MXPA00012239A - Compuestos de amonio cuaternario como agentes antitusivos - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a nuevos compuestos y composiciones farmacéuticas que contienen tales compuestos y poseen actividad anti- tusiva, fórmula (I), o un solvato o sal del mismo farmaceúticamente aceptable, en donde Y y E son independientemente seleccionados de CH2- R16, o un grupo representado por la fórmula (II).

Description

COMPUESTOS DE AMONIO CUATERNARIO COMO AGENTES ANTITUSIVOS Campo de la Invención Las preparaciones expectorantes convencionales que contienen un agente anti-tusivo efectivo tal como codeína, han sido usados ampliamente para el alivio sintomático de la tos. Sin embargo, la codeina tiene varios efectos laterales los cuales son indeseables.

Antecedentes de la Invención En consecuencia, la presente invención se refiere a compuestos y composiciones farmacéuticas que tienen actividad anti-tusiva, y a un método de tratamiento de animales de sangre caliente afectados por la tos, mediante la administración de una cantidad efectiva de los compuestos o las composiciones farmacéuticas de la invención.

Breve Descripción de la Invención Los problemas de la técnica anterior han sido superados por la presente invención, la cual Ref . 125723 ^^^ ¡ ..% $ -, . i ¡fcafc. *,. . proporciona composiciones farmacéuticas que poseen actividad anti-tusiva, y a un método de administración de la misma a animales de sangre caliente, incluyendo humanos. El agente anti-tusivo activo de conformidad con la presente invención, es un compuesto de amonio cuaternario representado por la siguiente fórmula (I) o un solvato o sal del mismo farmacéuticamente aceptable: R Y-N-£ AiT © I en donde Y y E son independientemente, seleccionados de -CH2-Ri6 o un grupo representado por la siguiente fórmula (II) : en donde R, Ri, R:, R3, R R5 Re y Ríe son 25 independientemente seleccionados de hidrógeno , j¡^g*gfo : alquilo C?-C8, alcoxialquilo C3-C8 y aralquilo C7-C?2; m es un entero de 1 a 8 y n es un entero desde 0 a 8 ; A se selecciona a partir de alquilo C¿ - ? , un anillo carbociclico C3-C?3, y sistemas de anillos seleccionados de las fórmulas (III), (IV), (V), (VI), (VII) , (VIII) , (IX) y (X) : Dao* 9 mé* -ecve) -33* en donde R7, Rß r R9/ Rio, Rn y R12 son independientemente seleccionados de bromo, cloro, flúor, carboxi, hidrógeno, hidroxi, hidroximetilo, metanosulfonamido, nitro, sulfamilo, trifluorometilo, alcanoiloxi C2-Ct, alquilo C1-C0, alcoxi C?-C6, alcoxicarbonilo C2-C-, tioalquilo 'C?-C0, arilo y N(R:3, Rp), en donde R:. y R._ son independientemente seleccionados de hidrógeno, acetilo, metanosulfonilo y alquilo C?-Ce, y Z se selecciona de CH, CH2, O, N y *.&- » S, en donde Z puede ser directamente unido a X cuando Z es CH, o X puede ser un enlace directo a Z cuando Z es N, o Z puede ser unido directamente a R15 cuando Z es N y X no es un enlace directo a Z, Ri5 se selecciona de hidrógeno, alquilo C?-C5, cicloalquilo C3-Ce, arilo y bencilo; y X es N-R0, excepto que cuando Z en A es nitrógeno y X es un enlace directo a Z ; An" es la sal de adición acidica de un ácido farmacéuticamente aceptable o el anión de la sal farmacéuticamente aceptable, y las isoformas geométricas, diastereoméricas, enantioméricas aisladas del mismo, y mezclas de los mismos, con la condición de que Y no puede ya sea -CH2-R?6 estar en el mismo compuesto, y cuando Y está representado por la fórmula (II) cuando n es 0, m es 1, R? y R3 son cada uno, hidrógeno, X es N-H y A está representado por la fórmula (III), entonces E no es -CH2-Ri6 o el mismo como Y.

Breve Descripción de los Dibujos La Figura 1 es un diagrama de flujo que muestra la disposición del aparato experimental usado para la determinación de la tos; y Las Figuras 2A y 2B son registros a escala ampliados de los cambios de presión derivados del transductor de presión diferencial durante las respuestas características presentadas por un cobayo durante la exposición a un aerosol con ácido citrico. 5 Descripción Detallada de la Invención Como se usó aqui, los siguiente términos tienen los siguientes significados: 10 "Alquilo" se refiere a un fragmento de hidrocarburo ramificado o no ramificado, que contiene el número especificado de átomos de carbono y que tiene un punto de unión. Los ejemplos incluyen n- propilo (un alquilo C3) , isopropilo (también alquilo C3) y t-butilo (un alquilo C4) . "Alcoxialquilo" se refiere a un grupo alquileno substituido con un grupo alcoxi. Por ejemplo, metioxietilo (CH3OCH2CH2- ) y etoximetilo (CH3CH2OCH2- ) son ambos grupos alcoxialquilo C3. 20 "Alquileno" se refiere a un radical divalente, el cual es un fragmento de hidrocarburo ramificado o no ramificado que contiene el número especificado de átomos de carbono y que tiene dos puntos de unión. Un ejemplo es propileno (-CH2CH2CH2-) , un alquileno C¿.

"Aralquilo" se refiere a un grupo alquileno en donde uno de los puntos de unión es a un grupo arilo. Un ejemplo es el grupo bencilo (C6H5CH2-), un grupo aralquilo C7. "Alcanoiloxi" se refiere a ?n substituyente éster en donde el oxigeno del éter es el punto de unión a la molécula. Los ejemplos incluyen propanoiloxi ( CH3CH2C ( 0) -O- ) , un alcanoiloxi C3 y etanoiloxi (CH3C(0)-0), un alcanoiloxi. "Alcoxi" se refiere a un átomo O-substituido por un grupo alquilo, por ejemplo metoxi (-0CH3), un alcoxi Ci . "Alcoxicarbonilo" se refiere a un substituyente éster en donde el carbono de carbonilo es el punto de unión a la molécula. Los Ejemplos incluyen etoxicarbonilo ( CH3CH:0C (=0) ) , un alcoxicarbonilo C3, y metoxicarbonilo (CH30C(0)-), un alcoxicarbonilo C2. "Arilo" se refiere a grupos aromáticos, los cuales tienen al menos, un anillo que tiene un sistema de electrón pi conjugado e incluyen arilo carbociclico, arilo heterociclico (también conocido como grupos heteroarilo) y grupos biarilo, de los cuales todos pueden ser opcionalmente substituidos. Los grupos arilo carbociclicos son generalmente preferidos en los compuestos de la presente invención, en donde los grupos fenilo y naftilo son grupos arilo carbociclicos preferidos. "Cicloalquilo" se refiere a un anillo, el cual puede ser saturado o no saturado y monocíclico, bicíclico o tricíclico, formado completamente de átomos de carbono. Un ejemplo es el grupo ciclopentenilo (C5H-7-), el cual es un grupo cicloalquilo no saturado de cinco carbonos. "Carbocíclico" se refiere a un anillo, el cual puede ser ya sea un anillo arilo o un anillo cicloalquilo, ambos como se definen anteriormente. "Tioalquilo" se refiere a un átomo de azufre substituido por un grupo alquilo, por ejemplo tiometilo (CH3S), un tioalquilo Ci . El origen de la tos a ser tratada por la presente invención no está particularmente limitada, y puede incluir virtualmente cualquier alteración respiratoria, tal como padecimiento pulmonar obstructivo crónico, tuberculosis, bronquitis, malignidades respiratorias, asma, alergia, fibrosis pulmonar, inflamación del tracto respiratorio, enfisema, neumonía, cáncer de pulmón, presencia de cuerpos extraños, garganta elevada, resfriado común, influenza, infección del tracto respiratorio, broncoconstricción, inhalación de irritantes, tos de fumadores, tos no productiva crónica, tos neoplástica, tos debida a la terapia inhibidora de la enzima de conversión de la angiotensión (ACE) . La tos también puede ocurrir sin una causa conocida. Los compuestos de la presente invención son sales de amonio cuaternario representadas por la siguiente fórmula (I), o un solvato o sal del mismo farmacéuticamente aceptable: 10 R le Y-K-€ An" © I R? en donde Y y E son independientemente seleccionados de -CH2-Ri6 o un grupo representado por la siguiente fórmula (II): en donde R , Rx , R- R 3 , R R 5 , R£ RK son ^m*ajw^^^jj*g^^ independientemente seleccionados de hidrógeno, alquilo C?-C8 alcoxialquilo C3-C8 y aralquilo C7-C?2; m es un entero de 1 a 8 y n es un entero desde 0 a 8; A se selecciona a partir de alquilo C5- 12, un anillo carbociclico C3-C3.3, y sistemas de anillos seleccionados de las fórmulas (III), (IV), (V), (VI), (VII) , (VIII) , (IX) y (X) : en donde R7, R8^ R9, Rio R11 y R12 son independientemente seleccionados de bromo, cloro, flúor, carboxi, hidrógeno, hidroxi, hidroximetilo, metanosulfonamido, nitro, sulfamilo, trifluorometilo, alcanoiloxi C2-C7, alquilo C?-C6, alcoxi C?-C6, alcoxicarbonilo C2-C7, tioalquilo C]-C6, arilo y N(Ri3, R14)/ en donde R13 y R? son independientemente seleccionados de hidrógeno, acetilo, metanosulfonilo y alquilo C?-C6, y Z se selecciona de CH, CH2, O, N y S, en donde Z puede ser directamente unido a X cuando Z es CH, o X puede ser un enlace directo a Z cuando Z es N, o Z puede ser unido directamente a Ri5 cuando Z es N y X no es un enlace directo a Z, R15 se selecciona de hidrógeno, alquilo Ci-Cd, cicloalquilo C3-C8, arilo y bencilo; y X es N-R6, excepto que cuando Z en A es nitrógeno y X es un enlace directo a Z; An" es la sal de adición acídica de un ácido farmacéuticamente aceptable o el anión de la sal farmacéuticamente aceptable, y las isoformas geométricas, diastereoméricas, enantioméricas aisladas del mismo, y mezclas de los mismos, con la condición de que Y no puede ya sea -CH2-Ri6 estar en el mismo compuesto, y cuando Y está representado por la fórmula (II) cuando n es 0, m es 1, R: y R3 son cada uno, hidrógeno, X es N-H y A está representado por la fórmula (III) (es decir, Y es -CHj-C- H-? ) ) , i entonces E no es -CH:-R?6 o el mismo como Y. Un compuesto preferido de la presente invención es un compuesto de la fórmula (I) como se representa mediante el cloruro de N,N-bis-[(l- indolinil ) carbonilmeti 1 ] dimetilamonio con la s iguiente est ructura Otro compuesto preferido de la presente invención es un compuesto de la fórmula (I) como se representa por el cloruro de N-[(l- 10 indolinil) carbonilmetil] -N- ( fenilcarbonilmetil ) dimet ilamonio con la siguiente estructura : Otro compuesto preferido de la presente invención es un compuesto de fórmula (I) como se representa por el cloruro de N- [ (1- indolinil ) carbonilmetil ] trietilamonio, con la siguiente estructura: -^U '^r^^^té^^^k^^dhX ,^, Otro compuesto preferido de la presente invención es un compuesto de la fórmula (I) como se representa por el cloruro de N,N-bis-[(l-naftil) carbonilmetil] dimetilamonio con la siguiente estructura : Los compuestos de la presente invención pueden ser preparados por analogía con metodología sintética conocida (véase por ejemplo, Patente Belga 614,154, la cual sigue de la Patente Suiza 1779/71, descripciones de las cuales están aquí incorporadas para referencia) . Una vía convencional de la síntesis, involucra tres etapas y pueden ser descritas (como en la patente mencionada anteriormente, véase también T. Takahashi, J. Okada, M. Hori, A. Kato, K. Kanematsu, y Y. Yamamoto, J. Pharm . Soc . Japón 16, 1180-6 (1956)) como sigue. En una primera etapa, una amina aromática se hace reaccionar con cloruro de cloroacetilo en un solvente adecuado tal como diclorometano y en la presencia de trietilamma . La reacción se conduce a baja temperatura (-15°C) y el producto deseado es recuperado de la mezcla de reacción mediante técnicas de química orgánica convencional, y si es necesario, puede ser purificada por técnicas de cromatografía. En una segunda etapa, el derivado clorado anterior puede hacerse reaccionar con una amina terciaria en un solvente tal como metanol con un catalizador (por ejemplo, yoduro de potasio) para formar una sal de amonio cuaternario. El intermediario clorado puede reaccionar así también con una amina secundaria para proporcionar la amina terciaria correspondiente, la cual entonces, además, se hace reaccionar con un derivado clorado para formar una sal de amonio cuaternario. Los procedimientos sintéticos descritos aquí, especialmente cuando se toman con el conocimiento general en la técnica, proporcionan suficiente guía para aquellos ordinarios expertos en la técnica, para realizar la síntesis, aislamiento y purificación de los compuestos de la presente invención . Las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas, incluyen sales de adición acídicas, tal como ácido clorhídrico, bromhídrico, bencensul fónico (besilato), benzoico, canforsul fónico, etanosulfónico, fumárico, glucónico, glutámico, isetiónico, maléico, málico, mandélico, metanosul fónico, mucico, nítrico, pamóico, pantoténico, succínico, p-toluensulfónico, fosfórico, sulfúrico, cítrico, tartárico, láctico y acético, aunque la sal de adición acídica preferida es la sal de clorhidrato. La magnitud de la dosis terapéutica o profiláctica de los compuestos de la presente invención en el tratamiento y/o prevención de la tos, dependerá de la severidad y naturaleza de la condición a ser tratada y la ruta de administración. La dosis y frecuencia de la dosificación también variará de conformidad con la edad, peso corporal y respuesta individual del paciente. En general, el rango de dosis diaria total para los compuestos de la presente invención para el tratamiento o prevención de la tos es de aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 800 mg en dosis únicas o repetidas. Cualquier ruta adecuada de administración puede ser empleada para proporcionar una dosificación efectiva de los compuestos de la presente invención aunque la administración por inhalación es preferida, más preferiblemente en forma de aerosol. Las formas adecuadas de administración incluyen, pero no están limitadas a, inhalación (liberadas mediante, por ejemplo, inhaladores de dosis medida, nebulizadores a chorro, nebulizadores ultrasónicos, inhaladores de polvo seco, etc.), aerosoles nasales, nebulización, administración oral como por vía de tabletas, cápsulas, pastillas, jarabes, aerosoles, suspensiones, elixirs, enjuagues bucales, y otras preparaciones líquidas, espumas de aerosol, administración parenteral y administración sublingual . Los compuestos de la presente invención pueden incluir portadores farmacéuticamente aceptables y otros aditivos convencionales, incluyendo portadores de base acuosa, co-solventes tales como alcohol etílico, propilenglicol y glicerina, rellenadores, lubricantes, agentes humectantes, agentes saborizantes, agentes colorantes, emulsificantes, agentes de suspensión o dispersantes, agentes de suspensión, etc. Para la liberación en aerosol de los compuestos de la presente invención, diluyentes farmacéuticamente aceptables, portadores, y/o propulsores pueden estar incluidos en la formulación para uso en dispositivos apropiados. Estos son preparados por procedimientos bien conocidos por aquellos expertos en la técnica (véase por ejemplo, Medications Teaching Manual, 5th Ed., Bethesda, MD, American Society of Hospital Pharmacists, 1991). Las composiciones de la presente invención pueden incluir opcionalmente otros agentes terapéuticos conocidos, incluyendo descongestionantes tales como HCl seudoefedrina, HCl fenilefrina y HCl efedrina, fármacos anti-inflamatorios no esteroidales tales como acetaminofeno, aspirina, fenacetina, ibuprofeno y cetoprofeno, expectorantes tales como guaiacolato de glicerilo, hidrato de terpina y cloruro de amonio, anties taminas tales como maleato de clorfeniramina, succinato de doxilamina, maleato de bromfeniramina y clorhidrato de difenidramina, y compuestos anestésicos tal como fenol. Los siguientes ejemplos se ofrecen por medio de ilustración y no por medio de limitación.

EJEMPLO 1 Cloruro de N, N-Bis- [ (1 -indol inil) carbonil-metil ] dimetilamonio Cloroacetindolida: A una solución enfriada (-13CC) de indolina (12 g, 100 mmol) y trietilamina (37 ml, 262 mmol) en dilcorometano (350 ml ) se agregó gota a gota una solución de cloruro de cloroacetilo (10.6 ml, 131 mmol) en diclorometano (250 ml) . La mezcla de reacción se agitó a -13°C por 30 minutos adicionales y entonces se dejo calentar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se lavó con agua (600 ml ) , la capa acuosa se colecto y se extrajo una vez más con diclorometano (200 ml) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y el solvente se evaporó i n va c uo para producir el compuesto del titulo crudo. La purificación por cromatografía en columna seca con mezclas de acetato de etilo-hexanos como eluyentes seguido por recristalización de metanol proporcionó 16 g del compuesto del compuesto de título. ii) Dimetilaminoacetindolida : Una mezcla de cloroacetindolida (8.5 g, 43.4 mmol) en dimetilamina al 40% de peso, una solución en agua (85 ml) se sometió a reflujo por una hora. La mezcla de reacción enfriada se dividió entre una solución (85 ml ) de 1M de NaOH acuoso y diclorometano (170 ml) . La capa acuosa se colecto y se extrajo una . . . Wj. ,^m..^. , ,t , . .. - ...»^-,-„ . ? ^ g.. vez más con diclorometano (85 ml ) . Los extractos orgánicos combinados se lavaron posteriormente con agua 9200 ml, 100 ml) y se secaron sobre sulfato de sodio. La evaporación del solvente i n va c uo produjo 8.8 g del compuesto del titulo (95% de rendimiento) . iii Cloruro de N, N, -Bis- [ ( 1-indolinil ) carbonilmetil] dimetilamonio Una mezcla de cloroacetindolida (1.96 g, 10 mmol), dimetilaminoacetindolida (2.04 g, 10 mmol) y yoduro de potasio (0.017 g, 0.1 mmol) en metanol (20 ml) se calentó a 80°C por 16 horas. Se agregó a la mezcla de reacción enfriada, éter dietilíco (20 ml) . Lo precipitado resultante se colectó y se recristalizó de una mezcla de metanol-éter dietilíco (1:1, v/v) para producir 3.35 g (84% de rendimiento) del compuesto del titulo, caracterizado por análisis elemental como se expone en la Tabla 1.

EJEMPLO 2 Cloruro de N- [ (1-Indolinil) carbonilmetil] -N- ( fenilcarboailmetil ) dimetilamonio i) Cloroacetindolida A una solución enfriada (-13°C) de anilina (18.2 g, 200 mmol) y trietilamina (73 ml , 520 mmol) en diclorometano (350 ml) se agregó gota a gota una solución de cloruro de cloroactilo (2L.1 ml , 260 ml ) en dicloroe tano (250 ml ) . La mezcla de reacción se agitó a -13°C por 30 minutos adicionales y entonces se dejo calentar hasta temperatura ambiente. La mezcla de reacción se lavó con agua (600 ml ) , la capa acuosa se colectó y se extrajo una vez más con diclorometano (200 ml) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y el solvente se evaporo i n va cuo para producir el compuesto del titulo. La purificación por cromatografía en columna seca con mezclas de acetato de etilo-hexanos como eluyentes seguido • pro recristalización de metanol proporcionó 29.6 g (87% de rendimiento) del compuesto del titulo. ii) Dimetilaminoacetindolida : Ver etapa i y ii del Ejemplo 1 iii) Cloruro de N- [( 1-indolinil ) carbonilmetil] -N-feni Icarbamoi lmetil ) dimetilamonio Una mezcla de cloroacetindolida (1.20 g, 7.08 mmol), dimetilaminoacet indolida (1.44 g, 7.08 mmol) y yoduro de potasio (0.012 g, 0.071 mmol) en metanol (15 ml) se calentó a 80°C por 16 horas. Se agregó a la mezcla de reacción enfriada éter dietilíco (15 ml ) . Lo precipitado resultante se colecto y se recristalizó de una mezcla de metanol-éter dietilíco (1:1, v/v) para producir 2.18 g (82% de rendimiento) del compuesto del titulo, caracterizado por análisis elemental como se muestra en la Tabla 1.

EJEMPLO 3 Cloruro de N- [( Indolinil ) carbonilmetil ] trietilamonio I) Cloroacetindolida: Véase etapa i del Ejemplo 1. ii ) Cloruro de N- [ ( 1- indolinil ) carbonilmetil] trimetil] trietilamonio : Una mezcla de cloroacet indol 1 da (1.8 g, 9.2 mmol), trietilamina (4.0 ml , 28.7 mmol) y yoduro de potasio (0.015 g, 0.092 mmol) en metanol (20 ml) se calentó a 80°C por 36 horas. A la mezcla de reacción enfriada se le agregó éter dietílico (50 ml ) . Lo precipitado resultante se colectó y recristalizó de una mezcla de éter de metanol-acetona-dietí lico (1:3:8, v/v/v) para proporcionar 2.07 g (rendimiento 76%) del compuesto del titulo, caracterizado por análisis elemental como se expone en la Tabla 1.

EJEMPLO 4 Cloruro de N,N-bis- [ (1-naftil) carbonilmetil ] dimetilamonio 10 Cloroacetindolida : A una solución enfriada (0°C) del 1- naftilamina (25 g, 174 mmol) y carbonato de potasio (29 g, 209 mmol) en cloroformo (150 ml) se agregó una solución de cloruro de cloroactilo (15.3 ml, 192 15 mmol) en cloroformo (100 ml) . El sólido se colectó, se lavó con agua (300 ml), y después se extrajo con éter dietílico vía extracción Soxhlet para proporcionar 17.5 g (46% de rendimiento) del compuesto del titulo. 20 ii) Dimetil aminoacetil-1-naftilamida Una mezcla de cloroacetil-1-naftilamida (8.96 g, 39 mmol) en solución de dimetilamina 40% peso en agua (100 ml) se sometió a reflujo por una hora. La mezcla de reacción enfriada se dividió entre ^""wJ ' . «-i.» -. .- . ¿t«?. *— **— „ -- ... t- ., . ,. . . . < íl«a.-¿i«.J , solución acuosa NaOH 1M (80 ml) y diclorometano (100 ml) . La capa acuosa se colectó y se extrajo una vez más con diclorometano (100 ml ) . Los extractos orgánicos combinados se lavaron posteriormente con agua (2 x 50 ml) y se secaron sobre sulfato de sodio. La evaporación del solvente in vacuo proporcionó 8.87 g (100% rendimiento) del compuesto del titulo. iii) Cloruro de N,N-bis- [ (1- naftil ) carbonilmetil ] dimetilamonio : Una mezcla de cloroacetil-1-naftilamida (6.59 g, 30 mmol), dimeti laminoacetil- 1-naftilamida (6.85 g, 30 mmol) y yoduro de potasio (50 mg, 0.3 15 mmol) en m-xileno anhidro (30 ml ) se sometió a reflujo por 1 hora. Lo precipitado resultante se colectó mientras la mezcla de reacción estaba todavía caliente y se lavó con porciones calientes de alcohol etílico para proporcionar 4.6 g (34% de rendimiento) 20 del compuesto del titulo. El análisis de TLC y la electrofóresis por capilaridad de una muestra alícuota, mostró al compuesto como puro. ^^&d&&^^&ua^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ ^^^ ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^t^^^^^l^^^&&t^^ TABLA 1 EJEMPLO 5 El siguiente método fue uno de los métodos generales disponibles para determinar la actividad anti-tusiva de los compuestos de la presente invención . Cobayos de cepas Dunkin-Hartley albinos, machos (peso 300-400 g) se suministraron por Harían UK Ltd., Bicester, Oxon, UK. El método usado se modificó a partir de aquellos descritos por Adcock J.J., Schneider C y Smith T. ., "Effects of Morphine and a Novel Opioid Pentapeptide BW443C, on Coug, Nociception and Ventilation en the Unanaestheti zed Guinea-pig", Br J.

Pharma col . , 93, 93-100 (1998). Cobayos conscientes individuales, se colocaron incontenibles en una cámara de exposición perspex movible a propósito sellada (3,000 cm3 de volumen) y se dejaron climatizar antes de la administración del aerosol. El arreglo del aparato experimental usado se muestra en la Figura 1. El cilindro de aire se introdujo en la cámara de exposición a una relación de flujo de 1 litro/minuto, mantenida por una válvula de aguja y se monitoreó por un rotámero. Del rotámero, el aire pasa a través de la copa de un nebulizador ultrasónico (DeVilbis UltraNeb 2000) el cual se usó para generar aerosoles de fármaco o ácido cítrico a 0.15 ml/min. Un neumatógrado Fleish, conectado a un transductor de presión diferencial (Grass modelo PT5) se unió a la salida del flujo a partir de la cámara de exposición y proporcionó una medición de flujo de aire a partir de la cámara. El transductor de presión diferencial se conectó a un polígrafo Grass a partir del cual se produce un registro de copia duro. La salida del polígrado se dirigió a un sistema de adquisición de datos computarizados (poh-Ne-Mah) para el registro de tiempo real de los datos. Un micrófono unido por un fijador se colocó en la cámara de exposición y se conectó vía un pre-ampli ficador a una salida de amplificador para proporcionar al observador con un monitor de audio de respuestas. Las respuestas a la tos se indujeron mediante la exposición a un aerosol de ácido cítrico (1M) por 10 minutos. Los animales fueron continuamente monitoreados por el observador entrenador, y el número de toses se contaron durante un periodo de 15 minutos a partir del comienzo de la administración del aerosol de ácido cítrico. Se produjeron tres respuestas características por la exposición al ácido cítrico: tos, estornudo y meneo de "perro mojado". Los tres tipos de respuestas se diferenciaron principalmente por sonido y observación visual. La confirmación de los números de múltiples toses se determinó por la referencia al cambio en la proporción del flujo mostrada por el monitor de sistema Poh-Ne-Mah. Las impresiones que demuestran la característica de los cambios de presión de la respuesta diferente al irritante, se muestran en las en las Figuras 2A y 2B. Los datos registrados para los cobayos individuales en el sistema Poh-Ne-Mah se almacenaron en un disco óptico. Cada tos se marcó en el trazo de papel polígrafo Grass, y a partir de estos números registrados se determinaron la frecuencia y tiempo del comienzo de la tos. La respuesta de la tos se definió por un sonido de expectoración característica y conducta, asociada con un cambio de presión bifásica marcado. Los cambios de presión bifásicas asociados con un estornudo, no fueron de una magnitud mayor como aquellas asociadas con una tos, la elevación secundaria en la presión también está menos lejos que durante una tos (Figura 2B) . El sonido de un estornudo difiere de aquel de una tos, y el estornudo se asoció con la actividad de fricción de la nariz. La tercer respuesta, un meneo de "perro mojado", produce una elevación en solamente la presión (Figura 2A) y carece del sonido definitivo de una tos o estornudo. Las cantidades de fármacos se pesaron completamente y se disolvieron en un vehículo. Los volúmenes iguales se sometieron a alícuotas en tubos de muestras antes de ser pasados, junto con otro tubo de muestra que contiene el mismo volumen del vehículo, a un observado independiente para codificación. Los pre-tratamientos se igualaron por la concentración junto con un grupo de control de vehículo. Se distribuyeron aleatoriamente cinco cobayos a cada grupo de tratamiento. Los animales se pre-trataron con ya sea el vehículo (salina estéril al 0.9%), lidocaína o fármacos de prueba por 5 minutos inmediatamente antes de la exposición al aerosol de ácido cítrico. Los fármacos de prueba y la lidocaína se administraron como aerosoles a concentraciones de 0.1, 1.0 y 10.0 mg/ml. La secuencia de administración de pre-tratamiento se determinó de conformidad con el diseño Latin Suare 4x4. Los datos presentados como el número nedia+SEM de tos producida por los cobayos individuales dentro de cada grupo durante el periodo de observación de 15 minutos o latencia media+SEM de tos, se analizaron usando una forma de análisis de varianza para comparar las respuestas medias entre los grupos igualados de los animales (dosis) y entre los grupos no igualados (tratamientos) seguida por el ensayo de comparación múltiple Tukey-Kramer cuando fuera apropiado. En una serie de experimentos usando el protocolo general descrito anteriormente, se probó la actividad anti-tusiva de cloruro de N-[(l-indolinil ) carbonilmetil ] -N- ( fenilcarbamoilmeti 1 ) dimetilamonio (compuesto 2) . Los resultados muestran que el pre-tratamiento de los _^¿_^. ¡¿ . , ^, í&. , -.- , «t , „ . .- i-.-^ ^-^ . . „ -. -ava-a , 8 Xa Aásm cobayos con aerosoles del Compuesto 2 a 10.0 mg/ml inmediatamente antes de la exposición al ácido cítrico (1M) inhibió la respuesta de la tos por 56% comparado con el vehículo (agua destilada) de cobayos pre-tratados durante el periodo de observación de 15 minutos. Al mismo tiempo, la latencia media del comienzo de la tos se prolongó por cuatro veces. La actividad anti-tusiva de cloruro N-[(l-indolinil) carbonil-metil] trietilamonio (Compuesto 3) fue similarmente probada. El pre-tratamiento de los cobayos con aerosoles del Compuesto 3 a 10.0 mg/ml inmediatamente antes de la exposición al ácido* cítrico (1M), reduce las respuestas de tos por 36% comparada con el vehículo (agua destilada) de los cobayos pre-tratados durante el periodo de 15 minutos de observación. Los resultados del mismo experimento mostraron que el tiempo al primer registro de respuesta de tos estimulado por el ácido cítrico se prolongó por el pre-tratamiento del Compuesto 3 inmediatamente antes de la exposición al ácido cítrico, cuando la latencia del comienzo de la tos se incrementó 2.5 veces.

EJEMPLO 6 En otro experimento similar a aquel descrito anteriormente en el Ejemplo 5, la duración de los efectos anti-tusivos de los compuestos de la presente invención contra las respuestas de la tos inducidas por el ácido cítrico se investigaron en cobayos conscientes. Los agentes de prueba o vehículo, se administraron como pre-tratamientos de aerosol (10 mg/ml, 5 minutos de duración) a 5 minutos, 30 minutos, 1 hora, 2 horas y 4 horas previas a la inducción de las respuestas de tos por el aerosol de ácido cítrico.

EJEMPLO 7 Los efectos anti-tusivos de un pretratamiento de 5 minutos con los compuestos aerosolizados de la presente invención y lidocaína en la tos inducida por aerosol con capsaicina, se investigaron en cobayos conscientes usando un método similar a aquel descrito en el Ejemplo 5.

EJEMPLO 8 El tratamiento terapéutico con los compuestos de la presente invención puede también ser determinado por un método similar co o se describe en el Ejemplo 5. Los efectos anti-tusivos de los compuestos de la presente invención y de lidocaína administrada después de la inducción de las respuestas de tos por la exposición al aerosol de ácido cítrico, se investigaron en cobayos conscientes. El vehículo o agentes de pruebas se administraron como aerosoles (10 mg(ml); 5 minutos de duración) 2 minutos después de la exposición al comienzo del aerosol de ácido cítrico. Las respuestas de tos se registraron durante un periodo de observación de 15 minutos (t=0 a t=15 minutos) de la iniciación de la exposición al ácido cítrico.

EJEMPLO 9 Investigación de la actividad anti-tusiva del compuesto de prueba aerosolizado en respuestas de tos, inducidas por ácido cítrico en conejos conscientes .

Protocolo Veintidós conejos New Zeland Blancos, machos, se distribuyeron aleatoriamente a ya sea dos grupos de 11 conejos. Se colocaron pares de conejos (control contra prueba) en cámaras de exposición individual con un flujo de aire de 5 litros/minuto a través de las cámaras. Cada conejo se expuso a ozono (3 ppm) por 1 hora. Los conejos entonces se expusieron inmediatamente a aerosoles de ya sea vehículo (cámara 1) o el compuesto de prueba (10 mg/ml, cámara 2-) a una proporción de nebulización de 0.9 ml/min. Se indujeron las respuestas de tos con el aerosol de ácido cítrico (1.6 M) . Se contó la tos durante los 10 minutos de exposición al ácido cítrico. Todos los conejos se expusieron al ozono antes del pre-tratamiento del fármaco de prueba o vehículo .

Todas las publicaciones y solicitudes de patentes mencionadas en esta especificación están aquí incorporadas por referencia a la misma extensión como si cada publicación individual o solicitud de patente fuera específicamente e individualmente incorporada aquí por referencia. A partir de lo antes mencionado, se apreciará que, aunque las modalidades específicas de la invención han sido descritas aquí para propósitos de ilustración, varias modificaciones pueden hacerse sin desviarse del espíritu y ámbito de la invención. En consecuencia, la invención no está limitada excepto por las reivindicaciones adjuntas.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro a partir de la presente descripción de la invención. Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes. yj.

Claims (10)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula (I), o un solvato o sal farmacéuticamente aceptable del mismo: R le Y-í?-5 An" (1) I R* en donde R, y Ri, son independientemente seleccionados de hidrógeno, alquilo Ci-Cg, alcoxialquilo C3-C- y aralquilo C7-C12. E está representado por la fórmula (II) : en donde R , R3/ R y Rs son independientemente seleccionados de hidrógeno, alquilo C?-C8, alcoxialquilo C3-C8 y aralquilo C7-C12; m es un entero de 1 a 8 y n es un entero desde 0 a 8; A se ««— «~*-- selecciona a partir de alquilo C5-C12, un anillo carbociclico C3-C13, y sistemas de anillos seleccionados de las fórmulas (III), (IV), (V), (VI), (VII) , (VIII) , (IX) y (X) : en donde R-, R8, Rg/ Rio, R11 y R?2 son independientemente seleccionados de bromo, cloro, flúor, carboxi, hidrógeno, hidroxi, hidroximetilo, metanosulfonamido, nitro, sulfamilo, trifluorometilo, alcanoiloxi C2-C7, alquilo C?-C6, alcoxi C?-C6, alcoxicarbonilo C2-C7, tioalquilo CL-C6, arilo y N(Ri3, R?4), en donde Ri3 y R14 son independientemente seleccionados de hidrógeno, acetilo, metanosulfonilo y alquilo C?-C6, y Z se selecciona de CH, CH2, O, N y S, en donde Z puede ser directamente unido a X cuando Z es CH, o X puede ser un enlace directo a Z cuando Z i. t es N, o Z puede ser unido directamente a R?5 cuando Z es N y X no es un enlace directo a Z, R?5 se selecciona de hidrógeno, alquilo Ci-Cß, cicloalquilo C3-C8, arilo y bencilo; y X es N-R6, excepto que 5 cuando Z en A es nitrógeno y X es un enlace directo a Z; en donde R6 es independientemente seleccionado de hidrógeno, alquilo C?-C8, alcoxialquilo C3-C8 y aralquilo C7-C12; Y es independientemente seleccionado de -CH2R?6 o un 10 grupo representado por la fórmula (II), en donde Ri6 es independientemente seleccionado de hidrógeno, alquilo C?-C8, alcoxialquilo C -C8 y aralquilo C7-C12; An" es la sal de adición acídica de un ácido farmacéuticamente aceptable o el anión de una" sal 15 farmacéuticamente aceptable, y las isoformas geométricas, diastereoméricas, enantioméricas aisladas del mismo, y mezclas de los mismos, con la condición de que cuando A en E es alquilo C5-C?2 o un anillo carbocíclico C3-C13. Y no puede ya sea 20 -CH2-R16; y cuando A en E está representado por la fórmula (III), Y no puede ser -CH2R?6 o el mismo como E. 25 ^^^£¡^^^^L_ ?^S¿^_ __^_;^_^^_t^!é^ £ ^i... , - .. , . , , . . i. ¿; „A,A->..- . j . ,s,¿i.i I ,ate,»..a¿,a?

2. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R y Ri son alquilo C?~C8. 5

3. Un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque Y es —CH2 ~ R? 6 • 10

4. Un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque Y es un grupo representado por la fórmula (II) .. 15

5. Un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado por que R2, R3, R y R5 son independientemente seleccionados de hidrógeno y alquilo C?-C8. 20

6. Un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque R2, R3, R y R5 son hidrógeno. 25

7. Un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque A en E es independientemente seleccionado de las fórmulas (III) , (IV) , (V) , (VI) , (IX) , y (X) .

8. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque A en Y es independientemente seleccionado de las fórmulas 10 (III) , (IV) , (V) , (VI) , (IX) y (X) .

9. Un compuesto de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, 15 caracterizado porque m es 1.

10. Un compuesto de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, 20 caracterizado porque n es 0. 25