MX2013011185A - Cultivar de arroz designado 'cl152'. - Google Patents
Cultivar de arroz designado 'cl152'.Info
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Abstract
Se describe cultivar de arroz tolerante a herbicida designado 'CL152' y sus híbridos y derivados.
Description
.
CULTIVAR DE ARROZ DESIGNADO 'CL152'
El beneficio de la fecha de presentación del 31 de marzo de 2011 de la solicitud de patente provisional de los Estados Unidos número de serie 61/469, 866-es reclamada bajo 35 U.S.C. § 119(e) en los Estados Unidos, y es reclamada bajo los tratados y convenciones aplicables en todos los países. La descripción completa de la solicitud de prioridad se incorpora a la presente por referencia en su totalidad.
CAMPO TÉCNICO
Esta invención pertenece al cultivo de arroz designado 'CL152' y a híbridos de, y cultivos derivados del cultivo de arroz designado 'CL152'.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
El arroz es una cosecha agrícola antigua, y sigue siendo una · de las cosechas de alimento principales del mundo. Existen dos especies cultivadas de arroz: Oryza sativa L., el arroz asiático, y O. Glabarrina Steud., el arroz africano. Oryza sativa L. constituye casi todo el arroz cultivado en el mundo y es la especie crecida en los Estados Unidos. Las tres regiones principales productoras de arroz en los Estados Unidos son el Delta de Mississippi (Arkansas:,
Mississippi, noreste de Louisiana, sureste de Missouri), la Costa del Golfo (suroeste de Louisiana, sureste de Texas), y el Valle Central de California. En general, ver la patente de E.U.A. No. 6,911,589.
El arroz es una cosecha semiacuática que se beneficia de —condiciones de suelo inundado durante parte o casi toda la temporada de crecimiento. En los Estados Unidos, .el arroz típicamente crece en suelo inundada para optimizar producciones de grano. Los suelos de arcilla pesada o suelos franco limosos con capas duras de olla aproximadamente 30 cm debajo de la superfi.cie son suelos típicos productores de arroz, ya que reducen la pérdida de agua de percolación de suelo. La producción de arroz en los Estados Unidos se puede categorizar ampliamente como de sembrado en seco o sembrado en agua. En el sistema de sembrado en seco, el arroz es cosechado en un lecho de semilla bien preparado con una perforación de grano o al esparcir la semilla e incorporándola con un disco o grada. La humedad para germinación de semilla proviene de la irrigación o pluviosidad. Otro método de sembrar en seco es esparcir la semilla por aeroplano en un campo inundado, y después drenar dé inmediato el agua del campo. Para el sistema de sembrado en seco, cuando las plantas han alcanzado suficiente tamaño (etapa de cuatro a cinco hojas), se aplica una inundación permanente poco profunda de agua de 5 a 16 cm de profundidad al campo por el resto de la temporada de cosecha. Algún arroz es crecido en sistemas de producción de tierra alta, sin inundación.
Un método de sembrado en agua es enjuagar semilla de arroz durante 12 a 36 horas para iniciar la germinación, y después esparcir la semilla por aeroplano en un campo inundado. Los semilleros surgen a través de una inundación poco profunda, o el agua se puede drenar desde el campo por un tiempo corto para mejorar el establecimiento del semillero. Una inundación poco profunda entonces se mantiene hasta que el arroz se alcanza madurez. Tanto para el sistema de producción de sembrado en seco como para el de sembrado en agua, los campos son drenados cuando la cosecha es madura, y el arroz es cosechado 2 a 3 semanas después con cosechadoras grandes.
En los programas de cultivo de arroz, los cultivadores típicamente usan los mismos sistemas de producción que predominan en la región. De esta manera, típicamente se usa un vivero de cultivo sembrado a máquina por cultivadores en una región en donde el arroz es sembrado a máquina, y típicamente se usa un vivero sembrado con agua en regiones en donde prevalece el sembrado en agua.
El arroz en los Estados Unidos es clasificado en tres tipos de mercado primario por tamaño de grano, forma y composición de endosperma: grano largo, grano mediano y grano corto. Los cultivos de grano largo de los Estados Unidos típicos se cocinan secos y esponjosos cuando son al vapor o hervidos, mientras que los cultivos de grano mediano y corto se cocinan húmedos y pegajosos. Los cultivos de grano largo han sido tradicionalmente crecidos en los
estados sureños y por lo general reciben precios más altos en el mercado de Estados Unidos.
Aunque los objetivos de cosecha específicos varían de alguna manera en regiones diferentes, aumentar la producción es un objetivo primario en todos los programas. La producción de grano dependen de, en parte, el númeno de panojas por área unitaria, el número de flósculos fértiles por panoja, y peso de grano por flósculo. Los aumentos en cualquiera o todos estos componentes pueden ayudar a mejorar las producciones. Existe variación heredable para cada uno de estos componentes, y los cultivadores directa o indirectamente pueden seleccionar cualquiera de ellos.
Hay numerosos pasos en el desarrollo de cualquier germoplasma de planta novedoso, deseable. La cosecha de plantas comienza con el análisis y definición de problemas y debilidades del germoplasma actual, el establecimiento de metas del programa, y la definición de objetivos de cosecha específicos. El-siguíente paso es la selección (o generación) de germoplasma que prosea los rasgos deseados para cumplir las metas del programa. Una meta a menudo es combinar en una sola variedad una combinación mejorada de rasgos deseables a partir de dos o más líneas de germoplasma ancestrales. Estos rasgos pueden incluir dichas cosas como producción mayor de semilla, resistencia a enfermedad o insectos, mejores tallos y raíces, tolerancia a temperaturas bajas, y mejores características agronómicas o calidad del grano.
La elección de métodos de cultivo y selección depende del modo de reproducción de planta, la herencia del rasgo(s) siendo mejorado, y el tipo de semilla que se usa comercialmente (por ejemplo, híbrido F,, contra cultivos de linea pura o engendrados por endogamia). Para rasgos altamente heredables, una elección de plantas individuales, superiores evaluadas en una sola ubicación a veces puede ser efectiva, mientras que para rasgos con herencia baja o más compleja, la selección a menudo se basa en valores promedio obtenidos de revaluaciones replicadas de familias de plantas relacionadas. Los métodos de selección incluyen selección de pedigrí, selección de pedigrí modificada, selección de masa, selección recurrente y combinaciones de estos métodos.
La complejidad de herencia influye en la elección del método de cultivo. El cultivo de hibridación cruzada se usa para transferir uno o pocos genes favorables para un rasgo altamente heredable en un cultivo deseable. Esta propuesta se ha usado extensamente para cultivar cultivos resistentes a enfermedad. Se usan varias técnicas de selección recurrente para mejorar rasgos cuantitativamente heredados controlados por numerosos genes. El uso de la selección recurrente en cosechas de auto-polinización dependen del caso de polinización, la frecuencia de híbridos exitosos de cada polinización, y el número de retoños híbridos de cada cruza exitosa.
Las líneas de cultivo avanzadas prometedoras son probadas y comparadas por completo con estándares apropiados en medios ambiente representativos del área(s) objetivo comercial, típicamente
por tres o más años. Las mejores líneas se convierten en candidatos para cultivos comerciales nuevos; aquellos todavía deficientes en pocos rasgos se pueden usar como parientes para producir poblaciones nuevas para más selección.
-Estos procesos, que conducen finalmente a la mercadotecnia y distribución de cultivos o híbridos nuevos, típicamente toman 8 a 12 años desde el momento de la primera cruza; además pueden depender (y retrasarse por) el desarrollo de lineas de cultivo mejoradas como precursores. El desarrollo de cultivos e híbridos nuevos es un proceso consumidor de tiempo lo que requiere planeación avanzada precisa uso eficiente de recursos. Nunca hay garantías de un resultado exitoso.
Una tarea particularmente difícil es la identificación de plantas individuales que son, de hecho, genéticamente superiores. El fenotipo de una planta resulta de una interacción compleja de genética y medio ambiente. Un método para identificar una planta genéticamente superior es observar su funcionamiento relativo a otras plantas experimentales y a un cultivo estándar ampliamente crecido en un medio ambiente idéntico. Las observaciones repetidas de múltiples ubicaciones pueden ayudar a proveer un mejor cálculo de valor genético.
La meta de cultivo de arroz es desarrollar cultivos e híbridos de arroz nuevos, únicos y superiores. El cultivador inicialmente selecciona y cruza dos o más lineas parentales, seguido por auto polinización y selección, produciendo muchas combinaciones
genéticas nuevas. El cultivador puede generar billones de combinaciones genéticas diferentes vía cruza, autopolinización y cultivo de mutación. El cultivador tradicional no tiene control directo de genética al nivel molecular. Por lo tanto, dos cultivadores tradicionales trabajando independientemente uno del otro nunca desarrollarán la misma linea, o incluso líneas muy similares, con los mismos rasgos.
Cada año, el cultivador de plantas selecciona germoplasma para avanzar a la siguiente generación. Este germoplasma crece bajo diferentes condiciones geográficas, climáticas y de suelo. Entonces se hacen más selecciones durante y al final de la temporada de crecimiento. Los cultivos resultantes (o híbridos) y sus características son inherentemente ¡mpredécibles. Esto es debido a que la selección del cultivador tradicional ocurre en medios ambiente únicos, con ningún control al nivel molecular, y con potencialmente billones de diferentes combinaciones genéticas posibles siendo generadas. Un cultivador no puede predecir la línea resultante final, excepto posiblemente en un modo muy bruto y genérico. Además, el mismo cultivador no puede producir el mismo cultivo dos veces, incluso iniciando con las mismas líneas parentales, usando las mismas técnicas de selección. Esta variación incontrolable resulta en esfuerzo sustancial y gastos en desarrollar nuevos cultivos de arroz superiores (o híbridos); y hace a cada nuevo cultivo (o híbrido) novedoso e impredecible.
La selección de cruzas de híbrido superiores se realiza ligeramente de manera diferente. La semilla híbrida típicamente se produce por cruzas manuales entre parientes macho-fértiles seleccionados o al usar sistemas de esterilidad machos genéticos. Estos h i bridos- típicamente se seleccionan para rasgos de un solo gen que inequívocamente indican que una planta en verdad es un híbrido F1 que ha heredado rasgos de ambos presuntos padres, en particular el padre macho (ya que el arroz normalmente se auto-poliniza). Dichos rasgos pueden incluir, por ejemplo, un tipo de planta semi-enana, pubescencia, aristas o color de apícola. Datos adicionales sobre líneas parentales, así como el fenotipo del híbrido, incluyen en la decisión del cultivador de continuar o no con una cruza de híbrido particular o una cruza análoga, usando lineas parentales relacionadas.
Los métodos de cultivo de pedigrí y cultivo de selección recurrente a veces se usan para desarrollar cultivos de poblaciones de cultivo. Estos métodos de cultivo combinan rasgos deseables de dos o más cultivos u otras fuentes de germoplasma en acervos de cultivo de los cuales se desarrollan cultivos por autopolinización y selección de fenotipos deseados. Los nuevos cultivos son evaluados para determinar potencial comercial.
El cultivo de pedigrí a menudo se usa para mejorar cosechas de auto-polinización. Dos padres que poseen rasgos favorables, complementarios son cruzados para producir plantas F,. Una población F2 se produce por autopolinización de uno o más F^s. La
selección de las plantas individuales superiores puede comenzar en la generación F2 (o después). Entonces, comenzando en la generación F3 (u otra posterior), se seleccionan plantas individuales. La prueba replicada de hileras de panojas de las plantas seleccionadas puede comenzar en la generación F4 (u otra posterior), ambas para arreglar los rasgos deseados y mejorar la efectividad de selección para rasgos que tienen herencia baja. En una etapa avanzada en engendrado por endogamia (por ejemplo, F6 o F7), las mejores líneas o mezclas de líneas fenotípicamente similares son probadas para liberación potencial como cultivos nuevos.
También se pueden usar métodos de selección de masa y recurrentes para mejorar poblaciones de cosechas de auto-polinización o polinización cruzada. Una población genéticamente variable de individuos heterocigotos se identifica o crea al entrecruzar varios padres diferentes. Las plantas con mejores retoños se seleccionan con base en superioridad individual, progenie sobresaliente o excelente habilidad de combinar. Las plantas seleccionadas se entrecruzan para producir una población nueva en donde se continúan más ciclos de selección.
El cultivo de hibridación cruzada a menudo se usa para transferir genes por un rasgo simplemente heredado, altamente heredable en un cultivo homocigoto deseable o línea engendrada por endogamia, que es el padre recurrente. La fuente del rasgo a transferirse se llama en padre donador. La planta resultante debe tener idealmente los atributos del padre recurrente (por ejemplo,
cultivo) y el nuevo rasgo deseado transferido desde el padre donador. Después de la cruza inicial, individuos que poseen el fenotipo donador deseado (por ejemplo, resistencia a enfermedad, resistencia a insecto, tolerancia a herbicida) se seleccionan y repetidamente se cruzan (hibridan de manera cruzada) al padre recurrente.
El procedimiento de origen de una semilla en el sentido estricto se refiere a plantar una población segregante, cosechando una muestra de una semilla por planta, y usando la muestra de una semilla para plantar la siguiente generación. Cuando la población ha sido avanzada de la generación F2 al nivel deseado de engendro por endogamia, las varias plantas de las cuales las lineas se derivan cada una rastreará a diferentes individuos de F2. El número de plantas en una población disminuye cada generación, debido a la falla de algunas de las semillas de germinar o la falla de algunas plantas de producir por lo menos una semilla. Como resultado, no todas las plantas de F2 originalmente probadas en la población será representadas por progenie en generaciones posteriores.
En un procedimiento de múltiples semillas, el cultivador cosecha una o más semillas de cada planta en una población y se trillan juntas para formar un bulto. Parte del bulto se usa para plantar la siguiente generación y parte se mantiene en reserva. El procedimiento ha sido referido como técnica de origen de una semilla modificada o de vaina-bulto. El procedimiento de múltiples semillas se ha usado para ahorrar mano de obra al cosechar. Es
considerablemente más rápido trillar panojas a máquina que eliminar una semilla de cada una a mano como en el procedimiento de una semilla. El procedimiento de múltiples semillas hace también posible plantar el mismo número de semillas de una población para cada generación de engendrado por endogamia. Se cosechan suficientes semillas para compensar por plantas que no germinan o producen semilla.
Otros métodos de cultivo comunes y menos comunes son conocidos y usados en la técnica. Ver, por ejemplo, R.W. Allard, Principies of Plant Breeding (John Wiley and Sons, Inc., Nueva York, Nueva York, 1967); N.W. Simmonds, Principies of Crop I mprove ment (Longman, Londres, 1979); J. Sneep y otros, Plant Breeding Perspectives (Pudoc, Wageningen, 1979); y W.R. Fehr, Principies of Cultivar Development. Theory and Technique (Macmillan Pub., Nueva York, Nueva York, 1987).
La prueba propia debe detectar cualquier falla principal y establecer el nivel de superioridad o mejora sobre cultivos actuales. Además de mostrar desempeño superior, debe haber demanda por un nuevo cultivo o híbrido, es decir, el cultivo o híbrido nuevo debe ser compatible con estándares de industria, o debe crear un mercado nuevo. La introducción de un cultivo o híbrido nuevo puede incurrir en gastos adicionales al productor de semilla, el cultivador, procesador y consumidor de dichas cosas como publicidad y mercadotecnia especial, semilla alterada y prácticas de producción comunes, y nueva utilización de producto. La prueba qúe precede la
liberación de un cultivo o híbrido nuevo debe considerar costos de investigación y desarrollo, además de superioridad técnica del cultivo o híbrido final.
En años recientes, pocas variedades de arroz tolerante a herbicida e híbridos se han introducido con éxito en el mercado. Ver, por ejemplo, patentes de E.U.A. Nos. 5,545,822; 5,736,629; 5,773,703; 7,773,704; 5,952,553; 6,274,796; 6,943,280; 7,019,196; 7,345,221; 7,399,905; 7,495,153; 7,754,947; y 7,786,360; solicitudes de patente internacionales publicadas WO 2010/059656, WO 2011/044315, y WO 2011/044334; y solicitudes de patente de E.U.A. publicadas US 2007/0061915, US 2010/0257623 y US 2009/0025108. Estas plantas de arroz tolerantes a herbicida son resistentes a o tolerantes de herbicidas que normalmente inhiben el crecimiento de plantas de arroz. De esta manera, los cultivadores de arroz ahora pueden controlar mala hierba que previamente fue difícil de controlar en campos de arroz, incluyendo "arroz rojo". "Arroz rojo" es un pariente lleno de hierba de arroz cultivado, y previamente ha sido difícil de controlar ya que en realidad pertenece al mismo género (Oryza), y a veces incluso la misma especie (O. Sativa) como arroz cultivado. Sólo recientemente, cuando el arroz tolerante a herbicida se hace disponible, no fue posible controlar el arroz rojo con herbicidas en campos donde arroz cultivado fue creciendo contemporáneamente. En la actualidad sólo un número limitado de cultivos de arroz tolerante a herbicida e híbridos comercialmente disponibles. Hay una necesidad continua por cultivos e híbridos
nuevos tolerantes a herbicida, es decir, plantas de arroz que no sólo expresen un fenotipo tolerante a herbicida deseado, sino que también posean otras características agronómicamente deseables. Los cultivos e híbridos tolerantes a herbicidas adicionales proveerán a los productores de arroz mayor flexibilidad en plantar y manejar cosechas. -
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
Se ha descubierto un cultivo de arroz de grano largo, novedoso, resistente a herbicida, de alto rendimiento, de madurez muy temprana, de estatura corta designado 'CL152' (designación experimental LA2051). En comparación con el cultivo más temprano 'CL151', la calidad del grano 'CL152' es superior, las plantas tienen mayor resistencia a espiga erecta y mayor resistencia a ráfaga. Aunque tiene casi la misma altura como 'CL151', la variedad novedosa tiene mayor resistencia a alojamiento. Hay menos gis en el grano molido de lo que a veces se observa para 'CL151'. La variedad nueva ha mostrado potencial de rendimiento ligeramente menor que 'CL151', pero de alguna manera ha mostrado consistentemente mayores rendimientos de arroz de cabeza después de la molienda. 'CL152' tiene reacción similar a la plaga de vaina como 'CL151', pero de alguna manera tiene mejor resistencia contra mancha de hoja café estrecha (Cercospora) , contra ráfaga, y contra enfermedades de plaga de panoja bacteriana. La variedad nueva es similar á 'CL151'
en días desde la aparición del semillero a madurez de la cosecha. 'CL152' tiene características de calidad y cocción de cereal de grano largo sureño típico.
Esta invención también pertenece a métodos para producir un híbrido o variedad nueva al cruzar la variedad de arroz 'CL152' con otra línea de arroz, una o más veces. De esta manera, cualquiera de dichos métodos que usan la variedad de arroz 'CL152' son aspectos de esta invención, incluyendo engendrado por endogamía, producción de híbrido, cruzas a poblaciones, y otros métodos de cultivo que involucran 'CL152'. Las plantas híbridas producidas usando la variedad de arroz 'CL152' como un padre también están dentro del alcance de esta invención. Opcionalmente, cualquier padre puede, a través de la manipulación de rutina de factores citoplásmicos u otros a través de técnicas conocidas en la técnica, se producido en una forma macha-estéril.
En otra modalidad, esta invención permite plantas convertidas de un solo gen de CL152'. El único gen transferido puede ser un alelo dominante o recesivo. Preferiblemente, el único gen transferido confiere un rasgo tal como resistencia a insectos; resistencia a una o más enfermedades bacterianas, fúngicas o virales; fertilidad o esterilidad masculina; calidad nutricíonal mejorada; calidades de procesamiento mejoradas; o una fuente adicional de resistencia a herbicida. El único gen puede ser un gen de arroz que ocurre de manera natural o un transgen introducido a través de técnicas de ingeniería genética conocidas en la técnica. El único gen también se
puede introducir a través de técnicas de hibridación cruzada tradicionales o técnicas de transformación genética conocidas en la técnica.
En otra modalidad, esta invención provee células regenerables para usarse en cultivo de tejido de planta de arroz 'CL152'. El cultivo de tejido puede permitir regeneración de plantas teniendo características fisiológicas y morfológicas de la planta de arroz 'CL152' y de plantas de regeneración teniendo sustancialmente el mismo genotipo como la planta de arroz 'CL152'. Las técnicas de cultivo de tejido para arroz son conocidas en la técnica. Las células regenerables en cultivo de tejido se pueden derivar de fuentes tales como embriones, protoplastos, células meristemáticas, callo, polen, hojas, anteras, puntas de raíz, flores, semillas, panojas o tallos. Además, la invención provee plantas de arroz generadas de dichos cultivos de tejido.
En otra modalidad, la presente invención provee un método para controlar hierba mala en la vecindad del arroz. El método comprende contactar el arroz con un herbicida, en donde dicho arroz pertenece a cualquiera de (a) variedad 'CL152' o (b) un híbrido, derivado, o progenie de 'CL152' que expresa las características de resistencia a herbicida de imidazolinona de 'CL152'.
En algunas modalidades, el herbicida es un herbicida de imidazolinona, un herbicida de sulfonilurea o una combinación de los mismos.
En una modalidad, el arroz es una planta de arroz y dicho contacto comprende aplicar el herbicida en la vecindad de la planta de arroz.
En otra modalidad, el herbicida es aplicado a hierba mala en la vecindad de la planta de arroz.
Todavía en otras modalidades, el arroz es una semilla de arroz y dicho contacto comprende aplicar el herbicida a la semilla de arroz.
•o
En algunas modalidades, la presente invención provee un método para tratar arroz. El método comprende contactar el arroz con una composición agronómicamente aceptable, en donde dicho arroz pertenece a cualquiera de (a) variedad 'CL152' o (b) un híbrido, derivado o progenie de 'CL152' que expresa las características de resistencia . a herbicida de imidazolinona de 'CL152'.
En una modalidad, la composición agronómicamente aceptable comprende por lo menos un ingrediente activo agronómicamente activo.
En otra modalidad, el ingrediente activo agronómicamente activo se selecciona a partir del grupo que consiste de fungicidas, insecticidas, antibióticos, compuestos potenciadores de tolerancia a estrés, promotores de crecimiento, herbicidas, moluscicidas , rodenticidas, repelentes a animales, y combinaciones de los mismos.
En algunas modalidades, las plantas de arroz de la presente invención incluyen plantas que comprenden un polipéptido de AHASL (subunidad grande de sintasa de acetohidroxiácido) teniendo,
relativo al polipéptido de AHASL de tipo silvestre, una asparagina (N) en la posición de aminoácido 653 (Arabidopsis thaliana numeración de AHASL) o posición equivalente, en donde dicha planta tiene tolerancia aumentada a un herbicida de imidazolinona en comparación con una planta de arroz de tipo silvestre.
La posición de aminoácido 653 de Arabidopsis thaliana AHASL corresponde a posición de aminoácido 627 de Oryza sativa AHASL. En el polipéptido de AHASL de arroz de tipo silvestre, esta posición es una Serina (S) en la región conservada Isoleucina-Prolina-Serina-Glicina-Glicina (IPSGG) (SEC ID NO:1).
En otras modalidades, las plantas de arroz de la presente invención incluyen plantas que comprenden un polipéptido de AHASL teniendo las secuencias de aminoácido como se establece en SEC ID NO: 2 o una variante de secuencia de AHASL maduro, de longitud completa del mismo, en donde el variante comprende (i) la asparagina (N) en la posición de aminoácido 653 (Arabidopsis thaliana AHASL numeración) o posición equivalente y (ii) una o más sustituciones conservadoras en uno o más residuos de aminoácido no esenciales.
En una modalidad, el variante de secuencia de AHASL maduro de longitud completa tiene, sobre la longitud completa del variante, por lo menos aproximadamente 95%, ilustrativamente, por lo menos aproximadamente 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5% y 99.9% identidad de secuencia a SEC ID NO: 2.
En algunas modalidades, la presente invención provee una línea de arroz de progenie o variedad obtenible de la línea de arroz 'CL152', una muestra representativa de semillas de dicha línea 'CL152' habiendo sido depositada bajo el número de acceso de ATCC No. PTA-11753, dicha línea 'CL152' habiendo sido producida por un proceso que comprende: - (a) proveer una semilla de arroz de la variedad de ciprés (USDA ARS GRIN NPGS no. de acceso Pl 561734); y
(b) mutar dicha semilla de arroz para producir una planta alterada que contiene en su genoma un gen de AHASL codificando un polipéptido de AHASL teniendo, relativo al polipéptido de AHASL de tipo silvestre del arroz de ciprés, una sustitución de asparagina (N) en la posición de aminoácido 653 (Arabidopsis thaliana AHASL numeración) o posición equivalente, y además cultivando la planta alterada,
en donde dicha planta alterada del paso (b) exhibe, al expresar dicho gen de AHASL, una tolerancia aumentada a un herbicida de imidazolinona en comparación con aquél de plantas de dicha variedad de ciprés, y plantas de dicha linea 'CL152' y plantas de dicha línea de progenie o variedad contienen dicho gen de AHASL y exhiben dicha tolerancia aumentada.
En otras modalidades, la presente invención provee una línea de arroz de progenie o variedad obtenida de la línea de arroz
'CL152', una muestra representativa de semillas de dicha línea 'CL152' habiendo sido depositada bajo ATCC no. de acceso PTA-11753, dicha línea 'CL152' habiendo sido producida por un proceso que comprende:
(a) proveer una semilla de arroz de la variedad de ciprés
(USDA ARS GRIN NPGS no. de acceso Pl 561734); y
(b) mutar dicha semilla de arroz para producir una planta alterada que contiene en su genoma un gen de AHASL codificando un polipéptido de AHASL teniendo, relativo al polipéptido de AHASL de tipo silvestre del arroz de ciprés, una sustitución de asparagina (N) en la posición de aminoácido 653 (Arab idopsis thaliana AHASL numeración) o posición equivalente, y además cultivando la planta alterada ,
en donde dicha planta alterada del paso (b) exhibe, al expresar dicho gen de~ AHASL, una tolerancia aumentada a un herbicida de i m idazolinona en comparación con aquél de plantas de dicha variedad de ciprés, y plantas de dicha línea 'CL152' y plantas de dicha línea de progenie o variedad contienen dicho gen de AHASL y exhiben dicha tolerancia aumentada.
En algunas modalidades, la presente invención provee una planta de arroz de progenie obtenible de la línea de arroz 'CL152', una muestra representativa de semillas de dicha línea 'CL152'
habiendo sido depositada bajo ATCC no. de acceso PTA-11753, dicha línea habiendo sido producida por un proceso que comprende:
(a) proveer una semilla de arroz de la variedad de ciprés (USDA ARS GRIN NPGS no. de acceso Pl 561734); y
(b) mutar dicha semilla de arroz para producir una planta alterada que contiene en su genoma un gen de AHASL codificando un polipéptido de AHASL teniendo, relativo al polipéptido de AHASL de tipo silvestre del arroz de ciprés, una sustitución de asparagina (N) en la posición de aminoácido 653 (Arabidopsis thaliana AHASL numeración) o posición equivalente, y además cultivando la planta alterada,
en donde dicha planta alterada del paso (b) exhibe, al expresár dicho gen de AHASL, una tolerancia aumentada a un herbicida de imidazolinona en comparación con aquél de plantas de dicha variedad de ciprés, y plantas de dicha línea 'CL152' y dicha planta de arroz de progenie comprenden dicho gen de AHASL y exhiben dicha tolerancia aumentada.
En algunas modalidades, la presente invención provee una planta de arroz de progenie obtenida de la línea de arroz 'CL152', una muestra representativa de semillas de dicha línea 'CL152' habiendo sido depositada bajo ATCC no. de acceso PTA-11753, dicha línea 'CL152' habiendo sido producida por un proceso que comprende:
(a) proveer una semilla de arroz de la variedad de ciprés (USDA ARS GRIN NPGS no. de acceso Pl 561734); y
(b) mutar dicha semilla de arroz para producir una planta alterada que contiene en su genoma un gen de AHASL codificando un polipéptido de AHASL teniendo, relativo al polipéptido de AHASL de tipo silvestre del arroz de ciprés, una sustitución de asparagina (N) en la posición de aminoácido 653 {Arabidopsis thaliana AHASL numeración) o posición equivalente, y además cultivando la planta alterada,
en donde dicha planta alterada del paso (b) exhibe, al expresar dicho gen de AHASL, una tolerancia aumentada a un herbicida de imidazolinona en comparación con aquél de plantas de dicha variedad de ciprés, y plantas de dicha linea 'CL152' y dicha planta de arroz de progenie comprenden dicho gen de AHASL y exhiben dicha tolerancia aumentada.
En otra modalidad, la presente invención provee una planta de arroz de progenie de la linea de arroz 'CL152', una muestra representativa de semillas de dicha línea 'CL1S2" habiendo sido depositada bajo ATCC no. de acceso PTA-11753, la planta de arroz de progenie siendo obtenible por un proceso que comprende:
(a) proveer una planta de linea 'CL152', o tejido, semilla o célula de la misma; y
(b) mutar o transformar dicha planta, tejido, semilla o célula del paso (a) para producir una planta alterada que contiene en su genoma un gen de AHASL codificando un polipéptido de AHASL teniendo, relativo al polipéptido de AHASL de tipo silvestre del arroz de ciprés, una sustitución de asparagina (N) en la posición de aminoácido . 653 (Arabidopsis thaliana AHASL numeración) o posición equivalente, y opcionalmente además cultivando la planta alterada,
en donde dicha planta alterada del paso (b) exhibe, al expresar dicho gen de AHASL, una toíerancia aumentada a un herbicida de imidazolinona en comparación con aquél de la planta de arroz de tipo silvestre.
En otra modalidad, la presente invención provee una planta de arroz de progenie de la línea de arroz 'CL152', una muestra representativa de semillas de dicha línea 'CL152' habiendo sido depositada bajo ATCC no. de acceso PTA-11753, la planta de arroz de progenie siendo obtenida por un proceso que comprende:
(a) proveer una planta de la línea 'CL152', o tejido, semilla o célula de la misma; y
(b) mutar o transformar dicha planta, tejido, semilla o célula del paso (a) para producir una planta alterada que contiene en su genoma un gen de AHASL codificando un polipéptido de AHASL teniendo, relativo al polipéptido de AHASL de
tipo silvestre del arroz de ciprés, una sustitución de asparagina (N) en la posición de aminoácido 653 (Arabidopsis thaliana AHASL numeración) o posición equivalente, y opcionalmente además cultivando la planta alterada,
en donde dicha planta alterada del paso (b) exhibe, al expresar dicho gen de AHASL, una tolerancia aumentada a un herbicida de imidazolinona en comparación con aquél de la planta de arroz de tipo silvestre.
En otras modalidades, la presente invención provee un método para controlar hierba mala en un campo, dicho método que comprende:
crecer, en un campo, una planta de acuerdo con la presente invención; y
contactar dicha planta y hierba mala en el campo con una cantidad efectiva de un herbicida inhibidor de AHAS al cual la planta es tolerante, así controlando la hierba mala.
En algunas modalidades, se proveen plantas de arroz mejoradas y líneas de arroz teniendo tolerancia a por lo menos un herbicida inhibidor de AHAS. En algunas modalidades, el herbicida inhibidor de AHAS es un herbicida de imidazolinona. En algunas modalidades, el herbicida de imidazolinona es imazetapir, imazaquin, imazapir, imazamox o combinaciones de los mismos. Varios ejemplos
de herbicidas de imidazolinona comercialmente disponibles son, sin limitación, PURSUIR® (imazetapir) , SCEPTER® (imazaquin), ARSENAL® (imazapir) y Raptor™ Herbicide (imazamox). En algunas modalidades, el herbicida inhibidor de AHAS es un herbicida de sulfonilurea. En una modalidad, el herbicida de sulfonilurea es nicosulfuron.
Las plantas de arroz y líneas de arroz de la presente invención también proveen sistemas mejorados y métodos para controlar hierba mala usando por lo menos un herbicida inhibidor de AHAS. En algunas modalidades, el herbicida inhibidor de AHAS es un herbicida de imidazolinona. En algunas modalidades, e\ herbicida de imidazolinona es imazetapir, imazaquin, imazapir, imazamox o combinaciones de los mismos. En algunas modalidades, el herbicida inhibidor de AHAS es un herbicida de sulfonilurea. En una modalidad, el herbicida de sulfonilurea es nicosulfuron.
En algunas modalidades, el herbicida inhibidor de AHAS es un herbicida de imidazolinona, un herbicida de sulfonilurea o combinaciones de los mismos.
DEFINICIONES
Las siguientes definiciones aplican a lo largo de la especificación y reivindicaciones, a menos que el contexto claramente indique lo contrario:
"Días a 50% de encabezamiento". Número promedio de días a partir de sembrar al día cuando 50% de todas las panojas son ejercidas por lo menos parcialmente a través de la vaina de la hoja. Una medida de madurez.
"Rendimiento de grano". El rendimiento de grano se mide en libras por acre, a 12.0% humedad. El rendimiento de grano depende de un número de factores, incluyendo el número de panojas por área unitaria, el número de flósculos fértiles por panoja, y peso de grano por flósculo.
"Porcentaje de alojamiento". El alojamiento es una calificación subjetivamente medida, y es el porcentaje de tallos de planta que se recargan o caen por completo al suelo antes de cosechar.
"Longitud de grano (L)". La longitud de un grano de arroz, o longitud promedio, medida en milímetros.
"Ancho de grano (W)". El ancho de un grano de arroz, o ancho
- promedio, medido en milímetros.
"Relación de longitud/ancho (L/W)". Esta relación se determina al dividir la longitud promedio (L) por el ancho promedio (W).
"Peso de 1000 granos". El peso de 1000 granos de arroz, medido en gramos.
"Humedad de Cosecha". El porcentaje de humedad en el grano cuando es cosechado.
"Altura de Planta". La altura de la planta en centímetros, medida desde la superficie del suelo a la punta de la panoja extendida al cosechar.
"Porcentaje Aparente de Amilosa". El porcentaje del almidón de endosperma de arroz molido que es amilosa. El porcentaje aparente de amilosa es una característica importante del grano que afecta el comportamiento de cocción. Los granos largos estándar contienen 20 a 23 por ciento de amilosa. Los granos largos de tipo Rexmont contienen 24 a 25 por ciento de amilosa. Los granos cortos y medianos contienen 13 a 19 por ciento de amilosa. El arroz ceroso contiene cero por ciento de amilosa. Los valores de amilosa, como la mayoría de las características de arroz, dependen del medio ambiente. "Aparente" se refiere al procedimiento para determinar amilosa, que también puede involucrar medir algunas moléculas de amilopectina de cadena larga que unen a algunas de las moléculas de amilosa. Estas moléculas de amilopectina éh realidad actúan similar a amilosa en determinar las características de cocción duras o suaves.
"Valor de Extensión Álcali". Un índice que mide el grado de desintegración del grano de arroz molido cuando en contacto con solución álcali diluida. Es un indicador de temperatura de gelatinización. Los granos largo estándar tienen un valor de extensión álcali de 3 a 5 (temperatura de gelatinización intermedia).
"Viscosidad Pico". La viscosidad máxima lograda durante el calentamiento cuando un protocolo específico de instrumento estandarizado se aplica a una suspensión de harina de arroz-agua definida.
"Viscosidad de Depresión". La viscosidad mínima después del pico, normalmente ocurriendo cuando la muestra se comienza a enfriar.
"Viscosidad Final". Viscosidad al final de la prueba o pasta fría. "Descomposición". La viscosidad pico menos la viscosidad de pasta caliente.
"Retranqueo". El retranqueo 1 es la viscosidad final menos la viscosidad de depresión. El retranqueo 2 es la viscosidad final menos la viscosidad pico.
"Viscosidad de RVA". La viscosidad, como se mide por un analizador Visco rápido, un instrumento de laboratorio ampliamente usado para examinar la viscosidad de pasta o habilidad de espesamiento de arroz molido durante el proceso de cocción.
"Viscosidad de pasta caliente". La medida de viscosidad de suspensión de harina de arroz/agua después de calentarse a 95°C. Los valores menores indican tipos de cocción de arroz más suaves y más pegajosos.
"Viscosidad de pasta fría". La medida de viscosidad de suspensión de harina de arroz/agua después de calentarse a 95°C y uniformemente enfriada a 50°C. Los valores de menos de 200 indican tipos de cocción de arroz más suaves.
"Alelo". Un alelo es cualquiera de una o más formas alternas del mismo gen. En una célula u organismo diploide tal como arroz, los dos alelos de un gen dado ocupan lugares correspondientes en un par dé cromosomas homólogos.
"Hibridación cruzada". La hibridación cruzada es un proceso en donde un cultivador cruza repetidamente progenie de híbrido de regreso a uno de los padres, por ejemplo, cruzando un híbrido F, de primera generación con uno de los genotipos parientes del híbrido F,, y después cruzando un híbrido F2 de segunda generación con el mismo genotipo pariente, y así sucesivamente.
"Esencialmente todas las características fisiológicas y morfológicas". Una planta teniendo "esencialmente todas las características fisiológicas y morfológicas" de una planta especificada se refiere a una planta que tiene las mismas características fisiológicas y morfológicas, excepto para aquellas características que se derivan de un gen convertido particular.
"Lugares de rasgo cuantitativo (QTL)". Los lugares de rasgo cuantitativo (QTL) se refieren a lugares genéticos que a cierto grado controlan rasgos numéricamente medibles, en general rasgos que son continuamente distribuidos.
"Regeneración". La regeneración se refiere al desarrollo de una planta de cultivo de tejido.
"Único gen convertido (conversión)". Único · gen convertido (conversión) incluye plantas desarrolladas por hibridación cruzada, en donde se recuperan esencialmente todas las características morfológicas y fisiológicas deseadas de una variedad parental, al mismo tiempo también reteniendo un único gen que es transferido en las plantas al cruzar e hibridar cruzando. El término también se
puede referir a la introducción de un único gen a través de técnicas de ingeniería genética conocidas en la técnica.
MODO DE LLEVAR A CABO LA INVENCIÓN
'CL152' es una -variedad de arroz de grano largo, estatura corta, que contiene, por descendencia, el mismo alelo para resistencia a herbicida como aquél encontrado en el cultivo CL161. El pedigrí para esta línea es TACAURI/3/C YPRESS//L-202/TEBONNET/4/CL161. La cruza de la cual esta línea se desarrolló se hizo en la estación LSU Rice Research Station en Crowley, Louisiana, y se origina como un montón F3 de una sola hilera de progenie (05-69043). Tacauri es una variedad de grano largo, de maduración temprana, desarrollada en Uruguay. El ciprés es una variedad de grano largo, de maduración temprana, con excelente calidad de grano y estabilidad de molienda que se desarrolló en la estación Louisiana Rice Research Station. L-202 es una variedad de grano largo desarrollada en California. Tebonnet es una variedad de grano largo, muy temprana, de estatura alta desarrollada · en Arkansas. CL161 es una variedad tolerante a herbicida derivada en la estación Louisiana Rice Research Station por cultivo de mutación de la variedad original de ciprés. Ver patentes de E.U.A. Nos. 6,943,280 y 7,019,196, cada una de las cuales se incorpora a la presente por referencia en su totalidad. 'CL152' es altamente resistente a herbicidas de imidazolinona, incluyendo, pero sin
limitación a, imazetapir e imazamox. Las características de resistencia a herbicida de 'CL152' son esencialmente idénticas a las características de resistencia a herbicida de la variedad 'CL161' (ATCC depósito PTA-904), que también es conocida como línea PWC16 como se describe por las patentes de E.U.A. Nos. 6,943,280 y 7,019,196. Además, la patente de E.U.A. No. 6,943,280 describe que en la secuencia de ADN de enzima de AHAS de línea PWC16, el codón correspondiente al aminoácido 627 es AAT, que codifica asparagina, contra AGT (serina) para el tipo silvestre, y que esta sustitución de serina a asparagina se cree es responsable por la resistencia a herbicida exhibida por la enzima de AHAS de la línea PWC16. 'CL152' y sus híbridos y variedades derivadas se adaptan para crecer a lo largo de las áreas en crecimiento de arroz de Louísiana, Texas, Arkansas, Mississippi y Missouri; y también serán bien adecuados para crecer en muchas otras áreas productoras de arroz en todo el mundo.
Después de hacer la cruza inicial, la línea fue cosechada y seleccionada a través de generaciones tempranas para superioridad fenotípica para características tales como arquitectura de planta corta, forma y uniformidad de grano, vigor de semillero, número de hijuelos, y tamaño de grano. En generaciones posteriores (aumento de semilla), la linea se seleccionó para uniformidad y pureza tanto dentro como entre hileras de panoja. Los variantes eliminados de campos de aumento de semilla de 'CL152' fueron primariamente plantas más altas o posteriores. Otros variantes incluyeron cualquier
combinación de los siguientes: pubescencia de hoja, grano más temprano, más corto, mediano, grano intermedio, cáscara dorada, y hoja a color más claro. La incidencia global de variantes es menos de 1 por 5,000 plantas. El arroz de semilla base finalmente creció comenzando con la generación F7. Semillas de las generaciones F5, F6 y F7 entraron en un programa de prueba de linea experimental, y también fueron probadas en varias ubicaciones en áreas productoras de arroz de Louisiana. 'CL152' ha sido observado como estable por al menos tres generaciones.
'CL152' es moderadamente resistente a alojamiento. Promedió
39 pulgadas en altura durante tres años de prueba, lo mismo como CL151 y CL111. CL152' está madurando después que CL151 o CL111, promediando 83 días a 50% de encabezamiento, en comparación con 81 y 77 días para CL151 y CL111, respectivamente. Las hojas, lema y palea de 'CL152' son lampiñas. La espigueta es de color de paja. El apícola es morado claro en la cabeza, y el color desvanece conforme el grano alcanza madurez. El grano es no aromático 'Cl 15?' es susceptible a plaga de vaina y es moderadamente susceptible a ráfaga y a trastorno de espira erecta.
Durante la prueba en varios ensayos, en múltiples ubicaciones de Louisiana durante un periodo de tres años, el rendimiento de grano promedio global fue 7159 Ib/A para 'CL152' en comparación con 7307 Ib/A para 'CL111' y 7674 Ib/A para 'CL151'.
INFORMACIÓN DE DESCRIPCIÓN DE VARIEDAD
Se observó que el cultivo de arroz 'CL152' posee las siguientes características morfológicas y otras, con base en promedios de pruebas realizadas en múltiples ubicaciones a lo largo del estado de Louisiana durante tres temporadas de crecimiento; datos para las variedades 'CL111' y 'CL151' se muestran para comparación:
TALLO:
Ángulo (grados desde perpendicular después de florecer): Erecto (menos de 30°)
Longitud: 99 cm (igual como CL151; 2.5 cm más largo que CL161)
Color de ¡nternodo (después de florecer): verde
Fuerza (resistencia a alojamiento): moderadamente fuerte
HOJA BANDERA:
Long itud : 36 cm
Ancho: 14 mm
Pubescencia: lampiña
Ángulo de hoja (después de encabezamiento): intermedio
Color de brizna (en encabezamiento): verde oscuro
Color de vaina de hoja basal (en encabezamiento): verde
LÍGULA:
Longitud: 2 cm
Color (estado vegetativo tardío): blanco
Forma: hendidura
Color de collar (estado vegetativo tardío): verde pálido
Color de aurícula (estado vegetativo tardío): verde pálido
PANOJA:
Longitud: 23 cm
Tipo: Intermedio
Ramificación secundaria: pesada
Saliente (cerca de madurez): >90%
Destrucción: (<5%)
Habilidad de trillar: fácil
GRANO (espina):
Aristas . (después de encabezamiento completo): cortas y parcialmente aristadas
Color de apícola (en madurez): morado
Color de apícola (después de encabezamiento completo): morado
Color de estigma: blanco
Color de lema y palea (en madurez): paja
Pubescencia de lema y palea: lampiño
: Esterilidad de espina (en madurez): (<10% - altamente fértil)
GRANO (semilla):
Color de cubierta de semilla (salvado): marrón claro
Tipo de endosperma: no glutinoso (no ceroso)
Translucidez de endosperma: transparente
Calidad de entizar de endosperma: (pequeña, menos de 10% de muestra)
Aroma: sin aroma
Clase de forma (relación de longitud/ancho):
Arrozal - largo (3.4:1 o más)
Marrón - largo (3.1:1 o más)
Molido - largo (3.0 : 1 o más)
Forma de Longitud Ancho Grosor Relación 1000 Granos grano: (mm) (mm) (mm) L/W (gramos)
Arrozal 8.61 2.30 3.73 27.01
Marrón 6.77 2.07 3.27 22.23
Molido 6.50 .96 3.32 20.12
Calidad de molienda (% cáscaras) : 20
Rendimiento de molienda (% grano blanco (cabeza) arroz a arroz áspero): 61-69
Proteína (NIR): 7.7%
Amilosa: 21.7%
Valor de extensión; álcali: 4.1 (1.7% solución de KOH)
Tipo de temperatura de gelatinización: intermedio
Viscosidad de pasta amiiográf ica
Pico 445
Pasta caliente 320
Pasta fría 675
Descomposición/retranqueo 155 / 273
RESISTENCIA A TEMPERATURA BAJA:
Germinación y vigor de semillero: mediana
Florecimiento (fertilidad de espina): alta
VIGOR DE SEMILLERO NO RELACIONADO" CON TEMPERATURA BAJA:
Vigor: Alto
RESISTENCIA A INSECTO: Susceptible a gorgojo de agua de arroz (Lissorhoptrus oryzophilus) y a broma de tallo de arroz
(Chilo plejadelluus):
La variedad es resistente a herbicidas de imidazolinona. El perfil de resistencia a herbicida es esencialmente el mismo como aquél de 'CL161', siendo derivado de ancestro común. La tolerancia a herbicida permite que 'CL152' y sus híbridos, y variedades derivadas a usarse con tecnología y herbicidas de arroz Clearfield™, incluyendo, entre otros, imazetapir e imazamox, para el control selectivo de hierba mala, incluyendo arroz rojo. Ver, por lo general, patente de E.U.A. No. 6,943,280.
Características de tolerancia y susceptibilidad de herbicida:
La variedad es tolerante a algunos herbicidas, y susceptible a algunos herbicidas, que normalmente inhiben el crecimiento de plantas de arroz. Entre otras, las características de tolerancia y susceptibilidad de herbicida de 'CL152' incluyen o se espera que incluyan lo siguiente. Estas características en algunos casos se basan en observaciones reales a la fecha, y en otros casos reflejan suposiciones basadas en ancestro común con 'CL161':
'CL152' expresa una sintasa de acetohidroxiácido muíante cuya actividad enzimática es directamente resistente a niveles normalmente inhibidores de una i m idazolinona herbicidamente efectiva;
'CL152' es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de imidazolinona, a niveles de los herbicidas de imidazolinona que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: imazetapir, imazapic, imazaquin, imazamox e imazapir;
'CL152' es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: nicosulfuron, metilo de metsulfuron, metilo de tif ensu If uron y metilo de tribenuron;
'CL152' es sensible a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: metilo de sulfometuron, etilo de clorimuron y rimsulfuron.
Esta invención también está dirigida a métodos para producir una planta de arroz al cruzar una primera planta de arroz pariente con una segunda planta de arroz pariente, en donde la primera o segunda planta de arroz es una planta de arroz de la linea 'CL152'. Además, tanto la primera como la segunda planta de arroz pariente puede ser el cultivo 'CL152', aunque se prefiere que uno de los padres . sea diferente. Los métodos que usan el cultivo 'CL152' también son parte de esta invención, incluyendo cruza, autopolinización, hibridación cruzada, cultivo de híbrido, cruza a poblaciones, los otros métodos de cultivo discutidos en esta-especificación, y otros métodos de cultivo conocidos a aquellos expertos en la técnica. Cualquier planta producida usando el cultivo 'CL152' como un padre o ancestro están dentro del alcance de esta invención. Los otros padres u otras líneas usados en dichos programas de cultivo pueden ser cualquiera del número amplio de variedades de arroz, cultivos, poblaciones, líneas experimentales y otras fuentes de germoplasma de arroz conocidas en la técnica.
Por ejemplo, esta invención incluye métodos para producir una planta de arroz híbrido de primera generación al cruzar una primera
planta de arroz pariente con una segunda planta de arroz pariente, en donde ya primera o segunda planta de arroz pariente es 'CL152'. Además, esta invención también está dirigida a métodos para producir una linea de arroz híbrido derivada de 'CL152' al cruzar 'CL152' con una segunda planta de arroz, y creciendo la semilla de progenie Los pasos .de cruzar y crecer se pueden repetir cualquier número de veces. Los métodos de cultivo usando la línea de arroz 'CL152' son considerados parte de esta invención, no sólo hibridación cruzada y producción de híbrido, sino también autopolinización, cruzas a poblaciones, y otros métodos de cultivo conocidos en la técnica.
Opcionalmente, cualquiera de los padres en dicha cruza, 'CL152' o el otro padre, se puede producir en forma estéril masculina, usando técnicas conocidas en la técnica.
En una modalidad, una planta de arroz producida usando el cultivo 'CL152' como un padre o ancestro exhibe tolerancia a aplicaciones de una o más clases de herbicidas. Las clases de herbicidas incluyen, pero no se limitan a, inhibidores de sintasa de acetohidroxiácido (AHAS); herbicidas blanqueadores tales como inhibidores de hidroxifenilpiruvato disoxigenasa (HPPD) o inhibidores de fitoeno desaturasa (PDS); inhibidores de shikimato 3-fosfato sintasa de enolpiruvilo (EPSPS) tal como glifosato; inhibidores de glutamina sintetasa (GS) tal como glufosinato; herbicidas auxínicos, por ejemplo, dicamba; inhibidores de biosíntesis de lípido tales como inhibidores de ACCasa; u herbicidas de oxinilo (es decir, bromoxinilo
o ¡oxinilo); inhibidores de protoporfirinogen-IX oxidasa (PPO) diferentes de saflufenacil ("otros inhibidores de PPO") (por ejemplo, acifluorfen, butafenacil, carfentrazona, flufenpir-etilo, fomesafen, flumioxazin, lactofen, oxadiargilo, oxadíazon, oxifluorfen, su Ifentrazona) ; inhibidores de biosíntesis de lípido tales como inhibidores de acetilo CoA carboxilasa (ACCasa); herbicidas de oxinilo (es decir, bromoxinilo o ioxinilo); inhibidor(es) de ACCasa; saflufenacil(os); inhibidores de p-hidroxifenilpiruvato dioxigenasa (4-HPPD); amida(s), por ejemplo, propanil; y similares. Los herbicidas inhibidores de AHAS incluyen, por ejemplo, herbicidas de imidazolinona, uno o más herbicidas de sulfonilurea (SU) seleccionados a partir del grupo que consiste de a m idosu If u ro n , flupisulfuron, fo ra msulfuron , imazosulfuron , yodosulfuron, mesosulfuron, nicosulfuron, tifensulfuron y tribenuron, sales y ésteres agronómicamente aceptables de los mismos y combinaciones de los mismos. Los herbicidas inhibidores de ACCasa incluyen, por ejemplo, "dims" (por ejemplo, cicloxidim, setoxidim, cletodim o tepraloxidim), "fops" (por ejemplo, clodinafop, diclofop, fluazifop, haloxifop o quizalofop) y "dens" (tal como pinoxaden).
Por ejemplo, en algunas modalidades las plantas de arroz que se producen usando cultivo 'CL152' como un padre o ancestro puede ser tolerante a inhibidores de ACCasa, tales como "dims" (por ejemplo, cicloxidim, setoxidim, cletodim o tepraloxidim), "fops'' (por ejemplo, clodinafop, diclofop, fluazifop, haloxifop o quizalofop), y "dens" (tal como pinoxaden); a herbicidas auxinicos, tal como
dicamba; a inhibidores de EPSPS, tal como glifosato; a otros inhibidores de PPO; y a inhibidores de GS, tal como glufosinato.
Además de estas clases de inhibidores, las plantas de arroz que se producen usando cultivo 'CL152' como un padre o ancestro también pueden ser tolerantes a herbicidas teniendo otros modos de acción, por ejemplo, inhibidores de pigmento de clorofila/carotenoide, interruptores de membrana celular, inhibidores de fotosíntesis, inhibidores de división celular, inhibidores de raíz, inhibidores de brote y combinaciones de los mismos.
Dichos rasgos de tolerancia se pueden expresar, por ejemplo, como proteínas de subunidad grande de acetohidroxiácido sintasa mutante (AHASL), proteínas de ACCasa mutantes, proteínas de EPSPS mutantes, o proteínas de glutamina sintetasa mutantes; o como una ariloxialcanoato dioxigenasa mutante nativa, engendrada por endogamia o transgénica (AAD o DHT), haloarilnitrilasa (BXN), deshalogenasa de ácido 2,2-dicloropropiónico (DEH), glifosato-N-acetiltransferasa (GAT), glifosato decarboxilasa (GDC), glifosato oxidoreductasa (GOX), glutationa-S-transferasa (GST), fosfinotricina acetiltransferasa (PAT o bar), o proteína de citocroma P450 (CYP450) teniendo actividad degradante de herbicida.
Las plantas de arroz también se pueden "amontonar" con otros rasgos incluyendo, pero sin limitación a, rasgos pesticidas tal como Bt Cry y otras proteínas teniendo actividad pesticida hacia coleopteran, lepidopteran, nematodo, u otras pestes; los rasgos nutricionales o nutracéuticos tales como contenido de aceite
modificado o rasgos de perfil de aceite, rasgos de concentración de proteina alta o aminoácido alto y otros tipos de rasgo conocidos en la técnica.
Además, en otra modalidad, se generan plantas de arroz, por ejemplo, por él uso de técnicas de ADN recombinante, cultivo o de lo contrario por selección de rasgos deseados, que son capaces de sintetizar una o más proteínas para mejorar su productividad, contenido de aceite, tolerancia a sequía, salinidad u otros factores ambientales limitando el crecimiento, o tolerancia a pestes artrópodas, y patógenos fúngicos, bacterianos o virales de plantas de arroz.
Además, en otras modalidades, se generan plantas de arroz, por ejemplo, por el uso de técnicas de ADN recombinante, cultivo o de lo contrario por selección de rasgos deseados para contener una cantidad modificada de una o más sustancias o contener sustancias nuevas, por ejemplo, para mejorar nutrición de humanos o animales, por ejemplo, ácido grasos de omega 3 de cadena larga promotores de salud o ácidos grasos de omega 9 insaturados. (Cf. Nexera® cañóla, Dow Agro Sciences, Canadá).
Además, en algunas modalidades, se generan plantas de arroz, por ejemplo, por el uso de técnicas de ADN recombinante, cultivo o de lo contrario por selección de rasgos deseados para contener cantidades aumentadas de vitaminas, minerales o perfiles mejorados de compuestos nutracéuticos.
En una modalidad, se producen plantas de arroz usando cultivo 'CL152' como un padre o ancestro, de modo que las plantas de arroz nuevas, relativas a una planta de arroz de tipo silvestre, comprenden una cantidad aumentada de, o un perfil mejorado de, un compuesto seleccionado a partir del grupo que consiste de: glucosinolatos (por ejemplo, glucorafanina (4-metilsulfinilbutil-glucosinolato), sulforafano, 3-indolilmetil-glucosinolato (glucobrassicina), o 1-metoxi-3-indolilmetil-glucosinolato (neoglucobrassicina)); fe noli eos (por ejemplo, flavonoides (por ejemplo, quercetina, kaempferol), derivados de hidroxicinamoilo (por ejemplo, 1,2,2'-trisinapoilgentiobiosa, 1,2-diferuloilgentiobiosa, 1 ,2'-disinapoil-2-feruloilgentiobiosa, o 3-O-caffeoil-quinic (ácido neoclorogénico) ; y vitaminas y minerales (por ejemplo, vitamina C, vitamina E, caroteno, ácido fólico, niacina, riboflavina, tiamina, calcio, hierro, magnesio, potasio, setenio y zinc).
En otra modalidad, se producen plantas de arroz usando el cultivo 'CL152' como un padre o ancestro de modo que las plantas de arroz nuevas, relativas a una planta de arroz de tipo silvestre, comprenden una cantidad aumentada de, o un perfil mejorado de, un compuesto seleccionado a partir del grupo que consiste de: progoitrina; isotiocianatos; índoles (productos de hidrólisis de glucosinolato); glutationa; carotenoides tales como beta-caroteno, licopeno y los carotenoides de xantofilo tales como luteína y zeaxantina; fenólicos que comprenden los flavonoides tales como los flavonoles (por ejemplo, quercetina, rutina), las flavinas/taninas
(tales como las procianidinas que comprenden coumarina, proantocianidinas, catequinas y antocianinas); flavonas; fitoestrógenos tales como coumestans; lignans; resveratrol; isoflavonas, por ejemplo, genisteína, daidzeína y gliciteína; lactonas de ácido resorcíclico; compuestos de organosulfuro; fitoesteroles; terpenoides tales como carnosol, ácido . rosmarínico, glicirrizina y saponinas; clorofila; clorfilina, azúcares, antocianinas y vainilla.
Herbicidas
Las composiciones herbicidas que se pueden usar en conjunto con la invención incluyen ingredientes herbicidamente activos (A.l.) y sus sales y ésteres agronómicamente aceptables.
Las composiciones herbicidas se pueden aplicar en cualquier formato agronómicamente aceptable. Por ejemplo, se pueden formular como soluciones acuosas listas para rociar, polvos o suspensiones; como soluciones acuosas, oleosas - u otras concentradas o altamente concentradas o dispersiones; como emulsiones, dispersiones de aceite, pastas, polvos, gránulos u otros formatos que se pueden trasmitir. Las composiciones herbicidas se pueden aplicar por cualquier método conocido en la técnica, incluyendo, por ejemplo, aspersión, atomización, espolvoreo, extensión, riego, tratamiento de semilla, o co-plantación en mezcla con la semilla. Las formulaciones dependen del propósito deseado; en cualquier caso, deben asegurar una distribución fina de los A.l.s. Se puede seleccionar una composición herbicida de acuerdo con las
tolerancias de una planta particular, y la planta se puede seleccionar de entre aquellos que tienen rasgos de tolerancia amontonados.
En algunas modalidades, en donde el A.l. incluye un inhibidor de AHAS, el inhibidor de AHAS se puede seleccionar a partir de: (1) las imidazolinonas, por ejemplo, imazamox, imazetapir, imazapir, imazapic, imazaquin e imazametabenz; preferiblemente imazamox, imazetapir, imazapir o imazapic; (2) las sulfonilureas, por ejemplo, amidosulfuron, azimsulfuron, bensulfuron, cinosulf uron , etoxisulfuron, flupirsulfuron, foramsulfuron, imazosulfuron , yodosulf uron, mesosulfuron, metsulfuron, nicosulfuron, tifensulfuron y tribenuron; (3) los pirimidiniloxi[tio]benzoatos, por ejemplo, incluyendo los pirimidiniloxibenzoatos (por ejemplo, bispiribac, piriminobac y piribenzoxim) y los pirimidiniltiobenzoatos (por ejemplo, piritiobac y piriftalid); y (4) las sulfonamidas, por ejemplo, incluyendo las sulfonilaminocarbon iltriazolinonas (por ejemplo, flucarbazona y propoxicarbazona) y las triazolopirimidinas (por ejemplo, cloransulam, diclosulam, florasulam, flumetsulam, metosulam y penoxsulam). Las sales y esteres agronómicamente aceptables de los anteriores también se incluyen, como son combinaciones de los mismos.
Los A.l.s opcionales de otros tipos incluyen, pero no se limitan a, fungicidas agronómicamente aceptables tales como estrobilurinas, por ejemplo, piraclostrobina, solas o en combinación con, por ejemplo, boscalid, epiconazol, metaconazol, tebuconazol, kresoxim-metilo, y similares; insecticidas tales como nematicidas,
lepidoptericidas, coleoptericidas; moluscicidas), y otros conocidos en la técnica (por ejemplo, malatíon, piretrinas/piretrum, carbarilo, espinosad, permetrina, bifentrina y esfenvalerato).
Ejemplos de herbicidas que son inhibidores de ACCasa incluyen, pero no se limitan a, herbicidas de ciciohexanodiona (DIMs, también referidos como: oxima de ciclohexeno, oxima de ciciohexanodiona; y CHD), herbicidas de aríloxifenoxi propionato (también referidos como propanoato de aríloxifenoxi; ariloxifenoxi-alcanoato; oxifenoxi; APP; AOPP; APA; APPA; FOP), y herbicidas de fenilpirazol (también conocidos como DENs; y a veces referidos bajo la clase más general de fenilpirazoles tal como pinoxaden (por ejemplo, herbicidas vendidos bajo los nombres comerciales Axial y Traxos)). En algunos métodos de controlar hierba mala o plantas tolerantes a herbicida en crecimiento, por lo menos un herbicida se selecciona a partir del grupo que consiste de setoxidim, cicloxidim, tepraloxidim , haloxifop, haloxifop-P o un derivado de uno de estos herbicidas. La tabla 1 enlista ejemplos de herbicidas que interfieren con actividad de ACCasa.
Tabla 1: Ejemplos de inhibidores de ACCasa.
Ejemplos de herbicidas que son herbicidas auxínicos incluyen pero no se limitan a, aquellos mostrados en la tabla 2.
Tabla 2: Ejemplos de herbicidas auxínicos.
En una modalidad, un saflufenacil A l. es, por ejemplo: 2-cloro-5-[3,6-dihidro-3-metil-2,6-dioxo-4-(trifluorometil)-1 (2/-/)-pirimidinil]-4-fluoro-/V-[ [metil(1 -metiletil) amino] sulfonil]benzamida (CAS: N'-{2-cloro-4-fluoro-5-[1,2,3,6-tetrahidro-3-metil-2,6-dioxo-4-(tr¡fluoro-metil)pirimidin-1 -il] benzoil}-A/-isopropil-A/-metilsulfamida; No. de registro: 372137-35-4); BAS H800). Como se usa en la presente, un compuesto nombrado, (por ejemplo, "saflufenacil") incluye el compuesto (por ejemplo, saflufenacil) asi como sus sales y ésteres, a menos que expresamente se mencione lo contrario.
Las composiciones herbicidas también pueden comprender ingredientes auxiliares que son de costumbre para la formulación de agentes de protección de cosecha.
Ejemplos de auxiliares de costumbre para la formulación de agentes protectores de cosecha incluyen auxiliares inertes, portadores sólidos, agentes tensioactivos (tales como dispersantes, coloides protectores, emulsores, agentes humectantes, y pegamentos), espesantes orgánicos e inorgánicos, penetradores (tales como agentes tensioactivos de organosilicona potenciadores de penetración o quelatos de sulfato ácido, por ejemplo, CT-301™ disponibles de Cheltec, Inc.), seguros, bactericidas, agentes anticongelación, antiespumas, colorantes y adhesivos. Se pueden preparar formulaciones de las composiciones herbicidas útiles en la presente de acuerdo con cualquier método para ser útil para ese propósito en la técnica.
Ejemplos de espesantes (es decir, compuestos que imparten propiedades de flujo modificadas, es decir, alta viscosidad en el estado de reposo y baja viscosidad en movimiento) son polisacáridos-, tal como goma de xantano ( elzan® de Kelco), Rhodopol® 23 (Rhone Poulenc) o Veegum® (de R.T. Vanderbilt), y también minerales de hoja orgánicos e inorgánicos, tal como Attaclay® (de Engelhard).
Ejemplos de antiespumas son emulsiones de silicona (por ejemplo, Silikon® SRE, Wacker o Rhodorsil® de Rhodia), alcoholes de cadena larga, ácidos grasos, sales de ácidos grasos, compuestos de organoflúor, y mezclas de los mismos.
Opcionalmente se pueden agregar bactericidas para estabilizar las formulaciones herbicidas acuosas. Ejemplos de bactericidas son
bactericidas basados en diclorofeno y alcohol bencílico hemiformal (Proxel® de ICI o Acticide® RS de Thor Chemie y Kathon® MK de Rohm & Haas), y también derivados de isotiazolinona, tales como alquilisotiazolinonas y bencisotiazolinonas (Acticide MBS de Thor Chemie).
Ejemplos de agentes de anti-congelación son etilenglicol, propilenglicol, urea y glicerol.
Ejemplos de colorantes incluyen miembros de clases de colorante tales como los pigmentos escasamente solubles en agua y los colorantes solubles en agua. Algunos ejemplos incluyen los colorantes conocidos bajo los nombres Rhodamin B, C.l. pigmento rojo 112, C.l. solvente rojo 1, pigmento azul 15:4, pigmento azul 15:3, pigmento azul 15:2, pigmento azul 15:1, pigmento azul 80, pigmento amarillo 1, pigmento amarillo 13, pigmento rojo 112, pigmento rojo 48:2, pigmento rojo 48:1, pigmento rojo 57:1, pigmento rojo 53:1, pigmento naranja 43, pigmento naranja 34, pigmento naranja 5, pigmento verde 36, pigmento verde 7, pigmento blanco 6, pigmento café 25, violeta básico 10, violeta básico 49, rojo ácido 51, rojo ácido 52, rojo ácido 14, azul ácido 9, amarillo ácido 23, rojo básico 10 y rojo básico 108.
Ejemplos de adhesivos son polivinilpirrol idona, acetato de polivinilo, alcohol polivinílico y tilosa.
Los auxiliares inertes adecuados son, por ejemplo, lo siguiente: fracciones de aceite mineral de punto de ebullición mediano a alto, tal como keroseno y aceite diesel; aceites de alquitrán; aceites de
origen vegetal o animal; hidrocarburos alifáticos, cíclicos y aromáticos, por ejemplo, parafinas, tetrahidronaftaleno, naftalenos alquilados y sus derivados, bencenos alquilados y sus derivados, alcoholes tales como metanol, etanol, propanol, butanol y ciclohexanol, cetonas tal como ciclohexanona o solventes fuertemente polares, por ejemplo, aminas tal como N-metilpirrolidona y agua.
Los portadores adecuados incluyen portadores líquidos y sólidos.
Los portadores líquidos incluyen, por ejemplo, solventes no acuosos tales como hidrocarburos cíclicos y aromáticos, por ejemplo, parafinas, tetrahidronaftaleno, naftalenos alquilados y sus derivados, bencenos alquilados y sus derivados, alcoholes tales como metanol, etanol, propanol, butanol y ciclohexanol, cetonas tal como ciclohexanona, solventes fuertemente polares, por ejemplo, aminas tal como N-metilpirrolidona, y agua, así como mezclas de los mismos.
Los portadores sólidos incluyen, por ejemplo, tierras minerales tales como sílices, geles de sílice, silicatos, talco, caolín, piedra caliza, cal, tronco, loess, arcilla, dolomita, tierra diatomácea, sulfato de calcio, sulfato de magnesio y óxido de magnesio, materiales sintéticos molidos, fertilizantes tales como sulfato de amonio, fosfato de amonio, nitrato de amonio y ureas, y productos de origen vegetal, tales como harina de cereal, harina de corteza de árbol, harina de
madera, harina de cascara de nuez, polvos de celulosa y otros portadores sólidos.
Los agentes tensioactivos adecuados (por ejemplo, adyuvantes, agentes humectantes, pegamentos, dispersantes o emulsores) incluyen las sales de metal alcalino, sales de metal alcalino térreo y sales de amonio de ácidos sulfónicos aromáticos, por ejemplo, ácidos lignosulfónicos (por ejemplo, tipos de Borrespers, Borregaard), ácidos fenolsulfónicos, ácidos naftalenosulfónicos (tipos de Morwet, Akzo Nobel) y ácido dibutilnaftalenosulfónico (tipos de Nekal, BASF AG), y de ácidos grasos, alquil- y alquilariisulfonatos, sulfatos de alquilo, lauril éter sulfatos y sulfatos de alcohol graso, y sales de hexa-, hepta- y octadecanoles sulfatados, y también de éteres glicólicos de alcohol graso, condensados de naftaleno sulfonado y sus derivados con formaldehído, condensados de naftaleno o de los ácidos naftalenosulfónicos con fenol y formaldehído, éter polioxietileno octilfenólico, isooctil-, octil- o nonilfenol etoxilado, éter poliglicólico de alquilfenilo o tributilfenilo, alcoholes de poliéter alquilarílico, alcohol isotridecílico, condensados de alcohol graso/óxido de etileno, aceite de ricino etoxilado, éteres alquílicos de polioxietileno o éteres alquílicos de polioxipropileno, acetato de éter poliglicólico de alcohol laurílico, ésteres de sorbitol, líquidos de desecho de lignosulfita y proteínas, proteínas desnaturalizadas, polisacáridos (por ejemplo, metilcelulosa), almidones hidrofóbicamente modificados, alcohol polivinílico (tipos de Mowiol, Clariant),
policarboxilatos (BASF AG, tipos de Sokalan), polialcoxilatos, polivinilamina (BASF AG, tipos de Lupamine), polietilenoimina (BASF AG, tipos de Lupasoi), polivinilpirrolidona y copolímeros de los mismos.
Polvos, materiales para esparcir y se pueden preparar polvos por mezcla o molienda concomitante de los A i s junto con un portador sólido.
Gránulos, por ejemplo gránulos revestidos, gránulos impregnados y gránulos homogéneos, se pueden preparar al unir los A.l.s a portadores sólidos.
Se pueden preparar formas de uso acuoso de concentrados de emulsión, suspensiones, pastas, polvos que se pueden humectar o gránulos que se pueden dispersar en agua al agregar agua.
Para preparar emulsiones, pastas o dispersiones de aceite, las composiciones herbicidas se pueden homogenizar en agua por medio de un agente humectante, pegamento, dispersante o emulsor. Alternativamente, también es posible preparar concentrados comprendiendo compuesto activo, agente humectante, pegamento, dispersante o emulsor y, si se desea, solvente o aceite, preferiblemente adecuado para dilución o dispersión con agua.
La concentración del herbicida(s) presente en la composición herbicida se puede variar dentro de rangos amplios. En general, las formulaciones comprenden aproximadamente de 0.001% a 98% en peso, preferiblemente 0.01 a 95% en peso de por lo menos un ingrediente activo. En algunas modalidades, los A.l.s se emplean en
una pureza de 90% a 100%, preferiblemente 95% a 100% (medido, por ejemplo, de acuerdo con espectro de NMR o IR).
En algunas formulaciones, los herbicidas son suspendidos, emulsionados o disueltos. Las formulaciones pueden estar en la forma de soluciones acuosas, polvos, suspensiones o suspensiones o dispersiones altamente concentradas acuosas, oleosas u otras, emulsiones acuosas, microemulsiones acuosas, suspo-emulsiones acuosas, dispersiones de aceite, pastas, polvos, materiales para extender, o gránulos.
Los herbicidas o las composiciones herbicidas que los comprenden se pueden aplicar pre-aparición, post-aparición o pre-plantación, o junto con la semilla. También es posible aplicar las composiciones herbicidas o compuestos activos al plantar semillas pretratadas con las composiciones herbicidas o compuestos activos.
En otra modalidad, los herbicidas o composiciones herbicidas se pueden aplicar al tratar la semillas. El tratamiento de semillas comprende en esencial cualquiera de los procedimientos familiares al experto en la técnica (por ejemplo, abono de semilla, recubrimiento de semilla, espolvoreo de semilla, enjuague de semilla, recubrimiento de película de semilla, recubrimiento de multicapa de semilla, incrustamiento de semilla, goteo de semilla y peletización de semilla). Las composiciones herbicidas se pueden aplicar diluidas o no diluidas.
Además, puede ser benéfico aplicar los herbicidas solos o en combinación con otros herbicidas, o en la forma de una mezcla con
otros agentes protectores de cosecha, por ejemplo, junto con agentes para controlar pestes u hongos fitopatógenos o bacteria. También es de interés la miscibilidad con soluciones de aceite mineral, que se emplean para probar las deficiencias de elemento nutricional y de rastreo. También se pueden agregar otros aditivos tales como aceites no fitotóxicos y concentrados de aceite.
Además, puede ser útil aplicar los herbicidas en combinación con seguros. Los seguros son compuestos que previenen o reducen daño inducido por herbicida para plantas útiles sin tener un impacto mayor en la acción herbicida de los herbicidas. Se pueden aplicar ya sea antes de sembrar (por ejemplo, en tratamientos de semilla, brotes o semilleros) o en la aplicación de pre-aparición o aplicación de post-aparición de la planta de cosecha. Los seguros y los herbicidas se pueden aplicar simultáneamente o en sucesión.
Los seguros incluyen, por ejemplo, ácidos (quinolin-8-oxi)acéticos, ácidos 1 -fenil-5-haloalquil-1 H-1 , 2,4-triazol-3-carboxílicos, ácidos 1-fenil-4,5-dihidro-5-alquil-1H-pirazol-3,5-dicarboxilicos, ácidos 4,5-dihidro-5, 5-diaril-3-isoxazol carboxílicos, dicloroacetamidas, alfa-oximinofenílacetonitrilos, acetofenonoximas, 4,6-dihalo-2-fenilpirimidinas, amidas N-[[4-(aminocar.bonil)fenil]-sulfonil]-2-benzoicas, anhídrido 1 , 8-naftálico, ácidos 2-halo-4-(ha loa lquil)-5-tiazol carboxílicos, benoxacor, cloquintocet , ciometrinil, ciprosulfamida, diclormid, diciclonon, dietolato, fenclorazol, fenclorim, flurazol, fluxofenim, furilazol, isoxadifeno, mefenpir, mefenato, anhídrido naftálico, oxabetrinil, 4-(dicloroacetil)-
1-oxa-4-azaspiro[4.5]decano (MON4660, CAS 71526-07-3) y 2,2,5-trimetil-3-(dicloroacetil)-1 , 3-oxazolidina (R-29148, CAS 52836-31-4), fosfortiolatos y N-alquil-O-fenil-carbamatos y sus sales agricolamente aceptables y sus derivados agrícolamente aceptables tales como amidas, ésteres y tioésteres.
Aquellos expertos en la técnica reconocerán que algunos compuestos usados como herbicidas, seguros, etc., son capaces de formar isómeros geométricos, por ejemplo, isómeros E/Z, enantiómeros , diaestereómeros, u otros estereoisómeros. En general, es posible usar isómeros puros o mezclas de isómeros. Por ejemplo, algunos de los herbicidas de ariloxifenoxi propionato son quirales, y algunos de ellos son comúnmente usados en forma enantioméricamente enriquecida o enantíopura, por ejemplo, clodinafop, cihalofop, fenoxaprop-P, fluazifop-P, haloxifop-P, metamifop, propaquizafop o quizalofop-P. Como otro ejemplo, se puede usar glufosinato en forma enantioméricamente enriquecida o enantiopura, también conocido como glufosinato-P. Alternativamente, los compuestos se pueden usar en mezclas racémicas u otras mezclas de isómeros geométricos.
- Controlando mala hierba
Las plantas de arroz de la invención se pueden usar en conjunto con herbicida(s) a los cuales son tolerantes. Se pueden aplicar herbicidas a las plantas de arroz de la invención usando cualquier técnica conocida a aquéllos expertos en la técnica. Se
pueden aplicar herbicidas en cualquier punto en el proceso de cultivo de planta de arroz. Por ejemplo, se pueden aplicar herbicidas pre-plantando, en plantación, pre-aparición, post-aparición o combinaciones de los mismos. Se pueden aplicar herbicidas a semillas y secarse para formar una capa en las semillas.
En algunas modalidades, se tratan semillas con un seguro, seguido por una aplicación post-aparición de herbicida(s). En una modalidad, la aplicación post-aparición de herbicida(s) ocurre aproximadamente 7 a 10 días después de plantar semillas tratadas con seguro. En algunas modalidades, el seguro es cloquintocet, diclormid, fluxofenim o combinaciones de los mismos.
En otros aspectos, la presente invención provee un método para controlar hierba mala en un lugar para crecer una planta de arroz o parte de la planta de la misma, el método que comprende aplicar una composición que comprende herbicida(s) al lugar.
En algunos aspectos, la presente invención provee un método para controlar hierba mala en un lugar para crecimiento de una planta, el método que comprende aplicar una composición herbicida al lugar; en donde dicho lugar es: (a) un lugar que contiene una planta de arroz o semilla capaz de producir una planta de arroz; y (b) un lugar que contendrá la planta de arroz o la semilla después de aplicar la composición herbicida.
Los siguientes son ejemplos no limitantes que describen diferentes métodos de cultivo de arroz incluyendo la aplicación de herbícida(s).
En el método de post-inundación, post-aparición (trasplantado), se crece arroz en aproximadamente la etapa de 2-4 hojas lejos del campo. El campo está inundado y labrado (encharcado) hasta lograr una mezcla de lodo. Las plantas de arroz entonces se trasplantan en el lodo. La aplicación de herbicida típicamente ocurre antes o después de la inundación.
En el método post-inundación, post-aparición (sembrado con agua), se remoja arroz durante aproximadamente 24 horas o más, y después se siembra en la superficie de un campo inundado poco profundo. La aplicación de herbicida típicamente se hace después de la germinación de mala hierba.
En el método de pre-inundación, post-aparición, de sembrado directo (esparcido o sembrado a máquina), el arroz es esparcido o plantado con una sembradora bajo la superficie del suelo. El campo se puede descargar (regar) para promover el crecimiento de arroz. El campo es inundado aproximadamente una semana o más después de plantar conforme la planta germina. La aplicación de herbicida ocurre típicamente antes de la inundación, pero después de la aparición de las plantas de arroz
En el método de pre-inundación, post-aparición (estilo de sureste de Asia), se remoja arroz por aproximadamente 24 horas o más. El campo es encharcado a la consistencia correcta y se drena. Las semillas pre-germinadas entonces son esparcidas a la superficie del suelo. La inundación ocurre conforme el arroz se desarrolla. La
aplicación de herbicida normalmente ocurre antes de la inundación, pero después de la aparición de las plantas de arroz.
En el método de pre-aparición o pre-aparición retrasada, se plantan semillas, usualmente con una sembradora. Se aplica herbicida antes de la aparición del arroz o hierba mala.
Se pueden aplicar composiciones herbicidas, por ejemplo, como tratamientos foliares, tratamientos de suelo, tratamientos de semilla o pociones de suelo. La aplicación se puede hacer, por ejemplo, por aspersión, espolvoreo, esparcido o cualquier otro modo conocido en la técnica.
En una modalidad, se pueden usar herbicidas para controlar el crecimiento de mala hierba que se puede encontrar creciendo en la vecindad de las plantas de arroz de la invención. En modalidades de este tipo, un herbicida al cual la planta de arroz de la invención es tolerante se puede aplicar al terreno a una concentración suficiente para matar o inhibir el crecimiento de mala hierba. Las concentraciones de herbicida suficientes para matar o inhibir el crecimiento de mala hierba son conocidas en la técnica.
En otra modalidad, la presente invención provee un método para controlar mala hierba en la vecindad de plantas de arroz. El método comprende aplicar una cantidad efectiva de herbicida(s) a la mala hierba y a la planta de arroz, en donde la planta de arroz tiene tolerancia aumentada al herbicida(s) en comparación con una planta de arroz de tipo silvestre.
En otro aspecto, se puede usar herbicida(s) como un tratamiento de semilla. En algunas modalidades, una concentración efectiva o una cantidad efectiva de herbicida(s), o una composición que comprende una concentración efectiva o una cantidad efectiva de herbicida(s) se puede aplicar directamente a las semillas antes de o durante la siembra de las semillas. Las formulaciones de tratamiento de semilla adicionalmente pueden comprender aglutinantes, y opcionalmente colorantes también.
Se pueden agregar aglutinantes para mejorar la adhesión de los materiales activos en las semillas después del tratamiento. Los aglutinantes adecuados incluyen, por ejemplo, copolímeros en bloque, agentes tensioactivos de EO/PO, alcoholes polivinílicos, polivinilpirrolidonas, poliacrilatos, polimetarilatos, polibutenos, poliisobutilenos, poliestireno, polietilenoaminas, polietilenoamidas, polietilenoiminas (por ejemplo, Lupasol®, Polymin®), poliéteres, poliuretanos, polivinilacetato, tilosa y copolímeros derivados de estos polímeros.
El término "tratamiento de semilla" incluye todas las técnicas de tratamiento de semilla adecuadas conocidas en la técnica, tales como abono de semilla, recubrimiento de semilla, espolvoreo de semilla, remojo de semilla y peletizacion de semilla. El suelo puede ser tratado al aplicar una formulación que contiene el herbicida (por ejemplo, una formulación granular), por ejemplo, con una máquina para sembrar semillas, con opcionalmente uno o más portadores
sólidos o líquidos agronómicamente aceptables, y opcionalmente con uno o más agentes tensioacti os agrícolamente aceptables.
La presente invención también comprende semillas cubiertas con o que contienen una formulación de tratamiento de semilla que comprende herbicida(s) .
El término "revestido con o que contiene" en general significa que el ingrediente activo está para la mayor parte en la superficie de la semilla al momento de la aplicación, aunque una parte mayor o menor del ingrediente puede penetrar en la semilla, dependiendo del método de aplicación. Cuando la semilla es plantada, puede absorber el ingrediente activo.
En algunas modalidades, el tratamiento de semilla con herbicida(s) o con una formulación que comprende el herbicida(s)' se aplica al rociar o espolvorear las semillas, o de lo contrario al tratar la semillas, antes de sembrar la semillas.
En otros aspectos, la presente invención provee un método para combatir vegetación indeseada o controlar mala hierba, comprendiendo contactar semillas de las plantas de arroz con herbicida(s) antes de sembrar, o después de la pre-germinación, o ambos. El método puede comprender además sembrar las semillas, por ejemplo, en suelo en un campo o en un medio de plantar en un invernadero. El método encuentra uso particular en combatir vegetación indeseada o controlar la mala hierba en la vecindad intermedia de la semilla. El control de vegetación indeseada se entiende como la matanza de mala hierba, o de lo contrario
retardando o inhibiendo el crecimiento normal de mala hierba. La mala hierba, en el sentido más amplio, se entiende como que significa todas aquellas plantas que crecen en ubicaciones en donde no son deseadas.
La mala hierba que se puede tratar incluye, por ejemplo, mala hierba dicotiledónea y monocotiledónea. La mala hierba monocotiledónea incluye, pero no se limita a, mala hierba del género: Echinochloa, Setaria, Panicum, Digitaria, Phleum, Poa, Festuca, Eleusine, Brachiaria, Lolium, Bromus, Avena, Oryza, Cyperus, Sorghum, Agropyron, Cynodon, Monochoria, Fimbristyslis, Sagittaria, Eleocha ris, Scirpus, Paspalum, Ischaemum, Sphenoclea, Dacty!octenium , Agrostis, Alopecurus y Apera. La mala hierba dicotiledónea incluye, pero no se limita a, mala hierba del género: Sinapis, Lepidium, Galium, Stellaria, Matricaria, Anthemis, Galinsoga, Chenopodium, Urtica, Senecio, Amaranthus, Portulaca, Xanthium, Convolvulus, Ipomoea, Polygonum, Sesbania, Ambrosia, Cirsium, Carduus, Sonchus, Solanum, Rorippa, Roíala, Lindernia, Lamium, Verónica, Abutilón, Emex, Datura, Viola, Galeopsis, Papaver, Centaurea, Trifolium, Ranunculus y Taraxacum.
Ejemplos de arroz rojo/cubierto de maleza incluyen, pero no se limitan a, Oryza longistaminata, Oryza sativa L. var. Sylvatica, Oryza latifolia, Oryza barhii A. Chev, Oryza punctata y Oryza rufipogon .
Ejemplos de Echinochtoa spp. incluyen, pero no se limitan a, Echinochloa colona, Echinochloa crusgalli y Echinochloa oryzicola.
Además, la mala hierba tratada con la presente invención puede incluir, por ejemplo, plantas de cosecha que están creciendo en una ubicación indeseada.
Todavía en otros aspectos, los lugares, plantas, partes de planta o semillas son tratados con una composición agronómicamente aceptable que no contiene un A.l. Por ejemplo, e.l tratamiento puede comprender uno o más portadores agronómicamente aceptables, diluyentes, excipientes^ reguladores de crecimiento de planta, y similares; o un adyuvante, tal como un agente tensioactivo, un rociador, un pegamento, un penetrante, un agente controlador de banco, un aceite de cosecha, un emulsor, un agente de compatibilidad o combinaciones de los mismos.
En otros aspectos, la presente invención provee un producto preparado de las plantas de arroz de la invención, por ejemplo, arroz café (por ejemplo, arroz de carga), arroz quebrado (por ejemplo, arroz malcriado, arroz de cervecero), arroz pulido (por ejemplo, arroz molido), cáscaras de arroz (por ejemplo, cascarones, cascarillas), salvado de arroz, árboles podados de arroz, alimento de molino de arroz, harina de arroz, aceite de arroz, salvado de arroz en aceite, salv.ado de arroz sin aceite, "arrak", vino de arroz, cria de ave, y alimento para animales.
Más Modalidades de la Invención
Como se usa en la presente, el término "planta" incluye células vegetales, protoplastos vegetales, células vegetales de cultivo de
tejido de las cuales se pueden regenerar plantas de arroz, callo de planta, montones de planta y células vegetales que están intactas en plantas o partes de plantas, tales como polen, flores, embriones, óvulos, semillas, vainas, hojas, tallos, raíces, anteras y similares. De esta manera, otro aspecto de esta invención es proveer células que, al crecer y diferenciar, producen un cultivo que tiene esencialmente todas las características fisiológicas y morfológicas de 'CL152'.
Técnicas para transformar con y expresar genes estructurales deseados y células cultivadas son conocidas en la técnica. También, como es sabido en la técnica, el arroz se puede transformar y regenerar de modo que se obtienen plantas enteras conteniendo y expresando genes deseados bajo control regulador. Se pueden encontrar descripciones generales de vectores de expresión de planta y genes reporteros y protocolos de transformación, por ejemplo, en Gruber y otros, "Vectors for Plant Transformation, in Methods in Plant Molecular Biology & Biotechnology" en-Glich y otros (Eds. Pp. 89-119, CRC Press, 1993). Por ejemplo, vectores de expresión y casetes de genes con el reportero GUS están disponibles de Clone Tech Laboratories, Inc. (Palo Alto, California), y vectores de expresión y casetes de genes con luciferasa reportera están disponibles de Promega Corp. (Madison, Wis ). Se proveen métodos generales para cultivar tejidos de planta, por ejemplo, por Maki y otros, "Procedures for Introducing Foreign DNA into Plants" en Methods in Plant Molecular Biology & Biotechnology, Glich y otros (Eds. Pp. 67-88 CRC Press, 1993); por Phillips y otros, "Cell-Tissue
Culture and In-Vitro Manipulation" en Corn & Corn Improvement, 3a edición; y por Sprague y otros (Eds. Pp. 345-387) American Society of Agronomy Inc., 1988. Los métodos para introducir vectores de expresión en tejido vegetal incluyen la infección directa o co-cultivo de células vegetales con Agrobacterium tumefaciens, Horsch y otros, Science, 227:1229 (1985). Se proveen descripciones de sistemas de vectores de Agrobacterium y métodos para transferencia de genes "mediada por Agrobacterium por Gruber y otros, supra.
Los métodos útiles incluyen, pero no se limitan a, vectores de expresión introducidos en tejidos vegetales usando un método de transferencia de gen directo tal como surtido mediado por microproyectil , inyección de ADN, electroporación y similares. Más preferible, los vectores de expresión son introducidos en tejidos vegetales que usan el surtido de medio de microproyectil con transformación mediada con dispositivo biolistico o Agrobacterium. Las plantas transformadas obtenidas con el germoplasma de 'CL152' deben estar dentro del alcance de esta invención.
La presente invención también provee plantas de arroz regeneradas de un cultivo de tejido de la variedad 'CL152' o planta híbrida. Como es sabido en la técnica, se puede usar cultivo- de tejido para la regeneración in vitro de una planta de arroz. Por ejemplo, ver Chu. Q.R. y otros (1999) "Use of bridging parents with high anther cu Iturability to improve plant regeneration and breeding valué in rice", Rice Biotechnology Quarterly , 38:25-26; Chu, Q.R. y otros, "A novel plant regeneration médium for rice anther culture of
Southern U.S. crosses", Rice Biotechnology Quarterly, 35:15-16 (1998); Chu, Q.R. y otros, "A novel basal médium for embryogenic callus induction of Southern US crosses", Rice Biotechnology Quarterly, 32:19-20 (1997); y Oono, K. , "Broadening the Genetic Variability by Tissue Culture ethods", Jap. J. Breed., 33 (Sup. 2), 306-307 (1983). De esta manera, otro aspecto de esta invención es proveer células que, al crecer y diferenciar, producen plantas de arroz que tienen todas, o esencialmente todas, las características fisiológicas y morfológicas de la variedad 'CL152'.
A menos que el contexto claramente indique lo contrario, las referencias en la especificación y reivindicaciones a 'CL152' se deben entender también que incluyen conversiones de un solo gen de 'CL152' con un gen codificando un rasgo tal como, por ejemplo, esterilidad masculina, otras fuentes de resistencia a herbicida, resistencia por enfermedad bacteriana, fúngica o viral, resistencia a insectos, fertilidad masculina, calidad nutricional mejorada, uso industrial, estabilidad de rendimiento y mejora de rendimiento.
Duncan y otros, Planta, 165:322-332 (1985) refleja que 97% de las plantas cultivadas que produjeron callos fueron- capaces de regeneración de planta. Los experimentos posteriores con engendrados por endogamia e híbridos produjeron 91% de callo regenerable que produjeron plantas. En otro estudio, Songstad y otros, Plant Cell Reports, 7:262-265 (1988) registraron varias adiciones de medio que mejoraron la habilidad de regenerar callo de dos líneas engendradas por endogamia. Otros reportes publicados
también indican que los tejidos "no tradicionales" son capaces de producir embriogénesis somática y regeneración de planta, K.P. Rao y otros, Maize Genetics Cooperation Newsletter, 60:64-65 (1986), se refiere a embriogénesis somática de cultivos de callo 'glume' y B.V. Conger y otros, Plant Cell Reports, 6:345-347 (1987) registraron embriogénesis somática de los cultivos de tejido de segmentos de hoja de maíz. Estos métodos de obtener plantas se usan de rutina con una velocidad de éxito alta.
El cultivo de tejido de elote (maíz) se describe en la solicitud de patente europea No. 160,390. Los procedimientos de cultivo de tejido de maíz, que se pueden adaptar para usarse con arroz, también se describen en Green y otros, "Plant Regeneration in Tissue Culture of Maize", Maize for Bíological Research (Plant Molecular Biology Association, Charlottesville, Va., pp. 367-372, 1982) y en Duncan y otros, "The Protection of Callus Capable of Plant Regeneration from Immature Embryos of Numerous Zea Mays Genotypes", 165 Planta, 322:332 (1985). De esta manera, otro aspecto de esta invención es proveer células que, al crecer y diferenciar, producen plantas de arroz que tienen todas, o en esencia' todas, las características fisiológicas y morfológicas de línea de arroz híbrido 'CL152'. Ver T.P. Croughan y otros (Springer-Verlag, Berlín, 1991) Arroz (Oryza sativa. L): establecimiento de cultivo de callo y la regeneración de plantas, en Biotechnology in Agriculture and Forestry (19-37).
Con la llegada de técnicas biológicas moleculares que permiten el aislamiento y caracterización de genes que codifican productos de proteína específicos, ahora es posible maquinar de rutina genomas de planta para incorporar y expresar genes extranjeros, o versiones adicionales o modificadas de genes nativos, o endógenos (quizás impulsados por diferentes promotores) a fin de alterar los rasgos de una planta en una manera específica. Dichos genes extranjeros, adicionales y modificados en la presente son referidos colectivamente como "transgenes". En años recientes, varios métodos para producir plantas transgénicas se han desarrollado, y la presente invención, en particular modalidades, también se refiere a versiones transformadas de 'CL152'.
Un vector de expresión es construido que funcionará en células vegetales. Dicho vector comprende una secuencia codificadora de ADN que está bajo el control de o se liga operativamente a un elemento regulador (por ejemplo, un promotor). El vector de expresión puede contener una o más combinaciones de secuencia codificadora/elemento regulador operativamente ligadas. El vector(es) puede estar en la forma de un plásmido o virus, y se puede usar solo o en combinación con otros plásmidos o virus para proveer plantas de arroz transformadas.
Vector de Ex presión
Vectores de expresión comúnmente incluyen por lo menos un "marcador" genético, operativamente ligado a un elemento regulador
(por ejemplo, un promotor) que permite células transformadas conteniendo el marcador a ser recuperado por selección negativa, es decir, inhibiendo el crecimiento de células que no contienen el gen marcador que se puede seleccionar, o por selección positiva, es decir, seleccionando el producto codificado por el marcador genético. Muchos genes marcadores comúnmente usados que se pueden seleccionar para transformación de planta son conocidos en la técnica, e incluyen, por ejemplo, genes que codifican para enzimas que metabólicamente purifican un inhibidor químico selectivo tal como un antibiótico o un herbicida, o genes que codifican una diana alterada que es insensible a dicho inhibidor. También se conocen en la técnica métodos de selección positiva.
Por ejemplo, un gen marcador comúnmente usado que se puede seleccionar para transformación de planta es aquél para neomicina fosfotransferasa II (nptil), aislado de transposon Tn5, cuya expresión confiere resistencia a kanamicina. Ver Fraley y otros, Proc. Nati. Acad. Sc¡. U.S. A. , 80:4803 (1983). Otro gen marcador comúnmente usado que se puede seleccionar es el gen de higromicina fosfotransferasa, que confiere resistencia a la higromicina de antibiótico. Ver Vanden Elzen y otros, Plant Mol. Biol., 5:299 (1985).
Genes marcadores adicionales que se pueden seleccionar de origen bacteriano que confieren resistencia a uno o más antibióticos incluyen gentamicina acetilo transferasa, estreptomicina fosfotransferasa, aminoglicósido-3'-adenilo transferasa, y el determinante de resistencia a bleomicina. Hayford y otros, Plant
Physiol, 86:1216 (1988), Jones y otros, Mol. Gen. Genet., 210:86 (1987), Svab y otros, Plant Mol. Biol., 14:197 (1990); Plant Mol. Biol., 7:171 (1986). Otros genes marcadores que se pueden seleccionar confieren resistencia a herbicidas tales como glifosato, glufosinato o broxinilo. Comai y otros, Nature, 317:741-744 (1985); Gordon-Kamm y otros, Plant Cell, 2:603-618 (1990); y Stalker y otros, Science, 242:419-423 (1988).
Los genes marcadores que se pueden seleccionar para transformación de planta de origen no bacteriano incluyen, por ejemplo, dihidrofolato reductasa de ratón, 5-enolpiruvilshikimato-3-fosfato sintasa de planta, y acetolactato sintasa de planta. Eichholtz y otros, Somatic Cell Mol. Genet. 13:67 (1987); Shan y otros, Science, 233:478 (1986); y Charest y otros, Plant Cell Rep., 8:643 (1990).
Otra clase de genes marcadores para transformación de planta emplea selección de células vegetales supuestamente transformadas, en vez de selección para resistencia a una sustancia tóxica tal como un antibiótico. Estos genes marcadores son particularmente útiles para cuantificar o visualizar el patrón espacial de expresión de un gen en tejidos específicos, y son referidos con frecuencia como genes reporteros ya que se pueden fusionar al gen diana o secuencia reguladora. Los genes reporteros comúnmente usados incluyen glucuronidasa (GUS), galactosidasa, luciferasa, cloranfenicol y acetiltransferasa . Ver Jefferson, R.A., Plant Mol. Biol. Rep., 5:387 (1987); Teeri y otros, EMBO J., 8:343 (1989); Koncz y otros, Proc.
Nati. Acad. Sci. U.S. A., 84:131 (1987); y DeBlock y otros, EMBO J., 3:1681 (1984). Otra propuesta para identificar casos de transformación relativamente raros ha sido el uso de un gen que codifica un regulador constitutivo dominante de la vía de pigmentación de antocianina de Zea maysr Ludwig y otros, Science, 247:449 (1990).
El gen de proteína fluorescente verde (GFP) ha sido usado como un marcador para expresión de genes en células procarióticas y eucarióticas. Ver Chalfie y otros, Science, 263:802 (1994). GFP y mutantes de GFP se pueden usar como marcadores que se pueden seleccionar.
Los genes incluidos en vectores de expresión son impulsados por una secuencia de nucleótido que comprende un elemento regulador, por ejemplo, un promotor. Muchos promotores adecuados son conocidos en la técnica, como son otros elementos reguladores que se pueden usar solos o en combinación con promotores.
Como se usa en la presente, "promotor" se refiere a una región de ADN ascendente o descendente del sitio de iniciación de transcripción, una región que está involucrada en reconocer y unir ARN polimerasa y otras proteínas para iniciar la transcripción. Un "promotor de planta" es un promotor capaz de iniciar la transcripción en células vegetales. Ejemplos de promotores bajo control de desarrollo incluyen promotores que inician de preferencia la transcripción en ciertos tejidos, tales como hojas, raíces, semillas, fibras, recipientes de xilema, traqueidas o esclerénquima . Dichos
promotores son referidos como "preferidos de tejido". Los promotores que inician la transcripción sólo en cierto tejido son referidos como "específicos de tejido". Un promotor especifico de "tipo celular" primariamente impulsa expresión en ciertos tipos celulares en uno o más órganos, por ejemplo, células vasculares en raíces u hojas. Un promotor "inducible" es un promotor que está bajo control ambiental. Ejemplos de condiciones ambientales que pueden inducir transcripción por promotores inducibles incluyen condiciones anaeróbicas o la presencia de luz. Los promotores específicos de tejido, preferidos de tejido, específicos de tipo celular e inducibles son ejemplos de promotores "no constitutivos". Un promotor "constitutivo" es un promotor que es generalmente activo bajo la mayoría de las condiciones ambientales.
A. Promotores Inducibles
Un promotor inducible se liga operativamente a un gen para expresión en arroz. Opcionalmente, el promotor inducible se liga operativamente a una secuencia de nucleótído codificando una secuencia de señal que se' liga operativamente a un gen para expresión en arroz. Con un promotor inducible, la velocidad de transcripción aumenta en respuesta a un agente inductor.
Cualquier promotor inducible adecuado se puede usar en la presente invención. Ver Ward y otros, Plant Mol. Biol., 22:361-366 (1993). Ejemplos incluyen aquellos del sistema ACEI, que responde a cobre, Meft y otros, PNAS, 90:4567-4571 (1993); gen In2 de maíz,
que responde a seguros herbicidas de bencenosulfonamida, Hershey y otros, Mol. Gen Genetics, 227:229-237 (1991); Gatz y otros, Mol. Gen. Genetics, 243:32-38 (1994); y represor Tet de Tn10, Gatz, Mol. Gen. Genetics, 227:229-237 (1991). Un promotor inducible preferido es— uno que responde a un agente inductor al cual plantas no responden normalmente, por ejemplo, el promotor inducible de un gen de hormona esteroide, la actividad de transcripción del cual se induce por una hormona glucocorticoesteroide. Ver Schena y otros, Proc. Nati. Acad. Sci. U S A., 88:0421 (1991).
B. Promotores Constitutivos
Un promotor constitutivo se liga operativamente a un gen para expresión en arroz, o el promotor constitutivo se liga operativamente a una secuencia de nucleótido codificando una secuencia de señal que se liga operativamente a un gen para expresión en arroz.
También se pueden usar promotores constitutivos en la presente invención. Ejemplos incluyen promotores de virus vegetales como el promotor 35S del virus mosaico de coliflor, Odell y otros, Nature, 313:810-812 (1985), y los promotores del gen actina de arroz, McEIroy y otros, Plant Ce//, 2:163-171 (1990); ubiquitina, Christensen y otros, Plant Mol. Biol., 12:619-632 (1989) y Christensen y otros, Plant Mol. Biol. 18:675-689 (1992); pEMU, Last y otros, Theor. Appl. Genet., 81:581-588 (1991); MAS, Velten y otros, EMBO J., 3:2723-2730 (1984); y H3 histona de maíz, Lepetit y otros,
Mol. Gen. Genetics, 231:276-285 (1992) y Atanassova y otros, Plant Journal, 2 (3):291-300 (1992).
Un promotor ALS (AHAS), tal como el fragmento 5' de Xba1/Ncol del gen estructural ALS3 Brassica napus (o una secuencia de nucleótido homologa o- de lo contrario similar a dicho fragmento Xba1/Ncol), se puede usar como un promotor constitutivo. Ver . solicitud de PCT WO 96/30530. El promotor de un gen ALS (AHAS) de arroz también se puede usar. Ver las secuencias descritas en la solicitud de PCT WO 01/85970; y patente de E.U.A. No. 6,943,280.
C. Promotores Específicos de Tejido o Preferidos de Tejido
Un promotor específico de tejido se liga operativamente a un gen para la expresión en arroz. Opcionalmente, el promotor específico de tejido se liga operativamente a una secuencia de nucleótido codificando una secuencia de señal que se liga operativamente a un gen para expresión en arroz. Las plantas transformadas producen el producto de expresión del transgen exclusivamente, o preferenciaimente, en tejido(s) específico.
Cualquier promotor específico de tejido o preferido de tejido se puede usar en la presente invención. Ejemplos de promotores específicos de tejido o preferidos de tejido incluyen aquellos del gen faseolina, Murai y otros, Science, 23:476-482 (1983), y Sengupta-Gopala y otros, Proc. Ntl. Acad. Sci. U.S. A., 82:3320-3324 (1985); un promotor específico de hoja e inducido con luz tal como de cab o rubisco, Simpson y otros, EMBO J., 4(11 ): 2723-2729 (1985) y Timko
y otros, Nature, 318:579-582 (1985); un promotor especifico de antera tal como de Zn13, Guerrero y otros, Mol. Gen. Genetics , 244:161-168 (1993); o un promotor preferido de microespora tal como de apg, Twell y otros, Sex. Plant Reprod., 6:217-224 (1993).
Secuencias de Señal para . Focalizar Proteínas a Compartimentos Subcelulares
El transporte de moléculas de proteina o péptido producidas por transgenes a un compartimento subcelular tal como un cloroplasto, vacuola, peroxisoma, glioxisoma, pared celular o mitocondria, o para secreción en un apoplasto, se logra al ligar operativamente una secuencia de nucleótido codificando una secuencia de señal al extremo 5' o 3' de un gen codificando la proteina o péptido de interés. Las secuencias de focalización en el extremo 5' o 3' del gen estructural pueden determinar, durante síntesis y procesamiento de proteína, en donde la proteína codificada finalmente se compartimentaliza.
Muchas secuencias de señal son conocidas en la técnica. Ver, por ejemplo, Becker y otros, Plant Mol. Biol., 20:49 (1992); Cióse, P.S., Tesis Maestra, lowa State University (1993); Knox, C. y otros, "Structure and Organization of Two Divergent Alpha-Amylase Genes from Barley", Plant Mol. Biol., 9:3-17 (1987); Lerner y otros, Plant Physiol., 91:124-129 (1989); Fontes y otros, Plant Cell, 3:483-496 (1991); Matsuoka y otros, Proc. Nati. Acad. Sci., 88:834 (1991); Gould y otros, J. Cell Biol., 108:1657 (1989); Creissen y otros, Plant
J., 2:129 (1991); Kalderon y otros, "A short amino acid sequence able to specify nuclear location", Cell, 39:499-509 (1984); y Steifel y otros, "Expression of a maize cell Wall hydroxyproline-rich glycoprotein gene in early leaf and root vascular differentiation", Plant Cell, 2:785-793 (1990).
Genes de Proteína Extranjeros y Genes Agronómicos
Los genes agronómicamente significativos que se pueden transformar en plantas de arroz de conformidad con la presente invención incluyen, por ejemplo, lo siguiente:
1. Genes que confieren resistencia a pestes o enfermedad.
A. Genes de resistencia a enfermedad de planta. Las defensas de planta a menudo se activan por interacción específica entre el producto de un gen de resistencia a enfermedad (R) en la planta y el producto de un gen de avirulencia (Avr) - correspondiente en el patógeno. Una planta se puede transformar con un gen de resistencia clonado para maquinar plantas que sean resistentes a cepas de patógeno específicas. Ver, por ejemplo, Jones y otros, Science 266:789 (1994) (clonación del gen- Cf-9 de jitomate para resistencia a Cladosporium fulvum); Martin y otros, Science 262:1432 (1993) (gen Pto de jitomate para resistencia a Pseudomonas syringae pv. El jitomate codifica una proteína kinasa); y Mindrinos y otros, Cell
78:1089 (1994) (gen Arabidopsis RSP2 para resistencia a Pseudomonas syringae) .
Una proteína Bacillus thuringiensis, un derivado de ta misma, o un polipéptido sintético modelado ahí. Ver, por ejemplo, Geiser y otros, Gene 48:109 (1986),· describiendo la clonación y secuencia de nucleótido de un gen Bt-endotoxina . Las moléculas de ADN codificando genes de endotoxina se pueden obtener de American Type Culture Coilection, Manassas, Va., por ejemplo, bajo números de acceso de ATCC Nos. 40098, 67136, 31995 y 31998.
Una lectina. Ver, por ejemplo, Van Damme y otros, Plánt Molec. Biol. 24:25 (1994), describiendo las secuencias de nucleótido de varios genes de lectina de unión a mañosa Clivia miníala.
Una proteína de unión a vitamina tal como avidina. Ver solicitud de PCT US93/06487. Esta descripción enseña el uso de avidina y homólogos de avidina como larvicidas contra pestes de insectos.
Un inhibidor de enzima, por ejemplo, una proteasa o inhibidor de proteinasa o un inhibidor de amilasa. Ver, por ejemplo, Abe y otros, J. Biol. Chem. 262:16793 (1987) (secuencia de nucleótido de inhibidor de proteína cisteína de arroz); Huub y otros, Plant Molec. Biol. 21:985 (1993) (secuencia de nucleótido de cADN codificando inhibidor
de proteinasa de tabaco 1); y Sumitani y otros, Biosci. Biotech. Biochem. 57:1243 (1993) (secuencia de nucleótido de inhibidor de Streptomyces n ¡trosporeus-a milasa) .
Una hormona o feromona especifica de insecto tal como un ecdiesteroide y hormona juvenil, un variante de la misma, un mimético basado ahí, o un antagonista o agonista del mismo. Ver, por ejemplo, Hammock y otros, Nature, 344:458 (1990), describiendo expresión de baculovirus de hormona estearasa juvenil clonado, un inactivador de hormona juvenil.
Un péptido o neuropéptido especifico de insecto que, al expresar, interrumpe la fisiología de la peste afectada. Ver, por ejemplo, Regan, J. Biol. Chem. 269:9 (1994) (clonación de expresión produce ADN codificando para receptor de hormona diurética de insecto); y Pratt y otros, Biochem. Biophys. Res. Comm., 163:1243 (1989) (una alostatina en Diploptera puntata). Ver también patente de E.U.A. No. 5,266,317 a Tomalski y otros, describiendo genes codificando neurotoxinas paralíticas específicas de insecto.
Un veneno especifico de insecto producido en naturaleza por una víbora, una avispa, etc. Por ejemplo, ver Pang y otros, Gene, 116:165 (1992), con respecto a expresión
heteróloga en plantas de un gen codificando para un péptido insectotóxico de escorpión.
Una enzima responsable por hiperacumulación de un monoterpeno, un sesquiterpen o , un esteroide, ácido hidroxámico, un derivado de fenilpropanoide u otra molécula de no proteína con actividad insecticida.
Una enzima involucrada en la modificación, incluyendo modificación post-transcripción , de una molécula biológicamente activa; por ejemplo, una enzima glicolítica, una enzima proteolitica, una enzima lipolítica, una nucleasa, una ciclasa, una transaminasa , una esterasa, una hidrolasa, una fosfatasa, una kinasa, una fosforilasa, una polimerasa, una elastasa, una quitinasa, o una glucanasa, ya sea natural o sintética. Ver solicitud de PCT WO 9302197 a Scott y otros, que describe la secuencia de nucleotido de un gen de calasa. Moléculas de ADN que contienen secuencias codificando quitinasa se pueden obtener, por ejemplo, de American Type Culture Collection bajo los números de acceso Nos. 39637 y 67152. Ver también Karmer y otros, Insect Biochem. Molec. Biol., 23:691 (1993), que describe la secuencia de nucleotido de un cADN codificando quitinasa de helminto de tabaco; y Kawalleck y otros, Plant Molec. Biol., 21:673 (1993), que describe la secuencia de nucleotido del gen ub¡4-2 poliubiquitina de perejil.
Una molécula que estimula transducción de señal. Ver, por ejemplo, Botella y otros, Plant Molec. Biol., 24:757 (1994), que describe secuencias de nucleótido para clones de cADN calmodulina de frijol mungo; y Griess y otros, Plant Physiol., 104:1467 (1994), que describe la secuencia de nucleótido de un clon de cADN de calmodulina de maíz.
Un péptido antimicrobiano o anfifático. Ver solicitud de PCT WO 9516776 (describiendo derivados de péptido de Tachyplesin que inhiben patógenos de planta fúngica); y solicitud de PCT WO 9518855 (describiendo péptidos antimicrobianos sintéticos que confieren resistencia a enfermedad),
Una permeasa de membrana, un formador de canal o un bloqueador de canal. Ver, por ejemplo, Jaynes y otros, Plant Sci., 89:43 (1993), que describe expresión heterologa de un péptido lítico de cecropina análogo para hacer plantas de tabaco transgénico resistentes a Pseudomonas solanacearum.
Una proteína invasiva viral o una toxina compleja derivada de la misma. Por ejemplo, la acumulación de proteínas de capa viral en células vegetales transformadas induce resistencia a infección viral o desarrollo de enfermedad causado por el virus del cual se deriva el gen de proteina de capa, así como por virus
relacionados. Se ha conferido resistencia mediada por proteína de capa al transformar plantas contra virus de mosaico de alfalfa, virus de mosaico de pepino, virus de mancha de tabaco, virus X de papa, virus Y de papa, virus de grabado de tabaco, virus de cascabel de tabaco y virus de mosaico de -tabaco. Ver Beachy y otros, Ann. Rev. Phytopat ol., 28:451 (1990).
Un anticuerpo específico de insecto o una inmunotoxina derivada del mismo. De esta manera, un anticuerpo focalizado a una función metabólica crítica en el intestino del insecto inactiva una enzima afectada, matando al insecto. Ver Taylor y otros, resumen #497, Séptimo Simposio Internacional sobre Interacciones de Planta Molecular-Microbio (Edinburgo, Escocia, 1994) (inactivación enzimática en tabaco transgénico vía la producción de fragmentos de anticuerpo de una cadena). Un anticuerpo específico de virus. Ver, por ejemplo, Tavladoraki y otros, Nature, 366:469 (1993), mostrando protección de plantas transgénicas expresando genes de anticuerpo recombinante del ataque viral.
Una proteína de arresto de desarrollo producida en naturaleza por un patógeno o un parásito. Por ejemplo, endo-1 ,4-D-poligalacturonasas fúngicas facilitan la colonización fúngica y liberación de nutriente vegetal al solubilizar homo-1 ,4-D-galacturonasa de pared celular de
planta. Ver Lamb y otros, Bio/Technology, 10.1436 (1992). La clonación y caracterización de un gen que codifica una proteína inhibidora de endopoligalacturonasa de frijol se describe por Toubart y otros, Plant J., 2.367 (1992). ~
R. . Una proteína de arresto de desarrollo producida en naturaleza por una planta. Por ejemplo, Logemann y otros, Bio/Technology, 10:305 (1992) registró que plantas transgénicas expresando el gen desactivador de ribosoma de cebada tienen una resistencia aumentada a enfermedad fúngica.
Genes que confieren resistencia adicional a un herbicida, más allá de lo que es inherente en 'CL152', por ejemplo:
A. Un herbicida que inhibe el punto de crecimiento o meristema, tal como una imidazolinona o un sulfonilurea. Genes ejemplares en esta categoría codifican enzimas de ALS y AHAS mutantes como se describe, por ejemplo, por Lee y otros, EMBO J. , 7:1241 (1988); y Miki y otros, Theor. Appi. Genet., 80:449 (1990), respectivamente. Ver, adicionalmente, patentes de E.U.A. Nos. 5,545,822; 5,736,629; 5,773,703; 5,773,704; 5,952,553; 6,274,796; 6,943,280; 7,019,196; 7,345,221; 7,399,905; 7,495,153; 7,754,947; y 7,786,360; solicitud de patente internacional publicada WO 2010/059656; (en la actualidad) solicitudes de patente internacionales no publicadas
PCT/US2010/051749, y PCT/US2010/051780; y solicitudes de patente de E.U.A. No. publicadas US 2007/0061915, US 2010/0257623, y US 2009/0025108. La resistencia a herbicidas actuando de AHAS puede ser a través de un mecanismo diferente de una enzima de AHAS resistente. Ver, por ejemplo, patente de E.U.A. No. 5,545,822.
Glifosato. Se puede impartir resistencia por 5-enolpiruvl-3-fosfikimato sintasa mutante (EPSP) y genes aroA. Otros compuestos fosfono tal como glufosinato: Se puede impartir resistencia por fosf inotricina acetilo transferasa, PAT y fosf inotricin-acetilo transferasa de Streptomyces hygroscopicus , bar, genes. Ácidos propiónicos de piridinoxi o fenoxi y ciclohexanonas; Se puede impartir resistencia por genes codificando inhibidor de ACCasa. Ver, por ejemplo, patente de E.U.A. No. 4,940,835 a S ah y otros, que describe la secuencia de nucleótido de una forma de EPSP que confiere resistencia a glifosato. Una molécula de ADN codificando un gen aroA mutante se p-uede obtener bajo el número de acceso de ATCC 39256, y la secuencia de nucleótido del gen mutante se describe en la patente de E.U.A. No. 4,769,061 a Comai. Solicitud de patente europea No. 0333033 a Kumada y otros; y patente de E.U.A No. 4,975,374 a Goodman y otros, describen secuencias de nucleótido de genes de glutamina sintetasa que confieren resistencia a herbicidas
tal como L-fosf¡notricina. La secuencia de nucleótido de un gen de fosf inotricin-acetil-transferasa se provee en solicitud europea No. 0242246 a Leemans y otros y DeGreef y otros, Bio/Technology, 7:61 (1989), describiendo la producción de plantas transgénicas que expresan genes bar quiméricos codificando para actividad de f osf inotricina acetilo transferasa. Ejemplos de genes que confieren resistencia a ácidos fenoxi propiónicos y ciclohexonas, tales como setoxidim y haloxifop, son los genes Acc1-S1, Acc1-S2 y Acc1-S3 descritos por Marhall y otros, Theor. Appl. Genet., 83:435 (1992).
Un herbicida que inhibe fotosíntesis, tal como una triazina (genes psbA y gs + ) o un benzonitrilo (gen nitrilasa). Przibilla y otros, Plant Cell, 3:169 (1991), describen la transformación de Chlamydomonas con plásmidos que codifican gens psbA mutantes. Se describen secuencias de nucleótido para genes de nitrilasa en la patente de E.U.A. No. 4,810,648 a Stalker, y moléculas de ADN conteniendo estos genes están disponibles bajo los números de acceso de ATCC Nos. 53435, 67441 y 67442. La clonación y expresión de ADN codificando para una glutationa S-transferasa se describe por Hayes y otros, Biochem. J. , 285:173 (1992).
Genes que confieren o contribuyen a un rasgo de valor agregado, tal como:
A. Metabolismo de ácido graso modificado, por ejemplo, al transformar una planta con una secuencia antisentido a estearil-ACP desaturasa, para aumentar el contenido de ácido esteárico de la planta. Ver Knultzon y otros, Proc.. Nati. Acad. Sci. U.S. A. 89:2624 (1992).
B. Contenido de fitato disminuido
1) Introducción de un gen que codifica fitasa mejoraría la descomposición de fitato, agregando más fosfato libre a la planta transformada. Ver, por ejemplo, Van Hartingsveldt y otros, Gene, 127:87 (1993), que describe la secuencia de nucleótido de un gen de fitasa Apergillus niger.
2) Un gen se puede introducir para reducir contenido de fitato. Por ejemplo, esto se puede lograr al clonar, y después reintroduciendo ADN asociado con un alelo que es responsable para mutantes de maíz caracterizados por niveles bajos de ácido fítico, o se puede usar una
. mutación homologa o análoga en arroz. Ver Raboy y otros, Maydica, 35:383 (1990).
C. Se puede modificar la composición de carbohidrato, por ejemplo, al transformar plantas con un gen codificando una enzima que altera el patrón de ramificación de almidón. Ver Shiroza y otros, J. Bacteol.; 170:810 (1988)
secuencia de nucleótido de gen fructosiltransferasa mutante Streptococcus); Steinmetz y otros, Mol. Gen. Genet., 20:220 (1985) (secuencia de nucleótido de gen levansucrasa Bacillus subtilis); Pen y otros, Bio/Technology, 10:292 (1992) (producción de plantas transgénicas que expresan amilasa Bacillus licheniformis); Elliot y otros, Plant Molec. Biol., 21:515 (1993) (secuencias de nucleótido de genes invertasa de jitomate); Sogaard y otros, J. Biol. Chem., 268:22480 (1993) (mutagénesis dirigida en sitio de gen amilasa de cebada); y Fisher y otros, Plant Physiol., 102:1045 (1993) (enzima 11 de ramificación de almidón de endosperma de maíz).
Métodos para transformación de raíz
Numerosos métodos para transformación de planta son conocidos en la técnica, incluyendo ambos protocolos de transformación biológica y física. Ver, por ejemplo, Miki y otros, "Procedures for Introducing Foreign DNA into Plañís" en Methods in Plant Molecular Biology and Biotechnology; Glick B. R. y Thompson, J. E. (Eds.) (CRC Press, Inc., Boca Ratón, 1993), pp. 67-88. Además, los vectores de expresión y métodos de cultivo in vitro para transformación de célula o tejido vegetal y regeneración de plantas son conocidos en la técnica. Ver, por ejemplo, Gruber y otros, "Vectors for Plant Transformation" en Methods in Plant Molecular
Biology and Biotechnology, Glick B. R. y Thompson, J. E. (Eds.) (CRC Press, Inc., Boca Ratón, 1993), pp. 89-119.
A. Transformación mediada con Agrobacterium
Un método para introducir un vector de expresión en plantas se basa en el sistema de transformación natural de Agrobacterium. Ver, por ejemplo, Horsch y otros, Science, 227:1229 (1985). A. tumefaciens y A. rhizogenes son bacterias de suelo patogénicos de planta que genéticamente transforman células vegetales. Los plásmidos Ti y Ri de A. tumefaciens y A. rhizogenes, respectivamente, portan genes responsables por la transformación genética de plantas. Ver, por ejemplo, Kado, C. I., Crit. Rev. Piant Sci., 10:1 (1991). Se proveen descripciones de sistemas de vector Agrobacterium y métodos para transferencia de gen mediada por Agrobacterium por Gruber y otros, supra; Miki y otros; y Moloney y otros, Plant Cell Reports, 8:238 (1989). Ver también patente de E.U.A. No. 5,591 ,616.
ß. Transferencia de Genes Directa
A pesar del hecho de que el rango de huésped para transformación mediada con Agrobacterium es amplio, es más difícil transformar algunas especies de cosecha de cereal y gimnospermas vía este modo de transferencia de genes, aunque se ha tenido éxito tanto en arroz como maíz. Ver Hiei y otros, The Plant Journal, 6:271-282 (1994); y patente de E.U.A. No! 5,591,616. Otros métodos de
transformación de planta existen como alternativas a transformación mediada con Agrobacterium .
Un método generalmente aplicable de transformación de planta es transformación mediada con microproyectil (denominado "pistola de genes"), en - donde ADN es portado en la superficie de microproyectiles, típicamente 1 a 4 µ?? en diámetro. El vector de expresión se introduce en tejidos vegetales con un dispositivo biolistico que acelera los microproyectiles a velocidades típicas de 300 a 600 m/s, suficiente para penetrar paredes y membranas de célula vegetal. Sanford y otros, Parí. Sci. Technol., 5.27 (1987); Sandford, J. C, Trends Biotech., 6:299 (1988); Klein y otros, Bio/Technology, 6:559-563 . (1988); Sanford, J. C, Physiol Plant, 7:206 (1990); y Klein y otros, Biotechnology, 10:268 (1992). Varios tejidos diana se pueden bombardear con microproyectiles mediados con ADN para producir plantas transgénicas, incluyendo, por ejemplo, callo (tipo I o tipo II), embriones inmaduros y tejido meristemátíco.
Otro método para entrega física de ADN a plantas es sonicación de células diana Zhang y otros, Bio/Technology, 9:996 (1991). Alternativamente, se ha usado fusión de lipos ma y esferoplasto para introducir vectores de expresión en plantas. Deshayes y otros, EMBO J. , 4:2731 (1985); y Christou y otros, Proc Nati. Sci. U.S. A., 84:3962 (1987). La absorción directa de ADN en protoplastos, usando precipitación de CaCI2, alcohol polivinílico o poli-L-ornitina, también se ha registrado. Hain y otros, Mol. Gen.
Genet., 199:161 (1985); y Draper y otros, Plant Cell Physiol., 23:451 (1982). La electroporación de protoplastos y células enteras y tejidos también se ha descrito. Donn y otros, en "Abstracts of Vllth International Congress on Plant Cell and Tissue Culture IAPTC", A2-38, p. 53 (1990); D'Halluin y otros, Plant Cell, 4:1495-1505 (1992); y Spencer y otros, Plant Mol. Biol., 24:51-61 (1994).
Después de la transformación de tejidos diana de arroz, la expresión de un gen marcador que se puede seleccionar permite selección preferencial de células, tejidos o plantas transformadas, usando métodos de regeneración y selección conocidos en la técnica.
Estos métodos de transformación se pueden usar para producir una línea engendrada por endogamia transgénica. La línea engendrada por endogamia transgénica entonces se puede cruzar con otra línea engendrada por endogamia (en sí transformada o no transformada), para producir una nueva línea engendrada por endogamia transgénica. Alternati amente, un rasgo genético que se ha maquinado en una línea de arroz particular se puede mover en otra línea usando técnicas de cruzado e hibridación cruzada tradicionales. Por ejemplo, la hibridación cruzada se puede usar para mover un rasgo maquinado desde una línea engendrada por endogamia no élite pública en una linea engendrada por endogamia élite, o de una linea engendrada por endogamia que contiene un gen extraño en su genoma en una línea o líneas engendradas por endogamia que no contienen un gen.
El término "planta de arroz engendrada por endogamia" se debe entender que también incluye conversiones de un solo gen de una línea engendrada por endogamia. Se pueden usar métodos de hibridación cruzada con la presente invención para mejorar o introducir una característica en una linea engendrada por endogamia.
Muchos rasgos de un solo gen se han identificado que no son seleccionados de manera regular para el desarrollo de una nueva línea engendrada por endogamia, sino se puede mejorar por cruza e hibridación cruzada. Los rasgos de un gen pueden ser o no transgénicos. Ejemplos de dichos rasgos incluyen esterilidad masculina, almidón ceroso, resistencia a herbicida, resistencia por enfermedad bacteriana o fúngica o viral, resistencia a insectos, fertilidad masculina, calidad nutricional mejorada, estabilidad a rendimiento y mejora de rendimiento. Estos genes en general son heredados a través del núcleo. Las excepciones conocidas a los genes nucleares incluyen algunos genes para esterilidad masculina que son heredados cítoplásmicamente, pero que todavía actúan como rasgos de un gen. Varios rasgos de un gen se describen en las patentes de E.U.A. Nos. 5,777,196; 5,948,957; y 5,969,212.
INFORMACIÓN DE DEPÓSITO
Una muestra del cultivo de arroz designado 'CL152' se depositó con la colección de cultivo de tipo americano (ATCC), 10801
University Boulevard, Manassas, Virginia 20110-2209 el 15 de marzo de 2011, y se asignó número de acceso de ATCC No. PTA-11753. Este depósito se hizo bajo el Tratado de Budapest.
MISCELÁNEO
Las descripciones completas de todas las referencias citadas en esta especificación se incorporan a la presente por referencia, incluyendo la descripción completa de la solicitud de prioridad 61/469,866. En caso de un conflicto de lo contrario irreconciliable, no obstante, la presente especificación deberá controlar.
Claims (1)
- REIVINDICACIONES 1 - Una semilla de arroz de la variedad 'CL152', en donde una muestra representativa de dicha semilla se ha depositado bajo el número de acceso de ATCC No. PTA-11753. 2.- Una planta, o upa parte de la misma, producida al crecer la semilla de conformidad con la reivindicación 1. 3 - Un método para producir plantas de arroz, dicho método que comprende plantar una pluralidad de semillas de arroz de conformidad con la reivindicación 1 bajo condiciones favorables para el crecimiento de plantas de arroz. 4.- El método de conformidad con la reivindicación 3, que comprende adicionalmente el paso de producir semilla de arroz de las plantas de arroz resultantes. 5.- La semilla de arroz producida por el método de conformidad con la reivindicación 4. 6. - El método de conformidad con la reivindicación 3, que comprende adicionalmente el paso de aplicar herbicida en la vecindad de las plantas- de arroz para controlar mala hierba, en donde el herbicida normalmente inhibe acetohidroácido sintasa, a niveles que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz. 7. - El método de conformidad con la reivindicación 6, en donde el herbicida comprende una sulfonilurea. 8 - El método de conformidad con la reivindicación 6, en donde el herbicida comprende una ¡m idazolinona. 9.- El método de conformidad con la reivindicación 6, en donde el herbicida comprende imazetapir o imazamox. 10.- Polen de la planta de conformidad con la reivindicación 2. 11. - Un óvulo de la planta de conformidad con la reivindicación 2. 12. - Una planta de arroz, o una parte de la misma, teniendo en esencia todas las características fisiológicas y morfológicas de la planta de arroz de conformidad con la reivindicación 2, incluyendo las características de 'CL152' resistentes a herbicida de i m idazolinona 13 - Un cultivo de tejido de células regenerables o protoplastos producidos de la planta de arroz de conformidad con la reivindicación 2. 14.- El cultivo de tejido de conformidad con la reivindicación 13, en donde dichas células o protoplastos son producidos de un tejido seleccionado a partir del grupo que consiste de embriones, células meristemáticas, polen, hojas, anteras, raíces, puntas de raíz, flores, semillas y tallos. 15 - Una planta de arroz generada del cultivo de tejido de conformidad con la reivindicación 14, dicha planta de arroz teniendo todas o en esencia todas las características morfológicas y fisiológicas de 'CL152', incluyendo las características de 'CL152' resistentes a herbicida de imidazolinona. 16. - Un método para producir semilla de arroz, dicho método que comprende cruzar una primera planta de arroz pariente con una segunda planta de arroz pariente, y cosechando la semilla de arroz híbrido resultante, en donde la primera planta de arroz pariente o la segunda - planta de arroz pariente es la planta de arroz de conformidad con la reivindicación 2, en donde, si la semilla de arroz híbrido crece, entonces las plantas de arroz crecidas de la semilla de arroz híbrido expresarán las características de 'CL152' resistentes a herbicida de imidazolinona. 17. - Una semilla de arroz híbrido producida por el método de conformidad con la reivindicación 16, en donde, si crece dicha semilla de arroz híbrido, entonces las plantas de arroz crecidas de dicha semilla de arroz híbrido expresarán las características de 'CL152' resistentes a herbicida de imidazolinona. 18. - El método de conformidad con la reivindicación 16, que comprende adicionalmente el paso de plantar una pluralidad de la semilla de arroz híbrido bajo condiciones favorables para el crecimiento de plantas de arroz. 19. - El método de conformidad con la reivindicación 18, que comprende adicionalmente el paso de producir semilla de arroz de las plantas de arroz resultantes; en donde, si la semilla de arroz resultante crece, entonces por lo menos algunas plantas de arroz crecidas de la semilla de arroz resultante expresarán las características de 'CL152' resistentes a herbicida de imidazolinona. 20.- Una pluralidad de semilla de arroz producida por el método de conformidad con la rei indicación 19, en donde, si dicha semilla de arroz resultante crece, entonces por lo menos algunas de las plantas de arroz crecidas de dicha semilla de arroz resultante expresará las características de 'CL152' resistentes a herbicida de imidazolinona. 21 - El método de conformidad con la reivindicación 18, que comprende adicionalmente el paso de aplicar herbicida en la vecindad de las plantas de arroz para controlar mala hierba, en donde el herbicida normalmente inhibe acetohidroxiácido sintasa, a niveles del herbicida que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz. 22.- El método de conformidad con. la reivindicación 21, en donde el herbicida comprende una sulfonilurea. 23.- El método de conformidad con la reivindicación 21, en donde el herbicida comprende una imidazolinona. 24 - El método de conformidad con la reivindicación 21, en donde el herbicida comprende imezatapir o imazamox. 25.- Un método para producir una planta de arroz con múltiples fuentes de resistencia a herbicida, dicho método que comprende transformar la planta de arroz de conformidad con la reivindicación 2 con un transgen que confiere resistencia a herbicida, además de la resistencia a herbicida que es inherente en el arroz de CL152'. 26 - Una planta de arroz resistente a herbicida o semilla de arroz producida por el método de conformidad con la reivindicación 25. 27.- Un método de producir una planta de arroz resistente a insecto, dicho método que comprende transformar la planta de arroz de conformidad con la reivindicación 2 con un transgen que confiere resistencia a insecto. 28 - Una planta de arroz resistente a insecto o semilla de arroz producida por el método de conformidad con la reivindicación 27. 29 - Un método de producir una planta de arroz resistente a enfermedad, dicho método que comprende transformar la planta de arroz de conformidad con la reivindicación 2 con un transgen que confiere resistencia a enfermedad. 30. - Una planta de arroz resistente a enfermedad o semilla de arroz producida por el método de conformidad con la reivindicación 29. 31. - Un método de producir una planta de arroz con ácido graso modificado o metabolismo de carbohidrato modificado, dicho método que comprende transformar la planta de arroz de conformidad con la reivindicación 2 con al menos un transgen codificando una proteína seleccionada a partir del grupo que consiste de fructosiltransferasa, levansucrasa, alfa-amilasa, invertasa y enzima de ramificación de almidón; o codificando una secuencia anti-sentido a estearilo-AC P desaturasa. 32 - Una planta de arroz o semilla de arroz teniendo ácido graso modificado o metabolismo de carbohidrato modificado, en donde dicha planta de arroz o semilla de arroz se produce por el método de conformidad con la reivindicación 31. 33.- Un método de introducir un rasgo deseado en cultivo de arroz 'CL152', dicho método que comprende los pasos de: (a) cruzar plantas de conformidad con la reivindicación 2 con plantas de otra linea de arroz expresando el rasgo deseado, para producir plantas de progenie; (b) seleccionar plantas de progenie que expresen el rasgo deseado, para producir plantas de progenie seleccionadas; (c) cruzar las plantas de progenie seleccionadas con plantas de conformidad con la reivindicación 2 para producir plantas de progenie nuevas; (d) seleccionar nuevas plantas de progenie que expresen tanto el rasgo deseado como algunas o todas las características fisiológicas y morfológicas del cultivo de arroz 'CL152', para producir nuevas plantas de progenie seleccionadas, y (e) repetir los pasos (c) y (d) tres o más veces en sucesión, para producir plantas de progenie de hibridación cruzada de generación más alta seleccionadas que expresen tanto el rasgo deseado como esencialmente todas las características fisiológicas y morfológicas del cultivo de arroz 'CL152', como se describe en la INFORMACIÓN DE DESCRIPCIÓN DE VARIEDAD de la especificación, determinado a un nivel de 5% de importancia, cuando crecen en las mismas condiciones ambientales; y en donde las plantas seleccionadas expresan las características de 'CL152' resistentes a herbicida de imidazolinona. 34. - Una semilla de arroz producida por el método de _ conformidad con la reivindicación 33, en donde, si dicha semilla de arroz crece, entonces las plantas de arroz crecidas de dicha semilla de arroz expresarán las características de 'CL152' resistentes a h'erbicida de imidazolinona. 35. - El método de conformidad con la reivindicación 33, que comprende adicionalmente el paso de plantar una pluralidad de semilla de arroz producida por plantas de progenie de hibridación cruzada de mayor generación seleccionadas bajo condiciones favorables para el crecimiento de plantas de arroz. 36 - El método de conformidad con la reivindicación 35, que comprende adicionalmente el paso de producir semilla de arroz de las plantas de arroz resultantes. _ 37 - La semilla de arroz resultante del método de conformidad con la reivindicación 36, en donde, si dicha semilla de arroz resultante crece, entonces las plantas de arroz crecidas de dicha semilla de arroz resultante expresarán las características de 'CL152' resistentes a herbicida de imidazolinona. 38.- El método de conformidad con la reivindicación 35, que comprende adicionalmente el paso de aplicar herbicida en la vecindad de las plantas de arroz para controlar mala hierba, en donde el herbicida normalmente inhibe acetohidroxiácido sintasa, a niveles del herbicida que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz. 39.- El método de conformidad con la reivindicación 38, en donde el herbicida comprende una sulfonilurea. 40.- El método de conformidad con la reivindicación 38, en donde el herbicida comprende una imidazolinona. 41. - El método de conformidad con la reivindicación 38, en donde el herbicida comprende imazetapir o imazamox. 42. - El método de conformidad con la reivindicación 33, en donde el rasgo deseado se selecciona a partir del grupo que consiste de esterilidad masculina; resistencia a herbicida; resistencia a insecto; y resistencia a enfermedad bacteriana, fúngica o viral. 43 - Un método para producir semilla de arroz híbrido, dicho método que comprende cruzar una primera planta de arroz pariente con una segunda planta de arroz pariente, y cosechar la semilla de arroz híbrido resultante, en donde la primera planta de arroz pariente, o la segunda planta de arroz pariente, pero no ambas, es una planta de arroz de la variedad 'CL152', en donde una muestra representativa de semilla de arroz de la variedad 'CL152' se ha depositado bajo el número de acceso de ATCC No. PTA-11753, y en donde, sí la semilla de arroz híbrido crece, entonces las plantas de arroz híbrido resultantes expresarán las siguientes características: (a) la planta de arroz híbrido expresa una sintasa de acetohidroxiácido mutante cuya actividad enzimática es directamente resistente a niveles normalmente inhibidores de una imidazolinona herbicidamente efectiva; (b) la planta de arroz híbrido es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de imidazolinona, a niveles de los herbicidas de imidazolinona que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: imazetapir, imazapic, imazaquin, imazamox e imazapir; (c) la planta de arroz híbrido es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: nicosulfuron, metilo de metsulfuron, metilo de tifensulfuron y metilo de tribenuron; y (d) la planta de arroz híbrido es sensible a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: metilo de sulfometuron, etilo de clorimuron y rimsulfuron. 44 - La semilla de arroz híbrido producida por el método de conformidad con la reivindicación 43, en donde, si dicha semilla de arroz híbrido crece, entonces las plantas de arroz híbrido resultantes expresarán las siguientes características: (a) la planta de arroz híbrido expresa una sintasa de acetohidroxiácido mutante cuya actividad enzimática es directamente resistente a niveles normalmente inhibidores de una imidazolinona herbicidamente efectiva; (b) la planta de arroz híbrido es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de imidazolinona , a niveles de los herbicidas de imidazolinona que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: imazetapir, imazapic, imazaquin, imazamox e i m a z a p i r ; (c) la planta de arroz híbrido es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: nicosulf uron, metilo de metsulfuron, metilo de tifensulf uron y metilo de tribenuron; (d) la planta de arroz híbrido es sensible a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: metilo de sulfometuron, etilo de clorimuron y rimsulfuron. 45.- Una planta de arroz híbrido, o una parte de la misma, producida al crecer la semilla de arroz híbrido de conformidad con la reivindicación 44. 46 - Un método para producir plantas de arroz, dicho método que comprende plantar una pluralidad de semillas de arroz híbrido de conformidad con la reivindicación 44 bajo condiciones favorables para el crecimiento de plantas de arroz. 47.- El método de conformidad con la reivindicación 46, que comprende adicionalmente el paso de cosechar semilla de arroz producida por las plantas de arroz híbrido resultantes. 48 - La semilla de arroz cosechada por el método de conformidad con la reivindicación 47. 49.- El método de conformidad con la reivindicación 46, que comprende adicionalmente el paso de aplicar herbicida en la vecindad de las plantas de arroz para controlar mala hierba, en donde el herbicida normalmente inhibe acetohidroxiácido sintasa, a niveles del herbicida que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz. 50 - El método de conformidad con la reivindicación 49, en donde el herbicida comprende una sulfonilurea herbicidamente efectiva. 51.- El método de conformidad con la reivindicación 49, en donde el herbicida comprende una imidazolinona herbicidamente efectiva. 52.- El método de conformidad con la reivindicación 49, en donde el herbicida comprende imazetapir o imazamox. 53. - El método de conformidad con la reivindicación 44, en donde el primer pariente o el segundo pariente es masculino estéril. 54. - Un método para producir semilla de arroz con múltiples fuentes de resistencia a herbicida; dicho método que comprende transformar una planta de arroz de la variedad 'CL152' con un transgen que confiere resistencia a herbicida, además de la resistencia a herbicida que es inherente en arroz 'CL152'; en donde una muestra representativa de semilla de arroz de la variedad 'CL152' se ha depositado bajo el número de acceso de ATCC No. PTA-11753, y en donde, las plantas de arroz transformadas expresan las siguientes características: (a) la planta de arroz expresa una sintasa de acetohidroxiácido muíante cuya actividad enzimática es directamente resistente a niveles normalmente inhibidores de una imidazolinona herbicidamente efectiva; (b) la planta de arroz es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de imidazolinona, a niveles de los herbicidas de imidazolinona que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: imazetapir, imazapic, imazaquin, ¡mazamox e i m a z a p i r ; (c) la planta de arroz es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: nicosulfuron, metilo de metsulfuron, metilo de tifensu Ifuron y metilo de tribenuron; y (d) la planta de arroz es sensible a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: metilo de sulfometuron, etilo de clorimuron y rimsulfuron. 55 - Una planta de arroz resistente a herbicida o semilla de arroz producida por el método de conformidad con la reivindicación 54, en donde las plantas de arroz transformadas o las plantas de arroz crecidas de la semilla de arroz transformada expresarán las siguientes características: (a) la planta de arroz expresa una sintasa de acetohidroxiácido muíante cuya actividad enzimática es directamente resistente a niveles normalmente inhibidores de una imidazolinona herbicidamente efectiva; (b) la planta de arroz es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de imidazolinona, a niveles de los herbicidas de imidazolinona que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: imazetapir, imazapíc, imazaquin, imazamox e ima.zapir; (c) la planta de arroz es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea , a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: nicosulfuron , metilo de metsulfuron, metilo de tifensulfuron y metilo de tribenuron; y (d) la planta de arroz es sensible a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: metilo de sulfometuron, etilo de clorimuron y rimsulfuron. 56.- Un método de producir una planta de arroz resistente a insecto, dicho método que comprende transformar una planta de arroz de la variedad 'CL152' con un transgen que confiere resistencia a insecto; en donde una muestra representati a de semilla de arroz de la variedad 'CL152' se ha depositado bajo el número de acceso de ATCC no. PTA-11753. 57 - Una planta de arroz resistente a insecto o semilla de arroz producida por el método de conformidad con la reivindicación 56. 58 - Un método de producir una planta de arroz resistente a enfermedad, dicho método que comprende transformar una planta de arroz de la variedad 'CL152' con un transgen que confiere resistencia a enfermedad, en donde una muestra representativa de semilla de arroz de la variedad 'CL152' se ha depositado bajo el número de acceso de ATCC No. PTA-11753. 59 - Una planta de arroz resistente a enfermedad o semilla de arroz producida por el método de conformidad con la reivindicación 58. 60 - Un método de producir una planta de arroz con ácido graso modificado o metabolismo de carbohidrato, dicho método que comprende transformar una planta de arroz de la variedad 'CL152' con por lo menos un transgen codificando una proteina seleccionada a partir del grupo que consiste de fructosiltransferasa, levansucrasa, alfa-amilasa, invertasa y enzima de ramificación de almidón; o codificando una secuencia de antisentido a estearilo-ACP desaturasa; en donde una muestra representativa de semilla de arroz de la variedad 'CL152' se ha depositado bajo el número de acceso de ATCC No. PTA-11753. 51 - Una planta de arroz o semilla de arroz teniendo ácido graso modificado o metabolismo de carbohidrato, en donde dicha planta de arroz o semilla de arroz se produce por el método de conformidad con la reivindicación 60. 62 - Un método de introducir un rasgo deseado en cultivo de arroz 'CL152', dicho método que comprende los pasos de: (a) cruzar cultivo de arroz 'CL152' con plantas de otra línea de arroz expresando el rasgo deseado, para producir plantas de progenie, en donde una muestra representativa de semilla de arroz de la variedad 'CL152' se ha depositado bajo el número de acceso de ATCC No. PTA-11753; (b) seleccionar plantas de progenie que expresen el rasgo deseado, para producir plantas de progenie seleccionadas; (c) cruzar las plantas de progenie seleccionadas con plantas de 'CL152' para producir plantas de progenie nuevas; (d) seleccionar nuevas plantas de progenie que expresen tanto el rasgo deseado como algunas o todas las características fisiológicas y morfológicas del cultivo de arroz 'CL152', para producir nuevas plantas de progenie seleccionadas; y (e) repetir los pasos (c) y (d) tres o más veces en sucesión, para producir plantas de progenie de hibridación cruzada de generación más alta seleccionadas que expresen tanto el rasgo deseado como esencialmente todas las características fisiológicas y morfológicas del cultivo de arroz 'CL152', como se describe en la INFORMACIÓN DE DESCRIPCIÓN DE VARIEDAD de la especificación, determinado a un nivel de 5% de importancia, cuando crecen en las mismas condiciones ambientales; en donde: (f) la planta de progenie de hibridación cruzada de generación superior seleccionada expresa una sintasa de acetohidroxiácido mutante cuya actividad enzimática es directamente resistente a niveles normalmente inhibidores de una imidazolinona herbicidamente efectiva; (g) la planta de progenie de hibridación cruzada de generación superior seleccionada es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de imidazolinona, a niveles de los herbicidas de imidazolinona que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: imazetapir, imazapic, imazaquin, imazamox e imazapir; (h) la planta de progenie de hibridación cruzada de generación superior seleccionada es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: nicosulfuron, metilo de metsulfuron, metilo de tifensulfuron y metilo de tribenuron; y (i) la planta de progenie de hibridación cruzada de generación superior seleccionada es sensible a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: metilo de sulfometuron, etilo de clorimuron y rimsulfuron, metilo de tribenuron; y (j) la planta de progenie de hibridación cruzada de generación superior seleccionada expresa el rasgo deseado. 63 - Semilla de arroz cosechada de plantas de progenie de hibridación cruzada de generación superior seleccionadas producidas por el método de conformidad con la reivindicación 62, en donde, si dicha semilla de arroz crece, entonces las plantas de arroz híbrido resultantes expresarán las siguientes características: (a) la planta de arroz expresa una sintasa de acetohidroxiácido mutante cuya actividad enzimática es directamente resistente a niveles normalmente * inhibidores de una imidazolinona herbicidamente efectiva; (b) la planta de arroz es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de imidazolinona, a niveles de los herbicidas de imidazolinona que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: imazetapir, imazapic, ¡mazaquin, imazamox e imazapir; (c) la planta de arroz es resistente a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz: nicosulfuron, metilo de metsulfuron, metilo de tifensulfuron y metilo de tribenuron; (d) la planta de arroz es sensible a cada uno de los siguientes herbicidas de sulfonilurea, a niveles de los herbicidas de sulfonilurea que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz, metilo de sulfometuron , etilo de clorimuron y rimsulfuron; y (e) la planta de arroz expresa el rasgo deseado. 64 - El método de conformidad con la reivindicación 62, que comprende adicionalmente el paso de plantar, bajo condiciones favorables el crecimiento de plantas de arroz, una pluralidad de semilla de arroz cosechada de plantas de progenie de hibridación cruzada de generación superior seleccionadas. 65.- El ^método de conformidad con la reivindicación 64, que comprende adicionalmente el paso de cosechar semilla de arroz producida por las plantas de arroz resultantes. 66 - La semilla de arroz cosechada por el método de conformidad con la reivindicación 65. 67. - El método de conformidad con la reivindicación 64, que comprende adicionalmente el paso de aplicar herbicida en la vecindad de las plantas de arroz para controlar mala hierba, en donde el herbicida normalmente inhibe acetohidroxiácido sintasa, a niveles del herbicida que normalmente inhibirían el crecimiento de una planta de arroz. 68. - El método de conformidad con la reivindicación 67, en donde el herbicida comprende una sulfonilurea herbicidamente efectiva. 69. - El método de conformidad con la reivindicación 67, en donde el herbicida comprende una imidazolinona herbicidamente efectiva. 70. - El método de conformidad con la reivindicación 67, en donde el herbicida comprende imazetapir o imazamox. 71.- El método de conformidad con la reivindicación 62, en donde el rasgo deseado se selecciona a partir del grupo que consiste de esterilidad masculina; resistencia a herbicida; resistencia a insecto; y resistencia a enfermedad bacteriana, fúngica o viral. 72 - Un método para controlar mala hierba en la vecindad de arroz, que comprende contactar el arroz con un herbicida, en donde dicho arroz pertenece a cualquiera de (a) variedad 'CL152' o (b) o híbrido, derivado, o progenie de 'CL152' que expresa las características de 'CL152' resistentes a herbicida de imidazolinona. 73.- El método de conformidad con la reivindicación 72, en donde el herbicida es un herbicida de imidazolinona, un herbicida de sulfonilurea, o una combinación de los mismos. 74.- El método de conformidad con la reivindicación 72, en donde el arroz es una planta de arroz, y dicho contacto comprende aplicar el herbicida en la vecindad de la planta de arroz. -75.- El método de conformidad con la reivindicación 74, en donde el herbicida se aplica a mala hierba en la vecindad de la planta de arroz. 76 - El método de conformidad con la reivindicación 72, en donde~el arroz es una semilla de arroz y dicho contacto comprende aplicar el herbicida a la semilla de arroz. 77.- Un método para tratar arroz, que comprende contactar el arroz con una composición agronómicamente aceptable, en donde dicho arroz pertenece a cualquiera de (a) variedad 'CL152' o (b) un híbrido, derivado o progenie de 'CL152' que expresa las características de 'CL152' resistentes a herbicida de imidazolinona. 78. - El método de conformidad con la reivindicación 77, en donde la composición agronómicamente aceptable comprende por lo menos un ingrediente activo agronómicamente aceptable. 79. - El método de conformidad con la reivindicación 78, en donde el ingrediente activo agronómicamente aceptable se selecciona a partir del grupo que consiste de fungicidas, insecticidas, antibióticos, compuestos potenciadores tolerantes a estrés, promotores de crecimiento, herbicidas, moluscicidas, rodenticidas, repelentes de animales y combinaciones de los mismos. 80. - El método de conformidad con la reivindicación 77, en donde el arroz tratado es semilla de arroz, y en donde dicho contacto comprende aplicar un herbicida de imidazolinona a la semilla de arroz. 81. - Una planta de arroz de progenie o variedad obtenible de la linea de arroz 'CL152', una muestra representativa de semillas de dicha línea 'CL152' habiendo sido depositada bajo número de acceso de ATCC No. PTA-11753, dicha línea 'CL152' habiendo sido producida por un proceso que comprende: (a) proveer una semilla de arroz de la variedad de ciprés (USDA ARS GRIN NPGS número de acceso Pl 561734); y (b) mutar dicha semilla de arroz para producir una planta alterada que contiene en su genoma un gen AHASL que codifica un pojipéptido de AHASL teniendo, relativo al polipéptido de AHASL de tipo silvestre del arroz de ciprés, una sustitución de asparagina (N) en la posición 653 de aminoácido (numeración de AHASL Arabidopsis thaliana) o posición equivalente, y además cultivando la planta alterada, en donde dicha planta alterada del paso (b) exhibe, al expresar dicho gen AHASL, una tolerancia a un herbicida de imidazolinona en comparación con aquella de plantas de dicha variedad de ciprés, y plantas de dicha línea 'CL152' y plantas de dicha línea o variedad de progenie contienen dicho gen AHASL y exhiben dicha tolerancia aumentada. 82 - Una planta de arroz de progenie o variedad obtenible de la línea de arroz 'CL152', una muestra representativa de semillas de dicha línea 'CL152' habiendo sído depositada bajo número de acceso de ATCC No. PTA-11753, dicha línea 'CL152' habiendo sido producida por un proceso que comprende: (a) proveer una semilla de arroz de la variedad de ciprés (USDA ARS GRIN NPGS número de acceso Pl 561734); y (b) mutar dicha semilla de arroz para producir una planta alterada que contiene en su genoma un gen AHASL qué codifica un polipépt.ido de AHASL teniendo, relativo al polipéptido de AHASL de tipo silvestre del arroz de ciprés, una sustitución de asparagina (N) en la posición 653 de aminoácido (numeración de AHASL Arabidopsis thaliana) o posición equivalente, y además cultivando la planta alterada, en donde dicha planta alterada del paso (b) exhibe, al expresar dicho gen AHASL, una tolerancia a un herbicida de imidazolinona en comparación con aquella de plantas de dicha variedad de ciprés, y plantas de dicha linea 'CL152' y plantas de dicha línea o variedad de progenie contienen dicho gen AHASL y exhiben dicha tolerancia aumentada. 83.- Una planta de arroz de progenie o variedad obtenible de la línea de arroz 'CL152', una muestra representativa de semillas de dicha línea 'CL152' habiendo sido depositada bajo número de acceso de ATCC No. PTA-11753, dicha línea 'CL152' habiendo sido producida por un proceso que comprende: (a) proveer una semilla de arroz de la variedad de ciprés (USDA ARS GRIN NPGS número de acceso Pl 561734); y (b) mutar dicha semilla de arroz para producir una planta alterada que contiene en su genoma un gen AHASL que codifica un polipéptido de AHASL teniendo, relativo al polipéptido de AHASL de tipo silvestre del arroz de ciprés, una sustitución de asparagina (N) en la posición 653 de aminoácido (numeración de AHASL Arabidopsis thaliana) o posición equivalente, y además cultivando la planta alterada, en donde dicha planta alterada del paso (b) exhibe, al expresar dicho gen AHASL, una tolerancia a un herbicida de imidazolinona en comparación con aquella de plantas de dicha variedad de ciprés, y plantas de dicha línea 'CL152' y dicha planta de progenie comprenden dicho gen AHASL y exhiben dicha tolerancia aumentada. 84 - Una planta de arroz de progenie obtenida de la línea de arroz 'CL152', una muestra representativa de semillas de dicha linea 'CL152' habiendo sido depositada bajo número de acceso de ATCC No. PTA-11753, dicha línea 'CL152' habiendo sido producida por un proceso que comprende: (a) proveer una semilla de arroz de la variedad de ciprés (USDA ARS GRIN NPGS número de acceso Pl 561734); y (b) mutar dicha semilla de arroz para producir una planta alterada que contiene en su genoma un gen AHASL que codifica un polipéptido de AHASL teniendo, relativo al polipéptido de AHASL de tipo silvestre del arroz de ciprés, una sustitución de asparagina (N) en la posición 653 de aminoácido (numeración de AHASL Arabidopsis thaliana) o posición equivalente, y además cultivando la planta alterada, en donde dicha planta alterada del paso (b) exhibe, al expresar dicho gen AHASL, una tolerancia a un herbicida de imidazolinona en comparación con aquella de plantas de dicha variedad de ciprés, y plantas de dicha línea CL152' y dicha planta de progenie comprenden dicho gen AHASL y exhiben dicha tolerancia aumentada. 85 - Una planta de arroz de la línea de arroz 'CL152', una muestra representativa de semillas de dicha linea 'CL152' habiendo sido depositada bajo número de acceso de ATCC No. PTA-11753, la planta de progenie siendo obtenible por un proceso que comprende: (a) proveer una planta de la línea CL152', o tejido, semilla, o célula de la misma; y (b) mutar o transformar dicha planta, tejido, semilla o célula del paso (a) para producir una planta alterada que contiene en su genoma un gen AHASL que codifica un polipéptido de AHASL teniendo, relativo al polipéptido de AHASL de tipo silvestre del arroz de ciprés, una sustitución de asparagina (N) en la posición 653 de aminoácido (numeración de AHASL Arabidopsis thaliana) o posición equivalente, y además cultivando la planta alterada, en donde dicha planta alterada del paso (b) exhibe, al expresar dicho gen AHASL, una tolerancia aumentada a un herbicida de imidazoiinona en comparación con aquella de planta de arroz de tipo silvestre. 86.- Una planta de arroz de la linea de arroz 'CL152', una muestra representativa de semillas de dicha línea 'CL152' habiendo sido depositada bajo número de acceso de ATCC No. PTA-11753, la planta de progenie siendo obtenida por un proceso que comprende: (a) proveer una planta de la linea 'CL152', o tejido, semilla, o célula de la misma; y (b) mutar o transformar dicha planta, tejido, semilla o célula del paso (a) para producir una planta alterada que contiene en su genoma un gen AHASL que codifica un polipéptido de AHASL teniendo, relativo al polipéptido de AHASL de tipo silvestre del arroz de ciprés, una sustitución de asparagina (N) en la posición 653 de aminoácido (numeración de AHASL Arabidopsis thaliana) o posición equivalente, y además cultivando la planta alterada, en donde dicha planta alterada del paso (b) exhibe, al expresar dicho gen AHASL, una tolerancia aumentada a un herbicida de imidazolinona en comparación con aquella de planta de arroz de tipo silvestre. 87.- Un método para controlar mala hierba en un campo, dicho método que comprende: crecer, en un campo, la planta de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 2, 12, 15, 26, 28, 30, 32, 45, 55, 57, 59, 61 y 81-86; y contactar dicha planta y mala hierba en el campo con una cantidad efectiva de un herbicida inhibidor de AHAS al cual la planta es tolerante, así controlando la mala hierba. 88. - El método de conformidad con la reivindicación 87, en donde el herbicida inhibidor de AHAS comprende una imidazolinona herbicidamente efectiva. 89. - El método de conformidad con la reivindicación 87, en donde el herbicida inhibidor de AHAS comprende un imazetapir o imazamox. 90. - El método de conformidad con la reivindicación 87, en _ donde el herbicida inhibidor de AHAS comprende una sulfonilurea herbicidamente efectiva.
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