MXPA00005655A - Soluciones de teriparatida estabilizadas - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a una composición farmacéuticamente estabilizada en la forma de una solución para administración parenteral de una hormona paratiroide, en donde el ingrediente terapéuticamente activo es estabilizado con un tampón y un poliol. Las preparaciones preferidas contienen en una solución acuosa, PTH(1-34) humano, manitol, un agente tampón o amortiguador acetato o tartrato y m-cresol o alcohol bencílico, como un preservativo.

Description

SOLUCIONES DE TERIPARATIDA ESTABILIZADAS CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a composiciones farmacéuticas que contienen una hormona paratiroide. Mas específicamente, la invención se relaciona con, PTH (1-34) formulaciones de solución estabilizada de teriparatida .

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La hormona paratiroide (PTH) es un producto de 84 aminoácidos, segregado por la glándula paratiroide de los mamíferos que controla los niveles del suero de calcio por medio de su actividad en varios tejidos, incluyendo los huesos. Los estudios en humanos con ciertas formas de PTH (hormona paratiroide) han demostrado un efecto anabólico sobre los huesos, y han motivado un significativo interés en su utilización para el tratamiento de osteoporosis y desórdenes óseos.

Utilizando los 34 aminoácidos N-terminal de la hormona bovina y humana por ejemplo, la cual REF. : 120694 mediante todas las historias publicadas se considera biológicamente equivalente a la hormona de longitud total, se ha demostrado en humanos que la hormona paratiroide aumenta el crecimiento óseo particularmente cuando se administra de una manera pulsátil por las vías subcutáneas e intra venosas. Una forma de PTH ligeramente diferente, PTH (1-38) humana ha demostrado resultados similares.

Las preparaciones PTH han sido reconstituidas de hormona fresca o liofilizada, e incorporan varias formas portadoras, excipiente y vehículo. La mayoría son preparadas en vehículos de base acuosa como salina, o agua acidificada típicamente con ácido acético para solubilizar la hormona. La mayoría de las formulaciones reportadas también incorporan albúmina como estabilizador (ver por ejemplo Reeve y otros., Br. Med. J., 1980, 280:6228; Reeve y otros., Lancet, 1976, 1:1035; Reeve y otros., Calcif. Tissuc Res., 1976, 21:469; Hodsman y otros., Bone Miner; 1990, 9(2): 137; Tsai y otros., J. Clin. Endocrinol Metab., 1989, 69(5):1024: Isaac y otros., Horm. Metab. Res., 1980, 12(9) :487; Law y otros., J. Clin Invest. 1983, 72(3):1106; y Hulter, J. Clin Hypertens. 1986, 2(4):360). Otras formulaciones reportadas han incorporado un excipiente como el manitol, el cual está presente o con la hormona liofilizada o en cl vehículo de reconstitución. Las formulaciones representativas de aquellas empleadas para estudios humanos incluyen una preparación de PTH(l-34) (SEC ID NO : 2 ) consistente, una vez reconstituida, de manitol, sero albúmina humana inactivada por calor, y ácido caproico (un inhibidor de proteasa) como incrementador de absorción (ver Reeve y otros., 1976, Calcif. Tissue Res., 21, Sppl., 469-477); una preparación humana PTH (1-38) reconstituida dentro de un vehículo salino (ver Hodsman y otros 1991,14(1), 67-83): y una preparación bovina PTH (1-34) en un vehículo acuoso de pH modificado con ácido acético y conteniendo albúmina. Existe también una preparación de Referencia Internacional la cual para el PTH (1-84) (SEC ID NO:l) humano consta de 100 ng de hormona envasada en ampolletas con 250 µg de sero albúmina humana y 1.25 mg de lactosa (1981), y para PTH (1-84) bovino consta de 10 µq de hormona liofilizada en ácido acético 0.01 M y manitol 0.1% p/v (ver Martindale, The Extra Pharmacoepia, The Pharmaceuticai Press, London, 29 Edición, 1989 en pag. 1338) .

Un intento reciente al mejoramiento de la estabilidad para la preparación liofolizada de h-PTH (1-34) (SEC ID NO:2) se reporta en EP 619 119-con una combinación de azúcar y cloruro de sodio. También la patente U.S. N° 5.496.801 describe una composición secada por congelamiento para la hormona natural, PTH(l-84), conteniendo manitol como excipiente y una fuente de citrato como un agente tampón o amortiguador no volátil.

La explotación comercial de la hormona paratiroide requiere el desarrollo de una formulación que sea aceptable en términos de estabilidad en almacenamiento y la facilidad de preparación. Debido a que es una proteína y por lo tanto mucho más inestable que los fármacos de peso molecular tradicionalmente pequeño, sin embargo, la formulación de la hormona paratiroide presenta retos no encontrados comúnmente en la industria farmacéutica. Además, como las demás proteínas que han sido formuladas con éxito, el PTH es particularmente sensitivo a la oxidación, deamidación e hidrólisis, y requiere que sus secuencias N-terminal y C-terminal permanezcan intactas con el fin de preservar la bioactividad .

Es un objetivo de la presente invención suministrar una preparación PTH, farmacéuticamente útil particularmente una que contenga como ingrediente activo, teriparatida, PTH ( 1-34 ) (SEC ID NO: 2) .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención provee una composición farmacéutica en forma de una solución estabilizada conteniendo una hormona paratiroide (PTH) en una cantidad terapéuticamente efectiva. La solución es estable en almacenamiento y, en su forma estéril, puede ser almacenada en viales o cartuchos listos para administración parenteral en pacientes humanos. Las ventajas de la presente solución son la eliminación de la necesidad de liofilización .

Por consiguiente, la presente invención es una solución de hormona paratiroide que incluye: (a) una cantidad terapéuticamente efectiva de una hormona paratiroide; (b) una cantidad efectiva de agente estabilizante; (c) una agente tampón o amortiguador en cantidad suficiente para mantener el pH de la composición dentro del rango de alrededor de 3-7: y (d) el balance es de agua.

Esta solución puede, si se desea, someterse a liofilización para formar un polvo secado por congelación que no contenga más del 2% de agua por peso .

Otro aspecto de la presente invención es una solución de hormona paratiroide que incluye: (a) una cantidad terapéuticamente efectiva de una hormona paratiroide; (b) un agente estabilizante de alrededor de 1 a 20 p-%; (c) un agente tampón o amortiguador en cantidad suficiente para mantener el pH de la composición dentro del rango de alrededor de 3-7 y seleccionado de una fuente de acetato o tartrato; (d) un preservativo parenteralmente aceptable desde alrededor de 0.1 a 2 p- %; y (e) el balance es de agua.

Aun otro aspecto de la presente invención es una composición farmacéutica en forma de un polvo secado por congelamiento previo a la reconstitución que incluye: (a) una cantidad terapéuticamente efectiva de una hormona paratiroide fraqmentada seleccionada de un grupo que consta de PTH (1-34), PTH(l-37), PTH(l-38) y PTH (141); (b) una cantidad efectiva de agente estabilizante; (c) un agente tampón o amortiguador en la cantidad suficiente para mantener el pH de la composición dentro de un rango aproximado de 3-7; y (d) menos del 2% de agua por peso.

DESCRIPCIÓN DETALLADA" DE LA INVENCIÓN La invención se relaciona con las soluciones de hormona paratiroide que exhibe estabilidad durante el almacenamiento en términos de composición de la hormona y la actividad.

Como ingrediente activo, ia composición o solución puede incorporar la longitud total de la forma de 84 amino?cida de la hormona paratiroide, particularmente la forma humana, hPTH (1-84) (SEC ID N0:1), obtenida o recombinantemente, por síntesis peptidica o por extracción del fluido humano. Ver, por ejemplo, Patente U.S. N° 5.208.041, incorporada al presente como referencia. La secuencia aminoácida para hPTH (1-84) es reportada por Kimura y otros en Biochem. Biophys. Res. Comm., 114(2): 493 SEC ID No. 1).

La composición o solución también puede incorporar como ingrediente activo ' fragmentos o variantes de PTH humano o PTH de ratas porcinos o bovinos que poseen actividad FTH humana como se determinó en un modelo de rata ovariectomizada, de osteoporosis reportada por Kimmel y otros., Endocrinology, 1993, 32(4):1577.

Los fragmentos de hormona paratiroide deseablemente incorporan por lo menos los primeros residuos 34N-tcrminalcs, tales como PTH(l-34) (SEC ID NO:2), PTH(l-37), PTH(l-38) y PTH(141). Las alternativas en la forma de variantes PTH incorporan de 1 a 5 substituciones aminoácidos que mejoran la estabilidad del PTH y el tiempo medio de vida tales como el reemplazo de residuos de metionina en las posiciones 8 y/o 18 con leucina u otros aminoácidos hidrofobicos que mejoran la estabilidad del PTH contra la oxidación y el reemplazo de aminoácidos en la región 25-27 con aminoácidos insensibles a la tripsina tal como la histidina u otro aminoácido que mejore la estabilidad PTH contra la proteasa. Estas formas de PTH están cubiertas bajo el término "hormona paratiroide" según se usa genéricamente aquí. La hormona preferida es la PTH (1-34) (SEC ID NO : 2 ) humana, también conocida como teriparatida . Las hormonas pueden ser obtenidas por conocidos métodos sintéticos o recombinantes, como los descritos en la Patente U.S. N° 4.086.196, incorporada aquí como refexencia .

El agente estabilizante incorporado en la solución o composición incluye un poliol el cual incluye un sacárido, preferiblemente un monosacárido o disacarido, ejemplo glucosa, trehalosa, rafinosa, o sucrosa; un alcohol de azúcar tal como manitol, sorbitol e inositol y un alcohol polihídrico tal como glicerina o propileno glicol o mezclas de los mismos. Un poliol preferido es manitol o propileno glicol. La concentración de poliol puede fluctuar desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 20 p-%, preferiblemente alrededor de 3 a 10 p-% de la solución total.

El agente tampón o amortiquador empleado en la solución o composición de la presente invención puede ser un ácido o combinación de sal la cual es farmacéuticamente aceptable y capaz de mantener la solución acuosa a un rango pH de 3 a 7 , preferiblemente 3-6. Los sistemas útiles de tampón son por ejemplo fuentes de acetato, tartrato o citrato. Sistemas preferidos de tampón son fuentes de acetato o tartrato, más preferida es una fuente de acetato. La concentración de tampón puede estar en el rango de alrededor de 2mM hasta alrededor de 500mM, preferiblemente alrededor de 2mM a lOOmM.

La solución o composición estabilizada de la presente invención puede también incluir un preservativo parenteralmente aceptable. Tales preservativos incluyen, por ejemplo, cresoles, alcohol bencílico, fenol, cloruro de benzalconio, cloruro de benzetonio, clorobutanol, alcohol feniletil, metil paraben, propil paraben, timerosal y nitrato y acetato fenilmercurico . Un preservativo preferido es m-cresol o alcohol bencílico; el más preferido es cl m-crcsol. La cantidad de preservativo usado puede fluctuar desde alrededor de 0.1 a alrededor de 2 p.%, preferiblemente alrededor de 0.3 a alrededor de 1.0 p-% de la solución total.

De esta manera, la presente invención ha provisto, por ejemplo, una solución teriparatida estabilizada que contiene manitol, acetato y m -creso con una vida en almacenamiento de más de 15 meses a °C.

Las composiciones de hormona paratiroide de la presente invención pueden, si se desea, ser provistas en una forma de polvo que contienen no más de 2% de agua por peso que es resultado de el secamiento por congelación de una solución de una hormona estéril, acuosa, preparada mezclando la hormona paratiroide seleccionada, un agente tampón o amortiguador y un agente estabilizante como se describió antes. Especialmente útil como agente tampón o amortiguador cuando se preparan polvos liofilizados es una fuente de tartrato. Los agentes estabilizantes particularmente útiles son glicina, sucrosa trehalosa, rafinosa o una mezcla de ios mismos .

La solución y composición PTH de la presente invención incorpora PTH en una cantidad médicamente efectiva, un término utilizado con referencia a las cantidades útiles o terapéuticamente o en diagnosis médico. La cantidad particular de la hormona paratiroide incorporada en la preparación puede ser predeterminada con base en el tipo del PTH seleccionado y en el uso final destinado de la preparación. En una aplicación, las preparaciones están explotadas para propósitos terapéuticos, y particularmente para el tratamiento de osteoporosis. La tTerapia de osteoporosis supone la administración de la preparación reconstituida por medio de inyección, deseablemente inyección subcutánea, en unidades de dosificación que reflejen el régimen de tratamiento prescrito, pero sean, como ejemplo, para PTH (1-34) humano (SEC ID NO : 2 ) , dentro del rango desde 25 µg PTH/mL de la solución inyectada hasta 1000 µg/mL de la solución inyectada por paciente, con los volúmenes de inyección preferiblemente desde 0.02 hasta 1.3 mL . Por consiguiente, el PTH purificado y esterilizado por filtración es incorporado preferiblemente con el agente tampón o amortiguador y el excipiente para formar una solución acuosa que contenga PTH en un rango de concentración desde 25 µg/mL hasta 1000 µg/mL, preferiblemente 100 µg/mL a 500 µg/mL, la cual es entonces filtrada estéril y llenada en un recipiente o cartucho para usarse.

Una vez que se obtiene la preparación como una solución que contiene las cantidades y concentraciones deseadas del agente tampón o amortiguador, excipiente y PTH, los viales individuales son llenados con la solución al volumen deseado. La ventaja de la presente invención es que la solución anterior puede ser preparada con agua estéril sin la necesidad de someterla a un proceso de secado por congelación.

En una realización de esta invención, las preparaciones proveen una forma que rinde una unidad de contenedor de 100-500 µg de PTH ( 1-34 ) (SEC ID NO : 2 ) humano sobre la reconstitución en alrededor de ImL (0.8-1.2 mL ) del vehículo de reconstitución, y los viales son llenados con alrededor de 1 mL de la preparación acuosa PTH, para secamiento por congelación, posterior.

En una realización preferida de la invención, la preparación PTH sujeta a secamiento por congelación comprende desde 25 hasta 1000 µg/mL de PTH (1-34) (SEC ID NO : 2 ) humano, desde 2 hasta 8% por peso de manitol, y una fuente de tartrato en una cantidad apta para tamponar la preparación hasta un rango dentro de 3.0 hasta 6.5 sobre la reconstitución en agua estéril. En realizaciones especificas de la invención, el agente tartrato de tamponamiento es incorporado en una cantidad suficiente para tamponar el pH de 3.5 a 5.5.

Además de su utilización terapéutica, la composición de PTH presente se puede formular v administrar para ayudar en los diagnósticos médicos, y particularmente para asistencia en establecer el diagnosis de hipoparatiroidismo y seudohipoparatiroidismo en pacientes hipocalcemicos . Excepto por' la dosis de PTH, la composición de la preparación PTH permanecerá como se describió aquí para uso terapéutico. Una dosis simple, intravenosamente inyectada de PTH (1-34) (SEC ID NO : 2 ) humano que sea igual a 200 Unidades Internacionales de actividad PTH es apropiada para este objetivo de diagnostico. La diagnosis se efectúa determinando el efecto del PTH administrado a los niveles de c/?MP urinarios, siendo la elevación de cAMP un indicativo de una condición de hipoparatiroidismo, en vez, que su seudoforma.

Los ejemplos siguientes son ilustrativos de ,1a invención y no son limitantes.

EJEMPLOS Ejemplo i Fueron mezclados 0.1 mg de rhPTH (1-34), 50 mg de manitol, 2.5 mg de m-cresol, 0.52 mg de ácido acético y 0.12 do acetato de sodio, fueron mezclados en una solución con 1 ml de agua destilada.

Ejemplo 2 rhPTH (1-34) 0.25 mg, manitol 45.4 mg, m- cresol 3 mg, ácido acético 0.41 mg y acetato de sodio 0.1 mg, fueron mezclados en una solución con 1 ml de agua destilada.

Las formulaciones de la presente invención, Ejemplos 1 y 2 fueron comparadas con soluciones que no contenían estabilizador, NaCl 0.9% y acetato 20 mM y acetato 10 mM como estabilizador primario. La estabilidad fue medida determinando la cantidad en % de rhPTH (1-34) (SEC ID NO : 2 ) remanente después de cierto tiempo. La medida se efectuó por medio de HPLC (cromatografía líquida de alto rendimiento) los resultados se muestran en ias Tablas 1 y 2. 10 Tabla 1 Efecto del Estabilizador Primario sobre la Estabilidad Química de rh PTH (1-34) a 50°C zv Tabla 2 Comparación de Estabilidad del rhPTH (1-34) a 30°( Ejemplo 3 El siguiente experimento se llevó a cabo para demostrar que las formulaciones de polvo liofilizado preparadas de soluciones estabilizadas de la presente invención son más estables que un control que fue preparado de PTH (1-34) y manitol solamente.

Una solución de control y soluciones para las muestras A hasta 0, fueron preparadas como se describió anteriormente con los ingredientes y concentraciones mostrados en el cuadro 3. Las soluciones fueron luego secadas por congelamiento y las formulaciones de polvo liofilizado resultantes fueron almacenadas a 40°C durante un mes. La cantidad de PTH (1-34) remanente en cada muestra fue entonces medida por medio del HPLC (cromatografía líquida de alto rendimiento), los resultados aparecen en el Tabla 3. Tabla 3 Estabilidad de las Formulaciones Liofilizadas PTH (1-34) a 40°C durante un mes • la estabilidad a los dos meses fue 96% Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante, para llevar a la práctica la citada invención es el qué resulta claro a partir de la manufactura de los objetos a los que la misma se refiera.

Habiéndose descrito ia invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes .

LISTADO DESECUENCIAS <110> Eli Lilly and Company <120> Soluciones Terlparatlda Estabiliza as <130> 3797.16 001 <140> Nueva Presentación <141> 199T-12-08 L50> 60/069,075 <151> 1997-12-09 <160> 2 <170> Patentln Ver. 2.0 <210> 1 <211> 84 <212> PRT <213> Ho o sapiens <400> 1 Ser Val Ser Glu He Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Aßn 1. 5 10 ÍS Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His 20 25 30 Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser 35 40 45 Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu 50 55 60 Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asn Val Asp Val Leu Thr Lys 65 70 75 80 Ala Lys Ser Gln <210> 2 <211> 34 <212> FRT <213> Homo sapiens <400> 2 Ser Val Ser Glu He Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 1 5. 10 15 Ser Mßt Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gín Asp Val Ki= 20 25 30 Asn Phe

Claims (25)

REIVINDICACIONES

1. Una solución de hormona paratiroide, caracterizada porque comprende! (a) una cantidad terapéuticamente efectiva de una hormona paratiroide; (b) una cantidad efectiva de un agente estabilizante; (c) un agente tampón o amortiguador en una cantidad suficiente para mantener el pH de la composición dentro del rango de alrededor 3-7; y (d) el resto de agua.

2. La solución de la reivindicación 1, caracterizada porque la hormona es una hormona fragmentada seleccionada del grupo consistente de: PTH(l-34), PTH(l-37), PTH(l-38), o PTH(1-41).

3. La solución de la reivindicación 1, caracterizada porque la hormona humana es PTH(1-34) (SEC ID NO:2) .

4. La solución de la reivindicación 1, caracterizada porque la hormona humana es PTH(1-84) (SEC ID NO: 1) .

5. La solución de la reivindicación 1, caracterizada porque el agente estabilizante es un poliol.

6. La solución de la reivindicación 5, caracterizada porque el poliol es manitol.

7. La solución de la reivindicación 5, caracterizada porque el poliol es propileno glicol.

8. La solución de la reivindicación 1, caracterizada porque el agente tampón o amortiguador es una fuente de acetato o tartrato.

9. La solución de la reivindicación 8, caracterizada porque el agente tampón o amortiguador es acetato.

10. La solución de la reivindicación 1, caracterizada porque comprende además un preservativo parenteralmente aceptable.

11. La solución de la reivindicación 10, caracterizada porque el preservativo es m-cresol o alcohol bencílico.

12. La solución de la reivindicación 11, caracterizada porque el preservativo es m-cresol.

13. Una composición conforme a la reivindicación 1, caracterizada porque la forma de un polvo secado por congelación que contiene menos del 2% de agua por peso.

14. Una solución de hormona paratiroide, caracterizada porque comprende: (a) una cantidad terapéuticamente efectiva de una hormona paratiroide; (b) un agente estabilizante desde alrededor de 1 hasta 20 p/%; (c) un agente tampón o amortiguador en una cantidad suficiente para mantener el pH de la composición dentro del rango de alrededor de 3-7 y seleccionado de una fuente acetato o tartrato; (d) un preservativo parenteralmente aceptable desde alrededor de 0_.1 a 2 p/%: y (e) el resto de agua.

15. La solución de la reivindicación 14, caracterizada porque la hormona es PTH(l-84).

16. La solución de la reivindicación 14, caracterizada porque la hormona es seleccionada del' grupo consistente de PTH(l-34), PTH(l-37), PTH(l-38), y PTH (1-41) .

17. La solución de la reivindicación 16, caracterizada porque la hormona es PTH (1-34) (SEC ID NO: 2) humana.

18. La solución de la reivindicación 14, caracterizada porque el agente estabilizante es un polio en una cantidad de alrededor de 3 hasta alrededor de 10 p/%.

19. La solución de la reivindicación 14, caracterizada porque el preservativo es m-cresol o alcohol bencílico en una cantidad de alrededor de 0.3 hasta alrededor de 1.0 p/%.

20. Una composición farmacéutica en la forma de un polvo seco por congelación, caracterizada porque comprende: (a) una cantidad terapéuticamente efectiva de una hormona paratiroide fragmentada seleccionada del grupo consistente de PTH(l-34), PTH(l-37), PTH(l-38), y PTH (1-41) ; (b) una cantidad efectiva de un agente estabilizante; (c) un agente tampón o amortiguador en una cantidad suficiente para mantener el pH de la composición dentro del rango de alrededor 3-7; y --> (d) menos de 2 p/% de agua por peso.

21. La composición de la reivindicación 20, caracterizada porque la hormona PTH (1-34) (SEC ID NO : 2 ) es humana.

22. La composición de la reivindicación 20, caracterizada porque el agente estabilizante es seleccionado del grupo consistente de glicina, manitol, sucrosa, trehalosa, rafinosa y una mezcla de los mismos.

23. La composición de la reivindicación 20, caracterizada porque cl agente de tampón es una fuente de acetato o tartrato.

24. La composición de la reivindicación 23, caracterizada porque el agente tampón o amortiguadores una fuente de tartrato.

25. La composición de la reivindicación 20, caracterizada porque el agente estabilizante está en una cantidad de alrededor de 1 hasta alrededor de 20 D-%.