MXPA00005476A - Reduccion del crecimiento del cabello - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a crecimiento de cabello de mamíferos se reduce por la aplicación a la piel, de un inhibidor de una enzima de trayectoria sintética de colesterol, tal como un inhibidor de HMG reductasa CoA o un inhibidor de la sintetasa escualeno.

Description

REDUCCIÓN DEL CRECIMIENTO DEL CABELLO CAMPO DE LA INVENCIÓN La invención se refiere a la reducción del crecimiento del cabello en mamíferos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Una función principal del cabello de mamíferos es proporcionar protección ambiental. Sin embargo, tal función ha sido ampliamente perdida en los humanos, en quienes el cabello se mantiene o remueve de varias partes . del cuerpo, especialmente por razones cosméticas. Por ejemplo, se prefiere de manera general tener cabello en el cuero cabelludo pero no en la cara. Se han empleado varios procedimientos para remover el cabello indeseado, incluyendo, la rasuración, electrólisis, cremas o lociones depiladoras, enceramiento, extracción y ant iandrógenos terapéuticos. Estos procedimientos convencionales generalmente tienen desventajas asociadas con ellos. La rasuración, por ejemplo, causa heridas y cortes, y pude conducir a una percepción de un incremento en la proporción del REF-: 120666 recrecimiento del cabello. La rasuración puede también conducir a una barba cerdosa indeseable. La electrólisis por otra parte, puede mantener un área tratada libre de cabello por periodos prolongados de tiempo, pero puede ser costoso, doloroso, y algunas veces dejar una cicatriz. Las cremas depiladoras aunque son muy efectivas, típicamente no son recomendadas para uso frecuente debido a su alto potencial irritante. El encerado y extracción pueden causar dolor, incomodidad y escasa eliminación del cabello corto. Finalmente, los ant iandrógenos. - los cuales han sido usados para tratar hírsutismo o vellosidad femenina - pueden tener efectos laterales no buscados. Se ha descubierto previamente que la proporción y carácter del crecimiento de cabello puede ser alterado por la aplicación a los inhibidores de la piel de ciertas enzimas. Estos inhibidores incluyen inhibidores de 5-alfa reductasa, descarboxilasa ornitina, descarboxilasa S-adenosíImetionina, transpeptidasa gama-glutamil y trasglutaminas . Véase por ejemplo, Breuer et al., Patente Estadounidense No. 4,885,289; Shander, Patente Estadounidense No. 4,720,489; Ahluwalia, Patente Estadounidense No. 5,095,007; Ahluwalia et al.; Patente Estadounidense No. 5,096,911; Shander et al.; Patente Estadounidense No. 5,132,293; y Shander et al.; Patente Estadounidense No. 5,143,925.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN El colesterol en las células es sintetizado de CoA acetilo de conformidad con las siguientes trayectorias bioquímicas: Acetil-CoA Acetoacetil-CoA ß-Hidroxi-ß-me 1tilglutaril-CoA HMG CoA reductasa Acido L-Mevalónico Sintasa escualeno Escualeno Colesterol Una enzima importante en la síntesis del colesterol es (hidoximetil-glutaril-reductasa CoA (HMG reductasa CoA), la cual asiste en la conversión de ß-hiroxi-ß-metilglutaril-CoA a ácido L-mevalónico. Una segunda enzima, sintasa escualeno, está involucrada en la conversión de ácido L-mevalónico a escualeno. Los inhibidores de la enzima (HMG reductasa CoA) se han encontrado por ser efectivos en la reducción del colesterol y varios son usados terapéuticamente en pacientes con riesgo incrementado a padecimientos vasculares arteroesclerótico debido a la hipercolesterolemia. Las enzimas involucradas en la trayectoria bioquímica descrita justamente, se referirán aquí como las "enzimas de trayectorias sintéticas del colesterol". Se ha encontrado ahora que el crecimiento no buscado del cabello de mamíferos (incluyendo ei humano) - particularmente el crecimiento del cabello estimulado por andrógenos -puede ser reducido mediante la aplicación a la piel de una composición que incluye un inhibidor de una enzima de trayectoria sintética del colesterol, por ejemplo (HMG reductasa CoA) y sintasa escualeno, en una cantidad efectiva para reducir el crecimiento del cabello. El crecimiento del cabello no buscado, el cual se reduce puede ser el crecimiento de cabello normal, o crecimiento de cabello que resulta de una condición de padecimiento o anormal. Loa inhibidores de (HMG CoA reductasa) incluyen fluvastatina ([R?, S ? - (E ) ] - ( ±) -7- [ 3- ( -fluorofenil-1- ( 1-metiletil- l-H-indol-2-il] -3,5-dihidroxi-6-ácido heptanóico); ácido simvastatina ( 1S-[la,3a,7ß,8ß(2S*,4S*), 8aß]]-l,2,3,7,8, 8a-hexahidro-3, 7-dimet il-8- [ 2-tetrahidro-4 -hidroxi-6-oxo-2H-piran-2-il)etil]-l-naftalenil-2, 2-dimetil-butañóico ) ; lovastatina (lS-[la(R*),3a,7ß,8ß(2S*,4S*), 8aß] ] -1,2,3,7,8, 8a-hexahidro-3 , 7-dimet il-8- [ 2-tetrah?dro-4-hidroxi-6-oxo-2H-piran-2-i71 ) etil] -l-naftalenil-2-met ilbutanoato; mevinolin ( 1 , 2 , 6, 7 , 8 , 8a-hexahidro-ß-d-dihidroxi-2 , 6-dimetil-8- ( 2 -metil-l-oxbutoxi-l-naftaleno-lactona de ácido heptanoico); ácido pravastatina ( 1S- [ la { BS* , dS* ) 2a, 6a, 8ß ( R* ) , 8aa] ] -1 , 2 , 6, 7, 8, 8a-hexahidro-ß,d, 6-trihidroxi -2-metil-1 -oxobutoxi- 1 -naf taleno-heptanoico; 4a-etil-ba-colest-7-eno-3ß, 15a-dioi ; 25-hidroxicolesterol ; 26-aminocolesterol; 27-hidroxicolesterol; 7ß-hidroxicolesterol ; rivastatina; y mevastatina; y 7-cetocolesterol ( 5-colesten-3ß-01-7-ona ) . Los inhibidores de la sintasa escualeno incluyen escualestat ina (ácido zaragózico) y análogos de escualestatina. Véase Procopiou, P.A., Baiey, E.J. et al., J. of Medicinal Chemstry, Vol. 37, 3274-3281, 1994. Los inhibidores de una enzima de trayectorias sintética del coiesterol, preferiblemente están incorporados en una composición tópica la cual incluye preferiblemente, un vehículo o portador dermatológicamente aceptable, no tóxico, el cual está adaptado para ser expandido sobre la piel. Los ejemplos de vehículos adecuados son acetona, alcoholes o crema, loción o gel, los cuales pueden efectivamente, liberar el compuesto activo. Uno de tales vehículos está descrito en la Solicitud copendiente PCT/US 93/0506A. Además, un incrementador de penetración puede ser agregado al vehículo para incrementar además, la efectividad de la formulación. La concentración del inhibidor en la composición, puede ser variado durante un rango amplio hasta una solución saturada, preferiblemente de 0.1% hasta 30% en peso o aún más; la reducción del crecimiento del cabelló se incrementa como la cantidad del inhibidor aplicado se incrementa por unidad de área de la piel. La cantidad máxima efectivamente aplicada está limitada solamente por la proporción a la cual el inhibidor penetra en la piel-Las cantidades efectivas pueden variar, por ejemplo, de 10 a 3000 microgramos o más por centímetro cuadrado de piel. La composición deberá ser tópicamente aplicada a un área seleccionada del cuerpo, a partir del cual se desea reducir el crecimiento del cabello. Por ejemplo, la composición puede ser aplicada a la cara, particularmente al área de la barba de la cara, es decir, el cachete o mejilla, cuello, labio superior, y mentón. La composición puede también ser aplicada a las piernas, brazos, torso o axila. La composición es particularmente adecuada para reducir el crecimiento de cabello.no deseado en -la mujer que padece de hirsutismo u otras condiciones. En humanos, la composición deberá ser aplicada una vez o dos veces por día, o aún más frecuentemente, por al menos tres meses para alcanzar una reducción percibida en ei crecimiento del cabello. La reducción en el crecimiento dei cabello se demuestra cuando la frecuencia de la remoción" del cabello se reduce, o el sujeto percibe menos cabello en el sitio tratado, o cuantitativamente, cuando se reduce el peso del cabello removido por rasuración (es decir, masa de cabello) .

Los hámsters Golden Syrian intactos machos, son considerados modelos aceptables para el crecimiento del cabello de la barba humana en que tales presentan órganos de flanqueo en forma oval, uno en cada lado, cada uno de aproximadamente 8 mm en diámetro mayor, en el cual crece cabello negro espeso y grueso similar al cabello de la barba humana. Estos órganos producen cabello -en respuesta a andrenógenos en el hámster. Para evaluar la efectividad de una composición que incluye un inhibidor de una enzima de trayectoria sintética del colesterol, los órganos de flanqueo de cada uno de un grupo de hámsters son depilados por la aplicación de un depilador químico a base de tioglicolato (Surgex) y/o rasurado. A un órgano de cada animal, se le aplicó 10 µl de vehículo solo una vez al día, mientras al" otro órgano de cada animal se aplica una cantidad igual de vehículo que contiene un inhibidor de una enzima de trayectoria sintética del colesterol. Después de treinta aplicaciones (una aplicación por día por cinco dias, en una semana), los órganos de flanqueo son rasurados y la cantidad del cabello recuperado (masa de cabello) de cada uno es pesado. La reducción de porcentaje del crecimiento del cabello se calcula por la substracción del valor de masa de cabello (mg) del compuesto de prueba lateral tratado del valor de masa de cabellos del vehículo lateral tratado; el valor delta obtenido es entonces dividido por el valor de masa de cabello del vehículo lateral tratado, y el número resultante es multiplicado por 100. El ensayo descrito anteriormente se referirá aquí como el ensayo ,de Hámster Golden Syrian". Las composiciones preferidas proporcionan una reducción en el crecimiento del cabello de al menos aproximadamente 15%, más preferiblemente al menos aproximadamente 40%, y más preferiblemente al menos, aproximadamente 60%, cuando se ensayó en- el ensayo de hámster Golden Syrian. Un número de inhibidores de colesterol de una trayectoria sintética se ensayaron en el ensayo de Hámster Golden Sy'rian; los resultados se proporcionan en la Tabla 1 : TABLA 1 Masa de Cabello (:mg) +SEM Compuesto Dosis Vehiculo Tratado Control % Reducción ovastatma 10% A 0.81+0.13 2.1.¿.19 63+_4 Simi ista ina 10% A 0.60+_0.11 1.62+..27 61+_7 7-cetocoleeterol 10. c 1.01+.0.1 2.23 + .33 5 _+_7 Mevastatina 5% B 1.09+0.07 1.40+..13 19+_7 - - 5% C 1.04+0.10 1-29+.13 17 + 9 hidroxicolesterol Vehículo A: 40% acetona, 40% dipropilenglicol, 20% sulfóxido de dimetilo ; Vehículo B: 100% de sulfóxido de dimetilo Vehículo C: 85% de sulfóxido de dimetilo; 10% alcohol bencílico, 5% NMP Cuatro órganos de flanqueo de hámster en folículos pilosos, se sonicaron en 250 µl de Amortiguador A ( 0.1M de sucrosa, 0.055M cloruro de potasio, 0.04M de fosfato de potasio, y 0.03M de EDTA de potasio, pH 7.2). Las células de desecho se removieron por dos centrifugaciones de 15 minutos a 10,000 x g. El sobrenadante se centrifugó a 100,000 x g por 45 minutos. Las pelotillas que contienen los microsomas se resuspendieron en Amortiguador B (Amortiguador A que contiene 10 mM en DTT) . Los microsomas resuspendidos se congelaron durante la noche a -20°C. Las microsomas se dejaron derretir a ya sea temperatura ambiente o 37 °C y un volumen igual de Amortiguador C (Amortiguador A que contiene 50% glicerol y 10 mM de DTT) se agregaron a la solución de microsoma. La suspensión se rehomogenizó con 10 pases hacia abajo de un- homogenizador de sujeción manual y se incubaron a 37°C por 60 minutos. La suspensión se diluyó en 3 partes con Amortiguador B que ha sido precalentado a 37°C por 60 minutos. La suspensión se homogenizó una segunda vez con un adicional de 10 pases hacia abajo del homogenizador de sujeción manual. Lo homogeneizado se centrifugó un tiempo final a 100,000 x g por 60 minutos, y el sobrenadante se usó en un ensayo (HMG reductasa CoA) . La actividad de reductasa se midió en la mezcla de reacción que contiene Amortiguador B con 3.5 µmol de NaCl, 5 µmól de glucosa-6-fosfato, 1 µmol NADP, 2.2 unidades de deshidrogenasa de glucosa-6-fosfató, y 150 mmol de 3-(1 C]-HMG CoA (0.34 Ci/mol), pH 7.2. La proteína' microsomal se agregó a una concentración final de 0.4-1 mg/ml. La reacción se detuvo con la adición, de 50 µl de 33% KOH. Después de 30 minutos, se agregó 25 µl de bromofenol azul (0.05%), seguido por 105-110 µl de 5N HCl, hasta que ocurre un cambio de color amarillo. La muestra se incubó nuevamente por 30. inutos al pH acídico, y las proteínas precipitadas se removieron por centrifugación. Ei sobrenadante se aplicó a una columna de formato AG-I-X8 (0.7 x lOcM) en H20. Se usaron 1.8 ml de agua para lavar la columna y descargarla. ' El __ producto de la reacción [14C] mevalonolactona, se colectó en el siguiente lavado de 5 ml, y la radioactividad se determinó por conteo de escintilación. Este ensayo se usó para medir la inhibición de la actividad (HMG reductasa CoA), en - extractos de folículos pilosos aislados a partir del órgano de flanqueo de hámster después de 1 hora después de la incubación con o sin la presencia de un inhibidor de enzima. La actividad inhibida más preferida (HMG reductasa CoA) por al menos 50%, y la actividad inhibida de los inhibidores más preferidos (HMG reductasa CoA) por al menos 80%, cuando se ensayaron a 14 µMm. Lovastatina y simivistatina se ensayaron a 14 µM y dieron casi la inhibición completa de la actividad de la enzima, 97%, y 100% respectivamente. Otras modalidades están dentro de las reivindicaciones.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro a partir de la presente descripción de la invención. Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes.

Claims (32)

REIVINDICACIONES

1. Un método para reducir el crecimiento del cabello de mamífero caracterizado porque comprende: seleccionar un área de la piel, en la cual se reduce si se desea, el crecimiento del cabello; y aplicar a dicha área de la piel, una composición dermatológicamente aceptable que comprende un inhibidor de una enzima de trayectoria colesterol en una cantidad efectiva para reducir el crecimiento del cabello.

2. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende fluvastatina .

3. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende simvastatina.

4. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende lovastatina .

5. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende mevinolina.

6. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende pravastatina .

7. El método .de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende 4-a-etil-5a-colest-7-eno-3ß, 15a-diol.

8. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende 25-hidroxicolesterol . -

9. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende 26-aminocolesterol .

10. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende 27-hidroxicolesterol . —

11. El método 'de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende rivastatina.

12. El método .de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende mevastatina.

13. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende escualestatina.

14. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor comprende un análogo de escualestatina. 1

15. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor es un inhibidor de (HMG reductasa CoA) .

16. El método -'de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho inhibidor es un inhibidor de la sintasa escualeno.

17. El método .de la reivindicación 1, caracterizado porque la concentración de dicho inhibior de dicha composición está entre 1% y 30%.

18. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque la composición proporciona una reducción en el crecimiento del cabello de al menos lb% cuando se prueba en el ensayo de hámster Golden Syrian .

19. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque la composición proporciona una reducción en el crecimiento del cabello de al menos 40% cuando se prueba en el ensayo de hámster Golden Syria .

20. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque la composición proporciona una reducción en el crecimiento del cabello de al menos 60%, cuando se prueba en -el ensayo de Hámster Golden Syrian .

21. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor se aplica a la piel en una cantidad desde 10 hasta 3000 microgramos de Ib dicho inhibidor por centímetro cuadrado de la piel.

22. El método de la reivindicación 1, caracterizado porque dicho mamífero es un humano. 20

23. El método de la reivindicación 22, caracterizado porque dicha área de la piel es en la cara de un humano. 2b

24. El método de la reivindicación 22, caracterizado porque dicha área de la piel es en una pierna del humano.

25. El método de la reivindicación 22, caracterizado porque dicha área de la piel es en un brazo del humano.

26. El método de la reivindicación 22, caracterizado porque dicha área de la piel es en una axila del humano.

27. El método de la reivindicación 22, caracterizado porque dicha área de la piel es en el torso del humano.

28. El método de la reivindicación 22, caracterizado porque dicho humano es una mujer que padece de hirsutismo.

29. Un método de reducir el crecimiento del cabello en mamíferos, caracterizado porque comprende seleccionar un área de la piel, en la cual se reduce si se desea, el crecimiento dei cabello; y aplicar a dicha área de la piel, una composición dermatológicament aceptable que comprende un inhibidor de (HMG reductasa CoA) en una cantidad efectiva para reducir el crecimiento del cabello.

30. Un método de reducir el crecimiento del cabello en mamíferos, caracterizado porque comprende seleccionar un área de la piel, en la cual se reduce si se desea, el crecimiento del cabello; y aplicar a dicha área de la piel, una composición dermatológicamente aceptable que comprende un inhibidor de sintetasa escualeno en una cantidad efectiva para reducir el crecimiento del cabelló.

31. Un método de reducir el crecimiento del cabello en mamíferos, caracterizado porque comprende seleccionar un área de la piel, en la cual se reduce si se desea, el crecimiento del cabello; y aplicar a dicha área de la piel, una composición dermatológicamente aceptable que comprende un inhibidor de una enzima de trayectoria del colesterol en lugar de (HMG reductasa CoA) y sintetasa escüaleno en una cantidad efectiva para reducir el crecimiento del cabello.

32. Un método de. reducir el crecimiento del cabello en mamíferos, caracterizado porque comprende seleccionar un área de la piel, en la cual se reduce si se desea, el crecimiento del cabello; y inhibir una enzima de trayectoria del colesterol en dicha área de la piel, suficientemente para causar una reducción en el crecimiento del cabelló en el área de la "piel.