MXPA06009283A - Preparacion de aislado de proteina canola y utilizacion en acuacultura - Google Patents

Abstract

Un aislado de proteína canolaútil en acuacultura se forma mediante un procedimiento en el cual se extrae harina de la semilla oleosa de canola para provocar la solubilización de la proteína en la harina de la semilla oleosa de canola para formar una solución proteínica acuosa que tiene un contenido proteínico entre aproximadamente 5 y 40 g/L y un pH entre aproximadamente 5 y 6.8. Después de la separación de la solución proteínica acuosa de la harina de la semilla oleosa de canola, la concentración proteínica se aumenta a al menos aproximadamente 50 g/L mientras que se mantenga la resistencia iónica prácticamente constante mediante la utilización de una técnica selectiva de membranas. La solución proteínica concentrada se seca para proporcionar un aislado de proteína canola que tenga un contenido proteínico de al menos aproximadamente 90%en peso (N x 6.25) d.b.

Description

PREPARACIÓN DE AISLADO DE PROTE?NA CAÑÓLA Y UTILIZACIÓN EN ACUACULTURA REFERENCIA CON LA SOLICITUD RELACIONADA Esta solicitud reivindica la prioridad de conformidad con el 35 USC 119 (e) de la solicitud de patente provisional de los Estados Unidos No. 60/544,346 presentada el 17 de febrero de 2004.

CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con la preparación de aislados de proteína cañóla y su uso en acuacultura.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los aislados de proteína cañóla se pueden formar a partir de la harina de la semilla oleosa de cañóla. En la solicitud de patente de los Estados Unidos co-pendiente No. 10/137,391 presentada el 3 de mayo de 2002 y la publicación del PCT correspondiente No. WO 02/089597, cedida al cesionario de la misma y las exposiciones de la misma se incorporan en la presente como referencia, se describe un método para elaborar aislados de proteína cañóla a partir de la harina de la semilla oleosa de cañóla, estos aislados tienen un contenido proteínico de al menos el 100% en peso (N x 6.25) . El procedimiento implica un proceso de múltiples pasos que comprende extraer harina de la semilla oleosa de cañóla utilizando una solución salina, separando la solución de proteína acuosa resultante de la harina de la semilla oleosa residual, aumentando la concentración proteínica de la solución acuosa hasta al menos aproximadamente 200 g/L mientras que se mantenga la resistencia iónica prácticamente constante al utilizar una técnica selectiva de membranas, diluyendo la solución proteínica concentrada resultante en agua enfriada para provocar la formación de micelas de proteína, sedimentando las micelas de proteína para formar una masa micelar de proteínas (PMM, por sus siglas en inglés) amorfa, viscosa, gelatinosa, similar a gluten, y recuperando la masa micelar de proteínas del sobrenadante que tiene un contenido proteínico de al menos aproximadamente 100% en peso según se determina mediante nitrógeno Kjeldahl (N x 6.25) . En el sentido en que se utiliza en la presente, el contenido proteínico se determina sobre una base de peso en seco. La PMM recuperada se puede secar. En una modalidad del proceso descrito anteriormente y como se describe específicamente en la Solicitud No. 10/137,391, el sobrenadante del paso de sedimentación de la PMM se procesa para recuperar un aislado proteínico que comprende la proteína deshidratada proveniente de la PMM húmeda y el sobrenadante. Este procedimiento se puede llevar a cabo al concentrar inicialmente el sobrenadante utilizando membranas de ultrafiltración, mezclando el sobrenadante concentrado con la PMM húmeda y secando la mezcla. El aislado de proteína cañóla resultante tiene una alta pureza de al menos aproximadamente el 90% en peso de proteína (N x 6.25) , de preferencia al menos aproximadamente el 100% en peso de proteína (N x 6.25). En otra modalidad del proceso descrito anteriormente y como se describe específicamente en la Solicitud No. 10/137,391, el sobrenadante del paso de sedimentación de la PMM se procesa para recuperar una proteína del sobrenadante. Este procedimiento se puede llevar a cabo al concentrar inicialmente el sobrenadante utilizando membranas de ultrafiltración y secando el concentrado. El aislado de proteína cañóla resultante tiene una alta pureza de al menos aproximadamente el 90% en peso de proteína (N x 6.25), de preferencia al menos aproximadamente el 100% en peso de proteína (N x 6.25) .

Los procedimientos descritos en las solicitudes de patente de los Estados Unidos mencionadas anteriormente son esencialmente procedimientos por lotes. En la solicitud de patente de los Estados Unidos copendiente No. 10/298,678 presentada el 19 de noviembre de 2002 y la publicación del PCT correspondiente No. WO 03/043439, cedida al cesionario de la misma y las exposiciones de la misma se incorporan en la presente como referencia, en la misma se describe un proceso continuo para producir los aislados de proteína cañóla. De acuerdo con esto, la harina de la semilla oleosa de cañóla se mezcla continuamente con una solución salina, la mezcla se lleva a través de una tubería mientras se está extrayendo la proteína de la harina de la semilla oleosa de ca óla para formar una solución proteínica acuosa, la solución proteínica acuosa se separa continuamente de la harina de semilla oleosa de cañóla residual, la solución proteínica acuosa se transporta continuamente a través de una operación selectiva de membranas para aumentar el contenido proteínico de la solución proteínica acuosa hasta al menos aproximadamente 200 g/L, mientras que se mantenga la resistencia iónica prácticamente constante, la solución proteínica concentrada resultante se mezcla continuamente con agua enfriada para provocar la formación de micelas proteínicas, y las micelas proteínicas se dejan sedimentar continuamente mientras que el sobrenadante se inunda continuamente hasta que la cantidad deseada de PMM se haya acumulado en el recipiente para sedimentación. La PMM se recupera del recipiente para sedimentación y se puede secar. La PMM tiene un contenido proteínico de al menos aproximadamente 90% en peso según se determina mediante nitrógeno Kjeldahl (N x 6.25) , de preferencia al menos aproximadamente 100% en peso (N x 6.25) . Como se describe en la solicitud de patente de los Estados Unidos No. 10/137,391 mencionada anteriormente, el sobrenadante inundado se puede procesar para recuperar el aislado de proteína cañóla del mismo. Se sabe que la semilla de cañóla contiene entre aproximadamente 10 y 30% en peso de proteínas y se han identificado diversos componentes de proteína diferentes. Estas proteínas se distinguen por diferentes coeficientes de sedimentación (S) . Estas proteínas conocidas e identificadas incluyen una globulina 12S, conocida como cruciferina, y una proteína de acumulación 2S, conocida como napina.

Como se describe en la solicitud de patente de los Estados Unidos copendiente No. 10/413,371 presentada el 15 de abril de 2003 y la publicación del PCT correspondiente No. WO 03/088760, cedida al cesionario de la misma y las exposiciones de la misma se incorporan en la presente como referencia, el aislado de proteína cañóla derivado de la PMM consiste predominantemente de una proteína 7S junto con alguna proteína 12S mientras que el aislado de proteína cañóla derivado del sobrenadante consiste predominantemente de la proteína 2S. En este proceso anterior, los aislados de proteína cañóla se derivan por separado de la solución de proteína cañóla concentrada al precipitar la PMM y al procesar el sobrenadante por separado para obtener cantidades adicionales de solución de proteína cañóla. Cañóla también se conoce como semilla de colza o semilla oleosa de colza.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN En la presente invención, la solución proteínica concentrada que resulta del paso de concentración de proteína se seca directamente sin procesar para producir la PMM y procesar por separado el sobrenadante. Este procedimiento simplifica la producción de un aislado de proteína cañóla que tiene un amplio espectro de proteínas 12S, 7S y 2S. Debido al menor número de pasos de proceso, el aislado se forma de una manera más económica. Por consiguiente, en un aspecto de la presente invención, se proporciona un proceso para preparar un aislado de proteína cañóla que comprende (a) extraer una harina de la semilla oleosa de cañóla para provocar la solubilización de la proteína en la harina de la semilla oleosa de cañóla y formar una solución proteínica acuosa que tiene un contenido proteínico entre aproximadamente 5 y 40 g/L y un pH entre aproximadamente 5 y 6.8; (b) separar la solución proteínica acuosa de la harina de la semilla oleosa de cañóla residual, (c) aumentar la concentración proteínica de la solución proteínica acuosa al menos a aproximadamente 50 g/L mientras que se mantenga la resistencia iónica prácticamente constante utilizando una técnica selectiva de membranas para proporcionar una solución proteínica concentrada; y (d) secar la solución proteínica concentrada para proporcionar un aislado de proteína cañóla que tenga un contenido proteínico de al menos aproximadamente 90% en peso (N x 6.25) sobre una base de peso en seco. El aislado de proteína cañóla producido de acuerdo con la presente invención tiene un perfil de proteína cañóla entre aproximadamente 25 y 55% en peso de proteína cañóla 2S, entre aproximadamente 45 y 75% en peso de proteína cañóla 7S y entre aproximadamente 0 y 15% en peso de proteína cañóla 12S, de preferencia entre aproximadamente 40 y 50% en peso de proteína cañóla 2S, entre aproximadamente 50 y 60% en peso de proteína cañóla 7S y entre aproximadamente 1 y 5% en peso de proteína cañóla 12S. El aislado de proteína cañóla producido de acuerdo con el proceso de la presente se puede utilizar en aplicaciones convencionales de aislados de proteína, tales como por ejemplo, la fortificación proteínica de alimentos procesados, la emulsificación de aceites, formadores de volumen en productos horneados y agentes para formación de espuma en productos que atrapan gases. Además, los aislados de proteína cañóla se pueden formar en fibras de proteína, útiles en los análogos cárnicos, se pueden utilizar como un sustituto de clara de huevo o extendedor en productos alimenticios donde se utiliza clara de huevo como un aglutinante. El aislado de proteína cañóla se puede utilizar como suplemento nutritivo. Otros usos del aislado de proteína cañóla se encuentran en alimentos para mascotas, alimentación de animales, acuacultura y en aplicaciones industriales y cosméticas y en productos para el cuidado personal . Debido a que los aislados de proteína que se forman mediante el proceso de la presente invención en general tienen menor pureza, en particular, un mayor contenido de sal, que se obtienen mediante los procedimientos descritos en las solicitudes de patente de los Estados Unidos mencionadas anteriormente, los mismos de preferencia se utilizan en las aplicaciones no humanas. Un uso particular de los aislados de proteína es como un alimento en acuacultura, como se describe con mayor detalle más adelante. Sin embargo, los aislados de proteína se pueden procesar para reducir el contenido de sal residual mediante cualquier procedimiento conveniente, tal como por ejemplo, mediante diálisis o diafiltración. De acuerdo con otro aspecto de la presente invención, se proporciona una composición alimenticia para acuacultura que comprende un aislado de proteína cañóla producido mediante el método proporcionado en la presente. La composición alimenticia se puede formular especialmente para la alimentación de salmónicos, entre los que se incluyen salmón y trucha.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS Las Figuras ÍA a 1C son perfiles de cromatogramas mediante HPLC de muestras provenientes de un procedimiento de extracción en banco para producir el aislado de proteína cañóla; y Las Figuras 2A y 2B son perfiles de cromatogramas mediante HPLC de un aislado de proteína cañóla llevados a cabo en un procedimiento de extracción a escala en la planta piloto.

DESCRIPCIÓN GENERAL DE LA INVENCIÓN El aislado de proteína cañóla se puede aislar de la harina de semilla oleosa de cañóla ya sea mediante un proceso por lotes o mediante un proceso continuo o mediante un proceso semi-continuo como se describe en general en las solicitudes de patente de los Estados Unidos mencionadas anteriormente. El paso inicial del proceso para proporcionar aislados de proteína cañóla implica solubilizar el material proteínico de la harina de la semilla oleosa de cañóla. El material proteínico recuperado de la harina de semilla cañóla puede ser la proteína que se presenta en la naturaleza en la semilla cañóla o el material proteínico puede ser una proteína modificada mediante manipulación genética aunque posee las propiedades hidrófobas y polares características de la proteína natural. La harina cañóla puede ser cualquier harina cañóla que resulta del retiro del aceite cañóla de la semilla oleosa de cañóla con niveles variables de la proteína sin desnaturalizar, que resulta, por ejemplo, de la extracción de hexano en caliente o los métodos para extrusión de aceite en frío. El retiro del aceite ca óla de la semilla oleosa de cañóla normalmente se efectúa como una operación por separado del procedimiento para recuperación del aislado de proteína descrito en la presente . La solubilización proteínica se efectúa de manera más eficaz utilizando una solución salina de grado alimenticio debido a que la presencia de la sal mejora el retiro de la proteína soluble de la harina de la semilla oleosa. Cuando el aislado de proteína cañóla se destina para usos no alimenticios, tales como por ejemplo en acuacultura, se pueden utilizar químicos que no son de grado alimenticio. La sal normalmente es cloruro de sodio, aunque se pueden utilizar otras sales, tales como por ejemplo, cloruro de potasio. La solución salina tiene una resistencia iónica de al menos aproximadamente 0.05, de preferencia al menos aproximadamente 0.10, para permitir que se lleve a cabo la solubilización de cantidades significativas de la proteína. A medida que la resistencia iónica de la solución salina aumenta, el grado de solubilización proteínica de la proteína en la harina de la semilla oleosa inicialmente aumenta hasta que se alcance un valor máximo. Cualquier aumento posterior en la resistencia iónica no aumenta la proteína total solubilizada . La resistencia iónica de la solución salina de grado alimenticio que provoca la solubilización proteínica máxima varía dependiendo de la sal implicada y la harina de la semilla oleosa seleccionada . Normalmente se prefiere utilizar un valor de resistencia iónica menor de aproximadamente 0.8, y de mayor preferencia un valor entre aproximadamente 0.1 y 0.6. En un proceso por lotes, la solubilización salina de la proteína se efectúa a una temperatura de al menos aproximadamente 5°C y de preferencia hasta 35°C, de preferencia acompañada por agitación para disminuir el tiempo de solubilización que normalmente está entre aproximadamente 10 y 60 minutos. Se prefiere efectuar la solubilización para extraer prácticamente tanta proteína de la harina de la semilla oleosa como sea factible, para proporcionar un alto rendimiento general del producto. El límite de temperatura más bajo de aproximadamente 5°C se selecciona debido a que la solubilización es imprácticamente lenta por debajo de esta temperatura mientras que el límite de temperatura preferido superior de aproximadamente 35°C se selecciona debido a que el proceso se torna antieconómico a niveles de temperatura superiores en un modo por lotes. En un proceso continuo, la extracción de la proteína de la harina de la semilla oleosa de cañóla se lleva a cabo de cualquier manera consistente con efectuar una extracción continua de la proteína de la harina de la semilla oleosa de cañóla. En una modalidad, la harina de la semilla oleosa de cañóla se mezcla continuamente con una solución salina de grado alimenticio y la mezcla se lleva a través de una tubería o conducto que tiene una longitud y a una proporción de flujo durante un tiempo de residencia suficiente para efectuar la extracción deseada de acuerdo con los parámetros descritos en la presente. En este procedimiento continuo, el paso de solubilización salina se efectúa rápidamente, en un tiempo de hasta 10 minutos, de preferencia para efectuar la solubilización para extraer prácticamente tanta proteína de la harina de la semilla oleosa de cañóla como sea factible. La solubilización en el procedimiento continuo de preferencia se efectúa a temperaturas elevadas, de preferencia al menos aproximadamente 35°C, en general hasta aproximadamente 65°C o más. La solución salina acuosa de grado alimenticio en general tiene un pH natural entre aproximadamente 5 y 6.8. Se prefieren los valores de pH entre aproximadamente 5.3 y 6.2. El pH de la solución salina se puede ajustar a cualquier valor deseado dentro de la variación entre aproximadamente 5 y 6.8 para utilizarse en el paso de extracción mediante el uso de cualquier ácido conveniente, normalmente ácido clorhídrico, o álcali, normalmente hidróxido de sodio, según se requiera. La concentración de harina de semilla oleosa en la solución salina de grado alimenticio durante el paso de solubilización puede variar ampliamente. Los valores típicos de concentración se encuentran entre aproximadamente 5 y 15% en p/v. El paso de extracción proteínica con la solución salina acuosa tiene el efecto adicional de solubilizar las grasas que puedan estar presentes en la harina cañóla, lo cual entonces da por resultado en grasas que están presentes en fase acuosa. La solución proteínica que resulta del paso de extracción, en general tiene una concentración proteínica entre aproximadamente 5 y 40 g/L, de preferencia entre aproximadamente 10 y 30 g/L. La solución salina acuosa puede contener un antioxidante . El antioxidante puede ser cualquier antioxidante conveniente, tal como por ejemplo, sulfito de sodio o ácido ascórbico. La cantidad de antioxidante empleada puede variar entre aproximadamente 0.01 y 1% en peso de la solución, de preferencia aproximadamente 0.05% en peso. El antioxidante sirve para inhibir la oxidación de fenólicos en la solución proteínica. La fase acuosa que resulta del paso de extracción entonces se puede separar de la harina cañóla residual, de cualquier manera conveniente, tal como por ejemplo, al emplear una centrifugadora para decantación, seguida por centrifugación y/o filtración en disco para retirar la harina residual. La harina residual separada se puede secar para ser eliminada . El color del aislado de proteína cañóla final se puede mejorar en lo que se refiere al color claro y amarillo menos intenso mediante el mezclado de carbón activado pulverizado u otro agente absorbente de pigmentos con la solución acuosa de proteína separada y retirar posteriormente el adsorbente, convenientemente mediante filtración, para proporcionar una solución proteínica. La diafiltración también se puede utilizar para la eliminación de pigmentos. Este paso de eliminación de pigmentos se puede llevar a cabo bajo cualesquiera condiciones convenientes, en general a la temperatura ambiente de la solución acuosa de proteína separada, empleando cualquier agente absorbente de pigmentos conveniente. Para el carbón activado pulverizado, se emplea una cantidad entre aproximadamente 0.025% y 5% en p/v, de preferencia entre 0.05% hasta 2% en p/v. Cuando la harina de semilla cañóla contiene cantidades significativas de grasa, como se describe en las patentes de los Estados Unidos Nos. 5,844,086 y 6,005,076, cedidas al cesionario de las mismas y los exposiciones de las mismas se incorporan en la presente como referencia, entonces los pasos de desgrasado descritos en la presente se pueden efectuar en la solución acuosa de proteína separada y sobre la solución acuosa de proteína concentrada analizada posteriormente. Cuando se lleva a cabo el paso de mejora de color, este paso se puede llevar a cabo después del primer paso de desgrasado. Como una alternativa para la extracción de la harina de la semilla oleosa con una solución salina acuosa, esta extracción se puede realizar utilizando únicamente agua, aunque la utilización de agua sola tiende a extraer menos proteína de la harina de la semilla oleosa que la solución salina acuosa. Cuando se emplea esta alternativa, entonces la sal, a las concentraciones analizadas anteriormente, se puede agregar a la solución proteínica después de la separación de la harina de la semilla oleosa residual para mantener la proteína en solución durante el paso de concentración descrito posteriormente. Cuando se lleva a cabo un paro para eliminación de color y/o un primer paso para retiro de grasa, la sal en general se agrega después de la realización de estas operaciones.

Otro procedimiento alternativo es extraer la harina de la semilla oleosa con la solución salina de grado alimenticio a un valor de pH relativamente alto superior de aproximadamente 6.8, en general de hasta aproximadamente 9.9. El pH de la solución salina de grado alimenticio, se puede ajustar al valor pH alcalino deseado mediante el uso de cualquier álcali del grado alimenticio conveniente, tal como por ejemplo, una solución acuosa de hidróxido de sodio. Alternativamente, la harina de la semilla oleosa se puede extraer con la solución salina a un pH relativamente bajo por debajo de aproximadamente un pH 5, en general por debajo de aproximadamente pH 3. Cuando se emplea esta alternativa, la fase acuosa resultante proveniente del paso de extracción de la harina de la semilla oleosa entonces se separa de la harina cañóla residual, de cualquier manera conveniente, tal como por ejemplo, empleando una centrifugadora para decantación, seguida por centrifugación y/o filtración en disco para retirar la harina residual. La harina residual separada se puede secar para ser eliminada. La solución acuosa de proteina resultante del paso de extracción a pH alto o bajo entonces el pH se ajusta a la variación entre aproximadamente 5 y 6.8, de preferencia entre aproximadamente 5.3 y 6.2, como se analizó anteriormente, antes de un proceso adicional como se analizará posteriormente. Este ajuste de pH se puede llevar a cabo utilizando cualquier ácido conveniente, tal como por ejemplo, ácido clorhídrico, o álcali, tal como por ejemplo, hidróxido de sodio, según sea adecuado. La solución acuosa de proteína entonces se concentra, normalmente entre aproximadamente 4 y 20 veces, para aumentar la concentración proteínica de la misma mientras que se mantenga la resistencia iónica prácticamente constante. Esta concentración en general se efectúa para proporcionar una solución proteínica concentrada que tenga una concentración proteínica de al menos aproximadamente 50 g/L, de preferencia al menos aproximadamente 200 g/L. El paso de concentración se puede llevar a cabo de cualquier manera conveniente consistente con la operación por lotes o continua, tal como por ejemplo al emplear cualquier técnica selectiva de membranas conveniente, tal como por ejemplo, ultrafiltración o diafiltración, utilizando membranas, tal como por ejemplo, membranas de fibra hueca o membranas de arrollado espiral, con una separación de peso molecular (MWCO) adecuada, tal como por ejemplo, entre aproximadamente 3,000 y 100,000 daltons, de preferencia entre aproximadamente 5,000 y 10,000 daltons, habiendo considerado diferentes materiales y configuraciones de la membrana. Las membranas pueden ser de membranas de fibra hueca o membranas de arrollado espiral. Para operación continua, la dimensión para permitir el grado deseado de concentración a medida que la solución acuosa de proteína pasa a través de las membranas . La solución proteínica concentrada entonces se puede someter a un paso de diafiltración utilizando una solución salina acuosa de la misma molaridad y pH como la solución de extracción. Esta diafiltración se puede efectuar utilizando entre aproximadamente 2 y 20 volúmenes de la solución de diafiltración, de preferencia entre aproximadamente 5 y 10 volúmenes de la solución de diafiltración. En la operación de diafiltración, las cantidades adicionales de contaminación se eliminan de la solución acuosa proteínica mediante el paso a través de la membrana con la impregnación. La operación de diafiltración se puede llevar a cabo hasta que en la impregnación ya no esté presente ninguna cantidad adicional significativa de fenólicos ni color visible. Esta diafiltración se puede efectuar utilizando una membrana que tenga una separación de peso molecular en la variación entre aproximadamente 3,000 y 100,000 daltons, de preferencia entre aproximadamente 5,000 y 10,000 daltons, habiendo considerado los diferentes materiales y configuración de la membrana. Puede estar presente en el medio de diafiltración un antioxidante durante al menos parte del paso de diaflitración . El antioxidante puede ser cualquier antioxidante conveniente, tal como por ejemplo, sulfito de sodio o ácido ascórbico. La cantidad de antioxidante empleada en el medio de diafiltración depende de los materiales empleados y puede variar entre aproximadamente 0.01 y 1% en peso, de preferencia entre aproximadamente 0.05% en peso. El antioxidante sirve para inhibir la oxidación de fenólicos presentes en la solución concentrada del aislado de proteína cañóla. El paso de concentración y el paso de diafiltración se pueden llevar a cabo a cualquier temperatura conveniente, en general entre aproximadamente 20° y 60°C, y durante el periodo de tiempo para efectuar el grado deseado de concentración. La temperatura y otras condiciones utilizadas a algún grado dependen del equipo de membrana utilizado para llevar a cabo la concentración y la concentración proteínica deseada de la solución. La concentración de la solución proteínica a la concentración preferida sobre aproximadamente 200 g/L en este paso no sólo aumenta el rendimiento del proceso a los niveles anteriores de aproximadamente el 40% en los términos de la proporción proteínica extraída que se recupera como el aislado proteínico deshidratado, de preferencia superior a aproximadamente 80%, aunque también disminuye la concentración salina del aislado proteínico final después del secado. La capacidad para controlar la concentración salina del aislado es significativa en aplicaciones del aislado donde las variaciones de las concentraciones salinas afectan las propiedades funcionales y sensoriales en una aplicación en alimentos específicos. Como es bien sabido, las técnicas selectivas por membrana para ultrafiltración y similares permiten que las especies de bajo peso molecular pasen a través de las mismas impidiendo que pasen las especies de peso molecular superior. Las especies de bajo peso molecular incluyen no sólo las especies iónicas de la sal de grado alimenticio sino que también los materiales de bajo peso molecular extraídos del material fuente, tales como por ejemplo, carbohidratos, pigmentos y factores anti-nutritivos, así como también cualesquiera formas de proteína de bajo peso molecular. La separación de peso molecular de la membrana normalmente se selecciona para asegurar la retención de una proporción significativa de la proteína en la solución, mientras que permita que los contaminantes pasen a través habiendo considerado los diferentes materiales y configuraciones de la membrana. La solución proteínica concentrada y opcionalmente diafiltrada se puede someter a una operación de desgrasado adicional, si se requiere, como se describe en las patentes de los Estados Unidos Nos. 5,844,086 y 6,005,076. La solución proteínica concentrada y opcionalmente diafiltrada se puede someter a una operación para eliminación de color como una alternativa a la operación para eliminación de color como se describió anteriormente. En la presente se puede utilizar carbón activado pulverizado así como también carbón activado granulado (GAC) . Otro material que se puede utilizar como un agente absorbente de color es polivinilpirrolidona. El paso de tratamiento con el agente absorbente de color se puede llevar a cabo bajo cualesquiera condiciones adecuadas, en general a la temperatura ambiente de la solución de proteína cañóla. Para el carbón activado pulverizado, se puede utilizar una cantidad entre aproximadamente 0.025% y 5% en p/v, de preferencia entre aproximadamente 0.05% y 2% en p/v. Cuando se utiliza polivinilpirrolidona como el agente absorbente de color, se puede utilizar una cantidad entre aproximadamente 0.5 y 5% en p/v, de preferencia entre aproximadamente 2 y 3% en p/v. El agente absorbente de color se puede retirar de la solución de proteína cañóla mediante cualquier medio conveniente, tal como por ejemplo, mediante filtración. La solución proteínica concentrada y opcionalmente diafiltrada resultante del paso para eliminación de color opcional se puede someter a pasteurización para exterminar cualesquiera bacterias que pudieran haber estado presentes en la harina original como resultado del almacenamiento o de otra manera, y se extrae de la harina en la solución del aislado de proteína cañóla en el paso de extracción.

Esta pasteurización se puede llevar a cabo bajo cualesquiera condiciones de pasteurización deseadas. En general, la solución proteínica concentrada y opcionalmente diafiltrada se calienta a una temperatura entre aproximadamente 55° y 70°C, de preferencia entre aproximadamente 60° y 65°C, durante aproximadamente 10 hasta aproximadamente 15 minutos, de preferencia aproximadamente 10 minutos. La solución proteínica concentrada pasteurizada entonces se puede enfriar para un procesamiento adicional como se describirá posteriormente, de preferencia a una temperatura entre aproximadamente 25 y 40°C. La solución proteínica concentrada resultante del paso de concentración, el paso de diafiltración opcional, el paso para eliminación de color y el paso para desgrasado opcional luego se seca mediante cualquier técnica conveniente, tal como por ejemplo, secado por aspersión o liofilización, a una forma deshidratada para proporcionar un aislado de proteína cañóla que tenga un contenido proteínico de al menos aproximadamente el 90% en peso de proteína (N x 6.25), de preferencia al menos aproximadamente el 100% en peso de proteína (N x 6.25) , y está prácticamente sin desnaturalizar (según se determina mediante calorimetría de exploración diferencial) .

El aislado de proteína cañóla tiene un perfil de proteína cañóla entre aproximadamente 25 y 55% en peso de proteína cañóla 2S, entre aproximadamente 45 y 75% en peso de proteína cañóla 7S y entre aproximadamente 0 y 15% en peso de proteína cañóla 12S, de preferencia entre aproximadamente 40 y 50% en peso de proteína cañóla 2S, entre aproximadamente 50 y 60% en peso de proteína cañóla 7S y entre aproximadamente 1 y 5% en peso de proteína cañóla 12S. Como se mencionó anteriormente, un uso potencial del aislado de proteína cañóla se encuentra en la acuacultura. En la producción de salmónicos en granja, se tiene en cuenta la alimentación para aproximadamente el 35 y 60% de los gastos de explotación y aproximadamente la mitad del costo del alimento proviene de las fuentes de proteína. Las harinas de pescado de alta calidad se utilizan como la fuente predominante de proteína en las dietas para salmónicos debido a que los mismos son muy apetitosos y tienen altos niveles de proteína digerible y energía y excelentes perfiles de aminoácido y ácido graso . Sin embargo, las harinas de pescado tienen calidad, disponibilidad y precio variables. La calidad se ve afectada por el tipo y frescura de la materia prima y las condiciones de procesamiento y almacenamiento, así como también la proporción de materiales solubles a torta de filtro-prensa y el nivel de antioxidantes. Se predice que el costo de la harina de pescado aumentará debido a las demandas aumentadas para el cultivo de peces y crustáceos, alimentos para mascotas y alimentos típicos para ganado. Ya que la rentabilidad de la acuacultura depende de la relación entre el costo de producción y el valor en el mercado del producto criado en granjas, los mayores precios de la harina de pescado se traducirán en costos de producción aumentados y por lo tanto en reducidos márgenes de ganancia. Una forma de reducir el costo de producción es a través del desarrollo de nuevos productos proteínicos más económicos para reemplazar parcial o totalmente la harina de pescado en las dietas para salmónicos. Una fuente de un sustituto para la harina de pescado son las harinas de semillas oleosas, incluyendo la harina de la semilla oleosa de cañóla. Estas harinas tienen una composición química muy constante y el costo de las alimentos es menor que la mitad de las harinas de pescado de alta calidad sobre una base de proteína por kilogramo. Además, la harina de la semilla oleosa de cañóla tiene una excelente valuación con base en el perfil de aminoácidos esenciales requerido por el pez, según se establece en la Tabla 6 posteriormente. Sin embargo, existen desventajas con respecto al uso de la harina de la semilla oleosa de cañóla que se deben a la presencia de factores antinutritivos (ANF), incluyendo ácido fítico, glucosinolatos , y compuestos fenólicos y fibra insoluble, que reducen la palatabilidad y capacidad de digestión de la harina. Un estudio inédito calculó el valor nutritivo de un concentrado de proteína cañóla (74% en peso de la proteína) para la trucha arco iris { Oncorhynchus myki ss) en salmón de agua dulce y del Atlántico { Sa.lmo sa.la.r) en agua de mar. Por lo que se refiere a la capacidad de digestión de la proteína, el producto de proteína cañóla tuvo un coeficiente de capacidad de digestión de la proteína mejor que la harina de pescado, un coeficiente de capacidad de digestión de energía similar a la harina de pescado y una energía digerible calculada similar la harina de pescado. El producto de proteína cañóla, incluso concentraciones proteínicas menores que las óptimas, mostró la misma proporción de crecimiento e ingestión de alimento como un material alimenticio comercial. La proporción de eficacia proteínica (PER) es el indicador positivo individual más significativa para todas las preparaciones de proteína. El producto de proteína cañóla utilizado en el estudio inédito tuvo concentraciones proteínicas menores que las óptimas que son el resultado de dificultades de procesamiento aunque, no obstante, la dieta con el producto de proteína cañóla tuvo una PER comparable a una dieta inicial que fue una dieta de investigación especial y una dieta comercial especial. La PER de la dieta comercial especial fue estadísticamente la misma que el producto de proteína cañóla y los valores iniciales de la PER. Estos resultados no se pueden alcanzar con la proteína de soya, ya sea en la forma de un concentrado o aislado. Habiendo considerado la distribución proteínica en el producto de la invención y la provisión de un verdadero aislado proteínico mediante el procedimiento descrito en la presente, se espera que los resultados en la alimentación mejorados, en comparación con aquellos alcanzados en el estudio inédito, se puedan alcanzar para salmónicos mediante la utilización del producto de la invención. Cuando se forma el aislado de proteína cañóla mediante el secado de la solución proteínica concentrada, el producto contiene una concentración significativamente mayor de sal residual que el aislado vía el procedimiento de la PMM analizado en la solicitud de patente de los Estados Unidos No. 10/137,391 de la técnica anterior mencionada anteriormente. La presencia de la sal no es perjudicial para ciertos usos del aislado proteínico, por ejemplo, al utilizarlo en acuacultura. Sin embargo, cuando la presencia de la sal es perjudicial para el uso pretendido del aislado de proteína cañóla, la sal se puede quitar al dializar o diafiltrar una solución acuosa de la proteína, la cual puede estar en la forma de la solución de proteína cañóla concentrada, diafiltrada opcionalmente, antes del secado.

EJEMPLOS Ejemplo 1: Este Ejemplo ilustra el procedimiento de la invención para la provisión de aislados de proteína cañóla.

Se agregaron 150 kg de harina de semilla oleosa de cañóla comercial lote AL022 a 1010.5L de solución salina O.lM (NaCl) a 19.8°C y se mezcló durante 30 minutos para proporcionar una solución acuosa de la proteína. A la mitad del mezclado (15 minutos), se agregaron 0.05% en peso o 500g p/v de ácido ascórbico como un antioxidante. El pH de la extracción fue 6.12 sin hacer ajuste al pH natural de la solución salina. Con el fin de retirar la harina de la solución extraída, la suspensión de harina se hizo pasar sobre una banda de filtro de vacío y fue el resultado una solución de 790L con un contenido proteínico promedio de 1.74% (17.4 g/L). Esta solución luego se hizo pasar a través de una centrífuga desenlodadora y una prensa filtro con alojamiento de almohadillas de 2.0 um con el fin de clarificar adicionalmente la solución proteínica. El extracto proteínico clarificado final tuvo un volumen de 780L y un contenido proteínico de 1.58% en peso (15.8 g/L) . Una alícuota de 700L de la solución proteínica clarificada luego se sometió a ultrafiltración (UF) en un sistema de 2 membranas utilizando membranas enrolladas de 5 espirales con difluoruro de polivinildieno (PVDF) . Estas membranas tienen una variación MWCO de 5000 Daltons. La reducción de volumen total fue de 700L inferior a 32L o una reducción en volumen de 21.8 veces. Los 32L resultantes de la solución proteínica concentrada o el reténtate tuvieron un contenido proteínico promedio de 25.10% en peso (251 g/L). El reténtate del paso de UF se pasteurizó a 60°C durante 10 minutos y las alícuotas luego se secaron en un deshidratador de aspersión APV. El contenido proteínico final del producto deshidratado fue del 93.08% en peso como esté y sobre una base de peso en seco del 95.46% en peso (N x 6.25) . (Los valores porcentuales de nitrógeno se determinaron utilizando un Determinador de Nitrógeno Leco FP528). El lote se designó BW-AL022-I02- 03A.

Ejemplo 2; Este Ejemplo describe la preparación de una muestra a escala de laboratorio del aislado de proteína cañóla. 75 g de la misma harina de cañóla como se utilizó en el Ejemplo 1 se agregaron a 500 mL de una solución salina 0.10 M (15% p/p) y la mezcla se agitó vigorosamente durante 30 minutos a 220 rpm en un agitador giratorio. El extracto, que contuvo 1.99% en peso de proteína, se centrifugó durante 20 minutos a 10,000 rpm y se filtró a través de papel filtro crepado- rizado . 350 ml del filtrado se concentraron en una unidad de ultrafiltración Amicon utilizando una membrana poliétersulfona de 5,000 MWCO (PES) hasta que se recolectaron 150 ml del reténtate. El reténtate se diafiltró (DF) con 350 L de solución salina 0.1 M para producir 75 ml del reténtate DF que contuvo 6.24% en peso de la proteína. El reténtate se dializó utilizando Spectra/Por 6 hacia una tubería de 8,000 MWCO a temperatura refrigerada. La muestra dializada se congeló y luego se liofilizó. El aislado de proteína cañóla resultante tuvo un volumen proteínico del 101% en peso (N x 6.25) .

Ejemplo 3; Este Ejemplo proporciona . el análisis proteínico de los aislados de proteína cañóla producidos en los Ejemplos 1 y 2. El análisis mediante HPLC se condujo sobre los aislados de proteína cañóla preparados como se describió en los Ejemplos 1 y 2. Los cromatogramas mediante HPLC de la extracción en banco, el permeado DF en banco y el aislado de proteína cañóla dializado mediante DF UF en banco se muestran en las Figuras ÍA, IB y ÍC, respectivamente. Los cromatogramas mediante HPLC de las muestras BW-AL022-I02 -03A en dos fechas diferentes se muestran en las Figuras 2A y 2B. El análisis de los aislados de proteína cañóla preparados como se describe en los Ejemplos 1 y 2 se encuentra en las Tablas 1 a 5 posteriormente. La Tabla 5 contiene el análisis de aminoácidos de las muestras en comparación con los aislados de proteína cañóla derivados de la PMM típica (C300) y los derivados del sobrenadante (C200), preparados como se describe en la solicitud de patente de los Estados Unidos copendiente No. 10/266,701 presentada el 9 de octubre de 2002, cedida al cesionario de la misma y la exposición de la misma se incorpora en la presente como referencia. Como se puede observar a partir de estos datos, el aislado en banco (Ejemplo 2) muestra una proporción mayor de la proteína que el aislado 102 (Ejemplo 1) , con base en las áreas pico. Ambos indican que las proteínas globulares (7S, 12S, >12S, y la sub-unidad) comprenden aproximadamente 2/3ras. áreas pico de la proteína total, con las albúminas (2S y pronapina) contribuyendo la otra l/3ra. Otros componentes encontrados en los cromatogramas mediante HPLC indican un nivel de fitato relativamente mayor en el aislado en banco, con un contenido fenólico menor (y varios) , con base en las áreas pico. Este resultado indica que el aislado en banco contuvo menos contenido de ácido fenólico libre que el aislado 102. Las diferencias de color, con base en A330. pueden ser debidas a los fenólicos unidos en la proteína, que no se pueden retirar sobre las membranas de filtro. El perfil 102 HPLC-SEC (Figura 2, Tabla 2) permaneció principalmente sin cambio desde la exploración inicial hecha el 19 de septiembre de 2003, a la ejecución más reciente el 18 de diciembre de 2003, con excepción de ácido ascórbico. El ácido ascórbico se oxidó con el tiempo y se redujo en cantidad, como se determina por el área pico, sobre este lapso de tiempo. Como resultado, los otros componentes aumentaron en proporción, como se muestra, aunque esto tuvo poco efecto sobre las proporciones proteínicas . Los análisis mediante HPLC-SEC de las muestras en banco, (Extracto, Permeado UF, Permeado DF, Reténtate DF y reténtate FD dializado DF resolubilizado) (Figura 1, Tabla 1), indica que los pasos de UF, DF y diálisis retiraron la mayoría de los fenólicos y componentes varios, aunque fue menos eficaz con el retiro de ácido fítico. El ácido fítico tiende a tener una fuerte asociación con la proteína. Aún así, se observó ácido fítico en los cromatogramas mediante HPLC permeados en banco lo cual indica el retiro parcial a través de las membranas (tal vez del 20 al 30% del total) . El aislado del Ejemplo 1 contuvo sal y otros minerales como se muestra, aumentando aproximadamente el 3% del peso en seco final del aislado (Tabla 3) . No se detectaron elementos tóxicos. Los resultados muestran que el aislado en banco es superior en proteína, debido a la DF y a los pasos de diálisis utilizados en la preparación de esta muestra. Los resultados del análisis de aminoácidos se convirtieron a "gramos por 100 gramos de aminoácidos" en las Tablas 4A y 4B. También se muestran las desviaciones promedio y estándar e indican mínimas diferencias. Esto se espera debido a que los pasos de DF y diálisis retiraron las no proteínas, lo cual no podría afectar el equilibrio de aminoácidos de cualquier manera significativa a menos que haya muchos de los aminoácidos y péptidos libres. La Tabla 5 compara los perfiles de aminoácidos de la muestra actual con los resultados de estudios anteriores. Los retentates actuales son muy similares en composición los retentates anteriores (a partir de las harinas A8 y AlO) así como también una muestra de Purateína proveniente de la harina AlO. La Purateína es una mezcla de la PMM y Superteína y debe ser similar al análisis de reténtate. La Tabla 5 también muestra los perfiles de aminoácidos C200 y C300 (harina AlO). El reténtate y las muestras de Purateína quedan entre estos dos aislados, lo cual se podría esperar. La lisina es un aminoácido esencial que tiene poca abundancia para cereales. Las semillas oleosas, en particular cañóla, tienden a tener niveles mayores de lisina. El análisis del reténtate reveló una cantidad significativa de lisina y esto podría mejorar la calidad nutritiva de este aislado, (incluso para alimento para peces u otro no humano) . La composición de aminoácidos esenciales es bastante alta para el aislado del reténtate, como se muestra la parte inferior de la Tabla 5.

En conjunto, el análisis muestra que el reténtate, C500, es un aislado con una composición de aminoácidos de calidad que varía entre C200 y C300. Este aislado tuvo bajos niveles de no proteínas, y el estudio en banco mostró que las sales, fenólicos y otras substancias desconocidas se retiraron mediante ultrafiltración. La diaf iltración y diálisis pueden mejorar esta eliminación de no proteínas, como se muestra por los datos de extracción en banco. Sin embargo, esto no se requirió para producir un aislado, como se muestra por los resultados 102.

SUMARIO DE LA EXPOSICIÓN En el sumario de la exposición, se proporciona un proceso novedoso para la preparación de aislados proteínicos de la semilla oleosa de cañóla que tenga usos múltiples, incluyendo la acuacultura. Dentro del alcance de la invención son posibles modificaciones.

TABLA 1A Muestra C500, UF DF FD, Lab #21,681, 17-19 de Dic/03 TABLA I B TABLA le Muestra C500,1% en P/V Lab #21, 681 n.d. = no realizado, UF = ultrafiltrado, DF = diafiltrado, FD = liofilizado, AU = Unidades de Absorbancia Globulinas = > 12S +12S +7S + sub-unidad TABLA 2 A Muestra C500, BW-AL022-I02-03A #1 SD, Lab #20, 576, Dic. 19/03 TABLA 2 B Muestra C500, Lab #20, 576, Resultados HPLC-SEC TABLA 2 c Muestra C500, 1 % P/V Lab #20,576 n.d. = no realizado, UF = ultrafiltrado, DF = diafiltrado, SD = secado por aspersión, AU = Unidades de Absorbancia Globulinas = > 12S +12S +7S + sub-unidad TABLA 3 Resultados externos a nivel de laboratorio para BW-AL022-I02-03A #1 C500 Lab #20,576, Dic.23/03 1ncluye la estimación de cloruro para sodio. Tanto el plomo como el cadmio están por debajo de los límites umbral.

TABLA 4A Resumen de aminoácidos del retentante de Cañóla por parte de Burcon NutraScience Obsérvese que las dos muestras son aislados de proteína, con base en la proteína recién preparada (N x 6.25) y no sobre la base de análisis de aminoácidos. Los análisis de aminoácidos normalmente dan por resultado en la pérdida de algo de nitrógeno a través de la desaminación de la glutamina y la asparigina.

TABLA 4 B (fc. e = 11 aminoácidos esenciales aa = aminoácidos * El ácido glutámico y el ácido aspártico en su mayor parte son glutamina y asparagina desa inadas.

TABLA 5 Mi.

Purateína es una combinación de C200 y C300, cerca de la composición esperada de C500. Los análisis actuales son ligeramente bajos para treonina e histidina y ligeramente mayores para ácido glutámico. En general, los análisis son muy similares y quedan entre los análisis típicos para C200 y C300, como se esperaba.

TABLA 6 Requerimientos de aminoácidos de los Retentates Teleost contra Burcon en g/1 OOg de la proteína 1D.P. Bureau & C.Y. Cho, Fish Nutrition Research Laboratory, Dept. of Animal & Poultry Science, University of Guelph, Guelph, Ontario, Canadá,

Claims (13)

1. REIVINDICACIONES 1. Un proceso para preparar un aislado de proteína cañóla caracterizado por: (a) extraer una harina de la semilla oleosa de cañóla para provocar la solubilización de la proteína en la harina de la semilla oleosa de cañóla y formar una solución proteínica acuosa que tiene un contenido proteínico de 5 a 40 g/L y un pH de 5 a 6.8; (b) separar la solución proteínica acuosa de la harina de la semilla oleosa de cañóla residual, (c) aumentar la concentración proteínica de la solución proteínica acuosa al menos a 50 g/L mientras que se mantenga la resistencia iónica substancialmente constante mediante la utilización de una técnica selectiva de membranas para proporcionar una solución proteínica concentrada; y (d) deshidratar la solución proteínica concentrada para proporcionar un aislado de proteína cañóla que tenga un contenido proteínico de al menos 90% en peso (N x 6.25), de preferencia al menos 100% en peso, sobre una base de peso en seco.
2. 2. El proceso según la reivindicación 1, caracterizado porque el aislado de proteína cañóla tiene un perfil de proteína cañóla que es de 25 a 55% en peso de la proteína cañóla 2S, de 45 a 75% en peso de la proteína cañóla 7S y de 0 a 15% en peso de la proteína cañóla 12S, de preferencia es de 40 a 50% en peso de la proteína cañóla 2S, de 50 a 60% en peso de la proteína cañóla 7S y de 1 a 5% en peso de la proteína cañóla 12S.
3. 3. El proceso según la reivindicación 1 ó 2 que se lleva a cabo en un modo por lotes y se caracteriza porque la extracción de la harina de la semilla oleosa de cañóla se efectúa mediante la utilización de una solución salina acuosa, de preferencia contiene un antioxidante, tiene una resistencia iónica de al menos 0.05, de preferencia de 0.1 a 0.6, y un pH de 5 a 6.8, de preferencia de 5.3 a 6.2, a una temperatura de al menos 5°C, de preferencia mediante la agitación de la solución salina acuosa durante 10 a 60 minutos, de preferencia a una concentración de harina de la semilla oleosa de cañóla en la solución salina acuosa que es de 5 y 15% en peso, para producir una solución proteínica acuosa que tiene concentración proteínica de 5 a 40 g/L, de preferencia de 10 a 30 g/L.
4. 4. El proceso según la reivindicación 1 ó 1, que se lleva a cabo sobre una base continua y se caracteriza porque el paso de extracción se efectúa al: (i) mezclar continuamente la harina de la semilla oleosa de cañóla con una solución salina acuosa, que contiene de preferencia un antioxidante, que tiene una resistencia iónica de al menos 0.05, de preferencia de 0.1 a 0.6, y un pH de 5 a 6.8, de preferencia de 5.3 a 6.2, a una temperatura de 5 ° a 65°C, de preferencia al menos 35°C, de preferencia a una concentración de la harina de semilla oleosa en la solución salina acuosa en el paso de mezclado de 5 a 10% en p/v, y (ii) conducir continuamente la mezcla a través de una tubería extrayendo la proteína de la harina de la semilla oleosa de cañóla para formar una solución proteínica acuosa que tiene un contenido proteínico de 5 a 40 g/L, de preferencia de 10 a 30 g/L, en un período de tiempo de hasta 10 minutos.
5. 5. El proceso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque después de la separación de la solución proteínica acuosa proveniente de la harina de semilla cañóla residual, la solución proteínica acuosa se somete a un paso para la eliminación de pigmento, de preferencia mediante la diafiltración de la solución proteínica acuosa o al mezclar un agente adsorbente de pigmentos, de preferencia carbón activado pulverizado, con la solución proteínica acuosa y retirar posteriormente el agente adsorbente de pigmentos proveniente de la solución proteínica acuosa .
6. 6. El proceso según la reivindicación 1 ó 2, caracterizado porque la harina de la semilla oleosa se extrae con agua y posteriormente a la misma se agrega sal a la solución proteínica acuosa resultante para proporcionar una solución proteínica acuosa que tiene una resistencia iónica de al menos 0.05, de preferencia 0.1 a 0.6.
7. 7. El proceso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque el paso de concentración se efectúa mediante ultrafiltración para producir una solución proteínica concentrada que tiene un contenido proteínico de al menos 200 g/L.
8. 8. El proceso según malquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque la solución proteínica concentrada se somete a diafiltración utilizando una solución salina acuosa que tiene la misma resistencia iónica utilizada en el paso de extracción, de preferencia utilizando 2 a 20 volúmenes, de preferencia 5 a 10 volúmenes de la solución de diafiltración, de preferencia al menos parcialmente en presencia de un antioxidante.
9. 9. El proceso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque la solución proteínica concentrada se somete a un paso para eliminación de color, de preferencia utilizando carbón activado granulado o polivinilpirrolidona.
10. 10. El proceso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque la solución proteínica concentrada se somete a un paso de pasteurización, de preferencia al calentar la solución proteínica concentrada a una temperatura de 55° hasta 70°C durante 10 a 15 minutos.
11. 11. El proceso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, que incluye formular el aislado deshidratado de proteína cañóla como una composición alimenticia para utilizarse en acuacultura, de preferencia para alimentar salmónicos .
12. 12. Una composición alimenticia para acuacultura que comprende un aislado de proteína cañóla producido mediante el método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, de preferencia formulada para alimentar salmónicos.
13. 13. La composición alimenticia según la reivindicación 12, caracterizada porque el aislado de proteína cañóla tiene un contenido proteínico de al menos el 90% en peso y un perfil de proteína cañóla que es de 25 a 55% en peso de la proteína cañóla 2S, de 45 a 75% en peso de la proteína cañóla 7S y de 0 a 15% en peso de la proteína cañóla 12S, de preferencia al menos el 100% en peso y un perfil de proteína cañóla que es de 40 a 50% en peso de la proteína cañóla 2S, de 50 a 60% en peso de la proteína cañóla 7S y de 1 a 5% en peso de la proteína cañóla 12S.