MXPA00001286A - Metodo y aparato para separar la materia en particulas a partir de una muestra liquida - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un aparato y método para separar materia en partículas a partir de un fluido, en donde el aparato incluye un recipiente de recolección, una configuración porosa colocada en un alojamiento y adecuada para recolectar materia en partículas en el líquido sobre el lado de recolección, y una bomba. El alojamiento incluye una primera porción que tiene elementos que mejoran el flujo de fluido a través del alojamiento, y elementos que reducen las características de retención de la configuración porosa de la porción. El alojamiento también incluye una porción que tiene elementos que incrementan las características de retención de la configuración porosa de la porción.

Description

MÉTODO Y APARATO PARA SEPARAR LA MATERIA EN PARTÍCULAS A PARTIR DE UNA MUESTRA LIQUIDA CAMPO TÉCNICO DE LA INVENCIÓN La presente invención está dirigida a un aparato y método para recolectar una monocapa uniforme de materia en partículas. En particular, la presente invención está dirigida a un aparato y método manual o semiautomático para colectar una monocapa uniforme de células a partir de fluidos biológicos y preparar la monocapa de células para utilizarse en protocolos citológicos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN En una amplia variedad de tecnologías, la habilidad y/o facilidad para separar materia, típicamente materia en partículas, de un fluido es un componente crítico en la habilidad para probar la presencia de substancias en el fluido. Muy generalmente, la interferencia asociada con la preparación de muestra obscurece a las células objetivo a tal grado que el proceso no es suficientemente confiable, o demasiado costoso. Dicho escenario se aplica a muchos otros campos que implican la detección y/o el diagnóstico, incluyendo prueba ambiental, investigación de radiación, clasificación de cáncer, examen citológico, prueba microbiológica, y contaminación de desperdicio dañina por nombrar sólo algunos. En todos estos intentos, los factores de limitación en el protocolo de preparación de muestra incluyen la separación adecuada de materia en partículas de su vehículo de fluido, por ejemplo, fluidos fisiológico, fluido biológico y fluido ambiental), y fácil y eficientemente recolectar y concentrar la materia en partículas en una forma fácilmente accesible para el examen microscópico. En el caso de examen citológico, se obtiene una muestra de célula de un paciente. Típicamente, esto se realiza raspando o limpiando un área , como en el caso de muestras cervicales , o recolectando fluidos del cuerpo, tales como aquellos obtenidos de la cavidad del pecho, vejiga o canal espinal, o a través de aspiración de aguja fina. En un examen citológico manual convencional , la materia en partículas incluyendo células y desperdicio en el fluido son transferidos en un portaobjetos de vidrio frotando y subsecuentemente secando al aire. El frotamiento da como resultado densidades no un iformes y distribuciones disparejas de cél ulas y desperdicio que por lo regular obscurecen las células objetivo. El secado con aire ocasiona la deformación de la célula y además impide un examen exacto. Se ha encontrado que el procesamiento rápido de orina para obtener muestras frescas asegura la exactitud de resultados de cultivo cuantitativos, urinalisis y microscopia. Las células tienden a pegarse a un portaobjetos de vidrio mucho mejor que las células de orina conservada , perm itiendo una extensión más moderada de las células sobre el cuerpo de vidrio. Los retrasos en el procesamiento, el cuidado negligente ya sea en el paciente o establecimientos que están fuera del paciente y la falta de refrigeración puede producir a una preparación deslizante no óptima. Una solución conocida para retrasar el problema es utilizar conservadores químicos con la orina. La presencia de conservadores líquidos, sin embargo, en la muestra de orina eleva la gravedad específica de la muestra a niveles que no se pueden medir y puede limitar la utilidad potencial de la orina para varios tipos de análisis cuantitativos tradicionales, tales como microscopia de portaobjetos. La microbiología de diagnóstico y/o citología, particularmente en el área de patología clínica, basa los diagnósticos en un examen microscópico de células y otros análisis microscópicos. La exactitud de la diagnosis y la preparación de muestras óptimamente interpretables típicamente depende de una adecuada preparación de la muestra. Nuevas metodologías tales como inmunocitoquímica y análisis de imagen requieren preparaciones que pueden ser reproducidas, rápidas, libres de daño biológico y no costosas. Las técnicas de preparación de célula convencionales fallan para dirigir adecuadamente las emisiones de densidades de célula no uniformes, la distribución dispareja de célula y artefactos de secado con aire. Convencionalmente, las muestras de fluido del cuerpo son recolectadas para exámenes citológicos utilizando recipientes que contienen una solución conservadora para conservar la muestra citológica durante el embarque desde el sitio de recolección hacia el laboratorio citológico. Además, las muestras de citología recolectadas de las cavidades del cuerpo utilizando limpieza, frotación, lavado o cepillado también son conservadas en recipientes con fijadores (por ejemplo, fijadores de alcohol o acetonas) antes de transferir las células sobre el portaobjetos o membrana para tinción o examen. Es deseable proporcionar un recipiente de muestra de orina u otro fluido biológico que permita que muestras biológicas líquidas puedan ser probadas sin remover la tapa del recipiente para orina o fluido biológico. Sin embargo, nada de la técnica anterior resuelve los problemas de transferir células en una monocapa a un portaobjetos para el examen sin porciones sumergidas del dispositivo en la muestra (e incrementando el riesgo de contaminación), consistente y repetidamente formando una monocapa de alta calidad sobre el portaobjetos del microscopio, y procesando la muestra de manera que el fluido a partir del cual fueron tomadas las células es conservado. Un número de métodos, aparatos y estructuras para surtir células en el fluido son conocidos. Por ejemplo, la patente de E.U.A. 5,143,627 abre el recipiente de muestra, inserta un elemento de dispersión en la suspensión líquida, y hace girar el elemento de dispersión durante varios minutos. En otro ejemplo, el así llamado "método de Saccomanno" se utiliza para procesar esputo, un proceso que es consumidor de tiempo e implica un gran número de pasos de procesamiento.

Los métodos de prueba citológica e instrumentos para medir cuantitativamente y recolectar células son conocidos de acuerdo con la patente Europea No. 0444837. Esta patente describe un método y aparato para el procesamiento de instrumentación controlada de células y otras partículas con un dispositivo de filtro que mide un parámetro del flujo a través del dispositivo de filtro de un fluido que lleva las partículas. Una medida del cambio del flujo del fluido a través del dispositivo de filtro produce la información deseada para cuantificar las partículas y para cuantificar la obstrucción del dispositivo de filtro por parte de las partículas. El método y aparato de acuerdo con esta invención típicamente opera en forma automática. Otro factor limitante para preparar óptimamente la materia en partículas para examen microscópico implica la solución y/o soluciones para fijar la materia en partículas a un portaobjetos de microscopio o similar. Las muestras citológicas, las cuales constituyen la forma examinable del material citológico, pueden ser preparadas a través de técnicas de embarradura o fluido. Ya que puede existir un lapso considerable antes de que estas muestras sean procesadas adicionalmente a través de tinción, aplicación de un cubreobjetos, etc., sin embargo, es importante aplicar un fijador al material citológico como un medio para conservar y fijar las células. El material citológico apropiadamente de fijación (es decir, conservación) tales como células, agregados de célula y pequeños fragmentos de tejido derivados de colecciones citológicas de tejido humano o animal es un pre-requisito para el diagnóstico exacto de la enfermedad, especialmente cáncer. El material citológico debe ser fijado lo más rápidamente posible después de obtener el material para evitar la deformación de la célula. Las muestras citológicas secadas con aire y teñidas con colorante de tetracromo, aunque ampliamente populares, en general no se utilizan en los Estados Unidos. Más bien, la fijación en húmedo, ya sea a través de la inmersión de los portaobjetos en una solución de alcohol, a través de saturación de los portaobjetos con un fijador en aerosol o descargando directamente el material citológico en una solución de alcohol, es un método conocido para la fijación de células. La fijación de célula es un pre-requisito para el examen de Papanicolaou, Hematoxilinas y Eosinas interpretables u otros portaobjetos de muestra citológica teñida. En general, las soluciones de alcohol, con o sin otros aditivos tales como glicol polietilénico, que varían de 50% a 95% (v/v: metano, etano, isopropanol) son soluciones conocidas para utilizarse en la fijación en húmedo. Cuando se utilizan soluciones de alcohol de más de 50% (v/v) para recolectar y fijar fluidos con un alto contenido de proteína, sin embargo, se forma un sedimento de proteína que subsecuentemente se endurece. La sedimentación de proteína hace que el material citológico fijo sea difícil de transferir a los portaobjetos de vidrio para examen, sin considerar si la transferencia se realizó a través de la aplicación directa al portaobjetos de vidrio, a través de citofiltración mediante un pequeño filtro de poro, o mediante citocentrifugación en los portaobjetos de vidrio revestidos con un adhesivo tal como gelatina de cromo-aluminio. Durante más de un siglo, las composiciones fijadoras de tejido utilizadas para conservar y preparar tejido para evaluación analítica se han basado en formaldehído. La composición estándar deseada para la conservación del tejido y la preparación de tejido de corte delgado para examen microscópico es formalina. La formalina es una solución de 3 a 10% del formaldehído en agua, usualmente conteniendo alrededor de 15% en alcohol metílico. El alcohol mejora las propiedades conservadoras de la solución. A pesar de muchas desventajas, principalmente la alta toxicidad y propiedades irritantes, la formalina permanece como el fijador de elección en aplicaciones de laboratorio típicas debido a su rápida reacción con las superficies de tejido expuestas y consecuente conservación celular incrementada al máximo. El metanol puede afectar adversamente la textura del tejido, haciéndolo demasiado quebradizo o, más usualmente, demasiado suave para facilitar el corte para la preparación del portaobjetos. También pueden producir artefactos pigmentados o impurezas que interfieren con la tinción. La formalina que contiene metanol, sin embargo, proporciona un tejido conservado que puede ser satisfactoriamente seccionado y teñido para examen microscópico. Los histologistas se han esforzado durante mucho tiempo en desarrollar fijadores inmunohistoquímicos efectivos y fijadores morfológicos, además, es deseable conservar los antígenos de tejido de conservación de detalle morfológicos para permitir la detección inmunohistoquímica y la localización de antígenos en el tejido. Dichos fijadores hacen que la proteína sea insoluble. Por ejemplo, el formaldehído puede ser utilizado como un agente de entrelazamiento formando enlaces covalentes entre los grupos aldehido y aminoácidos específicos para estabilizar la estructura de proteína y transformar el citoplasma de la célula en un gel, el cual prohibe el movimiento en enzimas autolíticas. Alternativamente, el alcohol puede ser utilizado como un fijador para precipitar la proteína a través de la desnaturalización. Preferiblemente, un fijador debe retrasar la autólisis y putrefacción y conservar el detalle morfológico y antigeneisidad. Desafortunadamente, un fijador morfológico efectivo no necesariamente es un fijador inmunohistoquímico. En contraste a las técnicas convencionales, las técnicas de preparación de materia sólida de la presente invención dirigen las emisiones de densidades de materia no uniformes, distribución dispareja de materia y pérdida de muestra en contaminación debido al número de pasos implicados en la preparación de la muestra. De esta manera, las preparaciones de acuerdo con la presente invención da como resultado una distribución pareja de sólidos que tienen una morfología superior, visualización mejorada y son fácilmente colocados y están disponibles para el análisis de absorbancia de luz sin la necesidad de manipular o preparar adicionalmente la muestra.

COMPENDIO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un aparato y un método para recolectar materia para la detección, análisis, cuantificación y/o visualización. Los dispositivos y métodos de la presente invención son particularmente adecuados para separar materia en partículas de fluidos biológicos, fisiológicos y ambientales y presentar la material en partículas en una forma mejorada para examen citológico. Una modalidad preferida de la presente invención se refiere a un aparato y método para recolectar una capa uniforme de células a partir de una muestra de orina u otro fluido biológico en una aparato de recolección de citología o módulo de ensayo, y para transferir la capa uniforme de la materia en partículas en un portaobjetos. Los dispositivos y métodos de la presente invención pueden ser configurados en un sistema o estructura manual portátil, o un sistema o estructura parcialmente automático. Dicho aparato de acuerdo con la presente invención supera los problemas asociados con el equipo convencional para recolectar células u otras partículas para citología proporcionando un mecanismo de estructura y operación relativamente simples que separan partículas de una solución líquida, recolecta una cantidad aproximadamente conocida de las células en una monocapa y transfiere las células recolectadas a un portaobjeto de microscopio.

En algunas modalidades de la presente invención, ningún elemento del aparato es colocado en la muestra líquida, evitando así la contaminación innecesaria de la muestra. Además, en algunas modalidades de la presente invención, el recipiente que lleva la muestra no es abierto en el curso de la recolección y transferencia de las células, eliminando así la posibilidad de la contaminación de la muestra durante la prueba. En todas las modalidades de la presente invención, una monocapa de una materia en partículas, por ejemplo, células, en la muestra es recolectada en un filtro pasando dos ramificaciones de un flujo de fluido a través de y alrededor del filtro. Dicho filtro es conocido a partir de las patentes de E.U.A. Nos. 5,301,685 y 5,471,994 las cuales corresponden al No. de patente mundial 94/03103. El paciente o el personal médico que maneja la recolección puede sellar un recipiente separado. La recolección de las células de acuerdo con la presente invención permite que se obtenga un portaobjetos de célula uniforme sin la contaminación de la células por conservadores, trabajadores o materiales externos. La transferencia desde el recipiente de colección hacia el aparato de recolección de citología puede realizarse sin vaciar o sin pipeta de la muestra recogida. La presente invención está dirigida a un aparato de recolección y distribución de célula que puede ser desensamblado para permitir la transferencia cara a cara de células a partir del dispositivo hacia un portaobjetos para examen mediante microscopio. La presente invención proporciona un aparato y métodos mejorados para recolectar una monocapa de células que puede ser transferida a un portaobjetos de microscopio. La efectividad de la transferencia de las células de monocapa desde el filtro hacia un portaobjetos de microscopio ha probado ser muy alta sin la pérdida diferencial de célula. El examen microscópico muestra que la distribución de célula es igual en el portaobjetos como en el filtro. Los dispositivos de la presente invención evitan la necesidad de que un técnico entrenado prepare apropiadamente un substrato de muestra. De esta manera, se eliminan o se reducen el tiempo, gastos y experiencia como factores críticos en los protocolos de preparación de muestra. Los dispositivos y métodos de la presente invención también proporcionan desventajas en la preparación de muestra ya que son adecuados para utilizarse con células frescas, no tratadas, células no modificadas, y están particularmente diseñados para proporcionar una capa delgada, uniforme de materia sólida (hasta aproximadamente 40 mieras o más). Esta invención es particularmente útil para recolectar células para una embarradura de Pap. Los aparatos y métodos de la presente invención presentan muchas ventajas para la microbiología y hematología convencionales. Las células recolectadas convencionales. Las células recolectadas están en un área predeterminada en donde se tiene un fácil acceso a una fuente de luz radiante y a un medidor de absorbancia de longitud de onda. Ya que las células están concentradas en una capa individual, por lo general están en un plano focal, eliminando así o reduciendo la interferencia por otras partículas y virtualmente eliminando el tiempo y la experiencia del técnico para establecer una lectura apropiada. El traslape de materia mínimo logrado por la presente invención asegura que toda la materia pueda ser fácilmente examinada con poca probabilidad de que los sólidos críticos se obscurezcan por medio de terrones de los sólidos o desperdicio traslapante. Ciertas modalidades de los aparatos de la presente invención pueden ser utilizadas en combinación con otros dispositivos automáticos para detectar y analizar cualquier materia sólida en una población dada. También permiten el análisis detallado de la composición química de la material. La presente invención también incluye un aparato y método mejorados para procesar un fluido conteniendo materia en partículas. El aparato y método incluye dispersar la materia en partículas en la muestra, preferiblemente haciendo girar el recipiente de la muestra alrededor de un agitador fijo o haciendo girar el agitador dentro de un recipiente de muestra fijo. La presente invención agita la muestra dentro del recipiente para asegurar la ruptura de la materia en partículas de tamaño grande, por ejemplo, cuerpos mucoides en el caso de muestras de esputo y la distribución uniforme de células a través del fluido. La agitación puede ocurrir como resultado del movimiento relativo entre los componentes del recipiente de la muestra, el movimiento no uniforme del recipiente de la muestra, y/o fuerzas de reacción de inercia aplicadas a la muestra por parte del recipiente. De acuerdo con una modalidad preferida de la presente invención, se proporcionan estructuras y medios para hacer girar un agitador con relación al recipiente y/o la muestra en el recipiente. Como se describe con más detalle más adelante, una modalidad preferida de acuerdo con la presente invención puede incluir una cubierta dentro de una cubierta, en donde el agitador se fija a una cubierta externa libremente giratoria y una cubierta interna está asegurada con respecto a un recipiente de muestra fijo. Dicho movimiento relativo mueve el agitador con relación a la muestra, y dispersa la materia en partículas en el fluido. Además, al proveer una cubierta de recipiente que tenga una porción que pueda girar, se permite la agitación o dispersión de la materia en partículas sin insertar un mecanismo de agitación en la muestra, eliminando así una fuente de contaminación que presenta placas en los dispositivos que están actualmente disponibles. En una modalidad preferible de la presente invención, la cubierta sobre el recipiente de muestra puede incluir un tubo hueco, con o sin un elemento de dispersión giratorio, para retirar la muestra del recipiente. En una modalidad preferida de la invención, la cubierta comprende una primera porción que acopla fijamente el recipiente y una segunda porción que puede girar con relación al recipiente. Como se utiliza en la presente, el aspecto de rotación con relación al recipiente se refiere al movimiento relativo de la primera porción y la segunda porción; la primera porción puede ser fija y la segunda porción puede ser móvil, o la primera porción puede ser móvil y la segunda porción fija. En una modalidad muy preferida, la segunda porción o interna de la cubierta es fija y la primera porción o externa puede girar. En una modalidad preferida de la invención, el agitador está acoplado a través de o fijado a la segunda porción de la cubierta. Un aparato de acuerdo con una modalidad preferida de la presente invención puede ser configurado para soportar, acoplar y hacer girar una porción de un recipiente de recolección, de manera que la muestra es mezclada de acuerdo con la presente invención. Un recipiente de recolección ilustrativo incluye un recipiente o copa adecuado para recolectar y mantener una muestra de espécimen, una tapa teniendo una primera posición que no puede girar con relación al recipiente y una segunda posición que puede girar con relación al recipiente, y un agitador acoplado o fijado a una porción de la cubierta y extendiéndose hacia el recipiente. Como se utiliza en la presente, configurado para soportar, acoplar y hacer girar se refiere a varias configuraciones que pueden ser adaptadas para realizar la función específica. Por ejemplo, un aparato de acuerdo con la invención puede incluir un soporte de recipiente para colocar por lo menos un recipiente de muestra y hacer girar el recipiente per se, y un manguito o sujetador para acoplar y fijar una porción de la tapa que se comunica con un elemento de agitación. Alternativamente, el soporte puede mantener al recipiente en una posición fija y una polea, manguito o sujetador puede acoplar y hacer girar la porción de la tapa que está fija con respecto a un agitador. En una modalidad preferida de la invención, un manguito acopla una porción interna de la tapa y mantiene la porción interna de la tapa en una posición fija con relación a una porción externa de la tapa. Las configuraciones o estructuras que acoplan una porción de la tapa o el recipiente típicamente incluyen cualquier miembro que coloque, fije y/o mueva ya sea esa porción de la tapa o el recipiente. Los miembros ilustrativos incluyen, pero no se limitan a, un manguito, una o más bandas, una o más poleas, una o más bandas elásticas, y similares. La presente invención también presenta un dispositivo para procesar un fluido en uno o más componentes, típicamente removiendo la materia en partículas del fluido. La presente invención está dirigida a aparatos y métodos para la recolección de fluidos, tales como fluidos biológicos, fisiológicos, o ambientales, y remover la materia en partículas del fluido, sin centrifugación, y diagnosticar y probar la materia. En una modalidad preferida de la invención, la materia en partículas es recolectada en un lado de recolección. En una modalidad muy preferida de la invención, la materia en partículas es recolectada en una monocapa y en una configuración espacial predeterminada.

Aunque un aparato de recolección de citología de acuerdo con la invención puede ser utilizado para cualquier fluido biológico, es particularmente útil para preparar muestras de prueba de orina y sus células asociadas para embarraduras o frotis de Pap. Se pretende que el tipo de materia se procese no deba limitar la invención. En una modalidad muy preferida de la invención, es fluido es orina y la materia en partículas es una célula. El aparato de procesamiento de materia en partículas de la presente invención también permite es aislamiento y recolección de células y/o microorganismos frescos de fluidos biológicos para realizar análisis de sonda de ADN y cromosomal una vez que el regulador de pH es apropiado hemoliza las células. En el caso de exámenes cervicales, se toma un raspado de cervix con un cepillo de mango largo. El mango después es reducido, tal como rompiendo o mediante el movimiento telescópico y el cepillo es insertado en un recipiente de espécimen o muestra. Convencionalmente, el recipiente debe ser abierto para remover el cepillo en el momento de la prueba. Dicho proceso incrementa la probabilidad de contaminación ya que la cubierta del recipiente de la muestra debe ser abierta, el cepillo típicamente retiene las células si la prueba no es realizada rápidamente después de la recolección de la célula y el operador debe hacer contacto con la muestra. De acuerdo con una modalidad preferida de la presente invención, estos problemas se evitan proporcionando un sistema en donde el cepillo no solamente permanece en el recipiente de recolección, sino que también pueda ser utilizado para dispersar las células recolectadas durante la agitación. Además, el aparato de la presente invención es un sistema cerrado; una vez que el aparato se cierra, no es necesario que sea abierto con el fin de procesar las células recolectadas en el cepillo. Además, la proporción de una cubierta de recipiente que tenga una porción que pueda girar permite la agitación o dispersión de la material en partícula sin insertar un mecanismo de agitación en la muestra, eliminando así una fuente de contaminación que forma placas en el dispositivo que están comercialmente disponibles. La presente invención también está dirigida a un equipo de recolección y prueba de citología conteniendo un aparato de recolección de citología, filtros de reemplazo, desechables reemplazables y/u otros componentes, ingredientes de una composición fijadora como se describe más adelante. El equipo de recolección de citología también puede incluir filtros de reemplazo, desechables de reemplazo, y/u otros componentes, ingredientes o soluciones típicamente utilizados durante los exámenes citológicos. El equipo también puede incluir soluciones de lavado, fijadores y/o reguladoras de pH. Un equipo cervical puede incluir un cepillo, y un fluido adecuado para almacenar el cepillo utilizado hasta que la materia en partículas en el cepillo pueda ser procesada a través del ensamble de filtro. Una modalidad preferida de la presente invención también se dirige a una composición fijadora de tejido para utilizarse en aplicaciones histopatológicas que rápidamente penetran las superficies del tejido para la concentración máxima celular, deja artefactos pigmentados mínimos y permite la tinción exacta. La presente invención también está dirigida a la proporción de una formulación fijadora citológica e histológica que fije y conserve células, agregados de célula y pequeños fragmentos de tejido en una suspensión líquida. La presente invención también está dirigida a la proporción de una formulación fijadora que retiene muestras de tejido que son incidentalmente recolectadas junto con el material citológico para procesamiento histológico adicional. La presente invención también está dirigida a la proporción de la formulación fijadora que permite los envíos de la suspención líquida de células, agregados de célula y fragmentos de tejido bajo condiciones típicamente encontradas en el envío postal, permitiendo que los usuarios lejanos sin citologistas disponibles, citotecnologistas y médicos u otro personal experimentado en la preparación de muestras citológicas fijen una muestra citológica para procesamiento posterior y de esta manera se puedan producir portaobjetos de muestra técnicamente satisfactorios y citológicos. La invención en otro aspecto se refiere a un método para preparar tejido para cortar, teñir y/o evaluación microscópica, en donde el tejido demuestra antes de la deshidratación es sometido a conservación con una solución fijadora de tejido estable al almacenamiento de la presente invención.

Se describen una formulación fijadora citológica e histológica única y métodos para utilizar esa formulación. La formulación fija y conserva células individuales, agregados de célula y pequeños fragmentos de tejido en una suspención líquida; reduce al mínimo la precipitación de proteína en la suspensión líquida; elimina selectivamente o reduce la contaminación de glóbulos rojos del material citológico y portaobjetos de la muestra citológica; retiene las muestras de tejido que son incidentalmente recolectadas junto con el material citológico para procesamiento histológico adicional; y permite el embarque del material citológico bajo condiciones típicamente encontradas en envío, permitiendo que los usuarios lejanos sin citologistas disponibles, citotecnologistas u otro tipo de personal experimentado en la preparación de muestras citológicas tengan portaobjetos de muestra citológica técnicamente satisfactorios. De acuerdo con otro aspecto de la presente invención, el aparato de recolección de materia también puede incluir módulos adicionales, removibles o integrados, para tratar el fluido. Por ejemplo, el fluido puede ser tratado con un módulo de recolección de materia, en combinación con un módulo de remoción de desperdicio, un módulo de cromatografía y un módulo de ensayo, o combinaciones de éstos y otros dispositivos. Estos u otros módulos o protocolos de tratamiento proporcionan características que pueden ser deseables para incorporarse en un aparato de preparación de muestra de acuerdo con la invención.

Los dispositivos y métodos de la presente invención tienen muchas ventajas para la citología convencional. Las células están en un área predeterminada permitiendo el ahorro de tiempo significativo cuando se tamiza el portaobjetos. Dichos problemas, a medida que las células yacen fuera del cubreobjetos o en el extremo frontal, son eliminados. Ya que las células se encuentran en una capa individual, casi siempre están en un plano focal cuando se utiliza un objetivo de 10X, el objetivo más comúnmente utilizado para la tamización de energía más baja de un portaobjetos. Aún con un objetivo de 40X, la mayoría de las células están en foco. Esto elimina el volver a enfocar frecuentemente y ahorra tiempo. Los dibujos anexos muestran modalidades ilustrativas de la invención, a partir de los cuales y de los otros objetos, serán fácilmente evidentes aspectos y ventajas novedosas.

DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 es una vista en sección transversal de una primera modalidad de la presente invención. La Figura 2 es una vista en sección transversal de una cámara de separación de materia en partículas de acuerdo con la presente invención. La Figura 3 es una vista en sección transversal de las trayectorias del flujo de fluido a través de la cámara de separación de materia en partículas.

La Figura 4A es una vista superior del ensamble de base y cavidad, formando la porción inferior de la cámara de separación de materia en partículas. La Figura 4B es una vista superior de la porción inferior de la cámara de separación de materia en partículas, e ilustra una modificación de superficie de cara de reloj de la cavidad. La Figura 4C es una vista superior de la porción inferior del alojamiento de separación de materia en partículas e ilustra una modificación de superficie de cara sombreada de la cavidad. La Figura 5 es una vista en sección transversal de una base desensamblada, tubo hueco y recipiente. La Figura 6 es una vista inferior de la porción superior del alojamiento de separación de materia en partículas. La Figura 7 es una vista en sección transversal de la porción inferior del alojamiento de separación de la materia en partículas y muestra el canal opcional y una aleta opcional. La Figura 8 es una vista en sección transversal de la porción inferior del alojamiento de separación de materia en partículas el canal opcional y el anillo con forma de O opcional. La Figura 9 es una vista en sección transversal de la porción inferior del alojamiento de separación de materia en partículas y muestra el canal opcional y la aleta opcional. La Figura 10 es una vista en sección transversal de una segunda modalidad preferida de la presente invención. La Figura 11 es una vista en sección transversal de una tercera modalidad preferida de la presente invención. La Figura 12 es una combinación de vistas inferior y lateral de una configuración de filtro de acuerdo con una modalidad preferida de la invención. La Figura 13 es una vista en sección transversal de un aparato utilizado en un método semiautomático de acuerdo con una modalidad preferida de la presente invención. La Figura 14 es una vista esquemática del aparato mostrado en la Figura 13 en una primera posición. La Figura 15 es una ilustración esquemática del aparato mostrado en la Figura 13 en una segunda posición.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención es un recipiente de muestra que incluye una cámara de separación de materia en partículas o módulo en comunicación de fluido con un recipiente de muestra. La presente invención también se refiere a un dispositivo para procesar un fluido en uno o más componentes, típicamente moviendo la materia en partículas del fluido. La presente invención también incluye dispositivos y métodos para la recolección de fluidos, tales como fluidos biológicos, fisiológicos o ambientales, remover la materia en partículas deseada del fluido, sin centrifugación, y diagnosticar y probar la materia en partículas. En una modalidad preferida de la invención, la materia en partículas es recolectada en un sitio de recolección. En una modalidad muy preferida de la invención, la materia en partículas es recolectada en una monocapa y en una disposición espacial predeterminada. La presente invención también incluye un aparato y método mejorados para procesar un fluido conteniendo materia en partículas. El aparato y método incluye hacer pasar el fluido a través de una cámara de separación de materia en partículas teniendo un asiento para una configuración de filtro poroso, el asiento incluye estructuras para alinear la materia en partículas recolectada en una configuración espacial predeterminada, estructuras que mejoran el flujo de fluido a través de la cámara de separación de materia en partículas, y/o estructuras para promover o detener la porosidad y/o presión de la configuración de filtro poroso alojada en la cámara de separación de materia en partículas. La presente invención también se refiere a un dispositivo mejorado para recolectar un fluido de procesamiento, típicamente un fluido biológico. El dispositivo incluye una cámara de separación de materia en partículas teniendo uno o más de lo siguiente: un sitio de recolección; una configuración de filtro poroso incluyendo una membrana para separar la materia en partículas de un fluido y una frita de soporte poroso; la configuración de filtro poroso establece por lo menos dos trayectorias de flujo de fluido a través de la cámara de separación de materia en partículas; un asiento de cámara que configura la materia en partículas recolectada en una configuración espacial predeterminada; una cámara de separación de materia en partículas teniendo un canal concéntrico; un canal teniendo uno o más miembros elásticos; un asiento de cámara teniendo uno o más miembros elásticos; un asiento o base de cámara teniendo postes; un asiento de cámara teniendo una o más modificaciones de superficie predeterminadas; un asiento de cámara teniendo uno o más elementos que promueven una configuración espacial predeterminada de material en partículas en el sitio de recolección; y estructuras que mejoran el flujo de fluido a través de la cámara de separación de materia en partículas. Un dispositivo de acuerdo con la presente invención también puede incluir estructuras que sean configuradas para y/o estén adaptadas para mezclar la muestra recolectada en el recipiente de muestra. Las estructuras ilustrativas incluye, pero no se limitan a, un recipiente de muestra teniendo una tapa, o una porción de la tapa que sea relativamente giratoria; una tapa o porción de tapa que se pueda mover con relación al recipiente de muestra; y un tubo o similar que se extienda hacia el recipiente de muestra. El tubo puede incluir uno o más elementos para agitar el espécimen. La tapa también puede incluir una porción que se acople ceñidamente a una porción de una cubierta para la cámara de separación de materia en partículas en un sello hermético al líquido. La tapa también incluye una porción que acopla ceñidamente una porción de la cubierta en un sello hermético al líquido pero no hermético al fluido. Un dispositivo de acuerdo con la presente invención también puede incluir una bomba o jeringa. La bomba o jeringa opcionalmente pueden incluir uno o más elementos configurados para permitir que una cantidad predeterminada del fluido entre a la bomba o jeringa. La presente invención también incluye preparar una muestra para examen microscópico procesando un fluido utilizando un dispositivo de acuerdo con la invención, y recolectar la materia en partículas en un sitio de recolección en el dispositivo. La presente invención también incluye un método para analizar materia que comprende recolectar un fluido en una cámara, recolectar la materia en partículas en un sitio de recolección y transferir la materia en partículas recogida en el sitio de recolección a un portaobjetos de microscopio o similar. Preferiblemente, ambos pasos de recolección ocurren dentro de la cámara. Un dispositivo de acuerdo con la presente invención también puede incluir uno o más elementos separables. En una modalidad preferida de la invención, el dispositivo incluye una cámara de separación de materia en partículas separable. En una modalidad preferida de la invención, el dispositivo incluye una configuración de filtro poroso por lo menos parcialmente retenida en una parte superior de la cámara. La presente invención también incluye un equipo que tenga un módulo de ensayo que incluya un elemento de recolección de materia en partículas de acuerdo con la invención, un recipiente de muestra de fluido, y una bomba para inducir flujo de fluido desde el recipiente de muestra a través del módulo de ensayo.

En una modalidad preferida de la invención, una muestra de fluido en un recipiente está en comunicación de fluido con una cámara de separación de materia en partículas o módulos para separar la materia en partículas en el fluido y recolectar la materia en partículas separada en un sitio de recolección. En una modalidad muy preferida de la invención, la materia en partículas separada es recolectada en una monocapa en el sitio de recolección. Una modalidad preferida de la invención también incluye un tubo hueco proporcionando comunicación de fluido entre el recipiente de muestra y la cámara de separación de materia en partículas. Muy preferiblemente, el tubo hueco incluye medios para agitar la muestra y/o dispersar la materia en partículas en la muestra. En otra modalidad de la invención, el aparato incluye el recipiente de muestra y la cámara de separación de materia en partículas descrita anteriormente, y una bomba, jeringa o similar. En esta modalidad de la invención, varias estructuras proporcionan una trayectoria de flujo de fluido a partir del recipiente de muestra, a través de la cámara de separación de materia en partículas y hacia la bomba o jeringa. Como se utiliza en la presente, los términos "muestra" o "espécimen" se refieren a cualquier fluido en combinación con materia sólida, tal como materia en partículas, y a partir de la cual puede ser deseable recolectar el componente en partículas de la muestra para el propósito de establecer su identidad o presencia en la muestra. Típicamente, el componente de fluido de la muestra será un líquido. Sin embargo, el fluido también puede ser aire o gas. Como una muestra, puede ser deseable determinar la presencia de células cancerosas o ciertas proteínas en un fluido biológico, tal como orina. En otro ejemplo, puede ser deseable evaluar la naturaleza de los contaminantes, tales como contaminantes moleculares, en agua ultra pura utilizada en la industria electrónica. Otros fluidos ilustrativos incluyen, pero no se limitan a, fluidos del cuerpo, tales como sangre, fluido espinal o fluido amniótico; lavado bronquial; esputo; aspiraciones de aguja fina; agua molida; fluidos de procesamiento industrial; y fluidos de diálisis electrónicos o médicos, para identificar sólo algunos. Se pretende que el tipo de fluido que sea procesado no debe limitar la invención. Como se utiliza en la presente, el término "fluido" se refiere a cualquier fluido para el cual puede ser deseable recolectar un componente del fluido con el propósito de establecer su identidad o presencia en el fluido. Típicamente, el componente en el fluido será una materia sólida, tal como una materia en partículas. Por ejemplo, el fluido puede ser aire o gas, o un fluido biológico tal como orina, y puede ser deseable determinar la presencia de células cancerosas o ciertas proteínas en el fluido biológico. En otro ejemplo, puede ser deseable evaluar la naturaleza de contaminantes, tales como contaminantes moleculares, en agua ultra pura utilizada en la industria electrónica. Otros fluidos ilustrativos incluyen, pero no se limitan a, fluidos del cuerpo tales como sangre, fluido espinal o fluido amniótico; lavado bronquial; esputo; aspiración de aguja fina; agua molida; fluidos de procesamiento industrial; fluidos de diálisis electrónica o médica; para identificar sólo algunos. Se pretende que el tipo de fluido que sea procesado no limite la invención. Como se utiliza en la presente, el término "materia en partículas" se refiere a cualquier substancia en un fluido que sea capaz de recolección y evaluación, preferiblemente a través de examen citológico. La materia en partículas ilustrativa incluye, pero no se limita a, células o fragmentos de célula, proteínas, moléculas, polímeros, hules estabilizadores, antioxidantes, aceleradores, silicones, resinas alquidálicas, tiocoles, parafinas, termoplásticos, bacterias, pesticidas y herbicidas. La materia polimérica ilustrativa específica incluye, pero no se limita a polietileno, polipropileno, poliisobutileno, poliacri Ion itri lo , glicol polietilénico, cloruro de polivinilo, poliestireno, polisulfuro, polimetilmetacrilatos, polietilentereftalatos, bisfenol A (contaminante ambiental común), etilcelulosa, nitrocelulosa, poliuretano y nylon. La materia biológica e ilustrativa específica incluye células cancerosas, incluyendo la distinción entre células cancerosas metastáticas y normales; proteínas, ácidos nucleicos, anticuerpos, o similares. Como se utiliza en la presente, los términos "adaptado para comunicación", "que se comunica con", o términos similares se refieren a cualquier medio, estructura o método para establecer un flujo de fluido a través del sistema, y son aquellos bien conocidos en la técnica. Estructuras ilustrativas se muestran en las Figuras. Por ejemplo, un conducto puede tener un conector adaptado para recibir o conectarse a un conector coincidente o en otro conducto. Como se utiliza en la presente, el término "conector" se refiere a cualquier estructura utilizada para formar una unión o unirse por sí misma a otra pieza. Estos conectores o conexiones establecen una trayectoria de flujo de fluido a través de varios elementos del aparato, ensamble o sistema. Las conexiones típicas incluyen, pero no se limitan a, conexiones coincidentes, tales como de tipo Luer, de tipo tornillo, de tipo flexión, o conectores que se unen conjuntamente. Como se utiliza en la presente, "adaptado para acoplarse", "acoplamiento", "acoplar", o términos similares se refieren a estructuras complementarias que pueden alinear, coincidir, estar cerca de, que se apoya cerca de, contra o dentro de una y la otra. Estructuras ilustrativas incluyen los conectores descritos anteriormente. Un dispositivo 10, de acuerdo con una modalidad ilustrativa de la presente invención que se muestra en la Figura 1, incluye un recipiente de muestra 20 que lleva una muestra de fluido 23, una cámara de separación de materia en partículas 30 teniendo una configuración de filtro poroso, y una bomba 40. La Figura 1 también muestra un tubo hueco 50 que incluye un elemento de dispersión 51. Cada uno de estos elementos será ahora descrito con más detalle.

RECIPIENTE DE RECOLECCIÓN De acuerdo con la invención, el recipiente de muestra 20 incluye cualquier recipiente adecuado para llevar un fluido 23, preferiblemente un fluido biológico. El recipiente típico incluye paredes laterales 21 y una pared de fondo 22 que, en combinación, contienen la muestra 23. El recipiente de muestra 20 también tiene un extremo abierto 24 para la recolección, mantenimiento o almacenamiento del fluido 23. Los fluidos típicos incluye, pero no se limitan a, fluidos biológicos tales como fluidos del cuerpo, fluidos de agua de desperdicio, o similares. Los fluidos del cuerpo típicos incluyen orina u otros fluidos biológicos tales como sangre, fluido cerebro espinal (CSF), lavado bronquial, esputo o aspiraciones de aguja fina. La configuración y materiales utilizados para hacer el recipiente (y cualquiera de los otros elementos que comprenden un dispositivo de acuerdo con la invención) pueden ser cualquiera de una variedad de materiales, formas y tamaños. Por ejemplo, la copa puede ser construida de cualquier material compatible con el fluido que será procesado. Se apreciará que el recipiente y el ensamble de las paredes laterales con la pared de fondo puede ser cualquier ensamble convencional. En una modalidad preferida de la invención, la pared de fondo 22 es un miembro cónico, como se muestra en la Figura 1. Opcionalmente, la pared de fondo 22 o la pared lateral 21 pueden incluir una o más aletas o similares (no mostrada) extendiéndose desde el interior del recipiente 20. Dichas aletas pueden ser deseables en una modalidad de la invención que se describe más adelante con detalle en donde la muestra en el recipiente es agitada mediante la rotación del recipiente. Como se muestra en las Figuras 1 y 2, un dispositivo de acuerdo con la invención también incluye una tapa 31. En una modalidad preferida de la invención, la tapa 31 está configurada o adaptada para recibir una porción inferior 32 de una cámara de separación de materia en partículas 30. La tapa 31 puede ser variadamente configurada para lograr la función deseada. Una modalidad preferida se muestra en la Figura 2. La tapa 31 puede incluir un miembro 51 que se extiende hacia abajo configurado para acoplar la pared lateral 21 del recipiente 20. Se pretende que la tapa 31 pueda ser de cualquier configuración o forma que cierre o selle el extremo abierto 24 del recipiente 20. La tapa también incluye una porción 52 que tiene una abertura 53 adaptada para recibir la porción inferior 32 de la cámara de separación de materia en partículas 30. Aunque el acoplamiento entre la porción de tapa 52 y la porción inferior 32 puede ser variadamente configurado, la porción inferior 32 preferiblemente incluye una ranura 53 adaptada para recibir una proyección 54 desde la porción de tapa 52. En una modalidad muy preferida de la invención, el acoplamiento es un ajuste por salto, con el acoplamiento entre la porción inferior 32 y la proyección 54 permitiendo que la porción inferior 32 gire con relación a la porción de tapa 52. Esta configuración de preferencia es hermética al líquido, y en una modalidad muy preferida de la invención, el sello es hermético al líquido, pero no hermético al gas (por ejemplo, aire).

Una configuración preferida de la tapa 31 ahora será descrita con respecto a la Figura 1. La tapa 31 puede ser configurada en forma variada para obtener la función deseada. De acuerdo con esta modalidad de la invención, la tapa 31 incluye estructuras y medios para permitir que una tapa externa 71 se mueva con relación a una tapa interna 72. La tapa externa 71 de preferencia se fija a y/o está en comunicación de fluido con el tubo 50. En una modalidad preferida de la invención, la tapa externa 71 y el tubo 50 relativamente puede girar con respecto a la tapa interna 72, cuando la tapa interna 72 es apretada en el recipiente 23. Dicho movimiento es relativo entre la tapa externa 71 y la tapa interna 72 mueve la muestra en el recipiente 23 con relación al agitador 58A (Figura 1), cepillo 58B (Figura 10) o escoba 58C (Figura 11). En la modalidad de la invención que incluye las tapas interna y externa, se prefiere que las tapas interna y externa estén adaptadas para acoplarse entre sí de manera que las tapas respectivas no giran hasta el cierre final de la tapa en el recipiente. Se pretende que por lo menos inicialmente, las tapas respectivas actúen como una tapa unitaria. Cuando la unidad de tapa es apretada en una posición predeterminada, sin embargo, se pretende que cualquier estructura que lleva la tapa interna 72 en su lugar con relación a la tapa externa 71 sea separada o liberada, de manera que las tapas interna y externa giren libremente con respecto una a la otra. Por ejemplo, la tapa interna 72 puede ser utilizada para sellar el recipiente y la tapa externa 71 puede ajustarse por salto sobre la tapa interna 72. En esta modalidad de la invención, una lengüeta o similar sobre el interior de la tapa externa 71 puede evitar el movimiento relativo entre las tapas interna y externa cuando las tapas respectivas estén en una primera posición. El movimiento de la tapa externa 71 hacia una segunda posición, por ejemplo, la ruptura de la lengüeta, permite la rotación de la tapa externa 71 con relación a la tapa interna 72. Alternativamente, se puede ver que un separador temporal (no mostrado) inicialmente podría mantener a las tapas interna y externa en una posición axialmente separada. Después de apretar la tapa interna 72 sobre el recipiente 20, el separador podría ser removido y la tapa externa 71 deslizarse axialmente sobre la tapa interna 72 hacia una posición que puede girar libremente con respecto a la tapa interna 72. Una estructura alternativa o adicional en la modalidad de la invención que incluye una cubierta con una pared flexible 55, preferiblemente es circular o elíptica, que acopla o soporta una porción 45 de la cámara de separación de materia en partículas 30. En una modalidad muy preferida de la invención, la pared 55 incluye una o más muescas separadas (no mostradas). Se pretende que estas muescas proporcionen un grado de flexibilidad en la pared de manera que, si se desea, la porción inferior de la cámara de separación de materia en partículas 30 puede ser desacoplada de la tapa 31 (ver, por ejemplo Figura 5). La Figura 5 también ilustra otra modalidad de la invención con relación a una tapa 31 que tiene una ranura a través de la cual el agitador 58A o escoba 58C puede ser colocado dentro del recipiente 20. En una modalidad preferida de la invención, la ranura o abertura en la tapa 31 puede ser cubierta con una cubierta removible y/o penetrable que protege el interior del recipiente 20 de la contaminación hasta que el recipiente 20 esté listo para usarse. Por ejemplo, un cepillo 58B o similar puede ser utilizado para recolectar una muestra cervical, la cubierta entonces puede ser removida desde la cubierta 31, y el cepillo 58B puede ser colocado en el recipiente 20. De acuerdo con otra modalidad preferida, la tapa interna 71 puede tener un collarín (no mostrado) que coaxialmente rodea al tubo 50 y se extiende parcialmente hacia el recipiente 20. Dicho collarín vuelve a dirigir a la muestra 23 de regreso hacia el recipiente 20 durante la agitación, como podría ocurrir durante la agitación de remolino. Esto es ventajoso ya que el collarín impone poca o nada de resistencia a la rotación relativa entre la tapa interna 71 y la tapa externa 72. Además, se puede ver que la tapa externa 72 puede tener formada sobre la misma una boquilla coincidente para la unión del tubo 50. La boquilla coincidente puede ser formada sobre la tapa externa 72 con el fin de extenderse coaxialmente dentro del collarín. De esta manera, se puede utilizar un tubo telescopiable o que se pueda romper 50 en su configuración alargada para recolectar el espécimen, y después volverse a configurar a su configuración aplastada y unida a la boquilla coincidente. Dicha configuración de acuerdo con esta modalidad además puede reducir la posibilidad de la contaminación de la muestra reduciendo al mínimo el manejo del espécimen entre el tiempo en que la muestra es recolectada y el tiempo en que esta es examinada.

ALOJAMIENTO DE SEPARACIÓN DE MATERIA EN PARTÍCULAS De acuerdo con la presente invención, un dispositivo de acuerdo con la invención incluye un alojamiento de separación de materia en partículas que puede ser variadamente configurado. Una configuración ilustrativa se muestra en la Figura 2. Se puede utilizar cualquier alojamiento 30 adaptado para recibir un ensamble de recolección en materia en partículas. Como se muestra en las Figuras 1 y 2, la cámara de separación de materia en partículas 30 preferiblemente es un alojamiento de dos piezas formado por una porción superior 41 y una porción de base 32. En una modalidad preferida de la invención, la porción superior 41 liberablemente acopla la porción de base 32; sin embargo, son adecuadas configuraciones o ensambles de cámara alternativos que proporcionan acceso a la configuración de filtro poroso 35. En una modalidad preferida de la invención, la porción de base 32 incluye una pared lateral 47 típicamente circular, y opcionalmente incluye una porción serrada 63 (mostrada en la Figura 4A) que acopla o se comunica con la pared lateral 44 y el asiento 42 de la porción superior 41. Se ha encontrado que porción serrada opcional 63 de la porción inferior 32 facilita el desacoplamiento de la porción inferior 32 de la porción superior 41. La porción superior 41 y la porción de base 32 pueden ser conectadas o sujetadas entre sí a través de cualquier conexión o medio coincidente que proporcione una fijación hermética al líquido o fluido, por ejemplo, una conexión coincidente de tipo Luer (roscada o no roscada) de tipo de tornillo, de tipo fricción y conexión coincidente ahusada, o ajuste por salto (como se ilustra). La porción de base 32 incluye un pared lateral y una pared de fondo adecuada para asentar un ensamble de filtro de materia en partículas 33. La porción de base 32 también puede incluir un agujero o abertura central 34 comunicándose con el tubo hueco 50. En una modalidad preferida de la invención, el tubo hueco 50 se extiende hacia el recipiente de espécimen 20. En una modalidad preferida de la invención, la porción de base 32 puede ser una estructura separada que sea capaz de girar con respecto a la tapa 31. Con el fin de obtener una fácil rotación centrífuga mientras se mantiene un ensamble hermético a líquido, la porción de base 32 coincidentemente puede acoplar la base 31 a través de una disposición de lengua y ranura (ver Figura 2). De acuerdo con una modalidad de la invención, la porción de base 32 del alojamiento 30 de cámara de separación de materia en partículas incluye una pared o asiento de fondo 39. Como se muestra en las Figuras 4A-4C, el asiento 39 puede incluir una o más costillas o proyecciones separadas 60. Las proyecciones 60 de preferencia son de una configuración, tamaño y forma suficientes para evitar que la configuración porosa 35 haga contacto con el asiento 39. En la modalidad mostrada en la Figura 4A las proyecciones 60 son anillos concéntricos. A continuación se describen con más detalle configuraciones alternativas. En una modalidad preferida de la invención, las proyecciones 60 funcionan en una o más de las siguientes formas: las proyecciones 60 pueden romper la tensión de superficie entre la configuración de filtro poroso 35 y el asiento 39 durante uso; cuando la configuración de filtro poroso 35 va a ser jalada del asiento 39, el primer medio poroso 36 no permanece en contacto con el asiento 39; las proyecciones 60 finalmente pueden distribuir la presión de la configuración de filtro poroso en la cámara de separación de materia en partículas 30; las proyecciones 60 pueden evitar o suprimir la compresión de la configuración de filtro poroso; y las proyecciones 60 pueden ser configuradas para distribuir cualquier materia en partículas recolectadas en una configuración predeterminada o distribución espacial. De acuerdo con la presente invención, la superficie del asiento 39 puede incluir una o más estructuras, configuraciones, o texturas de superficie que promuevan la habilidad de la configuración de filtro poroso 35 para liberarse del asiento 39, que promueve una distribución espacial predeterminada de la materia en partículas en el sitio de recolección, evita o suprime la compresión de la configuración de filtro poroso 35. Una modalidad de la invención incluye proyecciones concéntricas, tales como las proyecciones 60 descritas anteriormente. Otras configuraciones incluyen, pero no se limitan a, una rejilla, sombreado o similar, cuadrados o rectángulos concéntricos, o una serie de estructuras continuas o separadas, fl nodos, protuberancias, granulaciones, o similares (ver Figuras 4B y 4C). Se pretende que cualquier elemento, estructura o química que proporcione una textura a la superficie del asiento 39 para lograr las funciones establecidas anteriormente sea adecuada para utilizarse con la presente invención. En una modalidad preferida de la invención, la superficie del asiento se configura en forma subrayada (ver Figura 4C). En otra modalidad preferida de la invención, la superficie del asiento se configura en una estructura de fase de reloj de sol o de reloj (ver Figura 4B). Ambas modalidades, así como otras configuraciones de superficie descritas en la presente, promueven la recolección de la materia en partículas en el sitio de recolección en una configuración espacial predeterminada. Las configuraciones mostradas en las Figuras 4B y 4C son particularmente deseables, ya que la impresión del tratamiento de superficie del asiento puede ser transferida al portaobjetos del microscopio y utilizarse para ubicar e identificar materia en partículas específica, tal como una célula cancerosa, utilizando un sistema coordinado. Se ha encontrado que una porción mayor de la materia en partículas se recolecta en regiones y en el sitio de recolección que corresponde a o áreas opuestas 75 del asiento. En forma inversa, las manchas grandes 76 son regiones que corresponden a áreas en donde cantidades más pequeñas de materia en partículas se recogen en la superficie de recolección. Estas regiones son impresas en el portaobjetos de I microscopio cuando la superficie de recolección es colocada en contacto con el portaobjetos. Por ejemplo, un técnico que lee un portaobjetos de microscopio de acuerdo con la presente invención puede ser capaz de identificar y ubicar una célula de interés observando que la célula particular puede ser encontrada en una posición angular correspondiendo a las horas del reloj 2 en la configuración de cara de reloj mostrada en la Figura 4B. La impresión de un portaobjetos de microscopio de tal manera significativamente acelera la revisión de los portaobjetos y significativamente mejora la habilidad de un técnico para encontrar materia de interés previamente identificada. Incluidas dentro de la invención se encuentran una o más estructuras sobre la superficie de asiento que proporcionan orientación positiva de la materia en partículas a medida que esta es recolectada en el sitio de recolección y transferida al portaobjetos del microscopio. Por ejemplo, una estructura de identificación de coordenada adecuada puede ser una flecha 71 similar, como se muestra en la Figura 4B. De acuerdo con otra modalidad, el asiento 39 y/o porción inferior 32 opcionalmente puede incluir un canal 70 o similar, ejemplos de los cuales se muestran en las Figuras 4B, 4C y 7-9. En una modalidad preferida de la invención, el asiento 39 se inclina directamente hacia fuera hacia el canal 70. La ligera inclinación del asiento 39 y el canal 70 promueven un flujo de fluido mejorado a través de la cámara de separación de materia en partículas 30 y reduce la tensión de superficie del asiento 39 en la configuración de filtro 35, ambos promueven la capacidad de la configuración de filtro poroso 35 para desacoplarse de la porción inferior 32 de la cámara de separación de materia en partículas 30. Este aspecto de la invención es otra estructura que promueve la liberación de la configuración porosa. Estructuras adicionales se muestran en las Figuras 7-9 que dirigen o están indicadas en la promoción del flujo de fluido a través de la cámara de separación de materia en partículas 30 y también están implicadas en la liberación de la configuración de filtro poroso 35 de la porción inferior 32. La Figura 7 muestra aletas 72 que se extienden hacia abajo hacia el canal 70 desde el labio del asiento 39. La Figura 8 muestra un anillo 73, con forma de O, o similar que está colocado en el canal 70, preferiblemente de manera que una superficie superior del anillo con forma de O 73 está ligeramente por arriba del plano del asiento 39. Esto asegura que el anillo con forma de O 73 acoplará una porción de la configuración de filtro poroso 35 cuando se coloque en la porción inferior 32. La Figura 39 muestra una aleta 74 que se extiende hacia abajo desde una porción inferior del asiento 39, asegurando que la aleta 74 acoplará una porción de la configuración de filtro poroso 35 cuando se coloca en la posición inferior 32. En una modalidad preferida de la invención, la aleta 32, el anillo con forma de O 73 y la aleta 74 se hace de un material elástico. La configuración preferida es aquella mostrada en la Figura 9. De acuerdo con la invención, la cámara de separación de materia en partículas 30 está configurada para recibir una configuración porosa 35 que tiene un sitio de recolección de materia en partículas 36 adaptado para recolectar materia en partículas a medida que el fluido que contiene la materia en partículas pasa a través de la cámara 30. La configuración porosa 35 que tiene un sitio de recolección 36 adaptado para recolectar la materia puede ser colocada a través de una trayectoria de flujo de fluido, el sitio de recolección 36 comunicándose con el tubo hueco 50. La configuración porosa 35 dentro de la cámara de separación de materia preferiblemente está adaptada para definir por lo menos una trayectoria de flujo de fluido teniendo primera y segunda ramificaciones, la primera ramificación 61 extendiéndose a través del sitio de recolección 36 y la segunda ramificación 32 derivándose del sitio de recolección 36 (por ejemplo, ver Figura 3). En una modalidad preferida, la invención incluye una configuración de filtro poroso 35 teniendo un primer medio poroso 37, adecuado para evitar el pasaje de la materia en partículas, y un segundo medio poroso 38, adecuado para permitir el paso del fluido. El segundo medio poroso 38 puede o no puede ser capaz de remover la materia en partículas del fluido 23, una selección del diseño de acuerdo con las necesidades de un dispositivo particular. En una modalidad preferida, el primer medio poroso 37 adecuado para capturar o recolectar materia en partículas, y aún muy preferiblemente, capturar o recolectar materia en partículas en una capa uniforme o individual. Una modalidad preferida también incluye un segundo medio poroso 38 que es adecuado como un soporte para el primer medio poroso 37. La naturaleza del material utilizado para hacer los medios porosos, la compatibilidad de los materiales seleccionados para los medios porosos entre sí y con el líquido que será procesado todos son factores que deben ser considerados para seleccionar un material particular para un medio poroso para una aplicación dada.

La configuración de filtro poroso 35 puede incluir una estructura unitaria teniendo un primer medio poroso 37 de densidad y/o tamaño de poro adecuado para evitar el paso de células a través del mismo y un segundo medio poroso 38 de densidad y/o tamaño de poro adecuado para pasar el fluido a través del mismo. En una modalidad preferida, la configuración de filtro poroso 35 incluye un primer medio poroso 37 comprendiendo una membrana de policarbonato porosa, adecuado para evitar el paso de la materia en partículas a través del mismo. La configuración de filtro poroso 37 además incluye un segundo medio poroso 38 que comprende un filtro de profundidad o frita. El filtro de profundidad puede hacerse de polipropileno o plásticos porosos de polietileno de alta densidad POREX®. En una modalidad preferida de la invención, el segundo medio poroso 38 puede incluir una porción corriente abajo serrada o de dientes de sierra 64, un ejemplo de la cual se ilustra en la Figura 2. Se pretende que la porción 64 sea una estructura y configuración que reduzca o mitigue la compresión de la configuración de filtro poroso 35 cuando se coloque en el alojamiento de separación de materia en partículas 30. Se debe observar que varios tipos de configuraciones de filtro poroso 35 pueden ser utilizadas intercambiablemente con aquellas de la presente invención. Aunque una membrana de policarbonato 37 es especialmente adecuada para utilizarse en el aparato de recolección de citología de la presente invención, también son adecuadas otras membranas porosas. Las membranas porosas ilustrativas son bien conocidas en la técnica y se describen en las patentes de E.U.A. 5,471,994 y 5,301,685, las cuales corresponden al número de patente mundial No. 94/03103. La membrana porosa 37 preferiblemente tiene un tamaño de poro de aproximadamente 0.22 mieras a aproximadamente 8 mieras, de preferencia alrededor de una miera a aproximadamente 6 mieras, y muy preferiblemente alrededor de 2 mieras, lo cual permite que atrape la materia en partículas, por ejemplo, células, las cuales tienen un tamaño de más de 3 mieras. La membrana es adecuada para permitir que el flujo de fluido pase a través de la misma, mientras que evita el paso de la materia en partículas. El segundo medio poroso 38 es adecuado para pasar el fluido a través del mismo y también puede ser capaz de remover la materia en partículas del fluido 23. El tamaño de poro del segundo medio poroso 38 puede variar de aproximadamente 5 mieras a aproximadamente 60 mieras, de preferencia alrededor de 15 mieras a 45 mieras, aproximadamente, y muy preferiblemente alrededor de 35 mieras. Un experto en la técnica reconocerá, ajustando el tamaño de poro de la membrana porosa 37 y el filtro de profundidad poroso 38 de acuerdo con el tipo y/o tamaño de la materia que será recolectada permite la recolección de la materia en partículas en el sitio de recolección. En una modalidad preferida de la invención, el tamaño de poro se selecciona de manera que una capa uniforme de materia, preferiblemente una monocapa de materia, se forme sobre el sitio de recolección. Por ejemplo, alrededor de 3 µm a aproximadamente 40 µm se ha mostrado que es efectivo, pero se pretende que la invención no se limite a cierta escala de tamaño de poro. En una modalidad muy preferida de la invención, el primer medio poroso 37 está unido al segundo medio poroso 38 usando un adhesivo que es soluble en líquido. Dichos adhesivos solubles incluyen, pero no se limitan a, composiciones de azúcar, geles, y similares. El primer medio poroso 37 y el segundo medio poroso 38 pueden ser colocados en cualquier forma que funcione como se describe aquí. Un experto en la técnica reconocerá, que la configuración de filtro poroso 35 puede ser configurada en forma variada y colocada según sea necesario para obtener un resultado particular. Por ejemplo, los primero y segundo medios porosos pueden estar separados, o ser medios separados; los dos medios pueden ser laminados conjuntamente; el primer medio puede ser integral o removiblemente acoplado con el segundo medio poroso; o el elemento de recolección puede comprender una zona de densidad mayor que se asemeje a la función del primer medio poroso descrito anteriormente, y la zona de densidad menor que se asemeje a la función del segundo medio poroso como se describió anteriormente. La selección de estas varias configuraciones están dentro de la experiencia de los practicantes en la técnica. A continuación se describirán variaciones con respecto a la estructura y composición de la configuración porosa. Como se muestra en la Figura 12, un soporte poroso 38 con al menos un agujero pasado 73, preferiblemente un agujero colocado cerca de la circunferencia del soporte poroso 38, proporciona un conducto directo para la succión, de manera que una membrana de filtro 37 es retenida sobre el soporte poroso 38 cuando la cámara de separación de materia en partículas 30 se abre para exponer la membrana 37 para procesamiento adicional. En otra modalidad de la invención, la porción inferior 32, tubo 50 y aletas 58 forman una unidad integral y pueden ser separadas de la tapa 31 para facilitar la remoción de la estructura integral del recipiente 20. Una estructura ilustrativa de esta modalidad de la invención se muestra en la Figura 5.

BOMBA De acuerdo con la invención, el recipiente de espécimen 10 incluye una bomba 40. En una modalidad preferida de la invención, la bomba 40 es una jeringa o similar para alterar la presión diferencial dentro del aparato, de manera que el fluido puede ser extraído del recipiente de espécimen 20 a través de la cámara de separación de materia en partículas 30. De acuerdo con la presente invención, la bomba 40 puede ser variadamente configurada. En una modalidad preferida de la invención, la bomba 40 incluye un extremo que forma la porción de cubierta 41 de la cámara de separación de materia en partículas 30. La porción de cubierta 41 incluye un asiento 42 similar configurado para acoplar una porción corriente debajo de la configuración de filtro poroso 35. En una modalidad preferida de la invención, el asiento 42 coloca la configuración de filtro poroso 35 en la cubierta, de manera que la configuración de filtro poroso 35 no se mueve durante uso. En una modalidad muy preferida de la invención, el asiento 42 incluye una pluralidad de proyecciones o postes 47 de un tamaño, forma y número para colocar la configuración de filtro poroso 35 en la cámara de separación de materia en partículas 30, para promover substancialmente la distribución pareja de la presión contra la configuración de filtro poroso 35 y reducir o evitar la compresión de la configuración de filtro poroso 35 que pueda interferir con el flujo de fluido a través de la configuración de filtro poroso 35. En una modalidad preferida de la invención, una porción de cubierta 41 acopla removiblemente la porción de fondo 32 para formar la cámara de separación de materia en partículas 30. La porción de cubierta 41 puede acoplar la porción de fondo 32 en cualquier forma y con cualquier estructura que permita que la porción de cubierta 41 desacople la porción de fondo 32. En una modalidad preferida de la invención, ilustrada en la Figura 2, la porción de cubierta 41 incluye una porción lateral 44 extendiéndose hacia abajo teniendo una pestaña 45 o similar adaptada para acoplar liberablemente y/o selladamente y espaldón 56 o similar en la porción de fondo 32. El movimiento del fluido a través del aparato de recolección puede ser efectuado manteniendo un diferencial de presión entre una fuente de fluido y el destino del fluido. Medios ilustrativos para establecer este diferencial de presión pueden ser aplicar presión a cualquier parte del sistema sobre el lado de entrada de la cámara de separación de materia en partículas 30 (por ejemplo, el recipiente de espécimen 20); aplicar un vacío a cualquier parte del sistema sobre el lado de salida del alojamiento (por ejemplo, la jeringa 40); o cualquier forma de bomba, tal como un filtro de lana de vidrio autovial (fabricado por Genex Corporation); cabeza de gravedad; o un recipiente que se pueda aplastar, flexible, tal como un recipiente de espécimen el cual puede ser comprimido para forzar el fluido a través del aparato de recolección de materia y hacia la jeringa. En una modalidad preferida de la invención, una jeringa extrae el fluido de una copa de recolección a través del alojamiento.

TUBO HUECO De acuerdo con una modalidad preferida de la presente invención, el recipiente de espécimen 20 incluye un tubo 50 similar para extraer el fluido 23 hacia la cámara de separación de materia en partículas 30. Típicamente, un tubo 50 será hueco y abierto o que se pueda abrir en ambos extremos. El tubo 50 incluye un extremo abierto 51 cerca del fondo de la cámara de recolección 23 y puede incluir una o más aberturas 52 hacia el tubo 50. El extremo abierto 51 y/o las aberturas 52 permiten que diferentes capas de fluido así como sedimentos, sean probados simultáneamente cuando el fluido es extraído hacia la cámara de separación de materia en partículas 30. De acuerdo con otra modalidad de la invención mejorada, el tubo hueco 50 incluye por lo menos una proyección o aleta 58A, o similar, como se muestra en la Figura 1. En una modalidad preferida de la invención, el tubo hueco 50 puede girar y la aleta 58A agita el espécimen líquido, y en una modalidad muy preferida, dispersa las células y/o materia en partículas, y/o rompe cualquier materia en partículas grandes tales como cuerpos mucoides. En una modalidad preferida ulterior de la invención, el tubo hueco 50 y la porción inferior 32 son de construcción unitaria, y la porción inferior 32, tubo 50 y aleta 58A se pueden mover con relación al recipiente de espécimen 20. Por ejemplo, si el recipiente gira, las aletas opcionales en las paredes lateral y/o de fondo del recipiente pueden crear un movimiento concéntrico de la muestra en el recipiente, el movimiento que será interrumpido por la presencia de la aleta 58A. Alternativamente, la porción inferior 32, el tuvo 50 y la aleta 58A pueden hacerse girar dentro de un recipiente fijo. • Como se muestra en las Figuras 10 y 11, como una modalidad 5 alternativa de la invención, el agitador 58 puede comprender fibras, un cepillo, lavado, o escoba, o similar, preferiblemente, dichas fibras o cepillos son adecuados para dispersar la materia en partículas en el recipiente cuando la muestra es agitada con relación al agitador, cepillo o escoba. En una modalidad preferida de la invención, el cepillo o escoba también es adecuado para utilizarse en la recolección de materia en partículas de un paciente, por ejemplo, un cepillo o escoba cervical, o similar. Se pretende que el cepillo pueda ser fijado a una porción de la tapa 31, o la tapa 31 pueda incluir una ranura, collarín o similar para acoplar coincidentemente una porción del mango en el extremo opuesto del cepillo.

MEZCLADOR Las Figuras 13-15 muestran un aparato para un método semiautomático de acuerdo con una modalidad preferida de la invención. En particular, las Figuras 13-15 muestran una modalidad muy preferida que comprende un manguito de soporte A para colocar y hacer girar el recipiente y la tapa interna 72. En la modalidad muy preferida de la invención, la tapa externa 71 está acoplada por una o más bandas elásticas B que en una primera posición o aflojada (Figura 14) no acoplan la capa externa 71, y en una segunda posición o apretada (Figura 15) acoplan y mantienen la tapa externa 71, mientras que la tapa interna 72 y el recipiente 20 están girando. En una modalidad alternativa, la banda B puede ser una banda de impulsión que hace girar la tapa externa 71, el tubo 50 y el agitador 58, como una unidad, con respecto al recipiente 20 y la tapa interna 72.

EQUIPO La presente invención también está dirigida a un equipo de recolección de materia en partículas y de pruebas que contiene el aparato de recolección 10 como una unidad integral. El equipo puede incluir por lo menos un recipiente de espécimen 20, por lo menos una cámara de separación de materia en partículas 30, por lo menos una bomba 40 y al menos una configuración de filtro poroso 35. Un equipo de acuerdo con la presente invención también puede incluir filtros de reemplazo, desechables o reemplazo, y/u otros componentes o soluciones típicamente utilizados durante los procedimiento de prueba o examen de materia en partículas, por ejemplo, exámenes citológicos.

FIJADOR Una composición de acuerdo con la invención incluye o uno o más solventes, preferiblemente un alcanol, de entre aproximadamente 35% y aproximadamente 45% en volumen; cetona, entre 2% y 3% en volumen, aproximadamente; un diluyente, preferiblemente un diol o triol de 1% a 3% en volumen, aproximadamente; un entrelazador, de preferencia un aldehido, de 0.4% a 3% en volumen, aproximadamente; glicerol, de aproximadamente 0.5% a aproximadamente 2% en volumen; uno o más detergentes y/o agentes de dispersión, preferiblemente no iónicos, de 0.01% a 0.05% en volumen, aproximadamente; y un regulador de pH de aproximadamente 45% a aproximadamente 65% en volumen. En una modalidad preferida de la invención, el pH de la composición es de entre aproximadamente 4 y aproximadamente 7. La presente invención también incluye un método para preparar materia en partículas, tal como células y similares, para el examen citológico o histológico, que comprende recolectar la materia en partículas en una capa uniforme, preferiblemente una monocapa y finar las células en una composición de acuerdo con la presente invención. El Cuadro 1 resume la escala y concentraciones preferidas de los componentes de la formulación fijadora de acuerdo con la presente invención.

CUADRO 1 Una composición de acuerdo con la invención incluye uno o más solventes para penetrar el tejido o células, deshidrata las células y/o inhibir la actividad bacteriana y vital. En una modalidad preferida de la invención, el solvente es una mezcla de alcanoles, los cuales penetran lentamente y cuando se combinan otros reactivos, fijan la muestra rápidamente. Esto desnaturaliza la proteína a través de precipitación, precipita glicógeno, y disuelve las grasas y lípidos. El alcanol puede ser cualquiera de los alcoholes bien conocidos teniendo de 1 a 4 átomos de carbono, por ejemplo, metanol, etanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, y varios butanoles ramificados. El solvente muy preferido es una mezcla de metanol e isopropanol, típicamente alrededor de 30% y alrededor de 10% en volumen, respectivamente. La cetona es un fijador con acción similar a aquella del alcohol, excepto que el glicógeno no es bien conservado. La cetona actúa como un fijador y además permite que toda la composición penetre a las células. La cetona preferida es acetona. Él diluyente forma un revestimiento sobre el espécimen y ayuda a protegerlo de los efectos del secado. El diluyente preferido es un dio o un triol, muy preferiblemente glicol polietilénico (PEG), por ejemplo, PEG-1500 (peso molecular promedio de aproximadamente 1450) también denominado Carbowax. El glicerol evita el secado de las células durante el procesamiento de la muestra. Las células que han sido mantenidas en una solución fijadora durante un tiempo extendido típicamente se hacen rígidas debido al proceso de fijación y son menos capaces de extenderse sobre el portaobjetos. El glicerol ayuda a las células a aplanarse sobre el portaobjetos. El entrelazador reacciona con grupos extremos de proteína para entrelazar moléculas y produce un producto insoluble. Los grupos de proteína implicados incluyen amino, ¡mino y amido, péptido, hidroxilo, carboxilo y sulfhidrilo. Los puentes de metileno también son comúnmente formados entre los grupos similares tales como NH2 y NH, pero no se cree que sean reversibles lavando en agua. Algunos entrelazadores tales como formaldehído son un antiséptico. Los entrelazadores preferidos son aldehidos, muy preferiblemente formaldehído. El detergente es un detergente no iónico y agentes de dispersión utilizados para la solubilización de proteínas y componentes de membrana para disminuir la agregación celular. Los detergentes preferidos son Nonidet P40 o Tritón X-100, ambos detergentes bien conocidos. El regulador de pH mantiene la solución a un pH de entre aproximadamente y 7, y proporciona un medio para la transportación. El regulador de pH preferido es Tris, un regulador de pH bien conocido. De acuerdo con la presente invención, el regulador de pH también puede incluir fijador que precipita las nucleoproteínas y uno o más agentes de mantenimiento de osmolaridad. El precipitador de nucleoproteína preferido es ácido acético glacial, típicamente en la escala de aproximadamente 0.2% a aproximadamente 0.3% en peso, y ayuda a mantener el regulador de pH entre 7.4 y 7.8 aproximadamente. Los agentes de mantenimiento de osmolaridad preferidos son dextrosa, típicamente en una escala de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 0.2% en peso y cloruro de sodio típicamente en la escala de 0.7% a 0.8% en peso, aproximadamente. En la modalidad preferida, los ingredientes fijadores activos descritos puede ser disueltos en un solvente adecuado tal como agua destilada, y esta solución después puede ser utilizada como un agente fijador en un número de formas como puede ser obvio para algún experto en la técnica. Por ejemplo, la solución fijadora puede ser utilizada para conservar muestras de tejido que van a ser embarcadas o llevadas a un sitio de examen. En este proceso, pequeños frascos o jarras que tienen sellos herméticos a líquido se llenan con el reactivo de la invención, y las muestras de tejido son colocadas en el frasco que contiene el reactivo para conservar las muestras hasta que lleguen al área en donde puede ocurrir el procesamiento adicional. Cualquier diluyente adecuado que no cambie las características químicas y físicas importantes de la formulación puede ser utilizado. Los tejidos preparados para estudios utilizando el fijador de la invención pueden ser preparados para estudio histológico en una forma conocida convencional, tal como a través del uso de parafina, equipo de sección, tinción, montaje sobre portaobjetos u otros pasos comunes utilizados antes del examen microscópico o de otro examen. La presente invención de esta manera proporciona una solución fijadora segura, conveniente y efectiva que pueda ser utilizada en muchos procedimientos histológicos conocidos que empleen tales soluciones.

MÉTODO La presente invención también incluye un método para remover materia en partículas de un fluido, y para transferir la materia en partículas, tales como células, a un portaobjetos de microscopio. En contraste a los métodos actualmente disponibles, el uso de la filtración de membrana proporciona un método para depositar células uniformemente sobre un portaobjetos de microscopio dentro de un traslape mínimo. Esto permite la clara observación y una exactitud de diagnóstico óptima. El método incluye recolectar una muestra de fluido conteniendo materia en partículas en un recipiente de recolección 20. El recipiente 20 después es tapado con un ensamble que incluye uno o más de los siguientes: tapa 31, cámara de separación de materia en partículas 30 y bomba 40. La bomba 40 después es activada para jalar el fluido del recipiente 20 a través de la cámara de separación de materia en partículas 30 hacia la bomba 40, por ejemplo, retirando el pistón en una jeringa. Cuando el fluido es extraído del recipiente 20 hacia la bomba 40, el fluido fluirá a través de la configuración de filtro poroso 30 como se muestra en la Figura 3, de manera que se forma una capa de materia en partículas en el sitio de recolección 37. Una vez que se forma la monocapa de células, el flujo de fluido es reducido en el centro de la configuración de filtro poroso 35 y se incrementa hacia los bordes de la configuración de filtro poroso 35. Esto puede deberse al bloqueo del flujo de fluido por las células recogidas a medida que forman la monocapa sobre la superficie de la configuración de filtro poroso 35. Cuando la mono capa tiene la mayor parte de la superficie 45 cubierta de la configuración porosa, el flujo de fluido se deriva del primer medio poroso 37 y pasa a través del área lateral extendida del segundo medio poroso 38. De esta manera, el área del segundo medio poroso 38 extendiéndose más allá de una pared extrema o faldón de la porción superior actúa como una ventilación (con una baja resistencia al flujo) que evita el apilamiento de células o la recolección en más de una monocapa. El fluido puede ser pasado de regreso y hacia delante a través de la configuración porosa las veces que sean deseadas. La bomba 20 después puede ser desconectada de la base 31 exponiendo así la configuración de filtro poroso 35. Una vez que la configuración de filtro poroso 35 es removida de la porción inferior 32, se obtiene un fácil acceso al primer medio poroso 37. Alternativamente, el desacoplamiento de la porción superior 41 de la bomba 40 de la porción inferior 32 también puede remover la configuración porosa 35 de la cavidad 32. El primer medio poroso 37 después puede ser comprimido contra un portaobjetos de microscopio para permitir que la materia en partículas recolectada en el sitio de recolección sea transferida, a medida que es recolectada, sobre el portaobjetos. Esto permite que se realice un examen citológico en las células por parte del practicante sin la interferencia de los poros en la membrana o retraso debido a requerimientos de procesamiento. Ya que el detalle celular depende de la fijación, se prefiere que las células sean fijadas inmediatamente después de haber sido depositadas en el portaobjetos. Un retraso demasiado largo entre la preparación y la fijación puede exponer a la células al secado, lo cual puede ser dañino para la estructura celular. Además, los artefactos secados con aire adversamente pueden afectar los resultados de tinción subsecuentes. Una excepción es cuando las células son teñidas con Wright-Giemsa, en donde el secado con aire es utilizado como el paso de fijación. En otra modalidad de la presente invención, la monocapa de células puede ser fijada directamente en el sitio de recolección. Esto puede ser realizado depositando primero una monocapa de células sobre el sitio de recolección del aparato de recolección de citología como se describió anteriormente, y subsecuentemente pasar una solución conteniendo un fijador, tal como alcohol o acetona, a través del aparato de recolección de citología. Claro que, en la modalidad muy preferida de la presente invención, se podría utilizar el fijador anteriormente descrito.

CONFIGURACIONES ALTERNATIVAS El aparato o módulo de recolección de materia descrito anteriormente puede ser utilizado en combinación con otros dispositivos de filtración o de tratamiento adecuado. Los dispositivos ilustrativos incluyen otros dispositivos de desperdicio y/o ensayo o módulos que puedan ser unidos al alojamiento 10. Típicamente, estos módulos adicionales incluirán un alojamiento que tiene una entrada y una salida, e incluirán una filtración, ensayo o elemento de detección colocado a través de la trayectoria de flujo del fluido en el alojamiento. Por ejemplo, el aparato puede comprender un alojamiento incluyendo puertos de entrada y de salida definiendo una trayectoria de flujo entre la entrada y la salida; un filtro colocado a través de la trayectoria de flujo; y un elemento de cromatografía/ensayo libremente móvil, tal como perlas de substrato, colocadas sobre el lado de salida del filtro. El elemento de cromatografía/ensayo libremente puede mezclarse con la materia en el fluido, capturar la materia y después puede ser analizado para la presencia de la materia. Los dispositivos adecuados incluyen aquellos descritos en las patentes de E.U.A. Nos. 4,953,561; 5,224,489; 5,016,644; 5,139,031; 5,301,685; 5,042,502 y 5,137,031.

Incluida dentro del alcance de la presente invención se encuentra la producción de un portaobjetos individual a partir de una muestra de paciente, la producción de portaobjetos múltiples a partir de una muestra de paciente, o la producción de portaobjetos múltiples a partir de muestras de paciente múltiples. Se pretende que una muestra de paciente pueda ser procesada en una forma de un sólo golpe, intermitente o continua. Los portaobjetos adicionales para otras aplicaciones de tinción pueden ser fácilmente preparados. La prueba de virus de papiloma humano, por ejemplo, a través de métodos más nuevos tales como inmunocitoquímica o hibridación in situ puede realizarse en los portaobjetos adicionales. A medida que los productos de oncogen u otras pruebas inmunocitoquímicas se desarrollan, son necesarios fos portaobjetos. Las diferentes fijaciones que estas pruebas pueden necesitar, pueden ser fácilmente incorporadas en el procedimiento, ya que la preparación no requiere que los portaobjetos sean fijados en una sola forma. La tinción más ampliamente utilizada para la visualización de cambios celulares en citología es el procedimiento de tinción de Papanicolaou. Esta tinción, la cual es utilizada tanto para aplicaciones ginecológicas como no ginecológicas, está compuesta básicamente de contratinciones citoplásmicas nucleares azules y naranjas, rojas y verdes. La tinción nuclear demuestra que los patrones cromáticos asociados con células normales y anormales, mientras que las tinciones citoplásmicas ayudan a indicar el origen de las células. El éxito de este procedimiento puede ser atribuido a la habilidad de observar un número de factores, incluyendo la definición de detalle nuclear y diferenciación de células. Este procedimiento de tinción también da como resultado una preparación multicolor que es muy placentera para el ojo, posiblemente reduciendo la tensión en el ojo. Este mismo procedimiento de preparación de portaobjetos puede ser utilizado virtualmente para todas las formas de citología. Además, el uso de componentes desechables completamente contenidos dirige aspectos de peligro biológico. Finalmente, la presentación mejorada de células, produciendo interpretación citológica mejorada puede expandir el papel de la citología proporcionando diagnósticos de pacientes más consistentes y confiables. También, se pueden cultivar microorganismos capturados en el medio de cultivo. Después de que una monocapa de células ha sido recolectada en el aparato de recolección de citología, el fluido puede ser utilizado para lavar el sitio de recolección, transfiriendo así cualquier microorganismo recogido del sito de recolección. En la prueba de bacterias, el primer medio poroso puede ser utilizado para cultivar junto con un dispositivo Qualture (no mostrado) para determinar la presencia de colonias bacterianas específicas. El dispositivo Qualture es una cápsula de plástico que contiene una membrana de filtro y cuatro almohadillas nutrientes de medios deshidratados, selectivos. La técnica de Qualture es más sensible que el método de placa de agar y más rápida para determinar un diagnóstico probable. El dispositivo tamiza, aisla y probablemente diagnostica aislados bacterianos en un solo paso por lo general en 4-6 horas. Las pruebas han demostrado que la recuperación de 50 mililitros de fluido es excelente y sensible.

Claims (26)

REIVINDICACIONES

1.- Un aparato para procesar un líquido que contiene materia en partículas, que comprende: un recipiente incluyendo una tapa acoplando fijamente dicho recipiente: una configuración porosa en un alojamiento, dicho alojamiento comprendiendo una primera porción acoplando relativa y giratoriamente dicha tapa; una bomba acoplando una segunda porción del alojamiento; dicho alojamiento separando entre la primera porción y la segunda porción, y la segunda porción reteniendo la configuración porosa.

2.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la primera porción acopla la tapa con un sello hermético al líquido.

3.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 2, en donde el sello hermético al líquido no es hermético al fluido.

4.- Un aparato para separar materia en partículas de un líquido, que comprende: un recipiente que incluye una tapa, la tapa comprende una primera porción acoplando fijamente dicho recipiente y una segunda porción que puede girar relativamente con respecto a la primera porción; una configuración porosa en comunicación de fluido con el recipiente y adecuada para remover la materia en partículas de un líquido, la configuración porosa estando colocada en una porción superior acoplando liberablemente la segunda porción, las porciones superior y segunda definiendo un alojamiento; y una bomba en comunicación de fluido con el alojamiento.

5.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 1 o 4, en donde la tapa comprende un tubo que se extiende hacia el recipiente.

6.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 5, en donde el tubo comprende al menos una aleta de agitación sobre el extremo del tubo que se extiende hacia el recipiente.

7.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 1 o 4, en donde la bomba comprende uno o más topes para extraer una cantidad predeterminada de líquido hacia la bomba.

8.- Un aparato para procesar un líquido que contiene materia en partículas, que comprende: una configuración porosa adecuada para remover el material en partículas de un líquido que contiene partículas; y un alojamiento soportando la configuración porosa en una cámara interior, el alojamiento incluye una porción que recibe liberablemente la configuración porosa, y una segunda porción que retiene la configuración porosa, el alojamiento separando entre las primera y segunda porciones, la primera porción teniendo un asiento que confronta a la configuración porosa, el asiento definiendo una relación hidráulica predeterminada entre el alojamiento y la configuración porosa.

9.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 8, en donde la segunda porción comprende al menos una protuberancia acoplando la configuración porosa.

10.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 8, en donde la primera porción comprende una porción serrada para desacoplar la segunda porción.

11.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 8, en donde la relación hidráulica predeterminada es definida por una o más estructuras configuradas para reducir la tensión de superficie de la porción inferior con respecto a la configuración porosa.

12.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 8, en donde la primera porción comprende una o más estructuras configuradas para reducir la capacidad de retener la configuración porosa en la primera porción.

13.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 8, en donde la segunda porción comprende una o más estructuras configuradas para incrementar la capacidad de retener la configuración porosa en la segunda porción.

14.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 8, que comprende además un canal alrededor de dicho asiento.

15.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 14, que comprende además un miembro elástico colocado en el canal.

16.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 15, en donde el miembro elástico es un anillo con forma de O, o una aleta.

17.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 8, en donde el asiento comprende una textura de superficie predeterminada.

18.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 17, en donde el asiento comprende una inclinación extendiéndose radialmente desde un agujero central.

19.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 17, en donde además dicho asiento comprende una aleta acoplando la configuración porosa.

20.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 17, en donde la textura de superficie comprende proyecciones en un patrón predeterminado.

21.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 20, en donde el patrón es una rejilla.

22.- El aparato de acuerdo con la reivindicación 20, en donde el patrón es una cara de reloj.

23.- Un aparato para procesar un líquido que contiene materia en partículas que comprende: un recipiente incluyendo una tapa fijamente acoplando el recipiente; una configuración porosa en un alojamiento, el alojamiento comprendiendo una primera porción acoplando la tapa, la primera porción teniendo un tubo que se extiende hacia el recipiente, la primera porción acoplando relativa y giratoriamente la tapa, la primera porción recibiendo liberablemente la configuración porosa; y una bomba, dicha bomba comprendiendo una porción adaptada para acoplar una segunda porción del alojamiento; el alojamiento siendo adaptado para separar entre la primera porción y la segunda porción, la segunda porción estando adaptada para retener la configuración porosa.

24.- El aparato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-23 que comprende además, un motor agitando el líquido a través de rotación relativa entre el recipiente y el alojamiento.

25.- Un método para separar la materia en partículas de un líquido, que comprende: hacer pasar el líquido que contiene las partículas a través de una configuración porosa adecuada para remover la materia en partículas del líquido, el líquido pasando desde el interior de un recipiente, la configuración porosa siendo recibida en una segunda porción de alojamiento, la primera porción girando relativamente con respecto al recipiente y extendiéndose hacia el recipiente para la comunicación de fluido con el líquido; y separar una segunda porción del alojamiento de la primera porción, en donde el paso de separación incluye retener la configuración porosa en la segunda del alojamiento.

26.- El método de acuerdo con la reivindicación 25, que comprende además: agitar el líquido en el recipiente con una aleta fija en la primera porción extendiéndose hacia el recipiente.