MXPA00001349A - Derivados de acidos ariloxiarilsulfonilaminohidroxamicos - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a:Un compuesto de la fórmula o las sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en donde R1 es alquilo (C1-C6);R2 es alquilo (C1-C6);ço R1 y R2 tomados junto con elátomo de carbono al que están unidos forman un anillo seleccionado de cicloalquilo (C5-C7), 4-tetrahidropiranilo y 4-piperidinilo;R3 es hidrógeno o alquilo (C1- C6);e Y es 4-fluoroó4-cloro.

Description

DERIVADOS DE ÁCIDOS ARlLOXIARÍLSULFONlLAMINOHIDROXAMICOS ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a derivados de ácidos ariloxiarilsulfonilaminohidroxámicos. Estos compuestos son inhibidores selectivos de la metaloproinasa -13 de matriz y como tales, son útiles en el tratamiento de una afección seleccionada del grupo compuestos por artritis, cáncer, ulceración tisular, estenosis recurrrente, enfermedad periodontal, epidermólosis vesicular, resorción ósea, movilidad de implantes articulares artificiales, ateroesclerosis, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular (por ejemplo degeneración macular) y otras enfermedades caracterizadas por actividad de metaloproteinasa de matriz. Esta invención se refiere también a un procedimiento de uso de dichos compuestos en el tratamiento de las enfermedades anteriores en mamíferos, especialmente seres humanos, y a sus composiciones farmacéuticas útiles. Hay ciertas enzimas que efectúan el fraccionamiento de las proteínas estructurales y que son metaloproteasas estructuralmente relacionadas. Las metaloproteinasas que degradan la matriz, tal como gelatinasa, estromelisina y coiogenesa, están involucradas en la degradación de la matriz de los tejidos (por ejemplo: colapso del colágeno) y se han implicado en muchas afecciones patológicas que comportan tejidos conectivos y metabolismo de la matriz de la membrana basal anómalos, tal como artritis (por ejemplo: osteoartritis y artritis reumatoide), ulceración de tejidos (por ejemplo: ulceración corneal, epidérmica y gástrica), cicatrización de heridas anómala, enfermedad periodontal, enfermedad ósea (por ejemplo enfermedad de Paget y osteoporosis), metástasis o invasión teumoral, así como infección de VIH (J. Leuk. Biol., 52 (2): 224-248, 1992). Se sabe que el factor de necrosis tumoral está involucrado en muchas enfermedades infecciosas y autoinmunitarias (W. Friers, FEBS Letters. 1991 , 285, 199). Además se ha mostrado que el TNF es el medidor principal de la respuesta inflamatoria observada en la sepsis y en el choque séptico (C:E: Spooner y cois., Clinical Immunology and Immunopatholoqy, 1992, 62S11 ).

RESUMEN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un compuesto de fórmula: o las sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en la que R1 es alquilo (d- Ce); R2 es alquilo (C-i-Cß); o R1 y R2 tomados junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un anillo seleccionado de cicloalquilo (C5-C7), 4-tetrahidropiranilo y 4-pipetidinilo; R3 es hidrógeno o alquilo (CrC6); e Y es un sustituyente en cualquiera de los átomos de carbono del anillo fenilo capaz de soportar un enlace adicional, preferiblemente de 1 a 2 sustituyentes (más preferiblemente un sustituyente, lo más preferible un sustituyente en la posición 4) en el anillo fenilo, seleccionado independientemente de hidrógeno, fluoro, cloro, trifluorometilo, alcoxilo (CrC6). La expresión "alquilo", como se usa aquí, a menos que se indique otra cosa, incluye radicales hidrocarburo monovalentes saturados que tienen fracciones lineales, ramificadas o cíclicas o combinaciones de las mismas. La expresión "alcoxilo", como se usa aquí, incluye grupos O-alquilo en los que "alquilo" se define anteriormente. La presente invención se refiere también a las sales farmacéuticas aceptables de adición de ácido de los compuestos de fórmula I. Los ácidos que se utilizan para preparar las sales farmacéuticamente aceptables de adición de ácido de los compuestos básicos mencionados anteriormente de esta invención son los que forman sales no tóxicas de adición de ácido, es decir: sales que contienen aniones farmacéuticamente aceptables, tal como sales clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, nitrato, sulfato, bisulfato, fosfato ácido, acetato, lactato, citrato, citrato ácido, tartrato, bitartrato, succinato, maleato, fumarato, glucanato, glucarato, benzoato, metanosultonato, atanosulfonato, benzenosulfanato, p-toluenculfonato y pamoato [es decir: 1 ,1 '-,metileno-bis-(2-hidroxi-33-naftoato)].

La invención se refiere también a las sales de adición de base de fórmula I. Las bases químicas que pueden utilizarse como reactivos para preparar las sales básicas farmacéuticamente aceptables de estos compuestos de fórmula I que son de naturaleza acida son aquellas que forman sales básicas no tóxicas con dichos compuestos. Dichas sales básicas no tóxicas incluyen, pero no se limitan a, las derivadas de cationes farmacéuticamente aceptables, tales como cationes de metales alcalinos (por ejemplo: potasio y sodio9 y cationes de metales alcalinotérreos (por ejemplo: calcio y magnesio), o sales de adición de amonio o aminas solubles en agua, tales como N-metilglucamina (meglumina), y alconolamonio inferior y otras sales básicas de aminas orgánicas farmacéuticamente aceptables. Los compuestos de fórmula I pueden tener centros quirales y, por los tanto, existen en diferentes formas enantiómeras. Está invención se refiere a todos los isómeros y estereoisómeros ópticos de los compuestos de fórmula I y sus mezclas. Esta invención también abarca composiciones farmacéuticas que contienen y procedimientos de tratamiento o prevención que comprenden la administración de profármacos de compuestos de fórmula I que tienen grupos amido, hidroxilo o carboxilo libres se pueden convertir en profármacos. Los profármacos incluyen compuestos en los que un residuo aminoácido o una cadena polipeptídica de dos o más (por ejemplo, 2, 3 ó 4) residuos amonoácido que están unidos covalentemente por enlaces peptídicos se une a grupos amino, hidroxilo o ácido carboxílico libres de compuestos de fórmula I. Los residuos aminoácido incluyen los 20 aminoácidos naturales designados comúnmente por símbolos de tres letras e incluyen también 4-hidroxiprolina, hidroxilisina, demosina, isodemosina, 3-metilhistidina, norvalina, beta-alanina, ácido gamma-aminobutúrico, citrulina, homocisteina, homoserina, ornitina y sulfona metionina. Los profármacos incluyen también compuestos de fórmula I en los que el ácido hidroxámico y la fracción carbonilo, cuando se toman juntos, forman un grupo de fórmula en la que R1, R2 e Y son como se define en la fórmula I, y U, V son independientemente carbonilo, metileno, SO2 ó S3, y b es un número entero de uno a tres en la que cada grupo metileno está sustituido opcionalmente con hidroxilo. Los compuestos preferidos de fórmula I incluyen aquéllos en los que Y es hidrógeno, fluoro o cloro, preferiblemente 4-fluoro o 4-cloro. Otros compuestos preferidos de fórmula I incluyen aquéllos en los que R1 y R2, tomados junto con el átomo de carbono al que están unidos, forman un anillo coclopentilo o 4-tetrahidropiranilo. Otros compuestos preferidos de fórmula I incluyen aquéllos en los que R1 y R2 son metilo.

Otros compuestos preferidos de fórmula I incluyen aquéllos en los que R3 es hidrógeno. Los compuestos preferidos específicos de fórmula I incluyen los siguientes: éster etílico del ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxil)bencenosulfonil]-(1-hidroxi-carbamoil-ciclopentil)aminol]-propiónico. Acido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosuldonil]-(1 -hidroxi-carbomoilciclopentil)amino]propiónico. Ester etílico del ácido 3-[[4-(4-fluorogenoxi)bencenodulfonil]-(1-hidroxicarbamoil-1-meteletil)animo]prop¡ónico, y ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-1 -hidroxi-carbomoil-1 -metiletil)amino]propiónico. Otros compuestos de fórmula I incluyen los siguientes: ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-(4-hidroxicarbamoiltetrahidropiran-4-il)-amino]propiónico. Ester etílico del ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-(4-hidroxicarbamoil-tetrahidropiran-4-il)-amino]propiónico. Acido 3-[[4-(4-clorofenoxi)bencenosulfonil]-(4-hidroxicarbamoiltetrahidropiran-4-il)-am¡no]propiónico. Ester etílico dei ácido 3-[[4-(4-clorofenoxi)bencenosulfonil]-(4-hidroxicarbamoil-tetrahidropiran-4-il)-amino]propiónico. Acido 3-[(4-hidroxicarbamoiltetrahidropiran-4-il)-(4-fenoxibencenosulfonil)amino]-propiónico. Ester etílico del ácido 3-[(4-hidroxicarbomoil-tetrahidropiran-4-il)-(4-fenoxibencenosulfonil)amino]-propiónico.

Ester etílico del ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-(4-hidroxicarbamoilpiperidin-4-il)-amino]propión¡co. Acido 3-[[4-(4-clorofenoxi)bencenosulfonil]-(1 -hidroxicarbamoil-1 -metiletil)amino]-propiónico. Ester etílico del ácido 3-[[4-(4-clorofenoxi)bencenosulfonil]1 (1-hidroxicarbamoil-1-metiletil)amino]-propiónico. Acido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-(1-hidroxicarbamoilciclohexil)amino]propiónico. Acido 3-[[(1-hidroxicarbomoulciclopentil)-(4-fenoxibencenosulfonil)amino]propiónico, y ácido 3-[[4-(4-clorofenoxi)bencenosuldonil]-(1-hidroxicarbamoilciclopentil)amino]-propiónico. La presente invención se refiere también a una composición farmacéutica para (a) el tratamiento de una afección seleccionada del grupo compuesto por artritis, cáncer, ulceración tisular, estenosis recurrente, enfermedad periodontal, epidermólisis vesicular, resorción ósea, movilidad de implantes articulares artificiales, ateroesclerosis, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular (por ejemplo: degeneración macular) y otras enfermedades caracterizadas por actividad de metaloproteinasa de matriz, o (b) la inhibición selectiva de metaloproteinasa-13 de matriz en un mamífero, incluyendo un ser humano, que comprende una cantidad de un compuesto de la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, efectivo en dichos tratamientos y un vehículo farmacéuticamente aceptable. La presente invención se refiere también a un procedimiento para la inhibición selectiva de la metaloproteinasa-13 de matriz en un mamífero, incluyendo un ser humano, que comprende la administración a dicho mamífero de una cantidad efectiva de un compuesto de la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. La presente invención se refiere también a un procedimiento para tratar una afección seleccionada del grupo compuesto por artritis, cáncer, ulceración tisular, estenosis recurrente, enfermedad periodontal, epidermólisis vesicular, resorción ósea, movilidad de implantes articulares artificiales, ateroesclerosis, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular (por ejemplo, degeneración macular) y otras enfermedades caracterizadas por la actividad de metaloproteinasa-13 de matriz de un mamífero, incluyendo un ser humano, que comprende la administración a dicho mamífero de una cantidad de un compuesto de la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, efectivo en el tratamiento de dicha afección.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Los siguientes esquemas de reacción ilustran la preparación de los compuestos de la presente invención. A menos que se indique otra cosa, Y, R1, R2 y R3 en los esquemas de reacción y la discusión que sigue, se definen como anteriormente.

ESQUEMA 1 Vil N rv El esquema 1 se refiere a la preparación de compuestos de fórmula I a partir de compuestos de fórmula Vil. En relación al esquema 1 , el compuesto aminoácido de fórmula Vil en la que R16 es bencilo, se convierte en el correspondiente compuesto de fórmula VI por reacción con un derivado funcional reactivo de un compuesto del ácido arilsulfónico de fórmula Vil en la presencia de una base, tal como trietilamina, y un disolvente polar, tal como tetrahidrofurano, 1 ,2-dinetoxuetano, dioxano, agua o acetonitrilo, preferiblemente 1 ,2-dimetoxietano. La mezcla de reacción se agita, a temperatura ambiente, durante un período de tiempo entre aproximadamente 10 minutos y aproximadamente 24 horas, preferiblemente aproximadamente 60 minutos. El compuesto ariisulfonilamino de fórmula VI, en la que R16 es bencilo, se convierte en el correspondiente compuesto de fórmula V, en el que R18 es el grupo 3-terc-butil-dimetilsilaniloxipropanilo por reacción con terc-butil-(3-halo-propoxi)dimetilsilano, preferiblemente el derivado yodado, en la presencia de una base, tal como carbonato potásico, carbonato de cesio, hexametildisilazida potásica, o hidruro sódico, preferiblemente hexatildisilazida potásica, La reacción se agita en un disolvente polar, tal como dimetilformamida o N-metilpirrolidin-2-ona, a temperatura ambiente, durante un período de tiempo entre aproximadamente 2 horas a aproximadamente 48 horas, preferiblemente aproximadamente 18 horas. El compuesto de fórmula V se convierte en un derivado de ácido carboxílico de fórmula IV por reacción con un complejo trifluoruro-eterato de boro para formar un alcohol intermedio, seguido por oxidación y protección por esterificación. Específicamente, la reacción con el complejo trifluoruro-eterato de boro se realiza en un disolvente inerte tal como cloruro de metileno, a temperatura ambiente durante aproximadamente 15 minutos a aproximadamente 4 horas, preferiblemente aproximadamente 1 hora. La oxidación del alcohol se facilita utilizando trióxido de cromo en ácido sulfúrico acuoso (reactivo de Jones) a aproximadamente 0°C durante aproximadamente 1 a aproximadamente 6 horas, preferiblemente aproximadamente una a aproximadamente 2 horas. La protección del ácido carboxílico se facilita tratando el ácido libre con un agente alquilante tal como R3-L en el que Les un grupo saliente tal como yodo, bromo, mesilato o tosilato, preferiblemente yodo, como una base como carbonato potásico o carbonato de cesio, preferiblemente carbonato de potasio, en un disolvente polar tal como dimetilformamida, N-metilpirrolidin-2ona o tetrahidrodurano, preferiblemente dimetilformamida, durante aproximadamente 1 a aproximadamente 24 horas, preferiblemente 16 horas, a temperatura aproximadamente ambiente. El compuesto de fórmula IV se convierte en un compuesto de fórmula lll eliminando el grupo protector R16 por hidrogenólisis utilizando paladio en carbono en un disolvente tal como metanol o etanol, durante un período de aproximadamente 30 minutos a aproximadamente 48 horas, preferiblemente 16 horas a una temperatura de aproximadamente 20°C, es decir temperatura ambiente. El compuesto ácido carboxílico de fórmula lll se convierte en el derivado del ácido hidroxámico de fórmula II, en la que R16 es bencilo, por activación del compuesto de fórmula lll seguido de reacción con bencilhidroxilamina. El compuesto de fórmula lll se activa por tratamiento con hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetiIamino)fosfonio en la presencia de una base, a temperatura ambiente, en un disolvente polar. La reacción mencionada anteriormente se realiza durante un período de aproximadamente 15 aproximadamente a aproximadamente 4 horas, preferiblemente aproximadamente 1 hora. El derivado del compuesto de fórmula lll activado se convierte in situ en el compuesto de fórmula II por reacción con clorhidrato de bencilhidroxilamina se realiza durante aproximadamente 1 hora a aproximadamente 5 días, preferiblemente durante aproximadamente 16 horas, a una temperatura de aproximadamente 40°C a aproximadamente 80°C, preferiblemente aproximadamente 60°C. Las bases adecuadas incluyen N-metilmorfolina o diisopropiletilamina, preferiblemente diisopropiletilamina. Los disolventes adecuados incluyen N,N-dimetiIformamida o N-metilpirrolidin-2-ona, preferiblemente N, N-dimetilformamida. El compuesto de fórmula II se convierte en un compuesto I por eliminación del grupo protector de hidroxilamina. La eliminación del grupo protector de hidroxilamina se realiza por hidrogenólisis del grupo protector bencilo utilizando paladio catalítico en sulfato de bario en un disolvente polar en una temperatura de aproximadamente 20°C a aproximadamente 25°C, es decir, temperatura ambiente, durante un período de aproximadamente 1 hora a aproximadamente 5 horas, preferiblemente aproximadamente 3 horas. Los compuestos de fórmula Vil y VIII están comercializados o se pueden hacer procedimientos bien conocidos por los expertos en la técnica.

Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos ácidos de la invención son sales formadas con bases, es decir, sales catiónicas tal como sales de metales alcalinos y alcalinotérreos, tales como sales de sodio, litio potasio, calcio, magnesio así como amónicas, tales como sales de amonio, trimetilamonio y tris-(hidroximetil)-metilamio. De forma similar, también son posibles las sales de adición de ácido, tales como ácidos minerales, ácidos orgánicos carboxílicos y orgánicos sulfónicos, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido metanosulfónico, ácido meleico, siempre que un grupo básico, tal como piridilo, constituya parte de la estructura. Los compuestos de fórmula I que son de naturaleza básica son capaces de formar una amplia variedad de sales diferentes con diferentes ácidos inorgánicos y orgánicos. Aunque dichas sales deben ser farmacéuticamente aceptables para su administración a animales, en la práctica con frecuencia es deseable aislar inicialmente un compuesto de fórmula I de la mezcla de reacción con una sal farmacéuticamente aceptable y después simplemente convertir el último producto de nuevo en el compuesto de base libre por tratamiento con un reactivo alcalino, y posteriormente convertir la base libre en una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable. Las sales de adición de ácido de los compuestos básicos de esta invención se preparan fácilmente tratando el compuesto básico con una cantidad prácticamente equivalente al ácido mineral u orgánico elegido en un medio disolvente acuoso o en un disolvente acuoso o en un disolvente orgánico adecuado tal como metanol o etanol. Mediante la evaporación cuidadosa del disolvente, se obtiene la sal sólida deseada.

Los ácidos que se utilizan para preparar las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables de los compuestos básicos de esta invención son aquéllos que forman sales de adición de ácido no tóxicas, es decir, sales que contienen aniones farmacéuticamente aceptables, tales como sales clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, nitrato, sulfato o bisulfato, fosfato o fosfato ácido, acetato, lactato, citrato o citrato ácido, tartrato o bitartrato, succinato, meleato, fumarato, gluconato, glucarato, benzoato, metanosulfonato y pamoato [es decir, 1 ,1 '-metilen-bis(2-hidroxi-3-naftoato)]. Aquellos compuestos de fórmula I que también son de naturaleza acida, por ejemplo, donde R3 es hidrógeno, son capaces de formar sales de base con diferentes cationes farmacéuticamente aceptables. Ejemplos de dichas sales incluyen las sales de metales alcalinos o metales alcolinotérreos y particularmente, las sales de sodio y potasio. Todas estas sales se preparan por técnicas convencionales. Las bases químicas que se utilizan como reactivos para preparar las sales de base farmacéuticamente aceptables de esta invención son aquellas que forman sales básicas no tóxicas con los compuestos ácidos aquí descritos de fórmula I. Estas sales de base no tóxicas incluyen aquellas derivadas de cationes farmacéuticamente aceptables como sodio, potasio, calcio y magnesio, etc. Estas sales se pueden preparar fácilmente por tratamiento de los compuestos ácidos correspondientes con una solución acuosa que contiene los cationes farmacéuticamente aceptables deseados, y después evaporando la solución resultante a sequedad, preferiblemente bajo presión reducida. De forma alternativa, también se pueden preparar mezclando soluciones en alcanoles inferiores de los compuestos ácidos y el alcóxido de metal alcalino deseado juntos, y después evaporando la solución resultante a sequedad de la misma forma que anteriormente. En cualquier caso, se preferible emplear cantidades estequiométricas de reactivos para asegurar que se completa la reacción y el máximo rendimiento del producto. La capacidad de los compuestos de fórmula I o sus sales farmacéuticamente aceptables (en lo sucesivo denominadas también como compuestos selectivos MMP-13 de la presente invención) para inhibir la metaloproteinasa-13 de matriz (colagenasa 3) y, consecuentemente, demostrar su efectividad en el tratamiento de enfermedades caracterizadas por la metaloproteinasa-13 de matriz se muestra mediante los siguientes ensayos in vitrí.

Valoraciones biológicas Inhibición de la colaqenasa humana (MMP-1 ) La cologenasa recombinante humana se activa con tripsina utilizando la relación siguiente: 10 mg de tripsina por 100 mg de colagenasa. La tripsina y la colágenas se incuban a temperatura ambiente durante 10 minutos, después se añade un exceso de 5 veces (50 mg/10 mg tripsina) de inhibidor de tripsina de soja. Se preparan soluciones madre 10 mM de inhibidores en dimetil sulfóxido y después se diluyen utilizando el esquema siguiente: 10?t?M ? 120 µm ? 12 µM ? 1 ,2 µM ? 0,12µM.

Se añaden después 25 microlitros de cada concentración por triplicado a los pocilios adecuados en la placa microflúor de 96 pocilios. La concentración final del inhibidor será una dilución 1 :4 después de la adición de enzima y sustrato. Los controles positivos (enzima, sin inhibidor) se ponen en los pocilios D1-D6 y los blancos (sin enzima, sin inhibidor) se ponen en los pocilios D7-D12. La colagenasa se diluye a 400 ng/ml y después se añaden 25 ml a los pocilios adecuados de la placa microflúor. La concentración final de colagenasa en el ensayo es 100 ng/ml. El sustrato (DNP-Pro-Cha-Gly-Cys(Me9-His— Ala-Lys(NMA)-NH2) se prepara como una solución madre 5 mM en en dimetil-sulfóxido y se diluye después a 20 mM en solución amortiguadora de ensayo. El ensayo se inicia por la adición de 50 ml de sustrato por pocilio de la placa microflúor para proporcionar una concentración final de 10 mM. Las lecturas de fluorescencia (360 Nm excitación, 460 nm emisión) se toman en el tiempo 0 y después en intervalos de 20 minutos. El ensayo se realiza a temperatura ambiente con un tiempo de análisis típico de 3 horas. Después se hace gráfico de la fluorescencia frente al tiempo para las muestras del blanco y las que contienen colagenasa (se promedian los datos de determinaciones triplicadas). Se elige un punto del tiempo que proporciona una buena señal (el blanco) y que está en una parte lineal de la curva (normalmente alrededor de 120 minutos) para determinar los valores de IC50. El tiempo cero se utiliza como un blanco para cada compuesto en cada concentración y esos valores se sustraen de los datos del minuto 120. Se hace un gráfico de los datos como concentración del inhibidor dividido por la fluorescencia de sólo la colagenasa x 100). Las lc5o son i<0,03 mM entonces se ensayan los inhibidores en concentraciones de 0.3 mM, 0.03 mM, 0.03 mM y 0.003 mM.

Inhibición de MMp-13 El MMP-13 recombinante humano se activa con APMA 2 mM (acetato p-aminofenilmercúrico) durante 1.5 horas, a 37°C y se diluye a 400mg/ml en solución amortiguadora de ensayo (Tris 50 mM, pH 7.5 cloruro sódico 200mM, cloruro calcico 5 mM, cloruro de zinc 20 mM, brij 0.2%). Se añaden 25 microlitros de enzima diluida por pocilio de una placa microflúor de 96 pocilios. Se diluye la enzima después en una relación 1 :4 en el ensayo mediante la adición de un inhibidor y sustrato para proporcionar una concentración final en el ensayo de 100 mg/ml. Se preparan soluciones madre 10 mM de inhibidores en dimetilsulfóxido y después se diluyen en solución amortiguadora del ensayo según el esquema de dilución del inhibidor para la inhibición de colagenasa humana (MMP-1 ): se añaden 25 microlitros de cada concentración por triplicado a la placa microflúor. Las concentraciones finales en el ensayo son 30 mM, 3 mM, 0.3 mM, y 0.03 mM. El sustrato (Dnp-Pro-Cha-Gly-Cys-(Me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH2) se prepara como para inhibición de colagenasa humana (MMP-1 ) y se añaden 50 ml a cada pocilio para proporcionar una concentración de ensayo final de 10 mM. Las lecturas de fluorescencia (360 nM excitación; 450 emisión) se toman en tiempo 0 y cada 5 minutos durante 1 hora. Los controles positivos se componen de enzima y sustrato sin inhibidor y los blancos se componen sólo de sustrato. Las IC50 se determinan como para inhibición de colagenasa humana (MMP-1 ). Si se notifica que las IC50 son menores a 0.03 mM, los inhibidores se ensayan después en concentraciones finales de 0.3 mM, 0.03 mM, 0.003 mM y 0.0003 mM. Los compuestos de la presente invención poseen actividad sorprendentemente selectiva frente a la metaloproteinasa-13 de matriz (cologenasa 3) en comparación con metaloproteinasa-1 de matriz (cologenasa 1 ). Específicamente, los compuestos de fórmula I son 100 veces más selectivos para la metaloproteinasa-13 de matriz (cologenasa 3) que para la metaloproteinasa-1 de matriz (cologenasa 3) que para la metaloproteinasa-1 de matriz (cologenasa 1 ) y también IC50 de menos de 10 nM frente a la metaloproteinasa-13 de matriz (cologenasa 3). El cuadro 1 enumera varios compuestos que demuestran la selectividad inesperada de los compuestos de la invención.

CUAD O 1 A+ = MMP1- IC50(nM) B* = MMP-13 IC50(nM) Para la administración a seres humanos para la inhibición de metaloproteinasa-13 de matriz o la producción de factor de necrosis tumoral (TNF), se puede utilizarse una variedad de vías convencionales incluyendo la oral, parenteral y tópica. En general, el compuesto activo se administrará oral o parenteralmente en dosis entre aproximadamente 0.1 y 25 mg/kg de peso del sujeto a tratar por día, preferiblemente aproximadamente 3.33 a 5 mg/kg. Sin embargo, se producirá necesariamente alguna variación en la dosificación dependiendo de la afección del sujeto que se está tratando. La persona responsable de la administración determinará, en cada caso, la dosis adecuada para el sujeto individual. Los compuestos de la presente invención pueden administrarse en una amplia variedad de diferentes formas de dosificación, en general, los compuestos terapéuticamente efectivos de esta invención están presentes en dichas formas de dosificación en niveles de concentración que oscilan de aproximadamente 5,0% a aproximadamente 70% en peso. Para la administración oral, se pueden emplear comprimidos conteniendo diferentes excipientes tales como celulosa, microcristalina, citrato sódico, carbonato calcico, fosfato dicálcico y glicina junto con diferentes disintegrantes tales como almidón (y preferiblemente almidón de maíz, patata, o tapioca), ácido algínico y ciertos silicatos complejos, junto con aglomerantes de granulación como polivinilpirrolidona, sacarosa, gelatina o goma arábiga. Adicionalmente, agentes lubricantes tales como estearato de magnesio, laurilsulfato sódico y talco con frecuencia son muy útiles para la elaboración de comprimidos. También se pueden emplear composiciones sólidas de un tipo similar como cargas en cápsulas de gelatina; los materiales preferidos a este respecto incluyen también lactosa o azúcar de la luche, así como polietilenglicoles de alto peso molecular. Cuando se desean suspensiones acuosas y/o elíxires para la administración oral, se puede combinar el ingrediente activo con diferentes agentes adulcorantes o aromatizantes, materias colorantes o tintes y, si se desea, también agentes emulsionantes y/o suspensores junto con diluyentes como agua, etanol, polietilenglicol, glicerol y diferentes combinaciones de los mismos. Para la administración parenteral (usos intramuscular, intraperitoneal, subcutáneo e intravenoso) se prepara habitualmente una solución estéril inyectable del ingrediente activo. Pueden emplearse soluciones de un compuesto terapéutico de la presente invención en aceite de sésamo o de cacahuate o en propilenglicol acuoso. Las soluciones acuosas deben ajustarse y amortiguarse adecuadamente, preferiblemente a un pH superior a 8, si es necesario, y el líquido diluyente primero debe hacerse isotónico. Estas soluciones acuosas son adecuadas para la inyección intravenosa. Las soluciones oleosas son adecuadas para las inyecciones intraarticulares, intramusculares y subcutáneas. La preparación de todas estas soluciones bajo condiciones estériles se realiza fácilmente por técnicas farmacéuticas convencionales bien conocidas por los expertos de la técnica. Los siguientes ejemplos ilustran la preparación de los compuestos de la presente invención. Los puntos de fusión están sin corregir. Los datos RMN se indican en partes por millón (d) y están referidas a la señal de estabilización del deuterio del disolvente de la muestra (deuteriodimetisulfóxido a menos que se especifique otra cosa). Se utilizaron reactivos comerciales sin purificación adicional. THF se refiere a tetrahidrofurano. DMF se refiere a N, N-dimetilformamida. La cromatografía se refiere a cromatrografía de columna realizada utilizando gel de sílice de 32 a 63 mm y se ejecutó bajo condiciones de presión de nitrógeno (cromotog rafia rápida). La temperatura de la habitación o ambiente se refiere a 20 a 25 °C. Todas las reacciones no acuosas se realizaron bajo una atmósfera de nitrógeno por conveniencia y para maximizar los rendimientos. La concentración a presión reducida significa que se utilizó en evaporador rotatorio.

EJEMPLO 1 Ester etílico del ácido 3-rr4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonip-_1-hidroxi- carbamoilciclopentiDaminol-propiónico (A) A una solución de la sal p-toluensulfonato del éster bencílico del ácido 1-aminociclopentanocarboxílico (200 g, 0.51 moles) y trietalamina (177 ml, 1.27 moles) en agua (1 I) y 1 ,2-dimetoxietano (1 I) se añadió cloruro de 4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilo (161 g, 0.56 moles). La mezcla de agitó a temperatura ambiente durante 16 horas y después se eliminó la mayor parte del disolvente por evaporación al vacío. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó sucesivamente con solución se secó sobre sulfato magnésico y concentró dejando un sólido pardo. La trituración con éter dietílico produjo éster bencílico del ácido 1-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil-amino]ciclopentanocarboxílico como un sólido marrón claro, 167 g (70%). (B) A una solución de éster bencílico del ácido 1-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilamino]ciclopentano-carboxílico (199 g, 0.42 moles) en N, N-dimetilformamida seca (2.5 I) a temperatura ambiente se añadió hexametildisilazida potásica (100 g, 0.50 moles) y, después de 3 horas, ter-butil-(3-yodopropoxi)dimetilsilano (150 g, 0.50 moles). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Entonces se añadió terc-butil-(3-yodopropixi)-dimetilsilano (230 g, 0.067 moles) adicional. Se continuó la agitación a temperatura ambiente durante 3.5 horas más. La mezcla se extinguió por adición de solución saturada de cloruro de amonio. Se eliminó la N, N-dimetrilformamida por evaporación la vacío. El residuo se suspendió en éter dietílico y se lavó con agua y salmuera. Después de secar sobre sulfato magnésico, se evaporó el éter dietílico obteniéndose éster bencílico del ácido 1-{[3-(ter-butil-dimetilsilaniloxi)-propil]-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-amino} ciclopentanocarboxílico crudo en un aceite ámbar (279.6 g). (C) A una solución del éster bencílico del ácido 1 -{[3-(terc-butil-dimetilsilaniloxi)-propil]-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-amino} ciclopentanocarboxílico crudo (279 g) en cloruro de metileno (1 I) a temperatura ambiente se añadió trifluoreterto de boro 103 ml, 0.84 moles): Después de una hora, se extinguió la reacción por adición secuencial de solución saturada de cloruro de amonio y agua. Se separó la fase orgánica, se lavó con agua y salmuera y secó sobre sulfato magnésico. La evaporación del solvente al vacío proporcionó éster bencílico de ácido 1-[[4-(4-fluorifenoxi)bencenosulfonil]-(3-hidroxipropil)-amino]ciclopentanocarboxílico crudo como un aceite ámbar (235 g). (D) Una solución del éster bencílico del ácido 1-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-(3-hidroxipropil)-amino]ciclopentanocarboxíl¡co crudo (235 g) en acetona (2 I) se enfrió en un baño de hielo y se trató con reactivo de Jones (aproximadamente 200 ml ) hasta que persistió un color naranja. Se agitó la mezcla de 0°C a temperatura ambiente durante una hora. Después de extinguir el exceso de oxidante con isopropanol (10 ml), se filtró la mezcla y se concentró el filtrato al vacío. Se tomó el residuo en acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato magnésico y concentró obteniéndose un sólido que se trituró con una mezcla de dietiléter y haxano que proporcionó éster bencílico del ácido 1-{(2-carboxietil)-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]amino} ciclopentano carboxílico como un sólido blanco (147 g). (E) A una solución de éster bencílico del ácido 1-{(2-carbocietiI)-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosuldonil]amino}-ciclopentanocarboxílico (147 g) en N, N-dimetil formamida (3 I) a temperatura ambiente se añadió carbonato de potasio (150 g, 1.08 moles) y yoduro de etilo (32.4 ml, 0.405 moles). Se agitó la mezcla durante 16 horas a temperatura ambiente. Después de la filtración, se eliminó la mayor parte del disolvente al vacío. Se tomó el residuo en agua y se acidificó utilizando solución acuosa de ácido clohídrico 6 N. La mezcla resultante se extrajo con éter dietílico. El extracto orgánico se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato magnésico y concentró proporcionando éster bencílico del ácido 1 -{(2-etoxicarboniletil)-4-[4-(4-fluorofenoxi9bencenosulfonil]amino} ciclopentano carboxílico como un semisólido amarillo (149.1 g, 96%). (F) Una solución de éster bencílico del ácido 1-{(2-etocicarboniletil)-[4-(4-fluorofenoxi)benceno sulfonil]-amino}ciclopentanocarboxílico (74.5g, 0.13 moles) en etanol (1.8 I), se trato con paladio al 10% en carbono activado (7.4 g) y se hidrogenó en un agitador Parr® a una presión de 3 atmósferas durante 16 horas. Después de filtración por nilón (tamaño de poro 0.45µm) para eliminar el catalizador, se evaporó el disolvente proporcionando ácido 1-{(2-etoxicarboniletil)-4[4-(4-fluorofenoxi)benceno-sulfonil]amino}ciclopentanocarboxílico como una espuma blanca. La reacción se repitió a la misma escala proporcionando, en total, 125.2 g del producto deseado. (G) Se añadieron diisopropiletilamina (50 ml 0.286 moles) y hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris-(dimetilamino)fosfonio (126.5 g, 0.286 moles) secuencialmente a una solución de ácido 1-{(2-etoxicarboniletil)-[4-(4-fluorofenoxi)benceno-sulfonil]amino}ciclopentanocarboxíl¡co (125.2 g, 0.26 moles) en N, N-dlmetilformamida (2 I). Se agitó la mezcla durante 1 hora. Se añadió entonces diisopropiletilamina (91 ml, 0.52 moles) adicionales y clorhidrato de 0-bencilhidroxilamina (53.8 g, 0.338 moles) y la mezcla resultante se agitó a 60 °C durante 96 horas. Después de la concentración al vacío, el residuo se tomó en agua y se acidificó con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N. Se extrajo la mezcla con acetato de etilo y el extracto se lavó secuencialmente con agua, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y salmuera. La solución se secó sobre sulfato magnésico y se concentró proporcionando éster etílico del ácido 3-[(1 -benciloxicarbamoilciclopentil)-{4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-amino}propión¡co crudo como un aceite amarillo (164 g). (H) Una solución de éster etílico del ácido 3-{(1-benciloxicarbamoilciclopentil)-[4-(4-fluorofenoxi)-bencenofulfonil]amino}prop¡ónico crudo (164 g) en etanol (2.4 I) se trató con paladio al 5% en sulfato de bario (50 g) y se hidrogenó un agitador Parr® a una presión de 3 atmósferas durante 3 horas. Después de la filtración por nilón (tamaño de poro 0.45 µm) para eliminar el catalizador, se evaporó el disolvente produciéndose un aceite. Después la adición de acetato de etilo y hexano se obtuvo por filtración éster etílico del ácido 3-[(4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-[(1-hidroxi-carbanoilcicIopentil)amino]-propiónico, un sólido cristalino blanco (73.5 g). Se concentró el filtrado y el residuo se sometió a cromatografía en gel de sílice eluyendo con acetato de etilo en haxano al 40% proporcionando más del producto deseado (32.5 g). Pf: 79-83°C. 1H RMN (DMSO-d6): 610,40 (ancho s, 1 H), 8,78 (ancho s, 1 H), 7,80-7,77 (m, 2 H), 7,31-7,033 (m,6 H), 4,02 (q, J=7,3 Hz, 2 H), 3,49-3,45 (m, 2 H), 2,70-2,67 (m, 2 H), 2,24-2,21 (m, 2 H), 1 ,86-1 ,83 (m,2 H), 1 ,53-1 ,50 (m, 4 H), 1 ,16 (t, J=7,3 Hz, 3 H). MS 493 (M-1 ). Análisis calculado para C23H27FN2o7S. H2o: C, 53,90; H, 5,70; N, 5,47. Encontrado: C, 54,52; H, 5,63; N, 5,27.

EJEMPLO 2 Acido 3-rr4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfon¡n-(1 -hidroxi- carbanmoilciclopentil-carbamoilciclopentil.aminolpropiónico Una solución del éster etílico del ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi9bencenosulfonil]-(1-hidroxicarbamoil-cilcopentil-amino]propión¡co (106 g, 0.214 moles) en etanol (2.5 I) se trató con solución acuosa de hidróxido de sodio 1 N (856 ml, 0.856 moles) y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se concentró para eliminar e etanol, se diluyó con agua, se acidificó con solución acuosa de ácido clorhídrico 6 N y se extrajo con acetato de etilo. Después de lavar con agua y salmuera, se extrajo la fase orgánica y se secó sobre sulfato magnésico y se concentró a una espuma. La cristalización en acetato de etilo en hexano al 30% produjo ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-(1 -hidroxicarbamoilciclopentil)-amino]propiónico como un sólido cristalino blanco (81.5 g, 81 %). Pf: 170-172°C. 1H RMN (DMSO-d6): 612,25 (ancho s, 1 h), 10,40 (ancho s, 1 H), 10, 40 (ancho s, 1 H, 8,74 (ancho s, 1 H), 7,79-7,77 (m, 2 H), 7,29-7, 03 (m, 6 H), 3,45-3,41 (m, 2 H), 2,61-2,57 (m, 2 H), 2,24-2, 21 (m, 2 H), 1 , 53-1 ,50 (m, 2 H), 2,24-2,21 (m, 2 H), 1 ,88-1 ,82 (m, 2 H), 1 ,53-1 ,50 (m, 4 H). MS 465 (M-1 ). Análisis calculado para C2?H23FN2O7S: C, 54,07; H, 4,97; N, 6,00. Encontrado: C, 54, 17; H 5,02; N, 6,05.

EJEMPLO 3 Ester etílico del ácido 3-.T4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfoniri-(1- hidroxicarbamoil-1-metiletil.aminolpropiónico El compuesto del título se preparó según un procedimiento análogo al descrito en el ejemplo 1 partiendo de la sal p-toluensulfonato del éster bencílico del ácido 2-amino-2-metil-propiónico. Pf: 124, 8-125°C. 1H RMN (DMSO-d6) d 10,37 (S, 1 H), 8,74 (s, 1 H), 7,86 (d, 2 H, J=8.9 Hz), 7,16-7,30 (m, 4 H), 7,04 (d, 2 H, J=8,7 Hz), 3,pp (q, 2 H, J=7,1 Hz), 3,3-3,37 (m, 2 H), 2,62-2,66 (m, 2 H), 1 ,40 (s, 6 H), 1 ,13 (t, 3 H, J=7,1 Hz). MS: 467 (M-1). Análisis calculado para C2?H25FN2O7S: C, 53, 84; 5,38; N, 5,98. Encontrado: C, 54,00; H, 5,12; N, 5,87.

EJEMPLO 4 Acido 3-rr4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfon¡p--1 -hidroxi-carbamoil-1 - metiletiDaminolpropiónico El compuesto del título se preparó a partir del éster etílico del ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi9bencenosulfonil]-(1 -hidroxicarbamoil-1 -metiletil) amino] propiónico según un procedimiento análogo al descrito en el ejemplo 2. Pf: 162-162, 5°C. MS 439 (M-1). 1H RMN (DMSO-d6) d 12,26 (S, 1 H), 10,10,38 (S, 1 H), 8,75 (S, 1 H), 7,86-7,88 (m, 2 H), 7,16-7,7,30 (m, 4 H), 7,03-7,06 (m, 2 H), 33,29-3,35 (m, 2 H), 2,47-2,59 (m, 2 H), 1 ,40 (s, 6 H).

Claims (10)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto de la fórmula o las sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en el que R1 es alquilo 8C1-Cß); R2 es alquilo (C-I-CT); O R1 y R2 tomados junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un anillo seleccionado de cicloalquilo (C5-C ), 4-tetrahidropiranilo y 4-piperidinilo; R3 es hidrógeno o alquilo (C-i-Cß), e Y es un sustituyente en cualquiera de los átomos de carbono del anillo fenilo capaz de soportar un enlace adicional, seleccionado independientemente de fluoro, cloro, trifluorometilo, alcoxilo (Ci-Cß), trifluorometoxilo, diflouorometoxilo y alquilo (Cr C6).

2.- Un compuesto según la reivindicación 1 , en el que Y es hidrógeno, fluoro o cloro.

3.- Un compuesto según la reivindicación 1 , en el que Y es 4-fluoro o 4-cloro.

4.- Un compuesto según la reivindicación 1 , en el que R1 y R2 tomados junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un anillo ciclopentilo.

5.- Un compuesto según la reivindicación 3, en el que R1 y R2 tomados junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un anillo ciclopentilo.

6.- Un compuesto según la reivindicación 1 , en el que R1 y R2 tomados junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un anillo 4-tetrahidropiranilo.

7.- Un compuesto según la reivindicación 1 , en el que R1 y R2 son ambos metilo.

8.- Un compuesto según la reivindicación 3, en el que R1 y R2 son ambos metilo.

9.- Un compuesto según la reivindicación 1 , en el que R3 es hidrógeno.

10.- Un compuesto según la reivindicación 3, en el que R3 es hidrógeno. 1 1.- Un compuesto según la reivindicación 4, en el que R3 es hidrógeno. 12.- Un compuesto según la reivindicación 1 , en el que dicho compuesto se selecciona del grupo compuesto por: éster etílico del ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-(1 -hidroxi-carbamoilciclopentil)amino]propiónico, ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-(1 -hidroxi- carbamoilciclopentil)amino}propiónico, éster etílico del ácido 3-[{4-(4-fluorofonoxi)bencenosulfonil]-(1-hidroxicarbamoil-1-metiletil9amino}propiónico, y ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-(1 -hidroxi-carbamoil-1 -metiletil)amino]propiónico. 13.- Una composición farmacéutica para (a) el tratamiento de artritis o cáncer y otras enfermedades caracterizadas por la actividad de metaloproteinasa-13 de matriz o (b) la inhibición selectiva de metaloproteinasa-13 de matriz en un mamífero, incluyendo un ser humano, que comprende una cantidad de compuesto de la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, efectiva en tales tratamientos o inhibición y un vehículo farmacéuticamente aceptable. 14.- El uso de un compuesto de la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de un medicamento para la inhibición selectiva de metaloproteinasa-13 de matriz, en un mamífero, incluyendo un ser humano. 15.- El uso de un compuesto de la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de un medicamento para tratar artritis o cáncer y otras enfermedades caracterizadas por actividad de metaloproteinasa-13 de matriz en un mamífero, incluyendo un ser humano.