MXPA00008111A - Antigenos de estreptococo grupo b - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a proteínas de estreptococo del Grupo B (GBS) y los polinucleótidos que las codifican. Dichas proteínas son antigénicas y por lo tanto componentes de vacunaútiles para la profilaxis o terapia de la infección por estreptococo en animales. También se describen métodos recombinantes para producir los antígenos de proteínas asícomo análisis de diagnóstico para detectar infección bacteriana por estreptococo.

Description

ANTÍGENOS DE ESTREPTOCOCO GRUPO B CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a antígenos, más particularmente antígenos de proteína del patógeno bacteriano de estreptococo Grupo B (GBS), que son útiles como componentes de vacuna para la terapia y/o profilaxis.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los espectrococos son bacterias de gramo (+) que se diferencian por los antígenos de carbohidrato específico de grupo de la A a la O encontrados en su superficie celular. Los grupos de espectrococo se distinguen además por los antígenos de polisacárido capsular de tipo específico. Se han identificado varios serotipos para el estreptococo Grupo B (GBS): la, Ib, II, lll, IV, V, VI, Vil y VIII. GBS también contienen proteínas antigénicas conocidas como "proteínas C" (alfa, beta, gama y delta), algunas de las cuales se han clonado. Aunque GBS es un componente común de la flora colónico y vaginal humana normal, este patógeno se ha reconocido por mucho tiempo como una causa principal de sepsis neonatal y meningitis, meningitis tardía en infantes, endometritis posparto así como mastitis en vacas. Las madres que esperan expuestas a GBS se encuentran en riesgo de infección posparto y pueden transferir la infección a su bebe a medida que el niño pasa a través del canal de nacimiento. Aunque el organismo es sensible a antibióticos, el ataque rápido y la velocidad de ataque elevada de la sepsis en neonatos y la meningitis en infantes da como resultado mortalidad y patología elevada. Para encontrar una vacuna que protegerá a los individuos de infección por GBS, los investigadores han vuelto a los antígenos de tipo específico. Desafortunadamente, estos polisacáridos han probado ser pobremente inmunogénicos en humanos y se restringen al serotipo particular del cual se origina el polisacárido. Además, el polisacárido capsular produce una respuesta independiente de la célula T, es decir, ninguna producción de IgG. Consecuentemente, los antígenos de polisacárido capsular son inadecuados como componentes de vacuna para la protección contra infección por GBS. Otros se han enfocado en el antígeno beta de la proteína C que demostró propiedades inmunogénicas en modelos de ratones y conejos. Se descubrió que esta proteína es inadecuada como una vacuna para humanos debido a su propiedad indeseable de interactuar con afinidad elevada y en una manera no inmunogénica con la región Fe de IgA humano. El antígeno alfa de la proteína C es raro en serotipos de tipo lll de GBS, que es el serotipo responsable de la mayoría de las condiciones mediadas por GBS y por lo tanto es de poco uso como un componente de vacuna. Por lo tanto permanece una necesidad no satisfecha de antígenos GBS que puedan utilizarse como componentes de vacuna para la profilaxis y/o terapia de infección por GBS.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN De acuerdo a un aspecto, la presente invención proporciona un polinucleótido aislado que codifica un polipéptido que tiene al menos 70% de identidad a un segundo polipéptido que comprende una secuencia seleccionada del grupo que consiste en: SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 1 1 , SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 1 5, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 1 9, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21 , SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31 , SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 y SEQ ID NO: 44 o fragmentos, análogos o derivados de las mismas. En otros aspectos, se proporcionan vectores que comprende polinucleótidos de la invención enlazados de manera operable a una región de control de expresión, así como células huésped transfectadas con dichos vectores y métodos para producir polipéptidos que comprende cultivar dichas células huésped bajo condiciones adecuadas para su expresión . En todavía otro aspecto, se proporciona polipéptidos nuevos codificados por polinucleótidos de la invención.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 a es la secuencia de ADN del clon 1 (SEQ ID NO: 1 ) con secuencias de aminoácido correspondientes para estructuras de lectura abiertas; La figura 1 b es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 2; La figura 1 c es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 3; La figura 1 d es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 4; La figura 1 e es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 5; La figura 1 f es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 6; La Figura 2a es la secuencia de ADN del clon 2 (SEQ ID NO: 7) con secuencias de aminoácido correspondientes para estructuras de lectura abiertas; La figura 2b es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 8; La figura 2c es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 9; La figura 2d es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 1 0; La figura 2e es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 1 1 ; La figura 2f es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 12; La Figura 3a es la secuencia de ADN del clon 3 (SEQ ID NO: 13) con secuencias de aminoácido correspondientes para estructuras de lectura abiertas; La figura 3b es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 14; La figura 3c es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 1 5; La figura 3d es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 16; La figura 3e es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 17; La figura 3f es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 1 8; La figura 3g es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 1 9; La figura 3h es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 20; La figura 3i es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 21 ; La Figura 4a es la secuencia de ADN del clon 4 (SEQ ID NO: 22) con secuencias de aminoácido correspondientes para estructuras de lectura abiertas; La figura 4b es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 23; La figura 4c es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 24; La figura 4d es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 25; La figura 4e es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 26; La Figura 5a es la secuencia de ADN del clon 5 (SEQ ID NO: 27) con secuencias de aminoácido correspondientes para estructuras de lectura abiertas; La figura 5b es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 28; La figura 5c es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 29; La figura 5d es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 30; La figura 5e es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 31 ; La Figura 6a es la secuencia de ADN del clon 6 (SEQ ID NO: 32); La figura 6b es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 33; La figura 6c es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 34; La figura 6d es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 35; La figura 6e es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 36; La Figura 7a es la secuencia de ADN del clon 7 (SEQ ID NO: 37); La figura 7b es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 38; La figura 7c es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 39; La figura 7d es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 40; La figura 7e es la secuencia de aminoácido SEQ ID NO: 41 ; La Figura 8 es la secuencia de ADN de una parte del clon 7 que incluye una secuencia de señal (SEQ ID NO: 42); La Figura 9 es la secuencia de ADN de una parte del clon 7 sin una secuencia de señal (SEQ ID NO: 43); La Figura 9a es la secuencia de aminoácido (SEQ ID NO: 44); La Figura 10 representa la distribución de los títulos de ELISA anti-GBS en sueros de ratones CD-1 inmunizados con proteína GBS recombinante que corresponde a la SEQ ID NO: 39.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a nuevos polipéptidos antigénicos de estreptococo Grupo B (GBS) caracterizados por las secuencias de aminoácidos seleccionadas del grupo que consiste en : SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 1 0, SEQ ID NO: 1 1 , SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 1 8, SEQ ID NO: 1 9, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21 , SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31 , SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 y SEQ ID NO: 44 o fragmentos, análogos o derivados de las mismas. Una modalidad preferida de la invención incluye SEQ ID NO: 39 y SEQ ID NO: 44. Una modalidad preferida adicional de la invención es SEQ ID NO: 39. Una modalidad preferida adicional de la invención es SEQ ID NO: 44. Como se utiliza en la presente, "fragmentos", "derivados" o "análogos" de los polipéptidos de la invención incluyen aquellos polipéptidos en los cuales uno o más de los residuos de aminoácido se substituyen con un residuo de aminoácido conservado o no conservado (preferentemente conservado) y que puede ser natural o no natural. Los términos "fragmentos", "derivados" o "análogos" de polipéptidos de la presente invención también incluyen polipéptidos que se modifican por adición, borrado, substitución de aminoácidos siempre que los polipéptidos retengan la capacidad para inducir una respuesta inmune. Por el término "aminoácido conservado" se entiende una substitución de uno o más aminoácidos por otro en el cual el determinante antigénico (incluyendo su estructura secundaria y naturaleza hidropática) de un antígeno dado se conserva completa o parcialmente a pesar de la substitución. Por ejemplo, uno o más residuos aminoácidos dentro de la secuencia pueden substituirse por otro aminoácido de una polaridad similar, que actúa como un equivalente funcional, resultado en una alteración silenciosa. Los substitutos para un aminoácido dentro de la secuencia puede seleccionarse de otros miembros de la clase a la cual pertenece el aminoácido. Por ejemplo, los aminoácidos no polares (hidrofóbicos) incluyen alanina, leucina, isoleucina, valina, prolina, fenilalanina, triptofan y metionina. Los aminoácidos neutrales polares incluyen glicina, serina, teonina, cisteína, tirosina, aspargina y glutamina. Los aminoácidos cargados positivamente (básicos) incluyen arganina, lisina e histidina. Los aminoácidos cargados negativamente (ácidicos) incluyen ácido aspártico y ácido glutámico. Preferentemente, los derivados y análogos de polipéptidos de la invención tendrán aproximadamente 70% de identidad con aquellas secuencias ilustradas en las figuras o fragmentos de las mismas. Es decir, 70% de los residuos son los mismos. Más preferentemente, los polipétidos tendrán más del 95% de homología. En otra modalidad preferida, los derivados y análogos de polipéptidos de la invención tendrán menos de aproximadamente 20 substituciones de residuos de aminoácido, modificaciones o borrados y más preferentemente menos de 1 0. Las substituciones preferidas son aquellas conocidas en la materia como conservadas, es decir, los residuos substituidos comparten propiedades físicas o químicas tales como hidrofobicidad, tamaño, carga o grupos funcionales.

Además, en aquellas situaciones en donde las regiones de aminoácido se encuentra que son poliméricas, puede ser deseable variar uno o más aminoácidos particulares para imitar de manera más eficaz los diferentes epítopos de las diferentes cadenas de GBS. También incluidos son los polipéptidos que tienen unidos a los mismos otros compuestos que alteran las propiedades farmacológicas o biológicas de los polipéptidos, es decir, glicol de polietileno (PEG) para incrementar el periodo de vida media; las secuencias de aminoácido secretorias o líder para facilidad de purificación; prepro- y pro-secuencias; y (poli) sacáridos. Además, los polipéptidos de la presente invención pueden modificarse por acilación de -NH2 terminal (por ejemplo, mediante acetilación, o amidación de ácido tioglicólico, amidación de carbosi terminal, por ejemplo, con amonio o metilamina) para proporcionar estabilidad, hidrofobicidad aumentada para enlace o unión a un soporte u otra molécula. También se contemplan los multímeros de hetero y homo polipéptido de los derivados, análogos y fragmentos de polipéptido. Estas formas poliméricas incluyen, por ejemplo, uno o más polipéptidos que se han degradado con degradantes tales como avidina/biotina, gluteraldehído o supermidato de dimetilo. Tales formas poliméricas también incluyen polipéptidos que contienen dos o más secuencias contiguas invertidas o en tándem, producidas de mARNs multicistrónicos generados por teconología de ADN recombinante. Preferentemente, un fragmento, análogo o derivado de un polipéptido de la invención comprenderá al menos una región antigénica, es decir, al menos un epítopo. Con objeto de lograr la formación de polímeros antigénicos (es decir, multímeros sintéticos), los polipéptidos pueden utilizarse teniendo grupos bishaloacetilo, nitroarilhaluros o lo similar, en donde los reactivos son específicos para grupos tio. Por lo tanto, el enlace entre dos grupos mercapto de los diferentes péptidos puede ser una unión única o puede componerse de un grupo de enlace de al menos dos, típicamente al menos cuatro, y no más de 16, pero usualmente no más de aproximadamente 14 átomos de carbono. En una modalidad particular, los fragmentos de polipéptido, análogos o derivados de la invención no contienen un residuo inicial de metionina (Met). Preferentemente, los polipéptidos no incorporarán una secuencia secretoria o líder (secuencia de señal). La porción de señal de un polipéptido de la invención puede determinarse de acuerdo a técnicas biológicas moléculas, establecidas. En general, el polipéptido de interés puede aislarse de un cultivo de GBS y secuenciarse subsecuentemente para determinar el residuo inicial de la proteína madura y por lo tanto la secuencia del polipéptido maduro. De acuerdo a otro aspecto, se proporcionan composiciones de vacuna que comprende uno o más polipéptidos de GBS de la invención en mezcla con un adyuvante o diluyente vehículo farmacéuticamente aceptable. Los adyuvantes adecuados incluyen aceites, es decir, adyuvante completo o incompleto de Freund; sales es decir AIK (SO4)2, AINa (SO4)2, AINH4 (SO4)2, Al (OH)3, AIPO4, sílice, kaolín, derivado de saponin; polinucléotidos de carbono, es decir poli IC y poli AU y también toxina de cólera detoxicada (CTB) y toxina inestable al calor E. Coli para la inducción de inmunidad mucosal. Los adyuvantes preferidos incluyen QuilA™, Alhydrogel™, y Adjuphos™. Las vacunas de la invención pueden administrarse parenteralmente mediante inyección, infusión rápida, absorción nasofaringal, dermoabsorción, o bucal u oral. Las composiciones de vacuna de la invención se utilizan para el tratamiento de profilaxis de infección por streptococcus y/o enfermedades y síntomas mediados por infección por streptococcus, en particular streptococcus Grupo A (piogenes), streptococcus Grupo B (GBS o agalactiae), dysagalactiae, uberis, nocardia así como Staphylococcus aureus. Información general acerca de Estreptococo se encuentra disponible en Manual of Clinical Microbiology por P. R. Murray er al. (1 995, 6ta Edición, ASM Press, Washington, D.C.). Más particularmente agalactiae, streptococcus grupo B. En una modalidad particular las vacunas se administran a aquellos individuos en riesgo de infección por GBS tales como mujeres embarazadas e infantes para sepsis, meningitis y neumonía así como individuos inmunocomprometidos tales como aquellos con diabetes, enfermad del hígado o cáncer. Las vacunas también tiene aplicaciones veterinarias tales como para el tratamiento de mastitis en ganado que se media por la bacteria arriba mencionada así como E. Coli.

La vacuna de la presente invención también puede utilizarse para la fabricación de un medicamento utilizado para el tratamiento o profilaxis de infección por streptococcus y/o enfermedades y síntomas mediados por infección por streptococcus, en particular streptococcus Grupo A (piogenes), streptococcus Grupo B (GBS o agalactiae), dysagalactiae, uberis, nocardia así como Staphylococcus aureus. Más particularmente agalactiae, streptococcus grupo B. Las composiciones de vacuna se encuentran preferentemente en forma de dosis única de aproximadamente 0.001 a 1 00 µg/kg (antígeno/peso corporal) y más preferentemente 0.01 a 1 0 µg/kg y más preferentemente 0.1 a 1 µg/kg 1 a 3 veces con un intervalo de aproximadamente 1 a 12 semanas, intervalos entre inmunizaciones, y más preferentemente 1 a 6. De acuerdo con otro aspecto, se proporcionan polinucleótidos que codifican polipéptidos de estreptococo grupo B (GBS) caracterizados porque la secuencia de aminoácido se selecciona del grupo que consiste en: SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 1 0, SEQ ID NO: 1 1 , SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21 , SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31 , SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 y SEQ ID NO: 44 o fragmentos, análogos o derivados de las mismas. Los polinucleótidos preferidos son aquellos ilustrados en las figuras 1 a (SEQ ID NO: 1 ), 2a (SEQ ID NO: 7), 3a (SEQ ID NO: 1 3), 4a (SEQ ID NO: 22), 5a (SEQ ID NO: 27), 6a (SEQ ID NO: 32), 7a (SEQ ID NO: 37), 8 (SEQ ID NO: 42) y 9 (SEQ ID NO: 43) que corresponde a las estructuras de lectura abiertas, que codifican polipéptidos de la invención. Los polinucleótidos preferidos son aquellos ilustrados en las figuras 1 a (SEQ ID NO: 1 ), 2a (SEQ ID NO: 7), 3a (SEQ ID NO: 1 3), 4a (SEQ ID NO: 22), 5a (SEQ ID NO: 27), 6a (SEQ ID NO: 32), 7a (SEQ ID NO: 37), 8 (SEQ ID NO: 42) y 9 (SEQ ID NO: 43) y fragmentos, análogos y derivados de las mismas. Los polinucleótidos más preferidos de la invención son aquellos ilustrados en las figuras 7 (SEQ ID NO: 37), 8 (SEQ ID NO: 42) y 9 (SEQ ID NO: 43). Los polinucleótidos más preferidos de la invención son aquellos ilustrados en las figuras 8 (SEQ ID NO: 42) y 9 (SEQ ID NO: 43). Se apreciará que las secuencias de polinucleótido ilustradas en las figuras pueden alterarse con codones degenerados que codifican aún los polipéptidos de la invención. Debido a la degeneración de las secuencias que codifican el nucleótido, pueden utilizarse otras secuencias de polinucleótido que codifican substancialmente los mismos polipéptidos de la presente invención , en la práctica de la presente invención. Estos incluyen pero no se limitan a secuencias de nucleótido que se alteran por la substitución de diferentes codones que codifican el mismo residuo de aminoácido dentro de la secuencia, produciendo así un cambio silencioso. De acuerdo con lo anterior, la presente invención proporciona además polinucléotidos se producen en híbridos para las secuencias de polinucieótido en la presente arriba descritas (o las secuencias de complemento de las mismas), teniendo 50% y preferentemente al menos 70% de identidad entre secuencias. Más preferentemente, los polinucléotidos son hibridizables bajo condiciones estrictas, es decir, teniendo al menos 95% de identidad y más preferentemente más de 97% de identidad. Por capaz de producirse en híbridos bajo condiciones estrictas se entiende la temple de una molécula de ácido nucleico a al menos una región de una segunda secuencia de ácido nucleico (ya sea cADN, mARN, o ADN genómico o sus filamento complementario bajo condiciones estándar, por ejemplo temperatura elevada y/o contenido bajo en sal, que tiende a desfavorecer la hibridación de secuencias de nucleótido no complementarias. Un procedimiento adecuado se describe en Maniatis T. ef al. Molecular cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, 1982, que se incorpora en la presente para referencia. En un aspecto adicional, los polinucleótidos que codifican polipéptidos de la invención, o fragmentos, análogos o derivados de los mismos, pueden utilizarse en un método de inmunización de ADN. Es decir, pueden incorporarse en un vector que es replicable y expresable en la inyección , produciendo así el polipéptido antigénico in vivo. Por ejemplo, los polinucléotidos pueden incorporase en un vector de plásmido bajo el control del promotor CMV que es funcional en células eucarióticas. Preferentemente, el vector se inyecta intramuscularmente. De acuerdo a otro aspecto, se proporciona un proceso para producir polipéptidos de la invención mediante técnicas recombinantes al expresar un polinucléotido que codifica dicho polipéptido en una célula huésped y recuperar el producto de polipéptido expresado. Alternativamente, los polipéptidos pueden producirse de acuerdo a técnicas químicas sintéticas establecidas es decir, síntesis en fase sólida o en fase de solución de oligopéptidos que se ligan para producir el polipéptido completo (ligación por bloque). Para producción recombinante, las células huésped se transfectan con vectores que codifican el polipéptido, y después se cultivan en un medio nutriente modificado como apropiado para activar los promotores, seleccionar transformadores o amplificar los genes. Los vectores adecuados son aquellos que son viables y replicables en el huésped elegido e incluyen secuencias de ADN sintética, no cromosal y cromosomal, por ejemplo, plásmidos bacterianos, ADN de fago, baculovirus, piásmidos de levadura, vectores derivados de combinaciones ADN de fago y plásmidos. La secuencia de polipéptido pueden incorporarse en el vector en el sitio apropiado utilizando enzimas de restricción de tal manera que se enlaza de manera operable a una región de control de expresión que comprende un promotor, sitio de unión de ribosoma (región consenso o secuencia Shine-Dalgarno). Uno puede seleccionar componentes individuales de la región de control de expresión que son apropiados para un huésped dado y un vector de acuerdo a los principios de biología molecular establecidos (Sambrook et al, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2da ed. , Cold Spring Harbor, N.Y. 1 989 incorporada en la presente para referencia). Los promotores adecuados incluyen pero no se limitan a promotor SV40 o LTR, promotores trp, tac o lac de E. Coli y el promotor P lambda de fago. Los vectores incorporaran preferentemente un origen de replicación así como marcadores de selección, es decir, gen de resistencia a la ampicilina. Los vectores bacterianos adecuados incluyen pET, pQE70, pQE60, pQE-9, pbs, fagoescritura pD1 0, psiX1 74, pbluescript SK, pbsk, pNH8A, pNH 16a, pNH 1 8A, pNH46A, ptrc99a, pKK223-3, pKK233-3, pDR540, pRIT5 y vectores eucarióticos pBlueBaclll, pWLNEO, pSV2CAT, pOG44, pXT1 , pSG, pSVK3, pBPV, pMSG y pSVL. Las células huésped pueden ser bacterianas, es decir, E. Coli. Bacillus subtilis, Streptomyces; fúngales, es decir, Aspergillus niger, Aspergillus nidulins; de levadura, es decir, Saccharomyces o ecuarióticas, es decir, CHO, COS. En la expresión del polipéptido en el cultivo, las células se cosechan de manera típica mediante centrifugación después se interrumpen por medios físicos o químicos (si el polipéptido expresado no se segrega en el medio) y el extracto crudo resultante se retiene para aislar el polipéptido de interés. La purificación del polipéptido del medio de cultivo o lisato logra mediante técnicas establecidas, dependiendo de la precipitación de etanol, extracción de ácido, cromatografía de intercambio de anión o catión, cromatografía de fosfocelulosa, cromatografía de interacción hidrofóbica, cromatografía de hidroxilapatito y cromatografía de lectina. La purificación puede lograrse utilizando HPLC. El polipéptido puede expresarse con o sin secuencia de secreción o líder. En el caso precedente el líder puede retirarse utilizando procesamiento post-traslacional (ver E. U. 4,431 ,739; 4,425,437 y 4,338,397 incorporadas en la presente para referencia) o puede retirarse químicamente subsecuente de purificar el polipéptido expresado. De acuerdo a un aspecto adicional, los polipéptidos de GBS de la invención pueden utilizarse en una prueba de diagnóstico para infección por estreptococo en particular infección por GBS. Son posibles varios métodos de diagnóstico, por ejemplo detectar el organismo de estreptococo en una muestra biológica, puede seguirse el siguiente procedimiento. a) obtener una muestra biológica de un paciente; b) incubar un anticuerpo o fragmento del mismo, un reactivo con un polipéptido de GBS de la invención con la muestra biológica para formar una mezcla; y c) detectar el anticuerpo unido específicamente o fragmento unido en la mezcla que indica la presencia de estreptococo. Alternativamente, un método para la detección del anticuerpo específico para un antígeno de estreptococo en una muestra biológica que contiene o se sospecha que contiene dicho anticuerpo, puede ejecutarse como sigue: a) aislar una muestra biológica de un paciente; b) incubar uno o más polipéptidos de GBS de la invención o fragmentos del mismo con la muestra biológica para formar una mezcla; y c) detectar antígeno específicamente unido o fragmento unido en la mezcla que indica la presencia del anticuerpo específico para estreptococo. Un experto en la materia reconocerá que esta prueba de diagnóstico puede tomar varias formas, incluyendo una prueba inmunológica tal como análisis inmunoabsorbente enlazado a enzimas, un radioinmunoanálisis un análisis de aglutinación de látex, esencialmente para determinar si los anticuerpos específicos para la proteína se encuentra presentes en un organismo. Las secuencias de ADN que codifican polipéptidos de la invención pueden también utilizarse para diseñar pruebas de ADN para utilizarse en detectar la presencia de estreptococo en una muestra biológica que se sospecha que contiene tal bacteria. El método de detección de esta invención comprende: a) aislar la muestra biológica de un paciente; b) incubar una o más pruebas de ADN que tienen una secuencia de ADN que codifica un polipéptido de la invención o fragmentos de la misma con la muestra biológica para formar una mezcla; y c) detectar la prueba de ADN específicamente unida en la mezcla que indica la presencia de la bacteria de estreptococo. Las pruebas de ADN de esta invención también pueden utilizarse para detectar estreptococo circulante, es decir, ácidos nucleicos de GBS en una muestra, por ejemplo utilizando una reacción en cadena de polimerasa, como un método para diagnosticar el infecciones por estreptococo la prueba puede sintetizarse utilizando técnicas convencionales y puede inmovilizarse en una fase sólida, o puede marcarse con una marca detectable. Una prueba de ADN preferida para esta solicitud es un oligómero que tiene una secuencia complementaria para al menos aproximadamente 6 nucleótidos contiguos de los polipéptidos de GBS de la invención. Otro método de diagnóstico para la detección de estreptococo en un paciente comprende: a) marcar un reactivo de anticuerpo con un polipéptido de la invención o fragmento del mismo con una marca detectable; b) administrar el anticuerpo marcado o fragmento marcado al paciente; y c) detectar el anticuerpo marcado específicamente unido o fragmento marcado en el paciente que indica la presencia de estreptococo. Un aspecto adicional de la invención es el uso de los polipéptidos de GBS de la invención como inmunogenes para la producción de anticuerpos específicos para el diagnóstico y en particular el tratamiento de infección por estreptococo. Los anticuerpos adecuados pueden determinarse utilizando métodos de selección apropiados, por ejemplo, al medir la habilidad de un anticuerpo particular para protegerse pasivamente contra infección por estreptococo en un modelo de prueba. Un ejemplo de un modelo animal es el modelo de ratón descrito en los ejemplos en la presente. El anticuerpo puede ser un anticuerpo completo o un fragmento de unión al antígeno del mismo y puede pertenecer en general a cualquier clase de inmunoglobulina. El anticuerpo o fragmento puede ser de origen animal, específicamente de origen mamífero y más específicamente de origen humano, de rato o murino. Puede ser un anticuerpo natural o un fragmento del mismo, o si se desea, un anticuerpo recombinante o fragmento de anticuerpo. El término anticuerpo recombinante o fragmento de anticuerpo significa un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se producen utilizando técnicas biológicas moleculares. El anticuerpo o fragmentos de anticuerpo pueden ser policlonales, o preferentemente monoclonales. Puede ser específico para un número de epítopos asociados con los polipéptidos de GBS pero es preferentemente específico para uno.

EJEMPLO 1 : Modelo de murina de infección por Estreptococo Grupo B (GBS). El modelo de ratón de infección por GBS se describe en detalle en Lancefield ef al (J Exp Med 142: 165-179, 1975). La cadena de GBS C388/90 (Aislado clínico obtenido en 1 990 del fluido cefaloraquidiano de un paciente que padece de meningitis, Children's Hospital of Eastern Ontario, Ottawa, Canadá) y NCS246 (National Center for Streptococcus, Providencial Laboratory of Public Health for Northern Alberta, Edmonton, Canadá) se serotiparon respectivamente como tipo la/c y tipo ll/R. Para incrementar su virulencia, las cadenas de GBS C388/90 (serotipo la/C) y NCS 246 (serotipo ll/R) se pasaron seriamente a través de ratones como se describe previamente (Lencefield ef al J. Exp Med 142: 165-179, 1 975). Brevemente, el incremento de virulencia se monitoreó utilizando inoculaciones intraperitoneales de diluciones en serie de un subcultivo en caldo Todd-Hewitt obtenido de ya sea la sangre o bazo de ratón infectado. Después del último paso, las muestras sanguíneas infectadas se utilizaron para inocular caldo Todd-Hewitt. Después de una incubación durante 2 horas a 37°C con CO2 al 7%, se agregó al cultivo glicerol en una concentración final de 10% (v/v). El cultivo se prorrateo entonces y se almacena a -80°C para utilizar en experimentos de prueba de GBS. El número de cfu de GBS presente en estas muestras congeladas, se determinó. La concentración bacteriana necesaria para matar al 1 00% (LD1 00) a los ratones de 1 8 semanas, se determinó que es de 3.5X105 y 1 .1 X105 respectivamente para la cadena de GBS C388/90 y NCS246, que corresponden a un incremento significativo en virulencia para ambas cadenas. Sin embargo, la LD1 00 registrada antes del paso de estas dos cadenas fue más elevada que 109 cfu. En una prueba bacteriana una alícuota recientemente descongelada de una cadena de GBS virulenta se ajustó a la concentración bacteriana apropiada utilizando caldo Todd-Hewitt y 1 ml. se inyectó intraperitonealmente a cada ratón CD-1 hembra. Los ratones utilizados para los experimentos de protección pasiva tuvieron de 6 a 8 semanas, mientras que los utilizados para los procedimientos de protección activa tuvieron aproximadamente 1 8 semanas en el momento de la prueba. Todos los inoculadores se verificaron por cuentas por colonia. Los animales se observaron para cualquier señal de infección 4 veces diariamente durante las primeras 48 horas después de la prueba y después diariamente durante los siguientes 12 días. Al final de este período las muestras sanguíneas se obtuvieron de los sobrevivientes y se congelaron a -20°C. El vaso obtenido de cada ratón que sobrevivió el cambio se cultivo con el objeto de identificar cualquier GBS restante.

EJEMPLO 2 Inmunización y protección en ratones con células de GBS completas eliminadas con formaldehído. Las células completas de GBS eliminadas con formaldehído se prepararon de acuerdo a los procedimientos descritos en Lancefield ef al (J Exp Med 142: 165-1 79, 1 975). Brevemente, un cultivo durante la noche en placas de agar sanguíneo de rebaño (Quelab Laboratories, Montreal, Canadá) de una cadena de GBS se enjuagó dos veces en regulador de PBS (salina regulada de fosfato, pH7.2), se ajustó aproximadamente 3X109 cfu/mL y se incubó durante la noche en PBS que contiene formaldehído al 0.3% (v/v). La suspensión de GBS eliminado se enjuagó con PBS y se mantuvo congelado a -80°C. Los ratones CD-1 hembra, de 6 a 8 semanas (Charles River, St-Constant, Québec, Canadá) se inyectaron subcutáneamente tres veces en un intervalo de dos semanas con 0.1 mi de células eliminadas con formaldehído de cadena de GBS C388/90 (~6X107 GBS), o 0.1 ml de PBS para el grupo de control. En el día anterior a la inmunización Alhydrogel™ (Superfos Biosector, Frederikssund , Dinamarca) con una concentración final de 0.14mg o 0.21 mg de Al, se agregó a estas preparaciones y se incubaron durante la noche a 4°C con agitación. Las muestras de suero se obtuvieron de cada ratón antes de comenzar el proceso de inmunización y dos semanas después de la última inyección. Los sueros se congelaron a -20°C. Ocho ratones en cada grupo de control se inyectaron con PBS y el grupo inmunizado con células completas eliminadas con formaldehído de cadena de GBS C388/90 (la/c) se probaron con 1 .5X104 cfu de cadena de GBS C388/90 (la/c) una semana después de la tercera inyección. Todos los ratones inmunizados con las células completas de GBS eliminados con formaldehído sobrevivieron a la prueba homologa, aunque dentro de los 5 días después de la prueba, solamente 4 de los 8 ratones inyectados con PBS sobrevivieron de la infección. Con objeto de incrementar la tasa de modalidad en los grupos de control la suspensión bacteriana tuvo que ajustarse de acuerdo a la edad de los ratones en el momento de la prueba bacteriana. En experimento de prueba subsecuentes, cuando los ratones tuvieron más de 15 semanas, el inoculador bacteriano se incrementó a concentraciones entre 3.0X105 y 2.5X106 cfu.

Tabla 1 Inmunización de ratones CD1 con células completas eliminadas con formaldehído de GBS y prueba homologa subsecuente [cadena C388/90 (la/c)] y prueba heteróloga [cadena NCS246 (ll/R)]. se utilizó alhydrogel en una concentración final de 0.14 mg o 0.21 mg de Al ; aproximadamente 6x107 cfu; prueba intraperitoneal con 1 mL de medio de cultivo Todd-Hewitt que contiene GBS C388/90 (la/c) suspensión ajustada a 1.5X104 cfu; prueba intraperitoneal con 1 mL de medio de cultivo Todd-Hewitt que contiene GBS C388/90 (la/c) suspensión ajustada a 2.1 X106 cfu; no hecho; prueba intraperitoneal con 1 mL de medio de cultivo Todd-Hewitt que contiene GBS NCS246 (l l/R) suspensión ajustada a 1 .2X105 cfu.

En otro experimento, un grupo de 12 ratones que corresponden a un grupo de control se inyectaron con PBS, mientras que un segundo grupo de 12 ratones se inmunizaron con células completas eliminadas con formaldehído de cadena de GBS C388/90 (la/c). Seis ratones de cada uno de estos dos grupos se probaron con 10.1 X106 cfu de la cadena de GBS C388/90 (la/c) (Tabla 1 ). Como en el primer experimento de prueba, todos los ratones inmunizados con la cadena de GBS C388/90 (la/c) sobrevivieron a la prueba homologa. Solamente dos de los 6 ratones inyectados con PBS sobrevivieron a la infección. Los 6 ratones restantes en ambos grupos se utilizaron entonces una semana después para verificar si esta preparación antigénica podría conferir protección cruzada contra la cadena NCS246 (ll/R) que produce una cápsula serológicamente distinta. Ninguno de los ratones infectados con esta segunda cadena de GBS sobrevivieron la infección. El último resultados siguiere que la mayoría de la respuesta inmune protectora inducida por la cadena eliminada con formaldehído C388/90 se dirige contra el polisacárido capsular y que podría limitarse a cadenas de ese serotipo particular. Estos resultados indicaron claramente que este modelo particular de infección puede utilizarse eficazmente para estudiar la protección conferida por la vacunación.

EJEMPLO 3 Inmunización de conejo con células de GBS completas eliminadas con formaldehído y protección pasiva en ratones Un conejo de Nueva Zelanda (2.5 kg, Charles River, St-Constant, Québec, Canadá) se inmunizó con células eliminadas con formaldehído de cadena de GBS C388/90 (la/c) para obtener suero hiperinmune. Este conejo se inyectó subcutáneamente tres veces en intervalo de tres semanas con aproximadamente 1 .5X1 09 cfu de células completas eliminadas con formaldehído de cadena de GBS C388/90 (la/c). El adyuvante completo de Freund (Gibco BRL Life Technologies, Grand Island, Nueva York) se utilizó como el adyuvante para la primer inmunización, mientras que el adyuvante incompleto de Freund (Gibco BRL) se utilizó para las siguientes dos inyecciones. Las muestras de suero se obtuvieron antes del inicio del procedimiento de inmunización y dos semanas después de la última inyección. Los sueros se congelaron a -20°C. La habilidad de este suero hiperinmune de conejo particular para proteger pasivamente a los ratones contra una infección letal con GBS también se evaluó. La inyección intraperitoneal de ratones con ya sea 15 o 25 µL de suero de conejo hiperinmune 18 horas antes del cambio protegió a 4 de los 5 ratones (80%) contra la infección. Comparativamente, las tasas de supervivencia inferiores a 20% se registraron para ratones en el grupo de control inyectados con PBS o suero obtenido de un conejo inmunizado con la preparación de membrana exterior de meningococo. Este resultado indica claramente que la inmunización de otras especies animales con células de GBS eliminadas puede inducir la producción de anticuerpos que pueden proteger pasivamente a los ratones. Este reactivo también se utilizará para caracterizar a los clones. Tabla 2 Protección pasiva de los ratones CD-1 conferida por suero de conejo obtenido después de la inmunización con preparación antigénica de estreptococo completo grupo B eliminado con formaldehído (cadena C388/90 (la/c) inmunización, y el adyuvante incompleto de Freund para las siguientes dos inyecciones; 2 prueba intraperitoneal con 1 mL de medio de cultivo Todd-Hewitt que contiene GBS C388/90 (la/C) suspensión ajustada a 2X104 cfu.

EJEMPLO 4 Producción recombinante de proteína de fusión His.Tag- GBS La región de codificación de un gen de GBS se amplifició por PCR (sistema DNA Thermal Cycler GeneAmp PCR 2400 Perkin Elmer, San José, CA) de ADN genómico de cadena de GBS C388/90 (la/c) utilizando los olígos que contenían extensiones base para la adición de los sitios de restricción Bg l ll (AGATCT) y Hindlll (AAGCTT), respectivamente. El producto PCR se purificó de gel de agarosa utilizando un equipo de extracción de gel Qiaex II de Quiagen (Chatsworth, CA), digerido con las enzimas de restricción Bg l ll y Hindlll (Pharmacia Canadá Ine Baie d'Urfe, Canadá) y se extrajo con fenol:cloroformo antes de la precipitación de etanol. El vector pET-32b (+) (Novagen, Madison, Wl) que contiene la secuencia tioredoxin-His. Tag se digirió con las enzimas de restricción Bgl ll y Hind I II , se extrajo con fenol:cloroformo, y después se precipitó el etanol. El fragmento de ADN genómico Bg 1 li-Hind II I se ligó al vector pET-32b(+) Bg 1 1 l-H ind II I para crear la secuencia codificadora para la proteína de fusión tioredoxin-His.Tag-GBS cuyo gen estuvo bajo control del promotor T7. Los productos ligados se transformaron en cadena de E. coli XLI Blue MRF' (?(#t>crA) 183? (mcrCB-f?sdSMR-?r7/77r)173 endAl sup AA thi-? recM gyrA96 re1M lac (F' proAB /aclqZ?M15Tn 10 (Tetr)]c) (Stratagene, La Joya, CA) de acuerdo al método de Simanis (Hanahan, D. DNA Cloning, 1 985, D.M. Glover (ed.), pp. 1 09-1 35). El plásmido pET recombinante se purificó utilizando un equipo de Qiagen (Qiagen, Chatsworth, CA) y la secuencia de nucleótido del ADN insertada se verificó por secuenciación de ADN (Equipo de Secuenciación por Ciclo Terminator Taq Dye Deoxi, ABI, Foster City, CA). El plásmido pET recombinante se transformó por electroporación (aparato Gene Pulser II, BIO-RAD Labs, Mississauga, Canadá) en cadena de E. coli AD494 (DE3) (Aara 7eu7697?/acX74 AphoA Pvull phoR Ama 1 F'3 [/ac+(/aclq pro] trxB: : Kan (DE3)) (Novagen, Madison, Wl). En esta cadena de E. coli, el promotor T7 que controla la expresión de la proteína de fusión , se reconoce específicamente por la polimerasa de ARN T7 (presente en el profago ?DE3) cuyo gen se encuentra bajo control del promotor lac que es inducible por isopropil-ß-D-tio-galactopiranosido (IPTG). AD494 (DE3)/rpET trasformante se desarrolló a 37°C con agitación a 250 rpm en caldo de LB (peptona 1 0g/L, extracto de levadura 5g/L, NaCI 10g/L) que contiene 1 00 µg de ampicilina (Sigma-Aldrich Canadá Ltd, Oakville, Canadá) por mL hasta que A6oo alcanzó un valor de 0.6. Con objeto de inducir la producción de la proteína de fusión tioredoxin-His.Tag-GBS, las células se incubaron durante2 horas más en la presencia de IPTG en una concentración final de 1 mM. Las células bacterianas se cultivaron mediante centrifugación. La proteína de fusión recombinante producida por AD494 (DE3)/rpET32 en la inducción de IPTG durante 2 horas se obtuvo parcialmente como cuerpos de inclusión insolubles que se purificaron de proteínas endógenas de E. coli mediante el aislamiento de agregados insolubles (Gerlach, G. F. ef al 1992, Infecí Immun 60:892). Las células inducidas de un cultivo de 500 mL se resuspendieron en 20 mL de 25% de sacarosa-50mM de Tris-HCl regulador (pH8.0) y se congelaron a -70°C. La lisis de las células en suspensión descongelada se logró por la adición de 5 mL de una solución de lisozima (10mg/mL) en 250 mM de Tris-HCl regulador (phd.O) seguido por una incubación de 1 0 a 1 5 min en hielo, y la adición de 1 50mL de mezcla de detergente (5 partes de 20 mM de Tris-HCl regulador [pH7.4]-300mM de NaCI-2% de ácido deoxicólico-2% de Nonidet P-40 y 4 partes de 100mM de Tris-HCl regulador [pH8]-50 mM de EDTA-2% de Tritón X-1 00) seguido por 5 minutos de incubación en hielo. En la sonicación, los agregados de proteína se cultivaron por centrifugación durante 30 min a 35,000 x g y una muestra de la fracción celular soluble se mantuvo. Las proteínas agregadas se solubilizaron en 6M de hidrocloruro de guanidina. La presencia de la proteína de fusión tanto en las fracciones solubles como insolubles se muestra mediante análisis Sanguíneo Western utilizando el suero de un ratón inyectado con células eliminadas con formaldehído de cadena de GBS C388/90 (la/c) que sobrevivió un cambio bacteriano con la cadena de GBS correspondiente. La purificación de la proteína de fusión de la fracción soluble de AD494 (DE3)/rpET inducida con IPTG se hizo mediante cromatografía por afinidad en base a las propiedades de la secuencia His. Tag (6 residuos de histidina consecutivos) para unirse a cationes divalentes (Ni2*) inmovilizados en la resina de quelación de metal His. Bind (Novagen, Madison, Wl). El método de purificación utilizado es aquel descrito en el Manual del sistema pET, 6ta Edición (Novagen, Madison, Wl). Brevemente, las células granuladas obtenidas de un cultivo de 100mL inducido con IPTG se resuspendieron en 4mL de regulador de Unión (5 mM de imidazola-500 mM de NaCI-20 mM de Tris-HCl pH7.9), sonicado, y se centrifugaron en 39,000 X g durante 20 min para remover los retiros. El sobrenadante se filtró (membrana de tamaño de poro de 0.45 µm) y se depositó en una columna de resina His. Bind equilibrada en regulador de Unión. La columna se enjuagó entonces con 10 volúmenes de columna de regulador de Unión seguido por 6 volúmenes de columna de regular de Enjuague (20 mM de imidazola-500 mM de NaCI-20 mM de Tris-HCl pH7.9). La proteína de fusión tioredoxin-His.Tag-GBS se eluyó con regulador de Elusión (1 M de imidazola-500 mM de NaCI-20 mM de Tris-HCl pH7.9). el retiro de la sal e imidazola de la muestra se hizo mediante diálisis contra 3 X 1 litro de PBS a 4°C. Las cantidades de la proteína de fusión obtenidas de ya sea las fracciones citoplásmicas solubles o insolubles de E. coli se estimaron mediante coloración Coomasie de un sulfato de docecilo sodio (SDS)-gel de poliacrilamida con diluciones seriales de estas proteínas y un estándar de albúmina de suero de bovino (Pierce Chemical Co. Rockford, 11 1 .) EJEMPLO 5 Producción Recombinante de proteína GBS bajo control del promotor PL lambda. La región de codificación de ADN de una proteína de GBS se insertó aguas abajo del promotor ?PL en el vector de traslación pURV22. Este plásmido se derivó de p629 (George et al, 1 987, Bio/Technology 5:600) del cual la región de codificación para una porción de la glicoproteína (gD-1 ) tipo I de virus simple de herpes (HSV-I) se retiró, y el gen de resistencia a la ampicilina se reeplazo por un cásete kanamicina obtenido del vector de plásmido pUC4K (Pharmacia Biotech Canadá Inc. , Baie D'Urfe, Canadá). El vector contenía un cásete del gen represor sensible a la temperatura ? cl857 del bacteriófago del cual se ha borrado el promotor PR funcional. La inactivación del represor cl857 por el incremento de temperatura de los rangos de 30-37°C a 37-42°C resultó en la inducción del gen bajo el control de ? P . La traslación del gen se controló por el sitio de unión de ribosoma ero seguido aguas abajo por un sitio de restricción Bg l ll (AGATCT) y el ATG: ACTAAGGAGGTTAGATCTATG. Las enzimas de restricción y la ligasa de ADN T4 se utilizaron de acuerdo a los proveedores (Pharmacia Biotech Canadá Ine, Baie D'Urfe, Canadá; y New England Biolabs Ltd. , Mississauga Canadá). La electroforesis de gel de agarosa de fragmentos de ADN se ejecutó como se describe por Sambrook et al. (Molecular cloning: A Laboratorv Manual, 1989, Cold Spring Harbor Laboratory Press, N.Y.). El ADN cromosómico de la bacteria de GBS se preparó de acuerdo a los procedimientos descritos en Jayarao ef al (J. Clin. Micobiol. 1991 , 29:2774). Las reacciones de amplificación de ADN mediante reacción en cadena de polimerasa (PCR) se hicieron utilizando el sistema DNA Termal Cycler GenAmp PCR 2400 (Perkin Elmer, San José, CA). Los plásmidos utilizados para la secuenciación de ADN se purificaron utilizando equipos de plásmido de Qiagen (Chatsworth, CA). Los fragmentos de ADN se purificaron de geles de agarosa utilizando equipos de extracción de gel Qiaex II de Qiagen (Chatsworth, CA). La transformaciones de plásmido se llevaron a cabo por el método descrito por Hanahan (DNA Cloning, Glover (ed.) pp, 109-1 35, 1985). La secuenciación de ADN genómico insertada en los plásmidos se hizo utilizando oligonucleótidos sintéticos que se sintetizaron por el modelo sintetizador de oligonucleótido 394 (the Perkin-Elmer Corp. , Applied Biosystems Div. (ABI), Foster City, CA).

Las reacciones de secuenciación se llevaron a cabo mediante PCR utilizando el equipo de Secuenciación por Ciclo Terminator Taq Dye Deoxi, ABI, Foster City, CA). El ensamblaje de la secuencia de ADN se llevó a cabo utilizando el Secuenciador de programa 3.0 (Gene Codes Corporation, Ann Arbor, Ml). El análisis de las secuencias de ADN y sus polipéptidos predichos se llevaron a cabo con la versión del programa Gene Works 2.45 (Intelligenetics, Inc. , Mountain View CA). La región de codificación del gen de GBS se amplificó por PCR de cadena de GBS C388/90 (la/c) utilizando los olígos que contenían extensiones base para la adición de los sitios de restricción Bg l ll (AGATCT) y Xbal (TCTAGA), respectivamente. El producto PCR se purificó de gel de agarosa utilizando un equipo de extracción de gel Qiaex II de Quiagen (Chatsworth, CA), digerido con las enzimas de restricción Bg l ll y Xbal y se extrajo con feno cloroformo antes de la precipitación de etanol. El vector pURV22 se digirió con las enzimas de restricción Bg l ll y Xbal, se extrajo con feno cloroformo y se precipitó de etanol. El fragmento de ADN genómico Bg l ll- Xbal se ligó al vector pURV22 Bg 1 ll-Xbal en el cual el gen de GBS estuvo bajo control del promotor ?PL. Los productos ligados se transformaron en cadena de E. coli XLI Blue MRF' (?(mcrA) 183? (mcrCB-/7SG,SMR-m#77r) 173 endA1 supE44 thi- recA gyrA96 re7?1 lac [F' proAB /aclqZ?M15 Tn 10 (Tetr)]c) (Stratagene, La Joya, CA) de acuerdo a los métodos descritos en Hanahan, supra. Los plásmidos de albergue transformadores con la inserción se identificaron por análisis de células Usadas sometidas a electroforesis en gel de agarosa (Sambrook ef al, supra). El plásmido pURV22 recombinante se purificó utilizando un equipo de Qiagen (Qiagen, Chatsworth, CA) y la secuencia de nucleótido del ADN insertada se verificó por secuenciación de ADN. El XLI Blue MRF7rpURV22 transformador se desarrolló a 34°C con agitación a 250 rpm en caldo LB que contienen 50 µg de kanamicina por mL hasta que el A6oo alcanzó un valor de 0.6. Con objeto de inducir la producción de la proteína de fusión, las células se incubaron durante 4 horas adicionales a 39°C. Las células bacterianas se cultivaron mediante centrifugación, resuspendieron en regulador de muestra, hirvieron durante 10 min y mantuvieron a -20°C.

EJEMPLO 6 Subclonación del gen de proteína de GBS en pCMV-GH de plásmido CMV La región de codificación de una proteína de GBS se insertó en fase aguas debajo del gen de hormona de crecimiento humana (hGH) bajo el control transcripción del promotor de citomegalovirus (CMV) en el vector de plásmido pCMV-GH (Tang ef al, Nature, 1992, 356: 152). El promotor de CMV no es funcional en células E. coli pero es activo en la administración del plásmido en células eucaróticas. El vector también incorporó el gen de resistencia a ampicilina. La región de codificación del gen se amplificó por PCR de ADN genómico de cadena de GBS C388/90 (la/c) utilizando los olígos que contenían extensiones base para la adición de los sitios de restricción Bg l ll (AGATCT) y Hindlll (AAGCTT). El producto PCR se purificó de gel de agarosa utilizando un equipo de extracción de gel Qiaex II de Quiagen (Chatsworth, CA), digerido con las enzimas de restricción Bgl ll y Hindlll y se extrajo con fenokcloroformo antes de la precipitación de etanol. El vector pCMV-GH (Laboratorio del Dr. Stephen A. Johnston, Departamento de Biquímica, Universidad de Texas, Dallas, Texas) que contiene la hormona de crecimiento humana para crear las proteínas de fusión se digirió con las enzimas de restricción BamHI y Hindi, se extra, se extrajo con fenol:cloroformo y se precipitó de etanol. El fragmento de ADN genómico Bg l ll- Hindi 1 .3-kb se ligó al vector pCMV-GH BamHI-HindIII para crear la proteína de fusión hGH-GBS bajo el control del promotor CMV. Los productos ligados se transformaron en cadena de E. coli DH5a[f80 lacZ ?M1 5 endA? recA1 hsdRM (rK mK+) supE44 thi-l ?- g rA96 re íA1 ?(/acZYA-argF)U 169] (Gibco BRL, Gaithersburg, MD) de acuerdo a los métodos descritos por Hannan, supra. Los plásmidos de albergue transformadores con la inserción se identificaron por análisis de células Usadas sometidas a electroforesis en gel de agarosa (Sambrook, J. et al, supra). El plásmido pCMV recombinante se purificó utilizando un equipo de Qiagen (Qiagen, Chatsworth, CA) y la secuencia de nucleótido del ADN insertada se verificó por secuenciación de ADN.

EJEMPLO 7 Actividad inmunológica de proteína de GBS para prueba de GBS Cuatro grupos de 12 ratones CD-1 hembra (Charles River, St-Constant, Québec, Canadá) de 6 a 8 semanas se inyectaron subcutáneamente tres veces en un intervalo de tres semanas con 0.1 mL de las siguientes preparación antigénicas: células eliminadas con formaldehído de cadena de GBS C388/90 (~6X1 07 GBS), 20µg de la proteína de fusión de tioredoxina-His.Tag-GBS obtenida del insoluble (cuerpos de inclusión) o 20 µg de la proteína de fusión, purificada por afinidad (columna de níquel), de la fracción citoplásmica soluble en E. coli, o 20 µg de péptido de control tioredoxina-His.Tag purificada por afinidad (columna de níquel). 20 µg de QuilA™ (Cedarlane Laboratories Ltd, Hornby, Canadá) se agregaron a cada preparación antigénica como el adyuvante. Las muestras de suero se obtuvieron de cada ratón después de la inmunización (PB) y en días 20 (TB1 ), 41 (TB2) y 54 (TB3) durante los procedimientos de inmunización. Los sueros se congelaron a -20°C. Un incremento de los títulos de ELISA se registraron después de cada inyección de la proteína de fusión que indica una buena respuesta primaria y un refuerzo de la respuesta inmune humoral específica después de cada una de la segunda y tercer administración. Al final del periodo de inmunización, los medios de títulos de ELISA recíprocos fueron 456, 145 para el grupo inmunizado con 20 µg de proteína de fusión obtenida de cuerpos de inclusión en comparación con 290, 1 33 para el grupo de ratones inmunizados con la proteína de fracción soluble en E. coli. El último resultados sugiere que la proteína obtenida de los cuerpos de inclusión podría ser más inmunogénico que la proteína soluble. El análisis de los sueros de ratones en ELISA utilizando tioredoxin-His.Tag purificada por afinidad para revestir placas mostró que los títulos de anticuerpos insignificantes se hacen contra la porción de tioredoxin-His.Tag de la proteína de fusión. La reactividad de los sueros de los ratones inyectados con la proteína de fusión recombinante también se probaron por ELISA contra células completas eliminadas con formaldehído de cadena de GBS C388/90. Los anticuerpos inducidos por inmunización con proteína de fusión recombinante también reconoció sus epítopos de específicos en células de GBS que indican que su confirmación es suficientemente cercana a la proteína estreptococal nativa para inducir anticuerpos reactivos cruzados. Para verificar si la respuesta inmune inducida por la inmunización podría protegerse contra infección con GBS, los ratones se probaron con 3.5X106 cfu de cadenas de GBS C338/90 (la/c) y 1 .2x106 cfu de cadena de NCS246 (ll/R), los resultados de lo cual se ilustraron en las tablas 3 y 4 respectivamente. Los ratones inmunizados con péptido de tioredoxin-His.Tag de control no se protegieron contra prueba con cualquier cadena de GBS mientras que aquellos inmunizados con células completas C388/90 eliminadas con formaldehído solamente proporcionaron protección contra prueba homologa. La proteína de fusión de tioredoxin-His.Tag-GBS de la invención protegió a los ratones de la prueba con ambas cadenas de GBS. El cultivo de bazo y sangre de estos ratones no revelaron la presencia de ningún GBS.

Tabla 3 Supervivencia de la prueba de cadena de GBS C388/90 (la/c)1 -ajustada a 3.5X105 cfu. 2 20µg administrado; piernas posteriores paralizadas en ratón sobreviviente; GBS seleccionado en sangre y bazo; 3 6X107 cfu administrado; 20µg administrado Tabla 4 Supervivencia de la prueba de cadena de GBS NC246 (ll/R)1 u v - ew que contiene GBS NCS246 (ll/R) suspensión ajustada a 1 .2X105 cfu. 2 20µg administrado; 3 6X107 cfu administrado; un ratón murió durante la inmunización EJEMPLO 8 Inmunización con la proteína de GBS recombinante confiere protección contra infección por GBS experimental.

Este ejemplo ilustra la protección de ratones contra la infección por GBS fatal mediante la inmunización con la proteína recombinante que corresponde a la SEQ ID NO:39. Grupos de 10 ratones CD-1 hembra (Charles River) se inmunizaron subcutáneamente tres veces en intervalos de tres semanas con 20 µg de proteína recombinante purificada de BLR de cadena de E. coli (Novagen) que alberga el vector de plásmido pURV22 recombinante que contiene el gen de GBS que corresponde a la SEQ ID NO: 42 en presencia de 20 µg de adyuvante de QuilA™ (Cadarlane Laboratories Ltd, Hornby, Canadá) o, como control, con adyuvante QuilA™ en PBS. Las muestras sanguíneas se recolectaron del seno orbital en los días 1 , 22 y 43 antes de cada inmunización y catorce días (día 57) después de la tercer inyección. Una semana después, los ratones se probaron con aproximadamente 1 04 a 1 06 CFU de varias cadenas de GBS virulentas. Las muestras del inoculador de prueba de GBS se colocaron en placas de agar sanguíneo de rebaño TSA/5% para determinar el CFU y para verificar la dosis de prueba. Las muertes se registraron durante un periodo de 14 días y en el día 14 después de la prueba, los ratones sobrevivientes se sacrificaron y la sangre y bazo se probaron para la presencia de organismos de GBS. Los datos de supervivencia se muestran en la tabla 5. Los sueros de precambio se analizaron para la presencia de anticuerpos reactivos con GBS mediante inmunoanálisis estándar. Los análisis Elisa e inmunosanguíeno indicaron que la inmunización con proteína de GBS recombinante producida en E. coli produjo anticuerpos reactivos tanto con proteína recombinante como de GBS nativo. Las respuestas del anticuerpo a GBS se describen en el Ejemplo 9. Tabla 5 Habilidad de la proteína de GBS recombinante que corresponde a la SEQ ID NO: 39 para producir protección contra 8 diversas cadenas de prueba de GBS Grupos de 10 ratones por grupo se utilizaron, se indican el número de ratones que sobreviven a la infección y el número de ratones muertos. Las curvas de supervivencia que corresponden a los animales inmunizados con proteína de GBS recombinante se compararon con las curvas de supervivencia que corresponde a los animales inmunizados en falso utilizando la prueba log-hilera para análisis no paramétricos. 2 Análisis de comparación para animales inmunizados con NCS915-F. 3 Los animales se inmunizaron con GBS eliminado con formaldehído en presencia del adyuvante QuilA™.

Todos los hemocultivos de los ratones sobrevivientes fueron negativos en el día 14 después de la prueba. Los cultivos de bazo de los ratones sobrevivientes fueron negativos excepto para pocos ratones de MB-1 1 experimental.

EJEMPLO 9 Vacunación con la proteína de GBS recombinante produce una respuesta inmune a GBS Los grupos de 1 0 ratones CD-1 hembra se inmunizaron subcutáneamente con proteína de GBS recombinante que corresponde a la SEQ ID NO: 39, como se describe en el Ejemplo 8. Con objeto de determinar la respuesta del anticuerpo a la proteína de GBS nativo, los sueros de las muestras sanguíneas recolectas antes de cada inmunización y catorce días después de la tercer inmunización se probaron para el anticuerpo reactivo con células de GBS mediante ELISA utilizando placas revestidas con células de GBS eliminadas con formaldehído de la cadena NCS 954 tipo lll, cadena ATCC12401 tipo Ib, cadena NCS 535 tipo V o la cadena NCS 9842 tipo VI. La especificidad de los anticuerpos elevados para la proteína GBS se confirmo por en análisis sanguíneo Western para extractos de célula de GBS y antígenos recombinantes purificados. Los resultados mostrados en la Figura 10 demuestran claramente que los animales responden fuertemente a la proteína de GBS recombinante utilizada como inmunogenes con títulos de anticuerpo recíprocos medianos que varían entre 12000 y 128000, de sueros recolectados después de la tercer inmunización, dependiendo del antígeno de revestimiento. Todos los sueros preinmunes fueron negativos cuando se probaron en una dilución de 1 : 1 00. Los anticuerpos reactivos a GBS fueron detectables en los sueros de cada animal después de una sola inyección de proteína de GBS recombinante.

EJEMPLO 10 Conservación antigénica de la proteína de GBS de la presente invención Los anticuerpos monoclonales (MAbs) específicos para la proteína de GBS de la presente invención se utilizaron para demostrar que su antígeno de superficie se produce por todo el GBS y que también se conserva altamente de manera antigénica. Una recolección de 58 aislados de GBS se utilizó para evaluar la reactividad de los MAbs específicos para GBS. Estas cadenas se obtuvieron del National Center for Streptococcus, Provincial Laboratory of Public Health for Northern Alberta, Canadá; Centre Hospitalier Universitaire de Québec, Pavillos CHUL, Québec, Canadá; American Type Cultive Collection, EUA; Laboratoire de Sante Publique du Québec, Canadá; y Dept. of Infectious Disease, Children's Hospital y Medical Center, Seattle, EUA. Todos los ocho Mabs se probaron contra el siguiente panel de cadenas: 6 aislados de serotipos la o la/c, 3 aislados de serotipo Ib, 4 aislados de serotipo II, 14 aislados de serotipo lll, 2 aislados de serotipo IV, 2 aislados de serotipo V, 2 aislados de serotipo VI, 2 aislados de serotipo Vil, 1 aislado de serotipo VIII, 10 aislados que no se serotiparon y 3 cadenas S. agalactiae bovina. El MAb 3A2 también se reaccionó con GBS adicional: 9 aislados de serotipo la/c y 1 0 aislados de serotipo V. Las cadenas se desarrollaron durante la noche y las placas de agar sanguíneo a 37°C en una atmósfera de 5% de CO2. Los cultivos se almacenaron a 70°C en caldo de infusión cardíaco con glicerol al 20% (v/v). Para obtener los MAbs específicos para la proteína de GBS, los ratones se inmunizaron tres veces en intervalos de tres semanas con 20 µg de proteína de GBS recombinante (SEQ ID NO: 44) en la presencia de 20% de adyuvante de QuilA™. Las líneas celulares de hibridoma se generaron por fusión de las células de bazo recuperadas de los ratones inmunizados con la línea celular no secretoria SP2/O mieloma, como se describe en previamente (Hamel, J. ef al 1987. J. Med. Microbiol. 23: 163-1 70). Los sobrenadantes de clon híbridos se probaron para la producción de anticuerpo específico mediante ELISA utilizando GBS inactivado con formaldehído y proteína de GBS recombinante purificada (SEQ ID NO: 39 o 44) como antígeno de revestimiento, como se describe previamente (Hamel, J. ef al 1987. J. Med. Microbiol. 23: 163-1 70). El híbrido específico se clono mediante diluciones limitantes, expandidas. Congeladas en nitrógeno líquido. La producción de proteína de GBS recombinante se presentó en los Ejemplos 4 & 5. La proteína de GBS recombinante purificada o GBS inactivado con formaldehído se resolvieron por electroforesis mediante el uso del sistema regulador discontinuo de Laemmli como se recomienda por el fabricante y después se transfiere sobre la membrana nitrocelulosa para la inmunisanguíneo Western, como se describe previamente (Martín ef al 1992. Infect. Immun 60:2718-2725).

Los experimentos inmunosanguíneos Western claramente indicaron que todos los ocho MAbs reconocieron una banda de proteína que corresponde a la proteína de GBS recombinante (SEQ ID NO: 39). Estos MAbs también reaccionaron con una banda de proteína presente en cada aislado de GBS probado hasta ahora. La reactividad de estos MAbs específicos para GBS se presenta en la Tabla 6. Cada MAb reaccionó bien con todos los 46 GBS. Además, estas MAbs reconocieron las 3 cadenas de S. agalactiae de origen bovino que se probaron. MAb 3A2 también reconoció diecinueve GBS; 9 aislados de serotipo la/c y 10 de serotipo V. Los otros MAbs no se probaron contra estas cadenas adicionales. Estos resultados demuestran que la proteína de GBS (SEQ ID NO: 39) se produjo por todos los 65 GBS y las 3 cadenas de S. agalactiae de origen bovino que se probaron hasta ahora. De manera más importante, estos resultados demuestran claramente que los epítopos reconocidos por estos ocho MAbs específicos para GBS se distribuyen ampliamente y conservan entre GBS. Estos resultados también indican que estos epítopos no se limitaron a aislados serológicamente relacionados ya que los representantes de todos los serotipos de GBS conocidos que incluyen los principales grupos que causan enfermedades se probaron. En conclusión, los datos presentados en este ejemplo demuestran claramente que la proteína de GBS de la presente invención se produce para todo el GBS y que se conserva altamente de manera antigénica.

Tabla 6 Reactividad de ocho MAbs específicos para la proteína de GBS con diferentes cadenas de S. agalactiae, según se evalúa por inmunosanguíneos Western 1 Nueve cadenas adicionales de serotipo la/c y 10 cadenas de serotipo V se reconocieron por el MAb 3A2. 2 Estas cadenas no se serotiparon. 1 /63 LISTADO DE SECUENCIAS <110> Vacunas BioChem RIOUX, Clément DEKIS, Martin BRODEUR, Bernard R. KAMEL, Josée CHARLEBOSS. Isabelle BOYEB, nartine <120> NUEVOS GRUPOS ESTREPTOCO GRUPO B <130> 12806-9PCT <150> 60/075,425 <151> 1998-02-20 <160> 44 <170> FastSEQ para Windows versión 3.0 <210> 1 <211> 4514 c212> ADN <213> Estreptococo <220> <221> CDS <222> (3) ... (464) «22i> COS <222> (534) ... (887) «223> <221> CDS <222> (1024). . (17«7) <221> CDS <222> (1841) (4288) <221> CDS <222> (273S) . (4288) <400> 1 ^ tet ggc aaa gag cea gct aat cgt tet agt tgg gct aaa aat aaa 47 Ser ßly Lys ßlu Pro Ala Asn Arg Phe Ser Trp ?la Lys Asn Lys 1 5 10 15 2/63 tta tta ate aat gga ttc att gca act cta gca gca act ate tta ttt 95 Leu Leu lie Asn ßly Phe Xle ?la Thr Leu Ala Ala Thr lie Leu Phe 20 "2S 30 ttt gca gtt caá ttc ata ggt ctt aaa cea gat tac ect gga aaa acc 143 Phe Ala Val Gln Phe He Gly Leu Lys Pro Asp Tyr Pro Gly Lys Thr 35 40 45 tac ttt att ate cta ttg acá gca tgg act ttg atg gca tta gta act 191 Tyr Pbe Xle Xle Leu Leu Thr ?la Trp Thr Leu Met Ala Leu Val Thr 50 55 60 gct tta gtg gga tgg gat aat agg tat ggt tcc ttc ttg tcg tta tta 239 Ala Leu Val Gly Trp Asp Asn ?rg Tyr Gly Ser Phe Leu Ser Leu Leu 65 70 75 ata tta tta ttc cag ctt ggt tea age gca gga act tac cea ata gaa 267 lie Leu Leu Phe Gln Leu Gly Ser Ser Ala Gly Thr Tyr Pro Xle Glu BO 85 90 95 ttg agt ect aag tte ttt caá acá att caá cea ttt tta ecg atg aet 335 Leu Ser Pro Lys Phe Phe G n Thr Xle Gln Pro Phe Leu Pro Met Thr 100 105 110 tac tet gtt tea gga tta aga gag aec ate tcg ttg acg gga gac gtt 383 Tyr Ser Val Ser Gly Leu Arg ßlu Thr Xle Ser Leu Thr ßly Asp Val 115 120 125 aac cat caá tgg aga atg cta gta ate ttt tta gta tea tcg atg ata 431 ?sn His Gln Trp ?rg Met Leu Val Xle Phe Leu Val Ser Ser Met Xle 130 135 140 ctt gct ctt ctt att tat cgt aaa caá gaa gat taatagaaag tatctagtga 484 Leu ?la Leu Leu Xle Tyr ?rg Lys ßln ßlu ?sp 145 150 tagactaaca gtatgacatg gtatgtcaaa gtatttagga ggagaagat atg tet act 542 Met Ser Thr 155 tta ac ata att att gca acá tta act get ttg gaa eat ttt tat att 590 Leu Thr He He lie ?la Thr Leu Thr ?la Leu Glu His Phe Tyr lie 160 165 170 atg tat ttg gag acg tta gcc acc cag tea aat atg act ggg aag att 638 Met Tyr Leu ßlu Thr Leu ?la Thr ßln Ser ?sn Met Thr ßly Lys Xle 175 180 185 ttt agt at? tet aaa gaa gag ttg tea tat tta ecc gtt att aaa ett 686 Phe Ser Met Ser Lys ßlu ßlu Leu Ser Tyr Leu Pro Val Xle Lys Leu 190 195 200 205 ttt aag aat caá ggt gta tac aac ggc ttg att ggc cta ttc etc ctt 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Leu Val ?rg Xle ?la Tyr Lys Phe Leu His Tyr Leu Gly Lys Leu Phe 410 415 420 /63 ccg tat atg agg caá aaa gct caá gtt att tcg ctt atg ttg gag gat 1521 Pro Tyr Met Arg Gln Lys Ala G n Val Xle Ser Leu Met Leu ßlu ?sp 425 430 435 ttg aag att agt cea gct gat tta cag cat gtg tea act ect gta atg 1569 Leu Lys Xle Ser Pro Ala ?sp Leu Gln His Val Ser Thr Pro Val Met 440 445 450 gtt ttg gtt gga aat aag gac ata att aag tta aat cat tet aag aaa 1617 Val Leu Val Gly Asn Lys Asp Xle Xle Lys Leu Asn His Ser Lys Lys 455 460 465 470 ctt gct tet tat ttt cea agg ggg gag ttt tat tet tta gtt ggc ttt 1665 Leu Ala Ser Tyr Phe Pro ?rg Gly Glu Phe Tyr Ser Leu Val Gly Phe 475 480 485 ggg cat cae att act aag caá gat tcc cae gtt ctt aat att ate gca 1713 Gly His His Xle Xle Lys Gln ?sp Ser His Val Phe ?sn Xle ?le ?la 490 495 S00 aaa aag ttt ate aac gat acg ttg aaa gga gaa att gtt gaa aaa gct 1761 Lys Lys Phe Xle ?sn ?sp Thr Leu Lys Gly Glu Xle Val Glu Lys ?la 505 S10 515 aat tga aaaagtcaaa tcactgactt ctgtgattaa 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Cys Xle Gly Cys ?la Val Gly Xle Val Ser Leu 725 730 735 att ecc ggt gga tta gga agt ttt gaa tta gtt cta ttt acá ggg ttt 2542 lie Pro Gly Gly Leu Gly Ser Phe Glu Leu Val Leu Phe Thr Gly Phe 740 74S 750 gct gcc gag gga cta ect aaa gaa act gtg gtt gca tgg tta tta ctt 2590 ?la ?la Glu Gly Leu Pro Lys Glu Thr Val Val ?la Trp Leu Leu Leu 755 760 765 cae cgc cta gcc tac tat att acc cea etc ect gca ggt ate tat ttc 2638 Tyr ?rg Leu ?la Tyr Tyr lie lie Pro Phe Phe ?la Gly lie Tyr Phe 770 77S 780 785 ttt ate cat tac tta ggt agt caá ata aat caá cgc tat gaa aat gtc 2686 Phe lie His Tyr Leu Gly Ser Gln lie ?sn Gln ?rg Tyr Glu ?sn Val 790 795 800 ccg aaa gag tta gta tea act gtt cta caá acc atg gtg age cat tt? 2734 Pro Lys ßlu Leu Val Ser Thr Val Leu Gln Thr Met Val Ser Bis Leu 805 810 815 atg cgt att tea ggt gca ttc tta ata ttt tea acá gca ttt ttt gaa 2782 Met Arg Xle Leu Gly Ala Phe Leu Xle Phe Ser Thr Ala Phe Phe Glu 820 825 830 aat att act tat att atg tgg tt? cag aag cta ggc ttg gac eca tta 2830 Asn lie Thr Tyr ?le Met Trp Leu Gln. Lys Leu Gly Leu ?sp Pro Leu 835 840 845 6/63 ca gaa caá atg cea cgg cag ctt cea ggt cea tcg ccg ggg gcc tgt 2878 Gln Glu Gln Mee Leu Trp Gln Phe Pro Gly Leu Leu Leu Gly Val Cys 850 855 860 865 ttt act etc tta gct aga act att gat caá aaa gtg aaa aat ?ct ttt 2926 Phe Xle Leu Leu Ala Arg Thr Xle Asp Gln Lys Val Lys Asn Ala Phe 870 875 880 cea att gct ate acc cgg act act ttg acá ttg ttt tat ctt aat tta 2974 Pro Xle Ala lie lie Trp lie Thr Leu Thr Leu Phe Tyr Leu Asn Leu 885 890 895 ggt cat att agt tgg cga cta tcc tte tgg tet att tta cta ttg tea 3022 Gly His lie Ser Trp Arg Leu Ser Phe Trp Phe lie Leu Leu Leu Leu 900 905 910 ggc tta tta gtc att aag cea act etc tat aaa aaa caá ttt act tat 3070 Gly Leu Leu Val lie Lys Pro Thr Leu Tyr Lys Lys Gln Phe Xle Tyr 915 920 925 age tgg gaa gag cgt att aag gat gga ate att ate gtt agt tta atg 3118 Ser Trp Glu Glu Arg Xle Lys Asp Gly Xle Xle Xle Val Ser Leu Met 930 935 940 945 gga gtt cta ttt tat att gca gga cta cta ttc ect ate agg gct cat 3166 Gly Val Leu Phe Tyr Xle Ala Gly Leu Leu Phe Pro Xle Arg Ala His 950 955 960 att acá ggt ggt agt att ?aa ege ctg cat tat ate ata gca tgg gag 3214 lie Thr Gly Gly Ser lie Glu Arg Leu His Tyr lie lie Ala Trp Glu 965 970 975 ccg ata gca ttg gct acg ttg att ctt act etc gtt tat tta tgt ttg 3262 Pro Xle Ala Leu Ala Thr Leu Xle Leu Thr Leu Val Tyr Leu Cys Leu 980 985 990 gtt aag att tta caá gga aaa tet tgt cag att ggt gat gtg ttc aat 3310 Val Lys lie Leu Gln Gly Lys Ser Cys Gln lie Gly Asp Val Phe Asn 995 1000 1005 gtg gat cgt tac aaa aaa cta ctt caá gct tac ggt ggt tet tcg gat 3358 Val ?sp ?rg Tyr Lys Lys Leu Leu Gln ?la Tyr ßly ßly Ser Ser ?sp 1010 1015 1020 1025 age ggt tta gec ecc cta aat gac aaa agg etc tac tgg tac caá aaa 3406 Ser Gly Leu ?la Phe Leu ?sn ?sp Lys Arg Leu Tyr Trp Tyr Gln Lys 1030 1035 1040 aat gga gaa gat tgc gtt gcg ttc caá ttt gta att gtc aat aat aaa 3454 Asn Gly Glu ?sp Cys Val Ala Phe Gln Phe Val Xle Val ?sn ?sn Lye 1045 1050 1055 tgt ctt att atg g?g gaa cea gcc ggt gat gac act tat att cgt gaa 3S02 Cys Leu Xle Met Gly Glu Pro ?la Gly Asp Asp Thr Tyr Xle Arg Glu 1060 1065 1070 7/63 gcc ate gaa tcg ecc acc gac gac gcc gat aag cea gac tat gac ctt 3550 ?la lie Glu Ser Phe lie Asp Asp Ala Asp Lys Leu Asp Tyr Asp Leu 1075 1080 1085 gee cee cae age ate gga cag aag ctg acá cta ctt tta cae gag tat 3598 al Phs Tyr Ser lie Gly Gln Lys Leu Thr Leu Leu Leu Hie Glu Tyr 1090 1095 1100 1105 cgc ecc gac ttt atg aaa gte ggc gag gat gct tta gtt aat tta gaa 3646 Gly Pr.e ?sp Phe Met Lys Val Gly Glu Asp Ala Leu Val Asn Leu Glu 1110 1115 1120 acg [•-: ¿zz cee aaa ggg aac aag tac aaa ect etc aga aat gcc cea 3694 Thr rf.= Tiir e Lys Gly Asn Lys Tyr Lys Pro Phe Arg Asn Ala Leu 1125 1130 1135 aat aga gct gaa aag gat ggt ttc tat ttc gaa gtt gta caá tcg cea 3742 Asn Arg Val Glu Lys Asp Gly Phe Tyr Phe Glu Val Val Gln Ser Pro 1140 1145 USO cat age caá gag cta cta aat agt ttg gaa gag att tet aat act tgg 3790 Kis Ser Glr. Glu Leu Leu Asn Ser Leu Glu Glu Xle Ser Asn Thr Trp 1155 1160 1165 tta ?aa ?ga cgt ecc gaa aaa ggt ttc tea cta gga tac ttt aat aaa 3838 Leu Glu Gly Arg Pro Glu Lys Gly Phe Ser Leu Gly Tyr Phe Asn Lys 1170 1175 1180 1185 gat tac cez caá ca gcc cea ata gct ttg gta aaa aat gct gaa cae 3886 Asp Tyr Phe Gln Gln Ala Pro Xle Ala Leu Val Lys Asn ?la Glu His 1190 1195 1200 gaa gcc gcc gcc ett gct aat att atg cea aac tat gaa aag agt att 3934 Glu Val Val Ala Phe Ala Asn Xle Met Pro Asn Tyr Glu Lys Ser Xle 120S 1210 1215 acc ecc acc gac cea atg cgt cae gat aaa cag aaa aet ccg aae ggc 3982 Xle Ser Xie Asp Leu Met Arg His Asp Lys Gln Lys Xle Pro Asn Gly 1220 1225 1230 gtt atg gat ttc etc ttt tta tea tta ttc tet tat tat caá gag aag 4030 Val Met Asp Phe Leu Phe Leu Ser Leu Phe Ser Tyr Tyr Gln Glu Lys 1235 1240 1245 gga tac cae tat ttt gat ttg ggg atg gca ect tta tea gga gtt ggt 4078 Gly Tyr His Tyr Phe Asp Leu Gly Met ?la Pro Leu Ser Gly Val Gly 1250 1255 1260 1265 cgc gtt gaa acá agt ttt gct aaa gag aga atg gcg tat ctt gtc tat 4126 ?rg Val Glu Thr Ser Phe Ala Lys Glu Arg Met Ala Tyr Leu Val Tyr 1270 1275 1280 cat ttc ggt agt cat ttc tac tea ttt aat ggt tta cae aag tat aag 4174 His Phe Gly Ser His Phe Tyr Ser Phe ?sn Gly Leu His Lys Tyr Lys 1285 1290 1295 8/63 aag aag ttt acá cea ttg tgg tcg gaa ?gt tat att tet tgt tet cgt 4222 Lys Lys Phe Thr Pro Leu Trp Ser Glu ?rg Tyr lie Ser Cys Ser ?rg 1300 1305 1310 tcg tcc cgg tta att tgt gct att tgt gcc cta tta atg gaa gat agt 4270 Ser Ser Trp Leu Xle Cys ?la Xle Cys ?la Leu Leu Mee Glu ?sp Ser 1315 1320 1325 aaa att aag att gtt aaa taagctttat ttggcaatta aaaagagcat 4318 Lys Xle Lys Xle Val Lys 1330 1335 gteatgcgac atgetetttt taaatcattt aataceattg attgettgaa tetaetttat 4378 aatatgatgt gettttaaat accgtttagc tactgtagct gctgatctat getetacage 4438 tacttggtag ttcatttctt gcátttcttt tteagtgata tgaccagcaa gtttattgag 4498 agcttttttt acttga 4514 <210> 2 <211> 154 <212> PRT <213> Estreptococo <400> 2 Ser Gly Lys Glu Pro ?la Asn Arg Phe Ser Trp Ala Lys Asn Lys Leu 1 5 10 15 Leu Xle Asn Gly Phe Xle Ala Thr Leu Ala Ala Thr Xle Leu Phe Phe 20 25 30 Ala Val Gln Phe lie Gly Leu Lys Pro Asp Tyr Pro Gly Lys Thr Tyr 35 40 ~ 45 Phe Xle Xle Leu Leu Thr Ala Trp Thr Leu Mee Ala Leu Val Thr Ala 50 S5 60 Leu Val Gly Trp Asp Asn Arg Tyr Gly Ser Phe Leu Ser Leu Leu lie 65 70 75 80 Leu Leu Phe Gln Leu Gly Ser Ser Ala Gly Thr Tyr Pro Xle Glu Leu 85 90 95 Ser Pro Lys Phe Phe Gln Thr Xle Gln Pro Phe Leu Pro Mee Thr Tyr 100 IOS 110 Ser Val Ser Gly Leu Arg Glu Thr lie Ser Leu Thr Gly Asp Val ?sn 115 120 125 His Gln Trp ?rg Met Leu Val Xle Phe Leu Val Ser Ser Met Xle Leu 130 135 140 ?la Leu Leu Xle Tyr ?rg Lys Gln Glu ?sp 145 150 <210> 3 <211> 118 <212> PRT <213> Estreptococo <400> 3 Met Ser Thr Leu Thr lie Xle Xle ?la Thr Leu Thr ?la Leu ßlu His 1 5 10 15 Pbe Tyr lie Mee Tyr Leu ßlu Thr Leu ?la Thr ßln Ser ?sn Mee Thr 9/63 Gly Lys Xle Phe Ser Met Ser Lys ßlu Glu Leu Ser Tyr Leu Pro Val 40 45' Ile Lye Leu Phe Lys ?sn Gln Gly Val Tyr ?sn Gly Leu He Gly Leu 50 55 60 Phe Leu Leu Tyr Gly Leu Tyr He Ser Gln ?sn Gln Glu He Val ?la 65 70 7S 80 Val Pbe Leu Xle ?sn Val Leu Leu Val Ala Xle Tyr Gly Ala Leu Thr 85 90 95 Val Asp Lys Lys Xle Leu Leu Lys Gln Gly Gly Leu Pro He Leu Ala 100 105 110 Leu Leu Thr Phe Leu Phe 115 <210> 4 <211> 247 <212> PRT <213> Estreptococo <400> 4 Met Thr Glu Asn Trp Leu His Thr Lys Asp Gly Ser Asp He Tyr Tyr 5 10 15 Arg Val Val Gly Gln Gly Gln Pro He Val Phe Leu His Gly Asn Ser 25 30 Leu Ser Ser Arg Tyr Phe Asp Lys Gln He Ala Tyr Phe Ser Lys Tyr 40 45 Tyr Gln Val He Val Met Asp Ser ?rg Gly His Gly Lys Ser His ?la SO 55 60 Lys Leu ?sn Thr He Ser Phe ?rg ßln He Ala Val Asp Leu Lys Asp 65 70 75 80 He Leu Val His Leu Glu He Asp Lys Val Xle Leu Val Gly His Ser 85 90 95 Asp Gly Ala Asn Leu Ala Leu Val Phe Gln Thr Met Phe Pro Gly Met 100 105 110 Val Arg Gly Leu Leu Leu Asn Ser Gly Asn Leu Thr Xle His Gly Gln 115 120 12S Arg Trp Trp Asp He Leu Leu Val Arg He Ala Tyr Lys Phe Leu His 130 135 140 Tyr Leu Gly Lys Leu Phe Pro Tyr Met Arg ßln Lys Ala Gln Val He 145 150 155 160 Ser Leu Mee Leu Glu Asp Leu Lys He Ser Pro Ala Asp Leu Gln His 165 170 175 Val Ser Thr Pro Val Met Val Leu Val Gly ?sn Lys ?sp He He Lys 180 18S 190 Leu ?sn His Ser Lys Lys Leu ?la Ser Tyr Phe Pro ?rg Gly Glu Phe 195 200 205 Tyr Ser Leu Val Gly Phe Gly His His He He Lys Gln ?sp Ser His 210 215 220 Val Phe ?sn He He ?la Lys Lys Phe He Asn Asp Thr Leu Lys ßly 225 230 235 240 Glu He Val Glu Lys Ala ?sn 245 <210> S <211> 816 <212> PRT <213> Estreptococo 10/63 <400> 5 Met He His Leu Lys ?rg Thr Xle Ser Val Glu ßln Leu Lys Ser Val 1 S 10 15 Phe Gly Gln Leu Ser Pro Met ?sn Leu Phe Leu He He Leu al Gly 25 30 Val lie ?la Val Leu Pro Thr Thr Gly Tyr ?sp Phe Val Leu Asn Giy 40 45 Leu Leu Arg Thr Asp Lys Ser Lys Arg Tyr He Leu Gln Thr Ser Trp 50 55 60 Cys Xle ?sn Thr Phe ?sn Asn Leu Ser ßly Phe Gly ßly Leu He ?sp 65 70 75 80 Xle ßly Leu ?rg Met ?la Phe Tyr ßly Lys Lys ßly Gln ßlu Lys Ser 85 90 95 Asp Leu Arg ßlu Val Thr ?rg Phe Leu Pro Tyr Leu He Ser ßly Leu 100 105 110 Ser Phe He Ser Val He ?la Leu He Met Ser His Xle Phe Hie ?la 115 120 125 Lys ?la Ser Val ?sp Tyr Tyr Tyr Leu Val Leu Xle ßly ?la Ser Met 130 135 " 140 Tyr Phe Pro Val He Tyr Trp He Ser Gly His Lys Gly Ser His Tyr 145 150 155 160 Phe Gly ?sp Met Pro Ser Ser Thr ?rg He Lys Leu Gly Val Val Ser 165 170 175 Phe Phe Glu Trp Gly Cyß ?la ?la ?la ?la Phe He He He Gly Tyr 180 185 190 Leu Met Gly Xle His Leu Pro Val Tyr Lys Xle Leu Pro Leu Phe Cys 195 200 205 He Gly Cys ?la Val Gly He Val Ser Leu He Pro ßly ßly Leu ßly 210 215 220 Ser Phe Glu Leu Val Leu Phe Thr Gly Phe ?la ?la Glu Gly Leu Pro 225 230 235 240 Lys Glu Thr Val Val ?la Trp Leu Leu Leu Tyr ?rg Leu ?la Tyr Tyr 245 2S0 255 Xle Xle pro Phe Phe ?la Gly He Tyr phe Phe Xle His Tyr Leu Gly 260 265 270 Ser Gln He ?sn Gln ?rg Tyr Glu ?sn Val Pro Lys Glu Leu Val Ser 275 280 285 Thr Val Leu Gln Thr Met Val Ser His Leu Met ?rg Xle Leu Gly ?la 290 295 300 Phe Leu Xle Phe Ser Thr ?la Phe Phe Glu ?ßn Xle Thr Tyr Xle Met 305 310 315 320 Trp Leu Gln Lys Leu ßly Leu ?sp Pro Leu ßln ßlu ßln Met Leu Trp 325 330 335 Gln Phe Pro Gly Leu Leu Leu ßly Val Cys Phe Xle Leu Leu ?la ?rg 340 34S 350 Thr He ?sp Gln Lys Val Lys ?sn ?la Phe Pro He ?la He He Trp 355 360 365 He Thr Leu Thr Leu Phe Tyr Leu ?sn Leu ßly His He Ser Trp ?rg 370 ~ 375 380 Leu Ser Phe Trp Phe He Leu Leu Leu Leu ßly Leu Leu Val He Lys 385 390 395 400 Pro Thr Leu Tyr Lys Lys ßln Phe He Tyr Ser Trp Glu ßlu Arg Xle 405 410 415 Lys Asp ßly He He Zle Val Ser Leu Met ßly Val Leu Phe Tyr Xle 420 425 430 11/63 Ala Gly Leu Leu Phe Pro He ?rg ?la His He Thr Gly Gly Ser He 435 440 445 Glu Arg Leu His Tyr He He Ala Trp Glu Pro He Ala Leu Ala Thr 450 455 460 Leu He Leu Thr Leu Val Tyr Leu Cys Leu Val Lys He Leu Gln Gly 465 470 475 480 Lys Ser Cys Gln He Gly Asp Val Phe Asn Val Asp Arg Tyr Lys Lys 485 490 495 Leu Leu Gln Ala Tyr ßly Gly Ser Ser Asp Ser Gly Leu Ala Phe Leu 500 50S 510 Asn Asp Lys Arg Leu Tyr Trp Tyr Gln Lys ?sn Gly ßlu ?sp Cys Val 515 520 525 Ala Phe Gln Phe Val He Val Asn Asn Lys Cys Leu He Met Gly Glu 530 535 540 Pro Ala Gly Asp Asp Thr Tyr Xle Arg Glu Ala He Glu Ser Phe Xle 545 550 555 560 Asp Asp Ala Asp Lys Leu Asp Tyr Asp Leu Val Phe Tyr Ser He Gly 565 S70 575 Gln Lys Leu Thr Leu Leu Leu His Glu Tyr Gly Phe Asp Phe Met Lys S80 585 590 Val Gly Glu ?sp Ala Leu Val Asn Leu Glu Thr Phe Thr Leu Lys Gly 595 600 605 Asn Lys Tyr Lys Pro Phe Arg ?sn ?la Leu Asn Arg Val Glu Lys Asp 610 61S 620 Gly Phe Tyr Phe Glu Val Val Gln Ser Pro His Ser Gln Glu Leu Leu 625 630 635 640 Asn Ser Leu Glu Glu Xle Ser Asn Thr Trp Leu Glu Gly Arg Pro Glu 645 650 655 Lys Gly Phe Ser Leu Gly Tyr Phe Asn Lys Asp Tyr Phe Gln Gln Ala 660 665 670 Pro He Ala Leu Val Lys Asn Ala Glu His Glu Val Val Ala Phe Ala 675 680 685 Asn He Met Pro Asn Tyr Glu Lys Ser He He Ser He Asp Leu Met 690 695 700 ?rg His Asp Lys Gln Lys He Pro Asn Gly Val Met Asp Phe Leu Phe 705 710 715 720 Leu Ser Leu Phe Ser Tyr Tyr Gln Glu Lys Gly Tyr His Tyr Phe ?sp 72S * 730 73S Leu Gly Met Ala Pro Leu Ser Gly Val Gly Arg Val Glu Thr Ser Phe 740 74S 750 Ala Lys Glu Arg Met Ala Tyr Leu Val Tyr His Phe ßly Ser His Phe 755 760 765 Tyr Ser Phe ?sn Gly Leu His Lys Tyr Lys Lys Lys Phe Thr Pro Leu 770 775 780 Trp Ser Glu ?rg Tyr He Ser Cys Ser ?rg Ser Ser Trp Leu He Cys 785 790 795 800 ?la He Cys Ala Leu Leu Met Glu Asp Ser Lys He Lys He Val Lys 805 810 815 <210> 6 <211> 518 <212> PRT <213> Estreptococo <400> 6 12/63 Met Arg He Leu Gly Ala Phe Leu He Phe Ser Thr Ala Phe Phe Glu 1 5 10 ÍS Asn He Thr Tyr He Mee Trp Leu Gln Lys Leu Gly Leu Asp Pro Leu 25 30 Gln Glu Gln Mee Leu Trp Gln Phe Pro Gly Leu Leu Leu Gly Val Cys 40 45 Phe He Leu Leu Ala Arg Thr He Asp Gln Lys Val Lys Asn Ala Phe 50 55 60 Pro He Ala He He Trp He Thr Leu Thx Leu Phe Tyr Leu Asn Leu 65 70 75 80 Gly His He Ser Trp Arg Leu Ser Phe Trp Phe He Leu Leu Leu Leu 85 90 95 Gly Leu Leu Val He Lys Pro Thr Leu Tyr Lys Lys Gln Phe He Tyr 100 105 110 Ser Tro Glu Glu Arg He Lys Asp Gly He He He Val Ser Leu Mee 115 120 125 Gly Val Leu Phe Tyr He Ala Gly Leu Leu Phe Pro He Arg Ala His 130 13S 140 He Thr Gly Gly Ser He Glu Arg Leu His Tyr He Xle Ala Trp Glu 145 150 1S5 160 Pro Xle Ala Leu Ala Thr Leu He Leu Thr Leu Val Tyr Leu Cys Leu 165 170 175 Val Lys He Leu Gln Gly Lys Ser Cys Gln He Gly Asp Val Phe Asn 180 185 190 Val Asp Arg Tyr Lys Lys Leu Leu Gln Ala Tyr Gly Gly Ser Ser Asp 195 200 205 Ser Gly Leu Ala Phe Leu Asn Asp Lys Arg Leu Tyr Trp Tyr Gln Lys 210 215 220 Asn Gly Glu Asp Cys Val Ala Phe Gln Phe Val He Val Asn Asn Lys 225 230 235 240 Cys Leu He Mee Gly Glu Pro Ala Gly Asp Asp Thr Tyr He Arg Glu 245 2S0 255 Ala Xle Glu Ser Phe Xle Asp Asp Ala Asp Lye Leu Asp Tyr ?sp Leu 260 265 270 Val Phe Tyr Ser Xle Gly Gln Lys Leu Thr Leu Leu Leu His Glu Tyr 275 280 285 Gly Phe Asp Phe Mee Lys Val Gly Glu Asp Ala Leu Val Asn Leu ßlu 290 295 300 Thr Phe Thr Leu Lys Gly Asn Lys Tyr Lys Pro Phe Arg Asn Ala Leu 305 310 315 320 Asn Arg Val Glu Lys Asp Gly Phe Tyr Phe Glu Val Val ßln Ser Pro 325 330 335 His Ser Gln Glu Leu Leu Asn Ser Leu Glu Glu Xle Ser Asn Thr Trp 340 34S 350 Leu Glu Gly Arg Pro Glu Lys Gly Phe Ser Leu Gly Tyr Phe Asn Lye 355 360 365 Asp Tyr Phe Gln Gln Ala Pro Xle ?la Leu Val Lys ?sn ?la Glu His 370 375 380 Glu Val Val Ala Phe Ala Asn He Mee Pro Asn Tyr Glu Lys Ser Xle 385 390 395 400 Xle Ser Xle Asp Leu Mee Arg His Asp Lys Gln Lys Xle Pro Asn Gly 405 410 415 Val Mee Asp Phe Leu Phe Leu Ser Leu Phe Ser Tyr Tyr ßln ßlu Lys 420 425 430 Gly Tyr His Tyr Phe Asp Leu Gly Mee Ala Pro Leu Ser Gly Val Gly 435 440 445 13/63 Arg Val Glu Thr Ser Phe Ala Lys Glu Arg Met Ala Tyr Leu Val Tyr 450 4SS 460 His Phe Gly Ser His Phe Tyr Ser Phe Asn Gly Leu His Lys Tyr Lys 465 470 475 480 Lys Lys Phe Thr Pro Leu Trp Ser Glu Arg Tyr He Ser Cys Ser Arg 485 490 495 Ser Ser Trp Leu He Cys Ala He Cys Ala Leu Leu Met Glu Asp Ser 500 505 510 Lys He Lys He Val Lys 515 «210> 7 <211> 5126 <212> ADN «213> Estreptococo «220» «221> CDS «222» (1) . (687) <221> CDS <222> (701) (2S57) <221> CDS <222> (2566) (3036) <221> CDS <222> (3106)... (4842) <221> CDS <222> (4850) ... (5125) <400> 7 aat ttt gat ate gaa acá acá act ttt gag gca atg aaa aag cae gcg 48 Asn Phe Asp He Glu Tbr Thr Thr Phe Glu ?la Met Lys Lys His ?la 1 5 10 15 tea tta ttg gag aaa ata tet gtt gag egt tet ttt att gaa ttt gat 96 Ser Leu Leu Glu Lys Xle Ser Val Glu ?rg Ser Phe Xle Glu Phe ?sp 20 25 30 aaa ctt cta tta gca ect tat tgg cgt aaa gga atg ctg gca cta ata 144 Lyß Leu Leu Leu ?la Pro Tyr Trp ?rg Lys Gly Met Leu ?la Leu Xle 35 40 45 gat age cae gcc ttt aat tat cta cea tgc tta aaa aae agg gaa cea 192 Asp Ser His Ala Phe Asn Tyr Leu Pro Cys Leu Lys Asn Arg Glu Leu 50 55 60 caá eca age gcc ttt ttg tcc cag tta gat aaa gat ttt tta ttt gag 240 Gln Leu Ser Ala Pbe Leu Ser Gln Leu Asp Lys Asp Pbe Leu Phe ßlu 65 70 7S 80 acá cea gaa ca gee egg gca cea ccc aec eeg age atg gaa gtt gaa 288 Thr Ser Glu Gln Ala Trp ?la Ser Leu He Leu Ser Met Glu Val Glu 14/63 cae acá aag acc cee tta aaa aaa egg aag acá tea act cae ttt ca 336 His Thr Lys Thr Phe Leu Lys Lys Trp LYS Thr Ser Thr His Phe ßln 100 ios 110 aaa ?ac gcc gag cat ata gtg gat gtt tat cgt att cgc gaa caá atg 384 Lys Asp Val Glu His He Val Asp Val Tyr Arg He Arg Glu Gln Met 115 120 125 gga ccg gcc aaa gaa cae ccc Cae ege Cae gga aaa aec ata acá aaa 432 Cly Leu Ala Lys Glu His Leu Tyr Arg Tyr Gly Lys Thr He He Lys 130 135 140 caá geg gaa age acc cgc aaa gca aga ggc ttg atg gtt gat tte gaa 480 Glp ?la Glu Gly l e Arg Lys Ala Arg Gly Leu Met Val Asp Phe Glu 14S 150 155 160 aaa acá gaa caá cea gac age gag Cta gca ate cat gat agg cat gag 528 Lys He Glu Cln Leu ?sp Ser Glu Leu ?la He His ?sp Arg His Glu 165 170 175 ata gtt gcc aat ggc ggc acc tta ate aag aaa tta gga ata aaa ect 576 He Val Val Asn Gly Gly Thr Leu He Lys Lys Leu Gly He Lys Pro 180 185 190 ggt cea cag atg gga gat att ate tet caá att gaa tta gcc att gtt 624 Gly Pro Gln Het Gly Asp He He Ser Gln He Glu Leu Ala He Val 195 200 205 tta gga caá ctg att aat gaa gaa gag get att tta cat ttt gtt aa? 672 Leu Gly Gln Leu He Asn Glu Glu Glu Ala He Leu His Phe Val Lys 210 215 220 cag tac ttg atg gat tagagaggat tat atg age gat ttt tta gta gat 721 Gln Tyr Leu Met Asp Met Ser Asp Phe Leu Val ?sp 225 230 235 gga ttg act aag tcg gtt ggt gat aag acg gtc ttt agt aat gee cea 769 Gly Leu Thr Lys Ser Val Gly ?sp Lys Thr Val Phe Ser ?sn Val Ser 240 245 250 eee ate ate cat agt tta gac ege att ggg att att ggt gtc aat gga 817 Phe He Xle His Ser Leu ?sp Arg Zle Cly ?le Zle ßly Val Asn ßly 255 260 265 act gga aag aea acá cta tta gat gtt att tcg ggc gaa cea gge cee 865 Thr Gly Lys Thr Thr Leu Leu ?sp Val Xle Ser Gly Glu Leu Oly Phe 270 275 280 gae ggc gat cgt tcc cet ttt tea tea gct aat gat tat aag ate gee 913 ?sp ßly ?sp Arg Ser Pro Phe Ser Ser ?la ?sn ?sp Tyr Lys Xle ?la 28S 290 295 300 cae cta aaa eaa gaa cea gae ttt gat gat tcc cag acá acc ccg gac 961 Tyr Leu Lys Gln Glu Pro Asp Phe Asp ?sp Ser Gln Thr He Leu ?sp 305 310 315 15/63 acc gca ccc tet tet gac tta aga gag acg gct tta ate aaa gaa tat 1009 Thr Val Leu Ser Ser Asp Leu Arg Glu Met ?la Leu He Lys Glu Tyr 320 325 330 gaa tta ttg ctt aat cae tac gaa gaa agt aag caá tea cgt cta gag 1057 Glu Leu Leu Leu Asn His Tyr Glu Glu Ser Lys Gln Ser Arg Leu Glu 335 340 34S aaa gta atg gca gaa atg gat tet tta gat get tgg tet att gag age 1105 Lys Val Met Ala Glu Met Asp Ser Leu Asp Ala Trp Ser He Glu Ser 350 355 360 gaa gtc aaa acá gta tta tcc aaa tta ggt att act gat ttg cag ttg 1153 Glu Val Lys Thr Val Leu Ser Lys Leu Gly He Thr Asp Leu Gln Leu 365 370 375 380 tcg gee ggc gaa tea cea gga gga tea cga aga ege gee caá cea gcg 1201 Ser Val ßly Glu Leu Ser ßly Gly Leu Arg Arg ?rg Val Gln Leu ?la 385 390 395 caá gta tta tta aat gat gca gat tta ttg etc tta gac gaa ect act 1249 Gln Val Leu Leu Asn Asp Ala Asp Leu Leu Leu Leu Asp Glu Pro Thr 400 405 410 aac cae tta gat att gac act att gca tgg tta acg aat ttt ttg aaa 1297 Asn His Leu Asp Xle Asp Thr Xle Ala Trp Leu Thr Asn Phe Leu Lys 415 420 425 aat agt aaa aag acá gtg ctt ttt ata act eat gat cgc Cat ttt cta 1345 Asn Ser Lys Lys Thr Val Leu Phe xle Thr His Asp Arg Tyr Phe Leu 430 435 440 gac aat gtt gca acá cgt att ttt gaa tta gat aag gea cag att acá 1393 Asp Asn Val Ala Thr Arg He Phe ßlu Leu Asp Lys ?la Gln He Thr 445 450 455 460 gaa tat caá ggc aat tat cag gat tat gtc cga ctt cgt gca gaa caá 1441 Glu Tyr Gln ßly ?sn Tyr ßln ?sp Tyr Val ?rg Leu ?rg ?la ßlu ßln 465 470 475 gac gag cgc gac gee gee age cea cat aaa aag aaa cag ctt Cat aaa 1489 Asp ßlu Arg Asp Ala Ala Ser Leu His Lys Lys Lys Gln Leu Tyr Lys 480 485 490 cag gaa cta gee egg acg egt act cag cea caá gcc ege gca acg aaa 1537 ßln ßlu Leu Ala Trp Met ?rg Thr ßln Pro ßln ?la ?rg ?la Thr Lys 495 500 505 caá cag gct cgt att aat cgc ctt caá aat cta aaa aac gat tta cae 1585 ßln ßln ?la Arg "He ?sn ?rg Pbe ßln Asn Leu Lys Asn ?sp Leu His 510 515 520 caá acá age gat aea age gae ecg gaa aeg aea tcc gaa aea age ega 1633 Gln Thr Ser ?sp Thr Ser ?sp Leu Glu Met Thr Phe Glu Thr Ser Arg 525 530 535 540 att ggg aaa aag gtt att aat ccc gaa aac gcc ccc eee ccc cae cea 1681 He Gly Lys Lys Val He Asn Phe Glu Asn Val Ser Phe Ser Tyr PPrroo gac aaa ccc acc ccg aaa gac cee aae ccg cea acc caá aac aaa gac 1729 Asp Lys Ser He Leu Lys Asp Phe Asn Leu Leu He Gln Aen Lys Asp 560 565 570 cgt ate ggc ate gtt gga gat aat ggt gtt gga aag tea acc tta ctt 1777 Arg He Gly He Val Gly Asp Asn Gly Val Gly Lys Ser Thr Leu Leu 575 580 585 aat tta att gtt caá gat tta cag ccg gat tcg ggt aat gtc tet att 1825 Asn Leu He Val Gln Asp Leu Gln Pro Asp Ser Gly Asn Val Ser He 590 595 600 ggc gaa acg ata cgt gta ggt tac ttt tea caá caá ctt cat aat atg 1873 Gly Glu Thr He Arg Val Gly Tyr Phe Ser Gln Gln Leu His Asn Met 605 610 61S 620 gat ggc tea aaa cgt gtt acc aac cae ecg caá gag gcc gca gac gag 1921 Asp Gly Ser Lys Arg Val He Asn Tyr Leu Gln Glu Val Ala Asp Glu 625 630 635 gtt aaa act agt gtc ggc ac acá agt gtg acá gaa cta ttg gaa ca 1969 Val Lys Thr Ser Val Gly Thr Thr Ser Val Thr Glu Leu Leu Glu Gln 640 645 650 tcc ccc Ctt cea ege ecg ac cae gga ac caá att gca aaa tta tea 2017 Phe Leu Phe Pro Arg Ser Thr His Gly Thr Gln He Ala Lys Leu Ser 655 660 665 ggt ggt gag aaa aaa aga ctt tac ctt tta aaa ate ctg att gaa aag 2065 Gly Gly Glu Lys Lys Arg Leu Tyr Leu Leu Lys He Leu He Glu Lys 670 675 680 ccc aac gtg tta cta ctt gat gag ccg ac aat gac tta gat att gct 2113 Pro Asn Val Leu Leu Leu Asp Glu Pro Thr Asn Asp Leu Asp Xle Ala 685 690 695 700 acá tta act gee cet ?aa aat tcc tta caá ggc ttt ggt ggt ect gtg 2161 Thr Leu Thr Val Leu Glu Asn Phe Leu Gla Gly Phe Gly Gly Pro Val 705 710 715 att acá gcc age cae gae ege cap ect cea gac aaa geg gee aac aaa 2209 He Thr Val Ser His Asp Arg Tyr Phe Leu ?sp Lys Val ?la ?sn Lys 720 72S 730 ace acc gcg eee gaa gae aac gat ate cgt gaa tee eee ggc aat tat 2257 Xle Xle Ala Phe Glu Asp Asn Asp Xle ?rg Glu Pbe Pbe ßly Asn Tyr 735 740 745 act gat tat tta gat gaa aaa gca ttt aat gag caá aat aat gaa gtt 2305 Thr Asp Tyr Leu Asp ßlu Lys ?la Phe ?sn ßlu Gln ?sn ?sn Glu Val 750 75S 760 ate agt aaá aaa gag agt acc aag acá agt cgt gaa aag caá agt cgt 2353 He Ser Lys Lys Glu Ser Thr Lys Thr Ser Arg Glu Lys Gln Ser Arg 765 770 75 780 aaa aga atg ect tac ttt gaa aaa caá gaa tgg gcg acá att gaa gac 2401 Lys Arg Met Ser Tyr Phe Glu Lys Gln Gl? Trp ?la Thr He Glu Asp 785 790 795 gat att atg ata ttg gaa aat act ate act ege ata gaa aat ?at atg 2449 Asp He Met He Leu Glu Aen Thr He Thr Arg Xle Glu Asn Asp Mee 800 805 810 caá acá tgt ggt agt gat ttt acá agg tta tet gat tta caá aag gaa 2497 Gln Thr Cys Gly Ser Asp Phe Thr Arg Leu Ser Asp Leu Gln Lys Glu 815 820 825 tta gat gca aaa aat gaa gca ctt cta gaa aag tat gac cgt tat gag 2545 Leu Asp Ala Lys Asn Glu Ala Leu Leu Glu Lys Tyr Asp Arg Tyr Glu 830 835 840 tac ctt agt gag ttagacac atg att ate cgt ccg att att aaa aat gac 2595 Tyr Leu Ser Glu LeuAspThrMet He He Arg Pro He Xle Lys Asn Aep 845 850 855 860 gac caá gca gct gca caá tta att cga caá agt tea cgc gee tat gat 2643 Asp Gln Ala Val Ala Gln Leu Xle Arg Gln Ser Leu Arg Ala Tyr Asp 865 870 875 tta gae aaa ccc gac acá gca tat tea gac ect cae tta gat cat ttg 2691 Leu Asp Lys Pro ?sp Thr ?la Tyr Ser ?sp Pro His Leu ?sp His Leu 880 885 890 acc tea tac tac gaa aaa ata gag aag tea gga ttc ttt gtc att gag 2739 Thr Ser Tyr Tyr Glu Lys He Glu Lys Ser Gly Phe Phe Val He Glu 895 900 905 gag aga gat ?ag att att ggc tgt ggc ggc ttt ggt ccg ctg aaa aat 2787 Glu Arg ?sp Glu Xle Xle Gly Cys ßly Gly Phe ßly Pro Leu Lys Aßn 910 915 920 925 cea att gca gag atg eag aag gtg cae att gca gaa cgc ttc cgc ggc 2835 Leu He Ala Glu Met Gln Lys Val Tyr Xle Ala Glu Arg Phe Arg Gly 930 935 940 aag ggg ect gct act gae eca gtg aaa atg aec gaa gea gaa gec cga 2883 Lys Gly Leu Ala Thr ?sp Leu Val Lys Met He Glu Val Glu ?la ?rg 945 950 955 aaa att ggg tat aga caá ctt tat tta gag acá gee agt act ttg agt 2931 Lys He Gly Tyr Arg Gln Leu Tyr Leu Glu Thr Ala Ser Thr Leu Ser 960 965 970 agg gca act gcg gtt tat aag cat atg gga tat tgt gcc tta tcg caá 2979 Arg ?la Thr ?la Val Tyr Lys His Met Gly Tyr Cys ?la Leu Ser Gln 975 980 985 cea acá gca aac gac ca ggt cae acá gcc atg gat att tgg atg att 3027 Pro He Ala Asn Asp Gln Gly His Thr Ala Met Asp He Trp Met He 990 995 1000 1005 aaa gae tta taagtcgaaa gcggatcagc gaacacggac caactatttt 3076 Lys Asp Leu gagataagag gaaagaaaag gagacaCac acg gca cae ate cgg cce tat ttg 3129 Met Ala Tyr He Trp Ser Tyr Leu 1010 1015 aaa agg tac ccc aat tgg tta tgg ctt gac Cta cta gga gct atg ctt 3177 Lys Arg Tyr Pro Asn Trp Leu Trp Leu Asp Leu Leu Gly Ala Met Leu 1020 102S 1030 tcc gcg acg gee acc cta gga acg cec acá gcc tea gcg gge atg att 3225 Phe Val Thr Val He Leu Gly Met Pro Thr Ala Leu Ala Gly Mee He 103S 1040 1045 gac aae ggc gcc acá aaa ggc gae cgg acc gga gcc tat ctg tgg acg 3273 Asp Asn Gly Val Thr Lys Gly Asp Arg Thr Gly Val Tyr Leu Trp Thr 1050 1055 1060 ttc ate acg ecc aCa cce gcc gea cta ggt att att ggg cgt att acg 3321 Phe He Met Phe He Phe Val Val Leu Gly He He Gly Arg He Thr 1065 1070 1075 1080 atg gct tac gca tet age cgc tta acg ac acá atg att aga gat atg 3369 Met Ala Tyr Ala Ser Ser Arg Leu Thr Thr Thr Met He Arg Asp Met 1085 1090 1095 cgt aat gat atg tat gct aag ctt caá gaa tac tcc cat cat gaa tat 3417 Arg Asn Asp Met Tyr Ala Lys Leu Gln Glu Tyr Ser His His Glu Tyr 1100 1105 1110 gaa cag ata ggt gta tet tea cta gtg acá cgt atg acá age gat act 3465 Glu Gln lie Gly Val Ser Ser Leu Val Thr Arg Met Thr Ser Asp Thr 1115 1120 1125 ttt gtt ttg atg caá ttt gct gaa atg tet tta cgt tea ggc cea gCa 3513 Phe Val Leu Met Gln Phe Ala Glu Met Ser Leu Arg Leu ßly Leu Val 1130 1135 1140 act ect atg gta atg att ttt age gtg gtt atg ata cta act acg agt 3561 Thr Pro Met Val Met He Phe Ser Val Val Met He Leu He Thr Ser 1145 1150 1155 1160 cea tet ttg gct tgg ctt gta gcg gtt gcg atg ccc cee eeg gea gga 3609 Pro Ser Leu Ala Trp Leu Val Ala Val Ala Met Pro Leu Leu Val Gly 1165 1170 1175 gcc gcc cea eac gca gcc ac aaa acá aaa cec eca ect gaa aga caá 3657 Val Val Leu Tyr Val Ala He Lys Thr Lys Pro Leu Ser Glu Arg Gln 1180 1185 " 1190 19/63 cag acc atg ect gat aaa ate aat ca tat gtt cgt gaa aat tta acá 3705 Gln Thr Met Leu Asp Lys He Asn Gln Tyr Val Arg Glu Asn Leu Thr 1195 1200 120S ggg cea cgc gcc gcc aga gcc cee gca aga gag aac cec caá Cea caá 3753 Gly Leu Arg Val Val Arg Ala Phe Ala Arg Glu Asn Phe Gln Ser Gln 1210 1215 1220 aaa ccc caá gcc gcc aac caá cgt tac acá gat act tea act ggt ctt 3801 Lys Phe Gln Val Ala Asn Gln Arg Tyr Thr Asp Thr Ser Thr Gly Leu 1225 1230 1235 1240 tee aaa cta acá ggg cea acá gaa cea ctt ttc gtt caá act att att 3849 Phe Lys Leu Thr Gly Leu Thr Glu Pro Leu Phe Val Gln He He He 1245 1250 1255 gca atg ate gtg gct ate gcc cgg ett gct ttg gat ccc tta caá aga 3897 Ala Met He Val Ala He Val Trp Phe Ala Leu Asp Pro Leu Gln Arg 1260 1265 1270 ggt gct att aaa ata ggg gac cta gtt gct eet ate gaa tac age ttc 3945 Gly Ala He Lys He Gly Asp Leu Val Ala Phe He Glu Tyr Ser Phe 1275 1280 1285 cae gcc ccc ttt tea ttt ttg cta ttt gcc aat ctt ttt act atg tat 3993 His Ala Leu Phe Ser Phe Leu Leu Phe Ala Asn Leu Phe Thr Met Tyr 1290 1295 1300 ect cgt atg gtg gta tea age cat cgt att aga gag gtg atg gat atg 4041 Pro Arg Met Val Val Ser Ser His Arg He Arg Glu Val Met Asp Met 1305 1310 1315 1320 cea aec tet ate aat ect aat gcc gaa ggt gtt acg gat acg aaa ctt 4089 Pro He Ser He Asn Pro Asn Ala Glu Gly Val Thr Asp Thr Lys Leu 1325 1330 1335 aaa ggg cat tta gaa ttt gat aat gta acá ttc gct tat cea gga gaa 4137 Lys Gly His Leu Glu Phe Asp Asn Val Thr Phe Ala Tyr Pro Gly Glu 1340 1345 1350 ac gag agt ccc gtt ttg cat gat att tet ttt aaa gct aag ect gga 4185 Thr Glu Ser Pro Val Leu His Asp He Ser Phe Lys Ala Lys Pro Gly 1355 1360 1365 gaa acá att gct ttt att ggt tea acá ggt tea gga aaa tet tet ctt 4233 Glu Thr He Ala Phe He Gly Ser Thr Gly Ser Gly Lys Ser Ser Leu 1370 1375 1380 gtt aat ttg att cea cgt ttt tat gat gtg acá ctt gga aaa ate tta 4281 Val Asn Leu He Pro Arg Phe Tyr Asp Val Thr Leu Gly Lys He Leu 1385 1390 1395 1400 gta gat gga get gat gta aga gat tac aac ctt aaa tea ctt cgc caá 4329 Val Asp Gly Val Asp Val Arg Asp Tyr Asn Leu Lys Ser Leu Arg ßln 1405 1410 1415 20/63 aag att gga ttt ate ccc caá aaa gct ctt tta ttt acá ggg acá ata 4377 Lys He ßly Pbe Xle Pro ßln Lys ?la Leu Leu Phe Thr ßly Thr He 1420 1425 1430 gga gag aat tta aaa tat gga aaa ?cc gat gct act att gat gat ctt 4425 Gly Glu Asn Leu Lys Tyr Gly Lys Ala Asp Ala Thr He ?sp ?sp Leu 1435 1440 1445 aga caá gcg gtt gat att tet ca gct aaa gag tee aee gag age cae 4473 ?rg ßln ?la Val ?sp He Ser ßln ?la Lyß ßlu Phe He ßlu Ser His 1450 1455 1460 caá gaa gee ttt gaa acg cat tta gct gaa ggt ggg age aat ett tet 4521 Gln Glu Ala Phe Glu Thr Kis Leu Ala Glu ßly ßly Ser ?sn Leu Ser 1465 1470 1475 1480 g g g c caá aaa ca cgg tta tet att gct agg gct gtt gtt aaa gat 4569 ßly ßly ßln Lys ßln ?rg Leu Ser Zle ?la ?rg ?la val Val Lys ?sp 148S 1490 1495 cea gac tta tat aet ttt gae gat tea ttt tet gct etc gat tat aag 4617 Pro ?sp Leu Tyr He Phe ?sp ?sp Ser Phe Ser ?la Leu ?sp Tyr Lys 1500 1S0S 1510 acá gac gct act tta aga gcg cgt cta aaa gaa gta acc ggc gac tet 4665 Thr ?sp ?la Thr Leu ?rg ?la ?rg Leu Lys ßlu Val Thr ßly ?sp Ser 1515 1520 1525 acá gec etg ata gtt gct caá agg gtg ggt acg ate acg gae gec gac 4713 Thr Val Leu He Val ?la Gln ?rg Val ßly Thr Xle Mee ?sp ?la ?sp 1530 1535 1540 cag aee act gtc ett gat gaa ggc gaa att gtc ggt cgt ggt acc cae 4761 ßln Zle Xle Val Leu ?sp ßlu ßly ßlu He Val ßly ?rg ßly Thr His 1545 1S50 1555 1560 gct caá cea ac gaa aae aac gcc att tat cgt gaa ate gcc gag tea 4809 ?la ßln Leu He ßlu ?sn ?sn ?la He Tyr ?rg ßlu Xle ?la ßlu Ser 1565 1570 1575 caá ceg aag aac caá aac cea eca gaa gga gag tgattgt atg aga aaa 4858 Gln Leu Lys ?sn Gln Asn Leu Ser Glu Gly Glu Mee ?rg Lys 1S80 1585 1590 aaa cce gee ecc ceg aga cea egg tee tac cea aee ege eae aaa gee 4906 Lys Ser Val Phe Leu ?rg Leu Trp Ser Tyr Leu Thr ?rg Tyr Lys ?la 1595 1600 1605 aee eee ttc eta gcg aet tte eeg aaa gee cea tet age eee aeg age 4954 Thr Leu Pbe Leu-?la He Pbe Leu Lys Val Leu Ser Ser Phe Mee Ser 1610 1615 1620 gcc ccg gag ccc ccc aet tta ggg cea geg aea acá gag ccg act gec 5002 Val Leu Glu Pro Phe He Leu Gly Leu Ala Xle Thr ßlu Leu Thr ?la 1625 1630 1635 21/63 aac ct: gtt gat atg gcc aag gga gtt tet ggg gca gaa ccg aac gee SOSO ?sn Leu Val Asp Met Ala Lys Gly Val Ser Gly Ala Glu Leu Asn Val 1640 1645 1650 ccc cae ace gcc ggt att ttg att ate cae ttt ttc aga ggt gtt ttc 5098 Pro Tyr He Ala Gly He Leu He He Tyr Phe Phe Arg Gly al Phe 1655 1660 1665 1670 cat gaa cta ggt tet tat gge cea aat t 5126 Tvr Clu Leu Gly Ser Tyr ßly Ser Asn 1675 <;:o> e -.;il> 229 <212> PRT <213> Estreptococo <400> 8 Asn Phe Asp He Glu Thr Thr Thr Phe Glu Ala Met Lys Lys His Ala 1 5 10 15 Ser Leu Leu Glu Lys He Ser Val Glu Arg Ser Phe Xle Glu Phe ?sp 20 25 30 Lys Leu Leu Leu ?la Pro Tyr Trp Arg Lys Gly Met Leu Ala Leu Xle 35 40 45 Asp Ser His Ala Phe Asn Tyr Leu Pro Cys Leu Lys ?sn ?rg Glu Leu 50 55 60 Gln Leu Ser Ala Phe Leu Ser Gln Leu Asp Lys Asp Phe Leu Phe Glu 65 70 75 80 Thr Ser Glu Gln Ala Trp ?la Ser Leu Xle Leu Ser Met Glu Val Glu 85 90 95 His Thr Lys Thr Phe Leu Lys Lys Trp Lys Thr Ser Thr His Phe Gln 100 105 110 Lys Asp Val Glu His He Val Asp Val Tyr Arg He Arg ßlu Gln Met 115 120 125 Gly Leu Ala Lys Glu His Leu Tyr Arg Tyr Gly Lys Thr He He Lys 130 135 140 Gln Ala Glu Gly He Arg Lys Ala ?rg Gly Leu Met Val ?sp Phe Glu 145 150 155 160 Lys He Glu Gln Leu ?sp Ser Glu Leu ?la He His ?sp ?rg His Glu 165 170 175 He Val Val Asn siy Gly Thr Leu He Lys Lys Leu Gly He Lys Pro 180 185 190 Gly Pro Gln Met ßly Asp Xle xle Ser ßln He ßlu Leu Ala He Val 195 200 205 Leu ßly ßln Leu He Asn ßlu ßlu Glu ?la He Leu His Phe Val Lys 210 215 220 Gln Tyr Leu Met ?sp 225 <210> 9 <211> 622 «212> PRT «213> Estreptococo 22/63 «400> 9 Met Ser ?sp Phe Leu Val Asp Gly Leu Thr Lys Ser Val Gly Asp Lys 1 S 10 15 Thr Val Phe Ser Asn Val Ser Phe He lie Kis Ser Leu Asp Arg He 25 30 Gly He He Gly Val Asn Gly Thr Gly Lys Thr Thr Leu Leu Asp Val 40 45 He Ser Gly Glu Leu Gly Phe Asp Gly Asp Arg Ser Pro Phe Ser Ser 50 55 60 Ala Asn Asp Tyr Lys He ?la Tyr Leu Lys Gln Glu Pro Asp Phe Asp 65 70 75 80 ?sp Ser Gln Thr Xle Leu ?sp Thr Val Leu Ser Ser Asp Leu Arg Glu 85 90 95 Met Ala Leu Xle Lys Glu Tyr Glu Leu Leu Leu Asn His Tyr Glu Glu 100 IOS 110 Ser Lys Gln Ser Arg Leu Glu Lys Val Mee Ala Glu Mee Asp Ser Leu 115 120 125 Asp Ala Trp Ser He Glu Ser Glu Val Lys Thr Val Leu Ser Lye Leu 130 135 140 Gly Xle Thr Asp Leu Gln Leu Ser Val Gly Glu Leu Ser Gly Gly Leu 145 150 155 160 Arg Arg Arg Val Gln Leu Ala Gln Val Leu Leu Asn Asp Ala Asp Leu 165 170 175 Leu Leu Leu Asp Glu Pro Thr ?sn His Leu Asp He Asp Thr Xle Ala 180 185 190 Trp Leu Thr Asn Phe Leu Lys Asn Ser Lys Lys Thr Val Leu Phe He 195 200 205 Thr Kis Asp Arg Tyr Phe Leu Asp Asn Val Ala Thr Arg He Phe ßlu 210 215 220 Leu ?sp Lys Ala Gln He Thr Glu Tyr Gln Gly Asn Tyr Gln Asp Tyr 225 230 235 240 Val Arg Leu Arg Ala Glu Gln Asp Glu Arg Asp ?la Ala Ser Leu His 245 250 255 Lys Lys Lys Gln Leu Tyr Lys Gln Glu Leu ?la Trp Met ?rg Thr Gln 260 265 270 Pro Gln ?la ?rg ?la Thr Lys Gln Gln ?la ?rg Xle ?sn ?rg Phe Gln 275 280 285 Asn Leu Lys Asn ?sp Leu His Gln Thr Ser ?sp Thr Ser ?sp Leu ßlu 290 295 300 Met Thr Phe Glu Thr Ser Arg He Gly Lys Lys Val Xle Asn Phe ßlu 305 310 315 320 Asn Val Ser Phe Ser Tyr Pro Asp Lys Ser Xle Leu Lys Asp Phe Asn 325 330 335 Leu Leu Xle Gln Asn Lys ?sp ?rg Xle Gly He Val Gly ?sp ?sn Gly 340 345 350 Val Gly Lys Ser Thr Leu Leu ?sn Leu Xle Val Gln ?ßp Leu Gln Pro 355 360 365 ?sp Ser Gly ?sn Val Ser He Gly Glu Thr He ?rg Val Gly Tyr Phe 370 375 380 Ser Gln Gln Leu His Asn Met Asp Gly Ser Lys Arg Val He Asn Tyr 385 ~ 390 395 400 Leu Gln Glu Val ?la ?sp Glu Val Lyß Thr Ser Val Gly Thr Thr Ser 405 410 41S Val Thr Glu Leu Leu Glu ßln Phe Leu Phe Pro ?rg Ser Thr His ßly 420 425 430 23/63 Thr Gln lie Ala Lys Leu Ser Gly Gly Glu Lys Lys Arg Leu Tyr Leu 43S 440 445 Leu Lys He Leu He Glu Lys Pro Asn Val Leu Leu Leu Asp Glu Pro 450 455 460 Thr Asn Asp Leu Asp He Ala Thr Leu Thr Val Leu Glu Asn Phe Leu 465 470 475 480 Gln Gly Phe Gly Gly Pro Val He Thr Val Ser His Asp Arg Tyr Phe 485 490 495 Leu Asp Lys Val Ala ?sn Lys He He Ala Phe Glu Asp ?sn ?sp Xle 500 SOS 510 Arg Glu Phe Phe Gly Asn Tyr Thr ?sp Tyr Leu Asp Glu Lys Ala Phe SIS 520 525 Asn Glu Gln Asn Asn Glu Val Xle Ser Lys Lys Glu Ser Thr Lys Thr 530 535 540 Ser Arg Glu Lys Gln Ser Arg Lys Arg Met Ser Tyr Phe Glu Lys Gln 545 550 555 560 Glu Trp Ala Thr He Glu Asp Asp He Met He Leu Glu Asn Thr He 565 570 575 Thr Arg Xle Glu Asn Asp Met ßln Thr Cys Gly Ser ?sp Phe Thr ?rg 580 585 590 Leu Ser ?sp Leu Gln Lys Glu Leu Asp Ala Lys Asn Glu ?la Leu Leu 595 600 605 Glu Lys Tyr Asp Arg Tyr Glu Tyr Leu Ser Glu Leu ?sp Thr 610 615 620 <210> 10 e211> 157 <212> PRT e2i3> Estreptococo <400> 10 Met lie He ?rg Pro Xle Xle Lys ?sn Asp Asp Gln ?la Val Ala Gln 1 5 10 ÍS Leu He Arg Gln Ser Leu Arg Ala Tyr Asp Leu Asp Lys Pro Asp Thr 25 30 Ala Tyr Ser Asp Pro His Leu Asp His Leu Thr Ser Tyr Tyr Glu Lys 40 45 He Glu Lys Ser Gly Phe Phe Val He Glu Glu Arg ?sp Glu He Xle 50 55 60 Gly Cys Gly Gly Phe Gly Pro Leu Lys ?sn Leu He ?la Glu Met Gln 65 70 7S 80 Lys Val Tyr He ?la ßlu ?rg Phe ?rg ßly Lys ßly Leu ?la Thr Asp 85 90 95 Leu Val Lys Met He Glu Val Glu ?la Arg Lys Xle Gly Tyr Arg Gln 100 105 110 Leu Tyr Leu Glu Thr ?la Ser Thr Leu Ser ?rg ?la Thr Ala Val Tyr US 120 125 Lys His Met Gly Tyr Cys Ala Leu Ser Gln Pro He Ala ?sn ?sp Gln 130 135 140 Gly His Thr ?la Met Asp He Trp Met Xle Lys Asp Leu 145 150 1S5 <210» 11 <2ll> 579 <212> PRT <213> Estreptococo 24/63 <400> 11 Met ?la Tyr He Trp Ser Tyr Leu Lys Arg Tyr Pro Asn Trp Leu Trp 1 5 10 15 Leu Asp Leu Leu Gly Ala Met Leu Phe Val Thr Val He Leu Gly Met 25 30 Pro Thr ?la Leu ?la Gly Met He Asp Asn Gly Val Thr Lys Gly Asp 40 45 ?rg Thr Gly Val Tyr Leu Trp Thr Phe He Met Phe ?le Phe Val Val 50 55 60 Leu Gly He He Gly ?rg He Thr Met ?la Tyr ?la Ser Ser Arg Leu 65 70 75 80 Thr Thr Thr Met Xle Arg ?ep Met Arg Asn ?sp Met Tyr ?la Lys Leu 85 90 95 ßln Glu Tyr Ser Kis Kis Glu Tyr ßlu ßln He ßly Val Ser Ser Leu 100 • 105 110 Val Thr ?rg Met Thr Ser ?sp Thr Phe Val Leu Met ßln Phe Ala Glu 115 120 125 Met Ser Leu Arg Leu Gly Leu Val Thr Pro Met Val Met Xle Phe Ser 130 135 140 Val Val Met Xle Leu He Thr Ser Pro Ser Leu Ala Trp Leu Val Ala 145 150 155 160 Val Ala Met Pro Leu Leu Val Gly Val Val Leu Tyr Val ?la He Lys 165 170 175 Thr Lys Pro Leu Ser Glu ?rg Gln Gln Thr Met Leu Asp Lys He Asn 180 185 190 Gln Tyr Val Arg Glu Asn Leu Thr Gly Leu Arg Val Val ?rg ?la Phe 195 200 205 ?la ?rg Glu Asn Phe Gln Ser Gln Lys Phe Gln Val Ala Asn Gln Arg 210 215 220 Tyr Thr Asp Thr Ser Thr Gly Leu Phe Lys Leu Thr Gly Leu Thr Glu 225 230 235 240 Pro Leu Phe Val Gln Xle He Xle Ala Met Xle Val ?la Zle Val Trp 245 250 255 Phe ?la Leu Asp Pro Leu ßln Arg Gly Ala He Lys He ßly Asp Leu 260 265 270 Val Ala Phe He ßlu Tyr Ser Phe Bis Ala Leu Phe Ser Phe Leu Leu 275 280 285 Phe Ala ?sn Leu Pbe Thr Met Tyr Pro ?rg Met Val Val Ser Ser His 290 295 300 ?rg He ?rg ßlu Val Met ?sp Met Pro He Ser He ?sn Pro ?sn ?la 305 310 315 320 Glu Cly Val Thr ?sp Tbr Lys Leu Lys Oly His Leu ßlu Phe Asp Aßn 325 330 335 Val Thr Phe Ala Tyr Pro ßly ßlu Thr ßlu Ser Pro Vas Leu Bis Asp 340 345 350 Xle Ser Phe Lys Ala Lys Pro ßly Glu Tbr He ?la Phe Zle ßly Ser 355 360 365 Thr Gly Ser Gly Lys Ser Ser Leu Val Asn Leu He Pro ?rg Phe Tyr 370 375 380 ?sp Val Thr Leu ßly Lys He Leu Val ?sp ßly Val ?sp Val ?rg ?sp 385 390 395 400 Tyr ?en Leu Lys Ser Leu ?rg ßln Lys Xle ßly Phe He Pro Gln Lys 405 410 415 ?la Leu Leu Phe Tbr ßly Thr Zle ßly ßlu ?sn Leu Lyß Tyr ßly Lys 420 42S 430 25 /63 Ala Asp Ala Thr He Asp Asp Leu ?rg ßln ?la Val Asp He Ser Gln 435 440 445 Ala Lys Glu Phe He Glu Ser His ßln ßlu ?la Phe Glu Thr His Leu 450 4S5 460 Ala Glu Gly Gly Ser Asn Leu Ser Gly ßly Gln Lys Gln ?rg Leu Ser 465 470 475 480 Xle Ala Arg Ala Val Val Lys Asp Pro ?sp Leu Tyr He Phe Asp ?sp 485 490 495 Ser Phe Ser Ala Leu Asp Tyr Lys Thr ?sp ?la Thr Leu Arg ?la ?rg 500 505 510 Leu Lys Glu Val Thr Gly Asp Ser Thr Val Leu He Val Ala Gln Arg 515 520 525 Val Gly Thr He Met Asp ?la ?sp Gln He Xle Val Leu ?sp Glu Gly 530 53S 540 Glu He Val Gly Arg Gly Thr His ?la Gln Leu He Glu ?sn ?sn ?la 545 550 555 560 He Tyr Arg Glu He ?la Glu Ser Gln Leu Lys Asn Gln Asn Leu Ser 565 570 575 Glu Gly Glu «210> 12 211> 92 <212> PRT «213> Estreptococo <400> 12 Met Arg Lys Lys Ser Val Phe Leu Arg Leu Trp Ser Tyr Leu Thr ?rg 1 5 10 15 Tyr Lys Ala Thr Leu Phe Leu Ala Xle Phe Leu Lys Val Leu Ser Ser 25 30 Phe Met Ser Val Leu Glu Pro Phe He Leu Gly Leu Ala He Thr ßlu 40 45 Leu Thr Ala Asn Leu val Asp Met Ala Lys Gly Val Ser Gly Ala Glu 50 5S 60 Leu Asn Val Pro Tyr He Ala Gly He Leu He He Tyr Phe Phe Arg 65 70 75 80 Gly Val Phe Tyr Glu Leu Gly Ser Tyr Gly Ser Asn 85 90 <210> 13 <211> 521S «212> ADN <213> Estreptococo «220> <221> CDS «222> <3>... (122) <221> CDS «222> (133 .. (2511) <221> CDS <222> (367) ... (2511) «221> CDS 26/63 <222> (2946) . . . (2716) «223 > de filamento complementario <221> CDS <222> (3252 ) . . . (2995) «223 > de filamento complementario «221> CDS «222» (3676) . . . (3299) «223 > de filamento complementario <221> CDS <222> (4124) ...(3837) <223> de filamento complementario «221> CDS «222> (5214) . . . (4351) «223 > de filamento complementario «400> 13 aa eee gga age gee cea eca acá gee gaa gca aag gag aee aee age 47 Pbe Cly Se ?la Leu Ser Tbr Val ßlu Val Lyß ßlu Zle Zle Ser 1 5 10 15 gaa gaa aac aea cgg cta tac cgg ccc agt cgc t?c cae cec aec age 95 ßlu ßlu ?sn He Trp Leu Tyr ?rg Leu Ser Cys Cys His Pbe Tbr Ser 20 25 30 eac cea cae egg aag cea eca aee egg taagcateat aeg gge cea gea 144 Tyr Ser Tyr Trp Lys Leu Pro Tbr Trp Mee ßly Leu ?la 35 40 acá aag gac aac cag acc gcc tac ace gac gac age aaa ggc aag gea 192 Thr Lys ?sp ?sn ßln He ?la Tyr Zle ?sp ?sp Ser Lys ßly Lys ?la 45 50 55 60 aaa gcc cee aaa acá aac aaa acg atg gat caá ate agt gct gaa gaa 240 Lys ?la Pro Lys Tbr ?sn Lyß Thr Mee ?sp ßln Zle Ser ?la ßlu ßlu 65 70 75 gge aec CcC gee gaa cag acc gea gee aaa acc ace gac eaa ggc tat 288 Gly Zle Ser ?la ßlu ßln Xle Val Val Lys Xle Thr ?sp ßln ßly Tyr 80 85 90 gtg ace tea cae ggt gac cat tat cat ttt tac aat ggg aaa gtt cce 336 Val Thr Ser Kis ßly ?sp Bis Tyr His Pbe Tyr ?sn ßly Lyß Val Pro 95 100 105 cae gac geg att ate age gaa gag etg tcg acg aeg gae cec aac cae 384 Tyr ?ßp ?la He He Ser ßlu ßlu Leu Leu Mee Thr ?sp Pro ?sn Tyr 110 . US 120 ege eee aaa eaa cea gac gec aec aae gaa acc cea gae gge eac gee 432 ?rg Phe Lys ?ln Ser ?sp Val He ?ßn ßlu Zle Leu ?sp ßly Tyr Val 125 130 135 140 27/63 att aaa gtc aat ggc aac tat tat gtt tac etc aag cea ggt agt aag 480 ?le Lys Val Asn Gly ?sn Tyr Tyr Val Tyr Leu Lys Pro Gly Ser Lys 145 150 155 cgc aaa aac att cga acc aaa caá caá att gct gag caá gta gcc aaa 528 Arg Lys Asn He Arg Thr Lys Gln Gln Xle Ala Glu Gln Val Ala Lys 160 165 170 gga acc aaa gaa gee aaa gaa aaa ggc eta gcc caá gcg gcc cae ccc 576 Gly Thr Lys Glu Ala Lys Glu Lys Gly Leu ?la Gln Val ?la His Leu 175 180 185 age aaa gaa gaa gee gcg gca gcc aat gaa gca aaa aga eaa gga ege 624 Ser Lys Glu Glu Val ?la Ala Val Asn Glu Ala Lys Arg Gln Gly Arg 190 195 200 cae ace acá gac gae ggc cae acc ccc age ccg acá gac ate ate gac 672 Tyr Thr Thr Asp Asp Gly Tyr He Phe Ser Pro Thr Asp He lie Asp 205 210 215 220 gac tta gga gat gct tat tta gta ect cat ggt aat cae tat cat tat 720 Asp Leu Gly Asp Ala Tyr Leu Val Pro His Gly Asn His Tyr His Tyr 225 230 235 ate ccc aaa aag gat tcg tcc cea agt gag cta gct gct gca ca gcc 768 He Pro Lys Lys Asp Leu Ser Pro Ser Glu Leu ?la ?la Ala Gln Ala 240 245 250 tac tgg age caá aaa ca ggc cga ggc gcc aga ccg ecc gae tac cgc 816 Tyr Trp Ser Gln Lys Gln Gly Arg Gly Ala ?rg Pro Ser ?sp Tyr Arg 255 260 265 ccg ac cea gcc cea ggt ege agg aaa gcc cea att ect gat gtg acg 864 Pro Thr Pro Ala Pro Gly Arg Arg Lys Ala Pro He Pro Asp Val Thr 270 275 280 ect aac ccc gga caá ggt cat cag cea gat aae ggc ggc tat cat eca 912 Pro Asn Pro Gly Gln Gly His Gln Pro ?sp ?sn ßly ßly Tyr His Pro 285 290 295 300 gcg ect ccc agg cea aat gat gcg tea caá aac aaa cae caá aga gat 960 ?la Pro Pro ?rg Pro ?sn ?sp ?la Ser ßln ?sn Lys His Gln ?rg Asp 305 310 315 gag ttt aaa gga aaa acc ttt aag gaa ctt tta gat caá cea cae cgt 1008 Glu Phe Lys Gly Lys Thr Phe Lys Glu Leu Leu Asp Gln Leu His Arg 320 325 330 ctt gat ttg aaa tac cgt cat gtg gaa gaa gat ggg teg ace eee gaa 1056 Leu Asp Leu Lys Tyr Arg Bis Val Glu Glu Asp Gly Leu He Phe Glu 335 340 345 ccg act caá gtg ate aaa tea aac gct ttt ggg tat gtg gtg ect eat 1104 Pro Thr Gln Val He Lys Ser Asn ?la Phe Gly Tyr Val Val Pro His 3S0 355 360 28/63 gga gac cae eae cae ace aec cea aga age cag eca tea ect ccc gaa 1152 G?y Asp His Tyr His He He Pro Arg Ser Gln Leu Ser Pro Leu Glu 3óS 370 375 380 acg gaa cea gca gac cga cae cea gcc ggc caá acc gag gac aat gac 1200 Met Clu Leu Ala Asp Arg Tyr Leu Ala Gly Gln Thr Glu Asp Asn Asp 385 390 395 tea ggt cea gag cae cea aaa cea Cea gac aaa gaa gcg acá cae aec 1248 Ser Gly Ser Glu His Ser Lys Pro Ser Asp Lys Glu Val Thr His Thr 400 405 410 tet cte ggc cae cgc ate aaa gct tac gga aaa ggc tta gat ggt aaa 1296 Phe Leu Gly His Arg He Lys Ala Tyr Gly Lys Gly Leu Asp Gly Lys 415 420 425 cea eac gat acg age gae gee cat gtt ttt age aaa gaa Ccc ate cae 1344 Pro Tyr Asp Thr Ser Asp Ala Tyr Val Phe Ser Lys Glu Ser He His •!30 435 440 cea gcg gac aaa cea gga gtt acá gct aaa cae gga gat cat ttc cae 1392 Ser Val Asp Lys Ser Gly Val Thr Ala Lys His Gly Asp His Phe His 445 450 455 460 tac acá gga cec gga gaa ccc gaa caá tat gag tcg gat gag gtc gct 1440 Tyr He Gly Phe Gly Glu Leu Glu Gln Tyr Glu Leu Asp Glu Val Ala 465 470 475 aac cgg gcg aaa gca aaa gge caá gcc gac gag etc gcc gee gcc ccg 1488 Asn Trp Val Lys Ala Lys Gly Gln Ala Asp Glu Leu Ala Ala Ala Leu 480 485 490 gac cag gaa caá ggc aaa gaa aaa cea ccc ttt gac acc aaa aaa gtg 1536 Asp Gln Glu Gln Gly Lys Glu Lys Pro Leu Phe Asp Thr Lys Lys Val 495 500 505 age cgc aaa gta acá aaa gat ggt aaa gtg ggc cat atg atg cea aaa 1584 Ser Arg Lys Val Thr Lys Asp Gly Lys Val Gly Tyr Met Met Pro Lys 510 SIS 520 gat ggt aag gac tat ttc tat gct cgt gat caá ctt gat ttg act cag 1632 ?sp Gly Lys Asp Tyr Phe Tyr Ala ?rg ?sp Gln Leu ?sp Leu Thr ßln S25 530 535 540 ate gcc ttt gcc gaa caá gaa cta atg ctt aaa gat aag aag cae tac 1680 He ?la Phe ?la Glu Gln Glu Leu Met Leu Lys ?sp Lys Lys His Tyr 545 550 555 cgt tat gac aec gec gac acá gge att gag cea cga ctt gct gta gat 1728 Arg Tyr Asp He val Asp Thr Gly He Glu Pro Arg Leu Ala Val Asp 560 - 565 570 gtg tea agt ctg ccg acg cae gcc ggt aat gct act tac gat act gga 1776 val ser Ser Leu Pro Met His ?la Gly ?sn ?la Thr Tyr ?sp Thr Gly 575 580 585 29/63 agt ccg cec gcc acc cea cae att gat cat ate cat gtc gtt ccg tac 1824 Ser Ser Pbe al He Pro His He Asp His He His Val Val Pro Tyr 590 595 600 cea cgg ccg acg cgc gac cag ace gca acá gtc aag tat gtg atg caá 1872 Ser Trp Leu Thr Arg Asp Gln He Ala Thr Val Lys Tyr Val Met Gln 605 610 615 620 cae ecc gaa gtt cgt ccg gat gta tgg tet aag cea ggg cat gaa gag 1920 His Pro Glu Val Arg Pro Asp Val Trp Ser Lys Pro Gly Kis Glu Glu 625 630 635 tea ggt tcg gtc att cea aat gec acg ccc cec gat aaa cgt gct ggt 1968 Ser Gly Ser Val He Pro Asn Val Thr Pro Leu ?sp Lys ?rg ?la Gly 640 64S 650 atg cea aac tgg caá att ate cat ect gct gaa gaa gtt caá aaa gcc 2016 Met Pro Asn Trp Gln He He His Ser Ala Glu Glu Val Gln Lys Ala 655 660 665 cta gca gaa ggt cgt ttt gca acá cea gac ggc tat att ttc gat cea 2064 Leu Ala Glu siy Arg Phe Ala Thr Pro Asp Gly Tyr He Phe Asp Pro 670 675 " 680 cga gac gcc ctg gcc aaa gaa act ttt gta tgg aaa gat ggc tcc ttt 2112 Arg ?sp Val Leu Ala Lys Glu Thr Phe Val Trp Lys Asp Gly Ser Phe 685 690 695 700 age ate cea aga gca gac gge age tea tcg aga acc att aat aaa tet 2160 Ser He Pro Arg Ala Asp Gly Ser Ser Leu Arg Thr He Asn Lys Ser 705 710 715 gat cta tcc ca gct gag tgg caá caá gct caá gag tta ttg gca aag 2208 Asp Leu Ser Gln ?la Glu Trp Gln Gln Ala Gln Glu Leu Leu Ala Lys 720 725 730 aaa aac acc gge gae gee acc gac acg gac aaa ccc aaa gaa aag caá 2256 Lys Asn Thr Gly ?sp Ala Thr Asp Thr Asp Lys Pro Lys Glu Lys Gln 735 740 745 cag gca gac aag age aae gaa aac caá cag cea age gaa gcc age aaa 2304 Gln Ala ?sp Lys Ser Asn ßlu Asn Gln Gln Pro Ser Glu Ala Ser Lys 7S0 755 760 gaa gaa aaa gaa eca gac gac eec aea gac age cea cea gac eae ggc 2352 Glu Glu Lys Glu Ser Asp Asp Phe He Asp Ser Leu Pro Asp Tyr Gly 765 770 775 780 cea gac aga gca acc cea gaa gac cae ate aat caá tta gca caá aaa 2400 Leu Asp ?rg ?la Thr Leu Glu Asp Hiß He Asn Gln Leu Ala ßln Lys 785 790 795 gct aat ate gat ect aag tat etc att ttc caá cea gaa ggt gtc caá 2448 Ala Asn He Asp Pro Lys Tyr Leu He Phe Gln Pro Glu Gly Val Gln 800 805 810 30/63 ttt tat aat aaa aat ggt gaa ttg gta act tat gat ate aag acá ctt 2496 Phe Tyr Asn Lys Asn Gly Glu Leu Val Thr Tyr Asp He Lys Thr Leu 81S 820 825 caá caá ata aac ect caaccaaaag aagatetcae tgttaaagca ct?ctttgtc 2551 Gln Gln He ?sn Pro 830 aaagcaagtt acggtgattt tgaagtcatt ccatgtaacg agtagtgata aaageeggae 2611 aacagcggee CCcecccgca aagaaaeggc acceaegeea gaacageaaa aaaagaggag 2671 gaceceegga ccaatgteaa ataagtagac agaaaaetgt gttattttattgcgt 2726 taaaataatt ttettettec cgaeeagggg eeagccccag accagccgca cgegggeegc 2786 aaecgteaea aaaaeectca atgtattcaa agcagtctaa ttgaacctgt ttgatatttt 2846 gataatgttt tcggttgacc Cgcctatgct ccaaacactc gaaaaacgct tcagttacgg 2906 cactatcata aggatatcca ggaccagaaa aagaacgcac ?atattggca ctgcacccta 2966 atagtgagac gcaagaaaaa cacttttaggcaatcagtt ccctgtaetg tacaggcgac 3025 tggtcgttta acceccgecg aaececaget tcactataaa atgtaatgta atttttaaca 3085 acaccegtta tactatetet gttgtatttt etectattat ggaaataaaa ggtttcagtc 3145 ettaggacgg tgtgaaacca ttcaatacag gcattatctg caggtgttcc ttttcgagac 3205 actgagcgga taatgtcttt ttccgcgcaa gcctggtagt aagceataga agtatacact 3265 gagccecgge cactgtgtaa gaccgceecc ttatteaggcaatt eeaactgatt 3319 aagggtgtct ageacaaaac ccgtgtcctg acaaecegag acagcgcaag ctacaacecc 3379 ecggecacag agaeccataa ttgatgagag atacaattta cagttacega aacataggta 3439 ggcaacaccc gceacgagcc tttccttagg cttateggca t?gaaatccc gactcaattt 3499 attatctgtt aaataataag ctttacccaa attgggaact ttcctggtac gcgcccgaca 3559 aagccagcca ccaettttca tgataegata gactttctee gcaceaacag Ccaatccgtg 3619 gaececeecg agcaategtg taatggtacg atagecataa ataaagtgat tetecataea 3679 gagccgeeca aecaaeecaa eaaggecaec Ctcctttgcg getecteata ccccttcctc 3739 caacggcaae aggeegaccg eetgacccea aaacagceea gaaegaaaae caccgggcag 3799 tcgceeeeat agccecccac aagecegaca agacceaeeeeatcgatt cccttatcaa 3857 gccccgatac ttteecaaga ggecaaeccg eaaecgeaac tgttccaect cagacagatg 3917 ttccaagcet ttaccgtagg tatattgctt gccaacacct tgatgaaaac gataaagetc 3977 ctcgceeecg taccatttea eccaageaea gatttgaeca ttatttttga cgeccaaage 4037 etecataata accctgttag acttgcctgc tttetteata ecgatgcaag ecagettagt 4097 cccecatgaa tatgectttt caaccaeaae aaaacaeccc tgtttctagt ttactaaatt 4157 ccaacaggag tgcteeccce ccgccccacc eeagggacec agtgectatt gtcgtcatca 4217 attatttttc taaattcccc ggacttaaat tgtgaccctt ggccggaacg aaagagaagt 4277 gctccttcaa tctttcttcc accaagcgaa aaggcaacac ccccccgeac aacaeccaea 4337 aagegetttt ctaggcaatcaaec eeeeagecae tggtgeecgg eageegagac 4391 caccacgaac gcggeggeaa eeccaccaae gaacatagec ceeageccca agagetagtt 44S1 cecceagcaa eegaaaggec ccctgataaa caaattcaae ceegaaagea egataegcac 4511 ttteagetac ggeattgeca taaggataac eagcctgact aagcgaacgt gegaeeccaa 4571 aggeetceaa eaececaeea attaactgat caeeaaacee etcgeeacga ecegaaegga 4631 acacceegac cttggtcagg gcgeaaggga egcecegcae ggecegetta acgagttcag 4691 cggcccegtg ccaaecaaga gaeaggcega tgattccacg gtcgtatagg tcaatgatga 4751 ggcaaacata agcccaacga ttgeetacae gaacatagge taagtcagtg accaaggcct 4811 geagcggccc tccttgctca aactgcctgt ctaagtggtt gggaataggg gcttcattct 4871 tgectetaga atgtggtttg aaggtggctt tctgataaac agaaaecaaa ttgagtcgct 4931 ecataatgeg tegaatcega cgacgtgaaa gtgtgatacc ttcgttattc aagcatattt 4991 tgatttttct ggatccgtat ctagactcgc tategagaaa aattctttta atageeeeee 5051 caaaccecgc eccagacace gactccacgg ettgatagta ataacecgag tgtggcacac 5111 ccagccagcg acacatettt gaaatgctgt atttatcett attagcagtg aceaeeeccc 5171 ttttegtgcc ataatcaceg ctgccegect caggacaccc aace S215 <210> 14 <211> 40 «212> PRT 31 /63 «2i3> Estreptococo <400> 14 Phe Gly Ser Ala Leu Ser Thr Val Glu Val Lys Glu He He Ser Glu 1 5 10 15 Glu Asn He Trp Leu Tyr Arg Leu Ser Cys Cys His Phe Thr Ser Tyr 25 30 Ser Tyr Trp Lys Leu Pro Thr Trp 35 40 «210> 15 <211> 793 <212> PRT <213> Estreptococo <400> 15 Mee Gly Leu Ala Thr Lys Asp Asn Gln He Ala Tyr Xle Asp Asp Ser 1 5 10 15 Lys Gly Lys Ala Lys Ala Pro Lys Thr Asn Lys Thr Mee Asp Gln Xle 25 30 Ser Ala Glu Glu Gly Xle Ser Ala Glu Gln He Val Val Lys Xle Thr 40 45 Asp Gln Gly Tyr Val Thr Ser His Gly Asp His Tyr His Phe Tyr Asn 50 55 60 Gly Lys Val Pro Tyr Asp Ala He He Ser Glu Glu Leu Leu Met Thr 65 70 75 80 Asp Pro Asn Tyr Arg Phe Lys ßln Ser Asp Val Xle Asn Glu He Leu 85 90 95 Asp Gly Tyr Val He Lys Val Asn Gly ?sn Tyr Tyr Val Tyr Leu Lys 100 105 110 Pro Gly Ser Lys ?rg Lys Asn He Arg Thr Lys Gln ßln He Ala ßlu 115 120 125 ßln Val Ala Lys Gly Thr Lys Glu ?la Lys Glu Lys Gly Leu ?la Gln 130 135 140 Val ?la His Leu Ser Lys Glu Glu Val ?la ?la Val ?sn Glu ?la Lys 145 150 1SS 160 ?rg Gln Gly Arg Tyr Thr Thr Asp Asp Gly Tyr He Phe Ser Pro Thr 165 " 170 175 Asp Xle He ?sp Asp Leu Gly Asp Ala Tyr Leu Val Pro His Gly Asn 180 185 190 His Tyr Kis Tyr He Pro Lys Lys Asp Leu Ser Pro Ser ßlu Leu ?la 19S 200 205 ?la ?la Gln ?la Tyr Trp ser ßln Lys ßln ßly ?rg ßly ?la ?rg Pro 210 215 220 Ser ?sp Tyr Arg Pro Thr Pro Ala Pro Gly Arg ?rg Lys ?la Pro He 225 230 235 240 Pro Asp Val Thr Pro Asn Pro Gly Gln Gly Hiß ßln Pro Asp Asn ßly 245 250 255 Gly Tyr Kis Pro Ala Pro Pro Arg Pro Asn Asp Ala Ser Gln Asn Lys 260 265 270 Kis Gln Arg Asp Glu Phe Lys Gly Lys Thr Phe Lys ßlu Leu Leu Asp 275 280 285 Gln Leu His Arg Leu ?sp Leu Lys Tyr ?rg His Val Glu ßlu ?sp ßly 290 295 300 Leu Xle Phe Glu Pro Thr ßln Val He Lys Ser ?sn ?la Phe ßly Tyr 305 310 315 320 32/63 Val Val Pro His Gly Asp His Tyr His He He Pro Arg Ser Gln Leu 325 330 335 Ser Pro Leu Glu Met Glu Leu Ala Asp Arg Tyr Leu Ala Gly Gln Thr 340 345 350 Glu ?sp Asn Asp Ser Gly Ser Glu His Ser Lys Pro Ser Asp Lys Glu 355 360 365 Val Thr His Thr Phe Leu Gly His Arg He Lys ?la Tyr Gly Lys Gly 370 375 380 Leu ?sp Gly Lys Pro Tyr ?sp Thr Ser Asp Ala Tyr Val Phe Ser Lys 385 390 395 400 Glu Ser He His Ser val Asp Lys Ser Gly Val Thr Ala Lys His Gly 405 410 415 Asp His Phe His Tyr He Gly Phe Gly Glu Leu Glu Gln Tyr Glu Leu 420 425 430 Asp Glu Val Ala Asn Trp Val Lys Ala Lys Gly Gln Ala Asp Glu Leu 435 440 445 Ala Ala Ala Leu Asp Gln Glu Gln Gly Lys Glu Lys Pro Leu Phe Asp 450 4S5 460 Thr Lys Lys Val Ser Arg Lys Val Thr Lys ?sp Gly Lys Val Gly Tyr 465 470 475 480 Met Met Pro Lys Asp Gly Lys Asp Tyr Phe Tyr Ala Arg Asp Gln Leu 485 490 495 Asp Leu Thr Gln He Ala Phe Ala Glu Gln Glu Leu Met Leu Lys Asp 500 SOS 510 Lys Lys His Tyr Arg Tyr Asp Xle Val Asp Thr Gly He Glu Pro Arg 515 520 525 Leu Ala Val Asp Val Ser Ser Leu Pro Met His Ala Gly ?sn ?la Thr 530 535 540 Tyr Asp Thr Gly Ser Ser Phe Val He Pro His lie Asp His He His 545 550 555 560 Val Val Pro Tyr Ser Trp Leu Thr Arg Asp Gln He Ala Thr Val Lys 565 570 575 Tyr Val Met Gln His Pro Glu Val Arg Pro Asp Val Trp Ser Lys Pro 580 585 590 Gly His Glu Glu Ser Gly Ser Val He Pro Asn Val Thr Pro Leu ?sp 595 600 605 Lys ?rg Ala Gly Mee Pro ?sn Trp Gln He Xle His Ser ?la Glu Glu 610 615 620 Val Gln Lys Ala Leu Ala Glu Gly Arg Phe Ala Thr Pro Asp Gly Tyr 625 630 635 640 He Phe Asp Pro Arg ?sp Val Leu Ala Lys Glu Thr Phe Val Trp Lys 645 650 655 Asp Gly Ser Phe Ser Xle Pro Arg ?la Asp Gly Ser Ser Leu ?rg Tbr 660 665 670 He ?sn Lys Ser ?sp Leu Ser Gln Ala ßlu Trp ßln ßln Ala Gln ßlu 675 680 685 Leu Leu Ala Lys Lys Asn Thr ßly Asp Ala Thr ?sp Thr ?sp Lys Pro 690 695 700 Lys Glu Lys Gln Gln ?la Asp Lys Ser Asn ßlu Asn Gln Gln Pro Ser 705 710 715 720 Glu Ala Ser Lys Glu Glu Lys Glu Ser Asp Asp Phe He ?sp Ser Leu 725 730 735 Pro Asp Tyr Gly Leu Asp ?rg ?la Thr Leu Glu ?sp His Xle Asn Gln 74-0 745 750 Leu ?la Gln Lys ?la ?sn Xle Asp Pro Lys Tyr Leu Xle Phe Gln Pro 755 760 * 765 33/63 ßlu ßly Val Gln Phe Tyr ?sn Lys ?sn Gly ßlu Leu Val Thr Tyr ?sp 770 775 780 ?le Lys Thr Leu ßln ßln He ?sn Pro 785 790 <210> 16 <211> 715 «212> PRT <213> Estreptococo <400> 16 Met Thr ?sp Pro ?sn Tyr ?rg Phe Lys Gln Ser ?sp Val He ?sn Glu 1 S 10 15 He Leu ?sp Gly Tyr Val He Lys Val ?sn Gly Asn Tyr Tyr Val Tyr 25 30 Leu Lys Pro Gly Ser Lys Arg Lys Asn He Arg Thr Lys Gln Gln Xle 40 4S Ala Glu ßln Val Ala Lys Gly Thr Lys Glu Ala Lys Glu Lys Gly Leu 50 55 60 Ala Gln Val Ala His Leu Ser Lys Glu Glu Val Ala ?la Val ?sn Glu 65 70 75 80 ?la Lys Arg Gln Gly Arg Tyr Thr Thr Asp ?sp Gly Tyr He Phe Ser 85 90 95 Pro Thr Asp He He Asp ?sp Leu Gly ?sp ?la Tyr Leu Val Pro His 100 105 110 Gly ?sn His Tyr His Tyr He Pro Lys Lys ?sp Leu Ser Pro Ser Glu 115 120 125 Leu ?la ?la Ala Gln Ala Tyr Trp Ser Gln Lys Gln Gly ?rg Gly ?la 130 135 140 Arg Pro Ser Asp Tyr Arg Pro Thr Pro Ala Pro Gly ?rg ?rg Lys ?la 145 150 155 160 Pro He Pro Asp Val Thr Pro Asn Pro Gly Gln Gly His ßln Pro ?sp 165 170 175 ?sn ßly ßly Tyr His Pro ?la Pro Pro ?rg Pro ?sn ?sp ?la Ser ßln 180 185 190 ?sn Lys His Gln ?rg Asp Glu Phe Lys Gly Lys Thr Phe Lys ßlu Leu 195 200 205 Leu Asp Gln Leu His Arg Leu Asp Leu Lys Tyr Arg His Val Glu Glu 210 215 220 Asp Gly Leu He Pbe Glu Pro Thr Gln Val Xle Lys Ser ?sn ?la Phe 225 230 235 240 ßly Tyr Val Val Pro His ßly Asp His Tyr Hiß He He Pro ?rg Ser 245 250 255 ßln Leu Ser Pro Leu ßlu Met Glu Leu ?la ?sp ?rg Tyr Leu ?la Gly 260 265 270 Gln Thr Glu ?sp ?sn ?sp Ser Gly Ser Glu His Ser Lys Pro Ser ?sp 275 280 285 Lys Glu Val Thr His Thr Phe Leu ßly His ?rg He Lys ?la Tyr ßly 290 295 300 Lys Gly Leu ?sp ßly Lys Pro Tyr ?sp Thr Ser ?sp ?la Tyr Val Phe 30S - 310 315 320 ser Lys ßlu ser He His Ser Val ?sp Lys Ser Gly val Thr ?la Lys 325 330 335 His Gly ?sp His Pbe His Tyr Xle ßly Phe ßly ßlu Leu ßlu ßln Tyr 340 345 350 34/63 Glu Leu Asp Glu Val Ala Asn Trp Val Lys Ala Lys Gly ßln ?la ?sp 355 360 365 Glu Leu ?la ?la Ala Leu Asp Gln Glu Gln Gly Lys Glu Lys Pro Leu 370 375 380 Phe Asp Thr Lys Lys Val Ser Arg Lys Val Thr Lys Asp Gly Lys Val 385 390 395 400 Gly Tyr Met Mee Pro Lys Asp Gly Lys Asp Tyr Phe Tyr Ala Arg Asp 405 410 415 Gln Leu Asp Leu Thr Gln Xle Ala Phe Ala Glu Gln Glu Leu Mee Leu 420 425 430 Lys Asp Lys Lys His Tyr Arg Tyr Asp lie Val Asp Thr Gly He Glu 435 440 445 Pro Arg Leu Ala Val Asp Val Ser Ser Leu Pro Mee His Ala Gly Asn 450 455 460 Ala Thr Tyr Asp Thr Gly Ser Ser Phe Val He Pro His He Asp His 465 470 475 480 He His Val Val Pro Tyr Ser Trp Leu Thr Arg Asp Gln He Ala Thr 485 490 49S Val Lys Tyr Val Mee Gln His Pro Glu Val Arg Pro ?sp Val Trp Ser 500 505 510 Lys Pro Gly His Glu Glu Ser Gly Ser Val He Pro Asn Val Thr Pro 515 520 525 Leu Asp Lys Arg Ala Gly Mee Pro Asn Trp Gln He He His Ser Ala 530 535 540 Glu Glu Val Gln Lys Ala Leu ?la Glu Gly ?rg Phe Ala Thr Pro Asp 545 550 555 560 Gly Tyr He Phe Asp Pro Arg Asp Val Leu Ala Lys Glu Thr Phe Val S65 570 575 Trp Lys Asp Gly Ser Phe Ser He Pro Arg Ala Asp Gly Ser Ser Leu 580 585 590 Arg Thr He Asn Lys Ser Asp Leu Ser Gln Ala Glu Trp Gln Gln Ala 595 600 605 Gln Glu Leu Leu Ala Lys Lys Asn Thr Gly Asp Ala Thr Asp Thr Asp 610 615 620 Lys Pro Lys Glu Lys Gln ßln Ala ?sp Lys Ser ?sn ßlu Asn Gln Gln 625 630 635 640 Pro Ser Glu Ala Ser Lys Glu Glu Lys Glu Ser ?sp Asp Phe Xle Asp 645 650 655 Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Leu ?sp ?rg Ala Thr Leu Glu Asp His He 660 665 670 Asn Gln Leu Ala Gln Lys ?la ?sn He ?sp Pro Lys Tyr Leu Xle Phe 675 680 685 G n Pro Glu Gly Val Gln Phe Tyr Asn Lys Asn ßly ßlu Leu Val Thr 690 695 700 Tyr Asp Xle Lys Thr Leu ßln ßln He Asn Pro 705 710 715 <210> 17 <211> 77 <212> PRT «213> Estreptococo <400> 17 Mee Kis Ser Phe Ser Asn Pro ßly Tyr Pro Tyr Asp ?sn ?la Val Thr 1 5 10 15 35/63 Glu Ala Phe Phe Lys Tyr Leu Lys His ?rg Cln ?le ?sn ?rg Lys His 25 30 Tyr Gln ?sn He Lys Gln Val Gln Leu ?sp Cys Phe Glu Tyr He Glu 40 4S Asn Phe Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Hiß Thr Ala Asn Leu Gly Leu Thr SO 55 60 Pro ?sn Gi Lys Glu ßlu ?sn Tyr Phe Asn Ala Xle Lys £5 70 75 --.210> 18 *211> B6 *.212> PRT -2'? ' Estreptococo <400s. 18 Mee Ala Tyr Tyr Gln Ala Cys Thr Glu Lys Asp He He Arg Ser Met 1 5 10 15 Ser Arg Lys Gly Thr Pro Ala ?ep Asn Ala Cyß Xle Glu Trp Phe His 25 30 Thr Val Leu Lys Thr ßlu Thr Phe Tyr Phe His Asn ?rg ?rg Lys Tyr 40 45 Asn Lys Asp Ser Xle Thr ?sn Xle Val Lys ?sn Tyr Xle Thr Phe Tyr SO SS 60 Asn Glu Thr Arg He Gln Gln Arg Leu Asn Asp Gln Ser Pro Val Gln 65 70 75 80 Tyr Arg Lys Leu He Ala 85 «210> 19 <211> 126 «212> PRT «213> Estreptococo «400» 19 Met Glu Asn His Phe He Tyr ßly Tyr ?rg Tbr He Thr ?rg Leu Leu l s 10 15 Lyß Lys Xle His ßly Leu Thr Val ?ßn Thr Lys Lys Val Tyr Arg ?le 25 30 Met Lys Asn ?ßn ßly Trp Leu Cyß ?rg Thr ?rg Thr Lys Lys Val Pro 40 45 ?sn Leu Cly Lys ?la Tyr Tyr Leu Thr ?sp ?sn Lys Leu ser ?rg ?sp 50 55 60 Phe His ?la ?sp Lys Pro Lys ßlu Lys Leu Val Thr ?sp Zle Thr Tyr 65 70 75 80 Leu Tyr Phe ßly ?sn Cys Lys Leu Tyr Leu Ser Ser He Met ?sn Leu 85 90 95 Tyr ?sn ?rg ßlu He He ?la Tyr Thr He Ser Asp Cys ßln Aßp Tbr 100 IOS 110 ?sp Phe Val Leu ?sp Thr Leu Asn ßln Leu Lys Leu Pro Lys US 120 12S <210> 20 <211> 96 <212> PRT «213> Estreptococo 36/63 «400> 20 Met Val Lys Lys Ala Tyr Ser Trp ßlu Thr Lys Leu Ala Cys He Asp 1 5 10 15 Met Lys Lys Ala ßly Lys Ser Asn Arg Val Xle Met Clu Thr Leu Gly 25 30 He Lys Asn ?sn Ser Cln He Tyr Thr Trp Met Lys Trp Tyr Glu ?sn 40 4S Glu Glu Leu Tyr ?rg Phe His Gln Gly Val Gly Lys Gln Tyr Thr Tyr 50 55 60 ßly Lys ßly Leu ßlu Hiß Leu Ser ßlu Val ßlu ßln Leu ßln Leu Gln 65 70 75 80 Val ?sp Leu Leu Lys Lys Tyr Arg Gly Leu He Arg Lys Ser Xle Lys 85 90 95 «210> 21 «211> 288 <212> PRT «213> Estreptococo «400> 21 He ?rg Tyr Pro Lys ?la Ser Ser Gly ?sp Tyr Gly Thr Lys ?rg Glu 1 5 10 15 He He Thr ?la Asn Lys Asp Lys Tyr Ser He Ser Lys Met Cys Arg 25 30 Trp Leu ?sn Met Pro His Ser Ser Tyr Tyr Tyr Cln ?la Val Glu Ser 40 45 Val Ser Glu Thr Glu Phe Glu Glu Thr Xle Lys ?rg Xle Phe Leu Asp 50 55 60 Ser Glu Ser Arg Tyr Gly Ser Arg Lys He Lys He Cys Leu Asn Asn 65 70 75 80 Glu Gly He Thr Leu Ser Arg Arg Arg He ?rg ?rg He Met Lys ?rg 85 90 95 Leu ?sn Leu Val Ser Val Tyr Gln Lys ?la Thr Phe Lys Pro His Ser 100 105 110 Arg Gly Lys ?sn Glu Ala Pro Xle Pro Asn Kis Leu ?sp ?rg Gln Phe 115 120 125 Lys Gln ßlu ?rg Pro Leu Gln Ala Leu Val Thr Asp Leu Thr Tyr Val 130 135 140 Arg Val ßly ?sn ?rg Trp ?la Tyr Val Cys Leu He He ?sp Leu Tyr 145 150 155 160 ?sn ?rg ßlu He He ßly Leu Ser Leu ßly Trp His Lys Thr ?la ßlu 16S 170 175 Leu Val Lys ßln ?la He Gln Ser He Pro Tyr ?la Leu Thr Lys Val 180 185 190 Lys Met Phe His Ser ?sp ?rg Gly Lys ßlu Phe ?sp ?sn ßln Leu Xle 195 200 205 ?sp ßlu He Leu ßlu ?la Phe Gly Xle Thr ?rg Ser Leu Ser Gln ?la 210 215 220 ßly Tyr Pro Tyr ?sp ?sn ?la Val ?la ßlu Ser Thr Tyr ?rg ?la Phe 225 230 235 240 Lys Xle ßlu Phe Val Tyr Gln Glu Thr Phe ßln Leu Leu ßlu Glu Leu 245 250 255 ?la Leu Lys Thr Lys ?sp Tyr Val His Trp Trp ?sn Tyr His ?rg He 260 265 270 His ßly Ser Leu ?sn Tyr ßln Thr Pro Met Thr Lys ?rg Leu He ?la 275 280 285 37/63 «210> 22 «211> 5058 <2i2> ADN «213 > Estreptococo <220> «221> CDS «222» (1)...(663) «221> CDS «222> (763)... 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aaa acc acc eaa ace aag ccc gag aaa ccc aac gga gec gaa aaa gcg 384 Lys Thr Xle Gln Thr Lys Leu ßlu Lys Leu ?sn ßly Val ßlu Lys Val 115 ~ 120 125 ace cec eec gac cac gaa cae aea eca eac eae gca eee aeg gac gae 432 Thr Leu Ser ?ßp His ßlu His Tbr Pro Bis Tyr val Pro Mee ?sp ?ßp 130 135 140 38/63 gaa tta gta tea acc tta cta gct gtc tac gaa aag caá acc ggc cce 480 Glu Leu Val Ser Thr Leu Leu Ala Val Tyr ßlu Lys ßln Thr ßly Leu 145 150 155 160 aaa gga cac gaa cag gcc ace ggc ggt ggg aea eee gge cgc cea ccc 528 Lys ßly His Glu Gln Val He Gly Gly Gly Thr Phe Gly ?rg Leu Leu 165 170 175 gaa cgg ggc gcc gca cac ggc gcc aeg cec cea gga gae gaa aac acc 576 Glu ?rg Gly Val ?la Tyr Gly ?la Mee Phe Pro Gly ?sp Glu ?sn Thr 180 185 190 acg cae caá gee aat gag tac atg ect tta gaa aat att ttc cgt tcg 624 Met His Gln ?la Asn Glu Tyr Met Pro Leu Glu Asn He Phe ?rg Ser 195 200 205 gct gee acc Cac gca gaa gct ate tat gaa tta ate aaa taaaataatc 673 ?la ?la He Tyr ?la Glu ?la He Tyr Glu Leu He Lys 210 215 220 cttaaactaa atatgtgatc aatgataaag ggtggtgaag acatgaaagt gtctttgcct 733 ceeeccacaa ggceagacct ggagacctt atg act gac ttg gaa aaa att att 786 Met Thr ?sp Leu ßlu Lys He Xle 225 aaa gca ata aaa agt ?at tea cag aat caá aat tat acá gaa aat ggt 834 Lys ?la Xle Lys Ser ?sp Ser Gln Asn Gln Asn Tyr Thr Glu Asn Gly 230 235 240 245 att gat ect ttg ttt gct gct ect aaa acá gct agg ate aat att gtt 882 He ?sp Pro Leu Phe ?la ?la Pro Lys Thr ?la ?rg He ?sn Xle Val 250 255 260 ggc caá gca ect ggt tta aaa act caá gaa gca aga etc tat tgg aaa 930 Gly Gln ?la Pro Gly Leu Lys Thr Gln Glu ?la ?rg Leu Tyr Trp Lys 265 270 275 gat aaa tet gga gat cgt cta cgc cag tgg ctt gga gtt gat gaa gag 978 ?sp Lys Ser Gly ?sp ?rg Leu ?rg Gln Trp Leu Gly Val Asp Glu Glu 280 285 290 acá ttt tac cat tet gga aaa ttt gct gee cea cee cea gae ecc cac 1026 Thr Phe Tyr His Ser Gly Lys Phe Ala Val Leu Pro Leu Asp Phe Tyr 295 300 305 Cae cea ggc aaa gga aaa cea gga gae tta ccc ect aga aaa ggt ttt 1074 Tyr Pro Gly Lys Gly Lys Ser Gly Asp Leu Pro Pro ?rg Lys Gly Phe 310 315 320 32S geg gag aaa cgg cac cec ece acc cea aaa gaa aeg cee aac get eaa 1122 ?la ßlu Lys Trp His Pro Leu Xle Leu Lys ßlu Met Pro ?sn Val ßln 330 335 340 ttg acc ttg cta gtt ggt cag tat gct cag aaa tat tat ctt gga age 1170 Leu Tbr Leu Leu Val ßly ßln Tyr Ala ßln Lys Tyr Tyr Leu ßly Ser 34S 350 355 39/63 cce gea cae aaa aat eta acá gaa acá gtt aaa gct tac aaa gac tat 1218 Ser Ala His Lys Asn Leu Thr ßlu Thr Val Lys Ala Tyr Lys ?sp Tyr 360 365 370 cta ccc gat tat tta ccc ctg gtt cac cea tea ccg cga aat caá att 1266 Leu Pro ?ßp Tyr Leu Pro Leu Val Kiß Pro Ser Pro ?rg ?ßn ßln Xle 375 380 385 cgg eca aag aag aat cea tgg tet gaa aaa gat cta ate gtt gat eca 1314 Trp Leu Lys Lys ?sn Pro Trp Phe Glu Lys ?sp Leu Xle Val ?sp Leu 390 395 400 405 caá aag acá gta gca gat att tta aaa gat taaggatagg agttggt atg 1364 Gln Lys He Val ?la ?sp Zle Leu Lys ?ßp Mee 410 415 aga gac aae cae cea cac acg eae ece ecc cae gac ege caá aeg gca 1412 Arg ?sp Asn His Leu His Thr Tyr Phe Ser Tyr Asp Cys Gln Thr ?la 420 42S 430 ecc gag gac cae aec aac ggc cce acá gge gaa CCC aec acg acá gaa 1460 Phe ßlu Asp Tyr Zle Asn ßly Phe Thr ßly ßlu Phe Zle Tbr Thr ßlu 43S 440 44S cae ece gae cea eca aae eec cac acc ggt caá gac gac gcc ece gae 1508 His Phe Asp Leu Ser Asn Pro Tyr Thr ßly ßln Asp Asp Val Pro ?sp 450 455 460 cae age gcc cat tgt caá aaa ata gat tat ett aat eag aaa tat gga 1556 Tyr Ser ?la Tyr Cys ßln Lys He ?sp Tyr Leu ?sn ßln Lys Tyr ßly 465 470 475 480 aat ega ttt aaa aaa ga ate gaa acc ggt cac CCC aaa gac agg gaa 1604 ?sn ?rg Phe Lys Lys ßly He ßlu Xle ßly Tyr Phe Lys ?sp ?rg ßlu 485 490 495 cea gac ace cea gat tat tta aaa aat aaa gaa ttt gat tta aaa eta 1652 Ser ?ßp Xle Leu ?sp Tyr Leu Lyß ?sn Lys ßlu Phe ?sp Leu Lys Leu 500 SOS 510 ttg tea ate cat cat aat ggt agg tat gat tat ceg eaa gaa gaa gee 1700 Leu Ser Xle His His ?sn ßly ?rg Tyr ?sp Tyr Leu ßln ßlu ßlu ?la 515 520 S25 ecg aaa gea cea aea aag gga get eee age aga cea eec eaaecgcacg 1749 Leu Lys Val Pro Tbr Lys ßly ?la Phe Ser ?rg Leu Leu S30 S35 540 gaaeeegcca eaggccgcge ggaagcgcac gcceeageec accccgaeea cggttttcgt 1809 aagceaaacc eagaegeaga agaetcaaaa ccgttcgaaa cgcaacegaa gegcaceeec 1869 acaaagaege caeeeaaggg gctagctttt gaaceaaaca ccaaaecccc ccacceacae 1929 gggaaegaaa aaeeceateg eeacgcceta gagataceca aaeagectgg Ctgeaaaeaa 1989 eaccecacag gceccgacgg ceaeacecee gaacacecec gccaegaacc tgatagactt 2049 caaggtctge eaaaggaeca tcaaattgat gaaaaccaee egacaegagg aaatttttga 2109 eaaaaaagee aggcaacace gcecagcecc cccgcaacgc tattgatagt cceagcgaaa 2169 40/63 atttcaaaaa aataaagaaa tcatttaett gttgcaagcg cccgcgcaaa eegccacgae 2229 tttattggta acaattcatt aaaaaaggag aatgat acg aaa aga aaa gac cea 2283 Mee Lys ?rg Lys ?sp Leu 545 cec ggc gac aaa caá acc caá cac acg acc aga aag cea age gee gga 2331 Phe Gly ?sp Lys Gln Tbr ßln Tyr Thr He ?rg Lys Leu Ser Val ßly 550 5SS 560 gca gcc cea gee acá acá ggg gea tgt att ttt ctt cat age cea eag 2379 Val ?la Ser Val Thr Thr Gly Val Cys He Phe Leu His Ser Pro ßln S65 570 575 gta ttc gcc gaa gaa gca age gcc ccc ccc gca acc acá gcg aec gca 2427 Val Phe Ala Glu Glu Val Ser Val Ser Pro Ala Thr Thr Ala He Ala 580 585 590 595 gag ecg aae att aat eag gct gac aac ca caá tcc act aat tta aaa 2475 Glu Ser Asn He Asn Gln Val Asp Asn Gln Gln Ser Thr Asn Leu Lys 600 605 610 gat gac ata aac tea aae tet gag aeg gtt gtg acá ccc tea gat atg 2523 Asp Asp He Asn Ser Asn Ser Glu Thr Val Val Thr Pro Ser Asp Met 615 620 625 ccg gac acc aag caá cea gca cea gat gaa act gac act caá aag gga 2571 Pro Asp Thr Lys ßln Leu Val Ser Asp ßlu Thr ?sp Thr ßln Lys ßly 630 635 640 gtg acá gag ccg gat aag geg acá age etg ect gaa gaa aat aaa ggt 2619 Val Thr Glu Pro ?sp Lys ?la Thr Ser Leu Leu Glu Glu ?sn Lys Gly 645 650 655 ect gtc Cea gat aaa aat acc tta gat tta aaa gta gca cea tet aea 2667 Pro Val Ser ?sp Lys ?sn Tbr Leu Asp Leu Lys val Ala Pro Ser Thr 660 66S 670 675 ttg caá aac act cee gac aaa act tet caá gcc acá gge gec cea age 2715 Leu Gln Asn Thr Pro Asp Lys Thr Ser Gln Ala Xle Gly Ala Pro Ser 680 685 690 cce acc ecg aaa gea gcc aae caá gee cea cgg ace gaa aac gge Cae 2763 Pro Thr Leu Lys Val Ala ?sn ßln ?la Pro ?rg He ßlu ?sn ßly Tyr 695 700 705 ttt agg eta eat ett aaa gaa teg eee caá ggc cac ccc gca gaa age 2811 Phe Arg Leu His Leu Lys ßlu Leu Pro Gln Gly His Pro Val Glu Ser 710 715 720 acc gga cee cgg aea egg gga gac gcc gac caá ccg cce age aac cgg 2859 Thr Gly Leu Trp Xle Trp ßly ?sp Val Asp ßln Pro Ser Ser Asn Trp 72S 730 735 cea aac gge gcc acc ccc acg acc gac gcc aag aaa gac gac cac gge 2907 Pro Asn Gly ?la He Pro Mee Thr Asp Ala Lys Lys ?sp ?sp Tyr ßly 740 74S 750 75S 41/63 cae Cae gct gae ttc aaa tta tet gaa aaa caá cga aaa caá ata tet 2955 Tyr Tyr Val ?sp Phe Lyß Leu Ser ßlu Lys ßln ?rg Lys Gln Zle Ser 760 765 770 ttt cea acc aae aac aaa gca ggg acá aat tta age ggc gac cat eat 3003 Phe Leu Zle Asn Asn Lys ?la Gly Thr Asn Leu Ser ßly Asp His His 775 780 785 att cea cta tta cga cet gag atg aac caá gtt tgg att gat gaa aag 3051 Xle Pro Leu Leu ?rg Pro ßlu Met ?sn ßln Val Trp Xle Asp ßlu Lys 790 79S 800 tac ggc acá cac ace cae caá ccc ccc aaa gaa ggg cat gcc cgc acc 3099 Tyr ßly He His Thr Tyr Gln Pro Leu Lys Glu Gly Tyr Val Arg He 805 810 815 aac cat ttg agt tcc tet agt aac tat gac eac tta tea gca tgg etc 3147 ?sn Tyr Leu Ser Ser Ser Ser ?sn Tyr ?sp His Leu Ser ?la Trp Leu 820 825 830 835 ttt aaa gat gtt gca acc ccy tea acá act tgg cea gat ggc age aac 3195 Phe Lys ?sp Val ?la Thr Xaa Ser Thr Thr Trp Pro Asp Gly Ser ?sn 840 845 850 ecc gcg aae caá gga cea eae gga agg cae aec gae gea Cea cea aaa 3243 Phe Val ?sn ßln ßly Leu Tyr ßly ?rg Tyr Zle ?sp Val Ser Leu Lys 855 860 865 aee aac gee aaa gag aee ggc cec eca acc cea gac gaa age aag acá 3291 Thr ?sn ?la Lys ßlu Zle ßly Phe Leu He Leu ?sp ßlu Ser Lys Thr 870 875 880 gga gat gca gtg aaa gtt caá ccc aac gac tat gtt ttt aga gat tta 3339 ßly ?sp ?la Val Lys Val ßln Pro ?sn ?sp Tyr Val Phe ?rg ?ßp Leu 885 890 895 gct aac cat aac caá act ttc gca aaa gae aag gac cea aag gcc cae 3387 ?la ?sn His ?sn ßln He Phe Val Lys ?sp Lys ?sp Pro Lys Val Tyr 900 905 910 915 aac aac cec cae eac aec gac caá geg eag cea aag gae gcc caá caá 3435 ?sn ?sn Pro Tyr Tyr He ?sp ßln Val ßln Leu Lyß ?ßp ?la ßln ßln 920 925 930 aee gac cea acá age acc caá gca age cce aea aec cea gae ggg gca 3483 He ?sp Leu Tbr Ser Zle ßln ?la Ser Phe Thr Thr Leu ?sp ßly Val 935 940 945 gae aaa aec gaa aee cea aaa gaa eeg aaa geg ace gae aaa aac caá 3S31 Asp Lys Tbr ßlu lie Leu Lys ßlu Leu Lys Val Tbr ?sp Lyß ?sn ßln 950 955 960 aac gec acá caá acc ccc gac aec «ce ece gac aec age aaa ccc ccc 3979 Asn ?la Xle ßln He Ser ?sp Xle Thr Leu ?sp Thr Ser Lys Ser Leu 965 970 97S 42/63 cea ac acc aaa ggc gac ttt aat ect aaa caá ggt cat ttc aac ata 3627 Leu lie lie Lys ßly ?sp Phe ?sn Pro Lys Gln Gly His Pbe ?sn Xle 980 985 990 995 ccc cac aae ggc aac aac gtc acg acá agg caá ccc egg gaa ett aaa 3675 Ser Tyr Asn Gly ?sn ?sn Val Met Thr ?rg Gln Ser Trp ßlu Phe Lys 1000 1005 1010 gac caá ctt tat gct tat agt gga aat tta ggt gca gtt etc aat eaa 3723 Asp C.r. Leu Tyr ?la Tyr Ser Gly Asn Leu ßly Ala Val Leu Asn ßln 1015 ' 1020 1025 gae cgt eca aaa gcc gaa gcc age etc tgg tea ccg agt gct gat agt 3771 Asp Cly Ser Lys Val ßlu Ala Ser Leu Trp Ser Pro Ser ?la ?sp Ser 1030 " 1035 1040 gtc act atg acc act tat gac aaa gac aac caá aac agg gtt gta gcg 3819 Val Thr Kec He He Tyr Aso Lys Asp Asn ßln ?sn Arg Val Val ?la 1045 1050 1055 acc acc ecc ccc gcg aaa aac aac aaa gge gec egg cag acg aea cee 3867 Thr Thr Pro Leu val Lys ?sn ?sn Lys ßly Val Trp ßln Thr He Leu 1060 1065 1070 107S gat act aaa tta ggt att aaa aac tat acc ggt tac tat tat ctt tac 3915 ?sp Thr Lys Leu ßly He Lye ?sn Tyr Thr Gly Tyr Tyr Tyr Leu Tyr 1080 1085 1090 gaa ata aaa aga ggt aag gat aag gtt aag att tta gat ect tat gca 3963 Glu He Lys Arg Gly Lys Asp Lys Val Lys Xle Leu ?sp Pro Tyr Ala 109S 1100 1105 aag tea cea gca gag tgg gat agt aat act get ?AZ gat gae aee aaa 4011 Lys Ser Leu ?la Glu Trp ?sp Ser Asn Thr Val Asn ?sp ?sp Xle Lys 1110 1115 1120 acg gct aaa gca gct ttt gta aat cea agt caá ctt gga cet caá aat 4059 Thr ?la Lys ?la ?la Phe Val ?sn Pro Ser Gln Leu ßly Pro ßln ?sn 1125 1130 1135 tta agt ttt get aaa att gcc aat tcc aaa gga aga eaa gat gcc gcc 4107 Leu Ser Phe Ala Lys He Ala Asn Phe Lys ßly ?rg ßln ?sp ?la Val 1140 1145 1150 1155 aea cac gaa gca cae gea aga gac eec ace tcc gac cga cce ceg gae 41S5 He Tyr ßlu ?la His val Arg Asp Phe Tbr Ser Asp Arg Ser Leu ?sp 1160 1165 1170 gga aaa tta aaa aae eaa eec ggt acc eec gca gcc ecc eca gag aaa 4203 ßly Lys Leu Lys ?sn ßln Pbe ßly Thr Phe Ala ?la Phe Ser ßlu Lys 1175 1180 1185 cea gac eac cea cag aaa tea gga gee acá cac aet cag ect tta ccg 4251 Leu ?sp Tyr Leu ßln Lys Leu ßly Val Thr Bis He ßln Leu Leu Pro 1190 1195 1200 43/63 gca ceg age cat ttt tat gtt aat gaa atg gat aag tea ege tea acá 4299 Val Leu Ser Tyr Phe Tyr Val ?sn Glu Met ?sp Lys Ser ?rg Sex Thr 1205 1210 1215 gct tac aec tce cea gae aat aat tac aat egg ggc eac gae cea cag 4347 Ala Tyr Thr Ser Ser ?sp Asn ?sn Tyr ?sn Trp Gly Tyr ?ßp Pro Gln 1220 1225 1230 1235 age tat ttt gct ctt tet ggg atg tat tea gag aaa cea aaa gat cea 4395 Ser Tyr Phe ?l* Leu Ser ßly Het Tyr Ser ßlu Lyß Pro Lyß ?sp Pro 1240 1245 1250 tea gea cgt ate gee gaa cta aaa caá cea ac cae gac act cat aaa 4443 Ser Ala Arg Xle ?la ßlu Leu Lys ßln Leu Xle His ?sp Xle His Lys 125S 1260 1265 cgt ggc aeg ggg get ata ctt gat gtc gtc tat aat cae act gca aaa 4491 Arg ßly Met ßly Val He Leu ?ßp Val Val Tyr ?sn Bis Tbr ?la Lys 1270 1275 1280 ace eae cec eee gag gae ata gaa eet aat eac cae eac eee aeg aac 4539 Tbr Tyr Leu Phe ßlu ?sp He ßlu Pro ?sn Tyr Tyr His Phe Mee ?sn 1285 1290 1295 gaa gae gge eca cea aga gaa age ttt gga ggg gga cgt tta gga ace 4587 ßlu ?sp ßly Ser Pro ?rg ßlu Ser Phe ßly ßly ßly ?rg Leu ßly Tbr 1300 1305 1310 1315 acc cat ?ca atg agt cgt cgt gtt eeg gee gac cec aec aaa cae cec 4635 Thr His Ala Met Ser Arg ?rg Val Leu Val ?sp Ser He Lys Tyr Leu 1320 1325 1330 acá agt gaa ttt aaa gee gae ggt ttc cgt ttt gat atg atg gga gat 4683 Thr Ser ßlu Phe Lys Val ?ßp ßly Pbe ?rg Phe ?sp Met Mee ßly ?sp 1335 1340 1345 cae gat geg gee geg att gaa tea gee eat aaa gaa get aaa gct acc 4731 His ?sp ?la ?la ?la Xle ßlu Leu Ala Tyr Lys ßlu ?la Lys ?la Xle 1350 1355 1360 aae cce aae aeg aee aeg aec gge gag ggc Cgg aga acá ecc caá ggc 4779 ?ßn Pro ?sn Mee He Mee Xle ßly ßlu ßly Trp ?rg Thr Phe ßln ßly 1365 1370 1375 gac cas ggc cag eeg gte aaa eca ?ce gac ca gae cgg acg aag tea 4827 ?sp ßln Gly Gln Pro Val Lys Pro ?la ?sp ßln ?sp Trp Mee Lys ser 1380 138S 1390 1395 acc gae acá gec ggc gCe eee tea gat gat att cgt aat age ttg aaa 4875 Thr ?sp Thr Val ßly Val Phe Ser ?sp ?sp Zle ?rg ?sn Ser Leu Lyß 1400 1405 1410 tet ggt tet cea aae gaa ggc acc cea gcc cce aec acá ggt gge cea 4923 Ser ßly Phe Pro ?sn ßlu ßly Thr Pro ?la Phe Zle Thr ßly ßly Pro 1415 1420 1425 44/63 caá ccc tta caá ggt act tcc aaa aae acc aaa gca caá ccc ggg aac 4971 Gln Ser Leu Gln Gly He Phe Lys Asn He Lys Ala Gln Pro Gly Asn 1430 1435 1440 etc gaa gca gac ccg cea gga gac gcg gcg cag tat att gct gca cat 5019 Phe Glu Ala Asp Ser Pro Gly Asp Val Val Gln Tyr He Ala Ala His 1445 1450 1455 gac aac ctt acc ccg cae gac gcg acc gca aaa eca aec 5058 Asp Asn Leu Thr Leu His Asp Val He Ala Lys Ser Xle 1460 1465 1470 <2.10> 23 <211> 221 «212> PRT <213> Estreptococo «400> 23 Asn Leu Lys Ala Glu Leu Ser Val Glu Asp Glu Gln Tyr Thr Ala Thr 1 5 10 15 Val Tyr Gly Lys Ser Ala His Gly ser Thr Pro Gln Glu Gly Val Asn 20 25 30 Gly Ala Thr Tyr Leu Ala Leu Tyr Leu Ser Gln Phe Asp Phe Glu Gly 35 40 45 Pro Ala Arg Ala Phe Leu Asp Val Thr Ala Asn He He His Glu Asp 50 55 60 Phe Ser Gly Glu Lys Leu ßly Val Ala Tyr Glu Asp Asp Cys Mee Gly 65 70 75 80 Pro Leu Ser MeC Asn Ala Gly Val Phe Gln Phe Asp Glu Thr ?sn ?sp 85 90 95 Asp Asn Thr He Ala Leu Asn Phe Arg Tyr Pro Gln Gly Thr Asp Ala 100 105 110 Lys Thr He Gln Thr Lys Leu Glu Lys Leu Asn Gly Val Glu Lys Val 115 120 125 Thr Leu Ser Asp His Glu His Thr Pro His Tyr Val Pro Mee ?sp Asp 130 135 140 Glu Leu Val Ser Thr Leu Leu ?la Val Tyr Glu Lys Gln Thr Gly Leu 145 150 155 160 Lys Gly His Glu Gln Val He ßly Gly ßly Thr Phe Gly Arg Leu Leu 165 170 17S Glu Arg Gly Val Ala Tyr Gly Ala Met Phe Pro Gly Asp Glu Asn Thr 180 185 190 Met His Gln ?la ?sn Glu Tyr Met Pro Leu Glu ?sn He Phe ?rg Ser 19S 200 205 ?la Ala Xle Tyr Ala Glu ?la He Tyr Glu Leu Xle Lys 210 215 220 «210> 24 <211> 194 _ «212> PRT «213» Estreptococo <400> 24 45/63 Met Thr Asp Leu ßlu Lys He He Lys ?la Xle Lys Ser ?sp Ser ßln 1 5 10 15 Asn Gln Asn Tyr Thr Glu ?sn Gly Xle Asp Pro Leu Phe Ala Ala Pro 25 30 Lys Thr ?la ?rg He ?sn He Val Gly Gln ?la Pro Gly Leu Lys Thr 40 45 Gln Glu ?la ?rg Leu Tyr Trp Lys ?sp Lys Ser Gly ?sp ?rg Leu ?rg 50 SS 60 Gln Trp Leu ßly Val ?sp ßlu ßlu Thr Pbe Tyr His Ser ßly Lys Phe 65 70 75 80 ?la Val Leu Pro Leu ?sp Phe Tyr Tyr Pro ßly Lys ßly Lys ser ßly 8S 90 95 ?sp Leu Pro Pro ?rg Lys ßly Phe ?la ßlu Lys Trp His Pro Leu He 100 105 110 Leu Lys ßlu Met Pro ?sn Val ßln Leu Thr Leu Leu Val ßly ßln Tyr 115 120 125 ?la Gln Lys Tyr Tyr Leu ßly Ser Ser ?la His Lys ?sn Leu Thr ßlu 130 135 140 Thr Val Lys ?la Tyr Lys ?ßp Tyr Leu Pro ?sp Tyr Leu Pro Leu Val 145 150 155 160 His Pro Ser Pro ?rg ?sn ßln Xle Trp Leu Lys Lys ?sn Pro Trp Phe 165 170 175 ßlu Lys ?sp Leu Xle Val Asp Leu ßln Lys He Val Ala Asp He Leu 180 185 190 Lys Asp <210> 25 «211> 126 «212> PRT «213> Estreptococo «400> 25 Met Arg ?sp Asn Kis Leu His Thr Tyr Phe Ser Tyr Asp Cys ßln Thr 1 5 10 15 Ala Phe Glu Asp Tyr He Asn ßly Phe Thr ßly Glu Phe He Thr Thr 25 30 Glu His Phe Asp Leu Ser ?sn Pro Tyr Thr ßly Gln ?sp ?sp Val Pro 40 45 ?sp Tyr Ser Ala Tyr Cys ßln Lys He Asp Tyr Leu Asn ßln Lys Tyr 50 55 60 ßly Asn Arg Pbe Lys Lys ßly Xle ßlu He ßly Tyr Pbe Lys Asp ?rg 65 70 75 80 ßlu Ser ?sp Xle Leu ?ßp Tyr Leu Lyß ?ßn Lyß Glu Pbe ?sp Leu Lys 85 90 95 Leu Leu Ser He Kis His ?sn ßly ?rg Tyr Asp Tyr Leu ßln ßlu ßlu 100 IOS 110 ?la Leu Lyß Val Pro Thr Lys ßly ?la Phe Ser ?rg Leu Leu 115 120 125 «210> 26 ~ <211> 931 <212> PRT «213> Estreptococo <400> 26 46/63 Met Lys Arg Lys Asp Leu Phe Gly Asp Lys Gln Thr Gln Tyr Thr He 1 5 10 15 Arg Lys Leu Ser Val ßly Val ?la Ser Val Thr Thr Gly Val Cys He 20 25 30 Phe Leu Kis Ser Pro Gln Val Phe Ala Glu Glu Val Ser Val Ser Pro 40 45 Ala Thr Thr Ala Xle Ala Glu Ser ?sn He Asn Gln Val Asp ?sn ßln SO SS 60 Gln Ser Thr Asn Leu Lys ?sp ?sp He Asn Ser Asn Ser Glu Thr Val 65 70 75 80 Val Thr Pro Ser Asp Met Pro ?sp Thr Lys Gln Leu Val Ser Asp Glu 85 90 95 Thr Asp Thr Gln Lys Gly Val Thr Glu Pro Asp Lys ?la Thr Ser Leu 100 IOS 110 Leu Glu Glu Asn Lys Gly Pro Val Ser Asp Lys ?sn Thr Leu ?sp Leu 115 120 125 Lys Val Ala Pro Ser Thr Leu Gln ?sn Thr Pro ?sp Lys Thr Ser Gln 130 135 140 Ala He Gly Ala Pro ser Pro Thr Leu Lys Val ?la ?sn Gln ?la Pro 145 150 155 160 Arg He Glu Asn Gly Tyr Phe ?rg Leu His Leu Lys Glu Leu Pro Gln 165 170 175 Gly His Pro Val Glu Ser Thr Gly Leu Trp He Trp ßly ?sp Val ?sp 180 185 190 Gln Pro Ser Ser Asn Trp Pro ?sn Gly Ala Xle Pro Met Thr Asp ?la 195 200 205 Lys Lye Asp Asp Tyr Gly Tyr Tyr Val Asp Phe Lys Leu Ser ßlu Lys 210 215 220 Gln Arg Lys Gln He Ser Phe Leu Xle Asn ?sn Lys Ala ßly Thr Asn 22S 230 235 240 Leu Ser Gly Asp His His He Pro Leu Leu Arg Pro Glu Met Asn Gln 245 250 255 Val Trp He Asp Glu Lyß Tyr Gly Xle His Thr Tyr Gln Pro Leu Lys 260 265 270 Glu Gly Tyr Val Arg He ?sn Tyr Leu Ser Ser Ser Ser Asn Tyr Asp 275 280 285 Kis Leu Ser Ala Trp Leu Phe Lys ?sp Val Ala Thr Xaa Ser Thr Thr 290 295 300 Trp Pro Asp Gly Ser ?sn Phe Val ?sn Gln Gly Leu Tyr Gly Arg Tyr 30S 310 315 320 He Asp Val Ser Leu Lys Thr ?sn Ala Lys ßlu Xle ßly Phe Leu He 325 330 335 Leu Asp Glu Ser Lys Thr Gly Asp Ala Val Lys Val ßln Pro ?sn ?sp 340 345 350 Tyr Val Phe ?rg ?sp Leu ?la ?sn His ?sn ßln He Phe Val Lyß ?sp 355 360 365 Lys Asp Pro Lyß val Tyr Asn Asn Pro Tyr Tyr He ?sp ßln Val ßln 370 375 380 Leu Lys Asp Ala Gln Gln He ?sp Leu Thr Ser He ßln Ala Ser Phe 385 390 395 400 Thr Thr Leu Asp Gly Val ?sp Lys Thr Glu Xle Leu Lys Glu Leu Lys 405 410 415 val Thr Asp Lys Asn ßln Asn Ala Xle ßln Xle Ser Asp Xle Thr Leu 420 42S 430 Asp Thr ser Lys Ser Leu Leu He He Lys ßly Asp Phe Asn Pro Lys 435 440 445 47/63 Gln Gly His Phe ?sn He Ser Tyr ?sn Gly Asn ?sn Val Met Thr ?rg 4S0 455 460 Gln Ser Trp Glu Phe Lys ?ßp ßin Leu Tyr ?la Tyr Ser ßly ?sn Leu 465 470 475 480 Gly ?la Val Leu Asn ßln Asp ßly Ser Lys Val ßlu ?la Ser Leu Trp 48S 490 495 Ser Pro Ser Ala Asp Ser Val Thr Met He He Tyr Asp Lys Asp Asn 500 SOS 510 ßln Asn Arg Val Val Ala Thr Thr Pro Leu Val Lys Asn Asn Lys ßly 515 S20 525 Val Trp ßin Thr Xle Leu Asp Thr Lyß Leu ßly He Lys Asn Tyr Thr 530 53S S40 Gly Tyr Tyr Tyr Leu Tyr Glu He Lys Arg Gly Lys Asp Lys Val Lys 545 550 555 S60 He Leu Asp Pro Tyr Ala Lys Ser Leu Ala Glu Trp Asp Ser Asn Thr 565 570 575 Val Asn Asp Asp He Lys Thr Ala Lys Ala Ala Phe Val Asn Pro Ser 580 585 590 Gln Leu Gly Pro Gln Asn Leu Ser Phe Ala Lys He Ala Asn Phe Lys 595 600 605 Gly Arg Gln Asp Ala Val He Tyr Glu Ala His Val Arg Asp Pbe Thr 610 615 620 Ser Asp Arg Ser Leu Asp Gly Lys Leu Lys Asn Gln Phe ßly Thr Phe 625 630 635 640 Ala Ala Phe Ser Glu Lys Leu Asp Tyr Leu Gln Lys Leu Gly Val Thr 645 650 655 His He Gln Leu Leu Pro Val Leu Ser Tyr Phe Tyr Val Asn Glu Met 660 665 670 Asp Lys Ser Arg Ser Thr Ala Tyr Thr Ser Ser Asp Asn Asn Tyr Asn 675 680 685 Trp Gly Tyr Asp Pro Gln Ser Tyr Phe Ala Leu Ser Gly Met Tyr Ser 690 695 700 Glu Lys Pro Lys Asp Pro Ser Ala ?rg He Ala Glu Leu Lys Gln Leu 705 710 715 720 Xle His Asp He His Lys Arg Gly Met Gly Val Xle Leu Asp Val Val 725 730 735 Tyr Asn His Thr Ala Lys Thr Tyr Leu Phe Glu Asp He Glu Pro Asn 740 745 750 Tyr Tyr His Phe Met Asn Glu Asp Gly Ser Pro Arg ßlu Ser Phe Gly 755 760 765 Gly Gly Arg Leu Gly Thr Thr His Ala Met Ser Arg Arg Val Leu Val 770 775 780 Asp ser He Lys Tyr Leu Thr Ser Glu Phe Lys Val Asp Gly Phe ?rg 785 790 795 800 Phe ?sp Met Met Gly ?sp His ?sp ?la Ala Ala He Glu Leu Ala Tyr 805 810 815 Lys Glu ?la Lys ?la He Asn Pro Asn Met He Met Xle Gly Glu Gly 820 825 830 Trp ?rg Thr Phe Gln ßly ?sp ßln Gly Gln Pro Val Lys Pro ?la Asp S3S 840 845 Gln Asp Trp Met Lys Ser Thr Asp Thr Val Gly Val Phe Ser ?sp ?sp 850 855 860 He ?rg ?sn Ser Leu Lys Ser ßly Phe Pro Asn Glu Gly Thr Pro Ala 865 870 875 880 Pbe He Thr Gly Gly Pro Gln Ser Leu Gln ßly He Phe Lys Asn Xle 885 890 895 48/63 Lys Ala Gln Pro Gly ?sn Phe Glu ?la ?sp Ser Pro Gly ?sp Val Val 900 905 910 Gln Tyr He Ala Ala His Asp Asn Leu Thr Leu His Asp Val He Ala 915 920 925 Lys Ser He 930 <210> 27 «211> 5607 <212> ADN «213> Estreptococo <220> <221> CDS «222> (2) ...(301) <400> 27 a aet caá age ecg acá gaa ggc caá ccc cgc ect gac acc ccc gag ccc 49 He Gln Ser Leu Thr Glu Gly Gln Leu Arg Ser Asp Xle Pro Glu Phe 1 S 10 15 cgt gee ggt gac ace gta cgt gtt cac gct aaa get gtt gaa ggt act 97 Arg Ala Gly Asp Thr Val ?rg Val His Ala Lys Val Val Glu Gly Thr 20 25 30 cgc gaa ege acc cag ate ttt gaa ggt gtt gtt ate tea cgt aaa ggt 14S Arg Glu Arg He Gln He Phe Glu Gly Val Val He Ser Arg Lys Gly 35 40 4S caá gga ate tea gaa atg tac acá gta cgt aaa att tet ggt ggt ate 193 Gln Gly He Ser Glu Met Tyr Thr Val Arg Lys He Ser Gly Gly He 50 55 60 ggc gea gag ege acá ttc cea act cac act ect cgt gtt gat aaa ate 241 Gly Val Glu Arg Thr Phe Pro He His Thr Pro Arg Val ?sp Lys He 65 70 75 80 gaa gtt gtt cgt tat ggt aaa gta cgt cgc gee aaa ccc Cac Cae cea 289 Glu Val Val ?rg Tyr Gly Lys Val ?rg ?rg ?la Lys Leu Tyr Tyr Leu 85 90 95 cgc gca Ctg caá ggcaaagceg caegeaetaa agaaatccgt cgttaatttt 341 ?rg ?la Leu Gln 100 gatgatcaga ctttaaaaaC gceeggeegc etgaggatag taactatgtt ttaaaactgg 401 acaaccaaga cgtaaaaaat ctgcctgtgg gcagtttttt tactaggtcc cettagttea 461 atggatataa caaetccctc ctaaggagta attgctggtt cgaceecggc aggggacaea 521 eecaecgcac gtaaatagcg gtttagagct atettgcccc aaatttctce gatcaageec Sßl accgecccca ectttttgtt cttgtaattg atgtgcgtaa acttctaaag tgatatttaa 641 attctcgtga tctaaaactt gagagacgga aaecagacag ceegcaaacg eaegccCgag 701 agagtgeace cgtacctcgc gaceagttat ttttcggaca gttttattga ctgeattatt 761 tgaaagtttg tegaataate tgtcgttttt attttttgta aatteatgea aaaaaaataa 821 tgtatcattg tcaattggta 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caccaccaag acgtggaaat acgaccaecc aaagcaagtt tggcaaagac atcgcagtet 2700 acaccgggga tttaeccctc acagecettt eegatettat cttagaatct acgacegaca 2760 caccaeeeat gaggattaat geaaaatcta egcgeaaaac tctcatggga gaaeeggace 2820 agatgcacct tcgttacaat caacaacaag gcacccacca ceacceacgc gcgatttcag 2880 gtaagacagc cgaactcttt aaattageta gcaaagaagg ageeeaecec ggeggcgcag 2940 agaaggaggt tgttcgtcta gcaggccata ecggcettaa caeeggeaeg acaeeccaaa 3000 ttttggatga tatcctggat taeactgcag ataaaaaaac aeccaacaag eccgccceag 3060 aggatttaac acaaggcgtt taeagecttc ctctacttct egccaeegaa gaaaaecceg 3120 atatttecaa acctatttta gataaaaaaa cagatatggc eaecgaagac aeggaaaaaa 3180 ttgcttatct cgtcgtttcc cacagaggeg cegacaaage ecgccaccea geecgcaaac 3240 ecacegagaa agceaeeage gacaCaaaca agctacccca gaacecCgca aaaaaacagc 3300 egceacaacc aaceaaceac ccceeaaaac geaaaattta aaeaacaaaa aaaeacccca 3360 caatgccaga aaageageca gggaacgcee ttttattatc aeeeaeeeae cgcacccacc 3420 aaecaecaea gaecaccaec aecagcggce eecagcegac ggeaacgceg accacceega 3480 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Ala Asp Gly Leu Leu 20 25 30 His Ala Asp Asn His Tyr His Phe Phe Asn Gly Lys Ser Leu Ala Thr 35 40 45 Phe Asn Thr Asn Gln Leu He Arg Glu Val Val Tyr Val Glu He Ser 50 55 60 Leu Asp Thr Met Ser Ser Gly Glu His Asp Leu Val Lys Val Asn He 65 70 75 80 He Arg Pro Thr Thr Glu His Thr He Pro Thr Met Met Thr Ala Ser 85 90 95 Pro Tyr His Gln Gly He Asn Asp Pro Ala Ala Asp Gln Lys Thr Tyr 100 IOS 110 Gln Met Glu Gly Ala Leu Ala Val Lys Gln Pro Lys His He Gln Val 115 120 125 Asp Thr Lys Pro Phe Lys ßlu Glu Val Lys His Pro Ser Lyß Leu Pro 130 135 140 He Ser Pro Ala Thr Glu Ser Phe Thr His He Asp Ser Tyr Ser Leu 145 150 155 160 Asn Asp Tyr Phe Leu Ser Arg Gly Phe Ala Asn He Tyr Val Ser Gly 165 170 175 Val Gly Thr Ala Gly Ser Thr Gly Phe Met Thr Ser Gly Asp "Tyr Gln 180 185 190 Gln He Gln Ser Phe Lys ?la Val He ?sp Trp Leu ?sn Gly Lys Val 195 200 205 Thr ?la Phe Thr Ser His Lys ?rg Asp Lys Gln Val Lys Ala Asp Trp 210 215 220 Ser ?sn Gly Leu Val ?la Thr Thr Gly Lys Ser Tyr Leu Gly Thr Met 225 230 235 240 Ser Thr Gly Leu ?la Thr Thr ßly Val Glu Gly Leu Lys Val He He 245 250 255 Ala Glu Ala Ala He Ser Thr Trp Tyr Asp Tyr Tyr Arg Glu ?sn Gly 260 ~ 265 270 Leu Val Cys Ser Pro Gly Gly Tyr Pro ßly ßlu Asp Leu Asp Val Leu 275 280 285 Thr Glu Leu Thr Tyr Ser Arg ?sn Leu Leu Ala Gly Asp Tyr He Lys 290 295 300 ?sn ?sn ?sp Cys Tyr Gln ?la Leu Leu ?sn ßlu ßln Ser Lys ?la Zle 55/63 305 310 315 320 ?sp ?rg ßln Ser Gly ?sp Tyr Asn ßln Tyr Trp His Aßp Arg Asn Tyr 325 330 335 Leu Thr His Val Asn Asn Val Lys Ser Arg Val Val Tyr Thr His ßly 340 345 350 Leu Gln Asp Trp Asn Val Lys Pro Arg His Val Tyr Lys Val Phe Asn 3SS 360 365 Ala Leu Pro Gln Thr He Lys Lys His Leu Phe Leu His ßln Gly Gln 370 375 380 His Val Tyr Mee His Asn Trp Gln Ser He Asp Phe ?rg ßlu Ser Mee 385 390 395 400 Asn Ala Leu Leu Ser ßln ßlu Leu Leu Gly He Asp Asn His Phe Gln 405 410 415 Leu ßlu ßlu Val He Trp ßln ?sp ?sn Thr Tbr ßlu ßln Tbr Trp ßln 420 425 430 Val Leu ?sp Ala Phe Gly Gly Asn His Gln Glu Gln Xle ßly Leu Gly 435 440 445 ?sp Ser Lys Lys Leu Xle Asp Asn His Tyr ?sp Lys Glu ?la Phe ?sp 4S0 455 460 Thr Tyr Cys Lys Asp Phe Asn Val Phe Lys Asn ?sp Leu Phe Lys Gly 465 470 475 480 Asn Asn Lys Thr Asn Gln He Thr Xle Asn Leu Pro Leu Lys Lys ?sn 485 490 495 Tyr Leu Leu Asn Gly ßln Cys Lys Leu His Leu Arg Val Lys Thr Ser 500 505 510 Asp Lys Lys Ala He Leu Ser Ala Cln He Leu Asp Tyr ßly Pro Lys SIS 520 525 Lys ?rg Phe Lys ?sp Thr Pro Thr He Lys Phe Leu ?sn Ser Leu ?sp 530 535 540 Asn Gly Lys Asn Phe Ala ?rg Glu ?la Leu ?rg Glu Leu Pro Phe Thr 545 550 555 560 Lys Asp His Tyr Arg Val He Ser Lys Gly Val Leu Asn Leu Gln ?sn 565 S70 575 Arg Thr Asp Leu Leu Thr Xle Glu Ala Xle Glu Pro Glu ßln Trp Phe 580 585 590 Asp He ßlu Phe Ser Leu ßln Pro Ser He Tyr Gln Leu Ser Lys Gly 595 600 605 Asp ?sn Leu ?rg He He Leu Tyr Thr Thr Asp Fhe Glu His Thr Xle 610 615 620 Arg ?sp Asn Ala Ser Tyr Ser Xle Thr val Asp Leu Ser Gln Ser Tyr 625 630 635 640 Leu Thr Xle Pro Thr Asn ßln ßly ?sn 645 «210> 34 «211> 119 «212> PRT <213> Estreptococo «400> 34 Mee Lys Leu Leu- Thr Lys ßlu ?rg Phe ?sp Asp Ser ßln His Phe Trp 1 5 10 15 Tyr ßln He Asn Leu Leu ßln ßlu Ser Asn Phe ßly ?la Val Phe ?sp 25 30 His ?sp ?sn Lys ?sn He Pro ßln Val Val ?la Tbr Xle Val ?sp ?sp 35 40 45 56/63 Leu Gln Gly Ser Gly Ser Ser Asn His Phe Trp Tyr Phe Gly Asn Thr SO 55 60 Thr Asp Thr Ser He Leu Mee He Ala His Leu Aen Arg Lys Phe Tyr éS 70 75 80 He Gln Val Asn Leu Lys Asp Phe Asp Phe ?la Leu Asn Leu He ?la 85 90 95 !le Asn Asn Trp Lys Ser Leu Leu Gln Thr Gln Leu Glu ?la Leu ?sn 100 os no As Thr Leu Ala He Phe Gln 115 10> 35 ::? 326 -;H2 PF.T * - 13 * Estreptococo 400> 35 Mee Ser Ser Tyr Trp Asn Asn Tyr Pro Glu Leu Lys Lys Asn He Asp 1 5 10 15 Glu Thr Asn Gl Leu He Gln ßlu Arg Xle Gln Val Arg ?sn Lys ?sp 25 30 He Glu Ala Ala Leu Ser Gln Leu Thr Ala Ala Gly Gly Lys Gln Leu 40 45 Arg Pro Ala Phe Phe Tyr Leu Phe Ser Gln Leu ßly Asn Lys Glu Asn 50 55 60 Gln Asp Thr Gln Gln Leu Lys Lye He Ala ?la Ser Leu Glu Xle Leu 65 70 75 80 His Val Ala Thr Leu He His Asp Asp Val Xle Asp Asp Ser Pro Leu 85 90 95 Arg Arg Gly Asn Mee Thr He Gln Ser Lys Phe ßly Lys Asp Xle Ala 100 105 110 Val Tyr Thr Gly Asp Leu Leu Phe Thr Val Phe Phe Asp Leu He Leu 115 120 125 Glu Ser Mee Thr Asp Thr Pro Phe Mee Arg Xle ?sn ?la Lye Ser MeC 130 135 140 ?rg Lys Xle Leu Mee Gly Glu Leu Asp ßln Mee His Leu Arg Tyr Asn 14S 150 155 160 Gln Gln Gln Gly He His His Tyr Leu ?rg ?la Xle Ser Gly Lys Thr 165 170 175 Ala Glu Leu Phe Lys Leu Ala Ser Lys Glu Gly Ala Tyr Phe Gly Gly 180 185 190 Ala Glu Lye Glu Val Val Arg Leu ?la ßly His Xle ßly Pbe ?sn Xle 195 200 205 Gly Met Thr Phe Gln He Leu ?sp ?sp ?le Leu ?sp Tyr Thr ?la ?sp 210 215 220 Lys Lys Thr Phe ?sn Lys Pro Val Leu Glu ?sp Leu Thr ßln ßly Val 225 230 235 240 Tyr Ser Leu Pro Leu Leu Leu ?la He ßlu ßlu ?sn Pro ?sp Xle Phe 245 250 255 Lys Pro He Leu ?sp Lys Lys Thr ?sp Mee ?la Thr ßlu ?sp Mee ßlu 260 „ 26S 270 Lys He ?la Tyr Leu Val Val Ser His ?rg ßly Val ?sp Lys ?la ?rg 275 280 285 His Leu Ala Arg Lys Phe Thr ßlu Lys Ala He Ser Asp He Asn Lys 290 295 300 Leu Pro ßln Asn Ser ?la Lys Lys Gln Leu Leu ßln Leu Thr ?sn Tyr 57/63 30S 310 315 320 Leu Leu Lys ?rg Lys Xle 325 c210> 36 <211> 247 <212> PRT <213> Estreptococo <400> 36 Leu Pro ?sn Lys Pro Tyr ?sp Phe Ser Val Lys Asn Leu Ser Phe Gln 1 5 10 15 Tyr Lys Pro Gln ßlu Lys Trp Val Leu His His Leu Asp Leu Asp Xle 20 25 30 Lys Glu Gly Glu Lye He Ala He Leu Gly Arg Ser Gly Ser Gly Lys 35 40 45 Ser Thr Leu Ala Ser Leu Leu Arg Gly Asp Leu Lys Ala Ser Gln Gly 50 55 60 Lys Xle Thr Leu Gly Gly Ala Asp Val Ser He Val Gly Asp Cys He 65 70 7S 80 Ser ?sn Tyr Xle Gly Val He Gln Gln ?la Pro Tyr Leu Phe ?sn Thr 85 90 95 Thr Leu Leu Asn Asn Xle Arg Xle Gly Asn Gln Asp Ala Ser Glu ßlu 100 105 110 Asp Val Trp Lys Val Leu Glu ?rg Val Gly Leu Lys Glu Met Val Thr 115 120 125 Asp Leu Ser Asp Gly Leu Tyr Thr Met Val Asp Glu Ala Gly Leu Arg 130 135 140 Phe Ser Gly Gly Glu Arg His Arg Xle Ala Leu Ala Arg Xle Leu Leu 145 150 155 160 Lys ?sp Val Pro Xle Val He Leu Asp Glu Pro Thr Val ßly Leu Asp 165 170 175 Pro He Thr ßlu Gln Ala Leu Leu Arg Val Phe Met Lys Glu Leu Glu 180 185 190 Gly Lys Thr Leu Val Trp He Thr His His Leu Lys Gly He Glu His 195 200 205 Ala ?sp ?rg He Leu Phe He ßlu Asn ßly ßln Leu ßlu Leu ßlu ßly 210 215 220 Ser Pro ßln ßlu Leu Ser ßln Ser Ser ßln Arg Tyr Arg ßln Leu Lys 225 230 23S 240 Ala ?la ?sp ?sp ßly ?sp Leu 245 <210> 37 <211> 3480 <212> ADN <213> Estreptococo «400> 37 aattctatte ggaggeceec cccgaacaaa Cggceageea aggcaagcec cecagecgee 60 eeaggeggca cggececacc cgcgggcccc cgagttttag cggatactta egeccgccca 120 acegacaacg gcagaaceac aacaggeeec aacggecaec ctggacattg tggggtggat 180 caege gttc cgaccggaac gaccaccagg geageggeag aeggcaccgc gaaaccegea 240 ggageeggag ccaacccccc ttggatgaca gacttagcag gaaattgcgc catgattcaa 300 catgcggatg gaacgcacag cggctacgct caeacgccac gtgtggtggc caggaccggg 360 gaaaaageca aacaaggaga eaeeaccgge caegeaggag caaccggcat ggegaeggga 420 58/63 cctcaccttc attttgaatt tttaccagct aaecccaatt ttcaaaatgg tttccatgga 480 cgtatcaatc 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Met Thr ?sp Leu ?la ßly ?sn Cye 85 90 95 val Met Xle Cln His ?la ?sp ßly Met His Ser ßly Tyr ?la His Met 100 105 110 Ser ?rg Val Val ?la ?rg Thr ßly Glu Lys Val Lys ßln ßly ?sp Xle 115 120 125 He ßly Tyr Val ßly ?la Tbr ßly Met ?la Thr ßly Pro Bis Leu His 130 135 140 Phe ßlu Phe Leu Pro ?la ?sn Pro ?sn Phe ßln ?sn ßly Phe His ßly 145 150 155 160 ?rg Xle ?sn Pro Thr Ser Leu Xle ?la ?sn Val ?la Thr Phe Ser ßly 165 170 175 Lys Thr ßln ?la Ser ?la Pro Ser Xle Lys Pro Leu ßln Ser ?la Pro 180 185 190 Val ßln ?sn Gln Ser Ser Lys Leu Lys Val Tyr ?rg Val ?sp Glu Leu 195 200 205 ßln Lys Val ?sn ßly Val Trp Leu Val Lys ?sn ?sn Thr Leu Tbr Pro 210 215 220 Thr ßly Phe ?sp Trp ?sn ?sp ?sn ßly Zle Pro ?la Ser ßlu Zle ?sp 22S 230 235 240 ßlu Val ?sp ?la ?sn ßly ?sn Leu Tbr ?la ?sp ßln Val Leu ßln Lys 245 250 255 ßly ßly Tyr Pbe He Phe ?sn Pro Lys Thr Leu Lys Thr Val ßlu Lys 260 265 270 Pro He ßln ßly Thr ?la ßly Leu Tbr Trp ?la Lys Tbr ?rg Phe ?la 275 280 285 ?sn ßly Ser Ser Val Trp Leu ?rg Val ?sp ?sn Ser ßln ßlu Leu Leu 290 295 300 Tyr Lys 305 «210> 39 «211» 434 «212> PRT <213> Estreptococo <400> 39 Met Lys Met ?sn Lys Lye Val Leu Leu Thr Ser Tbr Met Ala Ala Ser 1 -5 10 15 Leu Leu Ser Val ?la Ser Val ßln ?la Gln Glu Thr ?sp Thr Thr Trp 25 30 Thr Ala Arg Thr Val Ser Glu Val Lys Ala Asp Leu Val Lys Gln ?sp 40 45 ?sn Lys Ser Ser Tyr Thr Val Lys Tyr ßly ?ßp Thr Leu Ser Val ?le 60/63 50 55 60 er ßlu ?la Met Ser He Asp Met Asn Val Leu Ala Lys Xle ?sn ?sn 70 75 80 le ?la Asp He Asn Leu He Tyr Pro Glu Thr Tbr Leu Thr Val Thr 85 90 95 yt Aep Gln Lye Ser Hie Thr ?la Tbr Ser Met Lys He ßlu Thr Pro 100 105 110 la Thr ?sn ?la ?la ßly ßln Tbr Thr ?la Tbr Val ?sp Leu Lys Thr 115 120 125 sn ßln Val Ser Val ?la ?sp ßln Lys Val Ser Leu ?sn Thr He Ser 130 135 140 lu ßly Met Thr Pro ßlu ?la ?la Thr Thr Xle Val Ser Pro Met Lys 45 150 155 160 hr Tyr Ser Ser ?la Pro ?la Leu Lys Ser Lys ßlu Val Leu ?la ßln 165 170 175 lu ßln Ala Val Ser ßln Ala ?la ?la ?sn Glu Gln Val Ser Thr ?la 180 185 190 ro Val 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HAS Asp C.y Leu Ser Val Ala ßlu Phe Xle ßln Lys Xle Lys Gly 115 120 125 Lys Tyr Pro Gl? Gln Leu Leu Mee ?la Asp He Ser Thr Phe Glu ßlu 130 135 140 ßly Lys Asn Ala Phe ßlu Ala ßly Val Asp Phe Val ßly Thr Thr Leu 145 150 155 160 Ser Gly Tyr Thr Asp Tyr Xaa Arg Gln Glu ßlu ßly Pro ?sp Xle ßlu 165 170 175 Leu Leu Asn Lys Leu Cys Cln ?la Gly Xle ?sp Val Xle Ala ßlu ßly 180 IBS 190 Lys He His Thr Pro Lys ßln Ala Asn ßlu Xle Asn His Xle ßly Val 195 200 205 Ala ßly He Val Val ßly ßly Ala Xle Thr ?rg Pro Lys ßlu Xle ?la 210 215 220 Glu ?rg Phe He Ser Gly Leu Ser 225 230 «210> 41 «211> 39 «212» PRT <213> Estreptococo <400> 41 Met Ser He Lys Lys Ser Val Xle Gly Phe Cys Leu Gly ?la ?la ?la 1 5 10 15 Leu Ser Met Phe ?la Cys Val Asp Ser Ser Gln Ser Val Met ?la Ala 2S 30 ßlu Lys ?sp Lys Val ßlu He «210» 42 «211> 1305 <212> ADN «213> Estreptococo <400> 42 atgaaaatga ataaaaaggt actattgaca tegacaatgg cagcttcgct attatcagtc 60 gcaagtgttc aageacaaga aacagacacg acgcggacag cacgcactge eecagaggca 130 aaggctgatt tggtaaagca agacaataaa tcatcatata ctgtgaaata cggegaeaca 180 ccaagcgeca ccecagaagc 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gacecaggeg aecacggcaa aggeecagca 1080 gccgacccca cegcaggcaa aaaccaagca eceggeaaeg aagecgcaca gtactctaca 1140 caaaacacgg cagcaaaeaa eaeeccaeac geeaectggc aacaaaagce ceacceaaae 1200 acaaaeagea eecaeggacc cgccaaeacc tggaatgcaa Cgccagaccg eggeggcgce 1260 aecgceaace ateaegacca egcecaegca tcatttaaca aacaa 1305 «210> 43 <211> 1230 «212> ADN <213> Estreptococo <400> 43 caagaaacag acacgacgCg gacagcacgt actgtttcag aggcaaaggc Cgatttggta 60 aagcaagaca aeaaatcatc aeacacegcg aaaeatggtg acacaccaag cgccaeecca 120 gaagcaaege caattgatat gaaegeccea gcaaaaatea ataacattgc agatatcaat 180 cttatttatc ctgagaeaac accgacagea acecacgaec agaagageea eaeegccacc 240 tcaacgaaaa tagaaacacc agcaacaaac gcegecggec aaacaacage eaccgcggae 300 tcgaaaaeca accaagtttc egecgcagae eaaaaagecc eeceeaacac aaeeecggaa 360 ggtatgacac cagaagcagc aacaacgacc gceccgecaa Cgaagacaca eceeeeegcg 420 ecagcecega aaccaaaaga agcaetagea eaagageaag cegeeageca agcagcagcc 480 aaegaacagg eaecaacage tcctgtgaag Ccgaeeacce eagaagttcc ageageeaaa 540 gaggaageea aaecaaceca gacgtcagtc agecagecaa caacagcate accagccece COO gecgccgceg aaacaccagc tccagcagcc aaagcagcac cggtaagaac Cgeagcagcc 660 cecagagcgg caagegeeaa ageagtcact cccaaagcag aaactggtgc accaccagag 720 caegeaeeag ceeeagcage teetgtgact acgaceecaa eagceaeaga eageaageea 780 caagegaecg aagecaagag cgttccggea gcacaaaaag ceccaacagc aacaceggea 840 gcacaaccag ccecaacaac aaatgcagta gctgcacatc ctgaaaatgc agggeeccaa 900 ccecacgecg cagceeacaa gcgccaaccc aeggagecaa egaaeccage 960 acacaccgcg caggegaccc aggtgatcat ggtaaaggec eagcagecga eeecaecgea 1020 ggtaaaaacc aagcacccgg eaatgaagtt gcacageace cacggcagea 1080 aataaeaett catatgceac ctggcaacaa aagttccace caaatacaaa tagtatttat 1140 ggacccgcca acacetggaa egcaatgcca gaccgeggcg gcgceacegc caaecaecac 1200 gaccaegeee acgeatcatt taacaaataa 1230 <210> 44 <211> 409 «212> PRT «213-j Estreptococo «400> 44 Gln Glu Thr ?sp Thr Thr Trp Thr ?la ?rg Thr Val Ser ßlu val Lys 1 5 10 15 ?la ?sp Leu val Lyß ßln Aßp ?sn Lys Ser Ser Tyr Thr Val Lys Tyr 20 25 30 ßly ?sp Thr Leu Ser Val He Ser ßlu ?la Mee Ser He ?sp Met ?sn 63/63 35 40 45 Val Leu ?la Lys He ?sn ?sn Xle ?la ?sp Zle ?ßn Leu Zle Tyr Pro 50 SS 60 ßlu Thr Thr Leu Thr Val Thr Tyr ?sp ßln Lys Ser Bis Thr ?la Thr 65 70 75 80 Ser Mee Lys He ßlu Thr Pro ?la Thr ?sn ?la ?la ßly ßln Tbr Tbr 85 90 95 ?la Tbr Val ?sp Leu Lys Tbr ?sn ßln Val Ser val ?la ?sp ßln Lys 100 ios 110 Val Stix Leu ?ßn Thr He Ser ßlu ßly Mee Thr Pro ßlu ?la ?la Tbr 115 120 125 Tbr Zle Val Ser Pro Mee Lys Tbr Tyr Ser Ser ?la Pro ?la Leu Lys 130 135 140 Ser Lyß ßlu Val Leu ?la ßln ßlu ßln ?la Val Ser ßln ?la ?la ?la 145 150 155 160 Asn ßlu ßln Val Ser Tbr ?la Pro Val Lys Ser He Thr Ser ßlu Val 165 170 175 Pro ?la ?la Lys ßlu Glu Val Lyß Pro Tbr ßln Tbr Ser Val Ser ßln 180 185 190 Ser Thr Thr Val Ser Pro ?la Ser Val ?la ?la ßlu Thr Pro ?la Pro 195 200 205 Val ?la Lyß Val ?la Pro Val ?rg Thr Val ?la ?la Pro ?rg Val ?la 210 215 220 Ser Val Lyß Val Val Thr Pro Lys Val ßlu Tbr ßly ?la Ser Pro ßlu 225 230 235 240 His Val Ser ?la Pro ?la Val Pro Val Tbr Tbr Tbr Ser Thr ?la Tbr 245 250 255 ?sp Ser Lys Leu Gln ?la Thr ßlu Val Lys Ser Val Pro Val ?la ßln 260 265 270 Lys ?la Pro Thr ?la Tbr Pro Val ?la ßln Pro ?la S?X Tbr Thr ?ßn 275 280 28S ?la val ?la ?la His Pro ßlu ?sn ?la ßly Leu Gln Pro His Val ?la 290 295 300 ?la Tyr Lys ßlu Lys val ?la Ser Thr Tyr ßly Val ?sn ßlu Phe Ser 305 310 315 320 Thr Tyr ?rg ?la ßly ?ßp Pro Cly ?sp Bis ßly Lys ßly Leu ?la Val 325 330 335 Asp Phe Zle val ßly Lys ?sn ßln ?la Leu ßly ?sn ßlu Val ?la ßln 340 345 350 Tyr Ser Tbr ßln ?sn Mee ?la ?la ?sn ?sn Zle ser Tyr Val Zle Trp 355 360 365 ßln ßln Lys Pbe Tyr Ser ?sn Thr ?sn Ser Xle Tyr ßly Pro ?la ?n 370 375 380 Thr Trp ?sn ?la Met Pro ?sp ?rg ßly ßly Val Thr ?la ?sn Bia Tyr 385 390 395 400 ?sp Bis Val Bis Val Ser Phe ?ßn Lyß 405

Claims (48)

1. - 47 - REIVINDICACIONES 1. Un polinucleótido aislado que codifica un polipéptido que tiene al menos 70% de identidad con un segundo polipéptido que tiene una secuencia seleccionada del grupo que consiste en: SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 1 1 , SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 1 5, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 1 9, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31 , SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 y SEQ ID NO: 44 o fragmentos, análogos o derivados de las mismas.
2. 2. Un polinucleótido según la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho polinucleótido codicia un polipéptido que tienen al menos 95% de identidad con el segundo polipéptido.
3. 3. Un polinucleótido aislado que codifica un polipéptido capaz de generar anticuerpos que tienen especificidad de unión para un polipéptido que tiene una secuencia seleccionada del grupo que consiste en: SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 1 1 , SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 1 8, SEQ ID NO: 1 9, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 23, SEQ ID - 48 - NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31 , SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 y SEQ ID NO: 44 o fragmentos, análogos o derivados de las mismas.
4. 4. Un polinucleótido aislado que es complementario al polinucleótido de la reivindicación 1 .
5. 5. Un polinucleótido aislado que es complementario al polinucleótido de la reivindicación 3.
6. 6. El polinucleótido según la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho polinucleótido es ADN.
7. 7. El polinucleótido según la reivindicación 3, caracterizado porque dicho polinucleótido es ADN.
8. 8. El polinucleótido según la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho polinucleótido es ARN.
9. 9. El polinucleótido según la reivindicación 3, caracterizado porque dicho polinucleótido es ARN.
10. 10. Un polinucleótido que se produce en híbridos bajo condiciones estrictas para un segundo polinucleótido que tiene una secuencia seleccionada del grupo que consiste en: SEQ ID NO: 1 , SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 1 3, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 42 y SEQ ID NO: 43 o fragmentos, análogos o derivados de las mismas.
11. 1 1 . Un polinucleótido que se produce en híbridos bajo condiciones estrictas para un segundo polinucleótido que tiene una - 49 -secuencia seleccionada del grupo que consiste en: SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 42 y SEQ ID NO: 43.
12. 12. Un polinucleótido según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque se produce en híbridos bajo condiciones estrictas para un segundo polinucleótido que tiene la secuencia SEQ ID NO: 37.
13. 13. Un polinucleótido según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque se produce en híbridos bajo condiciones estrictas para un segundo polinucleótido que tiene la secuencia SEQ ID NO: 42.
14. 14. Un polinucleótido según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque se produce en híbridos bajo condiciones estrictas para un segundo polinucleótido que tiene la secuencia SEQ ID NO: 43.
15. 1 5. Un polinucleótido según la reivindicación 10, caracterizado porque dicho polinucleótido tiene al menos 95% de complementariedad con el segundo polinucleótido.
16. 16. Un polinucleótido según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque dicho polinucleótido tiene al menos 95% de complementariedad con el segundo polinucleótido.
17. 17. Un vector que comprende el polinucleótido de la reivindicación 1 1 , caracterizado porque dicho polinucleótido se enlaza de manera operable a una región de control de expresión .
18. 18. Un vector que comprende el polinucleótido de la reivindicación 3, caracterizado porque dicho polinucleótido se enlaza - 50 -de manera operable a una región de control de expresión.
19. 19. Una célula huésped transfectada con el vector de la reivindicación 1 7.
20. 20. Una célula huésped transfectada con el vector de la reivindicación 1 8.
21. 21 . Un proceso para producir un polipéptido que comprende cultivar una célula huésped de acuerdo a la reivindicación 19 bajo condiciones adecuadas para la expresión de dicho polipéptido.
22. 22. Un proceso para producir un polipéptido que comprende cultivar una célula huésped de acuerdo a la reivindicación 20 bajo condiciones adecuadas para la expresión de dicho polipéptido.
23. 23. Un polipéptido aislado que tiene al menos 70% de identidad con un segundo polipéptido que tiene una secuencia seleccionada del grupo que consiste en: SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 1 0, SEQ ID NO: 1 1 , SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 1 8, SEQ ID NO: 1 9, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31 , SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 y SEQ ID NO: 44 o fragmentos, análogos o derivados de las mismas. - 51 -
24. 24. El polipéptido aislado según la reivindicación 23, caracterizado porque tiene una secuencia de acuerdo a la SEQ ID NO: 39.
25. 25. El polipéptido aislado según la reivindicación 23, caracterizado porque tiene una secuencia de acuerdo a la SEQ ID NO: 44.
26. 26. Un polipéptido aislado capaz de generar anticuerpos que tienen especificidad de unión para un segundo polipéptido que tiene una secuencia seleccionada del grupo que consiste en: SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 1 0, SEQ ID NO: 1 1 , SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 1 5, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31 , SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 y SEQ ID NO: 44 o fragmentos, análogos o derivados de las mismas.
27. 27. El polipéptido aislado según la reivindicación 26, caracterizado porque tiene una secuencia de acuerdo a la SEQ ID NO: 39.
28. 28. El polipéptido aislado según la reivindicación 26, caracterizado porque tiene una secuencia de acuerdo a la SEQ ID NO: 44. - 52 - 29. Un polipéptido aislado que tiene una secuencia de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en: SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 1 0, SEQ ID NO: 1 1 , SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO:
29. 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31 , SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, y SEQ ID NO: 41 o fragmentos, análogos o derivados de las mismas.
30. 30. El polipéptido aislado según la reivindicación 29, caracterizado porque tiene una secuencia de aminoácido de acuerdo a la SEQ ID NO: 39.
31. 31 . El polipéptido aislado, que tiene una secuencia de aminoácido de acuerdo a la SEQ ID NO: 44.
32. 32. El polipéptido aislado según cualquiera de las reivindicaciones 29 a 31 , caracterizado porque se borra el residuo Met de terminal N.
33. 33. El polipéptido aislado según cualquiera de las reivindicaciones 29 a 30, caracterizado porque se borra la secuencia de aminoácido secretoria.
34. 34. Una composición de vacuna que comprende un polipéptido según cualquiera de las reivindicaciones 23 a 31 y un vehículo farmacéuticamente aceptable, diluyente o adyuvante. - 53 -
35. 35. Una composición de vacuna que comprende un polipéptido según la reivindicación 32 y un vehículo farmacéuticamente aceptable, diluyente o adyuvante.
36. 36. Una composición de vacuna que comprende un polipéptido según la reivindicación 33 y un vehículo farmacéuticamente aceptable, diluyente o adyuvante.
37. 37. Un método para el tratamiento terapéutico o profiláctico de infección bacteriana por estreptococo en un animal susceptible a infección por estreptococo que comprende administrar a dicho animal una cantidad terapéutica o profiláctica de una composición según la reivindicación 34.
38. 38. Un método para el tratamiento terapéutico o profiláctico de infección bacteriana por estreptococo en un animal susceptible a infección por estreptococo que comprende administrar a dicho animal una cantidad terapéutica o profiláctica de una composición según la reivindicación 35.
39. 39. Un método para el tratamiento terapéutico o profiláctico de infección bacteriana por estreptococo en un animal susceptible a infección por estreptococo que comprende administrar a dicho animal una cantidad terapéutica o profiláctica de una composición según la reivindicación 36.
40. 40. Un método según cualquiera de las reivindicaciones 37 a 39, caracterizado porque dicho animal es un bovino.
41. 41 . Un método según cualquiera de las reivindicaciones 37 a 39, caracterizado porque dicho animal es un humano. - 54 -
42. 42. Un método según cualquiera de las reivindicaciones 37 a 39, caracterizado porque dicha infección bacteriana se selecciona del grupo que consiste de estreptococo grupo A y estreptococo grupo B.
43. 43. Un método según la reivindicación 42, caracterizado porque dicha infección bacteriana es estreptococo grupo B.
44. 44. El uso de una composición de vacuna según la reivindicación 34 para el tratamiento terapéutico o profiláctico de infección bacteriana por estreptococo en un animal susceptible a o infectado con infección por estreptococo que comprende administrar a dicho animal una cantidad terapéutica o profiláctica de la composición.
45. 45. El uso de una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 35 a 36 para el tratamiento terapéutico o profiláctico de infección bacteriana por estreptococo en un animal susceptible a o infectado con infección por estreptococo que comprende administrar a dicho animal una cantidad terapéutica o profiláctica de la composición.
46. 46. El uso de una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 23 a 31 para la fabricación de una vacuna para el tratamiento terapéutico o profiláctico de infección bacteriana por estreptococo en un animal susceptible a infección por estreptococo que comprende administrar a dicho animal una cantidad terapéutica o profiláctica de la composición.
47. 47. El uso de una composición de vacuna según la - 55 -reivindicación 32 para la fabricación de una vacuna para el tratamiento terapéutico o profiláctico de infección bacteriana por estreptococo en un animal susceptible a infección por estreptococo que comprende administrar a dicho animal una cantidad terapéutica o profiláctica de la composición.
48. 48. El uso de una composición de vacuna según la reivindicación 33 para la fabricación de una vacuna para el tratamiento terapéutico o profiláctico de infección bacteriana por estreptococo en un animal susceptible a infección por estreptococo que comprende administrar a dicho animal una cantidad terapéutica o profiláctica de la composición. . - 56 - RESUMEN Se describen proteínas de estreptococo Grupo B (GBS) y los polinucleótidos que las codifican. Dichas proteínas son antigénicas y por lo tanto componentes de vacuna útiles para la profilaxis o terapia de la infección por estreptococo en animales. También se describen métodos recombinantes para producir los antígenos de proteína así como análisis de diagnóstico para detectar infección bacteriana por estreptococo.