MXPA06009438A - Agonistas y antagonistas de p28 y el gen 3 inducido por el virus epstein-barr y wsx/trc, para el tratamiento de trastornos inmunes - Google Patents

Abstract

Se proveen métodos para la modulación de la actividad de citocinas, por ejemplo, con el propósito de tratar trastornos inmunes e inflamatorios;se proveen también métodos para administrar agonistas o antagonistas de IL-27 y receptor de IL-27.

Description

AGONISTAS Y ANTAGONISTAS DE P28 Y EL GEN 3 INDUCIDO POR EL VIRUS EPSTEIN-BARR Y WSX/TCCR PARA EL TRATAMIENTO DE TRASTORNOS INMUNES Esta solicitud reclama el beneficio de la solicitud de patente provisional de E.U.A. No. 60/545,762, presentada en febrero 17 de 2004, la cual se incorpora en su totalidad en la presente como referencia.

CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere en general a usos de citocinas de mamífero. Más específicamente, la invención describe una subunidad de receptor del receptor de IL-27.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El sistema inmune protege a los individuos de agentes infecciosos, por ejemplo, bacterias, organismos multicelulares, así como cánceres. Este sistema ¡ncluye varios tipos de células linfoides y mieloides tales como monocitos, macrófagos, células dendríticas (DCs), eosinófilos, células T, células B y neutrófilos. Estas células linfoides y mieloides producen con frecuencia proteínas de señalización conocidas como citocinas. La respuesta inmune ¡ncluye inflamación, es decir, la acumulación de células inmunes sistémicamente o en un sitio particular del cuerpo. En respuesta a un agente infeccioso o sustancia extraña, las células inmunes secretan citocinas que, a su vez, modulan la proliferación, desarrollo, diferenciación o migración de células inmunes. La respuesta inmune resulta a veces en consecuencias patológicas, es decir, trastornos inflamatorios. Estos trastornos inflamatorios, que implican células inmunes y citocinas incluyen, por ejemplo, psoriasis, artritis reumatoide, enfermedad de Crohn y aterosclerosis (véase, por ejemplo, Abbas, et al. (eds.) (2000) Cellular and Molecular Immunology, W. B. Saunders Co., Filadelfia, PA; Oppenheim y Feldmann (eds.) (2001 ) Cytokine Refere?ce, Academic Press, San Diego, CA; Kaufmann, eí al. (2001 ) Immunobiol. 204: 603-613; Saurez y Schultz-Cheery (2000) Dev. Comp. Immunol. 24: 269-283; van Reeth y Nauwynck (2000) Vet. Res. 31 : 187-213; García-Sastre (2001 ) Virology 279: 375-384; Katze, et al. (2002) Nat. Rev. Immunol. 2: 675-687; van Reeth (2000) Vet. Microbiol. 74: 109-116; y Tripp (2003) Curr. Pharm. Des. 9: 51-59). La IL-27 es una citocina heterodimérica que comprende dos subunidades diferentes, una estructura similar a la de IL-12, IL-23 y el heterodímero CNTF/sCNTFR. Las dos subunidades de la IL-27 son p28 y el gen 3 inducido por el virus de Epstein-Barr (EBI3). La IL-27 es expresada, por ejemplo, por células que presentan antígenos (APCs), tales como monocitos y células dendríticas (DCs). A su vez, la IL-27 expresada estimula la proliferación de células T no afectadas CD4+. Además, la IL-27 sinergiza con la IL-12 para provocar que las células T no afectadas CD4+ produzcan interferón-gamma (IFNgamma), una citocina tipo TH1. La IL-27 sobrerregula también a T-bet, un factor de transcripción específico para la respuesta inmune tipo TH1 y, consistente con esto, la IL-27 subregula a GATA-3, un factor de transcripción específico para la respuesta inmune tipo TH2. El lipopolisacárido (LPS) induce la expresión de ambas subunidades de la IL-27 por monocitos y DCs derivadas de monocitos, indicando una función para la IL-27 en la inmunidad innata (Takeda, eí al. (2003) J. Immunol. 170: 4886-4890; Lucas, eí al. (2003) Proc. Nati. Acad. Sci USA. 100: 15047-15052; Pflanz, eí al. (2002) Immunity 16: 779-790; Hashimoto, eí al. (2000) Blood 96: 2206-2214). El receptor de IL-27 comprende TCCR (conocido también como WSX-1 ; WSX-1/TCCR). Los ratones con expresión bloqueada (knock out) en TCCR/WSX-1 (ratones TCCR/WSX-1 KO), se distinguen por una respuesta inmune tipo TH1 deteriorada, por ejemplo, producción reducida de IFNgamma, susceptibilidad incrementada a patógenos celulares tales como Leishmania, Listería y Trypanosoma, menor producción de anticuerpos dependiente de células T tipo TH1 (subtipo lgG2a), formación anormal de granulomas en respuesta a Bacillus, y menor producción de anticuerpos dependiente de células T tipo TH1 (subtipo lgG2a). La tuberculosis, sarcoidosis y enfermedad de Crohn, son trastornos que implican formación de granulomas y respuesta tipo TH1. Ocurre formación de granulomas en los sitios de intervención de estas enfermedades. Los granulomas de pacientes con tuberculosis, sarcoidosis y enfermedad de Crohn, expresan ambas subunidades de IL-27 (véase, por ejemplo, Chen, eí al. (2000) Nature 407: 916-920; Yoshida, eí al. (2001 ) Immunity 15: 569-578; Trinchieri, eí al. (2003) Immunity 19: 641-644; Larousserie, et al. (2004) J. Pathol. 202: 164-171 ; y Brombacher, eí al. (2003) TRENDS Immunol. 24: 207-212). Se encuentran variaciones sutiles de vías inmunológicas que implican a la IL-27, dependiendo aparentemente de la identidad del patógeno usado para desafiar al hospedero, y de los puntos de tiempo elegidos para el estudio de la respuesta inmune a la infección. Por ejemplo, algunos estudios de los ratones con expresión bloqueada en WSX-1/TCCR, demostraron que los ratones son capaces de combatir la infección con un parásito intracelular (Toxoplasma), que los ratones desarrollan producción excesiva de IFNgamma, y que la producción de IFNgamma continúa siendo sobrerregulada, resultando en inflamación letal (Chen, eí al. (2000) Nature 407: 916-920; Villarino, eí al. (2003) Immunity 19: 645-655; Hamano, eí al. (2003) Immunity 19: 657-667). De acuerdo a Trinchieri, eí al., citado anteriormente, la IL-27 sola parece no tener una función importante en el inicio de la respuesta tipo TH1 sino, más bien, estimula la producción temprana de IFNgamma sin que influya mucho en el compromiso de células T a la diferenciación tipo TH1. Existe una necesidad no satisfecha por tratar trastornos inflamatorios e inmunes, tales como psoriasis y artritis, así como cánceres que resisten a la erradicación por el sistema inmune. La presente invención satisface esta necesidad, proveyendo métodos de uso de agonistas y antagonistas de IL-27 o receptor de IL-27.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se basa, en parte, en el descubrimiento de que un agonista o antagonista de IL-27 o receptor de IL-27, modula la respuesta a muchas condiciones inmunes e inflamatorias. La presente invención provee un método para la modulación de un trastorno o condición inmune, que comprende administrar una cantidad efectiva de un agonista o antagonista de p28, EBI3 o WSX/TCCR, en donde el trastorno o condición comprende: a) una condición inflamatoria de la piel; b) artritis; c) enfermedad de Crohn; d) inflamación o hiperreactividad de vías respiratorias; e) aterosclerosis; o f) un cáncer o tumor no causado por el virus de Epstein-Barr. Provisto también es el método anterior, en donde el antagonista inhibe o previene la unión de la IL-27 a un receptor, que comprende un complejo heterodimérico de WSX-1/TCCR y gp130. En otro aspecto, la invención provee el método anterior, en donde la condición inflamatoria de la piel comprende psoriasis o dermatitis atópica; en donde la artritis comprende artritis reumatoide; osteoartritis; o artritis psoriática; en donde el trastorno de inflamación o hiperreactividad de vías respiratorias comprende asma; alergia; o trastorno pulmonar obstructivo crónico (COPD). Provisto también es el método anterior, en donde el cáncer o tumor comprende cáncer de mama; cáncer de colon; o melanoma; así como el método anterior, en donde el agonista inhibe o mejora el trastorno, que comprende cáncer o tumor; y el método anterior, en donde el cáncer o tumor expresa cantidades detectablemente incrementadas, respecto a la expresión por un tejido control normal, de: a) p28; b) EBI3; o c) WSX-1/TCCR. En otro aspecto, la presente invención provee el método anterior, en donde el antagonista mejora la: a) condición inflamatoria de la piel; b) artritis; c) enfermedad de Crohn; d) hiperreactividad de vías respiratorias o inflamación de vías respiratorias; o e) aterosclerosis. En otra modalidad, la presente invención provee un método de modulación de un trastorno o condición inmune, que comprende administrar una cantidad efectiva de un agonista o antagonista de p28, EBI3 o WSX TCCR, en donde el trastorno o condición comprende: a) una condición inflamatoria de la piel; b) artritis; c) enfermedad de Crohn; d) hiperreactividad o inflamación de vías respiratorias; e) aterosclerosis; o f) un cáncer o tumor no causado por el virus de Epstein-Barr; en donde el agonista comprende: IL-27; hipercina de IL-27; p28; EBI3; o un ácido nucleico; o el método anterior, en donde el ácido nucleico codifica para: hipercina de IL-27; p28; EBI3; p28 y EBI3; WSX-1/TCCR; o WSX/1 TCCR y gp130; así como el método anterior, en donde el antagonista comprende una composición de unión de un anticuerpo que une específicamente: IL-27; p28; EBI3; WSX-1/TCCR; o un complejo de gp130 y WSX-1/TCCR; y el método anterior, en donde la composición de unión de un anticuerpo comprende un anticuerpo policlonal; un anticuerpo monoclonal; un anticuerpo humanizado, o un fragmento de los mismos; un fragmento Fab, Fv o F(ab')2; un peptidomimético de un anticuerpo; o una marca detectable. Provisto también es el método anterior, en donde el antagonista comprende: a) un receptor soluble derivado de WSX-1 TCCR; b) una molécula pequeña; o c) un ácido nucleico; así como el método anterior, en donde el ácido nucleico híbrida específicamente con un polinucleótido que codifica para: p28; EBI3; o WSX-1/TCCR; o el método anterior, en donde el ácido nucleico comprende un ácido nucleico antisentido o ARN de interferencia pequeño (ARNsi). Otro aspecto de la presente invención es el método anterior, en donde la administración del agonista incrementa, y el antagonista disminuye, la expresión de: RANKL; FNTalfa; TEASRL; IL-1alfa o beta; OX40; o APRIL. Provisto también es un método de diagnóstico de la condición o trastorno inmune anterior, que comprende poner en contacto una composición de unión con una muestra biológica, en donde la composición de unión se une específicamente a: a) IL-27, p28, EBI3 o WSX-1/TCCR; b) un complejo de WSX-1/TCCR y gp130; o c) un ácido nucleico que codifica para p28, EBI3 o WSX-1/TCCR; y medir o determinar la unión específica de la composición de unión a la muestra biológica. Además, la presente invención provee también un equipo para el diagnóstico de la condición o trastorno inmune descrito anteriormente, que comprende un compartimiento y una composición de unión que se une específicamente a: a) IL-27, p28, EBI3 o WSX-1/TCCR; b) un complejo de WSX-1/TCCR y gp130; o c) un ácido nucleico que codifica para p28, EBI3 o WSX-1/TCCR.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LAS MODALIDADES PREFERIDAS Como se usa en la presente, incluyendo las reivindicaciones anexas, las formas singulares de palabras tales como "un", "una" y "la" incluyen sus referencias plurales correspondientes, a menos que el contexto dicte claramente otra cosa. Todas las referencias citadas en la presente se incorporan como referencia al mismo grado como si se indicara que cada publicación, solicitud de patente o patente individual, fuese específicamente e individualmente incorporada en la presente como referencia.

I. Definiciones Los términos "activación", "estimulación" y "tratamiento", como se aplican a células o a receptores, pueden tener el mismo significado, por ejemplo, activación, estimulación o tratamiento de una célula o receptor con un ligando, a menos que se indique de otra manera mediante el contexto o explícitamente. El término "ligando" abarca ligandos naturales y sintéticos, por ejemplo, citocinas, variantes de citocinas, análogos, muteínas y composiciones de unión derivadas de anticuerpos. "Ligando" abarca también moléculas pequeñas, por ejemplo, peptidomiméticos de citocinas y peptidomiméticos de anticuerpos. El término "activación" puede referirse a activación celular regulada por mecanismos internos, así como por factores externos o ambientales. La "respuesta", por ejemplo, de una célula, tejido, órgano u organismo, abarca un cambio en el comportamiento bioquímico o fisiológico, por ejemplo, concentración, densidad, adhesión o migración dentro de un compartimiento biológico, velocidad de expresión génica o estado de diferenciación, en donde el cambio se correlaciona con activación, estimulación o tratamiento, o con mecanismos internos tales como programación genética. La "actividad" de una molécula puede describir o referirse a la unión de la molécula a un ligando o a un receptor, para actividad catalítica; a la capacidad para estimular expresión génica o señalización, diferenciación o maduración celular, para actividad antigénica; a la modulación de actividades de otras moléculas, y similares. La "actividad" de una molécula puede referirse también a actividad en la modulación o el mantenimiento de interacciones célula a célula, por ejemplo, adhesión, o actividad para mantener una estructura de una célula, por ejemplo, membranas celulares o citoesqueleto. La "actividad" puede significar también actividad específica, por ejemplo, [actividad catalítica]/[mg de proteína] o [actividad ¡nmunológica]/[mg de proteína], concentración en un compartimiento biológico, o similares. La "actividad proliferativa" abarca una actividad que promueve, es decir, necesaria para, o que se asocia específicamente con, por ejemplo, división celular normal, así como cáncer, tumores, displasia, transformación celular, metástasis y angiogénesis. Los términos "administración" y "tratamiento", como se aplican a un animal, humano, sujeto experimental, célula, tejido, órgano o fluido biológico, se refieren al contacto de una composición, compuesto o agente de diagnóstico, terapéutico o farmacéutico exógeno con el animal, humano, sujeto, célula, tejido, órgano o fluido biológico. La "administración" y el "tratamiento" pueden referirse, por ejemplo, a métodos terapéuticos, de placebo, farmacocinéticos, de diagnóstico, de investigación y experimentales. El "tratamiento de una célula" abarca el contacto de un reactivo con la célula, así como el contacto de un reactivo con un fluido, en donde el fluido está en contacto con la célula. La "administración" y el "tratamiento" significan también tratamientos in vitro y ex vivo, por ejemplo, de una célula, por una composición de reactivo, de diagnóstico o de unión, o por otra célula. El "tratamiento", como se aplica a un sujeto humano, veterinario o de investigación, se refiere a tratamiento terapéutico, medidas profilácticas o preventivas, para aplicaciones de investigación y de diagnóstico. El "tratamiento", como se aplica a un sujeto humano, veterinario o de investigación, o célula, tejido u órgano, abarca el contacto de un agonista de IL-27 o antagonista de IL-27 con un sujeto humano o animal, una célula, tejido, compartimiento fisiológico o fluido fisiológico. El "tratamiento de una célula", abarca también situaciones en donde el agonista de IL-27 o antagonista de IL-27 entra en contacto con el receptor de IL-27 (heterodímero de WSX-1/TCCR y gp130), por ejemplo, en la fase de fluido o fase coloidal, así como situaciones en donde el agonista o antagonista entra en contacto con un fluido, por ejemplo, en donde el fluido está en contacto con una célula o receptor, pero en donde no se ha demostrado que el agonista o antagonista entra en contacto con la célula o el receptor. La "composición de unión" se refiere a una molécula, molécula pequeña, macromolécula, anticuerpo, o fragmento o análogo de los mismos, o receptor soluble, capaz de mostrar unión a un objetivo. La "composición de unión" puede referirse también a un complejo de moléculas, por ejemplo, un complejo no covalente, a una molécula ionizada, o a una molécula modificada covalentemente o no covalentemente, por ejemplo, modificada por fosforilación, acilación, entrelazamiento, ciclización o digestión limitada, la cual es capaz de mostrar unión a un objetivo. La "composición de unión" puede referirse también a una molécula en combinación con un estabilizador, excipiente, sal, regulador de pH, solvente o aditivo, capaz de mostrar unión a un objetivo. La "unión" puede definirse como una asociación de la composición de unión con un objetivo, en donde la asociación resulta en reducción en el movimiento Browniano normal de la composición de unión, en casos en donde la composición de unión puede disolverse o suspenderse en solución. La expresión "variantes conservativamente modificadas" se aplica a secuencias de aminoácidos y de ácido nucleico. Con respecto a secuencias de ácido nucleico particulares, las variantes conservativamente modificadas se refieren a aquellos ácidos nucleicos que codifican para secuencias de aminoácidos idénticas o esencialmente idénticas, o en donde el ácido nucleico no codifica para una secuencia de aminoácidos, para secuencias de ácido nucleico esencialmente idénticas. Debido a la degeneración del código genético, un gran número de ácidos nucleicos funcionalmente idénticos puede codificar para alguna proteína determinada. Como para las secuencias de aminoácidos, el experto en la técnica reconocerá que una sustitución individual a una secuencia de ácido nucleico, péptido, polipéptido o proteína, que sustituya a un aminoácido o un pequeño porcentaje de aminoácidos en la secuencia codificada para un aminoácido conservado, es una "variante conservativamente modificada".

Tablas de sustitución conservativa que proveen aminoácidos funcionalmente similares, son bien conocidas en la técnica. Un ejemplo de una sustitución conservativa, es el intercambio de un aminoácido en uno de los siguientes grupos, por otro aminoácido del mismo grupo (véase la patente de E.U.A. No. ,767,063, expedida a Lee, eí al.; y Kyte y Doolittle (1982) J. Mol. Biol. 157: 105-132): (1) Hidrofóbicos: Norleucina, lie, Val, Leu, Phe, Cys o Met; (2) Hidrofílicos neutros: Cys, Ser, Thr; (3) Ácidos: Asp, Glu; (4) Básicos: Asn, Gln, His, Lys, Arg; (5) Residuos que influyen sobre la orientación de la cadena: Gly, Pro; (6) Aromáticos: Trp, Tyr, Phe; (7) Pequeños aminoácidos: Gly, Ala, Ser. El término "derivado" puede usarse para describir, por ejemplo, la derivación de la estructura de un péptido, oligopéptido o polipéptido de un péptido, oligopéptido o polipéptido precursor, tal como un anticuerpo. En este contexto, derivado abarca, por ejemplo, estructuras peptídicas en donde el péptido tiene la misma secuencia que una secuencia presente dentro del precursor, por ejemplo, en donde el péptido es idéntico al precursor, pero con un truncamiento en el extremo N-terminal, C-terminal o N- y C-terminal del precursor, o con un truncamiento y una fusión, o con sólo una fusión. El término derivado significa también que el péptido tiene la misma secuencia como se encuentra en el precursor, pero con cambios, deleciones o inserciones de aminoácidos, en donde las deleciones o inserciones preservan una propiedad biológica en el péptido que es inherente en el precursor. El término "derivado" abarca situaciones en donde el péptido o polipéptido es sintetizado usando al precursor como un compuesto de partida, y en donde el péptido o polipéptido es sintetizado de novo, usando la estructura del precursor como una guía. La "cantidad efectiva" o "cantidad terapéuticamente efectiva" significa una cantidad suficiente para mejorar un síntoma o signo de un trastorno o condición fisiológica, o una cantidad suficiente para permitir o facilitar un diagnóstico del trastorno o condición fisiológica. Una cantidad efectiva para un paciente o sujeto veterinario particular puede variar, dependiendo de factores tales como la condición que se esté tratando, la salud general del paciente, el método, la vía y dosis de administración, y la severidad de los efectos secundarios (véase, por ejemplo, la patente de E.U.A. No. 5,888,530, expedida a Netti, eí al.). Una cantidad efectiva puede ser el protocolo de dosificación o dosis máxima que evita efectos secundarios o efectos tóxicos significativos. El efecto resultará en una mejora de una medida de diagnóstico, parámetro o señal detectable por cuando menos 5%, usualmente por cuando menos 10%, más usualmente por lo menos 20%, muy usualmente por lo menos 30%, de preferencia por lo menos 40%, más preferiblemente por lo menos 50%, muy preferiblemente por lo menos 60%, idealmente por lo menos 70%, más idealmente por lo menos 80%, y muy idealmente por lo menos 90%, en donde 00% se define como el parámetro de diagnóstico mostrado por un sujeto normal (véase, por ejemplo, Maynard, eí al. (1996) A Handbook of SOPs for Good Clinical Practice, interpharm Press, Boca Ratón, FL; Dent (2001 ) Good Laboratory and Good Clinical Practice, Urch Publ., Londres, Reino Unido). El término "exógeno" se refiere a sustancias que se producen fuera de un organismo, célula o cuerpo humano, dependiendo del contexto. "Endógeno" se refiere a sustancias que se producen dentro de una célula, organismo o cuerpo humano, dependiendo del contexto. El término "trastorno" se refiere a un estado patológico, o una condición que se correlaciona con un estado patológico, o que predispone al mismo. El término "trastorno infeccioso" se refiere, por ejemplo, a un trastorno que resulta de un microbio, bacteria, parásito, virus, y similares, así como a una respuesta inmune inadecuada, ineficaz o patológica al trastorno. El término "trastorno oncogénico" abarca un cáncer, célula transformada, tumor, displasia, angiogénesis, metástasis, y similares, así como una respuesta inmune inadecuada, ineficaz o patológica al trastorno. El término "cantidad efectiva" significa, por ejemplo, una cantidad de un agonista de IL-27, antagonista de IL-27, compuestos de unión o composición de unión, suficiente para mejorar un síntoma o signo de un trastorno, condición o estado patológico. El término "cantidad efectiva" se refiere también a una cantidad de un agonista de IL-27, antagonista o compuesto- o composición de unión, suficiente para permitir o facilitar el diagnóstico de un síntoma o signo de un trastorno, condición o estado patológico. Los términos "inhibidores" y "antagonistas" o "activadores" y "agonistas", se refieren a moléculas inhibidoras o activadoras, respectivamente, por ejemplo, para la activación de, por ejemplo, un ligando, receptor, cofactor, gen, célula, tejido u órgano. Un modulador de, por ejemplo, un gen, un receptor, un ligando o una célula, es una molécula que altera una actividad del gen, receptor, ligando o célula, en donde la actividad puede ser activada, inhibida o alterada en sus propiedades reguladoras. El modulador puede actuar solo, o puede usar un cofactor, por ejemplo, una proteína, ion metálico o molécula pequeña. Los inhibidores son compuestos que disminuyen, bloquean, previenen, demoran la activación, inactivan, desensibilizan o subregulan, por ejemplo, un gen, proteína, ligando, receptor o célula. Los activadores son compuestos que aumentan, activan, facilitan, intensifican la activación, sensibilizan o sobrerregulan, por ejemplo, un gen, proteína, ligando, receptor o célula. Un inhibidor puede definirse también como una composición que reduce, bloquea o inactiva una actividad constitutiva. Un "agonista" es un compuesto que interactúa con un objetivo para causar o promover un incremento en la activación del objetivo. Un "antagonista" es un compuesto que se opone a las acciones de un agonista. Un antagonista previene, reduce, inhibe o neutraliza la actividad de un agonista. Un antagonista puede también prevenir, inhibir o reducir la actividad constitutiva de un objetivo, por ejemplo, un receptor objetivo, aún en donde no exista un agonista identificado. Para examinar el grado de inhibición, por ejemplo, muestras o pruebas que comprenden, por ejemplo, una proteína, gen, célula u organismo determinado, se tratan con un activador o inhibidor potencial, y se comparan con muestras control sin el inhibidor. A las muestras control, es decir, no tratadas con antagonista, se les asigna un valor de actividad relativo de 100%. Se logra inhibición cuando el valor de actividad respecto al control es de aproximadamente 90% o menos, típicamente 85% o menos, más típicamente 80% o menos, muy típicamente 75% o menos, en general 70% o menos, más generalmente 65% o menos, muy generalmente 60% o menos, típicamente 55% o menos, usualmente 50% o menos, más usualmente 45% o menos, muy usualmente 40% o menos, de preferencia 35% o menos, más preferiblemente 30% o menos, aún más preferiblemente 25% o menos, y muy preferiblemente menos de 25%. Se logra activación cuando el valor de actividad respecto al control es de aproximadamente 110%, en general por lo menos 120%, más generalmente por lo menos 140%, muy generalmente por lo menos 160%, con frecuencia por lo menos 180%, más con frecuencia por lo menos dos veces, muy con frecuencia por lo menos 2.5 veces, usualmente por lo menos 5 veces, más usualmente por lo menos 10 veces, de preferencia por lo menos 20 veces, más preferiblemente por lo menos 40 veces, y muy preferiblemente más de 40 veces mayor. Los puntos finales en activación o inhibición pueden monitorearse de la manera siguiente. Lá activación, inhibición y respuesta al tratamiento, por ejemplo, de una célula, fluido fisiológico, tejido, órgano y sujeto animal o humano, puede monitorearse por medio de un punto final. El punto final puede comprender una cantidad o porcentaje predeterminado de, por ejemplo, un índice de inflamación, oncogenicidad o desgranulación o secreción celular, tal como la liberación de una citocina, oxígeno tóxico o una proteasa. El punto final puede comprender, por ejemplo, una cantidad predeterminada de flujo o transporte iónico; migración celular; adhesión celular; proliferación celular; potencial para metástasis; diferenciación celular; y cambio en fenotipo, por ejemplo, cambio en expresión del gen que se relaciona con inflamación, apoptosis, transformación, ciclo celular o metástasis (véase, por ejemplo, Knight (2000) Ann. Clin. Lab. Sci. 30: 145-158; Hood y Cheresh (2002) Nature Rev. Cáncer 2: 91-100; Timme, eí al. (2003) Curr. Drug Targets 4: 251-261 ; Robbins e Itzkowitz (2002) Med. Clin. North Am. 86: 1467-1495; Grady y Markowitz (2002) Annu. Rev. Genomics Hum. Genet. 3: 101-128; Bauer, et al. (2001 ) Glia 36: 235-243; y Stanimirovic y Satoh (2000) Brain Pathol. 10: 113-126). Un punto final de inhibición es generalmente 75% del control o menos, de preferencia 50% del control o menos, más preferiblemente 25% del control o menos, y muy preferiblemente 10% del control o menos. En general, un punto final de activación es por lo menos 150% del control, de preferencia por lo menos dos veces el control, más preferiblemente por lo menos cuatro veces el control, y muy preferiblemente por lo menos 10 veces el control. El término "expresión" se refiere a una medida de ARN mensajero o polipéptido codificado por un gen específico. Las unidades de expresión pueden ser una medida, por ejemplo, del número de moléculas de ARN mensajero o polipéptido/mg de proteína, el número de moléculas de ARN mensajero o polipéptido/célula, en mediciones de expresión por célula, tejido, extracto de células o extracto de tejidos. Las unidades de expresión pueden ser relativas, por ejemplo, una comparación de señal de mamíferos control y experimental, o una comparación de señales con un reactivo que sea específico para el ARN mensajero o polipéptido contra el reactivo que sea no específico. "Hibridación" que sea específica o selectiva, ocurre típicamente cuando exista por lo menos aproximadamente 55% de homología sobre un tramo de por lo menos aproximadamente 30 nucleótidos, de preferencia por lo menos aproximadamente 75% sobre un tramo de aproximadamente 25 nucleótidos, y más preferiblemente por lo menos aproximadamente 90% sobre aproximadamente 20 nucleótidos (véase, por ejemplo, Kanehisa (1984) Nucleic Acids Res. 12: 203-213). La hibridación bajo condiciones severas, por ejemplo, de un primer ácido nucleico con un segundo ácido nucleico, es aquella que: (1 ) usa baja concentración iónica y alta temperatura para lavado, por ejemplo, cloruro de sodio a 0.015 M/citrato de sodio a 0.0015 M/dodecil sulfato de sodio a 0.1 % a 50°C; (2) usa durante la misma un agente desnaturalizante, tal como formamida, por ejemplo, formamida a 50% (vol/vol) con albúmina de suero de bovino a 0.1%/Ficoll® a 0.1 % (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO)/polivinilpirrolidona a 0.1 %/regulador de pH de fosfato de sodio a 50 mM a pH 6.5 con cloruro de sodio a 750 mM, citrato de sodio a 75 mM a 42°C; (3) usa formamida a 50%, 5X SSC (NaCI a 0.75 M, citrato de sodio a 0.075 M), fosfato de sodio a 50 mM (pH 6.8), pirofosfato de sodio a 0.1%, 5X solución de Denhardt, ADN de esperma de salmón sonicado (50 ng/ml), SDS a 0.1 % y sulfato de dextrán a 10% a 42°C, con lavados a 42°C en 0.2X SSC y SDS a 0.1%; o (4) usa un regulador de pH de sulfato de dextrán a 10%, 2X SSC (cloruro de sodio/citrato de sodio) y formamida a 50% a 55°C, seguido de un lavado de alta severidad que consiste de 0.1 X SSC conteniendo EDTA a 55°C (véase patente de E.U.A. No. 6,387, 657, expedida a Botstein, et al.). Las condiciones severas para la hibridación de ácidos nucleicos son una función de la concentración de sales, temperatura, solventes orgánicos y agentes caotrópicos. Las condiciones severas de temperatura incluirán usualmente temperaturas mayores de aproximadamente 30°C, más usualmente mayores de aproximadamente 37°C, típicamente mayores de aproximadamente 45°C, más típicamente mayores de aproximadamente 50°C, de preferencia mayores de aproximadamente 65°C, y más preferiblemente mayores de aproximadamente 70°C. Las condiciones severas de concentración de sales serán usualmente menores de aproximadamente 1 M, más comúnmente menores de aproximadamente 500 mM, usualmente menores de aproximadamente 400 mM, más usualmente menores de aproximadamente 300 mM, típicamente menores de aproximadamente 200 mM, de preferencia menores de aproximadamente 100 mM, y más preferiblemente menores de aproximadamente 80 mM, incluso menores a menos de aproximadamente 20 mM. Sin embargo, la combinación de parámetros es más importante que la medida de cualquier parámetro individual (Wetmur y Davidson (1968) J. Mol. Biol. 31: 349-370). "Condición inmune" o "trastorno inmune" abarca, por ejemplo, inflamación patológica, un trastorno inflamatorio y un trastorno o enfermedad autoinmune. La "condición inmune" se refiere también a infecciones, infecciones persistentes y condiciones proliferativas, tales como cáncer, tumores y angiogénesis, incluyendo infecciones, tumores y cánceres que resisten a la erradicación por el sistema inmune. La "condición cancerosa" incluye, por ejemplo, cáncer, células cancerosas, tumores, angiogénesis y condiciones precancerosas tales como displasia. "Trastorno inflamatorio" significa un trastorno o condición patológica en donde la patología resulta, totalmente o en parte de, por ejemplo, un cambio en número, cambio en velocidad de migración o cambio en activación, de células del sistema inmune. Las células del sistema inmune incluyen, por ejemplo, células T, células B, monocitos o macrófagos, células que presentan antígenos (APCs), células dendríticas, microglia, células NK, células NKT, neutrófilos, eosinófilos, células cebadas, o cualquier otra célula asociada específicamente con la inmunología, por ejemplo, células epiteliales o endoteliales que producen citocinas. El término "trastorno inflamatorio" significa un trastorno o condición patológica en donde la patología resulta, totalmente o en parte, de un incremento en el número y/o incremento en la activación de células del sistema inmune, por ejemplo, de células T, células B, monocitos o macrófagos, macrófagos alveolares, células dendríticas, células NK, células NKT, neutrófilos, eosinófilos o células cebadas. El término "knockout" (KO = con expresión bloqueada), se refiere a la reducción parcial o completa de la expresión de por lo menos una porción de un polipéptido codificado por un gen, por ejemplo, la subunidad p28 o EBI3 de IL-27, en donde el gen es endógeno a una célula individual, células seleccionadas, o todas las células de un mamífero. El término KO abarca también modalidades en donde la función biológica es reducida, pero en donde la expresión no es necesariamente reducida, por ejemplo, un polipéptido p28KO que comprende un polipéptido p28 expresado que contiene un péptido, oligopéptido o polipéptido de inactivación insertado. Las interrupciones en una secuencia codificante o una secuencia reguladora, son abarcadas por la técnica knockout. La célula o mamífero puede ser un "knockout heterocigótico", en donde un alelo del gen endógeno ha sido interrumpido. En forma alternativa, la célula o mamífero puede ser un "knockout homocigótico", en donde ambos alelos del gen endógeno han sido interrumpidos. No se pretende que el término "knockout homocigótico" limite la interrupción de ambos alelos a técnicas idénticas o a resultados idénticos en el genoma. Incluido dentro del alcance de esta invención, es un mamífero en el cual la expresión de uno o ambos alelos p28 ha sido bloqueada. "Ligando" se refiere, por ejemplo, a una molécula pequeña, péptido, polipéptido y molécula asociada a membrana o unida a membrana, o complejo de los mismos, que puede actuar como un agonista o antagonista de un receptor. "Ligando" abarca también un agente que no es un agonista o antagonista, pero que puede unirse al receptor sin que influya significativamente sobre sus propiedades biológicas, por ejemplo, señalización o adhesión. Además, el "ligando" incluye un ligando unido a membrana que ha sido cambiado, por ejemplo, por métodos químicos o recombinantes, a una versión soluble del ligando unido a membrana. Por convención, en donde un ligando está unido a la membrana en una primera célula, el receptor ocurre usualmente en una segunda célula. La segunda célula puede tener la misma identidad o una identidad diferente de la primera célula. Un ligando o receptor puede ser enteramente intracelular, es decir, puede residir en el citosol, núcleo o algún otro compartimiento ¡ntracelular. El ligando o receptor puede cambiar su ubicación, por ejemplo, desde un compartimiento ¡ntracelular hasta la cara exterior de la membrana plasmática. El complejo de un ligando y receptor se denomina un "complejo de receptor-ligando". En donde un ligando y receptor intervienen en una vía de señalización, el ligando ocurre en una posición corriente arriba, y el receptor ocurre en una posición corriente abajo de la vía de señalización. Una "primera cadena polipeptídica" y una "segunda cadena polipeptídica", se refieren a dos cadenas polipeptídicas no enlazadas por medio de un enlace peptídico clásico. Típicamente, la primera cadena polipeptídica comprende un extremo N-terminal y un extremo C-terminal, y la segunda cadena polipeptídica comprende otro extremo N-terminal y otro extremo C-terminal, es decir, en conjunto existen dos extremos N-terminales y dos extremos C-terminales. La primera cadena polipeptídica puede ser codificada por un primer vector, mientras que la segunda cadena polipeptídica puede ser codificada por un segundo vector. La primera cadena polipeptídica y la segunda cadena polipeptídica pueden ser codificadas por un vector, en donde un primer promotor puede ser enlazado operablemente con la primera cadena polipeptídica, y un segundo promotor puede ser enlazado operablemente con la segunda cadena polipeptídica o, en otra modalidad, la expresión de la primera y segunda cadena polipeptídicas puede ser enlazada operablemente al mismo promotor. El término "sensibilidad", por ejemplo, sensibilidad del receptor a un ligando, significa que la unión de un ligando al receptor resulta en un cambio detectable en el receptor, o en eventos o moléculas asociados específicamente con el receptor, por ejemplo, cambio de conformación, fosforilación, naturaleza o cantidad de proteínas asociadas con el receptor, o cambio en expresión genética mediada por el receptor o asociada con el mismo. Se proveen "moléculas pequeñas" para el tratamiento de fisiología y trastornos de tumores y cánceres. El término "molécula pequeña" se define como una molécula con un peso molecular que es menor de 10 kD, típicamente menor de 2 kD, y de preferencia menor de 1 kD. Las moléculas pequeñas incluyen, pero no están limitadas a, moléculas inorgánicas, moléculas orgánicas, moléculas orgánicas que contienen un componente inorgánico, moléculas que comprenden un átomo radiactivo, moléculas sintéticas, peptidomiméticos y miméticos de anticuerpo. Como un agente terapéutico, una molécula pequeña puede ser más permeable a células, menos susceptible a degradación, y menos apta para inducir una respuesta inmune, que las grandes moléculas. Se describen moléculas pequeñas, tales como peptidomiméticos de anticuerpos y citocinas, así como toxinas de molécula pequeña (véase, por ejemplo, Casset, eí al. (2003) Biochem. Biophys. Res. Commun. 307: 198-205; Muyldermans (2001 ) J. Biotechnol. 74: 277-302; Li (2000) Nat. Biotechnol. 18: 1251-1256; Apostolopoulos, eí al. (2002) Curr. Med. Chem. 9: 411-420; Monfardini, eí al. (2002) Curr. Pharm. Des. 8: 2185-2199; Domingues, et al. (1999) Nat. Struct. Biol. 6: 652-656; Sato y Soné (2003) Biochem. J. 371 : 603-608; y la patente de E.U.A. No. 6,326,482 expedida a Stewart, et al.). El término "receptor soluble" se refiere a receptores que son solubles en agua y ocurren, por ejemplo, en fluidos extracelulares, fluidos intracelulares, o débilmente asociados con una membrana. El término receptor soluble se refiere además a receptores que son diseñados para ser solubles en agua. El término "carácter específico de unión", "selectividad de unión", y similares, se refieren a una interacción de unión entre un ligando predeterminado y un receptor predeterminado que permite distinguir entre el ligando predeterminado y otros ligandos, o entre el receptor predeterminado y otros receptores. Que se une "específicamente" o "selectivamente", cuando se hace referencia a un ligando/receptor, anticuerpo/antígeno u otro par de unión, indica una reacción de unión que es determinante de la presencia de la proteína en una población heterogénea de proteínas y otros materiales biológicos. De esta manera, bajo condiciones designadas, un ligando especificado se une a un receptor particular, y no se une en una cantidad significativa a otras proteínas presentes en la muestra. El anticuerpo, o composición de unión derivada del sitio de unión a antígeno de un anticuerpo, se une a su antígeno con una afinidad que es por lo menos dos veces mayor, de preferencia por lo menos 10 veces mayor, más preferiblemente por lo menos 20 veces mayor, y muy preferiblemente por lo menos 100 veces mayor que la afinidad con cualquier otro antígeno. En una modalidad preferida, el anticuerpo tendrá una afinidad que es mayor de aproximadamente 109 litros/mol (véase, por ejemplo, Munsen, eí al. (1980) Analyt. Biochem. 107: 220-239).

II. Generalidades La presente invención provee métodos para la modulación o el tratamiento de muchas condiciones y trastornos inmunes, por ejemplo, psoriasis, artritis reumatoide, enfermedad de Crohn (CD) y ciertos cánceres. Se proveen métodos para el tratamiento y diagnóstico de trastornos caracterizados por la expresión anormal de p28; EBI3; IL-27 y WSX-1/TCCR. Se revisa la fisiología e inmunología de IL-27, receptor de IL-27, y sus subunidades. En resumen, se ha encontrado que la IL-27, o una de sus subunidades, desempeñan una función en la respuesta del interferón-gamma (IFNgamma), diferenciación de células T, trastornos inducidos por el virus de Epstein-Barr, embarazo y colitis ulcerativa (pero no enfermedad de Crohn). En detalle, la IL-27 influye sobre la vía de diferenciación de células T, que implican DCs estimuladas por el FNTalfa, en donde las DCs estimuladas por el FNTalfa entran en contacto con células T no afectadas, y promueven la diferenciación de las células T no afectadas a células T que producen IFNgamma. Si la IL-27 está presente durante la puesta en contacto de las DCs estimuladas por el FNTalfa con las células T no afectadas, esto intensifica la producción de IFNgamma por las células T. De esta manera, la IL-27 contribuye a la diferenciación de células T tipo TH1 no afectadas dependiente de DCs. La IL-27 tiene también una función en la acción del interferón-beta (IFNbeta). La expresión de EBI3 por células dendríticas (DCs) inmaduras y DCs maduras, es estimulada por muchas citocinas. Estas citocinas incluyen interferón-beta (IFNbeta), y tratamiento con IFNbeta, seguido de la combinación de CD40L e IFNgamma (véase, por ejemplo, Nagai, eí al. (2003) J. Immunol. 171 : 5233-5243; y van Seventer, et al. (2002) J. Neuroimmunol. 133: 60-71 ). EBI3 parece tener una función en trastornos inducidos por el virus de Epstein-Barr. EBI3 se expresa con infección de células B por el virus de Epstein-Barr, una infección que resulta en mononucleosis. Se ha propuesto que EBI3, expresada por líneas de células derivadas del linfoma de Hodgkin y en algunos carcinomas nasofaríngeos, es usada por tumores o virus que inhiben la respuesta inmune contra tumores asociados con el virus de Epstein-Barr, es decir, ciertos linfomas de Hodgkin y carcinomas nasofaríngeos. En resumen, se propuso que EBI3 tiene una función inmunosupresora o promotora de TH2 (véase, por ejemplo, Devergne, eí al. (1996) J. Virol. 70: 1143-1153; y Niedobitek, et al. (2002) J. Pathol. 198: 310-316). La IL-27 tiene una función específica en embarazo. La IL-27 es expresada en el útero después de que se inicia la gestación, en donde la expresión de esta citocina ocurre en células NK uterinas. EBI3, una subunidad de la IL-27, muestra expresión incrementada por la placenta, es decir, por trofoblastos diferenciados, y se encuentra en cantidades incrementadas en el suero durante el embarazo (véase, por ejemplo, Croy, eí al. (2003) Reproduction 126: 149-160; Zhang, eí al. (2003) Biol. Reproduction 69: 404-411 ; y Devergne, et al. (2001 ) Am. J. Pathol. 159: 1763-1776). Se preparó un ratón con expresión bloqueada en EBI3 (ratón EBI3KÓ; ratón EBI3"?) para determinar, por ejemplo, las consecuencias sobre la fisiología del sistema inmune. Los ratones EBI3KO mostraron cambios en células T NK invariables (células T iNK) y células T CD4+. Los ratones EBI3KO produjeron números disminuidos de células T iNK. Con los ratones EBI3KO, las células T CD4+ del bazo mostraron más producción de IFNgamma, tras la activación celular, pero menos IL-4, tras la activación celular. Estos efectos indican que los ratones EBI3KO promueven la respuesta tipo TH1 , y que EBI3 contribuye a la respuesta tipo TH2. Los ratones EBI3KO redujeron el número de células T iNK, y redujeron también la capacidad de las células T ¡NK, sobre una base por célula, para producir IL-4. Los ratones EBI3KO también llegaron a ser resistentes a la colitis, según se demuestra por estudios sobre colitis inducida por oxazolona, un modelo de colitis mediada por respuesta inmune tipo TH2, aunque los ratones EBI3KO no resistieron a un modelo de colitis tipo TH1. Asimismo, en otro estudio que indicaba una función para EBI3 en una colitis tipo TH2, EBI3 tuvo expresión intensificada en colitis ulcerativa activa, un trastorno en donde una respuesta tipo TH2 predomina, pero no en enfermedad de Crohn activa, en donde una respuesta tipo TH1 puede predominar (Christ, eí al. (1998) Gastroenterol. 115: 307-313; Niedobitek, et al. (2002) J. Pathol. 198: 310-316). WSX-1/TCCR es expresada en células T CD4\ células T CD8+ y células B CD19+ (véase, por ejemplo, Sprecher, eí al. (1998) Biochem. Biophys. Res. Commun. 246: 82-90). La presente invención identifica a gp130 como una subunidad del receptor de IL-27. gp130 es una subunidad de receptores, es decir, una subunidad de receptores compartida de la familia de citocinas IL-6. De esta manera, gp130 es una subunidad de los receptores para IL-6, factor inhibidor de leucemia (LIF), IL-11 , oncostatina M, factor neurotrófico ciliar (CNTF), cardiotrofina-1 (CT-1 ), citocina tipo cardiotrofina (CLC) y el homólogo de IL-6 viral. Se han identificado versiones solubles de gp130 (véase, por ejemplo, Hammacher, eí al. (1998) J. Biol. Chem. 273: 22701-22707; Hammacher, eí al. (2000) Biochem. J. 345: 25-32; Sánchez-Cuenca, et al. (1999) Immunol. Today 20: 57-59; Gadient y Patterson (1999) Stem Cells 17: 127-137; Peters, eí al. (1996) J. Exp. Med. 183: 1399-1406; y Muller-Newen (2003) Science STKE 2003, pe40). La presente ¡nvención provee métodos para el tratamiento y diagnóstico de enfermedad de Crohn. La enfermedad de Crohn es un trastorno inflamatorio crónico que puede afectar cualquier región del tracto gastrointestinal, por ejemplo, el intestino delgado o el colon. La enfermedad de Crohn implica fístula, mientras que otro trastorno inflamatorio del intestino, la colitis ulcerativa, implica lesiones ulcerativas superficiales. La patología de la enfermedad de Crohn implica citocinas inflamatorias, por ejemplo, IL-1 , IL-16 y factor de necrosis tumoral (FNT). La enfermedad de Crohn se distingue de la colitis ulcerativa, porque la enfermedad de Crohn implica en general una respuesta tipo TH1 con un incremento temprano en IFN, IL-2 e IL-12, con incrementos posteriores en FNTalfa e IL-18. En contraste con la enfermedad de Crohn, en la colitis ulcerativa existe expresión incrementada de IL-5, IL-6, IL-10 e IL-13 y ahí, el patrón de citocinas asemeja una variación de la respuesta tipo TH2. La enfermedad de Crohn y la colitis ulcerativa se distinguen además porque en la primera, las células T en lesiones de mucosas resisten a la apoptosis, mientras que en la última, las células T en lesiones de mucosas son más susceptibles a la apoptosis mediada por Fas. Las mutaciones en el gen NOD2 se asocian con la enfermedad de Crohn humana, mientras que los "genes de la región de antígenos de los leucocitos" y el gen MUC3, se asocian con la colitis ulcerativa humana. Las diferencias en los mecanismos de trastornos inflamatorios del intestino tipo TH1 y tipo TH2, resaltan por el hecho de que están disponibles ambos modelos de ratón tipo TH1 y tipo TH2. Por ejemplo, los ratones a los que se les administran células T CD4+ CD45RBalt0, desarrollan un trastorno mediado por células TH1 que se asemeja a la enfermedad de Crohn humana. Un modelo de enfermedad inflamatoria del intestino dirigida por células TH2, es posible con el uso de un ratón con expresión bloqueada en TCRalfa (véase, por ejemplo, Ardizzone y Porro (2002) J. Int. Med. 252: 475-496; Madsen (2002) Gastroenterol. 123: 2140-2144; Bouma y Strober (2003) Naí. Rev. Immunol 3: 521-533; Stallmach, eí al. (1998) Immunol. Today 19: 438-441 ; Yamamoto, eí al. (2000) J. Immunol. 164: 4878-4882; Targan, eí al. (1997) New Engl. J. Med. 337: 1029-1035; Simpson, et al. (1998) J. Exp. Med. 187: 1225-1234; y Beutler (2001 ) Immunity 15: 5-14). La presente invención provee métodos para el tratamiento y diagnóstico de psoriasis y otros trastornos inflamatorios de la piel, por ejemplo, hipersensibilidad de contacto. La psoriasis, un trastorno común que afecta a aproximadamente 2% de la población mundial, implica descamación de la piel y lesiones pustulares. De los pacientes con psoriasis en los Estados Unidos, aproximadamente un millón requiere terapia con luz ultravioleta o terapia inmunosupresora. Aproximadamente 10% de los pacientes con psoriasis desarrollan también artritis psoriática, una condición debilitante. La psoriasis implica hiperproliferación de queratinocitos e infiltración de glóbulos blancos en la piel. La inflamación de la psoriasis es mediada, por ejemplo, por células T, monocitos y macrófagos, neutrófilos, células cebadas y células que presentan antígenos (APCs), tales como células dendríticas y células de Langerhans (véase, por ejemplo, Yu, eí al. (2002) Dermatol. 204: 94-99; y Jiang, et al. (2001 ) Int. J. Dermatol. 40: 699-703). La hiperproliferación de queratinocitos surge, en parte, de la expresión inadecuada de IL-2, IFNgamma, FNTbeta, IL-5 y otras citocinas. Se ha implicado a la respuesta innata, por ejemplo, que implica al lipopolisacárido bacteriano (LPS; glucolípido), como parte de la etiología de la psoriasis (véase, por ejemplo, Bos y De Rie (1999) Immunology Today 20: 40-46; Ellis, eí al. (2001 ) New Engl. J. Med. 345: 248-255; Bhalerao y Bowcock (1998) Human Mol. Genetics 7: 1537-1545; van de Kerkhof (2000) Clin. Exp. Dermatol. 25: 165; Tanaka, eí al. (2000) Brit. J. Dermatol. 143: 728-732; ?ickoloff (1999) J. Clin. Invest. 104: 1161-1164; Curry, eí al. (2003) Arch. Pathol. Lab. Med. 127: 178-186; Travers, eí al. (1999) J. Clin. Invest. 104: 1181-1189; Greaves y Weinstein (1995) New Engl. J. Med. 332: 581-588; Robert y Kupper (1999) New Engl. J. Med. 341 : 1817-1828; Bos y De Rie (1999) immunol. Today 20: 40-46), Shimizu, et al. (2002) Histochem. Cell Biol. 118: 251-257, Gottleib, eí al. (1995) Nature Med. 1 : 442-447, Abrams, eí al. (2000) J. Exp. Med. 192: 681-693; y Yu, eí al. (2002) Dermatology 204: 94-99). La artritis psoriática, la dermatitis atópica y el asma se asocian con la psoriasis (Mclnnes, eí al. (2001 ) J. Immunol. 176: 4075-4082; Welp, eí al. (1989) Hautarzt 40: 496-500). La presente invención provee métodos para el tratamiento y diagnóstico de aterosclerosis y otros aspectos de enfermedad cardiovascular. Las células inmunes, por ejemplo, células cebadas, células dendríticas, neutrófilos, monocitos y macrófagos, contribuyen a la patología de la aterosclerosis. Se ha vinculado al factor de necrosis tumoral, interleucina-1 y otras citocinas con la etiología, por ejemplo, de aterosclerosis, enfermedad cardiovascular y apoplejía (véase, por ejemplo, Huang, eí al. (2002) Cardiovasc. Res. 55: 150-160; Kelley, eí al. (2000) Mol. Med. Today 6: 304-308; Aicher, eí al. (2003) Circulation 107: 604-611 ; Ozmen, eí al. (2002) Histol. Histopathol. 17: 223-237; Wanders, et al. (1994) Transpl. Int. 7 Supl. 1 : S371-S375; Hallenbeck (2002) Nature Med. 8: 1363-1368; Young, eí al. (2002) Thromb. Haemost. 88: 554-567; y Loppnow, eí al. (2001 ) Shock 1 : 3-9). Además, la presente invención provee métodos para el tratamiento y diagnóstico de artritis, por ejemplo, artritis reumatoide, artritis psoriática, artritis reumatoide juvenil, osteoartritis y espondilitis anquilosante. La artritis reumatoide (RA) es una enfermedad destructiva crónica de las articulaciones, caracterizada por inflamación e hiperplasia sinovial. La enfermedad no puede curarse y resulta en incapacidad. Las células T CD4+ infiltran las articulaciones y estimulan la producción de IL-1 , IL-6 y FNTalfa. Las citocinas producidas estimulan a fibroblastos, osteoclastos y condrocitos para que liberen proteinasas las cuales, a su vez, degradan el cartílago de las articulaciones. La célula cebada es una célula inmune clave implicada en la patología de la RA. Las células cebadas producen factor de necrosis tumoral-alfa (FNTalfa) que inicia una cascada inflamatoria que promueve la expresión de IL-1 e IL-6. La célula cebada activa también a proteasas que degradan la matriz del cartílago. Están disponibles modelos de artritis en ratones, por ejemplo, artritis inducida por colágena (CÍA), ratones que sobreexpresan FNT, y ratones que sobreexpresan IL-1alfa (Choy y Panayi (2001 ) New Engl. J. Med. 344: 907-916; Woolley (2003) New Engl. J. Med. 348: 1709-1711 ; ?iki, eí al. (2001 ) J. Clin. Invest. 107: 1127-1135; Feldmann y Maini (2001) Annu. Rev. Immunol. 19: 163-196). La presente invención provee métodos para el tratamiento y diagnóstico de asma y alergias. La infección con un helminto, por ejemplo, Nippostrongylus, o con el hongo Aspergillus, se asocia en humanos con asma y alergias. Además, la infección con Aspergillus o Nippostrongylus, o el tratamiento con un antígeno del helminto, se ha usado en estudios modelo de asma y alergias. La respuesta inmune a alérgenos del helminto puede ocurrir en fases, por ejemplo, una fase temprana o una fase tardía (véase, por ejemplo, Hurst, et al. (2001 ) J. Immunol. 166: 4922-4930; Hurst, et al. (2002) J. Immunol. 169: 443-453; Mehrad, et al. (1999) J. Immunol. 162: 1633-1640; Soubani y Chandrasekar (2002) Chest 121: 1988-1999; Schuh, eí al. (2002) FASEB J. 16: 1313-1315; Greenberger (2003) Front Biosci. 8: s119-s127; Gibson, eí al. (2003) Eur. Respir. J. 21 : 582-588; Black, eí al. (2001 ) J. Appl. Physiol. 90: 571-578; Palmer, et al. (2002) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 165: 1489-1493; Zou, eí al. (2002) Genome Biol. 3: 20.1-20.13; Abraham, eí al. (1999) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 159: 1205-1214; Jones, eí al. (1998) Can. J. Physiol. Pharmacol. 76: 210-217; Wright, eí al. (1999) J. Pharmacol. Exp. Therapeutics 289: 1007-1014; y D'Brot, eí al. (1989) Am. Rev. Respir. Dis. 139: 915-920). La presente invención contempla también métodos de tratamiento y diagnóstico de trastornos pulmonares, que incluyen los que implican hiperreactividad de vías respiratorias, por ejemplo, por tratamiento con un antagonista de IL-27. La hiperreactividad de vías respiratorias, conocida también como hipersensibilidad de vías respiratorias, que implica estrechamiento inadecuado de vías respiratorias en respuesta a un estímulo, es una característica de varios trastornos de las vías respiratorias, por ejemplo, asma, rinitis alérgica, bronquitis, bronquiolitis y posiblemente trastorno pulmonar obstructivo crónico (COPD). La hiperreactividad puede ser desencadenada, por ejemplo, por infecciones respiratorias, el fumar y alérgenos respiratorios. El asma, un trastorno crónico que puede ser fatal, afecta a aproximadamente uno de siete niños en los Estados Unidos, y da razón de más de 15% de las emergencias pediátricas. Los síntomas implican insuficiencia respiratoria e hipersecreción de moco (véase, por ejemplo, Crain, eí al. (1995) Arch. Pediatr. Adolesc. Med. 149: 893-901 ; Grunig, eí al. (1998) Science 282: 2261-2263; Crystal, eí al. (eds.) (1997) The Lung, Vols. 1-2, 2a. ed., Lippincott-Raven, Filadelfia, PA; Holgate, eí al. (2001 ) Allergy, 2a. ed., Mosby, New York; Marone (1998) Immunol. Today 19: 5-9; y Barnes y Lemanske (2001 ) New Engl. J. Med. 344: 350-362). La hiperreactividad de vías respiratorias se caracteriza por infiltración por células T, eosinófilos, células cebadas, neutrófilos y células que presentan antígenos (APCs), en las vías respiratorias. Las APCs del pulmón incluyen DCs, células B y macrófagos alveolares, cada uno de los cuales puede expresar citocinas y contribuye a la hiperreactividad de las vías respiratorias (véase, por ejemplo, Lawrence, eí al. (1998) J. Pharm. Exp. Thera. 284: 222-227; Alexis, eí ai. (2001 ) Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 280: L369-L375; Akabari, et al. (2002) Nature Medicine 8: 1024-1032; MacLean, et al. (1999) Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 20: 379-387; Hamelmann, eí al. (1999) Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 21 : 480-489; Gonzáles, eí al. (2000) Annals Interna! Medicine 133: 981-991 ; Li, et al. (2002) Pulmonary Pharmacol. Therapeutics 15: 409-416; Zimmermann, et al. (2003) J. Allergy Clin. Immunol. 111 : 227-242; y Riffo-Vázquez y Spina (2002) Pharmacol. Therapeutics 94: 185-211). La COPD es un trastorno que implica infiltración bronquiolar con macrófagos, neutrófilos y células T, por ejemplo, células T CD8+. La COPD, la cuarta causa principal de muerte en Norteamérica, se caracteriza por engrosamiento del músculo liso de las vías respiratorias e inflamación de las vías respiratorias. Esta respuesta parece deberse a la infiltración de monocitos, macrófagos, células T CD4+, células T CD8+ y neutrófilos hacia los pulmones. Los macrófagos alveolares, elevados en COPD, expresan citocinas que, a su vez, promueven la inflamación y el incremento en la activación de células inmunes. La COPD implica bronquitis y enfisema crónicos. El enfisema se caracteriza por la destrucción permanente del parénquima, espacios aéreos distales a los bronquíolos terminales (véase, por ejemplo, Hautamaki, eí al. (1997) Science 277: 2002-2004; Barnes (2000) Chest 117: 10S-14S; Barnes (2003) Annu. Rev. Med. 54: 113-129; Jeffery (1998) Thorax 53: 129-136; y Barnes (2000) New Engl. J. Med. 343: 269-280). Métodos de diagnóstico y tratamiento del cáncer son abarcados por la presente invención. Nótese que se ha mostrado que se usa IL-27 para tratar tumores en ratones (Hisada, eí al. (2004) Cáncer Res. 64: 1152-1156). La presente invención provee métodos de uso de IL-27 para incrementar la producción de FNTalfa, IL-1 alfa y OX40, citocinas que han sido implicadas con una respuesta inmune adecuada contra tumores y con la regresión de tumores. La presente invención provee métodos para tratar cáncer, usando IL-27 para estimular la producción de la respuesta inmune antitumoral que implica a citocinas tales como FNTalfa, IL-1alfa, IL-1 beta y OX40. Los tumores son infiltrados con frecuencia por células T CD4+ y células T CD8+. La mayor infiltración de un tumor con células T se asocia a veces con un mejor pronóstico para el paciente, por ejemplo, en el caso de melanoma y cáncer colorrectal. Un problema con la respuesta inmune a tumores, es que las células T pueden ser incompletamente activadas, anérgicas o inactivadas (Dalerba, eí al. (2003) Crit. Revs. Oncology Hematology 46: 33-57; Ladanyi, eí al. (2004) Clin. Cáncer Res. 10: 521-530; Toomey, et al. (1999) Immunol. Invest. 28: 29-41 ). La IL-1alfa, la IL-1 beta y el FNTalfa tienen efectos antitumorales, que resultan en respuesta inmune intensificada contra el tumor. Se ha encontrado que la IL-1alfa es expresada por muchos tipos de tumores. Los efectos antitumorales del FNTalfa, por ejemplo, resultan de citotoxicidad directa hacia el tumor, pero también por medio de la activación de macrófagos, células T CD8+ y neutrófilos. En contraste, bajo ciertas condiciones, la IL-1 y el FNTalfa pueden tener un efecto pro-tumoral. La IL-1 puede inducir la secreción de factores que promueven el crecimiento e invasividad del tumor. La producción de IL-1 puede que resulte de activación autocrina, incrementando la invasividad. El FNTalfa, la IL-1 alfa y la IL-1beta pueden estimular el crecimiento de ciertos tumores, por ejemplo, tumores ováricos (véase, por ejemplo, Chen, et al. (1998) Cáncer Res. 58: 3668-3676; Woods, eí al. (1998) Cáncer Res. 58: 3132-3141 ; Apte y Voronov (2002) Sem. Cáncer Biol. 12: 277-290; Woodward, eí al. (2002) Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 43: 3144-3152; Smith, et al. (1990) Cáncer Res. 50: 3146-3153; Wu, et al. (1993) Cáncer Res. 53: 1939-1944; Noorda, eí al. (2003) Cáncer 98: 1483-1490; Bazzoni, et al. (2001 ) Cáncer Res. 61 : 1050-1057; Kamada, eí al. (2000) Cáncer Res. 60: 6416-6420; Kaneda, eí al. (1998) Cáncer Res. 58: 290-295; Gnant, et al. (1999) Cáncer Res. 59: 4668-4674; y Suganuma, et al. (1999) Cáncer Res. 59: 4516-4518).

OX40 es un ligando, mientras que OX40R es el receptor correspondiente. La señalización mediada por OX40/OX40R desempeña una función en la respuesta antitumoral. OX40 y OX40R son sobrerregulados en células T que infiltran tumores, pero no son sobrerregulados en células T de sangre periférica. El desencadenamiento de la señalización de OX40/OX40R administrando el ligando OX40, puede resultar en el rechazo de varios tumores. Se ha encontrado que los melanomas y el cáncer de mama humanos contienen células T que expresan OX40, de nuevo implicando a OX40/OX40R en la respuesta antitumoral (véase, por ejemplo, Morris, eí al. (2001 ) Breast Cáncer Res. Treat. 67: 71-80; Hurwitz, eí al. (2000) Curr. Opin.

Immunol. 12: 589-596; y Ladany, et al. (2004) Clin. Cáncer Res. 10: 521-530). Con respecto al cáncer, están disponibles varios métodos de modulación de la respuesta inmune para el tratamiento de cánceres, tumores, metástasis y angiogénesis. Estos métodos incluyen tratamiento con citocinas o anticuerpos anti-citocinas, tales como IL-2, IL-12, factor de necrosis tumoral-alfa (FNTalfa), IFNgamma, factor estimulador de colonias de macrófagos-granulocitos (GM-CSF) y factor de crecimiento transformante (TGF). En donde una célula cancerosa puede producir una citocina que intensifica su propio crecimiento o su propia supervivencia, un anticuerpo anti-citocina puede ser un agente terapéutico adecuado (véase, por ejemplo, Ramírez-Montagut, eí al. (2003) Oncogene 22: 3180-3187; Braun, eí al. (2000) J. Immunol. 164: 4025-4031 ; Shaw, et al. (1998) J. Immunol. 161 : 2817-2824; Coussens y Werb (2002) Nature 420: 860-867; Baxevanis, eí al. (2000) J. Immunol. 164: 3902- 3912; Shimizu, et al. (1999) J. Immunol. 163: 5211-5218; Belardelli y Ferrantini (2002) TRENDS Immunol. 23: 201-208; Seki, eí al. (2002) J. Immunol. 168: 3484-3492; Casares, eí al. (2003) J. Immunol. 171 : 5931-5939; y Oft, eí al. (2002) Nature Cell Biol. 4: 487-494).

III. Agonistas, antagonistas y composiciones de unión La presente invención provee métodos de uso de agonistas y antagonistas de IL-27. Un agonista de IL-27 abarca, por ejemplo, IL-27, una variante de IL-27, muteína, hipercina o peptidomimético para la misma, anticuerpos agonistas para WSX-1/TCCR o gp130, y ácidos nucleicos que codifican para estos agonistas. Los antagonistas de IL-27 incluyen, por ejemplo, anticuerpos para IL-27, anticuerpos para p28 o EBI3, anticuerpos de bloqueo para WSX-1/TCCR o gp130, un receptor soluble basado en la región extracelular de una subunidad de WSX-1/TCCR o gp130, peptidomiméticos para la misma, y ácidos nucleicos que codifican para estos antagonistas.

Pueden usarse también anticuerpos anti-idiotípicos. La presente invención provee métodos de uso de agonistas y antagonistas de p28, agonistas y antagonistas del complejo de p28 y EBI3, agonistas y antagonistas de WSX-1/TCCR, agonistas y antagonistas de gp130, y agonistas y antagonistas del complejo de WSX-1/TCCR y gp130. Una hipercina de IL-27 abarca, por ejemplo, una proteína de fusión que comprenda la secuencia polipeptídica de p28 y EBI3, en donde p28 y EBI3 ocurren en una cadena polipeptídica continua. Las secuencias de p28 y EBI3 pueden estar en cualquier orden en la cadena polipeptídica continua. La proteína de fusión puede contener una secuencia de enlazador, que resida entre las secuencias de p28 y EBI3, en una cadena polipeptídica continua. Regiones de antigenicidad incrementada que pueden usarse para la generación de anticuerpos, pueden encontrarse fácilmente con una gráfica de Parker, usando la serie Vector NTI® (Informax, Inc, Bethesda, MD). Están disponibles anticuerpos para p28, EBI3, WSX-1/TCCR y gp130 (véase, por ejemplo, Pflanz, et al. (2004) J. Immunol. 172: 2225-2231 ; Larousserie, et al. (2004) J. Pathol. 202: 164-171 ; Devergne, et al. (2001) Am. J. Pathol. 159: 1763-1776; y Autissier, eí al. (1998) Int. Immunol. 10: 1881-1889). Se contemplan también anticuerpos que se unen específicamente al complejo de p28 y EBI3, y anticuerpos que se unen específicamente al complejo de WSX-1/TCCR y gp130. Se proveen también receptores solubles que corresponden a un dominio extracelular de WSX-1/TCCR y gp130. El dominio extracelular del complejo WSX-1/TCCR maduro humano, comprende los aminoácidos 33 a 514 de la secuencia de aminoácidos de BC028003 o NM_004843 del GenBank. Este dominio extracelular incluye un dominio de unión clásico a citocinas, y también tres dominios de fibronectina (FN). La invención contempla un receptor soluble que comprende el dominio de unión a citocinas, y ninguno, uno, dos o tres de los dominios de FN (Sprecher, eí al., citado anteriormente). Está disponible la gp130 soluble (véase, por ejemplo, Hui, eí al. (2000) Cytokine 12: 151-155).

Los receptores basados en estas regiones extracelulares no son limitados por estos aminoácidos N-terminales o C-terminales exactos, pero pueden ser más largos o más cortos, por ejemplo, por uno, dos, tres o más aminoácidos, en tanto las propiedades de unión al ligando se mantengan sustancialmente. Se contemplan también proteínas de fusión basadas en los receptores solubles, por ejemplo, para que se facilite la purificación o estabilidad, o para que se provea un dominio funcional, por ejemplo, un polipéptido tóxico. Pueden prepararse anticuerpos monoclonales, policlonales y humanizados (véase, por ejemplo, Sheperd y Dean (eds.) (2000) Monoclonal Antibodies, Oxford Univ. Press, New York, NY; Kontermann y Dubel (eds.) (2001 ) Antibody Engineering, Springer-Verlag, New York; Harlow y Lañe (1988) Antibodies A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, pp. 139-243; Carpenter, eí al. (2000) J. Immunol. 165: 6205; He, eí al. (1998) J. Immunol. 160: 1029; Tang, eí al. (1999) J. Biol. Chem. 27 '4: 27 '37 '1 -27 '37 '8; Baca, eí al. (1997) J. Biol. Chem. 272: 10678-10684; Chothia, eí al. (1989) Nature 342: 877-883; Foote y Winter (1992) J. Mol. Biol. 224: 487-499; y la patente de E.U.A. No. 6,329,511 expedida a Vásquez, eí al.). Se contemplan muteínas y variantes de anticuerpos y receptores solubles, por ejemplo, pegilación o mutagénesis para remover o reemplazar residuos de Asn desamidantes. No es necesaria la purificación del antígeno para la generación de anticuerpos. La inmunización puede llevarse a cabo por inmunización con vectores de ADN; véase, por ejemplo, Wang, eí al. (1997) Virology 228: 278- 284. En forma alternativa, puede inmunizarse a animales con células que posean el antígeno de interés. Pueden aislarse entonces esplenocitos de los animales inmunizados, y pueden fusionarse los esplenocitos con una línea de células de mieloma para producir un hibridoma (Meyaard, eí al. (1997) Immunity 7: 283-290; Wright, eí al. (2000) Immunity 13: 233-242; y Presten, eí al. (1997) Eur. J. Immunol. 27: 1911-1918). Pueden seleccionarse hibridomas resultantes para la producción del anticuerpo deseado por medio de pruebas funcionales o pruebas biológicas, es decir, pruebas que no dependen de la posesión del antígeno purificado. Puede demostrarse que la inmunización con células es superior para la generación de anticuerpos, que la inmunización con antígeno purificado (Kaithamana, eí al. (1999) J. Immunol. 163: 5157-5164). Los anticuerpos se unirán usualmente con por lo menos una KD de aproximadamente 10"3 M, más usualmente por lo menos 10"6 M, típicamente por lo menos 10"7 M, más típicamente por lo menos 10"8 M, de preferencia por lo menos 10"9 M, y más preferiblemente por lo menos 10"10 M, y muy preferiblemente por lo menos 10" 1 M (véase, por ejemplo, Presta, eí al. (2001) Thromb. Haemost. 85: 379-389; Yang, eí al. (2001 ) Crit. Rev. Oncol. Hematol. 38: 17-23; y Camahan, eí al. (2003) Clin. Cáncer Res. (Supl.) 9: 3982s-3990s). Se proveen receptores solubles que comprenden los dominios extracelulares de WSX-1/TCCR o polipéptidos del receptor de gp130. Pueden prepararse receptores solubles, y pueden usarse de acuerdo a métodos estándar (véase, por ejemplo, Jones, eí al. (2002) Biochim. Biophys. Acta 1592: 251-263; Prudhomme, eí al. (2001) Expert Opinión Biol. Ther. 1 : 359-373; y Fernández-Botran (1999) Crit. Rev. Clin. Lab Sci. 36: 165-224). Se proveen también composiciones para ARN de interferencia pequeño (ARNsi) (véase, por ejemplo, Arenz y Schepers (2003) Naturwissenschaften 90: 345-359; Sazani y Kole (2003) J. Clin. Invest. 112: 481-486; Pirollo, eí al. (2003) Pharmacol. Therapeutics 99: 55-57; y Wang, et al. (2003) Antisense Nucí. Acid Drug Devel. 13: 169-189).

IV. Composiciones terapéuticas, y métodos de uso de las mismas La presente invención provee métodos para el tratamiento y diagnóstico de psoriasis, enfermedad de Crohn, artritis reumatoide y cáncer. Para preparar composiciones farmacéuticas o estériles que incluyan un agonista o antagonista de IL-27, el reactivo se mezcla con un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable. Pueden prepararse formulaciones de agentes terapéuticos y de diagnóstico mediante mezclado con vehículos, excipientes o estabilizadores fisiológicamente aceptables en la forma de, por ejemplo, polvos liofilizados, suspensiones, soluciones acuosas, lociones o suspensiones (véase, por ejemplo, Hardman, eí al. (2001 ) Goodman y Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, McGraw-Hill, New York, NY; Gennaro (2000) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott, Williams and Wilkins, New York, NY; Avis, eí al. (eds.) (1993) Pharmaceutical Dosage Forms: Parenteral Medications, Marcel Dekker, NY; Lieberman, et al. (eds.) (1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Marcel Dekker, NY; Lieberman, et al. (eds.) (1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems; Marcel Dekker, NY; Weiner y Kotkoskie (2000) Excipient Toxicity and Safety, Marcel Dekker, Inc., New York, NY). La selección de un régimen de administración para un agente terapéutico depende de varios factores, que incluyen la tasa de renovación de la entidad en el tejido o suero, el nivel de síntomas, la inmunogenicidad de la entidad, y la accesibilidad de las células objetivo en la matriz biológica. De preferencia, un régimen de administración aumenta al máximo la cantidad de agente terapéutico suministrado al paciente consistente con un nivel aceptable de efectos secundarios. Por consiguiente, la cantidad de agente biológico suministrado depende en parte de la entidad particular y la severidad de la condición que se esté tratando. Está disponible una guía en la selección de dosis adecuadas de anticuerpos, citocinas y pequeñas moléculas (véase, por ejemplo, Wawrzynczak (1996) Antibody Therapy, Bios Scientific Pub. Ltd, Oxfordshire, Reino Unido; Kresina (ed.) (1991 ) Monoclonal Antibodies, Cytokines and Arthritis, Marcel Dekker, New York, NY; Bach (ed.) (1993) Monoclonal Antibodies and Peptide Therapy in Autoimmune Diseases, Marcel Dekker, New York, NY; Baert, eí al. (2003) New Engl. J. Med. 348: 601-608; Milgrom, eí al. (1999) New Engl. J. Med. 341 : 1966-1973; Slamon, eí al. (2001 ) New Engl. J. Med. 344: 783-792; Beniaminovitz, eí al. (2000) New Engl. J. Med. 342: 613-619; Ghosh, eí al. (2003) New Engl. J. Med. 348: 24- 32; y Lipsky, eí al. (2000) New Engl. J. Med. 343: 1594-1602). Pueden proveerse anticuerpos, fragmentos de anticuerpos y citocinas por infusión continua, o por dosis a intervalos de, por ejemplo, un día, una semana o 1 a 7 veces por semana. Pueden proveerse dosis intravenosamente, subcutáneamente, tópicamente, oralmente, nasalmente, rectalmente, intramuscularmente, intracerebralmente, intraespinalmente, o por inhalación. Un protocolo de dosis preferido, es uno que incluya la dosis máxima o frecuencia de dosis que evite efectos secundarios no deseables significativos. Una dosis semanal total es en general de por lo menos 0.05 µg/kg de peso corporal, más generalmente de por lo menos 0.2 µg/kg, muy generalmente de por lo menos 0.5 µg/kg, típicamente por lo menos 1 µg/kg, más típicamente por lo menos 10 µg/kg, muy típicamente por lo menos 100 µg/kg, de preferencia por lo menos 0.2 mg/kg, más preferiblemente por lo menos 1.0 mg/kg, muy preferiblemente por lo menos 2.0 mg/kg, óptimamente por lo menos 10 mg/kg, más óptimamente por lo menos 25 mg/kg, y muy óptimamente por lo menos 50 mg/kg (véase, por ejemplo, Yang, eí al. (2003) New Engl. J. Med. 349: 427-434; Herold, eí al. (2002) New Engl. J. Med. 346: 1692-1698; Liu, eí al. (1999) J. Neurol. Neurosurg. Psych. 67: 451-456; y Portielji, eí al. (2003) Cáncer Immunol. Immunother. 52: 133-144). La dosis deseada de un agente terapéutico de molécula pequeña, por ejemplo, un peptidomimético, producto natural o compuesto químico orgánico, es casi igual a la de un anticuerpo o polipéptido, sobre una base en moles/kg de peso corporal. La concentración en plasma deseada de un agente terapéutico de molécula pequeña, es casi igual a la de un anticuerpo, sobre una base en moles/kg de peso corporal. Una cantidad efectiva para un paciente particular puede variar, dependiendo de factores tales como la condición que se esté tratando, la salud general del paciente, el método, la vía y dosis de administración, y la severidad de los efectos secundarios (véase, por ejemplo, Maynard, eí al. (1996) A Handbook of SOPs for Good Clinical Practice, Interpharm Press, Boca Ratón, FL; y Dent (2001 ) Good Laboratory and Good Clinical Practice, Urch Publ., Londres, Reino Unido). Sujetos veterinarios, experimentales o de investigación típicos, incluyen monos, perros, gatos, ratas, ratones, conejos, conejillos de Indias, caballos y humanos. La determinación de la dosis adecuada es hecha por el médico clínico, por ejemplo, usando parámetros o factores conocidos o que se sospecha en la técnica afectan el tratamiento, o que se predice afectan el tratamiento. En general, la dosis comienza con una cantidad un poco menor que la dosis óptima, y se incrementa después en pequeños incrementos, hasta que se logre el efecto deseado u óptimo respecto a cualquier efecto secundarios negativo. Medidas de diagnóstico importantes incluyen aquellas de síntomas de, por ejemplo, la inflamación o el nivel de citocinas inflamatorias producidas. De preferencia, un agente biológico que se usará se deriva de la misma especie que el animal elegido como objetivo para el tratamiento, reduciendo al mínimo de esta manera una respuesta humoral al reactivo. Métodos para la co-administración o el tratamiento con un segundo agente terapéutico, por ejemplo, una citocina, esteroide, agente quimioterapéutico, antibiótico o radiación, son bien conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, Hardman, eí al. (eds.) (2001 ) Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10a. ed., McGraw-Hill, New York, NY; Poole y Peterson (eds.) (2001 ) Pharmacotherapeutics for Advanced Practice: A Practical Approach, Lippincott, Williams & Wilkins, Filadelfia, PA; y Chabner y Longo (eds.) (2001 ) Cáncer Chemotherapy and Biotherapy, Lippincott, Williams & Wilkins, Filadelfia, PA). Una cantidad efectiva de agente terapéutico disminuirá los síntomas típicamente por cuando menos 10%; usualmente por cuando menos 20%; de preferencia por lo menos aproximadamente 30%; más preferiblemente por lo menos 40%, y muy preferiblemente por cuando menos 50%. La vía de administración es, por ejemplo, por aplicación tópica o cutánea, inyección o infusión por las vías intravenosa, intraperitoneal, intracerebral, intramuscular, intraocular, intraarterial, intracerebroespinal, intralesional o pulmonar, o por sistemas de liberación sostenida o un implante. (véase, por ejemplo, Sidman eí al. (1983) Biopolymers 22: 547-556; Langer, eí al. (1981) J. Biomed. Mater. Res. 15: 167-277; Langer (1982) Chem. Tech. 12: 98-105; Epstein, eí al. (1985) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 82: 3688-3692; Hwang, et al. (1980) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 77: 4030-4034; y las patentes de E.U.A. Nos. 6,350,466 y 6,316,024). La presente ¡nvención provee métodos de tratamiento o de diagnóstico de una condición o trastorno proliferativo, por ejemplo, cáncer del útero, cerviz, mama, próstata, testículos, pene, tracto gastrointestinal, por ejemplo, esófago, orofaringe, estómago, intestinos delgado o grueso, colon o recto, riñon, célula renal, vejiga, hueso, médula ósea, piel, cabeza o cuello, hígado, vesícula biliar, corazón, pulmón, páncreas, glándula salival, glándula suprarrenal, tiroides, cerebro, ganglios, sistema nervioso central (SNC) y sistema nervioso periférico (SNP) y sistema inmune, por ejemplo, bazo o timo. La presente invención provee métodos de tratamiento, por ejemplo, de tumores inmunógenos, tumores no inmunógenos, tumores latentes, cánceres inducidos por virus, por ejemplo, cánceres de células epiteliales, cánceres de células endoteliales, carcinoma escamocelular, virus del papiloma, adenocarcinomas, linfomas, carcinomas, melanomas, leucemias, mielomas, sarcomas, teratocarcinomas, cánceres inducidos químicamente, metástasis y angiogénesis. La invención contempla también la reducción de la tolerancia a un antígeno de célula tumoral o célula cancerosa, por ejemplo, modulando la actividad de una célula T reguladora (Treg) (véase, por ejemplo, Ramírez-Montagut, eí al. (2003) Oncogene 22: 3180-3187; Sawaya, eí al. (2003) New Engl. J. Med. 349: 1501-1509; Farrar, eí al. (1999) J. Immunol. 162: 2842-2849; Le, eí al. (2001 ) J. Immunol. 167: 6765-6772; Cannistra y Niloff (1996) New Engl. J. Med. 334: 1030-1038; Osborne (1998) New Engl. J. Med. 339: 1609-1618; Lynch y Chapelle (2003) New Engl. J. Med. 348: 919-932; Enzinger y Mayer (2003) New Engl. J. Med. 349: 2241-2252; Forastiere, eí al. (2001) New Engl. J. Med. 345: 1890-1900; Izbicki, eí al. (1997) New Engl. J. Med. 337: 1188-1194; y Holland, eí al. (eds.) (1996) Cáncer Medicine Encyclopedia of Cáncer, 4a. ed., Academic Press, San Diego, CA). La presente invención provee métodos para el tratamiento de una condición proliferativa, cáncer, tumor o condición precancerosa tal como una displasia, con un agonista o antagonista de IL-27, con por lo menos un agente terapéutico o de diagnóstico adicional. Uno o más agentes terapéuticos o de diagnóstico adicionales pueden seleccionarse, por ejemplo, de una citocina o antagonista de citocina, tal como interferón-alfa o receptor del factor de crecimiento anti-epidérmico, doxorrubicina, epirrubicina, un anti-folato, por ejemplo, metotrexato o fluorouracilo, irinotecano, ciclofosfamida, radioterapia, terapia hormonal o terapia anti-hormonal, por ejemplo, andrógeno, estrógeno, anti-estrógeno, flutamida o dietilestilbestrol, cirugía, tamoxifeno, ifosfamida, mitolactol, un agente alquilante, por ejemplo, melfalán o cis-platino, etopósido, vinorelbina, vinblastina, vindesina, un glucocorticoide, un antagonista del receptor de histamina, un inhibidor de angiogénesis, radiación, un sensibilizador de radiación, antraciclina, alcaloide de vincapervinca, taxano, por ejemplo, paclitaxel y docetaxel, un inhibidor del ciclo celular, por ejemplo, un inhibidor de cinasa dependiente de ciclina, un anticuerpo monoclonal, un complejo de anticuerpo monoclonal y toxina, un adyuvante de células T, trasplante de médula ósea, o células que presentan antígenos, por ejemplo, terapia con células dendríticas. Pueden proveerse vacunas, por ejemplo, como una proteína soluble o como un ácido nucleico que codifique para la proteína (véase, por ejemplo, Le, eí al., (2001 ) J. Immunol. 167: 6765-6772; Greco y Zellefsky (eds.) (2000) Radiotherapy of Prostate Cáncer, Harwood Academic, Amsterdam; Shapiro y Recht (2001 ) New Engl. J. Med. 344: 1997-2008; Hortobagyi (1998) New Engl. J. Med. 339: 974-984; Catalona (1994) New Engl. J. Med. 331 : 996-1004; ?aylor y Hadden (2003) Int. Immunopharmacol. 3: 1205-1215; The Int. Adjuvant Lung Cáncer Trial Collaborative Group (2004) New Engl. J. Med. 350: 351-360; Slamon, eí al. (2001 ) New Engl. J. Med. 344: 783-792; Kudelka, et al. (1998) New Engl. J. Med. 338: 991-992; y van ?etten, eí al. (1996) New Engl. J. Med. 334: 920-921 ).

V. Equipos y reactivos de diagnóstico Están disponibles métodos de diagnóstico para trastornos inflamatorios, por ejemplo, psoriasis, enfermedad de Crohn, artritis reumatoide, asma o alergia, aterosclerosis y cánceres, basados en anticuerpos, hibridación de ácidos nucleicos y el método de PCR. Esta invención provee polipéptidos de IL-27, fragmentos de los mismos, ácidos nucleicos de IL-27, y fragmentos de los mismos, en un equipo de diagnóstico, por ejemplo, para el diagnóstico de trastornos virales que incluyen influenza A, y trastornos virales del tracto respiratorio y de tejidos de mucosas. Se proveen también composiciones de unión, que incluyen anticuerpos o fragmentos de anticuerpos, para la detección de IL-27, y metabolitos y productos de degradación de los mismos. Típicamente, el equipo tendrá un compartimiento que contiene un polipéptido de IL-27, o un fragmento antigénico del mismo, una composición de unión al mismo, o un ácido nucleico, tal como una sonda de ácido nucleico, iniciador o guía molecular (véase, por ejemplo, Rajendran, eí al. (2003) Nucleic Acids Res. 31 : 5700-5713; Cockerill (2003) Arch. Pathol. Lab. Med. 127: 1112-1120; Zammatteo, et al. (2002) Biotech. Annu. Rev. 8: 85-101 ; y Klein (2002) Trends Mol. Med. 8: 257-260). Un método de diagnóstico puede comprender poner en contacto una muestra de un sujeto, por ejemplo, un sujeto de prueba, con una composición de unión que se une específicamente a un polipéptido o ácido nucleico de IL-27 o receptor de IL-27. El método puede comprender además poner en contacto una muestra de un sujeto control, sujeto normal, o tejido normal o fluido del sujeto de prueba, con la composición de unión. Además, el método puede comprender también comparar la unión específica de la composición para el sujeto de prueba con la unión específica de la composición para el sujeto normal, sujeto control, o tejido normal o fluido del sujeto de prueba. La expresión o actividad de una muestra de prueba o sujeto de prueba puede compararse con la de una muestra control o sujeto control. Una muestra control puede comprender, por ejemplo, una muestra de tejido no afectada o no inflamada en un paciente que sufre de un trastorno inmune. La expresión o actividad de un sujeto control o muestra control puede proveerse como un valor predeterminado, por ejemplo, adquirido de un grupo de sujetos control estadísticamente adecuado. El equipo puede comprender, por ejemplo, un reactivo y un compartimiento, un reactivo e instrucciones para su uso, o un reactivo con un compartimiento e instrucciones para su uso. El reactivo puede comprender un agonista o antagonista de IL-27, o un fragmento antigénico del mismo, una composición de unión, o un ácido nucleico en una orientación sentido y/o antisentido. Un equipo para la determinación de la unión de un compuesto de prueba, por ejemplo, adquirido de una muestra biológica o de una colección química, puede comprender un compuesto control, un compuesto marcado, y un método para la separación del compuesto marcado libre del compuesto marcado unido. El compuesto control puede comprender un segmento del polipéptido de IL-27 o receptor de IL-27, o un ácido nucleico que codifique para IL-27 o receptor de IL-27. El segmento puede comprender cero, uno, dos o más fragmentos antigénicos. Una composición que es "marcada" es detectable, ya sea directamente o indirectamente, por medio de métodos espectroscó picos, fotoquímicos, bioquímicos, inmunoquímicos, isotópicos o químicos. Por ejemplo, marcas útiles incluyen 32P, 33P, 35S, 14C, 3H, 125l, isótopos estables, colorantes fluorescentes, reactivos de densidad electrónica, substratos, marcas de epítope o enzimas, por ejemplo, como se usan en ¡nmunoensayos ligados a enzima, o fluorettes (véase, por ejemplo, Rozinov y Nolan (1998) Chem. Biol. 5: 713-728). Pueden usarse pruebas de diagnóstico con matrices biológicas tales como células vivas, extractos de células, lisados de células, células fijadas, cultivos de células, fluidos corporales o muestras forenses. Anticuerpos conjugados útiles para propósitos de diagnóstico o equipo, incluyen anticuerpos acoplados a colorantes, isótopos, enzimas y metales (véase, por ejemplo, Le Doussal, eí al. (1991 ) New Engl. J. Med. 146: 169- 175; Gibellini, et al. (1998) J. Immunol. 160: 3891-3898; Hsing y Bishop (1999) New Engl. J. Med. 162: 2804-2811 ; y Everts, eí al. (2002) New Engl. J. Med. 168: 883-889). Existen varios formatos de prueba, tales como radioinmunoensayos (RÍA), ELISA, y laboratorio en una microplaca (chip) (véase patentes de E.U.A. Nos. 6,176,962 y 6,517,234). Los datos de la expresión génica son una herramienta útil en el diagnóstico y tratamiento de enfermedades y condiciones patológicas (véase, por ejemplo, Li y Wong (2001 ) Genome Informatics 12: 3-13; Lockhart, eí al. (1996) Nature Biotechnol. 14: 1675-1680; Homey, eí al. (2000) J. Immunol. 164: 3465-3470; y Debets, eí al. (2000) J. Immunol. 165: 4950-4956).

VI. Usos La presente invención provee métodos de uso de agonistas y antagonistas de IL-27 y receptor de IL-27 para el diagnóstico, prevención y tratamiento de trastornos inmunes e inflamatorios, que incluyen trastornos de la piel, tracto gastrointestinal, articulaciones y sistema vascular, tales como psoriasis, enfermedad de Crohn, artritis reumatoide, asma, alergias, COPD, hiperreactividad de vías respiratorias y aterosclerosis. La presente ¡nvención abarca también métodos de tratamiento o intensificación de respuesta inmune inadecuada o inapropiada en cánceres, por ejemplo, cáncer de mama y melanoma. Se proveen métodos para modular la respuesta inmune a, por ejemplo, psoriasis, enfermedad de Crohn, artritis reumatoide, asma, alergias, aterosclerosis y cáncer, o la respuesta de una célula durante estas enfermedades, administrando un agonista de IL-27 o un antagonista de IL-27, en donde la administración es, por ejemplo, hacia una célula, fluido biológico, tejido, órgano, sujeto animal o sujeto humano. Están disponibles muchos biomarcadores y métodos para la evaluación de trastornos inflamatorios, por ejemplo, psoriasis, enfermedad de Crohn y artritis reumatoide (véase, por ejemplo, Bresnihan (2003) Arthritis Res. Ther. 5: 271-278; Barnero y Delmas (2003) Curr. Opin. Rheumatol. 15: 641-646; Gionchetti, eí al. (2003) Dig. Dis. 21: 157-167; Wiik (2002) Autoimmune Rev. 1 : 67-72; y Sostegni, eí al. (2003) Aliment Pharmacol. Ther. 17 (Supl. 2): 11-17). Se describen también biomarcadores y métodos para la evaluación del cáncer (véase, por ejemplo, Alison (ed.) (2001) The Cáncer Handbook, Grove's Dictionaries, Inc., St. Louis, MO; Oldham (ed.) (1998) Principies of Cáncer Biotherapy, 3a. ed., Kluwer Academic Publ., Hingham, MA; Thompson, eí al. (eds.) (2001) Textbook of Melanoma, Martin Dunitz, Ltd., Londres, Reino Unido; Devita, eí al. (eds.) (2001 ) Cáncer: Principies and Practice of Oncology, 6a. ed., Lippincott, Filadelfia, PA; Holland, eí al. (eds.) (2000) Hoiland-Frei Cáncer Medicine, BC Decker, Filadelfia, PA; Garrett y Sell (eds.) (1995) Cellular Cáncer Markers, Humana Press, Totowa, NJ; MacKie (1996) Skin Cáncer, 2a. ed., Mosby, St. Louis; Moertel (1994) New Engl. J. Med. 330: 1136-1142; Engleman (2003) Semin. Oncol. 30 (3 Supl. 8): 23-29; y Mohr, et al. (2003) Onkologie 26: 227-233). El amplio alcance de esta invención se entiende mejor con relación a los siguientes ejemplos, los cuales no se pretende limiten la invención a las modalidades específicas.

EJEMPLOS I. Métodos generales Se describen métodos estándar en bioquímica y biología molecular (véase, por ejemplo, Maniatis, eí al. (1982) Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Sambrook y Russell (2001 ) Molecular Cloning, 3a. ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; y Wu (1993) Recombinant DNA, Vol. 217, Academic Press, San Diego, CA). Se incluyen también métodos estándar en Ausubel, eí al. (2001 ) Current Protocols in Molecular Biology, Vols. 1-4, John Wiley and Sons, Inc. New York, NY, que describe la clonación en células bacterianas y mutagénesis de ADN (Vol. 1), clonación en células de mamífero y levaduras (Vol. 2), glucoconjugados y expresión de proteínas (Vol. 3) y bioinformática (Vol. 4). Se describen métodos para la purificación de proteínas, que incluyen inmunoprecipitación, cromatografía, electroforesis, centrifugación y cristalización (Coligan, eí al. (2000) Current Protocols in Protein Science, Vol. 1, John Wiley and Sons, Inc., New York). Se describen análisis químico, modificación química, modificación post-traducción, producción de proteínas de fusión y glucosilación de proteínas (véase, por ejemplo, Coligan, eí al. (2000) Current Protocols in Protein Science, Vol. 2, John Wiley and Sons, Inc., New York; Ausubel, eí al. (2001) Current Protocols in Molecular Biology, Vol. 3, John Wiley and Sons, Inc., NY, NY, pp. 16.0.5-16.22.17; Sigma-Aldrich, Co. (2001 ) Products for Life Science Research, St. Louis, MO; pp. 45-89; Amersham Pharmacia Biotech (2001) BioDirectory, Piscataway, N.J., pp. 384- 391 ). Se describen métodos para la producción, purificación y fragmentación de anticuerpos monoclonales y policlonales (Coligan, eí al. (2001 ) Current Protocols in Immunology, Vol. 1, John Wiley and Sons, Inc., New York; Harlow y Lañe (1999) Using Antibodies, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Harlow y Lañe, citado anteriormente). Están disponibles técnicas estándar para la caracterización de interacciones de ligando/receptor (véase, por ejemplo, Coligan, eí al. (2001) Current Protocols in Immunology, Vol. 4, John Wiley, Inc., New York). Están disponibles métodos para citometría de flujo, que incluyen distribución de células activada por fluorescencia (FACS) (véase, por ejemplo, Owens, eí al. (1994) Flow Cytometry Principies for Clinical Laboratory Practice, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ; Givan (2001) Flow Cytometry, 2a. ed.; Wiley-Liss, Hoboken, NJ; y Shapiro (2003) Practical Flow Cytometry, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ). Están disponibles reactivos fluorescentes adecuados para la modificación de ácidos nucleicos, que incluyen sondas e iniciadores de ácido nucleico, polipéptidos y anticuerpos para su uso, por ejemplo, como reactivos de diagnóstico (véase, por ejemplo, Molecular Probes (2003) Catalogue, Molecular Probes, Inc., Eugene, OR; Sigma-Aldrich (2003) Catalogue, St. Louis, MO). Se describen métodos estándar de histología del sistema inmune (véase, por ejemplo, Muller-Harmelink (ed.) (1986) Human Thymus: Histopathology and Pathology, Springer Verlag, New York, NY; Hiatt, eí al. (2000) Color Atlas of Histology, Lippincott, Williams and Wiikins, Filadelfia, PA; y Louis, eí al. (2002) Basic Histology: Text and Atlas, McGraw-Hill, New York, NY). Están disponibles métodos de uso de modelos animales, por ejemplo, ratones con expresión bloqueada, y pruebas basadas en células para la realización de pruebas, evaluación y selección de agentes de diagnóstico, terapéuticos y farmacéuticos (véase, por ejemplo, Car y Eng (2001) Vet. Pathol. 38: 20-30; Kenyon, eí al. (2003) Toxicol. Appl. Pharmacol. 186: 90-100; Deurloo, eí al. (2001) Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 25: 751-760; Zuberi, eí al. (2000) J. Immunol. 164: 2667-2673; Temelkovski, eí al. (1998) Thorax 53: 849-856; Horrocks, eí al. (2003) Curr. Opin. Drug Discov. Devel. 6: 570-575; y Johnston, eí al. (2002) Drug Discov. Today 7: 353-363). Están disponibles paquetes de software y bases de datos para la determinación, por ejemplo, de fragmentos antigénicos, secuencias guía, plegamiento de proteínas, dominios funcionales, sitios de glucosilación y alineaciones de secuencias (véase, por ejemplo, GenBank, Vector NTI® Suite (Informax, Inc, Bethesda, MD); GCG Wisconsin Package (Accelrys, Inc., San Diego, CA); DeCypher® (TimeLogic Corp., Crystal Bay, Nevada); Menne, eí al. (2000) Bioinformatics 16: 741-742; Menne, eí al. (2000) Bioinformatics Applications Note 16: 741-742; Wren, eí al. (2002) Comput. Methods Programs Biomed. 68: 177-181 ; von Heijne (1983) Eur. J. Biochem. 133: 17-21 ; y von Heijne (1986) Nucleic Acids Res. 14: 4683-4690).

II. Expresión de subunidades de IL-27 y del receptor de IL-27 La expresión de las subunidades de IL-27, es decir, la subunidad p28 y la subunidad EBI3, y de las subunidades del receptor de IL-27, es decir, la subunidad WSX-1/TCCR y la subunidad gp130, se determinó por medio de análisis por PCR en tiempo real Taqman® (cuadro 1 ). Los resultados demuestran la asociación de la expresión incrementada de p28, EBI3 y WSX-1/TCCR con psoriasis; asociación de expresión intensificada de EBI3, WSX-1/TCCR y gp130 con enfermedad de Crohn; y correlación de expresión incrementada de EBI3 y WSX-1/TCCR con artritis reumatoide. Se muestran también asociaciones de expresión incrementada con cáncer de mama, melanoma, carcinoma de colon y aterosclerosis (cuadro 1 ).

CUADRO 1 Expresión de IL-27 y subunidades de IL-27, con análisis por medio de análisis por PCR en tiempo real Taqman®, respecto a la expresión de ubiqultina (1.0) CUADRO 1 (CONTINUACIÓN) El tratamiento de células cebadas humanas primarias obtenidas de sangre de cordón umbilical, con IL-27, estimuló la expresión de muchos genes (cuadro 2). La IL-27 provocó la expresión de muchos genes asociados con trastornos inmunes tales como psoriasis, artritis, enfermedad de Crohn, asma, alergias e hiperreactividad de vías respiratorias (cuadro 2).

CUADRO 2 Determinación, por medio de PCR en tiempo real, de cambios mediados por IL-27 en la expresión énica por células cebadas humanas. Un cambio en expresión de "1.0", significa ningún cambio detectable La presente invención provee métodos para el tratamiento de psoriasis y otros trastornos de la piel, por ejemplo, hipersensibilidad de contacto y dermatitis atópica. La psoriasis se asocia con incrementos en la expresión, por ejemplo, de FNTalfa, IL-1beta, TEASRL (ligando) y TEASR (receptor) (cuadro 3). Se usa terapia con anticuerpos anti-FNTalfa en el tratamiento de psoriasis (véase, por ejemplo, Girolomoni, eí al. (2002) Curr. Opin. Investig. Drugs. 3: 1590-1595; Zabraniecki y Fournie (2001 ) Joint Bone Spine 68: 106-108; Víctor y Gottiieb (2002) J. Drugs Dermatol. 1 : 264-275; y Reich, et al. (2002) J Invest Dermatol. 118: 155-163). TEASRL (conocido también como GITRL) es el ligando, mientras que TEASR (conocido también como GITR) es el receptor, de una vía de señalización que implica a TEASRL y TEASR. TEASR se conoce también, por ejemplo, como receptor del factor de necrosis tumoral inducido por glucocorticoides (GITR) y FNTRSF 18. TEASR es un miembro de la superfamilia de receptores del factor de necrosis tumoral. Un agonista de TEASR puede resultar en proliferación de células T CD4+ y células T CD8+, ya sea por estimulación directa de las células T CD4+ o células T CD8+, o interrumpiendo la supresión mediada por una célula T reguladora (Treg). La Treg puede ser una célula T reguladora CD4+CD25+ (véase, por ejemplo, Shimizu, eí al. (2002) Nature Immunol 3: 135-142; y McHugh, eí al. (2002) Immunity 16: 311-323). En vista de la capacidad de la IL-27 para estimular la expresión de TEASRL (cuadro 2), y la asociación de la expresión intensificada de TEASRL y TEASR con psoriasis (cuadro 3), la presente invención provee un antagonista de IL-27 para el tratamiento de psoriasis.

CUADRO 3 Expresión, por medio de PCR en tiempo real, de TEASRL (ligando) y TEASR (receptor) por análisis Taqman® La presente invención provee métodos para tratar artritis y artritis psoriática. El FNTalfa, el RANKL y la IL-1alfa, expresados a niveles incrementados con tratamiento con IL-27 (cuadro 2), estimulan la producción de osteoclastos, células que digieren y degradan el hueso. RANKL es el activador receptor del ligando Kappa B del factor nuclear. La expresión de RANKL se incrementa en las articulaciones de pacientes humanos con artritis psoriática. La IL-1alfa y la IL-1beta tienen funciones en la patología de la artritis. La presente invención provee métodos para el tratamiento de artritis, por ejemplo, artritis reumatoide, osteoartritis y artritis psoriática, administrando un antagonista de IL-27, en donde se espera que el antagonista reduzca la expresión de FNTalfa y RANKL (cuadro 2) (véase, por ejemplo, Reimold (2002) Curr. Drug Targets Inflamm. Allergy 1: 377-392; Girolomoni, eí al. (2002) Curr. Opin. Investig. Drugs 3: 1590-1595; Ritchlin, eí al. (2003) J. Clin. Invest. 111: 821-831; Nakashima, eí al. (2003) Curr. Opin. Rheumatol. 15: 280-287; Williams, eí al. (2000) J. Immunol. 165: 7240-7245; Arend (2001) Semin. Arthritis Rheum. 30 (5 Supl. 2) 1-6; y Arend (2002) Cytokine Growth Factor Revs. 13: 323-340). La presente invención provee métodos para tratar enfermedad de Crohn, por ejemplo, por el uso de un antagonista de IL-27 que inhiba la producción de OX40 y/o FNTalfa (cuadro 2). Un anticuerpo para OX40 mejoró un modelo de enfermedad de Crohn en animales, mientras que se encontró que incrementó la expresión de OX40 y el ligando de OX40 (OX40L) en el intestino de pacientes con enfermedad de Crohn (véase, por ejemplo, Totsuka, eí al. (2003) Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 284: G595-G603; Souza, eí al. (1999) Gut 45: 856-863; y Stuber, eí al. (2000) European J. Clin. Invest. 30: 594-599). El FNTalfa contribuye a la enfermedad de Crohn, ya que un anticuerpo anti-FNTalfa se usa para el tratamiento de este trastorno (véase, por ejemplo, Reimold (2002) Curr. Drug Targets Inflamm. Allergy 1: 377-392). La ¡nvención provee métodos de tratamiento de asma, alergias y otras condiciones pulmonares. Se ha implicado que el FNTalfa, la IL-1alfa, la IL-1 beta y OX40 contribuyen a la patología de asma, alergias, hiperreactividad de vías respiratorias y COPD. Por ejemplo, ratones deficientes en OX40L, o ratones tratados con anticuerpos anti-OX40L, resisten a respuestas patológicas a alérgenos modelo. Los ratones deficientes en IL-1 resisten también a los esfuerzos por inducir respuesta de hipersensibilidad de vías respiratorias. El nivel del FNTalfa se eleva en pacientes con hiperreactividad bronquial y COPD (véase, por ejemplo, Nakae, eí al. (2003) Int. Immunol. 15: 483-490; Halasz, et al. (2002) Respir. Med. 96: 262-267; Chung (2001 ) Eur.

Respir. J. Supl. 34: 50s-59s; y Hoshino, eí al. (2003) Eur. J. Immunol. 333: 861-869). La presente invención provee métodos para tratar cáncer, administrando un agonista o antagonista de IL-27. Se ha encontrado que el tratamiento con IL-27 estimula la expresión de citocinas u otras moléculas de señalización asociadas con la respuesta antitumoral, por ejemplo, FNTalfa, ÍL-1alfa, IL-1beta y OX40. Muestras de tumores que expresan niveles incrementados de p28, EBI3 o WSX-1/TCCR, indican que la respuesta inmune adecuada al tumor implica señalización mediada por IL-17, e indican que la respuesta antitumoral de ocurrencia natural puede intensificarse administrando un agonista de IL-27. Muestras de tumores que expresan niveles incrementados de p28, EBI3 o WSX-1/TCCR, incluyen cáncer de mama, melanoma y cáncer de colon (cuadro 1 ). Se han descrito otros genes en el cuadro 2. APRIL (un ligando inductor de proliferación) y Blys, son miembros de la familia de ligandos del factor de necrosis tumoral (FNT). La linfotoxina-alfa y beta (LTalfa; LTbeta) son citocinas usadas en el desarrollo de nodulos linfáticos (véase, por ejemplo, Varfolomeev, et al. (2004) Mol. Cellular Biol. 24: 997-1006 ; Novak, eí al. (2002) Blood 100: 2973-2979; Nardelli, eí al. (2002) Leuk. Lymphoma 43: 1367-1373; Shakhov, eí al. (2004) Eur. J. Immunol. 34: 494-503; y Kather, eí al. (2003) Immunology 108: 338-345). lll. La IL-27 media la señalización a través de WSX-1/TCCR y gp130 Varias proteínas receptoras de citocinas fueron apareadas con WSK-1/TCCR. Sólo la combinación de WSX-1/TCCR y gp130 sustentó la transducción de señales en respuesta a la IL-27. La subunidad del receptor sola no es suficiente para sustentar la transducción de señales. Un anticuerpo anti-gp130 humano (anticuerpo anti-hgp130) bloqueó la señalización mediada por IL-27 en una línea de células NK humanas y la proliferación de células T CD4+ no afectadas mediada por IL-27. Subunidades del miembro candidato para la subunidad WSX- 1/TCCR fueron expresadas en células Ba/F3 pre-B de ratón, y evaluadas para fosforilación de STAT1 y STAT3. La línea de células Ba/F3 precursora expresa WSX-1/TCCR (la expresión respecto a la ubiquitina fue de aproximadamente 100,000), pero expresa relativamente poca gp130 (la expresión respecto a la ubiquitina fue de aproximadamente 3). Células Ba/F3 precursoras y células Ba/F3 transfectadas con gp130, fueron estimuladas con IL-3, IL-6/slL-6Ralfa o IL-27, y evaluadas para fosforilación de STAT1. STAT1 fue fosforilado en respuesta a IL-27 sólo con transfección con gp130 (cuadro 4). La respuesta de STAT3 a los varios factores de estimulación fue similar a la de STAT1 (no mostrada). De esta manera, la señalización de células mediada por IL-27 es sustentada por gp130 en células que expresan naturalmente WSX-1/TCCR (cuadro 4).

CUADRO 4 Fosforilación de STAT1 en células Ba/F3 transfectadas o no transfectadas con gp130. ND significa no detectable. Se determinó STAT1-P con un anticuerpo específico La línea de fibroblastos de ratón NIH3T3 expresa gp130, en donde la expresión de gp 30 fue mucho mayor que la expresión de WSX- 1/TCCR, es decir, aproximadamente 1000 veces mayor, determinada por medio de análisis por PCR cuantitativa (cuadro 5). Las células NIH3T3 fueron transfectadas con un vector retroviral que codificaba para WSX-1/TCCR de ratón marcada con señalizador (mWSX-1/TCCR), un vector control, o no transfectadas en lo absoluto. Sólo las células transfectadas con WSX-1/TCCR respondieron a la IL-27 por fosforilación de STAT1 (cuadro 5). Se monitoreó también la fosforilación de STAT3, y los resultados de respuesta fueron similares a los de STAT1 , salvo que la fosforilación de STAT3 con tratamiento con IL-6/slL-6Ralfa fue un poco mayor que la fosforilación de STAT3 con tratamiento con IL-27. De esta manera, la señalización mediada por IL-27 es sustentada por WSX-1/TCCR en células que expresan naturalmente gp130 (cuadro 5).

CUADRO 5 Fosforilación de STAT1 en células NIH3T3 transfectadas o no transfectadas con mWSX-1 marcado con señalizador. ND significa no detectable. Se determinó STAT1-P con un anticuerpo específico Se encontró que un anticuerpo anti-gp130 humano (anticuerpo anti-hgp130) bloquea la respuesta a corto plazo y largo plazo a la IL-27, demostrando de nuevo que la IL-27 señaliza a través de gp130 (cuadro 6). Se terminó la respuesta a corto plazo con células asesinas naturales leucémicas (células NKL) humanas, una línea de células que responde a la IL-27 por fosforilación, por tirosina, de STAT1 y STAT3 (Hibbert, eí al. (2003) J. Interferon Cytokine Res. 23: 513-522). Las células se incubaron con y sin anticuerpo anti-hgp130 (anticuerpo B-T2), seguido de tratamiento con IL-27 (Wijdenes, eí al. (1995) Eur. J. Immunoi. 25: 3474-3481). Las células NKL se preincubaron con anticuerpo anti-hgp130 o un anticuerpo monoclonal control de isotipos. Se usaron anticuerpos a 25, 500 y 10,000 ng/ml (cuadro 6). Las células se estimularon con cantidades de saturación de IL-27, o se dejaron sin estimular. La respuesta a la IL-27, y la inhibición por anti-gp130, demuestra que la señalización de la IL-27 es mediada por gp130, en donde la señalización mediada por gp130 provoca la fosforilación de STAT1 y STAT2 (cuadro 6). Estudios a corto plazo separados demostraron que la IL-27 estimula a monocitos humanos primarios para que fosforilen a STAT1 y STAT3 (datos no mostrados), mientras que un estudio de curso de tiempo, que implica puntos de tiempo a t = 2h, 6h y 24h, demostró que la IL-27 provoca incrementos mensurables en la expresión de IL-1beta, FNTalfa e IL-18, sólo a t = 24h (datos no mostrados). Los monocitos producen IL-27 en respuesta a IL-27, y expresan ambas subunidades del receptor de IL-27, sugiriendo que los monocitos usan una vía autocrina para la autoestimulación.

CUADRO 6 El anticuerpo anti-gp130 previene la señalización de células mediada por IL-27 por células NKL. ND significa que la fosforilación de STAT no fue detectable. La estimulación con IL-27 fue por 10 a 20 minutos Se determinaron los efectos a largo plazo de la IL-27, y la dependencia de estos efectos a largo plazo por gp130, por medio de pruebas de proliferación de células T humanas no afectadas (cuadro 7). Las células T se purificaron por FACS antes de su uso en las pruebas. Se midió la proliferación por incorporación de timidina. Las células T recibieron IL-27 (niveles de saturación), anticuerpo anti-CD3 agonista, anticuerpo anti-CD28 agonista y anticuerpo anti-IL-2 neutralizante, según se indica. Las células se titularon con anticuerpo anti-GP130 o con anticuerpo control. La incorporación de [3H]timidina fue una medida de la proliferación celular. La incorporación máxima de timidina tritiada fue de aproximadamente 21 ,000 cpm. Se encontró inhibición máxima media a una concentración de anticuerpo anti-gp130 de aproximadamente 1.0 ng/ml, mientras que la inhibición máxima (7,000 cpm) se encontró a aproximadamente 30 ng/ml de anticuerpo anti-gp130 (cuadro 7). En donde las células fueron complementadas sólo con medio, la incorporación de tritio fue de cero, es decir, no detectable.

CUADRO 7 Proliferación de células T dependiente de IL-27. (--) significa aditivo no añadido IV. Materiales y métodos hlL-6/shlL-6Ralfa, hlL-2 y mlL-3 recombinantes, fueron de R & D Systems, Inc. (Minneapolis, MN). Están disponibles proteínas de fusión de IL- 27 de ratón y humano recombinantes (Pflanz, eí al., citado anteriormente). El anticuerpo monoclonal anti-hgp130 B-T2 fue del Institute of Biochemistry, RWTH Aachen, Alemania. El anticuerpo policlonal anti-hWSX-1 fue de U. S. Biological, Swampscott, MA. Los anticuerpos para las formas fosforiladas de STAT1 y STAT3 por tirosina fueron de Cell Signaling, Beverly, MA, mientras que los anticuerpos para la detección de STAT1 o STAT3 total fueron de Transduction Labs, Lexington, KY y Santa Cruz Biologicals, Santa Cruz, CA. Las células Ba/F3 precursoras mieloides de ratón y la línea de células NK leucémicas humanas (NKL), fueron cultivadas en RPMI/suero de ternera fetal (FCS) a 10% en presencia de mlL-3 (5 ng/ml) o hlL-2 (5 ng/ml), respectivamente. La línea de fibroblastos de ratón NIH3T3 fue cultivada en DMEM/FCS a 10%. Se prepararon y se cultivaron células T CD4+ primarias humanas no afectadas, según se describe (Pflanz, eí al., citado anteriormente). Se separó sangre de cordón umbilical humano recién aislada en leucocitos mononucleares por centrifugación con Ficoll®/Hypaque®. Se cultivaron células mononucleares de sangre de cordón umbilical en medio de Yseel (Gemini Bioproducts, Woodland, CA) complementado con suero humano a 2%, 100 ng/ml de factor de células madre, y 50 ng/ml de IL-6. Los cultivos se mantuvieron por aproximadamente 7 a 8 semanas con intercambio de medio semanalmente. A las ocho semanas, se complementaron los cultivos con 1 ng/ml de IL-4 y 10 microgramos/ml de IgE humana. A las 9 a 10 semanas los cultivos se cosecharon, y se removieron las células mieloides residuales por depleción, con perlas magnéticas, de células positivas para CD15, CD14 y CD11b (Miltenyi Biotec, Inc., Auburn, CA). Se verificó que la pureza de células cebadas (CD117+, FcepsilonRI) por análisis por FACS, fuese mayor de 97%. Se obtuvieron monocitos humanos primarios por centrifugación por gradiente de densidad de Percoll®, de la cubierta amarilla humana. Las pruebas de fosforilación de STAT por tirosina, fueron como se indica a continuación. En general, se cosecharon células por 12 horas en DMEM/FCS a 2%, y entonces se centrifugaron y se resuspendieron a una densidad de 2.5 x 106 células/ml. Se estimularon las células con las citocinas respectivas a concentraciones de saturación (100 ng/ml) por 15 minutos a 37°C, entonces se enfriaron sobre hielo por 5 minutos, se centrifugaron y se resuspendieron en regulador de pH de lisis (2X PBS complementado con EDTA a 2 mM, Brij 97 a 0.875% (Sigma, St. Louis, MO), NP40 a 0.125% (Sigma), vanadato de sodio a 1 mM, fluoruro de sodio a 1 mM, cocteles completos de inhibidor de proteasa (Roche Applied Science, Indianapolis, IN) y Pefabloc® a 3 mM (Roche Applied Science)). Los lisados se centrifugaron y los sobrenadantes se analizaron por SDS-PAGE y western blot subsiguiente, usando los anticuerpos descritos anteriormente. Las células NKL se incubaron con el anticuerpo respectivo por 20 minutos antes de la estimulación con IL-27. Las infecciones retrovirales se realizaron la manera siguiente. La infección de células Ba/F3 y NIH3T3 con construcciones retrovirales que codificaban para los receptores introducidos respectivamente, se realizó como se describió (Kitamura (1998) Int. J. Hematol. 67: 351-359). En resumen, ADN que codificaba para la porción madura de WSX-1 y el marco de lectura abierto completo de gp130, se amplificó de colecciones de ADNc (Clontech, Mountain View, CA) por tecnología de PCR estándar. El amplicón de gp130 fue clonado en el vector retroviral pMX, el amplicón de WSX-1 fue clonado 3' de una secuencia peptídica guía de CD8 y una secuencia de marca de señalizador en el vector pMX. Las eficiencias de transfección con estas construcciones, fueron usualmente mayores de 80%. Las pruebas de proliferación en células T CD4+ no afectadas, se realizaron de la manera siguiente. Se obtuvieron células CD3+CD45RA distribuidas por FACS, y se sometieron a un experimento de proliferación con cantidades de saturación de IL-27, según se describe (Pflanz, eí al., citado anteriormente). Los anticuerpos se titularon en la prueba. Se analizaron colecciones de ADNc para la expresión de ARN mensajero, usando un protocolo Sybr green (Halfon, eí al. (1998) J. Biol. Chem. 273: 16400-16408; Bolin, et al. (1997) J. Neurosci. 17: 5493-5502). Se preparó ARN mensajero de células Ba/F3 o NIH3T3, usando el equipo RNAeasy® (Qiagen, Valencia, CA). Se usaron los siguientes iniciadores de PCR delantero e inverso. Los iniciadores para gp130 humana, fueron de las bases 2174-2194 (delantero) y las bases 2276-2295 (inverso) de E06613 del GenBank. Los iniciadores para gp130 de ratón, fueron de las bases 1943-1965 (delantero) y 2065-2085 (inverso) de X62646 del GenBank. Los iniciadores para WSX-1/TCCR de ratón, fueron de las bases 1054-1074 (delantero) y 1101-1121 (inverso) de NM_016671 del GenBank. Los iniciadores para WSX-1/TCCR humana, fueron de las bases 1665-1684 (iniciador delantero), y de las bases 1726-1746 (iniciador inverso) de BC028003 del GenBank. Todas las citas de la presente se incorporan en la presente como referencia, al mismo grado como si se indicara que cada publicación o solicitud de patente individual fuese específicamente e individualmente incorporada en la presente como referencia. Muchas modificaciones y variaciones de esta invención, como será evidente para los expertos en la técnica, pueden hacerse para adaptarlas a una situación, material, composición de materia, procedimiento y paso o pasos de procedimiento particulares, para preservar el objetivo, espíritu y alcance de la invención. Se pretende que dichas modificaciones estén dentro del alcance de las reivindicaciones anexas a la misma, sin que se aparten del espíritu y alcance de la invención. Las modalidades específicas descritas en la presente se ofrecen sólo a manera de ejemplo, y la invención no será limitada por los términos de las reivindicaciones anexas, junto con el alcance completo de equivalentes para los cuales dichas reivindicaciones se intitulan; y la invención no será limitada por las modalidades específicas que se han presentado en la presente a manera de ejemplo.

Claims (27)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- El uso de un agonista o antagonista de p28, EBI3 o WSX TCCR, en la elaboración de un medicamento para la modulación de un trastorno o condición inmune, en donde el trastorno o condición comprende: a) una condición inflamatoria de la piel; b) artritis; c) enfermedad de Crohn; d) inflamación o hiperreactividad de vías respiratorias; e) aterosclerosis; o f) un cáncer o tumor no causado por el virus Epstein-Barr.

2.- El uso que se reclama en la reivindicación 1, en donde el antagonista inhibe o previene la unión de IL-27 a un receptor heterodimérico que comprende un complejo de WSX-1/TCCR y gp130.

3.- El uso que se reclama en la reivindicación 1, en donde la condición inflamatoria de la piel comprende: a) psoriasis; o b) dermatitis atópica.

4.- El uso que se reclama en la reivindicación 1, en donde la artritis comprende: a) artritis reumatoide; b) osteoartritis; o c) artritis psoriática.

5.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el trastorno de hiperreactividad de vías respiratorias o inflamación comprende: a) asma; b) alergia; o c) trastorno pulmonar obstructivo crónico (COPD).

6.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el cáncer o tumor comprende: a) cáncer de mama; b) cáncer de colon; o c) melanoma.

7.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el agonista inhibe o mejora el trastorno que comprende un cáncer o tumor.

8.- El uso que se reclama en la reivindicación 6, en donde el cáncer o tumor expresa cantidades detectablemente incrementadas, respecto a la expresión por un tejido control normal, de: a) p28; b) EBI3; o c) WSX- 1/TCCR.

9.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el antagonista mejora la: a) condición inflamatoria de la piel; b) artritis; c) enfermedad de Crohn; d) hiperreactividad de vías respiratorias o inflamación de vías respiratorias; o e) aterosclerosis.

10.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el agonista comprende: a) IL-27; b) hipercina de IL-27; c) p28; d) EBI3; o e) un ácido nucleico.

11.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el ácido nucleico codifica para: a) hipercina de IL-27; b) p28; c) EBI3; d) una primer cadena polipeptídica de p28 y una segunda cadena polipeptídica de EBI3; e) WSX-1/TCCR; o f) WSX/1/TCCR y gp130.

12.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el antagonista comprende una composición de unión de un anticuerpo que une específicamente: a) IL-27; b) p28; c) EBI3; d) WSX-1/TCCR; o e) un complejo de gp130 y WSX-1/TCCR.

13.- El uso que se reclama en la reivindicación 12, en donde la composición de unión de un anticuerpo comprende: a) un anticuerpo policlonal; b) un anticuerpo monoclonal; c) un anticuerpo humanizado, o un fragmento del mismo; d) un fragmento Fab, Fv o F(ab')2; e) un peptidomimético de un anticuerpo; o f) una marca detectable.

14.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el antagonista comprende: a) un receptor soluble derivado de WSX-1/TCCR; b) una molécula pequeña; o c) un ácido nucleico.

15.- El uso que se reclama en la reivindicación 14, en donde el ácido nucleico híbrida específicamente con un polinucleótido que codifica para: a) p28; b) EBI3; o c) WSX-1 /TCCR.

16.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el ácido nucleico comprende: a) un ácido nucleico antisentido; o b) ARN de interferencia pequeño (ARNsi).

17.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el agonista incrementa la expresión de: a) RANKL; b) FNTalfa; c) TEASRL; d) IL-1 alfa o beta; e) OX40; o f) APRIL.

18.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el antagonista disminuye la expresión de: a) RANKL; b) FNTalfa; c) TEASRL; d) IL-lalfa o beta; e) OX40; o f) APRIL.

19.- Un método para el diagnóstico de la condición o trastorno inmune de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado porque comprende poner en contacto una composición de unión con una muestra biológica, en donde la composición de unión se une específicamente a: a) IL- 27, p28, EBI3 o WSX-1/TCCR; b) un complejo de WSX-1/TCCR y gp130; o c) un ácido nucleico que codifica para p28, EBI3 o WSX-1/TCCR; y medir o determinar la unión específica de la composición de unión a la muestra biológica.

20.- Un equipo para el diagnóstico de la condición o trastorno inmune de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado porque comprende un compartimiento y una composición de unión que se une específicamente a: a) IL-27, p28, EBI3 o WSX-1/TCCR; b) un complejo de WSX-1/TCCR y gp130; o c) un ácido nucleico que codifica para p28, EBI3 o WSX-1/TCCR.

21.- Un polipéptido de TCCR aislado combinado con gp130 y con la citocina IL-27 (p28/EBI3).

22.- Un polipéptido de TCCR aislado combinado con un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo que une específicamente dicho polipéptido.

23.- El polipéptido de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el anticuerpo es un anticuerpo policlonal, anticuerpo monoclonal o anticuerpo humanizado.

24.- El polipéptido de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado además porque el fragmento de unión a antígeno del anticuerpo es un fragmento Fab, Fv o F(ab)2.

25.- Un polipéptido de gp130 aislado combinado con un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo que une específicamente dicho polipéptido.

26.- El polipéptido de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque el anticuerpo es un anticuerpo policlonal, anticuerpo monoclonal o anticuerpo humanizado.

27.- El polipéptido de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado además porque el fragmento de unión a antígeno del anticuerpo es un fragmento Fab, Fv o F(ab)2.