MXPA00005856A - Biopulimentacion continua de telas que contienen celulosa - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un método para la biopulimentación continua de telas que contienen celulosa. Este método involucra (a) poner en contacto la tela con una celulasa que tiene baja afinidad por la celulosa y (b) sujetar la tela puesta en contacto a una temperatura alta. El tratamiento del material que contiene celulosa se puede llevar a cabo como un paso adicional a un paso combinado con la preparación química, teñido, impresión y aprestado. Este tratamiento da por resultado excelente característica de formación de pelotillas, pérdida mínima en la resistencia y peso de la tela, y mejor humectabilidad.

Description

BIOPULIMENTACION CONTINUA DE TELAS QUE CONTIENEN CELULOSA Campo de la Invención La presente invención se refiere a métodos para el tratamiento de telas que contienen celulosa para lograr mejor tacto, apariencia y resistencia a la formación de pelotillas _ de la tela, particularmente al utilizar procesos de biopulimentación continuos o semi-continuos .

Antecedentes de la Invención La mayoría de telas que contienen celulosa, recientemente fabricadas tienen un tacto que es preferiblemente duro e inflexible a menos que se traten con componentes de aprestado. Además, la superficie de la tela parece desigual debido a fibras apeluzadas, pequeñas que sobresalen de su superficie. Además, después de un período de uso relativamente corto, la formación de pelotillas aparece en la superficie de la tela, dándole una apariencia gastada, no atractiva. Por estas razones, el mejoramiento del tacto, apariencia y resistencia a la formación de pelotillas de la tela es uno de los objetivos principales de la industria textil. Sin embargo, solo se ha logrado un éxito parcial.

REF: 120695 Se puede obtener un alto grado de suavidad y lisura de la tela al utilizar hilos finos, es decir, de bajo denier en el tejido. Sin embargo, el costo resultante es alto a medida que disminuye la salida del telar proporcionalmente con el diámetro de hilo de la trama . Una forma menos costosa de asegurar un tacto suave y liso de la tela es impregnar la tela aprestada con un agente suavizante, típicamente un compuesto catiónico, algunas veces en base a silicona, tensoactivo. Sin embargo, este tratamiento no elimina las pelotillas y la péluza. Además, la tela obtiene un tacto algo graso y no es a prueba de lavado y f ecuentemente su absorbencia de humedad se reduce de manera considerable. Un método químico es la reticulación de las fibras para reducir la fibrilación (Nicolai y colaboradores, 1996, Textil e Res . J. 66(9) 575-580) . Sin embargo, este método causa una disminución en la tenacidad de la fibra. Otro método conocido para obtener una ' tela suave y lisa es el tratamiento de telas celulósicas con celulasas. Ver, Bazin y colaboradores, "Enzy atic Bio-Polishing of Cellulosic Fabric", presentado en el 58o Congreso de la Asociación de Químicos y la Industria Textil en Mulhouse, Francia (25 de Octubre de 1991) y Asferg y colaboradores, "Softening and polishing of cotton fabrics by cellulase treatment", ITB Dyeing/Printing/Finishing (Febrero de 1990). El tratamiento con celulasas de la superficie de la tela mejora la calidad de la tela con respecto al tacto, la apariencia y la resistencia a la formación de pelotillas. Los efectos más importantes son menos peluza y pelotillas, satinado/brillo incrementado, tacto de la tela mejorado, suavidad durable, incrementada y absorbencia de agua mejorada. Estos efectos son referidos como efectos de biopulimentación . Las condiciones particulares que se utilizan son importantes en la determinación del resultado del tratamiento. Muchos procesos requieren exponer la tela a la agitación mecánica para obtener resultados de biopulimentación satisfactorios. Ver, por ejemplo WO 9320278; Cavaco-Paulo y colaboradores (1994, Bi oca talysi s 10:353-360); y Cavaco-Paulo y colaboradores (1996, Textil e Res . J. 66:287-294). Sin embargo, bajo algunas condiciones, también se observa pérdida de peso significante y pérdida de resistencia. Los métodos actuales en la biopulimentación con celulasas son principalmente procesos por lotes. Los procesos continuos o semi-continuos, comunes tales como inyector de vapor con almohadilla/caj a-J no se utilizan debido a que éstos no proporcionan alta acción mecánica y utilizan únicamente volúmenes pequeños de solución y de esta manera dan por resultado una biopulimentación insuficiente y/o desigual. Por ejemplo, la biopulimentación no uniforme puede resultar del uso de un complejo de celulasas, en parte debido a que celulasas diferentes exhiben afinidades diferentes por la celulosa y de esta manera se unen diferencialmente por la tela. De esta manera, existe una necesidad en la técnica por métodos de biopulimentación efectivos que se puedan utilizar en procesos continuos o se i-continuos, convencionales .

Breve Descripción de la Invención La presente invención proporciona un método para el tratamiento de una tela que contiene celulosa para mejorar al menos una propiedad pulida de la tela. El método se lleva a cabo mediante los pasos de (a) poner en contacto la tela con una solución de aumento de volumen, acuosa que comprende una celulasa, en donde la celulasa tiene una baja afinidad por la celulosa, y (b) sujetar la tela puesta en contacto a una temperatura alta.

En forma preferible, el método se lleva a cabo en un aparato continuo o semi-continuo. En estas modalidades, el método además comprende, después del paso (a), remover la tela puesta en contacto de la solución de aumento de volumen. En las modalidades preferidas, la tela se pone en contacto con la solución de aumento de volumen durante menos de aproximadamente 5 minutos, en forma más preferente, durante menos de aproximadamente 1 minuto. Los pasos de poner en contacto y sujetar se pueden realizar secuencial o simultáneamente . La propiedad pulida puede ser uno o más de la característica de formación de pelotillas, el tacto y la apariencia. En las modalidades preferidas, los métodos de la invención dan por resultado un mejoramiento en la característica de formación de pelotillas de al menos aproximadamente 0.25; en forma más preferible, al menos aproximadamente 0.5; y en forma mucho más preferible, al menos aproximadamente 1.0. Las celulasas de baja afinidad son en forma preferente enzimas que exhiben actividad de celulosa termoestable . Típicamente, la solución de aumento de volumen contiene menos que aproximadamente 200 CMCU/ml de actividad de celulosa, en forma preferible menos que aproximadamente 100 CMCU/ml, y en forma más preferible, menos que aproximadamente 50 CMCU/ml. En otros aspectos, la invención proporciona métodos para la biopulimentación combinada y el teñido, o la biopulimentación combinado y el lavado por descarga de agua. En estas modalidades, la solución acuosa con la cual se pone en contacto la tela contiene, además de la celulosa de baja afinidad, otros componentes apropiados tales como, por ejemplo, tintes y compuestos auxiliares.

Descripción Detallada de la Invención La presente invención proporciona métodos de biopulimentación que aumentan la calidad de las telas celulósicas. Los métodos se llevan a cabo al (i) poner en contacto una tela celulósica, en forma preferente en un aparato continuo o semi-continuo, con una solución de aumento de volumen, acuosa que comprende al menos una celulasa que exhibe una baja afinidad por la celulosa y (ii) sujetar la tela puesta en contacto con la ce?ulasa a una temperatura alta. La biopulimentación como se utiliza en la presente se refiere a un tratamiento que se dirige hacia el mejoramiento de una o más de las siguientes propiedades: tacto, apariencia y resistencia a la formación de pelotillas de la tela. Los métodos permiten la acción uniforme mediante la(s) celulasa (s) en la tela y dan por resultado mejoramientos mensurables en una o más de estas propiedades, mientras que se minimiza la pérdida de peso de la tela y/o resistencia de la tela y ' es obvia la necesidad por la agitación mecánica. La presente invención minimiza la pérdida de celulasa de la solución acuosa por medio de la adsorción a la tela, y por lo cual permite el uso de equipo para la industria textil semi-continuo o continuo, convencional. Los métodos de la invención también se pueden combinar con procesos tales como la preparación química alcalina, teñido de la tela, impresión y aprestado, con lo cual se da flexibilidad incrementada en la fabricación materiales textiles. Además, el uso simultáneo de otras enzimas, tales como, por ejemplo, lipasa, proteasa, hemicelulasas, y/o pectinasas, permite la remoción simultánea de materiales celulósicos y no celulósicos. Finalmente, los métodos de la invención pueden reducir la formación de polvo de borra durante el lavado por descarga de agua y la lavandería casera de telas tratadas de acuerdo con la invención. Las telas celulósicas como se utilizan en la presente abarcan tanto la estructuras tejidas en punto de malla y tejidas hechas de fibras celulósicas, inclusive, sin limitación, algodón, lino, ramio, cáñamo, yute, rayón/viscosa, tencel/lyocell o sus mezclas, así como también telas hechas de las mezclas de fibras celulósicas y otras fibras naturales y/o artificiales tales como, por ejemplo, lana, seda, poliéster, nilón' y similares . Un aparato continuo o semi-continuo como se utiliza en la presente se refiere, sin limitación, a un equipo convencional tal como, por ejemplo, cajas de lavado de inyector de vapor con almohadilla o cajas J con almohadilla, en el cual la tela se humedece al ponerla en contacto con una solución de aumento de volumen, y, una vez que pasa a través, no está más en contacto directo con la solución de aumento de volumen. Esto se distingue del equipo en el cual la tela está en contacto continuo con una solución de aumento de volumen por todo el tratamiento (métodos de lotes) . En un aparato de lotes, la relación líquido:tela (peso de la solución utilizada por peso de la tela) es en general mayor que aproximadamente 400%, como se compara con un captador de humedad (peso de la solución absorbida por peso de tela) de entre aproximadamente 50% y aproximadamente 150% en un aparato continuo o seiai-continuo. Será entendido que la presente invención abarca el uso de cualquier configuración o aparato en el cual la tela es expuesta únicamente a la solución de aumento de volumen durante un tiempo corto relativo al tiempo de tratamiento total, con o sin almohadilla para eliminar la solución excesiva de la tela. "Temperatura alta" como se utiliza en la presente se refieire a temperaturas arriba de aproximadamente 65°C, en forma preferible aproximadamente 70°C, y en forma más preferible arriba de aproximadamente 90 °C.

Celulasas En la práctica de la presente invención, una tela celulósica se pone en contacto con una celulasa que exhibe una baja afinidad por la celulosa. Como se utiliza en la presente, una celulasa o enzima celulolítica es una enzima que hidroliza la celulosa, inclusive, sin limitación, 1, 4-ß-D-glucan celobiohidrolasa (CE 3.2.1.91), endo-ß-1, 4-D-glucan-4-glucanohidrolasa (CE 3.2.1.4) y ß-gucosidasa (CE 3.2.1.21). La actividad enzimática de la ce?ulasa (expresada como unidades de endoglucanasa o CMCU) se determina típicamente al incubar una enzima con carboximetilcelulosa (CMC) a pH 7.5 durante 20 minutos, después de lo cual la formación de azucares de reducción se determina utilizando la reacción de ácido p-hidroxibenzoico-hidrazida (PHBAH) (Lever, 1972, Anal . Bi ochem . 47 : 273-279 , con la modificación que 5 g de tartrato de potasio sodio se adiciona a 1.5 g de PHBAH) . Las enzimas que tienen una baja afinidad por la celulosa, también referidas como "celulasas de baja afinidad", se pueden identificar utilizando, por ejemplo, el método descrito en el Ejemplo 4 posterior, el cual involucra la incubación de la enzima con Avicel para permitir la unión, después de la elución y la detección de la enzima unida. Típicamente, una enzima que tiene una baja afinidad por la celulosa no exhibirá la unión al Avicel en este ensayo. El uso de enzimas que tienen mayor afinidad por la celulosa es desventajoso en un aparato continuo o semi-continuo, debido a que esto da por resultado (a) adsorción no uniforme de enzima a la tela y (B) pérdida de enzima de la solución de aumento de volumen debido a la adsorción de la tela. Una celulasa que tiene baja afinidad por la celulosa, en general carece de un dominio de unión a la celulosa, funcional (CBD) , ya sea intrínsecamente o subsecuente a la modificación de la secuencia de la celulosa. Los CBDs son secuencias de péptidos que confieren la unión de alta afinidad a la celulosa, inclusive, sin limitación, las secuencias definidas por Peter Tommer y colaboradores en "Cellulose-Binding Domains : Classification and Properties" en Enzyma ti c Degrada ti on of Insol ubl e Carbohidra tes, John N. Saddler y Michael H. Penner (Eds.)/ ACS Symposium Series, No. 618, 1996. Tomme y colaboradores clasificaron más de 120 dominios de unión a la celulosa en diez familias (designadas I-X) , y CBDs identificados en diversas enzimas tales como celulasas, xilanasas, ananasas, arabinofuranosidasas, esterasas de acetilo y quitinasas, así como también en las proteínas de unión a polisacáridos, no hidrolíticas . Las celulasas de baja afinidad de acuerdo con la presente invención pueden ya sea carecer de una secuencia de CBD completamente, o pueden contener una secuencia de CBD residual que ha sido modificada para destruir su actividad de unión a la celulosa, por supresión, adición y/o sustitución de uno o más residuos o por cualquier modificación química o enzimática de la proteína intacta; dicha secuencia modificada también es referida como un CBD no funcional. ~~ De acuerdo con la invención, una tela que ha sido puesta en contacto con una celulasa de ' baja afinidad también se expone a altas temperaturas. Por consiguiente, las celulasas utilizadas en la práctica de la invención son preferentemente termoestables, es decir, exhiben actividad enzimática de celulasa, óptima a una temperatura de al menos aproximadamente 55°C, en forma preferible al menos aproximadamente 65°C, en forma más preferible al menos aproximadamente 75°C y en forma mucho más preferible al menos aproximadamente 85°C. Cualquier celulasa de baja afinidad se puede utilizar en la practica de la invención, ya que éstas exhiben al menos aproximadamente 20% de su actividad enzimática, máxima a una temperatura arriba de 65°C. En forma preferible, la celulasa exhibe al menos aproximadamente 50% de su actividad máxima a una temperatura de aproximadamente 65 °C. Ejemplos no limitantes de las celulasas útiles en la práctica de la presente invención incluyen la celulasa de Pyrococcus cuya secuencia está representada en la IDENT. DE LA SEC. NO:l y la celulosa de Di ctyogl omus cuya secuencia está representada en la IDENT. DE LA SEC. NO: 2. Otras celulasas adecuadas incluyen, sin limitación, las celulasas derivadas de las siguientes celulasas termofílicas, las cuales han sido modificadas si es necesario para reducir su afinidad por la celulosa: ß-glucosidasa de Pyrococcus furiosus (Kengen y colaboradores, 1993, Eur . J . Bi ochem . 213:305); exoglucanasa de Thermotoga sp . (Ruttersmith y colaboradores, 1991, Bi ochem . J. 277:887); celulasas de Thermotoga marí tima (Bronnenmeier y colaboradores, 1995, Appl . Environ . Mi crobi ol . 61:1399; Mi crobi ol ogy 142:2532, 1996); ß-glucosidasa de Thermotoga mari tima (Gabelsberger y colaboradores, 1993, FEMS Mi crobi ol . Let t . 109:131); endoglucanasa B de Thermotoga neapoli tani a (Bok y colaboradores, 1994, ACS Symp . Ser . 566:54); endoglucanasa de Archebacteria (WO 97/44361); endoglucanasa de Acidothermus cell ul olyti cus (EO 96/02551); celulasa de Rhodothermus marinus (Hreggvidsson y colaboradores, 1996, Environ . Mi crobi ol . 62:3047); y una exocelulasa/endocelulasa de Caldocell um saccharolyti cum ('Saúl, Nuc . Aci ds Res . 17:439, 1989). Las celulasas se pueden obtener de su célula de origen o de un organismo recombinante que ha sido programado para sintetizar la celulasa de un gen heterólogo. En forma preferible, las celulasas son enzimas monocomponentes, es decir, son polipéptidos individuales que tienen una actividad enzimática definida que no se sintetizan como parte de un complejo multicomponente que exhibe múltiples actividades enzimáticas. Las celulasas se pueden recuperar mediante procedimientos convencionales incluyendo, pero no limitado a, la centrifugación, filtración, secado por rocío, evaporación o precipitación. Como se utiliza en la presente, la celulasa "purificada" o "aislada" es la celulasa que ha sido tratada para eliminar el material no celulósico derivado de la célula en la cual se sintetizó que se podría interferir con su actividad enzimática. Si la celulasa se secreta en el medio de cultivo, la purificación puede comprender separar el medio de cultivo de la biomasa mediante la centrifugación, filtración o precipitación, utilizando métodos convencionales. De manera alternativa, la celulasa se puede liberar de la célula huésped mediante la disrrupción de las células y la separación de la biomasa. En algunos casos, la purificación adicional se puede lograr por métodos de purificación de proteínas, convencionales, inclusive sin limitación, la precipitación de sulfato de amonio; extracción de ácido o chaotropo; intercambio iónico, tamiz molecular, y cromatografía hidrofóbica, inclusive la FPLC y HPLC; enfoque isoeléctrico, preparativo; y electrofóresis de gel de poliacrilamida, preparativa. De manera alternativa, la purificación se puede lograr utilizando la cromatografía de afinidad, inclusive la cromatografía de inmunoafinidad. Por ejemplo, las celulasas recombinantes, híbridas se pueden utilizar teniendo una secuencia de aminoácidos adicional que sirve como una "cola" de afinidad, que facilita la purificación utilizando una matriz de fase sólida, apropiada.

Otros componentes En algunas modalidades de la invención, la solución de aumento de volumen que contiene la celulasa de baja afinidad además comprende otros componentes, inclusive sin limitación, otras enzimas, así como también uno o más surfactantes, agentes de decoloración, agentes antiespumantes, sistemas formadores y similares, que aumentan el proceso de biopulimentación y/o proporcionan efectos superiores relacionados con, por ejemplo, teñibilidad y/o humectabilidad. La solución acuosa también puede contener agentes de teñido. Las enzimas adecuadas para el uso en. la presente invención incluyen sin limitación: Enzimas de diges ti ón de pectina : Las enzimas de digestión de pectina, adecuadas (algunas de las cuales se identifican por sus Números de Clasificación de Enzimas de acuerdo con las Recomendaciones (1992) de la Unión Internacional de Bioquímica y Biología Molecular (IUBMB)) incluyen, sin limitación, enzimas de degradación de pectina tales como liasa de. pectato, liasa de pectina, metil esterasa de pectina, poligalacturonasa (3.2.1.15), y ramnogalacturonasa (WO 92/19728) . Hemi cel ulasas : las hemicelulasas adecuadas incluyen sin limitación endoarabinanasa (3.2.1.99), Rombouts y colaboradores, Carb . Polymers 9:25, 1988), arabinofuranosidasa, endo-ß-1 , 4-galactanasa, endo-xilanasa (3.2.1.8), mananasa y xiloglucanasa . Amil asas : Las amilasas adecuadas incluyen a-amilasas (a-1, 4-glucan-4-glucanohidrolasa, EC 3.2.1.1), inclusive, sin limitación, Bacill us a-amilasas (las cuales en el presente contexto son llamadas "a-amilasas similares a termamilo"), inclusive a-amilasa de B . li cheniformi s , B . amyl oli quefaci ens , y B . stearothermophil us . Las a-amilasas de B . licheniformis similares a Termamilo, comercialmente disponibles son Optitherm® y Takatherm® (disponibles de Solvay) , Maxamyl® (disponible de Gist-brocades/Genencor) , Spezym AA® (disponible de Genencor) , y Keistase® (disponible de Daiwa) . La a-amilasa no similar a termamilo incluye, sin limitación, miembros de la familia de a-amilasa similar al funga ilo. Proteasas : Las proteasas adecuadas incluyen aquellas de origen animal, vegetal o microbiano, preferentemente de origen microbiano. La proteasa puede ser una proteasa de serina o una metaloproteasa, en forma preferente una proteasa microbiana, alcalina o una proteasa similar a la tripsina. Los ejemplos de las proteasas incluyen las a inopeptidasas, inclusive aminopeptidasa de prolilo (3.4.11.5), X-pro aminopeptidasa (3.4.11.9), aminopeptidasa de leucilo bacteriana (3.4.11.10), aminopeptidasa termofílica (3.4.11.12), aminopeptidasa de lisilo (3.4.11.15), aminopeptidasa de triptofañilo (3.4.11.17), y aminopeptidasa de metionilo (3.4.11.18); endopeptidasas de serina, inclusive qui otripsina (3.4.21.1), tripsina (3.4.21.4), cucumisina (3.4.21.25), brachiurina (3.4.21.32), cerevisina (3.4.21.48) y subtilisina (3.4.21.62); endopeptidasas de cisteína, inclusive papaína (3.4.22.2), ficaína (3.4.22.3), quimopapaína (3.4.22.6), asclepaína (3.4.22.7), actinidaína (3.4.22.14), caricaína (3.4.22.30) y ananaína (3.4.22.31); endopeptidasas aspárticas, inclusive pepsina A (3.4.23.1), Aspergilopepsina I (3.4.23.18), Peníoilopepsina (3.4.23.20) y Sacaropepsina (3.4.23.25); y metaloendopeptidasas, inclusive Bacilolisina (3.4.24.28) . Ejemplos no limitantes de substilisinas incluyen subtilisina BPN' , subtilisina amilosacarítica, subtilisina 168, mesentericopeptidasa de subtilisina, subtilisina Carlsberg, subtilisina DY, subtilisina' 309, subtilisina 147, termitasa, acualisina, proteasa Bacillus PB92, proteinasa K, proteasa TW7, y proteasa TW3.

Las proteasas comercialmente disponibles incluyen AlcalaseMR, SavinaseMR, Primase™, DuralaseMR, Esperase™, y KannaseMR, (Novo Nordisk A/S), MaxataseMR, Maxacal™, MaxapemMR, ProperaseMR, PurafectMR, Purafect OxP , FN2MK, y FN3 , (Genencor International Inc.). También se contemplan para el uso en la presente invención las variantes de proteasa, tales como aquellas descritas en EP 130.756 (Genentech), EP 214.435 (Henkel), WO 87/04461 (Amgen), WO 87/05050 (Genex), EP 251-446 (Genencor), EP 260.105 (Genencor), Thomas y colaboradores, (1985), Na ture 318:375-376, Thomas y colaboradores, (1987), J. Mol . Bi ol . , 193, pp . 803-813, Russel y colaboradores (1987), Na ture 328:496-500, WO 88/08028 (Genex), WO 88/08033 (Amgen), WO 89/06279 (Nove Nordisk A/S), WO 91/00345 (Nove Nordisk A/S), EP 525 610 (Solvay) y WO 94/02618 (Gist-Brocades N.V. ) . La actividad de las proteasas se puede determinar como se describe en "Methods of Enzymatic Analysis", tercera edición, 1984, Verlag Chemie, Weinheim, vol. 5. ipasas : las lipasas adecuadas (también llamadas hidrolasas de éster carboxílico) incluyen aquellas de origen bacteriano o fungal, inclusive lipasas de triacilglicerol (3.1.1.3) y Fosfolipasa A2 (3.1.1.4) . Las lipasas para el uso en la presente invención incluyen, sin limitación, las lipasas de Humi cola (sinónimo Thermomyces ) , tal como de H. lanuginosa (T. lanuginosus) como se describe en EP 258 068 y EP 305 216 de H. insol ens como se describe en WO 96/13580; una lipasa Pseudomonas, tal como de P. al cali genes o P. pseudoal cali genes (EP 218 272), P. cepacia (EP 331 376), P. st u tzeri (GB 1,372,034), P. fl uorescens , Pseudomonas sp . cepa SD 705 (WO 95/06720 y WO 96/27002), P. wisconsinensis (WO 96/12012); una lipasa de Bacill us, tal como B . subtili s (Dartois y colaboradores, Bi ochem . Bi ophys . Acta, 1131:253-360, 1993), B . s tearothermophil us (JP 64/744992) o B . pumil us (WO 91/16422) . Otros ejemplos son variantes de lipasa tales como aquellas descritas en WO 92/05249, WO 94/01541, EP 407 225, EP 260 105, WO 95/35381, WO 96/00292, WO 95/30744, WO 94/25578, WO 95/14783, WO 95/22615, WO 97/04079 y WO 97/07202. Las enzimas de lipasa comercialmente disponibles, preferidas incluyen LipolaseMR y Lipolase UltraMR, LipozymeMR, PalataseMR, NovozymMR435/ y Lecitase™ (todas disponibles de Novo Nordisk A/S) . La actividad de la lipasa se 'puede determinar como se describe en "Methods of Enzy atic Analysis", Tercera Edición, 1984, Verlag Chemie, Weinhein, vol. 4.

En forma preferente, las enzimas se derivan de microorganismos alcalofílicos y/o exhiben actividad enzimática a temperaturas elevadas. Las enzimas se pueden aislar de su célula de origen o se pueden producir recombinantemente, y se pueden modificar química o genéticamente. Típicamente, las enzimas se incorporan en la solución acuosa en un nivel de aproximadamente 0.0001% a aproximadamente 1% de proteína enzimática en peso de la composición, en forma más preferible de aproximadamente 0.001% a aproximadamente 0.5% y en forma mucho más preferente de 0.01% a 0.2%. Será entendido que la cantidad de unidades de actividad enzimática para cada enzima adicional utilizada en los métodos de la presente invención, en conjunción con una celulasa particular, se puede determinar fácilmente utilizando ensayos convencionales. Los surfactantes adecuados para el uso en la práctica de la presente invención incluyen, sin limitación, surfactantes no iónicos (patente norteamericana No. 4,565,647); aniónicos; cartiónicos y de iones anfotéricos (patente norteamericana' No. 3,929,678); los cuales están presentes típicamente en una concentración de entre aproximadamente 0.002% a aproximadamente 3% en peso, en forma preferible de aproximadamente 0.02% a aproximadamente 2% en peso. Los surfactantes aniónicos incluyen, sin limitación, alquilbencensulfonato lineal, a-olefinsulfonato, sulfato de alquilo (sulfato de alcohol graso) , etoxisulfato de alcohol, alcanosulfonato secundario, éster metílico de ácido alfa-sulfo graso, ácido alquil- o alquenilsuccínico y jabón. Los surfactantes no iónicos incluyen, sin limitación, etoxilato de alcohol, etoxilato de nonilfenol, alquilpoliglicosido, alquildi etilamina-óxido, monoetanolamida de ácido graso etoxilado, monoetanolamida de ácido graso, amida de ácido graso de polihidroxi alquilo, y derivados de N-acil N-alquilo de glucosamina ("glucamidas") . Los sistemas formadores incluyen, sin limitación, aluminosilicatos, silicatos, policarboxilatos y ácidos grasos, agentes formadores de quelatos tales como tetraacetato de etilendiamina, aminopolifosfonatos, particularmente ácido etilendiamina tetrametilen fosfónico y ácido dietilen tria ina pentametilenfosfónico, los cuales se incluyen en una concentración de entre aproximadamente 5% a 80% en peso, en forma preferible entre aproximadamente 5% y aproximadamente 30% en peso. Los sistemas de decoloración pueden comprender un agente oxidante tales como peróxido de hidrógeno, perborato, peracetato o percarbonato, el cual se puede combinar con un activador de decolorado que forma perácido tal como tetraacetiletilendiamina o nonanoiloxibencensulfonato . De manera alternativa, el sistema de decoloración puede comprender peroxiácidos de tipo de, por ejemplo, amida, imida o sulfona. Los agentes antiespumantes incluyen sin limitación siliconas (patente norteamericana No. 3,933,672; DC-544 (Dow Corning), los cuales se incluyen típicamente en una concentración de entre aproximadamente 0.01% y aproximadamente 1% en peso. Las composiciones también pueden contener agentes de suspensión de manchas, agentes de liberación de manchas, abrillantadores ópticos, abrasivos, y/o bactericidas, como se conocen convencionalmente en la técnica. Los agentes de teñido incluyen, sin limitación, los tintes descritos en Shore (ed. ) . Cell ul osi c Dyeing, 1995 (Society of Dyers and Colorists, Alden Press, Oxford) .

Métodos de Biopulimentación La presente invención proporciona métodos para la biopulimentación de tela que comprende (a) poner en contacto una tela celulósica, en forma preferente en un aparato continuo o semi-continuo, con una solución acuosa que comprende al menos una celulosa de baja afinidad y (b) sujetar la tela puesta en contacto a una temperatura alta. El paso para poner en contacto involucra exponer la tela relativamente por un corto tiempo (típicamente, durante menos de 5 minutos) a una solución de aumento de volumen que contiene la enzima, después de lo cual la tela se puede tratar con almohadillas para eliminar la solución excesiva. Esto da por resultado una captación de humedad (expresada como peso de solución:peso de la tela x 100) de entre aproximadamente 50 y aproximadamente 200%, en forma preferible entre aproximadamente 50 y aproximadamente 130%. Los pasos de poner en contacto y de sujetar se pueden realizar de manera simultánea (es decir, al poner en contacto la tela con la solución de aumento de volumen mientras que se calienta) o subsecuentemente (es decir, primero al poner en contacto la tela con la solución de aumento de volumen; aliminando opcionalmente la solución excesiva; y, subsecuentemente, sujetar la teja humedecida a una temperatura alta) . Para lograr una biopulimentación efedtiva, variarán la concentración de las enzimas en la solución acuosa (CMCU/ml), la temperatura a la cual se sujeta la tela y el tiempo de incubación total, dependiendo de: (i) la naturaleza de la tela; (ii) la celulasa de baja afinidad, particular, utilizada; (iii) el pH de la solución; (iv) el tiempo durante el cual la tela se pone en contacto con la solución de aumento de volumen; y (v) la presencia de otros componentes en la solución acuosa. La determinación de la concentración adecuada de la enzima que se utiliza, así como también la optimización de otras variables, se puede lograr utilizando únicamente la experimentación de rutina al establecer una matriz de condiciones y analizar diferentes puntos en la matriz. Por ejemplo, la concentración de las enzimas, la temperatura a la cual ocurre el contacto, y el tiempo de contacto se pueden variar, después de lo cual la fibra o material textil resultante es evaluado por (a) una o más propiedades biopulidas, tales como por ejemplo, tacto de la tela, apariencia, o resistencia a la formación de pelotillas, y, opcionalmente (b) pérdida potencial en la resistencia y/o peso de la tela. El tacto y la apariencia de la tela se evalúan por la prueba de panel, utilizando una valoración de 1-3 (de peor a mejor) .

La formación de pelotillas se puede medir utilizando cualquier método convencional, tal como, por ejemplo, de acuerdo con el protocolo de American Society for Testing and Materials, ASTM D 4970-89, utilizando un Martindale Abrasión and Pilling Tester (James H. Heal & Co. UK) . En este método, la formación de pelotillas se evalúa visualmente en una escala de 1 a 5, donde 1 significa formación de pelotillas grave y 5 significa sin formación de pelotillas. La resistencia de la tela se mide utilizando cualquier método convencional, tal como, por ejemplo, de acuerdo con el protocolo de ASTM D 3786-87, utilizando un analizador Mullen Burst (Model C, B.F. Perkins, Chicopee MA) . En la práctica de la invención, se seleccionan las condiciones en las cuales una o más propiedades biopulidas, particularmente la formación de pelotillas, muestran mejoramientos sobre los controles sin tratar, pero en las cuales la pérdida de resistencia de la tela es mínima. En forma preferente, se observa un incremento de la característica de formación de pelotillas 'de al menos aproximadamente 0.25, en forma más preferible al menos aproximadamente 0.5, y en forma mucho más preferible al menos aproximadamente 1.0. En forma preferente, la pérdida de resistencia de la tela es menor que aproximadamente 20%, en forma más preferible menos de aproximadamente 10%, y en forma mucho más preferible menos de aproximadamente 5%. Típicamente, la solución de aumento de volumen contiene una celulasa de baja afinidad en una concentración de menos que aproximadamente 200 CMCU/ml, en forma más preferible menos que aproximadamente 100 CMCU/ml, y en forma mucho más preferible menos que aproximadamente 50 CMCU/ml; a una temperatura de al menos aproximadamente 65°C, en forma preferible al menos aproximadamente 75°C, y en forma mucho más preferible al menos aproximadamente 85 °C; y a un pH de entre aproximadamente 4 y 12, en forma preferible entre aproximadamente 5 y 10, y en forma más preferible entre aproximadamente 7 y 10. Métodos de combinaci ón : La presente invención también abarca los métodos de combinación en los cuales la biopulimentación se lleva a cabo de manera simultánea con el lavado por descarga de agua y/o teñido. En estas modalidades, la solución de aumento de volumen, acuosa también contiene otros componentes, inclusive' sin limitación las enzimas descritas en la presente, así como también otros componentes, tales como, tintes (inclusive sin limitación tintes reactivos, tintes directos, tintes de azufre y tintes de tina) y auxiliares de tinte. Ver, Shore (ed.), Cell ul osi c Dyeing, 1995 (Society of Dyers and Colorists, Alden Press, Oxford) . La tela puesta en contacto luego se sujeta a una temperatura alta, lo cual da por resultado el teñido, el lavado por descarga de agua y la biopulimentación simultáneos. Los siguientes ejemplos se proponen como ilustraciones no limitantes de la presente invención.

Ejemplo 1: Biopulimentación Utilizando Celulasa Dictyoglomus El siguiente experimento se realizó para evaluar la capacidad de biopulimentación de la celulosa Dictyoglomus en un aparato continuo. Mét odos : La tela utilizada fué Knitted Fabric 460 (Test Fabrics Inc.) . la cual es entrelazada, decolorada, 100% de algodón. La tela se cortó en piezas de 20 x 30 cm que pesan aproximadamente 12.5 g cada una. El peso de cada muestra se determinó después del acondicionamiento durante al menos 24 horas a 65 ± 2% de humedad relativa y 21 ± 2°C (70 ± 3°F) . La celulasa comprendió el dominio catalítico de la celulasa Di ctyogl omus (cuya secuencia se muestra en la IDENT. DE LA SEC. NO : 2 ) la cual se formuló en 15 M de fosfato de sodio. El pH y la concentración de la enzima se mostraron en la Tabla 1 posteriormente. Las muestras se pusieron en contacto con las soluciones de enzima durante menos de 45 segundos y luego se trataron a través de una almohadilla, después de lo cual éstas se pesaron y se colgaron inmediatamente en un régimen de vapor Mathis (Tipo PSA-HTF) (Werner Mathis USA Inc. Concord, NC) . El porcentaje de solución en la tela (% de captación de humedad) y la relación de actividad de la celulasa a la tela se muestran en la Tabla 1. Las muestras de tela se trataron a 90°C y 100% de humedad relativa durante 90 minutos. Todas las muestras luego se transfirieron y se enjuagaron en agua desionizada durante a_l menos 5 minutos, después de lo cual éstas se secaron con aire. Finalmente, las muestras se acondicionaron a 65 ± 2% de humedad relativa y 21 ± 2°C (70 ± 3°F) de temperatura durante al menos 24 horas después de la evaluación. La resistencia de la tela se midió en un analizador Mullen Burst modelo C de acuerdo con ASTM D3786 - 87: Standard Test Method for Hydraulic Bursting Strength of Knitted Goods and Nonwoven Fabrics Diaphragm Bursting Strength Tester Method. Los resultados se presentaron como el promedio de al menos 8 mediciones. La característica de formación de pelotillas se midió de acuerdo con ASTM D 4970 -89: Standard Test Method for Pilling Resistance and Other Related Surface Changes of Textiles Fabrics (Martindale Pressure Tester Method) . Después de 500 revoluciones, la formación de pelotillas en la tela se evaluó visualmente contra una escala estándar 1 a 5, donde 1 indica formación de pelotillas muy grave y 5 indica sin formación de pelotillas. Los resultados se presentan como el promedio de al menos dos mediciones. Res ul tados : Los resultados se muestran en la Tabla 1 posteriormente y en la Figura 1. Cuando la concentración de las enzimas incrementó, se observó un incremento correspondiente en la característica de formación de pelotillas. El incremento en la resistencia a formación de pelotillas es mayor en pH 8.1 que en pH 6.0. Bajo las condiciones indicadas de la concentración de las enzimas y el pH, el método de la invención da por resultado una mínima pérdida de resistencia de la tela (menos que 5% de pérdida en pH 6.0 y pérdida no detectable en pH 8.1) . Una formación de pelotillas regular sobre la superficie también indicó que la tela había sido expuesta uniformemente a la celulasa. Estos resultados demuestran que la biopulimentación de una tela de algodón con celulasa Di gtyogl omus mejora significantemente la resistencia a la formación de pelotillas de la tela sin pérdida de resistencia detectable.

Ejemplo 2: Biopulimentación Utilizando Celulasa Pyrococcus El siguiente experimento se realizó para evaluar la capacidad de biopulimentación de la celulasa Di ctyogl omus en un aparato continuo. La biopulimentación se llevó a cabo esencialmente como se describe en el Ejemplo 1, excepto que el amortiguador utilizado consistió de 9.53 g de decahidrato de tetraborato de sodio disuelto en 2.5 litros de agua desionizada y ajustado a pH 9.2, y la celulasa se derivó de Pyrococcus (cuya secuencia está representada en la IDENT. DE LA SEC. NO : 1 ) . Métodos : Las muestras se trataron con almohadilla y se trataron como se describe en el Ejemplo 1. La captación de humedad de la tela fué 94%. La tela se trató durante 90 minutos a pH 9.2, 90°C, y 100% humedad relativa. Los procedimientos de enjuague, teñido, evaluación fueron los mismos como en el Ejemplo 1, excepto que la característica de formación de pelotillas se evaluaron después de 125 revoluciones. Resul tados : No se detectó pérdida de resistencia si estadísticamente significante para todas las muestras tratadas con celulasa cuando se comparó con los controles que no fueron expuestos a las enzimas. Por otra parte, la característica de formación de pelotillas se incrementa cuando la actividad de las enzimas se incrementa (Figura 2) . Estos resultados indicaron que las celulosas Pyroccocus son útiles para' la biopulimentación, mientras que causan poca pérdida de resistencia de la tela en un aparato inyector de vapor con almohadilla. También se logró mejor apariencia y tacto de la tela.

Ejemplo 3: Tratamientos de combinación Los siguientes experimentos se realizaron para evaluar los métodos de la presente invención en el lavado por descarga de agua y la biopulimentación combinados . Métodos : La tela utilizada fue Fabric 4600, la cual es una tela de algodón 100%, no lavada por descarga de agua y no decolorada. La preparación de la tela y el amortiguador fueron los mismos como se describe en el Ejemplo 2 anterior. La solución de aumento de volumen contuvo: (a) La celulasa Pyroccucus descrita en el Ejemplo 2 anterior, en una concentración de 6.12 CMCU/ml y 4.9 CMCU/g de tela; y (b) liasa de pectato termoestable en una concentración de 1.93 v-mol/ml/min . Las muestras se trataron con almohadilla y se trataron como se describe en el Ejemplo 1. La captación de humedad de la tela fué 80%. Las condiciones de tratamiento fueron pH 9.2, 90°C, humedad relativa (RH) 100%, y el tratamiento fué durante 90 min. Los procedimientos de enjuague, teñido, evaluación son los mismos como se describe en el Ejemplo 1 anterior. La velocidad de humectación se evaluó de acuerdo con el método de prueba AATCC. Se dejó caer una gota de agua de 1 cm de una pipeta alta a una superficie tensa del espécimen de la tela. El tiempo para la desaparición del agua en la superficie de la tela se registró como tiempo de humectación. Se llevaron a cabo ocho mediciones en cada espécimen y se promediaron. Resul tados : La resistencia a la formación de pelotillas de la tela mejoró después de ya sea el tratamiento con celulasa o el tratamiento combinado con celulasa y pectinasa (Tabla 2). Además, el tiempo de humectación promedio también disminuyó significantemente relativo a los controles no tratados con enzima (Tabla 3) . Estos resultados indicaron que los métodos de la invención se pueden utilizar en la biopulimentación y el lavado por descarga de agua combinados .

Tabla 2 Característica de Formación de Pelotillas (125 rev.) sin enzima Celuiasa 2 . 5 Pectinasa Celulasa+Pectinasa 2 . 5 Tabla 3 Tiempo de humectación (segundos) Promedio sin enzima 50 115 249 >300 >300 >300 >300 >300 >300 Celulasa 64 40 40 46 164 124 214 182 109 Pectinasa 61 70 65 64 94 96 95 64 104 79 Celulasa + 37 40 39 30 28 22 28 28 32 Pectinasa Ejemplo 4: Identificación de Celulasas de Baja Afinidad El siguiente método se utiliza para medir la afinidad de un polipéptido por la celulosa, a fin de identificar las celulasas de baja afinidad. Se mezclan 200 µl de una solución de enzima de 1 mg/ml con 200 µl de una suspensión de Avicel 10% (p/v) , la cual se prepara en amortiguador de fosfato de sodio O.lM, pH 7.5, y se mezcla durante 15 minutos. La mezcla se incuba durante 1 hora a 4°C, después de lo cual se sujeta a la centrifugación durante 5 minutos a 5000 rpm en una microfuga. El sobrenadante se elimina y la suspensión de Avicel se lava con 1 ml de amortiguador y se volvieron a formar en pelotillas. Finalmente, la pelotilla de Avicel se resuspende en el amortiguador de carga de SDS-PAGE y se incuba a 95 °C durante 2 minutos. Después de la centrifugación durante 5 minutos a 5000 rpm, el sobrenadante se recupera y se carga en un gel de acrilamida SDS de gradiente 4-20% (Novex) , y la electrofóresis se realiza en un Xcell mini-cell (Novex) . La electrofóresis y el teñido se realizan de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Utilizando este método, las celulasas de baja afinidad se identifican como celulasas que no dan por resultado una banda detectable en SDS-PAGE utilizando un teñido con Coomassie Blue. Todas las patentes, las solicitudes de patente y las referencias de literatura referidas en la presente por este acto se incorporan por referencia en su totalidad. Muchas variaciones de la presente invención serán sugeridas para aquellos expertos en la técnica en vista de la descripción detallada anteriormente. Tales variaciones obvias están dentro del alcance propuesto completamente de las reivindicaciones anexas. <110> Liu, Jiyin Condón, Brian < 120 > Biopulimentación Continua de Telas que Contienen Celulosa con Celulasas TermofiOlcas <130> 5464.204-WO <1S0> 60/068,274 <151> 1997-12-19 <160> 2 <170> FastSEQ fo Windows Versión 3.0 <210> 1 <211> 319 <212> FRT <213> Escherichia coli <400> 1 Met Ser Lys Lys Lys Phe Val He Val Ser He Leu .Thr He Leu Leu 1 5 10 15 Val Gln Ala He Tyr Phe Val Glu Lys Tyr His Thr Ser Glu Asp Lys 25 30 Ser Thr Ser Asn Thr Ser Ser Thr Pro Pro Gln T r Thr Leu Ser Thr 40 45 Thr Lys Val Leu Lys He Arg Tyr Pro Asp Asp Gly Glu Trp Pro Gly 50 55 60 Ala Pro He Asp Lys Asp Gly Asp Gly Asn Pro Glu Phe Tyr He Glu 65 70 75 80 He Asn Leu Trp Asn He Leu Asn Ala Thr Gly Phe Ala Glu Met Thr 85 90 95 Tyr Asn Leu Thr Ser Gly Val Leu His Tyr Val Gln Gln Leu Asp Asn • 100 105 110 He Val Leu Arg Asp Arg Ser Asn Trp Val His Gly Tyr Pro Glu He 115 120 125 Phe Tyr Gly Asn Lys Pro Trp Asn Ala Asn Tyr Ala Thr Asp Gly Pro 130 135 140 He Pro Leu Pro Ser Lys Val Ser Asn Leu Thr Asp Phe Tyr Leu Thr 145 150 155 160 lie Ser Tyr Lys Leu Glu Pro Lys Asn Gly Leu Pro He Asn Phe Ala 165 170 175 He Glu Ser Trp Leu Thr Arg Glu Ala Trp Arg Thr Thr Gly He Asn 180 185 190 Ser Asp Glu Gln Glu Val Met He Trp He Tyr Tyr Asp Gly Leu Gln 195 200 205 Pro Ala Gly Ser Lys Val Lys Glu He Val Val Pro He He Val Aßn 210 215 220 Gly Thr Pro Val Asn Ala Thr Phe Glu Val Trp Lys Ala Asn He Gly 225 230 235 240 Trp Glu Tyr Val Ala Phe Arg He Lys Thr Pro He Lys Glu Gly Thr 245 250 255 Val Thr He Pro Tyr Gly Ala Phe He Ser Val Ala Ala Asn He Ser 260 265 270 Ser Leu Pro Asn Tyr Thr Glu Leu Tyr Leu Glu Asp Val Glu He Gly 275 280 285 Thr Glu Phe Gly Thr Pro Ser Thr Thr Ser Ala His Leu Glu Trp Trp 290 295 300 He Thr Asn He Thr Leu Thr Pro Leu Asp Arg Pro Leu He Ser 305 310 315 <210> 2 <213> Dictyoglotnus sp. <400> 2 Met Lys Lys Ser Leu Leu Ser Leu He Leu He Leu Leu Leu He Thr 1 5 10 15 Leu ser Phe Ser Gln Thr Pro Lys Tyr Lys Asp Ala Phe He Leu Lys 25 30 Ala Pro Ser Ser Gly Asp Val Thr Thr Lys Asn Leu Pro Leu Thr Leu 40 45 Glu Leu Asn Phe Trp Asn He Ala Asn Tyr Glu Gly Asn Thr Trp Met SO 55 60 Ala Phe Tyr Lys Glu Glu Asp Tnr Val Glu Tyr Tyr Ala Asp He Lys 65 70 75 80 Asn He Val Leu Lys Asp Lys Asn Ser Trp Val His Gly Tyr Pro ßlu 85 90 95 Val Tyr Tyr Gly Tyr Lys Pro Trp Ala Gly His Gly Asn Ser He Glu 100 105 110 Lys Leu Ala Leu Pro Lys Lys Val Ser Glu Phe Pro Asp val Leu Phe 115 120 125 Asn Leu Lys Tyr Asn He Trp Tyr Glu Lys Asn Leu Pro He Asn Phe 130 135 140 Ala Met Glu Thr Trp He Thr Lys Glu Pro Tyr Gln Lys Thr Val Thr 145 150 155 160 Ser Gly Asp He Glu Met Met Val Trp Leu Tyr Ala Asn Arg Leu Ser 165 170 175 Pro Ala Gly Arg Lys Val Gly Glu Val Lys He Pro He He Leu Asn 180 185 190 Gly Asn ßln Lys Asp He He Trp Glu Val Tyr Leu Ser Pro Met Ser 195 200 205 Trp Asp Tyr Val Ala Tyr LyS Ser Lys Glu Asn He Leu Gln Gly Gln 210 215 220 Val Lys He Pro He Asn Glu Phe Leu Lys His Leu Arg Thr He Leu 225 230 235 240 Ala Aen Asn Pro Ser Arg He Thr Pro Glu Lys Phe Asp Gln Met Tyr 245 250 255 Val Thr Val Trp siu He Gly Thr Glu Phe Gly Asp Pro Tyr Thr Thr 260 265 270 Glu Ala Lys Phe Gly Trp Thr Phe Ser Asn Phe Asp He Glu Leu Lys 275 280 285 Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones.

Claims (24)

REIVINDICACIONES

1. Un método para el tratamiento de una tela que contiene celulosa, el método está caracterizado porque comprende (a) poner en contacto la tela con una solución de aumento de volumen, acuosa que comprende una celulasa, en donde la celulasa tiene una baja afinidad por la celulosa, y (b) sujetar la tela puesta en contacto a una temperatura alta, en donde los pasos de poner en contacto y de sujeción ocurre secuencial o simultáneamente y en donde la tela tratada exhibe al menos una propiedad pulida, mejorada relativa con la tela no tratada.

2. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque además comprende, después del paso (a) , remover la tela puesta en contacto de la solución de aumento de volumen.

3. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la tela que contiene celulosa comprende una fibra celulósica seleccionada del grupo que consiste de algodón, lino, ramio, cáñamo, yute, rayón, lyocell y combinaciones de cualquiera de los anteriores entre sí o con una fibra no celulósica .

4. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la celulasa exhibe actividad enzimática de celulasa, termoestable.

5. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la celulasa carece de un dominio funcional de unión a celulosa.

6. Un método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la celulasa se deriva de Di ctyl ogl omus o Pyrococcus .

1 . Un método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la celulasa se selecciona del grupo que consiste de un polipéptido que comprende la secuencia de la SEC ID. "- -. ;, NO:l y un polipéptido que comprende la secuencia de la SEC ID. NO: 2

8. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la celulasa es una enzima monocomponente .

9. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la solución de aumento de volumen contiene menos de aproximadamente 200 CMCU/ml de actividad de la celulasa.

10. Un método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la solución de aumento de volumen contiene menos que aproximadamente 100 CMCU/ml de actividad de la celulasa.

11. Un método de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque la solución de aumento de volumen contiene menos que aproximadamente 50 CMCU/ml de actividad de la celulasa.

12. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el pH de la solución acuosa está entre aproximadamente 4 y aproximadamente 12.

13. Un método de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque el pH de la solución acuosa está entre aproximadamente 5 y aproximadamente 10.

14. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la temperatura alta está arriba de aproximadamente 65°C.

15. Un método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque la temperatura alta está arriba de aproximadamente 75°C.

16. Un método de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque la temperatura alta está arriba de aproximadamente 85°C.

17. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el paso de poner en contacto comprende menos de aproximadamente 5 minutos.

18. Un método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque el paso de poner en contacto comprende menos de aproximadamente 1 minuto.

19. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la propiedad mejorada se selecciona del grupo que consiste de característica de formación de pelotillas, tacto y apariencia .

20. Un método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque la propiedad mejorada es la característica de formación de pelotillas y en donde el mejoramiento es un incremento de la característica de formación de pelotillas de al menos aproximadamente 0.25 relativo a la característica de formación de pelotillas de una tela no tratada.

21. Un método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque la propiedad mejorada es la característica de formación de pelotillas y en donde el mejoramiento es un incremento de la característica de formación de pelotillas de al menos aproximadamente 0.5 relativo a la característica de formación de pelotillas de una tela no tratada.

22. Un método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque la propiedad mejorada es la característica de formación de pelotillas y en donde el mejoramiento es un incremento de la característica de formación de pelotillas de_ al menos aproximadamente 1.0 relativo a la característica de formación de pelotillas de una tela no tratada.

23. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la solución de aumento de volumen además comprende una enzima seleccionada del grupo que consiste de proteasas, lipasas, amilasas, enzimas de digestión de pectina, y hemicelulosas .

24. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la solución de aumento de volumen además comprende un tinte y/o un compuesto auxiliar de tinte y en donde el método da por resultado el teñido de la tela.