MXPA00004885A - 2- (2-6-dioxo-3- fluoropiperidin- 3 -il)-isoindolinas substituidas y su uso para reducir niveles de tnfa - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a las 1-oxo-2-(2,6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il)-isoindolinas y 1,3-dioxo-2-(2,6-dioxo-3--fluoropiperidin-3-il)- isoindolinas reducen los niveles de citocinas inflamatorias tales como TNFalfa en un mamífero. Una modalidad típica es 1,3-dioxo-2-(2,6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -isoindolina.

Description

2-(2-6-DIOXO-3-FLUOROPIPERIDIN-3-IL) -ISOINDOLINAS SUBSTITUIDAS Y SU USO PARA REDUCIR NIVELES DE TNFa DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Esta una continuación en parte de TSTo . De Serie 08/976,140, presentada el 18 de Noviembre de 1997, la descripción de la cual se incorpora en la presente en la referencia . El factor de necrosis tumoral a, o TNFa, es una citocina que se libera principalmente por fagocitos mononucleares en respuesta a un número de inmunoestimulatorios . Es una citocina proinflamatorio clave en la cascada de inflamación provocando la producción y/o liberación de otras citocinas y agentes. Cuando se administra a animales o humanos, provoca inflamación, fiebre, efectos cardiovasculares, hemorragia, coagulación y respuestas de fase aguda similares a aquellas observadas durante infecciones agudas y estados de choque. Producción de TNFa excesiva o no regulada ha sido implicada de esta forma en una variedad de condiciones de enfermedad. Estas incluyen endotoxemia y/o síndrome de choque tóxico {Tracey et al., Nature 330, 662-664 (1987) y Hinshaw et al., Circ . Shock 30, 279-292 (1990)} caquexia {Dezuke et al., Lancet, 335 (8690), 662 (1990) } y Síndrome de insuficiencia respiratoria en adulto donde la concentración de TNFa en exceso de 12,000 pg/ml ha sido detectada en aspirados pulmonares de pacientes con ARDS (Millar et al., Lancet 2(8665), 712-714 (1989)}. La infusión sistemática de TNFa recombinante también resulta en cambios típicamente observados en ARDS (Ferrai-Baliviera et al., Arch. Surg. 124 (12), 1400-1405 (1989)}. El TNFa parece estar implicado en enfermedades de reabsorción de hueso, que incluyen artritis. Cuando se activa, los leucocitos producirán reabsorción ósea, una activida a la cual los datos sugieren que el TNFa contribuye. {Bertolini et al., Nature 319, 516-518 (1986) y Johnson et al., Endocrinology 124(3), 1424-1427 (1989)}. El TNFa también ha sido mostrado para estimular la reabsorción ósea e inhibir la formación de hueso in vitro e in vivo a través de la estimulación de formación de osteoclastos y activación combinada con inhibición de función de osteoblastos . Aunque el TNFa puede estar implicado en muchas enfermedades de reabsorción ósea, incluyendo artritis, el enlace más compilar con la enfermedad es la asociacción entre producción de TNFa por tumor o tejidos de huésped y malignidades asociadas con hipercalcemia {Calci. Tissue Int. (US) 46 (Suppl.), S3-10 (1990) } . En la reacción de huésped contra injerto, los niveles de TNFa en suero incrementados han sido asociados con complicaciones mayores después de los transplantes de médula ósea alogénica agua (Holler et al., Blood, 75(4), 1011-1016 (1990) } . La malaria cerebral es un síndrome neurológico hiperagudo letal asociado con altos niveles sanguíneos de TNFa y la complicación más severa ocurre en pacientes con malaria. Los niveles de TNFa en suero se correlacionan directamente con la severidad de la enfermedad y la prognosis en pacientes con ataques de malaria aguda (Grau et al., N. Engl. J. Med. 320 (24), 1586-1591 (1989)}. Se conoce que la angiogenesis inducida por macrófagos es mediada por TNFa. Leibovich et al. {Nature, 329, 630-632 (1987) } muestra que TNFa induce formación de vaso sanguíneos capilares in vivo en la córnea de rata y membranas corioalantoicos de pollo en desarrollo en dosis muy bajas y sugiere que el TNFa es un candidato para inducir angiogenesis en inflamación, reparación de heridas y crecimiento tumoral . La producción de TNFa también ha sido asociada con condiciones cancerosas, particularmente tumores inducidos {Ching et al., Brit. J. Cáncer, (1955) 72, 339-343, y Kock, Progress in Medicinal Chemistry, 22, 166-242 (1985)}. El TNFa también juega un papel en el área de enfermedades inflamatorias pulmonares. La deposición de partículas de sílice lleva a la silicosis, una enfermedad de disfunción respiratoria progresiva provocada por una reacción fibrótica. El anticuerpo a TNFa bloquea completamente la fibrosis de pulmón inducida por sílice en ratones {Pignet et al., Nature, 344, 245-247 (1990)}. Han sido demostrados altos niveles de producción de TNFa (en el suero y macrófagos aislados) en modelos animales de fibrosis inducida por sílice y asbestos {Bissonnette et al., Inflammation 13(3), 329-339 (1989)}. Han sido encontrados macrófagos alveolares de. pacientes con sarcoidosis pulmonares para liberar espontáneamente cantidades masivas de TNFa comparado con macrófagos de donadores normales {Baughman et al., J. Lab. Clin. Med. 115(1), 36-42 (1990)}. El TNFa está cambien implicado en la respuesta inflamatoria que sigue a la reperfusión, llamada daño de reperfusión, y es una causa principal de daño de tejido después de pérdida de flujo sanguíneo {Vedder et al., PNAS 87, 2643-2646 (1990)}. El TNFa también altera las propiedades de células endoteliales y tiene varias actividades procoagulantes, tales como producir un incremento en la actividad de procoagulación de factor de tejido y supresión de la vía de la proteína C anticoagulante así como también la disminución de la regulación de la expresión de trombomodulina {Sherry ec al., J. Cell. Biol. 107, 1269-1277 (1988) } . El TNFa tiene actividades proinflamatorias que junto con su producción temprana (durante la etapa inicial de un evento inflamatorio) hace de este un probable mediador de daño a tejido en varios trastornos importantes incluyendo pero no limitados a, infarto al miocardio, infarto y choque circulatorio. De importancia específica puede ser la expresión inducida por TNFa de moléculas de adhesión, tales como la molécula de adhesión intercelular (IC7?M) o molécula de adhesión dé leucocitos endotelial (ELAM) en células endoteliales {Munro et al., Am. J. Path. 135 (1), 121-132 (1989) } . El bloqueo de TNFa con anticuerpos anti-TNFa monoclonales ha sido mostrado para ser benéfico en artritis reumatoide {Elliot et al., Int. J. Pharmac . 1995 17(2), 141-145} . Altos niveles de TNFa se asocian con la enfermedad de Crohn {von Dullemen et al., Gastroenterology, 1995 109(1), 129-135} y beneficio clínico ha sido logrado con tratamiento de anticuerpo de TNFa Por otra parte, es ahora conocido que el TNFa es un activador potente de replicación de retrovirus incluyendo activación de HIV-1. {Duh et al., Proc. Nat . Acad. Sci. 86, 5974-5978 (1989); Poli et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 87, 782-785 (1990); Monto et al., Blood 79, 2670 (1990), clouse et al., J. Immunol. 142, 431-438 (1989); Poli et al., AIDS Res. Hum. Retrovirus, 191-197 (1992)}. El SIDA resulta de la infección de linfocitos T con el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) . Han sido identificados por lo menos tres tipos o cepas de VIH, es decir, HIV-1, HIV-2 y HIV-3. Como una consecuencia de infección de VIH, se daña la inmunidad mediada por células T e individuos infectados manifiestan infecciones oportunistas severas y/o neoplasmos inusuales. La entrada de VIH en el linfocito T requiere activación de linfocitos T. Otros virus, tales como HIV-1, HIV-2 infectan linfocitos T después de la activación de células T y tal expresión de proteína de virus y/o replicación es mediada o mantenida por tal activación de células T. Una vez que se infecta un linfocito T activado con HIV, el linfocito debe continuar ser mantenido en un estado activado para permitir la expresión de genes de VIH y/o replicación de VIH. Las citocinas, específicamente TNFa están implicadas en expresión de proteínas de VIH mediada por células T activadas y/o replicación de virus jugando un papel en mantener la activación de linfocitos T. Por lo tanto, la interferencia con la actividad de citocina tal como por prevención o inhibición de producción de citocina, notablemente TNFa en un individuo infectado por VIH ayuda en la limitación del mantenimiento de linfocitos T provocado por la infección de VIH. Los monocitos, macrófagos, y células relacionadas, tales como células de kupffer y guales, también han sido implicados en el mantenimiento de la infección de VIH. Estas células, similares a células T, son objetivos para replicación viral y ei nivel de replicación viral es dependiente del estado de activación de las células. {Poli et al., Proc. Nati. Acad. Sci., 87, 782-784 (1990)}, por lo tanto, la prevención o inhibición de producción o actividad de citocina ayuda a limitar la progresión de VIH para las células T. Estudios adicionales han identificado TNFa como un factor común en la activación de VIH in vitro y han proporcionados un mecanismo claro de acción vía una proteína regulatoria nuclear encontrada, en el citoplasma de células (Osborn, et al., PNAS 86 2336-2340). Esta evidencia sugiere que una reducción de sín esis de TNFa puede tener un efecto antiviral en infecciones con VIH, al reducir la transcripción y de esta forma la producción de virus. La replicación viral de SIDA de VIH latente en células T y líneas de macrófagos puede ser inducida por TNFa {Folks et al., PNAS 86, 2365-2368 (1989)}. Se sugiere un mecanismo molecular para la actividad inducida por virus por la capacidad de TNFa para activar una proteína regulatoria de genes (NFKB) encontrada en el citoplasma de células, que promueve la replicación de VIH a través de enlace a una secuencia de genes regulacoria viral (LTR) {Osborn et al., PNAS 86, 2336-2340 (1989)}. Se sugiere el TNFa en SIDA asociado con caquexia per TNFa elevado en suero y niveles altos de producción de TNFa espontánea en monocitos sanguíneos periféricos de pacientes { right et al., J. Immunol. 141(1), 99-104 (1988)}. El TNFa ha sido implicado en varios juegos con otras infecciones virales, tales como el virus de citomegalia (CMV) , virus de influenza, adenovirus, y familia de herpes de virus por razones similares como aquellas indicadas.

El factor nuclear KB (NFKB) es un activador transcripcional pleiotrópico (Lenardo, et al., Cell 1989, 58, 227-29) . El NFKB ha estado implicado como un activador transcripcional en una variedad de estados de enfermedad e inflamatorios y se piensa regula los niveles de citocina incluyendo pero no limitado a TNFa y también para ser un activador de transcripción de VIH (Dbaibo, et al., J. Biol. Chem. 1993, 17762-66; Duh et al., Proc. Nati. Acad. Sci. 1989, 86, 5974-78; Bachelerie et al., Nature 1991, 350, 709-12; Boswas et al., J. Acquired Immune Deficiency Syndrome 1993, 6, 778-786; Suzuki et al., Biochem. And Biophys. Res. Comm. 1993, 193, 277-83; Suzuki et al., Biochem. And Biophys. Res Comm. 1992, 189, 1709-15; Suzuki et al., Biochem. Mol. Bio. Int. 1993, 31(4), 693-700, Shakhov et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 1990, 171, 35-47; y Staal et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 1990, 87, 9943-47) . De esta forma, la inhibición de enlace a NFicB puede regular la transcripción de genes de citocina y a través de esta modulación y otros mecanismos ser útil en la inhibición de una multitud de estados de enfermedad. Los compuestos descritos en la presente pueden inhibir la acción de NFKB en el núcleo y de esta forma son útiles en el tratamiento de una variedad de enfermedades incluyendo pero no limitado a artritis reumatoide, espondilitis reumatoide, osteoartritis, otras condiciones artríticas, choque séptico, septis, choque endotóxico, enfermedad de injerto contra huésped, descho, enfermedad de Crohn, colitis ulcerativa, esclerosis múltiple, eritematosis de lupus sistémico, ENL en leprosía, VIH, SIDA, e infecciones oportunistas en SIDA. Los niveles de TNFa y NFK están influenciados por un circuito de retroalimentación recíproco. Como se indica anteriormente, los compuestos de la presente invención afectan los niveles de ambos TNFa y NFKB . Muchas funciones celulares están mediadas por niveles de adenosina, monofosfato 3 ', 5' -cíclico (AMPc). Tales funciones celulares pueden contribuir a condiciones inflamatorias y enfermedades incluyendo asma, inflamación y otras condiciones (Lowe and Cheng, Drugs of the Future, 17(9), 799-807, 1992). S? ha mostrado que la elevación de AMPc en leucocitos in lamatorios inhibe su activación y la liberación subsecuente de mediadores inflamatorios, incluyendo TNFa y NFKE . Ni. eles incrementados de AMPc también lleva a la relajación de músculo liso en vías respiratorias. Las fosfodiesterasas controlan el nivel de AMPc a través de la hidrólisis e inhibidores de fosfodiesterasas han sido mostrados para incrementar los niveles de AMPC. Disminuir niveles de TNFa y/o incrementar niveles de AMPc constituye de esta forma una estrategia terapéutica valiosa para el tratamiento de muchas enfermedades inflamatorias, infecciosas, inmunológicas o malignidades. Estas incluyen pero no están restringidas a choque séptico, sepsis, choque endotóxicc, choque hemodinámico y síndrome de sepsis, daño ' de reperfusión post isquémico, malaria, infección micobacterial , meningitis, psoriasis, falla de corazón congestiva, enfermedad fibrótica, caquexia, rechazo de injerto, cáncer, enfermedad autoinmune, infecciones oportunistas en SIDA, artritis reumatoide, espondilitis reumatoide, osteoartritis, otras condiciones artríticas, enfermedad de Crohn, colitis ulcerativa, esclerosis múltiple, eritematosis de lupus sistémico, ENL en leprosía, daño por radiación, y daño alveolar hiperóxico. Esfuerzos anteriores dirigidos a la supresión de los efectos de TNFa están en el intervalo de la utilización de esteroides tales como dexametasona y prednisolona para el uso de ambos anticuerpos policlonales y monoclonales {Beutler et al., Science 234, 470-474 (1985); WO 92/11383}. La presente invención se basa en el descubrimiento que ciertas clases de compuestas que no son polipéptido más totalmente descritos en la presente disminuyen los niveles de TNFa, incrementan los niveles de AMPc, e inhiben la fosfodiesterasa. La presente invención se relaciona de esta forma a 2- (2 , 6-dioxo-3 -fluoropiperidin-3-il) -isoindolinas, el método para reducir niveles de factor de necrosis tumoral a y otras citocinas inflamatorias en un mamífero a través de la administración de tales derivados, y composiciones farmacéuticas que contienen tales derivados.

En P"rtioul«- ^ in-ncian pertenece „ ^~ \¿, o-d?oxo-3-fi uoropiPeridin-3-i «oindoliná de la fórmula- I. en la cual Y es oxígeno o H2 y Cada uno de R1, R2, R3 y R4, independientemente de los otros, es hidrógeno, halo, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, o amino, y (b) las sales e adición de ácido de las 2- (2, 6- dioxo-3 -fluoropiperidin-3 -il) -isoindolinas que contienen un átomo de nitrógeno capaz de ser protonado A menos de que se defina de otra forma, el término alquilo denota una cadena de hidrocarburos ramificada o lineal saturada univalente que contiene de 1 a 8 átomos de carbono. Son representativos de tales grupos alquilo metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, y tert-butilo. Alcoxí se refiere a un grupo alquilo enlazado al resto de la molécula a través de un átomo de oxígeno etéreo. on representativos de tales grupo alcoxi metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutoxi, sec-butoxi y tert-butoxi . Los compuestos de la Fórmula I se usan, bajo la supervisión de profesionales calificados, para inhibir los efectos indeseables de TNFa y otras citocinas inflamatorias incluyendo IL-1, IL-5 e IL-12. Los compuestos pueden ser administrados oralmente, rectalmente, o parentalmente, solos o en combinación con otros agentes terapéuticos incluyendo antibióticos, esteroides, etc., a un mamífero en necesidad de tratamiento. Los compuestos de la presente invención también pueden ser usados tópicamente en el tratamiento o profilaxis de estados de enfermedad tópicos mediados o exacerbados por producción de TNFa excesiva, respectivamente, tal como infeecciones virales, tales como aquellas provocadas por los virus de herpes, o conjuntivitis viral, psoriasis, dermatitis atópica, etc. Los compuestos también pueden ser usados en el tratamiento veterinario de mamíferos diferentes a humanos en necesidad de prevención o inhibición de producción de TNFa. Enfermedades mediadas por TNFa para tratamiento, terapéutica o profilácticamente, en animales incluyen estados de enfermedad tales como aquellos indicados anteriormente, pero en particular infecciones virales. Ejemplos incluyen virus de inmunodeficiencia felina, virus de anemia infecciosa equina, virus de artritis caprina, vivus visna, y virus maedi, así como también otros lentivirus . Los compuestos de la Fórmula I son fácilmente preparados a través de una variedad de rutas. En una primera modalidad, el nitrógeno de anillo de una 2- (2,6-dioxopiperidin-3-il) -isoindolina de la Fórmula II se protege con un grupo de protección de amino convencional para producir una 2 - (2 , S-dloxopiperidin-3 -il) -isoindolina protegida de la Fórmula III. Esta es entonces fluorinada para producir una 2- (2, 6-dioxo-3 -fluoropiperidin-3 -il) -isoindolina protegida de la Fórmula IV, después de la eliminación del grupo de protección produce los compuestos de la Fórmula V: IV V p En las reacciones anteriores, cada uno de R1, R2, R3, R4 y Y son como se definen anteriormente y X es un grupo de protección amino. Cuan.:".: cualquiera de R1, R2, R3 , y R4 es amino, también debe ser protegido antes a la etapa de fluorinación. Los intermediarios de la Fórmula IV pueden ser aislados y purificados antes a la eliminación del grupo de protección X o puede ser convertido directamente a los compuestos finales de la fórmula V in situ. Se conocen algunos de los compuestos de la Fórmula II que son aquí utilizados como intermediarios, como por ejemplo 1 , 3 -dioxo-2- (2 , 6-dixopiperidin-3-il) -4-aminoisoindolina y 1, 3 -dioxo-2- (2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -5-aminoisoindolina . Véase, por ejemplo, Johnson, Acta Pharma. Succica, 9, 521-542 (1972) . Se describen otros en la solicitud copendiente no. De serie 08/701,494, la descripción de la cual se incorpora =n la presente para referencia, o puede ser preparada por métodos análogos a la misma. La fluorinación puede ser efectuada con una variedad de reactivos, como por ejemplo, N-fluorobencenosulfoni ida, fluoruro de perclorilo, N-fluorobencenodisulfonimida, y similares, en la presencia de una base fuerte tal como n-butil litio, hidruro de sodio, diisopropilamida de litio, bis (trimetilsilil) amida de litio, y similares. En un segundo método, un diéster de ácido glutámico apropiadamente substituido de la Fórmula VI se fluorina para producir el diéster de ácido fluoroglutámico correspondiente de la Fórmula VI. Este es entonces convertido al anhídrido de ácido glutámico fluorinado de la Fórmula VIII el cual, a su vez, se amida para producir los compuestos de la Fórmula V: En las reacciones mencionadas anteriormente, cada uno de R1, R2, R3, R4 y Y son como se dfine anteriormente y Z y Z' son alquilo inferior. Otra vez cuando cualquiera de R1, R2, R3, y R4 es amino, debe se entendido para ser protegido antes a la etapa de fluorinación. Los grupos protectores utilizados en la presente denotan grupos que generalmente no se encuentran en los compuestos terapéuticos finales pero que son introducidos intencionalmente en la misma etapa de la síntesis con el fin «vimUMI de proteger grupos que de otra manera pueden ser alterados en el curso de manipulaciones químicas. Tales grupos protectores se eliminan en una etapa tardía de la síntesis y compuestos que portan tales grupos de protección de esta forma son de importancia fundamentalmente como intermediarios químicos (aunque algunos derivados también exhiben actividad biológica) . Por consiguiente la estructura precisa del grupo protector no es crítica. Se 'describen numerosas reacciones para la formación y eliminación de tales grupos protectores en un número de trabajos incluyendo, por ejemplo, "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, London and New York, 1973; Greene, Th. W. "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley, New York, 1.981; "The peptides", Vol. I, Schróder and Lubke, Academic Press, London and New York, 1965; "Methoden der orcanischen Chemie", Houben-Weyl, 4th Edition, Vol. 15/1, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974, las descripciones de las cuales se incorporan en la presente para referencia . En cualquiera de las reacciones mencionadas anteriormente, puede ser empleado un compuesto nitro con el grupo nitro que se convierte a un grupo amino por hidrogenación catalítica. Alternativamente, un grupo amino protegido puede ser escindido para producir el compuesto amino por hidrogenación catalítica. Alternativamente, un grupo amino protegido pusde ser protegido como una amida utilizando un grupo acilo, que se elimina selectivamente bajo condiciones suaves, especialmente benciloxicarbonilo, formilo, o un grupo alcanoilo inferior que es ramificado en la posición 1 ó a al grupo carbonilo, particularmente alcanoilo terciario tal como pivaloilo, un grupo alcanoilo inferior que es substituido en la posición a al grupo carbonilo, como por ejemplo trifluoroacetilo . El átomo de carbono al cual el átomo de flúor representado está unido en los compuestos de la Fórmula I constituye un centro de q iralidad, por lo que da origen a isómeros ópticos : LA IB Ambos de las mezclas racémicas de estos isómeros y los mismos isómeros individuales, así como también los diastereómeros cuando está presente un segundo centro quiral, están dentro del alcance de la presente invención. Las mezclas racémicas pueden ser usadas como tales o pueden ser separadas en sus isómeros individuales mecánicamente como por cromatografía usando un absorbente quiral. Alternativamente, los isómeros individuales pueden ser preparados en forma quiral o separados químicamente a partir de una mezcla formando sales con un ácido o base quiral, tal como los enantiómeros individuales de ácido 10-canforsulfónico, ácido canfórico, ácido a-bromocanfórico, ácido metoxiacético, ácido tartárico, ácido díacetiltartárico, ácido málico, ácido pirrolidona-5-carboxílico, y similares, y después liberando una o ambas bases no resueltas, repitiendo opcionalmente el proceso, para obtener así ya sea o ambas substancialmente libres de la otra; es decir, en una forma que tiene una pureza óptica de >95l . La presente invención también pertenece a las sales de adición de ácido no tóxicas fisiológicamente aceptables del compuesto de la Fórmula I que contiene un grupo capaz de ser protonado, por ejemplo, amino. Tales sales incluyen aquellas derivadas de ácidos orgánicos e inorgánicos, tales como, sin limitación, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico, ácido metanosulfónico, ácido acético, ácido tartárico, ácido láctico, ácido succínico, ácido cítrico, ácido málico, ácido sórbico, ácido aconítico, ácido salicílico, ácido ftálico, ácido embónico, ácido enántico, y similares. Compuestos particularmente preferidos incluyen 1,3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-flucrc-piperidin-3 -il) -isoindolina, 1,3-dioxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4-aminoisoindolina, 1 , 3 -dio c-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -5-aminoisoindolina, 1 , 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4 -metilisoindolina, 1, 3-dioxo-2- (2,6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -il) -5-metilisoindolina, l-oxo-2-(2, 6-dioxo-3-fluoro-piperidin-3-il) -5-metilisoindolina, 1-oxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluorcpiperidin-3-il) - -metilisoindolina, 1, 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3 -fiacrcpiperidin-3-il) -4,5,6,7-tetrafluoroisoindolina, 1, 3-dioxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4,5,5, 7- tetracloroisoindolina, 1,3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -il) -4, 5,6,7-tetrametilisoindolina, 1, 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3- luoropiperidin-3-il) -4,5, 5 , 7- tetrametoxiisoindolina, 1-oxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -5 -aminoisoindolina, 1-oxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -isoindolina, 1-oxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidir.-j-il) -4 -aminoisoindolina, 1-oxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4,5,6,7-tetrafluoroisoindolina, l-oxo-2- (2, 6-dioxo-3 -fluoropiperidin-3-il)-4,5,6, 7 -tetracloroisoindolina, l-oxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4, 5, , 7-tetrametilisoindolina, y 1-oxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4,5,6,7-tetrametoxiisoindolina. De estas, 1, 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3- fluoropiperidin-3-il) -isoindolina y l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3- fluoropiperidin-3-il) -isoindolina son particularmente preferidas . Formas de dosis orales incluyen tabletas, cápsulas, 5 pastillas, y formas far.r'aréuticas comprimidas de forma similar que contienen de 1 a 100 mg de fármaco por unidad de dosis. Las soluciones sa] nías isotónicas que contienen de 20 a 100 mg/ml, pueden ser usadas por administración parental que incluye rutas intramusculares, intratecal, intravenosa e 0 intraarterial de administración. La administración rectal puede ser efectuada a través del uso de supositorios formulados de portadores convencionales tales como grasa de cocoa. Composiciones farmacéuticas comprenden de esta 5 forma uno o más compuestos de las Fórmulas I asociados con por lo menos ur. £: - arr, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable. Al preparar tales composiciones, los ingredientes actives son mezclados usualmente con o diluidos por un excipiente o encerrados dentro de tal 0 portador que puede estar en la forma de una cápsula o sáchete. Al preparar tales composiciones, los ingredientes activos son usualmente mezclados con o diluidos por un excipiente o encerrados dentro de tal portador que puede estar en la forma de una cápsula o sáchete . Cuando el 5 excipiente sirve como un diluyente, este puede ser un ¡ 5J"'> r "?; material sólido, semisólido, o líquido que actúa como un vehículo, portador o medio para el ingrediente activo. De esta forma, las ccmp...'.ic: cues pueden estar en la forma de tabletas, pildoras, polvos, elixiris, suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes, cápsulas de gelatina suave y dura, supositorios, soluciones inyectables estériles y polvos empacados estériles. Ejemplos de excipientes adecuados incluyen lactosa, dextrosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidón, goma acacia, silicato de calcio, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidinona, celulosa, agua, jarabe, y metilcelulosa, las formulaciones pueden incluir adicionalmente agentes lubricantes tales como talco, estearato de magnesio y aceite mineral, agentes de humectado, emulsificantes y agentes de suspensión, agentes de conservación tales como metii y propilhidrobenzoatos, agentes endulzantes o agentes saborizantes. Las composiciones preferentemente se formulan en una forma de dosis de unidad, lo que significa unidades físicamente discretas como una dosis unitaria, o una fracción predeterminada de una dosis unitaria a ser administrada en un régimen de dosis simp_e z *?úitiple a sujetos humanos y otros mamíferos, cada unidad que contiene una cantidad predeterminada de material activo calculado para producir el efecto terapéutico deseada en asociación con un excipiente farmacéutico adecuado. Las composiciones pueden ser formuladas para proporcionar un liberación inmediata, sostenida o retrasada de ingrediente activo después de la administración al paciente al emplear procedimientos bien conocidos en la técnica . Los ensayes intr.uncaosorbentes enlazados a enzima para TNFa pueden ser realizados en una forma convencional. PBMC se aisla de donadores normales por centrifugación de densidad Ficoll-Hyp ue . .-e cultivan las células en RPMI complementado con 10% de A? + suero, L-glutamina 2 mM, penicilina 100 U/ml, y estreptomicina 100 mg/ml. Se disuelven los fármacosen dimetilsulfóxido (Sigma Chemical) y se hacen diluciones adicionales en RPMI complementado. La concentración de dimetilsulfóxido final en la presencia o ausencia de fármaco en las suspensiones de PBMC es 0.25% en peso. Se ensayan los fármacos en diluciones de medio log que inician a 50 mg/mi . S agregan ios fármacos a PBMC (10s células/ml) en placas de 96 pozos una hora antes de la adición de LPS. PBMC 'lO3 células/ml) en la presencia o ausencia de fármaco se estimulan por tratamiento con 1 mg/ml de LPS de Salmonella minneso ta R95 (List Biological Labs, Campbel, CA) . Las células se incuban entonces a 37° por 18-20 horas. Se cosechan ios sobrenadantes y se ensayan inmediatamente para niveles de TNFa o se mantienen congelados a -70 °C (por no más de 4 días) hasta que se ensayan. La concentración de TNFa en el sobrenadante se determina por equipo Elisa de TNFa humano. La concentración de TNFa en el sobrenadante se determina por equipos de ELISA de TNFa humano (ENDOGEN, Boston, MA) de acuerdo con las direcciones del fabricante . Los siguiente -tlerrylos servirán para tipificar además la naturaleza de esta invención pero no deben ser construidos como una limitación en el alcance del mismo, el alcance que se define e laip.ente por las reivindicaciones anexas . EJEMPLO 1 Se agrega una suspensión agitada de l,3-dioxo-2- (2 , 6-dioxopiperidin-3 -il) isoindolina (2.0 g, 7.75 mmoles) y dicarbonato de di tert-butilo (1.86 g, 8.52 mmoles) en 1,4-dioxano (3.0 ml) , dimetilaminopiridina (1.00 mg) a temperatura ambiente. Se agita la solución a temperatura ambiente por 18 hor¿e y . - elimina entonces el solvente in vacío. Se agita el residuo con éter (30 ml) por 30 minutos, se filtra, y se lava con éter para dar 1, 3 -dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiceridin-3 -íl) isoindolina. Una corrida típica produce 2.5 g (90% de rendimiento) de 1 , 3 -dioxo-2- (l-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3-il) isoindolina, p.f. 274.0-275.0 °C; XH NMR (DMS0-de) ; 5 1.47 (s, 9H, CH3), 2.08-2.15 (m, 1H," CHH) , 2.50-2.70 (m, 1H, CHH), 2.59-2.32 ( , 1H, CHH), 3.02-3.17 (m, 1H, CHH), 5.42 (dd, J=5.4, 12.9 Hz , 1H, NCH) , 7.90-7.94 (m, 4H, Ar) ; 13CNMR (DMSO-d6) d 21.11, 27.03, 30.69, 48.77, 86.01, 123.52, 131.16, 134.99, L43.28, 166.99, 167.55, 169.99; Análisis calculado para C13H1SN0S : C, 60.33; H, 5.06; N, 7.82. Encontrado: C, 60.01; H, 5.21; '.T, 7.47, EJEMPLO 2 Similar al proce imi;nto del Ejemplo 1, se obtienen respectivamente de 1, 3 -dic o-2- (2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -4,5,6, 7-tetrafluoroisoindo!ina, 1, 3 -dioxo-2- (2,6-dioxopiperidin-3-il) -4,5,6, 7- etraclcroisoindolina, 1,3-dioxo-2- (2, 6-dioxopiperidin-3-il) -4,5,6,7-tetrametilisoindolina, 1, 3 -dioxo-2- (2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -4,5,6, 7-tetrametoxiisoindo!ina, l-oxo-2- (2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -isoindolina, 1 -oxo- - (2 , 'i -dioxopiperidin-3 -il) -4,5,6,7-tetrafluoroisoindolina, l-oxo-2- (2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -4,5,6, 7-tetracloroiscindclina, l-oxo-2- (2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -4 , 5, 6 , 7-tetrame iii3oir.dc.iina, 1, 3-dioxo-2- (2,6-dioxopiperidin-3 -il) - -metilisoindolina, 1, 3-dioxo-2- (2, 6-dioxopiperidin-3 -il) -5-metilisoindolina, l-oxo-2- (2, 6-dioxopiperidin-3 -il) -5 -metilisoindolina, l-oxo-2- (2,6-dioxopiperidin-3-il) -4-metilisoindolina, y l-oxo-2- (2, 6-dioxopiperidin-3-il) -4,5,6, 7- etrametoxiisoindolina, los compuestos 1 , 3-dioxo-2- (l-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3-il) -4,5,5, 7- tetrafluoroisoindolina, 1,3-dioxo-2- (l-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxipiperidin-3-il) -4, 5, 6, 7-tetracloroisoindolina, 1, 3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiteridin-3 -il) -4,5,6,7-tetrametilisoindolin , - , -dioxo-2- ( 1-tert -buotixcarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3 - :J - , 5 , - 7 - tetrametoxiisoindolina, 1-oxo-2- (1-tert-butoxicar cn: i -.2 , 6-dioxopiperidin-3 -il) -isoindolina, ^ -oxo-2- (l-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3 -il) - - £ , 5 , i - ~. =trafluoroisoindolina, l-oxo-2- (1-tert-butoxicarbonil - 2 , S - ?io:'opiperidin-3-il) -4,5,6,7-tetracloroisoindolina, l-o:-:o-2- (1- ert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3 -il) -4,5,5.7- t-. rame ilisoindolina, 1,3-dioxo-2- (1-tert-buto:; care nil-2 , 6-dioxo-piperidin-3-il) -4-metilisoindolina, 1 , -_.ic:.;-2 - (1- tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxo-piperidin-3 -il ) -5-metilisoindolina, l-oxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , 6 -dioxo-pipe idin-3 -il) -5 -metilisoindolina, l-oxo-2- (l-tert-buto icarbt il-2, 6-dioxopiperidin-3-il) -4-metilisoindolina y -•_- .: -2- (1- tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxiperidin-3-il) -4,5,6, 7- tet arnetoxiisoindolina . Cantidades equivalentes similarmente utilizadas de 1, 3-dioxo-2- (2, 6-dio::. _µ-- -3-il) - -aminoisoindolina, 1, 3-dioxo-2- (2, 6-dioxopiperidin-3-il) -5-aminoisoindolina, 1-oxo-2- (2, 6-dioxopiperidin-3-il) -5-aminoisoindolina y l-oxo-2-(2, 6-dioxopiperidin-3-il) -4-ami noisoindolina, pero utilizando 3.72 g de dicarbonato de di- ert-butilo en el procedimiento del Ejemplo 1, se obtienen respectivamente 1 , 3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , 6-?ioxopiperidin-3-il) -4- (1-tert-butoxicarbonilamino) -isoindol ina, 1, 3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , ß-dioxopiperidin-3-il) -5- (1-tert-butoxicarbonilamino) - l-oxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2, 6-di ocir- ri?in-3-il) -5- (1-tert -butoxicarbonila ino) - isoincolina y l-oxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3 -il) -4- (1-tert-butoxicarbonilamino) -isoindolina. EJEMPLO 3 Se agrega a una solución agitada de 1, 3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , 5 -dioxcpiperidin-3 -il) isoindolina (1.0 g, 2.8 mmoles) en tetrahidrofurano (10 ml) n-butil litio (1.2 ml, 3.00 mmoles, 2.5 :7; a -"''.• °C. Después de 20 minutos, se agrega N-fluorobencensulfonimida (0.8 g, 3.2 mmoles) a la mezcla. Se permite a la mezcla alcanzar la temperatura ambiente y se elimina entonces el solvente in vacuo. Seagita el residuo con acetato de etilo (10 ml) y ácido clorhídrico 1 N (10 ml) por una hora. 3e separa la capa or'ganica y se elimina el solvente in vacuo para producir 1, 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -il) -isoindolina que puede además ser purificada a través de crcnutografías . En una forma similar, se agrega bis (trimetilsilil) amida de litio (24 ml , 24 mmoles, 1.0 M) a una solución agitada de 1 , 3 -aioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3-ii) isoindolina (7.16 g, 20 mmoles) en tetrahidrofurano (250 ml) a -40 °C. Después de una hora, se agrega N-fluorobencensulfonimida (7.6 g, 24 mmoles) a la mezcla. Se permite a is :r. -,-tcla alcanzar la temperatura ambiente y se' mantiene iurui •• la r.cche. Se agita la solución con acetato de etilc .. ". cloruro de amonio acuoso (100 ml, sat.) y agua (17. -.-.1 . -. separa ia capa acuosa y se extrae con acetato ->~ ~^ .' !200 mi). Se lavan las capas orgánicas combinadas e:n ayu:-; 100 mi: , salmuera (100 ml) , y se seca en sulfato de sodi . Se retira el solvente in vacuo. Se purifica el residuo per cromatografía (gel de sílice) para dar el intermediario 1 , 3 -dio:: -2- (1- tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -il) i^oindolina . Una corrida . tíeic produce 700 mg (10% de rendimiento) de 1,3- iitxc -1 - ' 1 -tert-butoxicarbonil -2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-ii' isoindolina, p.f. 156.0-157.0°C; XH NMR (CDC13) ; d 1.62 ,s, .7Í, 2KZ ) , 2.41-2.72 (m, 2H, CH2) , 2.87-3.03 (m, 1H, CHH), 3.52-2.55 (m, 1H, CHH), 7.81-7.97 ( , 4H, Ar) ; 13C NMR (CDC1 o 26.20 (2J -;--= 27 Hz) , 27.39, 28.98 (3JC-F=7.5 Hz) , 67.15, 92 .50 MC-?= 218 Hz), 124.31, 130.84, 135.29, 147.17, 161.30 rJ,:-F=28 Kz), 165.57; /Análisis calculado para ClßHi7N2?5F: C, 57.45; H, 4.55; N, 7.44; F, 5.05.- Encontrado: C, 57.73; K. 4.62; M, 7.23; F, 4.94. El inter;:: .ni , io 1, 3 -dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2, 6-diexo-3- flucropiperidin-3 -il) isoindolina puede ser convertido a 1 , 3 -dioxo-2- (2 , ß-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) isoindolina al agitar una solución de 1, 3-dioxo-2- (2, 6-dioxo-3-£lucropiperidin-3-il) isoindolina al agitar una solución de ^ , 3 -dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxo-3-flüoropirspd?u-3 - il) isoindolina (620 mg, 1.64 mmoles) y cloruro de l_ irt.: no en 1,4 -dioxano (15 ml, 4 M, 60 mmoles) a temperatura am.-ie.ire por 3 días. Se retira el solvente in vacuo y • -- a-_.a -. residuo con éter (10 ml) por una hora y se fil;r.:. c s: dar 1, 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il' _.e?:.c,tli'.a. Una corrida típica produce 350 mg (77% de renditriento, d. 1, 3 -dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) isoindolina, p.f. 223.3-230.0°C; R NMR (DMSO-dg); d 2.44-2.61 (m, 2H, CH2) , 2 3 - 1 . 3 i, 1H, CHH), 3.24-3.31 (m, 1H, CHH), 7.93 (brs, 4H, ?_- , ll.± (s, 1K, NH) ; 13C NMR (DMSO-de) d 26.91 (2JC-F= 27 Hz), 23.41 • ;JC-F=8 Hz), 93.57 (JC-F= 211 Hz) , 123.75, 135.29 (3JC-F=; HZ - L--..70 (3JC-F=6 Hz) , 166.21 (4JC.F= 1 Hz) , 171.58 í'!77 " • , ; Análisis calculado para C13H9N2?4F: + 0.2 H20 : : 7-.. • H, 3.39; N, 10.01; F, 6.79. Encontrado: C, 55.74; :•. 3.:C; M, 9.86; F, 7.18. EJEMPLO 4 Se sigue el procedimiento del Ejemplo 3, substituyendo, sin embargo, 0.76 g de N-fluorobencenodisulfommida para los 0.8 g de N-fluorobencenosulfoni'-io . = or io tanto se obtiene 1,3-dioxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluorcv. icertiin -_,-il) isoindolina que puede además ser purificada ? tr.-ré.? de cromatografía de columna. EJEMPLO 5 Se agrega a una solución agitada de 1, 3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3-il) isoindolina (1.0 g, 2.8 mmoles) en tetrahidrofurano (10 ml) diisopropilamida de litio (1.5 ml, 3.0 mmoles, 2M) . Después de tres minutos, se burbujea fluoruro de perclorilo (5 mmoles) en la mezcla. Se permite a la mezcla alcanzar la temperatura ambiente y se elimina entonces el solvente in vacuo. Se agita el residuo con acetato de etilo (10 ml) y ácido clorhídrico 1 N (10 ml) por una hora. Se separa la capa orgánica y se retira el solvente in vacuo para producir 1, 3 -dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) isoindolina que puede además ser purificada a través de cromatografía. EJEMPLO 6 Se agrega a una solución agitada de 1, 3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3-il) isoindolina (1.0 g, 2.8 mmoles) en dimetilformamida (10 ml) hidruro de sodio (112 mg, 2.8 mmoles, 60%) a temperatura ambiente. Después de minutos, se burbujea el fluoruro de perclorilo (5 mmoles) en la mezcla. Se agita la mezcla con cloruro de metileno (10 ml) y ácido clorhídrico ÍN (10 ml) por una hora. Se separa la capa orgánica y se retira el solvente in vacuo para producir 1, 3-dioxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperídin-3-il) isoindolina que puede además ser purificada a través de cromatografía. EJEMPLO 7 Se agrega a una solución agitada de 1, 3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3-il) isoindolina (1.0 g, 2.8 mmoles) y tetrametiletileno diamina (0.5 g, 4.3 mmoles) en tetrahidrofurano (10 ml) n-butil litio (1.2 ml, 3.0 mmoles, 2.5 M) a -78 °C. Después de 30 minutos, se agrega N-fluorobencensulfonimida (0-8 g, 3.2 mmoles) a la mezcla. Se permite a la mezcla alcanzar la temperatura ambiente y el solvente se elimina entonces in vacuo. Se agita el residuo con acetato de etilo (10 ml) y ácido clorhídrico 1 N (10 ml) por una hora. Se separa la capa orgánica y se retira el solvente in vacuo para producir 1 , 3 -dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) isoindolina que puede además ser purificada a través de cromatografía de columna. EJEMPLO 8 Iniciando con cada una de 1, 3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -4- (1-tert-butoxicarbonilamino) -isoindolina, 1 , 3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperid¿n-3 -il) -5- (1-tert-butoxicarbonilamino) -isoindolina, 1, 3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -4,5,6,7-tetrafluoroisoindolina, l,3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil- 2,6-dioxopiperidin-3-il) - , 5 , 6 , 7-tetracloroisoindolina, 1,3- dioxo-2- (l-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3-il) - 4,5,6, 7-tetrametilisoindolina, 1, 3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3-il) -4,5,6,7- tetrametoxiisoindolina, l-oxo-2- (l-tert-butoxicarbonil-2 , 6- dioxopiperidin-3-il) -5- (1-tert-butoxicarbonilamino) -isoindolina, l-oxo-2- (l-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -isoindolina, l-oxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3-il) -4- (1-tert-butoxicarbonilamino) -isoindolina, l-oxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3-il) -4 , 5 , 6 , 7-tetrafluoroisoindolina, l-oxo-2- (l-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -4,5,6, 7-tetracloroisoindolina, l-oxo-2- (l-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -4,5,6,7-tetrametilisoindolina, l,3-dioxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3-il) -4 -metilisoindolina, 1, 3-di-oxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -4-metilisoindolina, 1, 3 -di-oxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3-il) -4 -metilisoindolina, 1, 3 -di-oxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -5-metilisoindolina, l-oxo-2- (l-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -5-metilisoindolina, l-oxo-2- (1-tert-butoxicarbonil-2, 6-dioxopiperidin-3-il) -4 -metilisoindolina y l-oxo-2- (l-tert-butoxicarbonil-2 , 6-dioxopiperidin-3-il) -4,5, 6, 7-tetrametoxiisoindolina, se obtienen respectivamente siguiendo los procedimientos de Ejemplos 3, 4, 5, 6, ó 7, l,3-dioxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4-aminoisoindolina, 1 , 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -5-aminoisoindolina, 1, 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4,5,6, 7 -tetrafluoroisoindolina, 1,3-dioxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoro-piperidin-3-il) -4,5,6,7- tetracloroisoindolina, i, 3-dioxo-2- (2, 6 -dioxo-3-fluoro-piperidin-3-il)--4, 5, 6 , 7-tetrametilisoindolina, i, 3-dioxo-2- (2, 6 -dioxo-3-fluoropiperidin-3 -il) -4,5,6,7-teetrametoxiisonindolina, l-oxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4, 5, 6, 7- tetrametoxiisoindolina, l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -il) -5 -aminoisoindolina, 1-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -il) - isoindolina, 1-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -il) -4 -aminoisoindolina, 1-oxo-2- (2, 6-dioxo-3 - fluoropiperidin-3 -il) -4,5,6,7-tetrafluoroisoindolina, l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4, 5, 6, 7 -tetracloroisoindolina, l-oxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluorpiperidin-3-il) -4,5,6, 7-tetrametilisoindolina, 1,3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoro-piperidin-3-il) -4-metilisoindolina, 1, 3 -dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluorspiperidin-3-il) -5 -metilisoindolina, l-oxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -5-metilisoindolina, l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) - -metilisoindolina, y l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3 - fluoropiperidin- 3 -il) -4,5,6, 7- tetrametoxiisoindolina. EJEMPLO 9 Parte A. Se calienta una solución de ácido L-glutámico dimetil éster (2.6 g, 14.8 mmoles), nitrito de isoamilo (2.13 ml , 15.9 mmoles) y ácido acético (0.22 ml) en benceno (150 ml) llevándola a reflujo por una hora. Se lava la solución con ácido sulfúrico acuoso 1 N, agua, solución de carbonato ácido de sodio saturado, agua y salmuera (50 ml de cada uno) . Se retira el solvente in vacuo para producir 2-diazopentano-1, 5-dioato de dimetilo que puede ser purificado además por cromatografía por columna. Parte B. Se agrega a una solución fría de 5 ml de fluoruro ácido al 70% en piridina y 1.2 g (6.7 mmoles) de N-bromosuccinimida en 10 ml de éter una solución de 2-diazopentano-1, 5-dioato de dimetilo (1.1 g, 5.9 mmoles) en éter (10 ml) a 0°C. Se agita la mezcla a 0°C por 30 minutos. Se lava la solución con agua (20 ml) , salmuera (20 ml) y se seca en sulfato de sodio. Se retira el solvente in vacuo para producir 2-bromo-2-fluoropentano-1, 5-dioato de dimetilo que puede además ser purificado por cromatografía de columna. Parte C. Se calienta una mezcla de 2-bromo-2-fluoropentano-1, 5-dioato de dimetilo (1.0 g, 3.8 mmoles) y ftalimida de potasio (0.79 g, 4.3 mmoles) en dimetilformamida (10 ml) a 80°C por 3 horas. Se retira el solvente in vacuo y se agita el residuo con acetato de etilo (50 ml) por 10 minutos. Se lava la capa orgánica con agua y salmuera (20 ml cada uno) , y se seca en sulfato de sodio. Se retira el solvente in vacuo para producir 2- (1, 3-dioxoisoindolina-2-il) -2-fluoropenta-1, 5-dioato de dimetilo que puede además ser purificado por cromatografía de columna. Parte D. Se calienta una mezcla de 2- (1,3-dioxoindolin-2-il) -2-fluoropenta-1, 5-dioato de dimetilo (1.3 g, 4.0 mmoles), metanol (10 ml) y ácido clorhídrico 4 N (10 ml) a 80 °C por una hora. Se retira el solvente in vacuo para producir ácido 2-fluoro-2- (1, 3 -dioxoisoindolin-2-il) -propano-1, 3 -dicarboxílico. Este se disuelve en anhídrido acético (20 ml) y se calienta la solución a reflujo por 30 minutos. Este se disuelve en anhídrido acético (20 ml) y se calienta la solución a reflujo por 30 minutos. Se retira el solvente in vacuo para producir anhídrido de ácido 2-fluoro-2- (1, 3-dioxoisoindolin-2-il) -propano-1 , 3 -dicarboxílico que se mezcla con amoniaco en metanol (35 ml , 2 M) y se agita a temperatura ambiente por 18 horas. Se retira entonces el solvente in vacuo y se agita el residuo con cloruro de metileno (50 ml) por 10 minutos. Se lava la capa orgánica con agua y salmuera (40 ml, cada uno) y se seca en sulfato de sodio. Se retira el solvente in vacuo y se calienta el residuo a reflujo con diimidazol carbonilo (0.65 g, 4 mmoles) y dimetilaminopiridina (50 mg) en tetrahidrofurano (30 ml) por 18 horas. Se aisla la 1, 3 -dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) isoindolina con extracción con acetato de etilo y además se purifica por cromatografía. EJEMPLO 10 Se calienta una mezcla agitada de ácido L-glutámico dimetil éster (2.0 g, 11.4 mmoles) y anhídrido ftálico (1.7 g, 11.4 mmoles) en ácido acético (30 ml) llevando a reflujo por una hora. Se retira el solvente in vacuo para producir 2-(1, 3-dioxoisoindolin-2-il) -pentano-1, 5-dioato de dimetilo que se además purifica a través de cromatografía. Se agrega a una solución agitada de 2- (1,3-dioxoisoindolin-2-il) -pentano-1, 5-dioato de dimetilo (1.0 g, 3.3 mmoles) y tetrametiletilendiamina (0.5 g, 4.3 mmoles) en tetrahidrofurano (10 ml) n-butil litio 2.5 M (1.6 ml, 4 mmoles) , a -79 °C. Después de 30 minutos, se agrega N-fluorobencensulfonimida (1 g, 3.2 mmoles) a la mezcla que entonces se permite alcanzar la temperatura ambiente. Se retira el solvente in vacuo y se agita el residuo con cloruro de metileno (100 ml) por 10 minutos. Se lava la capa orgánica con agua y salmuera (30 ml cada uno) , y se seca en sulfato de sodio. Se retira el solvente in vacuo para producir 2- (1,3-dioxoisoindolin-2-il) -2-fluoropentano-1, 5-dioato de dimetilo que se purifica además pro cromatografía y se convierte a 1,3 -dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3 -fluoropiperidin-3 -ill isoindolina como se describe anteriormente en la parte D del Ejemplo 9. EJEMPLO 11 Se calienta una mezcla agitada de bromofluoroacetato de etilo (1.0 g, 5.4 mmoles) y ftaluro de potasio (1.0 g, 5.4 mmoles) en dimetilformamida (10 ml) a 80°C por 3 horas. Se agita la mezcla con éter (50 ml) y agua (50 ml) y se lava entonces la capa orgánica con agua y salmuera (30 ml, cada uno), y se seca en sulfato de sodio. Se retira el solvente in vacuo para dar 2- (1,3-dioxoisoindolin-2-il) -2-fluoroacetato de etilo que además se purifica a través de cromatogratía. Se ' agrega a una solución agitada de 2- (1,3-dioxoisoindolin-2-íl) -2 -fluoroacetato de etilo (0.80 g, 3.2 mmoles) en tetrahidrof ranc >,3ü ml) diisopropilamida de litio (1.7 ml, 3.4 mmoles, 2M) a -78 aC. Después 30 min., se agrega acrilato de t-butilo (0.42 g, 3.2 mmoles) a la mezcla que se permite alcanzar la temperatura ambiente. Se retira el solvente in vacuo y se agita el residuo con cloruro de metileno (50 ml) y agua í30 ral) y se seca en sulfato de sodio. Se retira el solventa in vacuo para dar 4-(l,3-dioxoisoindolin-2-il) - i -flu jro-4-etoxicarbonilbutanoato de tert-butilo que se purifica además por cromatografía de columna. Se agita una solución de 4- (1, 3-dioxoisoindolin-2-il) -4-fluoro-4-etoxicarboni.7fc-utanoato de tert-butilo (1.1 g, 3 mmoles) y ácido trifluoroacético (5 ml) en cloruro de metileno (5 ml) por 18 horas y entonces con cloruro de metileno (50 ml) por 1C :r.?r.. Se lava la capa orgánica con agua y salmuera (30 mi, cada uno) y se seca en sulfato de sodio. Se retira el solvente in vacuo para producir ácido 4-(1, 3-dioxoisoindolin-2-il) -4- (etoxicarbonil) -4-fluorobutanoico que puede ser purificado por cromatografía o usado en la siguiente etapa sin purificación adicional. Se calienta una mezcla de ácido 4- (1,3-dioxoísoindolin-2-il) -4-fluorobutanoico (0.9 g, 2.8 mmoles), carbonildiimidazol (C. 5 g, 2.8 mmoles) y dimetilaminopirimidiua ;'J.5,- g, 5.6 mmoles) en tetrahidrofurano (30 ml) llevando a reflujo por 18 horas. Se retira el solvente in vacuo y se agita el residuo con cloruro de metileno (50 ml) per 10 min. Se lava la capa orgánica con agua y salmuera (40 ml, onda uno) y se seca en sulfato de sodio. Se retirra el solvente in vacuo para dar l,3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropie =ridi: - 3 - -' 1) isoindolina que se purifica además por cromatografía de columna. EJEMPLO 12 Las tabletas que contienen cada una 50 mg de 1,3-dioxo-2- (2, 6-dioxo-3- luoropiperidin-3 -il) -isoindolina, pueden ser preparadas en la siguiente forma: Constituyentes (por 1000 tabletas) 1, 3-dioxo-2- (2 , 6 -dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) isoindolina 50.0 g lactosa 50.7 g almidón de trigo 7.5 g polietilenglicol 6000 5.0 g talco 5.0 g estearato de magnesio 1.8 g agua desmineralizada c . s . Se forzan primero los ingredientes sólidos a través de un tamiz de un ancho de malla de 0.6 mm. Se mezclan entonces el ingrediente activo, lactosa, talco, estearato de 33 magnesio y la mitad d ! ai.iidin. Se suspenden la otra mitad del almidón en 40 mi, de agua y se agrega esta suspensión a una solución en ebullición dsl polietilenglicol en 100 ml de agua. Se agrega !_-. pasta .-^sultante a las substancias pulvurulentas y se g; o . :- 1* mezcla, si es necesario con la adición de agua. Se ¿e Í e~ c •_ ..nulado durante la noche a 35°C se forza a través de un tamiz de 1.2 mm de ancho de malla y se comprime para formar tabletas de aproximadamente 6 mm de diámetro que son cóncavos en ambos lados . EJEMPLO 13 Pueden ser preparadas tabletas, cada una que contiene 100 mg de 1 -txt- - .2 , 6-dioxo-3 -fluoropiperidin-3-il) isoindolina, en la '•• i ui "-.n : -or a: Constituyentes fi 1Q0Q tabletas) l-oxo-2- (2,6- ilo. ; -_" - fluoropiperidin-3 -il) isoindolina 100.0 g lactosa 100.0 g almidón de trigo 47.5 g estearato de magnesio 3.0 g agua desmineralizada c.s. Todos los ingredientes sólidos se forzan primero a través de un tamiz de 3none de malla de 0.6 mm. Se mezclan el ingrediente activo, lactosa, ootearato de magnesio y la mitad del almidón. La otra mitad del almidón se suspende en 40 ml de agua y se agrega esta suspensión a 100 ml de agua en ebullición. Se agrega la pasta resultante a las substancias pulvurulentas y se granula la mezcla, si es necesario con la adición de agua. Se seca el granulado durante la noche a 35 °C, se forza a través de un tamiz de ancho de malla 1.2 mm y se comprime para formar tabletas de aproximadamente 6 mm de diámetro que son cóncavas en ambos lados . EJEMPLO 14 Pueden ser preparadas tabletas para mascar, cada una que contiene 75 mg de l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) isoindolina, en la siguiente forma: Composición (para 1000 tabletas) l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3 -flusropiperidin-3-il) isoindolina 75.0 g manitol 230.0 g lactosa 150.0 g talco 21.0 g glicina 12.5 g ácido esteárico 10.0 g almidón de trigo 47.5 g sacarina 1.5 g solución de gelatina al 5% c.s. Todos los ingredientes sólidos se forzan primero a través de un tamiz de ancho de malla de 0.25 mm. Se mezclan el manitol y la lactosa, se granula con la adición de solución de gelatina, forzada a través de un tamiz de ancho de malla de 2 mm. , se seca a 50°C y se forza otra vez a través de un tamiz de 1.7 mm de ancho de malla. Se mezclan cuidadosamente l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3 -fluoropiperidin-3-il) -isoindolina, la glicina y la sacarina, el manitol, la lactosa granulada, el ácido esteárico y el talco y se mezcla todo totalmente y se comprime para formar tabletas de aproximadamente 10 mm de diámetro que son cóncavas en ambos lados y tiene una ranura de rompimiento en el lado superior. EJEMPLO 15 Las tabletas que contienen cada una 10 mg de 1,3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -il) -4,5,6,7-tetrafluoroisoindolina en la siguiente forma: Composición (por 1000 tabletas) 1, 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -il) -4 , 5, 6 , 7-tetrafluoroisoindolm? 10.0 g lactosa 328.5 g almidón de trigo 17.5 g polietilenglicol 6000 5.0 g talco 25.0 g estearato de magnesio 4.0 g_ agua desmineralizada c.s. Se forzan primero los ingredientes sólidos a través de un tamiz de un ancho de malla de 0.6 mm. Se mezclan entonces el ingrediente active, lactosa, talco, estearato de magnesio y la mitad del almidón intimamente. Se suspenden la otra mitad del almidón en 65 ml, de agua y se agrega esta suspensión a una solución en ebullición del polietilenglicol en 260 ml de agua. Se agrega la pasta resultante a las substancias pulvurulentas y se granula y se mezcla el total, si es necesario con la adición de agua. Se seca el granulado durante la noche a 35°C se forza a través de un tamiz de 1.2 mm de ancho de malla y se comprime para formar tabletas de aproximadamente 10 mm de diámetro que son cóncavos en ambos lados y tienen una ranura de rompimiento en el lado superior. EJEMPLO 16 Pueden ser preparadas cápsulas rellenadas con gelatina seca, cada una que contiene 100 mg de l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoro-piperidin-3 -il) -5 -aminoisoindolina, en la siguiente forma: Composición (por 1000 cápsulas) l-oxo-2- (2, 6-dioxc-3-fluoropiperidin-3-il) -5-aminoisoindolina 100.0 g celulosa microcristalina 30.0 g laurilsulfato de sodio 2.0 g estearato de magnesio 8.0 g Se tamiza el laurilsulfato de sodio en la l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -il) -5-aminoisoindolina a través de un tamiz de ancho de malla 0.2 mm y los dos componentes se mezclan íntimamente por 10 minutos. Se agrega entonces la celulosa microcristalina a través de un tamiz de 0.9 de ancho de malla y se mezcla íntimamente otra vez el total por 10 minutos. Finalmente, se agrega el estearato de magnesio a través de un tamiz de 0.8 de ancho, y después de mezclar por 3 minutos adicionales, se introduce la mezcla en porciones de 140 mg cada una en cápsulas rellenas con gelatina seca de tamaño o (alargadas) . EJEMPLO 17 Puede ser preparada una solución de infusión o inyección al 0.2%, por ejemplo en la siguiente forma: Clorhidrato de 1 , 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -5 -aminoisoindolina 5.0 Cloruro de sodio 22.5 g Amortiguador de fosfato pH 7.4 300.0 g Agua desmineralizada para 2500.0 ml Se disuelve clorhidrato de 1, 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo- 3-fluoropiperidin-3-il) -5-aminoisoindolina en 1000 ml de agua y se filtra a través de un microfiltro. Se agrega la solución amortiguadora y se lleva el total hasta 2500 ml con agua. Para preparar formas de unidad de dosis, se introducen porciones de 1.0 ó 2.5 ml cada una en las ampolletas de vidrio (cada una que contiene respectivamente 2.0 ó 5.0 mg de imida) .

Claims (23)

1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto seleccionado del grupo que consiste de (a) una 2- (2 , 6 -dioxo-3 -fluoropiperidin-3 -il) - isoindolina de la fórmula I. en la cual Y es oxígeno ó H2 y cada uno de R1, R2, R3 y R4 independientemente de los otros, es hidrógeno, halo, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, o amino, y (b) las sales de adición de ácido de las 2- (2, 6- dioxo-3 -fluoropiperidin-3-il) -isoindolinas que contienen un átomo de nitrógeno capaz de ser protonads.
2. 2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque R1, R2, R3 y R4 son hidrógeno .
3. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque R , R , R y R son los mismos y cada uno es cloro, flúor, metilo o metoxi.
4. 4. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque R3 , es amino, y R1, R2 y R4 son hidrógeno .
5. 5. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizad; porque R4 , es amino, y R1, R2 y R3 son hidrógeno.
6. 6. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque R3 , es metilo, y R1, R2 y R4 son hidrógeno.
7. 7. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque R4, es metilo, y R1, R2 y R3 son hidrógeno.
8. 8. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque es 1, 3-dioxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3- il) - iscindolina .
9. 9. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque es 1, 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4 -aminoisoindolina .
10. 10. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque es 1, 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3 -fluoropiperidin-3 -il) -5 -aminoisoindolina.
11. 11. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque es 1, 3-dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3 -fluoropiperidin-3 -ii) -4,5,6, 7- tetrafluoroisoindolina.
12. 12. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque es 1, 3 -dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3 - fluoropiperidin- 3 -il) - 4,5,6, 7 -tetracloroisoindolina.
13. 13. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque es 1, 3 -dioxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -i_) - 4,5,6, 7-t trametilsoindolina.
14. 14. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterízalo porque es 1, 3 -dioxo-2- (2, 6-dioxo-3-fluoropiperidin-? - il) - 4,5,6,7-tetrametoxiisoindolina.
15. 15. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque es l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin- 3 -il! -aminoisoindolina .
16. 16. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque es l-oxo-2- (2, 6-dioxo- 3-fluoropiperidin-3-il > -iscindeiina .
17. 17. El c:¡,:pu-?.- c de conformidad con la reivindicación 1 caracterizad:: 'porque 'es l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -i1)— -aminoisoindolina.
18. 18. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque es l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4,5,6, 7 -tetrafluoroisoindolina.
19. 19. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque es l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3 -il) -4,5,6, 7 -tetracloroisoindolina. 43
20. 20. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 cara ; .v ?~ - p rqué es 1 -oxo-2- (2 , 6-dioxo-3 -fluoropiperidin-3 -ii, -4,5,6, ' -tetrametilisoindolina.
21. 21. Un compuesto de confermidad con la reivindicación 1 caracterizado porque es l-oxo-2- (2 , 6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-il) -4, £ ß, "-tetra etoxiisoindolina .
22. 22. El método para reducir niveles indeseables de citocinas inflamatorias en un mamífero caracterizado porque comprende administrar al -OSVJ una cantidad efectiva de un compuesto de acuerdo a la coi 'tnaicación 1.
23. 23. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende una cantidad de un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1 suficiente. h ~o administración en un régimen de dosis simple o múltiple para reducir niveles de citocinas inflamatorias en un ~amí íero en una combinación con un portador.