MXPA00004671A - Compuestos agonistas de exendina novedosos - Google Patents

Compuestos agonistas de exendina novedosos

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MXPA00004671A
MXPA00004671A MXPA/A/2000/004671A MXPA00004671A MXPA00004671A MX PA00004671 A MXPA00004671 A MX PA00004671A MX PA00004671 A MXPA00004671 A MX PA00004671A MX PA00004671 A MXPA00004671 A MX PA00004671A
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MXPA/A/2000/004671A
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Nigel Robert Arnold Beeley
Kathryn S Prickett
Original Assignee
Amylin Pharmaceuticals Inc
Nigel Robert Arnold Beeley
Kathryn S Prickett
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Abstract

Se proveen compuestos de agonista de exendida novedosos;estos compuestos sonútiles para el tratamiento de diabetes y condiciones que se beneficiarían al reducir la glucosa en el plasma y retardar y/o hacer más lento el vaciado gástrico.

Description

COMPUESTOS AGONISTAS DE EXEND1NA NOVEDOSOS SOLICITUD RELACIONADA Esta solicitud reclama el beneficio de la solicitud provisional de E.U.A. No 60/066,029, publicada el 14 de noviembre de 1997, los contenidos de la cual se encuentran incorporados en la presente como referencia en su totalidad.
CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a compuestos novedosos que tienen actividad como agonistas de exendina. Estos compuestos son útiles en el tratamiento de diabetes de tipo I y ll, en el tratamiento de trastornos que pueden beneficiarse mediante agentes que reducen los niveles de glucosa en el plasma y en el tratamiento de trastornos que se beneficiarían con agentes útiles para retardar y/o hacer más lento el vaciado gástrico.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La siguiente descripción incluye información que puede ser útil para la comprensión de la presente invención. No se admite que cualquier información que se provea en la misma, sea la técnica anterior a la invención reclamada en la presente, y que ninguna de las publicaciones mencionadas específica o implícitamente sean de la técnica anterior a esta invención.
Exendina Las exendinas son péptidos que se encuentran en el veneno del monstruo de Gila, un lagarto común en Arizona y el norte de México. La exendina-3 [SEQ. ID. NO. 1] se encuentra presente en el veneno de Heloderma horridum, y la exendina-4 [SEQ. ID. NO. 2] se encuentra presente en el veneno de Heloderma suspectum (Eng, J., et al., J. Biol. Chem.. 265:20259-62, 1990; Eng., J., et al., J. Biol. Chem., 267:7402-05, 1992). La secuencia de aminoácidos de la exendina-3 se muestra en la figura 1. La secuencia de aminoácidos de la exendina-4 se muestra en la figura 2. Las exendinas tienen alguna similitud en cuanto a la secuencia, con varios miembros de la familia de péptidos similares a glucagon, con la homología más elevada, 53%, siendo hasta GLP-1 [7-36]NH2 [SEQ. ID. NO. 3] (Goke, et al., J. Biol. Chem., 268:19650-55, 1993). GLP-1 [J-36]NH2, también conocido como proglucagon [78-107] o simplemente "GLP-1 ," como se utiliza con mayor frecuencia en la presente, tiene un efecto insulinotrópico, que estimula la secreción de insulina desde las células ß pancreáticas; GLP-1 también inhibe la secreción de glucagon desde las células a pancreáticas (0rsov, et al., Diabetes, 42:658-61 , 1993; D'Alessio, et al., J. Clin. Invest., 97:133-38, 1996). La secuencia de aminoácidos de GLP-1 se muestra en la figura 3. GLP-1 se reporta porque inhibe el vaciado gástrico (Willms B, et al., J. Clin Endocrinol Metab 81 (1 ): 327-32, 1996; Wettergren A, et al., Diq Dis Sci 38 (4): 665-73, 1993), y la secreción de ácido gástrico. Schjoldager BT, et al., Diq Dis Sci 34(5): 703-8, 1989; O'Halloran DJ, et al., J. Endocrinol 126 (1 ): 169-73; 1990; Wettergren A, et al., Diq Dis Sci 38 (4) 665-73, 1993). GLP-1 [7-37], que tiene un residuo de glicina adicional en su terminación carboxi, también estimula la secreción de insulina en humanos (0rsov, et al., Diabetes, 42:658-61 , 1993). Un receptor acoplado a adenilato de proteína G de transmembrana-ciclasa el cual se cree que es el responsable del efecto insulinotrópico de GLP-1 , se ha clonado a partir de la línea de células ß (Thorens, Proc. Nati. Acad. Sci. EUA 89:8641-45 (1992)), de aquí en adelante denominado como "receptor GLP-clonado". Según se dice, la exendina-4 actúa en los receptores de GLP-1 en las células de ßTC1 secretoras de insulina, en células acinares dispersas del páncreas de conejillo de indias, y en las células parietales del estómago; también se dice que el péptido estimula la liberación de somatostatina e inhibe la liberación de gastrina en estómagos aislados (Goke, et al., J. Biol. Chem. 268:19650-55, 1993; Schepp, et al., Eur. J. Pharmacol., 69:183-91 , 1994; Eissele, et al., Life Sci., 55:629-34, 1994). Se encontró que la exendina-3 y la exendina-4 estimulan la producción de AMPc en, y la liberación de amilasa de, células acinares pancreáticas (Malhotra, R., et al., Requlatory Peptides. 41 :149-56, 1992; Raufman, et al., J. Biol. Chem. 267:21432-37, 1992; Singh, et al., Requl. Pept. 53:47-59, 1994). Basándose en sus actividades insulinotrópicas, se ha propuesto el uso de exendina-3 y exendina-4 para el tratamiento de diabetes mellitus y la prevención de hiperglicemia (Eng, Patente de E.U.A. No. 5,424,286). Los agentes que sirven para retardar el vaciado gástrico han encontrado un lugar en la medicina como auxiliares de diagnóstico en exámenes radiológicos gastrointestinales. Por ejemplo, glucagon es una hormona de polipéptido que se produce mediante las células a de los islotes pancreáticos de Langerhans. Es un agente hiperglicémico que moviliza la glucosa al activar la glicogenólisis hepática. Puede hasta cierto modo estimular la secreción de insulina pancreática. Glucagon se utiliza en el tratamiento de hipoglicemia inducida por insulina, por ejemplo, cuando no es posible la administración de glucosa de manera intravenosa. Sin embargo, ya que glucagon reduce la motilidad del tracto gastrointestinal también se utiliza como un auxiliar de diagnóstico en exámenes radiológicos gastrointestinales. Glucagon también se ha utilizado en varios estudios para tratar varios trastornos gastrointestinales dolorosos relacionados con el espasmo. Daniel, et al. (Br. Med. J., 3:720, 19J4) reportó un alivio sintomático rápido de diverticulitis aguda en pacientes tratados con glucagon comparado con aquellos que habían sido tratados con analgésicos o antiespasmódicos. Una revisión hecha por Glauser, et al., (J. Am. Coll. Emergency Phvsns. 8:228, 1979) describió el alivio de obstrucción esofágica aguda por alimento seguida por la terapia de glucagon. En otro estudio glucagon significativamente alivió el dolor y sensibilidad en 21 pacientes con enfermedad del tracto biliar comparada con 22 pacientes tratados con placebo (M.J. Stower, et al., Br. J.
Surq., 69:591-2. 1982). Los métodos para regular la motilidad gastrointestinal que utilizan agonistas de amilina se describen en la solicitud internacional No. PCT/US94/10225, publicada ei 16 de marzo de 1995. Los métodos para regular la motilidad gastrointestinal que utiliza agonistas de exendina se describen en la solicitud de la patente de E.U.A. No. de serie 08/908,867, publicada el 8 de agosto de 1997 titulada "Methods for Regulating Gastrointestinal Motility", cuya solicitud es una continuación de la solicitud de patente de E.U.A. No. de serie 08/694,954, publicada el 8 de agosto de 1996. Los métodos para reducir el consumo de alimentos utilizando agonistas de exendina se describen en la solicitud de la patente de E.U.A. No. de serie 09/003,869, publicada el 7 de enero de 1998, titulada "Use of Exendin and Agonists Thereof for the Reduction of Food Intake", la cual reclama el beneficio de las solicitudes provisionales de E.U.A. Nos. 60/034,905, publicada el 7 de enero de 1997, 60/055,404 publicada el 7 de agosto de 1997, 60/065,442, publicada el 14 de noviembre de 1997 y 60/066,029 publicada el 14 de noviembre de 1997. Los compuestos novedosos de agonista de exendina se describen en la solicitud de PCT No. de serie PCT/US98/16387, publicada el 6 de agosto de 1998, titulada "Novel Exendin Agonist Compounds", la cual reclama el beneficio de la solicitud de patente de E.U.A. No. de serie 60/055,404, publicada el 8 de agosto de 1997. Otros agonistas de exendina novedosos se describen en la solicitud de E.U.A No. de Serie , publicada el 13 de noviembre de 1998, titulada "Novel Exendin Agonist Compounds", la cual reclama el beneficio de la solicitud de patente de E.U.A. No. 60/065,442, publicada el 14 de noviembre de 1997.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN De acuerdo con un aspecto, la presente invención provee compuestos novedosos agonistas de exendina que exhiben propiedades ventajosas que incluyen efectos para hacer más lento el vaciado gástrico y reducir los niveles de glucosa en el plasma. De acuerdo con la presente invención, se proveen los compuestos de la fórmula (l) [SEQ. ID. NO. 4]: Xaa-i Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaas Xaaß Xaa7 Xaa8 Xaag Xaaio Xaan Xaa?2 Xaa-?3 Xaau Xaa-? Xaa?6 Xaa?7 Ala Xaaig Xaa20 Xaa2? Xaa22 Xaa23 Xaa2 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28-Z?; en donde Xaai es His, Arg, Tyr, Ala, Norval, Val o Norleu; Xaa2 es Ser, Gly, Ala o Thr; Xaa3 es Ala, Asp o Glu; Xaa es Ala, Norval, Val, Norleu o Gly; Xaa5 es Ala o Thr; Xaa6 es Phe, Tyr o naftilalanina; Xaa7 es Thr o Ser; Xaa8 es Ala, Ser o Thr; Xaa9 es Ala, Norval, Val, Norleu, Asp o Glu; Xaa-io es Ala, Leu, lie, Val, pentiglicina o Met; Xaan es Ala o Ser; Xaa-.2es Ala o Lys; Xaa?3 es Ala o Gln; Xaa1 es Ala, Leu, lie, pentilglicina, Val o Met; Xaa-15 es Ala o Glu; Xaa?6 es Ala o Glu; Xaa-.7 es Ala o Glu; Xaa-ig es Ala o Val; Xaa20 es Ala o Arg; Xaa21 es Ala o Leu; Xaa22 es Phe, Tyr o naftilalanina; Xaa23 es He, Val, Leu, pentilglicina, tert-butilglicina o Met; Xaa24 es Ala, Glu o Asp; Xaa25 es Ala, Trp, Phe, Tyr, o naftilalanina; Xaa26 es Ala o Leu; Xaa27 es Ala o Lys; Xaa28 es Ala o Asn; -NH2, Gly-Z2, Gly Gly Xaa31-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa3i Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36Xaa37 Xaa38-Z2 o Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36Xaa37 Xaa38 Xaa3g-Z2; en donde Xaa3?, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente Pro, homoprolina, 3Hyp, 4Hyp, tioprolina, N-alquilglicina, N-alquilpentilglicina o N-alquilalanina; y Z2 es -OH o -NH2; con la condición que no más de tres de Xaa3, Xaa , Xaas, Xaa6, Xaa8, Xaag, Xaa10, Xaa-n, Xaa 2, Xaa13, Xaa14, Xaa?5, Xaa?6, Xaa?7, Xaaig, Xaa20, Xaa21, Xaa2 , Xaa25, Xaa26, Xaa2 y Xaa28, sean Ala; y también siempre y cuando, si Xaa-., es His, Arg o Tir, entonces por lo menos uno de Xaa3, Xaa4, y Xaag es Ala.
También incluidos dentro del alcance de la presente invención están las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula (I) y composiciones farmacéuticas incluyendo dichos compuestos y sales de los mismos. También dentro del alcance de la presente invención están los géneros más estrechos de compuestos péptidos de varias longitudes, por ejemplo, géneros de compuestos que no incluyen péptidos teniendo una longitud de 28, 29 o 30 residuos de aminoácidos, respectivamente. De manera adicional, la presente invención incluye géneros más estrechos de compuestos péptidos que tienen secuencias de aminoácidos particulares, por ejemplo, compuestos de fórmula (I) [SEQ. ID. NO. 4]: Xaa-i Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaag Xaa-io Xaa-n Xaa?2 Xaa13 Xaau Xaa-15 Xaa-,6 Xaa?7 Ala Xaa?8 Xaa-ig Xaa2o Xaa2? Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa2 Xaa28-Z? ; en donde Xaa es His o Ala; Xaa2 es Gly o Ala; Xaa3 es Ala, Asp o Glu; Xaa es Ala o Gly; Xaa es Ala o Thr; Xaa6 es Phe o naftilalanina; Xaa es Thr o Ser; Xaa8 es Ala, Ser o Thr; Xaa9 es Ala, Asp o Glu; Xaa-io es Ala, Leu o pentiglicina; Xaan es Ala o Ser; Xaa 2 es Ala o Lys; Xaa-.3 es Ala o Gln; Xaau es Ala, Leu, Met o pentilglicina; Xaa-15 es Ala o Glu; Xaa?6 es Ala o Glu; Xaa17 es Ala o Glu; Xaaiges Ala o Val; Xaa20 es Ala o Arg; Xaa21 es Ala o Leu; Xaa^es Phe o naftilalanina; Xaa23 es lie, Val o tert-butilglicina; Xaa24 es Ala, Glu o Asp; Xaa25 es Ala, Trp o Phe; Xaa26 es Ala o Leu; Xaa27 es Ala o Lys; Xaa28es Ala o Asn; Z es -OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa3 Z2, Gly Gly Xaa31 Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 o Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Ser-Z2; Xaa3?, Xaa36, Xaa3 y Xaa38 son independientemente Pro, homoprolina, tioprolina, o N-metilalanina; y Z2 es -OH o -NH2; con la condición que no más de tres de Xaa3, Xaa5, Xaa6, Xaa8, Xaa-io, Xaan, Xaa?2, Xaa?3, Xaa , Xaa15, Xaa-.6, Xaa-? , Xaaig, Xaa20, Xaa2?, Xaa24, Xaa25, Xaa26, Xaa2 y Xaa28 sean Ala; y también siempre y cuando, si Xaai, es His, Arg o Tyr, entonces por lo menos uno de Xaa3, Xaa , y Xaag es Ala; y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos; También se proveen compuestos péptidos de la fórmula (II) [SEQ. ID. NO. 94]: Xaai Xaa2 Xaa3 Xaa Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaaio Xaan Xaa?2 Xaa?3 Xaau Xaa-?5 Xaa?6 Xaa17 Ala Xaaig Xaa20 Xaa2? Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa2ß-X?Z?; en donde Xaai es His, Arg, Tyr, Ala, Norval, Val, Norleu o 4-¡midazopropionilo; Xaa2 es Ser, Gly, Ala o Thr; Xaa3 es Ala, Asp o Glu; Xaa4 es Ala, Norval, Val, Norleu o Gly; Xaa5 es Ala o Thr; Xaa6 es Phe, Tyr o naftilalanina; Xaa7 es Thr o Ser; Xaa8 es Ala, Ser o Thr; Xaag es Ala, Norval, Val, Norleu, Asp o Glu; Xaa10 es Ala, Leu, He, Val, pentilglicina o Met; Xaan es Ala o Ser; Xaa12 es Ala o Lys; Xaa?3 es Ala o Gln; Xaa14 es Ala, Leu, He, pentilglicina, Val o Met; Xaa?5 es Ala o Glu; Xaa16 es Ala o Glu; Xaa17 es Ala o Glu; Xaa?9 es Ala o Val; Xaa20 es Ala o Arg; Xaa21 es Ala, Leu o Lys-NHE-R, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo o cicloaleil-alcanoilo de cadena recta o ramificada de C"c10; Xaa^ es Phe, Tyr o naftilalanina; Xaa23 es He, Val, Leu, pentilglicina, tert-butilglicina o Met; Xaa24 es Ala, Glu o Asp; Xaa25 es Ala, Trp, Phe, Tyr, o naftilalanina; Xaa26 es Ala o Leu; Xi es Lys Asn, Asn Lys, Lys-NHE-R Asn, Asn Lys-NHE-R, Lys-NHE-R Ala, Ala Lys-NHE-R, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo o cicloalquilalcanoilo de cadena recta o ramificada de C Cio; es -OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa3 Z2, Gly Gly Xaa3? Ser-Z2) Gly Gly Xaa3? Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa3i Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36Xaa37 Xaa38-Z2 o Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36Xaa37 Xaa38 Xaa39-Z2; en donde Xaa3?, Xaa3ß, Xaa37 y Xaa38 son independientemente seleccionados del grupo que consiste en Pro, homoprolina, 3Hyp, 4Hyp, tioprolina, N-alquilglicina, N-alquilpentilglicina o N-alquilalanina; y Z2 es -OH o -NH2; con la condición que no más de tres de Xaa3, Xaa , Xaa5, Xaaß, Xaa8, Xaag, Xaa-io, Xaan, Xaa?2, Xaa?3, Xaau, Xaa15, Xaa16, Xaa? , Xaa19, Xaa20, Xaa21, Xaa2 , Xaa25, Xaa26, sean Ala; y también siempre y cuando, si Xaa-i, es His, Arg, Tir o 4-imidazopropionilo, entonces por lo menos uno de Xaa3, Xaa4, y Xaa9 es Ala. También incluidos dentro del alcance de la presente invención están las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula (II) y composiciones farmacéuticas incluyendo dichos compuestos y sales de los mismos. Los compuestos preferidos de fórmula (II) ¡ncluyen aquellos en donde Xaa! es His, Ala, Norval o 4-imidazopropion?'Io. Preferiblemente, Xaa! es His, o 4-imidazopropionilo o Ala, muy preferiblemente His o 4-imidazopropionilo. Los compuestos preferidos de fórmula (il) incluyen aquellos en donde Xaa2 es Gly. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaa4 es Ala.
Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaag es Ala. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaau es Leu, pentilglicina o Met. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaa25 es Trp o Phe. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaa6 es Ala, Phe o naftilalanina; Xaa22 es Phe o naftilalanina; y Xaa23 es lie o Val. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Zi es -NH2. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaa3?, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente seleccionados del grupo que consiste en Pro, homoprolina, tioprolina, y N-alquilalanina. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaa3g es Ser o Tyr, preferiblemente Ser. Los compuestos preferidos de fórmula (II) ¡ncluyen aquellos en donde Z2 es -NH2. Los compuestos preferidos de fórmula (II) ¡ncluyen aquellos 42 en donde Zi es -NH2. Los compuestos preferidos de fórmula (II) ¡ncluyen aquellos en donde Xaa2? es Lys-NHE-R, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo de cadena recta o ramificada de C1-C10; Los compuestos preferidos de fórmula (II) ¡ncluyen aquellos en donde X^ es Lys Asn, Lys-NHE-R Asn, o Lys-NHE-R Ala, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo de cadena recta o ramificada de C1-C10; Los compuestos preferidos de fórmula (II) ¡ncluyen aquellos que tienen una secuencia de aminoácidos seleccionada de SEQ. ID. NOS. 95-110.
Definiciones De acuerdo con la presente invención y como se utilizan en la presente, los siguientes términos se definen con los siguientes significados, a menos que se establezca de otra manera. El término "aminoácido" se refiere a aminoácidos naturales, aminoácidos no naturales, y análogos de aminoácidos, todos en sus estereoisómeros D y L si su estructura permite dichas formas estereoisoméricas. Los aminoácidos naturales ¡ncluyen alanina (Ala), arginina (Arg), asparagina (Asn), ácido aspártico (Asp), cisteína (Cys), glutamina (Gln), ácido glutámico (Glu), glicina (Gly), histidina (His), isoleucina (He), leucina (Leu), lisina (Lys), metionina (Met), fenilalanina (Phe), prolina (Pro), serina (Ser), treonina (Thr), tiptofan (Trp), tirosina (Tyr) y valina (Val). Los aminoácidos no naturales incluyen, pero no se encuentran limitados al ácido azetidincarboxílico, ácido 2-aminoadípico, ácido 3-aminoadípico, beta-alanina, ácido aminopropiónico, ácido 2-aminobutírico, ácido 4-aminobutírico, ácido 6-aminocaproico, ácido 2-aminoheptanoico, ácido 2-aminoisobutírico, ácido 3- aminoisobutírico, ácido 2-aminopimélico, butiglicina terciaria, ácido 2,4- diaminoisobutírico, desmosina, ácido 2,2'-diaminopimélico, ácido 2,3- diaminopropiónico, N-etilglicina, N-etilasparagina, homoprolina, hidroxilisina, alo-hidroxilisina, 3-hidroxiprolina, 4-hidroxiprolina, isodesmosina, alo- isoleucina, N-metilalanina, N-metilglicina, N-metilisoleucina, N- 5 metilpentilglicina, N-metilvalina, naftalanina, norvalina, norleucina, ornitina, pentilglicina, ácido pipecólico y tioprolina. Los análogos de aminoácidos ¡ncluyen los aminoácidos naturales y no naturales que se encuentran bloqueados químicamente, reversible o irreversiblemente, o modificados en su grupo amino N-terminal o sus grupos de cadena laterales, por ejemplo, f 10 sulfóxido de metionina, sulfona de metionina, S-(carboximetil)-cisteína, sulfóxido de S-(carboximetil)-cisteína y sulfona de S-(carboximetiI) cisteína. El término "análogo de aminoácido" se refiere a un aminoácido en donde el grupo carboxi C-terminal, el grupo amino N-terminal o grupo funcional de cadena lateral se ha codificado químicamente a otro grupo 15 funcional. Por ejemplo, éster beta-metílico de ácido aspártico es un análogo de aminoácido de ácido aspártico; es un análogo de aminoácido de ácido ?— aspártico; N-etilglicina es un análogo de aminoácido de glicina; o carboxamida de alanina es un análogo de aminoácido de alanina. El término "residuo de aminoácido" se refiere a radicales que 20 tienen la estructura: (1 ) -C(0)-R-NH-, donde R típicamente es -CH(R')-, en donde R' es una cadena lateral de aminoácido, típicamente H o un sustituyente que contiene carbono; o (2) en donde p es 1 , 2 ó 3 representando el ácido azetidincarboxílico, residuos de ácido de prolina o pipecólico, respectivamente. El término "inferior", al que se hace referencia en la presente junto con radicales orgánicos tales como grupos alquilo, define dichos grupos que incluyen hasta alrededor de 6, preferiblemente hasta 4 e incluyendo de manera ventajosa uno ó más átomos de carbono. Dichos grupos pueden ser cadena recta o cadena ramificada. "Sales farmacéuticamente aceptables" incluyen sales de compuestos de la presente invención derivadas de la combinación de dichos compuestos y un ácido orgánico o inorgánico. En la práctica, el uso de la forma de sal equivale al uso de la forma de base. Los compuestos de la presente invención son útiles tanto en bases libres y formas de sales, con ambas formas siendo consideradas dentro del alcance de la presente invención. Además, las siguientes abreviaturas representan lo siguiente: "ACN" o "CH3CN" se refiere al acetonitrilo. "Boc", "tBoc" o "Tboc" se refiere a t-butoxicarbonilo. "DCC" se refiere al N.N'-diciciohexilcarbodiimida. "Fmoc" se refiere al fluorenilmetoxicarbonilo.
"HBTU" se refiere al hexafluorofosfato de 2-(1 H-benzotriazol-1-il)-1 ,1 ,3,3,-tetrametiluronio. "HOBt" se refiere a monohidrato de 1 -hidroxibenzotriazol. "homoP" o "hPro" se refiere a homoprolina. "MeAla" o "Nme" se refiere a N-metilalanina. "naph" se refiere a naftilalanina. "pG" o "pGly" se refiere a pentilglicina. "tBuG" se refiere a butilglicina terciaria. "ThioP" o "tPro" se refiere a tioprolina. "3Hyp" se refiere a 3-hidroxiprolina "4Hyp" se refiere a 4-hidroxiprolina "NAG" se refiere a N-alquilglicina. "NAPG" se refiere a N-alquilpentilglicina "Norval" se refiere a norvalina "Norleu" se refiere a norleucina.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La figura 1 representa la secuencia de aminoácidos para exendina-3 [SEQ. ID. NO. 1]. La figura 2 representa la secuencia de aminoácidos para exendina-4 [SEQ. ID. NO. 2].
La figura 3 representa la secuencia de aminoácidos para GLP-1 [7-36]NH2 (GLP-1 ) [SEQ. ID. NO. 3]. La figura 4 representa las secuencias de aminoácidos para ciertos compuestos de la presente invención, compuestos 1-89 [SEQ. ID. NOS. 5 a 93]. La figura 5 ilustra el efecto de disminuir la glucosa en la sangre de varias concentraciones del compuesto 1 [SEQ. ID. NO. 5]. La figura 6 representa una comparación de los efectos en el vaciado gástrico de varias concentraciones del compuesto [SEQ. ID. NO. 5]. La figura J representa las secuencias de aminoácidos para ciertos compuestos de la presente invención, compuestos 90-105 [SEQ. ID. NOS. 95 -1 10].
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN De acuerdo con la presente invención, se proveen los compuestos de la fórmula (I) [SEQ. ID. NO. 4]: Xaai Xaa2 Xaa3 Xaa Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaag Xaaio Xaan Xaa12 Xaa13 Xaa-. Xaa15 Xaa16 Xaa?7 Ala Xaa-ig Xaa20 Xaa21 Xaa^ Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28-Z?; en donde Xaa! es His, Arg, Tyr, Ala, Norval, Val o Norleu; Xaa2 es Ser, Gly, Ala o Thr; Xaa3 es Ala, Asp o Glu; Xaa4 es Ala, Norval, Val, Norleu o Gly; Xaa5 es Ala o Thr; Xaa6 es Phe, Tyr o naftilalanina; Xaa7 es Thr o Ser; Xaa8 es Ala, Ser o Thr; Xaag es Ala, Norval, Val, Norleu, Asp o Glu; Xaaio es Ala, Leu, lie, Val, pentilglicina o Met; Xaa es Ala o Ser; Xaa12 es Ala o Lys; Xaa?3 es Ala o Gln; Xaa es Ala, Leu, He, pentilglicina, Val o Met; Xaa16 es Ala o Glu; Xaa?7 es Ala o Glu; Xaaiges Ala o Val; Xaa20 es Ala o Arg; Xaa21 es Ala, Leu o Lys-NHE-R, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo o cicloaleil-alcanoilo de cadena recta o ramificada de C?-C10; Xaa^es Phe, Tyr o naftilalanina; Xaa23 es He, Val, Leu, pentilglicina, tert-butilglicina o Met; Xaa24 es Ala, Glu o Asp; Xaa25 es Ala, Trp, Phe, Tyr, o naftilalanina; Xaa26 es Ala o Leu; Xaa27 es Ala o Lys; Xaa28 es Ala o Asn; Zi es -OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa31-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa3i Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 o Gly Gly Xaa3 Ser Ser Gly Ala Xaa36Xaa37 Xaa38 Xaa39-Z2; en donde Xaa3?, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente seleccionados del grupo que consiste en Pro, homoprolina, 3Hyp, 4Hyp, tioprolina, N-alquilglicina, N-alquilpentilglicina o N-alquilalanina; y Z2 es -OH o -NH2; con la condición que no más de tres de Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6, Xaa8, Xaa9, Xaa10, Xaan, Xaa12, Xaa?3, Xaa14, Xaa?5, Xaa-?6, Xaa17, Xaa19, Xaa20, Xaa21, Xaa2 , Xaa25, Xaa26, Xaa27 y Xaa28 sean Ala; y también siempre y cuando, si Xaa-?, es His, Arg o Tir, entonces por lo menos uno de Xaa3, Xaa4, y Xaag es Ala. También incluidos dentro del alcance de la presente invención están las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula (I) y composiciones farmacéuticas incluyendo dichos compuestos y sales de los mismos. Los grupos N-alquilo preferidos para N-alquilglicina, N-alquilpentilglicina y N-alquilalanina incluyen grupos de alquilo inferiores preferiblemente de 1 a aproximadamente 6 átomos de carbono, muy preferiblemente de 1 a 4 átomos de carbono. Compuestos adecuados de la fórmula (I) incluyen aquellos identificados en los ejemplos 1-89 ("Compuestos 1-89", respectivamente) [SEQ. ID. NOS. 5 a 93], así como aquellos compuestos correspondientes identificados en los ejemplos 104 y 105. Los compuestos agonistas de exendina preferidos incluyen aquellos en donde Xaai es His, Ala o Norval. Muy preferiblemente Xaai es His o Ala. Todavía muy preferiblemente Xaai es His. Se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en donde Xaa2 es Gly. Se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en donde Xaa3 es Ala. Se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en donde Xaa es Ala.
Se prefieren aquellos compuestos de fórmula (I) en donde Xaag es Ala. Se prefieren los compuestos de fórmula (I) en donde Xaa es Leu, pentilglicina o Met. Se prefieren los compuestos de fórmula (I) en donde Xaa25 es Trp o Phe. Los compuestos preferidos de fórmula (I) ¡ncluyen aquellos en donde Xaaß es Ala, Phe o naftilalanina; Xaa22 es Phe o naftilalanina; y Xaa23 es lie o Val. Los compuestos preferidos de fórmula (I) incluyen aquellos en donde Xaa31, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente seleccionados de Pro, homoprolina, tioprolina, y N-alquilalanina. Preferiblemente, Zi es -NH2. Preferiblemente, Z2 es -NH2. De acuerdo con un aspecto, se prefieren los compuestos de fórmula (I) en donde Xaa-_ es Ala, His o Tyr, muy preferiblemente Ala o His; Xaa2 es Ala o Gly; Xaa6 es Phe o naftilalanina; Xaa14 es Ala, Leu, pentilglicina o Met; Xaa^ es Phe o naftilalanina; Xaa23 es He o Val; Xaa3?, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente seleccionados de Pro, homoprolina, tioprolina o N-alquilalanina; y Xaa39 es Ser o Tyr, muy preferiblemente Ser. Muy preferiblemente Z-i es -NH2. De acuerdo con un aspecto especialmente preferido, los compuestos que especialmente se prefieren incluyen a aquellos de la fórmula (I) en donde: Xaai es His o Ala; Xaa2 es Gly o Ala; Xaa3 es Ala, Asp o Glu; Xaa es Ala o Gly; Xaas es Ala o Thr; Xaa6 es Phe o naftilalanina; Xaa7 es Thr o Ser; Xaa8 es Ala, Ser o Thr; Xaag es Ala, Asp o Glu; Xaa-io es Ala, Leu o pentilglicina; Xaan es Ala o Ser; Xaa12 es Ala o Lys; Xaa-?3 es Ala o Gln; Xaa14 es Ala, Leu, Met o pentilglicina; Xaa15 es Ala o Glu; Xaa-i6 es Ala o Glu; Xaa17 es Ala o Glu; Xaaig es Ala o Val; Xaa20 es Ala o Arg; Xaa2? es Ala o Leu; Xaa22 es Phe o naftilalanina; Xaa2 es He, Val o tert-butilglicina; Xaa24 es Ala, Glu o Asp; Xaa25 es Ala, Trp o Phe; Xaa2ß es Ala o Leu; Xaa27 es Ala o Lys; Xaa28 es Ala o Asn; Z-\ es -OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa31-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 o Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Xaa39-Z2; Xaa31, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente seleccionados de Pro, homoprolina, tioprolina o N-metilalanina; y Z2 es -OH o -NH2; con la condición que no más de tres de Xaa3, Xaas, Xaa6, Xaa8, Xaag, Xaa10) Xaan, Xaa 2, Xaa13, Xaa14, Xaa?5, Xaa?6, Xaa?7, Xaa19, Xaa20) Xaa2?, Xaa24, Xaa25, Xaa26, Xaa27 y Xaa28 sean Ala; y también siempre y cuando, si Xaa-t, es His, Arg o Tir, entonces por lo menos uno de Xaa3, Xaa , y Xaa9 es Ala. De acuerdo con un aspecto especialmente preferido, se proveen compuestos de fórmula (I) en donde Xaau es Ala, Leu, lie, Val o pentilglicina, muy preferiblemente Leu o pentilglicina, y Xaa2s es Ala, Phe, Tyr o naftilalanina, muy preferiblemente Phe o naftilalanina. Estos compuestos serían menos susceptibles a la degradación oxidativa, tanto in vitro como in vivo, así como durante la síntesis del compuesto. También dentro del alcance de la presente invención están los géneros más estrechos de compuestos péptidos de varias longitudes, por ejemplo, géneros de compuestos que no incluyen péptidos teniendo una longitud de 28, 29 o 30 residuos de aminoácidos, respectivamente. De manera adicional, la presente invención incluye géneros más estrechos de compuestos péptidos que tienen secuencias de aminoácidos particulares, por ejemplo, compuestos de fórmula (I) [SEQ. ID. NO. 4]: Xaai Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaag Xaa10 Xaan Xaa12 Xaa?3 Xaa-|4 Xaa-15 Xaa16 Xaa?7 Ala Xaa18 Xaa19 Xaa20 Xaa2? Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa2J Xaa28-Z?; en donde Xaai es His o Ala; Xaa2 es Gly o Ala; Xaa3 es Ala, Asp o Glu; Xaa4 es Ala o Gly; Xaa5 es Ala o Thr; Xaa6 es Phe o naftilalanina; Xaa7 es Thr o Ser; Xaa8 es Ala, Ser o Thr; Xaa9 es Ala, Asp o Glu; Xaa10 es Ala, Leu o pentilglicina; Xaan es Ala o Ser; Xaa?2 es Ala o Lys; Xaa 3 es Ala o Gln; 5 Xaa14 es Ala, Leu, Met o pentilglicina; Xaa-15 es Ala o Glu; Xaa?6es Ala o Glu; Xaa17es Ala o Glu; Xaa19 es Ala o Val; f 10 Xaa20 es Ala o Arg; Xaa2 es Ala o Leu; Xaa^ es Phe o naftilalanina; Xaa23 es He, Val o tert-butilglicina; Xaa24 es Ala, Glu o Asp; 15 Xaa25 es Ala, Trp o Phe; Xaa26 es Ala o Leu; j Xaa27 es Ala o Lys; Xaa28 es Ala o Asn; ^ es -OH, 20 -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa3 Z2, Gly Gly Xaa31 Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36Xaa37 Xaa38-Z2 o Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Ser-Z2; Xaa3i, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente Pro, homoprolina, tioprolina, o N-metilalanina; y Z2 es -OH o -NH2; con la condición que no más de tres de Xaa3, Xaa5, Xaa6, Xaa8, Xaaio, Xaan, Xaa 2, Xaa13, Xaa , Xaa15, Xaa16, Xaa?7, Xaaig, Xaa20, Xaa21, Xaa24, Xaa25, Xaa26, Xaa2 y Xaa28 sean Ala; y también siempre y cuando, si Xaa1 ( es His, Arg o Tyr, entonces por lo menos uno de Xaa3, Xaa4, y Xaa9 es Ala; y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos; También se proveen compuestos péptidos de la fórmula (II) [SEQ. ID. NO. 94]; 5 10 Xaa! Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaan Xaa?2 Xaa?3 Xaa Xaa15 Xaa?6 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 X1-Z1; en donde Xaa! es His, Arg, Tyr, Ala, Norval, Val, Norleu o 4-¡midazopropion¡lo; Xaa2 es Ser, Gly, Ala o Thr; Xaa3 es Ala, Asp o Glu; Xaa4 es Ala, Norval, Val, Norleu o Gly; Xaa5 es Ala o Thr; Xaa6 es Phe, Tyr o naftilalanina; Xaa7 es Thr o Ser; Xaa8 es Ala, Ser o Thr; Xaag es Ala, Norval, Val, Norleu, Asp o Glu; Xaaio es Ala, Leu, He, Val, pentilglicina o Met; Xaan es Ala o Ser; Xaa 2es Ala o Lys; Xaa13 es Ala o Gln; Xaa14es Ala, Leu, He, pentilglicina, Val o Met; Xaa15 es Ala o Glu; Xaa16es Ala o Glu; Xaa17es Ala o Glu; Xaa-?9 es Ala o Val; Xaa20 es Ala o Arg; Xaa21 es Ala, Leu o Lys-NHE-R, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo o cicloaleil-alcanoilo de cadena recta o ramificada de C"c10; Xaa^ es Phe, Tyr o naftilalanina; Xaa23 es He, Val, Leu, pentilglicina, tert-butilglicina o Met; Xaa 4 es Ala, Glu o Asp; Xaa25 es Ala, Trp, Phe, Tyr, o naftilalanina; Xaa26 es Ala o Leu; Xi es Lys Asn, Asn Lys, Lys-NHE-R Asn, Asn Lys-NHE-R, Lys-NHE-R Ala, Ala Lys-NHE-R, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo o cicloalquilalcanoilo de cadena recta o ramificada de C1-C10; Z-, es -OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa3?-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36Xaa37 Xaa38-Z2 o Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36Xaa37 Xaa38 Xaa3g-Z2; en donde Xaa31, Xaa36, Xaa3 y Xaa38 son independientemente seleccionados del grupo que consiste en Pro, homoprolina, 3Hyp, 4Hyp, tioprolina, N-alquilglicina, N-alquilpentilglicina o N-alquilalanina; y Z2 es -OH o -NH2; con la condición que no más de tres de Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6, Xaa8, Xaa9, Xaa10, Xaan, Xaa12, Xaa13, Xaa1 , Xaa15, Xaa16, Xaa17, Xaaig, Xaa20, Xaa21, Xaa24, Xaa25, Xaa26, sean Ala; y también siempre y cuando, si Xaa1 ; es His, Arg, Tir o 4-¡m¡dazopropionilo, entonces por lo menos uno de Xaa3, Xaa4, y Xaa9 es Ala. También incluidos dentro del alcance de la presente invención están las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula (II) y composiciones farmacéuticas incluyendo dichos compuestos y sales de los mismos. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaai es His, Ala, Norval o 4-imidazopropionilo. Preferiblemente, Xaai es His, o 4-imidazopropionilo o Ala, muy preferiblemente His o 4-imidazopropionilo. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaa2 es Gly. Los compuestos preferidos de fórmula (ll) ¡ncluyen aquellos en donde Xaa4 es Ala. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaa9 es Ala. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaau es Leu, pentilglicina o Met.
Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaa2s es Trp o Phe. Los compuestos preferidos de fórmula (II) ¡ncluyen aquellos en donde Xaa6 es Ala, Phe o naftilalanina; Xaa22 es Phe o naftilalanina; y Xaa23 es He o Val. Los compuestos preferidos de fórmula (II) ¡ncluyen aquellos en donde Zi es -NH2. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaa3?, Xaa3ß, Xaa37 y Xaa38 son independientemente seleccionados del grupo que consiste en Pro, homoprolina, tioprolina, y N-alquilalanina. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaa39 es Ser o Tyr, preferiblemente Ser. Los compuestos preferidos de fórmula (II) ¡ncluyen aquellos en donde Z2 es -NH2. Los compuestos preferidos de fórmula (II) ¡ncluyen aquellos 42 en donde Zi es -NH2. Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos en donde Xaa21 es Lys-NHE-R, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo de cadena recta o ramificada de C1-C10. Los compuestos preferidos de fórmula (II) ¡ncluyen aquellos en donde Xi es Lys Asn, Lys-NHE-R Asn, o Lys-NHE-R Ala, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo de cadena recta o ramificada de CrC-io- Los compuestos preferidos de fórmula (II) incluyen aquellos que tienen una secuencia de aminoácidos seleccionada de SEQ. ID. NOS. 95-110. Los compuestos mencionados anteriormente forman sales y bases con varios ácidos inorgánicos y orgánicos. Dichas sales incluyen sales preparadas con ácidos orgánicos e inorgánicos, por ejemplo HCl, HBr, H2S04, H3P0 , ácido trifluoroacéitco, ácido acético, ácido fórmico, ácido metansulfónico, ácido toluensulfónico, ácido maleico, ácido fumárico y ácido alcanforsulfónico. Las sales preparadas con bases ¡ncluyen sales de amonio, sales de metal alcalino, por ejemplo sales de sodio y potasio, y sales alcalinotérreas, por ejemplo, sales de calcio y magnesio. Se prefieren las sales de acetato, clorhidrato, y trifluoroacetato. Las sales pueden estar formadas mediante medios convencionales, al reaccionar el ácido libre o formas de base del producto con uno o más equivalentes de la base apropiada o ácido en un solvente o medio en el que la sai sea ¡nsoluble, o en un solvente tal como agua que posteriormente se remueve al vacío o al secar por congelamiento o al intercambiar los ¡ones de una sal existente para otro ion en una resina de intercambio de iones adecuada.
Utilidad Los compuestos que se describieron anteriormente son útiles en vista de sus propiedades farmacológicas. En particular, los compuestos de la invención son agonistas de exendina, y poseen actividad como agentes para regular la motilidad gástrica y para hacer más lento el vaciado gástrico, como se muestra por su capacidad de reducir los niveles de glucosa post-prandial en mamíferos. Los compuestos de la presente invención son útiles en métodos científicos in vitro e in vivo para la investigación de exendinas y agonistas de exendina, por ejemplo, en métodos tales como los que se describen en los ejemplos A-E posteriores.
Preparación de compuestos Los compuestos de la presente invención pueden prepararse utilizando técnicas de síntesis de péptidos de fases sólidas estándares y preferiblemente un sintetizador de 'péptido automatizado o semiautomatizado. Típicamente, utilizando dichas técnicas, un aminoácido protegido con a-N-carbamoilo y un aminoácido unido a la cadena de péptido creciente en una resina se acopla a temperatura ambiente en un solvente inerte tal como dimetilformamida, N-metilpirrolidinona o cloruro de metileno en la presencia de agentes de • copulación tales como diciciohexilcarbodiimida y 1-hidroxibenzotriazol en presencia de una base tal como diisopropiletilamina. El grupo protector a-N-carbamoilo se remueve de la resina de péptido resultante utilizando un reactivo tal como ácido trifluoroacético o piperidina, y la reacción de copulación repetida con el siguiente aminoácido N-protegido deseado para añadirse a la cadena de péptido.
Los grupos N-protectores adecuados son bien conocidos en la técnica, siendo los preferidos en la presente t-butiloxicarbonilo (tBoc) y fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc). Los solventes, derivados de aminoácidos y resinas de 4-metilbenzhidril-amina utilizados en el sintetizador de péptido pueden comprarse de Applied Biosystems Inc. (Foster City, CA). Los siguientes aminoácidos protegidos de cadena lateral pueden comprarse de Applied Biosystems, Inc.: Boc-Arg (Mts), Fmoc-Arg (Pmc), Boc-Thr (Bzl), Fmoc-Thr (t-Bu), Boc-Ser (Bzl), Fmoc-Ser (t-Bu), Boc-Tyr (BrZ), Fmoc-Tyr (t-Bu), Boc-Lys (Cl-Z), Fmoc-Lys (Boc), Boc-Glu (Bzl), Fmoc-Glu (t-Bu), Fmoc-His (Trt), Fmoc-Asn (Trt), y Fmoc-Gln (Trt). Boc-His (BOM), pueden comprarse de Applied Biosystems, Inc. o Bachem Inc. (Torrance, CA). Anisol, dimetilsulfuro, fenol, etanditiol, y tionisol pueden obtenerse de Aldrich Chemical Company (Milwaukee, Wl). Air Products and Chemicals (Allentown, PA), suministra HF. Éter etílico, ácido acético y metanol pueden comprarse de Fisher Scientific (Pittsburgh, PA). La síntesis de péptido de fase sólida puede llevarse a cabo con un sintetizador de péptido automático (modelo 430A, Applied Biosystems Inc., Foster City, CA) utilizando ei sistema NMP/HOBt (opción 1) y química de tBoc o Fmoc (véase Applied Biosystems User's Manual for the ABl 430A Peptide Synthesizer, Versión 1.3B 1 de julio de 1988, sección 6, pp. 49-70, Applied Biosystems, Inc., Foster City, CA) con bloqueo. Las resinas de Boc-péptido pueden cortarse con HF (-5°C a 0°C, 1 hora). El péptido puede extraerse de la resina al alternar agua y ácido acético, y los filtrados se liofilizan. Las resinas de Fmoc-péptido pueden cortarse de acuerdo con los métodos estándares (Introduction to Cleavaqe Techniques. Applied Biosystems, Inc., 1990, pp. 6-12). Los péptidos también pueden unirse utilizando un sintetizador Advanced Chem Tech (modelo MPS 350, Louisville, Kentucky). Los péptidos pueden purificarse por RP-CLAR (de preparación y analítica) utilizando un sistema Waters Delta Prep 3000. Una columna de preparación de C4, C8 o C18 (10 µ, 2.2 x 25 cm; Vydac, Hesperia, CA) puede utilizarse para aislar péptidos, y la pureza puede determinarse utilizando una columna analítica de C4, C8 o C18 (5 µ, 0.46 x 25 cm; Vydac). Los solventes (A=0.1 % de TFA agua y B=0.1 % de TFA/CH3CN) pueden suministrarse a la columna analítica a una velocidad de flujo de 1.0 mL/min y a la columna de preparación a 15 mL/min. Los análisis de aminoácidos pueden realizarse en el sistema Waters Pico Tag y procesarse utilizando el programa Máxima. Los péptidos se pueden hidrolizar mediante hidrólisis de ácido de fase de vapor (115°C, 20-24 horas). Los hidrolisatos pueden derivarse y analizarse mediante métodos estándares (Cohén, et al., The Pico Taq Method: A Manual of Advanced Techniques for Amino Acid Analysis. pp. 11-52, Millipore Corporation, Milford, MA (1989)). El análisis de bombardeo rápido de átomo puede llevarse a cabo por medio de M-Scan, Incorporated (West Chester, PA). La calibración de masa puede realizarse utilizando yoduro de cesio o yoduro de cesio/glicerol. El análisis de ionización por desabsorción en plasma utilizando tiempo de detección de trayectoria puede llevarse a cabo en un espectrómetro de masa Applied Biosystems Bio-lon 20. La espectroscopia de masa por electroaspersión puede llevarse a cabo en una máquina VG-Trio. Los compuestos de péptido útiles en la invención pueden también prepararse utilizando técnicas de ADN recombinante, utilizando métodos ahora conocidos en la técnica. Véase, por ejemplo, Sambrook er al., Molecular Cloninq: A Laboratorv Manual. 2da Ed. Cold Spring Harbor (1989). Los compuestos no péptidos útiles en la presente invención pueden prepararse mediante métodos conocidos en la técnica.
Formulación v administración Los compuestos de la invención son útiles en vista de sus efectos similares a la exendina y pueden proveerse de manera conveniente en forma de formulaciones adecuadas para administración parenteral (incluyendo vía intravenosa, intramuscular y subcutánea) nasal, bucal u oral. En algunos casos, resultará conveniente proveer un agonista de exendina y otro agente de antivaciado gástrico, tal como glucagon, una amilina o un agonista de amilina, en una sola composición o solución para administrarse en conjunto. En otros casos puede ser más conveniente administrar otro agente de antivaciado por separado a partir de dicho agonista de exendina. Incluso en otros casos puede ser benéfico suministrar un agonista de exendina, ya sea en co-fórmula o por separado con otros agentes reductores de glucosa, tales como insulina. Un practicante de medicina puede determinar mejor un formato adecuado de administración para cada paciente individualmente. Los vehículos adecuados farmacéuticamente aceptables y su formulación se describen en tratados de formulaciones estándares, por ejemplo, Reminqton's Pharmaceutical Sciences de E.W. Martin. Véase también Wang, Y.J. y Hanson, M.A. "Parenteral Formulations of Proteins and Peptides: Stability and Stabilizers", Journal of Parenteral Science and Technology, Technical Report No. 10, Sup. 42:2S (1988). Los compuestos útiles en la invención pueden proveerse como composiciones parenterales para inyección o infusión. Por ejemplo, pueden suspenderse en un aceite inerte, de manera adecuada un aceite vegetal, tal como aceite de ajonjolí, cacahuate, oliva, u otro vehículo aceptable. De preferencia, se suspenden en un vehículo acuoso, por ejemplo, en una solución reguladora de pH isotónica en un pH de aproximadamente 5.6 a 7.4. Estas composiciones pueden esterilizarse mediante técnicas de esterilización convencionales o pueden esterilizarse mediante filtro. Las composiciones pueden contener sustancias auxiliares farmacéuticamente aceptables conforme se requieran en condiciones fisiológicas aproximadas, tales como agentes reguladores de pH. Los reguladores de pH útiles incluyen por ejemplo, reguladores de pH de ácido acético/acetato de sodio. Una forma de preparación de liberación lenta repositoria o de "depósito" puede emplearse para que se liberen cantidades terapéuticamente efectivas de la preparación en el torrente sanguíneo durante muchas horas o días después de la inyección transdérmica u otra forma de administración.
La ¡sotonícidad deseada puede lograrse utilizando cloruro de sodio u otros agentes farmacéuticamente aceptables, tales como dextrosa, ácido bórico, tartrato de sodio, propilenglicol, polioles (como manitol y sorbitol), u otros solutos orgánicos o inorgánicos. Se prefiere el cloruro de sodio en particular para reguladores de pH que contienen iones de sodio. Los compuestos reclamados también pueden formularse como sales farmacéuticamente aceptables (por ejemplo, sales de adición de ácido) y/o complejos de las mismas. Las sales farmacéuticamente aceptables son sales no tóxicas en la concentración en la que se administran. La preparación de dichas sales puede facilitar el uso farmacológico alterando las características físico-químicas de la composición sin evitar que ésta ejerza su efecto fisiológico. Los ejemplos de alteraciones útiles en propiedades físicas incluyen la disminución del punto de fusión para facilitar la administración a través de la mucosa y aumentar la solubilidad para facilitar la administración de concentraciones mayores del fármaco. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de adición de ácido, como aquellas que contienen sulfato, clorhidrato, fosfato, sulfamato, acetato, citrato, lactato, tartrato, metansulfonato, etansulfato, bencensulfato, p-toluensulfonato, ciclohexilsulfamato y quinato. Las sales farmacéuticamente aceptables pueden obtenerse a partir de ácidos, tales como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido sulfámico, ácido acético, ácido cítrico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido malónico, ácido metansulfónico, ácido etansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido p- toluensulfónico, ácido ciclohexilsulfámico y ácido quínico. Dichas sales pueden prepararse mediante, por ejemplo, la reacción de formas sin ácido o base del producto con uno o más equivalentes de la base o ácido apropiados en un solvente o medio en el que la sal no es soluble, o en un solvente, como el agua, que entonces se elimina in vacuo o mediante secado por congelamiento o intercambiando los iones de una sal existente por otro ion en una resina de intercambio de iones adecuada. Los vehículos o excipientes también pueden utilizarse para facilitar la administración del compuesto. Los ejemplos de vehículos y excipientes incluyen carbonato de calcio, fosfato de calcio, diversos azúcares, tales como lactosa, glucosa o sacarosa, o tipos de almidón derivados de celulosa, gelatina, aceites vegetales, polietilenglicoles y solventes fisiológicamente compatibles. Las composiciones o composición farmacéutica pueden administrarse mediante distintas vías que ¡ncluyen intravenosa, intraperitoneal, subcutánea, intramuscular, oral, tópica o a través de la mucosa. Si se desea, las soluciones de las composiciones anteriores pueden espesarse con un agente espesante, tal como metilcelulosa. Pueden prepararse en forma emulsificada, ya sea agua en aceite o aceite en agua. Puede emplearse cualquiera de una amplia variedad de agentes emulsificantes farmacéuticamente aceptables, que incluyen, por ejemplo, polvo de acacia, un agente tensioactivo no iónico (tal como Tween), o un agente tensioactivo iónico (tal como sulfatos o sulfonatos de alcohol de poiiéter alcalino, por ejemplo, Tritón). Las composiciones útiles en la invención se preparan mediante la mezcla de los ingredientes siguiendo generalmente procedimientos aceptados. Por ejemplo, los componentes seleccionados pueden mezclarse de manera simple en un mezclador u otro dispositivo estándar para producir una mezcla concentrada que entonces puede ajustarse a la concentración y viscosidad finales mediante la adición de agua o agente espesante y posiblemente un regulador de pH para controlar el pH, o un soluto adicional para controlar la tonicidad. Para uso del médico, los compuestos se proveerán en formas de dosis unitaria que contengan una cantidad de un agonista de exendina, con o sin otro agente de antivaciado. Las cantidades terapéuticamente efectivas de un agonista de exendina para uso en el control de vaciado gástrico y en condiciones en las que el vaciado gástrico se disminuye o regula de manera conveniente son aquellas que disminuyen los niveles de glucosa en la sangre post-prandial, de preferencia a no más de aproximadamente 8 ó 9 mM o de manera que los niveles de glucosa en la sangre se reduzcan como se desea. En individuos diabéticos o intolerantes a la glucosa, los niveles de glucosa en el plasma son mayores que en individuos normales. En dichos individuos puede obtenerse la reducción o "disminución" benéfica de niveles de glucosa en la sangre post-prandial. Como lo reconocerán los expertos en el área, una cantidad efectiva de agente terapéutico variará con muchos factores incluyendo la edad y el peso del paciente, la condición física del paciente, el nivel de azúcar en la sangre o el nivel de inhibición de vaciado gástrico que se obtendrá, y otros factores. Dichas composiciones farmacéuticas son útiles para provocar hipomotilidad gástrica en un sujeto y pueden emplearse también en otros trastornos en los que la motilidad gástrica se reduce de manera conveniente. La dosis de antivaciado diaria efectiva de los compuestos casi siempre estará en la escala de 0.001 ó 0.005 a alrededor de 5 mg/día, de preferencia alrededor de 0.05 ó 0.1 a 2 mg/día, y con mayor preferencia de alrededor de 0.05 ó 0.1 a 1 mg/día aproximadamente, para un paciente de 70 kg. La dosis exacta que se administrará la determina el médico encargado y depende de dónde se encuentra el compuesto particular dentro de la escala mencionada con anterioridad, así como de la edad, peso y condición del individuo. La administración debe iniciar a la primera señal de síntomas o poco después del diagnóstico de diabetes mellitus. La administración puede ser mediante inyección, de preferencia subcutánea o intramuscular. La administración también puede ser por otras rutas, por ejemplo, rutas oral, bucal o nasal, sin embargo, las dosis deben aumentarse de 5-10 veces, en comparación con las dosis de inyección. En general, en el tratamiento o prevención de niveles de glucosa en la sangre post-prandial elevados, ¡napropiados o no deseados, pueden administrarse los compuestos de esta invención a pacientes que necesiten dicho tratamiento en una escala de dosis similar a aquellas determinadas con anterioridad, sin embargo, los compuestos se administran con mayor frecuencia, por ejemplo, una, dos o tres veces al día. La formulación y modo óptimos de administración de los compuestos de la presente solicitud a un paciente depende de factores conocidos en la técnica, tales como la enfermedad o trastorno específicos, el efecto deseado, y el tipo de paciente. Aunque casi siempre los compuestos se utilizarán para tratar pacientes humanos, también pueden utilizarse para tratar enfermedades similares o idénticas en otros vertebrados, tales como otros primates, animales de granja, tales como cerdos, ganado y aves de corral, y animales para deportes y mascotas, tales como caballos, perros y gatos. Para ayudar en el entendimiento de la presente invención, se incluyen los siguientes ejemplos que describen los resultados de una serie de experimentos. Los experimentos relacionados con esta invención, desde luego, no deben interpretarse como específicamente limitativos de la invención y dichas variaciones de la invención, ahora conocidas o desarrolladas posteriormente, que estarían dentro del alcance de un experto en la técnica se consideran que están dentro del alcance de la invención, como se describe en la presente y se reclama más adelante.
EJEMPLO 1 Preparación del compuesto 1 Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Giu Phe Leu Lys Asn-?/H2 (SEQ. ID. NO. 5] El péptido amidado anterior se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifeniI)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) utilizando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc.). En general, los ciclos de copulación-única se utilizaron en la síntesis y se utilizó la química de Fast Moc (activación de HBTU). La desprotección (remoción del grupo Fmoc) de la cadena de péptido de crecimiento se logró utilizando piperidina. La desprotección final de la resina de péptido completada se logró utilizando una mezcla de trietilsilano (0.2 mL), etanoditiol (0.2 mL), anisol (0,2 mL), agua (0.2 mL) y ácido trifluoroacético (15 mL) de acuerdo con los métodos estándares (Introduction to Cleavage Techniques, Applied Biosystems, Inc.). El péptido se precipitó en éter/agua (50 mL) y se centrifugó. El precipitado se reconstituyó en ácido acético glacial y se liofilizó. El péptido liofilizado se disolvió en agua. La pureza cruda fue de alrededor de 75%. En los pasos de purificación y análisis se utilizaron el solvente A (0.1 % de TFA en agua) y solvente B (0.1 % de TFA en ACN). La solución que contiene péptido se aplicó a una columna de preparación de C-18 y se purificó (10% a 40% de solvente B en solvente A durante 40 minutos). La pureza de las fracciones se determinó ¡socráticamente utilizando una columna analítica de C-18. Las fracciones puras se recolectaron proveyendo el péptido antes identificado. La RP-CLAR analítica (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado dio el péptido de producto que tiene un tiempo de retención observado de 19.2 minutos. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3171.6; encontrado: 3172.
EJEMPLO 2 Preparación del compuesto 2 His Gly Ala Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 6] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-d¡metox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 36% a 46% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado dio el péptido del producto teniendo un tiempo de retención observado de 14.9 minutos. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3179.6; encontrado 3180.
EJEMPLO 3 Preparación del compuesto 3 His Gly Glu Ala Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 7] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 37% a 47% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado dio el péptido del producto teniendo un tiempo de retención observado de 12.2 minutos. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3251.6; encontrado 3253.3.
EJEMPLO 4 Preparación del compuesto 4 His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 8] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 35% a 65% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado dio el péptido del producto teniendo un tiempo de retención observado de 16.3 minutos. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3193.6; encontrado 3197.
EJEMPLO 5 Preparación del compuesto 5 Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-?//-/2 [SEQ. ID. NO. 9] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3228.6.
EJEMPLO 6 Preparación del compuesto 6 His Gly Ala Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-? H2 [SEQ. ID. NO. 10] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-d¡metoxifen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3234.7. • EJEMPLO 7 Preparación del compuesto 7 His Gly Glu Ala Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val 10 Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-? H2 [SEQ. ID. NO. 11] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2,-4'-dimetox¡fen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3308.7.
EJEMPLO 8 Preparación del compuesto 8 His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Trp Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 12] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3250.7.
EJEMPLO 9 Preparación del compuesto 9 His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Ala Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 13] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1 . En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3252.6.
EJEMPLO 10 Preparación del compuesto 10 Ala Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-?/tf2 [SEQ. ID. NO. 14] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido dei producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3200.6.
EJEMPLO 11 Preparación del compuesto 11 Ala Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val 10 Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 15] • El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3143.5.
EJEMPLO 12 Preparación del compuesto 12 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 16] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifeniI)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3214.6.
EJEMPLO 13 Preparación del compuesto 13 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 17] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2,-4'-dimetox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3157.5.
EJEMPLO 14 Preparación del compuesto 14 Ala Gly Asp Gly Ala Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 18] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3184.6.
EJEMPLO 15 Preparación del compuesto 15 Ala Gly Asp Gly Ala Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Phe Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 19] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3127.5.
EJEMPLO 16 Preparación del compuesto 16 Ala Gly Asp Gly Thr NaftilAla Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 20] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3266.4.
EJEMPLO 17 Preparación del compuesto 17 Ala Gly Asp Gly Thr Naftilala Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-? H2 [SEQ. ID. NO. 21] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-d¡metox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3209.4.
EJEMPLO 18 Preparación del compuesto 18 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Ser Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 22] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3200.6.
EJEMPLO 19 Preparación del compuesto 19 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Ser Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 23] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3143.5.
EJEMPLO 20 Preparación del compuesto 20 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ala Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 24] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3198.6.
EJEMPLO 21 Preparación del compuesto 21 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ala Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 25] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetox¡fenii)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3141.5.
EJEMPLO 22 Preparación del compuesto 22 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn- /H2 [SEQ. ID. NO. 26] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3170.6.
EJEMPLO 23 Preparación del compuesto 23 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Phe Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 26] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3113.5.
EJEMPLO 24 Preparación del compuesto 24 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 28] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3228.6.
EJEMPLO 25 Preparación del compuesto 25 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 29] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3171.6.
EJEMPLO 26 Preparación del compuesto 26 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Ala Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 30] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3172.5.
EJEMPLO 27 Preparación del compuesto 27 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Ala Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 31] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-d¡metox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3115.4.
EJEMPLO 28 Preparación del compuesto 28 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Pentilgly Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 32] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3230.4.
EJEMPLO 29 Preparación del compuesto 29 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Pentilgly Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 33] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-d¡metox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3198.6.
EJEMPLO 30 Preparación del compuesto 30 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ala Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Thr Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 34] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3141.5.
EJEMPLO 31 Preparación del compuesto 31 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ala Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 35] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3157.5.
EJEMPLO 32 Preparación del compuesto 32 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Ala Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 36] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3100.4.
EJEMPLO 33 Preparación del compuesto 33 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Ala Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 37] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se €> 5 desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por 10 electroaspersión (M): calculado 3157.6.
EJEMPLO 34 Preparación del compuesto 34 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Ala Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 38] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en Jo ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3100.5.
EJEMPLO 35 Preparación del compuesto 35 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Ala Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 39] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-d¡metox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3100.5.
EJEMPLO 36 Preparación del compuesto 36 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Ala Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 40] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3154.5.
EJEMPLO 37 Preparación del compuesto 37 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Ala Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-/VH2 [SEQ. ID. NO. 41] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3115.5.
EJEMPLO 38 Preparación del compuesto 38 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Pentlgly Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys [SEQ. ID. NO. 42] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3212.4.
EJEMPLO 39 Preparación del compuesto 39 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Pentlgly Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 43] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2,-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3173.4.
EJEMPLO 40 Preparación del compuesto 40 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Ala Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 44] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorleucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3156.6.
EJEMPLO 41 Preparación del compuesto 41 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Ala Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 45] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3099.5.
EJEMPLO 42 Preparación del compuesto 42 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys GIn Met Glu Ala Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 46] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3156.6.
EJEMPLO 43 Preparación del compuesto 43 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Ala Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn- /H2 [SEQ. ID. NO. 47] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifeniI)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3099.5.
EJEMPLO 44 Preparación del compuesto 44 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Ala Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 48] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3156.6.
EJEMPLO 45 Preparación del compuesto 45 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Ala Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 49] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1 . En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3099.5.
EJEMPLO 46 Preparación del compuesto 46 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Ala Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-?/tf2 [SEQ. ID. NO. 50] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2,-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3186.6.
EJEMPLO 47 Preparación del compuesto 47 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Ala Arg Leu Phe He Giu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 51] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3129.5.
EJEMPLO 48 Preparación del compuesto 48 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Ala Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 52] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3129.5.
EJEMPLO 49 Preparación del compuesto 49 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Ala Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 53] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3072.4.
EJEMPLO 50 Preparación del compuesto 50 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys GIn Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Ala Phe lie Glu Trp Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 54] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3172.5.
EJEMPLO 51 Preparación del compuesto 51 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Ala Phe lie Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 55] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3115.5.
EJEMPLO 52 Preparación del compuesto 52 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Naftilala He Glu Trp Leu Lys Asn-/VH2 [SEQ. ID. NO. 56] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3266.4.
EJEMPLO 53 Preparación del compuesto 53 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Naftilala He Glu Phe Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 57] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3209.4.
EJEMPLO 54 Preparación del compuesto 54 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe Val Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 58] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3200.6.
EJEMPLO 55 Preparación del compuesto 55 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe Val Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 59] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3143.5.
EJEMPLO 56 Preparación del compuesto 56 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe tButilgly Glu Trp Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 60] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3216.5.
EJEMPLO 57 Preparación del compuesto 57 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe tButilgly Glu Phe Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 61] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2*-4'-dimetoxifen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3159.4.
EJEMPLO 58 Preparación del compuesto 58 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Asp Trp Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 62] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3200.6.
EJEMPLO 59 Preparación del compuesto 59 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Asp Phe Leu Lys Asn-/VH2 [SEQ. ID. NO. 63] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3143.5.
EJEMPLO 60 Preparación del compuesto 60 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Ala Leu Lys Asn-?/H2 [SEQ. ID. NO. 64] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3099.5.
EJEMPLO 61 Preparación del compuesto 61 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Ala Leu Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 65] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-d¡metoxifen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3081.4.
EJEMPLO 62 Preparación del compuesto 62 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Ala Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 66] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3172.5.
EJEMPLO 63 Preparación del compuesto 63 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Ala Lys Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 67] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifeniI)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3115.5.
EJEMPLO 64 Preparación del compuesto 64 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Trp Leu Ala Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 68] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetox¡fen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3157.5.
EJEMPLO 65 Preparación del compuesto 65 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Ala Asn-NH2 [SEQ. ID. NO. 69] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2,-4'-d¡metoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3100.4.
EJEMPLO 66 Preparación del compuesto 66 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Trp Leu Lys A\a-NH2 [SEQ. ID. NO. 70] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-dimetox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3171.6.
EJEMPLO 67 Preparación del compuesto 67 Ala Gly Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Phe Leu Lys A\a-NH2 [SEQ. ID. NO. 71] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3114.5.
EJEMPLO 68 Preparación del compuesto 68 Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro-NH2 [SEQ. ID. NO. 72] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 4033.5.
EJEMPLO 69 Preparación del compuesto 69 His Gly Ala Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Phe Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro-?/H2 [SEQ. ID. NO. 73] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3984.4.
EJEMPLO 70 Preparación del compuesto 70 His Gly Glu Ala Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro-NH2 [SEQ. ID. NO. 74] • El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis 9 se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 4016.5.
EJEMPLO 71 Preparación del compuesto 71 His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro-NH2 [SEQ. ID. NO. 75] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,:dimetox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3861.3. 9 EJEMPLO 72 Preparación del compuesto 72 Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Ala Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn Gly Giy Pro Ser Ser Gly Ala Pro-NH2 [SEQ. ID. NO. 76] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3746.1.
EJEMPLO 73 Preparación del compuesto 73 Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly A\a-NH2 [SEQ. ID. NO. 77] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3742.1.
EJEMPLO 74 Preparación del compuesto 74 His Gly Ala Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Phe Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly A\a-NH2 [SEQ. ID. NO. 78] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3693.1.
EJEMPLO 75 Preparación del compuesto 75 His Gly Glu Ala Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Giu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser G\y-NH2 [SEQ. ID. NO. 79] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó ei solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3751.2.
EJEMPLO 76 Preparación del compuesto 76 His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val 5 Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser-? H2 [SEQ. ID. NO. 80] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3634.1. • EJEMPLO 77 20 Preparación del compuesto 77 Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser-NH2 [SEQ. ID. NO. 81] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3526.9.
EJEMPLO 78 Preparación del compuesto 78 His Gly Ala Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn Gly Gly Pro Sera-NH2 [SEQ. ID. NO. 82] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifeniI)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3477.9.
EJEMPLO 79 Preparación del compuesto 79 His Gly Glu Ala Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro-?/H2 [SEQ. ID. NO. 83] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3519.9.
EJEMPLO 80 Preparación del compuesto 80 His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn Gly G\y-NH2 [SEQ. ID. NO. 84] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3307.7.
EJEMPLO 81 Preparación del compuesto 81 Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn G\y-NH2 [SEQ. ID. NO. 85] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3186.5.
EJEMPLO 82 Preparación del compuesto 82 His Gly Ala Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly tPro Ser Ser Gly Ala tPro tPro tPro-/VH2 [SEQ. ID. NO. 86] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-dimetoxifen¡I)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. Se requieren acoplamientos dobles en los residuos 37, 36 y 31. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 4121.1.
EJEMPLO 83 Preparación del compuesto 83 His Gly Glu Ala Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Ala tPro tPro tPro-NH2 [SEQ. ID. NO. 87] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-d¡metoxifenii)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. Se requieren acoplamientos dobles en los residuos 37, 36 y 31. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 4173.2.
EJEMPLO 84 Preparación del compuesto 84 His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly NMeala Ser Ser Gly Ala NMeala Nmeala-?/H2 [SEQ. ID. NO. 88] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. Se requieren acoplamientos dobles en los residuos 36 y 31. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3796.1.
EJEMPLO 85 Preparación del compuesto 85 Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly hPro Ser Ser Gly Ala hPro-?/H2 [SEQ. ID. NO. 89] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetox¡fen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. Se requiere un acoplamiento doble en el residuo 31. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3871.1.
EJEMPLO 86 Preparación del compuesto 86 His Gly Ala Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly A\a-NH2 [SEQ. ID. NO. 90] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLÁR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3750.2.
EJEMPLO 87 Preparación del compuesto 87 His Gly Asp Ala Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly-?/H2 [SEQ. ID. NO. 91] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3408.8.
EJEMPLO 88 Preparación del compuesto 88 Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser-NH2 [SEQ. ID. NO. 92] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 4120.6.
EJEMPLO 89 Preparación del compuesto 89 Ala Gly Ala Giy Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser-?/H2 [SEQ. ID. NO. 93] El péptido amidado antes identificado se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al compuesto 1. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 4005.5.
EJEMPLO 90 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 95 El compuesto No. 90, 4-lmidazolilpropionil-Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Trp Leu Lys-NHeoctanoilo Asn-NH2 [SEQ ID. NO. 95], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeoctanoílico para acoplarse en la posición 27. En lugar de usar un aminoácido protegido para el acoplamiento final en la posición 1 , el ácido 4-imidazolilpropiónico se acopla directamente al N terminal de los residuos 2-28 en la resina. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3361.7.
EJEMPLO 91 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 96 El compuesto No. 91 , 4-lmidazolilpropionil-Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Phe Leu Lys-NHeoctanoilo Asn-NH2 [SEQ ID. NO. 96], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se utilizó ácido Fmoc-Lys- NHeocta no ílico para acoplarse en la posición 27. En lugar de usar un aminoácido protegido para el acoplamiento final en la posición 1 , el ácido 4-imidazoIilpropiónico se acopla directamente al N terminal de los residuos 2-28 en la resina. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por eiectroaspersión (M): calculado 3304.6.
EJEMPLO 92 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 97 El compuesto No. 92, 4-lmidazolilpropionil-Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys-NHeoctanoilo Asn Gly G\y-NH2 [SEQ ID. NO. 97], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2,-4'-dimetoxifen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeoctanoílico para acoplarse en la posición 27. En lugar de usar un aminoácido protegido para el acoplamiento final en la posición 1 , el ácido 4-imidazoliipropiónico se acopla directamente al N terminal de los residuos 2-30 en la resina. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3475.8.
EJEMPLO 93 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 98 El compuesto No. 93, 4-lmidazolilpropionil-Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys-NHeoctanoilo Asn Gly G\y-NH2 [SEQ ID. NO. 98], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeoctanoílico para acoplarse en la posición 27. En lugar de usar un aminoácido protegido para el acoplamiento final en la posición 1 , el ácido 4-imidazoliIpropiónico se acopla directamente al N terminal de los residuos 2-30 en la resina. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3418.7.
EJEMPLO 94 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 99 El compuesto No. 94, 4-lmidazolilpropionil-Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Asn Lys-NHeoctanoilo-?/H2 [SEQ ID. NO. 99], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeoctanoílico para acoplarse en la posición 28. En lugar de usar un aminoácido protegido para el acoplamiento final en la posición 1 , el ácido 4-imidazolilpropiónico se acopla directamente al N terminal de los residuos 2-28 en la resina. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3361.7.
EJEMPLO 95 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 100 El compuesto No. 95, 4-lmidazolilpropionil-Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Asn Lys-NHeoctanoilo -NH2 [SEQ ID. NO. 100], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeoctanoílico para acoplarse en la posición 28. En lugar de usar un aminoácido protegido para el acoplamiento final en la posición 1 , el ácido 4-¡midazolilpropiónico se acopla directamente al N terminal de los residuos 2-28 en la resina. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3304.6.
EJEMPLO 96 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 101 El compuesto No. 96, 4-lmidazoIilpropionil-Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Asn Lys-NHeoctanoilo Gly G\y-NH2 [SEQ ID. NO. 101], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeoctanoílico para acoplarse en la posición 28. En lugar de usar un aminoácido protegido para el acoplamiento final en la posición 1 , el ácido 4-imidazolilpropiónico se acopla directamente al N terminal de los residuos 2-30 en la resina. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3475.8.
EJEMPLO 97 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 102 El compuesto No. 97, 4-lmidazolilpropionil-Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Ala Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Asn Lys-NHeoctanoilo Gly G\y-NH2 [SEQ ID. NO. 102], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetox¡fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeoctanoílico para acoplarse en la posición 28. En lugar de usar un aminoácido protegido para el acoplamiento final en la posición 1 , el ácido 4-imidazolilpropiónico se acopla directamente al N terminal de los residuos 2-30 en la resina. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3418.7.
EJEMPLO 98 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 103 El compuesto No. 98, Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys-NHeoctanoilo Asn-NH2 [SEQ ID. NO. 103], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-d¡metoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeocta no ílico para acoplarse en la posición 27. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3334.6.
EJEMPLO 99 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 104 El compuesto No. 99, Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys-NHeoctanoilo Asn-NH2 [SEQ ID. NO. 104], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4,-d¡metoxifen¡l)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeoctanoílico para acoplarse en la posición 27. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3277.6.
EJEMPLO 100 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 105 El compuesto No. 100, Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Lys-NHeoctanoilo Asn Gly G\y-NH2 [SEQ ID. NO. 105], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-d¡metoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeoctanoílico para acoplarse en la posición 27. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3442.8.
EJEMPLO 101 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 106 El compuesto No. 101 , Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu f 10 Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Lys- NHeoctanoilo Asn Gly G\y-NH2 [SEQ ID. NO. 106], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeoctanoílico para acoplarse en la posición 28. En el análisis se f usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3391.7.
EJEMPLO 102 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. No. 107.
El compuesto No. 102 Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Asn Lys-NHe octanoilo-?/H , [SEQ. ID. NO. 107], se ensambla en 4-(2'-4,-dimetox¡-fenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina MBHA resina (Novabiochem, 6.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Imoc (Applied Biosystems, Inc.) se separó de la resina se desprotegió y purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys-NHe-octanoilo para acoplarse en la resina en la posición 28. En el análisis se usó el solvente A (0.1 % TFA en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN)-RP-HPCL analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3334.6.
EJEMPLO 103 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 108 El compuesto No. 103, Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe lie Glu Phe Leu Asn Lys- NHeoctanoilo -NH2 [SEQ ID. NO. 108], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2,-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeocta no ílico para acoplarse en la posición 28. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3277.6.
EJEMPLO 104 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 109 El compuesto No. 104, Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Trp Leu Asn Lys-NHeoctanoilo Gly G\y-NH2 [SEQ ID. NO. 109], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2'-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeoctanoílico para acoplarse en la posición 28. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1 % en agua) y el solvente B (TFA al 0.1 % en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3442.8.
EJEMPLO 105 Preparación de péptido que tiene SEQ. ID. NO. 110 El compuesto No. 105, Ala Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe He Glu Phe Leu Asn Lys-NHeoctanoilo Gly G\y-NH2 [SEQ ID. NO. 110], se ensambló en resina de MBHA de 4-(2,-4'-dimetoxifenil)-Fmoc aminometilfenoxi de acetamidonorieucina (Novabiochem, 0.55 mmoles/g) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc), se separó de la resina, se desprotegió y se purificó de una manera similar al ejemplo 1. Se usó ácido Fmoc-Lys- NHeoctanoíIico para acoplarse en la posición 28. En el análisis se usó el solvente A (TFA al 0.1% en agua) y el solvente B (TFA al 0.1% en ACN). RP-CLAR analítico (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado se lleva a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. Espectrometría de masa por electroaspersión (M): calculado 3391. J.
EJEMPLO 106 Preparación de péptidos de ácido carboxílico C-terminales que corresponden a las secuencias de amida C-terminales anteriores para los compuestos 1-67. 73-79. 80-81. 86-89 y 90-105.
Los péptidos de ácido carboxílico C-terminales correspondientes a los compuestos amidados 1-67, 73-79, 80-81 , 86-89 y 90-105 se ensamblan en la llamada resina Wang (resina de alcohol p-alcoxibencílico (Bachem, 0.54 mmoles/g)) utilizando aminoácidos protegidos* con Fmoc (Applied Biosystems, Inc.), se separan de la resina, se desprotegen y se purifican en una forma similar a la del ejemplo 1. En el análisis se utilizó el solvente A (0.1 % de TFA en agua) y el solvente B (0.1 % de TFA en ACN). La RP-CLAR analítica (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado entonces se llevó a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. La espectrometría de masa por electroaspersión provee un (M) experimentalmente determinado.
EJEMPLO 107 Preparación de péptidos de ácido carboxílico C-terminales que corresponden a las secuencias de amida C-terminales anteriores para los compuestos 68-72, 79 y 82-85.
Los péptidos de ácido carboxílico C-terminales correspondientes a los compuestos amidados 68-72, 79, 82-85 se ensamblan en la resina de 2-cloruro de clorotritilo (malla 200-400), 2% de DVB (Novabiochem, 0.4-1.0 mmoles/g) utilizando aminoácidos protegidos con Fmoc (Applied Biosystems, Inc.), se separan de la resina, se desprotegen y se purifican en una forma similar a la del ejemplo 1. En el análisis se utilizó el solvente A (0.1 % de TFA en agua) y el solvente B (0.1 % de TFA en ACN). La RP-CLAR analítica (gradiente de 30% a 60% de solvente B en solvente A durante 30 minutos) del péptido liofilizado entonces se llevó a cabo para determinar el tiempo de retención del péptido del producto. La espectrometría de masa por electroaspersión provee un (M) experimentalmente determinado.
EJEMPLOS A A E Reactivos utilizados El GLP-1 [7-36]NH2 (GLP-1 ) se compró de Bachem (Torrance, CA). Todos los otros péptidos se prepararon utilizando métodos de síntesis tales como aquellos descritos en la presente. Todos los químicos fueron del grado comercial más alto. El inmunoensayo AMPc SPA se compró de Amersham. Los radioligandos se compraron de New England Nuclear (Boston, MA). Las células RINmdf (American Type Tissue Collection, Rockville, MD) se cultivaron en un medio de DME/F12 que contenía 10% de suero bovino fetal y 2 mM de L-glutamina. Las células se cultivaron a 37°C y 5% de C02/95% de aire humidificado y el medio se reemplazó cada 2 ó 3 días. Las células se cultivaron para confluir y después cosecharse y homogeneizarse utilizando un homogeneizador Polytron. Los homogenatos de célula se almacenaron congelados a -70°C hasta su uso.
EJEMPLO A Estudios del enlace de receptor GLP-1 El enlace de receptor se evalúa por la medición de desplazamiento de [125l] GLP-1 o [1251] exendina (9-39) de membranas RINmdf. El regulador de pH del ensayo contenía 5 µg/mL de bestatina, 1 µg/mL de fosforamidon, 1 mg/mL de albúmina de suero de bovino (fracción V), / 1 mg/mL de bacitracina, y 1 mM de MgCI2 en 20 mM de HEPES, pH 7.4. Para medir el enlazamiento, 30µg de proteínas de membrana (ensayo de proteína Bradford) se volvieron a suspender en 200 µl del regulador de pH del ensayo y se incubaron con 60 pM [125l] GLP-1 o [125l] exendina (9-39) y los péptidos sin marcar durante 120 minutos a 23°C en placas de 96 cavidades (Nagle Nunc, Rochester, NY). Las incubaciones se terminaron mediante filtración rápida con solución salina regulada en su pH de fosfato fría, pH 7.4, a través de filtros de fibra de vidrio GF/B tratados con polietilenimina (Wallac Inc., Gaithersburg, MD) utilizando un cosechador de placa Tomtec Mach II (Wallac Inc., Gaithersburg, MD). Los filtros se secaron, se combinaron con escintilador, y la radioactividad se determinó en un contador escintilador líquido Betaplate (Wallac Inc.). Las muestras de péptido se corrieron en el ensayo como puntos duplicados en 6 diluciones sobre una escala de concentración de 10"6M a 10" 12M para generar curvas de respuesta. La actividad biológica de una muestra se expresa como un valor IC50 calculado de los datos empíricos utilizando un programa de fijación de curva iterativo que utiliza una ecuación logística de parámetro 4 (Prizm™, GraphPAD Software). Los resultados se muestran en el cuadro I.
CUADRO I Compuesto IC50XM1Ü Exendina-4 [SEQ. ID. NO. 2] 0.7 Compuesto 1 [SEQ. ID. NO. 5] 26.1 Compuesto 2 [SEQ. ID. NO. 6] 14.42 Compuesto 3 [SEQ. ID. NO. 7] 41.65 Compuesto 4 [SEQ. ID. NO. 8] 4.96 EJEMPLO B Estudio de activación de ciclasa El regulador de pH del ensayo contiene 10 µM de GTP, 0.75 mM de ATP, 2.5 mM de MgCI2, 0.5 mM de fosfocreatina, 12.5 U/mL de creatina cinasa, 0.4 mg/ml de aprotinina, 1 µM de IBMX en 50 mM de HEPES, pH 7.4. Las membranas y péptidos se combinaron en 100 ml de regulador de pH del ensayo en placas de parte inferior de filtro de 96 cavidades (Millipore Corp., Bedford, MA). Después de 20 minutos de incubación a 37°C, el ensayo se terminó mediante transferencia de sobrenadante por filtración en una placa fresca de 96 cavidades utilizando un múltiple de vacío Millipore. Los contenidos de AMPc sobrenadante se cuantificaron mediante inmunoensayo SPA. Las muestras de péptido se corrieron en el ensayo como puntos triplicados a 7 diluciones sobre una escala de concentración de 10"6M a 10"12M para generar curvas de respuesta. La actividad biológica de una muestra particular se expresó como un valor EC50 calculado como se describe anteriormente. Los resultados se tabularon en el cuadro II.
CUADRO II Compuesto ECm(Mn) Exendina-4 [SEQ. ID. NO. 2] 0.23 Compuesto 1 [SEQ. ID. NO. 5] >1 ,000 Compuesto 2 [SEQ. ID. NO. 6] >10,000 Compuesto 3 [SEQ. ID. NO. 7] >10,000 Compuesto 4 [SEQ. ID. NO. 8] >10,000 EJEMPLO C Determinación de los niveles de glucosa en la sangre en ratones db/db Los ratones C57BLKS/J-m-db de al menos 3 meses de edad se utilizaron para el estudio. Los ratones se obtuvieron de The Jackson Laboratory y se aclimataron durante al menos una semana antes de su uso. Los ratones se alojaron en grupos de diez a 22° + 1°C con un ciclo de luz:oscuridad de 12:12, con luces a las 6 a.m. Todos los animales se sometieron a ayuno durante 2 horas antes de tomar las muestras de sangre de línea basal. Aproximadamente 70µl de sangre se retiraron de cada ratón mediante una perforación en el ojo, después de una anestesia ligera con metofano. Después de recolectar las muestras de sangre de línea basal, para medir las concentraciones de glucosa en el plasma, todos los animales recibieron inyecciones subcutáneas de cualquier vehículo (10.9% de NaCI), exendina-4 o compuesto de prueba (1 µg) en vehículo. Las muestras de sangre se retiraron de nuevo, utilizando el mismo procedimiento, después de exactamente una hora de las inyecciones, y se midieron las concentraciones de glucosa en el plasma. Para cada animal, se calculó el por ciento de cambio en el valor de plasma, del valor de línea basal. La disminución del porcentaje de glucosa en el plasma después de una hora se muestra en el cuadro lll.
CUADRO lll Compuesto de prueba % de caída en glucosa Exendina-4 [SEQ. ID. NO. 2] 39% (n=78) Compuesto 1 [SEQ. ID. NO. 5] 40% (n=4) Compuesto 2 [SEQ. ID. NO. 6] 41 % (n=5) Compuesto 3 [SEQ. ID. NO. 7] 32% (n=5) Compuesto 4 [SEQ. ID. NO. 8] 42% (n=5) EJEMPLO D Determinación de respuesta de dosis de niveles de glucosa en la sangre en ratones db/db Ratones C57BLKS/J-m-db/db de al menos 3 meses de edad se utilizaron para el estudio. Los ratones se obtuvieron de The Jackson Laboratory y se aclimataron durante al menos una semana antes de su uso. Los ratones se alojaron en grupos de diez a 22° + 1°C con un ciclo de luz:oscuridad de 12:12, con luces a las 6 a.m. Todos los animales se sometieron a ayuno durante 2 horas antes de tomar las muestras de sangre de línea basal. Aproximadamente 70µl de sangre se retiraron de cada ratón mediante una perforación en el ojo, después de una anestesia ligera con metofano. Después de recolectar las muestras de sangre de línea basal, para medir las concentraciones de glucosa en el plasma, todos los animales recibieron inyecciones subcutáneas de cualquier vehículo, exendina-4 o compuesto de prueba en las concentraciones indicadas. Las muestras de sangre se retiraron de nuevo, utilizando el mismo procedimiento, después de exactamente una hora de las inyecciones, y se midieron las concentraciones de glucosa en el plasma. Para cada animal, se calculó el por ciento de cambio en el valor de plasma, del valor de línea basal y una relación dependiente de dosis se evaluó utilizando el software de Graphpad Prizm™. La figura 5 ilustra los efectos de variar las dosis de exendina-4 [SEQ. ID. NO. 2] y el compuesto 1 [SEQ. ID. NO. 5] en los niveles de glucosa en el plasma. Exendina-4 tuvo un ED5o de 0.01 µg por ratón y el compuesto 1 tuvo un ED50 de 0.42 µg por ratón.
EJEMPLO E Vaciado gástrico El siguiente estudio se llevó a cabo para examinar los efectos de exendina-4 y un compuesto agonista de exendina de la presente invención en el vaciado gástrico en ratas. Este experimento siguió una modificación del método de Scarpignato, et al., Arch. Int. Pharmacodyn. Ther. 246:286-94 1980. Se utilizaron ratas macho Harían Sprague Dawley (HSD). Los animales se alojaron a 22.7 ± 0.8 C en un ciclo de luz:obscuridad de 12:12 horas (los experimentos se llevaron a cabo durante el ciclo de luz) y se les suministró alimento y agua ad libitum (Diet LM-485, Teklad, Madison, Wl). La exendina-4 se sintetizó de acuerdo con los métodos estándares de síntesis de péptido. La preparación del compuesto 1 [SEQ. ID. NO. 5] se describe en el ejemplo 1. La determinación de vaciado gástrico mediante el método descrito más adelante se realizó después de un ayuno de -20 horas para asegurar que el estómago no contuviera quimo que pudiera interferir con las mediciones de absorbancia espectrofotométrica. Las ratas conscientes recibieron mediante alimentación forzada, 1.5 mL de un gel acalórico que contenía 1.5% de metilcelulosa (M-0262, Sigma Chemical Co, St Louis, MO) y 0.05% de indicador de rojo fenol. Veinte minutos después de la alimentación forzada, las ratas se anestesiaron utilizando 5% de halotano, el estómago se expuso y se sujetó en los esfínteres esofágicos pilóricos e inferiores utilizando pinzas para arterias, removido y abierto en una solución alcalina que se hizo a un volumen fijo. El contenido del estómago se derivó de la intensidad del rojo fenol en la solución alcalina, medida mediante absorbancia a una longitud de onda de 560 nm. En los experimentos por separado en 7 ratas, el estómago y el intestino delgado se extirparon y abrieron en una solución alcalina. La cantidad de rojo fenol que se pudo recuperar del tracto gastrointestinal superior en los 20 minutos de alimentación forzada fue de 89 ± 4%; el colorante que pareció enlazarse irremediablemente a la superficie luminal del intestino pueden explicar el resto. Para considerar una recuperación de colorante máxima de menos de 100%, el porcentaje del contenido restante en el estómago después de 20 minutos se expresó como una fracción del contenido gástrico recuperado de las ratas de control sacrificadas inmediatamente después de la alimentación forzada en el mismo experimento. Por ciento de contenido gástrico restante = (absorbencia a 20 min)/(absorbencia a 0 mm) x 100. En los estudios de línea basal, sin tratamiento con fármacos, se determinó el vaciado gástrico durante 20 minutos. En los estudios de dosis-respuesta, las ratas se trataron con 0.01 , 0.1 , 0.3, 1 , 10 y 100 µg de exendina-4 y 0.1 , 0.3, 1 , 10 y 100 µg de compuesto 1 [SEQ. ID. NO. 5]. Los resultados, mostrados en la figura 6, muestran que los agonistas de exendina, exendina-4 y compuesto 1 , son inhibidores potentes de vaciado gástrico. El EC50 para la exendina-4 fue de 0.27 µg. El EC50 para el compuesto 1 fue de 55.9 µg.

Claims (73)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES
1 .- Un compuesto de péptido de la fórmula (I) [SEQ. ID. NO. 4]:
Xaa-i Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaag Xaaio Xaan Xaa-.2 Xaa-.3 Xaa-| Xaai5 Xaa-iß Xaa?7 Ala Xaa-?9 Xaa2o Xaa21 Xaa^ Xaa23 Xaa2 Xaa2s Xaa26 Xaa27 Xaa28-Z? ; en donde Xaa1 es His, Arg, Tyr, Ala, Norval, Val o Norleu; Xaa2 es Ser, Gly, Ala o Thr; Xaa3 es Ala, Asp o Glu; Xaa4 es Ala, Norval, Val, Norleu o Gly; Xaa5 es Ala o Thr; Xaa6 es Phe, Tyr o naftilalanina; Xaa7 es Thr o Ser; Xaa8 es Ala, Ser o Thr; Xaag es Ala, Norval, Val, Norleu, Asp o Glu; Xaa10 es Ala, Leu, He, Val, pentiglicina o Met; Xaan es Ala o Ser; Xaa?2 es Ala o Lys; Xaa?3 es Ala o Gln; Xaau es Ala, Leu, lie, pentilglicina, Val o Met; Xaa-?5 es Ala o Glu; Xaa?6 es Ala o Glu; Xaa17 es Ala o Glu; Xaa-.g es Ala o Val; Xaa20 es Ala o Arg; Xaa2? es Ala o Leu; Xaa^ es Phe, Tyr o naftilalanina; Xaa23 es He, Val, Leu, pentilglicina, tert-butilgücina o Met; Xaa24 es Ala, Glu o Asp; Xaa25 es Ala, Trp, Phe, Tyr, o naftilalanina; Xaa26 es Ala o Leu; Xaa27 es Ala o Lys; Xaa28 es Ala o Asnj Z! es -OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly Xaa31-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 o Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Xaa3g-Z2; en donde Xaa31, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente selecionados del grupo que consiste en Pro, homoprolina, 3Hyp, 4Hyp, tioprolina, N-alquilglicina, N-alquilpentilglicina o N-alquilalanina; y Z2 es -OH o -NH2; con la condición que no más de tres de Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6, Xaa8, Xaa9, Xaaio, Xaan, Xaa 2, Xaa13, Xaau, Xaa15, Xaa?6, Xaa17, Xaa-ig, Xaa20, Xaa21, Xaa24, Xaa25, Xaa26, Xaa27 y Xaa28, sean Ala; y también siempre y cuando, si Xaa-?, es His, Arg o Tir, entonces por lo menos uno de Xaa3, Xaa4, y Xaag es Ala; y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. 2.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Xaa? es His, Ala o Norval.
3.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Xaai es Ala.
4.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque Xaai es Ala.
5.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Xaa1 es His.
6.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque Xaa-. es His.
7.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Xaa2 es Gly.
8.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque Xaa2 es Gly.
9.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Xaa3 es Ala.
10.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque Xaa3 es Ala.
11.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Xaa es Ala.
12.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque Xaa es Ala.
13.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Xaa9 es Ala.
14.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque Xaag es Ala.
15.- Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 8-14, caracterizado además porque Xaa14 es Leu, pentilglicina o Met.
16.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado además porque Xaa2s es Trp o Phe.
17.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado además porque Xaa6 es Ala, Phe o naftilalanina; Xaa22 es Phe o naftilalanina; y Xaa23 es He o Val.
18.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado además porque Z-. es -NH2.
19.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado además porque Xaa3-?, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente selecionados del grupo que consiste en Pro, homoprolina, tioprolina y N-alquilalanina.
20.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Xaa3g es Ser o Tyr.
21.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado además porque Xaa3g es Ser o Tyr.
22.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Xaa39 es Ser.
23.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado además porque Xaa3g es Ser.
24.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Z2 es -NH2.
25.- Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 19, 21 ó 23, caracterizado además porque Z2 es -NH2.
26.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Z-. es -NH2.
27.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Xaa3?, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente selecionados del grupo que consiste en Pro, homoprolina, tioprolina y N-alquilalanina.
28.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque tiene una secuencia de aminoácidos seleccionada de SEQ. ID. NOS. 5 a 93.
29.- Un compuesto de péptido de la fórmula (l) [SEQ. ID. NO. 4]: Xaai Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaag Xaa10 Xaan Xaa?2 Xaa?3 Xaau Xaa-id Xaa?6 Xaa?7 Ala Xaa-.8 Xaaig Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28-Z? ; en donde Xaa-? es His o Ala; Xaa2 es Gly o Ala; Xaa3 es Ala, Asp o Glu; Xaa4 es Ala o Gly; Xaa5 es Ala o Thr; Xaa6 es Phe o naftilalanina; Xaa7 es Thr o Ser; Xaa8 es Ala, Ser o Thr; Xaa9 es Ala, Asp o Glu; Xaa10 es Ala, Leu o pentiglicina; Xaan es Ala o Ser; Xaa-.2 es Ala o Lys; Xaa13 es Ala o Gln; Xaau es Ala, Leu, Met o pentilglicina; Xaa-?5 es Ala o Glu; Xaa16 es Ala o Glu; Xaa17 es Ala o Glu; Xaa19 es Ala o Val; Xaa20 es Ala o Arg; Xaa21 es Ala o Leu; Xaa22 es Phe o naftilalanina; Xaa23 es He, Val o tert-butilglicina; Xaa2 es Ala, Glu o Asp; Xaa25 es Ala, Trp o Phe; Xaa26 es Ala o Leu; Xaa27 es Ala o Lys; Xaa28 es Ala o Asn; Z es -OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa31-Z2, Gly Gly Xaa3 Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 o Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Ser-Z2; Xaa3?, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente Pro, homoprolina, tioprolina, o N-metilalanina; y Z2 es -OH o -NH2; con la condición que no más de tres de Xaa3, Xaa5, Xaa6, Xaa8, Xaa 0, Xaan, Xaa12, Xaa13, Xaau, Xaa-.5, Xaa16, Xaa17, Xaa-.9, Xaa20, Xaa2?, Xaa24, Xaa25, Xaa26, Xaa27 y Xaa28 sean Ala; y también siempre y cuando, si Xaai, es His, Arg o Tyr, entonces por lo menos uno de Xaa3, Xaa , y Xaa9 es Ala; y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
30.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado además porque tiene una secuencia de aminoácidos seleccionada de SEQ. ID. NOS. 5-9.
31.- Una composición que comprende un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 29 en un vehículo farmacéuticamente aceptable.
32.- Una composición que comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 30 en un vehículo farmacéuticamente aceptable.
33.- El uso de un compuesto como el que se reclama en la reivindicación 1 , para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de diabetes mellitus.
34.- El uso de un compuesto como el que se reclama en la reivindicación 28, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de diabetes mellitus.
35.- El uso de un compuesto como el que se reclama en la reivindicación 29, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de diabetes mellitus.
36.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 33, caracterizado además porque comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de una insulina.
37.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 34, caracterizado además porque comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de una insulina.
38.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 35, caracterizado además porque comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de una insulina.
39.- El uso de un compuesto como el que se reclama en la reivindicación 1 , para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de una condición hiperglicémica en un mamífero.
40.- El uso de un compuesto como el que se reclama en la reivindicación 28, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de una condición hiperglicémica en un mamífero.
41.- El uso de un compuesto como el que se reclama en la reivindicación 29, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de una condición hiperglicémica en un mamífero.
42.- Un compuesto de péptido de la fórmula (II) [SEQ. ID. NO. 94]: Xaai Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaaß Xaa7 Xaa8 Xaag Xaaio Xaan Xaa?2 Xaa13 Xaau Xaa-15 Xaa16 Xaa?7 Ala Xaa?9 Xaa20 Xaa21 Xaa^ Xaa23 Xaa2 Xaa2s Xaa26 X1-Z1; en donde Xaai es His, Arg, Tyr, Ala, Norval, Val, Norleu o 4-imidazopropionilo; Xaa2 es Ser, Gly, Ala o Thr; Xaa3 es Ala, Asp o Glu; Xaa4 es Ala, Norval, Val, Norleu o Gly; Xaa5 es Ala o Thr; Xaa6 es Phe, Tyr o naftilalanina; Xaa7 es Thr o Ser; Xaa8 es Ala, Ser o Thr; Xaag es Ala, Norval, Val, Norleu, Asp o Glu; Xaa10 es Ala, Leu, He, Val, pentilglicina o Met; Xaan es Ala o Ser; Xaa12 es Ala o Lys; Xaa?3 es Ala o Gln; Xaa14 es Ala, Leu, He, pentilglicina, Val o Met; Xaa?5 es Ala o Glu; Xaa16 es Ala o Glu; Xaa?7 es Ala o Glu; Xaa-.g es Ala o Val; Xaa20 es Ala o Arg; Xaa21 es Lys-NHE-R, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo o cicloalquil-alcanoilo de cadena recta o ramificada de C1-C10 Ala, Leu o; Xaa22 es Phe, Tyr o naftilalanina; Xaa23 es He, Val, Leu, pentilglicina, tert-butilglicina o Met; Xaa24 es Ala, Glu o Asp; Xaa25 es Ala, Tf, Phe, Tyr, o naftilalanina; Xaa26 es Ala o Leu; X1 es Lys Asn, Asn Lys, Lys-NHE-R Asn, Asn Lys-NHE-R, Lys-NHE-R Ala, Ala Lys-NHE-R, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo o cicloalquilalcanoilo de cadena recta o ramificada de C1-C10; Z-, es -OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa31-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa3? Ser Ser Gly Ala Xaa38 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 o Gly Gly Xaa3-? Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Xaa39-Z2; en donde Xaa3?, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente seleccionados del grupo que consiste en Pro, homoprolina, 3Hyp, 4Hyp, tioprolina, N-alquilglicina, N-alquilpentilglicina y N-alquilalanina; y Z2 es -OH o -NH2; con la condición que no más de tres de Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6, Xaa8, Xaag, Xaa10, Xaan, Xaa?2, Xaa?3, Xaa1 , Xaa15, Xaai6, Xaa17, Xaa19, Xaa20, Xaa2?, Xaa2 , Xaa25, Xaa26, sean Ala; y también siempre y cuando, si Xaa-i, es His, Arg, Tir o 4-¡midazopropionilo, entonces por lo menos uno de Xaa3, Xaa , y Xaag es Ala; y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
43.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaai es His, Ala, Norval o 4-imidazopropionilo.
44.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado además porque Xaai es His o 4-imidazopropionilo.
45.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado además porque Xaai es Ala.
46.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado además porque Xaai es His.
47.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado además porque Xaai es 4-imidazopropionilo.
48.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaa2 es Gly.
49.- Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 43-47, caracterizado además porque Xaa2 es Gly.
50.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaa3 es Ala.
51.- Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 43-47, caracterizado además porque Xaa3 es Ala.
52.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaa4 es Ala.
53.- Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 43-47, caracterizado además porque Xaa es Ala.
54.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaag es Ala.
55.- Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 43-47, caracterizado además porque Xaag es Ala.
56.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaau es Leu, pentilglicina o Met.
57.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaa2s es Trp o Phe.
58.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaa6 es Ala, Phe o naftilalanina; Xaa22 es Phe o naftilalanina; y Xaa 3 es He o Val.
59.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Z-? es -NH2.
60.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaa31, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente selecionados del grupo que consiste en Pro, homoprolina, tioprolina y N-alquilalanina.
61.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaa3g es Ser o Tyr.
62.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 58, caracterizado además porque Xaa39 es Ser o Tyr.
63.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaa3g es Ser.
64.- Un compuesto de conformidad con ia reivindicación 58, caracterizado además porque Xaa3g es Ser.
65.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Z2 es -NH2.
66.- Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 50, 52 ó 54, caracterizado además porque Z2 es -NH2.
67.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Z es -NH2.
68.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaa31, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 son independientemente selecionados del grupo que consiste en Pro, homoprolina, tioprolina y N-alquilalanina.
69.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque X-, es Lys Asn, Lys-NHe-R Asn o Lys-NHe-R Ala, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo de cadena recta o ramificada de C C?o.
70.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque Xaa2-? es Lys -NHe-R, en donde R es Lys, Arg, alcanoilo o cicloalquil-alcanoilo de cadena recta o ramificada de C?-C-|0.
71.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque tiene una secuencia de aminoácidos seleccionada de SEQ. ID. NOS. 95 a 1 10.
72.- Una composición que comprende un compuesto de conformidad co? la reivindicación 42 en un vehículo farmacéuticamente aceptable.
73.- Una composición que comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 71 en un vehículo farmacéuticamente aceptable.
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