MXPA96004228A - Metodos y formulaciones para control de plagas deinsectos - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a pasticidas biológicos novedosos y a su uso para controlas cucarachas, hormigas carpinteras y hormigas faraonas;específicamente, aislamientos altamente virulentos de Beauveria bassiana en una composición agrícola, se puede usar para controlar efectivamente estas plagas;se ilustran Beauveria bassiana No. 447, ATCC 20872 y Beauveria bassiana SP111, ATCC 74038;también se describen formulacionesúnicas que son altamente efectivas para surtir agentes de control biológico a plagas objetivo. Usando estas composiciones novedosas, las plagas objetivo se pueden controlar sin ocasionar peligros al ambiente y a la seguridad pública presentados por los agentes de control químico.

Description

MÉTODOS Y FORMULACIONES PARA CONTROL DE PLAGAS DE INSECTOS Referencia cruzada a solicitudes relacionadas Esta solicitud es una continuaci n en parte de la solicitud copendiente Serie No. 07/999,185, presentada el 30 de diciembre de 1992, que es una continuación de la solicitud Serie No. 07/687,362, presentada el IR de abril de 199], ahora abandonada. Esta solicitud es también una continuación en par-te de la solicitud copendiente Serie No. 07/999,186, presentada el 30 de diciembre de 1992, que es una continuación de la solicitud Sene No. 07/687,361, presentada el 18 de abril de 1991, ahora abandonada.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Fl desarrollo de agentes de control biológico como alternativas para los insecticidas químicos para el control de especies de plagas importantes es un terna de ínteres cada ve;: mayor-. Las preocupaciones por el ambiente y la exposición del hombre a substancias dañinas en el aire, alimentos y agua han estimulado la legislación y restricciones referentes al uso de pesticidas químicos, particularmente para plagas encontradas en el ambiente urbano. El control de plagas de insectos en reas urbanas es altamente deseable poro la exposición a pestj cidas químicos en el hogar y de jardines y parcelas '^s de gran preocupación para el público. Si se da a escoger, la mayoría de ¡ gente usaría un control biológico no toxico en lugar* de un compuesto químico tóxico para controlar insectos en el ambiente urbano. El problema es que uy pocas alternativas biológicas par-a los insecticidas químicos est n disponibles para comprarse v ser usados por el público. Para la mayoría de las plagas de insectos que se necesitan controlar en al ambiente urbano (hormigas, cucarachas, termitas, pulgas, avispas, etc.) no hay agente "' oíologico disponible para comprarse corno un producto. Las cucarachas son plagas económicas severas en reas urbanas. Puesto que las cucarachas están tan estrechamente asociadas con los seres humanos y comunmente se alimentan de alimentos en descompo ición, migajas de pan o residuos, y frecuentan reas insalubres tales co o sistemas de drenaje y tanques sépticos, su presencia conduce a la sospecha de una nmena?a par-a la salud humana. Organismos patógenos han sido --"aislados de cucarachas obtenidas de ambientes dom sticos y µeridomésticos; sin embargo, el papel de las cucarachas como vectores de patógenos es con rovertido. A diferencia de muchos artrópodos que se alimentan de sangre cuyo comportamiento do alimentación da por resultado la transmisi n directa de patógenos a los seres humanos, las cucarachas tienen <.sl potencial de transmitir- patógenos indirectamente a trav s de la contaminación de alimentos o utensilios usados para preparar alimentos. Se ha demostrado que las cucarachas adquieren bacterias patógenas simplemente al caminar sobre cultivos y han mostrados que esos patógenos son subsecuentemente transferidos a los alimentos por el comportamiento de búsqueda de alimento normal de las cucarachas infestadas. Ademas de envenenamiento de alimentos ocasionados por bacterias y enfermedades causadas por estas tales como tifoidea y disenteria, muchas otras enfermedades y patologías asociadas con microorganismos aislados de cucarachas han sido reportadas. Estas incluyen polio paralitica, yardiasis, otornicosis, neurno icosi s asi como "varios gusanos tales corno unsinapas y solitarias. Ademas del posible papel de las cucarachas corno vector-es de microorganismos patógenos, la era presencia de estos insectos se sabe que contribuye a morbilidad de los seres humanos en otras formas. Quizás el aspecto mas mcidioso es el impacto psicológico de esas plagas en términos de angustia y estrés relacionados con infestación, que en algunos casos puede adoptar- dimensiones patol gicas. Ademas, las secreciones -defensivas entre las especies de cucarachas pueden ocasionar- sensaciones de ardor, v rti o o nauseas en individuos que llegan a tener contacto con los insectos. Los métodos de control de cucarachas actuales en viviendas incluyen enfoques preventivos y correctivos. Las medidas preventivas hacen nfasis on la sanidad para eíirninar habitats y fuentes de alimentos, sellando vías de acceso y l a creaci n de ambientes inh spitos mediante la aplicación «le acido bórico o polvos absorbedores en los huecos de las paredes durante la construcción (Ebeling, U. [1971] Ann. Rev. Entomol. 16:123-158; Ebel g, U [19781 Urban Entomology, Ber eley: Univ.

Calif. Div. Agrie. Sci. 695 pp.). Sin embargo, la nnplernentacion de estas medidas es difícil y por lo tanto limita su efectividad (Thorns, E.M., W.H. Robinson [1978] 3. Eicon. Entomol. 80:131-135). Las medidas correctivas usadas para suprimir- infestaciones establecidas hacen énfasis en el uso de --?licaciones de insecticidas. Una técnica comunmente usada es rociar insecticidas con actividad residual prolongada en reas frecuentadas por cucarachas a intervalos de tiempo fLjos (Schal, C, R.L. Hamilton [1990] Ann. Rev. Entomol. 35.-521-551). A pesar de la supresión a corto plazo de poblaciones de cucarachas, los residuos tóxicos y el desarrollo de resi tencia al insecticida (Cochran, D.G. [19891 3. Econ. Entomol. 82:336-341) hace indeseable la confiabí 1 idad total en esta ieemea. Medidas correctivas alternativas tales corno la colocaci n do i rampas con cebo toxico puede proveer- un control suficiente bajo condiciones apropiadas (Thoms 8 Robinson [1978], supra) . El uso de enemigos naturales para el control biológico de cucarachas ha sido examinado a grados variables. Aunque las trampas que usan agentes de control biológico se han propuesto, estas trampas son únicamente tan buenas corno el agente de control biol gico usado i Patente de EUA No. 5,057,115 V 5,057,316). la liberación en el campo de parasitoides de las cucarachas americana y de banda cafe dan por' resultado regímenes de parasitismo -+an altos co o 95% y han generado cierto optimismo para su utilizaci n potencial (Coler, R.R. Van Dpesche, R.G., Elk ton, 3.S. [19841 Envi on. Entomol. 13:60- 606; Hagenbuch, B.E., R.S. Patterson, P.G. Koehler [19891 3. econ. Entomol. 82:90-94). Las levaduras patógenas aisladas de colonias de cucarachas en laboratorio también se han sugerido corno posibles agentes de control biológico, pero se requiere mas investigación para evaluar su potencial (Archbold, E.F., M.K. Rust, J).A. Reierson, K.D. Atkinson [1986] Environ.

Entoinol. 15:221-226; Ve ret, 3.M., K.B. Green, L.M. Gamble, F.C. Crochen [19871 3. Econ. Entomol. 80:1205-1212). Muchos otros hongos, bacterias, protozoapos y nernatodos han sido reportados para asociarlos con las cucarachas, pero su potencial corno agentes de control biol gico no es significativo o no ha sido complet mente evaluado (Roth and Willos [1960 II Smithsonian Mise. Coll. Vol. 141; Tsai, Y.H., .M. C<?h?ll I" J 97ÍI I 3. Parásito! . 56:375-377; Zervos, S. [19831 M . Z . J . __ Zoo! . 10:329-334; Rah et-Alla, M. , A.F. Ro ley [19891 _- [nvert. Path. 53:190-196). Por lo tanto, existe la necesidad importante y argamente esperada de medios as efectivos y seguros para controlar' cucarachas. Las hormigas carpinteras, Carnponotus spp., se distribuyen en toda Norteamérica. Algunas de las especies mas < ornune y/o estudiadas incluyen C . rno oc en el noroeste dol Pacifico, C. clapthorax en el sur de California, y el C_;_ f Ion danus en Florida.. C. pennsylvanicus, C. noveboracensí s y C. domi nal i s, se encuentran en el este (Ebel g, W. [19781 Ur-ban Entorno! ogy, Univ. Calif.: Ber eley p. 209-213). La preocupación del publico con respecto a las hormigas carpinteras se ha incrementado debido a la mayor probabilidad de infestaciones estructurales a medida que los desarrollos suburbanos se extienden en los hábitats de los bosques de las hormi as., Las especies pestilentas de hormigas carpinteras pueden considerarse plagas desagradables debido a su actividad de b squeda de alimento dentro de los hogares. El daño mas significativo ocurre cuando las hormigas carpinteras extienden sus nidos en madera solida. Los sitios de nido pueden ubicarse en arboles vivos y muertos, algunas veces ocasionando daño a arboles de sombra. Los nidos también pueden establecerse en paredes y vigas de sopor-te de estructuras, o en huecos dentro de puertas, paredes y muebles. La preferencia por la humedad y madera en descomposición ha sido reportada, pero los sitios de ni dación no están restringidos a dichas reas. Las poblaciones ~ e hormigas carpinteras se desarrollan con relativa lentitud con colonias de 300 a 2,000 obreras siendo producidas en un periodo de 2 años o mas par-a varias especies. La presencia de reproductivas sigue este lento desarrollo ya que su producción ha sido reportada solo de colonias bien establecidas (Hansen, I .D., R.D. Ak e [19851 "Biology of carpenter ants in Washington ta e (Hy enoptera: Formici daezCarnpono s ) , " M l der i a 43: 62 pp.; Ppcer-, 3.L . [19081 Biol . Bull. 14:177-218). A pesar del 1 ?nto crecimiento de las colonias, se han encontrado grandes colonias con colonias satélites. El movimiento de las obreras ocurre entre la colonia principal y las satélites, que sirven corno áreas par-a el desarrollo posterior de los descendient s y la expansión de la colonia (Hansen y Akre [1985], supra) . 5 Los métodos actuales para controlar infestaciones estructurales de hormigas carpinteras incluyen la sanidad de sitios de ni dación potenciales y actuales, reduciendo al mínimo el acceso a estructuras ( v . gr. , evitando el contacto de ramas de arboles con una estructura) , y la aplicación de insecticidas 10 para repeler (barreras de aspersi n de perímetros) y/o eliminar- hormigas carpinteras. El uso de polvo de acido bórico en huecos de paredes secas se reporta que es efectivo hasta por' 20 años (Hansen y A re, supra) . Las recomendaciones para el control químico de 15 infestaciones estructurales en el hogar con frecuencia van acompañadas de advertencias de posibles daños ai aplicador asi corno a niños y mascotas. Los m todos de control alternativo tales como agentes de control biológico efectivos no han sido encontrados (Akre, R.D.. , L.D. Hansen, A.L. Antonelli [19891 20 Ext. Bull. Washington State Univ. Coop. Ext. Serv. 1989 rev no. EB 0818, 6 pp.). Existe una necesidad clara de un agente de control biológico seguro y efectivo para hormigas carpinteras. Las hormigas faraonas, Monornonurn pharaoms se han descrito co o "...las hormigas infestadoras de nuestros hogares '? ''- mas per-sistent.es y difíciles de controlar o erradicar" (Sinith, M.R. [19651 USDA-ARS Tech. Bull. No. 1126, 105 pp.). Es una especie tropical que ha extendido su mbito a regiones mas templadas estableciendo colonias en edificios calentados. Las hormigas faraonas con frecuencia infestan edificaciones en donde se preparan alimentos, y se ha encontrado que portan organismos patógenos (Beatson, S.H. [1972] Lancet 1:425-427). La dificultad para controlar hormigas faraonas se puede atribuir* a sus sitios de nidación inaccesibles, su rápido crecimiento de poblaciones y dispersión de colonias. Su pequeño tamaño permite establecer colonias en cualquier lugar adecuado, incluyendo lugares poco usuales tales como entre los libros y ropa almacenada. Con colonias de reinas múltiples, y las condiciones calidas (30°C), húmedas (63-80% RH) que favorecen a las hormigas faraonas, se pueden desarrollar rápidamente grandes colonias. Porciones de estas grandes colonias se pueden dispersar para formar nuevas colonias en cualquier momento, probablemente en respuesta a sobrepobl ción y condiciones mi croarnbientales de favorables. A diferencia de otras especie de hormigas, las hormigas faraonas no muestran agresión entre colonias. Esto permite la adopción de hormigas de otras colonias y puede incrementar rnae el establecimiento de nuevas colonias y reinfestacior-es. Las hormigas faraonas tambi n buscan alimento a mas de 35 metros del nido sin disyinguir el seguimiento de los rastros, y de esta manera hacen que los nidos sean difíciles de encontrar* y erradicar. Los m todos de cont rol para las hormigas faraonas hacen nfasis en el uso de reguladores de crecimiento de insectos (TGR) o tóxicos incorporados en cebos. Los programas de cebos apropi damente írnplementados son efectivos, sin embargo pueden requerir rnas de un mes para lograr el control. Las aplicaciones de insecticidas, aunque actúan rápido, por lo 5 general no eliminan las colonias, y pueden ser inaceptables en ciertas áreas en donde los residuos tóxicos son una preocupación. Ademas, las aplicaciones de insecticidas generalmente no son compatibles con los programas de cebos. Existe la necesidad de agentes de control biológico seguros y ' efectivos para hormigas faraonas. Se ha concedido una patente de los Estados Unidos para un hongo que muestra alta actividad contra las hormigas quemadoras, Patente de EUA No. 4,925,663, este hongo aislado, denominado aislamiento Beauvep bassiana No. 447, se deposito en un deposito publico. Anteriormente no se había reportado actividad biológica distinta a Ja actividad contra hormigas quemadoras par-a este aislamiento, y se podía inferir* actividad contra otras plagas del simple conocimiento de que di aislamiento era activo contra las hormigas quemadoras. La presente invención se refiere a nuevos usos de B. bassiana No. 447.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN :> La present e invenci n se refiere al uso de a i s l amientos de Boauvepa bass i ana al t amente v i rul entos para controlar ciertas plagas, incluyendo cucarachas, hormigas carpinteras, hormigas quemadoras y hormigas faraonas. En la presente se ilustran específicamente formulaciones que contienen aislamientos de B. bassiana No. 447 y SP111. Estos aislamientos, ventajosamente, muestran virulencia inesperadamente alta contra ciertas plagas, incluyendo cucarachas, hormigas carpinteras, hormigas quemadoras y hormigas faraonas, y no producen los peligros ambientales asociados con agentes de cont ol químico. Los pest u ciclas biológicos a base de hongos que aquí se describen se pueden aplicar- a cada una de estas plagas en cualquiera de sus habitats normales. Los hongos se pueden aplicar, por ejemplo, di ectamente a las plagas, en charolas, o aplicarse a sus inmediaciones, o en aulquier lugar en el que estas plagas sean un problema. La presente invención también incluye u antes de los aislamientos ilustrados que retienen substancial mente la alta virulencia de la cepa origi al. Un rtSpecto adicional de la presente invención se refiere a formulaciones únicas que se pueden usar* para surtir efectivamente agentes de control biológico par-a plagas objetivo. Enn un ambiente preferido, un agentes de control biológico es surtido en una formulaci n que es f cilmente ingerida por la plaga objetivo y se adhiere al cuerpo de la plaga. En la presente se ilustra específicamente una formulación que se ha descubierto que no es repulsiva para las hormigas quemadoras y otras plagas. El descubrimiento es muy inesperado ya que se sabe que las plagas van a ser repelidas por- muchas formulaciones de agentes microbianos. La fornulacion de i a presente invención es particularmente ventajosa porque se ha encontrado que es altamente efctiva para surtir el agente de control biológico a la plaga objetivo. La formulación de la presente invenci n comprende una mezcla única de una fuente de alimento y el agente de control biológico a base de hongos.. Fn una modalidad preferida, también se usa un agente secador*. Estos ingredientes se presentan corno un polvo seco.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 muestra el por* ciento de mortalidad acumulada de hormigas carpinteras expuestas a aislamiento de IL. bassi na No. 477. La Figura 2 muest a el por* ciento de mortalidad acumulada de hormigas carpinteras expuestas a aislamiento de B. bas iana SP111. la Figura 3 muestra el por ciento de mortalidad acumulada de hormigas faraonas expuestas a aislamiento de B. bas i na 447. La Figura 4 muestra el por ciento de mortalidad acumulada de cucarachas alemanas expuestas a aislamiento de G. has i na 44 . La Figura 5 muestra el por ciento de mortalidad acumulada de cucarachas americanas expuestas a aislamiento do B. bassiana 447. La Figura 6 muestra el por ciento de mortalidad acumulada de cucarachas alemanas expuestas a aislamiento de B. bas ana SP111. La Figura 7 muestra la mortalidad de hormigas quemadoras de la formulación a base de hongos en comparación con compuestos químicos par-a trampas comerciales. la Figura 8 una comparación de cebos químicos de trampas par-a formulación a base de hongos para el control de hornigas faraonas. La Figura 9 muestra una comparación de cebos químicos de trampas para formulaci n a base de hongos para el control de hormigas locas. La Figura 10 muestra una comparación de cebos químicos de trampas par-a formulación a base de hongos para el con ol de hormigas carpinteras. La Figura 11 muestra una comparaci n de pesti ci as de ""campo para formulaci n a base de hongos para el control de hopni gas quemadoras.

DESCIPCION DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere al uso de agentes de control biológico a base de hongos para controlar ciertas plagas. En la presente se ilustran específicamente el uso de <* isl m lentos de Beauveria bassiana No. 447 y SPlll. B. bassiana es un aislamiento novedoso. Un aspecto adicional de la presente invención incluye formulaciones que son altamente efectivas para sur ir el agente de control biol gico a la plaga objetivo. Los cultivos biológicamente puros de Beauvepa bassiana No. 477 y Beauver a bassiana SP111, han sido depositados en el Depósito Norteamericano de Cultivo de Tipos (ATCC), 12301 Parkla n Drive, Rockville, MD 20852. La información de deposito y los números de acceso son los si guientes: Cultivo Núrn. de acceso Fecha de deposito Beauvena bassiana No. 477 ATCC 20872 29 de diciembre de 1987 Beauvepa bassiana SP111 ATCC 74308 5 de marzo de 1991 Los cultivos de la presente se han depositado ba o condiciones que aseguran que el acceso a los cultivos estara disponible mientras esta solicitud de patente dependa de una determinada por* el Director* de Patentes y Marcas para tenor-derecho a la misma de acuerdo con 37 CFR 1.14 y 35 U.S.C. 122. Los depósitos est n disponibles según se requiera por las leyes de patente extranjeras en países donde las contrapartes d« la solicitud de la presente, o su progenie, sean presentadas. Sin embargo, se debe entender que la disponibilidad de los depósitos no constituye una licencia para practicar la presente invención en derogación de derechos de patentes otorgados por acción gubernamental . Ademas, los depósitos de cultivo de la presente serán almacenados y estar n disponibles al publico de acuerdo ron las disposiciones del Tratado de Budapest ara el Depósito de Microorganismos, es decir, serán almacenados con todo el cuidado necesario para mantenerlos viables y no contaminados durante un periodo de por lo menos cinco años después de la solicitud rnás reciente para reponer una muestra de un deposito, y on cualquier caso, durante un periodo de por lo menos (30) años después de la fecha de depósito o para la vida vigente de cualquier patente que pudiera expedirse describiendo los cultivos. El depositante reconoce la obligación de reemplazarel depos?to(s) si el depositario no puede reponer una muestra cuando se le solicita, debido a la condici n de un deposito. Todas las restricciones sobre la disponi ilidad al publico de los depósitos de cultivo de ia presente ser n irrevocablemente removidos al otorgarse una patente que los describa. El hongo entomopatogenico Beauvepa bassiana es un hongo imperfecto (Fungí I perfecti) en la subdivisión Deutero ycotonia. Fl genero Beauveri Vuill esta den ro de la clase üeuterornycetes y se distingue de otros géneros por tener conidios que crecen en forma individual, no son catenuiados y tienen la porción fértil del conidióforo en forma de zig-zag y -,e desprende en la punta. La especie Beauveria bassiana tiene conidios esféricos, no elipsoides, que miden de 2 a 3 j,? por 1-2.5 µ y con conidióforos que forman manojos densos. Para que un agente de control biológico sea efectivo a un nivel practico par-a controlar cucarachas, hormigas carpinteras y hormigas faraonas, es esencial que el agente no solo presente patogem ci dad contra esas plagas, sino que también debe ser virulento. Mientras as virulento sea, mejor <<,era corno agente de control biol gico. Aunque algunos ai lamientos de hongos han mostrado tener* cierta patogemcidad para estas plagas, esos aislamientos no teman la virulencia esencial para funcionar como un agente de control -biológico. No hay manera conocida para convertir un aislamiento de hongo no virulento patógeno a un aislamiento virulento patógeno. Por lo tanto, el descubrimiento del aislamiento novedoso de la invenci n logra una eta que se ha buscado desde hace mucho tiempo. Modo de acción y virulencia. Corno en la mayoría de los hongos entornogenos, Bea vep bassiana inicia la infecci n por una espora germinante (conidio) fijada a, y subsecuen emente penetrando, la cutícula del insecto hospedero. Ventajosamente, e inesperadamente, los aislamientos de Beauvepa bassiana reclamados se adhieren en forma muy segura la cutícula de las cucarachas y hormigas y ípicamente no son removidos por las actividades de limpieza del insecto. Esto puede explicar hasta cierto grado la alta virulencia del hongo. A medida que el hongo ene ra a la cutícula del insecto, las hj fas invasor s empiezan a en rar a los tejidos del hoepeder-o y <,e ramifican a través del hernocele. Los cuerpos hLfales o •segmentos de las hifas se distribuyen en todo el hemoeole, llenando el insecto moribundo con micelios. Las hi as que emergen crecen a ravés de] integumento del insecto y producen esporas sobre la superficie externa del huésped. Estas esporas, Ó conidios, se dispersan y son capaces de infectar a nuevos insectos hospederos. Las esporas de B. bassiana se pueden dispersar dentro del nido por las actividades de las plagas. Formul ciones. Se encontró que las formulaciones de la pr-esente invención eran particularmente efectivas para el control de las hormigas quemadoras y otras plagas. En una modalidad preferida, la formulación comprende un polvo seco que tiene el agente de control biológico a base de hongo y un componente alimenticio. Preferiblemente, la formulación comprende ademas un agente secador. Opcional ente, la Formulación también puede comprender un atrayente. La rorrnulación preferida no es repelente e incluye una fuente de alimento por lo que la plaga objetivo comerá y atraerá a otros insectos del nido para actividad de búsqueda. Más aun la formulación de la presente invención se ha encontrado que se adhiere ventajosamente al cuerpo de la plaga objetivo, facilitando asi la colonización de la plaga por el agente de control biológico a base de hongos. La capacidad para adherirse a la plaga hace que la formulación de la presente invención sea muy distinta de las otras formulaciones que se usan actual ente para administrar pesticidas químicos. E-n una modalidad, la formulación de la presente invenci n consiste de aproximadamente 25 a 40% de material «le cacahuate, aproximadamente 45-60% de almid n de maíz, aorox uñadamente 2-20% de agente de control biológico a base de ^hongos, y de alrededor de 0 a 15% de agente secador. En una modalidad especifica, la formulación puede comprender aproximadamente 35% de material de cacahuate, aproximadamente 50% de almidón de maíz, alrededor- de 5% de agente secador y aprox-irnadarnente 10% de hongo. El agente secador puede ser cualquiera de muchos materiales conocidos por los expertos en la t cnica que son partículas pequeñas pero que tienen una relación alta de área de superficie a volumen por lo que para remover efectivamente agua o aceites de la formulación para " crear un polvo seco. Preferiblemen e, el agente secador- puede ser tierra de diatonas o un silicato de calcio sintético tal como iero -CeI" ., El componente de cacahuate de la formulación se prepara preferiblemente moliendo cacahuates tostados para obtener un polvo. Para lograr un polvo seco, es mejor moler los -acahuates junto con el almidón de maíz y/o agente secador.

Preferiblemente, los componentes de la formulación son "partículas pequeñas y pasarán a través de un tarniz de alla 60..

Típicamente, el almid n de aíz y el agente secador pasaran a ravés de un tarniz mucho mas pequeño, tal corno de malla 300. Preferiblemente, la formulación es un polvo que es de libre flujo y que no se pega formando grumos. Las fuentes de alimentos distintas al material je cacahuate o almidón de maíz también se puede usar de acuerdo con la presente invención. La elección de una fuente de alimento dependerá de la plaga I articular que es el objetivo para el control. También, varios „^» trayentes conocidos por los expertos en la técnica se pueden usar*. Esos at rayentes, por- ejemplo, pueden ser ferononas o varios extractos. En una modalidad preferida, el hongo patógeno es I_ Bassiana No. 477 o B. Bassiana SP111. Sin embargo, otros microbios se pueden usar corno otros agentes de control biolíogico. Por ejemplo, también se puede usar Bacill us t hupngiensis con la formulaci n de la presente invención. Para evaluar el control logrado usando los materiales y métodos de la presente invención, se condujeron pruebas para comparar el control de plagas logrado con ciertos pesticidas < ornerciales. Corno se describe más adelante, esas pruebas demuestran que las formulaciones de hongos de la presente invención son altamente efectivas para controlar* plagas. A continuación se dan ejemplos que ilustran los procedimientos, incluyendo el mejor modo para realizar Ja invención. Estos ejemplos no deben considerarse como limitantes. Todos los porcentajes son en peso y todas las proporciones de mezclas de solventes son en volumen a menos que se indique otra cosa.

EJEMPLO 1 Preperación del hongo El hongo d ela presente invención se puede producir en charolas con un medio a base de arroz. Un aislamiento de inoculo de hongo se usa para iniciar ei crecimiento del hongo en las charolas. El inoculo inicial se prepara en cajas de petp. Las esporas puras se transfieren después a frascos que contienen arroz blanco estéril sin cascara. El medio para las charolas se prepara de la siguiente manera: 1. El arroz se cuece previamente durante 10 minutos. 2. 750 gramos de a rroz cocido se colocan en bolsas de poliet lleno y se esterilizan en una autoclave a 120°C durante minutos. 3. Dentro de una campana de flujo laminar, se añade una cucharada de esporas y arroz de los frascos de inoculo a cada bolsa de medio estéril preparado. 4. Cada bolsa se cierra herméticamente doblando y engrapando el extremo abierto. 5. Las bolsas son transferidas a un cuarto est ril con presión positiva, a una temperatura de 25.0 a 27. °O, humedad relativa por arriba de 70% y una fotofase de 16 horas. Ese cuarto se conoce corno el "cuarto ambiental". Después de 3 días en el cuarto ambiental, las bolsas que contienen micelios se seleccionan y sus contenidos se transfieren a charolas de plástico. El tamaño de las charolas es tal que cada charola acomodara el contenido de 2-3 bolsas. Las char-olas y su contenido se dejan en el cuarto ambiental durante 12-15 días. Al final del periodo 12-15 días, las charolas son transferidas a un cuarto con una corriente fría \10-20oC) de aire limpio. Las charolas se dejan en este cuarto hasta que el aire frío ha secado la mezcla de arroz y hongos. Las charolas no contaminadas cubiertas con hongos se pueden cosechar y preparar para aplicación o almacenamiento. Si ei hongo se va a aplicar a cucarachas u hormigas dentro de 1-2 semanas después de la producción, se pueden recoger conidias •agitando y tamizando. El polvo resultante contiene esporas y algunos micelios, y se puede aplicar directamente a insectos objetivo o usar para preparar una formulación co o un liquido, :>olvo o cebo. Si el hongo se va a almacenar, la mezcla se puede mezclar con almidón de maíz o talco y colocar en contenedores de plástico estériles sellados hermé icamente y almacenados en un refrigerador a 4°C o en un cuarto con una escala de temperatura de 10-25°C y sinluz directa. La alta virulencia de 11. ßassiana puede ser anulada por cont minaci n bacteriana o de otros hongos. Por* lo tanto, en toda la preparación del hongo, se debe tener mucho cuidado de mantener la esterilidad de odos Jos instrumentos y equipo.. Corno lo demuestran los siguientes ejemplos, el producto que contiene hongo se puede aplicar a las plagas objetivo y a sus nidos corno un liquido, polvo o ponerse como una trampa con cebo para que coman las plagas, se infecten y lleven el inoculo a l ni o.

EJEMPLO 2 Aplicación por aspersión La aspersión se puede usar para tratar hormigas individuales o cucarachas individuales o pequños grupos de esas plagas. Una suspensión de hongos que contiene 1.0 x 1 7 \ . o x 109 esporas por* mililitro de agua se pueden rociar sobre las plagas objetivo usando un cepillo de aire u otro medio como un api icador.

EJEMPLO 3 Aplicación en polvo Una mezcla de esporas de hongos y micelios de hongos se pueden mezclar- ^on almidón de rnaíz o talco y aplicarse a las i medi ciones de las plagas como un polvo seco. Fl polvo se prepara co o en el Ejemplo 1 anterior. Fl polvo con B. Bassiana que contiene el arroz, esporas y micelio se mezcla con el almidón o talco. La aplicaci n de este polvo a los nidos o directamente a las plagas puede facilitar el crecineinto r pido y amplio de los hongos dentro del nido o sobre la plaga. La aplicación se puede lograr* usando un api icador* de aire bajo presión con un aditamento que distribuye las mezclas en grietas y huecos de un edificio no habitado por plagas.

'? ") Durante la aplicación y después de la misma, se observara plagas cubiertas con el polvo blanco. Esas plagas infectadas morirán dentro de 1-5 días, y las esporas que produzcan serán infecciosas para otras plagas. Debe haber un decrernento marcado en actividad dentro de 1-3 días y la muerte ocurrirá dentro de 1-2 semanas después de la aplicación. Las esporas activas permanecer n en las inmediaciones en el sitio del nido, proveyendo asi inoculo para infectar a otras cucarachas u hopni ga .

EJEMPLO 4 Aplicación de trampas con cebo El polvo con hongos se puede usar en una trampa en la cual las entradas estén untadas con inoculo de hongos.

Preferiblemente, se utilizan esporas de hongos. Un atrayente de cebo contenido dentro de la rampa sera ingerido por las cucarachas u hormigas y estos animales quedaran infectados.

Estos individuos infectados regresarán al nido contaminados e introducir n de esta manera la enfermedad causada por hongos al nido. Un aceite vegetal u otra substancia liquida se puede añadir al cebo en l rampa para hacerla más atractiva para las plagas. Varios at rayen es, incluyendo compuestos de feromoñ , son bien conocidos por los expertos en esta técnica. Las trampas con cebo se deb colocar en gabinetes, a lo largo de superficies, marcas de ventanas, etc. Una cantidad de 0.5-2.0 gramos de mezcla de hongos que contienen esporas y micelios deben estar contenidos en cada trampa. El numero de trampas usado en el área depender del nivel de infestación.

EJEMPLO 5 Tratamiento de hormigas carpinteras con B. Basßiana No. 447 Hormigas carpinteras (Carnponotus flopdanus) , se expusieron a Beauvepa bassiana No. 477. Cada tratamiento incluyo la exposici n de dos grupos de 50 hormigas cada una a conidios de los aislamientos. Las hormigas se revi tieron con una mezcla de conidios/almid n de maíz, agitando suavemente las hormigas y esporas entre si en un contenedor cubierto. El •tratamiento de control consisti únicamente de almidón de maíz. Las hormigas subsecuentemente se mantuvieron en cajas de pl stico abiertas que contaminaron una celda de nido (caja de petp cubierta de 100 inrn con el fondo de la caja lleno je yeso que se humedeci periódicamente con agua) y agua con miel para alimento. La mortalidad se registro diariamente durante 18 días empezando con el segundo día después de la exposici n. La prueba se termino despu s de 28 días. Las hormigas muertas se mantuvieron individualmente bajo humedad alta y se examinaron para esporulacion para determinar* las velocidades de infecci n. Las hormigas carpinteras expuestas a aislamientos de B. fiass ana tuvieron una mortalidad mayor de 95% (Figura 1).

, Po r lo menos 49% de las hormigas muer-tas desarrollaron cuerpos sporul adores de los hongos a los cuales se expusieron, indicando que estos aislamientos pueden crecer y reproducirse en hormigas carpinteras.

EJEMPLO 6 Tratamiento de hormigas carpinteras con B. bassiana SP111 Horm gas carpinteras (Carnponotus floridanus) , se expusieron a Beauvepa bassiana SPill. Cada tratamiento incluyo la exposición de dos grupos de 50 hormigas cada una a conidios de los aislamientos. Las hormigas se revistieron con una mezcla de conidios/almidón de maíz, agitando suavemente las hormigas y esporas entre sí en un contenedor cubierto. Ei tratamiento de control consistió únicamente de almidón de maíz. Las hormigas subsecuentemente se mantuvieron en cajas de pl stico abiertas que contaminaron una celda de nido (caja de pe p cubierta de LOO rn con el fondo de la caja lleno de yeso que se humedeci peri dicamente con agua) y agua con miel para alimento. La mortalidad se registró diariamente durante 10 días empezando con el segundo día después de la exposición. La prueba se termino después de 28 días. Las hormigas muertas se mantuvieron individualmente ba o humedad alta y se examinaron fiara esporulacion para determinar- las velocidades de infecci n. Las hormigas carpinteras expuestas a aislamientos de B. Tlas iana SPlll tuvieron una mortalidad mayor- de 75% (Figura r ) . Por- lo menos 49% de las hormigas muertas desarrollaron cuerpos esporulado es de los hongos a los cuales se expusieron, indicando que estos aislamientos pueden crecer y reproducirse en hormigas carpinteras.

EJEMPLO 7 Tratamiento de hormigas faraonas con B. bassiana No. 447 Hormigas faraonas se expusieron a una ezcla que comprendía conidios de B. bassiana No. 447 corno el ingrediente activo. Tres colonias aproximadamente 100-200 hormigas se espolvorearon individualmente con los conidios en una caja de petp y se dejo que fueran a una celda de nido (ca a de petp de pl stico de 15 x 40 mm con una base llena de yeso y agujeros de entrada en la tapa), los controles que consistían de res colonias no fueron espolvoreadas, tas colonias de hormigas se mantuvieron por* separado en cajas de pet p as grandes junto con las celdas de nido y agua con miel. La mortalidad se -egistro diariamente durante 25 días. Las hormigas muertas fueron individualmente esterilizadas superficialmente y se mantuvieron bajo alta humedad a la velocidad de infección. La exposición de las hormigas faraonas a B. bassi na 447 dio por resultado una mortalidad de 90% después de 8 días i Figura 3). Ademas, se confirmo que todas las hormigas muertas tenían esporas de hongos, indicando que el hongo se puede desarrollar exitosamente en hormigas faraonas.

EJEMPLO 8 Tratamiento de cucarachas con 11. bassiana No. 447 Para la cucaracha alemana, Blattella germánica, se probo B. bassiana No. 447 para la capacidad de sus conidios para infectar* y matar al hospedero. Grupos de 50 cucarachas macho fueron anestesiadas con CO2 y después espolvoreadas con conidios, dentro de un contenedor cubierto '227 g). Los controles consistieron de un grupo de 20 cucarachas. Las cucarachas espolvoreadas se tran firieron individualmente en cajas de petri separadas (10 x 35 rnm) que contenían papel filtro húmedo. La mortalidad se registro a partir del segundo día después de la aplicación de conidios y diariamente en lo posterior. Las cucarachas muertas se mantuvieron individualmente en una cámara h meda durante 10 días para identificar* hongos esporulantes. Para la cucaracha americana Penplaneta americana se - lico B. bassiana No. 447 cepillando los conidios sobre cucarachas anestesiadas. Las cucarachas se mantuvieron después on cajas de petp commo se describió antes, a 2fi°C. En la prueba con cucarachas alemanas, el aislamiento de hongos B. bassiana No 447 (Figura 4) produjo una mortalidad de 100% después del contacto con las esporas. La esporulacion del hongo fue evidente en 82% de las cucarachas muertas. Para Las exposiciones de la cucarachas americanas, el aislamiento de B„ bassiana produjo 90% o mas de mortalidad después de 8 días (Figura 5). La eeporulación de los hongos ocurrió en todas las cucarachas americanas muertas.

EJEMPLO 9 Tratamiento de cucarachas con B. basßiana SP111 Para la cucaracha alemana, Blattella germ nica, se probo B. bassiana SP111 para ia capacidad de sus conidios para infectar* y matar al hospedero. Grupos de 50 cucarachas macho fueron espolvoreados con conidios dentro de un contenedor cubierto (227 g). Los controles consistieron de un grupo de 20 cucarachas. Después de la exposición a conidios, las cucarachas se anestesiaron con CO2 y se transfirieron individualmente en cajas de pe ri separadas (10 x 35 rnm) que contenían papel nitro húmedo. La mortalidad se registro a partir del segundo día después de l a aplicación de conidios y diariamente en Jo posterior. Las cucarachas muertas se mantuvieron individualmente en una cámara húmeda durante 10 días para identificar hongos esporulant es. En la prueba con cucarachas alemanas, el aislamiento <e hongos II. bassiana No 447 (Figura d) produjo una mortalidad de 100% despu s del contacto con las esporas. La espor?lacion del hongo fue evidente en 82% de las cucarachas muertas.

?B EJEMPLO 10 Evaluación de formulaciones de cebo con B. bassiana para control de hormigas quemadoras Las formulaciones de cebo con material de cacahuate molido se dieron a colonias de hormigas quemadoras obreras en cajas de plástico (-20 x 12 x 10 cm) que contenían una placa pequeña de agua y una ca a de pe p de plástico (60 inm de diáme ro) par-a servir corno una celda de nido. Se establecieron colonias 2-4 días antes del mi cío del experimento para permitir que las hormigas se adaptar-an a su medio ambiente. Las formulaciones (0.5 g) se dieron en papeles previamente pesados (6.45 crn2 ) o placas pequeñas y se dejaron en cajas durante 3-4 días. Se usaron dos controles: un control limpio que no recibió formulación sino únicamente agua, y un control de cebo que recibi una formulación de cebo sin hongo. La mortalidad corregida por Abbott mayor de 70% 14 días después del i- rat miento se observo para el aislamiento de hongos que contenía aproximadamente 10% de B. bassiana No. 447.

EJEMPLO 11 Cebos químicos de trampas comparadas con formulaciones de hongos para el control de hormigas quemadoras Los cebos químicos que se compararon son de: trampa para hormigas MAX, trampa para hormigas RAID y trampas para hormi as COMBAT. Los cebos químicos se removieron de las trampas y sw dieron a las hormigas en papel. El control recibió la rnisrna formulación que el tratamiento con hongos pero sin conidios. La formulación de hongos contenía material de cacahuate y almid n de aíz y 10% de conidios de B. bassiana No. 447. MAX y las formulaciones de hongos tuvieron una mortalidad similar, aunque MAX hizo que la rnortali dad i ncrernentara mucho más rápidamente que el hongo corno se esperaba, ya que el hongo requiere 3-4 días para infectar y matar al insecto. Corno se muestra en la Figura 7, COMBAT y RAID fueron menos eficientes que MAX y B. bassiana.

EJEMPLO 12 Cebos químicos de trampas comparadas con formulaciones de hongos para el control de hormigas faraonas Los cebos químicos que se compararon son de: trampa para hormigas MAX, trampa para hormigas RAID y trampas para hormigas COMBA!. Los cebos químicos se removieron de las ramp s y sw dieron a las hormigas en papel. El control recibió la misma formulación que el tratamiento con hongos pero sin conidios. La formulación de hongos contenía material de acahuate y almidón de maíz y 10% de conidios de B. bassiana No. 447. Los resultados de estos experimentos se muestran en la Figura 8..

EJEMPLO 13 Cebos químicos de trampas comparadas con formulaciones de hongos para el control de hormigas locas Los cebos químicos que se compararon son de: trampa para hormigas MAX, trampa para hormigas RAID y trampas para hormigas COMBAT. Los cebos químicos se removieron de las trampas y sw dieron a las hormigas en papel. El control recibió la misma formulación que el tratamiento con hongos pero sin conidios. La formulación de hongos contenía material de cacahuate y almidón de maíz y 10% de conidios de B. bassiana No. 447. En todos los experimentos, el cebo con Beauvepa has i na produjo mortali a similar o mayor que la causada por cebos <?u?rn?cos. Véase Figura 9 para los resultados je dicho experi ento.

EJEMPLO 14 Cebos químicos de trampas comparadas con formulaciones de hongos para el control de hormigas carpinteras Los cebos químicos que se compararon son de: trampa para hormigas MAX, trampa para hormigas RAID y trampas para hormigas COMBAT. Los cebos químicos se removieron de las t ampas y sw dieron a las hormigas en papel. El control recibi Ja nisrna formulación que el tratamiento con hongos pero sin conidios. l a formulación de hongos contenía material de cacahuate y almidón de maíz y 10% de conidios de B. bassiana No. 44?. Como se puede ver en la Figura 10, la formulación de hongos tuvo un rendimiento similar a, o ligeramente mejor que, cebos de MAX y RAID, y sólo ligeramente menor que COMBAT. Tanto COMBAT corno el hongo tuvieron sus efectos retardados en relación con RAID y MAX, pero la demora en el efecto del hongo es mas larga que la de COMBAT.

EJEMPLO 15 Plaguicidas de campo comparados con formulaciones de hongos para el control de hormigas quemadoras Se evaluaron cebos químicos de AMDROR . Ei cebo en un expenrnenfo también tuvo 10% de insecticida en polvo para hormigas quemadoras ACEPHATE. En cada tratamiento, se dio medio jrarno de formulación por arena en papel previamente pesado. La formulación se removió después de 1 días., El control recibió la misma formulación que el tratamiento con hongos pero sin conidia. La formulación de hongos contenía material de cacahuate, almid n de maíz y 10% do conidios de B. bassiana No. 447. ACEPHATF (que normalmente no es una formulaci n de cebo) mata a las hormigas casi inmedi amente. La mortalidad con AMDRO incrementa menos rápidamente, pero para el día 4, Í-80% de la poblaci n estaba muerta. La mortalidad con hongos se incrementa a una velocidad más lenta pero la mortalidad final después de 2-4 semanas es similar a la obtenida con los pesticidas químicos (Figura 11). Se debe entender que los ejemplos y modalidades que aquí se describen son únicamente para fines ilustrativos y que varias modificaciones o cambios a la luz de las mismas serán sugeridas a los expertos en la técnica y deben incluirse dentro del espíritu de esta solicitud y el alcance de las reivindicaciones anexas.

Claims (17)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1. Un procedirnemto para controlar* cucarachas, que consiste en aplicar aislamiento de Beauveria bassiana No. 447, que tiene las características de ATCC 20872, sobre las cucarachas o sus inmedi ciones.

2. Un procedimiento para controlar hormigas carpinteras, que consiste en aplicar aislamiento de ßeauveria hassiana No. 447, que tiene las características de ATCC 20872, sobre las hormigas carpinteras o sus inmediaciones.

3. Un procedimiento para controlar hormigas faraonas, que consiste en aplicar aislamiento de Beauvepa bassiana No. 447, que tiene las características de ATCC 20872, sobre las hormigas faraonas o sus inmediaciones.

4. Una trampa que consiste del aislamiento definido en la reivindicación 1.

5. Una composición para el control de una plaga de cucarachas u hormigas, que consiste de una fuente de aliments y el aislamiento definido en la reivindicación 1, la composición estando en forma de un polvo seco capaz de pasar a través de un tarni de malla 65.

6. Una composición de con ormidad con la reivindicación 5, que comprende un material de cacahuate, almidón de maíz y el aislamiento.

7. Una composición de conformidad con la reivindicación 5, o la reivindicación 6, que comprende ademas un agente secador.

8. Una composición de conformidad con la reivindicación 7, que consiste de 30-40% de material de cacahuate, 45-55% de almidón de maíz, aproximadamente 10% de agente secador y alrededor de 10% de aislamiento.

9. Beauveria bassiana que cuando es, esencialmente en rorrna biol gicamente pura, tiene la virulencia contra cucarachas y hormigas carpinteras característica del aislamiento de Beauveria bassiana SPlll, deposito de cultivo ATCC 74038 y rnutantes del mis o.

10. Un procedimiento para controlar cucarachas, que consiste en aplicar el aislamiento definido en la reivindicación 9 sobre las cucarachas o sus inmediaciones.

11. Un procedimiento para controlar hormigas carpinteras, que consiste en aplicar* el aislamiento definido en . reivindicación 9 sobre las hormigas carpinteras o sus inmediaciones.

12. Una trampa que consiste del aislamiento definido en la reivindicación 9.

13. Una composición para el control de una plaga de cucarachas u hormigas que consiste de una fuente de alimento y un agente de control biológico, la composición estando en forma de un polvo seco que puede pasar a través de un tamiz de malla 65.

14. Una composición de conformidad con la reiv dicaion 13, que consiste de un material de cacahuate, almidón de rnaíz y un agente de control biológico de hongos.

15. Una composición de conformidad con la reivindicación 13 o la reivindicación 14, que consiste ademas de un agente secador.

16. Una composición de conformidad con la reivindicación 15, que consiste de 30-40% de material de cacahuate, 45-55% de almidón de maíz, aproxi adamen e 10% de agente secador y aproximadamente 10% del aislamien o.

17. Una composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 16, en donde el agente de con rol biológico es el aislamiento definido en la reivindicación 9.