MXPA01007574A - Inhibidores tace de tiol de sulfonamida acetilenica - Google Patents

Abstract

Se proporcionan compuestos de fórmula (B):(Ia), o (Ib), (Ic) en los cuales las variables están definidas aquímismo, que sonútiles en condiciones de enfermedades mediadas por TNF-alfa, tales como artritis reumatoide, osteoartritis,.sépsis, SIDA, colitis ulcerativa, esclerósis múltiple, enfermedad de Crohn, y pérdida degenerativa de cartílago.

Description

INHIBIDORES TACE DE TIOL DE SÜLFONAMIDA ACETILENICA CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a tioles de sulfonamida arilo acetilenicos los cuales actúan como inhibidores de la enzima convertidora de TNF-a (TACE) . Los compuestos de la presente invención son útiles en condiciones de enfermedades mediadas por TNF-a, tales como artritis reumatoide, osteoartritis, sepsis, SIDA, colitis ulcerativa, esclerosis múltiple, enfermedad de Crohn y pérdida de cartílago degenerativa .

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La enzima convertidora de TNF-a (TACE) cataliza la formación de TNF-a a partir del enlace de la membrana de la protelna precursora de TNF-a. La TNF-a es una citocina pro-inflamatoria que se considera tiene un papel en la artritis reumatoide [Shire, M. G. ; Muller, G. W.) Exp . Opin . Ther.

Patente 1998, 8(5), 531; Grossman, J. M.; Brahn, E. J". Women ' s Heal th 1997, 6 ( 6 ) , 627; Isomaki, P. Punnonen, J. Ann. Med. 1997, 29, 499; Camussi, G. ; Lupia, E. Drugs, 1998, 55(5), 613.] choque séptico [Mathison, et al. ". Clin . Invest . 1988, 81, 1925; Miethke, et al. ". Exp . Med. 1992, REF: 131147 Rechazo de injertos [Piguet, P. F. ; Grau, G. E. et al J. Exp. Med. 1987, 166, 1280.], caquexia [Beutler, B.; Cerami, A. Ann. Rev. Biochem. 1988, 57, 505.] anorexia, inflamación [Ksontini, R, ; Mackay, S.L.D.; Moldawer, L. L. Arch . Surg. 1998, 133, 558.], Falla cardíaca congestiva [Packer, M. Circulation, 1995, 92(6), 1379; Ferrari, R.; Bachetti, T.; et al. Circulación Circulation, 1995, 92(6), 1479.], daño por reperfusión post-lsquémica, enfermedades inflamatoria del sistema nervioso central, enfermedad intestinal inflamatoria, resistencia a la insulina [Hotamisligil, G. S.; Shargill, N. S.,- Spiegel an, B. .; et al Science, 1993, 259, 87.] e infección HIV [Peterson, P. K.; Gekker, G.; et al . J. Clin. Invest. 1992, 89, 574; Pallares-Trujillo, J. ; Lopez-Soriano, F.J. Argües, J. . Med. Res . Reviews. 1995, 15(6), 533.]], además de sus bien documentadas propiedades antitumorales [Oíd, L. Science, 1985, 230, 630.]. Por ejemplo, la investigación con anticuerpos anti-TNF-a y animales transgénicos ha demostrado que al bloquear la formación de TNF-a inhibe el progreso de la artritis [Rankin, E.C.; Choy, E.H.; Kassimos, D.; Kingsley, G.H,; Sopwith, A.M, ; Isenberg, D.A.; Panayi, G.S. Br. J. Rheumatol . 1995, 34, 334; Pharmaprojects, 1996, Therapeutic Updates 17 (Oct) , aul97-M2Z.]. Esta observación ha sido recientemente ampliada a humanos también descritos en "Enfermedades Humanas en TNF-a", Curre-nt Pharmaceutical Design, 1996, 2, 662. Se espera que los inhibidores de pequeñas moléculas de TACE tengan el potencial para tratar una gran variedad de estados de enfermedad. Aunque una variedad de inhibidores TACE son conocidos, muchas de estas moléculas son peptídicas o similares a péptidos que sufren a partir de problemas de biodisponibilidad y farmacocinética. Además, muchas de estas moléculas son no selectivas, siendo potentes inhibidores de metaloproteinasas de matriz y, en particular, MMP-1. La inhibición de MMP-1 (colagenasa 1) ha sido postulada para causar dolor de las articulaciones en exámenes médicos de inhibidores MMP [Scrip, 1998. 2349, 20] Inhibidores no peptídicos de acción prolongada, selectiva, oralmente biodisponibles de TACE sería por tanto, altamente deseable para el tratamiento de los estados de enfermedad antea discutidos. Las patentes Norteamericanas 5,455,258, 5,506,242, 5,552,419, 5,770,624 y 5,817,822 así como solicitudes de patente Europeas EP 606,046A1 y IPO con números de publicación internacional WO9600214 así como W09722587 que describen inhibidores no peptídicos de matriz de metaloproteinasas y/o TACE de los cuales el ácido hidroxámico de aril sulfonamida mostrado abajo es representativo. Las publicaciones adicionales que describen la sulfsnamida basada en inhibidores MMP que son variantes del hidroxamato-sulfonamida mostrado más adelante o los análogos de carboxilatos-sulfonamidas se muestran en las solicitudes de patente Europeas EP-757037-A1 y EP-757984-A1 así como en las publicaciones internacionales WIPO W09535275, 09535276, 09627583, O9719068, 09727174, WO9745402, WO9807697, 09831664, 09833768, W09839313, 09839329, W09842659 Y 09843963. El descubrimiento de este tipo de inhibidrores se detalla en adelante por MacPherson et al en el J. Med. Chem. , (1997), 40, 2525 y Ta aura, et al en J. Med. Chem . (1998), 41, 640.

Las publicaciones que describen inhibidores de ß-sulfonamida-hidroxamato de MMP' s y/o TACE en los cuales el carbón alfa se ha unido al ácido hidroxamico en un anillo al nitrógeno de la sulfonamida, como se muestra adelante, incluyen las patentes US 5,753,653, las publicaciones internacionales WIPO W09633172, WO9720824, WO9827069, WO9808815, WO9808822, WO9808823, WO9808825, W09834918, WO9808827, Levin, et al Bioorg. & Med. Chem . letters, 1998, 8, 2657 y Pikul, et al J. Med Chem . 1998, 41, 3568.

Las solicitudes de patente DE19, 542, 189-Al, W09718194 y EP803505 que describen ejemplos adicionales de sulfonamidas cíclicas como inhibidores TACE y/o MMP. En este caso el anillo que contiene sulfonamida se fusiona a un anillo heteroaromático o aromático.

Ejemplos de inhibidores TACE/MMP de ácido hidroxámico de sulfonamida en los cuales la cadena de dos carbones separa el ácido hidroxámico y el nitrógeno de la sulfonamida, como se muestra más adelante, se describen en las publicaciones internacionales WIPO WO9816503, WO9816506, W09816514 y W09816520 y en la patente US 5,776,961.

Los análogos a las sulfonamidas son inhibidores TACE/MMP del' ácido hidroxémico de la amida del ácido fosfónico, ejemplificados por la siguiente estructura, que ha sido descrita en la publicación internacional WIPO WO9808853.

Los inhibidores MMP/TACE de sulfonamida en los cuales el tiol es el grupo quelante de cinc, como se muestra más abajo, ha sido descrito en la solicitud internacional WIPO 9803166.

Es un objeto de la presente invención describir inhibidores TACE/MMP del ácido hidroxámico de la aril sulfonamida en los cuales el grupo aril sulfonilo está substituido en la posición para- con una porción butinilo substituido o un éter propargílico, amina o sulfuro.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona inhibidores TACE y MMP que tienen la fórmula B: en donde n' = 1 ó 2: y cuando n'=2, entonces A está ausente (ie. un disulfuro); y cuando n'= 1, entonces A es H ó R14C(*=W)-; ie. B es uno de los siguientes 1b 1c en las cuales : W es oxígeno o azufre: X es S02 o -P(O)-R10; Y es arilo o heteroarilo como se define posteriormente, con la condición de que X y Z pueden no estar enlazados a los átomos adyacentes de Y; Z es 0, NH, CH2 o S; Ri es hidrógeno, arilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono; R2 es hidrógeno, arilo o heteroarilo como se define posteriormente, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, C5- C8-cicloheteroalquilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono o CONR8R9; o Ri y R2, juntos con el átomo al cual están unidos, pueden formar un anillo en donde Ri y R2 representan una porción divalente de la fórmula: en donde Q = un enlace simple o doble carbono-carbono, 0, S, SO, -N-R11 o -CONR15; m = 1-3; r= 1 o 2 con la condición de que cuando Q es un enlace, r es igual a 2; Arilo es fenilo o naftilo opcionalmente substituido por uno o dos substituyentes seleccionados de entre R7, en donde R7 es como se define posteriormente; Heteroarilo está definido como .Q- ..0. r;> -CO. opcionalmente mono- o di- substituido por R, en donde K está definida como O, S o NR15; R3 es hidrógeno o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; O Ri y R3, juntos con los átomos a los cuales están unidos, pueden formar un anillo de 5 a 8 miembros en donde Ri y R3 representan porciones divalentes de las fórmulas: id en donde Q y m son como se definieron anteriormente; A es arilo o heteroarilo; S es 0 - 3; u es 1 - 4; R y R5 son cada uno, independientemente, hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, -CN, -CCH; R6 es hidrógeno, arilo, heteroarilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono o -Cs-C8-cicloheteroalquilo como se define posteriormente; R7 es hidrógeno, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, -OR8, -CN, -COR8, perfluoroalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, -O-perfluoroalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, -CONR8R9, -S(0)nR8, -OPO(OR8)OR9, -PO(OR8)R9, -OC (0) NR8Rg, -C (0) NR8OR9, -C00R8, -S03H, -NR8R9, -N [ (CH2) 2] 2NR8, -NR8COR9, -NR8COOR9, -S02NR8R9, -N02, -N(R8)S02R9, -NR8CONR8R9, -NR8C(=NR9)NR8R9, -NR8C (=NR9) N (C=OR8) R9, -NR8C (=NR9) N (S02R8) R9, tetrazol-5-ilo, -S02NHCN, -S02NHC0NR8R9, fenilo, heteroarilo como se definió antes, o -C5-C8-cicloheteroalquilo como se define posteriormente. en donde -NR8R9 pueden formar un anillo de pirrolidina, piperidina, morfolina, tiomorfolina, oxazolidina, tiazolidina, pirazolidina, piperazina o un anillo azetidina; en donde -Cs-Ca-cicloheteroalquilo está definida como en donde K esta definida como antes; R8 y R9 son cada una, independientemente hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, arilo, heteroarilo, o -C5-C8-cicloheteroalquilo; Rio es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, arilo o heteroarilo como se definió antes; Rn es hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, arilo, heteroarilo, -S(0)nR8, -C00R8, -C0NR8R9, -S02NR8R9 o -C0R8; R12 y Ri3 están independientemente seleccionados entre H, -0R8, -NR8Rg, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, arilo, heteroarilo, -C00R8; -C0NR8R9; o Ri2 y Ri3 juntos forman un -C3-C6-cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono o un anillo -Cs-Cß-cicloheteroalquilo; o R?2 y R13 juntos con el carbono al cual están unidos, forman un grupo carbonilo; con la condición de que Rio y R?2 o Ru y R12 pueden formar un anillo cicloheteroalquilo, en donde el cicloheteroalquilo es como se definió anteriormente, cuando están unidos a átomos adyacentes; R14 es -0R8, NR8R9, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquils de 3 a 6 átomos de carbono, arilo o heteroarilo; RX5 es hidrógeno, arilo, heteroarilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono; y n es 0-2; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. La presente invención proporciona un proceso para preparar compuestos de fórmula B como se definió anteriormente, el cual comprende uno de lo siguiente; a) hacer' reaccionar un compuesto de fórmula V: (V) eri donde Ri-Rß, X, Y y Z están definidos anteriormente, con un compuesto de la fórmula R14C (W) SH bajo condiciones adecuadas para la reacción Mitsunobu para dar un compuesto correspondiente de fórmula lb (i.e. Fórmula B en donde n'=l y A es R?4C(-W)-) ; o b) hacer reaccionar un compuesto de fórmula VI: (VI) en donde Ri- ßc X, Y y Z están definidos anteriormente, y J es un grupo saliente eg halógeno tal como cloro, un grupo sulfoniloxi orgánico tal como mesilato o tosilato o triflato, con un compuesto de la fórmula A' SH en donde A' es un metal álcali o un grupo R?4C{W)- o una sal del mismo para dar un compuesto correspondiente de fórmula la o lb (i.e. fórmula B en donde n'=l y A es H o R?4C(=W)-); o c) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula VII: en donde Ri, R2, R3, X, Y, Z y n' es como se definió anteriormente, y cuando n'=l, R4Q es H o Ri4C(=W)-, y cuando n'=2, R40 está ausente (p. Ej . Un disulfuro), con un compuesto de la fórmula VIII; (VIII) en donde R4, R5 y Re son como se definió antes y J es un grupo saliente tal como se describió anteriormente, para dar un compuesto correspondiente de fórmula B; d) hidrolizar un compuesto de fórmula B en donde ?~Re, X, Y y Z están definidos antes, n' = 1 y A es R?4C(»W)- ( i.e. fórmula Ib) , para dar un compuesto correspondiente de fórmula la (i.e. fórmula B en donde A es H) ; e) reducir un compuesto de fórmula B en donde Ri-Rß, X, Y, y Z están definidos antes, n'=l y A es R?4C(=W)- (i.e. fórmula lb) , o n' es 2 (i.e. fórmula lc) , para dar un compuesto correspondiente de fórmula la (i.e. fórmula B en donde A es H); o f) oxidar un compuesto de fórmula B en donde R?-R6, X, Y y Z están definidos antes, n'=l y A es H (i.e. fórmula la), para dar un compuesto correspondiente de fórmula le (i.e. fórmula B en donde n'=2); o g) reducir una mezcla (e.g. racemato) de isómeros ópticamente activos de un compuesto de fórmula B para aislar un enantiómero o diastereómero substancialmente libre del otro enantiómero o diastereómeros; o h) acidificar un compuesto básico de fórmula B con un ácido aceptable farmacéuticamente para dar una sal aceptable farmacéuticamente .

Con respecto al proceso a) , éste puede ser llevado a cabo bajo condiciones estándar conocidas para llevarse a cabo la Reacción Mitsunobu (ver Merck Index 12th Edition 0NR-61 y referencias del mismo) usando reactivos adecuados tales como azodicarboxilato de dialquilo, fosfinas de trialquilo o triarilo y por ejemplo ácido tioacético. El proceso b) puede llevarse a cabo mediante procesos conocidos en el arte adecuados para tiolación o tioesterificación. El proceso c) puede llevarse a cabo mediante procesos conocidos en el arte adecuados para alquilación, en donde J es un grupo saliente apropiado tal como un haluro, o un grupo sulfoniloxi orgánico, e.g. mesilato, tosilato o triflato. El proceso d) puede llevarse a cabo mediante procesos conocidos en la materia, tales como usando metóxido de sodio. El proceso e) puede llevarse a cabo usando el agente de reducción apropiado, tal como borohidruro de sodio. El proceso f) , formando el disulfuro correspondiente, puede ser logrado mediante procesos conocidos en el arte para oxidación tal como el uso de aire u oxigeno. Con respecto al proceso g) las técnicas de separación estándar pueden ser usadas para aislar formas particulares enantioméricas o diastereoméricas. Por ejemplo una mezcla racémica puede ser convertida a una mezcla de diatereoisómeros ópticamente activos mediante una reacción con un enantiómero sencillo de un 'agente de resolución' (por ejemplo por formación de sal diastereomérica o formación de un enlace covalente) . La mezcla resultante de los diastereoisómeros ópticamente activos puede ser separasda por técnicas estándar (e.g. cristalización o cromatografía) y diastereoisómeros individuales ópticamente activos tratados posteriormente para eliminar el 'agente de resolución' con lo cual se libera el enantiómero sencillo del compuesto de la invención. La cromatografía quiral, (usando un agente quiral, el eluente o el agente de apareamiento de iones) puede también ser usada para separar directamente mezclas enantioméricas . Los compuestos de fórmula B pueden estar aislados en la forma de una sal de un ácido farmacéuticamente aceptable, e.g. un ácido orgánico o inorgánico mediante un tratamiento con un ácido tal como el descrito anteriormente. La invención esta dirigida además a un proceso para preparar compuestos de estructura B que involucra una o más reacciones para preparar intermediarios como sigue: 1) convertir un compuesto de fórmula I, o una sal o solvato del mismo, I en un compuesto de la fórmula II 2) convertir un compuesto de fórmula II anterior, o una sal o solvato del mismo, a un compuesto de fórmula III: en donde J es flúor, bromo, cloro, 1,2, 4-triazolil, benzotriazolil o imidazolil, y R4, R5 y Rß son como se definió antes. La invención está aún además dirigida a un proceso para preparar compuestos de estructura B que involucra una o más reacciones para preparar intermediarios como sigue: 1) convertir fenol, o una sal o solvato del mismo, en un compuesto de fórmula IV: IV 2) convertir un compuesto de formula IV anterior, o una sal o solvato del mismo, a un compuesto de fórmula II ' anterior. El alquilo, alquenilo, alquinilo y perfluoroalquilo incluyen tanto porciones de cadena recta así como ramificada. Las definiciones de alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo y fenilo incluyen porciones alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo y fenilo las cuales están no substituidas (carbonos enlazados a hidrógeno u otros carbonos en la cadena o anillo) o pueden estar mono- o poli-substituidas con R7. Cuando una porción contiene más de un substituyente con la misma designación (i.e. alquilo tri-substituido con R7) cada uno de esos sustituyentes (R7 en este caso) puede ser el mismo o diferente. Halógeno se refiere a bromo, cloro, flúor y yodo. Los compuestos de esta invención pueden contener un átomo de carbono asimétrico y algunos de los compuestos de esta invención pueden contener uno o más centros asimétricos y pueden así dar origen a isómeros y diastereomeros ópticos. Aun y cuando se muestran sin referir la estereoquímica, la presente invención incluye tales isómeros y diastereomeros ópticos; así como estereoisómeros R y S enantioméricamente puros, racémicos y resueltos; así como otras mezclas de estereoisómeros R y S y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Se reconoce que un isómero óptico, que incluye diastereomeros y enantiómeros o estereoisómeros pueden tener propiedades favorables sobre los otros, Así cuando de describe y se reclama la invención, cuando una mezcla racémica está descrita, está claramente contemplado que ambos isómeros ópticos, que incluye diastereómeros y enantiómeros o estereoisómeros sustancialmente exentos de los otros son descritos y reclamados también. Las sales farmacéuticamente aceptables pueden estar formadas a partir de ácidos orgánicos o inorgánicos, por ejemplo acético, propiónico, láctico, cítrico, tartárico, succinico, fumárico, maiéico, malónico, mandélico, málico, ftálico, clorhídrico, bromhídrico, fosfórico, nítrico, sulfúrico, metansulfónico, naftalensulfónico, bencensulfónico, toluensulfónico, camforsulfónico, y ácidos aceptables similarmente conocidos cuando un compuesto de esta invención contiene una porción básica. Las sales también pueden estar formadas a partir de bases inorgánicas y orgánicas, preferiblemente sales de metal álcali, por ejemplo sodio, litio o potasio, cuando un compuesto de esta invención contiene una porción acídica. Los compuestos preferidos de la invención son aquellos que tienen la fórmula. B en donde B es 1a o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Los compuestos más preferidos de la invención son aquellos en los cuales B es 1a y X es S02; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Los compuestos más preferidos de la invención son aquellos en los cuales B es: 1a y X es S02 y Z es oxígeno; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Los compuestos más preferidos de la invención son aquellos en los cuales B es: 1a y X es S02, Z es oxígeno, y R4 y R5 son hidrógeno; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Los compuestos aún más preferidos de la invención son aquellos en los cuales B es: 1a y X es S02, Z es oxígeno, R4 y R5 son hidrógeno y Re es -CH20H o metilo; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Compuestos todavía más preferidos son aquellos en los cuales B es en donde Ri es hidrógeno, tal que este compuesto tiene la estereoquímica absoluta como la mostrada en la estructura la anterior.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Los compuestos de la invención se preparan usando técnicas convencionales conocidas para aquellos expertos en la materia de síntesis orgánica. Los materiales de partida usados en la preparación de los compuestos de la invención son conocidos, preparados por métodos conocidos o están disponibles comercialmente. Aquellos expertos en la materia reconocerán que ciertas reacciones se llevan mejor a cabo cuando otra funcionalidad potencialmente reactiva sobre la molécula se enmascara o protege, evitando así reacciones laterales indeseables y/o incrementando el rendimiento de la reacción. Para este fin, aquellos expertos en la materia pueden usar grupos protectores. Ejemplos de estas porciones de grupos protectores pueden ser encontrados en T. W. Greene, P.G.M. Wuts' "Protective Groups in Organic Synthesis", 2nd, Edition, 1991, Wiley and Sons, New York. Las funcionalidades de la cadena lateral reactiva sobre los materiales de partida amino ácido están preferiblemente protegidas. La necesidad y selección de grupos protectores para una reacción en particular es conocida para aquellos expertos en la materia y depende de la naturaleza de los grupos funcionales a ser protegidos (hidroxi, amino, carboxi, etc.), de la estructura y de la estabilidad de la molécula de la cual es parte el substituyente y las condiciones de reacción. Aquellos expertos en la materia reconocerán que la naturaleza y el orden de las etapas sintéticas presentadas pueden ser variadas para el propósito de optimizar la formación de los compuestos de la invención. Al preparar o elaborar compuestos de la invención que contienen arilo, heteroarilo o anillos heterocíclicos, aquellos expertos en la materia reconocerán que los sustituyentes en ese anillo pueden prepararse antes, después o concomitantemente con la construcción del anillo, Por claridad, los substituyentes en tales anillos han sido omitidos de los esquemas posteriores. Los compuestos tiol de la invención, la-lc, se preparan de acuerdo con el Esquema 1, mediante la conversión de un alcohol, 2, en el tioéter o ditioéster correspondiente, lb, vía un procedimiento Mitsunobu usando reactivos tales como trifenilfosfina, dietilazodicarboxilato u ácido tiolacético. La conversión de lb en tiol la es realiza a través de una hidrólisis o desdoblamiento reductivo del éster usando metóxido de sodio, borohidruro de sodio o reactivos similares. El tiol la puede ser convertido en el disulfuro correspondiente usando métodos compatibles con sustituyentes acetilénicos tales como oxidación con aire u oxígeno. Alternativamente, la porción alcohol de 2 puede ser convertida en un grupo saliente J, en donde J es un haluro, tosilato, mesilato, triflato o funcionalidad similar para dar el compuesto 3. La reacción de 3 con nucléofilos tales como sulfuro de sodio, ácido tiolacético, ácido ditiolacético o reactivos similares o sus sales, proporciona entonces la o lb.

Esquema 1 R3 fr Mitsu Los alcoholes 2 pueden prepararse como se muestra en el esquema 2, El amino-alcohol 4 (R3o=H) , o sus análogos protegidos hidroxilo en donde R3o es un grupo enmascarante adecuado tales como trialquilsililo o tetrahidropirano puede ser sulfonilado o fosforilado con 7, en donde J es como se describió en el esquema 1, en presencia de una base amina terciaria, o piridina para proporcionar 8. La alquilación de un compuesto 8 N-H con R3J y una base tal como potasio, carbonato o hidruro de sodio en un solvente aprótico polar tal como acetona, N,N-dimetilformamida (DMF) o tetrahidrofurano (THF) proporciona la sulfonamida 9. El compuesto 9 también está disponible a través de una reacción directa de 7 con un derivado amino-alcohol N-substituido, 5. El compuesto 5 está disponible vía la alquilación o alquilación reductiva de la amina 4, o por aminación de 6 o el epóxido correspondiente. La conversión de 9 en alcohol es entonces desarrollada de manera consistente con la elección del grupo protector R3o y la presencia de un enlace triple carbono-carbono.

Esquema 2 Alquilación o Aminación Reductiva R3J R3NH2 Otra ruta para los compuestos 9 se muestra en el Esquema 3. El compuesto 7, por ejemplo el cloruro de sulfonilo, puede reaccionar con una amina primaria o amoniaco para dar compuestos 10 u 11, respectivamente. La alquilación de 10 con 6 o un epóxido análogo proporciona 9 directamente, mientras que 11 puede ser alquilado con R3J seguido por 6 (o visceversa) o un epóxido para dar 9.

Esquema 3 6 or Los métodos de preparación de los agentes de sulfonilación 7 están mostrados en el Esquema 4. Así, las sales de ácido sulfónico 12, donde ZR50 es un hidroxi, tiol o porción amino sustituida puede ser alquilada con acetilenos 13, en donde J es un grupo saliente adecuado tal como halógeno, mesilato, tosilato o triflato para dar 14. Los acetilenos 13 son compuestos conocidos, comercialmente disponibles o pueden ser sintetizados por métodos conocidos por aquellos expertos en la materia. Las sales de ácido sulfónico 14 pueden ser convertidas en el cloruro de sulfonilo correspondiente u otro agente de sulfonilación 7 por métodos conocidos, tales como la reacción con cloruro de oxalilo u otros reactivos compatibles con sustituyentes R4, R5 y Rj y el acetileno. Alternativamente, el disulfuro 15 puede ser convertido en di-acetileno 16 por reacción con compuestos 13, seguida por reducción del enlace disulfuro para proporcionar los tioles análogos los cuales pueden ser convertidos en 7 por métodos conocidos. La alquilación del fenol, tiofenol, anilina o anilina protegida 17 con 13 para dar 18, seguida por la reacción con ácido clorosulfónico proporciona ácidos sulfónicos 19 los cuales son fácilmente convertidos en 7 con cloruro de oxalilo o reactivos similares. Los tiofenoles 20 son también precursores de 7 vía protección del tiol, alquilación de ZH, en donde Z es O, N o S, y la desprotección del azufre seguida por la oxidación del ácido sulfónico 19.

Esquema 4 R50Z- ~s"s~ "zR5° 15 17 18 Los fósforos que contienen análogos de 7 pueden ser preparados usando metodología similar, como se muestra en el Esquema 5.

Esquema 5 RsoZ _ La cadena lateral acetilénica puede ser también añadida después de la sulfonilación o fosforilación del derivado amino ácido, como se muestra en el Esquema 6. Así, los derivados amino-alcohol 4 y 5 pueden ser sulfonilados o fosforilados con compuestos 23, en donde ZR50 es hidroxi o hidroxi protegido, tiol o amina, y si es necesario, alquilatado como en el Esquema 2, para dar 24. La eliminación del grupo enmascarante R50 para dar 25 y la alquilación subsecuentemente del fenol resultante, tiol o amina con 13 proporciona 9. En el caso en donde ZR50 es igual a OH, no se requiere la etapa de desprotección para dar 25. Alternativamente la porción OR3o de 24 puede ser convertida en el tioester, tiol o disulfuro análogo, como se muestra en los Esquemas 1 y 2, antes de la desprotección de la porción ZR50 del compuesto 24. La alquilación subsecuente del grupo -ZH sin enmascarar proporcionaría entonces los compuestos de la invención. Esquema 6 ZH 13 ^^ : Los análogos de amina propargílica de 9 pueden ser sintetizados como se muestra en el Esquema 7 comenzando a partir de los derivados amino-alcohol 4 y/o 5. La sulfonilación o fosforilación con compuestos para-nitro arilo 26, por ejemplo cloruro de 4-nitrobencensulfonilo, seguida por la alquilación con R3J (para 4) usando una base tal como carbonato de potasio o hidruro de sodio en DMF proporciona 27. La reducción de la porción nitro con hidrógeno y paladio sobre carbono, cloruro de estaño u otros métodos conocidos para dar anilina 28 y alquilación subsecuente con 13 proporciona entonces 9. La anilina 28 también puede ser derivada (29) antes de la alquilación con. 13 y posteriormente desprotegida después de la etapa de alquilación. Como se muestra en el Esquema 6, el compuesto 29 puede ser convertido primero en su tioester, disulfuro o análogo tiol protegido, seguido por la adición del grupo propargilo, vía alquilación con 13, y la desprotección subsecuente de la anilina para proporcionar compuestos la - lc de la invención.

Esquema 7 26 2) R>J 27 1) Reduce 2) Desprotege Los derivados acetilénicos 9 son también accesibles vía los compuestos de flúor 31, fácilmente preparados a partir de los derivados amino-alcohol 4 y/o 5 mediante la reacción con fluoroarilo 30, como se muestra en el Esquema 8. El desplazamiento del fluoruro de 31 en presencia de una base tal como hidruro de sodio con un grupo amino, tiol o hidroxi enmascarado (HZR7o en donde R7o es un grupo protector adecuado) en un solvente aprótico polar tal como DMF, seguido por la desprotección proporciona 32, el cual puede ser entonces alquilatado con 13 para proporcionar 9. La conversión de 31 a 32, en donde Z es azufre, puede ser también llevada a cabo con Na2S, K2S, NaSH o KS(C=S)OEt. El fluoruro de 31 puede también ser desplazado en un solvente aprótico polar con derivado propargílico 33, en donde Z es 0, S, o NH, en presencia de una base tal como hidruro de sodio, para dar 9 directamente. Como se describió para los Esquema 6 y 7 el orden de las operaciones sintéticas pueden ser cambiados tal que la porción acetilénica sea añadida después de la conversión de OR3o en el tioéster, disulfuro o tiol protegido correspondiente. Esquema 8 5_ 31 13 R*^ : XX » El compuesto 9, en donde Z es un grupo metileno, está disponible vía 34, como se muestra en el Esquema 9. La brominación bencílica de 34 con N-bromosuccinimida en un solvente hidrocarburo clorado proporciona bromuro 35. Esto es seguido por el desplazamiento del bromuro con el cuprato de propinilo apropiado para proporcionar sulfonamida 9. Esquema 9 Algunos de los métodos disponibles para la derivación de los compuestos de estructura 9 (para el caso en donde R6 es hidrógeno ) están mostrados en el Esquema 10. La metalización del acetileno terminal 9 seguida por la adición de un aldehido o alquil haluro, sulfonato o triflato proporciona derivados 36 y 37. La reacción de 9 con formaldehído y una amina proporciona el producto de adición Mannich 38. La adición de bromuro de cianógeno a 38 da el bromuro propargílico 39 el cual puede ser desplazado con una variedad de nucleofilos para dar, por ejemplo, éteres, tioéteres, y aminas, 40. Las reacciones de acoplamiento catalizadas con paladio de 9 proporcionan los acetilenos de arilo o heteroarilo 41. Es reconocido por aquellos expertos en la materia de la síntesis orgánica que el uso exitoso de estos métodos depende de la compatibilidad de los substituyentes u otras partes de la molécula. Pueden requerirse grupos protectores y/o cambios en el orden de las etapas descritas en la presente. Ejemplos de R3s, R45, R55, Res y Rs son grupos alquilo tales como metilo. 3 Esquema 10 RjßRíjCH' 55CH2J . 41 Los siguientes ejemplos específicos ilustran la preparación de los compuestos representativos de esta invención. Los materiales de partida, intermediarios y reactivos son comercialmente disponibles o bien pueden prepararse fácilmente siguiendo los procedimientos estándar de la literatura por un experto en la materia de síntesis orgánica. Ejemplo 1 Sal de Sodio del Acido 4-But-2-iniloxi-bencßnsulfónico A una solución de 52.35 g (0.225 mol) de la sal de sodio 4-hidroxibencensulfonato en ÍL de isopropanol y 225 mL de una solución l.ON de hidróxido de sodio se agregó 59.96 g (0.45 mol) de l-bromo-2-butino. La mezcla resultante se calentó a 70° durante 15 hr y posteriormente se eliminó el isopropanol mediante evaporación al vacío. El precipitado blanco resultante fue recuperado mediante filtración, lavado con isopropanol y éter y secado al vacío para dar 56.0 g (100%) de éter de butinilo como un sólido blanco.

Ejemplo 2 Cloruro de 4-But-2-iniloxi-bencensul£onilo A una solución 0° de 43.8 mL (0.087 mol) de una solución 2M de cloruro de oxalilo/diclorometano en 29 mL de diclorometano se agregó gota a gota 6.77 mL (0.087 mol) de DMF seguida por 7.24 g (0.029 mol) del producto del Ejemplo 1. La mezcla de reacción se agitó durante 10 minutos a 0° y posteriormente se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó por dos días. La reacción fue vertida entonces en hielo y extraída con 150 mL de hexanos. Los orgánicos se lavaron con agua y salmuera, secados sobre Na2S04, filtrados y concentrados al vacío para proporcionar 6.23g (88%) del cloruro de sulfonilo como un sólido amarillo; punto de fusión 63-65°C. Masa Específica E.l. 243.9 (M+) .

Ejemplo 3 But-2-iniloxi-benceno A una solución de 6.14g (0.023 mol) de trifenilfosfina disuelta en 100 mL de benceno y 40 mL de THF se agregó 1.75 mL (0.023 mol) de 2-butin-l-ol. Después de cinco minutos, 2.00(0.023 mol) de fenol, disuelto en 10 ml de THF, se agregó a la reacción seguido por 3.69 mL (0.023 mol) de azodicarboxilato de dietilo. La mezcla de reacción resultante se agitó durante 18 horas a una temperatura ambiente y posteriormente se concentró al vacío. El residuo fue cromatografiado sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo/hexanos (1:10) para proporcionar 2.18g (70%) del éter de butinilo como un líquido claro. Masa Específica El: 146.0 MH+.

Ejemplo 4 Cloruro de 4~But-2-iniloxi-bencensul£onilo A una solución de 0.146 g (1.0 mmol) del producto del Ejemplo 3 en 0.3 L de diclorometano en acetona/baño de hielo bajo N2 se agregó gota a gota una solución de 0.073mL (1.1 mmol) de ácido clorosulfónico en 0.3 mL de diclorometano.

Después de que la adición se completó, se eliminó el baño de hielo y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 hr. A la reacción se agregó entonces gota a gota 0.113 mL (1.3 mmol) de cloruro de oxalilo seguida por 0.015 mL de DMF.

La reacción se calentó a reflujo durante 2 horas y posteriormente se diluyó con hexano y se vertió en agua de hielo. La capa orgánica se lavó con salmuera, se seco sobre sulfato de sodio y se concentró al vacío para proporcionar 0.130 mg (53%) del producto deseado como un sólido ligeramente café. Ejemplo 5 4-But-2-iniloxi-N- (2-hidroxi-l-metil-ßtil) -bencensulfonamida A una solución de 0.279 g (3.718 mmol) de (R)-(-)-2-amino-1-propanol en 2.6 mL de THF y 0.9 mL de agua se agregó 0.62mL de trietilamina seguida por 1.00 g (4.09 mmol) de cloruro de 4-But-2-iniloxi-bencensulfonilo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 horas.

La reacción se diluyó entonces con acetato de etilo y se lavó con 5% de solución de HCl y agua, se seco sobre MgS04, se filtró y se concentró al vacío. El sólido resultante se lavó con éter y se secó al vacío para proporcionar 0.873g (83%) de la sulfonamida como un sólido blanco. Masa Específica por Electrorocío: 283.8 (M+H)+. Ejemplo 6 4-But-2-iniloxi-N- (2-hidroxi-l-mßtil-ßtil) -N-mßtil- bencensulfonamida A una solución de 0.400 g (1.413 mmol) del producto del Ejemplo 5 en 3.0 mL de DMF se agregó 0.585 g (4.240 mmol) de carbonato de potasio seguido por 0.132 mL (2.12 mmol) de yodometano y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. La reacción se diluyó posteriormente con éter y se lavó con agua, se secó sobre MgS04, se filtró y se concentró al vacío para proporcionar 0.354 g (84%) del N-metil sulfonamida como un sólido blanco. Masa Específica por Electrorocío: 297.9 (M+H)+. Ejemplo 7 Acido Tioacetico-S-{2- [ (4-but-2-iniloxi-bencensulfonil) - me il-amino]propil}ést<ar A una solución 0o de 0.302 g (1.017 mmol) del producto del Ejemplo 6 y 0.293 g (1.118 mmol) de trifenilfosfina en 4.0 mL de THF se agregó 0.176 mL (1.118 mmol) de dietil azodicarboxilato. La mezcla resultante se agitó durante 0.5 h a 0°C y se concentró posteriormente al vacío. El residuo se cromatografió sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo/hexanos para proporcionar 0.228 g (63%) del tioacetato como un aceite incoloro. Masa Específica por Electrorocío 355.9 (M+H)\ Ejemplo 8 4-But-2-iniloxi-N- ( (IR) -2-mßrcapto -1-metil-etil) -N-metil- bencensulfonami a A una solución de 0.168 g (0.473 mmol) del producto del Ejemplo 7 en 2.1 mL de metanol se agregó 0.092 g (1.704 mmol) de metóxido de sodio. Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas la reacción se enfrío con 5% de solución de HCl y se extrajo con éter. Los orgánicos se secaron sobre Na2S04, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se cromatografió sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo/hexanos en un gradiente de (1:10) a (1:3) para proporcionar 0.148 g (100%) del tiol como un aceite incoloro. Masa Específica por Electrorocío: 313.9 (M+H)+. Ejemplo 9 4-Bu -2-iniloxi-N- (2-hidroxi-l-metil-etil) -N- (2-morfolin-4- il-etil) -bencensulfonamida De acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 6, 0.400 g (1.413 mmol) del producto del Ejemplo 5 y 0.289 (1.555 mmol) de hidrocloruro de 4- (2-cloroetil) morfolina proporcionó 0.334 g (60%) de N-morfolinoetil sulfonamida como un aceite incoloro. Masa Específica por Electrorocío: 397.0 (M+H) +. Ejemplo 10 S- ( (2R) -2-{ í [4- (2-Butiniloxi) fenil] ßul onil) [2-4- morfolinil) etil] amino)propil) etantioato A una solución de 0.416 g (1.16 mmol) del producto del Ejemplo 9 en 4 mL de THF se agregó secuencialmente 0.304 g (1.16 mmol) de trifenilfosfina, 0.191 g (1.16 mmol) de azodicarboxilato de dietilo y 0.25 mL (3.5 mmol) de ácido tiolacético. La reacción se agitó durante 45 horas, se redujo a sequedad y el residuo resultante se sometió a cromatografía flash eluyendo con acetato de etilo/hexanos (3:1) para proporcionar 0.5 g (95%) de tioacetato como un sólido blanco. Masa Específica por Electrorocío: 455.3 (M+H)+. Ejemplo 11 4- (2-Butiniloxi) -N- [ < (IR) -l-metil-2-sulfanilßtil] -N- [2 (4- morfolinil) etil]bencensulfonamida A una solución de 0.16 g (0.352 mmol) del producto del Ejemplo 10 en 2 mL de metanol en un tubo sellable a -78° se agregó 20 mL de amoniaco líquido. El tubo se selló y la reacción se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. Después de re-enfriar a -78°el tubo de reacción no se selló y la solución se redujo cuidadosamente a sequedad. El residuo se sometió a cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con cloruro de metileno/metanol (50:1) proporcionando 121 mg (84%) del tiol deseado como un sólido blanco. Masa Específica por Electrorocío: 413.4 (M+H) +.

Ejemplo 12 (2R) -2-Amino-3- (tritilsulfanil)propanamida A 2.68g (7.37 mmol) de S-tritil-L-cisteína y 40 mL de metanol se agregó gota a gota 7 mL (96 mmol) de cloruro de tionilo. Después de calentamiento a reflujo durante 6 h, la solución se enfrío a temperatura ambiente y se concentró posteriormente al vacío. El residuo resultante se extrajo en 20 mL de metanol, se trato con carbón activado, se filtró y se concentró al vacío produciendo el metil éster como una espuma opaca. Este material se disolvió en 6 L de metanol en un tubo sellable y se enfrió a -78°. Después de que se agregó 30 mL de amoniaco líquido, el tubo se selló y la reacción se agitó a temperatura ambiente por 14 h. Después de re-enfriar a -78°el tubo de reacción no se selló y la solución se redujo cuidadosamente a sequedad. El residuo se sometió a cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con cloruro de metileno/metanol (10:1) proporcionando 1.52g (57%) de la amida primaria como un sólido blanco. Masa Específica por Electrorocío: 363.2 (M+H) +. Ejemplo 13 (2R) -2- ( { [4- (2-Butiniloxi) fßnil] sulfonil}amino) -3- (tritilsulfanil)propanamida A una solución de 1.203g (3.685 mmol) del producto de amida primaria del Ejemplo 12 y 1.39 mL (10 mmol) de trietilamina en 20 mL de cloruro de metileno se agregó una porción de 0.954g (3.9 mmol) de cloruro de 4-but-2-iniloxi-bencensulfonilo. Después de agitación por 13 h, se agregaron 50 mL de diclorometano y 50 mL de agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, se concentró al vacío y se sometió a cromatografía flash eluyendo con hexanos/acetato de etilo (1:1) para proporcionar 1.65 g (79%) de la sulfonamida deseada como un sólido blanco. Masa Específica por Electrorocío: 1139.6 (2M-H)~. Ejemplo 14 (2R) -2- ( { [4- (2-Butiniloxi) fenil] sulfonil} [2- (4- orfolinil) etil] amino) -3- (tritilsulfanil)propanamida A una solución de 0.6482 g (1.136 mmol) del producto del Ejemplo 13 en 3 mL de DMF se agregó 0.317g (1.704 mol) de hidrocloruro de 4- (2-cloroetil)morfolina y 0.705 g (5.1 mmol) de carbonato de potasio. La mezcla resultante se calentó a 60° por 14 h. Después de enfriar a temperatura ambiente la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, se concentró al vacío y se sometió a cromatografía flash eluyendo con hexanos/acetato de etilo (1:5) para proporcionar 0.434 g (56%) del compuesto deseado como un sólido blanco. Masa Específica por Electrorocío 684.5 (M+H)+.

Ejemplo 15 (2R) -2-{{ [4- (2-Butiniloxi) fenil] sulfonil} [2- (4- morfolinil)etil]amino}-3-sulfanil)propanamida A una solución de 0.116 g (0.170 mmol) del producto del Ejemplo 14 en 1.5 mL de cloruro de metileno se agregó triisopropilsilano, seguido por ácido trifluoroacético. Al consumirse el material de partida, la solución se concentró al vacío y se lavó 4 veces con 2 mL de éter. El residuo fue dividido entre acetato de etilo y bicarbonato de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío para proporcionar 66 mg (88%) 4§ del tiol como un sólido blanco. Masa Específica por Electrorocío: 442.4 (M+H)+.

Farmacología La capacidad de los compuestos de la invención o sus sales farmacéuticamente aceptables, para inhibir metaloproteinasas de matriz o TACE y consecuentemente, demostrar su eficacia para el tratamiento de enfermedades moduladas por matriz de metaloproteinasas o TACE se muestra en los siguientes ensayos in-vi ro.

Procedimientos de Prueba para medir la inhibición de MMP-1, MMP-9 y MMP-13 Estos procedimientos de examen farmacológico estándar se basan en el desdoblamiento de unos substratos de tiopéptido tales como Ac-Pro-Leu-Gly (2-mercapto-4-metil-pentanoil) -Leu-Gly-OEt por la matriz de metaloproteinasas de MMP-1, MMP-13 (colagenasas) o MMP-9 (gelatinasa) , lo cual resulta en la liberación de un producto de substrato que reacciona colori étricamente con DTNB (5, 5' -ditiobis (2-nitro-ácido benzoico) ) . La actividad de la enzima se mide por la proporción del incremento de color. El substrato de tiopéptido se prepara fresco como una reserva de 20 mM en DMSO al 100% y el DTNB se disolvió en DMSO al 100% como una reserva de lOOmM y se almacenó en la oscuridad a temperatura ambiente. Tanto el substrato como el DTNB se diluyen juntos a 1 mM con un amortiguador de substrato (como HEPES 50 mM, pH 7.5, CaCl2 5mM) , antes de usarse. La reserva de enzima se diluye con una solución amortiguadora (HEPES 50 mM, pH 7.5, CaCl2 5mM, Brij 0.02%) hasta la concentración final deseada. El amortiguador, la enzima, el vehículo o inhibidor y el substrato/DTNB se agregan en este orden a una placa de 96 pozos (reacción total en volumen de 280µl) y se verificó el incremento en color por cinco min. a 405nm en un lector de placas y el incremento en color con respecto al tiempo se gráfico dando por resultado una relación lineal. De manera alternativa se usó un substrato de péptido fluorescente, en este procedimiento el substrato de péptido contiene un grupo fluorescente y un grupo de enfriamiento. Al hidrolizar o desdoblar el substrato por medio de un MMP, la fluorescencia que se generó se cuantificó en la lectora de placas de fluorescencia. El ensayo se corrió en un amortiguador de prueba HCBC (HEPES 50mM, pH 7.0, Ca2+ 5 mM, Brij 0.02%, cisteína 0.5%) con MMP-1, MMP-9 o MMP-13 recombinante humano. El substrato se disolvió en metanol y se almacenó congelado en alícuotas 1 mM. Para el ensayo, el substrato y las enzimas se diluyeron en amortiguador HCBC a las concentraciones deseadas. Los compuestos se agregaron a la placa de 96 pozos conteniendo la enzima y se inició la reacción por adición del substrato. La reacción se leyó (exitación 340 nm, emisión 444 nm) por 10 min. y el incremento de la fluorescencia con respecto al tiempo se gráfico como una relación lineal. Ya sea para los procedimientos de prueba del péptido fluorescente o el tiopéptido, la pendiente de la línea se calculó y representa la velocidad de reacción. La linearidad de la velocidad de reacción se confirmó (r2>0.85). La definición (x+sem) de la velocidad de control se calculó y se comparó para determinar su importancia estadística (p-0.05) con las proporciones de aquellos tratados con fármacos utilizando el examen de comparación múltiple de Dunnett. La relación dosis-respuesta puede ser generada usando dosis múltiples de fármacos y valores IC50 con 95% Cl se estiman usando regresión lineal.

Procedimiento de prueba para medir la Inhibición TACE Se utilizaron placas de microtítulo de 96 pozos negros, en cada pozo se depositó una solución compuesta de 10 µL de TACE (de 1 µg/mL de concentración final) , 70 µL de amortiguador Tris, pH 7.4 que incluye glicerol al 10% (concentración final de 10 mM) y 10 µL de la solución del compuesto de prueba en DMSO (concentración final de 1 µM, DMSO a una concentración <1%) y se incubó por 10 minutos a temperatura ambiente. La reacción se inició con la adición de un substrato de peptidil fluorescente (Concentración final 100 µM) en cada pozo y entonces se agitó en un agitador durante 5 seg. La reacción se lee, (excitación 340, emisión 420 nm) por 10 min. Y el incremento en la fluorescencia con respecto al tiempo se gráfico como una relación lineal. La pendiente de la línea se calculó y representa la velocidad de reacción. La linearidad de la velocidad de reacción se confirmó (r2>0.085). El significado (x+sem) de la velocidad de control se calculó y se comparó para determinar su importancia estadística (p<0.05) con las proporciones de aquellos tratados con fármacos utilizando el examen de comparación múltiple de Dunnett. La relación dosis-respuesta puede ser generada usando dosis múltiples de fármacos y valores IC5o con 95% Cl se estimaron usando una regresión lineal.

Ensayo de Diferenciación de Células THP-1 Monoclticas humanas utilizando Proteinas Solubles (Ensayo de Proteina Soluble THP-1) . La estimulación mitogénica de células THP-1 provocan una diferenciación de células similares a macrófagos con secreción concomitante de factor de necrosis tumoral (TNF-a) y receptor TNF (TNF-R p75/80 y TNF-R p55/60) e Interleucina-8 (IL-8) , entre otras proteínas. Además, las células THP-1 no estimuladas separan tanto el receptor p75/80 como el p55/60 más tiempo. La liberación de la membrana unida a TNF-a y posiblemente, TNF-R p75/80 y TNF-R p55/60, pero no IL-8, es mediada por una enzima llamada enzima de conversión TNF- a o TACE. Este ensayo puede usarse para demostrar ya sea un efecto en el compuesto inhibidor o estimulador en esta enzima TACE y cualquier consecuencia citotóxica de tal compuesto. Las células THP-1 (de ATCC) son una línea celular monocítica humana obtenidas a partir de sangre periférica de un macho de un año de edad con leucemia monocítica aguda. Se pueden desarrollar en cultivo y deferenciarlas en células similares a macrófagos por estimulación con mitógenos. Para el ensayo, se sembraron células THP-1 a partir de un depósito de ATCC que fue previamente desarrollado y vuelto a congelar a 5xl06/ml/vial. Un frasco vial se sembró en un frasco con 16 mis de RPMI-1640 con medio Glutamax (Gibco) que contiene suero bovino fetal al 10%, 100 unidades/ml de penicilina, 100 µg/ml de estreptomicina y 5xl0"5 M de 2-mercaptoetanol (medio THP-1) . Cada vial de células se cultivo por' alrededor de dos semanas antes de ser usado para una prueba y entonces, se usaron solamente por 4 a 6 semanas para monitorear los compuestos. Las células se subcultivaron los Lunes y Jueves a una concentración de lxl05ml. Para desarrollar un ensayo, las células THP-1 son co-incubadas en una placa de 24 pozos con 50 ml/pozo de una reserva o "stock" de Lipopolisacárido de 24mg/ml (Calbiochem Lot#B13189) a 37°C en C02 al 5% a una concentración de 1.091 x 106 células/ml (1.1 ml/pozo) por un total de 24 hrs. Al mismo tiempo, 50 ml/pozo de fármaco, vehículo o medio THP-1 se plaquearon un los pozos apropiados para obtener el volumen final de 1.2 ml/pozo. Los compuestos de prueba y los estándares se disolvieron en DMSO a una concentración de 36 mM y se diluyeron de aquí a las concentraciones apropiadas en medio THP-1 y se agregaron a los pozos al inicio del período de incubación para obtener concentraciones finales de 100 mM, 30 mM, 10 mM, 3 mM, lmM, 300 nM y 100 nM. La exposición de células a DMSO fue limitada a una concentración final de 0.1%. Los pozos de control positivos se incluyeron en el experimento el cual se tenía adicionado mitógeno pero no fármaco. También se incluyeron los pozos con vehículo de control, los cuales fueron idénticos a los pozos de control positivos, excepto en que se agregó DMSO para dar una concentración final de 0.083%. Se incluyeron en el experimento pozos de control negativos los cuales tenían vehículo pero no mitógeno o droga adicionada a las células. Los compuestos pueden ser evaluados por su efecto basal (no estimulado) de los receptores no separados, reemplazando el LPS con 50 ml/pozo de medio THP-1. Las placas fueron colocadas en un incubador a 5% de C02 y a 37°C. Después de 4 horas de incubación, 300 ml/pozo de sobrenadante de cultivo de tejido (TCS) se eliminó para utilizarse en una ELISA TNF-a. A continuación de las 24 horas de incubación, 700 ml/pozo de TCS se eliminó y usó para análisis en ELISA de TNF-R p75/80, TNF-R p55/60 y IL-8. Además, a las 24 horas tiempo exacto, y las células para cada grupo en tratamiento se obtuvieron por re-suspensión en 500 µl/pozo de medio de THP-1 y transferido hacia un tubo FACS. Se agregó dos ml/tubo de una reserva "stock" de 0.5 mg/ml de yoduro de propidio (Pl) (Boehringer Mannheim cat #1348639) . Las muestras fueron corridas en un máquina de citometría Becton Dickinson FaxCAliber FLOW y la cantidad de tinta extraída por cada célula es medida en la longitud de onda ultrarojo (FL3) . Sólo las células con membrana comprometida (muerta o teñida) pueden extraer Pl. El porcentaje de células vivas es calculado por el número de células no teñidas con Pl, dividido entre el total de número de células en la muestra. Los valores de viabilidad calculados para el grupo de fármacos tratado fueron comparados con el valor de viabilidad calculado para el grupo estimulado con mitógeno tratado con vehículo ("control positivo del vehículo") el "porcentaje de cambio de control". Este valor de "porcentaje de cambio de control" es un indicador de la toxicidad del fármaco. La calidad de soluble de los cultivos de células TNF-a, TNF-R p75/80 y TNF-R p55/60 e IL-8 en el TCS del THP-1 se obtiene con ELISAs comercialmente disponibles de Sistemas R&D, por la extrapolación de una curva estándar generada con equipos estándar. El número de células que son extraídas o bien excluidas Pl se miden mediante la máquina de citometría FLOW y visualizadas por histogramas usando software Citológico comercialmente disponible para cada grupo de tratamiento incluyendo todos los controles. La variabilidad biológica en la magnitud de la respuesta de los cultivos de células THP-1 requiere que los experimentos sean comparados en base al porcentaje de cambio del "control positivo del vehículo" para cada concentración de fármaco. El porcentaje del cambio en cada proteína soluble evaluado a partir del "control positivo del vehículo" fue calculado para cada concentración del compuesto con la siguiente fórmula: % de cambio = pg/mlCcompuesto'. - pg/ml(control pos vehl x 100 pg ml(control pos veh) - pg ml(control neg veh) Para los estudios de la proteína soluble (TNF-a, p75/80, p55/60, IL-8) bajo condiciones estimuladas, se determinó el significado de pg/ml de pozos duplicados y los resultados se expresaron como porcentaje de cambio del "control positivo del vehículo". Para los estudios de la proteína soluble (receptores p75/80, p55/60) , condiciones no estimuladas, se determinó el significado de pg/ml de pozos duplicados y los resultados se expresaron como porcentaje de cambio del "control positivo del vehículo" utilizando la siguiente fórmula: % de cambio = pg/ml(control del compuesto neg) - pg/ml(control neg vefr) x 100 pg ml(control neg veh) Los valores IC50 para cada compuesto son calculados mediante análisis de regresión no lineal utilizando el software tradicional utilizando el paquete estadístico JUMP.

Para los estudios de viabilidad de células, se determinaron las viabilidades (exclusión Pl) de grupos de pozos duplicados y los resultados se expresaron como % de cambio del control de vehículo positivo". Los valores de viabilidad calculados para los grupos del compuesto tratado fueron comparados con el valor de viabilidad calculados para el "control positivo del vehículo" para determinar el "porcentaje de cambio a partir del control" como se refiere mas adelante. Este valor "porcentaje del cambio a partir del control" es un indicador de la toxicidad del fármaco. % de cambio = % de células vivas (compuesto - 1 x 100 % de células vivas (control pos veh) Referencias: Bjornberg, F., Lantz, M. , Olsson, I., and Gullberg. U. Mechanisms involved in the processing of the p55 and the p75 tumor necrosis factor (TNF) receptors to soluble receptor forms. Lymphokine Cytokine Res. 13:203-211, 1994. Gatanaga, T., Hwang, C, Gatanaga, M., Cappuccini, F., Yamamoto, R., and Granger, G. The regulation of TNF mRNA synthesis, membrane expression, and reléase by PMA- and LPS-stimulated human monocytic THP-1 cells in vitro. Cellular Im un. 138:1-10, 1991.

Tsuchiya, S., Yamabe, M., Yamagughi, Y., Kobayashi, Y., Konno, T., and Tada, K. Establishment and characterization of a human acute monocytic leukemia cell line (THP-1) . Int. J.Cáncer. 26:1711-176, 1980.

Los resultados de la anterior inhibición in-vitro de la matriz de metaloproteinasa, la inhibición TACE y los procedimientos estándar de las pruebas farmacológicas se proporcionan en la siguiente tabla 1.

Tabla 1 Ejemplo # Ri R2 MMP-G MMP-9* MMP-13* TACEa THP 8 CH3 CH3 6,300 2,700 679 273 3 11 CH3 (CHzhMorf - - - 362 11 CONH2 (CH2)2Morf - - - 263 19 a) IC» (nM) En base a los procedimientos de prueba farmacológica estándar descritos anteriormente, los compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento de desordenes tales como artritis, metástasis tumoral, ulceración de tejido, cicatrización anormal de tejidos, enfermedad periodontal, rechazo de injertos, resistencia a la insulina, enfermedades de los huesos e infección VIH.

' Los compuestos de esta invención son también útiles en el tratamiento de cambios patológicos de inhibición mediados por matriz de metaloproteinasas tales como ateroesclerosis, formación de placas por ateroesclerosis, reducción de trombosis coronarias a partir de ruptura de placas por ateroesclerósis, restenosis, osteopenias mediadas por MMP, enfermedades inflamatorias del sistema nervioso central, envejecimiento de piel, angiogénesis, metástasis tumoral, crecimiento de tumor, osteoartritis, artritis reumatoide, artritis séptica, ulceración de córnea, proteinuria, enfermedad de aorta aneurismal pérdida degenerativa de cartílago seguida de daño de articulaciones por traumatismos, enfermedad de desmielinización del sistema nervioso central, cirrosis hepática, enfermedad glomerular del riñon, ruptura prematura de la membrana fetal, enfermedad inflamatoria del intestino, degeneración macular relacionada con la edad, retinopatía diabética, vitroretinopatía proliferativa, retinopatía de premadurez, inflamación ocular, queratoconos, síndrome de Sjogren, miopía, tumores oculares, neovascularización/angiogénesis ocular y rechazo de injertos de córnea. Los compuestos de esta invención pueden ser administrados puros o con un portador farmacológico a un paciente con necesidad del mismo. El portador farmacéutico puede ser sólido o líquido. Los portadores sólidos aplicables pueden incluir una o más substancias las cuales pueden también actuar como agentes saborizantes, lubricantes, solubilizadores, agentes de suspensión, agentes de relleno, glidantes, auxiliares de compresión, agentes aglutinantes o de desintegración de tabletas o un material encapsulante. En polvos, el portador es un sólido finamente dividido que está en mezcla con el ingrediente activo finamente dividido. En tabletas, el ingrediente activo está mezclado con un portador que tiene las propiedades de compresión necesarias en proporciones adecuadas y compactado en la forma y el tamaño deseado. Los polvos y tabletas preferiblemente contienen hasta 99% del ingrediente activo. Los portadores sólidos adecuados incluyen, por ejemplo, fosfato de calcio, estearato de magnesio, talco, azúcares, lactosa, dextrina, almidón, gelatina, celulosa, celulosa de metilo, carboximetil celulosa de sodio, polivinilpirrolidina, ceras de bajo punto de fusión y resinas de intercambio iónico. Los portadores líquidos pueden ser usados para preparar soluciones, suspensiones, emulsiones, jarabes y elíxires. El ingrediente activo de esta invención puede estar disuelto o suspendido en un portador líquido farmacéuticamente aceptable, tal como agua, un solvente orgánico, una mezcla de tanto aceites como grasa farmacéuticamente aceptables. El portador líquido puede contener otros aditivos farmacéticos apropiados tales como solubilizadores, emulsificantes, soluciones amortiguadoras, conservadores, edulcorantes, agentes saborizantes, agentes de suspensión, agentes de espesamiento, colores, reguladores de viscosidad, estabilizadores u osmo-reguladores . Ejemplos adecuados de portadores líquidos para administración oral y parenteral incluyen agua, (conteniendo particularmente aditivos como los anteriores, e.g., derivados de celulosa, preferiblemente solución de carboximetil celulosa de sodio) , alcoholes (que incluyen alcoholes monohídricos, y alcoholes polihídricos, e.g., glicoles) y sus derivados, y aceites (e.g., aceite de coco fraccionado, y aceite de cacahuete) . Para administración parenteral los portadores también pueden ser un éster de aceite como oleato de etilo y miristato de isopropilo. Los portadores líquidos estériles son usados en composiciones estériles en forma líquida, para administración parenteral. Las composiciones farmacéuticas líquidas que son suspensiones o soluciones estériles pueden ser utilizadas mediante, por ejemplo, inyección intramuscular, intraperitoneal o subcutánea. Las soluciones estériles también pueden ser administradas de forma intravenosa. La administración oral puede ser en forma de composición líquida o sólida. Los compuestos de la presente invención pueden ser administradas por el recto en forma de un supositorio convencional. Para administración por inhalación o insuflación intranasal o intrabronquial, los compuestos de esta invención pueden ser formulados en una solución acuosa o parcialmente acuosa, las cuales pueden ser posteriormente utilizadas en forma de un aerosol. Los compuestos de esta invención también pueden ser administrados transdérmicamente a través de un parche transdérmico que contiene el compuesto activo y un portador que es inerte al compuesto activo, es no tóxico para la piel y permite la entrega de agente para absorción sistémica en la corriente sanguíneo vía la piel. El portador podría tomar cualquier número de formas tales como cremas y ungüentos, pastas, gel y dispositivos de oclusión. Las cremas y ungüentos pueden ser emulsiones líquidas viscosas o semi-sóilidas de tipo ya sea aceite en agua o agua en aceite. Las pastas comprenden polvos absorbentes dispersados en petróleo o petróleo hidrofílico que contiene el ingrediente activo también pueden ser adecuadas. Una variedad de dispositivos de oclusión podrían ser usados para liberar el ingrediente activo en la corriente sanguínea tales como una membrana semipermeable que cubre un depósito que contiene el ingrediente activo con o sin un portador, o una matriz que contiene el ingrediente activo. Se conocen otros dispositivos de oclusión en la literatura. La dosis a ser usada en el tratamiento de un paciente específico que sufre una condición dependiente de TACE o MMP debe ser determinada de manera obligatoria por el médico tratante que lo atiende. Las variables involucradas incluyen la severidad de la disfunción y el tamaño, edad y patrón de respuesta del paciente. El tratamiento será generalmente iniciado con dosis pequeñas menores que la dosis óptima del compuesto. Posteriormente, la dosis se incrementa hasta que se alcanza el efecto óptimo bajo las circunstancias. Las dosis precisas para la administración oral, parenteral, nasal, o intrabronquial serán determinada por el médico basado en su experiencia con el individuo tratado y los principios médicos estándar. Preferiblemente la composición farmacéutica está en forma de dosis unitaria, e.g., como tabletas o cápsulas. En tal forma, las composición esta sub-dividida en dosis unitarias que contienen las cantidades apropiadas del ingrediente activo; la forma de dosis unitaria pueden ser composiciones empacadas, por ejemplo polvos empacados, viales, ampolletas, jeringas pre-llenadas, bolsitas o sobres, bolsitas que incluyen líquidos. La forma de dosis unitaria puede ser, por ejemplo, una cápsula o tableta sola, o puede ser el número apropiado de cualquiera de tales composición en forma empacada.

Claims (16)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones: 1. Un compuesto que tiene la fórmula B: B en donde n' = 1 6 2: y cuando n'=2, entonces A está ausente (ie. un disulfuro); y cuando n'= 1, entonces A es H ó R?4C(=W)-; ie en donde B es uno de los siguientes: 1b 1c en las cuales : W es oxígeno o azufre: X es S02 o -P (O) -Rio; Y es arilo o heteroarilo como se define posteriormente, con la condición de que X y Z pueden no estar enlazados a los átomos adyacentes de Y; Z es O, NH, CH2 o S; Ri es hidrógeno, arilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono; R2 es hidrógeno, arilo o heteroarilo como se define posteriormente, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, C5-C8-cicloheteroalquilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono o CONRsR.,; o Ri y R2, juntos con el átomo al cual están unidos, pueden formar un anillo en donde Ri y R2 representan una porción divalente de la fórmula: (CH2)m-en donde Q = un enlace simple o doble carbono-carbono, 0, S, SO, -N-R11 o -CONR15; m = 1-3; r= 1 o 2, con la condición de que cuando Q es un enlace, r es igual a 2; Arilo es fenilo o naftilo opcionalmente substituido por uno o dos substituyentes seleccionados de entre R7, en donde R7 es como se define posteriormente; Heteroarilo está definido como opcionalmente mono- o di- substituido por R7, en donde K está definida como 0, S o NR15; R3 es hidrógeno o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; o Ri y R3, juntos con los átomos a los cuales están unidos, pueden formar un anillo de 5 a 8 miembros en donde Ri y R3 representan porciones divalentes de las fórmulas: en donde Q y m son como se definieron anteriormente; A es arilo o heteroarilo; S es 0 - 3; u es 1 - 4; R4 y Rs son cada uno, independientemente, hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, -CN, -CCH; Re es hidrógeno, arilo, heteroarilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono o -Cs-Cs-cicloheteroalquilo como se define posteriormente; R7 es hidrógeno, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, -OR8, -CN, -COR8, perfluoroalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, -O-perfluoroalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, -CONR8R9, -S(0)nR8, -OPO(OR8)OR9, -PO(OR8)R9, -OC(0)NR8R9, -C(0)NR8OR9, -COOR8, -S03H, -NR8R9, -N [ (CH2) 2] 2NR8, -NR8COR9, -NR8COOR9, -S02NR8R9, -N02, -N(R8)S02R9, -NR8CONR8R9, -NR8C(=NR9)NR8R9, tetrazól-5-ilo, -S02NHCN, -S02NHCONR8R9, fenilo, heteroarilo como se definió antes, o -Cs-C8-cicloheteroalquilo como se define posteriormente; en donde -NR8R9 pueden formar un anillo de pirrolidina, piperidina, morfolina, tiomorfolina, oxazolidina, tiazolidina, pirazolidina, piperazina o un anillo azetidina; en donde -C5-C8-cicloheteroalquilo está definida como en donde K est R8 y R9 son cada una, independientemente hidrógeno, alquilo de

1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, arilo, heteroarilo, o -C5-C8-cicloheteroalquilo; Rio es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, arilo o heteroarilo como se definió antes; Rn es hidrógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, arilo, heteroarilo, -S(0)nR8, -COOR8, -CONR8R9, -S02NR8R9 o -COR8; R12 y Ri3 están independientemente seleccionados entre H, -0R8, -NR8R9, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, arilo, heteroarilo, -COOR8; -CONR8R9; o Ri2 y R?3 juntos forman un -C3-C6-cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono o un anillo -Cs-Cs-cicloheteroalquilo; o Ri2 y Ri3 juntos con el carbono al cual están unidos, forman un grupo carbonilo; con la condición de que Rio y R?2 o Rn y R?2 pueden formar un anillo cicloheteroalquilo, en donde el cicloheteroalquilo es como se definió anteriormente, cuando están unidos a átomos adyacentes; R?4 es -OR8, NR8R9, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, arilo o heteroarilo; Ri5 es hidrógeno, arilo, heteroarilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono; y n es 0-2; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 de fórmula la caracterizado porque Y es fenilo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

3. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, caracterizado porque X es S02; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

4. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque Z es oxígeno; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

5. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque R4 y R5 son hidrógeno; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

6. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque Re es CH20H o metilo; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

7. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque Ri es hidrógeno tal que este compuesto tiene la estereoquímica absoluta como se muestra en la siguiente la

8. Un compuesto de fórmula II, con la condición de que Re no sea hidrógeno y R4, R5 y d son como se definió en la reivindicación 1.

9. Un compuesto de fórmula III, con la condición de que Re no sea hidrógeno en donde J es fluoruro, bromuro, cloruro, 1,2, 4-triazolil, benzotriazolil o imidazolil y R4, Rs y Re son como se definió en la reivindicación 1.

10. Un proceso para preparar compuestos de fórmula B como se definió en la reivindicación 1, caracterizado porque comprende uno de los siguientes a) hacer reaccionar un compuesto de fórmula V: (V) en donde R?-R6, X, Y y Z están definidos anteriormente, con un compuesto de la fórmula R?4C(W)SH bajo condiciones adecuadas para la reacción Mitsunobu para dar un compuesto correspondiente de fórmula lb (i.e. fórmula B en donde n'=l y A es Ri4C(=W)-); b) hacer reaccionar un compuesto de fórmula VI: (VI) en donde Ri-Rß, X, Y y Z están definidos en la reivindicación 1, y J es un grupo saliente con un compuesto de fórmula A' SH en donde A' es un metal álcali o un grupo R14 C(W)- o una sal del mismo para dar un compuesto correspondiente de fórmula la o lb (i.e. fórmula B en donde n'=l y A es H o R C(=W)-); c) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula VII: (VII) en donde Ri, R2, R3, X, Y, Z y n' es como se definió en la reivindicación 1, y cuando n'=l, R40 es H o R?4C(=W)-, y cuando n'=2, R4o está ausente (i.e. un disulfuro), con un compuesto de la fórmula VIII; (Viii) en donde R4, R5 y Re son como se definió antes y J es un grupo saliente tal como se describió anteriormente, para dar un compuesto correspondiente de fórmula B; o d) hidrolizar un compuesto de fórmula B en donde Ri-Rß, X, Y y Z están definidos en la reivindicación 1, n'= 1 y A es R?4C(=W)- (i.e. fórmula lb) , para dar un compuesto correspondiente de fórmula la (i.e. fórmula B en donde A es H); e) reducir un compuesto de fórmula B en donde R?-R6, X, Y, y Z están definidos en la reivindicación 1, n'=l y A es R?4C(=W)-(i.e. fórmula lb) , o n' es 2 (i.e. fórmula lc) , para dar un compuesto correspondiente de fórmula la (i.e. fórmula B en donde A es H) ; f) oxidar un compuesto de fórmula B en donde R.--R6, X, Y y Z están definidos en la reivindicación 1, n'=l y A es H (i.e. fórmula la) , para dar un compuesto correspondiente de fórmula lc (i.e. fórmula B en donde n'=2) ; g) reducir una mezcla (e.g. racemato) de isómeros ópticamente activos de un compuesto de fórmula B para aislar un enantiómero o diastereómero substancialmente libre del otro enantiómero o diastereómeros; o h) acidificar un compuesto básico de fórmula B con un ácido aceptable farmacéuticamente para dar una sal aceptable farmacéuticamente.

11. Uso de una cantidad efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 para la manufactura de un medicamento para inhibir los cambios patológicos mediados por una enzima convertidora de TNF-a (TACE) en un mamífero en necesidad de la misma.

12. El uso de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque la enfermedad tratada es artritis reumatoide, rechazo de injertos, caquexia, inflamación, fiebre, resistencia a la insulina, choque séptico, falla congestiva del corazón, enfermedad inflamatoria del sistema nervioso central, enfermedad inflamatoria del intestino o infección por VIH.

13. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 o una sal del mismo y un portador farmacéuticamente aceptable del mismo.

14. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es 4-But-2-iniloxi-N- ( (IR) -2 -mercapto -1-metil-etil) -N-metil-bencensulfonamida.

15. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es (2R) -2- { { [4- (2-Butiniloxi) fenil] sulfonil} [2- (4-morfolinil) etil] amino} -3-sulfanilpropanamida.

16. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es 4- (2-Butiniloxi) -N- [ (IR) -l-metil-2-sulfaniletil] -N- [2- (4-morfolinil) etil] bencensulfonamida.