron entre 5 y 10%. Los valores se expresaron como tanto por ciento de la máxima diferenciación alcanzada con calcitriol 100 - 1000 nM en el mismo experimento. La concentración (nM) correspondiente al 50% de este valor máximo, se determinó gráficamente y se consignó como EDS0 en la Tabla I que sigue a continuación.

TABLA I La actividad útil de los compuestos de fórmula I como agentes para el tratamiento de enfermedades hiperprolifera-tivas de la piel puede determinarse como sigue: Inhibición de la proliferación de queratinocitos Línea celular HaCaT - Se utilizó la línea celular humana inmortalizada HaCaT. Se midió la incorporación de 3H-timidina en cultivos de crecimiento exponencial después de 6 días de cultivo en presencia del compuesto de ensayo. Cultivo de las células - Se cultivaron células HaCaT en medio Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) y mezcla nutritiva de Ham F12 (F12) , 3:1 (v/v ICN conteniendo 4,5 g/litro de glucosa y suplementado con 10% de suero fetal bovino (Gibco, FCS) , L-glutamina (Gibco, 2mM) , penicilina (Gibco, 50 Ul/ml) , estreptomicina {Gibco, 50 µg/ml) , EGF (10 ng/ml), hidrocortisona (400 ng/ml), toxina de cólera (8,5 ng/ml) e insulina (5 ng/ml) . Las células se guardaron en una atmósfera húmeda conteniendo 5% de C02 y 95% de aire, y se subcultivaron cada 3-4 días.

Inhibición de la absorción de 3H-timidina - Se sembraron células HaCaT (250 células en medio completo de cultivo) en placas de cultivo de 96 pocilios y se incubaron a 37 °C con 5% de C02 y 95% de aire durante 6 días. Se añadieron inhibidores disueltos a la concentración lOx en 1% de etanol, inmediatamente al principio del ensayo. Se añadió 3H-timidina (5 Ci/mmoles, Amersham) a una concentración de 1 µCi/pocillo y las células fueron marcadas con pulsos durante las últimas 6 horas del período de crecimiento. A continuación se tripsinizaron las células durante 10 minutos a 37 °C con fuerte agitación y se recogieron en una placa filtrante GF/C de 96 pocilios (Uni Filter, Packard) empleando un recogedor de células Micro Mate 196 (Packard) . Después de secar a 40 °C al vacío durante 20-30 minutos, se añadieron 2 µl de centelleador Micro Scint O (Packard) y se midió la radioactividad unida a los filtros con un TOP COUNT (Packard) . Los resultados medidos como ICS0 se han consignado en la tabla II que sigue a continuación: TABLA II La actividad útil de los compuestos de fórmula I como agentes para el tratamiento de enfermedades de las glándulas sebáceas puede demostrarse como sigue: Inhibición in vitro de la proliferación de sebocitos himíanos Se aislaron células sebáceas de las glándulas sebáceas de humanos adultos mediante una combinación de métodos enzima-ticos y mecánicos (Doran y col., Characterization of Human Cells In Vitro ("Caracterización de células humanas in vitro") J. Invest. Dermatol. 96:34-8 (1991). Las células se cultivaron en medio de Iscove conteniendo 10% de suero fetal bovino y 4 µg/ml de dexametasona sobre una capa de fibroblastos de ratón 3T3 de crecimiento interrumpido. Se plaquearon las células en el medio sin el compuesto de ensayo y a conti-nuación se añadió el compuesto de ensayo en medio recién preparado, conteniendo el compuesto de ensayo, cada 48 horas. El día de la recogida, se lavaron los cultivos con EDTA al 0,03% en PBS para eliminar solamente los fibroblastos de 3T3, y luego se incubaron en tripsina 0,05%/EDTA 0,03%. Se suspendieron las células, se mezclaron enérgicamente para preparar una suspensión de células individual y se contaron en un hemocitómetro. Las soluciones madre de los compuestos se diluyeron a soluciones 10"2 M y se desgasificaron con etanol 100% y se guardaron a -20 °C en la oscuridad. Durante su empleo experimental, las soluciones, de las cuales se habían preparado alícuotas, se dejaron calentar a temperatura ambiente y se emplearon mediante dilución directa en un medio completo a la H concentración apropiada. Los compuestos se ensayaron para determinar la inhibición de la proliferación de células sebáceas cultivadas in vitro a 10"6, 10"7 y 10'ß M. Los resultados están resumidos en la tabla III a continuación, como la cantidad de compuesto necesario para inhibir la proliferación de células sebáceas al 50% (ED50) en nM comparada con un cultivo tratado con el vehículo. TABLA III COMPUESTO ED50 (nM) 1, 25- (R, S) -dihidroxi-16-en-23-in-26-trifluoro- 1,0 colecalciferol Carga de calcio (ensayo de tolerancia en ratones) Los cambios profundos en la homeostasis del calcio afectan fuertemente el desarrollo del peso de los animales. Este parámetro se empleó como un ensayo primario de la tolerancia. Ratones (25-30 g de peso corporal) recibieron diariamente administraciones subcutáneas del derivado de la vitamina D durante 4 días consecutivos. El peso corporal se registró justo antes y al final de un período de tratamiento de 5 días. La "dosis tolerada más alta" (HTD) es la dosis que da como resultado un aumento cero de peso durante el período de tratamiento. Los resultados están resumidos en la tabla IV a continuación: TABLA IV Los ejemplos siguientes se formulan para una mejor descripción de la invención, y no están dirigidos a limitarla de ninguna manera . Ejemplo 1 [3aS, [3 (1S*) ,3aa,7a,7ab] ] -1,1, 1-trifluoro-6- [3a, 4, 5, 6, 7, 7a-hexahidro-3a-metil-7- [trimetilsilil) oxi-lH-inden-3-il] -2-metil-3-heptin-2-ol (epímeros) A la solución de 1,1 g (3,80 mmoles) de [3aS, [3 (S*) , 3aa, 7a,7ab]]-[[3a,4,5,6,7, 7a-hexahidro-3a-metil-3- (l-metil-3-butinil) -lH-inden-7-il] oxi] -trimetilsilano, en 20 mi de tetrahidrofurano anhidro a -78°C, se añadieron con agitación, 2,61 mi (4,18 mmoles) de n-butillitio 1,6 M. Después de agitar durante una hora, se añadieron 0,68 mi (7,6 mmoles) de 1,1,1-trifluoroacetona, y la mezcla de reacción se agitó durante 1' hora más a 78 °C. La reacción se interrumpió con sal muera saturada y se dejó calentar hasta temperatura ambiente. Después de diluir con agua, se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con agua, se secaron con sulfato de sodio, y se evaporaron hasta sequedad. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía flash sobre una columna de silica gel con hexano-acetato de etilo 20:1 obteniéndose 1,47 g (96,5%) del compuesto amorfo del título. Ejemplo 2 [3aS- [3 (1S*) , 3aa, 7a, 7ab] ]-3a,4,5,6,7, 7a-hexahidro-3a-metil-3- (6,6, 6-trifluoro-5-hidroxi-1, 5-dimetil-3-hexinil) -1H-inden-7-ol (epímeros) A una solución en agitación de 1,47 g (3,65 mmoles) de [3aS, [3 (1S*) , 3aa,7a,7ab] ] -1,1, 1-trifluoro-6- [3a, 4, 5, 6, 7,7a-hexahidro-3a-metil-7- [ (trimetilsilil) oxi] -lH-inden-3-il] -2-metil-3-heptin-2-ol (epímeros), en 15 mi de tetrahidrofurano anhidro a temperatura ambiente en atmósfera de argón, se añadieron 8 mi (8,0 mmoles) de fluoruro de tetrabutilamonio 1 M. La mezcla de reacción se agitó durante 1,5 horas y a continuación se interrumpió mediante la adición de hielo. Seguidamente se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con bicarbonato de potasio 2N, con agua hasta pH neutro, y sal muera, se secaron con sulfato de sodio, y se evaporaron hasta sequedad. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía flash sobre una columna de silica gel con hexano-acetato de etilo 2:1 obteniéndose 1,2 g (100%) del compuesto cristalino del título; p.f. 78-80°C, [a] + 20,4° (c 0,5, etanol ("EtOH"); "H-RMN (CDC13) : d 1,07 (s,3H,CH3), 1,09 (d, 3H, J+6, 5 Hz, CH3) , 1,40 (dt, 1H, Jvic = 3 y 12,5 Hz, Jgem = 12,5 Hz, CH de CH2) , 1,58 (s, 3H, CH3) , 1,71 - 1,98 (m, 5H) , 2,00 (m, 1H, Jvic = 3 y 7 Hz, Jgem =14,5 Hz , CH de CH2) , 2,23 - 2,45 (m, 5H) ; 4,19 (brs, 1H, CH) , 5,40 (brm, 1H, CH) ; calculado para ClßH2SF302 : C 65,49, H 7,63; encontrado: C 65,59, H 7,77. Ejemplo 3 [3aR- [1(R*) ,3aa,7ab] ] -3a, 4, 5, 6, 7, 7a-hexahidro-7a-metil-l-(6,6, 6-trifluoro-5-hidroxi-l, 5-dimetil-3-hexinil) -4H-inden-4-ona (epímeros) A una solución en agitación de 300 mg (0.91 mmoles) de [3aS, [3 (1S*) , 3aa, 7a, 7ab] ] -3a, 4, 5,6,7, 7a-hexahidro-7a-metil-l-(6,6, 6-trifluoro-5-hidroxi] -1, 5-dimetil-3-hexinil) -lH-inden-7-ol (epímeros) , en 8 mi de cloruro de metileno anhidro, se añadieron 1,402 g (3,73 mmoles) de dicromato de piridinio y 70 mg de p-toluen-sulfonato de piridinio, y la mezcla de reacción se agitó durante 4 horas. Se añadieron 20 mi de éter, se agitó durante 20 minutos y se filtró a través de Celite. Se lavó el taco de Celite con 3 x 50 mi de éter. Los filtrados combinados se lavaron con 20 mi de HCl enfriado con hielo, agua, KHC03 2N (40 mi) y agua y sal muera. Las capas acuosas se extrajeron con 2 x 100 mi de éter-acetato de etilo (1:1). Las capas orgánicas se secaron con sulfato de sodio y se evaporaron a sequedad. El producto en bruto se purificó mediante cro-matografía flash sobre silica gel con hexano/ acetato de etilo (3:1), obteniéndose 272 mg (91,2%) del compuesto amorfo del título. Ejemplo 4 [3aR- [1 ( IR* ) , 3aa, 7ab] ] -3 , 3a, 5 , 6 , 7 , 7a-hexahidro- 7a-metil - 1 - ( 6 , 6 , 6 - trif luoro - 1 , 5 -dimet il - 5 - [ ( trimetil silil ) oxi] - 3 -hexinil ] -4H- inden-4 -ona (epímeros ) A una solución en agitación de 272 mg (0,828 mmoles) de [3aR, [1 (R*) , 3aa, 7ab] ]-3,3a,5,6,7, 7a-hexahidro-7a-metil- l-(6,6, 6-trifluoro-5-hidroxi-l, 5-dimetil-3-hexinil) -4H-inden-4-ona (epímeros) , en 6 mi de cloruro de metileno anhidro, se añadieron 0,79 mg (5,38 mmoles) de trimetilsilil-imidazol en atmósfera de argón. Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 2,5 horas y a continuación se interrumpió con 7 mi de agua. Después de agitar continuamente durante 30 minutos, se extrajo con 3 x 120 mi de acetato de etilo. Las capas orgánicas se lavaron cinco veces con una mezcla de agua y sal muera, se secaron con sulfato de sodio y se evaporaron a sequedad. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía flash sobre una columna de silica gel con hexano/acetato de etilo (10:1), obteniéndose 314 mg (94,6%) del compuesto del título. Ejemplo 5 1, 25 (R, S) -dihidroxi-16-en-23-in-26-trifluoro- cole-calciferol A una solución en agitación de 730 mg (1,25 mmoles) de óxido de 3S- (1Z, 3a, 5b) ]- [2- [3, 5-bis [ [1, 1-dimetiletil) dimetilsilil] oxi] -2-metilenciclo-hexiliden] etil] difenilfosfina en 7 mi de tetrahidrofurano anhidro a -78 °C, se añadieron gota a gota 0,758 mi (1,21 mmoles) de n-butillitio 1,6 M en hexano, en atmósfera de argón. Después de agitar durante 5 minutos, se añadió gota a gota a la solución roja así formada durante un período de 10 minutos, una solución de 314 mg (0,784 mmoles) de [3aR- [1 (IR*) , 3aa, 7ab] ] -3, 3a, 5, 6,7, 7a-hexahidro-7a-metil-l- [6, 6, 6-trifluoro-l, 5 -dimetil -5 - [ ( trimetil-silil ) oxi] -3-hexinil] -4H-inden-4-ona (epímeros) , en 5 mi de tetrahidrofurano anhidro. La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 1,5 horas, y a continuación se interrumpió mediante la adición de 10 mi de una mezcla 1:1 de sal de Rochelle 2N y bicarbonato de potasio 2N. Después de dejar calentar a temperatura ambiente, se añadieron 30 mi más de solución de sal de Rochelle - bicarbonato de potasio y se extrajo con 3 x 130 mi de acetato de etilo. Las capas orgánicas se lavaron con sal muera, se secaron con sulfato de sodio y se evaporaron a se-quedad. El residuo se purificó mediante cromatografía flash sobre una columna de silica gel con hexano - acetato de etilo 40:1, obteniéndose 475 mg del compuesto trisililado del título . A la solución de 475 mg (0,621 mmoles) del producto intermedio trisililado en 7 mi de tetrahidrofurano anhidro se añadieron 4 mi (4 mmoles) de un fluoruro de tetrabutilamonio en tetrahidrofurano en atmósfera de argón. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 17 horas, se añadieron 2 mi más de fluoruro de tetrabutilamonio 1M, y se agitó durante 5 horas más. A continuación se interrumpió con 5 mi de agua, y después de agitar durante 20 minutos se eliminó el tetrahidrofurano por destilación. El residuo se extrajo con 3 x 120 mi de acetato de etilo. Las capas orgánicas se lavaron con agua y sal muera, se secaron con sulfato de sodio y se evaporaron a sequedad. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía flash sobre una columna de silica gel con hexano - acetato de etilo 1:35 obteniéndose 270 mg (74,1%) del compuesto del título en forma de una espuma blanca; [a] +26° (c 0,2, EtOH) ,• UV (EtOH) ; lmáx: 203 nm (e 17500), 263 (14120); XH-RMN (CDC13) : d 0,72 (s, 3H, CH3) , 1,13 (d, 3H, J = 6,5 Hz , CH3) , 1,58 (s, 3H, CH3) , 1,92 (ddd, XH, Jvic = 3,5 y 8,5 Hz, Jgem = 13 Hz, CH de CH2) , 2,21 (dd, *H, Jvic = 12 Hz, Jgem = 14 Hz, CH de CH2) , 2,61 (dd, 1U, Jvic = 3Hz, Jgem = 13,5 Hz, CH de CH2) , 2,82 (brm, XH, CH de CH2) , 4,24 (brm, "H, CH) , 4,45 (brm, "H, CH) , 5,02,5,34 (2s, 2H, CH2), 5,39 (brs, "H, CH) , 6,11, 6,38 (AB, 2H, J = 11,2 Hz, 2CH) . Ejemplo 6 1, 25 (R,S) -dihidroxi-l6-en-23-in-26-trifluoro-19-nor-cole-calciferol A una solución en agitación de 630 mg (1,1 mmoles) de óxido de [3R- (3a, 5b, Z) ] -3, 5-bis [ [1, 1-dimetiletil) dimetilsi-lil] oxi] ciclohexiliden] etil] difenilfosfina en 7 mi de tetrahidrofurano anhidro a -78°C, se añadieron gota a gota 0,685 mi (1,1 mmoles) de n-butil litio 1,6 M en hexano, en atmósfera de argón. Después de agitar durante 5 minutos, se añadió gota a gota a la solución roja así formada en el curso de 5 minutos, una solución de 232 mg (0,579 mmoles) de [3aR- [l (IR*) , 3aa, 7ab] ]-3, 3a, 5,6,7, 7a-hexahidro-7a-metil-l- [6,6,6-trifluoro-l, 5-dimetil-5- [ (trimetilsilil) oxi] -3-hexinil] -4H- inden-4-ona (epímeros) , en 2 mi de tetrahidrofurano anhidro. La mezcla de reacción se agitó a -78 "C durante 1,75 horas. A continuación se interrumpió mediante la adición de 10 mi de una mezcla 1:1 de bicarbonato de potasio 2N y sal de Rochelle 2N, se dejó calentar a temperatura ambiente, se añadieron 30 mi más de la mezcla bicarbonato de potasio - sal de Rochelle, se extrajo con 3 x 100 mi de acetato de etilo. Los extractos reunidos se lavaron con sal muera, se secaron con sulfato de sodio y se evaporaron a sequedad. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía flash sobre una columna de silica gel con hexano - acetato de etilo, obteniéndose 145 mg del compuesto trisililado del título. A la solución de 145 mg (0,19 mmoles) del producto intermedio trisililado en 2,5 mi de tetrahidrofurano anhidro se añadieron en atmósfera de argón, 3 mi (3 mmoles) de fluoruro de tetrabutilamonio 1M en tetrahidrofurano, y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 65 horas. A continuación se interrumpió con 5 mi de agua, se agitó durante 15 minutos, se añadieron 20 mi de sal muera y se extrajo con 3 x 90 mi de acetato de etilo. Los extractos reunidos se lavaron con una mezcla de agua y sal muera, se secaron con sulfato de sodio y se evaporaron a sequedad. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía flash sobre silica gel obteniéndose 89 mg (33,9%) del compuesto del título en forma de una espuma blanca; [a] +76° (c 0,2, EtOH) ¡ UV (EtOH); lmáx: 242-243 nm (e 27.100), 250-251 (31.800); 260 (21.300); "H-RMN (CDC13) : d 0,72 (s, 3H, CH3) , 1,13 (d, 3H, J = 6,3 Hz, CH3) , 1,59 (s, 3H, CH3) , 1,97 (m, 1H) , 2,07 (m, 1H, CHde CH2), 2,15-2,55 (m, 8H) , 2,72-2,84 (m, 2H, 2 CH de CH2) , 4,06 (brm, 1H, CH) , 4,13 (brm, 1H, CH) , 5,42 (brs, 1H, CH) , 5,96, 6,31 (AB, 2H, J = 11,1 Hz, CH CH) . Ejemplo 7 la;, fluoro-25 (R, S) -hidroxi-16-en-23-in-26-trifluoro-cole-calciferol A una solución de 536 mg (1,14 mmoles) de óxido de [3S-(3a, 5b, Z) ] -2- [2-metilen- 3-fluoro-5- [ [ (1, 1-dimetiletil) dimetilsilil] oxi] ciclohexiliden] etil] difenilfosfina en 6 mi de tetrahidrofurano anhidro a -78 °C, se añadieron gota a gota 0,71 mi (1,14 mmoles) de n-butil litio 1,6 M en hexano, en atmósfera de argón. Después de agitar durante 5 minutos, se añadieron gota a gota durante 10 minutos, a la solución roja formada, 282 mg (0,704 mmoles) de [3aR- [1 (IR*) , 3aa, 7ab] ] -3 , 3a, 5 , 6, 7 , 7a-hexahidro-7a-metil -1- [6,6, 6-trifluoro-1, 5-dimetil-5- [ (trimetilsilil) oxi] -3-hexinil] -4H-inden-4-ona (epímeros), en 4,5 mi de tetrahidrofurano anhidro. La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 2,5 horas. A continuación se interrumpió con 10 mi de sal de Rochelle 2N, y se dejó calentar hasta temperatura ambiente. Se diluyó de nuevo con 25 mi de sal de Rochelle 2N y a continuación se extrajo con 3 x 100 mi de acetato de etilo. Las capas orgánicas reunidas se lavaron con sal muera, se secaron con sulfato de sodio y se evaporaron a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía flash sobre silica gel con hexano-acetato de etilo 30:1 y a continuación con 1:4. Se obtuvieron 380 mg del compuesto disililado del título. A una solución de 380 mg (0,582 mmoles) del producto intermedio de disililo en 4 mi de tetrahidrofurano anhidro se añadieron en atmósfera de argón, 4 mi (4 mmoles) de fluoruro de tetrabutilamonio 1M en tetrahidrofurano. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 17 horas. A continuación se interrumpió con 5 mi de agua, se agitó durante 15 minutos, se añadieron 20 mi de sal muera y se extrajo con 3 x 90 mi de acetato de etilo. Las capas orgánicas reunidas se lavaron con agua y sal muera, se secaron con sulfato de sodio y se evaporaron a sequedad. El producto en bruto se purificó en primer lugar mediante cromatografía flash sobre silica gel con hexano - acetato de etilo 2:1 y a continuación mediante HPLC sobre una columna de sílice YMC-50 mm x 50 cm, con hexano - acetato de etilo 3:2, obteniéndose 233 mg (70,9%) del compuesto del título en forma de una espuma blanca; [a] +22, 5o (C 0,2, EtOH); UV (EtOH); lmáx: 242-243 nm (e 11.400), 268-269 (11.050); XH-RMN (CDC13): d 0,71 (s, 3H, CH3) , 1,16 (d, 3H, J = 6,5 Hz, CH3) , 1,43-1,58 (m, 2H) , 1,60 (s, 3H, CH3) , 1,60-1,88 (m, 4H) , 2,02 (m, 2H, CH2) , 2,14-2,47 (m, 8H) , 2,64 (dd, Jvic « = 3,8 Hz, Jgem = 13,5 Hz, CH de CH2) , 2,82 (m, 1H, CH de CH2) , 4,24 (m, 1H, CH) , 5,12 (s, 1H, CH de CH2) , 5,15 (ddd, 1H, J = 3,9, 6,6 Hz, JHF = 49,5 Hz, CH) 5,41 (s, 2H, CH de CH2) , -6,12, 6,40 (AB, 2H, J = 11,3 Hz , CH CH) . Ejemplo 8 25 (R, S) -hidroxi-l6-en-23-in-26-trifluoro-colecalciferol A una solución de 520 mg (1,15 mmoles) de óxido de (5S,Z)-2-[2-[2-metilen-5-[[(l, 1-dimetiletil) dimetilsilil] oxi] ciclohexiliden] etil] difenilfosfina en 6 mi de tetrahidrofurano anhidro a -78°C, se añadieron gota a gota en atmósfera de argón 0,715 mi (1,14 mmoles) de butil litio 1,6 M en hexano. Después de agitar durante 5 minutos, se añadió gota a gota a la solución roja así formada durante 10 minutos, una solución de 287 mg (0,716 mmoles) de [3aR- [1(1R*) ,3aa,7ab] ] -3, 3a, 5, 6, 7, 7a-hexahidro-7a-metil-l- [6,6,6-trifluoro-l, 5-dimetil-5- [ (trimetilsilil) oxi] -3-hexinil] -4H-inden-4-ona (epímeros), en 4 mi de tetrahidrofurano anhidro. A continuación se agitó la mezcla de reacción a -78°C durante 2 horas . A continuación se interrumpió la reacción con 10 mi de una sal de Rochelle 2N y se dejó calentar hasta temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con 25 mi más de sal de Rochelle 2N y se extrajo con 3 x 100 mi de acetato de etilo. Las capas orgánicas reunidas se lavaron con sal muera, se secaron con sulfato de sodio y se evaporaron a sequedad. El residuo se purificó mediante croma-tografía flash sobre silica gel con hexano - acetato de etilo 30:1, obteniéndose 364 mg del compuesto disililado del título. A una solución de 364 mg (0,573 mmoles) del producto intermedio disililado en 4 mi de tetrahidrofurano anhidro se añadieron en atmósfera de argón, 4 mi (4 mmoles) de fluoruro de tetrabutilamonio 1M en tetrahidrofurano. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. A continuación se interrumpió la reacción con 10 mi de agua, se agitó durante 10 minutos, se añadieron 20 mi de sal muera y se extrajo con 3 x 90 mi de acetato de etilo. Las capas orgánicas se juntaron y se lavaron con agua y sal muera, se secaron con sulfato de sodio y se evaporaron a sequedad. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía flash sobre silica gel con hexano - acetato de etilo 2:1, y a continuación mediante HPLC sobre una columna de sílice YMC 50 mm x 50 cm con hexano - acetato de etilo 3:2, obteniéndose 238 mg (74%) del compuesto del título en forma de una espuma blanca; [a] +47° (c 0,2, EtOH); UV (EtOH); lmáx: 206 nm (e 16.000), 263 (15.500); 'H-RMN (CDC13): d 0,71 (s, 3H, CH,) , 1,13 (d, 3H, J = 6,4 Hz, CH3), 1,58 (s, 3H, CH3) , 1,93 (m, 1H) , 2,03 (ddd, 1H, Jvic = 3 y 6 Hz, Jgem = 14 Hz, CH de CH2) , 2,12-2,52 (m, 9H) , 2,58 (dd, 1H, Jvic = 3,5 Hz, Jgem = 13 Hz, CH de CH2) , 2,82 (m, 1H, CH de CH2), 3,96 (brm, 1H, CH) , 4,83 (d, 1H, J = 1,7 Hz, CH de CH2) , 5,06 (s, 1H, CH de CH2) , 5,39 (brs, 1H, CH) , 6,12, 6,23 (AB, 2H, J = 11,3 Hz, CH CH) . Las siguientes composiciones farmacéuticas pueden prepararse mediante métodos ya conocidos: EJEMPLO A Cápsula de gelatina blanda EJEMPLO B Cápsula de gelatina blanda EJEMPLO C Crema tópica m /rm Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención. Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes:

Claims (9)

1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de fórmula caracterizado porque R es hidrógeno, flúor o hidroxilo, y X es ó cuando R es hidroxilo, X es hidrógeno ó =CH2.
2. 2. El compuesto de la reivindicación 1, caracterizado porque R es hidroxilo.
3. 3. Una mezcla que comprende los epímeros de fórmula caracterizado porque R es hidrógeno, flúor o hidroxilo, y X es =CH2 ó cuando R es hidroxilo, X es hidrógeno ó =CH2.
4. 4. 1,25 (R,S) -dihidroxi-l6-en-23-in-26-trifluoro-colecalciferol .
5. 5. 1, 25 (R,S) -dihidroxi-16-en-23-in-26-trifluoro- 19 -nor-colecalciferol .
6. 6. Ice- fluoro- 25 (R, S) -hídroxi-16-en-23 -in-26 -trifluoro-colecalciferol .
7. 7. 25(R,S) -hidroxi-l6-en-23-in-26-trifluoro-colecalciferol.
8. 8. una caTposición farmacéutica, caracterizada porque consta de una cantidad eficaz del compuesto de fórmula I según la reivindicación 1, y un agente de carga inerte .
9. 9. Empleo de los compuestos de fórmula I según la reivindicación 1, para la elaboración de una composición farmacéutica para el tratamiento de trastornos hiperproliferativos, enfermedades neoplásicas y enfermedades de las glándulas sebáceas.